FI112167B - Dissosioituneiden kilpailevien progesteroniantagonistien käyttö ehkäisyaineen valmistamiseksi ja käyttökelpoisia uusia yhdisteitä - Google Patents

Description

! 112167

Dissosioituneiden kilpailevien progesteroniantagonistien käyttö ehkäisyaineen valmistamiseksi ja käyttökelpoisia uusia yhdisteitä 5 Keksinnön tausta Tämä keksintö koskee dissosioituneen kilpailevan progesteroniantagonistin käyttöä ehkäisyaineen valmistamiseksi sekä käyttökelpoisia uusia progesteroniantagonisteja.

Estämällä kohdun limakalvorauhasten muodostuminen 10 ja epiteelin kasvu voidaan estää hedelmöittyneen munan kiinnittyminen kohdussa (kohdun vastaanottokyvyn esto). Kilpailevia progesteroniantagonisteja voidaan näin ollen käyttää kontraseptiivisesti naaraassa.

RU 486 (11β-[4-N,N-(dimetyyliamino)fenyyli]-17β- 15 hydroksi-17a;-propionyyliestra-4,9(10) -dien-3-oni; EP-A 0 057 115) ja muut Ιΐβ-aryyli- tai 11β, 19-aryleeni-substituoidut steroidit ovat yhdisteitä, jotka voivat syrjäyttää progesteronin ja glukokortikoidit vastaavista reseptoreistaan. Nämä aineet tunnetaan farmakologisesti sii-20 tä, että niillä on voimakas progesteroni- ja glukokorti-. koidiantagonistivaikutus. Niiden tähänastinen terapeuttinen I * » käyttö on pohjautunut mainittuihin ominaisuuksiin. RU 486 . on käyttökelpoinen esim. progesteronin antagonistina ras- kauden terapeuttisessa keskeytyksessä ja myös glukokorti-25 koidin antagonistina Cushingin oireyhtymän hoidossa lisä- · t munuaiskerroksen patologisesti lisääntyneen eritystoiminnan • · vuoksi. RU 486:n naaraassa keskenmenon aiheuttava annos on 200 - 600 mg.

·’: On myös kauan ollut tunnettua, että kilpailevat 30 progesteroniantagonistit pystyvät estämään ovulaation erilaisissa eläinlajeissa ja naisessa. (Collins ja muut, "Blockade of the spontaneous mid-cycle gonadotropin surge *;*’ in monkeys by RU 486; A progesterone antagonist or ago- nist", J. Clin. Metab., 63 : 1270 - 1276 (1986); 35 Croxatto, H. B., "Salvatierra 1990 Cyclic use of antigestagens for fertility control", Illrd International

• I

112167 2

Symposium of Contraception, Heidelberg, 19 - 23. kesäkuuta 1990;

Danford ja muut, "Contraceptive potential of RU 486 by ovulation inhibition. III. Preliminary observations on 5 once weekly administration", Contraception 40 : 195 - 200 (1989);

Kekkonen ja muut, "Lähteenmäki P 1990 Interference with ovulation by sequential treatment with the antiprogesterone RU 486 and synthetic progestin", Fertil Steril 10 (Fertile Sterile) 53 : 4747;

Puri ja muut, "Gonadal and pituitary responses to progesterone antagonist ZK 98 299 during the follicular phase of the menstrual cycle in bonnet monkeys", Contraception 39, 2 : 227 - 243 (1989); 15 Puri ja muut, "Contraceptive potential of a progesterone antagonist ZK 98 734: Effect on folliculogenesis, ovulation and corpus luteum function in bonnet monkeys". In Moudgal ja muut (toim.) (1990); US-patentissa 4 764 513 opetetaan, että kohdun li-20 makalvon kykyä kiinnittää muna (kiinnittymisikkunaa) voi-daan muuttaa (hidastaa) antamalla naaraalle kilpailevaa progesteroniantagonistia lisämään todennäköisyyttä, että in vitro hedelmöitetty muna kiinnittyy menestyksellisesti.

• · 11β,19-o-fenyleenisilloitettuja steroideja, joilla 112167 3 antagonistilajista. Käytettäessä antagonistia RU 486 annos naiselle on 50 - 100 mg. (Croxatto ja muut, mainitussa paikassa, Ledge ja muut (1992), Inhibition of ovulation using very low dose mifepristone; Abstract: Second Congress of 5 the European Society of Contraception. RU 486:n vaikutuksessa keskushermostoon ja kohdun limakalvoon ilmenee vähäistä tai ei lainkaan dissosiaatiota ihmisessä (Ledge W.L. ja muut, Terra Symposium on Progesterone Antagonists, 25 -29. toukokuuta 1992, Mohouk, N.Y.).

10 On ehdotettu "LH +2" hoitoa kiinnittymisen estämi seksi (Swahn ja muut, "The effect of RU 486 administration during the early luteal phase on bleeding pattern, hormonal parameters and endometrium", Human Reproduction 5, 4 : 402 - 408 (1990)): kaksi päivää LH-piikin ilmenemisen jälkeen 15 (LH = lueinisoiva hormoni) naisen kuukautissyklin aikana (LH-piikin ilmeneminen vastaa ovulaation ajankohtaa) (eli näin ollen päivinä 14, 15 ja 16), annetaan kerran ovulaa tiota estävä annos RU 486:tta. Vaikuttavaa yhdistettä annetaan siis vasta ovulaatioajankohdan jälkeen kuukautissyklin 20 luteaalivaiheessa (luteaalikontraseptio).

Vasta äskettäin on raportoitu, että kohdun limakal- von desynkronointi naaraassa ilman hormonaalisia muutoksia (progesteronin ja estradiolin konsentroitumista) on saavu- ’ tettavissa kilpailevalla progesteroniantagonistilla RU 486, : 25 jos jäljimmäistä annetaan päivinä 5 ja 8 LH-piikin ilmene- > · . : misen jälkeen kuukautissyklissä (annostus kaikissa tapauk- V * sissa 10 mg suun kautta) (Kettel ja muut, 1992) . Ei voida saavuttaa luotettavaa hedelmöitymistä ilman ovulaation es-: · : toa, jos kilpailevaa progesteroniantagonistia annetaan vas- 30 ta sen jälkeen, kun LH-piikit on saavutettu kuukautissyk- * * >

Iissä.

Nyt on havaittu, että kilpailevat progesteronianta-gonistit pystyvät annosteluohjelmana, joka ei estä ovulaa-: : : tiota tai aiheuta keskenmenoa, estämään tämän keksinnön mu- 35 kaisesti kohdun limakalvorauhasten muodostuminen prolife-raatiovaiheessa sekä rauhasten toiminta kuukautissyklin lu- 112167 4 teaalivaiheessa siten, että saavutetaan kontraseptio, jos annos annetaan ainakin kerran ennen LH-piikin ilmenemistä ja mahdollisesti myös sen jälkeen.

Keksinnön yhteenveto 5 Tämä keksintö koskee dissosioituneen kilpailevan progesteroniantagonistin, jolla on dissosiaatiokerroin vähintään 30 tai suurempi, käyttö ehkäisyaineen valmistamiseksi, jolla aikaansaadaan naaraassa kontraseptio annos-määrällä, joka on pienempi kuin ovulaation estävä annos ja 10 pienempi kuin keskenmenon aiheuttava annos ja joka pystyy estämään kohdun limakalvorauhasten muodostuminen ja epiteelin kasvu ja/tai estämään onnistuneen kiinnittymisen edellyttämä rauhastoiminta, jolloin anto tapahtuu naaraan kuukautissykiin follikkelivaiheessa ja mahdollisesti myös 15 luteaalivaiheessa.

