FI95440B - Menetelmä plasmaperäisen C3b-inaktivaattoriliuoksen valmistamiseksi, joka ei sisällä oleellisesti tekijä B-aktiivisuutta eikä infektoivan viruksen aktiivisuutta - Google Patents
Menetelmä plasmaperäisen C3b-inaktivaattoriliuoksen valmistamiseksi, joka ei sisällä oleellisesti tekijä B-aktiivisuutta eikä infektoivan viruksen aktiivisuutta Download PDFInfo
- Publication number
- FI95440B FI95440B FI912879A FI912879A FI95440B FI 95440 B FI95440 B FI 95440B FI 912879 A FI912879 A FI 912879A FI 912879 A FI912879 A FI 912879A FI 95440 B FI95440 B FI 95440B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- factor
- activity
- plasma
- inactivator
- hours
- Prior art date
Links
- 108090000056 Complement factor B Proteins 0.000 title claims abstract description 32
- 102000003712 Complement factor B Human genes 0.000 title claims abstract description 32
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title claims abstract description 18
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title claims abstract description 16
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 title claims abstract description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 24
- 108090000044 Complement Factor I Proteins 0.000 title claims description 12
- 102000003689 Complement Factor I Human genes 0.000 title claims 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 15
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims abstract description 14
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 10
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 claims description 8
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 claims description 2
- 230000000937 inactivator Effects 0.000 claims 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 34
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 8
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 206010016075 Factor I deficiency Diseases 0.000 abstract description 2
- 201000007182 congenital afibrinogenemia Diseases 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 28
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 11
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 11
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 11
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 8
- 238000000760 immunoelectrophoresis Methods 0.000 description 8
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 8
- 102100035431 Complement factor I Human genes 0.000 description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 5
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 5
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 4
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 4
- 102000004411 Antithrombin III Human genes 0.000 description 3
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 description 3
- 102000016574 Complement C3-C5 Convertases Human genes 0.000 description 3
- 108010067641 Complement C3-C5 Convertases Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 description 3
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 description 3
- 108010071289 Factor XIII Proteins 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 230000000951 immunodiffusion Effects 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 102000016550 Complement Factor H Human genes 0.000 description 2
- 108010053085 Complement Factor H Proteins 0.000 description 2
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 2
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 2
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 2
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229940105784 coagulation factor xiii Drugs 0.000 description 2
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 description 2
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 2
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710131943 40S ribosomal protein S3a Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 1
- 108010078015 Complement C3b Proteins 0.000 description 1
- 229920002271 DEAE-Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 1
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000006229 amino acid addition Effects 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical class OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 229940105774 coagulation factor ix Drugs 0.000 description 1
- 229940105778 coagulation factor viii Drugs 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 229940012444 factor xiii Drugs 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
5 x 95440
Menetelmä plasmaperäisen C3b-inaktivaattoriliuoksen valmistamiseksi, joka ei sisällä oleellisesti tekijä B-aktiivi-suutta eikä infektoivan viruksen aktiivisuutta
Keksintö koskee menetelmää plasmaperäisen C3b-inaktivaattoriliuoksen valmistamiseksi, joka ei sisällä oleellisesti tekijä B - aktiivisuutta eikä infektoivan viruksen aktiivisuutta.
10
Komplementtijärjestelmä on entsyymikaskadijärjestelmä, joka koostuu yli 20 plasmaproteiinista. Järjestelmä on tärkeä puolustuksessa mikrobiaalisia infektioita vastaan. Se aktivoituu osaksi antigeeni/vasta-aine-komplekseilla klassi-15 sen reitin kautta, osaksi vaihtoehtoista reittiä esimerkiksi bakteerimembraaneilla ja liukoisilla aineilla. Molemmissa tilanteissa aktivaatio johtaa joidenkin aktiivisten ent-syymikompleksien, C3-konvertaasien muodostumiseen, joilla on substraattina keskeinen komponentti C3. C3-proteiini 20 lohkeaa pieneksi fragmentiksi, C3a, ja suuremmaksi fragmentiksi, C3b. C3b muodostaa osan vaihtoehtoisen reitin C3-konvertaasista. Siten komplementtijärjestelmään sisältyy vaihtoehtoisen reitin amplifiointiperiaate. Vaihtoehtoisen reitin C3-konvertaasi sisältää myös tekijän Bb, joka on 25 hajoamistuote komplementtitekijästä, tekijästä B.
