FI109087B - Menetelmä farmaseuttisen koostumuksen valmistamiseksi - Google Patents

Description

109087

Menetelmä farmaseuttisen koostumuksen valmistamiseksi

Keksintö koskee anandamidin kuljetuksen estäjää, joka on käyttökelpoinen kohonneen silmänpaineen hoitamiseksi topikaalisella annostuksella, sekä sitä sisältäviä 5 koostumuksia ja menetelmiä sen valmistamiseksi.

Arakidonyylietanoliamidi (AEA, kuva 1) oli ensimmäinen kannabinoidi-reseptorin raportoitu endogeeninen ligandi (Science 258:1946-1949, 1992) ja se sai nimen "anandamidi". Myöhemmin erilaisten arakidonihappo-penistaisten estereiden, kuten 10 2-arakidonoyyliglyserolin (Biochem.Pharmacol. 50:83-90, 1995), palmitoyylietano- liamidin (J.Biol. Chem. 272:3315-3323, 1997), homo-gamma-linoleenihapon (J.Med.Chem. 36:3032-3034, 1993) ja dokosatetraeenihapon (J.Med.Chem. 36: 3032-3034, 1993), esitettiin olevan kannabinoidi-reseptorien (CB1 tai CB2, jotka ovat kannabinoidi-reseptorien kaksi tunnettua alatyyppiä) endogeenisia ligandeja.

15 Sittemmin koko tätä yhdisteryhmää kutsuttiin "anandamideiksi". Syntetisoidut synteettiset anandamidit sisältävät substituutiot etanoliamidin alfa-hiilessä ja rasvahapon 2-hiilessä (Life Sei. 56:2041-2048, 1995), modifikaatiot etanoliamidiketjun pituudessa (Mol.Pharmacol. 46:516-522, 1994) ja pääteasemassa olevan hydrok-siosan korvauksen (J.Pharmacol.Exp.Therap. 273:1172-1181, 1995). Endogeenisil-20 le anandamideille (Eur.J.Pharmacol. 359:1-18, 1998) on ehdotettu erilaisia fysiolo- .· gisia funktioita kuten, että ne suojaavat neurodegeneraatiota ja hermovauriota vas- • ‘ : taan, osallistuvat verenpaineen säätelyyn tai toimivat immuunisysteemin säätelijänä : ” ja vaikuttavat muistiin ja kognitioon.

Cx^VNApn a,fa-hiili

ch3 I

nh— ch2 — ch2—oh I π ·’. : 2-hiili o

Kuva 1. Arakidonyylietanoliamidin (AEA) kemiallinen rakenne 30 '; ’ Viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että anandamidit laskevat kaneilla sil- * : mänpainetta (IOP) topikaalisen annostuksen jälkeen (Curr.Eye Res.14: 791-797, 1995; Life Sei. 63:2181-2188, 1998; Pharm.Res. 14:1738-1743, 1997; Jpn.J.Oph- 109087 2 thalmol 41:217-220, 1997). Endogeenisilla anandamideilla (arakidonyylietanoliami-di ja 2-arakidonoyyliglyseroli) ja niiden analogeilla (modifikaatiot etanoliamidiket-jun pituudessa tai päääteasemassa olevassa hydroksiosassa) havaitaan topikaalisen annostuksen jälkeen hoidetuissa silmissä aluksi silmänpaineen kohoamista ja myö-5 hemmin sen laskemista (Curr.Eye Res. 14:791-797, 1995; Life Sei. 63:2181-2188, 1998). Sitä vastoin anandamidianalogeilla, joilla on modifikaatiot ö#a-hiilessä, ei havaita okulaariannostuksen jälkeen tätä alussa tapahtuvaa silmänpaineen kohoamista, vaikka painetta alentava vaikutus on selvä (Pharm.Res. 14:1738-1743, 1997). CB-1-reseptorin salpaus erittäin spesifisellä antagonistilla eliminoi ö^iz-hiilessä 10 substituoitujen anandamidien ja muiden kannabinoidien painetta alentavan vaikutuk sen (Life Sei. 63:2181-2188, 1998).

Äskeittäin osoitettiin, että arakidonyylietanoliamidia muodostuu ja hydrolysoituu silmässä (Exp.Eye Res. 64:707-711, 1997) ja myös CB1-reseptorin olemassaolo 15 rotan silmässä on osoitettu (Mol.Brain Res. 58:240-245, 1998). Arakidonyylietano liamidia hydrolysoivan entsyymin ja CB-reseptorin esiintyminen silmässä viittaa arakidonyylietanoliamidin fysiologiseen rooliin silmänpaineen säätelyssä.

