FI91887B - Promoottorijärjestelmä streptomykeettavektoreita varten - Google Patents
Promoottorijärjestelmä streptomykeettavektoreita varten Download PDFInfo
- Publication number
- FI91887B FI91887B FI864071A FI864071A FI91887B FI 91887 B FI91887 B FI 91887B FI 864071 A FI864071 A FI 864071A FI 864071 A FI864071 A FI 864071A FI 91887 B FI91887 B FI 91887B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- promoter
- fragment
- plasmid
- streptomycetes
- promoter system
- Prior art date
Links
- 241001655322 Streptomycetales Species 0.000 title claims abstract description 15
- 239000013598 vector Substances 0.000 title claims description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 27
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims description 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 2
- 241000187398 Streptomyces lividans Species 0.000 claims 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 7
- 101710171801 Alpha-amylase inhibitor Proteins 0.000 description 6
- 239000003392 amylase inhibitor Substances 0.000 description 6
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 241000828254 Streptomyces lividans TK24 Species 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 2
- NSFFHOGKXHRQEW-UHFFFAOYSA-N Thiostrepton B Natural products N1C(=O)C(C)NC(=O)C(=C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(C(C)CC)NC(C(C2=N3)O)C=CC2=C(C(C)O)C=C3C(=O)OC(C)C(C=2SC=C(N=2)C2N=3)NC(=O)C(N=4)=CSC=4C(C(C)(O)C(C)O)NC(=O)C(N=4)CSC=4C(=CC)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(N=4)=CSC=4C21CCC=3C1=NC(C(=O)NC(=C)C(=O)NC(=C)C(N)=O)=CS1 NSFFHOGKXHRQEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 229930188070 thiostrepton Natural products 0.000 description 2
- NSFFHOGKXHRQEW-AIHSUZKVSA-N thiostrepton Chemical compound C([C@]12C=3SC=C(N=3)C(=O)N[C@H](C(=O)NC(/C=3SC[C@@H](N=3)C(=O)N[C@H](C=3SC=C(N=3)C(=O)N[C@H](C=3SC=C(N=3)[C@H]1N=1)[C@@H](C)OC(=O)C3=CC(=C4C=C[C@H]([C@@H](C4=N3)O)N[C@H](C(N[C@@H](C)C(=O)NC(=C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N2)=O)[C@@H](C)CC)[C@H](C)O)[C@](C)(O)[C@@H](C)O)=C\C)[C@@H](C)O)CC=1C1=NC(C(=O)NC(=C)C(=O)NC(=C)C(N)=O)=CS1 NSFFHOGKXHRQEW-AIHSUZKVSA-N 0.000 description 2
- 229940063214 thiostrepton Drugs 0.000 description 2
- NSFFHOGKXHRQEW-OFMUQYBVSA-N thiostrepton A Natural products CC[C@H](C)[C@@H]1N[C@@H]2C=Cc3c(cc(nc3[C@H]2O)C(=O)O[C@H](C)[C@@H]4NC(=O)c5csc(n5)[C@@H](NC(=O)[C@H]6CSC(=N6)C(=CC)NC(=O)[C@@H](NC(=O)c7csc(n7)[C@]8(CCC(=N[C@@H]8c9csc4n9)c%10nc(cs%10)C(=O)NC(=C)C(=O)NC(=C)C(=O)N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)C(=C)NC(=O)[C@H](C)NC1=O)[C@@H](C)O)[C@](C)(O)[C@@H](C)O)[C@H](C)O NSFFHOGKXHRQEW-OFMUQYBVSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- DKNPRRRKHAEUMW-UHFFFAOYSA-N Iodine aqueous Chemical compound [K+].I[I-]I DKNPRRRKHAEUMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/36—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Actinomyces; from Streptomyces (G)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
- C12N15/76—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora for Actinomyces; for Streptomyces
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Measurement And Recording Of Electrical Phenomena And Electrical Characteristics Of The Living Body (AREA)
- Electrotherapy Devices (AREA)
- Channel Selection Circuits, Automatic Tuning Circuits (AREA)
Description
91887
Promoottorijärjestelmä streptomykeettavektoreita varten
Keksintö koskee promoottorijärjestelmää, jossa promoottorit ovat tehokkaita streptomykeetoissa ja järjestet-5 tyinä peräkkäin tandemiin. Tällä "tandemjärjestelmällä" saavutetaan proteiiniekspression huomattava nousu. Keksintö koskee lisäksi vektoreita, jotka sisältävät tämän promoottorijärjestelmän, streptomykeettaisäntäkantoja, jotka sisältävät tällaisia vektoreita, ja niiden käyttöä 10 proteiinien tuotantoon. Keksinnön edullisia suoritusmuotoja valaistaan tarkemmin jäljempänä tai ne määritellään patenttivaatimuksissa.
