FI78083B - Foerfarande foer framstaellning av (+)-(4r,6s)-(e)-6-/2-(4'-fluor-3,3',5-trimetyl-/1,1'-bifenyl/-2-yl)etenyl /-3,4,5,6-tetrahydro-4-hydroxi-2h-pyran-2-on. - Google Patents

Description

78083

Menetelmä ( + ) — (4R, 6S)-(E)-6-/T- (4'-fluori-3,3',5-tri-metyyli-/T, 1' -bifenyf7-2-yyli) etenyyl£7-3,4,5,6-tetra-hydro-4-hydroksi-2H-pyraani-2-onin valmistamiseksi 5 Keksintö koskee menetelmää hypokolesteroleemisen ja hypolipeemisen (+)-(4R, 6S)-(E)-6-/J-(4'-fluori-3,3',5-trimetyyli-^ 1' -bifenyT7-2-yyli) etenyylf7-3,4,5,6-tetra-hydro-4-hydroksi-2H-pyran-2-onin valmistamiseksi, jolla on kaava (III)

10 H

CH3 SC0 ! T^H F * 15 r il i I CH, (m) / 3 20 CH3

Kaavan III mukaisen 4(R)-trans-laktonin kokonais-synteesi on esitetty seuraavassa synteesikaaviossa. Syntee-sikaavion kunkin vaiheen numero vastaa kaavion jälkeen esi- 25 tetyn menetelmän kuvauksen ja esimerkin numerointia. Vaiheet 5-9 edustavat keksinnön mukaista uutta valmistusmenetelmää.

O

CHO jL

1 CH-. I

Cv^ 3 /L .^CH3 \] Vaihe Y |1 Vaihe 2 35 ' li CH- 1 CH3 2 78083 CH3 CH0

5 AcQ^ , Vaihe 3<, i I

XP<£ I CH,--^

/ Y Y I

' ks X ch,

/-7 I

7 CH0 10 — 3 J 2

Vaihe 4

V

Y'C°2CH! CH3 CHO

15 CH3 J>H

i ' f CH, UJLAv^H3 ^ 3 j^ij CH3 CH3

I Vaihe 6 ST

25 HO - H0V^/°

OO-CH- I

?"> X^« ? v F I 1 ., 7 F\ yk, J Vaihe X Γ Vaihe 8 I L /Cii3 ' CH3 H3 i< 35 3 78083 CH3 . / ho*. ^ --1 Vaihe 9 H0\ , U 1 ' J3 J *j 5 r i! f' CH L o ^ .;'VCH3 \ I i T Ox/Cch3 tH3 1 y io iH3 111

Reaktiokaavion vaiheet 1. Reaktio aniliinin kanssa kiehuvassa tolueenissa.

2. Reaktio palladium(II)asetaatin kanssa kiehuvas- 15 sa etikkahapossa.

3. Reaktio substituoidun Grignard-reagenssin CH3 F —(/ y- MgBr 20 kanssa sopivassa liuottimessa, kuten bentseenissä tai tolueenissa trifenyylifosfiinin läsnäollessa, minkä jälkeen hydrolysointi 6 N HCl:lla ympäristön lämpötilassa.

25 4. Aldol-reaktio a) Tavanomainen Aldol-synteesi, jossa asetaldehydiä kondensoidaan bentsaldehydin kanssa, saatava ^-hydroksi-aldehydi asetyloidaan etikkahappoanhydridin avulla ja etik-kahappo poistetaan termisesti, jolloin saadaan vastaava 30 kanelialdehydi.

b) Mukaeltu Aldol-kondensaatio, jossa sopivasti N-substituoidun etylidenyyli-imiinin, kuten esimerkiksi etyli-deenisykloheksyyli-imiinin, anionia kondensoidaan bentsaldehydin kanssa huoneen lämpötilassa tai viileämmässä aproot- 35 tisessa liuottimessa, kuten esimerkiksi THFtssa, jolloin saadaan p-hydroksi-^-fenyylipropylidenyyli-imiini, joka sa- 4 78083 manaikaisen dehydratoinnin ja imiinin hydrolyysin tapahtuessa happamissa olosuhteissa, kun laimeassa HCl:ssa, muodostaa vastaavaa kanelialdehydiä.

c) Asetaldehydiä vastaavan nukleofiilisen reagens-5 sin käyttö, jossa cis-2-etoksivinyylilitiumia, joka saadaan cis-l-etoksi-2-tri-n-butyylistannyylietyleenistä, konden-soidaan bentsaldehydin kanssa, jolloin saadaan allyylialko-holia, joka muutetaan, sopivissa happamissa olosuhteissa, vastaavaksi kanelialdehydiksi.

