FI111253B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten heterosyklisten yhdisteiden valmistamiseksi - Google Patents

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten heterosyklisten yhdisteiden valmistamiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI111253B
FI111253B FI960727A FI960727A FI111253B FI 111253 B FI111253 B FI 111253B FI 960727 A FI960727 A FI 960727A FI 960727 A FI960727 A FI 960727A FI 111253 B FI111253 B FI 111253B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
formula
compound
piperidino
dichlorophenyl
piperidine
Prior art date
Application number
FI960727A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI960727A0 (fi
FI960727A (fi
Inventor
Scott Garson Miller
Original Assignee
Astrazeneca Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Astrazeneca Ab filed Critical Astrazeneca Ab
Publication of FI960727A0 publication Critical patent/FI960727A0/fi
Publication of FI960727A publication Critical patent/FI960727A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI111253B publication Critical patent/FI111253B/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

111253
Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten heterosyklisten yhdisteiden valmistamiseksi
Tämä keksintö koskee menetelmää terapeuttisesti 5 käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava I
M-V
W (I)
10 O
λ"(ΟΗ2)—D
jossa m on 2 tai 3; 15 D on jäännös, jolla on kaava Ia °a / -CH2— Nn (Ia)
20 Q R
jolloin Q on fenyyli, jolla voi olla yksi tai kaksi substituenttia, jotka on valittu toisistaan riippumatta 25 halogeenista, trifluorimetyylistä, hydroksista, (1-3C)-alkoksista, (1-3C)alkyylistä ja metyleenidioksista;
Qa on vety tai (1-4C)alkyyli; R1 on vety tai (1-6C)alkyyli; R2 on -C(=0)R3, jossa 30 R3 on vety tai fenyyli (jossa fenyylillä voi olla yksi tai useampia halogeeni-, hydroksi-, (1-4C)alkoksi-tai (1-4C)alkyylisubstituentteja); G tarkoittaa yksinkertaista sidosta; J on okso tai tiokso; 35 M on oksi tai NR12, jossa 111253 2 R12 on vety, (1-3C) alkyyli, Ra0C(=0)CH2- tai RbRcNC (=0) CH2-, jolloin
Ra on vety tai (1-3C)alkyyli;
Rd ja Rc ovat toisistaan riippumatta vety, 5 (1-3C)alkyyli, fenyyli tai bentsyyli; ja L on etyleeni, trimetyleeni tai tetrametyleeni; tai kaavan I mukaisen yhdisteen N-oksidin valmistamiseksi piperidinotyppeen liittyen, joka on osoitettu kaavassa A:11a; 10 tai kaavan I mukaisen yhdisteen tai mainitun N- oksidin farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi; tai kaavan I mukaisen yhdisteen kvaternaarisen ammoniumsuolan valmistamiseksi, jolloin piperidinotyppi, 15 joka on osoitettu kaavasssa on kvadrikovalenttinen ammoniumtyppi, jolloin neljäs radikaali typessä on (1-4C)-alkyyli tai bentsyyli ja liittynyt vastaioni on farmaseuttisesti hyväksyttävä anioni.
Keksinnön mukaisesti saatavat uudet 4-substituoidut 20 piperidiinijohdannaiset vastavaikuttavat neurokiniineina tunnettujen endogeenisten neuropeptiditakykiniinien farmakologisiin toimintoihin erityisesti neurokiniini 2 -reseptorissa (NK2-reseptorissa). Nämä uudet terapeuttiset heterosykliset yhdisteet ovat käyttökelpoisia, milloin 25 tahansa tällaista vastavaikutusta toivotaan. Siten tällaiset yhdisteet voivat olla arvokkaita niiden tautien hoidossa, joissa NK2-reseptori on osallisena, esimerkiksi astman ja siihen läheisesti liittyvien tilojen hoidossa.
Nisäkkään neurokiniinit käsittävät ääreis- ja 30 keskushermostossa tavattavien hermoston peptidivälittäjä-aineiden luokan. Kolme pääasiallista neurokiniinia ovat substanssi P (SP), neurokiniini A (NKA) ja neurokiniini B (NKB). On olemassa myös ainakin NKA:n N-päätteestä pidennettyjä muotoja. Tunnetaan ainakin kolme resep-35 torityyppiä kolmea pääasiallista neurokiniinia varten. Perustuen reseptoreiden suhteelliseen valikoivuuteen 111253 3 suosien neurokiniinien agonisteja SP, NKA ja NKB, ne luokitellaan vastaavasti neurokiniini 1 -reseptoreiksi (NK1), neurokiniini 2 -reseptoreiksi (NK2) ja neurokiniini 3 -reseptoreiksi (NK3). Ääreishermostossa SP ja NKA 5 sijaitsevat C-afferenteissa tuntohermosoluissa, jotka ovat tunnettuja ei-myelinisoiduista hermopäätteistä, jotka tunnetaan C-säikeinä, ja ne vapautuvat näiden hermosolujen valikoivan depolarisaation tai C-säikeiden valikoivan stimulaation tuloksena. C-säikeet sijaitsevat ilmateiden 10 epiteelissä ja takykiniinien tiedetään aiheuttavan syvällisiä vaikutuksia, jotka ovat lähes samansuuntaisia monien astmaatikoilla havaittujen oireiden kanssa. Takykiniinien vapautumiseen ja tuomiseen liittyviin vaikutuksiin nisäkkäiden ilmateissä sisältyvät 15 keuhkoputkien supistuminen, lisääntynyt mikrovaskulaarinen läpäisyvyys, verisuonten laajeneminen ja syöttösolujen aktivoituminen. Siten takykiniinit ovat osallisina astmaatikoilla havaitussa patofysiologiassa ja ilmateiden ylireaktiivisuudessa; ja vapautuneiden takykiniinien 20 toiminnan estäminen voi olla hyödyllistä astman ja siihen läheisesti liittyvien tilojen hoidossa.
Peptidiset NK2-antagonistit on raportoitu. Esimerkiksi syklinen heksapeptidi, joka tunnetaan nimellä L-659 877, on raportoitu valikoivana NK2-antagonistina. Ei-25 peptidiset NK2-antagonistit on myös raportoitu, esimerkiksi tietyt piperidiinit on julkaistu EP-patenttihakemuksissa 428 434, 474 561, 512 901, 512 902, 515 240 ja 559 538.
Sarja piperidiini-NK2-antagonisteja on raportoitu kansainvälisessä patenttihakemuksessa WO 94/10 146.
30 Olemme keksineet sarjan uusia ei-peptidisiä NK2-antagonisteja ja tämä on keksintömme pohja. Keksinnön mukaisesti saadaan 4-substituoidut piperidinojohdannaiset, joissa 4-substituentti on N-sitoutunut heterosykli (kuten jäljempänä on määritelty). Esimerkiksi havaitsimme, että 4-35 (2-okso-l,3-oksatsolidin-3-yyli)piperidinoyhdiste, joka on esitetty jäljempänä esimerkissä 1, on tehokas NK2- 111253 4 antagonisti in vitro -seulonnassa, joka on kuvattu jäljempänä kokeena A, ja funktionaalisessa määrityksessä, joka on kuvattu jäljempänä kokeena B.
On ymmärrettävää, että kaavan I mukainen yhdiste 5 sisältää yhden tai useampia asymmetrisesti substituoituja hiiliatomeita siten, että tällainen yhdiste voidaan eristää optisesti aktiivisissa, raseemisissa ja/tai diaste-reomeerisissa muodoissa. Lisäksi on ymmärrettävää, että kaavan I mukainen yhdiste voi esiintyä tautomeerisissa 10 muodoissa ja että yhdiste voi osoittaa polymorfismia. On ymmärrettävä, että tämä keksintö sulkee piiriinsä minkä tahansa raseemisen, optisesti aktiivisen, diastereo-meerisen, tautomeerisen, polymorfisen tai stereoisomeerisen muodon tai niiden seoksen, kun mainitulla muodolla on NK2-15 antagonistiominaisuudet, jolloin alalla on hyvin tunnettua, kuinka optisesti aktiivisia muotoja valmistetaan (esimerkiksi erottamalla raseeminen muoto tai valmistamalla synteettisesti optisesti aktiivisista lähtöaineista) ja kuinka määritetään NK2-antagonistiominaisuudet käyttämällä 20 jäljempänä kuvattuja standardikokeita. On edullista, että kaavan I mukaista yhdistettä käytetään muodossa, jolle on tunnusomaista, että se sisältää esimerkiksi vähintään 95 %:n, 98 %:n tai 99 %:n enantiomeerisen yli määrän. Lisäksi voi olla edullista käyttää kaavan I 25 mukaista yhdistettä, jossa m on 2, Qa on vety, R1 on (1-6C) alkyyli ja R3 on muu kuin vety ja joka on yhdiste, jolla on kaava Ie
G^J
30 M N
VNY^1 o {lc)
Q-TiV
35 U
111253 5 on muodossa, jolle on tunnusomaista, että se sisältää esimerkiksi vähintään 95 %:n, 98 %:n tai 99 %:n enantiomeerisen ylimäärän muotoa, jolla on (S)-kon figuraatio keskuksessa, joka on osoitettu tähdellä * 5 kaavassa.
Tässä patenttiselityksessä yleinen termi "(1-3C)-alkyyli" sisältää sekä suoraketjuiset että haaraketjuiset alkyyliradikaalit, mutta viittaukset yksittäisiin alkyyli-radikaaleihin, kuten "propyyliin", sisältävät vain suora-10 ketjuisen ("normaalin") radikaalin, jolloin haaroittuneeseen isomeeriin, kuten "isopropyyliin", viitataan erityisesti. Samanlainen sopimus pätee muihin yleisiin ryhmiin, esimerkiksi alkoksiin, alkanoyyliin jne. Halogeeni on fluori, kloori, bromi tai jodi.
15 Symbolin m erityinen merkitys on 2.
(1-6C)alkyylin erityinen merkitys on metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli tai butyyli.
(1-3C)alkyylin erityinen merkitys on metyyli tai etyyli.
20 Qa:n erityinen merkitys on vety, R1:n erityinen merkitys on metyyli ja R3:n erityinen merkitys on fenyyli, jolloin fenyylillä voi olla yksi tai kaksi kloori- tai fluorisubstituenttia.
Q:n erityinen merkitys on esimerkiksi fenyyli, 25 jolla voi olla yksi tai kaksi substituenttia, jotka on valittu halogeenista, trifluorimetyylistä ja metylee-nidioksista; ja erityisemmin 3,4-dikloorifenyyli tai 3,4-metyleenidioksifenyyli.
M:n erityinen merkitys on oksi tai NH. L:n erityi-30 nen merkitys on etyleeni tai trimetyleeni.
Kaavan I mukaisten yhdisteiden erityisen ryhmän muodostavat yhdisteet, joilla on kaava Ie, jossa Qb on fenyyli, jolla voi olla yksi tai kaksi substituenttia, jotka on valittu itsenäisesti halogeenista, trifluo-35 rimetyylistä, hydroksista, (1-3C)alkoksista, (1-3C)-alkyylistä ja metyleenidioksista; T ja U ovat toisistaan 111253 6 riippumatta vety, halogeeni, hydroksi, (1-3C)alkyyli tai (1-3C)alkoksi; W on (1-3C)alkyyli; ja radikaaleilla G, J, L ja M on mikä tahansa merkitys, joka on määritelty vastaavan radikaalin yhteydessä kaavan I mukaisessa yhdisteessä; tai 5 mainitun kaavan I mukaisen yhdisteen N-oksidi piperidino-typpeen liittyen, joka on osoitettu kaavassa Adla; tai mainitun kaavan I mukaisen yhdisteen tai mainitun N-oksidin farmaseuttisesti hyväksyttävä suola; tai mainitun kaavan I mukaisen yhdisteen kvaternaarinen ammoniumsuola, jolloin 10 piperidinotyppi, joka on osoitettu kaavassa A: Ha, on kvadrikovalenttinen ammoniumtyppi, jolloin neljäs radikaali typpeen liittyen on (1-4 C)alkyyli tai bentsyyli ja liittynyt vastaioni on farmaseuttisesti hyväksyttävä anioni.
15 Kaavan I mukaisten yhdisteiden toisen erityisen ryhmän muodostavat yhdisteet, joilla on kaava Ie, jossa R12 on vety tai (1-3C)alkyyli; T ja U ovat vetyatomeja; ja W on metyyli; ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.
Edullisiin yhdisteisiin sisältyvät (S)-N-[2-(3,4-20 dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)- piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidi; (S)-N-[2-(3,4-di- kloorifenyyli)-4-[4-(3-metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidi; (S)-N- [2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(3-etyyli-2-oksoperhydropyrim-25 idin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidi; ja (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoperhydropyrim^ idin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-etyylibentsamidi; ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.
Erityiset yhdisteet on kuvattu mukana seuraavissa 30 esimerkeissä.
Farmaseuttisesti hyväksyttävä suola on suola, joka on valmistettu hapon kanssa, joka tuottaa fysiologisesti hyväksyttävän anionin. Farmaseuttisesti hyväksyttäviin suoloihin sisältyvät suolat, jotka on valmistettu vahvan 35 epäorgaanisen tai orgaanisen hapon kanssa, joka tuottaa fysiologisesti hyväksyttävän anionin, kuten esimerkiksi 111253 7 suolahappo, rikkihappo, fosforihappo, metaanisulfonihappo tai p-tolueenisulfonihappo.
Kaavan I mukainen yhdiste voidaan valmistaa käyttämällä menetelmiä, joihin sisältyvät menetelmät, jotka 5 ovat alalla tunnettuja rakenteellisesti yhdenmukaisten heterosyklisten yhdisteiden valmistamiseksi. Tällaiset menetelmät kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi; tai kaavan I mukaisen yhdisteen N-oksidin valmistamiseksi piperidinotyppeen liittyen, joka on osoitettu kaavassa 10 tai kaavan I mukaisen yhdisteen tai mainitun N- oksidin farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi; tai kaavan I mukaisen yhdisteen kvaternaarisen ammoniumsuolan valmistamiseksi, jolloin piperidinotyppi, joka on osoitettu kaavassa Λ:11a, on kvadrikovalenttinen 15 ammoniumtyppi, jolloin neljäs radikaali typpeen liittyen on (1-4C)alkyyli tai bentsyyli ja liittynyt vastaioni on farmaseuttisesti hyväksyttävä anioni, ovat keksinnön kohteena.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle edellä määri-20 teltyjen uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan I mukaisten yhdisteiden ja niiden oksidien ja suolojen valmistamiseksi on tunnusomaista, että
(a) alkyloidaan piperidiini, jolla on kaava II
25 VNY^ (II)
30 aldehydillä, jolla on kaava IV
O
y H (CH2to~D (IV)
35 käyttämällä pelkistävää alkylointia, tai alkyloimisaineel-la, jolla on kaava V
111253 8
(CHJ-D
v 2/m (V) 5 jossa Y on poistuva ryhmä; (b) syklisoidaan vastaava yhdiste, jolla on kaava
III
H H
10 A dll)
L XX
^(CH2)—D
15 hiilihapon diaktivoidun johdannaisen tai diaktivoidun tio-karbonyylijohdannaisen avulla; (c) saatetaan reagoimaan amiini, jolla on kaava
VIII
jrtf 'lxNvy/'N (Vili)
15 I
CT w 25 j ossa
Qb on fenyyli, jolla voi olla yksi tai kaksi sub-stituenttia, jotka on valittu itsenäisesti halogeenista, trifluorimetyylistä, hydroksista, (1-3C)alkoksista, (1-3C)-30 alkyylistä ja metyleenidioksista; ja W on (1-3C)alkyyli; sopivan happokloridin kanssa; (d) saatetaan reagoimaan kaavan VIII mukainen amiini aktivoidun karboksyylihappojohdannaisen kanssa; 35 (e) kun halutaan kaavan I mukaisen yhdisteen kaavassa osoitetun piperidinotypen N-oksidi, 111253 9 hapetetaan kaavan I mukaisen yhdisteen kaavassa A: 11a osoitettu piperidinotyppi; (f) kun halutaan yhdiste, jolla on kaava I, jossa R12 ei ole vety, alkyloidaan vastaava yhdiste, jolla on 5 kaava I, jossa R12 on vety; tai (g) kun halutaan kaavan I mukaisen yhdisteen kva-ternaarinen ammoniumsuola, alkyloidaan kaavan I mukaisen yhdisteen kaavassa A: 11a merkitty piperidinotyppi.
Seuraavissa menetelmäkuvauksissa yleisten radikaa-10 lien merkitykset ovat kuten edellä on määritelty ellei toisin osoiteta.
(a) Alkyloidaan kaavan II mukainen piperidiini kaavan IV mukaisen aldehydin avulla käyttämällä pelkistävää alkylointia, tai alkyloimisaineen avulla, jolla on kaava V, 15 jossa Y on poistuva ryhmä. Poistuvan ryhmän Y tyypillisiin merkityksiin sisältyvät esimerkiksi jodidi, bromidi, me-taanisulfonaatti, p-tolueenisulfonaatti, trifluorimetaa-nisulfonaatti ja vastaavat. Alkylointi toteutetaan edullisesti käyttämällä tavanomaista pelkistävää alkylointia, 20 esimerkiksi kuten on kuvattu esimerkissä 1, muodostamalla in situ imminiumsuola happokatalyytin avulla ja sen jälkeen pelkistämällä tuote natriumsyaaniboorihydridillä alkoholi-liuottimessa.
(b) Kun halutaan yhdiste, jolla on kaava I, jossa J 25 on okso tai tiokso, syklisoidaan kaavan III mukainen yhdiste vastaavasti hiilihapon diaktivoidun johdannaisen tai diaktivoidun tiokarbonyylijohdannaisen avulla. Hiili-hapon diaktivoituihin johdannaisiin sisältyvät esimerkiksi 1, 1'-karbonyylidi-imidatsoli, kloroformaattiesterit (kuten 30 metyyli-, etyyli- tai fenyyliesteri) ja karbonaatti-diesterit, sekä fosgeeni, difosgeeni ja trifosgeeni; ja diaktivoituihin tiokarbonyylijohdannaisiin sisältyvät esimerkiksi 1,1'-tiokarbonyylidi-2(1H)-pyridoni, 1,1'-tio-karbonyylidi-imidatsoli, fenyyliklooriditioformaatti ja 35 tiofosgeeni. Tarkoituksenmukaisesti syklisointi toteutetaan inertissä liuottimessa, esimerkiksi kloroformissa, tetra- 111253 10 hydrofuraanissa tai tolueenissa, lämpötilassa, joka on noin ympäröivästä lämpötilasta reaktioseoksen palautusjääh-dytyslämpötilaan, esimerkiksi kuten on kuvattu esimerkissä 3. Jos hiilihapoin diaktivoitu johdannainen tai diaktivoitu 5 tiokarbonyylijohdannainen on happokloridi, voi olla edullista lisätä emästä, kuten esimerkiksi tri- etyyliamiinia, syklisointireaktioseokseen happoakseptorina.
