FR2841785A1 - Utilisation d'au moins deux composes anticancereux, dont un au moins module l'activite du proteasome pour la fabrication d'un medicament destine a traiter le cancer - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne l'utilisation d'au moins deux composés anticancéreux, dont un au moins module l'activité du protéasome pour la fabrication d'un médicament destiné à traiter le cancer, notamment le cancer du côlon.La présente invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant au moins deux composés anticancéreux, dont un au moins module l'activité du protéasome en combinaison avec au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable.

Description

<Desc/Clms Page number 1>

La présente invention concerne l'utilisation d'au moins deux composés anti cancéreux, dont au moins un module l'activité du protéasome pour l'obtention d'un médicament destiné à traiter le cancer, ainsi que les compositions pharmaceutiques contenant l'association de composés sus-mentionnés.

Le cancer est une des plus fortes causes de mortalité dans les pays développés. Une des thérapies permettant de lutter contre le cancer est l'utilisation de médicaments anticancéreux (ou chimiothérapie), qui interférent avec le métabolisme et la vie cellulaire, permettant d'inhiber la croissance tumorale.

Les composés anticancéreux peuvent être notamment des composés anti mitotiques, qui permettent d'éviter la prolifération des cellules cancéreuses. Ainsi les alcaloïdes de la pervenche (ou vinca-alcaloïdes), et leur dérivés obtenus par modification chimique ont pour cible la tubuline du fuseau chromatique de la mitose dont ils inhibent la polymérisation (Revue dans Rahmani & Zhou, Cancer Surveys, vol 17,1993). Parmi les vinca-alcaloïdes actuellement utilisés en chimiothérapie, on peut citer la vincristine, utilisée dans le traitement des cancers et des leucémies depuis 1960. Comme les autres vinca-alcaloïdes, la vincristine se fixe dans la cellule sur la tubuline et empêche la formation des microtubules. Elle bloque ainsi la dynamique du fuseau mitotique le long duquel migrent les chromosomes et arrête les cellules en métaphase. On peut citer également la vindésine qui est un alcaloïde semi-synthétique dérivé de la pervenche, qui se fixe également sur la tubuline et empêche la formation de microtubules, en particulier le système microtubulaire du fuseau mitotique, ce qui entraîne l'arrêt de la division cellulaire. Ce composé est donc actif sur les cellules déjà engagées dans le cycle cellulaire. La vinorelbine est le dernier médicament de la famille des vinca-alcaloïdes introduit en thérapeutique humaine. Comme les autres alcaloïdes de la pervenche, la vinorelbine est un agent dépolymérisant de la tubuline, bloquant la division cellulaire par altération du fuseau mitotique et provoquant l'apoptose de la cellule. Toutefois, la tubuline constituant également les fibres nerveuses, les vinca-alcaloïdes ont une toxicité nerveuse, surtout sensitive, et induisent une tendance dépressive. Ainsi, lors de l'administration de vincristine, le système nerveux périphérique peut être affecté sous la forme de troubles sensitifs des extrémités et d'une diminution des réflexes. Lors de l'administration de vindésine, si les complications neurologiques sont moins

<Desc/Clms Page number 2>

marquées que celles qui sont provoquées par la vincristine, la toxicité sanguine est le principal facteur limitant de ce médicament, induisant une diminution passagère et généralement modérée des granulocytes. Dans le cas de la vinorelbine, la principale toxicité de ce médicament est la diminution des globules blancs et des granulocytes, et la toxicité neurologique est peu fréquente.

