FR2792724A1 - Dispositif de prelevement et de conservation d'un echantillon biologique et son procede de mise en oeuvre - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne un dispositif de prélèvement et de conservation (1) d'un échantillon biologique en vue d'au moins une analyse ultérieure, qui comporte un support de prélèvement (2) protégé des contaminations extérieures par un emballage de protection (3 ou 4). Elle concerne également un procédé de mise en oeuvre d'un tel dispositif.L'invention consiste en un emballage (3 ou 4) qui protège hermétiquement le support (2) de prélèvement que ce soit avant ou après le prélèvement ou avant ou après le retrait d'au moins une partie dudit support (4); retrait effectué en vue d'une analyse ultérieure.L'invention trouve une application préférentielle dans le domaine du diagnostic médical in vitro.

Description

I

DESCRIPTION

La présente invention concerne un dispositif de prélèvement et de conservation d'un échantillon biologique en vue d'au moins une analyse ultérieure, qui comporte un support de prélèvement protégé des contaminations extérieures par un emballage de protection. La collecte d'échantillons biologiques, comme le sang, permet la réalisation d'analyses variées dans le contexte d'applications diagnostiques ou à des fins de recherche. Il est parfois très utile de pouvoir pratiquer de telles analyses à partir de matériel conservé sous une forme appropriée, permettant leur bonne conservation au cours du temps et également au cours d'un éventuel transport, en garantissant leur

correcte identification.

Ainsi et à titre d'exemple, l'état de la technique propose une surveillance à grande échelle des nouveau-nés pratiquée en routine pour le dépistage d'anomalies génétiques. Cette surveillance consiste à réaliser un dosage de phénylcétonurie à partir d'une goutte de sang prélevé au talon, adsorbée sur une fiche en papier buvard renseignée. Ce système présente les avantages suivants: prélèvement minime bien toléré, échantillon de sang suffisant pour permettre de réaliser le dosage, conservation possible de l'échantillon séché permettant le dosage différé dans le temps, après

éventuellement expédition à un laboratoire distant.

Ces avantages sont également exploités pour réaliser des tests génétiques grâce à des techniques de biologie moléculaire, à partir de prélèvements de sang, collectés et

conservés sur des fiches de papier absorbant renseignées.

Les techniques de biologie moléculaire utilisées pour la réalisation des tests génétiques, requièrent une étape d'amplification des régions géniques d'intérêt, qui impose des contraintes particulières pour préserver la qualité de l'échantillon à analyser (absence de contamination par du matériel humain autre). De telles contraintes ne sont pas respectées avec ces techniques antérieures, et les résultats obtenus sont

généralement faussés si des mesures d'hygiène drastiques ne sont pas prises.

La présente invention décrit un procédé permettant la collecte du sang sur un support absorbant permettant de réaliser l'étape d'amplification génique en garantissant des conditions minimales de contamination par du matériel humain autre que celui à analyser. La société Life Technologies a mis sur le marché un produit FTA (marque déposée) Gene Guard System. Il s'agit d'un appareil de collecte, de transport et de stockage de sang et autres échantillons biologiques. Il se présente sous la forme de cartes avec couverture protectrice. Il est possible d'effectuer un procédé de purification d'ADN génomique à partir des échantillons ainsi conservés, en moins d'une heure. Cet appareil est utilisable pour toutes sortes d'études, telles qu'analyses de populations,

génomiques, pharmacogénomiques.

En fait la carte FTA (marque déposée) est constituée par un papier filtre, imprégné avec des agents dénaturants, en vue d'empêcher la croissance de bactéries ou autres micro-organismes et de maintenir l'intégrité de l 'ADN (nucléases, oxydation, UV). Au contact du papier, les membranes cellulaires sont rompues, I 'ADN est libéré et se fixe sur la matrice FTA. De simples lavages de la matrice permettent d'éliminer

l'hème et autres inhibiteurs.

De plus l'utilisateur doit prévoir Il'utilisation d'un système de découpe de spots (1 mm) de type Harris Micro-Punch (marque déposée). Ce système est optimisé afin de ne pas avoir de contaminations, par le fait que les bords du système de découpe sont

extrêmement coupants.

