ES3058285T3 - Pharmaceutical compositions with reduced side effect and methods of using the same - Google Patents

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Composiciones farmacéuticas con un efecto secundario reducido y métodos de utilización de las mismasAntecedentes

[0003] Campo técnico

[0004] La presente divulgación se refiere a un sistema de administración de fármacos para la administración de un agente activo a un ojo. La presente divulgación se refiere a composiciones farmacéuticas que presentan un perfil reducido de efectos secundarios oculares, y a sus utilizaciones en el campo oftálmico.

[0005] Descripción de la técnica relacionada

[0006] La terapia farmacológica convencional para enfermedades oculares se logra comúnmente mediante la administración de disoluciones o suspensiones. Las limitaciones de estas formas de dosificación incluyen un aclaramiento rápido y una toxicidad local no deseada.

[0007] Las partículas que contienen lípidos como vehículos de administración de fármacos modifican el perfil farmacocinético del fármaco, donde los liposomas habitualmente permiten una liberación sostenida del fármaco, una retención prolongada del fármaco y altas dosis administradas con una administración del fármaco menos frecuente. Estudios han demostrado la retención mejorada del fármaco y la eficacia prolongada de las composiciones liposómicas en el ojo (patente US nº 4.804.539, patente US nº 8.956.600 y M. Abraishami et al., Retina. Mayo de 2009; 29(5):699-703).

[0008] Sin embargo, después de la administración, particularmente por medio de inyección intravítrea, de una composición que contiene vesículas unilaminares grandes con alta eficacia de encapsulación al humor vítreo, se informó de que los pacientes que recibieron dicha composición presentaban visión borrosa, que está asociada al enturbiamiento vítreo debido a las nanopartículas lipídicas. Se descubrió que la visión de un ojo que recibe una inyección intravítrea del ganciclovir encapsulado en liposomas indicado disminuyó inicialmente debido al enturbiamiento vítreo, y el ganciclovir encapsulado en liposomas inyectado por vía intravítrea apareció como una suspensión blanquecina ubicada en la parte inferior del humor vítreo (S K Akula et al., Br J Oftalmol. septiembre de 1994; 78(9): 677-680). Son divulgadas unas composiciones de hidrogel adicionales que comprenden liposomas en los documentos US 2019/151236 A1 y US 2014/105960 A1.

[0009] Por tanto, sigue existiendo una necesidad no satisfecha de una composición farmacéutica para su utilización en la administración de un agente activo a un ojo, que pueda lograr un efecto terapéutico prolongado así como efectos secundarios reducidos, tales como turbidez vítrea. La presente divulgación aborda esta necesidad y otras necesidades.

[0010] Sumario

[0011] La presente divulgación proporciona una composición farmacéutica para su utilización en administración intravítrea, que comprende: una mezcla de lípido que comprende uno o más lípidos (por ejemplo, fosfolípidos); una cantidad eficaz de agente activo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y un hidrogel biocompatible que comprende ácido hialurónico, en la que el hidrogel biocompatible está presente en la composición farmacéutica a una concentración comprendida entre 0.01 % (p/v) y 0.75 % (p/v);

[0012] en la que el agente activo es un agente antiangiogénesis o un agente antiinflamatorio, y en la que la composición farmacéutica presenta una viscosidad de 15 a 220 mPa·S a 20 °C. Un efecto secundario ocular provocado por la administración del agente activo en la composición farmacéutica de la invención se reduce, en comparación con el efecto secundario ocular de la misma composición farmacéutica en ausencia del hidrogel biocompatible (por ejemplo, una composición farmacéutica de referencia).

[0013] Para mejorar el tratamiento de enfermedades oftálmicas y obtener una capacidad de administración deseada así como un perfil de liberación de fármaco deseado, es divulgada una composición farmacéutica para su utilización en la administración de un agente activo a un ojo. La composición farmacéutica puede incluir una mezcla de un agente activo liposomal y un hidrogel biocompatible. por lo tanto, se logra un tratamiento mejorado de enfermedades oftálmicas con farmacocinética deseada así como un efecto secundario reducido en el ojo. Un hidrogel biocompatible ejemplificativo según la presente divulgación comprende por lo menos un polisacárido, por ejemplo un mucopolisacárido no ramificado, incluyendo pero sin limitarse a, un glucosaminoglucano aniónico no sulfatado, tal como ácido hialurónico (HA). Otros polisacáridos que pueden utilizarse incluyen alginato, agarosa, quitosano, colágeno, sulfato de condroitina, gelatina, sulfato de celulosa sódica, o mezclas de los mismos. El hidrogel biocompatible según la presente invención está presente en una concentración comprendida entre 0.01 % (p/v) y 0.75 % (p/v) de la composición farmacéutica. En algunas formas de realización, la cantidad de los uno o más lípidos (por ejemplo, fosfolípidos) según la presente divulgación está comprendida entre aproximadamente 2 µmol y aproximadamente 200 µmol por ml de la composición farmacéutica. La composición farmacéutica según la presente divulgación presenta una viscosidad adecuada, en la que las nanopartículas lipídicas no se dispersarían rápidamente en el humor vítreo y, por lo tanto, provocarían menos enturbiamiento o turbidez vítrea inicialmente después de la administración de la composición farmacéutica. La presente composición farmacéutica asimismo retiene la administrabilidad, por ejemplo, inyectabilidad. Además, la composición farmacéutica proporcionada asimismo presenta una turbidez reducida incluso después de que las nanopartículas lipídicas se hayan dispersado completamente, lo que mejora eficazmente la turbidez vítrea provocada por la administración de liposomas solos.

[0014] Mientras tanto, la composición farmacéutica según la presente divulgación ofrece una liberación sostenida del agente activo comparable con la misma composición farmacéutica en ausencia del hidrogel biocompatible. Es conocido que los liposomas pueden modificar la farmacocinética del agente activo, lo que es una importante preocupación de seguridad cuando se desarrolla un fármaco liposomal. La composición farmacéutica proporcionada muestra un perfil de liberación sostenida similar al de la misma composición farmacéutica sin el hidrogel biocompatible y, por lo tanto, asimismo mantiene una eficacia deseada y prolongada sin socavar la seguridad.

[0015] Dadas las ventajas descritas anteriormente, la composición farmacéutica proporcionada puede mejorar los resultados y el cumplimiento de los pacientes.

[0016] En determinadas formas de realización, la composición farmacéutica según la presente divulgación se prepara mediante un proceso que comprende: proporcionar la mezcla de lípido y el agente activo en una suspensión; y mezclar la suspensión con una disolución que contiene el hidrogel biocompatible, por lo que se forma una mezcla de vesículas multilaminares y el hidrogel biocompatible.

[0017] La presente divulgación asimismo describe un método de administración de un agente activo a un ojo de un sujeto que lo necesita, que comprende administrar una composición farmacéutica según la presente divulgación al ojo del sujeto. En una forma de realización particular, la etapa de administrar una composición farmacéutica según la presente divulgación al ojo del sujeto que lo necesita comprende administrar por vía intravítrea la composición farmacéutica al humor vítreo del ojo del sujeto. El método puede lograr tanto una eficacia prolongada como una turbidez reducida en el humor vítreo después de la administración de la composición farmacéutica según la presente divulgación, en comparación con la de una composición convencional con un perfil de liberación prolongada del agente activo.

[0018] La presente divulgación asimismo describe una composición farmacéutica para su utilización en el tratamiento de una enfermedad ocular. En particular, la presente divulgación describe la utilización de la composición farmacéutica en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la enfermedad ocular donde la reducción de un efecto secundario ocular mejora adicionalmente mediante la administración del agente activo por la composición farmacéutica según la presente divulgación.

[0019] Otros objetivos, ventajas y nuevas características de la divulgación resultarán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada haciendo referencia a los dibujos adjuntos.

[0020] Breve descripción de los dibujos

[0021] Las figuras 1A a 1E son fotografías que representan los comportamientos de dispersión de la composición de liposomas-DSP (fosfato sódico de dexametasona) y composiciones de HA/liposomas-DSP en disolución salina a 37 °C.

