FR2769914A1

FR2769914A1 - Derives d'indazole tricycliques leur preparation et leur application en therapeutique

Info

Publication number: FR2769914A1
Application number: FR9713150A
Authority: FR
Inventors: Luc Even; Michel Aletru; Eykmar Fett; Philippe R Bovy
Original assignee: Synthelabo SA
Current assignee: Synthelabo SA
Priority date: 1997-10-21
Filing date: 1997-10-21
Publication date: 1999-04-23
Anticipated expiration: 2017-10-21
Also published as: FR2769914B1

Abstract

Composés de formule générale (I) (CF DESSIN DANS BOPI) dans laquelle : R1 représente un atome d'hydrogène, un halogène tel que chlore, brome ou fluor, un groupe C1-4 alcoxy, un groupe méthyle, un groupe hydroxy ou un groupe amino, X représente un atome d'oxygène, un groupe NH ou N-C1-4 alkyle, ou un groupe méthylène, etA est un groupe de formule (B) ou (C). (CF DESSIN DANS BOPI) dans lesquelles : n est égal à 0, 1, 2 ou 3, etR4 représente pour les composés de formule (C) un atome d'hydrogène, un groupe C1-4 alkyle, linéaire ou ramifié, un groupe phényle ou benzyle, un groupe -(CH2 ) m -NH2, - (CH2 ) m NHSO2 CH3 ou - (CH2 ) m -SO2 NH2 , où m est égal à 2 ou 3, pour les composés de formule (B), R4 représente un atome d'hydrogène, un groupe amino ou -NHC (O) CH3 , NHBoc, NHSO2 CH3. Application en thérapeutique.

Description

La présente invention a pour objet des dérivés d'indazole tricycliques, leur préparation et leur application en thérapeutique.

Les composés répondent à la formule générale (I)

dans laquelle
R1 représente un atome d'hydrogène, un halogène tel que chlore, brome ou fluor, un groupe C14 alcoxy, un groupe méthyle, un groupe hydroxy ou un groupe amino,
R2 et R3, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un groupe C14 alkyle, linéaire ou ramifié, un phényle ou un benzyle,
X représente un atome d'oxygène, un groupe NH ou N-C1.4 alkyle, ou un groupe méthylène, et
A est un groupe de formule (B) ou (C)

dans lesquelles n est égal à 0, 1, 2 ou 3, et
R4 représente pour les composés de formule (C) un atome d'hydrogène, un groupe C14 alkyle, linéaire ou ramifié, un groupe phényle ou benzyle, un groupe -(CH2)m-NH2, -(CH2)m-
NHSO2CH3 ou -(CH2)m-SO2NH2, où m est égal à 2 ou 3, pour les composés de formule (B), R4 représente un atome d'hydrogène, un groupe amino ou -NHC(O)CH3, NHBoc (Boc représente un groupe ter-butylokycarbonyle), NHS02CH3.

Les composés de formule générale (I) comportent un ou plusieurs atomes de carbone asymétriques. Ils peuvent donc exister sous forme d'énantiomères ou de diastéréoisomères.

Ces énantiomères, diastéréoisomères, ainsi que leurs mélanges, y compris les mélanges racémiques, font partie de 1 invention.

Les composés de formule générale (I) peuvent se présenter sous forme de bases libres ou de sels d'addition à des acides pharmaceutiquement acceptables, qui font également partie de 1 invention.

Les composés de l'invention peuvent être préparés par des procédés illustrés dans les schémas qui suivent.

Les composés de formule (I) peuvent être préparés selon le schéma 1, par réaction d'un composé de formule (II), dans laquelle R1, R2 et R3 sont tels que définis dans la formule (I) et W représente un halogène, en particulier un atome de chlore, avec un composé de formule (III) dans laquelle X et A sont tels que définis dans la formule (I).

Par exemple, lorsque X représente un atome d'oxygène, la réaction peut se faire par formation préalable de l'alcoolate correspondant de formule XA- au moyen de butylithium ou d'hydrure de sodium dans du tétrahydrofurane.

Lorsque X représente une amine, soit NH soit N- C1.4 alkyle, la réaction peut s'effectuer dans un solvant organique, tel que le chloroforme ou le dichlorométhane, en présence d'une base telle que la triéthylamine ou du bicarbonate de potassium.

Ces réactions d'estérification et d'amidification, bien connues de l'homme du métier, peuvent se réaliser à une température comprise entre -100C et +500C.

Schéma 1

Les produits de départ sont directement disponibles dans le commerce, sont connus dans la littérature ou peuvent être synthétisés par des méthodes classiques connues de l'homme du métier.

Les composés de formule (III), dans laquelle A représente un groupe de formule (B), sont directement disponibles dans le commerce, sont connus dans la littérature ou peuvent être synthétisés par des méthodes classiques de l'homme du métier.

Les composés de formule (III), dans laquelle A représente un groupe de formule (C), peuvent être préparés selon le procédé décrit par L.M.Gaster et coll., J.Med.Chem.(1993), 36, 41214123.

Les composés de formule (I I), dans laquelle W est un atome de chlore et Rl, R2 et R3 sont tels que définis dans la formule (I), peuvent être préparés à partir d'un composé de formule (XIII) par activation de l'acide carboxylique en chlorure d'acide au moyen de chlorure de thionyle ou de chlorure d'oxalyle selon des méthodes connues de l'homme du métier.

Les composés de formule (XIII) peuvent être préparés selon le procédé général décrit dans le schéma 2, à partir de dérivés de formule (IV), dans laquelle R1 R2 et R3 sont tels que définis dans la formule (I).

Schéma 2

Selon ce schéma, les composés de formule (IV) peuvent être traités au moyen de trichlorure de bore et d'acétonitrile dans les conditions décrites par T. Sugasawa et coll., J. Am.

Chem. Soc. (1980), 100, 1357, pour donner les composés de formule (V), dans laquelle Rl, R2 et R3 sont tels que définis dans la formule (I), suivi d'une N-nitrosation avec du nitrite de sodium en milieu acide, dans les conditions connues de l'homme du métier (Jerry March, Advanced Organic Chemistry, éd. John Wiley & Sons, 3rd éd., pp 572), pour donner les composés de formule (VI). Les composés de formule (VI) peuvent ensuite être traités dans les conditions de réaction de Knoevenagel, connue de l'homme du métier (Jerry
March, Advanced Organic chemistry, éd. John Wiley & Sons, 3rd éd., 835-841), pour donner les composés de formule (VII), dans laquelle R1, R2 et R3 sont tels que définis dans la formule (I). La fonction N-nitroso des composés de formule (VII) peut être réduite à l'aide de zinc en poudre en présence d'acide acétique et immédiatement cyclisée pour donner les composés de formule (VIII), dans laquelle Rl, R2 et R3 sont tels que définis dans la formule (I). Enfin, les composés de formule (IX) peuvent être préparés par oxydation des composés de formule (VIII), en présence d'ozone ou par traitement avec du périodate de sodium et du tétroxyde d'osmium puis être oxydés à l'aide de nitrate d'argent en présence de potasse pour donner les composés de formule (XIII), dans laquelle Rl, R2 et R3 sont tels que définis dans la formule (I).