Järjestelmää säätelevät useat proteiinit, jotka inhiboivat aktivoituja entsyymikomplekseja. Tekijä I (C3b-inaktivaat-tori eli KAF) tällainen säätelijäproteiini, koska se hajot-30 taa C3b-fragmentin entsymaattisesti välituotefragmentiksi iC3b ja edelleen C3c:ksi ja C3d:ksi.
Tekijä I:n puute tuo mukanaan, ettei C3b voi hajota pienemmiksi lohkeamistuotteiksi. Tästä seuraa vaihtoehtoisen C3-35 konvertaasin jatkuva ja kontrolloimaton muodostuminen, josta seuraa vaihtoehtoisen reitin proteiinien väheneminen tai ehtyminen. Tähän liittyy vähäisempi resistenssi määrätyille infektiotyypeille. Siten tekijä I - puutepotilailla on kuvattu esimerkiksi lisääntynyttä aivokalvontulehduksen ja 2 95440 keuhkokuumeen esiintymistiheyttä, vertaa S.C. Ross st ai.. Medicine £2(5) (1984) 243.
Plasmasta puhdistetun tekijä I - valmisteen laskimonsisäi-5 sellä infuusiolla käsittely on kuvattu, vertaa J.B. Ziegler et ai.. J. Clin. Invest. 55 (1975) 668. Tämä käsittely on keksitty tehokkaaksi useimpien plasmaproteiinien konsent-raatioiden lähes normalisoinnin aikaansaamisessa tekijä I -puutepotilailta. Valmistetta ei ole kuitenkaan virusinak-10 tivoitu.
Samoin on hoito plasmainfuusioilla keksitty tehokkaaksi, vertaa: D.J. Barret s£ ai., J. Pediatri. 104(1) (1984) 76; V. Wahn et ai., Allergol. Immunopathol. 8(4) (1980) 422; 15 samoin kuin V. Wahn e£. ai, J. Clin. Immunol. 1(4) (1981) 228. Tällä käsittelyllä on kuitenkin joitain vakavia haittoja:
Tekijä I - puutepotilailla on veressä suuria C3-konver-20 taasimääriä. Siksi plasman kautta annettu C3 lohkeaa välit tömästi C3a:ksi ja C3b:ksi, kuten edellä kuvattiin. C3a, joka on anafylotoksiini, voi aiheuttaa anafylaktisia reaktioita plasmainfuusion yhteydessä, vertaa V. Wahn e£ ai..
J. Pediatr. 105(4) (1984) 673. Lisäksi tulokseksi muodos- 25 tuvalla C3b:lla on yhdistelmänä tekijä B:n kanssa samoin ’ plasman kanssa annettuna stimuloiva vaikutus vaihtoehtoi seen reittiin. Siten komplementtikomponenttien C3 ja tekijä B:n läsnäolo annetussa plasmassa heikentää vaihtoehtoisen reitin tekijä I - säätelyn tehokkuutta. Lopuksi, plasmain-30 fuusioilla ei voida poistaa viraalisen siirtymisen vaaraa.
Tekijä I- ja tekijä H -tasojen tilapäisiä alenemisia havaitaan potilaalla, joka kärsii systeemisestä punahukasta (S-LE). Kaneko (EP-patenttijulkaisu 0222611) osoitti, että 35 tekijä H:n ja/tai tekijä I:n anto hiirille, jotka kärsivät autoimmuunisairauksista, jotka muistuttavat ihmisen SLE:tä, nivelreumaa ja munuaiskerästulehdusta, oli tehokkaita parantamassa tai estämässä proteinuriaa, joka edustaa autoim- 3 95440 muunisairausten patologisia olosuhteita. Kaneko ei kuitenkaan esitä tekijä I - valmistetta virusinaktivaatiovaihee-seen tai spesifiseen tekijä B - poistumisvaiheeseen. Olennainen ongelma ihmisen verestä tai veriplasmasta tuotettu-5 jen valmisteiden tai jakeiden terapeuttisessa käytössä on, että veri tai veriplasma voi sisältää infektoivia viruksia. Esimerkkejä tällaisista infektoivista viruksista ovat hepatiitti B - virus, ei-A-, ei-B-hepatiittivirus ja ihmisen immuunikatovirus. Infektoivien virusten transmissio tunne-10 taan yleisesti ihmisen verestä tai veriplasmasta tuotettujen valmisteiden käytöstä. Esimerkkejä tällaisista valmisteista ovat koagulaatiotekijä VIII, koagulaatiotekijä IX, koagulaatiotekijä XIII, immunoglobuliini ja antitrombiini III.