Toutefois, la contamination est toujours possible puisqu'il est nécessaire d'utiliser d'autres appareils, comme le poinçonneur. La seule solution pour l'utilisateur est donc d'effectuer un nettoyage systématique de tous ces appareils, ce qui est long et peut entraîner des surcoûts dans l'analyse, tant par l'emploi de produits de nettoyage

que par le temps mis pour effectuer ce nettoyage par une personne qualifiée.

Le dispositif de collecte selon la présente invention apporte une solution à l'ensemble des problèmes rencontrés précédemment. Ainsi, il propose non seulement un moyen de prélèvement aseptique et bien protégé mais également un moyen de

reprise du prélèvement qui ne nécessite pas l'utilisation d'autres matériels.

A cet effet, la présente invention concerne un dispositif de prélèvement et de conservation d'un échantillon biologique en vue d'au moins une analyse ultérieure, qui comporte un support de prélèvement protégé des contaminations extérieures par un emballage de protection, caractérisé par le fait que l'emballage protège hermétiquement le support de prélèvement que ce soit avant ou après le prélèvement ou avant ou après le retrait d'au moins une partie dudit support; retrait effectué en vue d'une analyse ultérieure. Selon une variante de réalisation, le support est solidaire de l'emballage de protection par des moyens de fermeture irréversibles, tels que des soudures, et ledit emballage comporte des moyens de fermeture réversibles, tels que des surfaces

autocollantes, permettant l'emballage dudit support.

Selon une autre variante de réalisation, ledit support est de dimensions

inférieures audit emballage.

Selon encore une autre variante de réalisation, le support est de forme plate et comporte une face affectée au prélèvement de l'échantillon biologique sur le patient et une face affectée au retrait d'au moins une portion dudit support en vue d'une analyse ultérieure. Toujours selon une variante de réalisation, le support comporte au moins une

zone hydrophile, permettant de concentrer l'échantillon biologique prélevé.

Préférentiellement, la portion du support qui est retirée constitue une zone hydrophile. De façon préférentielle, le support est hydrophobe à l'endroit o il n'y a pas de

zones hydrophiles.

Selon un mode préférentiel de réalisation, la portion du support qui est retirée

est délimitée par des moyens qui facilitent le retrait, tels que des découpes.

Selon un autre mode préférentiel de réalisation, la portion du support qui est

retirée est pourvue d'un moyen facilitant ce retrait, tel qu'une ouverture centrale.

Quel que soit la variante ou le mode de réalisation, l'emballage est constitué d'une ou de deux feuilles en un matériau étanche qui prend ou prennent en sandwich le support; la feuille unique étant pliée pour constituer ce sandwich. La présente invention concerne également un procédé de prélèvement et de conservation d'un échantillon biologique en vue d'au moins une analyse ultérieure, le prélèvement et la conservation s'effectuant sur un support, tel que décrit ci-dessus, qui est caractérisé en ce qu'il consiste à effectuer les étapes suivantes: - ouverture du dispositif pour prélever au moins un échantillon biologique, - fermeture dudit dispositif, - stockage éventuel du dispositif, et

- ouverture du dispositif pour retirer le prélèvement dont on veut faire l'analyse.

Plus précisément, le procédé consiste à effectuer les étapes suivantes: ouverture du dispositif par retrait de la feuille ou de la partie de la feuille de l'emballage en contact avec la face du support affectée au prélèvement de l'échantillon biologique, - mise en contact de cette face découverte du support avec ledit échantillon et/ou avec le patient, fermeture du dispositif par remise en position de la feuille ou de la partie de la feuille de l'emballage en contact avec la face du support affectée au prélèvement de l'échantillon biologique, - stockage éventuel du dispositif, - ouverture du dispositif par retrait de la feuille ou de la partie de la feuille de l'emballage en contact avec la face opposée du support, et

- retrait d'au moins une portion du support en vue d'au moins une analyse ultérieure.