Keksintö koskee myös HS, 19-o-fenyleeni-17JS-hyd-roksi-17oi- (3-hydroksiprop-1 (Z) -enyyli) -4-androsten-3-onia, jolla on kaava R.

*’ OH

, Γ ^0Η = 1 |V. jossa R on y~CN tai jj/ t 1 1 • · • · ’·1 20 » i • 1 ” Keksinnön mukainen käyttö voidaan toteuttaa far- • I · ...· maseuttisen koostumuksen avulla, joka käsittää seoksena ;'j‘: farmaseuttisesti hyväksyttävän kantaja-aineen kanssa kil- .·. : pailevan progesteroniantagonistin sellaisen määrän annosyk- 25 sikköä kohti, että se on pienempi kuin ovulaatiota estävä 112167 5 annos ja pienempi kuin keskenmenon aiheuttava annos ja joka pystyy estämään kohdun limakalvorauhasten muodostuminen ja epiteelin kasvu.

Yksityiskohtainen pohdinta 5 Proliferaatiovaiheessa tapahtuu normaalin kuukau- tissyklin aikana kohdun limakalvossa erittävien rauhasten estrogeenin indusoimaa muodostumista ja progesteroni indusoi rauhasten eritysaktiivisuuden luteaalivaiheessa (jota myös kutsutaan eritysvaiheeksi). Kilpailevien progestero-10 niantagonistien kuvattu vaikutus proliferaatiovaiheessa, ts. ennen ovulaatiota, ei siis perustu luontaisesti progesteronin estoon, koska kohdun limakalvojen proliferaatio on estrogeeniriippuvainen. Progesteronikonsentraatiot veressä kuukautissyklin proliferaatiovaiheessa ovat lisäksi hyvin 15 pieniä. Käyttämällä keksinnön mukaisesti kilpailevia proge-steroniantagonisteja voidaan saavuttaa kohdun vastaanottokyvyn selektiivinen esto vaikuttamatta haitallisesti kuu-kautissykliin ja käyttäen annoksia, jotka ovat liian pieniä keskenmenon aikaansaamiseksi, jos muna on jo kiinnittynyt.

20 Kyky saavuttaa kontraseptio annoksilla, jotka ovat pienempiä kuin keskenmenon indusoivat annokset ja ovulaati-on estävät annokset, on hyvin tärkeä näkökohta joillekin ’ naisille, jotka eivät hyväksy raskauden keskeytystä tai • ovat huolissaan ovulaation eston pitkäaikaisista lääketie- : 25 teellisistä vaikutuksista.

, Tässä patenttihakemuksessa ehdotetun käytön ratkaisi i sevana etuna on käytetyn progesteroniantagonistin hyvin suuri kontraseptiivinen luotettavuus, koska kohdun limakal-vo ei pysty vastaanottamaan hedelmöitynyttä munaa annetta-30 essa vastaavasti hyvin pieni annos kilpailevaa progestero-niantagonistia ennen ovulaatiota ja valinnaisesti sen jäl-: “ keen. Kiinnittyminen ei myöskään ole poissuljettu normaalin i » kuukautissyklin proliferaatiovaiheessa. Koska kohdun lima-kalvon rauhaseritys on välttämätöntä kohdun limakalvon vas-35 taanottokyvyn kannalta, kiinnittyminen on mahdotonta, jos • » kohdun limakalvon rauhaset ja epiteeli ovat atrofioituneet.

112167 6 Näin varmistetaan kontraseptiivinen luotettavuus myös naaraissa, joiden kuukautissykli on epäsäännöllinen.

Uusilla kilpailevilla progesteroniantagonisteilla eli 1115,19- [4- (4-syaanifenyyli) -o-fenyleeni] -17S-hydroksi-5 17a-(3-hydroksiprop-l(Z)enyyli)-4-androsten-3-onilla (I) ja 1115,19- [4- (3-pyridinyyli) -o-fenyleeni] -1715-hydroksil7a-(3-hydroksiprop-l(Z)-enyyli)-4-androsten-3-onilla (II) on yllättävän selvä perifeerisesti selektiivinen vaikutus, ts. yhdisteiden I ja II vaikutus kohdun limakalvoon on erittäin 10 selvä, mutta samalla annostuksella voidaan useimmiten havaita vain vähäinen sentraalinen vaikutus aivolisä-ke-munasarjatakselilla.

Tällaisia kilpailevia progesteroniantagonisteja voidaan myös pitää dissosioituneina, koska ovulaatio ei es-15 ty (sentraalinen vaikutus) määrätyllä annoskynnysarvolla, vaikka voidaan havaita muutoksia kohdun limakalvossa. Ovulaation estävän annoksen ja kiinnittymisen estävän annoksen suhdetta (dissosiaatiokerrointa) (määritettynä rotassa suun kautta annon jälkeen) voidaan käyttää dissosiaation mitta-20 na. Tämä suhde vaihtelee yhdisteestä toiseen, mutta dis-. sosioituneella eli kilpailevalla progesteroniantagonistilla se on vähintään noin 30 tai suurempi.

·' Dissosioituneiden eli kilpailevien progesteronian- '! tagonistien etu johtuu siitä, että niitä voidaan antaa niin • 25 suurina annoksina, että voidaan saavuttaa vaikutuksia koh- dun limakalvoon estämättä ovulaatiota. Tuloksena on normaa-; ; : Iin kuukautissykiin jatkuminen.

Kilpailevia progesteroniantagonisteja annetaan edullisesti yksilöllisesti mitoitettuina annosyksikköinä, » · .·*·. 30 esim. edullisesti 4-10 päivän välein säännöllisin vä- • » liajoin, esim. kuukautissykiin aikana viikon välein annok- • » ' sena, joka on riittämätön estämään ovulaatio tai indusoi- maan keskenmeno, jos kiinnittyminen on jo tapahtunut. Sa- mantapainen vaikutus kohdun limakalvon vastaanottokykyyn .·. : 35 voidaan toisaalta saavuttaa pienemmillä, kerran päivässä • : » suun kautta annettavilla annoksilla. On myös mahdollista 7 112167 käyttää hitaasti vapauttavia systeemejä (mikrokiteisiä suspensioita, transdermaalisia laastareita ja subkutaaniistutteita) sillä edellytyksellä, että niistä vapautuneen proge-steroniantagonistin määrä on riittävä estämään munan kiin-5 nittyminen systeemin laskettuna elinaikana, mutta pienempi kuin annos, jolla on vaikutusta ovulaatioon, joka tapahtuisi muussa tapauksessa mainittuna aikana.

Kilpailevien progesteroniantagonistien yllä kuvattu käyttäytyminen voidaan osoittaa täysikasvuisilla naaraslak-10 kiapinoilla (Macaca radiata) suoritetuilla kokeilla, joissa käytettiin Onaprstonia (HS-(4-dimetyyliaminofenyy- li) -17o;-hydroksi-17S- (3-hydroksipropyyli) -13o!-metyyli-4,9-gonadien-3-onia; EP-A 0 129 499) , joka on tyypillinen kilpaileva progesteroniantagonisti.

15 Koejärjestely oli seuraava:

Lakkiapinat: Täysikasvuisia naaraseläimiä, kehon paino 3,5 - 4,5 kg. Onapristonilla käsitellyt ryhmät (N = 3) : 5 mg ja 10 mg eläintä ja ryhmää kohti subkutaanisti öljype-20 rusaineessa (bentsyylibentsoaatti/risiiniöljy 1 : 10).

Hoidon aloittaminen ja hoito -ohjelma: ; t Kuukautissykiin 1. päivänä, sitten anto viikon välein.

[ Hoidon kesto: *· : Kaksi sykliä.

ί 25 Välitysainekontrolli (N = 3) :

Yksi millilitra.