15
Tunnetaan erilaisia menetelmiä infektoivien virusten poistamiseksi ihmisverestä tai -veriplasmasta valmistetuista terapeuttisista valmisteista tai näitä sisältävistä liuoksista. Tällainen tunnettu menetelmä käsittää terapeuttista 20 proteiinia sisältävien vesiliuosten kuumentamisen 10 tunnin ajan 60 °C:ssa, aikaansaaden täten varmuutta infektoivien virusten siirtymistä vastaan näitä plasmaproteiineja sisältäviä valmisteita käytettäessä. Denaturoitumisen tai muun vahingon aiheuttamisen estämiseksi terapeuttisesti aktiivi-25 selle proteiinille vesiliuoksessa on kuumennuskäsittelyn ‘ aikana kuitenkin välttämätöntä lisätä stabilointiaineita.
Siten ihmisalbumiini- tai -proteiinikonsentraattia sisältävien liuosten 10-tuntisessa 60 °C:ssa kuumennuksessa lisä-30 tään stabilointiaineiksi rasvahappojen tai aminohappojen suoloja, vertaa Gellis £t ai., J. Clin. Invest. 27 (1948) 239. Tämän menetelmän käyttö ihmisalbumiinin tai -prote-iinikonsentraatin käsittelyyn ei ole liittynyt menetelmän vuonna 1948 tapahtuneesta käyttöönotosta lähtien infek-35 toivien virusten siirtymistä näitä valmisteita käytettäessä. Tähän menetelmään ei liity lainkaan, tai vain merkityksettömiä terapeuttisen plasmaproteiini albumiinin menetyksiä.
95440 4
Plasminogeeniä sisältäviä liuoksia voidaan stabiloida 10 tunnin kuumennuskäsittelyn aikana 60 °C:ssa aminohappo ly-siiniä, vertaa Baumgarten et ai·, US-patenttijulkaisu 3227626 (1966). Patenttijulkaisun mukaan tämä menetelmä 5 tuhoaa hepatiittiviruksen läsnäolon.
Koagulaatiotekijää XIII sisältäviä liuoksia voidaan kuumentaa 10 tunnin ajan 60 °C:ssa aminohapon, monosakkaridin tai sokerialkoholin läsnä ollessa, vertaa Fukuhima, JP-patent-10 tijulkaisu Sho 51-134878 (1976). Tällä menetelmällä on kuvattu noin 50-% tekijä XIII-aktiivisuuden menetys.
Lisäksi liuoksia, jotka sisältävät proteinaasi-inhibiittori anti-trombiini III:a, voidaan stabiloida sitruunahapon suo-15 loilla ennen kuumentamista 10 tunnin ajan 60 °C:ssa, vertaa Holleman et ai., Throm. & haemo. 38. (1977) 201. Terapeuttisen antitrombiini III - proteiinin menetys on tässä menetelmässä suuruudeltaan noin 30 %.
20 Lopuksi, DE-hakemusjulkaisussa 2916711 (198C) kuvataan menetelmä tekijä Villin kuumennuskäsittely 10 tunnin ajan 60 °C:ssa alentaen samalla kontaminoivan fibrinogeenin pitoisuutta. Käytetty stabilointiaine on sakkaridi tai sokerial-koholi yhdistelmänä aminohapon suuren konsentraation kans-25 sa. Läsnä oleva aminohappo aiheuttaa tekijä VIII - liuoksen . ‘ fibrinogeenin saostumisen. Tässä menetelmässä, tekijä VIII- liuosta sekoitetaan esimerkiksi 50 paino/paino-% sakkaroosin ja 2 M glysiinin kanssa kuumennuskäsittelyn aikana.
