FI110723B - Menetelmä immunoglobuliinin valmistamiseksi hengitystievirusten aiheuttamien infektioiden hoitoon - Google Patents
Menetelmä immunoglobuliinin valmistamiseksi hengitystievirusten aiheuttamien infektioiden hoitoon Download PDFInfo
- Publication number
- FI110723B FI110723B FI934657A FI934657A FI110723B FI 110723 B FI110723 B FI 110723B FI 934657 A FI934657 A FI 934657A FI 934657 A FI934657 A FI 934657A FI 110723 B FI110723 B FI 110723B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- syncytial
- virus
- sample
- airway
- plasma
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Control Of Indicators Other Than Cathode Ray Tubes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
110723
Menetelmä immunoglobuliinin valmistamiseksi hengitystievirusten aiheuttamien infektioiden hoitoon Tämä keksintö koskee plasmanäytteiden, joilla on korkeat vasta-ainetiitterit hengi-5 tystieviruksia vastaan, seulomista, kuten hengitysteiden synsytiaalinen virus, influenssavirus, parainfluenssavirus ja adenovirus. Tarkemmin, tämä keksintö koskee tehokkaiden, hengitystieviruksia vastaan olevien vasta-ainemäärien, seulomista plasmanäytteistä käyttämällä neutralointimäärityksiä.
Yleisesti, lukuisista yksilöistä otetuista plasmanäytteistä seulotaan tiettyä antigeeniä 10 vastaan olevat vasta-aineet. Ne näytteet, joissa on tietyt vasta-ainetiitterit antigeeniä vastaan, kerätään jotta tehdään immunoglobuliinivalmisteet tietyn antigeenin tai organismin tai viruksen, jossa sellaista antigeeniä on, aiheuttamien infektioiden hoitoon.
Plasmanäytteiden, joissa on vasta-aineita, seulominen suoritetaan testaamalla jokai-15 sesta plasmanäytteestä sopivat vasta-aineet käyttämällä sopivaa määritystä. Sopiviin määrityksiin, joita voidaan käyttää, kuuluvat kilpailevat analyysit, inhibiitioanalyy-sit, immunofluoresenssianalyysit, entsymaattiset menetelmät tietyn antigeenin tai vasta-aineen toteamiseksi (ELISA), voileipämääritykset ja neutralointimääritykset. . *·· Määritettäessä vasta-ainetiittereitä kullekin plasmanäytteelle, suoritetaan sama mää- • | · 20 ritys jokaiselle näytteelle. Ne näytteet, joissa on halutu vasta-ainetiitterit, selektoi- , : daan sitten kerätyn immunoglobuliinivalmisteen tuottamiseksi.
Tämän keksinnön näkökohdan mukaisesti tarjotaan menetelmä plasmanäytteiden, • ; joissa on tehokkaat vasta-ainetiitterit, hoitamaan tai ennalta ehkäisemään hengitys-' tieviruksen aiheuttamaa infektiota, tunnistamiseksi tai seulomiseksi. Prosessi aloite- 25 taan suorittamalla neutralointitesti tai -määritys. Neutralointimääritykseen kuuluu * § :· i plasmanäytteen, jossa on hengitystievirusta vastaan olevia vasta-aineita, saattami-*' t ; nen kontaktiin hengitystieviruksen kanssa. Plasman ja viruksen saatu seos saatetaan , sitten kosketuksiin solupopulaation kanssa. Näytteeseen jäänyt ei-neutraloitu virus • · · !” (so. virus, jota vasta-aine ei ole sitonut ja täten kykenee infektoimaan solut) • · 30 määritetään sitten immunomääntyksen keinoin sen jälkeen, kun solut infektoineen viruksen on annettu replikoitua annetulle hengitystievirukselle sopiva ajanjakso. Sopivan ajanjakson jälkeen määritetään soluissa virusantigeenin määrä. Plasmanäytteet, jotka edeltä valitulla minimi vasta-ainetiitterillä estävät virusreplikaation soluissa, valitaan sitten ja plasma, josta selektoidut näytteet 2 110723 taan sitten ja plasma, josta selektoidut näytteet saatiin, kerätään sitten tuottamaan immunoglobuliinia.
Keksinnön oleelliset tunnusmerkit on esitetty oheisissa patenttivaatimuksissa.