I i i l ', : Verinäytteiden otto:

Kerran päivässä ko. kuukautissyklin 10 ensimmäisenä päivä-; nä, sitten joka toinen päivä; myös esihoito- ja jälkihoito- 3 0 syklin aikana.

Kohdun limakalvon histologia: i * : " Biopsiat suoritettiin ketamiininukutuksessa (10 mg/kg ke- • · *...· honpainoa) toisen syklin 20. päivänä, ts. progesteronianta- gonistin 7 annon jälkeen.

• - | • t 35 112167 8

Hormonimääritykset:

Progesteroni ja estradioli määritettiin radioimmunoanalyy-sin (RIA) avulla.

Kohdun limakalvon ja hormonipitoisuuden muutoksiin 5 liittyvät havainnot:

Taulukosta 1 ilmenee, että keksinnön mukainen hoito ei ole muuttanut syklin eikä kuukautisjakson pituutta kontrolliryhmään verrattuna.

Estradioli- ja progesteronipitoisuudet osoittavat 10 selvästi, että follikulogeneesi ja ovulaatio ovat tapahtuneet normaalisti kaikissa eläimissä: normaali esiovulaation estradiolipiikki, normaali progesteronipitoisuus luteaali-vaiheessa (kuvio 1).

Histologia osoittaa, että kontrollieläimistä poike-15 ten kohdun limakalvo oli atrofioitunut molemmissa hoitoryhmissä. Vaikutus oli erityisen voimakas kohdun limakalvon rauhasissa: rauhasten atrofiaa ja deaktivoitumista ja stroomakudoksen kasvua.

» » t ♦ » i · I ; ·

• I

t I

* • » • · * ft » t

i I » > I

t ft * I ft I » ft 112167 9

Ai rt •ro (0 Η

U

3

Ai d ra Λ <υ * -H r—l π rH :(Ö

Ai CG -n cr >1 ti u m 3 ^ ti S o μ Λ CNCNn ^ h n -h

JJ ö -H M rH

-H ·· Qj > X

ti O £j — >1

-H ίΣ(Β CQ

H -rl _ D

Ai Ai £ D Ai r H t" ΐί co ^ ti >Ί i—I " -U M 04 04 04 04 CO 04 04 04 φ

n :(Ö y -H > M

Dl b 2 ft"' -h -H :(β u g 0 m g (β oi D — -h

Ai d 3 Ai M

0 ·Η··4-)^-Ι O] OJ Γ0 LO rH rH H H (N £ 0 i—I P-ι -H £> d)

Ai Ai s α — >1 ti * en m o

d o ti r> JJ

5 JJ d ti Ai o >rt -rl ·· -U D * ti •H OU-rl> CO ID o oocnuo (O UI CO > o isä-' OI OI (O Γ0 04 O] LO O] 04 ti d ra

P. S

rt >

Ai m !(ö

Ai rH D —. ^ rt a ti Ai “

. H -H ·· JJ D ro 04 04 04 H H CO H H -H

H ft Ή ί> -*S

* XX | +j m ra ? ti o ti ^ , ; : Ai -ra n d Ai • > -rl -rl · 4-) Sh ti

• rt OU-h> UO^CO O- VD in io co D

f» k s ft w OI O) OI 04 03 04 04 04 04 Aj ti s* , d rH D ^ • » » Q H ^ ^ .

V * 4J 4J Ai 04ΗΓ0 't H CO Ί1 OI CO ™ (Q M fti -H ft m

H O S (A > -H

MD— _ 0 :·.·. o, -h ro _ n .X, • · rt O d ~ TT 77 y ° ti x ti ti x ti 8 x • · o ö -H ·· JJ M H 3 ί .(rt ·...· S ra u -h > ^ in oi j io co rf .7 vo ># o 7

. «J $ WSCA— ^ 04 04 04 .jlj 04 03 04 £ oi oi ro H

-n 4J S > ^ Ai • · ti 4-> \ Dl >o ... ö ti -η Dl B ra

« * (D Φ i—I g O

·...· a) -H :rt o -rl

. H d Dj > 140 H 4J

... -h — — — rt : : : o rt ^ rt

• Ai ω Dj H 04 ro rH

.·. : Ai >. g ti . · d J-) w =rt =rt =rt >

rH -H g g g O

d H d £ U) 10 ,d ^ 04 O Ai CO O O

rt :rt O >1 OI OI O Saroin S O H CO 04 gl > M Pi rl 04 ii OI 04 04 Pi 04 04 rl * 112167 10

Yllä kuvatut havainnot osoittavat selvästi, että kilpailevat progesteroniantagonistit sopivat kontraseptioon (kiinnittymisen estoon) yksittäisannoksina siten, että yhdellä annosyksiköllä ei ole ovulaation estovaikutusta eikä 5 keskenmenoa aiheuttavaa vaikutusta edellyttäen, että an-nosyksiköt annetaan ennen jokaisen kuukautissyklin aikana tapahtuvaa ovulaatiota ja valinnaisesti myös sen jälkeen.

Sopivia kilpailevia progesteroniantagonisteja ovat kaikki yhdisteet, joilla on voimakas affiinisuus gesta-10 geenireseptoreihin (progesteronireseptoreihin) ja joilla ei sinänsä ole gestageenivaikutusta. Esim. seuraavat steroidit ovat sopivia: 11β-[(4-N,N-dimetyyliamino)-fenyyli] -17S-hydroksi-17a-pro-pinyyli-4,9(10)-estradien-3-oni (RU-38486), 15 11β- [ (4-N,N-dimetyyliamino) -fenyyli] -17B-hydroksi-18-me- tyyli-17a-propinyyli-4,9(10)-estradien-3-oni ja 11β-[(4-N,N-dimetyyliamino)-fenyyli]-17afi-hydroksi-17aa-propinyyli-D-homo-4,9(10),16-estratrien-3-oni (kaikki selitetty julkaisussa EP-A 0 057 115), 20 llβ-p-metoksifenyyli-17β-hydroksi-17α!-etinyyli-4,9 (10) estra dien-3-oni (Steroids 37 (1981), 361 - 382) ja ’ 11β-(4-asetyylifenyyli)-17fi-hydroksi-17a-(prop-l-inyyli)4,9 / l (10)-estradien-3-oni (EP-A-0 190 759) ja julkaisussa EP-A-0 277 676 kuvatut llfi-aryyli-14fi-estra- 25 dieenit ja -estratrieenit, 19,Ιΐβ-silloitetut steroidit, jotka ovat US-patentin 5 095 129 kohteena, julkaisusta EP-A 0 289 073 tunnetut l^-aryyli-6-alkyyli (tai 6-alke-jv, nyyli tai 6-alkinyyli)estradieenit ja pregnadieenit ja jul- kaisusta EP-A O 321 010 tunnetut 17fi-aryyli-7-metyyli (tai • · 30 7-etyyli) estradieenit samoin kuin julkaisun EP-A O 404 283 • '· ΙΟβ-Η-steroidit. Tämä luettelo ei ole täydellinen ja sopi- : : via ovat myös muut yllä mainituissa julkaisuissa selitetyt ,···, kilpailevat progesteroniantagonistit ja tässä patenttihake- • i · ! . muksessa mainitsemattomien julkaisujen antagonistit.

• I I

* * 35 Tässä keksinnössä käyttökelpoisia ovat erityisesti sellaiset kilpailevat progesteroniantagonistit, joilla on 112167 11 perifeerisesti selektiivinen vaikutus, ts. joilla on selvä vaikutus kohdun limakalvoon, annoksena, jolla useimmiten voidaan havaita vain vähäinen sentraalinen vaikutus aivolisäke -munasarjatakselilla.

