ES2968648T3 - Kit, procedimiento y montaje para preparar una muestra - Google Patents

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ES2968648T3 ES14793054T ES14793054T ES2968648T3 ES 2968648 T3 ES2968648 T3 ES 2968648T3 ES 14793054 T ES14793054 T ES 14793054T ES 14793054 T ES14793054 T ES 14793054T ES 2968648 T3 ES2968648 T3 ES 2968648T3
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Abstract

Un kit (1) para preparar una muestra de material comprende un recipiente (2) que tiene un extremo abierto (4); una pipeta (6) para transferir el material hacia y desde el recipiente (2), teniendo la pipeta (6} una punta abierta (8) para extraer y el material biológico; una tapa (10) configurada para sellar el extremo abierto (4) del recipiente (2) y para permitir que la punta de la pipeta (8) entre en el recipiente (2) a través de la tapa (10). La tapa (10) y la pipeta (6) comprenden porciones de tope cooperantes (14, 16) para. evitando que la pipeta (6) avance dentro del recipiente (2) al acoplarse las porciones de tope (14, 16). La pipeta (6}, la tapa (10) y el recipiente (2) están configurados mutuamente de manera que al acoplarse. de las porciones de tope cooperantes (14, 16), la punta (8) se detiene por encima de un primer nivel predeterminado (18} pero por debajo de un segundo nivel predeterminado (20) en el recipiente (2); siendo el primer nivel predeterminado (18) un también se proporcionan el nivel para una primera sustancia; siendo el segundo nivel predeterminado (20) un nivel para la segunda sustancia en solución, y siendo el primer nivel (18) inferior al segundo nivel (20). (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Kit, procedimiento y montaje para preparar una muestra
Campo de la invención
La presente invención proporciona un kit, un procedimiento y un conjunto para preparar una muestra, tal como, por ejemplo, pero sin limitación, para preparar una muestra de material biológico para análisis.
Antecedentes de la invención
En la industria biotecnológica, los kits de lisis se utilizan para preparar material biológico para su análisis convirtiendo el material biológico en lisato. Un kit de lisis comprende un tubo, una tapa que sella el tubo y una punta de pipeta para colocar una muestra de material biológico en el tubo y para retirar el lisato del tubo. El tubo puede contener perlas para ayudar a romper mecánicamente las células de la muestra y homogeneizar el material celular roto. El tubo tam bién contiene una solución tampón de lisis que normalmente comprende un reactivo líquido para ayudar a desintegrar aún más las células sin dañar los componentes celulares que se van a analizar. El lisato se retira del tubo con la punta de la pipeta y se transfiere para su análisis. El kit de lisis debe cumplir una serie de requisitos que incluyen:
- La tapa debe sellar con seguridad el tubo de lisis que contiene la solución tampón de lisis y las perlas.
- La punta de la pipeta tiene que entrar en el tubo de lisis sin necesidad de abrir el tubo de lisis o sin necesidad de quitar el tapón.
- Fácil perforación del tapón, ya que el operador sólo puede aplicar una fuerza limitada y, en segundo lugar, debido a la fragilidad de la punta de pipeta utilizada.
- La punta de la pipeta debe poder retirarse fácilmente del tubo de lisis.
- Se debe limitar la evaporación de la solución tampón de lisis.
- La tapa debe proporcionar un buen sellado durante el transporte/almacenamiento y durante el batido de perlas, incluso si la tapa ha sido perforada.
- Se debe evitar la contaminación cruzada biológica incluso si se ha perforado el tapón.
- El tapón debe ser compatible con la punta de la pipeta.
Además, la punta de la pipeta debe estar correctamente colocada en el tubo para dispensar la muestra y aspirar el lisato. Hasta ahora se han propuesto muchas soluciones para abordar los requisitos anteriores. Sin embargo, sigue existiendo la necesidad de mejorar el posicionamiento de la punta de la pipeta en el tubo para evitar que componentes no deseados del lisato entren en la pipeta durante la aspiración.
El documento EP0126390 A2 describe un dispositivo de transferencia de fluido que tiene un receptáculo que tiene fracciones superior e inferior dispuestas en él y un vástago que tiene una longitud adecuada para que toda la fracción superior pueda ser recogida por el vástago. "El pretratamiento es clave en GPP" por Mai Le (https://www.luminexcorp.com/blog/pre-treatment-is-key-in-gpp/ publicado el 19/02/2013) describe un proceso de preparación de una muestra para análisis centrifugando la muestra en un tubo Bertin en presencia de perlas facilitadoras de lisis y un tampón de lisis.