[0022] Las figuras 2A y 2B son gráficos que representan las mediciones de turbidez de la composición de liposomas-DSP dispersada y composiciones de HA/liposomas-DSP en disolución salina. La figura 2A muestra que las composiciones de liposomas-DSP y HA/liposomas-DSP se dispersaban bien ambas en disolución salina. Las disoluciones homogéneas se añadieron a una placa de 96 pocillos y se midió la absorbancia a λ = 400 a 700 nm. La turbidez de las muestras se calculó entonces a partir de la absorbancia (cuanto mayor es la absorbancia de luz, mayor es la turbidez). Las disoluciones de blanco (disolución salina, H<2>O, disolución de DSP y HEPES/NaCl) asimismo se midieron como referencias. La figura 2B demuestra la absorbancia de las muestras a λ = 555 nm.

[0023] La figura 3 es un gráfico de líneas que representa la liberaciónin vitrode DSP de la composición de liposomas-DSP (muestra L1) y la composición de HA/liposomas-DSP (muestra H3) en disolución salina. Las cantidades totales de los fosfolípidos y DSP en las muestras de los dos grupos eran las mismas.

[0024] Descripción detallada de las formas de realización

[0025] Definición

[0026] Tal como se utilizan anteriormente y a lo largo de la divulgación, se entenderá que los siguientes términos, a menos que se indique lo contrario, presentan los siguientes significados.

[0027] Tal como se utilizan en la presente memoria, las formas singulares “un”, “una” y “el/la” incluyen la referencia en plural a menos que el contexto indique claramente lo contrario.

[0028] Todos los números en la presente memoria pueden entenderse como modificados por “aproximadamente”, que, cuando se refiere a un valor medible tal como una cantidad, una duración temporal y similares, pretende comprender variaciones de ±10 %, preferentemente ±5 %, más preferentemente ±1 %, y todavía más preferentemente ±0,1 % del valor especificado, ya que tales variaciones son apropiadas para obtener una cantidad deseada de composición liposómica, a menos que se especifique lo contrario.

[0029] El término “tratar”, “tratado” o “tratamiento” tal como se utiliza en la presente memoria incluye, pero no se limita a, utilizaciones o resultados preventivos (por ejemplo, profilácticos), paliativos y/o curativos.

[0030] El término “cantidad eficaz” tal como se utiliza en la presente memoria indica una dosis de la composición farmacéutica que es suficiente para reducir, prevenir o eliminar los síntomas o signos de una enfermedad, síndrome, trastorno o afección.

[0031] El término “sales farmacéuticamente aceptables” del agente activo de la presente divulgación son sales de un agente activo ácido formadas con bases, concretamente sales de adición de base tales como sales de metales alcalinos y alcalinotérreos, por ejemplo, sales de sodio, litio, potasio, calcio, magnesio, así como sales de amonio, por ejemplo, sales de amonio, trimetilamonio, dietilamonio y tris-(hidroximetil)-etilamonio. De manera similar, asimismo son posibles sales de adición de ácido, tales como de ácidos minerales, ácidos carboxílicos orgánicos y sulfónicos orgánicos, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido metanosulfónico, ácido maleico, proporcionados a un agente activo básico.

[0032] El término “sujeto” incluye un vertebrado que presenta enfermedades oftálmicas que afectan a la función ocular. En algunas formas de realización, el sujeto es un animal de sangre caliente, tal como mamíferos, incluyendo seres humanos.

[0033] En ciertas formas de realización, la cantidad o concentración de fosfolípidos del liposoma y la composición liposómica podría determinarse sometiendo a ensayo el contenido de fósforo de las muestras de liposomas y fármacos liposómicos utilizando un ensayo de fósforo (adaptado de G. Rouser et al., Lipids 1970, 5, 494-496). Tal como se utiliza en la presente memoria, el término “% (p/v)” se refiere al porcentaje en peso/volumen, que se define como la masa de un soluto en gramos presente en 100 ml de solución.

[0034] Como se utiliza en la presente memoria, el término “efecto secundario ocular” se refiere a efectos secundarios inducidos por el agente activo que incluyen, pero no se limitan a, presión ocular elevada, glaucoma, formación de cataratas, cicatrización retardada de heridas, susceptibilidad aumentada a infección, turbidez vítrea y problemas de visión. Tal como se utiliza en la presente memoria, el término “turbidez vítrea” se refiere a la aparición de turbidez difusa o lechosidad en el humor vítreo que puede provocar problemas de visión. Puede realizarse un examen ocular del humor vítreo utilizando un oftalmoscopio directo o indirecto para especular respecto la opacificación por medio de un índice arbitrario. Se examina la mayor parte del fondo de ojo que sea visible, incluyendo la retina, mácula, fóvea, vasos y disco óptico y sus márgenes, para ver todo el fondo de ojo (es decir, para ver un desprendimiento periférico de la retina).

[0035] Tal como se utiliza en la presente memoria, el término “turbidez” significa opacidad o enturbiamiento de un fluido provocado por partículas suspendidas. La turbidez podría medirse, pero sin limitarse a, utilizando un espectrofotómetro.

[0036] Mezcla de lípido

[0037] La mezcla de lípido de la composición farmacéutica proporcionada en la presente memoria comprende por lo menos un lípido, por ejemplo, pero sin limitarse a: un fosfolípido o una mezcla de fosfolípidos. La mezcla de lípido incluye, pero no se limita a, una película, torta, gránulos, polvos o disolución antes de añadirse a la composición farmacéutica.

[0038] En una forma de realización, el fosfolípido o la mezcla de fosfolípidos, con o sin colesterol, se preforman en liposomas antes de procesarse adicionalmente para proporcionar una mezcla de lípido.

[0039] En otra forma de realización, el fosfolípido o la mezcla de fosfolípidos, con o sin colesterol, no se preforman en liposomas antes de procesarse adicionalmente para proporcionar una mezcla de lípido.

[0040] La mezcla de lípido según la presente divulgación puede prepararse a partir de una variedad de lípidos capaces de o bien formar o bien incorporarse en una estructura de una sola capa o bicapa. Los lípidos utilizados en la presente divulgación incluyen uno o más fosfolípidos, incluyendo pero sin limitarse a, fosfatidilcolina (PC), fosfatidilglicerol (PG), fosfatidiletanolamina (PE), fosfatidilserina (PS), ácido fosfatídico (PA), fosfatidilinositol (PI) o combinaciones de los mismos.

[0041] En algunas formas de realización, la mezcla de lípido comprende fosfatidilcolina de huevo (EPC), fosfatidilglicerol de huevo (EPG), fosfatidiletanolamina de huevo (EPE), fosfatidilserina de huevo (EPS), ácido fosfatídico de huevo (EPA), fosfatidilinositol de huevo (EPI), fosfatidilcolina de soja (SPC), fosfatidilglicerol de soja (SPG), fosfatidiletanolamina de soja (SPE), fosfatidilserina de soja (SPS), ácido fosfatídico de soja (SPA), fosfatidilinositol de soja (SPI) o combinaciones de los mismos. En otras formas de realización, la mezcla de lípido comprende dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC), 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina (DOPC), dimiristoilfosfatidilcolina (DMPC), dipalmitoilfosfatidilglicerol (DPPG), dioleoilfosfatidilglicerol (DOPG), dimiristoilfosfatidilglicerol (DMPG), hexadecilfosfocolina (HEPC), fosfatidilcolina de soja hidrogenada (HSPC), diestearoilfosfatidilcolina (DSPC), diestearoilfosfatidilglicerol (DSPG), dioleoilfosfatidiletanolamina (DOPE), palmitoilestearoilfosfatidilcolina (PSPC), palmitoilestearoilfosfatidilglicerol (PSPG), monooleoilfosfatidiletanolamina (MOPE), 1-palmitoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina (POPC), diestearoilfosfatidiletanolamina de polietilenglicol (PEG-DSPE), dipalmitoilfosfatidilserina (DPPS), 1,2-dioleoilsn-glicero-3-fosfatidilserina (DOPS), dimiristoilfosfatidilserina (DMPS), diestearoilfosfatidilserina (DSPS), ácido dipalmitoilfosfatídico (DPPA), ácido 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatídico (DOPA), ácido dimiristoilfosfatídico (DMPA), ácido diestearoilfosfatídico (DSPA), dipalmitoilfosfatidilinositol (DPPI), 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatidilinositol (DOPI), dimiristoilfosfatidilinositol (DMPI), diestearoilfosfatidilinositol (DSPI), o combinaciones de los mismos.