30 Kirjallisuudessa ei ole kuvattu menetelmiä virusinakti- voidun tekijä I - valmisteen valmistamiseksi. Tämä keksintö aikaansaa kuitenkin menetelmä C3b-inaktivaattoriliuoksen valmistamiseksi, joka on olennaisen vapaa infektoivista viruksista ja tekijä B:stä ja joka on turvallinen infektoi-35 vien virusten siirtymistä vastaan, menetelmän käsittäessä C3b-inaktivaattoria sisältävän liuoksen, joka on peräisin plasmasta, alistamisen pastörointikäsittelylle kuumentamalla noin 55 - 65 °C:een 0,5 - 100 tunnin ajaksi, edullisesti
II
5 95440 noin 60 °C:ssa 4-24 tunnin ajan, ainakin yhden stabiloi-jan kanssa. Edullisemmin kuumakäsittelyä suoritetaan noin 60 °C:ssa 5-15 tunnin ajan.
5 Keksintö tekee mahdolliseksi valmistaa plasmaperäistä C3b-inaktivaattoriliuosta, joka suojataan käytännöllisesti aktiivisten virusten ja komplementtitekijän, tekijä B:n siirtymistä vastaan 1 vaiheessa.
10 Jos keksintö yhdistetään fraktiointivaiheen kanssa, jossa poistetaan C3-aktiivisuus, esimerkiksi PEG-saostuksella, kuten kuvataan esimerkissä 1, saadaan valmiste, jolla on 2 erittäin tärkeää etua verrattuna plasmaan tekijä I - puutteen hoidossa, koska se on käytännössä vapaa viruksista, ja 15 se on käytänössä ilman C3- ja tekijä B - aktiivisuutta, joka voi edellä kuvatulla tavalla aiheuttaa anafylaktisia reaktioita. Tuote on myös ylivoimainen Kanekon kuvaamiin tekijä I - valmisteisiin (EP-patenttijulkaisu 0222611) verrattuna autoimmuunisairausten hoitoa varten, koska nämä 20 tuotteet eivät olleet turvallisia virusten siirtymisen vaaran suhteen.
Siten tämä keksintö tekee mahdolliseksi aikaansaada huomattava parannus tekijä I - puutepotilaiden hoidossa verrat-25 tuna tavalliseen hoitoon plasmainfuusioilla. Käsittely menetelmä tekijä I:tä sisältävän liuoksen 1/2 - 100 tunnin kuumennuksella 55 - 65 °C:ssa sakkaridin ja/tai sokerial-koholin ja/tai aminohapon kanssa stabiloijana voidaan suorittaa millä hyvänsä tekijä I:tä sisältävällä fraktiolla 30 tai valmisteella.
Tekijä I:tä sisältävät liuokset sekoitetaan sakkaridin ja/tai sokerialkoholin ja/tai aminohapon kanssa. Tekijä I:n stabiloituminen lisääntyy lisääntyneellä sakkaridi-, soke-35 rialkoholi- tai aminohappolisäyksellä; siten lisäystä voi daan tehostaa 1 tai useamman useamman näiden stabiloija-tyyppien saturointiin asti. Samoin tekijä B:n stabiloituminen kasvaa kasvavalla sakkaridi- ja/tai sokerialkoholilis- 6 95440 äyksellä, mutta näille stabiloijille on konsentraatioalue, jolla kuumakäsitellyissä liuoksissa ei ole läsnä tekijä B:tä, ja suuri tekijä I:n saanto saadaan 10 tunnin kuumakä-sittelyn jälkeen 60 °C:ssa. On esimerkiksi merkittävää, 5 että stabilointi 55-% (paino/paino) sakkaroosilla aikaansaa tekijä B:n 21-% esiintymistiheyden 10 tunnin kuumakäsitte-lyn jälkeen 60 °C:ssa, kun taas 30-% (paino/paino) sakkaroosin käyttö aikaansaa tekijä B:n täydellisen denaturoitu-misen jo 4 tunnin sisällä 60 °C:ssa. Samaa selvää vaikutus-10 ta ei nähdä tekijä I:llä, vertaa esimerkki l, osa B ja esimerkki 3. Aminohappojen käytöllä stabiloijana ei nähdä tekijä B:n stabiloitumista, kun taas suuri tekijä I:n saanto voidaan saada 10 tunnin kuumakäsittelyn jälkeen 60 °C:ssa. Tämä tosiseikka tekee mahdolliseksi tuottaa tekijä I - val-15 mistetta, jossa ei ole tekijä B - aktiivisuutta.
