FR2784466A1 - Micro-systeme a multiple points d'analyse chimique ou biologique mettant en oeuvre un couplage entre les sondes et un substrat - Google Patents
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Abstract
L'invention concerne la réalisation d'un micro-système à multiple points d'analyse chimique ou biologique. La réalisation comprend les étapes consistant à :- concevoir une structure pourvue de micro-cuvettes (21), chaque micro-cuvette étant destinée à recevoir un réactif et étant pourvue de moyens de fixation (24) permettant d'y rattacher ledit réactif,- placer un premier composé organique (30) sur les moyens de fixation (24) des micro-cuvettes, le premier composé organique comportant une fonction d'accrochage avec un deuxième composé organique (51) et une fonction d'accrochage avec les moyens de fixation (24),- placer, dans chaque micro-cuvette (21), le deuxième composé organique (51), le deuxième composé organique comportant une fonction d'accrochage avec la fonction d'accrochage correspondante du premier composé organique (30) et comportant ledit réactif, pour obtenir dans chaque micro-cuvette des sondes d'analyse chimique ou biologique constituées par le réactif attaché aux moyens de fixation (24) par le couplage des fonctions d'accrochage des premier (30) et deuxième (51) composés organiques entre eux.
Description
MICRO-SYSTEME A MULTIPLE POINTS D'ANALYSE CHIMIQUE OU
BIOLOGIQUE METTANT EN OEUVRE UN COUPLAGE ENTRE LES
SONDES ET UN SUBSTRAT
Domaine technique
La présente invention concerne un micro-système à multiple points d'analyse chimique ou biologique mettant en oeuvre un couplage entre les sondes et un substrat.
BIOLOGIQUE METTANT EN OEUVRE UN COUPLAGE ENTRE LES
SONDES ET UN SUBSTRAT
Domaine technique
La présente invention concerne un micro-système à multiple points d'analyse chimique ou biologique mettant en oeuvre un couplage entre les sondes et un substrat.
La micro-électronique classique est de plus en plus appelée à tre un maillon de systèmes beaucoup plus complexes dans lesquels plusieurs fonctions sont intégrées. Ces systèmes ou micro-systèmes vont des applications capteurs physiques aux derniers développement de puces dites"biologiques".
Dans le premier cas, une cellule sensible capable de mesurer un phénomène physique est associé à un circuit intégré capable d'assurer le traitement de l'information et son exploitation. C'est le cas des coussins pneumatiques de sécurité de l'industrie automobile (connus sous le nom de"air-bag"dans la terminologie anglo-saxonne).
Dans le deuxième cas, un circuit intégré subit une finition lui permettant d'tre utilisé dans un milieu biologique. C'est le cas par exemple d'un mesureur de glucose intégré ou des sondes de pression sanguine.
Dans tous les cas, l'interface entre le milieu de la micro-électronique classique et celui des capteurs ou des biologistes est l'élément clef de ces micro-systèmes.
L'analyse chimique ou biologique est en train de subir la révolution de la miniaturisation liée à l'utilisation des microtechnologies. Lorsque des tests multiples peuvent tre regroupés sur un support de quelques mm2, les coûts sont réduits et une analyse naguère exceptionnelle peut tre utilisée de façon courante.
La demande vers des systèmes permettant l'analyse chimique ou biologique à très grand nombre de points est en émergence à l'heure actuelle avec l'apparition du screening en pharmacologie et des tests
ADN en biologie.
ADN en biologie.
Dans le premier cas, il faut déterminer sur un support comportant un grand nombre de cuvettes remplies du mme réactif, l'effet de différentes molécules que l'on dépose sélectivement dans chaque cuvette de façon séquentielle. Dans le deuxième cas chaque cuvette est remplie d'une sonde ADN différente et l'analyte dont on veut connaître la séquence gnomique est mis en contact au moment de l'analyse avec l'ensemble des cuvettes. En chimie analytique également la demande est forte vers la miniaturisation des cuvettes de réactions chimiques.
Tant d'un point de vue réalisation des cuvettes, dépôt des liquides dans ces cuvettes que système de lecture et d'acquisition des résultats, les efforts en Recherche et Développement sont importants.
Etat de la technique antérieure
Dans le domaine de l'analyse biologique ou plus généralement des tests en pharmacologie de nouvelles molécules, la réduction de la taille de l'outil de test est extrmement séduisante d'un point de vue économique. Plus précisément, on peut assimiler un micro-système d'analyse à une structure associant un support sur lequel des réactifs différents sont tout d'abord fixés puis mis en présence de la solution à analyser, et une méthode permettant de mesurer la réactivité obtenue. Eventuellement, un traitement dans le micro-système lui-mme de l'information obtenue peut tre prévu.
Dans le domaine de l'analyse biologique ou plus généralement des tests en pharmacologie de nouvelles molécules, la réduction de la taille de l'outil de test est extrmement séduisante d'un point de vue économique. Plus précisément, on peut assimiler un micro-système d'analyse à une structure associant un support sur lequel des réactifs différents sont tout d'abord fixés puis mis en présence de la solution à analyser, et une méthode permettant de mesurer la réactivité obtenue. Eventuellement, un traitement dans le micro-système lui-mme de l'information obtenue peut tre prévu.
Il existe différentes techniques pour fixer des réactifs différents sur un substrat.