(c) Kun halutaan kaavan I mukainen yhdiste, joka on yhdiste, jolla on kaava Ie, saatetaan reagoimaan kaavan 10 VIII mukainen amiini sopivan happokloridin kanssa. Reaktio voidaan toteuttaa inertissä liuottimessa, kuten esimerkiksi tetrahydrofuraanissa, dietyylieetterissä, tolueenissa, kloroformissa tai dikloorimetaanissa, lämpötilassa, joka on -78 - 100 °C, edullisesti -20 - 50 °C. Reaktio voidaan 15 toteuttaa esimerkiksi olosuhteissa, jotka ovat samanlaiset kuin on kuvattu esimerkissä 17.
(d) Kun halutaan kaavan I mukainen yhdiste, joka on yhdiste, jolla on kaava Ie, saatetaan reagoimaan kaavan VIII mukainen amiini aktivoidun karboksyylihappojoh- 20 dannaisen kanssa. Reaktio voidaan toteuttaa inertissä liuottimessa, kuten esimerkiksi tetrahydrofuraanissa, dietyylieetterissä, - tolueenissa, kloroformissa tai dikloorimetaanissa, lämpötilassa, joka on -78 - 100 °C, edullisesti -2C - 50 °C, sopivan aktivoivan aineen, 25 esimerkiksi 1-(3-dimetyyliaminopropyyli)-3-etyylikarbodi-imidihydrokloridin, läsnä ollessa. Reaktio voidaan toteuttaa esimerkiksi olosuhteissa, jotka ovat samanlaiset kuin esimerkissä 20 on kuvattu.
(e) Kun halutaan kaavan I mukaisen yhdisteen N-30 oksidi piperidinotyppeen liittyen, joka on osoitettu kaavassa A:lla, hapetetaan kaavan I mukaisen yhdisteen piperidinotyppi, joka on osoitettu kaavassa A:lla, käyttäen tavanomaista menetelmää, kuten esimerkiksi käyttäen vetyperoksidia metanolissa, peretikkahappoa, 3-kloori-35 peroksibentsoehappoa inertissä liuottimessa (kuten dikloo- 111253 11 rimetaanissa) tai dioksiraania asetonissa. Sopivat olosuhteet on kuvattu esimerkiksi esimerkissä 21.
(f) Kun halutaan yhdisteitä, joilla on kaava I, jossa R12 on (1-3C) alkyyli, Ra0C(=0)CH2- tai RbRcNC (=0) CH2-, 5 alkyloidaan vastaava yhdiste, jolla on kaava I, jossa R12 on vety, sopivan vastaavan alkyloimisaineen avulla. Alkylointi voidaan toteuttaa inertissä liuottimessa, kuten esimerkiksi tetrahydrofuraanissa, dietyylieetterissä, tolueenissa tai 1,2-dimetoksietaanissa, lämpötilassa, joka 10 on -78 - 100 °C, edullisesti 0-50 °C, sopivan emäksen läsnä ollessa. Sopivat olosuhteet on esimerkiksi kuvattu esimerkissä 22.
(g) Kun halutaan kaavan I mukaisen yhdisteen kvaternaarinen ammoniumsuola, alkyloidaan kaavan I mukaisen 15 yhdisteen piperidinotyppi, joka on osoitettu kaavasssa A:lla, käyttämällä sopivaa alkyloimisainetta. Alkylointi voidaan toteuttaa inertissä liuottimessa, kuten esimerkiksi tetrahydrofuraanissa, dietyylieetterissä, tolueenissa tai 1,2-dimetoksietaanissa, lämpötilassa, joka on -78 - 100 °C, 20 edullisesti 0-50 °C, sopivan emäksen läsnä ollessa.
Suojaryhmän käyttö voi olla mahdollisesti toivottavaa kaikkien edellä kuvattujen prosessien aikana tai osittain niiden aikana; suojaryhmä voidaan sitten poistaa, kun lopputuote on tarkoitus valmistaa.
25 Sen jälkeen minkä tahansa edellä esitettyjen menetelmien tapauksessa tarvittaessa kaavan I mukaisen yhdisteen farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa tai kaavan I mukaisen yhdisteen N-oksidin farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa, se voidaan saada saattamalla 30 reagoimaan vastaava kaavan I mukainen yhdiste tai N-oksidi hapon kanssa, joka tuottaa fysiologisesti hyväksyttävän vastaionin, tai käyttämällä mitä tahansa muuta tavanomaista menetelmää.
Jos edellä mainituissa menetelmissä tarvittavat 35 lähtöaineet eivät ole kaupallisesti saatavissa, ne voidaan valmistaa käyttämällä menetelmiä, jotka valitaan hetero- 111253 12 syklisen kemian standardimenetelmistä, menetelmistä, jotka ovat vastaavia kuin tunnettujen, rakenteellisesti vastaavien yhdisteiden synteesit, ja menetelmistä, jotka ovat vastaavia kuin edellä kuvatut menetelmät, tai menetelmistä, 5 jotka on kuvattu esimerkeissä.
Tarkoituksenmukainen välituote kaavojen III, IV ja V mukaisten lähtöaineiden valmistamiseksi on alkoholi, jolla on kaava VI (tai Vie)
10 H CL
<CH*>—D (VI,
BOni"^T
Q W U
joissa eri symboleilla on edellä esitetyt merkitykset.
20 Esimerkissä 1, osissa a) - f), on kuvattu menetelmä alkoholin valmistamiseksi, jolla on kaava Vie, jossa Qb on 3,4-dikloorifenyyli; ja vastaavan optisesti aktiivisen alkoholin valmistus on kuvattu esimerkissä 2, osissa a) - e) . Kaavan VI mukainen alkoholi voidaan sitten hapettaa 25 kaavan IV mukaiseksi aldehydiksi esimerkiksi käyttäen oksalyylikloridia, dimetyylisulfoksidia ja trietyyli-amiinia, kuten on kuvattu esimerkissä l.g), tai käyttäen Dess-Martinin perjodinaania (1,1,1-triasetoksi-l,1-dihydro- 1,2-bentsjodoksol-3(1H)-oni), kuten on kuvattu esimerkissä 30 2 f) ; tai se voidaan muuttaa kaavan V mukaiseksi alkyloimisaineeksi käyttämällä tavanomaista menetelmää. Kaavan IV mukainen aldehydi voidaan muuttaa vastaavaksi kaavan III mukaiseksi amiiniksi käyttäen menetelmää, joka on vastaava kuin esimerkissä 3, osissa a) -e), kuvattu. 35 Käyttäen menetelmää, joka on vastaava kuin esimerkissä 1 111253 13 kuvattu, kaavan IV mukainen aldehydi voidaan muuttaa kaavan VII mukaiseksi piperidoniksi O.
5 Y") k .N. (vii)
^(CH2)—D
jossa m ja D merkitsevät samaa kuin edellä; 10 ja kaavan ΙΙΙ mukainen amiini voidaan saada kaavan HM-L-NH2 mukaisen amiinin pelkistävän alkyloinnin avulla käyttäen kaavan VII mukaista piperidonia ja vastaavaa menetelmää kuin esimerkissä l.h) tai esimerkissä 3, osissa a) - e) on kuvattu.
15 Kaavan II mukaisen lähtöainepiperidiinin valmista miseksi 1-suojattua 4-piperidonia voidaan käyttää pelkistävään alkylointiin ja sen jälkeen toteutetaan syklisointi samalla tavalla kuin on kuvattu edellä menetelmässä (b), ja lopuksi poistetaan suojaus esimerkiksi 20 kuten on kuvattu esimerkissä 1, osissa h) - j). Yleensä kaavan II mukainen lähtöainepiperidiini voidaan saada 1-suojatusta 4-aminopiperidiinista tai 1-suojatusta 4-piperidonista käyttäen tavanomaista synteettistä metodologiaa .
25 Kuten tulee olemaan selvää alan ammattimiehille, lähtöaineiden valmistamiseksi on käytettävissä valikoima reaktiosarjoja ja lähtöaineisiin ja keksinnön tuotteisiin johtavia reaktiosarjoja voidaan muuttaa, mikäli noudatetaan tarkoituksenmukaista harkintaa koskien synteettisiä mene- 30 telmiä ja läsnäolevia radikaaleja.
Keksinnön mukaisesti saatavan yhdisteen hyödyllisyys voidaan osoittaa käyttämällä standardikokeita ja kliinisiä tutkimuksia, mukaan luettuna seuraavassa kuvatut.
111253 14
Neurokiniini A: n (NKA) reseptorisitoutumismääritys (Koe A)
Yhdisteen kyky vastavaikuttaa NKA:n sitoutumiseen NK2-reseptorissa voidaan osoittaa käyttäen määritystä, 5 jossa käytetään ihmisen NK2-reseptoria, joka on ilmennetty hiiren erytroleukemiasoluissa (MEL-soluissa), käyttämällä MEL-solumembraaneja (MELM), jotka kantavat suuren affiniteetin omaavia ja selektiivisiä NK2-reseptoreita, jolloin määritys toteutetaan seuraavasti: 10 Lyhyt kuvaus piirroksista
Kuvio 1 esittää MEL-solun ekspressiovektoriraken-nelman pMEG3/hNK2R muodostamista.
Kuvio 2 esittää ekspressiovektorirakennelman GSE-1417/hNK2R muodostamista.
15 Kuvio 3 esittää ihmisen NK2-reseptorin ilmentämistä MEL C88 -soluissa.
Ihmisen NK2-reseptorin (hNK2R) ilmentyminen MEL-so-lussa
Heterologinen proteiinin ilmentyminen hiiren 20 erytroleukemiasoluissa (MEL-soluissa) käyttää ihmisen globiinin lokuskontrollialuetta (LCR) [F. Grosveld et ai., Cell, 51, 975 - 985 (1987)]. cDNA:t sijoitetaan ihmisen β- globiinipromoottcrin ja ihmisen β-globiinigeenin toisen intronin väliin ja tämä ekspressiokasetti asetetaan sitten 25 LCR:n alapuolelle ja transfektoidaan MEL-soluihin [M. Needham et ai., Nucl. Acids Res., 20, 997 - 1003 (1992)].
Ihmisen NK2-reseptorin cDNA [A. Graham et ai., Biochem. Biophys. Res. Coraiun., 177, 8-16 (1991)] eristettiin ihmisen keuhkon RNA:sta käyttämällä polymeraasiketjureak-30 tiota ja DNA sekvensoitiin. Ihmisen NK2-reseptorin cDNA subkloonattiin sukkulavektoriin (pMEG3), joka sisälsi β-globiinipromoottorin ja ihmisen β-globiinigeenin 3'-osan (kuvio 1) . Ihmisen NK2-reseptorin cDNA rajoitettiin Eco 0109:llä (5'-pää) ja Bam HI:llä (3'-pää). Oligonukleo-35 tidin kytkytfragmenttiadaptori, joka sisälsi sisäisen Hind III -paikan ja 3'-pään Eco 0109 -paikan, liitet- 111253 15
tiin hNK2R:n cDNA-fragmenttiin. Päällimmäisen juosteen oligonukleotidin sekvenssi = 5'd(GCGCAAGCTTATGGG) (SEQ
ID N0:1) ja pohjajuosteen oligonukleotidin sekvenssi = 5'd(GTCCCCATAAGCTTGCGC) (SEQ ID NO:2). Nämä saatettiin 5 renkaaksi ja liitettiin hNK2R-fragmenttiin käyttämällä standardimenetelmiä. Pilkkomisen jälkeen käyttämällä Hind III: a tulokseksi saatu fragmentti kloonattiin Hind III- ja Bam HI-paikkoihin sukkulavektorin pMEG3 monikytkytfragmenttiin. Rakennelma (pMEG3/hNK2R) varmistettiin restrik-10 tiokartoituksella ja sekvensoimalla cDNA/vektorin 5'-pään ja 3'-pään liitokset. Tämä siirrettiin sitten E. coli DH5-a:aan ja plasmidi-DNA eristettiin käyttämällä standardimenetelmiä ja varmistettiin toteuttamalla restriktiokartoitus ja DNA-sekvensointi. ClaI/Asp718-kasetti, joka 15 kantoi β-globiinipromoottoria, ihmisen NK2-reseptorin cDNArta ja 3'-β-globiinigeenifragmenttia, katkaistiin ja subkloonattiin LCR:n alapuolelle plasmidissa pGSE1417 (kuvio 2). pMEG3/hKNK-2R~rakennelma pilkottiin Clal:n ja Asp718:n avulla ja kloonattiin suoraan Clal- ja Asp718-20 paikkoihin (LCR:n 3') ekspressiovektorissa GSE1417. Rakennelma GSE1417/hNK2R (13,9 kb) varmistettiin restriktiokartoituksen avulla. E. coli DH5 transformoitiin ja rekombinantit plasmidit varmistettiin restriktiokartoituksen avulla. MEL C88 -soluille [A. Deisseroth et ai., 25 Cell, 15, 55 - 63 (1978)] tehtiin elektroporaatio [M.
Antoniou, Methods Molecular Biology, 7, 421 - 434 (1991) käyttämällä Pvul-linearisoitua pGSE1417/humaanin NK2-reseptorin DNA:ta. Heti transfektion jälkeen solut laimennettiin elatusaineeseen konsentraatioon 104 ja 105 30 solua/ml ja 1 ml:n näytteet siirrettiin 24-kuoppaisen maljan kuhunkin kuoppaan. G418-elatusainetta lisättiin konsentraatioon 1 mg/ml 24 tunnin kuluttua transfektiosta stabiilien tranfektanttien valikoimiseksi. Yksittäiset kloonit otettiin talteen tai yhdistettiin populaatioiden 35 muodostamiseksi 7-10 päivää valikoivan elatusaineen lisäämisen jälkeen. Kuvio 3 esittää toimintatapaa, jota 111253 16 käytettiin transfektoidun MEL/humaanin NK2-reseptorin solulinjan eristämiseksi. Ekspressiotutkimuksia varten soluja pidettiin eksponentiaalisessa kasvussa neljän päivän ajan ja sitten lisättiin dimetyylisulfoksidia (DMSO) 2 %:n 5 (tilavuuden mukaan) lopulliseen konsentraatioon erilaistumisen ja siten ilmentymisen indusoimiseksi. Näytteet otettiin 4 päivän kuluttua induktion jälkeen mRNA:n ja NKA:n sitoutumisanalyysejä varten. Tulokset osoittivat, että klooni #1 ilmensi hNK2R:n korkeimmalla tasolla (sekä 10 hNK2R mRNA:n ja spesifisen NKA:n sitoutuminen). Tätä kloonia lisättiin ja sitä fermentoidaan nyt rutiininomaisesti 20 l:n mittakaavassa/kuukausi ja sitä hankittiin käytettäväksi kokeessa A.
Membraanivalmisteet (MELM), jotka oli preparoitu 15 MEL-soluista, jotka sisälsivät suuren affiniteetin omaavia NK2-reseptoreita, valmistettiin julkaistun menetelmän mukaan [D. Aharony et ai., Neuropeptides, 23, 121 - 130 (1992)] käyttäen seuraavia vähäisiä muunnelmia: (1)
Homogenointipuskuriin sisältyi jodiasetamidia (1 mM). (2) 20 Homogenointi toteutettiin kuten on julkaistu paitsi kerran käytettiin lyhyempää 10 sekunnin aikaa ja hitaampaa nopeutta (asetus 10) ; ja (3) tasapainotusvaihetta KCl/EDTA:n kanssa ei toteutettu. Tyypillisessä valmisteessa 3H-NKA:n (2,5 nM) sitoutuminen MELM-valmisteeseen oli 25 erittäin spesifinen (88 ± 4 %) ja lineaarisesti riippuvainen proteiinikonsentraatiosta, jolloin merkitsevää sitoutumista havaittiin niinkin pienellä proteiini-konsentraatiolla kuin 25 pg proteiinia/ml. Tasa- painokilpailukokeet osoittivat sitoutumisen suuren affi-30 niteetin omaaviin, suuritiheyksisiin reseptoreihin, jolloin Kd = 1187 nM, Bmax = 2229 fmol/ mg proteiinia.
Radioligandi 3H-neurokiniini A (3H-NKA) [4,5-3H-Leu9]-NKA:na (tyypillinen spesifinen aktiivisuus, 117 Ci/ mmol) saadaan käyttämällä Cambridge Research Biochemicalin 35 tavanomaista synteesiä ja sen puhtaus on > 95 %. Toistetut HPLC-analyysit osoittivat, että ligandi on stabiili 111253 17 asianmukaisissa varasto-olosuhteissa (silanoidut lasipullot, joissa 0,2 % merkaptoetanolia, argonin alla). Myöskään hajoamista tai aineenvaihduntaa ei ilmennyt reseptori-sitoutumismäärityksessä.
5 Määritys toteutetaan käyttäen inkubointipuskuria, jonka koostumus on seuraava: 50 mM Tris-HCl:a (pH-arvo 7,4), 5 mM Mg++:a, 100 μΜ tiorfaania, 1 nM 3H-NKA:a, 0,02 % (paino/tilavuus) BSA:a, 30 mM K+:a ja 300 μΜ ditiotreito-lia; ja membraaniproteiinin konsentraatiota pidetään suun-10 nilleen 0,05 - 0,025 mg:ssa/putki. Ei-spesifinen sitoutuminen määritetään rutiininomaisesti 1 μΜ NKAilla. Jokaiseen putkeen lisätään seuraavaa: 150 μΐ inkubointipuskuria, 20 μΐ 3H-NKA:ta, 20 μΐ yhdistettä, NKA:ta tai puskuria, kuten tarkoituksenmukaista, ja 125 μΐ membraanisuspensiota. Reak-15 tio aloitetaan lisäämällä membraaneja. Putkia inkuboidaan 60 minuutin ajan 25 °C:n lämpötilassa ravistettavassa vesi-hauteessa. Reaktio lopetetaan pesemällä putket 10 ml:11a jääkylmää 50 mM Tris-HCl-puskuria käyttäen Brandel-soluntalteenottojärjestelmää ja käyttäen Whatman GF/B-20 suodattimia, joita on liotettu vähintään 4 tuntia huoneenlämpötilassa 0,01-%:isessa (paino/tilavuus) polyeteeni-imiinissä, membraanien kokoa-miseksi talteen. Suodattimet asetetaan tuikelaskenta-pulloihin ja luenta suoritetaan Beckman LS 6000LL -tuikelaskimella. Sitoutumisva- 25 kio Ki lasketaan käyttämällä standardimenetelmiä ja on tyypillisesti useiden tällaisten määritysten keskiarvo. Kj.-arvot voidaan muuttaa negatiivisiksi logaritmeiksi ja ilmaista -log molaarinen K± -arvona (so. pKi).
