FR2610214A1 - Procede et dispositif de filtration - Google Patents
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Abstract
LE DISPOSITIF DE FILTRATION COMPREND UN CONTENEUR 10 POUVANT CONTENIR UN ECHANTILLON A FILTRER ET UN TUBE ALLONGE AYANT UNE EXTREMITE SUPERIEURE OUVERTE ET UNE EXTREMITE INFERIEURE FERMEE; UN RECIPIENT DE FILTRATION 40 POUR RECEVOIR LE FILTRAT ET COMPRENANT UN TUBE ALLONGE POUVANT ETRE INSERE DANS LE CONTAINER, LE RECIPIENT AYANT UNE EXTREMITE SUPERIEURE OUVERTE ET UNE EXTREMITE INFERIEURE COUVERTE D'UN MOYEN FORMANT FILTRE 70, 75; ET UN MOYEN FORMANT CAPUCHON 80 POUR OBTURER L'ECHANTILLON DANS LE DISPOSITIF, COMPRENANT UN MOYEN POUR LIMITER LA POSITION DU RECIPIENT RELATIVEMENT AU CONTENEUR. L'INVENTION S'APPLIQUE NOTAMMENT A L'ISOLEMENT DES PROTEINES D'ECHANTILLONS LIQUIDES DE FLUIDES CORPORELS OU DE MILIEUX BIOLOGIQUES DE CROISSANCE.
Description
La présente invention se rapporte à des procédés et à un dispositif pour
filtrer un fluide et elle se rapporte plus particulièrement à l'utilisation de
la force centrifuge pour aider à cette filtration.
On sait bien que la filtration de fluides par des filtres microporeux et ultraporeux peut être effectuée sous l'influence de la force centrifuge. Par exemple il est souvent souhaitable d'isoler les protéines d'échantillons liquides de fluides corporels ou de milieux biologiques de croissance afin de concentrer les
protéines ou bien de produire un filtrat sans protéine.
Le brevet US No. 3 488 768 (P.N. Rigopulos, 1970) révèle plusieurs dispositifs et procédés pour accomplir cette filtration. Rigopulos enseigne également qu'en plus de prévoir la force trans-membrane, nécessaire pour déplacer le liquide à travers le filtre, une force centrifuge peut être utilisée pour maintenir la surface de travail du filtre exempte d'accumulation de protéine ou de sédiment
pouvant le boucher.
Le brevet US No. 3 960 727 (Hochstrasser) révèle des procédés et un dispositif pour séparer le sérum du sang de sang entier coagulé, de préférence avec l'aide de la force centrifuge. Un échantillon à filtrer est contenu dans un premier tube et un second tube, comprenant un filtre à son extrémité inférieure, y est placé. Le second tube s'enfonce lentement dans le premier tube et à travers l'échantillon, le filtrant tandis qu'il s'enfonce. L'enfoncement est avantageusement accéléré en soumettant l'ensemble à une force centrifuge en faisant
tourner cet ensemble dans une centrifugeuse.
On a trouvé que pendant la filtration de solutions assez diluées, comme des solutions diluées de protéines ou polypeptides, la forme du tube interne de filtration "flottant totalement" de Hochstrasser n'offrait pas une pression trans-membrane optimale pendant la centrifugation. D'autres problèmes se présentent dans d'autres dispositifs pendant la filtration de solutions très concentrées ou de solutions contenant un grand volume d'une matière particulaire, car le filtre peut se trouver rapidement bouché par le soluté ou les particules. Un dispositif et des procédés restent nécessaires pour accomplir la filtration, aidée par la
force centrifuge, des fluides.
La présente invention a pour objet des procédés de filtration ainsi qu'un dispositif utiles à la fois pour des solutions diluées et des échantillons chargés de particules. La présente invention a pour autre objet un tel dispositif qui, lorsqu'il est placé dans un porte-tube de centrifugeuse de 50 ml, est capable de filtrer un volume
de l'échantillon de 5 à 15 ml.