Une première technique consiste à activer des sites où seront ensuite déposés et fixés les réactifs par des molécules chimiques diverses. C'est une technique principalement employée sur des substrats en verre. Les réactifs sont déposés par micro-pipettage ou par une technique du type jet d'encre. Côté chimie, pour assurer l'interface entre le substrat et le réactif, on peut citer les silanes, les lysines, les thioles lorsque le substrat est préalablement recouvert d'or. Cette chimie est complexe, surtout lorsqu'il s'agit de maitriser sa reproductibilité sur un substrat pouvant comporter quelques milliers de sites différents. On peut citer, comme représentatif de cette technique, le brevet US 5 474 796 qui se rapporte à la structuration de surface : les réactifs sont fixés sur un substrat présentant des zones hydrophiles et des zones hydrophobes. Le matriçage obtenu est de ce fait très régulier.
Selon une deuxième technique appliquée au domaine des puces à ADN (le réactif est une sonde ADN, notamment un oligonucléotide d'une vingtaine de bases), il a été proposé de construire la sonde base après base sur chaque site. Il est connu d'utiliser des masquages successifs pour faire cette synthèse in situ : chaque site est recouvert d'une base photoprotégée. Le photomasquage permet ensuite d'ôter la protection des sites et de venir accrocher chimiquement une base supplémentaire photoprotégée. L'opération est répétée jusqu'à l'obtention, sur chaque site, de la sonde voulue. Il est actuellement possible de construire plusieurs dizaines de milliers de sondes différentes sur un substrat. Cette technique est excellente mais elle ne permet pas d'obtenir des sondes à grand nombre de bases (la limite est d'environ 20). Il est possible également de fixer au départ une base protégée non plus par un radical photosensible mais par un radical chimiquement sensible. Il faut alors, par pipettage ou par une technique du type jet d'encre, venir localement sur les sites choisis pour ôter la protection de la base existante et y accrocher une base supplémentaire.
Une troisième technique concerne 1'électrodéposition sur site polarisé électriquement d'un polymère conducteur porteur de l'espèce réactive choisie. On peut se reporter à ce sujet à l'article "Electropolymerization of pyrrole and immobilization of glucose oxidase in a flow system : influence of the operating conditions on analytical performance"de
Juan-C. VIDAL et al., paru dans Biosensors &
Bioelectronics, vol. 13, No 3-4, pages 371-382,1998.
Juan-C. VIDAL et al., paru dans Biosensors &
Bioelectronics, vol. 13, No 3-4, pages 371-382,1998.
Le substrat est relié électriquement vers l'extérieur et trempé dans une cuve contenant l'espèce chimique à déposer. Le site choisi est polarisé et la copolymérisation s'effectue (en moins d'une minute sous une tension inférieure à 1 V). On passe à une autre solution porteuse d'un autre réactif, un autre site est polarisé à la surface du substrat et ainsi de suite.
Par ce moyen, des réactifs différents ont été fixés sur des zones différentes du substrat, permettant ainsi une analyse multipoint.
Une amélioration intéressante de cette dernière technique consiste à intégrer l'électronique d'adressage des sites dans le substrat lui-mme. Les polymères conducteurs utilisés pour ce procédé sont les polyanilines, les polypyrroles. On peut se reporter à ce sujet aux documents WO 94/22 889, FR-A-2 741 475 et
FR-A-2 741 476. Cette façon de faire est intéressante car la fixation de la sonde sur son site est forte, reproductible et bien maîtrisée. C'est une technique séquentielle : chaque site est polarisé successivement et le substrat est recouvert totalement ou trempé dans la solution porteuse du réactif à chaque passe.
FR-A-2 741 476. Cette façon de faire est intéressante car la fixation de la sonde sur son site est forte, reproductible et bien maîtrisée. C'est une technique séquentielle : chaque site est polarisé successivement et le substrat est recouvert totalement ou trempé dans la solution porteuse du réactif à chaque passe.
Cependant, lorsque le nombre de sites devient important, le temps de traitement de chaque support de sites devient prohibitif : autant de fois le temps de copolymérisation plus le temps de rinçage et d'introduction du nouvel électrolyte.
L'utilisation de ces dispositifs à sondes biologiques peut faire appel à une palette très étendue de méthodes : mesure électrique par impédance-métrie, microbalance, mesure optique par changement d'indice de réfraction, marquage radioactif, fluorescence. Cette dernière méthode est de plus en plus utilisée car elle est relativement facile à mettre en oeuvre et elle présente une bonne sensibilité. Schématiquement, elle consiste à coupler l'analyte à tester avec un fluophore. L'analyte est mis en contact avec le réactif fixé localement sur le micro-système. S'il y a réaction/appariement de quelque nature que ce soit, il restera sur la zone de test l'analyte portant le fluophore. Après lavage, une lecture de la fluorescence permettra de déterminer s'il y a eu appariement sur le site porteur.
Exposé de l'invention
Pour remédier aux problèmes de l'art antérieur, la présente invention propose l'utilisation d'une structure où chaque site est pourvu d'un composé organique offrant une fonction biotine. Chaque site peut alors recevoir une sonde chimique ou biologique constituée par un réactif déterminé (un petit morceau d'un brin d'ADN par exemple) associé à une fonction avidine ou streptavidine. Le couplage qui se réalise entre les fonctions avidine et biotine assure la fixation des sondes sur leurs sites respectifs.
Pour remédier aux problèmes de l'art antérieur, la présente invention propose l'utilisation d'une structure où chaque site est pourvu d'un composé organique offrant une fonction biotine. Chaque site peut alors recevoir une sonde chimique ou biologique constituée par un réactif déterminé (un petit morceau d'un brin d'ADN par exemple) associé à une fonction avidine ou streptavidine. Le couplage qui se réalise entre les fonctions avidine et biotine assure la fixation des sondes sur leurs sites respectifs.