Selon une méthode alternative, on peut préparer les composés de formule (XII I) , dans laquelle R1, R2 et R3 sont tels que définis dans la formule (I), suivant le procédé général décrit dans le schéma 3.

Schéma 3

Selon ce schéma, les composés de formule (X) peuvent être préparés à partir des dérivés de formule (IV) par réaction de 2-cyanofurane et de trichlorure de bore dans des conditions de réaction décrites par Sugasawa, ci-dessus référencé. Les composés de formule (XII) peuvent ensuite être obtenus par Nnitrosation des composés de formule (X) suivie de la réduction des composés résultant de formule (XI) à l'aide de zinc et par cyclisation subséquente de l'intermédiaire. Enfin les composés de formule (XII) sont oxydés par traitement avec un mélange de permanganate de potassium et de carbonate de potassium dans de l'acétonitrile ou alternativement dans un mélange de benzène et d'acétone (Chem. Abs. (1961), 55, 16518) pour donner les composés de formule (XIII), dans laquelle R1, R2 et R3 sont tels que définis dans la formule (I)
Les composés de formule (IV) peuvent être préparés selon des méthodes connues de l'homme du métier.

Par exemple, les composés de formule (IV), dans laquelle R2 et R3 représentent un atome d'hydrogène peuvent être préparés par réaction d'un dérivé de 2-aminophénol avec du chlorure de chloroacétyle dans des conditions de transfert de phase (X.

Huang et coll., Synthesis (1984), 10, 851), suivie d'une réaction de réduction au moyen d'hydrure de lithium et d'aluminium ou d'un complexe de borane, généralement dans un solvant éthéré tel que le tétrahydrofurane ou l'éther diéthylique.

De même, les composés de formule (IV), dans laquelle R2 et/ou
R3 représentent un groupe C14 alkyle, phényle ou benzyle peuvent être directement préparés par réaction d'un dérivé 2nitrophénol avec respectivement de la chloracétone ou du 2chloro ou 2-bromoacétophénone en présence de nickel de Raney, dans de l'éthanol (Melloni et coll. J. Het. Chem. (1983), 20, 259)
Les composés de formule (I), dans laquelle R2 et/ou R3 représentent un groupe C1.4 alkyle, un phényle ou un benzyle, peuvent être obtenus sous forme d'énantiomères ou de diastéréoisomères en réalisant un dédoublement à l'aide de sels chiraux des composés de formule (IV), (XIII) ou (I).

Selon une méthode alternative, les composés de formule (I) dans laquelle X est un groupe méthylène sont préparés à partir de composés de formule (XIII), dans laquelle Ri, R2 et
R3 sont tels que définis dans la formule (I), selon les procédés décrits dans les schémas 4 et 5.

Ainsi les composés de formule (I), dans laquelle X est un groupe méthylène, n est égal à 2 ou 3, et A représente un groupe de formule (B) sont préparés suivant le procédé général décrit dans le schéma 4.

Schéma 4

Selon le schéma 4, les composés de formule (XIV), dans laquelle Rl, R2 et R3 sont tels que définis dans la formule (I), sont préparés selon des méthodes d'amidification classiques, bien connues de l'homme du métier. L'amide de
Weinreb de formule (XIV) est obtenue à partir de l'acide carboxylique de formule (XIII), préalablement activé en chlorure d'acide de formule (II) et mis en réaction avec de l'hydrochlorure de N,O-diméthylhydroxylamine en présence de dichlorométhane et de triéthylamine comme décrit par S.

Weinreb et coll. dans Tet. Lett. (1981), 22, 3815.

L'amide obtenu de formule (XIV), réagit avec un organométallique, tel qu'un organomagnésien ou réactif de
Grignard par exemple de formule Br-MgCH2-(CH2)n-Cl, avec n=2 ou 3, pour donner des dérivés cétoniques de formule (XV), dans laquelle Rî, R2 et R3 sont tels que définis dans la formule (I). Les conditions utilisées comme l'emploi d'un solvant éthéré, tel le tétrahydrofurane, et une température comprise entre -10 et 250C sont décrites par S. Weinreb et coll. dans Tet. Lett. (1981) 22 3815.

Finalement les composés de formule (I), dans laquelle R1, R2,
R3 et R4 sont tels que définis dans la formule (I), sont obtenus par réaction entre les dérivés (XV) et une amine, telle une pipéridine, substituée ou non en position 4 dans un solvant comme le diméthylformamide chauffé à une température de 800C.

De même, les composés de formule (I), dans laquelle X est un groupe méthylène, n est égal à 1 et A représente un groupe de formule (C), sont préparés suivant le procédé général décrit dans le schéma 5.

<tb>

<SEP> Schéma <SEP> 5
<tb> <SEP> O <SEP> SchémaS <SEP> O
<tb> R1 <SEP> OCH3 <SEP> R
<tb> <SEP> I
<tb> <SEP> R2R3 <SEP> (XIV) <SEP> 2
<tb> <SEP> O <SEP> O
<tb> <SEP> 0
<tb> <SEP> OL, <SEP> 0 > S
<tb> <SEP> 0É
<tb> <SEP> R2R3 <SEP> (XVII) <SEP> R23 <SEP> (XVIII)
<tb> <SEP> o
<tb> <SEP> ~ <SEP> R1
<tb> <SEP> oÀN <SEP> NR4
<tb> <SEP> R <SEP> R3
<tb> <SEP> (I)
<tb>
Les composés de formule (XIV) sont transformés en dérivés méthylcétones de formule (XVI), dans laquelle Rl, R2 et R3 sont tels que définis dans la formule (I), par réaction avec un agent méthylant comme le bromure de méthylmagnésium selon le procédé décrit par S. Weinreb et coll. dans Tet. Lett.

(1981), 22, 3815.

Les composés de formule (XVI) sont ensuite traités dans les conditions de réaction de Knoevennagel, pour donner les composés de formule (XVII). Les hydrogénations successives des composés de formule (XVI I) et (XVIII) par des catalyseurs appropriés tel le rhodium à 5% sur charbon dans de l'éthanol et le palladium à 10% sur charbon s'effectuent dans de l'éthanol selon les procédés décrits dans la demande de brevet W09427965.