Por consiguiente, el objeto de la presente invención es proporcionar un kit, un procedimiento y un conjunto para pre parar una muestra de material que proporcione un posicionamiento mejorado de la pipeta en el tubo en comparación con las disposiciones existentes.
Sumario de la invención
De acuerdo con un primer aspecto de la invención, se proporciona un kit para preparar una muestra de material de acuerdo con la reivindicación 1.
Al menos la segunda sustancia puede ser un líquido. La primera y la segunda sustancias no son miscibles. Preferible mente, el kit es un kit de lisis para preparar una muestra de material biológico para análisis. Preferiblemente, la primera sustancia comprende un medio facilitador de la lisis. Los medios facilitadores de la lisis pueden comprender perlas.
Preferiblemente, la segunda sustancia comprende una solución tampón de lisis. En uso, la primera sustancia está cubierta por la segunda sustancia en el recipiente.
El primer nivel predeterminado es un nivel superior de la primera sustancia y el segundo nivel predeterminado es un nivel superior de la segunda sustancia.
Preferiblemente, con la aplicación de las porciones de tope cooperantes, la punta de la pipeta queda separada una distancia predeterminada por encima del primer nivel predeterminado.
La punta de la pipeta se coloca aproximadamente a media distancia entre el primer y el segundo nivel.
El recipiente puede tener una marca de primer nivel que indica el primer nivel predeterminado.
El recipiente puede tener una marca de segundo nivel que indica el segundo nivel predeterminado.
Las cantidades de la primera sustancia, de la segunda sustancia y del material pueden fluctuar dentro de los rangos respectivos predeterminados de cantidades permitidas.
La tapa puede definir una ranura para recibir la punta de la pipeta. Preferiblemente, la tapa es elásticamente deformable para una fácil inserción y extracción de la punta de pipeta a través de la ranura. La tapa puede ser una tapa de silicona o una tapa de elastómero termoplástico (TPE). Preferiblemente, la ranura es autosellable. Preferiblemente, partes de la tapa alrededor de la ranura están configuradas para limpiar la punta de la pipeta al retirar la punta de la pipeta del recipiente para evitar que el material que se aspira se adhiera a las superficies externas de la punta de la pipeta para evitar la contaminación cruzada.
La tapa tiene el tamaño y la forma necesarios para soportar una presión de aproximadamente 0,2 MPa. La capacidad del tapón para soportar una presión de hasta 0,2 MPa garantiza la estanqueidad y evita la extracción accidental del tapón cuando se extrae la punta de la pipeta del tubo.
El recipiente puede presentarse en forma de un tubo.
El kit comprende instrucciones para utilizar el kit para preparar una muestra de material para análisis.
Preferiblemente, se proporciona una pluralidad de kits en los que las cantidades respectivas de la primera sustancia, la segunda sustancia y el material de muestra y los respectivos primeros niveles predeterminados son los mismos. Preferiblemente, los segundos niveles predeterminados son los mismos en la pluralidad de kits.
De acuerdo con un segundo aspecto de la invención, se proporciona un procedimiento para preparar una muestra de material de acuerdo con la reivindicación 10.
Preferiblemente, al menos la segunda sustancia es un líquido. La primera y segunda sustancias no son miscibles. El procedimiento implica preparar una muestra de material biológico para análisis sometiendo la muestra a lisis. La pri mera sustancia comprende un medio facilitador de la lisis. Los medios facilitadores de la lisis pueden comprender perlas. La segunda sustancia comprende una solución tampón de lisis.
Preferiblemente, el primer nivel predeterminado es un nivel superior de la primera sustancia y el segundo nivel prede terminado es un nivel superior de la segunda sustancia.
El procedimiento incluye además los pasos de:
colocar una cantidad predeterminada de material biológico de muestra en la segunda sustancia en el recipiente; cubriendo la mezcla resultante la primera sustancia y, preferiblemente, estando dispuesto un nivel superior de la mezcla en el recipiente en o por encima del segundo nivel predeterminado; y
someter la muestra a lisis en el recipiente.
Preferiblemente, al aplicarse las porciones de tope cooperantes, la punta de la pipeta queda separara una distancia predeterminada por encima del primer nivel predeterminado.
La punta de la pipeta se coloca aproximadamente a medio camino entre el primer y el segundo nivel.
El recipiente puede tener una marca de primer nivel que indica el primer nivel predeterminado.
El recipiente puede tener una marca de segundo nivel que indica el segundo nivel predeterminado.
Las cantidades predeterminadas respectivas de la primera sustancia, la segunda sustancia y el material pueden fluc tuar dentro de los respectivos rangos predeterminados de cantidades permitidas.
