FI91808C - Immunologinen määritysjärjestelmä - Google Patents

Description

1 91808

Inununologinen maaritysjarjestelma

Keksinto koskee automaattista immunomååritysjarjestelmaa, jossa kåytetaan kiinteana faasina reaktioastian sisåpintaa. Keksinnon mukaista jarjestelmaa voidaan kayttaå yleisesti 5 fotometrisiin, fluorometri'siin, fosforimetrisiin tai radio- logisiin immunomaarityksiin.

Naytteesså olevan vasta-aineen (tai antigeenin) måårittå-miseksi kåytetaan ns. heterogeenisiå immunomååritysmenetel-miå, joissa vasta-aineen (tai vastaavasti antigeenin) ja 10 merkkiaineella varustetun vasta-aineen (tai vastaavasti antigeenin) annetaan sitoutua kiinteålle pinnalle etukåteen sijoitettuun antigeeniin (tai vastaavasti vasta-aineeseen). Nåisså menetelmisså on kiintea pinta, jolla inununologinen reaktio on tapahtunut, ja reaktioliuos erotetaan toisistaan 15 ennen merkkiaineen signaalin mittausta kiinteåstå pinnasta, jotta reaktioliuoksessa oleva ylimåårainen merkkiaine ei peittåisi kiinteåån faasiin sitoutuneessa vasta-aineessa (tai vastaavasti antigeenisså) olevaa signaalia. Kyseinen signaali voi olla esimerkiksi radioaktiivisuus (RIA), fluo-·. 20 resenssiaktiivisuus (FIA) tai entsyymiaktiivisuus (EIA).

Kaikissa nåisså menetelmisså on kiinteå faasi peståvå huo-lellisesti ennen mittausta.

Nykyisin kåytosså olevissa menetelmisså on aina kåsin suoritettavia vaiheita; ainakin pesuvaihe, jonka automati-25 soimiseksi ei ole loydetty kåytånnosså luotettavasti toimi-via keinoja.

Automatisoiduissa menetelmisså on pyrittåvå kåyttåmåån useista nåyteastioista muodostettuja reaktio- ja mittausky-vetistojå. Reaktiot on suoritettava yleenså tarkasti måårå-30 tysså låmpotilassa. Låmpotilan sååtåmiseksi on kåytetty in-kubaattoreita, joissa on låmmitettåvå kappale ja siinå kul-lekin kyvetiston kyvetille oma kyvetin muotoinen kolonsa.

Tåmå ratkaisu ei ole kuitenkaan tyydyttåvå, sillå eri kyvet-tien låmpotiloja on nåin vaikea saada pysymåån riittåvån 35 tarkasti haluttuna. Nåin ei pystytå kåyttåmåån niin suuria kyvetistojå, kuin automatisoinnin kannalta olisi edullista.

Tåmån keksinnon tarkoituksena on ennen kaikkea aikaansaada tåysin automaattinen heterogeeninen immunologinen mååritysjår- 91808 2 jestelmå. Erityisesti tarkoituksena on aikaansaada jarjestel-må, jossa mySs lammitys- ja pesuvaiheet tapahtuvat automaat-tisesti ja luotettavasti suuriakin kyvetistoja kaytettaessa.

Nyt keksittyyn laitteeseen kuuluu: vaakatasossa liikutel-5 tava kyvetistovaunu; sen ylåpuolella vaakatasossa liikutelta-va annostelupåå; annostelupååsså kiinni oleva yksikarkinen nesteannostelija, jossa on kårki, joka on laskettavissa ala-puolella olevan kyvetin pohjaan; annostelulaitteisto halutun nesteen viemiseksi kyvettiin ja kyvetissa olevan liuoksen 10 poistaxniseksi kyvetista kårjen kautta; sekå annostelupååsså kiinni oleva mittauslaite. Keksinto ja eraåt sen sovellutuk-set mååritellåån tåsmållisesti patenttivaatimuksissa.

Keksinnon erasta edullista suoritusmuotoa havainnolliste-taan lahemmin oheisten piirustusten avulla. Niisså kuva 1 15 esittaa kokonaiskuvaa jarjestelmastM, kuvio 2 osakuvaa ana-lysaattorin sisMltS, kuvio 3 kyvetin pohjaan laskettua neste-annostelijan kårkeå seka kuvio 4 laitteiston termostoitua in-kubaattoria.