Les composés de formule (XVIII) peuvent réagir avec des halogénures d'alkyle pour préparer des composés de formule (I-C) où toutes les significations de R4 sont telles que définies dans la formule (I).

Les exemples suivants illustrent les procédés et techniques appropriés pour la préparation de cette invention, sans toutefois limiter ltétendue de la revendication. Les microanalyses et les spectres RMN et IR confirment les structures des composés.

PREPARATION DES COMPOSES DE FORMULE (I)
Exemple I : Chlorhydrate de 7,8-dihydropyrazolo[1,5,4- de][1,4]benzoxazine-2-carboxylate de (1-butylpipéridin-4yl)méthyle.

On mélange de 2,4 g (0,0117 mole) d'acide 7,8 dihydropyrazolo1,5,4-de] [l,4]benzoxazine-2-carboxylique, 3 ml de chlorure de thionyle et quelques gouttes de diméthylformamide dans 50 ml de 1,2-dichloroéthane sont chauffés à 80"C pendant 1 heure. On évapore le solvant sous pression réduite pour obtenir le chlorure d'acide que l'on utilisera tel quel par la suite.

A une solution de 3,22 g (0,0188 mole) de l-n-butyl-4pipéridine méthanol dans 80 ml de tétrahydrofurane à OOC sont additionnés 8 ml (0,02 mole) de n-butyl lithium à 2,5 M dans l'hexane . Le mélange est agité pendant 1 heure 30 min en laissant revenir à température ambiante. On refroidit le mélange et on ajoute en 30 min une solution du chlorure d'acide (0,0117 mole), obtenu précédemment, dans 30 ml de 1,2-dichloroéthane. On agite à température ambiante pendant 18 heures.

Le milieu réactionnel est versé sur de l'eau glacée et on extrait le produit par du dichlorométhane, on lave la phase organique avec de l'eau, on la sèche et on évapore le solvant.

On purifie le produit par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de chloroforme et de méthanol (97:3), on obtient 2,12 g de produit sous forme de base libre.

En ajoutant au produit sous forme de base une solution d'éther chlorhydrique dans un mélange d'éther et de méthanol, on obtient le chlorhydrate.

Point de fusion = 1940C (décomposition).

Exemple 2 : Ethanedioate de N-[(l-butylpipéridin-4 yl)méthyl)]-7,8-dihydropyrazolo[l,5,4-de] tl,4]benzoxazine-2- carboxamide.

Un mélange de 0,23 g (0,00112 mole) d'acide 7,8 dihydropyrazolo[l,5,4-de][1,4]benzoxazine-2-carboxylique, 1,2 ml de chlorure de thionyle et quelques gouttes de diméthylformamide dans 30 ml de chloroforme sont portés au reflux pendant 2 heures. On évapore le solvant sous pression réduite pour obtenir le chlorure d'acide que l'on utilisera tel quel par la suite.

A une solution à OOC de 0,57 g (0,00336 mole) de (1butylpipéridin-4-yl)méthylamine et 0,41 g (0,003 mole) de bicarbonate de potassium dans 30 ml de chloroforme est additionnée goutte à goutte une solution du chlorure d'acide (0,00112 mole), obtenu précédemment, dans 10 ml de chloroforme. Le mélange est agité à température ambiante pendant 18 heures.

On extrait le produit par du chloroforme, on lave la phase organique avec de l'eau, on la sèche et on évapore le solvant.

On purifie le produit par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de chloroforme, de méthanol et d'ammoniaque (85:15:1), on obtient 0,3 g de produit sous forme de base libre.

En ajoutant au produit sous forme de base, trois équivalents d'acide oxalique dans un mélange de méthanol et d'éther, on obtient l'éthanedioate.

Point de fusion = 162-1630C.

Exemple 3 : Ethanedioate de N- (3-pipéridin-l-ylpropyl) -7,8- dihydropyrazolo [1,5, 4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxamide.

A une solution à OOC de 0,4 g (0,0029 mole) de 3-pipéridin-l- ylpropylamine et 0,4 g (0,003 mole) de bicarbonate de potassium dans 30 ml de chloroforme est additionnée goutte à goutte une solution du chlorure d'acide (0,00146 mole), obtenu selon l'exemple 2, dans 20 ml de chloroforme. Le mélange est agité à température ambiante pendant 18 heures.

On purifie le produit par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de chloroforme, de méthanol et d'ammoniaque (85:15:1), on obtient 0,39 g de produit sous forme de base libre.

Point de fusion = 2000C.

Exemple 4 : Ethanedioate de 7,8-dihydropyrazolo[1,5,4- de][l,4]benzoxazine-2-carboxylate de 3-pipéridin-l-ylpropyle
A une solution de 0,34 g (0,0024 mole) de 3-pipéridine-1-yl propanol dans 30 ml de tétrahydrofurane sont additionnés 0,1 g (0,0024 mole) d'hydrure de sodium à 60%. Le mélange est agité pendant 1 heure à température ambiante puis refroidi.

On ajoute goutte à goutte une solution d chlorure d'acide (0,0016 mole), obtenu selon l'exemple 1, dans 10 ml de 1,2dichloroéthane. On agite à température ambiante pendant 18 heures.

On purifie le produit par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de chloroforme et de méthanol (96:4), on obtient 0,36 g de produit sous forme de base libre.

En ajoutant au produit sous forme de base, trois équivalents d'acide oxalique dans de 1'éthanol, on obtient l'éthanedioate.

Point de fusion = 1900C.

Exemple 5 : Ethanedioate du 4-fluoro-8-méthyl-7,8 dihydropyrazolo[l,5,4-de][1,4]benzoxazine-2-carboxylate de (l-butylpipéridin-4-yl)méthyle.

A partir de 0,250 g (0,0011 mole) d'acide 4-fluoro-8-méthyl 7,8-dihydropyrazolo[1,5,4-de][1,4]benzoxazine-2-carboxylique et de 0,3 g (0,00175 mole) de l-n-butyl-4-pipéridine méthanol, traités dans les conditions de l'exemple 1, et après purification par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane et de méthanol (95:5), on obtient 0,23 g de produit sous forme de base libre.

En ajoutant au produit sous forme de base trois équivalents d'acide oxalique dans un mélange d'éther et de méthanol, on obtient l'éthanedioate.

Point de fusion = 184"C.

Exemple 6 : Chlorhydrate de l-(7,8-dihydropyrazolo[1,5,4- ] [l,4]benzoxazine-2-yl) -5-pipéridin-l-ylpentan-l-one.

6.1:[N-Méthoxy-N-méthyl]-7,8-dihydropyrazolo[1,5,4- de] [î, 4]benzoxazine-2-carboxamide.