10 5. Dianionivaihe. Reaktio asetetikkahappoesterin di- anionin kanssa sopivassa liuottimessa, kuten esimerkiksi THF:ssa tai dioksaanissa.

6. NaBH^-pelkistys sopivassa liuottimessa, kuten esimerkiksi etanolissa, huoneen lämpötilassa tai viileäm- 15 mässä.

7. Laktonin muodostus. Saippuointi emäksellä (esimerkiksi NaOHslla) alkoholisessa vesiliuoksessa, minkä jälkeen seuraa hapon muodostus ja renkaan sulkeva dehydrointi kuumentamalla tolueenissa ja sen jälkeen cis- ja trans- 20 isomeerien erottaminen kromatografisesti silikageelillä tai kiteyttämällä.

8. Trans-rasemaatin hajoittaminen enantiomeereikseen käsittelemällä (+)-trans-laktonia joko D-(+)- tai L-(-)-X-metyylibentsyyliamiinilla, jolloin muodostuu diastereomeeri- 25 siä dihydroksiamiineja, jotka erotetaan kromatografisesti tai kiteyttämällä.

9. Kunkin puhtaan diastereomeerisen amidin hydroly-sonti emäksisissä olosuhteissa, kuten esimerkiksi etanoli-NaOH-liuoksessa, jolloin saadaan vastaava puhdas dihydrok- 30 sihappoenantiomeeri, josta saadaan muodostamalla laktoni kiehuvassa tolueenissa, puhdas (+)-trans-enantiomeeri. Ste-reokemiallinen rakenne riippuu lähtöaineen olevan diastereomeerisen amidin absoluuttisesta stereokemiallisesta rakenteesta .

35 i 5 78083

Keksinnön mukaisesti valmistettu yhdiste kuuluu yhdisteryhmään, jolla on rakenne (I) v

E

I (I) 10 6 7i2 R1—"Τ' -*2 15 ja vastaavaa dihydroksihappoa, joka syntyy laktonirenkaan auetessa hydrolyyttisesti, sekä mainitun hapon muodostamia farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja.

Viime aikoina ovat Endo et ai. (US-patenttijulkaisut 4 049 495, 4 137 322 ja 3 989 140) kuvanneet käymis- 20 tuotteen, joka vaikuttaa tehokkasti kolesterolin biosynteesiä estävästi, valmistusta. Tämä luonnontuote, jota nyt kutsutaan kompaktiiniksi, on Brownin et ai. mukaan (J. Med. Soc. Perkin I (1976) 1165) rakenteeltaan kompleksinen me-valonolaktoni.

25 Viimeaikaiset US-patenttijulkaisut 4 198 425 ja 4 255 444 sisältävät joukon synteettisiä yhdisteitä, joilla on yleinen kaava (II), äo T 1111 R3 35 J-*2 6 78083 jossa A on -CH^ tai vety, E on suora sidos, ^-alkee- nisidos tai vinyleenisidos ja R:t ovat erilaisia substi-tuentteja.

EP-hakemusjulkaisu 0 024 348 (Merck & Co., Inc.) 5 sisältää samanlaisen ryhmän synteettisiä yhdisteitä, joissa A on vety, ja laktonirenkaan konfiguraatio on (4R)-trans, millä isomeerillä on kaikki erottamattoman cis-trans-laktoniseoksen sisältämä antihyperkolesterolee-minen vaikutus.

10 Tämän hakemuksen mukaisesti valmistettavalla (+)- (4R, 6S)-(E)-6-/f2-(3,3‘, 5-trimetyyli-4 1 - fluori-^ 1,1' -bife-nyl^-2-yyli) etenyyliy-3,4,5,6-tetrahydro-4-hydroksi-2H-pyran- 2-onilla on odottamattoman suuri teho verrattuna yllä mainitun EP-hakemusjulkaisun 0 024 348 sisältämän ryhmän mui-15 hin jäseniin verrattuna ja se on odottomattoman voimakas kolesterolin inhibiittori, jolla on parempi inhibitiokyky kuin kompaktiinilla.

Edellä mainituissa US-patenttijulkaisuissa 4 198 425 ja 4 255 444 ei anneta kaavan (II) mukaisen yh-20 disteen stereokemiallisia tietoja, ainoastaan olettamus, että odottamattoman suuri vaikutuksen voimistuminen saattaa johtua cis- ja trans-rasemaattien erottumisesta ja jälkimmäinen resoluutiosta, erityisesti silloin, kun fe-nyylirengas on edullisesti 2,4,6-trisubstituoitu. Kuiten-25 kin EP-hakemusjulkaisussa 0 024 348 ilmoitetaan, että kaavan (I) mukaisten trans-rasemaattien 4(R)-enantio-meerit ovat erityisen tehokkaita 3-hydroksi-3-metyyli-glutaryyli-koentsyymin A-reduktaasin, jonka tiedetään olevan osallisena kolesterolin biosynteesin reaktiono-30 peutta rajoittavassa vaiheessa, inhibiittoreita.

