FI78482C - Foerfarande foer framstaellning av ett nytt terapeutiskt anvaendbart (6-(3-pyridyl)-1,2-dihydro-4h-pyrrolo /1,2-c/-1,3-tiazin-8-karboxiamid. - Google Patents

Description

Menetelmä uuden, terapeuttisesti käyttökelpoisen (6-(3- pyridyyli)-1,2-dihydro-4H-pyrrolo/l,2-c)-l,3-tiatsiini-8- karboksiamidin valmistamiseksi i 73482 5 Jakamalla erotettu hakemuksesta 840107 (Patentti 76578)

Keksinnön kohteena on menetelmä uuden (6-(3-py-ridyyli)-1,2-dihydro-4H-pyrrolo^l,2-c)-l,3-tiatsiini-8-karboksiamidin valmistamiseksi, jonka kaava on I

10 conh2

is \=J

Keksinnön kohteena on myös menetelmä kaavan I mukaisen yhdisteen happoadditiosuolojen valmistamiseksi.

Uudella yleisen kaavan I mukaisella yhdisteellä ja sen suoloilla on mielenkiintoisia farmakologisia omi-20 naisuuksia, jotka tekevät ne hyödyllisiksi hoidettaessa ja ennaltaehkäistäessä veritulppia.

Kaavan I mukainen yhdiste valmistetaan kondensoi-malla 2-klooriakryyliamidi, jonka kaava on III

Cl O

I II

25 CH2=C—CNH2 III

N-nikotinyyli-3,4,5,6-tetrahydro-2H-l,3-tiatsin-4-karbok-syylihapon kanssa, jonka kaava on II

30 ^χ/COOH

S N n-n II

^ C0-\ 35 minkä jälkeen näin saatu yhdiste eristetään ja haluttaes sa muutetaan happoadditiosuolaksi.

2 78482

Reaktio toteutetaan yleensä etikkahappoanhydridissä kuumentamalla lämpötilassa 80 - 130 °C.

Kaavan (I) mukainen uusi yhdiste voidaan puhdistaa tavanomaisilla tunnetuilla menetelmillä, esimerkiksi kiteyt-5 tämällä, kromatografiällä tai peräkkäisillä uutoksilla happamassa ja emäksisessä ympäristössä.

Kaavan (I) mukainen uusi yhdiste voidaan muuttaa hap-poadditiosuoloiksi orgaanisessa liuottimessa kuten alkoholissa, ketonissa, eetterissä tai klooratussa liuottimessa.

10 Muodostunut suola saostuu mahdollisesti konsentroimalla liuoksesta; se erotetaan dekantoimalla tai suodattamalla.

Esimerkkeinä farmaseuttisesti hyväksyttävistä suoloista voidaan mainita additiosuolat epäorgaanisten happojen kanssa, kuten hydrokloridit, sulfaatit, nitraatit, 15 fosfaatit tai orgaanisten happojen kanssa, kuten asetaa-tit, propionaatit, sukkinaatit, bentsoaatit, fumaraatit, malaatit, metaanisulfonaatit, isotionaatit, teofylliini-asetaatit, salisylaatit, fenolftalinaatit, metyleeni-bis-β-oksinaftoaatit tai näiden yhdisteiden substituutiojoh-20 dannaiset.

Uutta kaavan (I) mukaista yhdistettä ja sen suoloja voidaan käyttää lääkkeinä sellaisenaan tai farmaseuttisesti hyväksyttävinä suoloina, eli ei-toksisina käyttöannoksina.

Ne ovat osoittautuneet vaikuttaviksi alle 50 mg/1 25 konsentraatioissa mitattaessa niiden inhiboivaa vaikutusta in vitro kollageenin indusoimassa trombosyyttien aggregaa-tiokokeessa menetelmällä, jonka ovat kuvanneet BORN G.V.R. et ai. £j.Physiol., 168, 178 (1963)J.

Kaavan (I) mukaisella uudella yhdisteellä ja sen suo-30 loilla on lisäksi vähäinen toksisuus. Niiden LD^q on yleensä 200 - 900 mg/kg suun kautta nautittuna hiirillä.