Un mélange de 15 g (0,0735 mole) d'acide 7,8 dihydropyrazolo[l,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique, 12,8 ml (00,147 mole) de chlorure d'oxalyle et quelques gouttes de diméthylformamide dans 300 ml de chloroforme sont agités à température ambiante pendant 1 heure. On évapore le solvant sous pression réduite pour obtenir le chlorure d'acide que l'on reprend dans 300 ml de dichlorométhane à OOC. On additionne 7,89 g (0,081 mole) de O,Ndiméthylhydroxylamine chlorhydrate, puis, goutte à goutte, 22,5 ml (0,162 mole) de triéthylamine. Le mélange est agité pendant 1 heure 30 min en laissant revenir à température ambiante. On agite à température ambiante pendant 1 heures.

On filtre le précipité et on évapore l'éluant. On purifie le produit par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange d'éther de pétrole et d'acétate d'éthyle (1:2), on obtient 13,9 g de produit sous forme de base libre.

Point de fusion = 680C.

Est obtenu de manière analogue [N-Métoxy-N-méthyl]-4-fluoro-7,8-dihydropyrazolo[1,5,4- ] [1, 4jbenzoxazine-2-carboxainide ; point de fusion = 1370C.

6.2 : 5-Chloro-1-(7,8-dihydropyrazolo[1,5,4- de] [1,4]benzoxazine-2-yl)pentan-l-one.

Dans un tricol de 50 ml, avec agitation magnétique et sous azote, on ajoute 2,8 ml (0,0243 mole) de 1,4bromochlorobutane à un mélange de 0,59 g (0,0243 mole) de magnésium en copeau dans 10 ml de tétrahydrofurane, sans dépasser 300C. On agite le mélange pendant 30 min à température ambiante, puis on le transfère précautionneusement à l'aide d'une canule dans un tricol de 250 ml contenant une solution refroidie à -100C de 2 g (0,0081 mole) de [N-Méthoxy-N-méthyl]-7,8 dihydropyrazolo [1,5, 4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxamide dans 80 ml de tétrahydrofurane. On agite pendant 1 heure en laissant revenir à température ambiante. On hydrolyse le milieu réactionnel refroidit à 0 C en additionnant gouttes à gouttes de l'acide chlorhydrique 1 N et on extrait le produit avec du dichlorométhane. On lave la phase organique avec de l'eau et une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium, on la sèche et on évapore le solvant.

On obtient 2,13 g de produit que l'on purifie par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange d'éther de pétrole et d'acétate d'éthyle (4:1), on obtient 1,29 g de produit.

6.3 : Chlorhydrate de 1- (7,8-dihydropyrazolo[1,5,4- de] [1,4]benzoxazine-2-yl)-5-pipéridin-1-ylpentan-1-one.

On chauffe, à 80 C, 1 g (0,0036 mole) de 5-chloro-1-(7,8dihydropyrazolo[1,5,4-de][1,4]benzoxazine-2-yl)pentan-1-one , 2,76 g (0,032 mole) de pipéridine et 0,027 g (0,00018 mole) d'iodure de sodium dans 15 ml de diméthylformamide. Après deux heures d'agitation, on additionne de l'eau et on extrait plusieurs fois avec de l'éther. Le phase organique est lavée avec de l'eau et une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium, puis séchée et évaporée.

On obtient 1,16 g de produit que l'on purifie par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométane et de méthanol (95:5). On obtient 0,960 g de produit.

Point de fusion = 890C.

En ajoutant au produit sous forme de base une solution d'isopropanol chlorhydrique 1N dans un mélange de dichlorométhane et de méthanol, on obtient le chlorhydrate.

Point de fusion = 2640C (décomposition).

Est obtenu de manière analogue
Chlorhydrate de 1- (4-fluoro-7,8-dihydropyrazolo[l,5,4- de] [1,4]benzoxazine-2-yl)-5-pipéridin-1-ylpentan-1-one ; point de fusion = 110 C.

Exemple 7 : Dichlorhydrate de 3-(l-butylpipéridin-4-yl)-1- (7,8-dihydropyrazo1o[l,5,4-de] [l,4]benzoxazine-2-yl)propan-l one.

7.1:1-(7,8-Dihydropyrazolo[1,5,4-de][1,4]benzoxazine-2- yl)éthanone.

A une solution de 8 g (0,00323 mole) de [N-Méthoxy-N-méthyl] 7,8-dihydropyrazolo[1,5,4-de][1,4]benzoxazine-2-carboxamide, obtenu dans l'exemple 6.1, dans 300 ml de tétrahydrofurane refroidit à -10 C, sont ajoutés 97 ml (0,097 mole) de méthyl bromure de magnésium 1 N dans du tétrahydrofurane. On laisse revenir à température ambiante en agitant pendant 1 heure, puis on refroidi à 0 C et on hydrolyse avec précaution le milieu réactionnel avec 80 ml d'acide chlorhydrique 1 N. On extrait le produit avec de l'éther, on lave la phase organique avec de l'eau, on la sèche et on évapore le solvant. On obtient 6,5 g de produit.

7.2:l-(7,8-Dihydropyrazolo[l,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-yl)-3- pyridin-4-yl-prop-2-èn-1-one.

On dissout 1,68 g (0,030 mole) de potasse dans 10 ml d'éthanol. On additionne une solution de 6,06 g (0,030 mole) de 1-(7,8-dihydropyrazolo[1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2- yl)éthanone dans 20 ml d'éthanol. On agite 5 min, puis on additionne goutte à goutte 3,15 g (0,033 mole) de pyridine-4 carboxaldéhyde. On laisse agiter 4 heures à température ambiante. On concentre le milieu sous pression réduite, sans chauffer. On filtre le précipité formé et on lave avec de l'éthanol glacé. On purifie le produit par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométane et de méthanol (9:1). On obtient 3,5 g de produit.

7.3: Chlorhydrate de 1- (7,8-Dihydropyrazolo[l,5,4- de] [l,4]benzoxazine-2-yl) -3-pyridin-4-ylpropan-l-one.

On introduit dans une fiole de Parr, une suspension de 2,6 g (0,0089 mole) de 1-(7,8-Dihydropyrazolo[1,5,4 de] [1,4]benzoxazine-2-yl) -3-pyridin-4-ylprop-2-èn-l-one dans 300 ml d'éthanol et 0,4 g de rhodium à 5% sur charbon. On hydrogène pendant 2 heures à 500C sous une pression de 50 psi (3,4 MPa). On filtre ensuite le catalyseur, on le lave avec de l'éthanol chaud, on récupère le filtrat et on évapore le solvant à sec.

On obtient 2,8 g de produit que l'on purifie par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométane et de méthanol (95:5). On obtient 2,23 g de produit que l'on solubilise dans 150 ml d'éthanol à chaud et on ajoute 10 ml d'un mélange d'isopropanol chlorhydrique 1 N et d'éthanol (4:1). On filtre le précipité pour obtenir 2,5 g du composé sous forme de chlorhydrate.