Keksinnön mukaisesti valmistettu yhdiste, jolla on kaava (III) , on jälkimmäisen ryhmän tehokkain yhdiste. Näiden yhdisteiden kolesterolin biosynteesiä inhiboiva vaikutus on mitattu kahdella menetelmällä. US-pa-35 tenttijulkaisun 4 198 425 mukainen menetelmä A oli H.J. Knaussin et ai. (J. Biol.Chem. 234 (1959) 2835) in vit- I: 7 78083 ro-menetelmä ja aktiivisuus ilmaistiin molaarisena kon-sentraationa IC^q(M), joka aiheuttaa entsyymin aktiivisuuden 50 % inhibition. US-patenttijulkaisun 4 198 425 mukainen menetelmä B oli A.A. Kandutschin et ai.

5 (J. Biol. Chem. 248 (1973) 8403) menetelmä, jolla mita- 14 14 taan C-kolesterolin biosynteesiä C-etikkahaposta hiiren L-soluissa. Aktiivisuus ilmaistaan määränä, joka estää 50 % kolesterolin biosynteesistä.

Näillä kahdella menetelmällä saadut tulokset yh- 10 disteille, joiden kaava on (II) ja joita on kuvattu US- -4 -6 pantettijulkaisuissa, antavat IC^g-arvoja 10 - 10 molemmissa kokeissa. Pienin mainittu 50 % inhibition aiheuttama määrä on noin 4 x 10 kun taas samalla kokeel- — 8 la saatu arvo kompaktiinille on noin 0,8-10 15 EP-hakemusjulkaisu 0 024 348 osoittaa, että in- hibitioteho kasvaa suuresti, kun isomeerit erotetaan, erityisesti, kun lisäksi valitaan optimaalinen R^:n, 1*2 :n ja R^:n 2,4,6-järjestys kaavan (II) mukaisen yhdisteen fenyylirenkaassa, ja erityisesti, kun A on vety ja 20 E on trans-CH=CH-.Täten 6-/3"(2,4-dikloori-6-(fenyyli-metoksi)fenyyli)etyyli/-3,4,5,6-tetrahydro-4-hydroksi-2H-pyran-2-onin (+)-trans-isomeerilla on IC^^-arvo 6,8 x 10 ® menetelmän A mukaisessa kokeessa. Vielä tehokkaampi yhdiste on (E)-6-/T-(3,5-dikloori-4'-fluori-25 /2 f 1'-bifenyl—2-yyli)etenyyli7-3,4,5,6-tetrahydro-4- hydroksi-2H-pyran-2-onin (+)-trans-isomeeri, ja tämän keksinnön mukainen yhdiste, (E)-6-/2-(4'-fluori-3,31,5-trimetyyli-/'!, 1' -bifenyl7-2-yyli) etenyyli^-3,4,5,6-tet-rahydro-4-hydroksi-2H-pyran-2-onin (+)-trans-isomeeri 30 on moninkerroin tehokkaampi.

Yhdisteet tutkittiin vastaavien dihydroksihap-pojen natriumsuoloina. Keksinnön mukaisesti valmistetun yhdisteen lisäetuna on se, että niillä ei ole kloo-risubstituentteja. Vaikka yhdisteen metaboliaa ei täy-35 dellisesti tunneta, ei ole edullista käyttää yhdis- 8 78083 tettä, joka saattaa muodostaa polykloorifenyyliä (PCB), minkä ryhmän aineet tiedetään karsiogeenisiksi.

Keksinnön mukaisesti valmistettua yhdistettä voidaan käyttää lääkevalmisteissa yhdessä farmaseuttisesti 5 kanto- tai laimennusaineiden kanssa. Lääkevalmisteet voidaan formuloida tavanomaisesti käyttäen kiinteitä tai nestemäisiä kanto- tai laimennusaineita, sekä farmaseuttisia lisäaineita, halutun antotavan mukaisesti. Yhdisteet voidaan antaa suun kautta, esimerkiksi tab-10 letteinä, kapseleina, rakeina tai jauheina, tai paren-teraalisesti injektiovalmisteina. Annettava annos riippuu kokonaisannostuksesta, oireista ja potilaan iästä ja painosta. Aikuisille annettava annos on edullisesti 200 - 2000 mg/päivä, joka voidaan antaa kerralla tai 15 1-4 yksittäisannoksena päivässä.