Les composés anticancéreux peuvent être également des intercalants qui s'insèrent entre les bases azotées de deux chaînes d'ADN et bloquent ainsi son activité normale ( Les cancers de A à Z Ed. Frison Roche). Ainsi, les anthracyclines, médicaments anticancéreux d'origine naturelle, isolés comme les antibiotiques de micro-organismes, s'intercalent entre les paires de bases azotées de l'ADN et inhibent l'activité de la topo-isomérase II, enzyme qui contrôle la structure dans l'espace de l'ADN. Ces composés forment également des radicaux libres oxygénés responsables de leur toxicité. Parmi les anthracyclines actuellement utilisés en chimiothérapie, on peut citer la doxorubicine. La formation de complexes ADNtopo-isomerase II-doxorubicine qui fixent les coupures de l'ADN, bloquent ses fonctions et entraînent la mort cellulaire. Toutefois, les anthracyclines, et plus particulièrement la doxorubicine favorisent également la formation de radicaux libres qui peuvent couper l'ADN et endommager les membranes, induisant une toxicité de ces composés sur le c#ur.

Plus récemment, il a été démontré que le protéasome peut être une cible en chimiothérapie (Almond & Cohen, Leukemia ; 16(4) : 433-433, 2002), suggérant que des composés modulant l'activité du protéasome peuvent être également utilisé pour lutter contre le cancer. Le protéasome est un complexe multicatalytique présentant notamment de multiples activités peptidasiques. En règle générale, les activités peptidasiques du protéasome permettent la dégradation des protéines dénaturées, anormales, en renouvellement ou des protéines régulatrices de fonctions cellulaires essentielles. Parmi les composés capables de moduler l'activité du protéasome, on peut citer notamment certains inhibiteurs de la protéase du virus de l'immunodéficience humain (VIH). La demande FR 98/07373, déposée par les Demanderesses décrit notamment que le ritonavir ou le saquinavir, composés habituellement destinés à lutter contre le SIDA, sont capables de moduler l'activité du protéasome, en inhibant l'activité de type chymotrypsine et en augmentant

<Desc/Clms Page number 3>

l'activité de type trypsine du protéasome, et pouvaient, de ce fait être utilisé pour lutter contre d'autres maladies telles que l'hépatite C ou le cancer.

Si ces médicaments anticancéreux agissent sur les cellules cancéreuses, ils restent tous fortement toxiques sur certaines cellules non cancéreuses, rendant difficile l'administration de doses très efficaces sans entraîner une toxicité excessive.

Actuellement, pour lutter plus efficacement contre le cancer, on utilise des compositions pharmaceutiques qui concentrent sur la tumeur l'efficacité de plusieurs médicaments anticancéreux tout en en dispersant leurs toxicités différentes sur divers organes. Toutefois, les patients peuvent présenter au cours du temps une certaine tolérance envers ces compositions pharmaceutiques, ce qui diminue leur efficacité.

Ainsi, le problème que souhaite résoudre l'invention est d'obtenir une nouvelle composition pharmaceutique permettant d'augmenter d'une façon synergique l'efficacité de composés anti cancéreux connus.

D'une façon surprenante, les inventeurs ont découvert qu'en associant au moins deux composés anticancéreux, dont au moins un module l'activité du protéasome, on obtient une synergie de ces composés sur l'inhibition de la prolifération des cellules en croissance. L'invention concerne ainsi l'utilisation d'au moins deux composés anti cancéreux, dont au moins un module l'activité du protéasome, pour la fabrication d'un médicament destiné à traiter le cancer.

L'invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant au moins deux composés anti cancéreux, dont au moins un module l'activité du protéasome, en combinaison avec au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable, pour la fabrication d'un médicament destiné à traiter le cancer.

Au sens de l'invention, par composé anticancéreux, on entend un composé qui interfère dans le métabolisme et la vie cellulaire, permettant d'inhiber la croissance tumorale. Ce composé anti cancéreux peut être notamment un composé antimitotique, qui entrave ou interdit la reproduction des cellules et leur division, en agissant notamment au moment de la mitose en altérant la structure du fuseau, ce qui empêche la migration des chromosomes vers chaque extrémité de la cellule en division, et bloquent ainsi la mitose pour entraîner peu après la mort de la cellule. On peut citer notamment les alcaloïdes végétaux, extraits de la pervenche (vincaalcaloïdes) ou de l'if (paclitaxel), la vinblastine, la vincristine, la vinorulbine. Ce

<Desc/Clms Page number 4>

composé anticancéreux peut être également un intercalant qui s'intercale entre deux paires de bases azotées de l'ADN. On peut citer notamment les anthracyclines, tels que notamment la doxorubicine, la daunomycine.