Aluksi tässä määrityksessä ICso-arvon, joka 30 mitattiin standardiyhdisteestä L-659 877, havaittiin olevan 30 nM verrattuna 3H-NKA:n sitoutumiseen MELM-valmisteeseen. Yhdisteen NK2-reseptoriin kohdistuvan sitoutumisen valikoivuus voidaan osoittaa määrittämällä sen sitoutuminen muihin reseptoreihin käyttäen standardimäärityksiä, esi-35 merkiksi määritystä käyttäen SP: n tritiumilla käsiteltyä johdannaista kudosvalmisteessa, joka on valikoiva NK1- 111253 18 reseptoreiden suhteen tai määritystä käyttäen NKB:n SP:n tritiumilla käsiteltyä johdannaista kudosvalmisteessa, joka on valikoiva NK3-reseptoreiden suhteen
Marsukoe (koe B) 5 Seuraavassa kuvatussa kokeessa käytetään joko NKA:ta tai [β-Ala8]-NKA(4-10)-tuotetta agonistina. Valitusta agonistista käytetään nimitystä AG kaikkialla selityksessä. Yhdisteen kyky vastavaikuttaa AG:n toimintaan keuhkokudoksessa voidaan osoittaa käyttäen funktionaalista 10 määritystä marsun henkitorvessa, mikä toteutetaan seuraavasti .
Urospuoliset marsut lopetetaan terävällä iskulla pään takaosaan. Henkitorvet poistetaan, puhdistetaan ylimääräisestä kudoksesta ja jaetaan kahteen leikkeeseen. Kum-15 pikin leike ripustetaan renkaana ruostumattomasta teräksestä valmistettujen kannatussilmukoiden väliin vesivaipan (37,5 °C) omaaviin kudoskylpyihin, jotka sisältävät fysiologista suolaliuosta, jolla on seuraava koostumus (mM) : NaCl, 119; KC1 4,6; CaCl2, 1,8; MgCl2, 0,5; NaH2P04, 1; NaH-20 CO3, 25; glukoosi, 11; tiorfaani, 0,001 ja indometasiini, 0,005; kudoskylpyjä kaasutettiin jatkuvasti 95 %:11a 02:ta - 5 %:lla C02:a. Kuhunkin kudokseen kohdistettu ensimmäinen jännitys on 1 g, jota pidetään 0,5 - 1,5 tunnin tasapainotus jakson ajan ennen muiden lääkkeiden lisäämistä. Supis-25 tusvasteet mitataan käyttäen Grass-polygrafia Grass FT-03-voimanmuuntajien kautta.
Kudoksia herkistettiin toistuvasti yhdellä AG: n konsentraatiolla (10 nM) 30 minuutin välein pesten jännityksen palauttamiseksi perustasolle. AG:n vaiku- 30 tuksesta tapahtuvien supistusten suuruus saavuttaa vakiotason kahden herkistyksen jälkeen ja jokaisen yhdisteen osalta tutkitaan AG:hen kohdistuvien vasteiden estäminen lisäämällä yhdistettä kudoskylpyyn 15 minuuttia ennen kolmatta tai myöhempää altistusta agonistille. AG:hen 35 kohdistuvaa supistusvastetta yhdisteen läsnä ollessa verrataan vasteeseen, joka saadaan toisella AG-her- 111253 19 kistyksellä (ilman yhdistettä). Estämis-% määritetään, kun yhdiste tuottaa tilastollisesti merkitsevän (p < 0,05) supistumisen vähenemisen ja lasketaan käyttäen toista supistusvastetta 100 %:na .
5 Valikoitujen yhdisteiden tehokkuus arvioidaan las kemalla kunkin tutkitun konsentraation näennäinen dissosi-oitumisvakio (KB) käyttäen standardimaista yhtälöä: KB = [antagonisti]/(annossuhde-1) 10 jossa annossuhde = antilog [(AG - log molaarinen ÄC50 ilman yhdistettä) - (AG -log molaarinen EC50 yhdisteen kanssa)]. KB-arvot voidaan muuttaa negatiivisiksi logaritmeiksi ja ilmaista -log molaarinen Κβ-arvona (so. ρΚβ). Tätä arvioin-15 tia varten täydelliset AG:n konsentraatiovastekäyrät saadaan ilman yhdistettä ja yhdisteen läsnä ollessa (30 minuutin inkubointijakso) käyttäen parillisia henkitorvi-renkaita. AG:n teho määritetään 50 %:na sen omasta maksimaalisesta vastetasosta jokaisessa käyrässä. ECso-arvot 20 muutetaan negatiivisiksi logaritmeiksi ja ilmaistaan -log molaarinen ECso-arvona. AG:n kohdistuvat maksimaaliset su-pistusvasteet määritetään ilmaisemalla AG:hen kohdistuva maksimaalinen vaste prosenttina karbakolin (30 μΜ) aiheuttamasta supistumisesta, jolloin karbakoli on lisätty ensim-25 mäisen tasapainotusjakson jälkeen. Kun yhdiste tuottaa AG:hen kohdistuvan maksimaalisen vasteen tilastollisesti merkitsevän vähenemisen (p < 0,05), estämis-% lasketaan suhteessa karbakolin aiheuttaman supistumisen prosenttiin 100 %:na käytetyssä käsittelemättömässä parillisessa kudok-30 sessa.
Kliiniset tutkimukset yhdisteen tehokkuuden osoittamiseksi voidaan toteuttaa käyttäen standardimenetelmiä. Esimerkiksi yhdisteen kyky estää tai hoitaa astman tai astman kaltaisten tilojen oireita voidaan osoittaa käyttäen 35 sisään hengitetyn kylmän ilman tai allergeenin aiheuttamaa herkistämistä ja toteuttaen arviointi käyttämällä 111253 20 standardimaisia keuhkomittauksia, kuten esim. uloshen-gityksen sekuntikapasiteettia (FEVi) ja sekuntitilavuutta vitaalikapasiteetista (FVC), jotka analysoidaan käyttämällä tilastollisen analyysin standardimenetelmiä.
5 On ymmärrettävää, että yhdisteen aktiivisuuden seu raamukset kokeessa A ja kokeessa B eivät rajoitu astmaan, vaan että pikemminkin koe tuottaa todisteen NKA:n yleisestä antagonismista. Yleensä tutkitut yhdisteet osoittivat tilastollisesti merkitsevää aktiivisuutta kokeessa A, jolloin 10 Ki-arvo oli 1 yM tai paljon vähemmän. Esimerkiksi esimerkissä 2 kuvatun yhdisteen Κι-arvon havaittiin tyypillisesti olevan 4,1 nM. Kokeessa B yhdisteen pKb arvon mitattiin olevan tyypillisesti 5 tai enemmän. Esimerkiksi esimerkissä 2 kuvatun yhdisteen pKB-arvon mitattiin olevan 8,7. Pitäisi 15 huomata, että aina ei ehkä ole suoraa korrelaatiota kokeessa A yhdisteiden Ki-arvoina mitattujen aktiivisuuksien ja muissa määrityksissä mitattujen arvojen, esim. kokeessa B mitattujen pKB-arvojen, välillä.
Kuten edellä on selostettu, keksinnön mukaisesti 20 saatavilla yhdisteillä on NKA-antagonistiominaisuuksia. Siten ne vastavaikuttavat ainakin johonkin NKA:n toiminnoista, joihin tiedetään sisältyvän keuhkoputkien supistuminen, lisääntynyt mikrovaskulaarinen läpäisyvyys, verisuonten laajeneminen ja syöttösolujen aktivoituminen. 25 Siten keksinnön mukaisesti saatua kaavan I mukaista yhdistettä tai kaavan I mukaisen yhdisteen N-oksidia, jolloin N-oksidi on muodostettu liittyen piperidinotyppeen, joka on osoitettu kaavassa A;lla; tai kaavan I mukaisen mainitun yhdisteen tai mainitun N-oksidin farmaseuttisesti 30 hyväksyttävää suolaa; tai kaavan I mukaisen yhdisteen kvaternaaristä ammoniumsuolaa, jolloin mainitussa ammoniumsuolassa, jolloin piperidinotyppi, joka on osoitettu kaavassa λ:Ha, on kvadrikovalenttinen ammoniumtyppi, jolloin neljäs radikaali typpeen liittyen on 35 (1-4C)alkyyli tai bentsyyli ja liittynyt vastaioni on farmaseuttisesti hyväksyttävä anioni, voidaan käyttää 111253 21 sellaisen hoitoa tarvitsevan ihmisen tai nisäkkään hoitamiseksi, jolla on tauti, jossa ΝΚΔ on osallisena ja sen toiminnan antagonismi on toivottavaa, kuten esimerkiksi astman tai siihen läheisesti liittyvän sairauden hoidossa.
5 Lisäksi keksinnön mukaisesti saatua kaavan I mukaista yhdistettä, tai kaavan I mukaisen yhdisteen N-oksidia, kun N-oksidi on muodostettu kaavassa A;Ha osoitettuun piperidinotyppeen liittyen, tai kaavan I mukaisen yhdisteen tai sen N-oksidin farmaseuttisesti hyväksytyn suolaa tai 10 kaavan I mukaisen yhdisteen kvaternaaristä ammoniumsuolaa jolloin piperidinotyppi, joka on osoitettu kaavassa A:Ha on kvadrikovalenttinen ammoniumtyppi, jossa neljäs radikaali typpeen liittyen on (1-4C)alkyyli tai bentsyyli ja liittynyt vastaioni on farmaseuttisesti hyväksyttävä 15 anioni; voidaan käyttää farmakologisena standardina uusien tautimallien tai määritysten kehittämiseksi ja standardisoimiseksi käytettäväksi uusien hoidollisten aineiden kehittämisessä tautien hoitamiseksi, joissa NKA on osallisena, tai määrityksissä niiden diagnoosia varten.
20 Kun yhdistettä käytetään tällaisen taudin hoidossa, se annetaan potilaalle yleensä sopivana farmaseuttisena koostumuksena, joka sisältää kaavan I mukaista yhdistettä, tai kaavan I mukaisen yhdisteen N-oksidia A:Ha osoitettuun piperidinotyppeen liittyen; tai kaavan I mukaisen yhdisteen 25 tai mainitun N-oksidin farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa; tai kaavan I mukaisen yhdisteen kvaternaarista ammoniumsuolaa, jolloin piperidinotyppi, joka on osoitettu kaavassa A:Ha/· on kvadrikovalenttinen ammoniumtyppi, jolloin neljäs radikaali typpeen liittyen on (1-4C)alkyyli 30 tai bentsyyli ja liittynyt vastaioni on farmaseuttisesti hyväksyttävä anioni; ja farmaseuttisesti hyväksyttävän laimennusaineen tai kantajan, jolloin koostumus on sovitettu nimenomaista valittua lääkkeen antotapaa varten. Tällainen koostumus voidaan saada käyttämällä tavanomaisia 35 menetelmiä ja täyteaineita ja sideaineita ja se voi olla yhdessä monista annostusmuodoista. Tällaisiin muotoihin 111253 22 sisältyvät esimer-kiksi tabletit, kapselit, liuokset tai suspensiot suun kautta annettavaksi; peräpuikot peräsuolen kautta annettavaksi; steriilit liuokset tai suspensiot annettavaksi laskimonsisäisenä tai lihaksensisäisenä 5 infuusiona tai ruiskeena; aerosolit tai sumutinliuokset tai -suspensiot inhalaation mukana annettavaksi; tai jauheet yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävien kiinteiden lai-mennusaineiden, kuten laktoosin, kanssa hengitysteihin sisään puhallettavaksi.
10 Suun kautta annettavaksi voidaan käyttää tar koituksenmukaisesti tablettia tai kapselia, joka sisältää enintään 250 mg (ja tyypillisesti 5 - 100 mg) kaavan I mukaista yhdistettä. Inhalaation mukana käytettäväksi kaavan I mukaista yhdistettä annetaan ihmiselle päivittäinen an-15 nostus, joka on esimerkiksi 5 - 100 mg yhtenä annoksena tai jaettuna 2-4 päivittäiseen annokseen. Samoin laskimon-sisäistä tai lihaksensisäistä ruisketta tai infuusiota varten voidaan käyttää tarkoituksenmukaisesti steriiliä liuosta tai suspensiota, joka sisältää enintään 10 paino-% (ja 20 tyypillisesti 0,05 - 5 paino-%) kaavan I mukaista yhdistettä .
Potilaalle annettavan· kaavan I mukaisen yhdisteen annos vaihtelee välttämättä alalla hyvin tunnettujen periaatteiden mukaisesti ottaen huomioon lääkkeen antotapa ja 25 tilan vakavuus ja hoidettavan potilaan koko ja ikä. Kuitenkin yleensä kaavan I mukaista yhdistettä annetaan lämminveriselle eläimelle (kuten ihmiselle) siten, että potilas saa annoksen, joka on esimerkiksi 0,01 - 25 mg/kg (ja tavallisesti 0,1-5 mg/kg). On ymmärrettävää, että yleensä voi-30 daan käyttää ekvivalenttisia määriä kaavan I mukaisen yhdisteen tai N-oksidin farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa tai kvaternaarista ammoniumsuolaa.
Keksintöä kuvataan nyt seuraavien ei-rajoittavien esimerkkien avulla, joissa ellei toisin mainita: 111253 23 (i) lämpötilat on annettu Celsius-asteina (°C) ; työvaiheet toteutettiin huoneenlämpötilassa tai ympäröivässä lämpötilassa, so. lämpötila-alueella 18 - 25 °C; (ii) orgaaniset liuottimet kuivattiin vedettömällä 5 natriumsulfaatiila; liuottimen haihduttaminen toteutettiin käyttäen kiertohaihdutinta alennetussa paineessa (600 4 000 Pa; 4,5 - 30 mmHg) hauteen lämpötilan ollessa enintään 60 °C; (iii) kromatografia tarkoittaa "flash-kromatogra-10 fiaa" (Stillin menetelmä), joka toteutettiin käyttäen Merck
Kieselgel -silikageeliä (Art 9385, E. Merck, Darmstadt, Saksa); käänteisfaasisilikageeli tarkoittaa oksadekyylisi-laanilla (ODS) päällystettyä alustaa, jonka hiukkasten halkaisija on 32 - 74 pm ja joka tunnetaan tuotteena "PREP-15 40-ODS (Art 731740-100, Bodman Chemicals, Aston, PA, USA) ; ohutkerroskromatografia (TLC) toteutettiin käyttäen 0,25 mm:n silikageeli-GHLF-levyjä (Art 21521, Analtech, Newark, DE, USA); (iv) yleensä reaktioiden kulkua seurattiin TLC:n 20 avulla ja reaktioajat on annettu vain esimerkiksi; (v) sulamispisteet ovat korjaamattomia ja (d) osoittaa hajoamista; annetut sulamispisteet on saatu tuotteista, jotka on valmistettu kuten on kuvattu; polymorfismi voi johtaa erilaisen sulamispisteen omaavien aineiden 25 eristämiseen joissakin valmistuksissa; (vi) lopputuotteilla oli tyydyttävät ydinmag-neettiset resonanssispektrit (NMR) ja ne olivat olennaisilta osin puhtaita TLC:n mukaan; (vii) saannot on annettu vain esimerkiksi eivätkä 30 ne ole välttämättä saantoja, joita voidaan saada kehittämällä uutterasti prosessia; valmistukset toistettiin, jos tarvittiin enemmän ainetta; (viii) jos NMR-tiedot on annettu, ne ovat tärkeimpien diagnostisten protonien Δ-arvojen muodossa 35 annettuna miljoonasosina (ppm) suhteessa tetra-metyylisilaaniin (TMS) sisäisenä standardina, määritetty 111253 24 300 MHz:n taajuudella käyttäen CDCl3:a liuottimena; signaalien muodolle käytetään tavanomaisia lyhenteitä; AB-spektrien osalta suoraan havaitut siirtymät on raportoitu; (ix) kemiallisilla symboleilla on tavalliset mer-5 kityksensä; käytetään Sl-yksiköitä ja -symboleja; (x) alennetut paineet on annettu absoluuttisina paineina pascaleina (Pa), kohotetut paineet on annettu manometripaineina bareina; (xi) liuotinsuhteet on annettu tilavuuden mukaan: 10 tilavuustermit (tilavuus/tilavuus); ja (xii) massaspektrit (MS) ajettiin käyttäen 70 elektronivoltin elektronienergiaa kemiallisessa ioni-saatiomallissa käyttäen suoraa altistuskoetinta; yleensä raportoidaan vain piikit, jotka osoittavat lähtöainemassaa.
15 Esimerkki 1 N- [2- (3,4-d.ikloorifenyyli) -4- [4- (2-okso-l, 3-oksafc- solidin-3-yy1i)piperidino]bu tyy1i]-N-metyy1ibents- amidihydrokloridi N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N-metyy- 20 libentsamidi (0,823 g) metanolissa (4 ml) lisättiin liuokseen, jossa oli 4-(2-okso-l, 3-oksatsolidin-3-yyli)-piperidiinia (0,600 g) ja etikkahappoa (0,20 ml) metanolissa (8 ml) . Viiden minuutin kuluttua lisättiin natriumsyaaniboorihydridiä (0,220 g) metanolissa (4 ml) 25 yhtenä annoksena. Reaktioseosta sekoitettiin 3 tunnin ajan, minkä jälkeen se laimennettiin vesipitoisella natriumbikarbonaatilla, seosta sekoitettiin 30 minuutin ajan ja sitten se uutettiin dikloorimetaanilla. Orgaaniset uutteet kuivattiin, haihdutettiin ja kromatografoitiin 30 käyttäen eluenttina dikloorimetaania/metanolia (gradientti 98:2, 90:10). Tulokseksi saatu aine liuotettiin dikloorimetaaniin, saostettiin hydrokloridisuolana eetteri-pitoisella suolahapolla, haihdutettiin ja pantiin suurtyhjöön yöksi, jolloin saatiin otsikon yhdiste 35 valkoisena kiinteänä aineena (0,88 g); MS: m/z = 504 (M+l).
111253 25
Yhdisteen C26H31CI2N3O3· 1,20 HC1 analyysi:
Laskettu: C 56,96; H 5,92; N 7,66.
Havaittu: C 57,02; H 6,05; N 7,62.
Välituote N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyy-5 li]-N-metyylibentsamidi valmistettiin seuraavasti: a. 1-bromi-2-(tetrahydropyran-2-yylioksi)etaani.
Mekaanisesti sekoitettavaan liuokseen, jossa oli dihydro-pyraania (1 1) ja vahvan hapon ioninvaihtohartsia (10,0 g) heksaanissa (2 1), lisättiin 2-bromietanolia (985 g) 10 tipoittain 1,5 tunnin kuluessa kylmässä jäähauteessa sisäisen lämpötilan pitämiseksi 35 - 40 °C:ssa.
