FI77118B - Provbehandlingsanordning foer pressning av vaextsaft ur vaextmaterial. - Google Patents

Description

77118

NÄYTTEENKÄSITTELYLÄITE KASVIMEHUN PURISTAMISEKSI KASVIMATERIAALISTA

Keksinnön kohteena on laite* jonka avulla voidaan kasvimateriaalista ^ vapauttaa kasvimehua iimnunokemial 1 isiä agg lut inaat ioarialyysejä var ten.

Kasvimehun eristäminen kasvimateriaalista, kuten kasvin lehdistä, varsista tai muista kasvin osista, juureksista, marjoista ja varsi-mukuloista on perinteisesti tapahtunut ottamalla sopiva näyte ¢10-10 100 g), ja mainittu näyte on käsitelty hienontavilla laitteilla kuten

Virtis, Ultradurrax, Stomacher tai vastaavilla laitteilla. Rikkoutuneista soluista irtoava mehu on saatu erilleen sentrifugoimalla kiintomateriaali tarkoitukseen sopivalla sentrifuugi1 la. Tätä varten tietty määrä puristemehua on siirretty sentrifuugiputkeen ja suur u t IS tettu sentrifugointi n. 1000 - 10000 kierrosta minuutissa (rpm) antavalla sentrifuugi1 la. Sentrifugoinnin jälkeen on sentrifuugiput -kessa oleva pintaneste siirretty näytteerikäsittelyast iaan sopivaa pipettiä tai annostelijaa käyttäen. Edellä kuvattua näytteenkäsit-telymenettelyä on käytetty kasvimehun puristamiseksi kemiallisten, 20 iimnunokemial 1 isten, mikrobiologisten (bakteriologisten, rnykologisten, v i r o log ist ön yms. > ja fysikaal isten (mm. värin määritys.) määritysten suorittamiseksi.

Keksinnön mukaista laitetta käytettäessä vältetään tavanomaisissa gr menetelmissä tarvittavat hankalat ja aikaavievät työvaiheet. Keksinnön mukainen laite on rakeenteeltaan yksinkertainen sekä helposti valmistettava, ja on rakeenteeltaan kaupallisesti saatavan valkosipulipuristimen kaltainen, jonka lisäksi siinä on kartiomainen, tyypillisesti erillinen, tavallisesti muovista tai muusta polymeeristä valmistettu annostelukärki. Mainittun kärkiosan avulla voidaan annos-telia haluttu määrä halutusta kasvimateriaalista peräisin > 2 771 1 8 olevaa nestettä esimerkiksi koeputkeen» reagenssiastiaan, testikor-tille tai muulle? halutulle alustalle. Kärkiosa on muotoiltu kulloistakin käyttötarkoitusta vastaavasti siten» että sillä voidaan * annostella kulloinkin tarvittava näytemäärä. Keksinnön mukaista ζ" laitetta voidaan käyttää kasvinesteen erottamiseksi kasvimateriaa- 1ista immunokemial1ista agglutinaatiotestiä varten. Testi suoritetaan mainitusta nesteestä joko sellaisenaan tai laimennettuna. Erityisen käyttökelpoinen menetelmä on laimentamattoman kasvime-hunäytteen ottamiseen immunologista lateksiagglutinaatiotestiä 10 varten, joka tehdään tarkoitukseen soveltuvalla kortilla, jossa reagenssit on kuivattu täpläksi kortin pinnalle.

Keksinnön mukaisella lasitteella voidaan immunokemial 1 isessa agglu-tinaatioanalyyssä tarvittava näytemäärä vapauttaa halutusta kasvima-l1» teriaalista. Seuraavassa kuvataan keksinnön mukaisen laitteen käyttömahdollisuuksia. Keksinnön mukaisen laitteen käyttö ei rajoitu pelkästään kuvattavan käytön mukaiseen käyttöön, vaan seuraavassa kuvataan käyttöä, jolla saavutetaan varsinaisen immunokemial1isen agglutinaatioanalyysin suhteen paras mahdollinen tulos siltä osin, 7P joka on riippuvainen lähtömateriaalin oikeasta käsittelystä. Jotta analyysin tulos olisi mahdollisimman luotettava, on testattava näyte käsiteltävä joko näytteenottopäivänä tai kasvimateriaalin säilyvyyden kannalta mahdollisimman pian. Tavallisesti voidaan kasvinäytettä säilyttää kylmässä (n. +4 C) vain muutama» tavallisesti korkeintaan af s p äivän ajan ennen varsinaista näytteen käsittelyä. Näyte on peräisin sellaisesta kasvin osasta, joka ei sisällä sellaista määrä kasvin tukirakennesolukkoa» jotta kasvimateriaalie ei voi keksinnön mukaisella laitteella käsitellä. Tälläisiä kasvimateriaaleja on esimerkiksi kasvin lehdet, useimmiten kasvin varsi»

II

3 771 1 8 kasvin mukula tai mukulasta kasvatettu itu. Kasvimateriaa 1i valitaan 4 sen mukaisesti, mitä kemial-1ista yhdistettä tai immunologisesti määriteltävää kohdetta halutaan määrittää. Tyypillisimpiä määriteltäviä immunologisen parin osapuolia ovat erilaiset virusantigeenit g joko suoraan viruksissa osotettavina tai erillisen uuton jälkeen määritettävinä.

Seuraavassa kuvataan keksinnön mukaisen laitteen käyttöä. Muovinen kertakäyttökärki asetetaan näytepuristimeen ja se kiinnitetään 10 paikalleen sormin painamalla. Näytteenä olevaa kasvimateriaalia otetaan näytepur ist imen sy1 interiosaan, puristimen mäntä asetetaan näytteen päälle, jonka jälkeen puristetaan voimakkaasti, jolloin näyte murskautuu ja kasvimehua valuu muovikärkeen. Mikäli näyte sisältää runsaasii mehua, on puristimen kärki suunnattava sivulle, 1Γ eikä alaspäin, mehun liiallisen ulosvalumisen estämiseksi. Muovikär jestä tiputetaarn sovellutuksesta riippuen haluttu määrä kasvimehua reaktioalustalle, joka voi olla testikortti, koeputki tai muu keräilyastia. Tämän jälkeen muovinen irtokärki poistetaan ja hävitetään, ja puristin pestään puhtaalla vedellä.

10

Kuvassa 1 kuvataan keksinnön mukaista laitetta. Siinä voidaan erottaa kärkiosa 1, puristuskammion sylinterimäinen kammio 2, puristuskammion mäntä 3 sekä puristuskahvat 4.

4 7711 8

Esimerkki 1

Itunäytten käsittely keksinnön mukaisen näytteenkäsittelyjärjes-telmän avulla lateksiagglutinaatiotesti1lä tapahtuvaa perunan Y-ζ viruksen osoittamista varten.

Perunan Y-viruksella saastuneeksi epäillyistä mukuloista kasvatettuja ituja kerätään näytteeksi 2-3 grammaa eli 2-3 kappaletta 1-2 cm pituista itua näytettä kohden. Puristimeen asetetaan muovinen 10 irtokärki ja se kiinnitetään paikalleen sormin painamalla. Näyte asetetaan puristimen sylinteriosaan ja puristimen mäntä asetetaan näytteen päälle niin» että näyte jää männän ja sylinterin reititetyn pohjan väliin. Puristin muovikärkineen suunnataan vaakasuoraan, sivullepäin. Puristetaan keksinnön mukaisen laitteen kädensijoja, 15" jolloin näytemater i aal i murskautuu ja mehua puristuu sylinterin rei'itetyn pohjan läpi muovikärkeen. Kasvimehua tiputetaan muovi -kärjestä testikortί1 le 1 pisara muuttamalla puristimen asentoa niin, että kärki osoittaa alaspäin. Perunan Y-virustesti suoritetaan testin käyttöohjeen mukaisesti. Ennen seuraavan näytteen käsittelyä 20 irtokärki poistetaan ja puristin pestään esim. keitetyllä talous-vedellä.

I: 5 77118

Esimerkki 2

Lehtinäyt teen käsittely keksinnön mukaisella näytteenkäsittelylaitteella lateksagglutiinaatiotesti1lä tapahtuvaa perunan V-viiruksen f osoiittamiista varten.

Perunan Y-viruksella saastuneeksi epäillystä perunan varsista kerätään näytteeksi lehtiä. Lehtimateriaalia otetaan näytteeksi 1-3 grammaa. Muovinen irtokärki asetetaan purstimeen ja kίinniitetään 10 paikalleen sormin painamalla. Näytemateriaali asetetaan puristimen sylinterosaan ja puristimen mäntä asetetaan näytteen päälle niin, että näytemateriaali jää männän ja sylinterin rei'itetyn pohjan väliin. Puristin kärkineen suunnataan vaakasuoraan eli sivullepäin, ja suoritetaan puristus puristimen kädensijoja käyttäen. Kasvimehua \ζ tiputetaan muovi kärjestä testikorti1 le 1 pisara muuttamalla puristimen asentaa siten, että kärki osoittaa alaspäin. Perunan Y-virus-testi suoritetaan saadusta kasvimehunäytteestä. Ennen seuraavan näytteen käsittelyä irtokärki poistetaan ja puristin pestään puhtaalla vedellä, esimerkiksi keitetyllä talousvedellä tai vesijohtoko vedellä.

β 77118

Esimerkki 3

Itunäytteen käsittely näytteenkäsittelylaitteella entsyymimääritys-menetelmällä tapahtuvaa perunan X-viruksen osoittamista varten.

5Γ

Perunan X-viruksella saastuneeksi epäillyistä mukuloista kasvatettuja ituja kerätään näytteeksi 2-3 grammaa eli 2-3 kappaletta 1-2 cm pituista itua näytettä kohden. Puristimeen asetetaan muovinen irtokärki ja se kiinnitetään paikalleen sormin painamalla. Näyte 10 asetetaan puristimen sylinteriosaan ja puristimen mäntä asetetaan näytteen päälle niin» että näyte jää männän ja sylinterin rei’itetyn pöhjanväliin. Puristimen muovi kärki suunnataan koeputken tai muun näytteenkeraysastiän suulle. Suoritetaan puristus, jolloin näyte.....

materiaali murskautuu ja kasvimehua valuu muovi kärkeen ja sen \s kauttanäytteenkeräysastiaan. Ennen seuraavan näytteen käsittelyä muovinen irtokärki poistetaan ja puristin pestään puhtaalla vedellä, esimerkiksi keitetyllä talousvedellä. Kasvimehua pipetoidaan näyt-teenkeräysastiästä haluttu määrä entsyymi-immunomäärityslevyi1 le ja suoritetaan enstsyymi-immunomääritystestί.

V

II

7 77118

Esimerkki 4

Homeella saastuneeksi epäillystä paprikoista leikataan 2-3 gramman suuruisia näytteitä. Muovinen irtokärki asetetaan puristimeen ja ST kiinnitetään paikalleen sormin painamalla. Näyte asetetaan puristimen sy1 interiosaan. Puristimen mäntä asetetaan näytteen päälle niin, että näyte jää männän ja sylinterin rei'itetyn pohjan väliin. Puristin kärkineen suunataan vaakasuoraan (sivulle) ja puristetaan puristimen kädensijoja, jolloin kasvimehua puristuu puristimen \0 reititetyn pohjan läpi muovi kärkeen. Kasvimehua tiputetaan mikroskoopin objektilasi 1le 1 pisara suuntaamalla puristimen kärki alaspäin. Mahdollinen home osoitetaan mikroskopoimalla tai muulla osoitusmenetelmälla. Ennen seuraavan näytteen käsittelyä irtokärki poistetaan ja puristin pestään puhtaalla vedellä, esimerkiksi keitetyllä talousvedellä tai vesijohtovedellä.

Claims (4)

8 771 1 8 Patentt ivaat imukset

1. Laite kasvimehun erottamiseksi kasvimateriaalista immunoke-miallista agqlutinaatioanalyysia varten» tunnettu £ siitä» että laite koostuu lieriömäisestä tukiosasta (2)» jonka pohjana on sellainen rei'itetty ympyrän muotoinen pohja» jonka läpi haluttu kasvimateriaalista peräisin oleva kasvineste voi kulkeutua kartiomaiseen, ohuemmasta päästään riittävän avoimeen astian osaan (1), josta haluttua kas-lö vinestettä voidaan annostella tipoittain halutun analyysin suorittamiseksi; ja tarvittava puristusvoima saadaan aikaiseksi riittävän tiiviin männän (3) avulla» joka kulkee mainitun lieriömäisen tuki osan < 11» sisällä avustavien 1iikuntavarsien avulla; ja kasvimateriaali sijoitetaan lS lieriömäisen tukiosan (1) sisään, jotta mainittu puristus voima puristaa kasvimateriaalia reititettyä pohjaa vasten mehun erottamiseksi.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen laite, tunnettu 2η siitä, että mainittu kartiomainen astian osa (li on erilleen muusta laitekokonaisuudesta erotettava.

3. Patentt ivaat imusten 1-2 mukainen laite, tunnettu siitä, että mainittu kartiomainen astian osa (1) on valmiste tettu polymeerimaisesta materiaalista.

4. Patenttivaatimusten 1-3 mukainen laite, tunnettu siitä, että mainittu kartiomainen astian osa Cl) on kertakäyttöinen, ja siten vaihdettavissa. I) 9 77118