ES3040765T3 - Compositions comprising hydroxytyrosol and boswellic acid - Google Patents

Abstract

Se describen composiciones que incluyen una combinación sinérgica de hidroxitirosol y ácido 3-O-acetil-11-ceto-β-boswélico. El hidroxitirosol puede obtenerse de un extracto de aceituna y el ácido 3-O-acetil-11-ceto-β-boswélico de un extracto de Boswellia serrata. Las composiciones pueden formularse para su administración oral a mamíferos o aves. Se proporcionan métodos para tratar, reparar o reducir el daño al tejido conectivo causado por uno o más mediadores inflamatorios, así como para reducir los niveles de uno o más mediadores inflamatorios en el tejido conectivo. Estos métodos consisten en la administración oral de las composiciones al sujeto que las necesite. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Composiciones que comprenden hidroxitirosol y ácido boswélico

La presente solicitud reivindica la prioridad respecto de la solicitud de patente estadounidense provisional con número de serie 62/403,807, presentada el 4 de octubre de 2016.

Campo técnico

La presente invención proporciona métodos que comprenden la administración de: (i) Ácido 3-O-acetil-11-ceto-pboswélico (AKBA) e (ii) hidroxitirosol, a un sujeto mamífero o aviar. La presente invención también proporciona composiciones administrables por vía oral que comprenden AKBA e hidroxitirosol.

Antecedentes de la técnica

El tejido conjuntivo es el marco estructural del cartílago, los huesos, la membrana sinovial, los ligamentos, los meniscos y los tendones de las articulaciones. Los componentes del tejido conjuntivo son producidos por células residentes y después secretados para formar las características de la matriz extracelular (MEC) del tejido. Además de servir como marco estructural, la MEC también desempeña un papel fundamental en la comunicación y el funcionamiento de las células. En el cartílago articular, los condrocitos se alinean en un patrón distinto dentro del marco de la MEC de colágeno tipo II. Los osteoblastos y osteocitos, que forman los huesos, así como los osteoclastos, encargados de la resorción ósea, se organizan en la MEC de colágeno tipo I mineralizado. Las pocas células similares a fibroblastos y macrófagos de la membrana sinovial también se mantienen en su lugar mediante la MEC. Similarmente, los tenocitos y las células de los ligamentos se ensamblan entre sí dentro de la MEC. La síntesis y degradación de la MEC del tejido conjuntivo está controlada por una red de moléculas reguladoras que también son producidas por las células del tejido residente. Esta red incluye factores de crecimiento y una amplia gama de moléculas conocidas como mediadores proinflamatorios.

Incluyen citocinas, quimiocinas, prostaglandinas y óxido nítrico. Estas moléculas muestran muchas actividades biológicas. Pueden inducir la proliferación celular o la muerte celular. Estas sustancias también pueden inducir vías anabólicas para la producción de MEC o inducir enzimas catabólicas que pueden descomponer la MEC. En condiciones fisiológicas, supervivencia o muerte celular, la producción o degradación de la MEC del tejido conjuntivo se controla estrictamente para mantener una homeostasis equilibrada. La producción y la función de las moléculas reguladoras están moduladas por muchos factores, incluidas las fuerzas mecánicas, factores físicos tales como la temperatura y el pH, los productos químicos, los microbios y sus productos. En determinadas condiciones, estos factores pueden provocar una producción excesiva e inoportuna de moléculas reguladoras, lo que conduce a un daño tisular irreparable, la pérdida de la función y la muerte.

Los tejidos reaccionan a las agresiones mecánicas, físicas y químicas y a las infecciones mediante una respuesta inflamatoria. Es conocido que el proceso de inflamación conduce a la recuperación, la curación y la defensa contra las infecciones y, usualmente, preserva la vida. La respuesta inflamatoria en humanos y animales consta de dos fases. La fase inicial se caracteriza por la síntesis local de mediadores proinflamatorios tales como las prostaglandinas y los leucotrienos. Se derivan del ácido araquidónico mediante la acción de las ciclooxigenasas y lipoxigenasas. Estos mediadores proinflamatorios aumentan el flujo sanguíneo local y mejoran la permeabilidad de las células endoteliales para permitir el reclutamiento y la acumulación de leucocitos. Otros mediadores proinflamatorios que se producen posteriormente incluyen citocinas (interleucina-1 beta (IL-1p), factor de necrosis tumoral alfa (TNF-a)), quimiocinas (IL-8) y óxido nítrico. En la segunda fase, la fase de resolución, las prostaglandinas generadas durante la fase inicial activan las vías enzimáticas a lo largo de las cuales el ácido araquidónico se convierte en mediadores químicos con propiedades antiinflamatorias. Se ha descrito que la prostaglandina E<2>(PGE<2>) activa la expresión de la 15-lipoxigenasa que genera lipoxinas antiinflamatorias a partir del ácido araquidónico. Por lo tanto, la resolución de la inflamación es impulsada por la respuesta proinflamatoria. Estos estudios indican que el inicio, la progresión y la terminación del proceso de inflamación están estrictamente controlados. La inflamación prolongada y exagerada se ha asociado a muchos trastornos, incluida la osteoartritis (OA), la artritis reumatoide (AR), la enfermedad de Alzheimer y enfermedades cardiovasculares.

En los tejidos articulares, los condrocitos, los sinoviocitos, los osteoblastos, los osteoclastos, las células de los ligamentos y los tenocitos producen una amplia variedad de mediadores proinflamatorios. Entre estos se encuentra la PGE<2>, que se sabe que desempeña un papel regulador al inducir la producción de otros mediadores, incluidas las citocinas, el óxido nítrico y las enzimas metaloproteinasas (MMP), que degradan el tejido conjuntivo. Debido a su capacidad para inducir metaloproteinasas (MMP), la PGE<2>contribuye a la degradación de la MEC del cartílago. Por añadidura, la PGE<2>promueve la resorción ósea y la formación de osteofitos. La PGE<2>sensibiliza los nociceptores en las terminaciones nerviosas periféricas, contribuyendo de esta manera al desarrollo del dolor inflamatorio. Los niveles de PGE<2>están regulados localmente por la enzima ciclooxigenasa-2 (COX-2). En afecciones patológicas tales como la osteoartritis, la expresión de la COX-2 está sobreexpresada con un aumento concomitante en la producción de PGE<2>.

El TNF-a es un importante mediador de la inflamación y desempeña un papel importante en la regeneración/expansión y destrucción de los tejidos durante la inflamación. En un estado normal, la inflamación está bien regulada por estos factores. Es decir, después de que estos factores causan inflamación con la inducción concomitante de respuestas inmunes, sus niveles disminuyen a un estado normal. Sin embargo, la producción desregulada de TNF-a provoca inflamación crónica, la cual está directamente asociada a una variedad de enfermedades tales como la artritis.

Si bien la inflamación es un proceso inmunológico crucial necesario para resolver una lesión tisular o infección, la liberación crónica de mediadores proinflamatorios como la IL-1p y el TNF-a puede seguir induciendo la producción de mediadores inflamatorios adicionales. Si los niveles no vuelven a un estado normal, la producción desregulada de TNF-a puede conducir a un proceso fisiopatológico perjudicial, incluida la osteoartritis (OA).

El TNF-a desempeña un papel clave en el inicio del proceso inflamatorio. El TNF-a es producido por una variedad de células de la articulación, a saber, condrocitos, osteoblastos, células de la membrana sinovial y células inmunitarias residentes en la articulación, o aquellas que se infiltran en la articulación durante la respuesta inflamatoria. Se detectan niveles elevados de TNF-a en el líquido sinovial, la membrana sinovial, el cartílago y el hueso subcondral de las personas con osteoartritis.

El TNF-a junto con la IL-1p son capaces de inducir el factor nuclear kappa B (NF-<k>B), el regulador maestro de la respuesta inflamatoria. El TNF-a induce la producción de PGE<2>al aumentar la producción de las enzimas clave implicadas en su síntesis, incluida la COX-2, la PGE sintasa microsomal (mPGES-1) y la fosfolipasa A2 soluble (sPLA2). De forma adicional, el TNF-a induce la producción de óxido nítrico sintasa inducible (iNOS), lo que resulta en un aumento de los niveles de óxido nítrico (NO). La producción de otras citocinas, incluidas la IL-6, la IL-17 y la IL-18 y la quimiocina IL-8, está modulada positivamente por el TNF-a. En combinación, la producción de estos mediadores proinflamatorios (prostaglandinas, NO, citocinas y quimiocinas) resulta en última instancia en la degradación del cartílago asociada con la osteoartritis.

El TNF-a es capaz de inhibir la producción de dos componentes clave de la matriz extracelular: el agrecano y el colágeno tipo II. Además, el TNF-a induce la expresión de las agrecanasas ADAMTS4 y ADAMTS-5, enzimas que degradan el agrecano. Estas dos acciones combinadas alteran el equilibrio bioquímico normal entre la síntesis y la degradación de la matriz del cartílago en la articulación, lo que finalmente resulta en la degeneración del cartílago. También se ha demostrado que el TNF-a desempeña un papel en la disfunción mitocondrial, la disminución de la producción de ATP y la apoptosis, lo que contribuye además a la destrucción del cartílago. Si bien el TNF-a desempeña un papel central en el inicio de la respuesta inmunitaria esencial a las lesiones y las infecciones, los efectos perjudiciales que desencadena cuando está desregulado convierten al TNF-a en un objetivo para el desarrollo de productos para el control de la inflamación.

El papel de otros tejidos en el proceso de inflamación también está bien establecido. Ahora se reconoce que la inflamación de la membrana sinovial es un evento clave en la degradación del cartílago en la osteoartritis, particularmente durante las primeras etapas de la enfermedad. La sinovitis se caracteriza por la activación de células similares a macrófagos y células similares a fibroblastos residentes en la membrana sinovial, lo que conduce a la producción de cantidades excesivas de mediadores proinflamatorios, incluidos el TNF-a, la IL-1p y la PGE<2>. La evidencia reciente sugiere que los macrófagos sinoviales son la principal fuente de citocinas en las etapas más tempranas de la osteoartritis y que contribuyen de manera importante al daño del cartílago en la osteoartritis a lo largo de la enfermedad. Las citocinas también inducen la producción de PGE<2>y metaloproteinasas (MMP) activas. Hoy en día está ampliamente aceptado que estos mediadores controlan el equilibrio entre la destrucción y la reparación de la MEC, lo que ha convertido a estas moléculas en objetivos preferidos para la intervención terapéutica. Otros tejidos de la articulación, tales como el hueso subcondral, también producen mediadores proinflamatorios que modulan la salud articular.

Además de los mediadores proinflamatorios, tales como las citocinas y las prostaglandinas, las especies reactivas de oxígeno (ROS) también se han relacionado con la degeneración articular observada en la osteoartritis. Se ha demostrado que el estrés oxidativo inducido por ROS, tal como el óxido nítrico y el peróxido de hidrógeno, provoca la apoptosis de los condrocitos y la degradación de la MEC del cartílago. Es más, se ha comunicado que las ROS activan las vías de transducción de señales que conducen a un aumento de la producción de mediadores proinflamatorios, incluidas las citocinas y las prostaglandinas. Los estudios in vitro han demostrado una relación entre las vías implicadas en la producción de ROS y los mediadores proinflamatorios. Estos estudios apoyan la idea de que los agentes capaces de inhibir tanto el estrés oxidativo como las vías de inflamación serían particularmente útiles en la modulación de la inflamación.

El papel central de la COX-2 y la PGE<2>en la fisiopatología de la osteoartritis se refleja en el uso generalizado de inhibidores selectivos de la COX-2 y de una variedad de medicamentos antiinflamatorios no esteroideos (AINE) no selectivos para el tratamiento del trastorno. Sin embargo, la administración prolongada de estos medicamentos tiene efectos secundarios desfavorables, que incluyen patologías gastrointestinales y trastornos del metabolismo de los proteoglicanos del cartílago. Los estudios en modelos humanos y animales han demostrado alteraciones en la cicatrización y reparación de los huesos con el uso de inhibidores de la COX. Por lo tanto, existe la necesidad de tratamientos alternativos para el control de la inflamación que no se centren en el uso de AINE para inhibir la producción de PGE<2>y otros mediadores proinflamatorios, incluido el TNF-a.

Entre los fármacos desarrollados hasta ahora para dirigirse al TNF-a se encuentran el infliximab (un anticuerpo monoclonal quimérico contra el TNF humano), el adalimumab (un anticuerpo monoclonal totalmente humano), el etanercept (una proteína de fusión TNFRII (p75) dimérica vinculada a la porción Fc de la IgG humana), el golimumab, el CDP571 y la talidomida. Sin embargo, además de inhibir las funciones positivas del TNF-a, estos fármacos pueden provocar resultados no deseados, que incluyen el desarrollo de linfomas e infección. Por lo tanto, existe la necesidad de agentes terapéuticos que regulen la generación excesiva de especies reactivas de oxígeno y la muerte celular inducida por el TNF-a sin bloquear las funciones fisiológicas positivas del TNF-a.

La patente WO 2008/006581 A2 expone nuevas composiciones que comprenden hidroxitirosol y/o oleuropeína (I) y al menos un componente adicional, p. ej., seleccionado del grupo de ligustilida, oleuropeína aglicona, magnolol, honokiol, genisteína, resveratrol, EGCG, extracto de corteza de magnolia, extracto de anacardo yGlycyrrhiza foetida,así como el uso de estas composiciones como medicamento, en particular como medicamento para el tratamiento, cotratamiento o prevención de trastornos inflamatorios. La patente US-2015/290270 A1 expone composiciones antiinflamatorias nutracéuticas o farmacéuticas o de suplementos dietéticos sinérgicas que comprenden una combinación terapéuticamente eficaz de un extracto enriquecido selectivamente en ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico (AKBA) derivado deBoswellia serratay extracto de resina no ácida deBoswellia serrata(BNRE). La(s) composición(es) se puede(n) usar para prevenir, controlar y tratar la inflamación y varias enfermedades relacionadas con la inflamación, incluidos el asma, la osteoartritis, la artritis reumatoide, la disfunción endotelial y similares. La invención expone además la mejora de proteínas o moléculas biomarcadoras proinflamatorias, cuya expresión/producción se altera durante las enfermedades inflamatorias. La patente WO 2006/020588 A1 A expone métodos para tratar una afección inflamatoria con una composición rica en hidroxitirosol. Las mejoras se controlan como una reducción en los niveles de un marcador bioquímico tal como la homocisteína o la proteína C reactiva. La composición se puede administrar en una cantidad y durante un período suficientes para provocar una caída en el nivel del marcador bioquímico.

Resumen

Según la invención, se proporciona una composición y una combinación sinérgica de hidroxitirosol y ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico para su uso en un método de tratamiento, reparación o reducción del daño al tejido conjuntivo tal como se define en las reivindicaciones adjuntas. Según los propósitos y beneficios descritos en la presente memoria, en un aspecto de la presente exposición se proporciona una composición que comprende una combinación sinérgica de hidroxitirosol y ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico. En las realizaciones, el hidroxitirosol se obtiene de un extracto de oliva y el ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico se obtiene de un extracto deBoswellia serrata.La composición se puede formular para la administración oral a un sujeto mamífero, que puede seleccionarse del grupo que consiste en un ser humano, un perro, un gato, un caballo, un camello o una vaca. En otras realizaciones, la composición puede formularse para la administración oral a un sujeto aviar.

En las realizaciones, la composición formulada para la administración oral a un sujeto humano puede comprender ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico en una cantidad de aproximadamente 0,67 a aproximadamente 2,70 mg por kg de peso corporal e hidroxitirosol en una cantidad de aproximadamente 0,15 a aproximadamente 2,50 mg por kg de peso corporal. En las realizaciones, la composición formulada para la administración oral a un sujeto canino puede comprender ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico en una cantidad de aproximadamente 1,24 a aproximadamente 4,98 mg por kg de peso corporal e hidroxitirosol en una cantidad de aproximadamente 0,28 a aproximadamente 4,60 mg por kg de peso corporal.

Las referencias a métodos de tratamiento en el Resumen y la Descripción detallada de la invención en esta descripción deben interpretarse como referencias a las combinaciones sinérgicas de la presente invención para su uso en un método para el tratamiento del cuerpo humano o animal mediante terapia.

En otro aspecto, la presente exposición proporciona un método para tratar, reparar o reducir el daño al tejido conjuntivo causado por uno o más mediadores inflamatorios, que comprende administrar a un sujeto mamífero o aviar que lo necesite una composición administrable por vía oral que comprende una combinación sinérgica de hidroxitirosol y ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico como se ha descrito anteriormente.

En otro aspecto más, la presente exposición proporciona un método para reducir los niveles de uno o más mediadores inflamatorios en el tejido conjuntivo, que comprende administrar a un sujeto mamífero o aviar que lo necesite una composición administrable por vía oral que comprende una combinación sinérgica de hidroxitirosol y ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico como se ha descrito anteriormente.

En la siguiente descripción, se muestran y describen realizaciones de las composiciones y métodos expuestos. Como debe entenderse, las composiciones y los métodos descritos son susceptibles de otras realizaciones diferentes y sus diversos detalles son susceptibles de modificarse en diversos aspectos obvios, todo ello sin apartarse del objeto expuesto y descrito en las siguientes reivindicaciones. En consecuencia, los dibujos y las descripciones se deben considerar de naturaleza ilustrativa y no restrictiva.

Breve descripción de las figuras

Las figuras adjuntas de los dibujos incorporadas en la presente memoria y que forman parte de la memoria descriptiva ilustran varios aspectos de las composiciones expuestas y, junto con la descripción, sirven para explicar ciertos principios de las mismas. En la figura:

La Figura 1 ilustra el efecto del hidroxitirosol y el AKBA en determinadas concentraciones sobre la producción de TNF-a en células de macrófagos murinos RAW 264.7 estimuladas por lipopolisacáridos;

la Figura 2 ilustra el efecto del hidroxitirosol y el AKBA en determinadas concentraciones sobre la producción de TNF-a en células de macrófagos murinos RAW 264.7 estimuladas por lipopolisacáridos; y

la Figura 3 ilustra el efecto del hidroxitirosol y el AKBA en determinadas concentraciones sobre la producción de TNF-a en células de macrófagos murinos RAW 264.7 estimuladas por lipopolisacáridos.

Ahora se hará referencia en detalle a las realizaciones de las composiciones expuestas y a los métodos asociados, cuyos ejemplos se ilustran en las figuras adjuntas de los dibujos.

Descripción detallada

La presente invención proporciona métodos que comprenden la administración de (i) ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico (AKBA) e (ii) hidroxitirosol, a un sujeto mamífero o aviar. El AKBA y el hidroxitirosol se pueden administrar juntos en una composición o forma farmacéutica, o se pueden administrar por separado. En ciertas realizaciones, el AKBA y el hidroxitirosol se administran juntos en una composición o forma farmacéutica, o por separado, en el trascurso de un período en el que sus propiedades terapéuticas se solapan. En las realizaciones, las composiciones se administran por separado en el trascurso de 1 hora. En otras realizaciones, las composiciones se administran por separado en el trascurso de 30 minutos. En otras realizaciones adicionales, las composiciones se administran por separado en el trascurso de 5 minutos.

El término “ sujeto mamífero” es cualquier mamífero, incluidos, aunque no de forma limitativa, seres humanos, perros, gatos, caballos, vacas y camellos. El término “ sujeto aviar” se refiere a las aves.

El hidroxitirosol es un tipo de fitoquímico fenólico que se encuentra en partes del olivo. El hidroxitirosol tiene el nombre IUPAC de 4-(2-hidroxietil)-1,2-bencenodiol y se refiere a un compuesto que tiene la siguiente estructura:

Como se utiliza en la presente memoria, el hidroxitirosol puede ser de origen sintético o puede obtenerse de fuentes naturales tales como de productos y subproductos derivados del olivo mediante extracción y/o purificación. De forma adicional, el hidroxitirosol se puede administrar en forma de extractos que comprenden hidroxitirosol obtenibles a partir de productos y subproductos derivados del olivo. Los productos y subproductos de los olivos abarcan las aceitunas, las hojas de olivo, las pulpas de aceituna, el aceite de oliva, el alpechín y las heces de aceite de oliva, sin limitarse a los mismos. Basándose en el procedimiento de extracción, un experto en la materia puede ajustar fácilmente la cantidad y, respectivamente, la relación del hidroxitirosol. En las realizaciones, el hidroxitirosol se deriva de aceitunas que pueden obtenerse de fuentes convencionales y disponibles comercialmente, tales como los productores.

El hidroxitirosol empleado en la presente memoria se puede preparar mediante varios métodos conocidos en la técnica. Las aceitunas pueden procesarse por cualquier medio adecuado para obtener las composiciones descritas. Por ejemplo, las aceitunas y/u hojas de olivo se pueden prensar para obtener una mezcla que incluye aceite de oliva, alpechín y subproductos sólidos. El hidroxitirosol se puede obtener directamente de la mezcla o la mezcla se puede fraccionar y/o purificar para obtener el hidroxitirosol. Las composiciones se pueden fraccionar y/o purificar mediante varios métodos conocidos por el experto en la técnica. Los ejemplos de métodos de fraccionamiento incluyen la división con un disolvente orgánico, la cromatografía, la cromatografía líquida de alta presión (HPLC) o el uso de fluidos supercríticos.

Ejemplos de referencias que tratan sobre la extracción de hidroxitirosol de hojas de olivo son las patentes WO02/18310 A1, US-2002/0198415 A1, WO2004/005228 A1, US- 6,416,808 y US-2002/0058078 A1, que exponen un método para la hidrólisis ácida del alpechín durante 2 a 12 meses hasta que se haya convertido al menos el 90 % de la oleuropeína presente. Un método de extracción de hidroxitirosol de las aceitunas, las pulpas de aceituna, el aceite de oliva y el alpechín se describe en las patentes US- 6,361,803 y WO01/45514 A1 y en la patente US-2002/0004077 A1. La patente EP 1582512 A1 describe una extracción de hidroxitirosol de hojas de olivo. Un método para obtener hidroxitirosol a partir del alpechín de aceitunas deshuesadas se expone en la patente US-2004/0039066 A1, en los párrafos [0080]-[0091]. Similarmente, son adecuados para su uso en la presente invención los extractos de oliva que contienen hidroxitirosol comercialmente disponibles.

La biodisponibilidad oral de una dosis única de 2,5 mg/kg de hidroxitirosol en sujetos humanos se ha descrito en la bibliografía, con una concentración plasmática pico observada de 1,11 ± 0,20 |jmol/l. González-Santiago, y col., Pharmacological research, 61.4 (2010): 364-370. Los expertos en la técnica pueden determinar los cálculos de dosificación evaluando el peso corporal, el área de superficie y las diferencias entre especies. Similarmente, un experto en la técnica puede calcular las dosificaciones para la extrapolación entre especies utilizando métodos de conversión de dosis convencionales.

La tasa de dosificación típica de hidroxitirosol es de aproximadamente 0,001 mg/kg a aproximadamente 2,0 mg/kg. En algunas realizaciones, la dosificación diaria típica es de al menos 0,1 mg y hasta 300 mg para sujetos humanos y no humanos. La dosificación diaria se refiere a la dosificación total administrada en un período de 24 horas.

Según algunas realizaciones ilustrativas, el hidroxitirosol se puede administrar a una dosis de 0,15 a 2,50 mg por kg de peso corporal de un sujeto humano (es decir, 9-250 mg para un sujeto humano de 60 kg).

Según algunas realizaciones ilustrativas, el hidroxitirosol se puede administrar a una dosis de 0,28 a 4,60 mg por kg de peso corporal de un sujeto canino (es decir, 2,8-46 mg para un sujeto canino de 10 kg).

El hidroxitirosol se puede administrar con una frecuencia de una vez por semana a cinco veces al día. En las realizaciones, el hidroxitirosol se administra de una vez cada dos días a tres veces al día. En realizaciones alternativas, el hidroxitirosol se administra una o dos veces al día. En otras realizaciones adicionales, el hidroxitirosol se administra una vez al día. El hidroxitirosol se puede tomar con o sin la administración de alimentos.

Se ha informado que los fitoquímicos extraídos deBoswellia serratason activos en el tratamiento de numerosas afecciones y enfermedades. La resina de goma deBoswellia serrataha sido utilizada durante mucho tiempo para el tratamiento de la artritis reumatoide y la gota por los practicantes de la medicina ayurvédica en el sistema de medicina indio. Diversos extractos de la resina de goma han demostrado una potente actividad antiinflamatoria y antiaterogénica en animales de laboratorio. La actividad biológica del extracto se ha relacionado con los componentes de la fracción de ácido boswélico. El ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico (AKBA) ha sido identificado como el compuesto más activo en los extractos deBoswellia serrata.Se ha informado que los extractos deBoswellia serrataque contienen AKBA inhiben la 5-lipoxigenasa y la metaloproteinasa-3 de la matriz (MMP-3)in vitro,como se describe en la patente WO2010/029578 A2. La patente WO2010/029578 A2 informa similarmente de la eficacia antiinflamatoria de las composiciones que comprenden extracto deBoswellia serrataenriquecido selectivamente en AKBA hasta un 30 %in vivo,incluidas reducciones significativas en los biomarcadores séricos TNF-a e IL-1p.

La biodisponibilidad de la administración de una dosis única de 100 mg/kg de extracto deBoswellia serrataestandarizado al 30 % de AKBA en suero de rata se ha descrito en la bibliografía, y se ha descrito una concentración sérica pico observada de 2,0 microgramos/ml. Sengupta, y col. Molecular and cellular biochemistry, 354.1-2 (2011): 189-197. Los expertos en la técnica pueden determinar los cálculos de dosificación evaluando el peso corporal, el área de superficie y las diferencias entre especies. Similarmente, un experto en la técnica puede calcular las dosificaciones para la extrapolación entre especies utilizando métodos de conversión de dosis convencionales.

La tasa de dosificación típica de AKBA es de aproximadamente 0,01 mg/kg a aproximadamente 10,0 mg/kg. En algunas realizaciones, la dosificación diaria típica es de al menos 1 mg y a aproximadamente 1 g para sujetos humanos y no humanos. La dosificación diaria se refiere a la dosificación total administrada en un período de 24 horas.

Según algunas realizaciones ilustrativas, el AKBA se puede administrar a una dosis de 0,67 a 2,70 mg por kg de peso corporal de un sujeto humano (es decir, 40-162 mg para un sujeto humano de 60 kg).

Según algunas realizaciones ilustrativas, el AKBA se puede administrar a una dosis de 1,24 a 4,98 mg por kg de peso corporal de un sujeto canino (es decir, 12,4-49,8 mg para un sujeto canino de 10 kg).

El AKBA se puede administrar con una frecuencia de una vez por semana a cinco veces al día. En ciertas realizaciones, el AKBA se administra de una vez cada dos días a tres veces al día. En realizaciones alternativas, el AKBA se administra una o dos veces al día. En otras realizaciones adicionales, el AKBA se administra una vez al día. El AKBA se puede tomar con o sin la administración de alimentos.

En algunas realizaciones, la combinación de (i) hidroxitirosol y (ii) AKBA demuestra sinergia. La sinergia se refiere al efecto en donde una combinación de dos o más componentes proporciona un resultado que es mayor que la suma de los efectos producidos por los agentes cuando se utilizan solos. En ciertas realizaciones, el resultado es estadísticamente significativo y mayor que el efecto aditivo. En algunas realizaciones, la combinación de hidroxitirosol y AKBA tiene un efecto mayor y estadísticamente significativo que cada componente por sí solo. En ciertas realizaciones, la combinación de hidroxitirosol y AKBA demuestra sinergia en uno o más de los siguientes: prevenir, tratar, reparar o reducir el daño a los tejidos conjuntivos; reducir los síntomas asociados con el daño al tejido conjuntivo en un sujeto aviar o mamífero; y reducir los niveles de uno o más mediadores inflamatorios en el tejido conjuntivo.

La presente invención proporciona un método para prevenir, tratar, reparar, reducir el daño o controlar la inflamación de los tejidos conjuntivos, proteger el cartílago o reducir los síntomas asociados con el daño al tejido conjuntivo en un sujeto aviar o mamífero, que comprende administrar al sujeto: (i) hidroxitirosol y (ii) AKBA. El término “ tejido conjuntivo” incluye, aunque no de forma limitativa, cartílago, huesos, membrana sinovial, ligamentos, meniscos y tendones. En algunas realizaciones, la administración de (i) hidroxitirosol y (ii) AKBA puede prevenir, tratar, reparar o reducir el daño a los tejidos conjuntivos. El daño al tejido conjuntivo puede ser el resultado de una lesión física o puede representar un “ desgaste” por el uso continuado, el peso y la edad, por ejemplo, a causa de la osteoartritis. El daño al tejido conjuntivo también puede ser el resultado de enfermedades tales como la artritis reumatoide, los trastornos sinoviales, las enfermedades reumáticas relacionadas con infecciones y los trastornos inflamatorios del tejido conjuntivo. En algunas realizaciones, la administración de (i) hidroxitirosol y (ii) AKBA puede reducir los síntomas asociados con el daño al tejido conjuntivo en un sujeto aviar o mamífero. Los síntomas asociados con el daño al tejido conjuntivo incluyen, aunque no de forma limitativa: dolor, incomodidad, presión, inflamación, rigidez y/o hinchazón.

La presente invención también proporciona un método para reducir los niveles de uno o más mediadores inflamatorios en el tejido conjuntivo, que comprende administrar a un sujeto aviar o mamífero: (i) hidroxitirosol y (ii) AKBA. Los mediadores inflamatorios incluyen, aunque no de forma limitativa, el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-a), prostaglandinas tales como la prostaglandina E<2>(PGE<2>), citocinas tales como la interleucina-1p (IL-1p) y quimiocinas, leucotrienos, óxido nítrico y especies reactivas de oxígeno.

La administración de hidroxitirosol y AKBA también puede ser útil para tratar, prevenir y reducir el daño o reducir los síntomas asociados con afecciones que afectan al sistema cardiovascular, el sistema nervioso, el sistema musculoesquelético y el sistema gastrointestinal. En un aspecto, la presente exposición proporciona composiciones y métodos para prevenir y/o reducir una respuesta inflamatoria y/o inflamación en un sujeto. En un aspecto, la presente exposición proporciona composiciones y métodos para controlar los trastornos inflamatorios o, generalmente, reducir la carga inflamatoria de un animal humano o no humano. En consecuencia, en una realización, la presente invención proporciona un método para prevenir y/o reducir una respuesta inflamatoria y/o inflamación en uno o más tejidos, incluido el método administrar a uno o más tejidos las composiciones de la presente invención.

La presente invención también proporciona una composición administrable por vía oral que comprende: (i) hidroxitirosol y (ii) AKBA. La composición administrable por vía oral es cualquier forma farmacéutica que se pueda administrar por vía oral, tal como, aunque no de forma limitativa: una cápsula, un comprimido, un polvo que se puede dispersar en una bebida, una pasta, en forma granulada, un líquido tal como una solución, suspensión o emulsión, una cápsula de gel blando/masticable, una barra masticable u otra forma farmacéutica conveniente, tal como un líquido oral en una cápsula, como es conocido en la técnica.

La composición administrable por vía oral puede contener uno o más ingredientes farmacéuticos no activos (también conocidos generalmente en la presente memoria como “ excipientes” ). Los ingredientes no activos, por ejemplo, sirven para solubilizar, suspender, espesar, diluir, emulsionar, estabilizar, conservar, proteger, colorear, dar sabor y convertir los ingredientes activos en una preparación aplicable y efectiva que sea segura, conveniente y aceptable de cualquier otra manera para su utilización. Los excipientes pueden ser excipientes farmacéuticamente aceptables. Los ejemplos de clases de excipientes farmacéuticamente aceptables incluyen lubricantes, agentes tamponadores, estabilizantes, agentes expansores, pigmentos, agentes colorantes, agentes saborizantes, rellenos, agentes de carga, fragancias, modificadores de la liberación, adyuvantes, plastificantes, aceleradores de flujo, agentes desmoldantes, polioles, agentes granulantes, diluyentes, aglutinantes, tampones, absorbentes, agentes deslizantes, adhesivos, antiadherentes, acidulantes, suavizantes, resinas, demulcentes, solventes, surfactantes, emulsionantes, elastómeros y mezclas de los mismos.

Las composiciones administrables por vía oral pueden comprender además uno o más ingredientes activos. Por ejemplo, las composiciones pueden comprender además uno o más fármacos o suplementos nutricionales. En algunas realizaciones, las composiciones pueden también comprender compuestos que son beneficiosos para el tejido conjuntivo. Los ejemplos incluyen, aunque no de forma limitativa, glicosaminoglicanos tales como la condroitina, aminoazúcares tales como la glucosamina, metilsulfonilmetano (MSM), colágeno (incluido el colágeno de tipo II), extractos de té verde, extractos de scutellaria, extractos de acacia, extractos de cúrcuma, curcumina, complejo de cetil miristoleato (CMO) y membrana de cáscara de huevo.

Ejemplos

Ejemplo 1: Efecto del hidroxitirosol y el AKBA sobre la producción de TNF-a en las células de macrófagos murinos RAW 264.7 estimuladas por lipopolisacáridos (LPS).

Las células de macrófagos murinos RAW 264.7 se pretrataron con 60 nM, 160 nM o 1 pM de hidroxitirosol (HT) (98 % de pureza, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) solamente, 0,28 pg/ml, 0,56 pg/ml o 1,124 pg/ml de AKBA (administrado como 5-LOXIN®, estandarizado al 30 % de AKBA, PLT Health Solutions, Inc.) solamente o cada una de las tres concentraciones de HT combinada con cada una de las tres concentraciones de AKBA durante 24 horas. A continuación, las células se estimularon durante 24 horas adicionales con 1 pg/ml de lipopolisacárido (LPS). El LPS es una endotoxina en la pared celular bacteriana capaz de inducir una respuesta inflamatoria que incluye un aumento de la producción de TNF-a. Los sobrenadantes celulares se analizaron para determinar la producción de TNF-a. Se realizaron comparaciones estadísticas mediante análisis de varianza unidireccional (ANOVA) y se llevó a cabo un análisispost hocde Tukey, en el que se consideraron significativas las diferencias con un valor de P<0,05. Los datos se presentan como la media /-1 SD.

Se observaron mayores reducciones estadísticamente significativas en los niveles de TNF-a cuando cada una de las tres concentraciones de HT se combinó con AKBA en comparación con la reducción con cualquiera de los agentes por separado. La combinación de 60 nM de HT con 0,28 pg/ml, 0,56 pg/ml o 1,124 pg/ml de AKBA resultó en una mayor reducción de la producción de TNF-a que el HT (P<0,001) o el AKBA (P<0,001) solos (Figura 1). Se alcanzó significación estadística en la reducción de TNF-a en células tratadas con 160 nM de HT junto con 0,56 pg/ml de AKBA en comparación con el HT (P<0,001) o el AKBA (P=0,001) solos (Figura 2). El tratamiento de las células con 1 pM de HT y 0,28 pg/ml, 0,56 pg/ml o 1,124 pg/ml de AKBA también resultó en reducciones estadísticamente significativas en comparación con el Ht solo (P<0,001, P= 0,002 y P<0,001, respectivamente) y el AKBA solo (P<0,001, P=0,02 y P= 0,004, respectivamente) (Figura 3).

Claims (13)

REIVINDICACIONES

1. Una composición que comprende una combinación sinérgica de hidroxitirosol y ácido 3-O-acetil-11-cetop-boswélico.

2. La composición de la reivindicación 1, en donde el hidroxitirosol se obtiene de un extracto de oliva.

3. La composición de la reivindicación 1, en donde el ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico se obtiene de un extracto deBoswellia serrata.

4. La composición de la reivindicación 1, formulada para la administración oral a un sujeto mamífero.

5. La composición de la reivindicación 4, en donde el sujeto mamífero se selecciona del grupo que consiste en un ser humano, un perro, un gato, un caballo, un camello o una vaca.

6. La composición de la reivindicación 1, formulada para la administración oral a un sujeto aviar.

7. La composición de la reivindicación 5, en donde la composición formulada para la administración oral al sujeto humano comprende ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico en una cantidad de 40 a 162 mg e hidroxitirosol en una cantidad de 9 a 250 mg.

8. La composición de la reivindicación 5, en donde la composición formulada para la administración oral a un sujeto canino comprende ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico en una cantidad de 12,4 a 49,8 mg e hidroxitirosol en una cantidad de 2,8 a 46 mg.

9. Una combinación sinérgica de hidroxitirosol y ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico para su uso en un método de tratamiento, reparación o reducción del daño al tejido conjuntivo.

10. Una combinación sinérgica para su uso según la reivindicación 9, en donde dicho daño al tejido conjuntivo es artritis.

11. Una combinación sinérgica para su uso según la reivindicación 10, en donde dicha artritis dañina es osteoartritis o artritis reumatoide.

12. Una combinación sinérgica para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 9 a 11, en donde se proporciona una composición administrable por vía oral que comprende la combinación sinérgica que se formula para un sujeto humano que comprende ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico en una cantidad de 40 a 162 mg e hidroxitirosol en una cantidad de 9 a 250 mg.

13. Una combinación sinérgica para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 9 a 11, en donde se proporciona una composición administrable por vía oral que comprende la combinación sinérgica que se formula para un sujeto canino que comprende ácido 3-O-acetil-11-ceto-p-boswélico en una cantidad de 12,4 a 49,8 mg e hidroxitirosol en una cantidad de 2,8 a 46 mg.