L'invention a donc pour objet un procédé de réalisation d'un micro-système à multiple points d'analyse chimique ou biologique, comprenant les étapes consistant à :
-concevoir une structure pourvue de micro-cuvettes, chaque micro-cuvette étant destinée à recevoir un réactif et étant pourvue de moyens de fixation permettant d'y rattacher ledit réactif,
-placer un premier composé organique sur les moyens de fixation des micro-cuvettes, le premier composé organique comportant une fonction d'accrochage avec un deuxième composé organique et une fonction d'accrochage avec les moyens de fixation,
-placer, dans chaque micro-cuvette, le deuxième composé organique, le deuxième composé organique comportant une fonction d'accrochage avec la fonction d'accrochage correspondante du premier composé organique et comportant ledit réactif, pour obtenir dans chaque micro-cuvette des sondes d'analyse chimique ou biologique constituées par le réactif attaché aux moyens de fixation par le couplage des fonctions d'accrochage des premier et deuxième composés organiques entre eux.
-concevoir une structure pourvue de micro-cuvettes, chaque micro-cuvette étant destinée à recevoir un réactif et étant pourvue de moyens de fixation permettant d'y rattacher ledit réactif,
-placer un premier composé organique sur les moyens de fixation des micro-cuvettes, le premier composé organique comportant une fonction d'accrochage avec un deuxième composé organique et une fonction d'accrochage avec les moyens de fixation,
-placer, dans chaque micro-cuvette, le deuxième composé organique, le deuxième composé organique comportant une fonction d'accrochage avec la fonction d'accrochage correspondante du premier composé organique et comportant ledit réactif, pour obtenir dans chaque micro-cuvette des sondes d'analyse chimique ou biologique constituées par le réactif attaché aux moyens de fixation par le couplage des fonctions d'accrochage des premier et deuxième composés organiques entre eux.
Selon une première variante, l'étape consistant à placer un premier composé organique sur les moyens de fixation des micro-cuvettes s'effectue par électro-polymérisation, les moyens de fixation étant des moyens conducteurs accessibles électriquement, la fonction d'accrochage du premier composé organique avec les moyens de fixation étant constituée par un monomère conducteur, une contreélectrode étant utilisée pour effectuer l'électropolymérisation. Les moyens conducteurs peuvent comprendre une électrode commune à toutes les microcuvettes. La structure peut tre conçue à partir d'un substrat dont une face présente ladite électrode commune, une couche de matériau isolant étant déposée sur ladite électrode commune, la couche de matériau isolant étant creusée jusqu'à ladite électrode commune pour former les micro-cuvettes dont le fond est constitué par l'électrode commune. La structure peut aussi tre conçue à partir d'un substrat actif présentant une pluralité d'électrodes sur l'une de ses faces, cette pluralité d'électrodes constituant les moyens de fixation, une couche de matériau isolant étant déposée sur ladite face, la couche de matériau isolant étant creusée jusqu'aux électrodes pour former les micro-cuvettes, des moyens de multiplexage étant prévus pour relier électriquement la pluralité d'électrodes afin de réaliser l'électro-polymérisation.
La contre-électrode peut tre une électrode solidaire de la structure ou tre placée en regard des moyens de fixation lors de l'opération d'électro-polymérisation.
Avantageusement, le monomère conducteur du premier composé organique est du pyrrole.
Selon une deuxième variante, l'étape consistant à placer un premier composé organique sur les moyens de fixation des micro-cuvettes consiste à mettre en oeuvre une liaison covalente entre la fonction d'accrochage du premier composé organique avec les moyens de fixation et les moyens de fixation. Cette liaison covalente est par exemple de type silanisation (silane-biotine) ou un auto-assemblage mettant en oeuvre une liaison thiol-biotine.
Selon une troisième variante, l'étape consistant à placer un premier composé organique sur les moyens de fixation des micro-cuvettes s'effectue par voie chimique, par addition d'un réactif apte à provoquer la polymérisation sur les moyens de fixation du premier composé organique. Ce premier composé organique peut tre du pyrrole et le réactif apte à provoquer la polymérisation d'un sel ferrique.
Selon un aspect particulièrement avantageux, la fonction d'accrochage du premier composé organique avec le deuxième composé organique est une fonction biotine, la fonction d'accrochage du deuxième composé organique avec le premier composé organique étant une fonction avidine ou streptavidine. Le premier composé organique peut tre un pyrrole biotinilé. Le deuxième composé organique peut tre constitué dudit réactif directement rattaché à la fonction avidine ou steptavidine. Dans ce cas, l'étape consistant à placer, dans chaque micro-cuvette, le deuxième composé organique peut comprendre le dépôt d'une solution contenant le deuxième composé organique dans chaque micro-cuvette puis l'élimination de cette solution pour ne garder que les sondes obtenues par accrochage sélectif des premier et deuxième composés organiques, par exemple par liaison entre la biotine et la streptavidine/avidine.
Le deuxième composé organique peut aussi tre constitué dudit réactif rattaché à la fonction avidine ou steptavidine par l'intermédiaire d'une fonction biotine. Dans ce cas, l'étape consistant à placer, dans chaque micro-cuvette, le deuxième composé organique peut comprendre le dépôt d'une première solution d'avidine ou de streptavidine dans chaque micro-cuvette, puis l'élimination de cette première solution pour révéler le premier composé organique avec la fonction biotine complexée par ladite avidine ou ladite steptavidine, ensuite le dépôt d'une deuxième solution contenant ledit réactif sous forme biotinilée, puis l'élimination de cette deuxième solution pour ne garder que les sondes obtenues.