Tyypillinen suun kautta annettava kapseli sisältää aktiivista ainetta (250 mg), laktoosia (75 mg) ja magnesiumstearaattia (15 mg). Seos seulotaan 60 meshin seulalla ja pakataan gelatiinikapseliin no. 1.

20 Tyypillinen injektiovalmiste tehdään pakkaamal la aseptisesti 250 mg steriiliä aktiivista ainetta pulloon, pakastekuivaamalla aseptisesti ja sulkemalla pullo. Käyttöä varten pullon sisältö sekoitetaan fysiologiseen suolaliuokseen (2 ml), jolloin saadaan injek-25 tioliuos.

Keksinnön mukaisesti valmistettu yhdiste on käyttökelpoinen myös sienten vastaisena aineena. Sitä voidaan käyttää esimerkiksi Penicillum sp-, Aspergillus niger-, Cladosporium sp-, Cochliobolus miyabeonus-30 ja Milminthosporium cynodnotis -lajien vastaisena aineena. Tätä tarkoitusta varten se sekoitetaan sopiviin formulointiaineisiin, jauheisiin, emulgaattoreihin tai liuottimiin, kuten etanoli-vesi-seokseen ja suihkutetaan ja levitetään jauheena käsiteltäville kasveille.

35 Keksintöä kuvaavat seuravat esimerkit, joissa liuo- l; 9 78083 tinsuhteet on annettu tilavuuksina ja prosentteina, ellei toisin ole mainittu, tai painomittoina.

Esimerkki (+)-(4R, 6S)-(E)-6-/7-(4'-fluori-3,31,5-trimetyyli-^l,1-bi-5 feny!7-2-yyli)etenyyli.7-3,4,5,6-tetrahydro-4-hydroksi-2H- pyran-2-oni_

Vaihe 1: N-ZJ2,4-dimetyylifenyyli)metyleenT7bentsamiinin valmistus 2,4-dimetyylibentsaldehydin (53,7 g, 0,4 mol), juuri 10 tislatun aniliinin (37,5 g, 0,4 mol) ja tolueenin (150 ml) seosta refluksoitiin Dean-Stark-sulkua (atseotrooppista ve-denerotinta) käyttäen 2 h. Liuos jäähdytettiin ja konsentroitiin alipaineessa. Jäännös tislattiin paineessa 0,2 mmHg, jolloin saatiin keltainen öljymäinen tuote (83,3 g, saanto 15 97 %), kp. 122-130°C, joka muuttui kiinteäksi jäähtyessään.

Vaihe 2: Bis/JT-(asetano-0: 0 1) bis (3,5-dime tyyli-2-/jTfenyyli- imino)metyyli7fenyyli-C,B7-dipalladiumin valmistus N-^l2,4-dimetyylifenyyli)metyleeni/bentsamiinin (58,7 g, 0,28 mol) ja palladium(II)asetaatin (62,9 g, 0,28 20 mol) seosta refluksoitiin etikkahapossa (1 1) sekoittaen tunnin ajan. Jäähdytettiin 50°C:n lämpötilaan, suodatettiin ja suodos kaadettiin veteen (4 1). Vesipitoista seosta sekoitettiin yön yli ja suodatettiin. Kiinteä jäännös pestiin moneen kertaan kylmällä vedellä ja kuivattiin monta tuntia 25 imun avulla ja kuivattiin vakuumiuunissa (45°C) 2 päivää, jolloin saatiin haluttu tuote kelta-oranssina kiinteänä aineena(101,3 g, saanto 97 %).

Vaihe 3: 4'-fluori-3,3',5-trimetyyli-l,1'-bifenyyli-2-karboksialdehydin valmistus 30 Kolmikaulapulloon (1 1), joka oli varustettu mag- neettisauvalla, putkella typen johtamista varten, tiputus-suppilolla (250 ml) ja kuivausputkella suljetulla palautus-jäähdyttäjällä, laitettiin 4,5 g (0,185 mol) magnesiumki-teitä. Laitteistoa lämmitettiin typpi suojakaasuna ja an-35 nettiin sitten jäähtyä huoneen lämpötilaan. 5-bromi-2- 10 78083 fluoritolueeni (35,0 g, 0,185 mol) liuotettiin eetteriin (300 ml) ja 40 ml tätä liuosta lisättiin Mg-kiteiden päälle. Seosta lämmitettiin hieman reaktion alkuun saamiseksi ja loppu eetteriliuos lisättiin sellaisella nopeudella, et-5 tä liuos kiehui koko ajan (1 h). Seosta refluksoitiin sekoittaen vielä 30 min ja jäähdytettiin huoneen lämpötilaan.