Sakkaridin, sokerialkoholin tai aminohapon poistaminen tekijä I:tä sisältävästä liuoksesta kuumakäsittelyn jälkeen voidaan aikaansaada ioninvaihdolla tai dialyysillä. Stabi-20 loijän poistamisen jälkeen liuos voidaan konsentroida haluttuun konsentraatioon, esimerkiksi ultrasuodatuksella, minkä jälkeen valmiste voidaan mahdollisesti pakastekuivata stabiilisuuden parantamiseksi käyttöön asti, jolloin se muodostetaan uudelleen. Tekijä I voidaan määrittää 25 "rocketimmunoelektroforeesilla kanin anti-ihmis-vasta-ai-• ‘ neella, joka on monospesifistä tekijä I:lle (valmistaja
Institute of Medical Microbiology at the University of Odense, Tanska). Näytteen koko on 10 μΐ. Standardi on pa-kastekuivattua ihmisplasmaa (KABI).
30
Tekijä B voidaan määrittää radiaalisella immunodiffuusioila kanin antihumaani-tekijä B - vasta-aineella (Behring, anti-C3-aktivaattori). Näytteen koko on 10 μΐ. Standardi on samoin pakastekuivattua ihmisen plasmaa (KABI). Koska C3:n 35 vastainen vasta-aine ei ole kaupallisesti saatavissa, C3:n läsnä olo voidaan sulkea pois seuraavalla epäsuoralla menetelmällä, vertaa I. Brandslund et ai., Scand. J. Clin. Lab. Invest. (1984) 44 suppl. 168, 57: C3:n hajoamistuotteen C3c
II
7 95440 vastaiset vasta-aineet reagoivat C3:n samoin kuin C3c:n kanssa, muttei C3d:n kanssa. Vastaavasti, C3d:n vastaiset vasta-aineet reagoivat sekä C3:n että C3d:n kanssa, mutteivät C3c:n kanssa. Kokonais-C3- ja -C3c-aktiivisuus voidaan 5 määrittää "rocket"-immunoelektroforeesilla kanin anti-hu-maani-vasta-aineella C3c:a vastaan (Dakopatts). Näytteen koko on 15 μΐ. C3:n ja C3d:n kokonaiskonsentraatio voidaan määrittää vastaavasti "rocket"-immunoelektroforeesilla kanin anti-humaani-vasta-aineella C3d:a vastaan (Dakopatts).
10 Standardi on molemmissa määrityksissä pakastekuivattua ihmisen plasmaa (KABI). Mikäli vain 1 näistä elektroforeeseista antaa negatiivisen vasteen (ei "rocket"ia), tämä tarkoittaa, ettei näytteessä ole C3:a.
15 Sakkaroosin konsentraatio voidaan määrittää jodimetrisellä titrauksella menetelmällä, jota on modifioitu menetelmästä, joka on kuvattu teoksessa Ph. Nord. 63» vo). II, s. 558. Keksinnön mukaista menetelmää kuvataan seuraavilla esimerkeillä.
20
Keksinnön olennaiset tunnusmerkit on esitetty oheisissa pat en11 ivaatimuks i s sa.
Esimerkki 1 25 Osa A
_ Tuoreena pakastettua plasmaa sulatetaan, ja lisätään PEGriä (18,5 %). Saostuma sentrifugoidaan pois. Sitten pH säädetään arvoon 4,8 niin, että suurin osa proteiineista saostuu. Sakka sentrifugoidaan pois ja liuotetaan uudelleen 30 veteen 86 %:iin alkuperäisestä plasmatilavuudesta. Tämä liuos sisältää: tekijä I: 0,6 U/ml tekijä B: 0,3 U/ml C3: 0 U/ml 35
Lisäksi läsnä on 0,3 U C3d/ml, mutta ei C3c:a, koska kaikki C3- ja C3c-aktiivisuus saostunut ensimmäiseen sakkaan.
8 §§44Ö
Osa B
Lähtömateriaali on vesiliuos, joka sisältää 0,4 U tekijä I/ml ja 0,16 U tekijä B/ml, ja joka on valmistettu osassa A kuvatulla menetelmällä. Liuoksen pH säädetään arvoon 7,0, 5 ja punnitaan 5 g liuosta kuhunkin 8:sta pikkupullosta. Pikkupullot sijoitetaan vesihauteeseen 6 minuutiksi 37 °C:een. Kuhunkin pikkupulloon lisätään 0 - 55 % (paino/-paino) sakkaroosia, katso taulukkoa alla. Sakkaroosin liukenemisen jälkeen pH säädetään jälleen arvoon 7,0. Sitten 10 pikkupullot suljetaan ja kuumakäsitellään 10 tunnin ajan 60 °C:ssa. Tekijä I ja tekijä B määritetään "rocket"-im-munoelektroforeesilla ja radiaalisella immunoelektroforee-silla, vastaavasti, sekä kuumakäsitellyissä ja kuumakäsit-telemättömissä formuloiduissa näytteissä.