7.4: Chlorhydrate de 1-(7,8-Dihydropyrazolo[1,5,4 de] [l,4]benzoxazine-2-yl) -3-pipéridin-4-ylpropan-1-one.

On introduit dans une fiole de Parr, une suspension de 2,5 g (0,00759 mole) de chlorhydrate de 1-(7,8
Dihydropyrazolo[l,5,4-de] [l,4]benzoxazine-2-yl) -3-pyridin-4- ylpropan-l-one dans 1,2 litre d'éthanol et 1,25 g de palladium à 5% sur charbon. On hydrogène pendant 4 heures à 550C sous une pression de 55 psi (3,7 MPa). On filtre ensuite le catalyseur, on le lave avec de l'éthanol chaud, on récupère le filtrat et on évapore le solvant à sec. On obtient 2,35 g de produit sous forme de chlorhydrate.

Point de fusion = 255"C (décomposition).

7.5: Dichlorhydrate de 3-(1-butylpipéridin-4-yl) -1- (7,8- dihydropyrazolo[1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-yl)propan-l-one.

On ajoute 0,85 ml de méthylate de sodium 5,3 N à une solution de 1,5 g (0,00447 mole) de chlorhydrate de l-(7,8 dihydropyrazolo[1 5 4-de] [1,4]benzoxazine-2-yî) -3-pipéridin- 4-ylpropan-1-one dissout à chaud dans 100 ml de méthanol.

Après 1 heure d'agitation, on évapore le solvant sous pression réduite. On reprend le résidu dans du chloroforme, on le triture et on le filtre. On évapore le solvant pour obtenir 1,4 g de produit sous forme de base libre.

A une solution de 1- (7,8-dihydropyrazolo[1,5,4- de] [l,4]benzoxazine-2-yl) -3-pipéridin-4-ylpropan-l-one et 1,55 ml (0,00894 mole) de N,N-diisopropyléthylamine dans 25 ml d'acétonitrile, on ajoute 0,58 ml (0,00536 mole) de 1bromobutane et 4 ml de diméthylformamide. On chauffe le milieu réactionnel à 800C pendant 4 heures, puis on le refroidit et on évapore le solvant sous pression réduite. On obtient 1,43 g de produit que l'on purifie par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane et de méthanol (95:5). On obtient 0,82 g de produit sous forme de base libre.

En ajoutant au produit sous forme de base, une solution d'isopropanol chlorhydrique 1N et d'éthanol (1:5), on obtient le dichlorhydrate.

Point de fusion = 2220C (décomposition).

PREPARATION DES INTERMEDIAIRES DE FORMULE (XIII)
Exemple 8 : Acide 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylique.

8.1. (3,4-Dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) furan-2-yl méthanone
A une solution de 15 g (0,11 mole) de 3,4-dihydro-2H-1,4benzoxazine dans 200 ml de 1,2-dichloroéthane, maintenue à une température comprise entre 0 et 50C et sous azote, on additionne lentement, pendant 1 heure, une solution de 200 ml (0,2 mole) de trichlorure de bore (1 M dans l'heptane). Le mélange est porté au reflux pendant 1 h 30 min, puis est refroidi avant d'additionner, pendant 20 min, une solution de 20 ml (0,22 mole) de 2-furonitrile dans 20 ml de 1,2dichloroéthane. Le mélange réactionnel est porté au reflux pendant 3 heures puis laissé une nuit à température ambiante.

Afin d'hydrolyser l'intermédiaire imine formé, on refroidit le milieu réactionnel dans un bain d'eau glacée, on y additionne 500 ml d'acide chlorhydrique 3M, la température étant maintenue entre 5 et 80C, puis on le porte au reflux pendant 45 min.

On refroidit à nouveau le mélange et on l'alcalinise jusqu'à pH 11 par de la soude concentrée à 30. On extrait le produit avec du dichlorométhane, on lave la phase organique avec une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium, on la sèche et on évapore le solvant sous pression réduite.

On purifie le produit par chromatographie sur gel de silice en éluant par du dichlorométhane.

On récupère 11,7 g de produit, cristallisé dans l'hexane.

Point de f sodium et on évapore le solvant à sec.

On obtient 12,3 g de produit.

Point de fusion = 135"C.

8.3. 2-Furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine
A une solution de 12,3 g (0,0477 mole) de (4-nitroso-3,4 dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)furan-2-yl méthanone dans 110 ml d'acide acétique glacial et 500 ml de méthanol, on additionne par petites quantités 12,5 g (0,19 mole) de zinc en poudre. L'addition dure 20 min et la température du milieu réactionnel monte jusqu'à 25"C. On laisse revenir à température ambiante, on filtre le zinc et on concentre sous pression réduite le filtrat. L'acide acétique restant est éliminé par évaporation azéotropique à l'aide de toluène. On extrait le produit avec 300 ml d'acétate d'éthyle et on lave la phase organique respectivement avec 170 ml d'acide chlorhydrique 1N, 170 ml d'hydrogénocarbonate de sodium à 5%, deux fois avec 170 ml de soude 2N et à l'eau. On sèche la phase organique et on évapore le solvant sous pression réduite. On purifie le produit par chromatographie sur gel de silice en éluant par un mélange cyclohexane : acétate d'éthyle (3:1).

On obtient 8,7 g de produit.

Point de fusion = 1150C.

Sont obtenus de manière analogue -4-Fluoro-2-furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine ;
Point de fusion = 1220C -4-Méthyl-2-furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine ;
Point de fusion = 72"C.

8.4. Acide 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2- carboxylique.

A une solution, refroidie à -50C, de 4 g (0,0177 mole) de 2 furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-del [1,4] benzoxazine et 2,44 g (0,016 mole) de carbonate de potassium dans 50 ml d'acétonitrile, on additionne par petites quantités 16 g (0,10 mole) de permanganate de potassium ; la température du milieu réactionnel ne doit pas dépasser 300C. On laisse sous agitation à 150C pendant 1 heure, puis on ajoute 16 ml d'acide formique en 1 heure. Puis 12 ml d'hydrogénosulfate de sodium sont ajoutés et 8 ml d'acide formique pour atteindre un pH-4. Le précipité est filtré puis lavé avec de l'acétonitrile. Le filtrat est concentré sous pression réduite, repris dans de l'eau et acidifié avec de l'acide chlorhydrique concentré jusqu'à pH = 1. Le solide est ensuite filtré, lavé abondamment à l'eau et séché. On obtient 1,3 g de produit.

Point de fusion = 2400C.