El procedimiento puede incluir preparar una pluralidad de muestras de material para análisis en una pluralidad corres pondiente de recipientes, en el que las cantidades respectivas de la primera sustancia, de la segunda sustancia y del material de muestra y los primeros niveles predeterminados respectivos son los mismos. Preferiblemente, los segun dos niveles predeterminados son los mismos.
De acuerdo con un tercer aspecto de la invención, se proporciona un conjunto para preparar una muestra de material para análisis de acuerdo con la reivindicación 12.
Preferiblemente, al menos la segunda sustancia es un líquido. La primera y segunda sustancias no son miscibles. Preferiblemente, el conjunto es un conjunto de lisis para preparar una muestra de material biológico para análisis. Preferiblemente, la primera sustancia comprende un medio facilitador de la lisis. Los medios facilitadores de la lisis pueden comprender perlas. Preferiblemente, la segunda sustancia comprende una solución tampón de lisis. Preferi blemente, el primer nivel predeterminado es un nivel superior de la primera sustancia y el segundo nivel predetermi nado es un nivel superior de la segunda sustancia.
Preferiblemente, la segunda sustancia está dispuesta en el recipiente junto con una cantidad predeterminada de ma terial biológico de muestra, cubriendo la mezcla resultante la primera sustancia y, preferiblemente, estando dispuesto un nivel superior de la mezcla en el recipiente en o por encima del segundo nivel predeterminado.
Preferiblemente, con la aplicación de las porciones de tope cooperantes, la punta de la pipeta queda separara una distancia predeterminada por encima del primer nivel predeterminado.
La punta de la pipeta se coloca aproximadamente a medio camino entre el primer y el segundo nivel.
El recipiente puede tener una marca de primer nivel que indica el primer nivel predeterminado.
El recipiente puede tener una marca de segundo nivel que indica el segundo nivel predeterminado.
Las cantidades predeterminadas respectivas de la primera sustancia, la segunda sustancia y el material pueden fluc tuar dentro de los rangos predeterminados respectivos de cantidades permitidas.
Preferiblemente, se proporciona una pluralidad de conjuntos en los que las cantidades respectivas de la primera sus tancia, la segunda sustancia y el material de muestra y los primeros niveles predeterminados respectivos y los segun dos niveles predeterminados son los mismos en la pluralidad de conjuntos.
De esta manera, de acuerdo con la presente invención, la punta de la pipeta siempre se detiene automáticamente a la misma distancia por encima de un nivel superior de la primera sustancia (situada en el primer nivel predeterminado), evitando así el error humano y asegurando que se recoja la muestra. desde la parte correcta del recipiente para que no entre material no deseado en la pipeta durante la aspiración.
Se apreciará que aunque la presente invención es beneficiosa en una aplicación de la lisis, otros usos están de hecho dentro del alcance de la presente invención en los que es necesario aspirar una sustancia específica sin aspirar otra sustancia no miscible del mismo recipiente.
Todas las características esenciales, preferidas u opcionales de cualquiera de los aspectos primero, segundo o tercero de la presente invención se pueden proporcionar junto con otro de los aspectos primero, segundo o tercero de la presente invención cuando sea apropiado.
Descripción detallada de la invención
A continuación se describirá una realización de la presente invención, únicamente a modo de ejemplo, con referencia a los dibujos que se acompañan, en los que:
La figura 1 es un alzado en sección transversal de un conjunto de acuerdo con la invención.
Con referencia a la figura 1, se describirán conjuntamente un kit, un procedimiento y un conjunto para preparar una muestra de acuerdo con la presente invención en su uso para preparar una muestra de material biológico para análisis mediante lisis.
Como se muestra en la figura 1, un conjunto de lisis (que puede montarse a partir de un kit de lisis proporcionado por la presente invención) de la presente invención se indica generalmente con el número de referencia 1. El conjunto 1 incluye un recipiente provisto en forma de un tubo 2. en la realización actualmente descrita. El tubo 2 tiene un extremo abierto 4. El conjunto 1 comprende además una pipeta 6 para transferir material biológico hacia y desde el tubo 2. La pipeta 6 tiene una punta abierta 8 para aspirar y dispensar el material biológico.