Reaktioseosta sekoitettiin yön yli huoneenlämpötilassa, minkä jälkeen se kromatografoitiin käyttämällä heksaania (6 1). Eluaatti haihdutettiin, jolloin saatiin 15 meripihkanvärinen neste, joka tislattiin 2 tuuman vigreux-pylvään läpi, jolloin talteen otettiin aine, joka kiehui 75 - 95 °C:n välillä (3 300 - 4 700 Pa) . Tämä aine tislattiin uudelleen, jolloin saatiin eetteri öljynä (1195,5 g); kiehumispiste 80 -90 °C (2 666 Pa); NMR: 4,68 (m, 1), 4,01 20 (m, 1), 3,89 (m, 1), 3,77 (m, 1), 3,52 (m, 3), 1,75 - 1,50 (m, 6) .
b. a-[2-(tetrahydropyran-2-yylioksi)etyyli)-3,4-di-kloorifenyyliasetonitriili. Liuokseen, jossa oli natrium-hydridiä (218,0 g 55-%:ista öljysuspensiota) tetra- 25 hydrofuraanissa (4 1) 10 °C:n lämpötilassa jää/vesihautees- sa, lisättiin 3,4-dikloorifenyyliasetonitriiliä (893,0 g) tetrahydrofuraanissa (2 1) 45 minuutin kuluessa ja tulokseksi saatua liuosta sekoitettiin 2 tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Seos jäähdytettiin jää/vesihauteessa 30 ja siihen lisättiin tipoittain l-bromi-2-(tetrahydropyran-2-yylioksi)etaania (1 076,0 g) puhtaana öljynä 25 minuutin kuluessa. Seosta sekoitettiin yön yli huoneenlämpötilassa ja se jaettiin neljään 2 l:n annokseen. Jokainen annos laimennettiin kyllästetyllä ammoniumkloridiliuoksella (3 1) 35 ja uutettiin eetterillä (500 ml) . Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin ammoniumkloridin vesiliuoksella, kui- 111253 26 vattiin ja haihdutettiin. Tulokseksi saatu aine kromatografoltiin käyttäen eluenttina heksaania/dikloori-metaania (gradientti 100:0, 0:100), jolloin saatiin nitriili öljynä (932 g); NMR: 7,47 (m, 4), 7,20 (m, 2), 5 4,57 (m, 2), 4,03 (m, 2), 3,85 (m, 4), 3,54 (m, 3), 3,37 (m, 1), 2,15 (m, 4), 1,77 (m, 4), 1,56 (m, 8).
c. 2-(3, 4-dikloorifenyyli)-4-(tetrahydropyran-2- yylioksi)butyyliamiini. Liuokseen, jossa oli edellä saatu nitriili (128,3 g) 95-%:isessa etanolissa (1,1 1} ja 10 väkevässä ammoniumhydroksidissa (550 ml), lisättiin Raney-nikkeliä (25,0 g). Seosta hydrattiin vetyilmakehässä 360 kPa:n (3,6 bar) paineessa 1,5 päivän ajan. Seos suodatettiin piimään läpi katalyytin poistamiseksi ja tulokseksi saatu suodos haihdutettiin. Tulokseksi saatu 15 aine kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloori- metaania/metanolia (gradientti 100:0, 95:5), jolloin saatiin amiini öljynä (91 g). NMR: 7,40 (s, 1), 7,38 (s, 1), 7,32 (d, 1, J = 2,1), 7,28 (d, 1, J = 2,0), 7,07 (dd, 1, J = 2,1, 4,9), 7,04 (dd, 1, J = 2,1, 4,9), 4,50 (m, 1), 20 4,43 (m, 1), 3,70 (m, 4), 3,45 (m, 2), 3,27 (m, 1), 3,17 (m, 1), 2,97 - 2,75 (m, 6), 2,00 (m, 2), 1,82 - 1,66 (m, 6), 1,53 (m, 8), 1,18 (leveä s, 4). MS: m/z = 318 (M+l).
d. N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-(tetrahydropyran-2-yylioksi)butyyli]bentsamidi. Liuokseen, jossa oli amiinia 25 (2,5 g) dikloorimetaanissa (35 ml), lisättiin trietyyliamiinia (1,1 ml) ja bentsohappoanhydridiä (1,85 g) ja tulokseksi saatua liuosta sekoitettiin 45 minuutin ajan. Seos pestiin 0,2 N suolahapolla, 1 N natriumhydroksidilla ja vedellä, kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin 30 amidi öljynä (3,3 g). NMR 7,63 (m, 4), 7,46 (m, 2), 7,37 (m, 8), 7,09 (m, 2), 6,22 (m, 2), 4,50 (m, 1), 4,43 (m, 1), 3,8 (m, 5), 3,63 (m, 1), 3,5 (m, 4), 3,36 (m, 1), 3,23 (m, 1) , 3,11 (m, 2), 2,06 (m, 2), 1,90 - 1,77 (m, 4), 1,68 (m, 2) , 1,51 (m, 8). MS: m/z = 338 [(M+l)-tetrahydropyranyyli].
35 e. N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-(tetrahydropyran-2- yylioksi)butyyli]-N-metyylibentsamidi. Edellä saadun amidin 777253 27 (3,3 g) liuokseen dimetyylisulfoksidissa (20 ml) lisättiin jauhettua kaliumhydroksidia (1,6 g) ja sen jälkeen jodimetaania (1,0 ml) 15 minuutin kuluttua. Yhden tunnin kuluttua seos laimennettiin vedellä ja uutettiin dikloori-5 metaanilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin amidi öljynä (3,1 g).
MS: m/z = 352 [(M+l)-tetrahydropyranyyli].
f. N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydroksibutyyli]-N-metyylibentsamidi. Edellä saadun amidin (10,5 g) liuokseen 10 tetrahydrofuraanissa (100 ml) lisättiin 6 N suolahappoa (50 ml) ja tulokseksi saatua liuosta sekoitettiin yön yli. Seos neutraloitiin 10 N natriumhydroksidilla, laimennettiin vedellä ja uutettiin dikloorimetaanilla. Orgaaninen kerros kuivattiin ja haihdutettiin. Tulokseksi saatu keltainen 15 kiinteä aine suspendoitiin eetteriin ja suodatettiin, jolloin saatiin alkoholi valkoisena kiinteänä aineena (8,4 g). MS: m/z = 352 (M+l).
g. N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N-metyylibentsamidi. Liuokseen, jossa oli oksalyylikloridia 20 (2,6 ml) dikloorimetaanissa (60 ml) -78 °C:n lämpötilassa, lisättiin dimetyylisulfoksidia (4,2 ml) dikloorimetaanissa (30 ml) ja sen jälkeen edellä saatua alkoholia (8.,3 g) dimetyylisulfoksidissa (6 ml) ja dikloorimetaanissa (30 ml) . Tulokseksi saatua liuosta sekoitettiin 30 minuutin 25 ajan ja siihen lisättiin trietyyliamiinia (16,4 ml). Seoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan, se laimennettiin dikloorimetaanilla, pestiin 1 N suolahapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja vedellä, kuivattiin ja haihdutettiin. Tulokseksi saatu 30 keltainen kiinteä aine suspendoitiin eetteriin ja suodatettiin, jolloin saatiin aldehydi valkoisena kiinteänä aineena (6,4 g). MS: m/z = 350 (M+l).
Välituote 4-(2-okso-l,3-oksatsolidin-3-yyli)piperi-diini valmistettiin seuraavasti.
35 h. 1-bent syyiioksikarbonyyli-4-(2-h_ydroksietyyli- amino)piperidiini. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-oksopiperi- 111253 28 diini (2,5 g) metanolissa (7,0 ml) lisättiin liuokseen, jossa oli etanoliamiinia (1,3 ml) ja etikkahappoa (1,2 ml) metanolissa (20 ml). Viiden minuutin kuluttua lisättiin yhtenä annoksena natriumsyaaniboorihydridi (1,35 g) 5 metanolissa (6 ml). Reaktioseosta sekoitettiin yön yli, minkä jälkeen se laimennettiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, seosta sekoitettiin 30 minuutin ajan ja se uutettiin dikloorimetaanilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet haihdutettiin, jäännös liuotettiin 1 N suolahappoon ja 10 pestiin dikloorimetaanilla. Vesipitoinen faasi tehtiin emäksiseksi 1 N natriumhydroksidilla ja uutettiin dikloorimetaanilla. Uutteet kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin aminoalkoholi öljynä (1,7 g). NMR (CD3OD) : 7,34 (m, 5), 5,10 (s, 2), 4,13 (m, 2), 3,64 (m, 2), 2,86 15 (m, 2), 2,73 (m, 2), 2,67 (m, 1), 1,90 (m, 2), 1,25 (m, 2).
MS: m/z = 279 (M+l).
i. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso-l,3-oksatso-lidin-3-yyli)piperidiini. Liuosta, jossa oli aminoalkoholia (1,7 g) ja 1,1'-karbonyylidi-imidatsolia (2,4 g) 20 kloroformissa (30 ml), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 6 tunnin ajan. Reaktioseos laimennettiin dikloorimetaanilla ja pestiin 1 N natriumhydroksidilla ja vedellä. Erotettu orgaaninen faasi kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin oksatsolidin-3-yylipiperidiini sitkeänä öljynä (1,9 25 g). NMR: 7,35 (m, 5), 5,13 (s, 2), 4,34 (m, 4), 3,89 (m, 1) , 3,49 (m, 2), 2,86 (m, 2), 1,78 (m, 2), 1,58 (m, 2). MS: m/z = 3,05 (M+l).
j. 4-(2-ckso-l,3-oksatsolidin-3-yyli)piperidiini. Liuosta, jossa oli edellä saatu oksatsolidin-3-yyli- 30 piperidiini (1,85 g) ja 20-%:ista palladiumhydroksidia hiilellä (0,340 g) etanolissa (30 ml), sekoitettiin yön yli 100 Pa:n (1 bar) vetypaineessa. Reaktioseos suodatettiin piimään läpi ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste (0,950 g) valkoisena kiinteänä aineena. NMR 35 (CD3OD) : 4,35 (m, 2), 3,75 (m, 1), 3,62 (m, 2), 3,20 (m, 2) , 2,76 (m, 2), 1,75 (m, 4). MS: m/z = 171 (M+l).
111253 29
Esimerkki 2 (S) -N- [2- (3,4-dikloorifenyyli) -4- (2-oksoperhyd.ro- 1,3-oksatsin-3-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyyli- bentsamidihydrokloridi 5 Käyttäen esimerkin 1 menetelmää korvaten 4-[4- (2-okso-l,3-oksatsolidin-3-yyli)piperidiini 4-(2-oksoper-hydro-1,3-oksatsin-3-yyli)piperidiinillä ja N-[-2-(3,4-di-kloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-n-metyylibentsamidi (S) -enantiomeerilla saatiin otsikon yhdiste valkoisena 10 kiinteänä aineena; MS: m/z = 518 (M+l).
Yhdisteen C27H33CI2N3O3 1,55 HCl-0,20 (C2H5)20 ana lyysi :
Laskettu: C 56,61; H 6,24; N 7,12.
Havaittu: C 56,54; H 6,60; N 7,38.
15 (S)-N-[2- (3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N- metyylibentsamidi valmistettiin seuraavasti.
a. 2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydroksibutyyliamiini.
Mekaanisesti sekoitettavaan liuokseen, jossa oli 2-(3,4- dikloorifenyyli)-4-(tetrahydropyran-2-yylioksi)butyyli- 20 amiinia (550 g) metanolissa (3 300 ml), lisättiin yhtenä annoksena 6,0 N suolahappoa (352 ml), mikä johti lievään eksotermiin. Reaktioseosta sekoitettiin 3 tunnin ajan, minkä jälkeen se haihdutettiin ja jäännös laimennettiin vedellä 3 ml: n tilavuuteen. Liuos uutettiin eetterillä 25 (2 kertaa 500 ml), tehtiin emäksiseksi natrium- hydroksidipelleteillä (100 g) ja uutettiin etyyliasetaatilla (4 kertaa 500 ml) . Yhdistetyt etyyli- asetaattiuutteet pestiin (800 ml kyllästettyä nat- riumkloridiliuosta), kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin 30 saatiin alkoholi meripihkanvärisenä öljynä (367 g), joka jähmettyi suurtyhjössä. NMR: 7,39 (d, 1, J = 8,2), 7,28 (d, 1, J = 2,0), 7,04 (dd, 1, J = 8,2, 2,0), 3,65 (m, 1), 3,50 (m, 1), 2,90 (m, 2), 2,71 (m, 1), 2,25 (m, 2), 1,86 (m, 2).
b. (S)-2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydroksibutyyli-35 amiini. Mekaanisesti sekoitettavaan liuokseen, jossa oli D- viinihappoa (222 g) metanolissa (4 1) palautusjääh- 111253 30 dytyslämpötliassa, lisättiin edellä saatu aminoalkoholi (342 g) lämpimässä metanolissa (2 1) yhtenä annoksena ja huuhdottiin alas ylimääräisellä annoksella metanolia (1 1). Seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen. Kiteet alkoivat 5 muodostua ennen kiehumispisteen saavuttamista. Liuosta palautusjäähdytettiin 1,5 tunnin ajan, minkä jälkeen se jäähdytettiin vähitellen huoneenlämpötilaan ja sitä sekoitettiin 3 päivän ajan. Tartraattisuolan ensimmäinen saanto kerättiin talteen suodattamalla imussa ja kuivattiin 10 tyhjöuunissa 60 °C: n lämpötilassa, jolloin saatiin tuote (232 g). Tämä aine otettiin metanoliin (13,5 1) sen kiehuessa ja seosta pidettiin palautusjäähdytyksessä yhden tunnin ajan antaen 1 l:n metanolia tislautua pois. Seoksen annettiin jäähtyä vähitellen huoneenlämpötilaan ja sitä 15 sekoitettiin 4 päivän ajan. Kiteiden ensimmäinen saanto kerättiin talteen suodattamalla imussa ja kiteet kuivattiin, jolloin saatiin kiinteä aine (178,8 g).
Metanolisuodos haihdutettiin noin 3 l:n tilavuuteen. Tulokseksi saatu suspensio kuumennettiin takaisin 20 palautusjäähdytyslämpötilaan, jolloin saatiin kirkas liuos, jonka annettiin jäähtyä vähitellen huoneenlämpötilaan sekoittaen. Kiteiden toinen saanto (43,8 g) kerättiin talteen. Erotettujen aminoalkoholitartraattien yhdistetyt saannot (222,6 g) otettiin 1,0 N natriumhydroksidiin (1,5 25 1) ja uutettiin dikloorimetaanilla (4 kertaa 500 ml).
Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin kyllästetyllä suoliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin optisesti rikastettu aminoalkoholi kellertävänä kiinteänä aineena (135,4 g); sulamispiste 80 - 82 °C. NMR (CD3OD) :
30 7,47 (d, 1, J = 8,3), 7,42 (d, 1, J = 2,1), 7,17 (dd, 1, J
= 8,2, 2,1), 3,47 (m, 1), 3,34 (m, 1), 2,83 (m, 3), 1,92 (m, 1), 1,74 (m, 1). MS: m/z = 324 (M+l).
c. Etyyli-(S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydrok-sibutyyli]karbamaatti. Etyylikloroformaattia (25,5 g) 35 lisättiin tipoittain 20 minuutin kuluessa mekaanisesti sekoitettavaan liuokseen, jossa oli edellä saatua 111253 31 aminoalkoholia (50,0 g) ja trietyyliamiinia (24,9 g) dikloorimetaanissa (600 ml) jäähdytettynä -30 °C:n lämpötilaan. Sisäistä lämpötilaa pidettiin -20 - -25 °C:ssa lisäyksen aikana. Sitten reaktioseoksen annettiin lämmetä 5 vähitellen huoneenlämpötilaan 4 tunnin kuluessa ja se pestiin (1 N suolahappo, kyllästetty natriumbikarbonaatin vesiliuos ja kyllästetty natriumkloridin vesiliuos). Erotettu dikloorimetaanifaasi kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin karbamaatti keltaisena öljynä (65,3 g). NMR 10 (CD3OD) : 7,44 (d, 1, J = 8,3), 7,38 (d, 1, J = 2,1), 7,15 (dd, 1, J = 8,3, 2,1), 3,99 (q, 2, J = 7,1), 3,45 (m, 1), 3,29 (m, 3), 2,97 (m, 1), 1,92 (m, 1), 1,75 (m, 1), 1,16 (t, 3, J = 7,1). MS: m/z 306 (M+l).
d. (S)-N-metyyli-2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydrok-15 sibutyyliamiini. Edellä saatu karbamaatti (65,3 g) tetrahydrofuraanissa (500 ml) lisättiin tipoittain 30 minuutin kuluessa mekaanisesti sekoitettavaan suspensioon, jossa oli litiumalumiinihydridiä (16,0 g) tetra hydrofuraanissa (200 ml). Sisäinen lämpötila nousi 20 45 °C:seen lisäyksen aikana. Reaktioseosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen yhden tunnin ajan, sitten se jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ja sitä sekoitettiin yön yli. Seos jäähdytettiin jäähauteessa ja siihen lisättiin kyllästettyä natriumsulfaatin vesiliuosta (50 ml) 25 tipoittain 45 minuutin kuluessa. Reaktioseosta sekoitettiin vielä yhden tunnin ajan, minkä jälkeen lisättiin kiinteätä vedetöntä natriumsulfaattia (50 g) . Seosta sekoitettiin 30 minuutin ajan, minkä jälkeen se suodatettiin piimään läpi ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin metyyliamiini 30 keltaisena öljynä (52,9 g). NMR: 7,37 (d, 1, J = 8,2), 7,27 (d, 1, J = 2,0), 7,01 (dd, 1, J = 8,2, 2,1), 3,69 (m, 1), 3,53 (m, 1), 3,40 (m, 2), 2,76 (m, 3), 2,45 (m, 3), 1,89 (m, 2). MS: m/z = 248 (M+l).
e. (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydroksibutyy-35 li]-N-metyylibentsamidi. Bentsoyylikloridia (31,5 g) dikloorimetaanissa (200 ml) lisättiin tipoittain 45 32 111253 minuutin kuluessa mekaanisesti sekoitettavaan liuokseen, jossa oli edellä saatua amiinia (52,9 g) ja tri- etyyliamiinia (54,0 g) dikloorimetaanissa (1 1) jäähdytettynä jäähauteessa 5 - 8 °C:n sisäisen lämpötilan 5 ylläpitämiseksi. Reaktioseosta sekoitettiin 3 tunnin ajan huoneenlämpötilassa ja sitten se pestiin (1 N suolahappo, kyllästetty suolaliuos) . Erotettu dikloorimetaanikerros haihdutettiin, jolloin saatiin keltainen öljy, joka kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaa-10 nia/metanolia (gradientti 100:0, 95:5), jolloin saatiin bentsamidi valkoisena kiinteänä aineena (65,6 g); sulamispiste 123 - 125 °C. MS: m/z = 352 (M+l); [a]o = -18,3° (c - 2,46, CH30H) .
f . (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N- 15 metyylibentsamidi. Edellä saatu alkoholi (12,9 g) dikloorimetaanissa (150 ml) siirrettiin kanyylin kautta liuokseen, jossa oli Dess-Martinin perjodinaania (18,6 g) ja tert-butanolia (4,5 ml) dikloorimetaanissa (150 ml). Reaktioseosta sekoitettiin 5 minuutin ajan, minkä jälkeen 20 se laimennettiin eetterillä (600 ml) ja liuoksella, jossa oli natriumbikarbonaattia (19,7 g) ja natrium-tiosulfaattipentahydraattia (64,5 g) vedessä (825 ml). Kaksi faasia käsittävää järjestelmää sekoitettiin voimakkaasti, kunnes molemmat kerrokset tulivat kirkkaiksi 25 (noin 30 min). Erotettu orgaaninen kerros pestiin (kyllästetty natriumbikarbonaatin vesiliuos), kuivattiin ja haihdutettiin. Raaka aine kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaania/eetteriä (1:1), jolloin saatiin aldehydi valkoisena kiinteänä aineena (9,7 g) saostamalla 30 ja suodattamalla eetteristä. MS: m/z = 350 (M+l).