Sont obtenus de manière analogue -Acide 4-fluoro-7, 8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1, 4]benzoxazine-2-carboxylique ;
Point de fusion = 2650C ; -Acide 4-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1, 4]benzoxazine-2-carboxylique ;
Point de fusion = 22O0C.

Exemple 9 : Acide 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique.

9.1. 1-(3,4-Dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)éthanone.

A une solution de 7 g (0,0518 mole) de 3,4-dihydro-2H-1,4benzoxazine dans 75 ml de 1,2-dichloroéthane, maintenue à une température comprise entre 0 et 50C et sous azote, on additionne lentement, pendant 1 heure, une solution de 100 ml (0,1 mole) de trichlorure de bore (1 M dans l'heptane). Le mélange est porté au reflux pendant 2 heures. Il est refroidi et on additionne en 20 min une solution de 5,36 ml (0,102 mole) d'acétonitrile dans 15 ml de 1,2-dichloroéthane.

Le mélange réactionnel est porté au reflux pendant 3 heures puis laissé une nuit à température ambiante. Afin d'hydrolyser l'intermédiaire imine formé, on refroidit le milieu réactionnel dans un bain d'eau glacée et on additionne 500 ml d'acide chlorhydrique 3 M, la température étant maintenue entre 5 et 80C, puis on le porte au reflux pendant 45 min.

On refroidit à nouveau le mélange et on l'alcalinise jusqu'à pH 11 par de la soude concentrée à 30%. On extrait le produit avec du dichlorométhane, on lave la phase organique avec une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium, on la sèche et on évapore le solvant sous pression réduite.

On récupère 1,6 g de produit sous forme d'huile.

Point d'ébullition = 700C (p=0,6 mm Hg; 4,13 kPa).

9.2. l-(4-Nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5- yl)éthanone.

A une solution, refroidie à OOC, de 4,75 g (0,0268 mole) de (3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)éthanone dans 70 ml de dichlorométhane, sont rapidement additionnés 2,39 g (0,034 mole) de sodium nitrite dissous dans 30 ml d'eau. On additionne lentement, pendant 1 heure, en maintenant la température entre 0 et 50C, une solution de 2,15 g d'acide sulfurique concentré dans 30 ml d'eau. On laisse revenir à température ambiante et on agite pendant 1 heure.

On extrait le produit avec du dichlorométhane, on lave la phase organique avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de sodium et on évapore le solvant à sec.

On obtient 5,5 g de produit sous forme d'huile.

Est obtenu de manière analogue -7-Fluoro-8-méthyl-l- (4 -ni troso-3,4-dihydro-2H-l,4- benzoxazin - 5 -yl ) é thanone
Point de fusion = 101 C.

9.3. 2-(2-Phényléthényl)-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine.

On dissout 1 g (0,0268 mole) de soude dans 5 ml d'eau. Une solution glacée de 5,5 g (0,0268 mole) de 1-(4-nitroso-3,4dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)éthanone, 2,84 g (0,0268 mole) de benzaldéhyde, fraîchement distillé, et 80 ml d'éthanol absolu est additionnée goutte à goutte, en 20 min, à 0-50C.

Le mélange est agité à 0-50C pendant 2 heures, 50 ml de chlorure de méthylène sont alors additionnés et le mélange est agité pendant une nuit à température ambiante. Après addition de 200 ml d'eau, la phase organique recueillie est séchée et le solvant est distillé sous pression réduite.

Le produit obtenu, le 1-(4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4- benzoxazin-5-yl) -3-phénylpro-2-èn-1-one, est dissout dans un mélange de 70 ml de méthanol et 15 ml d'acide acétique. On additionne avec précaution 6 g (0,09 mole) de zinc en poudre à une température comprise entre 0 et -50C. Le milieu réactionnel est agité pendant 1 h 30 min à 0-50C. On additionne 200 ml de méthanol, on filtre sur célite et le filtrat est évaporé sous pression réduite. On extrait le produit avec du dichlorométhane et on lave successivement avec de l'acide chlorhydrique 1N, de la soude 2N et de l'eau.

La phase organique est séchée et évaporée sous pression réduite. Le résidu est purifié sur gel de silice en éluant avec un mélange dichlorométhane : méthanol (99,8:0,2).

On obtient 2,7 g de produit sous forme d'huile.

Est obtenu de manière analogue -4-Fluoro-8-méthyl-2-(2-phényléthényl)-7,8-dihydropyrazolo [1, 5, 4 -de] [1, 4]benzoxazine [1, 4]benzoxazine ;
Point de fusion = 980C; 9.4. 7,8-Dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2- carboxaldéhyde.

Ce composé est obtenu selon deux procédés
Procédé A
A une solution de 2,7 g (0,0103 mole) de 2-(2-phényléthényl)7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine dans 100 ml de dichlorométhane, refroidie à -600C, on fait barboter, pendant heure 15 min, un flux de 2,06 g d'ozone. On laisse lentement remonter la température à -500C, on fait barboter un courant d'azote et on additionne une solution de 4,32 ml (0,031 mole) de triéthylamine dans 50 ml de dichlorométhane.

On agite pendant 18 heures en laissant revenir à température ambiante et on porte au reflux du solvant pendant 3 heures.

On purifie le produit par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant avec du dichlorométhane.

On obtient 0,5 g de produit.

Point de fusion = 1450C.

Est obtenu de manière analogue -4-Fluoro-S-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1, 4]benzoxazine-2-carboxaldéhyde
Point de fusion = 1470C.

Procédé B
On dissout 5 g (0,019 mole) de 2-(2-phényléthényl)-7,8dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine dans 100 ml d'éther et 100 ml d'eau, puis 0,1 g (0,0004 mole) de tétroxide d'osmium sont additionnés et le mélange est agité pendant 15 min.

On additionne par petites quantités, à température ambiante, 7,3 g (0,034 mole) de périodate de sodium et on agite le mélange pendant 2 heures. De nouveau, 0,1 g de tétroxide d'osmium est additionné, puis on additionne 3,6 g (0,0168 mole) de périodate de sodium par petites portions et on agite pendant 2 heures. Le mélange est alors lavé avec de l'eau. La phase éthérée est filtrée, séchée et évaporée sous pression réduite. Le résidu est chromatographié sur colonne de gel de silice en éluant par du dichlorométhane.

On obtient 1,75 g de produit.

Sont obtenus de manière analogue -4-Fluoro-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2 carboxaldéhyde
Point de fusion = 1700C.

- 3-Chloro-7, 8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2- carboxaldéhyde
Point de fusion = 262"C.