5 Tällaisia kilpailevia progesteroniantagonisteja voidaan myös pitää dissosioituneina, koska ovulaatio ei esty (sentraalinen vaikutus) määrätyllä annoskynnysarvolla, vaikka voidaan havaita muutoksia kohdun limakalvossa. Ovulaation estävän annoksen ja kiinnittymisen estävän annoksen 10 suhdetta (dissosiaatiokerrointa) voidaan käyttää dissosiaa-tion mittana. Tämä suhde vaihtelee yhdisteestä toiseen ja on keksinnön mukaisesti käytettävällä kilpailevalla proge-steroniantagonistilla 30 tai suurempi (rotassa suun kautta annon jälkeen).

15 Tämän keksinnön mukaisesti käytettävien dissosioi- tuneiden, kilpailevien progesteroniantagonistien etu johtuu siitä, että niitä voidaan antaa niin suurina annoksina, että voidaan saavuttaa tarpeellisia vaikutuksia kohdun limakalvoon estämättä ovulaatiota, ts. voidaan ylläpitää kuu-20 kautissyklin "normaali" kulku.

: Kilpailevia progesteroniantagonisteja voidaan antaa : : esim. paikallisesti, ulkonaisesti, enteraalisesti, trans- : * dermaalisesti tai parenteraalisesti. Anto suun kautta on • : edullinen.

25 Edulliseen suun kautta antoon sopivat erityisesti , tabletit, päällystetyt tabletit, kapselit, pillerit, sus- • » · pensiot tai liuokset, jotka voidaan valmistaa tavalliseen .. , tapaan gaalenisissa lääkkeissä tavanomaisesti käytettyjen ‘t>; lisäaineiden ja välitysaineiden kera. Paikallisessa tai ul- '·;* 30 konaisessa käytössä sopivia ovat emätinpuikot, emätinhyyte- löt, implantaatit, emätinrenkaat tai transdermaaliset sys-teemit, kuten iholaastarit. Mahdollisia ovat myös emätin- • · · renkaat, jotka voidaan poistaa määrätyn antoa jän jälkeen,

I I I

[ esim. yli 14 vuorokauden annon jälkeen, ja sijoittaa pai-

• · I

*· '· 35 koilleen seuraavan anto jakson alkaessa.

112167 12

Annosyksikkö sisältää tyypillisesti noin 0,25 50 mg IS- [ (4-N,N-dimetyyliamino) -fenyyli] -17a-hyd- roksi-17J3- (3-hydroksipropyyli) -13a-metyyli-4,9(10) -gona-dien-3-onia tai biologisen ekvivalenttimäärän toista kil-5 pailevaa progesteroniantagonistia.

Jos ehkäisyaine annetaan istutteen, emätinrenkaan tai transdermaalisen systeemin avulla, nämä antosysteemit on suunniteltava siten, että kilpailevaa progesteroniantagonistia vapautuu päivittäin annoksena, joka on tällä alu-10 eella 0,25 - 50 mg.

Kilpailevan progesteroniantagonistin keksinnön mukaisesti annettava annos alittaa ko. progesteroniantagonistin annostusalueen, joka estää ovulaation ja indusoi keskenmenon .

15 0,25-20 mg annetaan yleensä yhtenä annoksena; erityisesti ja nimenomaan käytettäessä perifeerisestä selektiivisiä, kilpailevia progesteroniantagonisteja voidaan antaa kerralla 0,5 - 50 mg, koska perifeerisesti selektiiviset ehkäisyaineet mahdollistavat paljon suuremman annos-20 tuksen aiheuttamatta ovulaation estoa. Sanonta "yhtenä an-; noksena" tai "antaa kerralla" käsittää myös antosysteemin, : josta vapautuu jatkuvasti kilpailevaa progesteronianta- ; * * ; gonistia nopeudella, joka vastaa päivittäistä annosta •; ; 0,25 - 20 mg tai yhtä ainoata annosta 0,5 - 50 mg.

25 Uskotaan, että ammattimies pystyy yllä olevan seli- tyksen perusteella käyttämään käsiteltävänä olevaa keksin- » · · töä koko laajuudessaan ilman lisäperehtymistä. Seuraavia .. , edullisia, valikoituja suoritusmuotoja on siten pidettävä • * •t<; pelkästään valaisevina eikä mitenkään selityksen muita osia *·’ 3 0 rajoittavina.

.* ·,. Kaikki lämpötilat ovat edellä esitetyssä ja seuraa- vissa esimerkeissä korjaamattomia ja esitetty celsiusastei-na ja jollei muuta ilmoiteta, kaikki osat ja prosentit ovat • * · ; , painon mukaan.

• · · *· : 35 Kaikkien yllä ja alempana lainattujen patenttihake musten, patenttien ja mahdollisten julkaisujen ja saksa- 112167 13 laisten etuoikeuspatenttihakemusten P 42 16 003.0 ja P 42 16 004.9 selitykset on kokonaisuudessaan liitetty tähän patenttihakemukseen viitteinä.

Valmistusesimerkki 1 5 11S,19-[4-(4-syaanifenyyli)-o-fenyleeni]-17S-hyd- roksi-17a-(3-hydroksiprop-l(Z)-enyyli)-4-andros-ten-3-oni a) 3,3-dimetyylitriiaetyleenidioksi-llS, 19- (4-nona-fluoributyyli sulfonyy1ioksi-o-fenyleeni)-andros taa-10 ni-5a,17S-dioli 50 g 3,3-dimetyylitrimetyleenidioksi-llS,19-(4-no-nafluoributyylisulfonyylioksi-o-fenyleeni)-androstaani-5a,176-diolia (PCT-patenttihakemuksen PCT/DE88/00150 esimerkki 18a, patenttihakemuksen selitys liitetty tähän pa-15 tenttihakemukseen viitteenä) liuotettiin suojakaasukehässä 1,75 litraan tetrahydrofuraania (lievästi samea liuos) ja liuokseen sekoitettiin 0 °C:ssa 71,3 ml n-butyylilitium-liuosta (1,6 M heksaanissa). Kun oli sekoitettu 30 minuuttia, lisättiin tiputtaen 22,8 ml 1,1,2,2,3,3,4,4,4-nona-20 fluori-1-butaanisulfonyylifluoridia (noin 90 %) . Kun oli * · sekoitettu yksi tunti jäähdyttäen jäähauteessa, reaktioseos ·,’ sekoitettiin kyllästettyyn bikarbonaattiliuokseen ja sekoi- ,'t ! tettiin vielä voimakkaasti yksi tunti. Sitten lisättiin , : etyyliasetaattia ja vesifaasi eristettiin ja uutettiin 25 useita kertoja etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin neutraaleiksi kyllästetyllä natriumkloridi-liuoksella, kuivattiin natriumsulfaatin päällä ja konsent-roitiin haihduttamalla vakuumissa. Saatiin 90,9 g otsikko-yhdistettä epäpuhtaana tuotteena. 1,9 g nonaflaattia

* I

'1;1 30 (C4F9SO3) kromatograf ioitiin silikageelillä etyyliasetaatin ja heksaanin seoksella. Saatiin 1,27 g puhdasta otsikkoyh-distettä valkoisena vaahtona. Sulamispiste 132 - 133 °C, [a] d2 = +15,4° (CHCI3, c = 0,525).