Immunomäärityksiin, joita voidaan käyttää määrittämään soluissa olevan virusanti-5 geenin määrää, kuuluvat kilpailevat määritykset, inhibiitiomääritykset, immuno-fluoresenssimääritykset, voileipämääritykset, epäsuorat voileipämääritykset, jne. Sellaiset määritykset suoritetaan yleisesti tunnettujen menetelmien mukaisesti. Yleensä virusantigenin määrä määritetään määrittämällä joko suoraan tai epäsuorasti soluissa läsnä olevaan virukseen sitoutuneen merkkiaineen määrä. Merkkiainee-10 seen sisältyy havaittavissa oleva leima tai merkkiaine. Merkkiaine tai leima voi olla esimerkiksi radioaktiivinen leima, kuten esimerkiksi radioaktiivinen isotooppi, fluo-resenssileima, kuten fluoresoiva väri, absorboiva väri, kemiluminisenssi aine, spin-leima, biotiini, kromogeeni, värilliset partikkelit tai entsyymileima. ELISA-määrityksessä käytetään entsyymileimaa, jolloin soluissa läsnä olevan virusanti-15 geenin määrä määritetään läsnä olevan sitoutuneen entsyymileiman määrällä. Milloin ELISA-määritys suoritetaan, käytetään sopivaa substraattia antamaan väri substraatin ja entsyymin reaktion jälkeen. On kuitenkin ymmärrettävää, että tämän keksinnön ulottuvuuden ei ole tarkoitus rajoittua spesifisiin määrityksiin ja edellä kuvattuihin leimoihin.
! . 20 Edullisessa suoritusmuodossa immunomääritys, jota on käytetty määrittämään so-• * · • · V luissa olevan virusantigeenin määrää, on ELISA-määritys. Sellaisessa määrityksessä solut, jota ennen menetelmän neutralointiosa on suoritettu, saatetaan kosketuksiin hengitystievirusta vastaan olevan vasta-aineen kanssa (virusta vastaan oleva vasta- i ’.· aine) muodostamaan virus-vasta-aine-kompleksi. Tämä kompleksi saatetaan sitten ««· '/· · 25 kosketuksiin virusta vastaan olevan vasta-aineen entsyymiin sitoutuneen vasta-aineen kanssa muodostamaan virus-virusta vastaanoleva vasta-aine-entsyymiin si-toutunut vasta-aine-kompleksin. Tämä kompleksi saatetaan sitten kosketuksiin ent-·"*: syymin substraatin kanssa. Soluissa olevan viruksen määrä määritetään sitten. Jos edeltä valitussa minimi vasta-ainetiitterissä ei virusta ole läsnä soluissa, voidaan * * * * * 30 plasma, josta plasmanäyte saatiin, selektoida tulemaan osaksi plasmanäytteiden ke- räymää, mitä käytetään valmistamaan immunoglobuliinia käytettäväksi hengitys- : : : tieviruksen ennalta ehkäisyyn ja hoitoon.
» * ’ ‘: Hengitystievirus saattaa olla hengitysteiden synsytiaalinen virus, parainfluenssavi- rus tai adenovirus.
3 110723 Tämä keksintö on eräässä erityisen edullisessa suoritusmuodossa erityisesti sovelle-tettavissa tehokkaiden, hengitysteiden synsytiaalisen viruksen tai RSV.n aiheuttamien infektioiden ennaltaehkäisyyn ja/tai hoitoon tarvittavien vasta-ainemäärien plasmanäytteistä seulomiseen. Eräässä suoritusmuodossa jokaiseen mikrotiitterimal-5 jän kaivoon lisättiin plasmanäytettä yksilöstä. Sitten jokaiseen kaivoon lisättiin annoksia hengitysteiden synsytiaalista virusta (Long kanta) ja seerumin ja viruksen seosta inkuboitiin.
Inkubaation jälkeen lisättiin HEp-2 solujen populaatio jokaiseen plasma- ja virus-näytteeseen ja inkuboitiin 5 d kostutetussa C02-inkubaattorissa. Maljat kiinnitetään 10 sitten imemällä kaivojen sisällöt, pesemällä kaivot fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella ja Tween 20:llä ja sitten lisäämällä asetoni-PBS-liuosta. Sitten maljoja inku-boidaan 15 min, sisällöt imetään ja maljat kuivataan ilmassa.
Sitten jokaiseen kaivoon lisätään seerumia, jossa on RSV:tä vastaan olevaa vasta-aineita, kuten naudan anti-RSV-seerumi.
15 Kaivoja inkuboidaan sitten 1 h ja pestään fosfaatti-puskuroidussa suolaliuoksessa ja
Tween 20:ssä ja saatetaan kosketuksiin entsyymi-konjugoituneen immunoglobulii- nin kanssa, joka on RSV-vasta-aineita vastaan. Esimerkki sellaisesta immunoglobu- liinista on peroksidaasi-konjugoitunut vuohi-anti-nauta IgG. Kaivoja inkuboidaan sitten 1 h; ja sitten kaivojen sisällöt imetään, kaivot pestään ja lisätään substraattia.