Tällä aikaa Pd-kompleksi (45,2 g, 0,06 mol), joka saatiin vaiheessa 2, oli lisätty 3 l:n kolmikaulapullossa olevaan tolueeniin (1 1). Näin saatua seosta sekoitettiin 10 voimakkaasti ja refluksoitiin (1 h) Dean-Stark-sulkua käyttäen vesijäämien poistamiseksi. Seos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan typpi suojakaasuna, trifenyylifosfiini (64,0 g, 0,24 mol) lisättiin ja sekoitettiin 30 min. Grignard-rea-genssi lisättiin tiputussuppilon avulla hitaasti ja tasai-15 sesti, ja reaktioseosta sekoitettiin 1 h. Lisättiin 200 ml 6 N HC1, sekoitettiin vielä lh ja suodatettiin. Kiinteä jäännös pestiin moneen kertaan tolueenilla. Suodos ja pesu-liuokset yhdistettiin ja kerrokset erotettiin. Tolueeni-eetteriliuos pestiin kahdesti 200 ml:lla kyll. suolaliuos-20 ta ja kuivattiin MgSO^slla. Suodattamalla ja haihduttamalla saatiin mustaa öljyä (70 g), joka puhdistettiin kromato-grafisesti 120 mm:n pylväällä (1,5 kg 230-400 mesh silika-geeliä) eluenttina 40 til-% Cl^C^-heksaaniseos. Kerättiin 2 kpl 1000 ml:n fraktioita ja 20 kpl 500 ml:n fraktioita, 25 puhdas tuote oli fraktioissa 5-14. Fraktiot 14-17 sisälsivät haluttua aldehydiä ja 2,4-dimetyylibentsaldehydiä. Tuotetta saatiin kaikkiaan 19-21 g vaaleankeltaisena kiinteänä aineena (saanto 70 %); tuote näkyi yhtenä täplänä TLC-levyllä (Rf = 0,30 Silica Gel GF-levyllä 40 til-% CHjClj-30 heksaaniseos eluenttina), sp. 75-78°C. Puhtaan sublimoidun tuotteen sp. on 78-80°C.

Vaihe 4: 3-(4'-fluori-3,31,5-trimetyyli-^l,1'-bifenyl/-2-yyli-2-propenaalin valmistus

Kuivaan nelikaulapulloon (1 1), joka oli varustettu 35 magneettisauvalla, putkella typen johtamista varten, lämpömittarilla, kuivausputkella suljetulla tiputussuppilolla ja septumkorkilla, lisättiin kuivaan THFsiin (200 ml) liuotet- il 78083 tu (Z)-l-etoksi-2-tributyylistannyylietyleeni (68,5 g, 0,19 mol) ja jäähdytettiin sitten hiilihappojää-asetonihau-teessa. n-butyylilitium (1,48 M heksaaniliuos, 130 ml, 0,19 mol) lisättiin ruiskulla 25 min:n aikana. Sekoitettiin 5 -75°C:ssa 1 h. THF:iin (150 ml) liuotettu 41-fluori-3,3',5- trimetyyli-1,1'-bifenyyli-2-karboksialdehydi (40,7 g, 0,168 mol) lisättiin pisaroittain tunnin aikana -75°C:ssa. Sekoitettiin 10 min, kylmähaude poistettiin ja reaktioseosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 1,5 h. Lisättiin hitaas-10 ti ja tasaisesti kyll. NaHCO^-liuos (150 ml), lisättiin eetteriä (500 ml) ja vettä (500 ml) ja erotettiin kerrokset. Vesikerrosta uutettiin eetterillä kahdesti. Eeetteriuutteet yhdistettiin, pestiin kylmällä vedellä ja kyll. suolaliuoksessa ja kuivattiin MgSO^:llä. Suodatettiin ja haihdutet-15 tiin, jolloin saatiin ruskeankeltaista öljyä (120 g), joka puhdistettiin kromatografisesti silikageelillä (2,6 kg, 230-400 mesh, 140 mm:n kolonni). Eluoitiin Cl^Clj-heksaani-seoksella (tilavuussuhteessa 3:1) 21 fraktiota (1 1 kukin), pääosa tuotteesta oli fraktioissa 11-19. Haihdutuksen jäl-20 keen öljy liuotettiin lämpimään heksaaniin (60 ml); lisättiin kiteytymiskeskuksia ja jäähdytettiin huoneen lämpötilaan, jolloin saatiin valkea kiteinen saostuma (20,6 g), sp. 82-85°C. Fraktiot 9 ja 10 käsiteltiin erikseen ja niistä saatiin heksaanista uudelleen kiteytettynä vielä 3,6 g 25 tuotetta; saatu kokonaismäärä oli 24,2 g (saanto 54 %).