1 ( 1 » 112167 14 b) 3,3-dimetyylitrimetyleenidioksi-5ar-hydroksi- 11β,19-(4-nonafluoributyylisulfonyylioksi-o-feny-leeni)-androstaani-17-oni 63 g kromitrioksidia lisättiin annoksittain 5 0 °C:ssa seokseen, jossa oli 210 ml pyridiinia ja 600 ml metyleenioksidia. Sitten lisättiin tiputtaen samassa lämpötilassa 89 g kohdassa a) saatua nonaflaattia, joka oli liuotettu 250 ml:aan metyleenikloridia. Reaktioseos lämmitettiin sitten hitaasti huoneenlämpötilaan ja sekoitettiin 2 10 tuntia. Sekoituksen päätyttyä supernatanttifaasi eristettiin dekantoimalla ja jäännös pestiin useita kertoja perusteellisesti metyleenikloridilla. Epäorgaanisten komponenttien tähteet poistettiin olennaisesti yhdistetyistä orgaanisista faaseista pesemällä 0,5 M natriumhydroksidiliu-15 oksella, pestiin neutraaliksi vedellä, kuivattiin natrium-sulfaatin päällä ja konsentroitiin haihduttamalla vakuumis-sa (pyridiini poistettiin tislaamalla atseotrooppisesti to-lueenin kera). Kromatografioimalla jäännös alumiinioksidilla (neutraali, vaihe III) etyleeniasetaatin ja heksaanin 20 seoksella saatiin 61,9 g otsikkoyhdistettä kellertävänä , · vaahtona. Kiteyttämällä etyyliasetaatista saatiin 55,7 g.

- Sulamispiste 176 - 177 °C, [a] d2 = +25,3° (CHC13, c = ; 0,520) .

: c) 3,3-dimetyylitrimetyleenidioksi-llS,19-(4-nona- 25 fluoributyylisulfonyylioksi-o-fenyleeni)-17a-[3- ;. (tetrahydropyran-2-yylioksi)-prop-l-inyyli]-andros- taani-5a,17S-dioli . Sekoitettiin 0 °C:ssa suojakaasukehässä 1 litra ab- soluuttista tetrahydrofuraania ja 73,5 ml 2-(2-propinyy- i · 30 lioksi) -tetrahydro-2H-pyraania. Sitten tähän liuokseen li- j sättiin hitaasti tiputtaen 328 ml 1,6 M n-butyylilitium- liuosta ilman merkittävää lämpötilan nousua. Kun oli sekoi- • * * tettu 30 minuuttia, tähän reaktioseokseen lisättiin hitaas-I . ti tiputtaen ja jäähauteessa jäähdyttäen liuos, jossa oli • * t *· · 35 50 g kohdassa b) saatua ketonia liuotettuna 500 ml:aan ab soluuttista tetrahydrofuraania, ja sekoitusta jatkettiin 30 112167 15 minuuttia. Reaktioseokseen sekoitettiin sitten kyllästettyä ammoniumkloridiliuosta ja vesifaasi uutettiin etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin natriumkloridi-liuoksella, kuivattiin natriumsulfaatin päällä ja konsent-5 roitiin haihduttamalla vakuumissa. Jäännös kromatografioi-tiin alumiinioksidilla (neutraali, vaihe III). Saatiin 50,3 g otsikkoyhdistettä valkoisena vaahtona.

d) 11S,19- [4-(4-syaanifenyyli)-o-fenyleeni]-3,3-di-metyylitrimetyleenidioksi-17a-[3-(tetrahydropyran- 10 2-yylioksi) -prop-l-inyyli] -androstaani-5ar, 17S-dioli

Liuotettiin 50 g kohdassa c) saatua nonaflaattia seokseen, jossa oli 400 ml tolueenia ja 155 ml etanolia, ja liuokseen sekoitettin peräkkäin suojakaasukehässä 1,44 g tetrakis(trifenyylifosfiini)palladiumia(O), 5,33 g litium- 15 kloridia, 78 ml 2 M natriumkarbonaattiliuosta ja 13,1 g 4-(1,3,2-dioksaborinan-2-yyli)bentsonitriiliä. S. Takahashi ja muut, Bul. Chem. Soc. Jpn, 62, 3896 (1989). Reaktioseos-ta sekoitettiin sitten 3 tuntia öljyhauteessa lämpötilassa 95 °C, jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ja sekoitettiin ve-20 den ja etyyliasetaatin kera. Vesifaasi eristettiin ja uu-* tettiin etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset faasit \ ,·’ kuivattiin natriumsulf aatin päällä ja konsentroitiin haih- | duttamalla vakuumissa. Jäännös kromatografioitiin sili- : : kageelillä etyyliasetaatin ja heksaanin seoksella. Saatiin • » i · ;· 25 38 g otsikkoyhdistettä kellertävänä vaahtona, [a] d2 = -36,5° i * Ϊ (CHC13, c = 0,515) .

e) HS, 19- [4- (4-syaanifenyyli) -o-fenyleeni] -17β- hyd-roksi-17a- (3-hydroksiprop-l-inyyli) -4-androsten-3-oni *,,! Liuotettiin 37 g kohdassa d) saatua ketoniasetaalia > · • · 30 950 ml:aan asetonia ja liuokseen sekoitettiin suojakaasuke- * » • '·. hässä 95 ml 4 N vedellistä kloorivetyhappoa. Kun oli sekoi- : : tettu kaksi tuntia 50 °C:ssa, reaktioseos kaadettiin kyl- ,··, mään, kyllästettyyn natriumbikarbonaattiliuokseen (emäksi- • » · ! . nen pH) ja suurin osa asetonista poistettiin tislaamalla.

• 1 · ‘ ' 35 Kun oli lisätty metyleenikloridia, vesifaasi eristettiin ja uutettiin useita kertoja metyleenikloridilla. Yhdistetyt 112167 16 orgaaniset faasit kuivattiin natriumsulfaatin päällä ja konsentroitiin haihduttamalla vakuumissa. Jäännös kromato-grafioitiin silikageelillä etyyliasetaatin ja heksaanin seoksella. Saatiin 23,8 g otsikkoyhdistettä kellertävänä 5 vaahtona.

f) 11S,19-[4-(4-syaanifenyyli)-o-fenyleeni]-17β-hydroksi-17a-(3-hydroksiprop-1(Z)-enyyli)-4-androsten-3-oni

Liuotettiin 23 g kohdassa e) saatua propargyylial-10 koholia suojakaasukehässä 825 ml:aan tetrahydrofuraania, liuokseen sekoitettiin 23 ml pyridiiniä ja hydrattiin normaalipaineessa käyttäen katalyyttinä 2,3 g palladiumia ba-riumsulfaatilla (10 %) . Kun ekvivalenttimäärä vetyä oli absorboitunut (TLC-kontrollin lisäksi!), reaktioseos suoda-15 tettiin Celitella, suodatuskakku pestiin toistamiseen tetrahydrof uraanilla ja suodos konsentroitiin haihduttamalla vakuumissa. Pyridiini poistettiin tislaamalla atseotrooppi-sesti tolueenin kera. Jäännös kiteytettiin uudelleen mety-leenikloridi/metanolista. Saatiin 14,3 g otsikkoyhdistettä 20 valkoisena kidemassana. Sulamispiste 265 - 266 °C (hajoaa), , : [a] d2 = +117,8° (CHC13, c = 0,500.