L'un au moins des composés mis en #uvre dans l'invention est un composé qui module l'activité du protéasome. Par composé qui module l'activité du protéasome, on entend un composé qui modifie une ou plusieurs activités enzymatiques du protéasome. Contrairement à l'inhibition du protéasome, la modulation du protéasome est compatible avec la vie cellulaire.Ces composé peuvent être notamment ceux décrits notamment dans WO 94/14436 et EP 432 695 tels que notamment le ritonavir ou le saquinavir, ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables, en particulier le mésylate de saquinavir.

Il a maintenant été trouvé que l'association d'un composé modulant l'activité du protéasome avec au moins un autre composé anti-cancéreux permet d'améliorer considérablement les résultats obtenus pour lutter contre le cancer.

Selon l'invention, on utilisera de préférence deux composés anti-cancéreux, l'un modulant l'activité du protéasome, l'autre luttant contre le cancer selon un autre mode d'action, tel que par exemple un composé anti-mitotique, de préférence un vinca-alcaloïde, comme le vincristine, ou bien un intercalant de préférence appartenant à la famille des anthracyclines, comme la doxorubicine.

En tant que composé modulant l'activité du protéasome, on utilisera avantageusement un composé inhibiteur de la protéase du VIH comme le ritonavir ou le saquinavir ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

L'association de la vincristine avec le ritonavir ainsi que l'association de la doxorubicine avec le ritonavir sont particulièrement préférées.

L'effet synergique de telles associations a été mise en évidence, notamment en démontrant leur effet sur la prolifération de lignées cellulaires d'adénocarcinome du côlon LoVo et HT-29 et sur la perméabilité membranaire mitochondriale de cellules HT-29.

Les tests mis en #uvre sont décrits dans les exemples suivants, donnés à titre illustratif et qui n'ont aucun caractère limitatif. Ils permettront de mieux comprendre l'invention en référence aux figures jointes.

<Desc/Clms Page number 5>

La figure 1 présente les effets du ritonavir sur la prolifération de cellules LoVo en culture, en présence ou en absence de vincristine.

La figure 2A présente les effets du ritonavir sur la prolifération de cellules HT-29 en culture, en présence ou en absence de vincristine.

La figure 2B présente les effets du ritonavir sur la prolifération de cellules HT-29 en culture, en présence ou en absence de doxorubicine.

La figure 3 présente les effets du ritonavir sur la perméabilité membranaire mitochondriale de cellules HT-29, en présence ou en absence de vincristine.

Exemple 1 : du ritonavir et de la vincristine sur la prolifération de cellules
LoVo en culture (figure 1) Afin d'étudier les effets d'un composé modulateur du protéasome sur l'action de la vincristine, un test MTT (3-[4,5-Diméthylthiazol-2-yl]-2,5-diphényl-tetrazolium bromide) de croissance cellulaire est réalisée sur des cellules LoVo en culture (lignée cellulaire d'adénocarcinome du côlon ; ATCC n CCL-229).

Pour cela, 20000 cellules sont ensemencées dans des puits de microplaques, dans 100 l de milieu de culture Ham'S F12 (BioWest Cat N val-L0135-500), 2mM LGlutamine (Gibco Cat N 25030-024), complété par 0,01 M HEPES (Gibco Cat N 15630-056), 25 g/ml de Gentamycine (Gibco Cat N 15750-045) et 10% de Sérum de Veau Foetal, en présence ou en absence de lOg/ml de Ritonavir (Norvir solution buvable Abbot Laboratories Limited Queenborough Kent), et cultivées en étuve à 37 C et 5% de CO2.