L'invention a aussi pour objet un micro-système à multiples points d'analyse chimique ou biologique constitué par une structure pourvue de micro-cuvettes, chaque micro-cuvette étant destinée à recevoir un réactif et étant pourvue de moyens de fixation permettant d'y rattacher ledit réactif par l'intermédiaire d'un premier composé organique, le réactif faisant partie d'un deuxième composé organique, le premier composé organique comportant une fonction d'accrochage avec le deuxième composé organique et une fonction d'accrochage avec les moyens de fixation, le deuxième composé organique comportant une fonction d'accrochage avec la fonction d'accrochage correspondante du premier composé organique.
Selon une première variante, les moyens de fixation sont des électrodes et la fonction d'accrochage avec les moyens de fixation du premier composé organique est un polymère conducteur. Les moyens de fixation peuvent former une électrode commune. Les micro-cuvettes peuvent tre formées dans une couche isolante de ladite structure, les moyens de fixation formant le fond des micro-cuvettes. La structure peut comporter une contre-électrode disposée en opposition par rapport au fond des micro-cuvettes afin de pouvoir établir un champ électrique entre la contre-électrode et les moyens de fixation.
Avantageusement, ledit polymère conducteur est un polypyrrole.
Selon une deuxième variante, les moyens de fixation et la fonction d'accrochage du premier composé organique avec les moyens de fixation sont tels qu'ils forment une liaison covalente. Cette liaison covalente est par exemple de type silanisation (silane-biotine) ou un auto-assemblage mettant en oeuvre une liaison thiol-biotine.
Selon une troisième variante, la fonction d'accrochage du premier composé organique avec les moyens de fixation comporte un réactif de polymérisation, par voie chimique, sur les moyens de fixation. Ce réactif peut tre un sel ferrique.
Selon un aspect particulièrement avantageux, le premier composé organique comprend une fonction biotine pour son accrochage avec une fonction avidine ou streptavidine du deuxième composé organique.
Le premier composé organique peut tre un polypyrrole biotinilé. Le deuxième composé organique peut tre constitué dudit réactif directement rattaché à la fonction avidine ou streptavidine. Le deuxième composé organique peut aussi tre constitué dudit réactif rattaché à la fonction avidine ou steptavidine par l'intermédiaire d'une fonction biotine.
L'invention a encore pour objet un pyrrole biotinilé pour lequel une molécule de biotine est reliée à l'atome d'azote d'une molécule de pyrrole par un espaceur hydrophile. Avantageusement, ledit espaceur a une longueur d'au moins onze atomes. Le pyrrole biotinilé peut posséder la formule suivante :
L'invention a encore pour objet un procédé de fabrication de pyrrole biotinilé consistant à coupler un aminoalkylpyrrole à de la biotine.
L'invention a encore pour objet un polypyrrole biotinilé obtenu par polymérisation du pyrrole biotinilé mentionné ci-dessus.
L'invention a encore pour objet un polypyrrole biotinilé obtenu par copolymérisation de pyrrole et du pyrrole biotinilé mentionné ci-dessus.
L'invention a enfin pour objet un procédé de fabrication de ces polypyrroles dans lequel les polypyrroles sont obtenus par électro-polymérisation.
Brève description des dessins.
L'invention sera mieux comprise et d'autres avantages et particularités apparaîtront à la lecture de la description qui va suivre, donné à titre d'exemple non limitatif, accompagnée des dessins annexés parmi lesquels :
-les figures 1A à 1E représentent différentes étapes de la réalisation d'une structure destinée à un micro-système à multiples points d'analyse chimique ou biologique selon la présente invention ;
-la figure 2 illustre une étape d'électropolymérisation effectuée dans les micro-cuvettes d'une structure destinée à un micro-système à multiples points d'analyse chimique ou biologique selon la présente invention ;
-la figure 3 représente une micro-cuvette de la structure représentée à la figure 2 et au fond de laquelle est fixé un premier composé organique, selon le procédé de réalisation d'un micro-système conforme à l'invention ;
-la figure 4 représente une autre structure destinée à un micro-système à multiples points d'analyse chimique ou biologique selon la présente invention,
-la figure 5 illustre une étape d'électropolymérisation effectuée dans les microcuvettes de la structure représentée à la figure 4 ;
-les figures 6 à 8 illustrent l'étape consistant à placer dans une micro-cuvette le deuxième composé organique pour obtenir une sonde d'analyse chimique ou biologique conforme à la présente invention ;
-la figure 9 illustre le procédé de fabrication d'un premier composé organique utilisable pour la présente invention.
-les figures 1A à 1E représentent différentes étapes de la réalisation d'une structure destinée à un micro-système à multiples points d'analyse chimique ou biologique selon la présente invention ;
-la figure 2 illustre une étape d'électropolymérisation effectuée dans les micro-cuvettes d'une structure destinée à un micro-système à multiples points d'analyse chimique ou biologique selon la présente invention ;
-la figure 3 représente une micro-cuvette de la structure représentée à la figure 2 et au fond de laquelle est fixé un premier composé organique, selon le procédé de réalisation d'un micro-système conforme à l'invention ;
-la figure 4 représente une autre structure destinée à un micro-système à multiples points d'analyse chimique ou biologique selon la présente invention,
-la figure 5 illustre une étape d'électropolymérisation effectuée dans les microcuvettes de la structure représentée à la figure 4 ;
-les figures 6 à 8 illustrent l'étape consistant à placer dans une micro-cuvette le deuxième composé organique pour obtenir une sonde d'analyse chimique ou biologique conforme à la présente invention ;
-la figure 9 illustre le procédé de fabrication d'un premier composé organique utilisable pour la présente invention.
Description détaillée de mode de réalisation de l'invention.
