FI57182C - Anordning foer bestaemmande av aggregationsgraden eller -tendensen hos blodtrombocyter - Google Patents

Description

Ιΐΐβ»»·Ι „ KUULUTUSjULKAISU ς n * o O

JQV 1¾ (11) UTLÄGCNINOSSKRIFT 5 ' ' ö C (45) Patentti ayör.r.· Ity 10 06 1990 ί Patent meddelat V T V (51) Kv.lk.'/Int.CI.* G 01 N 33/16 SUOMI-FINLAND (21) Pat«nttlhtk«mu· — PitMUmOknlnf 689/7¾ (22) HtkemlipUvI — Araeknlngtdag 07.03.7¾ ' ' (23) Alkupilvl>-Glltlgh«t<4af 07.03.7¾ (41) Tullut luikituksi — Bllvlt offtntllf , i nQ „i

Patentti· ja rekisterihallitus .... ..... .. , ....... y‘ _ . ^ . (44) Nlhtivlktlpunon |t kuul.|ulkal*un pvm. —

Patent-och registerstyrelsen Aruttktn utltgd och uti.skrift«n pubiktrad 29.02.80 (32)(33)(31) Pyydetty «tuolkuu*—Bujlrd prlorittt 13,03.73

Hollanti-Holland(NL) 7303522 (71) Unilever N.V., Burgemeester s'Jacobplein 1, Rotterdam, Hollanti-Holland(NL) (72) Gerard Hornstra, Klaaswaal, Hollanti-Holland(NL) (7¾) Leitzinger Oy (5¾) Laite verihiutaleiden aggregoitumisasteen tai -taipumuksen määrittämiseksi - Anordning för bestämmande av aggregationsgraden eller -tendensen hos blodtrombocyter

Keksinnön kohteena on laite verihiutaleiden aggregoitumisasteen tai -taipumuksen määrittämiseksi, joka laite on varustettu seuraavilla sarjassa toisiinsa putkien avulla yhdistetyillä osilla, eli laitteella, joka tuo näytteen tutkittavasta verestä sekä suodattimena, jolla on sellainen huokoisuus, että sen läpäisevät punaiset ja valkoiset verisolut mutta eivät aggregoidut verihiutaleet.

Tämän laitteen toimintaperiaate perustuu aikaisemmin kehittämäämme tekniikkaan, jossa adenosiini-difosfaatilla (ADP) indusoitu verihiutaleiden aggregoituminen rotissa määritetään ottamalla aggregaatit valtimoverenkiertoon keinotekoisesti asetettuun silmukkaan suodattimen avulla, kts. British Journal of Haematology, voi. 19, n:o 3, syyskuu 1970, sivut 321-329. Tämä näyttää olevan arvokas menetelmä tutkittaessa lääkeaineiden ja myös erityisten syötyjen dieettirasvojen vaikutuksia verihiutaleiden aggregoitumistaipumukseen. Tämän tekniikan käyttäminen ei kuitenkaan sovi yhtä hyvin muihin eläimiin ja ihmisiin kuin rottiin, koska valtimoon kohdistuu melko vaikea kateterisointi.

Tämän välttämiseksi kehitettiin nykyinen laite (FILTRAGOMETER), jossa laskimoverta poistetaan suodattimen kautta joko suoraan laskimosta tai epäsuorasti kohditionoi-dusta varastosta.

2 571 82

Keksinnön mukaiselle laitteelle on tunnusomaista se, että laite on järjestetty kytkettäväksi potilaaseen neulan avulla, että laitteeseen kuuluu suodattimen taakse asennettu imupumppu, jonka avulla veri edeltäpäin määrätyllä nopeudelle vedetään suodattimen läpi, sekä paineentuntoelimet, jotka mittaavat suodattimena paineen alenemisen.