Après 18h, une solution de Vincristine Sulfate (ICN Cat N. 190687 ; concentration finale dans le milieu de culture : 0,8ng/ml) est ajouté au milieu de culture.

Après 54 heures d'incubation, 20 l de 5 mg/ml solution de MTT (Sigma M2128 5 mg/ml) sont ajoutés. Le milieu est alors aspiré 1,5 heure après l'ajout de MTT. Le produit coloré est alors solubilisé dans 1001 d'isopropanol 40mM HCl. La densité optique de ce produit coloré, proportionnelle au nombre de cellules vivantes présentes dans le milieu, est mesurée à 590 nm. Les valeurs indiquées sur la figure 1 sont des moyennes de densité optique, obtenues sur 3 mesures.

Ainsi, le ritonavir associé à la vincristine diminue fortement la prolifération des cellules LoVo en culture par rapport à l'action de chacun de ces deux composés

<Desc/Clms Page number 6>

présent isolément dans le milieu de culture. En effet, la valeur théorique de densité optique attendue lors de la présence des deux composés dans le milieu de culture, calculée comme étant la somme des diminutions observées sur la DO lors de l'ajout de la vincristine ou du ritonavir dans le milieu de culture, devrait être de l'ordre de 0,16 alors que la valeur mesurée est de l'ordre de 0,04.

Ces résultats montrent que la vincristine agit en synergie avec le ritonavir pour inhiber la prolifération des cellules LoVo en culture.

Exemple 2 : du ritonavir, de la doxorubicine et de la vincristine sur la prolifération de cellules HT-29 en culture (figures 2A et 2B) Un protocole comparable à celui développé dans l'exemple 1 est réalisé afin d'étudier les effets d'un composé modulateur du protéasome sur l'action de deux anticancéreux sur une autre lignée cellulaire, sur des cellules HT-29 en culture (lignée cellulaire d'adénocarcinome du côlon ; ATCC n HTB-38).

Pour cela, 20000 cellules sont ensemencées dans des puits de microplaques, dans 100 l de milieu de culture McCoy's 5A with Glutamax (Gibco Cat N 36600-021), complété par O,OlM HEPES (Gibco Cat N 15630-056), 25 g/ml de Gentamycine (Gibco Cat N 15750-045) et 10% de Serum de Veau Foetal, en présence ou en absence de 10 g/ml de Ritonavir (Norvir solution buvable Abbot Laboratories Limited Queenborough Kent) et cultivées en étuve à 37 C et 5% de C02.

Après 18h, une solution de Vincristine Sulfate (ICN Cat N. 190687 ; concentration finale dans le milieu de culture : 0,8ng/ml) ou de Doxorubicine Hydrochloride (ICN Cat N. 159101 ; finale dans le milieu de culture : 0,125 g/ml) est ajouté au milieu de culture.

Après 54 heures d'incubation, 20 l de 5 mg/ml solution de MTT (Sigma M2128 5 mg/ml) sont ajoutés. Le milieu est alors aspiré 1,5 heure après l'ajout de MTT. Le produit coloré est alors solubilisé dans 100 l d'isopropanol 40mM HCl. La densité optique de ce produit coloré, proportionnelle au nombre de cellules vivantes, est mesurée à 590 nm. Les valeurs indiquées sur la figure 2A et 2B sont des moyennes obtenues sur 3 mesures.

Comme le montre la figure 2A, la vincristine, ajoutée isolément au milieu de culture, diminue la prolifération des cellules HT29 en culture. D'une façon surprenante, cet

<Desc/Clms Page number 7>

effet est fortement augmenté lorsque la vincristine agit en présence de ritonavir dans le milieu de culture. En effet, la valeur théorique de densité optique attendue lors de la présence des deux composés dans le milieu de culture est de l'ordre de 0,52 alors que la valeur mesurée est de l'ordre de 0,32.