Una tapa 10 sella el extremo abierto 4 del tubo 2. La tapa 10 está configurada para permitir que la punta de pipeta 8 entre en el tubo 2 a través de la tapa 10. Para este propósito, la tapa 10 define una ranura autosellable 12 para recibir la punta de pipeta 8. La tapa 10 está hecha preferiblemente de silicona o TPE para hacer que la tapa 10 sea elástica mente deformable para facilitar la inserción y extracción de la punta de pipeta 8 a través de la ranura 12. Partes de la tapa 10 alrededor de la ranura 12 limpian la punta de pipeta 8 al retirar la punta de pipeta 8 del tubo 2 para evitar que el material biológico de muestra y el lisato obtenido en el tubo 2 se adhieran a las superficies externas de la punta de pipeta 8 para evitar la contaminación cruzada. Además, la tapa 10 tiene un tamaño y una forma para soportar una presión de aproximadamente 0,2 MPa. Aunque la tapa 10 en la figura 1 se muestra con una base cónica 24, otras configuraciones, tales como una base plana con una ranura, están dentro del alcance de la presente invención.
La tapa 10 y la pipeta 6 comprenden porciones de tope cooperantes proporcionadas por las caras de los salientes 14, 16 de la pipeta 6 y la tapa 10, respectivamente, para evitar que la pipeta 6 avance dentro del tubo 2 al acoplarse las caras de los salientes 14, 16. Como se muestra en la figura 1, tras la aplicación de las caras 14, 16 del saliente cooperante, la punta 8 de la pipeta 6 se detiene por encima de un primer nivel predeterminado 18 pero por debajo de un segundo nivel predeterminado 20 en el tubo 2. El primer nivel predeterminado 18 es un nivel de medios facilitadores de lisis proporcionados en forma de perlas 22 en el tubo 2. El segundo nivel 20 por encima del primer nivel 18 es un nivel de la solución tampón de lisis resultante 26 en el tubo 2. Por conveniencia, aunque no se muestra en el dibujo, el tubo 2 puede tener una primera marca de nivel que indica el primer nivel predeterminado 18 y una segunda marca de nivel que indica el segundo nivel predeterminado 20.
En la práctica, una cantidad predeterminada de una primera sustancia en forma de perlas facilitadores 22 de la lisis se coloca en el tubo 2 en o por debajo del primer nivel predeterminado 18 y una cantidad predeterminada de una segunda sustancia en forma de solución tampón de lisis se coloca en el tubo 2. La primera y la segunda sustancia no son miscibles.
A continuación se sella el extremo abierto 4 del tubo 2 con la tapa 10. A continuación se coloca una cantidad prede terminada de material biológico de muestra en el tubo 2 mediante la pipeta 6 que se inserta en el tubo 2 a través de la ranura 12 en la tapa 10. Las cantidades predeterminadas respectivas de perlas 22, solución tampón de lisis 26 y material biológico de muestra pueden fluctuar dentro de los rangos predeterminados respectivos de cantidades per mitidas. El nivel superior de la solución resultante en el tubo 2 queda dispuesto en el tubo 2 en o por encima del segundo nivel 20. La muestra a continuación se somete a lisis en el tubo 2. Para recuperar el lisato obtenido del tubo 2, la punta de pipeta 8 se inserta en el tubo 2 a través de la ranura 12 en la tapa 10 hasta que las caras de salientes cooperantes 14, 16 de la pipeta 6 y de la tapa 10, respectivamente, se aplican y la punta 8 de la punta de pipeta 6 se detiene a un nivel. 28 aproximadamente a medio camino entre el primer y el segundo nivel 18, 20 a una distancia predeterminada por encima del primer nivel predeterminado 18. A continuación se aspira el lisato y se puede transferir al sitio de análisis. De esta manera, la punta 8 de la pipeta 6 siempre se detiene automáticamente a la misma distancia por encima de las perlas 22, evitando de esta manera el error humano y asegurando que la muestra de material biológico y el lisato se recojan de la parte correcta de la solución en el tubo. 2 y durante la aspiración no entra material no deseado en la pipeta 6.
Los pasos anteriores se repiten con una pluralidad de conjuntos 1 para preparar una pluralidad de muestras de material biológico para análisis y las cantidades respectivas de perlas 22, solución tampón de lisis 26 y muestra de material biológico mientras se mantienen iguales los respectivos primeros niveles predeterminados 18 y los segundos niveles predeterminados 20 en la pluralidad de conjuntos 1.
Se apreciará que, aunque se ha descrito una realización preferida de la presente invención en una aplicación para lisis, otros usos se encuentran ciertamente dentro del alcance de la presente invención en los que es necesario aspirar una sustancia específica de un recipiente que contiene al menos dos sustancias no miscibles sin aspirar la segunda sustancia del mismo recipiente.
Aunque más arriba se han descrito realizaciones específicas de la presente invención, se apreciará que son posibles modificaciones dentro del alcance de la presente invención tal como se define en las reivindicaciones adjuntas.