Streptomykeetoissa tehokkaiden promoottorien DNA-rakenteesta on vielä suhteellisen vähän tietoa. Nyt on 15 havaittu, että järjestämällä kaksi streptomykeettapromoot-toria tandemiin voidaan lisätä proteiiniekspressiota odottamattomissa määrin. Tällöin ei näiden kahden promoottorin tarvitse olla välittömästi peräkkäin, mihin liittyisi myös vaikeuksia tämän hetkisen vielä vähäisen näiden promootto-20 rien DNA-rakennetta koskevan tiedon valossa. On siis riittävää, että promoottorit ovat tandemissa toisiinsa ja ilmennettävään rakennegeeniin nähden, jolloin näiden kahden promoottorin välissä voi olla lyhyempi tai pitempi DNA-segmentti. Tämän yhdistävän DNA-jakson edullinen koko on 25 helppo määrittää yksinkertaisin esikokein, joissa voidaan käyttää esimerkiksi kemiallisesti syntetisoituja DNA-jak-soja soveltuvien kytkijöiden tai adapterien muodossa.
Soveltuva, streptomykeetoissa tehokas promoottori voidaan ottaa talteen hybridiplasmidista pKAI 1, jota ku-30 vataan DE-hakemusjulkaisussa 3 331 860. Tätä varten käsitellään 2,3 kein DNA-pala, jota valaistaan tarkemmin mainitun hakemusjulkaisun kuviossa 2, restriktioentsyymeillä SstI ja Hindi, ja eristetään 650 emäsparin pituinen fragmentti. Tämä DNA-fragmentti sisältää a-amylaasi-inhibiit-35 toria, "tendamistaattia", vastaavan rakennegeenin ja sii- 91887 2 hen liittyvän promoottorin. Tämä DNA-sekvenssi sijaitsee 940 emäsparin pituisessa jaksossa, joka on entsyymien PstI ja BamHI restriktiokohtien välissä (DE-hakemusjulkaisun 3 331 860 kuvio 2).
5 Toinen promoottori, joka soveltuu keksinnön mukai seen "tandemjärjestelmään", esiintyy kaupallisesti saatavassa plasmidissa pIJ 702 [E. Katz et ai., J. Gen. Microbiol. 129 (1983) 2703 - 2714: D.A. Hopwood et ai., Genetic Manipulations of Streptomyces, A Laboratory Manual, The 10 John Innes Foundation, Norwich, Englanti, 1985, s. 292]. Tätä varten pilkotaan plasmidi restriktioentsyymeillä SphI ja PstI, ja eristetään 350 emäsparin fragmentti. On myös mahdollista saattaa plasmidi reagoimaan restriktioentsyy-mien Sphl ja Bell kanssa ja eristää 270 emäsparin DNA-15 fragmentti. Tässä 270 emäsparin fragmentissa on mel-gee-nin, joka koodaa tyrosinaasiproteiinia, promoottori.
Nämä DNA-fragmentit, jotka sisältävät mel-promoot-torin, voidaan sitten - tandemissa - sijoittaa haluttuun ilmentymisvektoriin sillä tavalla, että ne sijaitsevat 20 ennen toista streptomykeetoissa tehokasta promoottoria tai tämän promoottorin ja rakennegeenin välissä.
Keksinnön eräässä toisessa suoritusmuodossa ei eristetä mel-promoottoria plasmidista pIJ 702, vaan sijoitetaan tähän plasmidiin rakennegeeni ja toinen promoot-25 tori - jälleen tandemissa. On tarkoituksenmukaista sijoittaa toinen promoottori ja rakennegeeni yhtenä yksikkönä mel-promoottorin jälkeen eli käyttää siis esimerkiksi mainittua DNA-fragmenttia, joka sisältää tendamistaattiraken-negeenin ja siihen liittyvän promoottorin. Tämä geenira-30 kenne johtaa noin kymmenkertaiseksi kasvaneeseen a-amylaa-si-inhibiittorin, tendamistaatin, oikeaan ekspressioon ja erittymiseen.