9.5. Acide 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2carboxylique.

Une solution de 0,64 g (0,00163 mole) de nitrate d'argent dans 1 ml d'eau et une solution de 0,5 g de potasse dans 10 ml d'eau sont successivement additionnées à température ambiante à une solution de 0,3 g (0,00163 mole) de 7,8dihydropyrazolo [1,5, 4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxaldéhyde dans 10 ml d'éthanol. Le mélange est agité pendant 22 heures à température ambiante, filtré sur célite et lavé à l'eau. Le filtrat est repris par du dichlorométhane, la phase aqueuse est séparée et acidifiée à pH 4 par de l'acide acétique. Le produit désiré est extrait du mélange acide par du dichlorométhane. La phase organique est recueillie, séchée et évaporée sous pression réduite.

On obtient 0,28 g de produit.

Point de fusion = 2380C.

Sont obtenus de manière analogue -Acide 4-fluoro-7, 8-dihydropyrazolo f1,5, 4-de] [1, 4]benzoxazine-2-carboxylique ;
Point de fusion = 265"C ; -Acide 4-fluoro-8-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylique ;
Point de fusion = 2420C ; -Acide 3-chloro-7,8-dihydropyrazolo [1,5, 4-de] [I, 4]benzoxazine-2-carboxyîique ;
Point de fusion = 186-1870C .

Le tableau qui suit illustre les structures chimiques et les propriétés physiques de quelques composés de l'invention.

Tableau

<tb> N <SEP> R1 <SEP> R2 <SEP> R3 <SEP> R4 <SEP> A <SEP> n <SEP> X <SEP> F <SEP> (C) <SEP> Sel
<tb> 1 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> butyle <SEP> C <SEP> 1 <SEP> NH <SEP> 162-3 <SEP> ox.
<tb>

2 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> butyle <SEP> C <SEP> 1 <SEP> NCH3 <SEP> 135 <SEP> 1,5
<tb> <SEP> ox.
<tb>

3 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> butyle <SEP> C <SEP> 1 <SEP> O <SEP> 194 <SEP> (d) <SEP> HCl
<tb> 4 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> C <SEP> 1 <SEP> NH <SEP> 214 <SEP> -5 <SEP> ox <SEP> . <SEP>
<tb>

5 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> benzyle <SEP> C <SEP> 1 <SEP> NH <SEP> 164-5 <SEP> ox.
<tb>

6 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> (CH2)2-SO2NH2 <SEP> C <SEP> 1 <SEP> NH <SEP> 186-8 <SEP> - <SEP>
<tb> 7 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> (CH2)2-NHSO2CH3 <SEP> C <SEP> 1 <SEP> NH <SEP> 175-6 <SEP> - <SEP>
<tb> 8 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> (CH2)3-NHSO2CH3 <SEP> C <SEP> 1 <SEP> NH <SEP> 140-2 <SEP>
<tb> 9 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> CH(CH3)2 <SEP> C <SEP> 1 <SEP> NH <SEP> 114-6 <SEP> ox. <SEP>
<tb>

10 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> (CH2)2-phényle <SEP> C <SEP> 1 <SEP> NH <SEP> 117-9 <SEP> ox.
<tb>

11 <SEP> 4-F <SEP> H <SEP> H <SEP> butyle <SEP> C <SEP> 1 <SEP> NH <SEP> 232 <SEP> (d) <SEP> ox.
<tb>

12 <SEP> 4-F <SEP> H <SEP> H <SEP> butyle <SEP> C <SEP> 1 <SEP> O <SEP> 177 <SEP> ox.
<tb>

13 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> butyle <SEP> C <SEP> 1 <SEP> CH2 <SEP> 222 <SEP> (d) <SEP> 2HCl
<tb> 14 <SEP> 3-Cl <SEP> H <SEP> H <SEP> butyle <SEP> C <SEP> 1 <SEP> O <SEP> 187-8 <SEP> ox.
<tb>

15 <SEP> 4-F <SEP> 8-CH3 <SEP> H <SEP> butyle <SEP> C <SEP> 1 <SEP> O <SEP> 184 <SEP> ox.
<tb>

16 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> benzyle <SEP> C <SEP> 1 <SEP> O <SEP> 171-2 <SEP> ox.
<tb>

<tb>

N <SEP> R, <SEP> R2 <SEP> R3 <SEP> R4 <SEP> A <SEP> n <SEP> X <SEP> F <SEP> (C) <SEP> Sel
<tb> 17 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> butyle <SEP> C <SEP> 0 <SEP> O <SEP> 220 <SEP> HC1 <SEP>
<tb> 18 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> B <SEP> 3 <SEP> NH <SEP> 200 <SEP> ox.
<tb>

19 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> B <SEP> 3 <SEP> CH2 <SEP> 264-6(d) <SEP> HC1 <SEP>
<tb> 20 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> B <SEP> 3 <SEP> O <SEP> 190 <SEP> ox.
<tb>

21 <SEP> 4-F <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> B <SEP> 3 <SEP> CH2 <SEP> 210 <SEP> HC1 <SEP>
<tb> 22 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> NH-Boc <SEP> B <SEP> 3 <SEP> CH2 <SEP> 146
<tb> 23 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> NHSO2CH3 <SEP> B <SEP> 3 <SEP> CH2 <SEP> 255(d) <SEP> HC1 <SEP>
<tb> 24 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> NH2 <SEP> B <SEP> 3 <SEP> CH2 <SEP> 200(d) <SEP> 2TFA
<tb> 25 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> C <SEP> 1 <SEP> CH2 <SEP> 255(d) <SEP> HC1 <SEP>
<tb> 26 <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> NHC <SEP> (O) <SEP> CH3 <SEP> B <SEP> 3 <SEP> CH2 <SEP> 245(d) <SEP> HC1 <SEP>
<tb> 27 <SEP> 4-Me <SEP> H <SEP> H <SEP> H <SEP> B <SEP> 3 <SEP> CH2 <SEP> 180 <SEP> ox.
<tb>

Dans le tableau, l'abréviation suivante "ox." représente un sel d'éthanedioate, "Boc" représente un groupe terbutyloxycarbonyl et HCl1 et "TFA" désignent respectivement un chlorhydrate et un trifluoroacétate . Dans la colonne "F0C", "d" désigne un point de fusion avec décomposition.

Les composés de formule (I) selon l'invention, ont fait l'objet d'essais pharmacologiques qui ont montré leur intérêt comme substances actives en thérapeutique.

Les composés de l'invention ont également été étudiés quant à leur affinité vis-à-vis des récepteurs 5-HT4 dans le striatum de cobaye, selon la méthode décrite par Grossman et coll., Br. J. Pharmacol. (1993), 109, 618-624.