15 % (paino/paino) sakkaroosia for- tekijä I-aktiivi- tekijä B-aktiivi- muloidussa suuden talteen- suuden talteen- liuoksessa saanti-% saanti-% 20 - 0 0 0 25 69 0 30 80 0 35 94 6 25 40 87 11 45 100 13 50 92 15 55 89 21
30 Osa C
Lähtömateriaali on kuumakäsitelty vesiliuos, joka on for-i muloitu osassa B kuvatulla tavalla 30 %:lla (paino/paino) sakkaroosia. pH säädetään arvoon 7,8. Liuos lisätään kolonniin, joka on pakattu DEAE Sepharose FF (Pharmacia)-ionin-35 vaihtogeelillä, tasapainotettu fosfaattipuskurissa, jonka johtokyky on 2,0 mS ja pH-arvo 7,8. Näytteen geeliin lisäämisen jälkeen se huuhdotaan 1,5 kolonnintilavuudella tasa-·· painotuspuskuria, minkä jälkeen seuraa eluointi fosfaat-
II
9 95440 tipuskurilla, jonka johtokyky on 4,0 mS ja pH-arvo 7,8. Eluaatti kerätään talteen. Määritetään sekä tekijä I-ak-tiivisuus ("rocket"-immunoelektroforeesi) että sakkaroosi-konsentraatio (jodimetrisellä titrauksella) ioninvahdon 5 lähtömateriaalinäytteellä samoin kuin eluaatilla.
Tekijä I:n ja sakkaroosin saannot ovat 64 % ja 1,1 %, vastaavasti.
10 Eluaatti konsentroidaan ultrasuodatuksella ja pakastekuiva-taan.
Esimerkki 2 Lähtömateriaali on vesiliuosta, joka sisältää 0,6 U tekijä 15 I/ml ja 0,3 U tekijä B/ml, vertaa esimerkki 1, osa Ά. Liuoksen pH säädetään arvoon 7,0, ja 5 g liuosta punnitaan kuhunkin 13 pikkupullosta. Pikkupulloihin lisätään 0 - 50 % (paino/paino) sorbitolia tai 0,5 - 1,0 M lysiiniä tai 0,5 - 2,0 M glysiiniä, katso seuraavaa taulukkoa. Stabiloijän 20 liukenemisen jälkeen pH säädetään jälleen arvoon 7,0. Sitten pikkupullot suljetaan ja kuumakäsitellään 10 tunnin ajan 60 °C:ssa. Tekijä I ja tekijä B määritetään "rocket"-immuno-elektroforeesilla ja radiaalisella immunodiffuusiolla, vastaavasti, sekä kuumakäsitellyissä että kuumakäsittelemät-25 tömissä näytteissä.
stabiloijan tekijä I-ak- tekijä B-ak- määrä formu- tiivisuuden tiivisuuden loidussa talteen- talteen- 30 liuoksessa saanti-% saanti-% : 0 0 0 5 % (paino/paino) sorbitolia 21 0 10 % (paino/paino) sorbitolia 59 0 35 15 % (paino/paino) sorbitolia 75 0 20 % (paino/paino) sorbitolia 85 0 30 % (paino/paino) sorbitolia 93 noin 3 i 40 % (paino/paino) sorbitolia 96 5 10 95440 50 % (paino/paino) sorbitolia 100 8 0,5 M lysiini 100 0 1.0 M lysiini 100 0 5 - 0,5 M glysiini 0 0 1.0 M glysiini 9 0 2.0 M glysiini 59 0 10
Esimerkki 3 Lähtömateriaali on vesiliuosta, joka sisältää 0,63 U tekijä I/ml ja 0,30 U tekijä B/ml, ja joka on valmistettu esimerkin 1 osassa A kuvatulla tavalla. Liuoksen pH säädetään ar-15 voon 7,0, ja lisätään 30 % (paino/paino) sakkaroosia. Formuloitu liuos jaetaan pikkupulloihin niin, että kuhunkin lisätään 1/2 ml. Pikkupullot suljetaan ja sijoitetaan 60 °C:een. Pikkupulloja poistetaan eri ajanhetkillä 60 °C:ssa varastoinnista -20 °C:een, katso seuraavaa taulukkoa.