Käytettäessä plasmideja, joiden kopiolukumäärä solua kohden on suuri, voi proteiinien tuotanto laskea fer-35 mentoinnin kestäessä pitkään. Tällaisissa tapauksissa on 4 · li 91887 3 edullista käyttää vektoreita, joiden kopiolukumäärä on pienempi.
Vastaavasti kuin tämä vain esimerkkinä esitettävä geenirakenne voidaan myös muista streptomykeetoissa te-5 hokkaista promoottoreista muodostaa tällaisia "tandemjärjestelmiä" ja saattaa haluttu rakennegeeni ilmentymään.
Keksintöä valaistaan tarkemmin seuraavissa esimerkeissä.
Esimerkki 1 10 Plasmidin pKal 1 DNA:sta (7 pg, DE-hakemusjulkaisu 3 331 860) eristetään elektroeluutiolla 650 emäsparin
HincII-Sstl-fragmentti. Tämän fragmentin sijaintia plasmidin pKAI 1 2,3 ke:n fragmentissa valaistaan kuviossa 1, jossa "SG" tarkoittaa a-amylaasi-inhibiittorirakennegee-15 niä. 650 emäsparin fragmentti sisältää rakennegeenin lisäksi kaikki Streptomyces lividans TK 24:ssa tapahtuvan ilmentymisen vaatimat säätelyalueet.
Kaupallinen E. coli -vektori pUC 19 [C. Yanisch-Perron et ai.. Gene 33 (1985) 103 - 119: New England Bio-20 labs 1985/86 Catalog, s. 90/91; BRL, Bethesda Research Laboratories Catalogue & Reference Guide, 1985, s. 136/-137] pilkotaan kahdesti restriktioendonukleaaseilla Hindi ja SstI, ja ligatoidaan linearisoitu plasmidi edellä mainitun 650 emäsparin Sstl-HincII-fragmentin kanssa. E. coli ' 25 JM 101:n transformoituiin jälkeen eristetään kloonit, jotka sisältävät yhdistelmäplasmidin, josta käytetään merkintää pKAI 650 ja joka sisältää rakenneosanaan 650 emäsparin fragmentin. Tämä plasmidi esitetään kuviossa 2 (ei oikeassa mittakaavassa), jossa P tarkoittaa promoottorialuetta.
30 Eristetty plasmidin pKAI 650 DNA pilkotaan kahdesti restriktioendonukleaaseilla SstI ja Sphl tai SstI ja PstI, tehdään geelielektroforeesi ja elektroeluutio, ja eristetään noin 650 emäsparia sisältävä fragmentti.
• · 4 91 887
Esimerkki 2
Plasmidi pIJ 702 (saatavissa John Innes Foundation' ista, Norwich, Englanti) pilkotaan restriktioendonuk-leaaseilla SstI ja Sphl, ja eristetään 400 emäsparin Sstl-5 Sphl-fragmentti muusta vektori-DNA:sta agaroosigeelielekt- roforeesilla. 1 pg eristettyä, puhdistettua vektori-DNA:ta ligatoidaan 0,3 pg:n kanssa pKAI 650:sta saatua 650 emäs-parin Sstl-SphI-fragmenttia (esimerkki 1), ja transformoidaan ligaatiotuotteella Streptomyces lividans TK 24 (saa-10 tavissa John Innes Foundation'ista) sinänsä tunnetulla tavalla. Haluttujen kloonien valikointi tehdään tiostrepto-niresistenssin ja a-amylaasi-inhibiittorituotannon perusteella seuraavalla levykokeella:
Pesäkkeet peitetään 5 ml:11a vesiliuosta, joka si-15 sältää 0,4 - 1,0 mg/ml pankreatiinia, ja inkuboidaan 1 tunti lämpötilassa 37 eC. Sitten liuos poistetaan ja korvataan 5 ml:lla 2-painoprosenttista tärkkelysagaria. 2 tunnin inkuboinnin (37 eC:ssa) jälkeen peitetään levyt 5 ml:11a jodi-kaliumjodidikehitysliuosta. Sinisen kehän ym-20 päröimät pesäkkeet osoittavat, että kloonit syntetisoivat ja erittävät tendamistaattia.