Välituote 4-(2-oksoperhydro-l,3-oksatsin-3-yyli)pi-peridiini valmistettiin seuraavasti.
g. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-hydroksipropyyli-amino)piperidiini. Käyttäen esimerkin l.h menetelmää 35 korvaten etanoliamiini 3-amino-l-propanolilla saatiin aminopiperidiini öljynä. NMR (CD3OD) : 7,35 (m, 5), 5,10 (s, 111253 33 2), 4,12 (m, 2), 3,62 (t, 2, J = 6,2), 2,86 (m, 2), 2,71 (m, 2), 2,65 (m, 1), 1,90 (m, 2), 1,71 (m, 2), 1,24 (m, 2).
MS: irt/z = 293 (M+l) .
h. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-oksoperhydro-l,3- 5 oksatsin-3-yyli)piperidiini. Käyttäen esimerkin l.i menetelmää korvaten l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-hydroksi-etyyliamino)piperidiini l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-hydroksipropyyliamino)piperidiinilla saatiin oksatsin-3-yylipiperidiini öljynä. NMR (CD3OD): 7,35 (m, 5), 5,11 (s, 10 2), 4,22 (m, 5), 3,24 (m, 2), 2,88 (m, 2), 1,99 (m, 2), 1,69 (m, 4). MS: m/z = 319 (M+l).
i. 4-(2-oksoperhydro-l, 3-oksatsin-3-yyli)piperidiini. Käyttäen esimerkin l.j menetelmää korvaten 1-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso-l, 3-oksatsolidin-3-yyli)- 15 piperidiini l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-oksoperhydro- 1,3-oksatsin-3-yyli)piperidiinilla saatiin piperidiini, josta suojaus oli poistettu, amorfisena, valkoisena jähmeänä aineena. NMR (CD3OD) : 4,24 (m, 2), 4,12 (m, 1), 3,32 (m, 2), 3,22 (m, 2), 2,78 (m, 2), 2,03 (m, 2), 1,79 20 (m, 4). MS: m/z = 185 (M+l).
Esimerkki 3 (S)-N-[2- (3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoimidat-.
solidin-l-yyli)piperidino]butyyli] -N-metyylibents- amidihydrokloridi 25 Sekoitettavaa liuosta, jossa oli (S)-N-[4-[4-(2- aminoetyyliamino)piperidino]-2-(3,4-dikloorifenyyli)butyy-li]-N-metyylibentsamidia (0,356 g) ja 1,1'-karbonyyli-diimidatsolia (0,157 g) kloroformissa (6 ml), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 2 tunnin ajan. Reaktioseos 30 laimennettiin dikloorimetaanilla, pestiin (natriumbikarbonaatin vesiliuos), kuivattiin, haihdutettiin ja kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaa-nia/metanolia (gradientti 98:2, 90:10). Tulokseksi saatu aine liuotettiin dikloorimetaaniin, saostettiin hydro-35 kloridisuolana eetteripitoisella suolahapolla, haihdutettiin ja pantiin suurtyhjöön yöksi, jolloin saatiin otsikon 111253 34 yhdiste valkoisena kiinteänä aineena (0,244 g). MS: m/z = 503 (M+l).
Yhdisteen C26H32CI2N4O2· 1, 70 HC1*0,20 (C2H5)20 ana lyysi : 5 Laskettu: C 55,47; H 6,20; N 9,65.
Havaittu: C 55,47; H 6,35; N 9,44.
Välituote (S)-N-[4-[4-(2- aminoetyyliamino)piperidino]-2-(3,4-dikloorifenyyli)butyy-li]-N-metyylibentsamidi valmistettiin seuraavasti.
10 a. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-aminoetyyli- amino)piperidiini. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-oksopiperi-diini (12,0 g) metanolissa (72 ml) lisättiin sekoitettavaan liuokseen, jossa oli etyleenidiamiinia (5,2 ml) ja etikkahappoa (8,8 ml) metanolissa (72 ml). Sitten 15 15 minuutin kuluttua lisättiin natriumsyaaniboorihydridi (9,7 g) metanolissa (72 ml) yhtenä annoksena. Reaktioseosta sekoitettiin yön yli, minkä jälkeen se haihdutettiin ja jäännös liuotettiin 1 N suolahappoon (100 ml) . Lisättiin tipoittain väkevää suolahappoa ja sekoittamista jatkettiin, 20 kunnes kaasun kehittyminen päättyi. Hapan vesipitoinen seos pestiin dikloorimetaanilla, tehtiin emäksiseksi pH-arvoon 10 10 N natriumhydroksidilla ja uutettiin dikloorimetaanilla. Dikloorimetaaniuutteet kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin diamiini sitkeänä öljynä 25 (7,5 g). NMR (CD3OD) : 7,35 (m, 5), 5,10 (s, 2), 4,12 (m, 2), 2,89 (m, 2), 2,70 (m, 5), 1,90 (m, 2), 1,24 (m, 2). MS: m/z = 278 (M+l).
b. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-[(2,2,2-trifluori-asetyyli) [2-(2,2,2-trifluoriasetyyliamino)etyyli]amino]pi-30 peridiini. Trifluorietikkahappoanhydridiä (10,5 ml) lisättiin liuokseen, jossa oli edellä saatu diamiini (7,5 g) kloroformissa (90 ml). Reaktioseosta sekoitettiin yön yli, minkä jälkeen se jäähdytettiin 0 °C:n lämpötilaan ja siihen lisättiin tipoittain trietyyliamiinia (8,3 ml). 35 Yhden tunnin kuluttua seos laimennettiin dikloo rimetaanilla, pestiin (1 N suolahappo, natriumbikarbonaatin I I noo 35 vesiliuos), kuivattiin, haihdutettiin ja kroraatografoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaania/metanolia (98:2), jolloin saatiin trifluoriasetyloitu piperidiini valkoisena vaahtona (8,9 g). NMR (CD3OD) : 7,35 (m, 5), 5,12 (s, 2), 5 4,28 (m, 2), 3,95 (m, 1), 3,48 (m, 4), 2,90 (m, 2), 1,78 (m, 4). MS: m/z 470 (M+l).
c. 4-[(2,2,2-trifluoriasetyyli)[2-(2,2,2-trifluori-asetyyliamino)etyyli]amino]piperidiini. Käyttäen esimerkin l.j. menetelmää korvaten l-bentsyylioksikarbonyyli-4- 10 (2okso-l,3-oksatsolidin-3-yyli)piperidiini 1-bentsyylioksi-karbonyyli-4-[(2,2,2-trifluoriasetyyli)[2-(2,2,2-trifluo-riasetyyliamino)etyyli]amino]piperidiinilla saatiin piperidiini, jonka 1-asemasta suojaus oli poistettu, keltaisena öljynä; NMR (CD3OD) : 3,84 (m, 1), 3,51 (m, 4), 3,12 (m, 2), 15 2,61 (m, 2), 1,74 (m, 4). MS: m/z = 336 (M+l).
d. (S)-N-[2 - (3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-[(2,2,2-tri-fluoriasetyyli)[2-(2,2,2-trifluoriasetyyliamino)etyyli]-amino]piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidi. Käyttäen esimerkin 1 menetelmää korvaten 4-(2-okso-l,3-oksatsolidin- 20 3-yyli)piperidiini 4-[(2,2,2-trifluoriasetyyli) [2-(2,2,2-trifluoriasetyyliamino)etyyli]amino]piperidiinilla ja N-[-2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N-metyylibentsamidi (S)-enantiomeerilla saatiin N-metyylibentsamidi sitkeänä öljynä. MS: m/Z = 669 (M+l).
25 e. (S)-N-[4-[4-(2-aminoetyyliamino)piperidino]-2- (3,4-dikloorifenyyli)butyyli]-N-metyylibentsamidi. Liuosta, jossa oli esimerkistä 3.d saatu raaka tuote (2,5 g) 20-%:isessa kaliumhydroksidissa (8,5 ml) ja metanolissa (11 ml) , sekoitettiin yhden tunnin ajan. Reaktioseos tehtiin 30 happamaksi pH-arvoon 2 käyttämällä 1 N suolahappoa ja pestiin 3 kertaa dikloorimetaanilla. Vesipitoinen faasi tehtiin sitten emäksiseksi pH-arvoon 10 käyttämällä 10 N natriumhydroksidia ja uutettiin dikloorimetaanilla. Uutteet kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin diamiini 35 sitkeänä öljynä (1,8 g). MS: m/z = 477 (M+l).
111253 36
Esimerkki 4 (S)-N- [2- (3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-tioksoimid-atsolidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyyli-bentsamidihydrokloridi 5 Käyttäen esimerkin 3 menetelmää korvaten 1,1'- karbonyylidi-imidatsoli 1,1'-tiokarbonyylidi-2(1H)-pyrid-onilla ja sekoittaen huoneenlämpötilassa 1,5 tunnin ajan palautusjäähdytyksen sijasta saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena. MS: m/z = 519 (M+l).
10 Yhdisteen C26H32CI2N4OS >1,7 0 HCl-0,10 (C2H5)20:n analyysi:
Laskettu: C 53,84; H 5,93; N 9,51.
Havaittu: C 53,89; H 5,89; N 9,48.
Esimerkki 5 15 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoperhyd- ropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyyli-bentsamidihydrokloridi Käyttäen esimerkin 3 menetelmää korvaten (S)—N—[4 — [4-(2-aminoetyyliamino)piperidino]-2-(3,4-dikloorifenyy-20 li)butyyli]-N-metyylibentsamidi (S)-N-[-4-(3-aminopropyy-liamino)piperidino]-2-(3,4-dikloorifenyyli)butyyli]-N-met-yylibentsamidilla saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena. MS: m/z = 517 (M+l).
Yhdisteen C27H34CI2N4O2· 2,60 HCl-0,13 (C2H5)20 25 analyysi:
Laskettu: C 53,14; H 6,14; N 9,00.
Havaittu: C 53,14; H 6,31; N 9,16.
Välituote (S)-N- [4-[4-(3-aminopropyyliamino)piperidino] -2-(3,4-dikloorifenyyli)butyyli]-N-metyylibentsamidi 30 valmistettiin seuraavasti.
a. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-aminopropyyliamino) piperidiini . Käyttäen esimerkin 3. a menetelmää korvaten eteenidiamiini 1,3-diaminopropaanilla saatiin piperidiini sitkeänä öljynä. MS: m/z = 292 (M+l) . NMR (CD3OD) : 7,34 35 (m, 5), 5,10 (s, 2), 4,13 (m, 2), 2,86 (m, 2), 2,65 (m, 5), 1,90 (m, 2), 1,65 (m, 2), 1,23 (m, 2).
111253 37 b. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-[2,2,2-trifluori-asetyyli)-[3-(2,2,2-trifluoriasetyyliamino)propyyli]amino]-piperidiini. Käyttäen esimerkin 3.b menetelmää korvaten l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-aminoetyyliamino)piperidii- 5 ni l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-aminopropyyliamino)pipe-ridiinilla ja lisäten trietyyliamiini liuokseen ennen trifluorietikkahappoanhydridin lisäämistä 0 °C:n lämpö tilassa saatiin trifluoriasetyloitu piperidiini sitkeänä öljynä. NMR: 7,36 (m, 5), 5,14 (s, 2), 4,35 (m, 2), 3,93 10 (m, 1), 3,35 (m, 4), 2,83 (m, 2), 1,87 - 1,74 (m, 6). MS: m/z = 484 (M+l).
c. 4-[(2,2,2-trifluoriasetyyli)[3-(2,2,2-trifluo- riasetyyliamino)propyyli]amino]piperidiini. Käyttäen esi merkin l.j menetelmää korvaten l-bentsyylioksikarbonyyli-4- 15 (2-okso-l,3-oksatsolidin-3-yyli)piperidiini 1-bentsyyli- oksikarbonyyli-4-[(2,2,2-trifluoriasetyyli)-[3-(2,2,2-tri-fluoriasetyyliamino)propyyli]amino]piperidiinilla saatiin piperidiini, jonka 1-asemasta suojaus oli poistettu, sitkeänä öljynä. NMR (CD3OD) : 4,39 (m, 1), 3,98 (m, 1), 20 3,30 (m, 3), 2,95 (m, 1), 2,82 (m, 1), 2,65 (m, 2), 2,01 (m, 2), 1,75 (m, 2), 1,32 (m, 2). MS: m/z = 350 (M+l).
d. .(S) -N- [2 - (3, 4-dikloorifenyyli) — 4 — [4 — [ (2,2,2-trifluoriasetyyli)[2-(2,2,2-trifluoriasetyyliamino)etyyli]-amino]piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidi. Käyttäen 25 esimerkin 1 menetelmää korvaten 4-(2-okso-l,3-oksatsolidin- 3-yyli)piperidiini 4-[ (2,2,2-trifluoriasetyyli) [3-(2,2,2-trifluoriasetyyliamino)propyyli]amino]piperidiinilla ja N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N-metyylibentsamidi (S)-enantiomeerilla saatiin N-metyylibentsamidi. MS: m/z = 30 683 (M+l).
e. (S)-N-[4-[4-(3-aminopropyyliamino)piperidino]-2-(3,4-dikloorifenyyli)butyyli]-N-metyylibentsamidi. Käyttäen esimerkin 3.e menetelmää korvaten (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli) -4-[4-[(2,2,2-trifluoriasetyyli)[2-(2,2,2-tri- 35 fluoriasetyyliamino)etyyli]amino]piperidino]butyyli]-N- metyylibentsamidi N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-[(2,2,2- 111253 38 trifluoriasetyyli)[3-(2,2,2-trifluoriasetyyliamino)propyy-li]amino]piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidilla saatiin diamiini sitkeänä öljynä. MS: m/z = 491 (M+l).
Esimerkki 6 5 (S)-N- [2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-tioksoper- hydropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyy-libentsamididihydrokloridi Käyttäen esimerkin 3 menetelmää korvaten 1,1'-karbonyylidi-imidatsoli 1,1'-tiokarbonyylidi-imidatsolilla 10 ja korvaten (S)-N-[4-[4-(2-aminoetyyliamino)piperidino]-2-(3,4-dikloorifenyyli)butyyli]-N-metyylibentsamidi (S)-N-[4-[4-(3-aminopropyyliamino)piperidino]-2-(3,4-dikloorifenyy-li)butyyli]-N-metyylibentsamidilla ja sekoittaen yön yli huoneenlämpötilassa palautusjäähdytyksen sijasta saatiin 15 otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena. MS: m/z = 533 (M+l).
Yhdisteen C27H34Cl2N4OS · 2,30 HCl-0,10 (C2H5)20 analyysi:
Laskettu: C 52,67; H 6,01; N 8,96.
20 Havaittu: C 52,57; H 6,11; N 8,84.
Esimerkki 7 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(3-metyyli-2-tioksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli ] -N-metyylibentsamidihydrokloridi 25 Käyttäen esimerkin 1 menetelmää korvaten 4 —(2 — okso-1,3-oksatsolidin-3-yyli)piperidiini 4-(3-metyyli-2-tioksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiinilla ja N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N-metyylibentsamidi (S)-enantiomeerilla saatiin otsikon yhdiste valkoisena 30 kiinteänä aineena. MS: m/z = 547 (M+l).
Yhdisteen C28H36CI2N4OS · 1,70 HCl-0,10 (C2H5)20 analyysi:
Laskettu: C 55,28; H 6,32; N 9,08.
Havaittu: C 55,21; H 6,37; N 8,88.
35 Välituote 4-(3-metyyli-2-tioksoperhydropyrimidin- 1-yyli)piperidiini valmistettiin seuraavasti.
111253 39 a. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-metyyliaminoprop- yyliamino}piperidiini. Käyttäen esimerkin 3. a menetelmää korvaten eteenidiamiini N-metyyli-1, 3-propaanidiamiinilla saatiin otsikon yhdiste sitkeänä öljynä. MS: m/z = 306 5 (M+l) . NMR {CD3OD) : 7,34 (m, 5), 5,10 (s, 2), 4,13 (m, 2), 2,86 (m, 2), 2,70 (m, 5), 2,47 (s, 3), 1,91 (m, 2), 1,73 (m, 2), 1,24 (m, 2).
b. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-metyyli-2-tiokso-perhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini. Liuosta, jossa oli 10 diamiinia (3,0 g) ja 1,1'-tiokarbonyylidi-imidatsolia (1,9 g) kloroformissa (70 ml), refluksoitiin 1,5 tunnin ajan ja sitten sitä sekoitettiin yön yli ympäröivässä lämpötilassa. Reaktioseos laimennettiin dikloorimetaanilla ja pestiin peräkkäin vedellä, 1 N suolahapolla ja 15 natriumbikarbonaatin vesiliuoksella. Erotettu orgaaninen faasi kuivattiin, haihdutettiin ja kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaania/eetteriä (80:20), jolloin saatiin tiourea valkoisena kiinteänä aineena (1,4 g). MS: m/z = 348 (M+l). NMR (CD3OD) : 7,35 (m, 5), 5,66 (m, 20 1), 5,11 (s, 2), 4,24 (m, 2), 3,35 (m, 5), 3,22 (m, 2), 2,88 (m, 2), 1,92 (m, 2), 1,72 - 1,55 (m, 4).
c. 4-(3-metyyli-2-tioksoperhydropyrimidin-l-yyli)- piperidiini. Trifluorimetaanisulfonihappoa (2,0 ml) lisättiin liuokseen, jossa oli edellä saatu piperidiini 25 (1,4 g) ja anisolia (1,4 ml) dikloorimetaanissa (20 ml) 0 °C:n lämpötilassa- Reaktioseosta sekoitettiin 2 tunnin ajan, minkä jälkeen se haihdutettiin, jäännös liuotettiin metanoliin, liuos kuljetettiin heikon emäksen katio-ninvaihtohartsipylvään läpi, haihdutettiin ja kro-30 matografoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaa-nia/metanolia (gradientti 98:2, 90:10). Tulokseksi saatu aine liuotettiin laimeaan suolahapon vesiliuokseen, uutettiin dikloorimetaanilla (kaadettiin pois) ja tehtiin emäksiseksi käyttämällä natriumhydroksidia. Sitten 35 vesipitoinen faasi uutettiin dikloorimetaanilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin piperidiini valkoisena 111253 40
kiinteänä aineena (0,75 g). MS: m/z = 214 (M+l). NMR
(CD3OD) : 5,53 (m, 1), 3,36 (m, 5), 3,29 (m, 2), 3,08 (m, 2), 2,64 (m, 2), 1,94 (m, 2), 1,72 - 1,53 (m, 4).