; . 20 Kun käytetään peroksidaasi-konjugoitunutta immunoglobuliinia, voi sopiva sub-• · · : * · · straatti olla o-fenyleenidiamiinidihydrokloridi ja vetyperoksidi. Sitten luetaan jokai-’.: ·' sen kaivon absorbanssi 492 nm:ssä. Absorbanssi-arvoja voidaan sitten käyttää mää-rittämään, onko soluissa RSV:tä määränä, joka on vastaava tai alle esimääritetyn ta- • · · • son. Absorbanssilukema, joka on suurempi kuin tai yhtä kuin 3 standardijakaumaa 25 15 kontrollikaivonryhmän, joissa on ei-infektoituneita soluja, keskiarvon yläpuolel la, pidetään todisteena virusreplikaatiosta. Plasmanäytteet, jotka vastaavat niitä : näytteitä, joissa RSV, jota on soluissa, on määränä, joka on yhtä kuin tai alle esi- .···, määritetyn tason, voidaan sitten kerätä muodostamaan immunoglobuliinivalmiste ’ ·' RSV:n ennalta ehkäisyyn ja/tai hoitoon. Sellaista määritystä on kuvattu lisää Ander-·..·* 30 son, et ai., J. Clin. Microbiol, voi. 22, nro. 6, s. 1050-1052 (joulukuu 1985).
Hakija on havainnut, että tämän keksinnön prosessi tarjoaa tarkan in vitro määritysmenetelmän selektoimaan plasmanäytteitä, joilla on vasta-aineita määrä, joka on ’ < ’ '· tehokas hengitystieviruksen ennaltaehkäisyyn ja/tai hoitoon. Sellaiset plasmanäytteet voidaan sitten kerätä tarjoamaan immunoglobuliinivalmisteen, joka on tehokas 35 hoidettaessa ja/tai ehkäistäessä ennalta hengitystievirusta.
110723
Hakija on havainnut, että seulomalla plasmanäytteistä vasta-aineen korkeampia tiit-tereitä hengitystievirusta vastaan tämän keksinnön menetelmällä, jonka jälkeen seeruminäytteet, joissa on korkeammat vasta-ainetiitterit, kerätään tekemään immuno-globuliinia hengitystieviruksen ennaltaehkäisyyn tai hoitoon, saadaan immunoglo-5 buliinia, joka tarjoaa parantuneen suojan hengitystievirusta vastaan tai parantuneen hengitystieviruksen hoidon verrattuna muilla määritysmenetelmillä seulotuista seeruminäytteistä valmistettuihin immunoglobuliineihin. Muihin määritysmenetelmiin, joihin verrattuna tämän keksinnön menetelmä on parannus, kuuluvat suora ELISA (esim. suora ELISA, joka käyttää virus-infektoitua solulysaattia tai virusproteiineja 10 antigeeneinä); kilpailevat määritykset, kuten esimerkiksi ne, jotka käyttävät vasta-ainetta (kuten monoklonaalinen vasta-aine), joka kilpailee vasta-aineen kanssa, jota oli testiseerumissa virusproteiinien sitomiskohtia varten (sellaisia kilpailevia määrityksiä voidaan suorittaa ELISA-formaatissa, jos halutaan); ja plakin muodostumisen vähenemisen neutralointimäääritykset.
15 Keksintöä kuvataan nyt ottaen huomioon seuraava esimerkki; tämän keksinnön ulottuvuutta ei kuitenkaan ole tarkoitus täten rajoittaa.
Esimerkki 1
Mikroneutralointimääritys • . '** Tätä esimerkkiä varten tehtiin standardi korkealla titrattu IgG-valmiste pilot- :.: · 20 kokeissa viidestä korkeimmasta titrautuneesta plasmayksiköstä 100 yksikön joukos- : ta, jotka oli arvioitu mikroneutralointimäärityksellä, Anderson, et ai. Nämä 5 plas- ·.·· manäytettä kerättiin ja 1 % IgG-valmiste tehtiin kerätyistä näytteistä. Tästä IgG- j‘.*; valmisteesta testattiin sitten vasta-ainetiitterin eri laimennuksina RSV:tä vastaan. • · Tämän standardi IgG-valmisteen loppupistetiitteri on standardivalmisteen, joka an-25 toi virusreplikaation täyden inhibiition, korkein laimennus. Virusreplikaatio kuva-. . taan optiseksi tiheydeksi, joka on suurempi kuin tai yhtä suuri kuin 3 standardija-kaumaa ei-infektoituneiden solujen taustan optisen tiheyden yläpuolella. Tämän ·;·’ IgG-valmisteen loppupistetiitteri määritettiin olevan 1:6 000. Standardi IgG-valmis-: teelle ilmoitettiin 6 000 mikroneutralointiyksikön vasta-ainepitoisuus.