Les figures 1 à 8 illustrent la variante de réalisation pour laquelle les moyens de fixation du premier composé organique sont des électrodes et pour laquelle le placement de ce premier composé organique se fait par électro-polymérisation, ces électrodes permettant l'application d'un potentiel électrique.
Pour cette variante de réalisation, deux cas sont à considérer. La structure peut comporter un substrat passif, c'est-à-dire qu'il ne comporte pas d'électronique intégrée. Dans ce cas, le substrat peut tre revtu d'un plan conducteur (par exemple métallique) lui-mme recouvert d'une couche d'un matériau assurant la fonction d'isolation électrique et dans lequel sont formées les micro-cavités. Celles-ci débouchent localement sur le plan conducteur. Les zones découvertes du plan conducteur constituent alors les électrodes de réception.
Le substrat peut aussi tre actif auquel cas l'électronique qui lui est intégrée peut servir à différentes fonctions : chauffage localisé des sites, mesure locale de pH, lecture d'un signal de fluorescence, etc. Dans la plupart des cas, il n'est pas possible de laisser en court-circuit les sites pour les fonctions ultérieures qui doivent rester adressables sur chaque site indépendamment des autres.
Le multiplexage nécessaire à ces fonctions peut alors tre utilisé au cours du procédé de réalisation du micro-système. Il est en effet possible d'adresser collectivement tous les sites pour effectuer l'opération de fixation des réactifs. Chaque site pourra ultérieurement tre adressé de façon individuelle.
Les figures 1A à 1E sont des vues en coupe transversale et partielles. Elles illustrent un premier mode de réalisation d'un micro-système selon l'invention pour lequel la contre-électrode est située en surface et pour lequel le substrat est passif.
La figure 1A représente un substrat 1 constitué par une plaquette qui peut tre en un matériau tel que le verre, le silicium, le plastique.
Sur une face principale de cette plaquette on a déposé une couche métallique 3, par exemple en chrome, en or ou en platine, d'une épaisseur comprise entre 0,1 et 10 um. Comme le montre la figure 1B, on dépose, sur la couche métallique 3, un film de polymère photosensible 5, par exemple un film de polyimide d'une épaisseur comprise entre 1 et 50 um.
Des micro-cuvettes 7 sont ensuite formées par insolation~et développement du film de polyimide (voir la figure 1C). Elles sont avantageusement formées avec des flancs en pente. Les micro-cuvettes formées révèlent localement la couche métallique 3. Une nouvelle couche métallique 9 est alors uniformément déposée sur le film de polyimide y compris l'intérieur des micro-cuvettes 7. La couche métallique 9 peut tre en chrome, en or ou en platine et avoir 0,1 à 10 um d'épaisseur.
Comme le montre la figure 1D, une couche de résine de masquage 11 est déposée sur la couche métallique 9 et des zones à graver dans cette couche métallique 9 sont définies.
La couche métallique 9 est alors gravée aux endroits accessibles et la résine 11 est retirée. On obtient la structure représentée à la figure 1E. Chaque micro-cuvette 7 présente en son fond une électrode 9a, toutes les électrodes 9a étant connectées électriquement grâce à la couche métallique 3. Une électrode commune 9b recouvre la face supérieure du film de polymère 5. Cette structure est prte pour l'étape suivante consistant à placer le premier composé organique au fond des micro-cuvettes.
La figure 2 illustre l'étape d'électropolymérisation. On a représenté une structure 20 pourvue de micro-cuvettes 21 et qui, contrairement au cas décrit précédemment, est constituée à partir d'un substrat actif 22. Les micro-cuvettes 21 ont été formées dans une couche isolante 23 déposée sur le substrat 22. Le fond des micro-cuvettes 21 est constitué par les électrodes 24 qui peuvent tre, par multiplexage, reliées électriquement. Comme pour le cas décrit précédemment, une contre-électrode commune 25 a été déposée sur la partie supérieure de la couche isolante 23. Une différence de potentiel peut donc tre appliquée entre la contre-électrode 25 et les électrodes 24 reliées électriquement par multiplexage.
Une couche 26 contenant des monomères appropriés, par exemple un mélange de pyrrole et de pyrrole biotinilé comme celui décrit plus loin, est déposée sur la face du substrat 20 présentant les micro-cuvettes. Une différence de potentiel appropriée est appliquée entre la contre-électrode 25 et les électrodes 24. Lorsque 1'électro-polymérisation est achevée, les micro-cuvettes sont rincées et séchées. On obtient alors, comme le montre la figure 3, un composé organique 30, constitué de polypyrrole biotinilé, fixé sur les électrodes 24. Ce composé organique adhère aux électrodes 24 par les cycles pyrroles et présente des molécules de biotine 31 rattachées à des cycles pyrroles par des espaceurs 32.
La structure destinée à constituer le micro-système selon l'invention peut ne pas comporter de contre-électrode directement déposée sur elle-mme.
Une telle structure est représentée à la figure 4. Dans ce cas, la structure 40 comprend par exemple un substrat passif 41 dont une face est recouverte d'une couche métallique 42 formant électrode. Une couche isolante 43 a été déposée sur la couche métallique 42 et gravée pour former des micro-cuvettes 44.
L'électro-polymérisation est alors réalisée, comme représenté à la figure 5, dans une cuve 45 remplie d'une solution appropriée 46 contenant un mélange de monomères pyrrole et pyrrole biotinilé. Un générateur de tension continue 47 est branché entre l'électrode 42 et une contre-électrode 48 disposée en vis-à-vis du fond des micro-cuvettes 44. L'électropolymérisation provoque le dépôt de polypyrrole biotinilé sur les zones apparentes de l'électrode 42 comme pour la figure 3. Les figures 6,7 et 8 illustrent la fixation du deuxième composé organique.