Yhdistelmäplasmidi pAX 650, joka saa aikaan a-amy-laasi-inhibiittorin, tendamistaatin, synteesin, esitetään kuviossa 3 (ei oikeassa mittakaavassa). P' tarkoittaa täs-25 sä pIJ 702:sta peräisin olevan mel-geenin promoottorialuetta.
Esimerkki 3 (vertailuesimerkki)
Menetellään muuten esimerkin 2 mukaisesti, mutta poistetaan plasmidista pIJ 702 650 emäsparin Pstl-SstI -30 fragmentti ja ligatoidaan loppuosa plasmidista pKAI 650:-sta saadun noin 650 emäsparin pituisen SsT-Pstl-fragmentin kanssa. Siten saatu yhdistelmäplasmidi pAX 651 antaa a-amylaasi-inhibitiotestissä noin 10 kertaa pienemmän arvon kuin plasmidi pAX 650 (esimerkki 2).
n • · 5 91 887
Esimerkki 4 "Heilurivektori" pSWl (EP-hakemusjulkaisu 0 158 201, kuva 26) pilkotaan osittain restriktioentsyy-millä Bell, ja eristetään noin 1,6 ke:n pituinen lineaari-5 nen fragmentti 0,4-%:isella agaroosigeelillä tehdyn elektroforeesin jälkeen. Eristetty DNA-fragmentti uutetaan puskuroidulla fenoliliuoksella ja saostetaan etanolilla.
Siten puhdistetut DNA-fragmentit ligatoidaan pAX 650:sta saadun 1,81 ke:n BclI-fragmentin kanssa, joka si-10 sältää täydellisen α-amylaasin-inhibiittorigeenin. Ligaa-tioseoksella transformoidaan S. lividans TK 24. Tiostrep-toniresistentit yhdistelmäkloonit tuottavat ja erittävät a-amylaasi-inhibiittoria, tendamistaattia, myös pitkien fermentointien kuluessa vakiosaannolla.
» ·
Claims (9)
1. Streptomykeetoissa aktiivinen promoottori järjestelmä, tunnettu siitä, että streptomykeetoissa 5 aktiivinen promoottori sijaitsee tandemissa toisen streptomykeetoissa aktiivisen promoottorin jäljessä.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen promoottorijärjestelmä, tunnettu siitä, että toinen näistä kahdesta promoottorista on peräisin 350 emäsparin pituisesta 10 plasmidin pIJ 702 Pstl-SphI-fragmentista.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen promoottorijärjestelmä, tunnettu siitä, että toinen näistä kahdesta promoottorista on peräisin 270 emäsparin pituisesta plasmidin pIJ 702 BclI-SphI-fragmentista.
4. Patenttivaatimuksen 1, 2 tai 3 mukainen promoot- torijärjestelmä, tunnettu siitä, että toinen promoottoreista on peräisin 650 emäsparin HincII-Sstl-frag-mentista, joka sijaitsee 0,94 ke:n Pst-BamHI-fragmentissa plasmidissa pKAI 1.
5. Streptomykeetoissa aktiivinen vektori, t u n -n e t t u siitä, että se sisältää yhden tai useamman edeltävän patenttivaatimuksen mukaisen promoottorijärjestel-män.
6. Streptomyces-sukuun kuuluva isäntäsolu, t u n - 25. e t t u siitä, että se sisältää patenttivaatimuksen 5 mukaisen vektorin.
7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen isäntäsolu, tunnettu siitä, että se on lajia S. lividans.
8. Menetelmä proteiinin valmistamiseksi, t u n -n 30. t t u siitä, että Streptomyces-suvun isäntäsolussa saatetaan ilmentymään vektori, joka sisältää tandemissa yhden tai useamman patenttivaatimuksista 1-4 mukaisen promoottori järj estelmän.