Les figures ci-jointes sont données à titre d'exemple explicatif et n'ont aucun

caractère limitatif. Elles permettront de mieux comprendre l'invention.

La figure 1 représente une vue en perspective, avant assemblage, des différentes

parties constituant une première variante de dispositif selon l'invention.

La figure 2 représente une vue en perspective, avant assemblage, des différentes

parties constituant une seconde variante de dispositif selon l'invention.

s La figure 3 représente une vue en coupe transversale selon A-A de la figure 2.

La figure 4 représente une vue en coupe transversale, après assemblage, de la

seconde variante du dispositif.

La figure 5 représente une vue de dessus d'un premier mode de réalisation de l'invention. La figure 6 représente une vue de dessus d'un second mode de réalisation de l'invention. La figure 7 représente une vue de dessus d'un support, selon l'invention, adapté

pour le prélèvement et la conservation d'un échantillon biologique.

La figure 8 représente une vue sensiblement en coupe transversale de la figure 7, dans laquelle l'utilisateur ou un automate est en train de retirer une partie du support,

afin d'effectuer au moins une analyse ultérieure.

Enfin, la figure 9 représente une vue identique à la figure 7, dans laquelle une

partie du support est retirée pour effectuer l'analyse ultérieure.

La présente invention concerne un dispositif de prélèvement et de conservation

1 essentiellement représenté sur les figures 5 et 6 selon deux modes de réalisation.

Les figures 1 à 4 représentent schématiquement deux variantes possibles pour la fabrication de tels dispositifs de prélèvement et de conservation 1. Un tel dispositif de prélèvement et de conservation I permet donc le prélèvement et la conservation d'un échantillon biologique, non représenté sur les figures, ce prélèvement permettant par la suite une analyse dudit échantillon, afin de diagnostiquer, par exemple, une maladie ou une résistance à un antibiotique, etc. Comme on le voit bien sur les figures 1 à 4, le dispositif 1 a une structure en forme de sandwich puisqu'il est essentiellement constitué d'un support de prélèvement

2 en position intermédiaire qui est entouré par un emballage de protection 3 ou 4.

Cet emballage de protection, tel que représenté sur la figure 1, est constitué de deux parties 4 qui enserrent le support 2. Par contre, sur la figure 2 ainsi que sur l'ensemble des autres figures, l'emballage de protection 3 est en une seule partie et est en fait constitué par une seule feuille en matière plastique transparente qui est pliée comme cela est bien représenté sur les figures 2 et 3. Selon le mode de réalisation représenté sur l'ensemble des figures, la forme générale du dispositif 1 est sensiblement rectangulaire avec des dimensions (longueur, largeur) de chaque élément adapté à l'emballage du support 2. Ainsi, le support 2 a des dimensions qui sont sensiblement inférieures à chaque moitié de l'emballage de protection 3 une fois plié. D'ailleurs, on remarque sur les figures 5 et 6, la dimension

inférieure dudit support 2 représentée en pointillé au centre de l'emballage 3.

En fait, que ce soit le support 2 ou l'emballage 3, ceux-ci ont une structure particulière. Ainsi en ce qui concerne l'emballage 3, on remarque sur la figure 5 comme sur la figure 6, qu'il y a présence d'une soudure 5 constituant des moyens de fermeture irréversible de l'emballage 2, dans le sens o l'ouverture à ce niveau entraîne une destruction du dispositif 1. Cette soudure longitudinale 5 sur le rebord arrière 14 du dispositif 1 peut également servir de portion isolée faisant office de poignée de manipulation 17 pour l'ensemble du dispositif 1. Cette soudure est effectuée selon les flèches P représentées aux figures 1, 2 et 4. Sur les figures 1 et 2, deux flèches P sont représentées délimitant les extrémités de la soudure 5 devant être réalisées, c'est-à-dire que la soudure s'étend entre les deux flèches P. Sur le figure 4, on remarque que l'action P pour créer la soudure 5 vient bloquer en position le support 2 qui est soudé entre les deux parties de l'emballage 3. L'extrémité située à gauche constituant la poignée de manipulation 17 alors que l'extrémité libre de droite n'est pas fixée de

manière irréversible.