La cuve d'électro-polymérisation 45 peut comporter une électrode supplémentaire servant de référence.
L'étape suivante du procédé est représentée par la figure 6. Elle consiste à placer, dans chaque micro-cuvette, une solution 50 comportant le deuxième composé organique 51. Ce deuxième composé organique comporte par exemple une fonction avidine ou streptavidine si le premier composé organique est biotinilé.
Une sonde ADN peut ainsi tre constituée en choisissant comme deuxième composé organique de l'ADN streptavidine qui est commercialisé. La reconnaissance biotine/streptavidine est très utilisée industriellement à cause du taux de reconnaissance élevé, de l'insensibilité aux variations de température, d'un large choix du tampon, du pH, etc.
La figure 7 montre l'accrochage effectué entre la fonction biotine du composé organique 30 et la fonction avidine ou streptavidine du composé organique 51.
Après rinçage et séchage, on obtient un micro-système dont un point d'analyse est représenté à la figure 8. La micro-cuvette 21 est pourvue de sondes constituées par l'association des composés organiques 30 et 51.
Sur le polypyrrole biotinilé du fond des micro-cuvettes, on peut fixer des séquences d'ADN, d'ARN, des oligonucléotides, des enzymes, des acides nucléiques ou aminés, des protéines, des antigènes ou tout produit pouvant tre lié à l'avidine (ou la streptavidine) ou à la biotine. En effet, on peut former non seulement l'association : polypyrrole-biotine/ (strept) avidine-réactif, mais aussi l'association : polypyrrole-biotine/ (strept) avidine/biotine-réactif.
On peut alors utiliser de l'ADN biotinilé qui est un produit commercialisé. La double reconnaissance biotine/streptavidine/biotine présente les mmes qualités que la réaction de reconnaissance biotine/streptavidine.
Il est à noter que l'invention permet le placement de manière collective du premier composé organique sur le fond des micro-cuvettes.
Le polypyrrole biotinilé qui s'accroche au fond des micro-cuvettes est avantageusement un copolymère synthétisé à partir de pyrrole et de pyrrole biotinilé pour lequel la biotine est rattachée à l'atome d'azote d'un cycle pyrrole par un espaceur hydrophile. Le choix de cet espaceur peut tre crucial.
Il doit tre suffisamment long pour assurer une reconnaissance non restreinte de la biotine par l'avidine. Une longueur d'au moins onze atomes est particulièrement appropriée.
La figure 9 est un schéma représentant la synthèse d'un pyrrole biotinilé. Cette synthèse est obtenue par couplage d'un aminoalkylpyrrole et d'une entité biotine. La synthèse de l'aminoalkylpyrrole a été menée en utilisant une réaction telle que décrite par JIRKOWSKY et BAUDY dans Synthesis, 1981, page 481.
Les réactifs utilisés et les conditions des réactions sont les suivants :
i) 4,7,10-trioxa-1,13-tridécanediamine (3 eq.), acide acétique/dioxanne à reflux, pendant 5 h, rendement 32% ;
ii) KOH 10% à reflux pendant 5 h, rendement 65% ;
iii) ester de d-biotine Nhydroxysuccinimide (1 eq.) dans le diméthylformamide à température ambiante pendant 16 h, rendement 54%.
i) 4,7,10-trioxa-1,13-tridécanediamine (3 eq.), acide acétique/dioxanne à reflux, pendant 5 h, rendement 32% ;
ii) KOH 10% à reflux pendant 5 h, rendement 65% ;
iii) ester de d-biotine Nhydroxysuccinimide (1 eq.) dans le diméthylformamide à température ambiante pendant 16 h, rendement 54%.
Claims (30)
1. Procédé de réalisation d'un micro-système à multiple points d'analyse chimique ou biologique, comprenant les étapes consistant à :
-concevoir une structure (20,40) pourvue de micro-cuvettes (21,44), chaque micro-cuvette étant destinée à recevoir un réactif et étant pourvue de moyens de fixation permettant d'y rattacher ledit réactif,
-placer un premier composé organique (30) sur les moyens de fixation (24) des micro-cuvettes (21), le premier composé organique comportant une fonction d'accrochage avec un deuxième composé organique (51) et une fonction d'accrochage avec les moyens de fixation (24),
-placer, dans chaque micro-cuvette (21), le deuxième composé organique (51), le deuxième composé organique comportant une fonction d'accrochage avec la fonction d'accrochage correspondante du premier composé organique (30) et comportant ledit réactif, pour obtenir dans chaque micro-cuvette (21) des sondes d'analyse chimique ou biologique constituées par le réactif attaché aux moyens de fixation par le couplage des fonctions d'accrochage des premier et deuxième composés organiques entre eux.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'étape consistant à placer un premier composé organique (30) sur les moyens de fixation (24) des micro-cuvettes (21) s'effectue par électro-polymérisation, les moyens de fixation étant des moyens conducteurs accessibles électriquement, la fonction d'accrochage du premier composé organique (30) avec les moyens de fixation étant constituée par un monomère conducteur, une contre-électrode (25) étant utilisée pour effectuer 1'électro-polymérisation.
3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que les moyens conducteurs comprennent une électrode (42) commune à toutes les micro-cuvettes.
4. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que ladite structure (40) est conçue à partir d'un substrat (41) dont une face présente ladite électrode commune (42), une couche de matériau isolant (43) étant déposée sur ladite électrode commune, la couche de matériau isolant étant creusée jusqu'à ladite électrode commune (42) pour former les micro-cuvettes (44) dont le fond est constitué par l'électrode commune.
5. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que ladite structure (20) est conçue à partir d'un substrat actif (22) présentant une pluralité d'électrodes (24) sur l'une de ses faces, cette pluralité d'électrodes constituant les moyens de fixation, une couche de matériau isolant (23) étant déposée sur ladite face, la couche de matériau isolant (23) étant creusée jusqu'aux électrodes (24) pour former les micro-cuvettes, des moyens de multiplexage étant prévus pour relier électriquement la pluralité d'électrodes (24) afin de réaliser l'électropolymérisation.
6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 à 5, caractérisé en ce que la contreélectrode (9b, 25) est une électrode solidaire de ladite structure.
7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 à 5, caractérisé en ce que la contreélectrode est une électrode (48) placée en regard des moyens de fixation lors de l'opération d'électropolymérisation.
8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 2 à 7, caractérisé en ce que le monomère conducteur du premier composé organique (30) est du pyrrole.
9. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'étape consistant à placer un premier composé organique (30) sur les moyens de fixation (24) des micro-cuvettes (21) consiste à mettre en oeuvre une liaison covalente entre la fonction d'accrochage du premier composé organique avec les moyens de fixation et les moyens de fixation.
10. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'étape consistant à placer un premier composé organique sur les moyens de fixation des micro-cuvettes s'effectue par voie chimique, par addition d'un réactif apte à provoquer la polymérisation sur les moyens de fixation du premier composé organique.
11. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que le premier composé organique est du pyrrole et en ce que le réactif apte à provoquer la polymérisation est un sel ferrique.
12. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce que la fonction d'accrochage du premier composé organique (30) avec le deuxième composé organique (51) est une fonction biotine, la fonction d'accrochage du deuxième composé organique (51) avec le premier composé organique (30) étant une fonction avidine ou streptavidine.
13. Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que le premier composé organique (30) est un pyrrole biotinilé.
14. Procédé selon l'une des revendications 12 ou 13, caractérisé en ce que le deuxième composé organique (51) est constitué dudit réactif directement rattaché à la fonction avidine ou streptavidine.
15. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que l'étape consistant à placer, dans chaque micro-cuvette (21), le deuxième composé organique (51) comprend le dépôt d'une solution (50) contenant le deuxième composé organique (51) dans chaque micro-cuvette (21) puis l'élimination de cette solution pour ne garder que les sondes obtenues.
16. Procédé selon l'une des revendications 12 ou 13, caractérisé en ce que le deuxième composé organique (51) est constitué dudit réactif rattaché à la fonction avidine ou streptavidine par l'intermédiaire d'une fonction biotine.
17. Procédé selon la revendication 16, caractérisé en ce que l'étape consistant à placer, dans chaque micro-cuvette (21), le deuxième composé organique (51) comprend le dépôt d'une première solution d'avidine ou de streptavidine dans chaque micro-cuvette, puis l'élimination de cette première solution pour révéler le premier composé organique (30) avec la fonction biotine complexée par ladite avidine ou ladite steptavidine, ensuite le dépôt d'une deuxième solution contenant ledit réactif sous forme biotinilée, puis l'élimination de cette deuxième solution pour ne garder que les sondes obtenues.
18. Micro-système à multiples points d'analyse chimique ou biologique constitué par une structure (20,40) pourvue de micro-cuvettes (21,44), chaque micro-cuvette étant destinée à recevoir un réactif et étant pourvue de moyens de fixation (24) permettant d'y rattacher ledit réactif par l'intermédiaire d'un premier composé organique (30), le réactif faisant partie d'un deuxième composé organique (51), le premier composé organique (30) comportant une fonction d'accrochage avec le deuxième composé organique (51) et une fonction d'accrochage avec les moyens de fixation (24), le deuxième composé organique (51) comportant une fonction d'accrochage avec la fonction d'accrochage correspondante du premier composé organique (30).
19. Micro-système selon la revendication 18, caractérisé en ce que les moyens de fixation sont des électrodes (9a, 24) et en ce que la fonction d'accrochage avec les moyens de fixation du premier composé organique est un polymère conducteur.
20. Micro-système selon la revendication 19, caractérisé en ce que les moyens de fixation forment une électrode commune (42).
21. Micro-système selon l'une des revendications 19 ou 20, caractérisé en ce que les micro-cuvettes (21) sont formées dans une couche isolante (23) de ladite structure (20), les moyens de fixation (24) formant le fond des micro-cuvettes.
22. Micro-système selon l'une quelconque des revendications 19 à 21, caractérisé en ce que ladite structure (20) comporte une contre-électrode (25) disposée en opposition par rapport au fond des micro-cuvettes afin de pouvoir établir un champ électrique entre la contre-électrode et les moyens de fixation (24).
23. Micro-système selon l'une quelconque des revendications 19 à 21, caractérisé en ce que ledit polymère conducteur est un polypyrrole.
24. Micro-système selon la revendication 18, caractérisé en ce que les moyens de fixation et la fonction d'accrochage du premier composé organique avec les moyens de fixation sont tels qu'ils forment une liaison covalente.
25. Micro-système selon la revendication 18, caractérisé en ce que la fonction d'accrochage du premier composé organique avec les moyens de fixation comporte un réactif de polymérisation, par voie chimique, sur les moyens de fixation.
26. Micro-système selon la revendication 25, caractérisé en ce que ledit réactif est un sel ferrique.
27. Micro-système selon l'une quelconque des revendications 18 à 26, caractérisé en ce que le premier composé organique (30) comprend une fonction biotine pour son accrochage avec une fonction avidine ou streptavidine du deuxième composé organique (51).
28. Micro-système selon la revendication 27, caractérisé en ce que le premier composé organique (30) est un polypyrrole biotinilé.