[0042] En algunas formas de realización, la mezcla de lípido comprende un primer fosfolípido y un segundo fosfolípido. En algunas formas de realización, el primer fosfolípido se selecciona de entre el grupo que consiste en EPC, EPE, SPC, SPE, DPPC, DOPC, DMPC, HEPC, HSPC, DSPC, DOPE, PSPC, MOPE, POPC; y el segundo fosfolípido se selecciona de entre el grupo que consiste en PG, PS, PA, PI, EPG, EPS, EPA, EPI, SPG, SPE, SPS, SPA, SPI, DPPG, DOPG, DMPG, DSPG, PSPG, DPPS, DOPS, DMPS, DSPS, DPPA, DOPA, DMPA, DSPA, DPPI, DOPI, DMPI, DSPI, y un polímero hidrófilo con una cadena larga de polímero neutro flexible altamente hidratado unido a una molécula de fosfolípido. Los ejemplos del polímero hidrófilo incluyen, pero no se limitan a, polietilenglicol (PEG) con un peso molecular de aproximadamente 2,000 a aproximadamente 5,000 daltons, metoxi PEG (mPEG), gangliósido GM<1>, poli(ácido siálico), poli(ácido láctico) (asimismo denominado polilactida), poli(ácido glicólico) (asimismo denominado poliglicolida), poli(ácido láctico)-poli(ácido glicólico), poli(alcohol vinílico), polivinilpirrolidona, polimetoxazolina, polietiloxazolina, polihidroxietiloxazolina, polihidroxipropiloxazolina, poliaspartamida, polihidroxipropilmetacrilamida, polimetacrilamida, polidimetilacrilamida, polivinilmetiléter, poli(acrilato de hidroxietilo), celulosas derivatizadas tales como hidroximetilcelulosa o hidroxietilcelulosa y polímeros sintéticos.

[0043] En una forma de realización particular, la mezcla de lípido comprende además un esterol. El esterol utilizado en la presente divulgación no está particularmente limitado, incluyendo ejemplos del mismo colesterol, fitolsterol (sitosterol, estigmasterol, fucosterol, espinasterol, brassicasterol, y similares), ergosterol, colestanona, colestenona, coprostenol, colesteril-2'-hidroxietil éter y colesteril-4'-hidroxibutil éter. El componente de esterol de la mezcla de lípido, cuando está presente, puede ser cualquiera de los esteroles utilizados convencionalmente en el campo de la preparación de partículas lipídicas.

[0044] En una forma de realización más particular, la mezcla de lípido comprende además un colesterol. En algunas formas de realización, la mezcla de lípido comprende de aproximadamente 10 % en moles a aproximadamente 33 % en moles de colesterol, de aproximadamente 15 % en moles a aproximadamente 30 % en moles de colesterol, de aproximadamente 18 % en moles a aproximadamente 28 % en moles de colesterol o de aproximadamente 20 % en moles a aproximadamente 25 % en moles de colesterol.

[0045] En una forma de realización particular, la mezcla de lípido comprende el primer fosfolípido, el segundo fosfolípido y el esterol a una razón de porcentaje molar de 29.5 % a 90 %:3 % a 37.5 %:10 % a 33 %.

[0046] En una forma de realización particular, el primer fosfolípido es DOPC, POPC, SPC o EPC y el segundo fosfolípido es PEG-DSPE o DOPG.

[0047] En una forma de realización más particular, la mezcla de lípido comprende DOPC y DOPG.

[0048] En una forma de realización, la mezcla de lípido está sustancialmente libre de ácido graso o lípido catiónico (es decir, un lípido que porta una carga positiva neta a pH fisiológico).

[0049] En una forma de realización, la mezcla de lípido comprende opcionalmente un conjugado lipídico de un anticuerpo o un péptido que actúa como resto de direccionamiento para permitir que los liposomas del mismo se unan específicamente a una célula diana que lleva una molécula diana. Los ejemplos de las moléculas diana incluyen, pero no se limitan a, TNF-α y antígeno de superficie de células B, tal como CD20. Asimismo pueden utilizarse otros antígenos, tales como CD19, HER-3, GD2, Gp75, proteína CS1, mesotelina, c-Myc, CD22, CD4, CD44, CD45, CD28, CD3, CD123, CD138, CD52, CD56, CD74, CD30, Gp75, CD38, CD33, GD2, factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) o factor de crecimiento transformante (TGF).

[0050] Partículas que contienen lípidos

[0051] Tal como se utiliza en la presente memoria, “partícula que contiene lípidos” o “nanopartícula lipídica (LNP)” según la presente divulgación incluye, pero no se limita a, una población de partículas que comprenden un lípido y adicionalmente otros excipientes biocompatibles para formar un vehículo para la administración de un agente activo. Se ha demostrado una variedad de nanopartículas que contienen lípidos, tales como liposomas, micelas u otras nanopartículas que contienen lípidos. El método de producción de la formulación de nanopartículas lipídicas puede influir y/o dictar la distribución de ciertos componentes dentro de las nanopartículas lipídicas, y que esta distribución puede influir y/o dictar propiedades físicas (por ejemplo, estabilidad) y/o biológicas (por ejemplo, eficacia, suministro intracelular, inmunogenicidad) de las nanopartículas lipídicas según se desee.

[0052] Tal como se utiliza en la presente memoria, el término “nanopartícula lipídica” incluye, pero no se limita a, un vehículo de administración que comprende uno o más lípidos y se formula en forma de partículas que presentan un tamaño o diámetro promedio de nanómetros a micrómetros para administrar uno o más agentes activos a un sujeto que lo necesita. Los ejemplos de lípidos adecuados incluyen lípidos catiónicos, lípidos no catiónicos y lípidos modificados con PEG.

[0053] En un grupo de formas de realización, las nanopartículas lipídicas según la presente divulgación son liposomas. El liposoma según la presente divulgación incluye, pero no se limita a, una bicapa lipídica que rodea un componente interno que porta un agente acuoso. Los ejemplos no limitativos de liposomas incluyen vesículas unilaminares pequeñas (SUV), vesículas unilaminares grandes (LUV), liposomas multivesiculares (LMV) y vesículas multilaminares (MLV).

[0054] Los liposomas preparados en esta divulgación pueden generarse mediante técnicas convencionales utilizadas para preparar vesículas. Estas técnicas incluyen el método de inyección de éter (Deamer et al., Acad. Sci. (1978) 308: 250), el método de tensioactivo (Brunner et al., Biochim. Biophys. Acta (1976) 455: 322), el método de congelación-descongelación (Pick et al., Arch. Biochim. Biophys. (1981) 212: 186), el método de evaporación de fase inversa (Szoka et al., Biochim. Biophys. Acta. (1980) 601: 559 71), el método de tratamiento con ultrasonidos (Huang et al., Biochemistry (1969) 8: 344), el método de inyección de etanol (Kremer et al., Biochemistry (1977) 16: 3932), el método de extrusión (Hope et al., Biochim. Biophys. Acta (1985) 812:5565), el método de prensa francesa (Barenholz et al., FEBS Lett. (1979) 99: 210) y los métodos detallados en Szoka, F., Jr., et al., Ann. Rev. Biophys. Bioeng.9:467 (1980). Todos los procesos anteriores son tecnologías básicas para la formación de vesículas. Después de la esterilización, los liposomas preformados pueden colocarse de manera aséptica en un recipiente y a continuación liofilizarse para formar un polvo o una torta. En la forma de realización en la que la mezcla de lípido comprende liposomas preformados, dichos liposomas pueden obtenerse mediante el método de inyección de disolvente y seguido por liofilización para formar la mezcla de lípido. La mezcla de lípido comprende opcionalmente uno o más agentes de carga. En una forma de realización, la mezcla de lípido comprende además uno o más agentes tamponantes.