. Keksintö koskee anandamidin kuljetusmekanismin estäjän, nimittäin N-(4-hydroksi- ! 20 fenyyli)arakidonyyliamidin uutta käyttöä. Tämä estäjä on käyttökelpoinen silmän paineen hoitamiseksi topikaalisella annostuksella yhdessä endogeenisten anandami- ♦ · dien tai niiden analogien kanssa, tai ilman niitä.

• ·

Keksintö perustuu havaintoon, että soluunottomekanismi (aktiivinen anandamidin * 25 kuljetus) inaktivoi arakidonyylietanoliamidin, endogeenisen anandamidin, ja että ' ,; anandamidin kuljetuksen estäjät hidastavat endogeenisten anandamidien inaktivoitu- ' mistä ja lisäävät anandamidien konsentraatiota silmässä, mikä aikaansaa silmänpai- ,,. ,; neen laskun.

3 0 Keksinnön toisena kohteena on sanotun anandamidin kuljetuksen estäjän käyttö tehostamaan ja pidentämään topikaalisesti annostettujen endogeenisten anandamidien tai niiden analogien silmänpainetta alentavaa vaikutusta.

109087 3

Keksinnön kohteena on täten menetelmä kohonneen silmänpaineen hoitamiseksi tarkoitetun farmaseuttisen koostumuksen valmistamiseksi, joka koostumus sisältää aktiiviaineen ja mahdollisesti ainakin yhden farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan tai lisäaineen (adjuvantin), jolloin aktiiviaineena käytetään N-(4-hydroksifenyyli)-5 arakidonyyliamidia.

Anandamidin kuljetuksen estäjä, N-(4-hydroksifenyyli)arakidonyyliamidi, on sinänsä tunnettu ja se voidaan valmistaa tavanomaisilla menetelmillä arakidonihappoklo-ridista ja 4-aminofenolista (J.Med.Chem. 39: 4515-4519, 1996).

10

Koostumus sisältää tavallisesti farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan tai lisäaineen ja se voi olla mikä tahansa koostumus, joka on sopiva anandamidin kuljetuksen estäjän annostamiseksi topikaalisesti silmään.

15 Topikaalisesti annostettava koostumus on tyypillisesti vesiperustainen liuos, suspen sio tai emulsio, joka sisältää farmaseuttisesti tehokkaan määrän anandamidin kuljetuksen estäjää yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävien kantajien, kuljettimien tai lisäaineiden kanssa. Koostumus voi myös olla lotioni, emulsiovoide tai voide. Alan ammattimies tuntee hyvin tällaiset koostumukset ja niiden valmistuksen.

20

Mainitut koostumukset, erityisesti silmätipat, voivat sisältää viskositeettia lisääviä aineita, esimerkiksi selluloosajohdannaisia, koostumuksen viskositeetin lisäämiseksi,

• I

ja/tai aineita pH:n säätelemiseksi, esimerkiksi happoja, emäksiä tai puskureita, •, ja/tai säilöntäaineita, esimerkiksi bentsoehappojohdannaisia, ja/tai aineita sopivan 25 isotonisen paineen aikaansaamiseksi ja/tai aineita vesiliukoisuuden ja stabiilisuuden ,1, : lisäämiseksi, esimerkiksi syklodekstriinejä.

| · | ' . Koostumus voi olla myös kiinteä okulaarinen insertti, joka sisältää aktiiviaineen S , · · ·. sopivassa matriisirakenteessa, josta se vapautuu sopivalla nopeudella silmään.

30 ';;; Sopiva määrä anandamidin kuljetuksen estäjää on määrä, joka tehokkaasti alentaa silmänpainetta silmässä. Tyypillinen määrä topikaalisesti annostettavassa koostu- 4 109087 muksessa, esimerkiksi silmätippaliuoksessa, voi vaihdella laajoissa rajoissa, esimerkiksi 0,01 paino-%:sta 5 paino-%:iin, edullisesti 0,05 paino-%:sta 2 paino-%:iin aktiiviainetta annostettavaksi esimerkiksi 1-3 kertaa päivässä riippuen hoidettavasta potilaasta ja tilan vakavuudesta.

5

Seuraava esimerkki kuvaa keksintöä sitä rajoittamatta.

ESIMERKKI 1 10 Tässä esimerkissä tutkittiin 0,25% risen (m./til.) N-(4-hydroksifenyyli)arakidonyy- liamidin (AM404) (Kuva 2) topikaalisen annostamisen vaikutusta normotensiivisen, pigmentoidun kanin silmänpaineeseen. AM404 on anandamidin kuljetuksen selektiivinen estäjä ja vaikka se on rakenteeltaan samanlainen kuin arakidonoyylietanoli-amidi, se ei aktivoi kannabinoidi-reseptoreita (Science 277: 1094-1097, 1997).

