FI79298B - Nytt foerfarande foer framstaellning av -glutamyltaurin. - Google Patents

Description

1 79298

Uusi menetelmä ^-glutamyylitauriinin valmistamiseksi

Esillä oleva keksintö koskee uutta menetelmää, jolla valmistetaan biologisesti aktiivista ^-L-glutamyyli-5 tauriinia, jolla on kaava I

H0N-CH-COOH 2 I

CH- I

I 2 CH~ I 2

10 C0-NH-CH2-CH2S020H

sen enantiomeeriä (kaavan I mukaista -D-glutamyylitau-riinia), näiden kahden yhdisteen raseemista seosta (kaavan 15 I mukaista ^-DL-glutamyylitauriinia) ja niiden farmakologisesti käyttökelpoisia suoloja. Uusi synteesi on yksinkertaisempi ja tehokkaampi kuin tunnetut menetelmät.

Eräässä Chinoinin aikaisemmassa patenttijulkaisussa ^HU-patenttijulkaisu 174 114 = DE-hakemusjulkai-20 su 2 518 160.0^7 on kuvattu useita synteesejä ^-glutamyy-litauriinin valmistamiseksi. Yhteistä näille synteeseillä : on tauriinin asyloiva liittäminen sen jälkeen, kun se on muutettu aktiiviksi johdannaiseksi, esim. aktiiviesteri-johdannaiseksi. Tämä yhdiste on glutamiinihapon y-puo-25 liesterijohdannainen, jossa glutamiinihapon aminoryhmä on suojattu, esim. bentsyylioksikarbonyyliglutamiinihapon oC-bentsyyliesteri.

Esillä olevan keksinnön kohteena on synteettinen menetelmä, jolla ^-glutamyylitauriinia voidaan valmis-30 taa tunnettuihin menetelmiin verrattuna yksinkertaisemmin, ‘ lyhyemmässä ajassa ja vähäisemmin kemikaalein ja parem- min saannoin.

Menetelmän mukaisesti kaavan II

35 h2n-ch2-ch2-so2oh II

mukainen tauriini asyloidaan ftalyyliglutamiinihappo-anhydridillä, jolla on kaava III

2 79298

O O

c c

(Qj^ ^^^N-CH \0 III

5 η I I

O CH- C.

Näin saadusta ftalyyli- T'-glutamyylitauriinista, jolla on

10 kaava IV

O

II

IV

--- ^ N-CH-COOH

15 V

tl ' 2 O <fH2

C0-NH-CH2-CH2-S020H

20 poistetaan suojaryhmä ja saadaan siten haluttu kaavan I mukainen yhdiste.

Keksinnön mukainen menetelmä toteutetaan siten, että kaavan III mukainen ftalyyliglutamiinihappoanhydridi ^F. E. King, D. A. A. Kidd, J. Chem. Soc. (1949) s. 3315? 25 saatetaan reagoimaan liuoksessa kaavan II mukaisen tau- riinin kanssa. Liuottimena käytetään edullisesti orgaanista liuotinta. Kun lisätään happoa sitovaksi aineeksi emästä, tapahtuu reaktio paremmin. Muodostunut kaavan IV mukainen ftalyyli-y'-glutamyylitauriini saatetaan reagoimaan 30 ftalyyliryhmän poistamiseen sopivan aineen, tarkoituksenmukaisesti hydratsiinihydraatin kanssa (Chem. Ber. 83, s. 246) ja saadaan 7"“9lutamyylitauriini (I). Tuote uudel-leenkiteytetään ja/tai puhdistetaan ioninvaihtokromato-grafiällä ja muutetaan haluttaessa suolaksi.

35 Keksinnön mukaisessa menetelmässä tauriinin vapaa aminoryhmä liitetään N-ftalyyli-l-glutamyylianhydridiin.

3 79298

Esimerkiksi julkaisusta J. of Med. Chem. Voi 25, s, 1019 on tunnettua, että sellaisten aminohappojen kuin esimerkiksi 4-aminobutyyrihapon aminoryhmät ovat reaktiivisem-pia kuin aryyliamiinijohdannaisten kuten esim. 4-nitro-5 aniliini-3-rikkihapon (vrt. DE-A-2 333 798) aminoryhmät. Tästä syystä ensin mainitussa julkaisussa kuvatussa menetelmässä aminohapot suojataan trimetyylisilyylijohdannai-sinaan ennen reaktiota N-ftalyyli-l-glutamyylianhydridin kanssa, kun sen sijaan julkaisun DE-A 2 333 798 mukaan 10 4-nitroaniliini~3-rikkihappoa ei suojattu. Koska keksinnön mukaisessa menetelmässä lähtöaineena käytettävä tauriini on rakenteeltaan läheinen 4-aminobutyyrihapolle, on näistä julkaisuista tunnetun tekniikan perusteella odottamatonta, että se voidaan ilman suojausta saattaa reagoimaan 15 N-ftalyyli-l-glutamyylianhydridin kanssa siten, että haluttua tuotetta saadaan suurin saannoin.

Seuraavassa luetellaan uuden menetelmän edut verrattuna menetelmiin, joilla 7'“L_glutamyylitauriinia on aikaisemmin valmistettu.

20 Gluatmiinihaposta saadaan lyhyellä 4-vaiheisella synteesillä y>_glutarniinitauriinia· Aikaisemmat menetel-'·>* ‘ mät olivat 6-vaiheisia tai vielä useampivaiheisia syn- teesejä.

Glutamiinihaposta lähtevä synteesi käsittää noin *:* 25 puolet siitä toimenpiteiden määrästä ja kestää noin puo- let siitä työtuntimäärästä kuin yksinkertaisin aikaisemmista menetelmistä.