[0055] Los agentes de carga incluyen, pero no se limitan a, polioles o alcoholes de azúcar tales como manitol, glicerol, sorbitol, dextrosa, sacarosa y/o trehalosa; aminoácidos tales como histidina y glicina. Un agente de carga preferido es manitol.

[0056] Los agentes tamponantes incluyen, pero no se limitan a, fosfato de sodio monobásico dihidratado y fosfato de sodio dibásico anhidro.

[0057] En la forma de realización en la que la mezcla de lípido comprende lípidos que no están preformados en liposomas, la mezcla de lípido puede prepararse mediante disolución en un disolvente orgánico adecuado, incluyendo, pero sin limitarse a, etanol, metanol, alcohol t-butílico, éter y cloroformo, y secando mediante calentamiento, evaporación al vacío, evaporación de nitrógeno, liofilización u otros medios convencionales de eliminación del disolvente.

[0058] Agente activo

[0059] El agente activo de la presente divulgación puede mezclarse o bien en ddH<2>O o bien en un tampón adecuado como una disolución que contiene el agente activo para suspender la mezcla de lípido para obtener la composición farmacéutica según la presente divulgación. En algunas formas de realización, el agente activo no está unido covalentemente a un lípido tal como fosfolípido o un ácido graso, tal como palmitato.

[0060] En un aspecto, el agente activo se refiere a una sustancia que induce un efecto farmacológico o fisiológico deseado, que alivia un síntoma o previene el desarrollo de una enfermedad o trastorno.

[0061] El agente activo que puede utilizarse en la composición farmacéutica divulgada en la presente memoria comprende uno o más de un agente antiangiogénesis, un agente antiinflamatorio, un agente inmunosupresor, un agente antimicrobiano o un agente antivírico. Según la presente invención, el agente activo es uno o más de un agente antiangiogénesis o un agente antiinflamatorio.

[0062] Los ejemplos del agente antiangiogénesis incluyen, pero no se limitan a, bevacizumab (Avastin<®>, Genentech), ranibizumab (Lucentis<®>, Genentech), aflibercept (Eylea<®>, Regeneron), brolucizumab (Beovu<®>, Novartis) y pegaptanib (Macugen<®>, Valeant).

[0063] En una forma de realización, los agentes antiinflamatorios incluyen, pero no se limitan a, un esteroide, particularmente esteroide ocular, un derivado del mismo, una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un profármaco del mismo. El esteroide útil en la presente descripción incluye cualquier hormona esteroidea de origen natural, esteroides sintéticos y sus derivados. En una forma de realización particular, el agente antiinflamatorio es un corticosteroide. Los ejemplos del esteroide incluyen, pero no se limitan a, cortisona, hidrocortisona, acetato de hidrocortisona, pivalato de tixocortol, fluocinolona, prednisolona, metilprednisolona, prednisona, acetónido de triamcinolona, triamcinolona, mometasona, amcinonida, budesonida, desonida, fluocinonida, acetónido de fluocinolona, halcinonida, fosfato sódico de betametasona, dexametasona, fosfato sódico de dexametasona (DSP), fluocortolona, hidrocortisona-17-butirato, hidrocortisona-17-valerato, dipropionato de alclometasona, valerato de betametasona, dipropionato de betametasona, prednicarbato, clobetasona-17-butirato, clobetasol-17-propionato, caproato de fluocortolona, pivalato de fluocortolona, acetato de fluprednideno, difluprednato, loteprednol, fluorometolona, medrisona rimexolona, beclometasona, cloprednol, cortivazol, desoxicortona, difluorocortolona, fluclorolona, fludrocortisona, flumetasona, flunisolida, flurandrenolona, meprednisona, metilprednisolona y parametasona. En ciertas formas de realización, el esteroide ocular es un esteroide soluble en agua. En ciertas formas de realización, el esteroide soluble en agua es DSP.

[0064] Los ejemplos del agente inmunosupresor incluyen, pero no se limitan a, metotrexato, azatioprina, micofenolato mofetilo, ciclosporina, tacrolimus, voclosporina, ciclofosfamida, clorambucilo, etanercept, infliximab, adalimumab, rituximab, abatacept, anakinra y daclizumab.

[0065] Los ejemplos del agente antimicrobiano incluyen, pero no se limitan a, vancomicina, ceftazidima, amikacina, anfotericina y voriconazol.

[0066] Los ejemplos del agente antivírico incluyen, pero no se limitan a, ganciclovir, foscarnet, cidofovir y fomivirsen. En algunas formas de realización, el agente activo se selecciona de entre el grupo que consiste en bevacizumab, ranibizumab, aflibercept, brolucizumab, pegaptanib, cortisona, hidrocortisona, acetato de hidrocortisona, pivalato de tixocortol, fluocinolona, prednisolona, metilprednisolona, prednisona, acetónido de triamcinolona, triamcinolona, mometasona, amcinonida, budesonida, desonida, fluocinonida, acetónido de fluocinolona, halcinonida, betametasona, fosfato sódico de betametasona, dexametasona, fosfato sódico de dexametasona (DSP), fluocortolona, hidrocortisona-17-butirato, hidrocortisona-17-valerato, dipropionato de alclometasona, valerato de betametasona, dipropionato de betametasona, prednicarbato, clobetasona-17-butirato, clobetasol-17-propionato, caproato de fluocortolona, pivalato de fluocortolona, acetato de fluprednideno, difluprednato, loteprednol, fluoromet, medrisona rimexolona, beclometasona, cloprednol, cortivazol, desoxicortona, difluorocortolona, fluclorolona, fludrocortisona, flumetasona, flunisolida, flurandrenolona, meprednisona, metilprednisolona y parametasona.

[0067] En algunas formas de realización, el agente activo es un antagonista específico para VEGF, que puede ser un anticuerpo específico para VEGF, un receptor de VEGF, un ácido nucleico que se une a VEGF, o una molécula pequeña que interfiere con la interacción entre VEGF y su receptor afín y bloquea la ruta de señalización de VEGF. El término “anticuerpo” utilizado en la presente memoria se refiere a una inmunoglobulina de origen natural, un fragmento funcional de la misma, o una inmunoglobulina modificada genéticamente, tal como anticuerpo humanizado, anticuerpo quimérico o anticuerpo completamente humano.

[0068] En algunas formas de realización, el agente terapéutico es un anticuerpo específico para VEGF. Tal anticuerpo específico para VEGF puede ser una molécula de anticuerpo completa que presenta cadenas pesada y ligera de longitud completa o un fragmento funcional, tal como Fab, Fab', F(ab)<2>, F(ab')<2>, scFv, di-scFv, scFv-Fc, anticuerpo de un solo dominio, diacuerpo y triacuerpo.

[0069] En un ejemplo, el agente de obtención de imágenes se refiere a una sustancia útil para aplicaciones de obtención de imágenes. Los ejemplos del agente de obtención de imágenes incluyen, pero no se limitan a, radioconjugados, agentes fluorescentes, gadolinio-DTPA (Gd-DTPA), óxido de hierro, óxido de manganeso y puntos cuánticos.

[0070] Hidrogel biocompatible

[0071] El término “hidrogel biocompatible” tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a una sustancia que no es tóxica para las células vivas y en la que los polímeros forman una estructura de red (por ejemplo, mediante unión química) y se retiene una gran cantidad de agua en la red.