9. Patenttivaatimuksen 8 mukainen menetelmä, 35 tunnettu siitä, että isäntäsolu on lajia S. lividans. ii 91887
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19853536182 DE3536182A1 (de) | 1985-10-10 | 1985-10-10 | Promotor-anordnung fuer streptomyceten-vektoren |
DE3536182 | 1985-10-10 |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI864071A0 FI864071A0 (fi) | 1986-10-08 |
FI864071A FI864071A (fi) | 1987-04-11 |
FI91887B true FI91887B (fi) | 1994-05-13 |
FI91887C FI91887C (fi) | 1994-08-25 |
Family
ID=6283273
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI864071A FI91887C (fi) | 1985-10-10 | 1986-10-08 | Promoottorijärjestelmä streptomykeettavektoreita varten |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4918007A (fi) |
EP (1) | EP0218204B1 (fi) |
JP (1) | JPS62100293A (fi) |
AT (1) | ATE70306T1 (fi) |
AU (1) | AU592825B2 (fi) |
CA (1) | CA1296271C (fi) |
DE (2) | DE3536182A1 (fi) |
DK (1) | DK482686A (fi) |
ES (1) | ES2038118T3 (fi) |
FI (1) | FI91887C (fi) |
GR (1) | GR3003950T3 (fi) |
IE (1) | IE59590B1 (fi) |
IL (1) | IL80250A (fi) |
NO (1) | NO175319C (fi) |
NZ (1) | NZ217842A (fi) |
PT (1) | PT83519B (fi) |
ZA (1) | ZA867697B (fi) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5426036A (en) * | 1987-05-05 | 1995-06-20 | Hoechst Aktiengesellschaft | Processes for the preparation of foreign proteins in streptomycetes |
ZA929284B (en) * | 1991-12-12 | 1993-06-02 | Serono Lab | P0438, an new calcium-regulated promoter. |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2701890C2 (de) * | 1977-01-19 | 1983-08-04 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Peptielischer Glycosidhydrolase-Inhibitor aus einem Streptomyceten und seine Verwendung |
ES8207217A1 (es) * | 1980-10-09 | 1982-09-01 | Hoechst Ag | Procedimiento para la preparacion de un inactivador de alfa-amilasa |
US4717666A (en) * | 1984-03-05 | 1988-01-05 | Smithkline Beckman Corporation | Cloned streptomycete lividans excretable β-galactosidase gene |
CA1203185A (en) * | 1982-06-03 | 1986-04-15 | Thomas G. Eckhardt | Cloned streptomycete gene |
JPS5965099A (ja) * | 1982-10-05 | 1984-04-13 | Takeda Chem Ind Ltd | 発現用プロモ−タ−およびその用途 |
DE3331860A1 (de) * | 1983-09-03 | 1985-03-21 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Verfahren zur herstellung von tendamistat |
JPS60160887A (ja) * | 1984-02-02 | 1985-08-22 | Green Cross Corp:The | ベクタ− |
-
1985
- 1985-10-10 DE DE19853536182 patent/DE3536182A1/de not_active Withdrawn
-
1986
- 1986-10-02 ES ES198686113627T patent/ES2038118T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1986-10-02 AT AT86113627T patent/ATE70306T1/de not_active IP Right Cessation
- 1986-10-02 DE DE8686113627T patent/DE3682861D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1986-10-02 EP EP86113627A patent/EP0218204B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1986-10-08 IL IL80250A patent/IL80250A/xx not_active IP Right Cessation
- 1986-10-08 NZ NZ217842A patent/NZ217842A/xx unknown
- 1986-10-08 US US06/917,066 patent/US4918007A/en not_active Expired - Fee Related
- 1986-10-08 FI FI864071A patent/FI91887C/fi not_active IP Right Cessation
- 1986-10-09 AU AU63634/86A patent/AU592825B2/en not_active Ceased
- 1986-10-09 CA CA000520201A patent/CA1296271C/en not_active Expired - Fee Related
- 1986-10-09 DK DK482686A patent/DK482686A/da not_active Application Discontinuation
- 1986-10-09 NO NO864020A patent/NO175319C/no unknown
- 1986-10-09 JP JP61239432A patent/JPS62100293A/ja active Pending
- 1986-10-09 IE IE265886A patent/IE59590B1/en not_active IP Right Cessation
- 1986-10-09 ZA ZA867697A patent/ZA867697B/xx unknown
- 1986-10-10 PT PT83519A patent/PT83519B/pt not_active IP Right Cessation
-
1992
- 1992-03-04 GR GR910402136T patent/GR3003950T3/el unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE3682861D1 (de) | 1992-01-23 |
EP0218204B1 (de) | 1991-12-11 |