15

Spesifisesti 12,5 mg AM404:ää ja 1250 mg 2-hydroksipropyyli-P-syklodekstriiniä (2HP-P-CD) lisättiin tislattuun veteen ja liuoksen pH säädettiin arvoon 7,4 natrium-hydroksidilla. Sen jälkeen lisättiin tislattua vettä kokonaistilavuuden säätämiseksi . 5,0 mlraan. Kuljetinkontrolli sisälsi 25% (m./til.) 2-HP-P-CD:tä.

20

Sen jälkeen 25 μΐ joko AM404:ää tai kontrolliliuosta annostettiin unilateraalisesti ; normotensiivisille kaneille. Silmänpaine mitattiin käyttäen BioRad (Cambridge, •, MA,USA) Digilab Modular One Pneumatonometer-laitetta. Ennen jokaista mittaus- ; *. ta sarveiskalvolle laitettiin, ennen silmänpainemittaria, yksi tai kaksi tippaa 25 0,06%:ista (p./til.) oksibuprokaiinia anesteesisena aineena epämukavuuden poista- : ’ . I miseksi. Jokaista määritystä varten otettiin jokaisesta silmästä ainakin kaksi luke- > * ’ maa. Mittaukset aloitettiin kaksi tuntia ennen lääkkeen tai kontrolliliuoksen annos- ,...: tusta ja niitä jatkettiin viiden tunnin ajan annostuksen jälkeen.

\ 30 109087

/=v=W\fH

? _ l °H

5 Kuva 2. AM404:n kemiallinen rakenne

Tulokset osoittavat, että 0,25% risen (m./til.) AM404:n unilateraalinen annostus alentaa huomattavasti silmänpainetta käsitellyissä silmissä normotensiivisilla, pig-mentoiduilla kaneilla verrattuna kontrolliliuokseen. AM404:llä havaittiin 4,5 10 mmHgrn maksimaalinen silmänpaineen alentuminen kaksi tuntia topikaalisen annos tuksen jälkeen. Sitä vastoin 0,25% risen (m./til.) AM404:n unilateraalinen annostus ei vaikuta silmänpaineeseen kontralateraalisessa (käsittelemättömässä) silmässä ver- i rattaessa kontrolliliuokseen.

TAULUKKO 1

Silmänpaineen muutokset (mmHg) etukäteen määrätyin aikavälein (h) normotensiivisilla pigmentoiduilla kaneilla 0,25% risten AM404-silmätippojen unilateraalisen annostuksen jälkeen (keskiarvo ± S.E., n = 4) '; Liuos Oh 0.5 h lh 2h 3h 4h 5h ; käsitellyt silmät 0,25% AM404 0,0±0,0 - 1,4±0,9 - 0,8±1,6 - 4,5±1,3 - 3,0±1,4 - 1,8±1,0 - 3,0±0,7

Kontrolli 0,0±0,0 1,8±0,5 2,1±0,9 0,6±0,6 1,3±0,6 2,6±1,6 1,7±0,5 t : käsittelemättömät silmät (kontralateraaliset) ,·' . 0,25% AM404 0,0±0,0 1,3±0,7 1,1±0,5 - 1,4±0,6 - 1,1±0,6 - 1,1±0,5 0,0±0,5 t

Kontrolli 0,0±0,0 - 0,7±0,5 - 0,2±0,1 - 0,7±0,4 - 0,8±0,2 0,9±0,6 0,6±0,3 Näiden tulosten perusteella on ilmeistä, että AM404 vaikuttaa paikallisesti käsitellyssä 109087 6 silmässä. Koska AM404 ei aktivoi kannabinoidi-reseptoreita, on ilmeistä, että AM404 estää endogeenisen arakidonyylietanoliamidin inaktivoitumisen (kantaja-välitteinen arakidonyylietanolidikuljetus), mikä tuottaa painetta alentavan vaikutuksen.

* · • · * » * • a · * · * » f I * » » * * * j

Claims (3)

109087

1. Menetelmä kohonneen silmänpaineen topikaaliseksi hoitamiseksi tarkoitetun farmaseuttisen valmisteen valmistamiseksi, joka valmiste sisältää aktiiviaineen ja mah- 5 dollisesti ainakin yhden farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan tai lisäaineen, tunnet tu siitä, että aktiiviaineena käytetään N-(4-hydroksifenyyli)arakidonyyliamidia.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että farmaseuttinen valmiste on liuos, emulsio, suspensio, lotioni, emulsiovoide, voide tai okulaarinen 10 insertti.

3. Minkä tahansa edellä esitetyn patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että endogeenista anandamidia tai sen analogia käytetään yhdessä aktiiviaineen kanssa. 15 > # ’ * t » I *