30 Seuraavia plasmanäytteitä käytettiin mikroneutralointimäärityksessä, mitkä on ku-vattu alla: 1. Korkeatiitterinen IgG- (1 %) valmiste, kuten edellä kuvattiin, valittiin standardiksi. Tälle valmisteelle tehtiin laimennukset 1/1000, 1/2000, 1/4000, 1/6000 ja 1/8000, joissa oli 6, 3, 1,5 ja 0,75 mikroneutralointiyksikkö ml RSV-vasta-ainetta, 110723 vastaavasti. Laimennetuille näytteille tehtiin Anderson, et ai. mikroneutralointi-määritys ja saatiin optisten tiheyksien standardikäyrät vastaten mikroneutralisaa-tioyksikkö/ml. Korkein laimennus, jossa standardi esti virusreplikaation, oli tyypillisesti 1/6000 (1 mikroneutralisaatioyksikkö/ml).
5 2. Kontrolli plasmanäytteet (a) Sandoz 069 laskimonsisäinen immunoglobuliini (IgG) 1 %:ssa, jossa oli noin 1000 mikroneutralisaatioyksikköä/ml; (b) 1 %, ensimmäisen kliinisen RSV laskimonsisäisen immunoglobuliinimäärän (positiivinen kontrolli) liuos, jossa oli noin 2000 mikroneutralisaatioyksikköä/ml; (c) viruskontrolli, joka antaa maksimaalisen optisen tiheyden, joka havaitaan, kun 10 viruskasvua ei inhiboida; ja (d) solukontrolli, joka antaa optisen tiheyden, jota odotetaan kun viruskasvu on täydellisesti virusta neutraloivien vasta-aineiden inhiboimaa.
Kontrolleille (a) ja (b) tehtiin laimennukset 1/2000.
3. 23 tuntematonta plasmanäytettä, joille jokaiselle tehtiin laimennus 1/2000.
15 Ennen plasmanäytteiden laimennusta jokainen näyte inaktivoidaan lämmöllä 56 °C:ssa 30 min. Sitten jokainen näyte laimennetaan, kuten edellä kuvattiin mini-. ’·· maali olennaiseen alustaan (essential medium, MEM), johon on lisätty 2 % vasikan sikiön seerumia, 1 % glutamiinia ja 1 % antibiootteja. Lisätään jokaista näytettä . 75 μΐ kolmena rinnakkaisena 96 kaivon mikrotiitterilevyn kaivoon. Lisätään 25 μΐ ·:· 20 hengitystie syncytial virusta (Long kanta) laimennettuna MEM.iin antamaan noin 100 TCID50 kaikkiin kaivoihin, paitsi solukontrollikaivot. Sitten levyä inkuboidaan ,··,·. huoneenlämpötilassa 2 h.
Inkubaation jälkeen lisätään jokaiseen kaivoon 100 μΐ HEp-2-solujen suspensiota (2 x 106 solua/ml). Sitten levy kiedotaan Saran Wrape’iin ja inkuboidaan 5 % CO2-25 inkubaattorissa 37 °C:ssa 5 d. Sitten malja pestään 3 kertaa fosfaattipuskuroidulla , suolaliuoksella (PBS) ja Tween 20:11a ja jokaiseen kaivoon lisätään 75 μΐ 80 % ase- t < i toni/20 % PBS.ää. Sitten maljaa inkuboidaan 4 °C:ssa 15 min ja sitten jokaisesta ’ ·; · ’ kaivosta imetään. Sitten maljaa kuivataan ilmassa noin 30 min.
Jokaisessa kaivossa olevalle näytteelle tehdään ELISA-määritys. Lisätätään 75 μΐ » » » ‘ 30 naudan anti-RSV seerumia laimennettuna (Wellcome Diagnostics, Research Triangle Park, NC) 1:1000 PBS/0,5 % gelatiini/0,15 % Tween 20 2 % normaalin vuohen seerumin kanssa jokaiseen kaivoon. Sitten maljaa inkuboidaan 1 h 37 °C:ssa koste- 6 110723 assa kammiossa ja sitten pestään 4 kertaa PBS:ssä ja Tween 20:ssä. Lisätätään 75 μΐ peroksidaasi-konjugoitua vuohen antinauta IgG:tä (Kirkegaard & Perry Laboratories, Inc., Gaithersburg, Md) laimennettuna 1:10000 PBS/0,5 % gelatiini/0,15 % Tween 20 2 % normaalin vuohen seerumin kanssa jokaiseen kaivoon ja sitten mal-5 jaa inkuboidaan 1 h 37 °C:ssa kosteassa kammiossa. Jokainen kaivo pestään sitten 6 kertaa PBS/Tween 20 ja lisättiin 125 μΐ kiteistä 3,3',5,5'-tetrametyylibentsidiini-substraattiliuosta (TMB) jokaiseen kaivoon. Sitten maljaa inkuboitiin huoneenlämpötilassa noin 15 min. Sitten jokaisen kaivon absorbanssi mitattiin 450 nm:ssä ja jokaisen kolmen rinnakkaisen näytteen keskimääräinen absorbanssi lasketaan, jotta 10 määritetään jokaisessa plasma-näytteessä olevan anti-RSV-vasta-aineen määrä, mistä sitten määritetään virusantigeeni soluissa ja sitten plasmanäytteen vasta-aine-tiitteri.