La présente invention a pour autre objet la retenue complète d'échantillons biologiquement dangereux
pendant une filtration aidée par la force centrifuge.
La présente invention satisfait à ces nécessités en prévoyant des procédés et un dispositif pour filtrer un fluide, comprenant à la fois des solutions relativement diluées, comme de protéines ou de polypeptides, et des échantillons relativement particulaires, comme un bouillon de fermentation contenant des cellules ou du sang entier. Le dispositif se compose d'un conteneur retenant un échantillon de liquide à filtrer, le conteneur ayant une extrémité ouverte et une extrémité fermée. Un récipient de filtration est installé dans le conteneur et comprend une chambre de réception du fluide filtré. Le récipient de filtration est de préférence cylindrique et a une extrémité supérieure ouverte et une ouverture à son extrémité inférieure qui est couverte par un filtre, de préférence une membrane d'ultrafiltration (ayant par exemple une taille des pores de moins d'environ 10 nm) portée par un support de filtre. Une haute pression trans-membrane et des taux élevés de filtration sont obtenus en immergeant, de force, l'extrémité du récipient de filtration qui porte le filtre dans l'échantillon pour créer une pression dynamique au-dessus du filtre. Par "immersion forcée", on indique l'immersion contre la flottaison naturelle du récipient de filtration. La position immergée du récipient de filtration doit être maintenue et cela est accompli, dans le mode de réalisation préféré, par la combinaison d'un capuchon annulaire de blocage et l'engagement d'une crête sur le récipient de filtration avec le bord interne du capuchon annulaire. Bien que la différence de pression créée par l'immersion forcée seule puisse ne pas être suffisante pour accomplir la filtration, cette différence de pression est fortement accrue lorsque, selon le procédé de l'invention, le dispositif est soumis à une force centrifuge. La force centrifuge amplifie fortement la différence de pression entre l'intérieur et l'extérieur du récipient de filtration pour forcer l'échantillon liquide à travers le filtre et dans le récipient de filtration. La force centrifuge empêche simultanément le c8té travail du filtre de se trouver bouché par un sédiment. Le liquide dans le récipient de filtration est connu comme "filtrat" tandis que la partie de l'échantillon qui reste en dehors du récipient de
filtration est connue comme "rétentat".
L'invention sera mieux comprise et d'autres buts, caractéristiques, détails et avantages de celle-ci
apparattront plus clairement au cours de la description
explicative qui va suivre faite en référence aux dessins schématiques annexés donnés uniquement à titre d'exemple illustrant un mode de réalisation de l'invention et dans lesquels:
26 1 0 2 1 4
- la figure 1 est une vue éclatée de la présente invention; - la figure 2 est une vue de la présente invention, avant centrifugation; - la figure 3A est une vue de la présente invention, suivant la centrifugation et la filtration d'un échantillon très concentré ou chargé de particules; - la figure 3B est une vue de la présente invention, suivant la centrifugation et la filtration d'un échantillon dilué; - la figure 4 est un graphique du volume du rétentat, sur l'axe des ordonnées, en fonction du temps de centrifugation sur l'axe des abscisses; - la figure 5 est un graphique du volume de l'ultrafiltrat, sur l'axe des ordonnées, en fonction du temps de centrifugation, sur l'axe des abscisses; et - la figure 6 est un diagramme du volume de l'ultra-filtrat sur l'axe des ordonnées en fonction du
temps de centrifugation sur l'axes des abscisses.