ν,ί Valmistusesimerkki 2 ; : 11β,19-[4-(3-pyridinyyli)-o-fenyleeni]-17S-hydrok- si-17a- (3-hydroksiprop-1 (Z) -enyyli) -4-androsten-3- t * < » . \ 2 5 oni I I t i /;. a) 11β, 19-[4-(3-pyridinyyli) -o-fenyleeni] -3,3-di- ti· metyylitrimetyleenidioksi-17a-[3-(tetrahydropyran-, 2-yylioksi)-prop-l-inyyli]-androstaani-5a,17fi-dioli t ·

Liuotettiin 13,7 g kohdassa le) saatua nonaflaattia 30 seokseen, jossa oli 140 ml tolueenia ja 70 ml etanolia, ja j’’.. liuokseen sekoitettiin peräkkäin suoj akaasukehässä 877 mg tetrakis(trifenyylifosfiini)palladiumia(O), 1,29 g litium- • · » kloridia, 19 ml 2 M natriumkarbonaattiliuosta ja 2,46 g di- • » · ; . etyyli(3-pyridinyyli)boraania. Reaktioseosta sekoitettiin *· *· 35 sitten 2 tuntia öljyhauteessa lämpötilassa 95 °C, jäähdy tettiin huoneenlämpötilaan ja siihen sekoitettiin vettä ja 112167 17 etyyliasetaattia. Vesifaasi erotettiin ja uutettiin etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivattiin natri-umsulfaatin päällä ja konsentroitiin haihduttamalla vakuu-missa. Jäännös kromatografioitiin silikageelillä etyyliase-5 taatin ja heksaanin seoksella. Saatiin 8,8 g otsikkoyhdis-tettä kellertävänä vaahtona.

b) 11S,19-[4-(3-pyridinyyli)-o-fenyleeni]-17S-hyd-roksi-17a-(3-hydroksiprop-l-inyyli)-4-androsten-3-oni 10 Liuotettiin 8,8 g kohdassa a) saatua ketoniasetaa- lia 250 ml:aan asetonia ja liuokseen sekoitettiin suojakaa-sukehässä 5 ml 4 N vedellistä kloorivetyhappoa. Kun oli sekoitettu kaksi tuntia 50 °C:ssa, reaktioseos kaadettiin kylmään, kyllästettyyn natriumbikarbonaattiliuokseen (emäk-15 sinen pH) ja suurin osa asetonista poistettiin tislaamalla.

Kun oli lisätty metyleenikloridia, vesifaasi eristettiin ja pestiin useita kertoja metyleenikloridilla. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivattiin natriumsulfaatin päällä ja konsentroitiin haihduttamalla vakuumissa. Jäännös kromatogra-20 fioitiin silikageelillä etyyliasetaatin ja heksaanin seok-V * sella. Saatiin 5,0 g otsikkoyhdistettä kellertävänä vaahto- :V: na. [a}l2 = +48,6° (CHC13, c = 0,530).

: c) 11S,19-[4-(3-pyridinyyli)-o-fenyleeni]-17S-hyd- • : ; roksi-17oi-(3-hydroksiprop-l (Z)-enyyli)-4-androsten- j. 2 5 3-oni

Liuotettiin 5 g kohdassa b) saatua propargyylialko- • « » holia suojakaasukehässä 200 ml:aan tetrahydrofuraania, liu- .. . okseen sekoitettiin 5 ml pyridiiniä ja hydrattiin normaali- » · * paineessa käyttäen katalyyttinä 500 mg palladiumia barium- • · '·;>* 30 sulfaatilla (10 %) . Kun ekvivalenttimäärä vetyä oli absor- hoitunut (TLC-kontrollin lisäksi!), reaktioseos suodatet- • tiin Celiten läpi, suodatuskakku pestiin toistamiseen tet-rahydrofuraanilla ja suodos konsentroitiin haihduttamalla I I « ( vakuumissa. Pyridiini poistettiin tislaamalla atseotrooppi- i » » ’· 35 sesti tolueenin kera. Jäännös kromatografioitiin silikagee lillä etyyliasetaatin ja heksaanin seoksella. Saatiin 3,4 g 112167 18 otsikkoyhdistettä kellertävänä öljynä. Kiteyttämällä etyyliasetaatista saatiin 3,12 g valkoisia kiteitä. Sulamispiste 219 - 221 °C, [aio2 = +72,2° (CHC13, c = 0,505). Formulointiesimerkki 3 5 10,0 mg HS- [ (4-N,N-dimetyyliamino)-fenyyli]-17a- hydroksi-17S- (3-hydroksipropyyli) -13a-me-tyyli-4,9(10)-gonadien-3-onia 140.5 mg laktoosia 69.5 mg maissitärkkelystä 10 2,5 mg polyvinyylipyrrolidonia 25 2.0 mg aerosilia 0,5 mg magnesiumstearaattia 225.0 mg kokonaispaino 15 Yllä kuvattu koostumus formuloidaan tavalliseen ta paan 10 mg painaviksi tableteiksi annettaviksi suun kautta.

Käytettäessä ehkäisyainetta on kriittistä, että ainakin yksi annosyksikkö annetaan kuukautissykiin follikke-livaiheessa (ennen ovulaatiota) ja valinnaisesti annetaan 20 vähintään yksi annosyksikkö kuukautissykiin luteaalivai-V · heessa (ovulaation jälkeen).

!f! I Ehkäisyaine annetaan edullisesti yksittäisinä an- : ' i nosyksikköinä 4-10 päivän välein, edullisesti viikon väli': lein tai samana päivänä siten, että aloitetaan minä tahansa • I * * . . 25 päivänä ennen ovulaation alkamista ensimmäisen kuukautis- syklin aikana, jolloin anto tapahtuu. Aikaväli yksittäisten • » » annosyksikköjen antojen välissä pidetään edullisesti vakio-., , na.

Ill • ·

Ehkäisyaine annetaan edullisesti kerran viikossa

I I

’•y* 30 samana viikonpäivänä, esim. maanantaisin ("maanantaipille- : ri"). Rytmi, jossa anto tapahtuu viikon välein aina samana viikonpäivänä, mahdollistaa erittäin hyvän luotettavuusta-son. Mutta on myös mahdollista antaa annosyksikkö päivän II» ; , välein, kahden päivän välein tai kolmen päivän välein joko «ti ’· * 35 kuukautissykiin pelkän follikkelivaiheen aikana tai lisäksi myös luteaalifaasin aikana. On myös mahdollista vaihdella 112167 19 ehkäisyaineen yksittäisten annosyksikköjen antointervalleja tai antaa ehkäisyaine vakionopeudella pitkävaikutteisesta välitysaineimplantaatista.

Kilpailevien progesteroniantagonistien ovulaation 5 estävien annosten määrittämiseksi toteutettiin alla kuvattu ovulaation estotesti rotalla; vastaavat keskenmenon aiheuttavat annokset saatiin tunnetusta (esim.

US 5 095 129) rotan keskenmenotestistä.

Yhdisteiden I, II ja RU 486 määritetyt dissosiaa-10 tiokertoimet ovat:

Yhdiste Dissosiaatiokerroin I > 100 II > 30 RU 486 < 10 15

Sekä yhdisteellä I että II on lisäksi havaittu, että joskin niillä on äärimmäisen voimakas antinidaatiovaiku-tus (yhdisteellä I on vielä kiinnittymisen täysin estävä vaikutus rotassa päiväannoksella 0,1 mg ja yhdisteellä II 20 päiväannoksella 0,3 mg), niillä ei samanaikaisesti ole an-*. : tiglukokortikoidista vaikutusta. Tämä käy ilmi antigluko- kortikoidista vaikutusta mittaavasta tymolyysitestistä (EP- :* ί A 0 283 428) .

• > j ; : Yhdisteet I ja II valmistetaan käyttäen syn- ♦ * I » • j. 25 teesireittiä, joka on selitetty julkaisussa EP-A O 283 ti < « 428), ja alla olevissa esimerkeissä kuvatulla tavalla.