Esimerkki 8 5 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-okso-l,3- perhydrodiatsepin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N- metyylibentsamididihydrokloridi Käyttäen esimerkin 1 menetelmää korvaten 4-(2-okso- 1,3-oksatsolidin-3-yyli)piperidiini 4-(2-okso-l,3-perhyd-10 rodiatsepin-l-yyli)piperidiinilla ja N-[2-(3,4-dikloorifenyyli) -4-oksobutyyli]-N-metyylibentsamidi (S)-N-[2- (3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N-metyylibentsamidilla saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena. MS: m/z = 531 (M+l).
15 Yhdisteen C28H36CI2N4O2 · 2,10 HCl-0,20 (02Η5)20 analyysi:
Laskettu: C 55,53; H 6,48; N 8,99.
Havaittu: C 55,70; H 6,53; N 8,91.
Välituote 4-(2-okso-l,3-perhydrodiatsepin-l-yyli)-20 piperidiini valmistettiin seuraavasti.
a. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(4-aminobutyyliami- no)piperidiini. Käyttäen esimerkin 3. a menetelmää korvaten eteenidiamiini 1,4-diaminobutaanilla saatiin otsikon yhdiste sitkeänä öljynä. MS: m/z = 306 (M+l). NMR (CD3OD): 25 7,34 (m, 5), 5,10 (s, 2), 4,13 (m, 2), 2,86 (m, 2), 2,63 (m, 5), 1,90 (m, 2), 1,51 (m, 4), 1,23 (m, 2).
b. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso-l,3-perhyd-rodiatsepin-l-yyli)piperidiini. Liuosta, jossa oli diamiinia (1,6 g) ja 1,1'-karbonyylidi-imidatsolia (0,94 g) 30 kloroformissa (40 ml) , refluksoitiin 1 tunnin ajan.
Reaktioseos laimennettiin dikloorimetaanilla ja pestiin vedellä. Erotettu orgaaninen faasi kuivattiin, haihdutettiin ja kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaania/metanolia (gradientti 98:2, 90:10), 35 jolloin saatiin urea valkoisena kiinteänä aineena (0,36 g). MS: m/z = 332 (M+l). NMR (CD3OD) : 7,34 (m, 5), 5,09 (s, 2), 111253 41 4,21 (m, 3), 3,25 (m, 2), 3,13 (m, 2), 2,85 (m, 2), 1,58 (m, 6), 1,44 (m, 2).
c. 4-(2-okso-l,3-perhydrodiatsepin-l-yyli)piperi-diini. Käyttäen esimerkin l.j menetelmää korvaten 1-5 bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso-l,3-oksatsolidin-3-yyli)-piperidiini l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso-l,3-perhydrodiatsepin-l-yyli ) piperidiinilla saatiin piperidiini valkoisena kiinteänä aineena. MS: m/z = 198 (M+l). NMR
(CD3OD) : 4,16 (m, 1), 3,29 (m, 2), 3,21 (m, 2), 3,11 (m, 10 2), 2,65 (m, 2), 1,62 (m, 6), 1,48 (m, 2).
Esimerkki 9 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-okso-5,5-dimetyyliperhydropyrimidin-l-yyli) piperidino] bufc-yyli]-N-metyylibentsamidi 15 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksopropyyli]-N- metyylibentsamidi (0,622 g) metanolissa (8,0 ml) lisättiin liuokseen, jossa oli 4-(2-okso-5,5-dimetyyliperhydro-pyrimidin-l-yyli)piperidiinia (0,400 g) ja etikkahappoa (0,11 ml) metanolissa (8,0 ml). Viiden minuutin kuluttua 20 lisättiin natriumsyaaniboorihydridiä (0,119 g) metanolissa (8,0 ml) yhtenä annoksena. Reaktioseosta sekoitettiin yön yli, minkä jälkeen se laimennettiin natriumbikarbonaatin -vesiliuoksella, sitä sekoitettiin 30 minuutin ajan ja se uutettiin dikloorimetaanilla. Erotettu orgaaninen kerros 25 kuivattiin, haihdutettiin ja kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaania/metanolia (95:5). Tulokseksi saatu öljy, joka alkoi kiteytyä seistessään, suspendoitiin eetteriin ja suodatettiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena (0,720 g). MS: m/z = 30 545 (M+l).
Yhdisteen C29H38CI2N4O2 analyysi:
Laskettu: C 63,84/ H 7,02; N 10,26.
Havaittu: C 63,95; H 6,95; N 10,15.
Välituote 4-(2-okso-5,5-dimetyyliperhydropyrimidin-35 1-yyli)piperidiini valmistettiin seuraavasti.
111253 42 a. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-amino-2,2-di-metyylipropyyliamino)piperidiini. Käyttäen esimerkin 3.a menetelmää korvaten eteenidiamiini 2,2-dimetyyli-l,3-propaanidiamiinilla saatiin otsikon yhdiste sitkeänä 5 öljynä. NMR (CD3OD) : 7,34 (m, 5), 5,10 (s, 2), 4,08 (m, 2), 2,93 (m, 2), 2,57 (m, 1), 2,46 (s, 2), 2,44 (s, 2), 1,89 (m, 2) , 1,27 (m, 2) , 0,89 (s, 6) .
b. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso-5,5-dimetyy-liperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini. Liuosta, jossa 10 oli diamiinia (3,02 g) ja 1,1'-karbonyylidi-imidatsolia (2,19 g) kloroformissa (40 ml), refluksoitiin 3 tunnin ajan. Reaktioseos laimennettiin dikloorimetaanilla ja pestiin peräkkäin 1 N suolahapolla ja natriumbikarbonaatin vesiliuoksella. Erotettu orgaaninen faasi kuivattiin, 15 haihdutettiin, trituroitiin eetteristä ja suodatettiin, jolloin saatiin urea valkoisena kiinteänä aineena (1,72 g). MS: m/z = 346 (M+l). NMR (CD3OD) : 7,34 (m, 5), 5,10 (s, 2), 4,35 (m, 1), 4,23 (m, 2), 2,87 (m, 6), 1,58 (m, 4), 1,00 (s, 6).
20 c. 4-(2-okso-5,5-dimetyyliperhydropyrimidin-l- yyli)piperidiini. Käyttäen esimerkin l.j menetelmää korvaten l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso-l,3-oksatsol-idin-3-yyli)piperidiini l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso-5,5-dimetyyliperhydropyrimidin-l-yyli)piperidii-25 nilla saatiin piperidiini valkoisena kiinteänä aineena. MS: m/z = 212 (M+l). NMR (CD3OD) : 4,28 (m, 1), 3,10 (m, 2), 2,92 (m, 2), 2,89 (m, 2), 2,66 (m, 2), 1,59 (m, 4), 1,03 (s, 6) .
Esimerkki 10 30 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(3-metyyli-2- oksoperhydropyrimidin-l-yyli) piperidino]butyyli] -N-me tyy1ibents amidi s itraatti (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N-metyylibentsamidia (0,883 g) metanoiissa (10,0 ml) 35 lisättiin liuokseen, jossa oli 4-(3-metyyli-2-okso-per-hydropyrimidin-l-yyli)piperidiinia (0,498 g) ja etikka- 111253 43 happoa (0,145 g) metanolissa (10,0 ml). Viiden minuutin kuluttua lisättiin natriumsyaaniboorihydridiä (0,159 g) metanolissa (10,0 ml) yhtenä annoksena. Reaktioseosta sekoitettiin 3,5 tunnin ajan, minkä jälkeen se lai-5 mennettiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, sitä sekoitettiin 30 minuutin ajan ja se uutettiin dikloorimetaanilla. Erotettu orgaaninen kerros kuivattiin, haihdutettiin ja kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaania/metanolia (95:5). Tulokseksi saatu öljy 10 (0,970 g) ja sitruunahappo (0,352 g) liuotettiin metanoliin ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste lasina, joka raaputettiin talteen valkoisena kiinteänä aineena (1,27 g). MS: m/z = 531 (M+l).
Yhdisteen C28H36CI2N4O2 · 1, 10 C6HsO7-0,30 H2O analyysi: 15 Laskettu: C 55,53; H 6,11; N 7,48.
Havaittu: C 55,55; H 6,04; N 7,46.
Välituote 4-(3-metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini valmistettiin seuraavasti.
a. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-oksoperhydropy-20 rimidin-l-yyli)piperidiini. Sekoitettavaa liuosta, jossa oli l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-aminopropyyliamino)- piperidiinia (10,1 g) ja 1,1'-karbonyylidi-imidatsolia (6,2 g) kloroformissa (250 ml) , kuumennettiin palautus-jäähdyttäen 2 tunnin ajan. Seos pestiin vedellä ja erotettu 25 orgaaninen faasi kuivattiin, haihdutettiin ja kromato-grafoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaania/metanolia (90:10), jolloin saatiin urea valkoisena kiinteänä aineena (7,4 g). MS: m/z = 318 (M+l). NMR (CDC13) : 7,35 (m, 5), 5,12 (s, 2), 4,75 (m, 1), 4,50 (m, 1), 4,26 (m, 2), 3,27 30 (m, 2), 3,13 (m, 2), 1,89 (m, 2), 1,63 (m, 4).
b. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-metyyli-2-okso- perhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini. Kalium-tert-butoksi-dia (19,3 ml, 1 M tetrahydrofuraanissa) lisättiin liuokseen, jossa oli l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso- 35 perhydropyrimidin-l-yyli)piperidiinia (3,06 g) tetra-hydrofuraanissa (88 ml). Sitten lisättiin jodimetaania (2,4 111253 44 ml) ja reaktioseosta sekoitettiin 30 minuutin ajan. Reak-tioseos laimennettiin dikloorimetaanilla, pestiin vedellä ja kromatografoitiin käyttäen eluenttina di- kloorimetaania/metanolia (gradientti 98:2, 90:10). Tuote 5 trituroitiin eetteristä ja suodatettiin, jolloin saatiin N-metyyliyhdiste valkoisena kiinteänä aineena (2,78 g). MS: m/z = 332 (M+l) ; NMR (CDC13) : 7,34 (m, 5), 5,12 (s, 2), 4,53 (m, 1), 4,26 (m, 2), 3,21 (m, 2), 3,11 (m, 2), 2,93 (s, 3), 2,86 (m, 2), 1,91 (m, 2), 1,60 (m, 4).
10 c. 4 - ( 3-metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)pi- peridiini. Käyttäen esimerkin l.j menetelmää korvaten l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso-l, 3-oksatsolidin-3-yyli)piperidiini l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiinilla saatiin pipe-15 ridiini sitkeänä öljynä. MS: m/z = 198 (M+l). NMR (CD3OD) : 4,19 (m, 1), 3,14 (m, 4), 2,98 (m, 2), 2,80 (s, 3), 2,53 (m, 2), 1,82 (m, 2), 1,48 (m, 4).
Esimerkki 11 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(3-etyyli-20 2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidino]butYyli]- N-metyylibentsamidisitraatti Käyttäen esimerkin 10 menetelmää korvaten 4-(3-metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini 4- (3-etyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiinilla 25 saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena. MS: m/z = 545 (M+l).
Yhdisteen C29H38CI2N4O2 · 1,00 CeHeCb analyysi:
Laskettu: C 56,98/ H 6,28; N 7,59
Havaittu: C 56,66; H 6,31; N 7,57.
30 Välituote 4-(3-etyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l- yyli)piperidiini valmistettiin seuraavasti.
a. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-etyyli-2-oksoper-hydropyrimidin-l-yyli)piperidiini. Käyttäen esimerkin 10.b menetelmää korvaten jodimetaani jodietaanilla saatiin bent-35 syylioksikarbonyyliyhdiste valkoisena kiinteänä aineena trituroimalla eetterin kanssa. MS: m/z = 346 (M+l). NMR
111253 45 (CDC13) : 7,34 (m, 5), 5,12 (s, 2), 4,54 (m, 1), 4,26 (m, 2), 3,38 (q, 2, J = 7,1), 3,22 (m, 2), 3,11 (m, 2), 2,86 (m, 2), 1,90 (m, 2), 1,60 (m, 4), 1,10 (t, 3, J = 7,1).
b. 4 - (3-etyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)pipe-5 ridiini. Käyttäen esimerkin l.j menetelmää korvaten l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso-l,3-oksatsolidin-3~ yyli) piperidiini l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-etyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiinilla saatiin pipe-ridiini sitkeänä öljynä. MS: m/z = 212 (M+l). NMR (CDC13) : 10 4,45 (m, 1), 3,38 (q, 2, J = 7,1), 3,17 (m, 6), 2,72 {m, 2), 2,15 (m, 1), 1,91 (m, 2), 1,62 (m, 4), 1,10 (t, 2, J= 7,1) .
Esimerkki 12 (S)-N-[2- (3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-[3-(N,N-di-15 metyylikarbamoyylimetyyli)-2-oksoperhydropyrim- idin-l-yyli]piperidino]butyyli]-N-metyylibents-amidisitraatti Käyttäen esimerkin 10 menetelmää korvaten 4-(3-metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini 4-[3-20 (N,N-dimetyylikarbamoyylimetyyli)-2-oksoperhydropyrimidin- 1-yyli]piperidiinilla saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena. MS: m/z = 602 (M+l).
Yhdisteen C31H41CI2N5O3· 1,10 CeHsCy analyysi:
Laskettu: C 55,48; H 6,16; N 8,60.
25 Havaittu: C 55,22; H 6,26; N 8,65.
Välituote 4-[3-(N,N-dimetyyliasetamido)-2-oksoper-hydropyrimidin-l-yyli]piperidiini valmistettiin seuraavasti .
a. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-karboksimetyyli-30 2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini. Kalium-tert- butoksidia (52 ml, 1 M tert-butanolissa) lisättiin 1-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)-piperidiiniin (15,0 g) ja liuosta sekoitettiin 35 minuutin ajan. Sitten lisättiin tert-butyylibromiasetaattia (7,65 35 ml) ja seosta sekoitettiin yön yli. Reaktioseos laimennettiin tetrahydrofuraanilla (20 ml) ja dikloorimetaanilla (10 111250 46 ml) ja sen jälkeen seokseen lisättiin tetrabutyyliammonium-jodidia (1,74 g), kalium-tert-butoksidia (52 ml, 1 M tert-butanolissa) ja tert-butyylibromiasetaattia (7,65 ml). Reaktioseosta sekoitettiin yön yli, minkä jälkeen se lai-5 mennettiin dikloorimetaanilla ja pestiin vedellä. Erotettu orgaaninen kerros kuivattiin, haihdutettiin öljyksi ja liuotettiin 1 N suolahappoon (700 ml), tetrahydrofuraaniin (200 ml) ja metanoliin (200 ml). Reaktioseosta sekoitettiin yön yli, minkä jälkeen se väkevöitiin tyhjössä orgaanisten 10 liuottimien poistamiseksi. Tulokseksi saatu vesiliuos uutettiin dikloorimetaanilla, tehtiin happamaksi 2 N suolahapolla pH-arvoon 2 ja uutettiin dikloorimetaanilla. Ensimmäinen orgaaninen uute väkevöitiin, jolloin saatiin reagoimaton l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-oksoper-15 hydropyrimidin-l-yyli)piperidiini (7,0 g). Toinen orgaaninen uute pestiin vedellä, kuivattiin ja haihdutettiin. Raaka tuote trituroitiin eetteristä ja suodatettiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena (8,3 g). MS: m/z = 376 (M+l). NMR (CDC13) :7,35 (m, 5), 5,12 (s, 20 2), 4,48 (m, 1), 4,28 (m, 2), 4,02 (s, 2), 3,35 (m, 2), 3,18 (m, 2), 2,87 (m, 2), 1,97 (m, 2), 1,65 (m, 4).
b. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-[3-(N,N-dimetyyli-karbamoyylimetyyli)-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli]piperidiini. Liuosta, jossa oli l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-25 karboksimetyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiinia (2,00 g), dimetyyliamiinihydrokloridia (0,522 g), trietyy-liamiinia (0,89 ml), 4-dimetyyliaminopyridiinia (0,781 g) ja 1-(3-dimetyyliaminopropyyli)-3-etyylikarbodi-imidi- hydrokloridia (1,23 g) dikloorimetaanissa (55 ml), sekoi-30 tettiin yön yli. Reaktioseos pestiin (1 N suolahappo, natriumbikarbonaatin vesiliuos), kuivattiin ja haih-dutettiin. Raaka tuote kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloori-metaania/metanolia (gradientti 98:2, 80:20), trituroitiin eetteristä ja suodatettiin, jolloin saatiin amidi valkoise-35 na kiinteänä aineena (2,00 g). MS: m/z = 403 (M+l). NMR (CDCI3) : 7,35 (m, 5), 5,12 (s, 2), 4,50 (m, 1), 4,27 (m, 111253 47 2) , 4,12 (m, 2), 3,35 (m, 2), 3,18 (m, 2), 3,01 (s, 3), 2,95 (s, 3), 2,84 (m, 2), 1,98 (m, 2), 1,64 (m, 4).
c . 4- [3- (N, N-dirnetyyliasetamido) -2-oksoperhydro-pyrimidin-l-yyli]piperidiini. Käyttäen esimerkin l.j mene-5 telmää korvaten l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso-l,3-oksatsolidin-3-yyli)piperidiini 1-bentsyylioksikarbonyyli- 4-[3-(N,N-dimetyylikarbamoyylimetyyli)-2-oksoperhydropy-rimidin-l-yyli]piperidiinilla saatiin piperidiini valkoisena kiinteänä aineena trituroimalla eetteristä. MS: m/z = 10 269 (M+l) . NMR (CDC13) : 4,40 (m, 1), 4,12 (s, 2), 3,35 (m, 2), 3,24 (m, 2), 3,11 (m, 2), 3,02 (s, 3), 2,95 (s, 3), 2,69 (m, 2), 2,14 (m, 1), 1,98 (m, 2), 1,64 (m, 4).
Esimerkki 13 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-[3-(N-metyyli-15 karbamoyylimetyyli) -2-oksoperhydropyrimidin-1 - yyli]piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidisit-raatti Käyttäen esimerkin 10 menetelmää korvaten 4 —(3 — metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini 4-[3-(N-20 metyylikarbamoyylimetyyli)-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli]-piperidiinilla saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena. MS: m/z = 588 (M+l).
Yhdisteen C30H39CI2N5O3 1, 10 06Η80?·0,4 0 H2O analyysi: Laskettu: C 54,46; H 6,06; N 8,67.