Biologiset kokeet Määritettiin uuden yhdisteen inhiboiva vaikutus in vitro kollageenin indusoimassa trombosyyttien aggregaatio-35 kokeessa menetelmällä, joka on kuvattu julkaisussa Born, G.V.R. et ai., J. Physiol. 168, 178 (1963). Lisäksi määritettiin yhdisteen toksisuus. Saatiin seuraavat tulokset: 3 78482

Toksisuus (hiiri) Kollageenilla indusoitu

Dl,-n (mg/kg p.o.) aggregaatio (kaniini)

Cl50 (mg/1) 300 - 900 2,2 5 __

Seuraava esimerkki osoittaa kuinka keksintö voidaan toteuttaa käytännössä.

Esimerkki 10 Suspensiota, jossa on 21,5 g N-nikotinyyli-3,4,5,6- tetrahydro-(2H)-1,3-tiatsin-4-karboksyylihappoa ja 32 g 2- 3 klooriakrylamidia 250 cm :ssä etikkahappoanhydridiä, kuumennetaan noin 75 °C:een lämpötilassa 15 minuuttia, sitten noin 95 °C:een lämpötilassa tunnin ajan. Saatu suspensio 15 jäähdytetään noin 4 °C:een tunnin ajaksi ja kiteet erote- 3 taan suodattamalla, pestään 3 kertaa kaikkiaan 15 cm :llä 3 etikkahappoanhydridiä, sitten 3 kertaa kaikkiaan 45 cm :llä dietyylieetteriä ja kuivataan alennetussa paineessa (20 mm Hg; 2,7 kPa) noin 20 °C:een lämpötilassa tabletteina olevan 20 kaliumhydroksidin läsnäollessa. Näin saadaan 16,1 g yhdis- 3 tettä. Tämä yhdiste liuotetaan 750 cm :iin tislattua vettä noin 45 °C:een lämpötilassa, sitten saadun liuoksen pH säädetään noin 8:aan lisäämällä natriumbikarbonaattia. Saatu suspensio jäähdytetään noin 4 °C:een 70 minuutiksi ja ki- 25 teet erotetaan suodattamalla, pestään 3 kertaa kaikkiaan 3 3 240 cm :llä tislattua vettä, 3 kertaa kaikkiaan 10 cm :llä 3 etanolia ja 3 kertaa kaikkiaan 30 cm :llä dietyylieetteriä ja kuivataan alennetussa paineessa (20 mm Hg; 2,7 kPa) noin 20 °C:een lämpötilassa tabletteina olevan kaliumhydroksi-30 din läsnäollessa. Näin saadaan 12,9 g yhdistettä, joka sulaa 220 °C:ssa. Tämä yhdiste, yhdistettynä 1,3 g;aan edellisellä kerralla valmistettua yhdistettä, liuotetaan 800 3 cm :iin kiehuvaa etanolia. Saatuun liuokseen lisätään 0,5 g aktiivihiiltä ja suodatetaan kuumana; suodos jäähdytetään 35 noin 4 °C:een 1 tunniksi. Muodostuneet kiteet erotetaan suodattamalla, pestään 3 kertaa kaikkiaan 60 emeillä noin 4 °C: 3 een jäähdytettyä etanolia, sitten 3 kertaa kaikkiaan 60 cm : 4 78482 llä dietyylieetteriä ja kuivataan alennetussa paineessa (20 mm Hg; 2,7 kPa) noin 20 °C:een lämpötilassa tabletteina olevan kaliumhydroksidin läsnäollessa. Näin saadaan 12,6 g 6-(3-pyridyyli)-1,2-dihydro-4H-pyrrolo£l,2-q7~1,3-tiatsin-8-5 karboksamidia valkoisina kiteinä 220 °C:ssa.

2-klooriakrylamidia voidaan valmistaa S.S. Ivanov' in ja M.M. Koton'in mukaan, J. Gen. Chem. USSR., 28, 139, (1959); Chem. Abstr. 52, 12757 d, (1958).