En fait, en se référant à nouveau aux figures 5 et 6, on remarque que les trois autres rebords, c'est-à-dire le rebord avant 13 ainsi que les rebords latéraux droit 15 et gauche 16, sont associés à des moyens de fermeture réversibles constitués par des surfaces autocollantes 6. Ces surfaces autocollantes 6 circonscrivent donc un espace entre les deux parties de l'emballage 3 dans lequel est présent le support de prélèvement 2. Selon un mode préférentiel représenté sur la figure 6, chaque partie de l'emballage 3 est associée à un index permettant d'identifier les fonctions qui peuvent être réalisées avec l'une ou l'autre face 7 ou 8 du support 2. Ainsi, l'index 18 est associé avec la partie de la feuille 3 en contact avec la face du support 2 affectée au prélèvement 7, alors que l'index 19 est associé avec la partie de la feuille 3 en contact avec la phase du support 2 affectée au retrait 8, retrait qui sera mieux explicité par la suite. En ce qui concerne la structure du support de prélèvement 2, celle-ci est bien représentée sur les figures 7 à 9. Bien entendu, nous ne reviendrons pas sur la façon de solidariser ledit support 2 à l'emballage 3 par l'intermédiaire de la soudure 5, ce qui a

déjà été décrit précédemment.

Pourtant, le support 2 comporte un certain nombre d'adaptations aux fonctions de prélèvement et de conservation d'un échantillon biologique devant être analysé ultérieurement. Ainsi, le support 2 est essentiellement constitué d'un papier absorbant, par exemple de type papier buvard (référence: Schleicher et Schuell, N 2992, 182 g/m2, épaisseur 45), sur lequel sont définies des zones hydrophiles 10 qui permettent la concentration de l'échantillon biologique devant être analysé. Sur le mode de réalisation représenté sur les figures 7 et 9, il y a six zones hydrophiles 10. Celles-ci sont aisément identifiables du fait de la présence de moyens facilitant le retrait 12 constitués par des découpes circulaires 11. Ces découpes 11 permettent de faciliter le retrait de la partie 9 du support 2, cette partie 9 permettant le stockage et la conservation de l'échantillon biologique devant faire l'objet de l'analyse ultérieure. Les zones hydrophiles 10 sont donc identiques aux parties retirées 9 et sont donc délimitées par les découpes 11. Le retrait de la portion 9 est bien représenté sur la figure 9 et s'effectue selon F. Pour faciliter encore la concentration de l'échantillon prélevé sur les zones hydrophiles 10, le reste du support 2, c'est-à-dire ledit support 2 à l'exception de ces

zones 10, est hydrophobe.

Selon un mode particulier de réalisation, la fonction hydrophile est donnée par le buvard, alors que la fonction hydrophobe est assurée par la face non collante d'un autocollant. Pour aboutir au dispositif 1 selon les figures 7 et 9, l'autocollant est découpé par un emporte-pièce qui réalise la coupe et le retrait des portions 9. Le buvard, quand à lui, subit l'action d'une presse qui génère les découpes 11. Puis l'autocollant est collé sur le buvard. Bien entendu à cette occasion, les coupes et les découpes 11 correspondent les unes aux autres, de sorte que l'autocollant est absent au

niveau des portions 9.

Selon un mode particulier d'utilisation du dispositif 1, le retrait de la portion 9 s'effectue par l'intermédiaire de l'embout référencé 20 d'une micro-pipette, comme cela est bien représenté à la figure 8. Bien entendu, l'embout 20 est stérile ou garanti sans RNAse ou DNAse dont le coût est très faible et dont la disponibilité est aisée dans tout laboratoire d'analyse. Ceci réduit énormément les risques de contamination et n'entraîne pas de surcoût dû par l'achat d'une poinçonneuse ou autre appareil pour effectuer le retrait selon F. Pour faciliter encore ce retrait, la portion 9 est équipée d'un

moyen facilitant le retrait 12 constitué par une ouverture centrale 12.