Jotta keksinnön mukaisella laitteella voitaisiin määrittää kokeellisesti indusoidun aggregoitumisen aste, välittömästi neulan jälkeen on järjestetty elimet, joiden avulla lisätään aines, joka stabiloi ja/tai edistää aggregoitumista ja/tai on anti-koagulantti, sekä sekoituslaite, joka tarkasti sekoittaa lisäaineen tai -aineet veren kanssa.

Osa putkijärjestelmästä, sekoituskanmiosta ja suodattimesta voidaan yhdistää helposti vaihdettavaksi yksiköksi. Voidaan asentaa elin, joka pitää sekoituekammion, suodattimen ja kiinnitetyt putket kehon lämpötilassa.

Filtragometer-laitetta voidaan käyttää ihmisillä (kts. "THE LANCET", toukokuu 26, 1973, ss. 1153-1157) ja useimmilla tavallisista laboratorioeläimistä (mukaanlukien rotat, kaniinit).

Filtragometer-laitteen kehittämisvaiheen aikana suoritettiin joitakin kokeita vapaaehtoisilla ihimisillä. Kokeiden tulokset on annettu seuraavasaa. Kaikki arvot koskevat aggregoitumisaikaa, t^, joka on aika (s), joka tarvitaan saamaan aikaan suodattimen standarditukkeutumisaste. Tämä aika on sitä pidempi, mitä pienempi on aggregoi-tumistaipumus. Ellei toisin ole osoitettu, kaikki kokeet suoritettiin käyttämällä aintikoagulanttina hepariinia (5 U/ml verta).

£. Suodattimen halkaisijan vaikutus aggregoitumisreaktioon

Vapaaehtoisilla ihmisillä on aggregoitumisreaktio mitattuna 2,3 mm 0 suodattimena huomattavasti (P^ " 0,05) suurempi (t^ lyhyempi) kuin mitattuna 3,0 nm 0 suodattimena.

Suodattimen halkaisija 2,3 on: log t^ - 2,2960 ♦ 0,0785, t^ * 198 s, n - 10 Suodattimen halkaisija 3,0 mm: log t^ - 2,4165 « 0,0294, t^ ” 261 s, n - 10 3 57182 b. Hepariinin ja hirudiinin vertailu aggregoitumisreaktion suhteen

Kun antikoagulanttina käytetään hirudiinia (0,1 mg/ml verta), aggre-goitumisaste ei eroa huomattavasti heparinisoidulla verellä havaitusta arvosta.

hepariini: log tA = 1,974 + 0,078, tA = 94 s, n = 12 hirudiini: log tA = 1,975 +_ 0,092 , t^ = 94 s, n = 12 c. Hepariinin ja natriumsitraatin vertailu aggregoitumisreaktion suhteen

Natriumsitraatin (38 mg/ml verta) infuusion aggregoitumisreaktio on merkittävästi (Pj <0,05) pienempi (tA pidempi) kuin hepariini-infuu-sion.

sitraatti: log tA = 2,227 ^ 0,1041, t^ = 169 s, n = 7 hepariini: log tA = 1,899 + 0,0557, t^ = 79 s, n = 7 d. Prostaglandiinin (PGE^) vaikutus

Ekstrakorporeaalinen PGE^-infuusio (loppukonsentraatio 100 ng/ml verta) pidentää t^-arvoa huomattavasti (Pj <0,05) verrattuna suolaliuosinfuu-sioon samassa kohteessa.

suolaliuos: log tA = 2,19 3 +_ 0,1015, tA = 156.s, n = 7 PGE^ : log tA = 2,324 + 0,080, tA = 211 s, n = 7 e. PGE^:n vaikutus sitratoituun vereen

Ekstrakorporeaalisesti sitratoituun vereen infusioitu PGE (loppu-konssntraatio 100 ng/ml) pienentää aggregoitumisreaktiota merkittävästi (Pj < 0,05) verrattuna samaan kohteeseen infuusioituun suolaliuokseen, suolaliuos: log tA = 2,219 +_ 0,0706, tA = 166 s, n = 13 PGE1 : log tA s 2,343 + 0,0512, tA = 220 s, n = 13 f. Asetyylisalisyylihapon (ASA) vaikutus