Un mode de réalisation préféré du présent dispositif de filtration est illustré à la figure 1. Le dispositif se compose d'un conteneur 10 pour retenir un échantillon de fluide à filtrer et dans ce mode de réalisation préféré, le conteneur 10 est un tube alongé ayant une extrémité inférieure obturée 20 et une extrémité supérieure ouverte 30. Un récipient de filtration 40, qui, dans ce mode de réalisation préféré est également un tube allongé, peut s'adapter à l'intérieur du conteneur 10. Le conteneur 10 et le récipient de filtration 40 sont de préférence construits en une matière plastique synthétique qui est inerte aux fluides qui devront être filtrés dans ce dispositif, comprenant des fluides corporels et des solvants organiques. Le dispositif est de préférence dimensionné pour s'adapter dans des rotors de centrifugeuse conçus pour accepter des tubes de centrifugeuse standard de ml. Comme on peut le voir sur la figure 1, le récipient préféré de filtration 40 se compose d'une portion de chambre 60 dont le diamètre n'est que légèrement plus petit que celui du conteneur 10. La portion de chambre 60 est connectée via une portion d'épaulement 65 d'un diamètre intermédiaire à une portion allongée et étroite 50 de col. L'extrémité inférieure ouverte 62 du récipient de filtration 40 porte un filtre qui, de préférence, comprend un support de filtre poreux et un élément de filtre 75. L'élément de filtre 75 peut être de toute taille souhaitée des pores et est choisi en gardant à l'esprit la taille du soluté ou de la particule à filtrer. Sur les figures, l'élément de filtre est représenté sous la forme d'un filtre à membrane, auquel cas le support 70 se compose de préférence d'une grille en plastique moulée ayant des gorges et une ou plusieurs gaines pour le passage du perméat. Le support et le filtre 75 sont fixés au récipient de filtration en sertissant la lèvre 63 à la base du récipient 40 et en repliant la lèvre sur le bord de l'élément de filtre et du support. Dans l'alternative, le support 70 et le filtre 75 peuvent être cimentés à la base du récipient 40. Le support 70 et l'élément de filtre 75 peuvent être remplacés par d'autres matériaux de filtration, comme des mousses à cellules ouvertes, dont une grande variété sont
bien connues.
Comme on peut le voir sur les figures, le mode de réalisation préféré du dispositif selon l'invention comprend un premier capuchon 80 qui est adapté à maintenir le récipient de filtration 40 immergé de force dans l'échantillon dans le conteneur 10 pendant tout le processus de filtration. Le premier capuchon 80 a une portion de base 85 qui est adaptée à engager la portion supérieure 30 du conteneur 10, cet engagement créant un Joint hermétique à l'air entre le premier capuchon 80 et le conteneur 10. La portion de base 85 est porteuse d'un certain nombre de dents 87 qui engagent des dents correspondantes 37 sur le conteneur 10 pour former entre eux un blocage du type "à baïonnette". Une portion de col 89 du premier capuchon 80 engage le récipient de filtration 40 via un aJustage à friction entre lui et la portion supérieure de diamètre réduit du col 50 du récipient de filtration, permettant au filtrat de se décanter sans fuite du rétentat. Le coin interne 84 du premier capuchon 80 est d'un plus petit diamètre que le récipient de filtration 40 à l'endroit de la crête 41 pour produire une immersion de force du récipient de filtration. Un second capuchon, désigné par le chiffre 90, est responsable de l'obturation du contenu du récipient de filtration 40 dans le dispositif. Comme on peut le voir sur les figures, le second capuchon 90 peut s'adapter très précisément sur la portion de col 81 du premier capuchon 80 de manière qu'un aJustage à friction
soit formé entre eux.
Pendant la filtration de l'échantillon fluide, l'échantillon passe du conteneur 10 à travers le filtre et le support 70 et dans la portion de chambre 60 du récipient de filtration 40. L'air occupant le récipient de filtration est déplacé par le volume du filtrat qui monte, et il passe vers la chambre 10 via un mince canal capillaire 100 qui est formé dans la surface externe du col 50. Le canal 100 est dimensionné de manière que le
rétentat ne le traverse pas pendant la décantation.