N-nikotinyyli-3,4,5,6-tetrahydro-2H-l,3-tiatsin-4-10 karboksyylihappoa voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: Liuosta, jossa on 37,8 g etyyli-N-nikotinyyli-3,4, 5,6-tetrahydro-(2H)-1,3-tiatsin-4-karboksylaattia seokses- 3 sa, jossa on 80 cm 5N natriumhydroksidin vesiliuosta ja 80 cm'* etanolia, sekoitetaan noin 20 °C:een lämpötilassa 15 16 tuntia. Liuotin haihdutetaan sitten alennetussa painees sa (20 mm Hg; 2,7 kPa) noin 50 °C:een lämpötilassa. Jäännös liuotetaan 100 cm :iin tislattua vettä ja puhdistetaan valuttamalla saatu liuos halkaisijaltaan 4,5 cm:n suuruisen pylvään läpi, jossa on 630 g D0WEX 50 WX-2 (50 - 100 mesh) 3 20 hartsia. Eluoidaan 4000 cm :llä tislattua vettä, sitten 1000 3 cm :llä veden ja metanolin seosta (50-50 tilavuuksina), sit- 3 3 ten 2000 cm :llä metanolia, sitten 2000 cm :llä tislattua vettä. Kaikki vastaavat fraktiot heitetään pois. Seuraavat 6 fraktiota, jotka saadaan eluoimalla 2 %:lla pyridiinin ve-25 siliuoksella, yhdistetään, konsentroidaan alennetussa paineessa (20 mm Hg; 2,7 kPa) noin 50 °C:een lämpötilassa. Jään- 3 nös liuotetaan 150 cm :iin etanolia ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa (20 mm Hg; 2,7 kPa) noin 50 °C: een lämpötilassa. Tämä toistetaan 1 kerran. Lopuksi saatu 30 jäännös liuotetaan 350 cm :iin kiehuvan etanolin ja veden seokseen (60-40 tilavuuksina). Saatuun liuokseen lisätään 0,5 g aktiivihiiltä ja suodatetaan kuumana; suodos jäähdytetään noin 4 °C:een lämpötilaan 1 tunniksi. Muodostuneet kiteet erotetaan suodattamalla, pestään 3 kertaa kaikkiaan 3 35 60 cm :llä etanolin ja veden seosta (60-40 tilavuuksina), 3 sitten 3 kertaa kaikkiaan 60 cm :11a etanolia ja kuivataan alennetussa paineessa (20 mm Hg; 2,7 kPa) noin 20 °C:een 5 78482 lämpötilassa tabletteina olevan kaliumhydroksidin läsnäollessa. Näin saadaan 24,2 g N-nikotinyyli-3,4,5,6-tetrahydro-(2H)-1,3-tiatsin-4-karboksyylihappoa valkoisina kiteinä, jotka sulavat 214 °C:ssa.