Seulontamenetelmä
Jos plasmanäytteellä havaitaan olevan vasta-ainetiitteriä RSV:tä vastaan vähintään 15 1:3000 (so. 1/2000 laimennuksella näytteestä on O.D. yhtä kuin tai vähemmän kuin 1,5 mikroneutralointiyksikköä standardi IgG-käyrässä), lisäksi plasma kerätään vastaavasta luovuttajasta. Joka kerta kun luovuttaja luovuttaa, testataan plasma mik-roneutralointimääritysmenetelmällä, joka on kuvattu edellä, määrittämään, jatkaako luovuttaja vähintään 1:3000 RSV-vasta-ainetiitteriä. Jos luovuttajan tiitteri putoaa *·.. 20 alle 1:3000, ei plasmanäytteitä kerätä enää.
• · « :,Y Plasmanäytteet, joiden RSV-vasta-ainetiitteri on vähintään 1:3000, tarkistetaan sit- '··'; ten, jotta ollaan varmoja, että sellaiset näytteet tulevat hyväksyttävistä luovuttajista . ja sitten näytteet sekoitetaan yhteen keräymään, jossa on noin 150 - noin 12001. Ke- * · · : V rätty plasma voidaan sitten fraktioida tavanomaisin keinoin antamaan immuuni- I » · Y : 25 seerumiglobuliinia.
. . On kuitenkin ymmärrettävää, että tämän keksinnön ulottuvuus ei ole tarkoitettu rajoittumaan edellä kuvattuihin erityisiin suoritusmuotoihin. Keksintöä voidaan to-·; ·* teuttaa käytännössä toisin kuin erityisesti kuvattu ja silti pysyä mukana olevien pa-: Y tenttivaatimusten puitteissa.
• · 30
Claims (10)
1. Menetelmä immunoglobuliinin valmistamiseksi, jossa on tehokkaat vasta-ainetiitterit hengitysteiden synsytiaalisen viruksen aiheuttaman infektion hoitamiseksi tai ennalta ehkäisemiseksi, tunnettu siitä, että menetelmässä: 5 otetaan talteen plasmasta immunoglobuliini, joka sisältää tehokkaat vasta-ainetiitte-rit hoitamaan tai ennalta ehkäisemään hengitysteiden synsytiaalisen viruksen aiheuttamaa infektiota, joka mainittu plasma on valittu siten, että: saatetaan plasmanäyte, jossa on mainittua hengitysteiden synsytiaalista virusta vastaan olevia vasta-aineita, kosketuksiin hengitysteiden synsytiaalisen viruksen kansio sa; saatetaan plasman ja hengitysteiden synsytiaalisen viruksen seos kosketuksiin solu-populaation kanssa; inkuboidaan seosta ennalta määrätty ajanjakso ei-neutraloidun hengitysteiden synsytiaalisen viruksen, joka on jäänyt seokseen, sallimiseksi replikoitua soluissa; 15 määritetään soluissa oleva hengitysteiden synsytiaalisen virusantigeenin määrä im-munomäärityksellä; ja valitaan plasmanäytteet, jotka esivalitulla minimi vasta-ainetiitterillä estävät vitaalin replikaation mainituissa soluissa.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainituissa ‘ . 20 soluissa olevan mainitun hengitysteiden synsytiaalisen virusantigeenin määrän mää-: rittäminen käsittää sen, että: "·. saatetaan mainittu näyte kosketuksiin vasta-aineen kanssa, joka on hengitysteiden • · · " j. synsytiaalista virusta vastaan; ;saatetaan mainittu näyte kosketuksiin entsyymi-sitoutuneen vasta-aineen kanssa, jo-• 25 ka on mainittua hengitysteiden synsytiaalista virusta vastaan olevaa vasta-ainetta '·' vastaan; saatetaan näyte kosketuksiin mainitun entsyymin substraatin kanssa; ja :. ‘ · · määritetään mainitun hengitysteiden synsytiaalisen viruksen määrä, joka jää mainit- ’ t # #: tuun näytteeseen, määrittämällä mainitun substraatin kanssa reagoineen entsyymin ’·. 30 määrä.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu ent- . syymi on peroksidaasi.