• ♦ »

Ovulaation estotesti rotassa >·'<' Menetelmäperiaate • ·

Ovulaation estävien aineiden löytämiseksi rotta on *;* 3 0 hyvin sopiva, koska se ovuloi spontaanisti ja sykli on hei- i · I posti havaittavissa emätinsivelyvalmisteiden avulla. Tämä mahdollistaa testin kulun tarkkailun myös hoitovaiheessa.

iti .h Menetelmäesimerkki 4 I f » * * *

Koe-eläimet

• i I

’* ’· 35 Naarasrottia, paino 190 - 210 g, 6 eläintä annosta kohti. Eläimet pidettiin Macrolon-häkeissä huoneissa, jois 112167 20 sa altistuminen valolle voitiin säätää (10 tuntia pimeyttä, 14 tuntia valoa), ravintona standardidieetti (pelletoitu rotanruoka) ja vesijohtovettä vapaasti.

Testiaineiden formulointi ja anto 5 Testiaineet liuotettiin bentsyylibentsoaatti/ ri siiniöljyyn (t/t 1+9) ja päiväannos annettiin subkutaa-nisti tilavuudessa 0,2 ml.

Annettaessa suun kautta testiaine suspendoitiin kantajanesteeseen (85 mg MyrjR 100 mlrssa 0,9 p/t-prosent-10 tista NaCl-liuosta) ja päiväannos annettiin tilavuudessa 0,5 ml.

Testierä

Tarkkailtiin kahta sykliä ennen testin aloittamista emätinsivelyvalmisteiden avulla. Testissä käytettiin pel-15 kästään eläimiä, joilla oli säännöllinen neljän vuorokauden sykli. Valinta hoitoryhmiin tapahtui mielivaltaisesti. Aloittaen metestruksesta testiainetta annettiin neljänä päivänä (päivät 1-4) ja syklin tarkkailua jatkettiin.

4. päivänä (annon jälkeen) eläimistä, jotka olivat 20 estrus- tai metestrus-tilassa emätinsivelyvalmisteen aika- • ’ na, poistettiin munasarja toiselta puolelta eetterinukutuk- : ’ sessa. Munanjohtimista valmistettiin murskepreparaatteja ja .* : niistä tutkittiin munasolut mikroskoopilla. 5. päivänä ; ; kaikki eläimet (koskemattomat ja eläimet, joista munasarja . 25 oli poistettu toispuolisesti) tapettiin C02-kaasulla ja mu- , , nanjohtimet preparoitiin ja tutkittiin samalla tavoin.

Menetelmäesimerkki 5

Arviointi > * ’ Yksittäisissä annostusryhmissä määritettiin eläin- 30 ten prosentuaalinen osuus, joiden ovulaatio oli estynyt.

• ‘ -· Vapaaehtoiset: ; Potilaiden anamneesitila: Pelkästään terveitä, nor- .maalisyklisiä naisia. Edullisesti vapaaehtoisia, joiden mo-; . lemmat munanjohtimet on sidottu tai molemmat munanjohtimet ' ’ 35 on poistettu leikkaamalla (kohdunulkoinen raskaus), tai 112167 21 naisia, jotka ovat olleet yhteydessä pelkästään vasektomoi-tujen partnerien kanssa.

Ihmistutkimus 1: Kohdun limakalvon vastaanottokyvyn biokemiallisen ja morfologisen markkerin (markkerien) ka-5 rakterisointi lyhytkestoisen hoidon jälkeen onapristonilla luteaalivaiheen aikana.

Tämä on esitutkimus biokemiallisten menetelmien, erityisesti kohdun limakalvon markkeriproteiinit identifioivien menetelmien löytämiseksi, jotka ovat käyttökelpoi-10 siä jatkotutkimusten kehittämiseksi, joissa onapristonia annetaan pieninä annoksina (joka päivä ja ajoittain).

Koepöytäkirja:

Vapaaehtoisryhmät:

Kaksi ryhmää (kontrolli- ja hoitoryhmä), kussakin 15 8-10 naista.

Tutkimuksen kesto:

Kolmen syklin eli esihoito-, hoito- ja jälkihoito-syklin arviointi.

Hoito: 50 mg onapristonia päivässä päivinä LH + 1 20 ja LH + 2 suun kautta.

i * · ' * Tiedetään, että tämä onapristoniannos indusoi en- » : ,· nenaikaiset kuukautiset ihmisessä annettaessa luteaalivai- : · heen lopulla. Mutta Bygdemanin tutkimuksen mukaan (Swahn ja : : muut (1990) ) hoito varhaisluteaalivaiheessa (LH + 2) 200 ft ;· 25 mg:11a RU 486:tta yhtenä ainoana annoksena ei vaikuta syk-

Iin pituuteen.

Arviointi: RIA, LH, FSH, E2 ja progesteroni esihoi- · ’. to-, hoito- ja jälkihoitosyklin aikana.

* »

- Kohdun limakalvon biopsia ja kohtunesteen keru päivinä LH

• I

30 + 3 ja LH + 8 (hoitosykli) (ks. yksityiskohdat liitteestä).

• '·· - Kuukautisvuodon ilmeneminen.

: : Ihmistutkimus 2: Tutkimus, jossa arvioidaan ona- ,·!·_ pristonin päivittäisen käytön vaikutus ovulaatioon ja koh- » » · ! . dun limakalvon morfologiaan ja biokemiaan: tutkimus oikean

• > I

‘ * 35 annoksen löytämiseksi.

112167 22 a) Tavoite Tämän tutkimuksen tulosten avulla voidaan löytää onapristoniannos, joka ei vaikuta sykliin, mutta joka vaikuttaa kohdun limakalvon morfologiaan ja toimintaan (kohdun 5 limakalvon markkeriproteiinit). Tällä tavoin voidaan määritellä kohdun limakalvossa muutoksia aiheuttava minimiannos.

b) Tutkimussuunnitelma:

Vapaaehtoisryhmät: Neljä ryhmää (kolme hoitoryhmää ja kontrolliryhmä), kussakin 8-10 naista.

10 Tutkimuksen kesto: Kolmen syklin eli esihoito-, hoito- ja jälkihoitosyklin arviointi.

Anto-ohjelma: Annetaan päivittäin suun kautta 18 annoksena 20 mg (ryhmä 1), 10 mg (ryhmä 2) ja 5 mg (ryhmä 3) onapristonia aloittaen syklin 1. päivänä.

15 c) Arviointi: - RIA, LH, FSH, E2 ja progesteroni ja kortisoli esihoito-, hoito- ja - jälkihoitosyklin aikana.

- Kohdun limakalvon biopsioiden arviointi ja kohtunesteen 20 keruu (previkaalisesti) hoitosyklin 16. ja 23. päivänä (ks.

* yksityiskohdat liitteestä).

.· - Kuukautisvuodon ilmeneminen ·, j Ihmistutkimus 3: Onapristonin kerran viikossa annon i : vaikutukset ovulaatioon, kohdun limakalvon morfologiaan ja ·· 25 biokemiaan.

a) Tavoite: • » · Tämän tutkimuksen tulosten avulla voidaan löytää ...4 onapristonin kerran viikossa annettava annos, joka ei vai- * · kuta sykliin, mutta mutta joka vaikuttaa kohdun limakalvon • · • · 30 morfologiaan ja toimintaan (kohdun limakalvon markkeripro-’·· teiinit) .

: b) Tutkimussuunnitelma:

Vapaaehtoisryhmät: Kuusi ryhmää (viisi hoitoryhmää • * · I , ja kontrolliryhmä), kussakin 8-10 naista, joiden munan- *· * 35 johtimet on sidottu.

112167 23

Tutkimuksen kesto: Neljän syklin eli esihoito-, kahden hoito- ja jälkihoitosyklin arviointi.

Hoito:

Annetaan kerran viikossa suun kautta 50 mg (ryh-5 mä 1) , 2 0 mg (ryhmä 2), 10 mg (ryhmä 3), 2 mg (ryhmä 5) ja 0,25 mg (ryhmä 5) onapristonia aloittaen syklin 1. päivänä kahden syklin aikana.

c) Arviointi: RIA, LH, FSH, E2 ja progesteroni esihoito-, hoito-10 ja jälkihoitosyklin aikana.