Vaihe 5: Metyyli-(E)-7-(4'-fluori-3,3',5-trjmetyyli-^l,l-bi-fenyj[7-2-yyli) -5-hydroksi-3-okso-6-heptenoaatin valmistus Metyyliasetoasetaatti (12,31 g, 0,106 mol) lisättiin pisaroittain ja sekoittaen kuivaan tetrahydrofuraaniin 30 (180 ml) suspentoituun natriumhydridiin (50 % öljysuspen- sio, 5,09 g, 0,0106 mol) 0°C:ssa (pinnan alle, pitäen lämpötila alle 10°C) ja typpi suojakaasuna. Saatua liuosta sekoitettiin 0°C:ssa 15 min ja käsiteltiin sitten 1,40 M bu-tyylilitiumin heksaaniliuoksella (78,7 ml, 0,106 mol), joka 35 lisättiin pisaroittain 20 min:n aikana ruiskulla. Sekoitettiin 0°C:ssa 20 min, haude vaihdettiin jää-asetonihautee-seen ja sekoitettiin vielä 5 min. Lisättiin kuivaan THFsiin i2 78083 (150 ml) liuotettu 3-(4'-fluori-3,3',5-trimetyyli^l,1-bi-fenyI/-2-yyli-2-propenaali (26,5 g, 0,099 mol) pisaroit-tain 15 min:n aikana, siten että lämpötila pysyi 10°C:ssa. Reaktioseosta sekoitettiin 0°C:ssa 30 min ja lisättiin hi-5 taasti 45 ml 6 N HC1. Seos laimennettiin vedellä (300 ml) ja uutettiin kolmesti eetterillä. Eetteriuutteet yhdistettiin, pestiin kylmällä vedellä ja kyll. suolaliuoksella, kuivattiin MgS04:lla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin keltainen öljy (38 g); näkyi yhtenä täplänä 10 TLC-levyllä (Silica Gel GP), R^-0,49 (5 til-% asetoni- ch2ci2).

Vaihe 6: Metyyli-(E)-(4'-fluori-3,3'5-trimetyyli-^l,1-bi-fenyl/-2-yyli)3,5-dihydroksi-6-heptenoaatin valmistus

Natriumboorihydridi (1,92 g, 0,0507 mol) lisättiin 15 annoksittain 10 minin aikana sekoittaen kylmään (0°C) liuokseen, jossa oli metyyli-(E)-7-(4'-fluori-3,3',5-tri-metyyli^l,11-bifenyl7-2-yyli)-5-hydroksi-3-okso-6-heptenoaat-tia (37,5 g) metanolissa (400 ml). Kirkasta reaktioseosta sekoitettiin 15 min ja laimennettiin sitten vedellä (300 20 ml). Pitäen lämpötila alle 10°C:ssa jäähauteen avulla seos tehtiin happameksi 12 N HClilla (22 ml). Uutettiin kolmesti eetterillä (250 ml kerralla), eetteriuutteet yhdistettiin, pestiin kylmällä vedellä ja kyll. suolaliuoksella, kuivattiin MgSO^illa ja haihdutettiin jäykkäliikkeiseksi öljyksi 25 (38 g). Tuote näkyi yhtenä täplänä TLC-levyllä (Silica Gel GF), R^ = 0,21 (10 til-% asetoni-CH2Cl2-seos).

Vaihe 7; (+)-trans-(E) - 6-^2- (4 1-fluori-3,3',5-trimetyyli- /1,1'-bifenyl/-2-yyli)etenyyli)-3,4,5,6-tetrahydro-4-hydroksi-2H-pyran-2-onin valmistus 30 Metanoliin (150 ml) liuotettua metyyli-(E)-7-(3'- fluori-3,3',5-trimetyyli-^l,1'-bifenyl7-2-yyli)3,5-dihyd-roksi-6-heptenoaatin (37,7 g, 0,0976 mol) ja 1 N natrium-hydroksidin (100 ml, 0,10 mol) seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 15 min. Metanoli poistettiin haihduttamalla 35 (30°C), reaktioseos laimennettiin vedellä (600 ml), tehtiin happameksi väkevällä HClilla ja uutettiin eetterillä (3 x 300 ml). Eetteriuutteet yhdistettiin, pestiin kylmällä ve- i3 7808 3 dellä ja kyll. suolaliuoksella, kuivattiin MgS04:lla ja haihdutettiin, jolloin saatiin kellanoranssi öljy (37 g).

Epäpuhdasta öljymäistä diolihappoa tolueeniin (300 ml) liuotettuna refluksoitiin Dean-Stark-sulun alla 1 h.

5 Haihduttamalla saatiin keltainen öljy (37 g), joka oli cis- ja trans-laktonien seos. Tuote puhdistettiin kromato-grafisesti 140 mm:n kolonnissa (230-400 mesh silikageeli), eluenttina 10 til-% asetoni-CH2“Cl2.