4. Patenttivaatimuksen 2 tai 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu substraatti mainitulle peroksidaasille on 3,3’,5,5’-tetrametyylibentsidiini. 110723
5. Patenttivaatimuksen 2 tai 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu substraatti mainitulle peroksidaasille on o-fenyleenidiamiinidihydrokloridi ja vetyperoksidi.
6. Menetelmä immunoglobuliinin valmistamiseksi käytettäväksi hengitysteiden 5 synsytiaalisen viruksen aiheuttaman infektion hoitoon, tunnettu siitä, että immuno- globuliini valmistetaan yhteenkerätyistä plasmanäytteistä, jossa plasmalla on hengitysteiden synsytiaalisen viruksen vasta-ainetiitteri vähintään 1:3000 mitattuna analyysillä, joka käsittää sen, että: saatetaan plasmanäyteseos ja hengitysteiden synsytiaalinen virus kosketuksiin solu-10 populaation kanssa; inkuboidaan seosta ennalta määrätty ajanjakso ei-neutraloidun hengitysteiden synsytiaalisen viruksen, joka on jäänyt seokseen, sallimiseksi replikoitua soluissa; ja määritetään soluissa oleva hengitysteiden synsytiaalisen virusantigeenin määrä im-munomäärityksellä sen määrittämiseksi, estyykö vitaali replikaatio mainituissa so-15 luissa tiitterillä vähintään 1:3000.
7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainituissa soluissa olevan hengitysteiden synsytiaalisen virusantigeenin määrän määrittäminen käsittää sen, että: saatetaan mainittu näyte kosketuksiin vasta-aineen kanssa, joka on hengitysteiden 20 synsytiaalista virusta vastaan; : saatetaan mainittu näyte kosketuksiin entsyymisitoutuneen vasta-aineen kanssa, jo- «M « ... , .·. ka on mainittua hengitysteiden synsytiaalista virusta vastaan olevaa vasta-ainetta • 4 * "j vastaan; "‘I saatetaan näyte kosketuksiin mainitun entsyymin substraatin kanssa; ja :,.;' 25 määritetään mainitun hengitysteiden synsytiaalisen viruksen määrä, joka jää mainit-*·* * tuun näytteeseen, määrittämällä mainitun substraatin kanssa reagoineen entsyymin määrä.
.*··. 8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu ent- • syymi on peroksidaasi. : : 30
9. Patenttivaatimuksen 7 tai 8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu \ substraatti mainitulle peroksidaasille on 3,3 ’,5,5 ’-tetrametyylibentsidiini.
:/·· 10. Patenttivaatimuksen 7 tai 8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu substraatti mainitulle peroksidaasille on o-fenyleenidiamiinidihydrokloridi ja vetyperoksidi. 110723
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US68843591A | 1991-04-22 | 1991-04-22 | |
| US68843591 | 1991-04-22 | ||
| PCT/US1992/002958 WO1992018652A1 (en) | 1991-04-22 | 1992-04-10 | Process of screening plasma samples for effective antibody titers against respiratory viruses |
| US9202958 | 1992-04-10 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI934657A0 FI934657A0 (fi) | 1993-10-21 |
| FI934657A FI934657A (fi) | 1993-10-21 |
| FI110723B true FI110723B (fi) | 2003-03-14 |
Family
ID=24764406
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI934657A FI110723B (fi) | 1991-04-22 | 1993-10-21 | Menetelmä immunoglobuliinin valmistamiseksi hengitystievirusten aiheuttamien infektioiden hoitoon |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5412077A (fi) |
| EP (1) | EP0581882B1 (fi) |
| JP (1) | JPH06509866A (fi) |
| AT (1) | ATE161967T1 (fi) |
| AU (2) | AU668092B2 (fi) |
| CA (1) | CA2108259C (fi) |
| DE (1) | DE69223955T2 (fi) |
| DK (1) | DK0581882T3 (fi) |
| ES (1) | ES2113428T3 (fi) |
| FI (1) | FI110723B (fi) |
| GR (1) | GR3026393T3 (fi) |
| NO (1) | NO933697D0 (fi) |
| WO (1) | WO1992018652A1 (fi) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE161967T1 (de) * | 1991-04-22 | 1998-01-15 | Massachusetts Health Res | Verfahren für das screening von plasma-proben für einen effektiven antikörpernachweis gegen respiratorische viren |
| US5811524A (en) * | 1995-06-07 | 1998-09-22 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Neutralizing high affinity human monoclonal antibodies specific to RSV F-protein and methods for their manufacture and therapeutic use thereof |
| DE69829400T2 (de) | 1997-10-20 | 2006-04-13 | Acambis, Inc., Cambridge | Passive immunisierung gegen durch clostridium difficile verursachte krankheit |
| US6969520B2 (en) * | 1997-10-20 | 2005-11-29 | Acambis Inc. | Active immunization against clostridium difficile disease |