[0072] En un ejemplo, el hidrogel biocompatible comprende un polímero seleccionado de entre el grupo que consiste en polisacárido, polifosfaceno, poli(ácidos acrílicos), poli(ácidos metacrílicos), poli(óxidos de alquileno), poli(acetato de vinilo), polivinilpirrolidona (PVP), y copolímeros y combinaciones de los mismos.

[0073] En un ejemplo, el hidrogel biocompatible comprende un polisacárido seleccionado de entre el grupo que consiste en ácido hialurónico, alginato, agarosa, quitosano, colágeno, sulfato de condroitina, gelatina, sulfato de celulosa sódica, y combinaciones de los mismos.

[0074] Los hidrogeles biocompatibles ejemplificativos según la presente divulgación incluyen, pero no se limitan a, polisacáridos, particularmente mucopolisacáridos no ramificados. En determinadas formas de realización, el hidrogel biocompatible según la presente divulgación es glucosaminoglucano unido a O o unido a N, particularmente glucosaminoglucano no sulfatado. En determinadas formas de realización, el hidrogel biocompatible según la presente divulgación incluye, pero no se limita a, un glucosaminoglucano aniónico no sulfatado.

[0075] En la presente invención, el hidrogel biocompatible comprende ácido hialurónico.

[0076] En algunas formas de realización, el hidrogel biocompatible presenta un peso molecular de aproximadamente 4 kDa a aproximadamente 8000 kDa, opcionalmente de aproximadamente 4 kDa a aproximadamente 7000 kDa, opcionalmente de aproximadamente 50 kDa a aproximadamente 8000 kDa, opcionalmente de aproximadamente 50 kDa a aproximadamente 7000 kDa, opcionalmente de aproximadamente 50 kDa a aproximadamente 6000 kDa, opcionalmente de aproximadamente 50 kDa a aproximadamente 5000 kDa, opcionalmente de aproximadamente 50 kDa a aproximadamente 4000 kDa, opcionalmente de aproximadamente 50 kDa a aproximadamente 3000 kDa, opcionalmente de aproximadamente 50 kDa a aproximadamente 2500 kDa, opcionalmente de aproximadamente 50 kDa a aproximadamente 2000 kDa, opcionalmente de aproximadamente 100 kDa a aproximadamente 2500 kDa, opcionalmente de aproximadamente 100 kDa a aproximadamente 2000 kDa, opcionalmente de aproximadamente 1500 kDa a aproximadamente 1800 kDa.

[0077] La composición farmacéutica

[0078] La composición farmacéutica de la presente divulgación es adecuada para la administración de un agente activo a un ojo y comprende una mezcla de lípido que comprende uno o más lípidos (por ejemplo, fosfolípidos); una cantidad eficaz del agente activo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y un hidrogel biocompatible que comprende ácido hialurónico, en la que el hidrogel biocompatible está presente en la composición farmacéutica a una concentración comprendida entre 0.01 % (p/v) y 0.75 % (p/v), el agente activo es un agente antiangiogénesis o un agente antiinflamatorio, y la composición farmacéutica presenta una viscosidad de 15 a 220 mPa·S a 20 °C; en la que el efecto secundario ocular de dicha composición farmacéutica se reduce, en comparación con el efecto secundario ocular de una composición farmacéutica de referencia sin el hidrogel biocompatible. La composición farmacéutica de referencia incluye, pero no se limita a, los uno o más lípidos, y el agente activo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de la presente divulgación pero en ausencia del hidrogel biocompatible (en la que la composición farmacéutica de referencia provoca el efecto secundario ocular). Después de la administración intravítrea de la presente composición farmacéutica, el efecto secundario ocular se reduce en de aproximadamente 10 % a aproximadamente 100 %, de aproximadamente 10 % a 40 %, o de aproximadamente 20 % a 40 %, particularmente en por lo menos 10 %, por lo menos 15 %, por lo menos 20 %, por lo menos 25 %, por lo menos 30 %, por lo menos 35 %, por lo menos 40 %, por lo menos 45 % y por lo menos 50 %, en comparación con el de una composición farmacéutica de referencia en ausencia del hidrogel biocompatible.

[0079] En una forma de realización, la cantidad de los uno o más lípidos (por ejemplo, fosfolípidos) está comprendida entre aproximadamente 2 µmol y aproximadamente 200 µmol por ml de la composición farmacéutica, opcionalmente entre aproximadamente 10 µmol y aproximadamente 200 µmol por ml de la composición farmacéutica, opcionalmente entre aproximadamente 10 µmol y aproximadamente 150 µmol por ml de la composición farmacéutica, opcionalmente entre aproximadamente 20 µmol y aproximadamente 150 µmol por ml de la composición farmacéutica, opcionalmente entre aproximadamente 20 µmol y aproximadamente 125 µmol por ml de la composición farmacéutica, opcionalmente entre aproximadamente 30 µmol y aproximadamente 125 µmol por ml de la composición farmacéutica, opcionalmente entre aproximadamente 30 µmol y aproximadamente 100 µmol por ml de la composición farmacéutica, opcionalmente entre aproximadamente 40 µmol y aproximadamente 100 µmol por ml de la composición farmacéutica, opcionalmente entre aproximadamente 50 µmol y aproximadamente 100 µmol por ml de la composición farmacéutica, opcionalmente entre aproximadamente 60 µmol y aproximadamente 100 µmol por ml de la composición farmacéutica.

[0080] En la presente invención, el hidrogel biocompatible está presente en una concentración comprendida entre 0.01 % (p/v) y 0.75 % (p/v), opcionalmente entre aproximadamente 0.05 % (p/v) y aproximadamente 0.75 % (p/v), opcionalmente entre aproximadamente 0.01 % (p/v) y aproximadamente 0.6 % (p/v), opcionalmente entre aproximadamente 0.05 % (p/v) y aproximadamente 0.6 % (p/v), opcionalmente entre aproximadamente 0.01 % (p/v) y aproximadamente 0.5 % (p/v), opcionalmente entre aproximadamente 0.05 % (p/v) y aproximadamente 0.5 % (p/v), opcionalmente entre aproximadamente 0.06 % (p/v) y aproximadamente 0.5 % (p/v), opcionalmente entre aproximadamente 0.07 % (p/v) y aproximadamente 0.5 % (p/v), opcionalmente entre aproximadamente 0.08 % (p/v) y aproximadamente 0.5 % (p/v), opcionalmente entre aproximadamente 0.09 % (p/v) y aproximadamente 0.5 % (p/v), opcionalmente entre aproximadamente 0.0912 % (p/v) y aproximadamente 0.456 % (p/v) de la composición farmacéutica.

[0081] En una forma de realización, la composición farmacéutica se prepara mediante un proceso que comprende: proporcionar la mezcla de lípido y el agente activo en una suspensión; y mezclar la suspensión con una disolución que contiene el hidrogel biocompatible, por lo que se forma una mezcla de partículas que contienen lípidos y el hidrogel biocompatible.

[0082] En una forma de realización particular, dicha suspensión se prepara reconstituyendo una torta lipídica liofilizada que comprende la mezcla de lípido con una disolución acuosa que comprende el agente activo. En otra forma de realización particular, dicha suspensión se prepara reconstituyendo una combinación liofilizada de la mezcla de lípido y el agente activo con una disolución acuosa.

[0083] En una forma de realización, la etapa de proporcionar la mezcla de lípido y el agente activo en una suspensión comprende reconstituir la mezcla de lípido y el agente activo en una disolución acuosa para formar nanopartículas lipídicas en la suspensión. En la etapa de mezclado, se forma una mezcla de nanopartículas lipídicas y el hidrogel biocompatible en la composición farmacéutica. Después de la administración de la composición farmacéutica a un sujeto que lo necesita, el perfil de liberación del agente activo de la composición farmacéutica se mantiene en el humor vítreo del sujeto sin provocar turbidez. En algunas formas de realización, las nanopartículas lipídicas incluyen vesículas multilaminares y una porción del agente activo está asociada con las vesículas multilaminares.