Comme le montre la figure 2B, le ritonavir associé à la doxorubicine diminue fortement la prolifération des cellules HT-29 en culture par rapport à l'action de chacuns de ces deux composés présent isolément dans le milieu de culture. En effet, la valeur théorique de densité optique attendue lors de la présence des deux composés dans le milieu de culture est de l'ordre de 0,57 alors que la valeur mesurée est de l'ordre de 0,32.

Ces résultats montrent que la doxorubicine et la vincristine agissent en synergie avec le ritonavir pour diminuer la prolifération des cellules HT-29 en culture.

Exemple 3 : du ritonavir et de la vincristine sur la perméabilité membranaire mitochondriale de cellules HT-29 en culture (figure 3) Afin de déterminer la perméabilité membranaire mitochondriale, représentative de l'apoptose cellulaire, 105 de cellules HT-29 (lignée cellulaire d'adénocarcinome du côlon ; ATCC n HTB-38)sont ensemencées dans 1 ml de milieu de culture McCoy's 5A avec Glutamax (Gibco Cat N 36600-021), complété par 0,01 M HEPES (Gibco Cat N 15630-056), 25ug/ml de Gentamycine (Gibco Cat N 15750-045) et 10% de Serum de Veau Foetal, en présence ou en absence de 10 g/ml de Ritonavir (Norvir solution buvable Abbot Laboratories Limited Queenborough Kent) Après 18h, une solution de Vincristine Sulfate (ICN Cat N. 190687 ; concentration finale dans le milieu de culture : 1 ng/ml) ou de Doxorubicine Hydrochloride (ICN Cat N. 159101 ; finale dans le milieu de culture : 0,125 g/ml) est ajouté au milieu de culture.

Après 48h d'incubation, les cellules sont ensuite recoltées par trypsination (GibcoBRL Cn 25090-028) et incuber 15 minutes à 37 C avec 40 nM de 3,3'dihexyloxacarbocyanine iodide (Dioc6, Sigma, 31,842-6). A la fin de l'incubation, l'iodide de propidium (PI, Sigma P4170,1 g/ml) est ajouté dans le milieu de culture, et les cellules sont immédiatement analysées par cytométrie de flux.

<Desc/Clms Page number 8>

Le Dioc6 marque faiblement les cellules présentant une chute de potentiel de membrane mitochondriale, par comparaison aux cellules intactes. Le PI marque fortement les cellules mortes par comparaison aux cellules vivantes. La combinaison de ces deux marqueurs permet ainsi de distinguer 4 populations de cellules : # Cellules vivantes lorsque on observe un marquage Dioc6 fort et un marquage
PI négatif # Cellules nécrotiques lorsque on observe un marquage Dioc6 fort et un marquage PI positif # Cellules en apoptose précoce lorsque on observe un marquage Dioc6 faible et un marquage PI négatif # Cellules en apoptose tardive lorsque on observe un marquage Dioc6 faible et un marquage PI positif Les résultats, exprimés en pourcentage de Dioc6 faible - PI positifs sont présentés dans la figure 3. Lorsque le ritonavir et la vincristine agissent simultanément, les cellules présentent un pourcentage très élevé (21,78%), suggérant la présence de cellules en apoptose tardive, par comparaison aux cellules contrôles (3. 54%), aux cellules mis en culture en présence de ritonavir seul (7,63%) ou de vincristine seule (7,36%).

Ces résultats montrent que la vincristine agit en synergie avec le ritonavir pour augmenter l'apoptose des cellules HT-29 en culture.

Ces exemples démontrent ainsi les effets synergiques du ritonavir, de la vincristine et/ou de la doxorubicine, sur l'inhibition de la prolifération cellulaire et sur l'augmentation de l'apoptose des cellules en culture.