25 Havaittu: C 54,49; H 6,10; N 8,64.
Välituote 4-[3-(N-metyylikarbamoyylimetyyli)-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli]piperidiini valmistettiin seuraavasti .
a. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-[3-(N-metyyliaset-30 amido)-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini. Käyttäen esimerkin 12.b menetelmää korvaten dimetyyliamiini-hydrokloridi metyyliamiinihydrokloridilla saatiin amidi kumina. MS: m/z = 389 (M+l). NMR (CDC13) : 7,35 (m, 5), 6,59 (m, 1), 5,12 (s, 2), 4,47 (m, 1), 4,28 (m, 2), 3,92 (s, 2), 35 3,34 (m, 2), 3,16 (m, 2), 2,86 (m, 2), 2,80 (s, 1,5), 2,79 (s, 1,5), 1,96 (m, 2), 1,63 (m, 4).
111253 48 b. 4-[3-(N-metyylikarbamoyylimetyyli)-2-oksoperhyd-ropyrimidin-l-yyli]piperidiini. Käyttäen esimerkin l.j menetelmää korvaten l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso- 1,3-oksatsolidin-3-yyli)piperidiini 1-5 bentsyylioksikarbonyyli-4-[3-(N-metyylikarbamoyylimetyyli)-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli]piperidiinilla saatiin piperidiini kumina. MS: m/z = 255 (M+l). NMR (CDC13) : 6,70 (m, 1), 4,38 (m, 1), 3,92 (s, 2), 3,35 (m, 2), 3,23 (m, 2), 3,14 (m, 2), 2,81 (s, 1,5), 2,79 (s, 1,5), 2,72 (m, 2), 10 2,10 (m, 1), 1,97 (m, 2), 1,64 (m, 4).
Esimerkki 14 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-[3-(N-bents- yylikarbamoyylimetyyli)-2-oksoperhydropyrimidin-l- yyli] piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidisit- 15 raatti Käyttäen esimerkin 10 menetelmää korvaten 4-(3-metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini 4 - [3- (N-bentsyylikarbamoyylimetyyli)-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli ] piperidiinilla saatiin otsikon yhdiste valkoisena 20 kiinteänä aineena. MS: m/z = 664 (M+l).
Yhdisteen C36H43CI2N5O3· 1,10 C6HbO7-0,60 H2O analyysi:
Laskettu: C 57,69; H 6,02; N 7,89.
Havaittu: C 57,65; H 6,00; N 7,90.
Välituote 4-[3-(N-bentsyylikarbamoyylimetyyli)-2-25 oksoperhydropyrimidin-l-yyli]piperidiini valmistettiin seuraavasti.
a. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-[3-(N-bentsyylikarbamoyylimetyyli) -2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini . Käyttäen esimerkin 12. b menetelmää korvaten 30 dimetyyliamiinihydrokloridi bentsyyliamiinilla ja jättämällä pois trietyyliamiini saatiin amidi kumina. MS: m/z = 465 (M+l). NMR (CD3OD) : 7,34 (m, 5), 7,28 (m, 5), 5,10 (s, 2), 4,38 (s, 2), 4,33 (m, 1), 4,22 (m, 2), 3,99 (s, 2), 3,30 (m, 2), 3,20 (m, 2), 2,85 (m, 2), 1,95 (m, 2), 1,60 35 (m, 4).
49 I t 1/00 b. 4-[3-(N-bentsyylikarbamoyylimetyyli)-2-oksoper- hydropyrimidin-l-yyli]piperidiini. Käyttäen esimerkin l.j menetelmää korvaten l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso- 1,3-oksatsolidin-3-yyli)piperidiini 1-bentsyylioksikarbon-5 yyli-4-[3-(N-bentsyylikarbamoyylimetyyli)-2-oksoperhydro-pyrimidin-l-yyli]piperidiinilla saatiin piperidiini sitkeänä öljynä. MS: m/z = 331 (M+l). NMR (CD3OD): 7,29 (m, 5), 4,39 (s, 2), 4,30 (m, 1), 4,00 (s, 2), 3,30 (m, 4), 3,16 (m, 2), 2,73 (m, 2), 1,98 (m, 2), 1,68 (m, 4).
10 Esimerkki 15 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-[3-(etoksikar- bonyylimetyyli)-2-oksoperhydropyrimidin-1-yyli]piper idino]butyyli]-N-metyylibentsamidisitraatti Käyttäen esimerkin 10 menetelmää korvaten 4-(3-15 metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini 4—[3— (etoksikarbonyylimetyyli)-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli]-piperidiinilla saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena. MS: m/z = 603 (M+l).
Yhdisteen C31H40CI2N4O4· 1,10 06Η80? analyysi: 20 Laskettu: C 55,41; H 6,04; N 6,88.
Havaittu: C 55,28; H 6,11; N 6,86.
Välituote 4-[3-(etoksikarbonyylimetyyli)-2-oksoper-hydropyrimidin-l-yyli]piperidiini valmistettiin seuraavasti .
25 a. l-bentsyylioksikarbonyyli-4-[3-(etoksikarbonyy limetyyli) -2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli]piperidiini. Liuosta, jossa oli l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(3-karboksi-metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiinia (1,51 g), 2-etoksi-l-etoksikarbonyyli-l,2-dihydrokinoliinia 30 (1,64 g) ja ammoniumbikarbonaattia (1,43 g) kloroformissa (30 ml), sekoitettiin 4 tunnin ajan. Reaktioseos laimennettiin dikloorimetaanilla, pestiin 1 N suolahapolla (5 kertaa) , kuivattiin ja haihdutettiin. Raaka tuote kromatogra-foitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaani/metanolia (gra-35 dientti 98:2, 90:10) ja trituroitiin eetteristä, jolloin saatiin esteri valkoisena kiinteänä aineena (1,25 g). MS: 111253 50 m/z = 404 (M+l) . NMR (CDC13) : 7,34 (m, 5), 5,11 (s, 2), 4,49 (m, 1), 4,26 (m, 2), 4,18 (q, 2, J = 7,1), 4,06 (s, 2), 3,31 (m, 2), 3,17 (m, 2), 2,84 (m, 2), 1,97 (m, 2), 1, 64 (m, 4), 1,26 (t, 3, J = 7,1) .
5 b. 4-[3-(etoksikarbonyylimetyyli)-2-oksoperhydro- pyrimidin-l-yyli]piperidiini. Käyttäen esimerkin l.j menetelmää korvaten l-bentsyylioksikarbonyyli-4-(2-okso-l,3-oksatsolidin-3-yyli)piperidiini 1-bentsyylioksikarbonyyli- 4-[3-(etoksikarbonyylimetyyli)-2-oksoperhydropyrimidin-l-10 yyli]piperidiinilla saatiin piperidiini sitkeänä öljynä. MS: m/z = 270 (M+l). NMR (CDC13) : 4,41 (m, 1), 4,19 (q, 2, J = 7,1), 4,07 (s, 2), 3,32 (m, 2), 3,24 (m, 2), 3,12 (m, 2), 2,70 (m, 2), 2,09 (m, 1), 1,98 (m, 2), 1,63 (m, 4), 1,27 (t, 3, J = 7,1).
15 Esimerkki 16 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoperhyd-ropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-etyyli-bentsamidisitraatti Käyttäen esimerkin 10 menetelmää korvaten 4-(3-20 metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiini 4-(2-ok-soperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiinilla ja N-[2-(3,4-dikloorifenyyli ) -4-oksobutyyli]-N-metyylibentsamidi (S)-N- [2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N-etyylibentsamidilla saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena. MS: 25 m/z = 531 (M+l).
Yhdisteen C28H36CI2N4O2 · 1 ,·10 C6HgO7*0,30 H2O analyysi: Laskettu: C 55,53; H 6,11; N 7,48.
Havaittu: C 55,51; H 6,19; N 7,47.
Välituote (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-okso-30 butyyli]-N-etyylibentsamidi valmistettiin seuraavasti.
a. (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydroksibutyy-li]bentsamidi. Bentsoehappoanhydridiä (14,6 g) dikloori-metaanissa (50 ml) lisättiin tipoittain liuokseen, jossa oli (S)-2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydroksibutyyliamiinia 35 (15,0 g) ja trietyyliamiinia (9,0 ml) dikloorimetaanissa (200 ml) 0 °C:n lämpötilassa. Reaktioseosta sekoitettiin 111253 51 O °C:n lämpötilassa yhden tunnin ajan ja sitten ympäröivässä lämpötilassa yhden tunnin ajan, minkä jälkeen se pestiin (1 N suolahappo, kyllästetty natriumbi-karbonaatin vesiliuos) ja erotettu orgaaninen faasi kuivattiin ja haihdutet-5 tiin. Raaka tuote kromatografoitiin käyttäen eluenttina di-kloorimetaania/metanolia (gradientti 98:2, 90:10), jolloin saatiin amidi vaaleankeltaisena kumina (17,5 g). MS: m/z = 338 (M+l). NMR (CDC13) : 7,65 (m, 2), 7,48 (m, 1), 7,38 (m, 3), 7,33 (d, 1, J = 2,1), 7,07 (dd, 1, J = 2,1, 8,2), 6,44 10 (m, 1, NH), 3,83 (m, 1), 3,70 (m, 1), 3,58 - 3,41 (m, 2), 3,13 (m, 1), 2,47 (m, 1, OH), 1,99 (m, 1), 1,84 (m, 1).
b. (S)-N-[4-asetoksi-2-(3,4-dikloorifenyyli)butyy-li]bentsamidi. Äsetyylikloridia (4,6 ml) lisättiin tipoit-tain liuokseen, jossa oli (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4- 15 hydroksibutyyli]bentsamidia (17,5 g) ja pyridiinia (8,4 ml) dikloorimetaanissa (400 ml) 0 °C:n lämpötilassa. Reak-tioseosta sekoitettiin yön yli huoneenlämpötilassa, minkä jälkeen se pestiin (vesi, kyllästetty kupari (II)sulfaatin vesiliuos) ja erotettu orgaaninen faasi kuivattiin ja haih-20 dutettiin, jolloin saatiin asetyyliyhdiste vaaleankeltaisena öljynä. MS: m/z = 380 (M+l). NMR (CDCI3) : 7,63 (m, 2), 7,48 (m, 1), 7,39 (m, 3), 7,32 (d, 1, J = 2,1), 7,06 (dd, 1, J = 2,1, 8,2), 6,21 (m, 1), 4,03 (m, 1), 3,87 (m, 2), 3,41 (m, 1), 3,07 (m, 1), 2,09 (m, 1), 1,98 (s, 3), 25 1,92 (m, 1) .
c. (S) -N-[4-asetoksi-2-(3, 4-dikloorifenyyli)butyy- li]-N-etyylibentsamidi. (S)-N-[4-asetoksi-2-(3,4-dikloori fenyyli ) butyyli] bentsamidi (4,2 g) tetrahydrofuraanissa (15 ml) siirrettiin kanyylin kautta natriumhydridin suspensioon 30 (0,58 g, 60-%:inen dispersio kivennäisöljyssä) ja jodietaa- niin (1,0 ml) tetrahydrofuraanissa (5 ml). Reaktioseosta sekoitettiin yön yli, minkä jälkeen se väkevöitiin tyhjössä, jäännös liuotettiin dikloorimetaaniin ja pestiin vedellä. Erotettu orgaaninen kerros kuivattiin, haihdutettiin ja 35 kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaa- 111253 52 nia/eetteriä (10:1), jolloin saatiin N-etyyli-yhdiste öljynä (3,7 g). MS: m/z = 408 (M+l).
d. (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydroksibutyy-li]-N-etyylibentsamidi. Liuosta, jossa oli (S)-N-[4- 5 asetoksi-2-(3,4-dikloorifenyyli)butyyli]-N-etyylibents- amidia (3,7 g) 1 N natriumhydroksidissa (27 ml), tetrahyd-rofuraanissa (70 ml), vedessä (20 ml) ja metanolissa (15 ml) , sekoitettiin 3 tunnin ajan. Reaktioseos väkevöitiin tyhjössä, jäännös liuotettiin dikloorimetaaniin ja pestiin 10 vedellä. Erotettu orgaaninen kerros kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin alkoholi öljynä (3,2 g). MS: m/z = 366 (M+1).
e. (S)-N- [2 - (3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N-etyylibentsamidi. Liuokseen, jossa oli oksalyylikloridia 15 (1,3 ml) dikloorimetaanissa (30 ml) -78 °C:n lämpötilassa, lisättiin dimetyvlisulfoksidia (2,1 ml) dikloorimetaanissa (10 ml) ja sen jälkeen (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydroksibutyyli]-N-etyylibentsamidia (3,2 g) dikloorimetaanissa (15 ml) viiden minuutin kuluessa. Sitten 15 minuutin 20 kuluttua lisättiin trietyyliamiinia (8,2 ml) ja reak-tioseoksen annettiin lämmetä ympäröivään lämpötilaan. Seos laimennettiin dikloorimetaanilla ja pestiin laimealla suolahapon vesiliuoksella, vedellä ja natriumbikarbonaatin vesiliuoksella. Erotettu orgaaninen kerros kuivattiin, haih-25 dutettiin ja kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloo-rimetaania/eetteriä/heksaania (2:1:1), jolloin saatiin al-dehydi öljynä (2,5 g). MS: m/z = 364 (M+l).
Esimerkki 17 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoperhyd-30 ropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-4-fluori-N- metyylibentsamidisitraatti
Lisättiin 4-fluoribentsoyylikloridia (0,115 ml) liuokseen, jossa oli (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-35 metyyliamiinia (0,400 g) ja pyridiinia (0,16 ml) dikloorimetaanissa (10 ml) -30 °C: n lämpötilassa. Reaktioseoksen 111253 53 annettiin lämmetä ympäröivään lämpötilaan ja sitä sekoitettiin yhden tunnin ajan. Seos laimennettiin dikloorime-taanilla, pestiin (natriumbikarbonaatin vesi-liuos, kyllästetty kupari (II)sulfaatin vesiliuos), kuivattiin ja haihdu-5 tettiin. Raaka tuote kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaania/metanolia (gradientti 98:2, 80:10). Puh distettu tuote (0, 350 g) ja sitruunahappo (0,126 g) liuotettiin metanoliin ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste lasina, joka raaputettiin talteen valkoisena 10 kiinteänä aineena (0,450 g). MS. m/z = 535 (M+l).
Yhdisteen C27H33CI2FN4O2 1,10 C6H807-0, 10 (C2H5) 20-0, 70 H20 analyysi:
Laskettu: C 53,25; H 5,80; N 7,30.
Havaittu: C 53,22; H 5,70; N 7,30.
15 Välituote (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2- oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyyli-amiini valmistettiin seuraavasti.
a. Tert-butyyli-(S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydroksibutyyli]-N-metyylikarbamaatti. Di-tert-butyylidi-20 karbonaatti (21,6 g) dikloorimetaanissa (125 ml) lisättiin tipoittain liuokseen, jossa oli (S)-N-metyyli-2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydroksibutyyliamiinia (25,0 g) dikloorimetaanissa (125 ml) 30 minuutin kuluessa. Reak-tioseosta sekoitettiin 3 tunnin ajan, minkä jälkeen se pes-25 tiin (0,1 N suolahappo, natriumbikarbonaatin vesiliuos), kuivattiin ja haihdutettiin. Raaka tuote kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloorimetaania/eetteriä (2:1), jolloin saatiin tert-butyyliesteri öljynä (33,0 g), joka kiteytyi seistessään.
30 b. Tert-butyyli-(S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4- oksobutyyli]-N-metyylikarbamaatti. Käyttäen esimerkin 16. e menetelmää korvaten (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hydroksibutyyli]-N-etyylibentsamidi tert-butyyli-(S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-hvdroksibutyyli]-N-metyylikarba-35 maatilla saatiin aldehydi öljynä, joka käytettiin raakana seuraavassa reaktiossa.
111253 54 (3, 4-dikloorifenyyli)-4-hydroksibutyyli]-N-metyylikarba-maatilla saatiin aldehydi öljynä, joka käytettiin raakana seuraavassa reaktiossa.
c. Tert-butyyli-(S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4- 5 [4-(2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N- metyylikarbamaatti. Käyttäen esimerkin 10 menetelmää korvaten 4-(3-metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidii-ni 4-(2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidiinilla ja N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N-metyylibents-10 amidi tert-butyyli-(S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli] -N-metyylikarbamaatilla saatiin otsikon yhdiste kumina .
d. (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli) piperidino]butyyli]-N-metyyliamiini.
15 Trifluorietikkahappoa (7,5 ml) lisättiin liuokseen, jossa oli tert-butyyli-(S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)—4—[4—(2— oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyyli-karbamaattia (5,1 g) dikloorimetaanissa (200 ml). Sitten 30 minuutin kuluttua lisättiin vielä trifluorietikkahappoa 20 (7,5 ml) ja reaktioseosta sekoitettiin 4 tunnin ajan. Seos pestiin 1 N natriumhydroksidilla (250 ml), kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste kumina (3,8 g). MS: m/z = 413 (M+l).
Esimerkki 18 25 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoperhyd- ropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-4-metyyli- N-metyy1ibentsamidi sitraatti Käyttäen vastaavaa menetelmää kuin esimerkissä 17 on kuvattu paitsi korvaten 4-fluoribentsoyylikloridi 30 p-tolyoyylikloridilla saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena. MS: m/z = 531 (M+l).
Yhdisteen C28H36CI2N4O2 · 1, 10 C6H807- 0, 10 (C2H5) 20· 0,30 H20 analyysi:
Laskettu: C 55,63; H 6,18; N 7,41.
35 Havaittu: C 55,58; H 6,17; N 7,52.
111253 55
Esimerkki 19 (S)-N-[2- (3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-{2-oksoperhyd- ropyrimidin-1 -yyli) piperidino] butyyli ] -4-metoksi- N-metyylibentsamidisitraatti 5 Käyttäen vastaavaa menetelmää kuin esimerkissä 17 on kuvattu paitsi korvaten 4-fluoribentsoyylikloridi 4-metoksibentsoyylikloridilla saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena. MS: m/z = 547 (M+l).
Yhdisteen C28H36CI2N4O3 1,10 C6H807-0, 10 (C2H5) 20- 0, 70 10 H20 analyysi:
Laskettu: C 53,92; H 6,10; N 7,19.
Havaittu: C 53,93; H 5,99; N 7,19.
Esimerkki 20 (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoperhyd-15 ropyrimidin-1-yyli) piperidino]butyyli] -4-hydroksi- N-me tyy1ibentsamidis i traatti
Liuosta, jossa oli (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)- 4-[4-(2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyyliamiinia (1,22 g), 4-asetoksibentsoehappoa (0,640 g) 20 ja 1-(3-dimetyyliaminopropyyli)-3-etyylikarbodi-imidihyd-rokloridia (0,682 g) dikloorimetaanissa (30 ml), sekoitettiin yön yli. Reaktioseos laimennettiin dikloorimetaanilla, pestiin (vesi, natriumbikarbonaatin vesiliuos), kuivattiin ja haihdutettiin. Raaka tuote kromatografoltiin kahdesti 25 käyttäen eluenttina dikloorimetaania/ metanolia (gradientti 95:5, 80:20). Puhdistettu tuote (0,190 g) ja sitruunahappo (0,069 g) liuotettiin metanoliin ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste lasina, joka raaputettiin talteen valkoisena kiinteänä aineena (0,220 g). MS: m/z = 533 30 (M+l). Yhdisteen C27H34CI2N4O3· 1,10 C6H807-0,60 H20 analyysi:
Laskettu: C 53,40; H 5,86; N 7,41.