La figure 2 illustre un dispositif assemblé de filtration qui a été rempli d'environ 15 ml d'un fluide à filtrer. Comme on peut le voir, les portions d'épaulement et de col du récipient de filtration 40 forment un réservoir du fluide dans la portion supérieure du conteneur 10, bien qu'une partie de l'échantillon occupe l'espace en dessous du filtre 75 dans une portion de réservoir maintenant présente en dessous du récipient de filtration. Le récipient de filtration 40 a été immergé de force à l'intérieur du conteneur 10 pour créer une pression (h) au-dessus du filtre 75. Le dispositif est maintenant prêt à reposer dans un rotor de centrifugeuse pour une centrifugation à une vitesse et une force g
appropriées à l'échantillon particulier qui est filtré.
Lorsque la centrifugation commence, le récipient de filtration 40, sous la force de flottaison fortement accrue due à l'échantillon, tende de monter dans le conteneur. Le récipient 40 est maintenu immergé de force, parce que la crête 41 sur le col du récipient 40 contacte le bord interne 84 du capuchon 80 comme le montre la figure 2. La filtration d'échantillons chargés de particules, comme un bouillon de fermentation, est facilitée parce qu'un réservoir 110 de particules se crée en dessous de la membrane de filtration. La membrane se trouverait rapidement bouchée par le volume important des
particules filtrées si le réservoir n'était pas formé.
La figure 3A illustre le présent dispositif à la suite de la filtration d'un échantillon chargé de particules. Le récipient de filtration 40 contenant le liquide filtré (filtrat) repose sur un lit de particules filtrées contenues dans le réservoir 110 en dessous du filtre. Le filtrat est facile à décanter par enlèvement
du second capuchon 90 et déversement du liquide.
L'ajustage serré entre le premier capuchon 80, le conteneur 10 et le récipient de filtration 40 empêche le
rétentat de fuir pendant l'étape de décantation rapide.
La combinaison du conteneur 10 et des premier et second capuchons 80 et 90 forme une barrière hermétique à l'air et ainsi l'échantillon ne peut s'échapper sous la forme d'un aérosol. La figure 3B illustre le présent dispositif à la suite de la filtration d'un échantillon bien plus dilué. Sans lit de particules sur lequel reposer, le récipient de filtration 40 s'est enfoncé Jusqu'au fond du conteneur 10 tandis que le récipient s'est rempli du filtrat. Il reste environ 3 à 3,5 des 15 ml d'origine de l'échantillon sous la forme de rétentat, produisant ainsi une concentration d'environ cinq fois au premier tour. Le filtrat peut 6tre décanté et le dispositif remonté pour de plus amples centrifugation et filtration. Une seconde filtration produit un niveau final de concentration
pouvant atteindre 15 à 20 fois au total.
Exemples.
Les exemples qui suivent illustrent la filtration/concentration rapide et efficace que l'on peut obtenir avec la présente invention lorsque l'on filtre
une grande variété d'échantillons.
Exemple I: Solution diluée de protéine.
Quatre dispositifs selon la présente invention ("Centriprep (marque de fabrique) 10", "10" signifiant la coupure à un poids moléculaire de 10000 de la membrane de filtration du dispositif) ont été chargés de 5, 10 ou ml d'une solution à 1 mg/ml d'albumine de sérum bovin et on a centrifugé dans un rotor horizontal ou à angle
fixe (450) pendant diverses longueurs de temps à 3000xg.
Après chaque tour, les volumes du rétentat ont été déterminés par poids direct. Chaque point de donnée Jusqu'au premier équilibre (figure 4, premier tour) a été produit avec des dispositifs frais. Lorsque le premier équilibre a été atteint, le filtrat a été décanté et les unités ont été remontées et recentrifugées pendant des temps variables. Comme les courbes pour les deux rotors étaient très similaires, on a pris les moyennes des valeurs pour chaque point et on les a représentées graphiquement sous la forme d'une courbe par volume de départ (figure 4 o la ligne en trait plein indique le premier tour de centrifugation et la ligne en pointillé
le second tour de centrifugation).