Kohdun limakalvon biopsioiden arviointi ja koh-tunesteen keruu molempien hoitosyklien 16. ja 23. päivänä (ks. yksityiskohdat liitteestä).

Kuukautisvuodon ilmeneminen ja poikkeavuudet syklin 15 aikana:

Yllä kuvattua hoitokaaviota toteutettaessa tehtiin seuraavat havainnot: syklin parempi säätely hoitoryhmissä verrattuna kontrolliryhmiin, parempi toleranssi, hyvä kont-raseptioluotettavuus ja kontraseption aikaansaaminen estro-20 geenittomalla annolla.

>

Yllä kuvatut esimerkit voidaan toistaa yhtä hyvin tuloksin korvaamalla edellisissä esimerkeissä käytetyt re-j aktantit ja/tai käyttöolosuhteet tässä keksinnössä geneeri- : sesti tai valikoidusti kuvatuilla reaktanteilla ja/tai ·· 25 käyttöolosuhteilla.

Ammattimies pystyy yllä esitetyn selityksen perusteella helposti tunnistamaan tämän keksinnön olennaiset tunnusmerkit ja poikkeamatta keksinnön hengestä ja suoja- • » alasta ammattimies pystyy monin tavoin muuttamaan ja muun- • ;· 30 telemaan keksintöä keksinnön sovittamiseksi erilaisia käyt-

I I

• töjä ja olosuhteita varten.

i · < • · • · • 1 » I > t » · · • · · » 1 • ·

Claims (18)

112167

1. Dissosioituneen kilpailevan progesteronianta-gonistin, jolla on dissosiaatiokerroin vähintään 30 tai 5 suurempi, käyttö ehkäisyaineen valmistamiseksi, jolla aikaansaadaan naaraassa kontraseptio annosmäärällä, joka on pienempi kuin ovulaation estävä annos ja pienempi kuin keskenmenon aiheuttava annos ja joka pystyy estämään kohdun limakalvorauhasten muodostuminen ja epiteelin kasvu ja/tai 10 estämään onnistuneen kiinnittymisen edellyttämä rauhastoi-minta, tunnettu siitä, että anto tapahtuu naaraan kuukautissykiin follikkelivaiheessa ja mahdollisesti myös luteaalivaiheessa.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen käyttö, t u n -15 n e t t u siitä, että anto tapahtuu vain kuukautissyklin follikkelivaiheessa.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että anto tapahtuu kuukautissyklin sekä follikkelivaiheessa että luteaalivaiheessa.

4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen käyttö, t u n - ^ n e t t u siitä, että anto tapahtuu suun kautta noin ker- . ran viikossa kuukautissyklin jokaisen viikon aikana.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen käyttö, t u n - ’· n e t t u siitä, että kilpaileva progesteroniantagonisti > · 2 5 on .. :* HS- [ (4-N,N-dimetyyliamino) fenyyli] -17S-hydroksi- » V ·* 18-metyyli-17oi-propynyyli-4,9 (10) -estradien-3-oni, 11β-[(4-N,N-dimetyyliamino)fenyyli]-17afi-hydroksi-17ao;-propynyyli-D-homo-4,9 (10) , 16-estratrien-3-oni, ;* 30 ll&-p-metoksifenyyli-17S-hydroksi-17o!-etynyyli- 4,9 (10) -estradien-3-oni tai 11β-(4-asetyylifenyyli)-17fi-hydroksi-17a-(prop-1- ’···* ynyyli) -4,9 (10) -estradien-3-oni .

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen käyttö, t u n -35 n e t t u siitä, että kilpaileva progesteroniantagonisti • · on 112167 111S- (4-dimetyyliaminofenyyli) - 17o!-hydroksi -1715- (3-hydroksipropyyli)-13a-metyyli-4,9-gonadien-3-oni tai 1115- (4-asetyylifenyyli) -17J5-hydroksi-17o;- (3-hydroksiprop-l-enyyli)-4,9(10)-estradien-3-oni.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen käyttö, tun nettu siitä, että kilpaileva progesteroniantagonisti on 1115.19- [4- (syaanifenyyli) -o-fenyleeni] -1715-hydroksi-17a-(3-hydroksiprop-l(Z)-enyyli)-4-androsten-3-oni 10 tai 1115.19- [4- (3-pyridinyyli) -o-fenyleeni] -1715-hydroksi-17o;- (3-hydroksiprop-l (Z) -enyyli) -4-androsten-3-oni.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen käyttö, t u n -15 n e t t u siitä, että progesteroniantagonisti annetaan yksittäisinä annosyksikköinä 4 - 10 päivän välein aloittaen minä päivänä tahansa ennen ensimmäisen kuukautissyklin, jonka aikana anto tapahtuu, ovulaatiopäivää.

9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen käyttö, t u n -20 n e t t u siitä, että progesteroniantagonistin anto tapahtuu suun kautta.

. 10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen käyttö, tun nettu siitä, että naaras on ihminen.

/ 11. Patenttivaatimuksen 1 mukainen käyttö, t u n - · 25 n e t t u siitä, että naaras on ihminen ja progesteronian-1 * · *· ί tagonistin anto tapahtuu ihmiselle suun kautta viikon vä- > ' » · lein jokaisen kuukautissyklin aikana jona halutaan aikaansaada kontraseptio. • » · j

: 12. Patenttivaatimuksen 11 mukainen käyttö, t u n - 30. e t t u siitä, että kilpaileva progesteroniantagonisti » · » on *... HS, 19- [4- (syaani f enyyli) -o-fenyleeni] -1715- ·;* hydroksi-17o;- (3-hydroksiprop-l (Z) -enyyli) -4-androsten-3-oni : tai • · * * * 112167 11β,19-[4-(3-pyridinyyli)-o-fenyleeni]-17β-hydroksi-17o;- (3-hydroksiprop-l (Z) -enyyli) -4-androsten-3-oni .

13. 11β,19-[(4-syaanifenyyli)-o-fenyleeni]- tai 5 11β,19-[4-(3-pyridinyyli)-o-fenyleeni]-17fi-hydroksi-17a-(3- hydroksiprop-1(Z)-enyyli)-4-androsten-3-oni, tunnet -t u siitä, että sillä on kaava JLJ OH \ HVS ^oh jossa R on ^~CN tai ^ j/

14. Patenttivaatimuksen 13 mukainen yhdiste, , tunnettu siitä, että se on 11β,19-[4-(syaani- \ fenyyli) -o-fenyleeni] -17fi-hydroksi-17o;- (3-hydroksiprop- 1(Z)-enyyli)-4-androsten-3-oni.

’> .* 15. Patenttivaatimuksen 13 mukainen yhdiste, ., :* 15 tunnettu siitä, että se on 11β, 19- [4- (3-pyridinyy- V : li) -o-fenyleeni] -17fi-hydroksi-17a- (3-hydroksiprop-l (Z) - enyyli)-4-androsten-3-oni.

16. Patenttivaatimuksen 1 mukainen käyttö, t u n -n e t t u siitä, että naaras on ihminen ja annoksen määrä 20 antoa kohti on 0,25 - 50 mg.

• " 17. Patenttivaatimuksen 8 mukainen käyttö, t u n - ’·»·* n e t t u siitä, että naaras on ihminen ja annoksen määrä antoa kohti on 0,25 - 50 mg. 112167

18. Patenttivaatimuksen 11 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että naaras on ihminen ja annoksen määrä on antoa kohti 0,25 - 50 mg. » * · * » > · * i · t » < · * · • · * * t » · • · · • » · 112167