| US6692739B1 (en) | 1998-08-31 | 2004-02-17 | Inhibitex, Inc. | Staphylococcal immunotherapeutics via donor selection and donor stimulation |
| ES2349348T3 (es) * | 2000-01-27 | 2010-12-30 | Medimmune, Llc | Anticuerpos neutralizantes de rsv de ultra alta afinidad. |
| CA2401652A1 (en) * | 2000-03-01 | 2001-09-07 | Medimmune, Inc. | High potency recombinant antibodies and method for producing them |
| US7179900B2 (en) * | 2000-11-28 | 2007-02-20 | Medimmune, Inc. | Methods of administering/dosing anti-RSV antibodies for prophylaxis and treatment |
| US6855493B2 (en) | 2000-11-28 | 2005-02-15 | Medimmune, Inc. | Methods of administering/dosing anti-RSV antibodies for prophylaxis and treatment |
| US20050153382A1 (en) * | 2002-06-06 | 2005-07-14 | Chengdu Kuachang Science And Technology Co., Ltd. | Biochip kit comprising biochip based on antigen-antibody reactions, and its usage |
| US7132100B2 (en) | 2002-06-14 | 2006-11-07 | Medimmune, Inc. | Stabilized liquid anti-RSV antibody formulations |
| CA2585891A1 (en) * | 2004-10-29 | 2006-05-11 | Medimmune, Inc. | Methods of preventing and treating rsv infections and related conditions |
| EP1997830A1 (en) | 2007-06-01 | 2008-12-03 | AIMM Therapeutics B.V. | RSV specific binding molecules and means for producing them |
| US8568726B2 (en) | 2009-10-06 | 2013-10-29 | Medimmune Limited | RSV specific binding molecule |
| SG10201602668VA (en) | 2011-04-22 | 2016-05-30 | Wyeth Llc | Compositions relating to a mutant clostridium difficile toxin and methods thereof |
| BR122016023101B1 (pt) | 2012-10-21 | 2022-03-22 | Pfizer Inc | Polipeptídeo, composição imunogênica que o compreende, bem como célula recombinante derivada de clostridium difficile |
| US9815886B2 (en) | 2014-10-28 | 2017-11-14 | Adma Biologics, Inc. | Compositions and methods for the treatment of immunodeficiency |
| US10259865B2 (en) | 2017-03-15 | 2019-04-16 | Adma Biologics, Inc. | Anti-pneumococcal hyperimmune globulin for the treatment and prevention of pneumococcal infection |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4315073A (en) * | 1979-10-26 | 1982-02-09 | Cutter Laboratories, Inc. | Titration of serum influenza antibody using plaque reduction neutralization test |
| US4617379A (en) * | 1983-06-14 | 1986-10-14 | Miles Laboratories, Inc. | High titer cytomegalovirus immune serum globulin |
| US4665379A (en) * | 1984-05-10 | 1987-05-12 | Anes Electronics, Inc. | Vehicle security system |
| US4665159A (en) * | 1985-11-07 | 1987-05-12 | Miles Laboratories, Inc. | High titer varicella-zoster immune globulin for intravenous administration |
| US4717766A (en) * | 1986-01-27 | 1988-01-05 | Miles Laboratories, Inc. | Method of preparing high titer anti-respiratory syncytial virus intravenous immune globulin |
| US4800078A (en) * | 1987-05-28 | 1989-01-24 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Immunotherapeutic method of treating respiratory disease by intranasal administration of Igb |
| ATE161967T1 (de) * | 1991-04-22 | 1998-01-15 | Massachusetts Health Res | Verfahren für das screening von plasma-proben für einen effektiven antikörpernachweis gegen respiratorische viren |
-
1992
- 1992-04-10 AT AT92912244T patent/ATE161967T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-04-10 WO PCT/US1992/002958 patent/WO1992018652A1/en active IP Right Grant
- 1992-04-10 ES ES92912244T patent/ES2113428T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-04-10 CA CA002108259A patent/CA2108259C/en not_active Expired - Fee Related
- 1992-04-10 EP EP92912244A patent/EP0581882B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-04-10 JP JP4511728A patent/JPH06509866A/ja active Pending
- 1992-04-10 DE DE69223955T patent/DE69223955T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1992-04-10 AU AU19885/92A patent/AU668092B2/en not_active Ceased
- 1992-04-10 DK DK92912244T patent/DK0581882T3/da active
-
1993
- 1993-08-04 US US08/102,106 patent/US5412077A/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-10-14 NO NO1993933697A patent/NO933697D0/no not_active Application Discontinuation
- 1993-10-21 FI FI934657A patent/FI110723B/fi active
-
1995
- 1995-01-27 US US08/378,815 patent/US5582827A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-07-24 AU AU60678/96A patent/AU680170B2/en not_active Ceased
-
1998