Les données montrent qu'une solution diluée de protéine peut être concentrée 20 fois en 55 et 75 minutes selon le volume de départ. Pendant la première centrifugation, on peut obtenir une concentration d'environ 5 fois avant que les niveaux de fluide à l'intérieur et à l'extérieur du récipient de filtration ne viennent à l'équilibre et que la filtration ne s'arrête. Après décantation du filtrat, le dispositif est de nouveau mis en centrifugation jusqu'à ce que les niveaux interne et externe du fluide atteignent l'équilibre et qu'on obtienne un facteur final de concentration de 20 fois. Le volume final du rétentat est
de 0,5 à 0,7 ml.
Les données au tableau 1 ci-dessous montrent les temps de centrifugation à 3000 x g nécessaires pour obtenir un certain facteur de concentration aussi bien pour Centriprep que pour Centricon (marque déposée), autre concentrateur centrifuge de Amicon. Centricon est décrit dans le brevet US No. 4 632 761 qui est incorporé
ici à titre de référence.
TABLEAU 1
I)isposi ti. Vltmille I acLeur dle Temps Flux FlUX uniLnire Initial Co'lcelLraLit)lli (min) (mnil/mn) (ml/mn/cmn2) Cent Lriprep I() 15 5 45 0, 275 0,096 Cenl. r icuni 10 2 5 45 11,1)36 0,039 Centriprep 10 15 10 54 0, 233 0,082 Centricon I0 2 10I 93 il,019 0,021 Centl riprep 10 15 2(1 63 0, 222 0,078 Cent r i con 10 2 21 1107 0,017 0,019 Centriprep 10 donne une concentration de vingt fois en partant de 15 ml, en moins de 75 minutes. Le flux total était de 0,222 ml/mn avec un flux unitaire de 0,078 ml/mn/cm2 pour ce dispositif avec une surface de membrane de 2,84cm2. Dans le Centricon conventionnel, une concentration de 20 fois en partant de 2 ml a pris minutes. Là, le flux total était de 0,017 ml/mn et le flux unitaire était de 0,019 ml/mn/cm2. Centriprep 10, avec trois fois l'aire superficielle de la membrane de Centricon, donne treize fois le flux absolu et quatre fois le flux normalisé pendant une concentration de vingt
fois de la protéine diluée.
Exemple II. Solution de protéine concentrée.
quatre dispositifs Centriprep 30 (c'est-à-dire des dispositifs selon la présente invention ayant un filtre à membrane à coupure à un poids moléculaire de 30000) ont été chargés de 15 ml de sérum bovin entier et ont été centrifugés pendant diverses longueurs de temps
dans un rotor horizontal ou à angle fixe à 3000 x g.
Après chaque tour de centrifugation, l'ultrafiltrat a été décanté et pesé. On a de nouveau fait la moyenne des deux rotors, étant donné le bon accord, et cela est représenté graphiquement sous la forme d'une courbe (figure 5), o le volume de l'ultrafiltrat est donné en ordonnées et le
temps de centrifugation en abscisses.
Les données démontrent que, même avec des solutions concentrées et visqueuses de protéine (environ mg/ml), on peut produire plusieurs ml de filtrat sans
protéine en une seule centrifugation de 20 à 30 minutes.
Les taux de filtration sont élevés parce que le récipient de filtration peut flotter au-dessus de la couche dense
polarisante de la protéine au fond du tube conteneur.
En comparaison avec Centrifree (marque de fabrique, dispositif centrifuge de Amicon conçu pour produire un filtrat sans protéine à partir du sérum), Centriprep avait plus du double du flux unitaire (ml/mn/cm2) à tout facteur donné de concentration. Exemple III. Solution contenant une matière particulaire. On a fait tourner quatre dispositifs Centriprep avec 5, 10 et 15 ml de levure lysée (15% poids/volume) pendant des longueurs différentes de temps à 3000 x g dans un rotor horizontal. Des filtrats sans cellule ont été pesés après chaque tour et les données sont
représentées à la figure 6, o le volume de l'ultra-
filtrat est donné en abscisses et le temps de
centrifugation en ordonnées.