Kun annetaan oraalisesti 1 g ASA:ta, se indusoi merkittävästi (Pj= 0,02) pienemmän aggregoitumisreaktion kuin placebo-tabletti placebo-ryhmä: log tA = 1,923 +_ 0,0887 , tA = 84 s, n = 10 ASA-ryhmä : log tA = 2,228 + 0,0855, tA = 169-s,, n = 10 " 57182 £· Dietaarisen linolihappopitoisuuden vaikutus

Syötettäessä ravintoa, joka sisältää 12 kal-% linolihappoa, 6 vuotta saadaan merkittävästi (P2 0,001) pienempi verihiutaleiden aggregoi- tuminen kuin ravinnolla, joka sisältää 4 kal-% linolihappoa.

12 kal-% linolihappo: log t^ = 1,992 + 0,040, t^ ~ 98 s, n = 38 H kal-% linolihappo : log tA = 1,802 + 0,024, t^ = 63 s, n = 38 Tätä koetta on kuvattu yksityiskohtaisemmin julkaisussa The Lancet, toukokuu '26 , 1973 ss. 1155-1157 (liite 11).

Seuraavassa selvitetään laitetta lähemmin viitaten kaaviolliseen piirustukseen.

Tutkittava veri voidaan ottaa joko suoraan laskimosta neulan 1 avulla tai se voidaan vetää konditionoidusta varastosta. Kohdassa 2 on mahdollista lisätä ainetta, joka stabiloi ja/tai edistää aggregoitumista, tai antikoagulanttia. Näin saatu seos sekoitetaan hyvin sekoituskam-miossa 3. Tätä tarkoitusta varten sopii hyvin magneettinen sekoitus-järjestelmä. Sen jälkeen seos vedetään suodattimen 4 kautta, mikä saadaan aikaan kohdassa 5 esitetyn pumpun avulla. Pumppua käytetään moottorin 6 avulla, jota voidaan käyttää myös kohdassa 2 tapahtuvassa aineiden annostelussa. Sekoituskammio 3 ja suodatin 4 sekä niihin kiinnitetyt putket pidetään lämpötilassa 37°C kuumennusjärjestelmän 12 avulla. Seoksen paine ennen suodatinta ja sen jälkeen mitataan kahden painemuuntimen 7 ja 8 avulla. Saadut arvot vähennetään toisistaan elektronisesti (ΔΡ) ja tulos taltioidaan taltiointilaitteeseen 9, johon merkitään vertailuksi muuntimen 7 taltioima paine ennen suodatinta.

Taltiointilaitteen piirustuksessa vain esimerkkimäisesti esitetyssä diagrammassa näkyy mittaus, joka tässä tapauksessa tapahtuu seuraavasti: Juuri ennen mittauksen aloittamista kohdassa 2 syötettiin natriumsit-raattiliuos, jotta estettäisiin ilmakuplien pääsy kytkettäessä järjestelmä neulalla puhkaistuun laskimoon. Välittömästi sen jälkeen, kun järjestelmä oli yhdistetty tutkittavan veren kanssa, käynnistettiin imupumppu 5, pysäytettiin sitraatin infuusio ja aloitettiin hepariinin infuusio. Tämä hetki näkyy automaattisesti (10) paine-erokäyrässä. Hetkellä, jolloin paine-ero saavutti arvon 5 mm elohopeaa, hepariinin infuusio lopetettiin ja aloitettiin sitraatin infuusio. Myös tämä hetki näkyy käyrässä (11). Sen jälkeen, kun oli saatu riittävästi informaa- 571 82 5 tiota, imupumppu pysäytettiin ja neula poistettiin laskimosta. Näistä ja samanlaisista käyristä voidaan laskea parametrit, jotka liittyvät aggregoitumiseen ja de-aggregoitumiseen.