Kun oli kerätty 3 kpl 1 l:n fraktioita ja 25 kpl 10 500 ml:n fraktioita, eluointia jatkettiin 20 til-% asetoni- CH2-Cl2-seoksella ja kerättiin 6 kpl 1 l:n fraktioita, jotka sisälsivät pääasiassa cis-rasemaattia (84 %). 500 ml:n fraktiot 12-15 yhdistettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin trans-rasemaattia vaalean keltaisena öljynä (90 % 15 puhdasta HPLCzlla analysoituna). Tämä kiteytettiin Et20-heksaani-seoksesta, jolloin saatiin kiinteä tuote (5 g), sp. 115-117°C. Fraktiot 16-25 yhdistettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin vaalean keltaista öljyä (12 g), joka oli trans- ja cis-rasemaattien 6:4-seos.

20 Tämä seos (12 g) puhdistettiin uudelleen kromato- grafisesti kahdesti Waters Prep LC500:lla, käyttäen kahta preparatiivista PAK-500 silikapatruunaa sarjassa ja eluoi-den asetoni-C^-C^-seoksella (1:9, tilavuussuhteina). Saatiin 5 g trans-isomeeria ja 4 g cis-isomeeria. Trans-rase-25 maatit, jotka oli kerätty molemmista kromatografisista erotuksista, yhdistettiin valkeaksi kiteiseksi aineeksi (10 g), sp. 115-117°C. Kaikki kromatografisesti ja Waters-erotuksella saadut cis-fraktiot yhdistettiin, jolloin saatiin 9 g tuotetta, joka kiteytyi seisoessaan.

30 Vaihe 8: (3R, 5S)-N-( (S)-c(-metyylibentsyyli)-7-(4 '-fluori- 3,3',5-trimetyyli^l,11-bifenyl7-2-yyli)-3,5-dihydroksi-6-hepteenihappoamidin valmistus THFiiin (35 ml) liuotettua (-)-trans-(E)-6-/T-(4'-fluori-3,3',5-trimetyylisi,1'-bifeny -2-yyli)etenyyli/-35 3,4,5,6-tetrahydro-4-hydroksi-2H-pyran-2-onia (10 g, 28,2 mmol) ja (S)-(-)-o( -metyylibentsyyliamiinia (36,35 ml,24,17 g 282 mmol) sekoitettiin varovasti refluksoiden typen alla 14 780 8 3 16 h. Reaktioseos jäähdytettiin, laimennettiin Etelillä (400 ml) ja pestiin vedellä (2 x 200 ml), 3 N HCl:lla (2 x 300 ml) ja kyll. suolaliuoksella (2 x 200 ml), kuivattiin MgS04:lla ja suodatettiin. Suodos haihdutettiin, 5 jolloin saatiin seos keskenään diastereomeerisiä amideja vaalean kellertävänä kumimaisena aineena.

Jäännös liuotettiin Et20:iin (100 ml) ja käsiteltiin heksaanilla, kunnes liuos sameni. Lisättiin kiteyty-miskeskuksia ja jäähdytettiin 0°C:een. Kiinteä aine, 1,5 g, 10 sp. 110-12°C, kerättiin suodattamalla. Suodos haihdutettiin, jolloin muodostui kumimainen tuote (12 g).

Tämä diastereomeeristen amidien seos puhdistettiin kromatografisesti Waters Prep LC500:lla. Seos erotettiin käyttäen kahta preparatiivista PAK-500/silikapatruunaa sar-15 jassa eluoiden metyleenikloridi-asetoniseoksella (80:20, tilavuussuhde). Seos jaettiin ja eluoitiin kahdessa erässä. Saatiin kaksi diastereomeeriä (1) (4,5 g, sp. 110-12°C) ja (2) (3,5 g, 52,6 % teoreettisesta), sp. 86-9°C. Yhdiste (2), joka on 99 % puhdasta HPLCrlla analysoituna, on haluttu 20 diastereomeeri. (2):n kiteytyksistä saadut emäliuokset yh distettiin (1,9 g, 75 % (2)).

Vaihe 9: ( + )-(4R, 6S) - (E ) -6-j/_2-4 ' -f luori-3,3 ' , 5-trimetyyli- /3”, 1' -bifenyI7-2-yyli) etenyyli/-3,4,5,6-tetrahdyro-4-hyd-roksi-2H-pyran-2-oni 25 Liuosta, jossa oli N-((S)-o< -metyylibentsyyli)-7-(4 ' - fluori-3,31,5-trimetyyli^l,1'-bifenyiy~2-yyli-3,5-dihydroksi- 6-hepteenihappoamidia (3,5 g, 7,35 mmol), diastereomeeri (2) yo. vaiheesta 8, 1 N NaOH (44 ml, 44 mmol) ja H20 (44 ml) EtOH:ssa (300 ml) refluksoitiin typen alla 14 h.