Laitteiston paaosat ovat analysaattori 1, tietokone 2 20 nayttopaMtteineen 3 ja kirjoitin 4. Jarjestelmaan voidaan liittaa myos muita ohjaus- tai tiedonsiirto- ja tallennus-laitteita 5. Myos analysaattorissa on oma kaytto- ja tulos-tuspaneeli 6. Analysaattorin kansi 7 on aukeava. NSytekyve-tisto sijoitetaan liikkuvaan vaunuun 8. Vaunun liikerata on 25 suoraviivainen ja merkitty vaunun paan kohdalla olevalla nuo-lella. Vaunun 8 ylåpuolella on vaunun liikerataa vastaan koh-tisuoraa rataa pitkin liikuteltava annostelupåå 9, johon on kiinnitetty fotometri 10 ja nesteannostelija 11. Annostelu-påån 9 liikesuuntaa on merkitty sen vieresså olevalla nuolel-30 la.

Mittaus suoritetaan johtamalla valonsåde alhaalta reiåstå 12 nåytekyvetin pohjan låpi fotometrin 10 mittauskårjen 13 kautta detektoitavaksi.

Nesteannostelijassa 11 on 1etkupumppuun yhdistetty påå-35 kanava 14 sekå sen sisåån aukeava måntåpumppuun yhdistetty sivukanava 15 (kuvio 3). Nesteannostelijan kårki 15 on laskettavissa alapuolella olevan kyvetin pohjaan.

Nesteannostelijan 11 kårki 15 on joustavaa materiaalia ja edullisesti kaareva (kuvio 3). Kun kaareva kårki 15 lasketaan 3 91808 kyvetiston 17 kyvetin 18 pohjalle, asettuu karjen suu kyve-tin 18 nurkkaan. Nain saadaan kyvetissa 18 oleva neste ime-tyksi pois mahdollisimman taydellisesti.

Analysaattorissa kaytetaan pystymittauskyvetistoa 17, 5 jossa on useita låpinakyvållå pohjalla varustettuja sylinte-rimaisiå mittauskyvettejå 18, jotka on yhdistetty ylareunas-ta toisiinsa suorakulmaiseksi matriisiksi tukilevyllå. Ky-vettien 18 sisåseinåmiin, erityisesti pohjiin on etukateen kiinnitetty mååritettåvan vasta-aineen antigeeniå. Vaunussa 8 10 on valoa lapåisevåt reiåt kyvettien 18 kohdilla.

Vaunussa 8 on termostoitu inkubaattori, johon kyvetisto sijoitetaan. Inkubaattorissa on kyvettien 18 våliin sijoit-tuvia låmmitystappeja. Tapit 19 ovat poikkileikJcaukseltaan nelioita, joiden sivut kaartuvat sisåanpain kyvettien 18 15 seiniå myotaillen siten, etta tappien 19 ja kyvettien valiin jaa pieni rako (kuvio 4). Nåin ilma paåsee vapaasti kierta-maån kyvettien vålissa, ja kaikkien kyvettien lampotila py-syy mahdollisimman tarkasti haluttuna.

Vaunussa 8 on paikka 20 kyvetistolle 17 kuin myos paikka 21 20 nayteastioille seka paikka 22 tarvittaville reagenssi- ja nesteiden poistoastioille.

Laitteisto toimii seuraavasti:

Analysaattorin kansi 7 avataan ja naytteet, esimerkiksi seeruminåytteet, asetetaan niille varatulle paikalle 21 ja 25 kyvetisto 17 sille varatulle paikalle 20. Kansi 7 suljetaan, ja kaynnistetaån haluttu ohjelma. Nesteannostelija 11 noutaa ja laimentaa kunkin naytteen omaan kyvettiinså 18 seka noutaa ja annostelee leimatun vasta-aineen seka muut mahdolli-sesti tarvittavat reagenssit kuhunkin kyvettiin. Naytteita 30 inkuboidaan haluttu aika, jolloin immunologinen reaktio ta-pahtuu.

Nyt nesteannostelija 11 imee vuoronperaan kaikkien kyvettien 18 reaktioliuokset paakanavaan 14 ja poistaa ne niille varattuun astiaan huuhdellen samalla kanavan. Nyt annostel-35 laan kaikkiin kyvetteihin vuoronperaan paakanavasta 14 pesu-nestetta, minka jålkeen kyvetit taas tyhjennetaan edellå esitetylla tavalla. Lopuksi kunkin kyvetin pohjasta mitataan siihen sitoutuneen leimatun vasta-aineen maåra ja maaritys- « 91808 tulokset tulostetaan halutulla tavalla.

Liuos poistetaan kyvetistå siten, ettå karki 15 tyonne-taan kyvetin 18 pohjaan ja kun liuosta imetåån pois siirre-taan kaareva karki 15 kyvetin nurkkaa vasten. Nain kårki 15 5 saadaan aina tåsmållisesti kyvetin 18 nurkkaan ja liuos mah-dollisimman tarkasti poistetuksi.

Pesuneste annostellaan kyvettiin 18 siten, etta neste-suihku ei irrota reagoimatta vasta-ainetta, mutta irrottaa kuitenkin ylimååråisen merkityn vasta-aineen seka muut epa-10 puhtaudet liuokseen.