20 Liuoksista analysoidaan tekijä I-aktiivisuus ja tekijä B-aktiivisuus "rocket"-immunoelektroforeesilla ja radiaali-sella immunodiffuusiolla, vastaavasti.
minuuttien tekijä I-aktiivi- tekijä B-aktiivi- 25 määrä suuden talteen- suuden talteen- 60 °C:ssa saanti-% saanti-% 0 100 100 30 100 6 30 60 100 4 120 100 3 240 92 0 420 84 0 600 78 0 35 4446 46 0 11
Claims (2)
1. Förfarande för framställning av en C3b-inaktivatoriös-ning, som härstammar frän plasma och som är väsentligen fri 20 frän faktor B - aktivitet och aktivitet av infekterande virus, kännetecknat av att en plasmafraktion som innehäller C3b-inaktivator utsätts för pastörisering genom uppvärmning av densamma tili ca. 55 - 65'C under 0,5 - 100 timmar i närvaro av ätminstone en stabilisator, som är en sackarid, 25 sockeralkohol eller aminosyra, varvid nämnda stabilisator är närvarande i en tillräcklig mängd för stabilisering av C3b-inaktivatoraktivitet och för minskande av utbytet av faktor B - aktiviteten till under 10 %. 30
2. Förfarande enligt patentkrav 1, kännetecknat av att plasmafraktionen uppvärms vid ca. 60‘C under 4-24 timmar, företrädesvis under 5-15 timmar.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DK708488A DK708488D0 (da) | 1988-12-20 | 1988-12-20 | Faktor i praeparat |
DK708488 | 1988-12-20 | ||
DK8900297 | 1989-12-19 | ||
PCT/DK1989/000297 WO1990006759A1 (en) | 1988-12-20 | 1989-12-19 | A pure factor i protein and a process for producing said protein |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI912879A0 FI912879A0 (fi) | 1991-06-14 |
FI95440B true FI95440B (fi) | 1995-10-31 |
FI95440C FI95440C (fi) | 1996-02-12 |
Family
ID=8149208
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI912879A FI95440C (fi) | 1988-12-20 | 1991-06-14 | Menetelmä plasmaperäisen C3b-inaktivaattoriliuoksen valmistamiseksi, joka ei sisällä oleellisesti tekijä B-aktiivisuutta eikä infektoivan viruksen aktiivisuutta |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5378811A (fi) |
EP (1) | EP0449897B1 (fi) |
JP (1) | JPH04502324A (fi) |
AT (1) | ATE101521T1 (fi) |
AU (1) | AU4811290A (fi) |
DE (1) | DE68913212T2 (fi) |
DK (2) | DK708488D0 (fi) |
ES (1) | ES2062502T3 (fi) |
FI (1) | FI95440C (fi) |
NO (1) | NO912387D0 (fi) |
WO (1) | WO1990006759A1 (fi) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB9424732D0 (en) * | 1994-12-08 | 1995-02-08 | Common Services Agency | Heat treated blood plasma proteins |
DK1107807T3 (da) * | 1998-08-25 | 2007-02-19 | Ash Access Technology Inc | Anvendelse af citrat i en kateterlukkeoplösning |
US7749529B2 (en) | 2005-02-08 | 2010-07-06 | Ash Access Technology, Inc. | Catheter lock solution comprising citrate and a paraben |
GB0904427D0 (en) | 2009-03-13 | 2009-04-29 | Lachmann Peter | Treatment of diseases related to hyperactivity of the complement system |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4440679A (en) * | 1980-03-05 | 1984-04-03 | Cutter Laboratories, Inc. | Pasteurized therapeutically active protein compositions |
US4623717A (en) * | 1980-03-05 | 1986-11-18 | Miles Laboratories, Inc. | Pasteurized therapeutically active protein compositions |
JPH0742235B2 (ja) * | 1985-11-08 | 1995-05-10 | 三共株式会社 | 自己免疫性疾病の予防・治療剤 |
-
1988
- 1988-12-20 DK DK708488A patent/DK708488D0/da not_active Application Discontinuation
-
1989