Ainsi, les associations selon l'invention sont particulièrement intéressantes pour leur activité anticancéreuse et pourront être utilisées pour la fabrication de médicaments.

Les médicaments obtenus selon l'invention sont destinés notamment à lutter contre le cancer, c'est à dire contre toutes les maladies dues à une multiplication anormale des cellules, notamment de manière non limitatrice, les myélomes, lymphomes, leucémies, carcinomes du rein, du cerveau, du colon, de la prostate, du rectum, du pancréas, des ovaires, du poumon, du foie, du sein, les cancers cutanés choisi parmi les kératinomes et les carcinomes, les mélanomes.

<Desc/Clms Page number 9>

Les associations selon l'invention peuvent être formulées dans des compositions pharmaceutiques, en association avec au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable bien connu de l'homme du métier.

Dans les compositions pharmaceutiques selon l'invention, pour l'administration orale, sublingale, sous cutanée, intra musculaire, intra veineuse, topique, intratrachéale, rectale, transdermique, les composés anticancéreux peuvent être administrés sous formes unitaires d'administration ou en mélange avec des supports pharmaceutiques classiques, et destinés à une administration par voie orale, par exemple sous la forme d'un comprimé, d'une gélule, d'une solution buvable, etc, ou par voie rectale, sous la forme d'un suppositoire, par voie parentérale, en particulier sous la forme d'une solution injectable, notamment par voie intraveineuse, intradermique, sous cutanée, etc, selon des protocoles classiques bien connus de l'homme du métier. Pour l'application topique, on peut utiliser les composés anti cancéreux dans des crèmes, pommades, lotions, collyres.

Lorsqu'on prépare une composition solide sous forme de comprimés, on mélange les composés anti cancéreux avec un excipient pharmaceutiquement acceptable également nommé véhicule pharmaceutique, tel que la gélatine, l'amidon, le lactose, le stéarate de magnésium, le talc, la gomme arabique ou analogues. On peut enrober les comprimés de saccharose, d'un dérivé cellulosique, ou d'autres matières appropriées. On peut également les traiter de telles sortes qu'ils aient une activité prolongée ou retardée et qu'ils libèrent d'une façon continue une quantité prédéterminée de composés anti cancéreux. On peut également obtenir une préparation en gélules en mélangeant les composés anti cancéreux avec un diluant et en versant le mélange dans des gélules molles ou dures. On peut également obtenir une préparation sous forme de sirop ou pour l'administration sous forme de gouttes, dans laquelle les composés anticancéreux sont présents conjointement avec un édulcorant, un antiseptique, tel que notamment du méthylparaben et du propylparaben, ainsi qu'un agent donnant du goût ou un colorant approprié. Les poudres ou les granules dispersibles dans l'eau peuvent contenir les composés anti cancéreux en mélange avec des agents de dispersion ou des agents mouillants, ou des agents de mise en suspension, bien connus de l'homme du métier. Pour une administration parentérale, on utilise des suspensions aqueuses, des solutions salines

<Desc/Clms Page number 10>

isotoniques ou des solutions stériles et injectables qui contiennent des agents de dispersion, des mouillants pharmacologiquement compatibles, tels que notamment le propyléneglycol ou le butylèneglycol.

Le médicament ou la composition pharmaceutique selon l'invention peut comprendre en outre un agent d'activation qui induit les effets d'une médication ou renforce ou complète les effets de la médication principale, en augmentant notamment la biodisponibilité de la médication principale.

La posologie dépend de la gravité de l'affection. Dans le cas d'une composition pharmaceutique comprenant un antimitotique tel que notamment la vincristine, et un composé modulateur de l'activité du protéasome tel que notamment le ritonavir, l'administration peut être notamment administrée de 1 à 3 fois par jour de façon à administrer un dosage journalier de 1 à 3 mg, de préférence de 1,5 à 2,5 mg d'antimitotique et de 100 à 1500 mg, de préférence de 600 à 1200 mg de composé modultateur de l'activité du protéasome, en combinaison avec un excipient pharmaceutiquement acceptable. Dans le cas d'une composition pharmaceutique comprenant un intercalant tel que notamment la doxorubicine, et un composé modulateur de l'activité du protéasome tel que notamment le ritonavir, l'administration peut être notamment effectuée de 1 à 3 fois par jour de façon à administrer un dosage journalier de 20 à 60 mg, de préférence de 30 à 50 mg d'intercalant et de 100 à 1500 mg, de préférence de 600 à 1200 mg de composé modultateur de l'activité du protéasome, en combinaison avec un excipient pharmaceutiquement acceptable.

Claims (21)

REVENDICATIONS

1 - Utilisation d'au moins deux composés anti cancéreux dont au moins un module l'activité du protéasome, pour la fabrication d'un médicament destiné à traiter le cancer, notamment le cancer du côlon.

2 - Utilisation selon la revendication 1 caractérisée en ce qu'on utilise deux agents anticancéreux dont un seul module l'activité du protéasome.

3 - Utilisation selon la revendication 1 ou 2 caractérisée en ce que l'un des composés anticancéreux est un composé anti-mitotique.

4 - Utilisation selon la revendication 3 caractérisée en ce que le composé anti- mitotique est un vinca-alcaloïdes, tel que la vincristine.

5 - Utilisation selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que l'un des composés anticancéreux est un intercalant.

6 - Utilisation selon la revendication 5 caractérisée en ce que l'intercalant appartient à la famille des anthracyclines, tel que notamment la doxorubicine.

7 - Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 caractérisée en ce que le composé modulant l'activité du protéasome est un composé inhibiteur de la protéase du virus de l'immunodéficience humaine (VIH).

8 - Utilisation selon la revendication 7 caractérisée en ce que le composé est le ritonavir ou le saquinavir, ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

9 - Utilisation selon la revendication 4 ou 8, caractérisée en ce qu'on utilise la vincristine en combinaison avec le ritonavir ou un de ses sels pharmaceutiques acceptables.

10 - Utilisation selon la revendication 6 ou 8, caractérisée en ce qu'on utilise la doxorubicine en combinaison avec le ritonavir ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables.

11 - Composition pharmaceutique comprenant au moins deux composés anti cancéreux dont au moins un module l'activité du protéasome en combinaison avec au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable.

12 - Composition selon la revendication 11, caractérisée en ce qu'on utilise deux agents anticancéreux dont un seul module l'activité du protéasome.

13 - Composition selon la revendication 11 ou 12, caractérisée en ce que l'un des composés anticancéreux est un composé anti-mitotique.

<Desc/Clms Page number 12>

14 - Composition selon la revendication 13, caractérisée en ce que le composé anti-mitotique est un vinca-alcaloïde, tel que notamment la vincristine.

15 - Composition selon la revendication 11 ou 12 caractérisée en ce que l'un des composés anticancéreux est un intercalant.

16 - Composition selon la revendication 15 caractérisée en ce que l'intercalant appartient à la famille des anthracyclines, tel que notamment la doxorubicine.

17 - Composition selon l'une quelconque des revendications 11 à 16 caractérisée en ce que le composé modulant l'activité du protéasome est un composé inhibiteur de la protéase du virus de l'immunodéficience humaine (VIH).

18 - Composition selon la revendication 17 caractérisée en ce que le composé est le ritonavir ou le saquinavir, ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

19 - Composition selon la revendication 14 ou 18, caractérisée en ce qu'elle associe la vincristine et le ritonavir ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables.

20 - Composition selon la revendication 16 ou 18, caractérisée en ce qu'elle associe la doxorubicine et le ritonavir ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables.

21- Composition selon l'une quelconque des revendications 11à 20 pour la fabrication de médicament destiné à traiter le cancer, notamment le cancer du côlon.