Käytetään olennaisesti vähemmän kemikaaleja kuin taloudellisimmassa aikaisemmassa menetelmässä.

30 Uuden synteettisen menetelmän mukaisesti saadaan glutamiinihaposta ^“Cflutamyylitauriinia 32 % :n kokonais-saannolla. Tämä saanto on yleisesti paljon parempi kuin aikaisemmissa menetelmissä glutamiinihaposta laskien.

: ; Lisää yksityiskohtia on esitetty seuraavissa esi- . 35 merkeissä rajoittamatta suojapiiriä näihin esimerkkei- ·;· hin.

4 79298

Esimerkki 1 3,05 g:aan (11 mmol) ftalyyli-L-glutamiinihappo-anhydridiä lisätään 15 ml vedetöntä asetonitriiliä. Muodostunut suspensio jäähdytetään 0°C:seen ja siihen lisä-5 tään tipoittain ja sekoittaen liuos, jonka muodostaa 1,25 g (10 mmol) tauriinia 2,56 ml:ssa (20 mmol) tetra-metyyliguanidiinia, ja 5 ml:ssa asetonitriiliä. Liuosta sekoitetaan sitten 30 minuuttia 0°C:ssa ja vielä 30 minuuttia 20°C:ssa. Sekoittamisen lopettamisen jälkeen sus-10 pensio kirkastuu. Reaktioseokseen lisätään 1,4 ml (20 mmol) 70 %:ista hydratsiinihydraattia ja 10 ml etanolia. Liuoksen annetaan seistä huoneen lämmössä yli yön ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan 50 ml:aan vettä ja lisätään 1,2 ml jääetikkaa. Erottunut ftalyyli-15 hydratsiini poistetaan suodattamalla tai linkoamalla.

Puhtaan liuoksen pH säädetään arvoon 2,5 lisäämällä muurahaishappoa. Liuos viedään 2,2 x 40 cm:n Dowex 50Wx2/ 100-200 mesh/pylvään H+-vaiheeseen, joka pylväs on etukäteen tasapainotettu muurahaishappo/etikkahappo/vesi-seok-20 sella, jonka tilavuussuhde on 1:4:45 (pH noin 2,1). Elu-oidaan samalla muurahaishappo/etikkahappo-liuoksella. Jo näytteen viennin alusta lähtien kerätään eluaattia ja lopetetaan sen jälkeen kun näytteen vienti on lopetettu ja eluaattia on tullut 160 ml. Liuos haihdutetaan alennetus-25 sa paineessa. Kiteinen jäännös kuivataan eksikkaattorissa lipeällä ja uudelleenkiteytetään dimetyyliformamidin ja veden 8:2 tilavuussuhteisesta seoksesta. Emäliuos haihdutetaan ja myös niin saatu jäännös uudelleenkiteytetään.

Nämä kaksi kiteistä tuotetta yhdistetään. Saadaan 1,85 g 30 T- L-glutamyylitauriinia (73 %) .

Sulamispiste: 222-223°C. = +20,3° (vesi, c 3,6).

Paperielektroforeettinen liikkuvuus pH:ssa 6,5 verrattuna kysteiinihappoon: 0,73; pH :ssa 2 0,53. Paperikromatogra-finen R^-arvo: 0,19 (butanoli/pyridiini/jääetikka/vesi = 35 15:10:3:12).

5 79298

Analyysi kaavalle C7Hi4N2^6S (254,26) laskettu: C 33,07 %, H 5,55 %, N 11,02 %, 0 37,75 %, S 12,61 % saatu: C 33,11 %, H 5,71 %, N 10,97 %, 0 37,58 %, 5 S 12,76 %.

Esimerkki 2 3.05 g (11 mmol) ftalyvli-D-glutamiinihappoanhyd-ridiä saatetaan reagoimaan esimerkin 1 mukaisesti 1,25 g (10 mmol) kanssa tauriinia. Saadaan 1,80 g ^-D-gluta- 10 myylitauriinia (71 %). Sulamispiste: 220-222°C.

- -20,4° (vesi, c 5,1).

Esimerkki 3 3.05 g (11 mmol) ftalvyli-DL-glutamiinihappoan-hydridiä saatetaan reagoimaan esimerkin 1 mukaisesti 15 1,25 g:n (10 mmol) kanssa tauriinia. Saadaan 1,88 g y^-DL-glutamyvlitauriinia (74 %). Sulamispiste: 209-212°C.

Claims (3)

6 79298

1. Uusi menetelmä kaavan I 5 H-N-CH-COOH

2 I CH~ I I * CH, I 2 C0-NH-CH2-CH2-S020H 10 mukaisen ^-glutamyylitauriinin kahden enantiomeerin, niiden raseemisen seoksen ja niiden farmaseuttisesti käyttökelpoisten suolojen valmistamiseksi, tunnettu 15 siitä, että tauriini, jolla on kaava II h2n-ch2-ch2-so2oh II saatetaan reagoimaan ftalyyli^ta^inihaPPOa^Y^^i11 20 kanssa, jolla on kaava ΙΠ g C 25 Il ' c

0 CH, / f -glutamyylitauriinista, 30 ja muodostuneesta ftalyyl1 jolla on kaava IV 7 79298 O II ___IV <r>r~ s n-ch-cooh 5 ©L--c^ άΐ- Il 1 2 O ?H2 C0-NH-CH2-CH2-S020H 10 poistetaan ftalyylisuojaryhmä ja haluttaessa muutetaan saadut kaavan I mukaiset yhdisteet suolaksi.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaavojen II ja III mukaisten yhdisteiden välinen reaktio saatetaan tapahtumaan happoa 15 sitovan aineen läsnäollessa ja suojaryhmä poistetaan sopivalla aineella, edullisesti hydratsiinihydraatilla. 8 79298