[0084] En un ejemplo, la composición farmacéutica es adecuada para su utilización en la administración de un agente activo a un ojo por medio de inyección intravítrea, inyección subconjuntival, inyección subretiniana, inyección intracameral o administración tópica. En una forma de realización particular de la invención, la composición farmacéutica es para su utilización en una inyección intravítrea.

[0085] En una forma de realización, el efecto secundario ocular comprende turbidez vítrea. La turbidez vítrea puede observarse después de la administración de una composición liposómica al humor vítreo de un ojo, en la que la composición comprende una mezcla de lípido que comprende uno o más fosfolípidos; y una cantidad eficaz del agente activo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0086] La composición farmacéutica de la presente divulgación puede presentar una viscosidad mayor que una composición farmacéutica de referencia sin el hidrogel biocompatible. Las nanopartículas lipídicas junto con el hidrogel biocompatible en la mezcla formada de la presente composición farmacéutica se retienen en el humor vítreo y conducen a una reducción de la turbidez vítrea inicialmente después de la inyección intravítrea de la composición farmacéutica, en comparación con una composición farmacéutica oftálmica de referencia que presenta los mismos componentes pero sin el hidrogel biocompatible. En particular, la composición farmacéutica oftálmica de referencia puede ser una suspensión de nanopartículas lipídicas. En otro aspecto, después de la administración intravítrea, la presente composición farmacéutica se retiene en el humor vítreo de un sujeto que lo necesita durante un tiempo de retención, que puede ser después de que las nanopartículas lipídicas, por ejemplo, vesículas multilaminares, se dispersen bien en el humor vítreo. Después de la administración de la presente composición farmacéutica, el humor vítreo puede mostrar una turbidez menor en relación con la de una administrada con la composición farmacéutica oftálmica de referencia. En una forma de realización, la composición farmacéutica de la invención es para su utilización en la reducción de la turbidez vítrea provocada por la inyección intravítrea de una composición liposómica en el humor vítreo de un ojo de un sujeto que lo necesita, en la que la composición liposómica comprende el agente activo sin el hidrogel biocompatible.

[0087] Método de tratamiento de enfermedades o trastornos oftálmicos

[0088] La composición farmacéutica según la presente divulgación es adecuada para su utilización en el tratamiento de enfermedades o trastornos oftálmicos.

[0089] En una forma de realización, el sujeto que lo necesita según la presente divulgación padece por lo menos una enfermedad o trastorno oftálmico. Los ejemplos de la enfermedad o trastorno oftálmico incluyen, pero no se limitan a, degeneración macular, edema macular quistoide (CME), maculopatía diabética, retinopatía diabética proliferativa (PDR), edema macular diabético, oclusiones de la vena retiniana (RVO), glaucoma neovascular (NVG), tumores vasculares retinianos, hemangiomas coroideos, melanoma coroideo, tumor ocular vasoproliferativo, melanoma del iris, retinopatía por radiación, coriorretinopatía serosa central (CSR), retinopatía de la prematuridad (ROP), endoftalmitis, uveítis y retinitis.

[0090] En una forma de realización, la administración de la composición farmacéutica comprende administrar por vía intravítrea la composición farmacéutica al humor vítreo.

[0091] Un ejemplo de esta divulgación es un método de administración de un agente activo al humor vítreo de un sujeto que lo necesita y reducción del efecto secundario ocular de una composición liposómica, que comprende administrar una composición farmacéutica como se describe anteriormente.

[0092] En una forma de realización, el efecto secundario ocular comprende turbidez vítrea. Se observa un aumento en la turbidez vítrea después de la administración de una composición liposómica sin un hidrogel biocompatible al humor vítreo. Sin embargo, la administración de la presente composición farmacéutica al humor vítreo reduce la turbidez vítrea, en comparación con la administración de la misma composición farmacéutica en ausencia del hidrogel biocompatible.

[0093] En determinadas formas de realización, la composición farmacéutica según la presente divulgación presenta una concentración de fosfolípido comprendida entre aproximadamente 50 mM y aproximadamente 150 mM y el hidrogel biocompatible en una cantidad de aproximadamente 0.05 % a 1 % (p/v), de aproximadamente 0.1 % a 0.9 % (p/v) o de aproximadamente 0.2 % a 0.5 % (p/v). Después de la administración intravítrea de la composición farmacéutica, la turbidez vítrea se reduce en de aproximadamente 10 % a aproximadamente 100 %, de aproximadamente 10 % a 40 %, o de aproximadamente 20 % a 40 %, particularmente en por lo menos 10 %, por lo menos 15 %, por lo menos 20 %, por lo menos 25 %, por lo menos 30 %, por lo menos 35 %, por lo menos 40 %, por lo menos 45 % y por lo menos 50 %, en comparación con la de una composición farmacéutica de referencia en ausencia del hidrogel biocompatible. La viscosidad de la composición farmacéutica según la presente divulgación es de 15 a 220 mPa·S a 20 °C.

[0094] Los siguientes ejemplos ilustran adicionalmente la presente divulgación. Estos ejemplos se proporcionan únicamente a título ilustrativo y no limitativo de la presente divulgación.

[0095] Ejemplos

[0096] Los siguientes ejemplos ilustran la preparación y las propiedades de determinadas formas de realización de la presente divulgación.

[0097] Ejemplo 1 Preparación de una composición de liposomas para la administración de fármacos A. Preparación de una torta lipídica

[0098] Una mezcla de lípido de uno o más lípidos, incluyendo DOPC, DOPG y colesterol, tal como se forma a una razón molar de 67.5 : 7.5 : 25 (DOPC : DOPG : colesterol) y se disuelve en etanol absoluto a aproximadamente 40 °C. Se utilizó un baño de ultrasonidos de sobremesa para la disolución de los lípidos. La disolución de lípidos disueltos se añadió entonces a una disolución 1 mM de fosfato de sodio para formar una suspensión de proliposomas, seguido por extrusión de la suspensión de proliposomas a través de una membrana de policarbonato con un tamaño de poro de 0.2 µm con de 6 a 10 pases de extrusión para formar una suspensión de liposomas. La suspensión de liposomas se dializó y concentró mediante un sistema de filtración de flujo tangencial (módulos de filtro de fibras huecas Spectrum<®>; membrana MIDIKROS: mPES, 100 kDa, 115 cm<2>) frente a una disolución 1 mM de fosfato de sodio y luego se esterilizó utilizando un filtro estéril de 0.2 µm para obtener una suspensión de liposomas esterilizada. La concentración de fosfolípidos de la suspensión de liposomas esterilizada se cuantificó mediante un ensayo de fósforo. La suspensión de liposomas esterilizada se formuló posteriormente con un crioprotector, manitol al 2 % p/p (aséptico), y se cargó de manera aséptica en viales para su liofilización para formar una torta lipídica.

[0099] B. Reconstitución de la torta lipídica para formar una composición de liposomas-fármaco

[0100] La composición de agente activo liposomal (composición de liposomas-fármaco) que comprende la mezcla de lípido puede prepararse mediante reconstitución de la torta lipídica (preparada en el ejemplo 1A) con un agente activo, tal como un agente terapéutico o un agente de obtención de imágenes. En el presente ejemplo, los agentes activos ejemplificativos son fosfato sódico de dexametasona (DSP) y bevacizumab.

[0101] I. Composición de liposomas-DSP

[0102] La composición de DSP liposómica (asimismo denominada composición de liposomas-DSP) se preparó mediante reconstitución de la torta lipídica (preparada en el ejemplo 1A) con una disolución de DSP, que comprende DSP (13.2 mg/ml) y citrato de sodio (4.6 mg/ml) en una fase acuosa. La concentración de fosfolípidos de la composición de liposomas-DSP reconstituida es de 100 mM o 167 mM dependiendo del volumen añadido de disolución de DSP.