5 Etyyli-N-nikotinyyli-3,4,5,6-tetrahydro-(2H)-1,3- tiatsin-4-karboksylaattia voidaan valmistaa seuraavalla tavalla :

Suspensioon, jossa on 37,2 g etyyli-3,4,5,6-tetrahydro- (2H)-l,3-tiatsin-4-karboksylaattia 350 cm^:ssä kloro-10 formia, lisätään 15 minuutin aikana noin 20 °C:een lämpöti- 3 lassa seos, jossa on 75 g trietyyliamiinia ja 100 cm kloroformia. Näin saatuun liuokseen lisätään 10 minuutin aikana noin 20 °C:een lämpötilassa 50,4 g nikotinyylikloridin hydrokloridia. Reaktioseosta kuumennetaan noin 65 °C:een 15 lämpötilassa 1 tunti 45 minuuttia, sitten sekoitetaan noin 20 °C:een lämpötilassa 16 tunnin ajan. Reaktioseos pestään 3 3 kertaa kaikkiaan 600 cm :llä tislattua vettä, sitten 3 3 kertaa kaikkiaan 600 cm :llä kyllästettyä kaliumbikarbonaa-tin vesiliuosta, kuivataan vedettömän magnesiumsulfaatin 20 päällä, lisätään 0,5 g aktiivihiiltä, suodatetaan ja konsentroidaan kuiviin alennetussa paineessa (20 mm Hg; 2,7 kPa) noin 50 °C:een lämpötilassa. Näin saadaan 52 g yhdistettä. Tämä yhdiste kromatografoidaan halkaisijaltaan 5,2 cm:n suuruisella pylväällä, joka sisältää 520 g silikagee- 3 25 liä (0,063 - 0,2 mm) ja kerätään 500 cm fraktioita. Ensimmäinen fraktio, joka saadaan eluoimalla sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seoksella (50-50 tilavuuksina) heitetään pois. 3 seuraavaa fraktiota, jotka saadaan eluoimalla etyyliasetaatin ja sykloheksaanin seoksella (50-50 tilavuuksi-30 na), kaksi seuraavaa fraktiota, jotka saadaan eluoimalla etyyliasetaatin ja sykloheksaanin seoksella (70-30 tilavuuksina) ja seuraava fraktio, joka saadaan eluoimalla etyyliasetaatin ja sykloheksaanin seoksella (80-20 tilavuuksina) yhdistetään ja konsentroidaan kuiviin alennetussa paineessa 35 (20 mm Hg; 2,7 kPa) noin 50 °C:een lämpötilassa. Näin saa daan 37,8 g etyyli-N-nikotinyyli-3,4,5,6-tetrahydro-(2H)- 1,3-tiatsin-4-karboksylaattia keltaisena öljynä. /Rf = 0,33; 6 78482 silikageeliohutkerroskromatografia; liuotin: etyyliasetaat-ti-sykloheksaani (80-20 tilavuuksina)^.

Etyyli-3,4,5,6-tetrahydro-(2H)-1,3-tiatsin-4-karb-oksylaattia voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: 5 Kyllästetään 4 tunnin ajan noin 20 °C:een lämpötilas sa 47,7 g 3,4,5,6-tetrahydro-(2H)-1,3-tiatsin-4-karboksyy- 3 lihappoa 650 cm :ssä etanolia kuivan kloonvetyhappovirran avulla. Suspensiota sekoitetaan 3 päivää noin 20 °C:een lämpötilassa, sitten kuumennetaan sekoittaen noin 80 °C:een 10 lämpötilassa 3 tuntia ja 20 minuuttia. Kun saatu liuos on jäähdytetty noin 4 °C:een lämpötilaan, muodostuneet kiteet 3 erotetaan suodattamalla, pestään 3 kertaa kaikkiaan 30 cm : llä noin 4 °C:een lämpötilaan jäähdytettyä etanolia, sitten 3 kertaa kaikkiaan 120 cm^:llä dietyylieetteriä ja kuiva-15 taan alennetussa paineessa (20 mm Hg; 2,7 kPa) noin 20 °C: een lämpötilassa tabletteina olevan kaliumhydroksidin läsnäollessa. Näin saadaan 37,2 g etyyli-3,4,5,6-(2H)-1,3-tiatsin-4-karboksylaattia valkoisina kiteinä, jotka sulavat 185 °C:ssa.

20 3,4,5,6-tetrahydro-(2H)-1,3-tiatsin-4-karboksyylihap- poa voidaan valmistaa J.J. Wriston, Jr.:n ja C.G. Mackenzie, J.Biol.Chem., 225, 607 (1957).

Claims (1)

1. Menetelmä uuden, terapeuttisesti käyttökelpoisen (6-(3-pyridyyli)-1,2-dihydro-4H-pyrrolo£l,3-tiat- 5 siini-8-karboksiamidin valmistamiseksi, jonka kaava on I 7 78482 Patenttivaatimus conh2 10 ---1-\_/ ja sen happoadditiosuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 2-klooriakryyliamidi, jonka kaa-15 va on III Cl 0 I II CH2=C—CNH2 III kondensoidaan N-nikotinyyli-3,4,5,6-tetrahydro-2H-l,3-20 tiatsin-4-karboksyylihapon kanssa, jonka kaava on II COOH S N- η N 11 25 ^CO-A ^ minkä jälkeen näin saatu yhdiste eristetään ja haluttaessa muutetaan happoadditiosuolaksi.