On euthanasie des cobayes (Hartley, Charles River) de 300 à 400 g et on prélève leur cerveau. On excise les striata et on les congèle à -800C. Le jour de l'expérience, on décongèle le tissu à +40C dans 33 volumes de tampon Hépès-NaOH 50mM (pH = 7,4 à 20 C) et on l'homogénéise à l'aide d'un broyeur Poltron. On centrifuge l'homogénat pendant 10 min à 48000xg, on récupère le culot, on le remet en suspension et on le centrifuge de nouveau dans les mêmes conditions. On suspend le culot final dans du tampon Hépès-NaOH (30 mg de tissu frais/ml). Cette suspension membranaire est utilisée telle quelle.

On incube 100 pl de la suspension membranaire à OOC pendant 120 min, en présence de 0,1 nM de [3H]GR113808 (activité spécifique : 80-85 Ci/mmole), dans un volume final de 1 ml de tampon Hépès-NaOH (50 mM, pH = 7,4), en l'absence ou en présence du composé à tester. On arrête l'incubation par filtration sur filtres Whatman GF/B, préalablement traités avec de la polyéthylèneimine 0,1 %, on rince chaque tube par 4 ml de tampon à OOC et on filtre de nouveau. On mesure la radioactivité retenue sur les filtres, par scintigraphie liquide.

On détermine la liaison non spécifique en présence de sérotonine 30 pM.

La liaison spécifique représente 90% de la radioactivité totale récupérée sur le filtre.

Pour chaque concentration de composé étudié, on détermine le pourcentage d'inhibition de la liaison spécifique du [3H]GR113808 puis la concentration du composé testé qui inhibe 50% de la liaison spécifique (Ces).

Les Cîso des composés de l'invention se situent entre 0,7 nM et 2 ssM.

Enfin, les composés de l'invention ont été étudiés quant à leurs effets agonistes ou antagonistes vis-à-vis des récepteurs 5-HT4 dans l'oesophage de rat selon la méthode décrite par Baxter et coll., Naunyn Schmied Arch. Pharmacol.

(1991), 343, 439.

On utilise des rats mâles Sprague Dawley pesant de 300 à 450 g. On prélève rapidement un fragment d'environ 1,5 cm de la partie terminale de l'oesophage, on élimine la couche musculaire, on ouvre longitudinalement la tunique muqueuse musculaire interne, on la monte dans une cuve à organe isolé contenant une solution de Krebs-Henseleit à 320C oxygénée par un courant carbogène (95% 02 et 5% CO2), et on la connecte à un transducteur isométrique sous une tension basale de 0,5 g.

On induit une contraction du tissu par l'addition de 0,5 ssM de carbachol, on attend que la contraction se stabilise (15 min), puis on expose la préparation au composé à étudier, en concentration cumulées croissantes de 0,1 nM à 1 UM.

Les composés qui induisent une relaxation sont caractérisés comme des agonistes 5-HT4. Pour les composés qui n'induisent pas de relaxation, la préparation est exposée à la sérotonine en concentrations cumulées croissantes, de 0,1 nM jusqu'à une concentration induisant une relaxation maximale, et la courbe de relaxation due à la sérotonine, en présence du composé à étudier, est alors comparée à une courbe témoin établie en l'absence du dit composé. Si sa présence induit un déplacement de la courbe vers la droite, le composé étudié est caractérisé comme un antagoniste 5-HT4.

Les pkB des composés selon l'invention se situent entre 5 et 10.

Les résultats des tests biologiques montrent que les composés de formule (I) selon l'invention, sont des antagonistes des récepteurs sérotoninergiques 5-HT4.

Ils peuvent donc être utilisés pour la préparation de médicaments destinés à agir en tant qu'antagonistes des récepteurs sérotoninergiques 5-HT4.

Les composés de 1 invention de formule (I), sont particulièrement utiles pour le traitement et/ou la prévention des troubles fonctionnels intestinaux tels que la diarrhée, le reflux oesophagien, les troubles moteurs intestinaux, les troubles de la sécrétion intestinale, du côlon irritable, de la viscérosensibilité ; de la fibrose kystique du pancréas, du syndrome carcinoide ; de l'incontinence urinaire ou intestinale, du megacôlon.

Les composés de l'invention sont encore utiles en vue du traitement et/ou de la prévention des nausées et vomissements, par exemple consécutifs à un traitement antitumoral ou à l'administration d'un anesthésique ; du spasme oesophagien ; des troubles du système nerveux central tels que la schizophrénie, la manie, l'anxiété et la dépression ; des troubles de la cognition tels que la démence sénile ou présénile d'Alzheimer ; de la dyskinésie, des douleurs, migraines et maux de tête ; des troubles de la dépendance ou du sevrage de l'alcool ou de drogues ; des troubles de la fonction gastro-intestinale tels que dyspepsie, ulcère peptique, aigreurs d'estomac, flatulences des troubles du système cardio-vasculaire et des troubles respiratoires.

Les composés de l'invention, en association avec des excipients appropriés, peuvent être présentés sous toutes formes convenant à une administration orale ou parentérale, telles que comprimés, dragées, gélules, capsules, suspensions ou solutions buvables ou injectables, et dosées pour permettre une administration de 0,005 à 5 mg/kg, 1 à 4 fois par jour.

Claims

NHSO2CH3 ou -(CH2)m-SO2NH2, où m est égal à 2 ou 3, pour les composés de formule (B), R4 représente un atome d'hydrogène, un groupe amino ou -NHC (O) CH3, NHBoc, NHSO2CH3, sous forme d'énantiomère, de diastéréoisomère, y compris de mélange racémique ainsi que leurs sels d'addition à des acides pharmaceutiquement acceptables.

R4 représente pour les composés de formule (C) un atome d'hydrogène, un groupe C14 alkyle, linéaire ou ramifié, un groupe phényle ou benzyle, un groupe -(CH2)m-NH2, -(CH2)m-

dans lesquelles n est égal à 0, 1, 2 ou 3, et

A est un groupe de formule (B) ou (C)

X représente un atome d'oxygène, un groupe NH ou N-C1.4 alkyle, ou un groupe méthylène, et

R2 et R3, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un groupe C1.4 alkyle, linéaire ou ramifié, un phényle ou un benzyle,

R1 représente un atome d'hydrogène, un halogène tel que chlore, brome ou fluor, un groupe C1.4 alcoxy, un groupe méthyle, un groupe hydroxy ou un groupe amino,

dans laquelle

Revendications 1. Composé de formule générale (I)
2. Procédé de préparation du composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (II)

dans laquelle Rl, R2 et R3 sont tels que définis dans la revendication 1 et W représente un halogène, avec un composé

H-X-A dans laquelle X et A sont tels que définis dans la revendication 1.
3. Médicament caractérisé en ce qu'il est constitué par un composé selon la revendication 1.
4. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend un composé selon la revendication 1 et un ou plusieurs excipients.