En limitant le volume de départ à 5 ml et ainsi en minimisant le volume des matières particulaires pouvant se tasser autour et boucher la membrane, le taux de filtration peut être maintenu pour donner un volume du filtrat sans cellule de plus de 1,0 ml dans un seul tour de 20 minutes. De nouveau, le taux de filtrat est optimisé parce que le récipient du filtrat peut flotter au-dessus de la couche tassée des cellules au fond du
tube conteneur.
Au contraire, avec Centricon 10, l'on ne peut obtenir que 0,12 ml du filtrat à partir de 2 ml de 15% de levure en 20 minutes. L'augmentation du temps de centrifugation n'augmente pas de manière significative le volume du filtrat (0,185 ml au bout de 60 minutes parce que, dans Centricon, l'écoulement est fortement réduit du fait de la couche des cellules qui s'amasse directement
sur la surface de la membrane.
Exemple IV. Récupération des protéines après concentration de l'échantillon
dans Centriprep.
On a chargé Centriprep 30 et Centriprep 10 de 15 ml d'albumine de sérum bovin à 1 mg/ml et de 15 ml de cytochrome C à 0,25 mg/ml, respectivement. Tous les dispositifs ont été centrifugés Jusqu'à leur premier point d'équilibre et le filtrat a été décanté. Les dispositifs ont alors été centrifugés à leur second point d'équilibre et le filtrat final a été décanté et combiné au premier. Les filtrats, les concentrats et la matière première ont été pesés et examinés à la recherche de la protéine, et les pourcentages de récupération ont été calculés. Les données qui suivent démontrent l'excellent
rendement des échantillons concentrés dans Centriprep.
Tableau 2.
Dispositif Récupération Récupération n du filtrat du rétentat Centriprep 30 2,9+2,1 93,6+2,8 20 Centriprep 10 2,3+2,8 95,8+3,7 40
Claims (25)
1. Procédé de filtration d'une composition caractérisé en ce qu'il consiste à: placer une composition à filtrer dans un conteneur; immerger, de force, un récipient de filtration pour recevoir le filtrat dans ladite composition dans ledit conteneur, ledit récipient de filtration comprenant une extrémité avec un moyen formant filtre; limiter la position du récipient de filtration relativement au conteneur pour produire un mouvement limité entre eux, tout en maintenant ledit récipient de filtration immergé de force; et soumettre ledit conteneur, ledit récipient de filtration et la composition à une force centrifuge pour
ainsi effectuer la filtration.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que pendant l'étape consistant à soumettre le conteneur, le récipient et la composition à la force centrifuge, ledit récipient de filtration se
remplit du filtrat et s'enfonce dans la composition.
3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le conteneur et le récipient de filtration sont chacun formés d'un cylindre allongé, ledit récipient ayant un diamètre plus petit que celui du conteneur.
4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'étape précitée de limitation consiste à placer un moyen formant capuchon en engagement
avec le conteneur et le récipient de filtration.
5. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que le récipient de filtration comprend une portion formant chambre contenant le moyen formant filtre, une portion de col d'un diamètre plus petit que le diamètre de la portion de chambre et une portion d'épaulement reliant lesdites portions de col et de chambre.
6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que la portion de col comprend un moyen capillaire pour permettre à l'air de s'écouler entre
ledit récipient de filtration et ledit conteneur.
7. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le moyen formant filtre comprend un filtre à membrane et le récipient de filtration comprend un moyen de fixation pour lui attacher ledit moyen
formant filtre.
8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que le moyen pour attacher comprend une
lèvre du récipient de filtration.
9. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que l'étape de limitation consiste à placer un moyen formant capuchon sur les extrémités supérieures adjacentes du conteneur et de la portion de
col du récipient de filtration.
10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que le moyen formant capuchon comprend des dents pouvant engager des dents correspondantes à
l'extrémité supérieure du conteneur.
11. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que le moyen formant capuchon comprend un premier organe et un second organe, le premier organe étant adapté à effectuer le Joint avec la portion supérieure du conteneur et comprenant une gorge adaptée à recevoir la portion de col du récipient de filtration, ledit second organe étant adapté à effectuer un Joint
avec ledit premier organe.
12. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il consiste de plus à décanter le
filtrat du récipient de filtration.
13. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce qu'il consiste de plus à enlever le second organe et à décanter un filtrat du récipient de filtration.
14. Dispositif de filtration caractérisé en ce qu'il comprend: un conteneur (10) contenant un échantillon à filtrer, comprenant un tube allongé ayant une extrémité supérieure ouverte et une extrémité inférieure fermée; un récipient de filtration (40) pour recevoir le filtrat et comprenant un tube allongé adapté à être inséré dans ledit conteneur, ledit récipient ayant une extrémité supérieure ouverte et une extrémité inférieure couverte par un moyen formant filtre; et un capuchon (80) pour sceller ledit échantillon dans ledit dispositif, ledit capuchon comprenant un moyen pour limiter la position dudit récipient relativement
audit conteneur.
15. Dispositif selon la revendication 14, caractérisé en ce que le récipient de filtration comprend une portion formant chambre (60) ayant un diamètre, une portion de col (50) ayant un diamètre plus petit que celui de la portion formant chambre et une portion d'épaulement (65) reliant la portion de chambre et la
portion de col et d'un diamètre intermédiaire.
16. Dispositif selon la revendication 15, caractérisé en ce que le moyen formant filtre précité comprend un support de filtre poreux (70) et une membrane de filtration (75), ledit support et ladite membrane étant fixés au récipient de filtration par un moyen de fixation.
17. Dispositif selon la revendication 16, caractérisé en ce que le moyen de fixation comprend une
partie de lèvre du récipient de filtration (40).
18. Dispositif selon la revendication 16, caractérisé en ce que la membrane de filtration (75)
comprend une membrane d'ultrafiltration.
19. Dispositif selon la revendication 15, caractérisé en ce que le moyen formant filtre comprend une membrane fixée au récipient de filtration par une lèvre inférieure sertie dudit récipient (40) de filtration.
20. Dispositif selon la revendication 15, caractérisé en ce que le moyen limitant la position du récipient de filtration comprend un bord interne du capuchon (80) pouvant engager le col (50) du récipient de filtration.
21. Dispositif selon la revendication 20, caractérisé en ce que la partie de col du récipient de filtration comprend une partie de crête (41) adapté à
engager le bord interne du capuchon.
22. Dispositif selon la revendication 14, caractérisé en ce que le capuchon comprend des dents (87) pour le fixer au conteneur par engagement de dents (37)
correspondantes sur le conteneur.
23. Dispositif selon la revendication 15, caractérisé en ce que le col (50) du récipient de filtration comprend un canal capillaire (100) pour permettre l'équilibrage de la pression dans le récipient
de filtration et le conteneur.
24. Dispositif selon la revendication 14, caractérisé en ce que le capuchon comprend un premier organe (80) adapté à effectuer un joint avec l'extrémité supérieure ouverte du conteneur et comprenant un canal adapté à recevoir une partie du col du récipient de filtration et un second organe (90) adapté à engager le premier organe tout en scellant l'extrémité supérieure
ouverte du récipient de filtration.
25. Dispositif selon la revendication 24, caractérisé en ce que le premier organe comprend des dents (87) adaptées à engager des dents correspondantes
(37) disposées à la partie supérieure du conteneur.
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