- 1998-03-17 GR GR980400590T patent/GR3026393T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE69223955T2 (de) | 1998-08-13 |
| GR3026393T3 (en) | 1998-06-30 |
| ES2113428T3 (es) | 1998-05-01 |
| FI934657A0 (fi) | 1993-10-21 |
| AU680170B2 (en) | 1997-07-17 |
| EP0581882A1 (en) | 1994-02-09 |
| NO933697L (no) | 1993-10-14 |
| EP0581882A4 (en) | 1994-06-08 |
| ATE161967T1 (de) | 1998-01-15 |
| CA2108259C (en) | 2003-12-09 |
| DE69223955D1 (de) | 1998-02-12 |
| CA2108259A1 (en) | 1992-10-23 |
| US5412077A (en) | 1995-05-02 |
| AU1988592A (en) | 1992-11-17 |
| JPH06509866A (ja) | 1994-11-02 |
| EP0581882B1 (en) | 1998-01-07 |
| US5582827A (en) | 1996-12-10 |
| FI934657A (fi) | 1993-10-21 |
| DK0581882T3 (da) | 1998-09-07 |
| AU6067896A (en) | 1996-10-17 |
| WO1992018652A1 (en) | 1992-10-29 |
| AU668092B2 (en) | 1996-04-26 |
| NO933697D0 (no) | 1993-10-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI110723B (fi) | Menetelmä immunoglobuliinin valmistamiseksi hengitystievirusten aiheuttamien infektioiden hoitoon | |
| Marquardt et al. | An indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for measuring antibodies in chickens infected with infectious bursal disease virus | |
| Hamblin et al. | A new enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of antibodies against foot-and-mouth disease virus I. Development and method of ELISA | |
| Schild et al. | Single-radial-haemolysis: A new method for the assay of antibody to influenza haemagglutinin: Applications for diagnosis and seroepidemiologic surveillance of influenza | |
| Forghani et al. | Antibody assays for varicella-zoster virus: comparison of enzyme immunoassay with neutralization, immune adherence hemagglutination, and complement fixation | |
| O'callaghan et al. | Human antibody to influenza C virus: its age-related distribution and distinction from receptor analogs | |
| Brown et al. | Detection of Breda virus antigen and antibody in humans and animals by enzyme immunoassay | |
| McKeating et al. | Detection of cytomegalovirus in urine samples by enzyme‐linked immunosorbent assay | |
| Masihi et al. | Enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of influenza type-specific antibodies | |
| Tuokko | Comparison of nonspecific reactivity in indirect and reverse immunoassays for measles and mumps immunoglobulin M antibodies | |
| Heckert et al. | Evaluation of an enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of antibodies to caprine arthritis-encephalitis virus in goat serum. | |
| Vaheri et al. | Evaluation of solid‐phase enzyme‐lmmunoassay procedure in immunity surveys and diagnosis of rubella | |
| Shehab et al. | Epidemiological standardization of a test for susceptibility to mumps | |
| US4814269A (en) | Diagnostic testing for antibodies against microorganisms | |
| Popow‐Kraupp | Enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA) for mumps virus antibodies | |
| Chiodi et al. | Measles IgM antibodies in cerebrospinal fluid and serum in subacute sclerosing panencephalitis | |
| Florent et al. | Detection of antibodies to bovine leukemia virus in bovine milk samples with an ELISA involving two monoclonal antibodies | |
| Forghani et al. | Use of monoclonal antibodies to human immunoglobulin M in" capture" assays for measles and rubella immunoglobulin M | |
| Sousa et al. | Antibody response to Newcastle disease vaccination in a flock of young partridges (Rhynchotus rufescens) | |
| Carthew et al. | Comparison of alkaline phosphatase and horseradish peroxidase conjugated antisera in the ELISA test for antibodies to reovirus 3, mouse hepatitis and Sendai viruses | |
| Choppin et al. | Genetic variants of influenza virus which differ in reactivity with receptors and antibodies | |
| Fulton et al. | Sensitive fluorogenic enzyme immunoassay on nitrocellulose membranes for quantitation of virus | |
| Gupta et al. | An enzyme immunoassay based micro-neutralization test for titration of antibodies to human cytomegalovirus (CMV) and its correlation with direct ELISA measuring CMV IgG antibodies | |
| RU1797709C (ru) | Способ диагностики вирусных болезней животных | |
| Groen et al. | Comparison of an enzyme-linked immunosorbent assay, an immunofluorescence assay and a hemagglutination inhibition assay for detection of antibodies to K-papovavirus in mice. |