Havaittu: C 53,45; H 6,13; N 7,26.
111253 56
Esimerkki 21 1-[(S)-N-bentsoyyli-3-(3,4-dikloorifenyyli)-lime tyyli- 4 -aminobu tyyli ] -4- (2-oksoperhydropyrimi-din-l-yyli)piperidiini-1-oksidi 5 Lisättiin 3-klooriperoksibentsoehappoa (0,700 g) dikloorimetaanissa (16 ml) tipoittain liuokseen, jossa oli (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoperhydro-pyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidia (1,31 g) dikloorimetaanissa (12 ml) 0 °C: n lämpötilassa. 10 Reaktioseosta sekoitettiin yhden tunnin ajan, minkä jälkeen se laimennettiin dikloorimetaanilla, pestiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Raaka tuote kromatografoitiin käyttäen eluenttina dikloori-metaania/metanolia (gradientti 98:2, 70:30). Puhdistettu 15 tuote (0,592 g) ja p-tolueenisulfonihappomonohydraatti (0,232 g) liuotettiin dikloorimetaaniin/metanoliin ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena (0,824 g). MS: m/z = 533 (M+l).
Yhdisteen C27H34CI2N4O3 1,10 C7H8O3S · 1,10 H2O analyy- 20 si:
Laskettu: C 56,11; H 6,10; N 7,54.
Havaittu: C 55,85; H 5,96; N 7,33.
Esimerkki 22 N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(3-metyyli-2-okso-25 imidatsolidin-l-yyli)piperidino]butyyli] -N-metyy- libentsamidihydrokloridi
Suspensiooon, jossa oli natriumhydridiä (30 mg, 60-%:inen dispersio öljyssä) tetrahydrofuraanissa (1 ml), lisättiin N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoimidatso-30 lidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidia (152 mg) tetrahydrofuraanissa (2 ml) . Sitten 30 minuutin kuluttua lisättiin jodimetaania (0,021 ml) ja reaktioseosta sekoitettiin 2,5 tunnin ajan. Seos laimennettiin dikloorimetaanilla ja pestiin vedellä. Erotettu orgaaninen kerros 35 kuivattiin ja haihdutettiin öljyksi, joka liuotettiin minimimäärään dikloorimetaania ja saostettiin eetteripitoisella 111253 57 suolahapolla. Liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin valkoinen kiinteä aine (104 mg). MS: m/z = (M+l).
Yhdisteen C27H34N4O2CI2 · 1,2 HCl-0,1 (C2H5)20 analyysi: Laskettu: C 57,83; H 6,42; N 10,05.
5 Havaittu: C 57,85; H 6,41; N 9,85.
Välituote N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-okso-imidatsolidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyylibents-amidi valmistettiin käyttäen samanlaista reaktiojärjestystä kuin esimerkissä 3 ja sen alaosissa on kuvattu korvaamalla 10 alaosassa 3.d käytetty (S)-N-[-2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-oksobutyyli]-N-metyylibentsamidi N-[-2-(3,4-dikloorifenyyli) -4-oksobutyyli]-N-metyylibentsamidilla.
111253 58
Sekvenssilista (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:l: 5 (i) SEQUENCE CHARACTERISTICS: (A) LENGTH: 15 base pairs (B) TYPE: nucleic acid (C) STRANDEDNESS: single 10 (D) TOPOLOGY: linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID N0:1: GCGCAAGCTT ATGGG 15 15 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:2: (i) SEQUENCE CHARACTERISTICS: 20 (A) LENGTH: 18 base pairs (B) TYPE: nucleic acid (C) STRANDEDNESS: single (D) TOPOLOGY: linear 25 (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID N0:2: GTCCCCATAA GCTTGCGC 18

Claims (4)

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava I 5 ,G J M V" L-N 1° a"(CH2)—D jossa m on 2 tai 3; D on jäännös, jolla on kaava Ia 15 °a / — —CH—N( (Ia) Q R 20 jolloin Q on fenyyli, jolla voi olla yksi tai kaksi substituenttia, jotka on valittu toisistaan riippumatta halogeenista, trifluorimetyylistä, hydroksista, (1-3C)-25 alkoksista, (1-3C)alkyylistä ja metyleenidioksista; Qa on vety tai (1-4C)alkyyli; R1 on vety tai (1-6C)alkyyli; R2 on -C(=0)R3, jossa R3 on vety tai fenyyli (jossa fenyylillä voi olla 30 yksi tai useampia halogeeni-, hydroksi-, (1-4C)alkoksi-tai (1-4C)alkyylisubstituentteja); G tarkoittaa yksinkertaista sidosta; J on okso tai tiokso; M on oksi tai NR12, jossa
35 R12 on vety, (1-3C} alkyyli, Ra0C(=0)CH2- tai RbRcNC (=0) CH2-, jolloin 111253 Ra on vety tai (1-3C)alkyyli; R ja R ovat toisistaan riippumatta vety, (1-3C)alkyyli, fenyyli tai bentsyyli; ja L on etyleeni, trimetyleeni tai tetrametyleeni; 5 tai kaavan I mukaisen yhdisteen N-oksidin valmistamiseksi piperidinotyppeen liittyen, joka on osoitettu kaavassa Ä:lla; tai kaavan I mukaisen yhdisteen tai mainitun N-oksidin farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmis- 10 tamiseksi; tai kaavan I mukaisen yhdisteen kvaternaarisen ammoniumsuolan valmistamiseksi, jolloin piperidinotyppi, joka on osoitettu kaavasssa A:lla, on kvadrikovalenttinen ammoniumtyppi, jolloin neljäs radikaali typessä on (1-4C)-15 alkyyli tai bentsyyli ja liittynyt vastaioni on farmaseuttisesti hyväksyttävä anioni, tunnettu siitä, että (a) alkyloidaan piperidiini, jolla on kaava II
20 G->J m T (II) OS 25 aldehydillä, jolla on kaava IV O U (IV) 30 käyttämällä pelkistävää alkylointia, tai alkyloimisaineel-la, jolla on kaava V Y"(CH2)— D (V) 35 jossa Y on poistuva ryhmä; f 1 ί ZOO (b) syklisoidaan vastaava yhdiste, jolla on kaava III c H H
5. I (III) N^(ch2)—o 10 hiilihapon diaktivoidun johdannaisen tai diaktivoidun tiokarbonyylijohdannaisen avulla; (c) saatetaan reagoimaan amiini, jolla on kaava VIII
15 G^>J M TT (viii) lb i
20. W jossa Qb on fenyyli, jolla voi olla yksi tai kaksi substituenttia, jotka on valittu itsenäisesti halogeenista, 25 trifluorimetyylistä, hydroksista, (1-3C)alkoksista, (1-3C)-alkyylistä ja metyleenidioksista; ja W on (1-3C)alkyyli; sopivan happokloridin kanssa; (d) saatetaan reagoimaan kaavan Vili mukainen 30 amiini aktivoidun karboksyylihappojohdannaisen kanssa; (e) kun halutaan kaavan I mukaisen yhdisteen kaavassa Arlla osoitetun piperidinotypen N-oksidi, hapetetaan kaavan I mukaisen yhdisteen kaavassa Ä;lla osoitettu piperidinotyppi; 111253 (f) kun halutaan yhdiste, jolla on kaava I, jossa R12 ei ole vety, alkyloidaan vastaava yhdiste, jolla on kaava I, jossa R12 on vety; tai (g) kun halutaan kaavan I mukaisen yhdisteen 5 kvaternaarinen ammoniumsuola, alkyloidaan kaavan I mukaisen yhdisteen kaavassa Ä:lla merkitty piperidinotyppi.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan: (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoperhyd- 10 ropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidi; (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(3-metyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyy- libentsamidi; 15 (S)-N-[2 - (3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(3-etyyli-2- oksoperhydropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-metyy-libentsamidi tai (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoper-hydropyrimidin-l-yyli)piperidino]butyyli]-N-etyylibents- 20 amidi; tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(2-oksoperhydropyrimidin-l-yyli)- 25 piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidi tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan (S)-N-[2-(3,4-dikloorifenyyli)-4-[4-(3-etyyli-2-oksoperhydropyrimidin-l- 30 yyli)piperidino]butyyli]-N-metyylibentsamidi tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola. 111253
FI960727A 1993-08-17 1996-02-16 Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten heterosyklisten yhdisteiden valmistamiseksi FI111253B (fi)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB9317104 1993-08-17
GB939317104A GB9317104D0 (en) 1993-08-17 1993-08-17 Therapeutic heterocycles
PCT/GB1994/001777 WO1995005377A1 (en) 1993-08-17 1994-08-15 Heterocycles useful as neurokinin antagonists
GB9401777 1994-08-15

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI960727A0 FI960727A0 (fi) 1996-02-16
FI960727A FI960727A (fi) 1996-02-16
FI111253B true FI111253B (fi) 2003-06-30

Family

ID=10740632

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI960727A FI111253B (fi) 1993-08-17 1996-02-16 Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten heterosyklisten yhdisteiden valmistamiseksi

Country Status (24)

Country Link
US (6) US5567700A (fi)
EP (1) EP0714392B1 (fi)
JP (1) JP3502386B2 (fi)
KR (1) KR100359631B1 (fi)
CN (1) CN1077573C (fi)
AT (1) ATE172971T1 (fi)
AU (1) AU677091B2 (fi)
CA (1) CA2166800C (fi)
CZ (1) CZ285299B6 (fi)
DE (1) DE69414398T2 (fi)
DK (1) DK0714392T3 (fi)
ES (1) ES2123810T3 (fi)
FI (1) FI111253B (fi)
GB (2) GB9317104D0 (fi)
HU (1) HU219586B (fi)
IL (1) IL110672A (fi)
MY (1) MY112102A (fi)
NO (1) NO305657B1 (fi)
NZ (1) NZ269575A (fi)
PL (1) PL178426B1 (fi)
RU (1) RU2153498C2 (fi)
SK (1) SK281232B6 (fi)
WO (1) WO1995005377A1 (fi)
ZA (1) ZA946142B (fi)

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5583134A (en) * 1992-09-30 1996-12-10 Sanofi 1-azoniabicyclo[2.2.2] octanes and pharmaceutical compositions in which they are present
GB9321557D0 (en) * 1992-11-03 1993-12-08 Zeneca Ltd Carboxamide derivatives
GB9317104D0 (en) * 1993-08-17 1993-09-29 Zeneca Ltd Therapeutic heterocycles
GB9322643D0 (en) * 1993-11-03 1993-12-22 Zeneca Ltd Lactam derivatives
US5589489A (en) * 1993-12-15 1996-12-31 Zeneca Limited Cyclic amide derivatives for treating asthma
GB9408872D0 (en) * 1994-05-03 1994-06-22 Zeneca Ltd Heterocyclic compounds
TW432061B (en) * 1994-08-09 2001-05-01 Pfizer Res & Dev Lactams
US5998444A (en) * 1995-10-24 1999-12-07 Zeneca Ltd. Piperidinyl compounds as NK1 or NK2 antagonists
EP0709375B1 (en) * 1994-10-25 2005-05-18 AstraZeneca AB Therapeutic heterocycles
US6008223A (en) * 1994-10-27 1999-12-28 Zeneca Limited Therapeutic compounds
GB9421709D0 (en) * 1994-10-27 1994-12-14 Zeneca Ltd Therapeutic compounds
GB9508786D0 (en) * 1995-04-29 1995-06-21 Zeneca Ltd Substituted heterocycles
US5688960A (en) * 1995-05-02 1997-11-18 Schering Corporation Substituted oximes, hydrazones and olefins useful as neurokinin antagonists
US5696267A (en) * 1995-05-02 1997-12-09 Schering Corporation Substituted oximes, hydrazones and olefins as neurokinin antagonists
GB9521781D0 (en) * 1995-10-24 1996-01-03 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
GB9523526D0 (en) * 1995-11-17 1996-01-17 Zeneca Ltd Therapeutic compounds
US5922737A (en) * 1996-02-21 1999-07-13 Hoechst Marion Roussel, Inc. Substituted N-methyl-N-(4-(4-(1H-Benzimidazol-2-YL-amino) piperidin-1-YL)-2-(arlyl) butyl) benzamides useful for the treatment of allergic diseases
US5998439A (en) 1996-02-21 1999-12-07 Hoescht Marion Roussel, Inc. Substituted N-methyl-N-(4-(piperidin-1-yl)-2-(aryl)butyl)benzamides useful for the treatment of allergic diseases
US5932571A (en) * 1996-02-21 1999-08-03 Hoechst Marion Roussel, Inc. Substituted N-methyl-N-(4-(4-(1H-benzimidazol-2-yl) {1,4}diazepan-1-yl)-2-(aryl) butyl) benzamides useful for the treatment of allergic diseases
US5789422A (en) * 1996-10-28 1998-08-04 Schering Corporation Substituted arylalkylamines as neurokinin antagonists
IL135408A0 (en) * 1997-11-21 2001-05-20 Schering Corp Substituted oximes as neurokinin antagonists
GB9924141D0 (en) * 1998-10-30 1999-12-15 Zeneca Ltd Treatment of gastric asthma
US6063926A (en) * 1998-11-18 2000-05-16 Schering Corporation Substituted oximes as neurokinin antagonists
CA2355886C (en) * 1998-12-23 2006-10-31 Schering Corporation Substituted oximes and hydrazones as neurokinin antagonists
US6204265B1 (en) 1998-12-23 2001-03-20 Schering Corporation Substituted oximes and hydrazones as neurokinin antagonists
GB0015246D0 (en) * 2000-06-22 2000-08-16 Astrazeneca Ab Method for the treatment of urinary incontinence
SE0103668D0 (sv) * 2001-11-02 2001-11-02 Astrazeneca Ab Method for the treatment of overactive blader
SE0103795D0 (sv) 2001-11-02 2001-11-02 Astrazeneca Ab Compounds and method for the treatment of överactive bladder
US20100189797A1 (en) 2002-06-10 2010-07-29 Julien Mendlewicz Oral antidepressant formulation
TW200508221A (en) 2003-06-13 2005-03-01 Astrazeneca Ab New azetidine compounds
GB0326407D0 (en) * 2003-11-12 2003-12-17 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
TWI396686B (zh) 2004-05-21 2013-05-21 Takeda Pharmaceutical 環狀醯胺衍生物、以及其製品和用法
GB0412865D0 (en) * 2004-06-09 2004-07-14 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
AR057828A1 (es) 2005-09-29 2007-12-19 Astrazeneca Ab Compuestos derivados de azetidina, su preparacion y composicion farmaceuutica
US8106208B2 (en) * 2006-05-18 2012-01-31 Albireo Ab Benzamide compounds that act as NK receptor antagonists

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IE903957A1 (en) * 1989-11-06 1991-05-08 Sanofi Sa Aromatic amine compounds, their method of preparation and¹pharmaceutical compositions in which they are present
UA41251C2 (uk) * 1990-01-04 2001-09-17 Пфайзер, Інк. Гідровані азотвмісні гетероциклічні сполуки, похідні піперидину, фармацевтична композиція та спосіб пригнічення активності речовини р в організмі
IL99320A (en) * 1990-09-05 1995-07-31 Sanofi Sa Arylalkylamines, their preparation and pharmaceutical preparations containing them
FR2676055B1 (fr) * 1991-05-03 1993-09-03 Sanofi Elf Composes polycycliques amines et leurs enantiomeres, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
FR2676054B1 (fr) * 1991-05-03 1993-09-03 Sanofi Elf Nouveaux composes n-alkylenepiperidino et leurs enantiomeres, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
FR2676053B1 (fr) * 1991-05-03 1993-08-27 Sanofi Elf Nouveaux composes dialkylenepiperidino et leurs enantiomeres, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
FR2676781B1 (fr) * 1991-05-23 1995-03-31 Peugeot Dispositif de refroidissement de l'air de suralimentation d'un moteur a combustion interne d'un vehicule.
FR2688219B1 (fr) * 1992-03-03 1994-07-08 Sanofi Elf Sels d'ammonium quaternaires de composes aromatiques amines, leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
GB9321557D0 (en) * 1992-11-03 1993-12-08 Zeneca Ltd Carboxamide derivatives
GB9317104D0 (en) * 1993-08-17 1993-09-29 Zeneca Ltd Therapeutic heterocycles
GB9325074D0 (en) * 1993-12-07 1994-02-02 Zeneca Ltd Bicyclic heterocycles

Also Published As

Publication number Publication date
EP0714392A1 (en) 1996-06-05
GB9317104D0 (en) 1993-09-29
ZA946142B (en) 1995-02-17
ATE172971T1 (de) 1998-11-15
HU9503826D0 (en) 1996-02-28
HUT75113A (en) 1997-04-28
IL110672A (en) 1999-06-20
SK281232B6 (sk) 2001-01-18
GB9416442D0 (en) 1994-10-05
MY112102A (en) 2001-04-30
ES2123810T3 (es) 1999-01-16
US5861392A (en) 1999-01-19
IL110672A0 (en) 1994-11-11
US6444809B1 (en) 2002-09-03
PL178426B1 (pl) 2000-04-28
NO960630D0 (no) 1996-02-16
CA2166800C (en) 2006-06-06
CZ285299B6 (cs) 1999-06-16
KR100359631B1 (ko) 2003-01-24
CN1129449A (zh) 1996-08-21
DE69414398T2 (de) 1999-05-06
JP3502386B2 (ja) 2004-03-02
SK21096A3 (en) 1997-02-05
US20030187255A1 (en) 2003-10-02
US5567700A (en) 1996-10-22
EP0714392B1 (en) 1998-11-04
CA2166800A1 (en) 1995-02-23
JPH09501439A (ja) 1997-02-10
AU7388094A (en) 1995-03-14
NO960630L (no) 1996-02-16
AU677091B2 (en) 1997-04-10
FI960727A0 (fi) 1996-02-16
CN1077573C (zh) 2002-01-09
US5990130A (en) 1999-11-23
US6124279A (en) 2000-09-26
DE69414398D1 (de) 1998-12-10
DK0714392T3 (da) 2001-02-05
NO305657B1 (no) 1999-07-05
RU2153498C2 (ru) 2000-07-27
US7053213B2 (en) 2006-05-30
WO1995005377A1 (en) 1995-02-23
PL313075A1 (en) 1996-05-27
HU219586B (hu) 2001-05-28
NZ269575A (en) 1997-11-24
CZ43496A3 (en) 1996-05-15
FI960727A (fi) 1996-02-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI111253B (fi) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten heterosyklisten yhdisteiden valmistamiseksi
US5559131A (en) Carboxamide derivatives for treating asthma
US5521199A (en) Piperidinyl compounds as neurokinin receptor antagonists
US5534525A (en) Lactam derivatives
US5977135A (en) Bicyclic heterocycles
US6235757B1 (en) Substituted heterocycles