29. Micro-système selon l'une des revendications 27 ou 28, caractérisé en ce que le deuxième composé organique (51) est constitué dudit réactif directement rattaché à la fonction avidine ou streptavidine.
30. Micro-système selon l'une des revendications 27 ou 28, caractérisé en ce que le deuxième composé organique (51) est constitué dudit réactif rattaché à la fonction avidine ou streptavidine par l'intermédiaire d'une fonction biotine.
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Cited By (4)
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|---|---|---|---|---|
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| FR2916367A1 (fr) * | 2007-05-25 | 2008-11-28 | Commissariat Energie Atomique | Procede de fixation sur un microsysteme de composes a liaisons peptidiques, tels que des proteines, et microsysteme incorporant ces composes. |
| FR2927169A1 (fr) * | 2008-02-05 | 2009-08-07 | Commissariat Energie Atomique | Procede de fonctionnalisation de la surface d'un pore |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2789401B1 (fr) * | 1999-02-08 | 2003-04-04 | Cis Bio Int | Procede de fabrication de matrices de ligands adresses sur un support |
| KR100375105B1 (ko) * | 2000-09-08 | 2003-03-08 | 주식회사 셀텍 | 광 다이오드를 이용한 질병 및 바이러스 분석장치 |
| ES2191553B2 (es) * | 2002-01-22 | 2005-02-01 | Universitat Rovira I Virgili | Metodo para la fabricacion de chips para la deteccion de analitos. |
| US20070134721A1 (en) * | 2004-02-03 | 2007-06-14 | Laitenberger Peter G | Sensor |
| US8728158B2 (en) | 2009-02-09 | 2014-05-20 | Jeffrey C. Whitsett | Exchangeable intraocular lens device and method of use |
| WO2014001459A1 (fr) | 2012-06-29 | 2014-01-03 | Danmarks Tekniske Universitet | Procédé de charge d'un porteur d'essai, et porteur d'essai |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0402917A2 (fr) * | 1989-06-15 | 1990-12-19 | Biocircuits Corporation | Biocapteurs utilisant des signaux électriques, optiques et mécaniques |
| WO1993006237A1 (fr) * | 1991-09-13 | 1993-04-01 | Allage Associates, Inc. | Procede analytique pour dispositifs chimiques et biodetecteurs formes a partir de films minces polymeres electroactifs |
| WO1996028538A1 (fr) * | 1995-03-10 | 1996-09-19 | Meso Scale Technologies, Llc | Essai par electrochimioluminescence multispecifique et multirangee |
| US5653939A (en) * | 1991-11-19 | 1997-08-05 | Massachusetts Institute Of Technology | Optical and electrical methods and apparatus for molecule detection |
| US5776791A (en) * | 1995-11-17 | 1998-07-07 | Commissariat A L'energie Atomique | Process for collective manufacture of chips with electrodes selectively covered by a deposit |
-
1998
- 1998-10-13 FR FR9812800A patent/FR2784466B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
1999
- 1999-10-12 EP EP99947540A patent/EP1121588A1/fr not_active Withdrawn
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0402917A2 (fr) * | 1989-06-15 | 1990-12-19 | Biocircuits Corporation | Biocapteurs utilisant des signaux électriques, optiques et mécaniques |
| WO1993006237A1 (fr) * | 1991-09-13 | 1993-04-01 | Allage Associates, Inc. | Procede analytique pour dispositifs chimiques et biodetecteurs formes a partir de films minces polymeres electroactifs |
| US5653939A (en) * | 1991-11-19 | 1997-08-05 | Massachusetts Institute Of Technology | Optical and electrical methods and apparatus for molecule detection |
| WO1996028538A1 (fr) * | 1995-03-10 | 1996-09-19 | Meso Scale Technologies, Llc | Essai par electrochimioluminescence multispecifique et multirangee |
| US5776791A (en) * | 1995-11-17 | 1998-07-07 | Commissariat A L'energie Atomique | Process for collective manufacture of chips with electrodes selectively covered by a deposit |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| COSNIER, S.: "Electropolymerization of amphiphilic monomers for designing amperometric biosensors.", ELECTROANALYSIS, vol. 9, no. 12, 1997, pages 894 - 902, XP002101569 * |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2834299A1 (fr) * | 2001-12-27 | 2003-07-04 | Commissariat Energie Atomique | Procede de fixation par electrodeposition de reactifs sur une face plane d'un substrat |
| WO2003056072A2 (fr) * | 2001-12-27 | 2003-07-10 | Commissariat A L'energie Atomique | Procede de fixation par electrodeposition de reactifs sur une face plane d'un substrat |
| WO2003056072A3 (fr) * | 2001-12-27 | 2004-02-12 | Commissariat Energie Atomique | Procede de fixation par electrodeposition de reactifs sur une face plane d'un substrat |
| FR2843829A1 (fr) * | 2002-08-26 | 2004-02-27 | Commissariat Energie Atomique | Support de garniture par voie electrochimique, systeme d'adressage d'un tel support, et procede pour un depot selectif |
| FR2916367A1 (fr) * | 2007-05-25 | 2008-11-28 | Commissariat Energie Atomique | Procede de fixation sur un microsysteme de composes a liaisons peptidiques, tels que des proteines, et microsysteme incorporant ces composes. |
| WO2009004142A2 (fr) * | 2007-05-25 | 2009-01-08 | Commissariat A L'energie Atomique | Procede de fixation sur un microsysteme de composes a liaisons peptidiques, tels que des proteines, et microsysteme incorporant ces composes |
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|---|---|
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| ST | Notification of lapse |
Effective date: 20060630 |