NO175319C (no) | 1994-09-28 |
PT83519B (pt) | 1989-05-31 |
JPS62100293A (ja) | 1987-05-09 |
FI91887C (fi) | 1994-08-25 |
IL80250A (en) | 1991-07-18 |
PT83519A (de) | 1986-11-01 |
NZ217842A (en) | 1988-09-29 |
NO175319B (no) | 1994-06-20 |
CA1296271C (en) | 1992-02-25 |
AU6363486A (en) | 1987-04-16 |
EP0218204A2 (de) | 1987-04-15 |
DK482686D0 (da) | 1986-10-09 |
AU592825B2 (en) | 1990-01-25 |
FI864071A (fi) | 1987-04-11 |
ES2038118T3 (es) | 1993-07-16 |
NO864020D0 (no) | 1986-10-09 |
FI864071A0 (fi) | 1986-10-08 |
ZA867697B (en) | 1987-05-27 |
ATE70306T1 (de) | 1991-12-15 |
US4918007A (en) | 1990-04-17 |
EP0218204A3 (en) | 1988-09-07 |
IL80250A0 (en) | 1987-01-30 |
NO864020L (no) | 1987-04-13 |
GR3003950T3 (fi) | 1993-03-16 |
DE3536182A1 (de) | 1987-04-16 |
IE59590B1 (en) | 1994-03-09 |
DK482686A (da) | 1987-04-11 |
IE862658L (en) | 1987-04-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Kollek et al. | Isolation and characterization of the minimal fragment required for autonomous replication (“Basic replicon”) of a copy mutant (pKN 102) of the antibiotic resistance factor R1 | |
Lessl et al. | Dissection of IncP conjugative plasmid transfer: definition of the transfer region Tra2 by mobilization of the Tra1 region in trans | |
Thomas et al. | Regions of broad-host-range plasmid RK2 which are essential for replication and maintenance | |
Steiert et al. | A Gene Coding for a Membrane–Bound Hydrolase is Expressed as a Secreted, Soluble Enzyme in Streptomyces Lividans | |
FI86439B (fi) | Stabiliserade plasmider. | |
Kornacker et al. | Molecular characterization of pulA and its product, pullulanase, a secreted enzyme of Klebsielia pneumoniae UNF5023 | |
Boquet et al. | Use of TnphoA to detect genes for exported proteins in Escherichia coli: identification of the plasmid-encoded gene for a periplasmic acid phosphatase | |
HU205386B (en) | Process for expressing cloned lysostaphin gene and for producing dna fragment containing the gene, expression vector and transformed host cell | |
Lanka et al. | Plasmid RP4 encodes two forms of a DNA primase | |
Krause et al. | Molecular cloning of an ornithine-activating fragment of the gramicidin S synthetase 2 gene from Bacillus brevis and its expression in Escherichia coli | |
Hickman et al. | Evidence that TET protein functions as a multimer in the inner membrane of Escherichia coli | |
TAUCHER‐SCHOLZ et al. | Identification of the gene for DNA helicase II of Escherichia coli | |
EP0195303A1 (en) | Plasmid vectors for expression in escherichia coli and/or bacillus subtilis | |
EP0187630B1 (en) | Cloned streptomyces beta-galactosidase promoter fragment | |
FI91887B (fi) | Promoottorijärjestelmä streptomykeettavektoreita varten | |
Tokunaga et al. | Identification of prolipoprotein signal peptidase and genomic organization of the lsp gene in Escherichia coli. | |
EP0092388A2 (en) | Cloning vectors | |
Gil et al. | Cloning of a chloramphenicol acetyltransferase gene of Streptomyces acrimycini and its expression in Streptomyces and Escherichia coli | |
Ritzenthaler et al. | Use of in vitro gene fusions to study the uxuR regulatory gene in Escherichia coli K-12: direction of transcription and regulation of its expression | |
EP0196375A1 (en) | Gene coding for signal peptides and utilization thereof | |
Mongkolsuk et al. | Transcription termination signal for the cat-86 indicator gene in a Bacillus subtilis promoter-cloning plasmid | |
JPH07102140B2 (ja) | 組換えdna | |
US4865982A (en) | Cloned streptomycete gene | |
KR920007685B1 (ko) | 발현벡터와 그의 제조방법 | |
Sibold et al. | Cloning and expression of a DNA fragment carrying a his nifA fusion and the nifBQ operon from a nif constitutive mutant of Klebsiella pneumoniae |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
BB | Publication of examined application | ||
MM | Patent lapsed |
Owner name: HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT |