FI68418C - Foerfarande foer framstaellning av maltoheptaos-derivat - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av maltoheptaos-derivat Download PDFInfo
- Publication number
- FI68418C FI68418C FI820586A FI820586A FI68418C FI 68418 C FI68418 C FI 68418C FI 820586 A FI820586 A FI 820586A FI 820586 A FI820586 A FI 820586A FI 68418 C FI68418 C FI 68418C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- derivatives
- amylase
- maltoheptaos
- framework
- nitrophenyl
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 6
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 6
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 5
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 5
- 102100024295 Maltase-glucoamylase Human genes 0.000 description 4
- NEZJDVYDSZTRFS-RMPHRYRLSA-N Phenyl beta-D-glucopyranoside Chemical group O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1 NEZJDVYDSZTRFS-RMPHRYRLSA-N 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- -1 mononitrophenyl group Chemical group 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- BNABBHGYYMZMOA-AHIHXIOASA-N alpha-maltoheptaose Chemical class O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@H](O[C@@H]3[C@H](O[C@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H](O[C@@H]5[C@H](O[C@H](O[C@@H]6[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]6O)CO)[C@H](O)[C@H]5O)CO)[C@H](O)[C@H]4O)CO)[C@H](O)[C@H]3O)CO)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O BNABBHGYYMZMOA-AHIHXIOASA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 229920001450 Alpha-Cyclodextrin Polymers 0.000 description 2
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 2
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 2
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 2
- 108010025880 Cyclomaltodextrin glucanotransferase Proteins 0.000 description 2
- HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N alpha-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N 0.000 description 2
- 229940043377 alpha-cyclodextrin Drugs 0.000 description 2
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 2
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- UFBJCMHMOXMLKC-UHFFFAOYSA-N 2,4-dinitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O UFBJCMHMOXMLKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 2-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IFBHRQDFSNCLOZ-ZIQFBCGOSA-N 4-nitrophenyl alpha-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 IFBHRQDFSNCLOZ-ZIQFBCGOSA-N 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 101000935015 Emericella nidulans (strain FGSC A4 / ATCC 38163 / CBS 112.46 / NRRL 194 / M139) N-acetyl-6-hydroxytryptophan oxidase ivoB Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- CKMNPXWFAZLBNK-QOFYEYOWSA-N OC[C@H]1O[C@@H]2O[C@@H]3[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]4[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]5[C@@H](CO)O[C@H](O[C@H]1[C@H](O)[C@H]2O)[C@H](O)[C@H]5O)[C@H](O)[C@H]4O)[C@H](O)[C@H]3O Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H]2O[C@@H]3[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]4[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]5[C@@H](CO)O[C@H](O[C@H]1[C@H](O)[C@H]2O)[C@H](O)[C@H]5O)[C@H](O)[C@H]4O)[C@H](O)[C@H]3O CKMNPXWFAZLBNK-QOFYEYOWSA-N 0.000 description 1
- 241000178960 Paenibacillus macerans Species 0.000 description 1
- CYTYCFOTNPOANT-UHFFFAOYSA-N Perchloroethylene Chemical group ClC(Cl)=C(Cl)Cl CYTYCFOTNPOANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- UYXAWHWODHRRMR-UHFFFAOYSA-N hexobarbital Chemical compound O=C1N(C)C(=O)NC(=O)C1(C)C1=CCCCC1 UYXAWHWODHRRMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000004203 pancreatic function Effects 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000001044 red dye Substances 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229950011008 tetrachloroethylene Drugs 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000006276 transfer reaction Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
6841 8
Menetelmä maltoheptaoosi-johdannaisten valmistamiseksi
Keksintö koskee menetelmää maltoheptaoosi-johdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava
CH„OH | CHo0H
J-0 /-% OH OH 5 jossa R on fenyyliglukosidi-, mononitrofenyyliglukosidi- tai dinitrofenyyliglukosidiryhmä.
Seerumin a-amylaasitason määrittäminen on tärkeä kliininen haiman toimintaa selvittävä parametri. Kaupan olevat a-amy-laasin määrittämiseen tarkoitetut reagenssit perustuvat pääasiallisesti systeemiin, jossa a-amylaasi pilkkoo tärkkelystä ja muodostuneet pilkkoutuneet osat määritetään näkyvällä alueella tai UV-alueella siitä riippuen, onko kokeessa käytetty amylaasisubstraattina värjättyä tärkkelystä vai luonnon tärkkelystä. Tämän menetelmän tai reagenssien oleellisena varjopuolena on se, että makromolekyylinä olevaa tärkkelystä ei voida riittävän hyvin karakterisoida ja standardisoida, joten yksityisten erien muuttumisnopeudet muodostuvat hyvin erilaisiksi ja mittauksissa on aina käytettävä standardikoet-ta. Parempien tulosten saavuttamiseksi tarvittaisiin yhtenäisempää substraattia, joka antaisi pilkottaessa luotettavia tuloksia.