30 Liuotin haihdutettiin alipaineessa (40°C). Jäännös liuotettiin jääveteen (300 ml) ja Etisiin (500 ml), jäähdytettiin ja lisättiin sekoittaen ja hitaasti 3 N HC1 (50 ml). Orgaaninen kerros erotettiin ja pestiin jääkylmällä 1 N HCl:lla (200 ml) ja kyll. suolaliuoksella (2 x 200 ml), 35 kuivattiin MgS04:lla ja suodatettiin. Liuotin haihdutettiin alipaineessa ja jäännös liuotettiin tolueeniin (500 ml) ja refluksoitiin tolueenissa Dean-Stark-sulun alla 2 h.

15 78083

Haihdutettaessa saatiin keltaista öljyä, joka puhdistettiin kromatografisesti 50 mm:n kolonnissa (230-400 mesh silikageeli) eluenttina asetoni-metyleenikloridi (tilavuussuhteessa 10:90) ja keräten 10 ml fraktioita. Tuote 5 oli fraktioissa 19-31, minkä jälkeen eluoitui fraktioita, jotka olivat lievästi kontaminoituneita cis-laktonilla. Vähemmän puhtaat fraktiot yhdistettiin ja haihdutuksen jälkeen rikastettiin kiteyttämällä Et20-heksaanista. Yhdistetty saanto oli 1,6 g, 61 %. Tuote oli 99 % puhdas-10 ta HPLC-analyysin perusteella, sp. 87-9°C.

£*./£5 +40,56° (c = 1,075, CHC13) .

Claims (7)

16 78083 Patenttivaatimus Menetelmä (+) - (4R, 6S) - (E) -6-ΖΓ2- (4 ' -fluori-3,3 ' , 5-trimetyyli-^1,1' -bifenyl/-2-yyli) etenyyli,/-3 /4,5, 6-tetra-5 hydro-4-hydroksi-2H-pyran-2-onin valmistamiseksi, jolla on kaava (III) H 10 FH3 f* H F 1 J III 15 l| v tunnettu siitä, että 20 a) kondensoidaan asetetikkahappoesterin dianioni alde- hydin kanssa, jolla on kaava CH-, CHO J x' 30 jolloin syntyy yhdiste, jolla on kaava li 78083 °=f ^CO-CH- l OH CH- ^ 5 f\Jn f ^ j) C H 3 X b) pelkistetään ketoryhmä hydroksyyliksi , jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava

15 H° . co2ch3 ^ OH ch3 ^ FsA 20 | X 25 c) saippuoidaan esteri, muodostetaan laktoni ja erotetaan cis- ja trans-rasemaatit, jolloin saadaan laktoni, jolla on kaava 18 78083 HO ‘O O

5 CH3 ^ 10 kk ch3 d) muodostetaan diastereomeeriset C^-metyylibentsyyli-amidit trans-rasemaatista käsittelemällä (±)-trans-lakto- 15 nia joko d-( + )- tai 1-(-)-«-metyylibentsyyliamiinilla, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava CH3xX\

20. J» CH3 1 Tlf b^3 ja erotetaan diastereomeeriset dihydroksiamidit kromato-grafisesti tai kiteyttämällä, ja 30 e) hydrolysoidaan emäksen avulla diastereomeeri, joka sisältää tuotteen (+)-trans-enantiomeerin ja saatu yhdiste muutetaan laktoniksi kuumentamalla sitä tolueenissa palautus j äähdyttäen . i, i9 78083 Förfarande för framställning av (+)-(4R,6S)-(E)-6-Cl-(4'-fluor-3,3',S-trimetyl-^l,l-bifenyl7~2-yl)etenyl/-3,4, 5 5,6-tetrahydro-4-hydroxi-2H-pyran-2-on, med formeln (III) H 10 l ° ?H3 H III F Jv J Ml f

15 T 1 Th3 kännetecknat därav, att man 20 a) kondenserar dianjonen av acetoättiksyraester med en aldehyd med formeln CHO CH3 I 25 mJL jt ^VVCli3 V CH3 30 för erhällande av en förening med formeln 20 78083 o=r^co2cH3 L OH

5 CH3 J txx 10 ch3 b) reducerar ketogruppen till en hydroxylgrupp för erhällande av en förening med forraeln 15 H0 L OH ch3

20 FTil f 25 <^3 c) förtvälar estern, bildar laktonet och separerar cis- och transracematen för erhällande av en förening med formeln