[0103] II. Composición de liposomas-bevacizumab

[0104] La composición de bevacizumab liposómica (un anticuerpo específico para VEGF) (composición de liposomasbevacizumab) se preparó mediante reconstitución de la torta lipídica (preparada en el ejemplo 1A) con una disolución de bevacizumab que comprende una cantidad adecuada de bevacizumab en una fase acuosa. La concentración de bevacizumab de la composición de liposomas-bevacizumab reconstituida puede ser, por ejemplo, 25 mg/ml.

[0105] Ejemplo 2 Preparación de disoluciones de hidrogel

[0106] La disolución de hidrogel en el presente ejemplo era una disolución acuosa que comprende un hidrogel biocompatible que se preparó tal como se describió anteriormente, en la que el hidrogel biocompatible comprendía ácido hialurónico. Se disolvió polvo de ácido hialurónico (sal de sodio de ácido hialurónico de Streptococcus equi, Sigma) en ddH<2>O (sistema de purificación Milli-Q, Millipore) o tampones (HEPES 10 mM/NaCl 145 mM, L-histidina 10 mM/NaCl 145 mM o PBS (Gibco<®>/Thermo Fisher Scientific), etc.) a una concentración indicada (ver la tabla 1), y se agitó a 4 °C durante la noche para una disolución y reticulación exhaustivas del HA.

[0107] Los tampones para la disolución de HA se prepararon tal como sigue:

[0108] (1) HEPES 10 mM/NaCl 145 mM: disolver 119.15 mg de HEPES y 423.69 mg de NaCl en 50 ml de ddH<2>O y ajustar el valor de pH a 7.4 utilizando NaOH y/o HCl.

[0109] (2) L-histidina 10 mM/NaCl 145 mM: disolver 77.75 mg de L-histidina y 423.69 mg de NaCl a 50 ml de ddH<2>O y el pH a aproximadamente 7.56.

[0110] Tabla 1 Disoluciones de HA

[0113]

[0115] Ejemplo 3 Preparación de composiciones de hidrogel/liposomas-fármaco

[0116] La disolución de hidrogel y la composición de liposomas-fármaco reconstituida se mezclaron para obtener una composición farmacéutica que comprende hidrogel y el agente activo liposómico (asimismo indicada como composición de hidrogel/liposomas-fármacos).

[0117] I. Composición de hidrogel/liposomas-DSP (composición de HA/liposomas-DSP)

[0118] La disolución de HA y la composición de liposomas-DSP reconstituida tal como se preparó mediante el método según los ejemplos previos se mezclaron en la razón en volumen de 2 : 3 para formar la composición de HA/liposomas-DSP. Los contenidos finales de HA y fosfolípido en las composiciones de HA/liposomas-DSP se enumeran en la tabla 4.

[0119] II. Composición de hidrogel/liposomas-bevacizumab (composición de HA/liposomas-bevacizumab)La disolución de HA y la composición de liposomas-bevacizumab reconstituida se mezclaron para formar la composición de HA/liposomas-bevacizumab.

[0120] Ejemplo 4 Determinación de la viscosidad y evaluación de la inyectabilidad de la composición de hidrogel/liposomas-fármaco

[0121] Las viscosidades de las muestras se determinaron mediante un viscosímetro equipado con un HVROC-T/controlador de temperatura (µVISC<™>/HVROC-S, RheoSense). Antes de la medición, la temperatura del viscosímetro se estableció en 20 °C o 37 °C y se equilibró hasta el estado estacionario. Se cargaron 400 µl de la muestra en una pipeta de viscosímetro desechable y se montaron en el viscosímetro para la medición. Se aplicaron tres mediciones repetidas para cada muestra. La medición de inyectabilidad de las muestras se aplicó en agujas de 24G (extracción) y 30G (inyección). Los resultados de viscosidad e inyectabilidad de las muestras se enumeran en la tabla 2 a la tabla 4.

[0122] Tal como se muestra en la tabla 4, a medida que aumentó la concentración de HA, la viscosidad de la composición de HA/liposomas-DSP asimismo aumentó. La viscosidad de la composición de HA/liposomas-DSP tuvo un impacto sobre su inyectabilidad. por lo tanto, una composición inyectable de hidrogel/liposomasfármaco presenta un intervalo de concentración indicado de hidrogel adecuado para la presente divulgación.

[0123] Tabla 2 La viscosidad de disoluciones de HA

[0126]

[0128] Tabla 3 La viscosidad de las composiciones de liposomas-DSP

[0131]

[0133] Tabla 4 La viscosidad e inyectabilidad de composiciones de HA/liposomas-DSP

[0136]

[0138] Ejemplo 5 Comportamiento de dispersión de las composiciones farmacéuticas

[0139] El comportamiento de dispersión de la composición de liposomas-DSP y las composiciones de HA/liposomas-DSP en un medio se inspeccionó visualmente. Se añadieron lentamente 30 µl de la composición de liposomas-DSP o 50 µl de las composiciones de HA/liposomas-DSP a 2 ml de disolución salina en un vial de vidrio transparente, donde las cantidades totales de fosfolípidos en la composición de liposomas-DSP y las composiciones de HA/liposomas-DSP eran las mismas. Los viales se incubaron a 37 °C y los comportamientos de dispersión de las muestras se registraron a cada punto de tiempo indicado después de la incubación durante (A) 0 h, (B) 1 h, (C) 2 h, (D) 3 h y (E) 24 h. Etiquetas de las muestras (de izquierda a derecha) (1) composición de liposomas-DSP; (2) composición de HA al 0.228 % (PBS)/liposomas-DSP; (3) composición de HA al 0.228 % (HEPES/NaCl)/liposomas-DSP; (4) composición de HA al 0.456 % (PBS)/liposomas-DSP; (5) composición de HA al 0.456 % (HEPES/NaCl)/liposomas-DSP. Las muestras se incubaron a 37 °C y sus comportamientos de dispersión se registraron mediante fotografía a 0 horas (h), 1 h, 2 h, 3 h y 24 h. (Figuras 1A-1E).

[0140] Tal como se ilustra en la figura 1E, después de la incubación de las muestras durante 24 horas sin agitación/sacudidas, la composición de liposomas-DSP se dispersó completamente en disolución salina (muestra 1), mientras que las composiciones de HA/liposomas-DSP permanecieron todas como pequeños agregados no dispersados en la parte inferior de los viales. Además, asimismo se observó que cuanto mayor es la concentración de HA en la composición de HA/liposomas-DSP, menor es la dispersión espontánea de la composición en disolución salina, lo que puede atribuirse a la viscosidad de la composición.

[0141] Ejemplo 6 Análisis de turbidez

[0142] La turbidez es una medida del grado en el que una disolución pierde su transparencia debido a la presencia de partículas dispersadas. En este caso, se midió la absorbancia de las muestras a = 400 - 700 nm (dentro del intervalo de luz visible). Según la definición de absorbancia (ecuación 2), cuanto mayor es la absorbancia de una muestra, menor será la transmitancia de la misma, lo que indica mayor turbidez de la disolución (se dispersa más luz incidente, ecuación 1). Para la preparación de la muestra, se añadieron 50 μl de las composiciones de liposomas-DSP (muestra L1) o 50 μl de las composiciones de HA/liposomas-DSP (muestras H5 y H6) a 2 ml de disolución salina, donde las cantidades totales de fosfolípidos en la composición de liposomas-DSP y las composiciones de HA/liposomas-DSP eran las mismas. Las muestras se sometieron a vibración hasta que las composiciones de liposomas-DSP o HA/liposomas-DSP se dispersaron completamente en disolución salina. Las disoluciones de muestra homogéneas se transfirieron a una placa de 96 pocillos (200 μl/pocillo) y la absorbancia se midió a = 400 a 700 nm en un lector de microplacas (Synergy H1, BioTek).

[0145]

[0147] I: Luz transmitida (salida)

[0148] I<0>: Luz incidente (entrada)

[0149] La figura 2A ilustra que, en el intervalo de longitud de onda de 400 nm a 700 nm, la composición de liposomas-DSP presenta un espectro de absorbancia más alto que las composiciones de HA/liposomas-DSP. El resultado ha demostrado un efecto inesperado de que, después de que las composiciones se dispersaran completamente en disolución salina, las composiciones de HA/liposomas-DSP mostraron una turbidez reducida en comparación con la composición de liposomas-DSP. Además, cuanto mayor es el contenido de HA en la composición, mejor es el efecto de reducción de la turbidez. Vale la pena indicar que el efecto de reducción de la turbidez de las composiciones de HA/liposomas-DSP cubría todo el intervalo de luz visible (400 nm - 700 nm) sometido a prueba. En la condición de luz diurna, los ojos humanos son más sensibles a la longitud de onda de 555 nm. A una longitud de onda de 555 nm, la turbidez de la composición de liposomas-DSP con HA al 0.228 % fue aproximadamente un 21 % menor en comparación con la composición de liposomas-DSP. La composición de liposomas-DSP con HA al 0.456 % redujo la turbidez en aproximadamente un 37 % en comparación con la composición de liposomas-DSP sola.

[0150] Ejemplo 7 Liberación in vitro (IVR) del agente activo

[0151] Se realizó una evaluaciónin vitrode la liberación de agente activo de la composición de liposomas-fármaco y la composición de hidrogel/liposomas-fármaco en un sistema de disolución que contenía un tubo de diálisis (dispositivo de diálisis Float-A-Lyzer<®>G2, 20 kDa, 1 ml, Spectra/Por<®>) como depósito de muestra rodeado por el medio de liberación en una botella de vidrio. Se cargó un depósito de muestra con (1) 760 μl de disolución salina y 240 μl de composición de liposomas-DSP (muestra L1, donde la composición se añadió lentamente a la disolución salina) o (2) 600 μl de disolución salina y 400 μl de composición de HA al 0.456 %/liposomas-DSP (muestra H3, donde la composición se añadió lentamente a la disolución salina), donde las cantidades totales de fosfolípidos y DSP en los depósitos de muestra en los dos grupos fueron las mismas. Se utilizó disolución salina como medio de liberación en esta evaluación de la liberaciónin vitro. El depósito de muestra se colocó en 200 ml de un medio de liberación en una botella de vidrio, y el sistema se sometió a agitación lenta a 37 °C para facilitar la disolución de DSP desde el depósito de muestra hasta el medio de liberación. Se recogió 1 ml del medio de liberación en los puntos de tiempo indicados, y se midió la cantidad liberada de DSP (UV, = 241 nm) y se calculó en consecuencia.

[0152] El resultado de la IVR en la figura 3 muestra que el perfil de liberación de la composición de HA/liposomas-DSP era similar al perfil de liberación de la composición de liposomas-DSP en el plazo de 24 h. Como es conocido que la composición de liposomas-DSP es una composición farmacéutica de liberación sostenida, se concluye que la composición de HA/liposomas-DSP ofrece un perfil de liberación sostenida comparable del agente activo a partir de la composición farmacéutica, en comparación con el de la composición de liposomas-DSP sola.

Claims (15)

1. REIVINDICACIONES

1. Composición farmacéutica para utilización en una administración intravítrea, que comprende:

una mezcla de lípido que comprende uno o más lípidos;

una cantidad eficaz de un agente activo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y un hidrogel biocompatible que comprende ácido hialurónico,

en la que el hidrogel biocompatible está presente en la composición farmacéutica a una concentración comprendida entre 0.01 % (p/v) y 0.75 % (p/v);

en la que el agente activo es un agente antiangiogénesis o un agente antiinflamatorio, y

en la que la composición farmacéutica presenta una viscosidad de 15 a 220 mPa·S a 20 °C.

2. Composición farmacéutica según la reivindicación 1, en la que el hidrogel biocompatible presenta un peso molecular de aproximadamente 4 kDa a aproximadamente 8000 kDa.

3. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, en la que el hidrogel biocompatible está presente en una concentración comprendida entre aproximadamente 0.09 % (p/v) y aproximadamente 0.5 % (p/v).

4. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la mezcla de lípido comprende uno o más fosfolípidos seleccionados de entre el grupo que consiste en dioleoilfosfatidilcolina (DOPC), y dioleoilfosfatidilglicerol (DOPG).

5. Composición farmacéutica según la reivindicación 4, en la que la mezcla de lípido comprende además colesterol.

6. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que se prepara mediante un proceso que comprende:

proporcionar la mezcla de lípido y el agente activo en una suspensión; y

mezclar la suspensión con una disolución que contiene el hidrogel biocompatible, por lo que se forma una mezcla de nanopartículas lipídicas y el hidrogel biocompatible.

7. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que el agente activo es seleccionado de entre el grupo que consiste en bevacizumab, ranibizumab, aflibercept, brolucizumab, pegaptanib, cortisona, hidrocortisona, acetato de hidrocortisona, pivalato de tixocortol, fluocinolona, prednisolona, metilprednisolona, prednisona, acetónido de triamcinolona, triamcinolona, mometasona, amcinonida, budesonida, desonida, fluocinonida, acetónido de fluocinolona, halcinonida, betametasona, fosfato sódico de betametasona, dexametasona, fosfato sódico de dexametasona (DSP), fluocortolona, hidrocortisona-17-butirato, hidrocortisona-17-valerato, dipropionato de alclometasona, valerato de betametasona, dipropionato de betametasona, prednicarbato, clobetasona-17-butirato, clobetasol-17-propionato, caproato de fluocortolona, pivalato de fluocortolona, acetato de fluprednideno, difluprednato, loteprednol, fluorometolona, medrisona rimexolona, beclometasona, cloprednol, cortivazol, desoxicortona, difluorocortolona, fluclorolona, fludrocortisona, flumetasona, flunisolida, flurandrenolona, meprednisona y parametasona.

8. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que el agente antiangiogénesis es un antagonista específico para VEGF seleccionado de entre un grupo que consiste en un anticuerpo específico para VEGF, un receptor de VEGF, un ácido nucleico y una molécula pequeña.

9. Composición farmacéutica según la reivindicación 8, en la que el anticuerpo específico para VEGF es seleccionado de entre un grupo que consiste en una molécula de anticuerpo completa, Fab, Fab', F(ab)<2>, F(ab')<2>, scFv, di-scFv, scFv-Fc, anticuerpo de dominio único, diacuerpo y triacuerpo.

10. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que el agente antiinflamatorio es un corticosteroide.

11. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que los uno o más lípidos están en una cantidad comprendida entre aproximadamente 2 µmol y aproximadamente 200 µmol por ml de la composición farmacéutica.

12. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que los uno o más lípidos están en una cantidad comprendida entre aproximadamente 60 µmol y aproximadamente 100 µmol por ml de la composición farmacéutica.

13. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que los uno o más lípidos están a una concentración de 50 mM a 150 mM; el hidrogel biocompatible en una cantidad de 0.05 % a 0.75 % (p/v); y la composición farmacéutica presenta una viscosidad de 5 a 100 mPa·S a 37 °C.

14. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 para utilización en la reducción de la turbidez vítrea provocada por la inyección intravítrea de una composición liposómica en el humor vítreo de un ojo de un sujeto que necesita la misma, en la que la composición liposómica comprende el agente activo sin el hidrogel biocompatible.

15. Composición farmacéutica para utilización según la reivindicación 14, en la que el sujeto que necesita la misma padece por lo menos un trastorno seleccionado de entre el grupo que consiste en enfermedades retinianas, degeneración macular, degeneración macular relacionada con la edad, edema macular quistoide (CME), maculopatía diabética, retinopatía diabética proliferativa (PDR), edema macular diabético, oclusiones de vena retiniana (RVO), glaucoma neovascular (NVG), tumores vasculares retinianos, hemangiomas coroideos, melanoma coroideo, tumor ocular vasoproliferativo, melanoma del iris, retinopatía por radiación, coriorretinopatía serosa central (CSR), retinopatía de la prematuridad (ROP), endoftalmitis, uveítis y retinitis.