- 1989-12-19 DE DE68913212T patent/DE68913212T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1989-12-19 AT AT90900763T patent/ATE101521T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-12-19 JP JP90501447A patent/JPH04502324A/ja active Pending
- 1989-12-19 ES ES90900763T patent/ES2062502T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1989-12-19 EP EP90900763A patent/EP0449897B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-12-19 AU AU48112/90A patent/AU4811290A/en not_active Abandoned
- 1989-12-19 WO PCT/DK1989/000297 patent/WO1990006759A1/en active IP Right Grant
- 1989-12-19 US US08/089,905 patent/US5378811A/en not_active Expired - Fee Related
-
1991
- 1991-06-03 DK DK105391A patent/DK105391A/da unknown
- 1991-06-14 FI FI912879A patent/FI95440C/fi not_active IP Right Cessation
- 1991-06-19 NO NO912387A patent/NO912387D0/no unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
NO912387L (no) | 1991-06-19 |
EP0449897A1 (en) | 1991-10-09 |
DK708488D0 (da) | 1988-12-20 |
ATE101521T1 (de) | 1994-03-15 |
FI912879A0 (fi) | 1991-06-14 |
US5378811A (en) | 1995-01-03 |
JPH04502324A (ja) | 1992-04-23 |
AU4811290A (en) | 1990-07-10 |
DK105391D0 (da) | 1991-06-03 |
WO1990006759A1 (en) | 1990-06-28 |
DE68913212D1 (de) | 1994-03-24 |
DK105391A (da) | 1991-06-03 |
FI95440C (fi) | 1996-02-12 |
NO912387D0 (no) | 1991-06-19 |
DE68913212T2 (de) | 1994-05-19 |
ES2062502T3 (es) | 1994-12-16 |
EP0449897B1 (en) | 1994-02-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4623717A (en) | Pasteurized therapeutically active protein compositions | |
EP0073371B1 (en) | Intravenously injectable immune serum globulin and method of preparing same | |
AU651188B2 (en) | Stabilized factor VIII preparations | |
EP2270044B1 (en) | Liquid immunoglobulin G (lgG) product | |
EP0035204B1 (en) | Pasteurized therapeutically active protein compositions | |
EP0314095B1 (en) | Plasma and recombinant protein formulation in high ionic strength media | |
US4499073A (en) | Intravenously injectable immune serum globulin | |
US5118794A (en) | Process for stabilizing human albumin solutions and the solution obtained | |
KR0152256B1 (ko) | 면역글로불린을 함유하는 정맥내투여용 폴리클로날 면역글로불린 제제 및 이의 제조방법 | |
AU549584B2 (en) | Heat stabilization of plasma proteins | |
JPH08176010A (ja) | 分配剤としてカプリル酸ナトリウムを用いる低温アルブミン分画 | |
EP0196761A2 (en) | Method of virus-inactivating heat treatment of gamma-globulin | |
JPH0348169B2 (fi) | ||
JPS63192724A (ja) | r−グロブリンの液状製剤 | |
US9145448B2 (en) | Method for the isolation of haptoglobin | |
EP0117064A2 (en) | Process for heat treatment of blood coagulation factor VIII | |
EP0764447A2 (en) | Preparation of virally inactivated intravenously injectable immune serum globulin | |
FI95440B (fi) | Menetelmä plasmaperäisen C3b-inaktivaattoriliuoksen valmistamiseksi, joka ei sisällä oleellisesti tekijä B-aktiivisuutta eikä infektoivan viruksen aktiivisuutta | |
JPS61189228A (ja) | 血液凝固第8因子製剤の製法 | |
US4478825A (en) | Warm ethanol method for preparation of low fibrinogen antihemophilic factor | |
KR100696897B1 (ko) | 바이러스의 불활성화 방법 | |
Köhler et al. | In vivo recovery and half-life time of a steam-treated factor IX concentrate in hemophilia B patients: The influence of reagents and standards | |
CN114787185A (zh) | 一种凝血因子ⅷ中间品的冻存方法 | |
Østergaard Alsøe et al. | Pasteurisation of a factor I (C3b inactivator) concentrate from human plasma | |
JPH10504310A (ja) | 生物学的に活性な化合物で患者を治療する方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
BB | Publication of examined application | ||
MM | Patent lapsed |