Kantahakemuksessa 782789 (FI-C 61916) on kuvattu menetelmä a-amylaasin määrittämiseksi ruumiinnesteistä pilkkomalla entsymaattisesti edellä esitetyn kaavan I mukaista maltoheptaoosi— johdannaista ja määrittämällä sen jälkeen pilkkoutumistuotteet sinänsä tunnetulla tavalla.
2 6841 8
Pilkkoutumistuotteiden määritys suoritetaan edullisesti α-glu-kosidaasin avulla. Tällöin lohkeaa molempien entsyymien, ct-amy-laasi ja α-glukosidaasi, vaikutuksesta fenyyliryhmä, mononitro-fenyyliryhmä tai dinitrofenyyliryhmä, joka on helposti määritettävissä. Fenyyliryhmät voivat olla a- tai 3-asemassa. Jos kysymyksessä on α-asema, a-amylaasin ja α-glukosidaasin vaikutuksesta tapahtuu vain näiden lohkeaminen ja lohjenneet substi-tuoidut tai substituoimattomat fenolit ovat helposti määritettävissä tunnetuin värireaktioin. Voidaan kuitenkin myös käyttää β-asemassa olevia substituentteja. Viimeksi mainitussa tapauksessa α-glukosidaasin ohella käytetään lisäksi myös 3-glukosi-daasia.
Kun kyseessä ovat dinitrof enyyliryhmätkummatkin nitroryhmät voivat olla halutussa asemassa, esimerkiksi 2,4-, 2,6- tai 3,5-substituentteina.
Nitroryhmän sisältävän substituentin lohkaisun yhteydessä vapautuva nitrofenoli tai dinitrofenoli on itse värillinen yhdiste, joka on ilman muuta optisesti määritettävissä. Jos tällöin lohkeaa itse fenolia, tämä on määritettävissä tunnetuin menetelmin, esimerkiksi antamalla sen reagoida nukleofiilisen aineen kuten 3-metyyli-6-sulf onyyli-bentstiatsoloni-hydratsoni- (2) (HSK):n kanssa monofenolioksidaasin läsnäollessa. Tässä reaktiossa muodostuu punaista väriainetta, joka on mitattavissa.
Esillä olevan keksinnön tarkoituksena on aikaansaada menetelmä edellä esitetyn kaavan I mukaisten maltoheptaoosi-johdannaisten valmistamiseksi ja tämä onkin toteutettu menetelmällä, jolle on tunnusomaista se, että kyseisen fenyyliqlukosidin tai nit-ratun fenyyliglukosidin annetaan reagoida a-syklodekstriinin kanssa syklomaltodekstriini glukanotransferaasin läsnäollessa.
Tässä entsymaattisessa valmistusmenetelmässä suoritetaan siis fenyyliglukosidin tai vastaavien nitrattujen fenyyliglukosidien transglukosidointi 6841 8 α-syklodekstriinillä tunnetun syklonaltodekstriini glukanotrans-feraasin läsnäollessa (tästä entsyymistä käytetään myöskin nimitystä Bacillus macerans-amylaasi E.C.2.4.1.19. DSM 24; eristäminen: J.A. de Pinto, L.L. Campbell, Biochemistry (1968) 114; transfer-reaktio: Methods in Carbohydr. Chemistry, Voi. II 347), jolla hydrolyyttisen ja syklisoivan vaikutuksensa ohella on ilmeisesti myös glukosyyliä transferoiva vaikutus.
Seuraava esimerkki valaisee keksintöä.
Esimerkki p-nitrofenyyli-a-maltoheptaosidin valmistus syntetisoimalla entsymaattisesti syklomaltodekstriini glukanotransferaasia (Bacillus macerans-amylaasia E.C.2.4.1.19 Bac. mac. DSM 24:stä) käyttäen.