Edellå on kuvattu erasta edullista fotometristå sovellu-tusta. Jarjestelya voidaan soveltaa myos fluorometriseen tai radiologiseen mittaukseen. Laitteisto voi myos muuten yksi-tyiskohdissaan poiketa edellå esitetystå. Siinå voi olla 15 esimerkiksi erillinen inkubointiasema, johon vaunu ajetaan. Annostelupååta voidaan luonnollisesti kåyttåå myos inkuboin-nin aikana, kuten myos fotometria.

Erååsså edullisessa sovellutuksessa suoritetaan samanai-kaisesti useita eri måårityssekvenssejå.

Claims (8)

1. Immunologinen måårityslaitteisto, johon kuuluu vaakatasossa liikuteltava vaunu (8), jossa on paikka (20) kyvetistolle (17), 5. vaunun (8) ylapuolella vaakatasossa liikuteltava an- nostelupåå (9), annostelupååsså (9) kiinni oleva yksikårkinen nestean-nostelija (11), jonka kårki (15) on laskettavissa ala-puolella olevan kyvetin (18) pohjaan, 10. annostelulaitteisto nesteen viemiseksi kyvettiin ja kyvetissa olevan liuoksen poistamiseksi karjen (15) kautta, annostelupååsså (9) kiinni oleva mittauslaite (10) sig-naalin mittaamiseksi, 15 tunnettu siita, ettå - vaunun (8) kyvetistbpaikka (20) on termostoitu inkubaat-tori, - kyvetiston (17) kyvettien (18) sisåpinnalle on kiinnitet-ty maSritettåvSn vasta-aineen antigeeniS, ja ettå 20. mittauslaite (10) on sovitettu kyvetin (18) sisåseinåån tarttuneen merkkiaineen antaman signaalin mittaamiseksi.

2. Vaatimuksen 1 mukainen laitteisto, tunnettu siita, etta vaunu (8) on liikuteltavissa vain suoraviivaista rataa pitkin.

3. Vaatimuksen 1 mukainen laitteisto, tunnettu siitå, etta annostelupMa (9) on liikuteltavissa vain suoraviivaista rataa pitkin.

4. Jonkin vaatimuksen 1-3 mukainen laitteisto, tunnettu siita, ettå on vaunussa (8) paikka (20) kyvetistolle (17), 30 jonka kyvetit (18) muodostavat suorakulmaisen matriisin ja on kiinnitetty ylåosasta toisiinsa tukilevyllå ja jossa on inkubaattorissa kyvettien vålisiin tiloihin asettuvia låmmi-tystappeja (19).

5. Vaatimuksen 4 mukainen laitteisto, tunnettu siitH, ettå 35 låmmitystapit (19) ovat poikkileikkaukseltaan oleellisesti nelikulmaisia.

5 91808

6. Vaatimuksen 5 mukainen laitteisto, tunnettu siitå, ettå . on vaunussa (8) paikka kyvetistolle (17), jonka kyvetit (18) 91808 6 ovat ympyrasylinterimåisiå ja jossa lSmmitystappien (19) sivuseinat ovat koveria vastaten kyvettien seinien kaare-vuutta.

7. Jonkin vaatimuksen 1-6 mukainen laitteisto, tunnettu 5 siita, etta nesteannostelijan (11) karki (15) on kaareva.

8. MenetelmS vasta-aineen maarittamiseksi nestenayttees-ta, jossa menetelmasså - vaakatasossa liikuteltavaan vaunuun (8) sijoitetaan kyvetistQ (17), 10. annetaan immunologisen reaktion tapahtua, ja annostelupåSsså (9) kiinni olevan mittauslaitteen (10) avulla mitataan merkkiaineen signaali, tunnettu siitå, ettS - kyvetiston (17) kyvettien sisSpinnalle on kiinnitetty 15 mMMritettSvMn vasta-aineen antigeeniM, - termostoitavaan vaunuun (8) sijoitetaan nåyteastiat, joissa on maSritettSvat naytteet, seka reagenssiastiat, joissa on tarvittavat reagenssit, vaunun (8) yiapuolella liikuteltavan yksikarkisen (15) 20 nesteannostelijan (11), jonka karki (15) on lasketta- vissa alapuolella olevan kyvetin (18) pohjaan, avulla noudetaan kuhunkin kyvettiin nayte nMyteastiasta seka reagenssit reagenssiastioista, - karjen (15) avulla poistetaan liuokset kyveteista 25 (18), - karjen (15) avulla annostellaan pesunestetta kyvettei-hin ja poistetaan se niista, - mitataan kyvetin (18) sisaseinaan tarttuneen merkkiaineen signaali. 7 91808