Selon un autre mode de réalisation particulièrement intéressant, il est possible que l'une des parties de l'emballage 4 porte sur sa face 8 affectée au retrait de la portion 9 du support 2 d'une zone autocollante suffisamment forte pour que l'ouverture de cette partie de l'emballage 3 permette l'arrachement de la portion 9 vis-à-vis du reste du support 2. Dans ce cas, il y a lieu que la surface autocollante soit suffisamment puissante pour permettre la découpe sans intervention manuelle ou mécanique de l'utilisateur par simple retrait de la partie de l'emballage 4 recouvrant le support 2 mais suffisamment faible pour ne pas empêcher le retrait de la portion 9 vis-à-vis de

l'emballage 4 o elle est collée.

Globalement, le procédé de prélèvement et de conservation d'un échantillon biologique en vue d'une analyse ultérieure s'effectue de la façon suivante. Lorsque l'on veut faire une prise de sang au niveau du talon d'un nouveau-né, il convient tout d'abord de piquer le talon, afin que du sang sorte et soit disponible, puis d'ouvrir le dispositif 1 en agissant sur l'index 18 de l'emballage 4 afin de découvrir la face 7 du support 2. Ladite face 7 est alors mise en contact avec le talon afin de répandre du sang sur l'ensemble de cette face 7. L'échantillon biologique constitué par du sang est alors concentré au niveau des zones hydrophiles 10 présentes au niveau des portions 9 situées au centre des découpes 10. L'échantillon ayant été récupéré, l'utilisateur referme l'emballage, afin que les surfaces autocollantes 6 referment hermétiquement le contenu du dispositif 1 et ce pour permettre une conservation à l'abri des contaminations. A ce moment-là, le dispositif 1 peut être manipulé et peut permettre de stocker pendant une certaine durée, pouvant aller jusqu'à plusieurs mois voire plusieurs années, l'échantillon biologique. Il est possible d'envoyer ce prélèvement à un laboratoire compétent ou de le traiter sur place. Dans tous les cas, le manipulateur va utiliser l'index 19 pour ouvrir le dispositif 1 ce qui permet de libérer la face 8 du support 2. Selon le mode de retrait prévu, si l'emballage 3 comporte en interne une surface autocollante non représentée sur les figures, il sera possible que cette surface autocollante colle les portions 9 et les arrache d'elle-même, le manipulateur n'aura plus ensuite qu'à détacher de façon stérile

l'ensemble des portions 9 par rapport à l'emballage 3 et à effectuer l'analyse ultérieure.

Selon l'autre mode de réalisation, il conviendra également que le manipulateur ouvre le dispositif par l'index 18 afin de prendre dans ses doigts le dispositif 1, au niveau de la poignée 17, et de libérer complètement le support 2 en rabattant les deux parties de l'emballage 3. Par la suite, il n'aura plus qu'à utiliser l'embout d'une pipette 20 afin de détacher et de stocker au moins l'une des portions 9 dans un tube ou tout récipient

adapté à une analyse ultérieure.

Selon un mode de réalisation particulièrement intéressant, le dispositif de prélèvement et de conservation 1 peut comporter, sur au moins l'une de ses faces extérieures, un moyen d'identification. Il peut s'agir d'une zone sur laquelle il est possible pour l'utilisateur d'écrire, ou un code barre, etc.

REFERENCES

1. Dispositif de prélèvement et de conservation 2. Support de prélèvement 3. Emballage de protection en une partie 4. Emballage de protection en deux parties 5. Moyens de fermeture irréversibles ou soudures 6. Moyens de fermeture réversibles ou surfaces autocollantes 7. Face affectée au prélèvement de l'échantillon biologique sur le patient 8. Face affectée au retrait d'au moins une portion 9 du support 2 9. Portion retirée du support 2 en vue d'une analyse ultérieure 10. Zone hydrophile du support 2 11. Moyens facilitant le retrait de la portion 9 ou découpes 12. Moyen facilitant le retrait de la portion 9 ou ouverture centrale 13. Rebord avant 14. Rebord arrière 15. Rebord latéral droit 16. Rebord latéral gauche 17. Portion isolée par la soudure 5 faisant office de poignée de manipulation 18. Index associé avec la partie de la feuille 3 en contact avec la face du support 2 affectée au prélèvement 7 19. Index associé avec la partie de la feuille 3 en contact avec la face du support 2 affectée au retrait 8 20. Embout de pipette P. Soudures 5 F. Retrait de la portion 9 Il