Bacillus macerans-amyPaasilla on hydrolyyttisen ja syklisoivan vaikutuksen ohella myös glykosyyliä transferoivia ominaisuuksia, joita voidaan käyttää hyväksi syntetisoitaessa oligosakkarideja ja niiden johdannaisia (Methods in Carbohydrate Chemistry II, 347). p-nitrofenyyli-oligosakkaridien synteesiä varten tämä menetelmä optimoitiin seuraavanlaiseksi: 680 mg Bacillus macerans-amylaasia E.C.2.4.1.19 Bac. mac. DSM 24:stä) (lyofilisaattia) (0,46 yks/mg punnittua erää, proteiinipitoisuus punnitussa erässä 28,5 %, ei p-nitrofenyyli-ot-D-glukosidia pilkkovaa aktiivisuutta), 400 mg α-D-p-nitrofenyyliglukosidia, 3,5 g α-syklodekstriiniä, ja 70 ml Soerensen'in fosfaattipuskuria, pH 6,2; 0,01 moolia, sekoitetaan keskenään. Erää inkuboidaan 24 tuntia 37°C:ssa. Puhdistusta varten erotetaan sitten a- ja syntynyt 8-syklo-dekstriini ensin tetrakloorietyleeni-sulkeumayhdisteen välityksellä. ' Ristisidotulla dekstraanilla (Sephadex LH20) suoritetun kromatografoinniri jälkeen saadaan 50 mg amylaasi-testissä erittäin aktiiviseksi osoittautunutta p-nitrofenyyli-maltoheptaosidi-lyofilisaattia.
Applications Claiming Priority (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2741192 | 1977-09-13 | ||
| DE2741192A DE2741192C2 (de) | 1977-09-13 | 1977-09-13 | Verfahren zur Bestimmung von alpha- Amylase |
| DE2755803 | 1977-12-14 | ||
| DE19772755803 DE2755803A1 (de) | 1977-12-14 | 1977-12-14 | Verfahren und reagens zur bestimmung von alpha-amylase |
| FI782789 | 1978-09-12 | ||
| FI782789A FI61916C (fi) | 1977-09-13 | 1978-09-12 | Foerfarande och reagens foer bestaemning av alfa-amylas |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI820586L FI820586L (fi) | 1982-02-23 |
| FI68418B FI68418B (fi) | 1985-05-31 |
| FI68418C true FI68418C (fi) | 1985-09-10 |
Family
ID=27187306
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI820586A FI68418C (fi) | 1977-09-13 | 1982-02-23 | Foerfarande foer framstaellning av maltoheptaos-derivat |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| FI (1) | FI68418C (fi) |
-
1982
- 1982-02-23 FI FI820586A patent/FI68418C/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI820586L (fi) | 1982-02-23 |
| FI68418B (fi) | 1985-05-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0045220B1 (en) | Method and test composition for determination of hydrogen peroxide | |
| FI61916B (fi) | Foerfarande och reagens foer bestaemning av alfa-amylas | |
| US4681841A (en) | Enzymatic assay method | |
| GB1571265A (en) | Amylase determination | |
| US4762917A (en) | Oligosaccharide derivatives and their use as substrate for measuring .alpha. | |
| Brander et al. | Colorimetric LPMO assay with direct implication for cellulolytic activity | |
| Shibata et al. | Rate assay of N-acetyl-β-D-hexosaminidase with 4-nitrophenyl N-acetyl-β-D-glucosaminide as an artificial substrate | |
| Rescigno et al. | Polyphenol oxidase activity staining in polyacrylamide electrophoresis gels | |
| Waheed et al. | Chemical characterization and substrate specificity of rabbit liver aryl sulfatase A | |
| FI68418C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av maltoheptaos-derivat | |
| EP0252525B1 (en) | Alpha-amylase assay using modified oligosaccharide and process for producing said modified oligosaccharide | |
| US4009079A (en) | Method for quantitatively determining glucoamylase in human urine and body fluids | |
| IE45395B1 (en) | Method and test kit for serum amylase assay | |
| US5202233A (en) | Process for the detection of substances with hydrolase activity | |
| JPS5913198B2 (ja) | アミラ−ゼ活性測定方法 | |
| Larson et al. | Glucosyltransferase activity in a water extract of maize pollen | |
| US5350678A (en) | Method of differential assay for α-amylase isozymes and a kit for the same | |
| JP3310008B2 (ja) | オリゴ糖酸化酵素、オリゴ糖酸化酵素の製造方法、オリゴ糖の測定方法、オリゴ糖酸の製造方法、アミラーゼ活性測定法及び新規微生物 | |
| Kessler et al. | Substrate and product specificity of Arthrobacter sialophilus neuraminidase. | |
| EP0557021B1 (en) | Oligosaccharide derivatives suitable for alpha-amylase determination | |
| Satomura et al. | Kinetics of human pancreatic and salivary α-amylases with carboxymethylamyloses as substrates | |
| JPH0824598B2 (ja) | アミラ−ゼ定量用試験試薬 | |
| JPS5931699A (ja) | α−アミラ−ゼ活性の測定法 | |
| US5260428A (en) | Agent for the detection of substances with hydrolase activity | |
| USRE33635E (en) | Enzymatic assay method |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MA | Patent expired |
Owner name: BOEHRINGER MANNHEIM GMBH |