Claims (12)

REVENDICATIONS

1. Dispositif de prélèvement et de conservation (1) d'un échantillon biologique en vue d'au moins une analyse ultérieure, qui comporte un support de prélèvement (2) protégé des contaminations extérieures par un emballage de protection (3 ou 4), caractérisé par le fait que l'emballage (3 ou 4) protège hermétiquement le support (2) de prélèvement que ce soit avant ou après le prélèvement ou avant ou après le retrait d'au

moins une partie dudit support (4); retrait effectué en vue d'une analyse ultérieure.

2. Dispositif, selon la revendication 1, caractérisé par le fait que le support (2) est solidaire de l'emballage de protection (3 ou 4) par des moyens de fermeture irréversibles (5), tels que des soudures (5), et que ledit emballage (3 ou 4) comporte des moyens de fermeture réversibles(6), tels que des surfaces autocollantes (6), permettant

l'emballage (3 ou 4) dudit support (2).

3. Dispositif, selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisé par

le fait en ce que ledit support (2) est de dimensions inférieures audit emballage (3 ou 4).

4. Dispositif, selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé par le

fait que le support (2) est de forme plate et comporte une face (7) affectée au prélèvement de l'échantillon biologique sur le patient et une face (8) affectée au retrait

d'au moins une portion (9) dudit support (2) en vue d'une analyse ultérieure.

5. Dispositif, selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé par le

fait que le support (2) comporte au moins une zone hydrophile (10), permettant de

concentrer l'échantillon biologique prélevé.

6. Dispositif, selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé par le

fait que la portion (9) du support (2) qui est retirée constitue une zone hydrophile (10).

7. Dispositif, selon l'une quelconque des revendications 5 ou 6, caractérisé par

le fait que le support (2) est hydrophobe, à l'endroit o il n'y a pas de zones hydrophiles.

8. Dispositif, selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé par le

fait que la portion (9) du support (2) qui est retirée est délimitée par des moyens qui

facilitent le retrait ( 1), tels que des découpes (11).

9. Dispositif, selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé par le

fait que la portion (9) du support (2) qui est retirée est pourvue d'un moyen facilitant ce

retrait (12), tel qu'une ouverture centrale (12).

10. Dispositif, selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé par

le fait que l'emballage (3 ou 4) est constitué d'une (3) ou de deux feuilles (4) en un matériau étanche qui prend ou prennent en sandwich le support (2); la feuille unique

(3) étant pliée pour constituer ce sandwich.

11. Procédé de prélèvement et de conservation d'un échantillon biologique en vue d'au moins une analyse ultérieure, le prélèvement et la conservation s'effectuant sur un support, selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'il consiste à effectuer les étapes suivantes: ouverture du dispositif pour prélever au moins un échantillon biologique, - fermeture dudit dispositif, - stockage éventuel du dispositif, et

- ouverture du dispositif pour retirer le prélèvement dont on veut faire l'analyse.

12. Procédé, selon la revendication 1 1, caractérisé en ce qu'il consiste à effectuer les étapes suivantes: - ouverture du dispositif par retrait de la feuille ou de la partie de la feuille de l'emballage en contact avec la face du support affectée au prélèvement de l'échantillon biologique, mise en contact de cette face découverte du support avec ledit échantillon et/ou avec le patient, - fermeture du dispositif par remise en position de la feuille ou de la partie de la feuille de l'emballage en contact avec la face du support affectée au prélèvement de l'échantillon biologique, stockage éventuel du dispositif, - ouverture du dispositif par retrait de la feuille ou de la partie de la feuille de l'emballage en contact avec la face opposée du support, et

- retrait d'au moins une portion du support en vue d'au moins une analyse ultérieure.