Claims (12)

REIVINDICACIONES
1. Un kit para preparar una muestra de material, comprendiendo el kit
un recipiente (2) que tiene un extremo abierto (4);
una pipeta (6) para transferir el material hacia y desde el recipiente (2), teniendo la pipeta (6) una punta abierta (8) para aspirar y dispensar el material;
una tapa (10) configurada para sellar el extremo abierto (4) del recipiente (2) de manera hermética y para permitir que la punta de pipeta (8) entre en el recipiente (2) a través de la tapa (10)
la tapa (10) y la pipeta (6) comprenden porciones de tope (14, 16) que cooperan para evitar que la pipeta (6) avance dentro del recipiente (2) al acoplarse las porciones de tope (14, 16);
una cantidad predeterminada de una primera sustancia, que define un primer nivel predeterminado (18) cuando se dispone en el recipiente (2); y
una cantidad predeterminada de una segunda sustancia, que cubre la primera sustancia y define un segundo nivel predeterminado (20) cuando se dispone en el recipiente (2) después de la primera sustancia; siendo el primer nivel predeterminado (18) inferior al segundo nivel predeterminado (20);
en el que la pipeta (6), la tapa (10) y el recipiente (2) están configurados mutuamente de manera que con la aplicación de las porciones de tope cooperantes (14, 16), la punta (8) de la pipeta (6) se detiene por encima de la primer nivel predeterminado (18) pero por debajo del segundo nivel predeterminado (20) en el recipiente (2);
en el que la tapa (10) tiene un tamaño y una forma para soportar una presión de aproximadamente 0,2 MPa; y en el que la pipeta (6), la tapa (10) y el recipiente (2) están configurados mutuamente de manera que tras el acoplamiento de las porciones de tope cooperantes (14, 16) la punta de la pipeta (8) se coloca aproximadamente a medio camino entre los niveles primero y segundo (18, 20).
2. Un kit de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el kit es un kit de lisis para preparar una muestra de material biológico para análisis, en el que la primera sustancia comprende un medio facilitador de la lisis, la segunda sustancia comprende una solución tampón de lisis (26) y, en uso, la primera sustancia queda cubierta por la segunda sustancia en el recipiente (2).
3. Un kit de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que la pipeta (6), la tapa (10) y el recipiente (2) están configurados mutuamente de manera que al aplicarse las porciones de tope cooperantes (14, 16), la punta de la pipeta (8) está separada una distancia predeterminada por encima del primer nivel predeterminado (18).
4. Un kit de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el recipiente (2) tiene una primera marca de nivel que indica el primer nivel predeterminado (18).
5. Un kit de acuerdo con la reivindicación 4, en el que el recipiente (2) tiene una segunda marca de nivel que indica el segundo nivel predeterminado (20).
6. Un kit de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la tapa (10) define una ranura (12) para recibir la punta de pipeta (8), siendo la tapa (10) elásticamente deformable para una fácil inserción y extracción de la punta de pipeta (8). mediante la ranura (12) y siendo la ranura (12) autosellable.
7. Un kit como se reivindica en la reivindicación 6, en el que partes de la tapa (10) alrededor de la ranura (12) están configuradas para limpiar la punta de pipeta (8) al retirar la punta de pipeta (8) del recipiente (2) para evitar que el material que se aspira se adhiera a las superficies externas de la punta de la pipeta (8) para evitar la contaminación cruzada.
8. Un kit que comprende una pluralidad de kits de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, en el que las cantidades respectivas de la primera sustancia, la segunda sustancia y el material de muestra y los primeros niveles predeterminados (18) y los segundos niveles predeterminados (20) respectivos son los mismos.
9. Un kit de acuerdo con la reivindicación 2 en combinación con cualquiera de las reivindicaciones 3 a 8, en el que los medios facilitadores de lisis comprenden perlas (22).
10. Un procedimiento para preparar una muestra de material biológico para análisis, comprendiendo el procedimiento las etapas de:
a) proporcionar un recipiente (2) que tenga un extremo abierto (4);
una pipeta (6) para transferir el material biológico hacia y desde el recipiente (2), teniendo la pipeta (6) una punta abierta (8) para aspirar y dispensar el material biológico;
una tapa (10) para sellar el extremo abierto (4) del recipiente (2) de manera hermética, estando configurada la tapa (10) para permitir que la punta de pipeta (8) entre en el recipiente (2) a través de la tapa (10). ) y tenga un tamaño y una forma para soportar una presión de aproximadamente 0,2 MPa;
la tapa (10) y la punta de pipeta (8) comprenden porciones de tope (14, 16) que cooperan para evitar que la punta de pipeta (8) avance dentro del recipiente (10) tras el aplicación de las porciones de tope (14, 16); en la que
la pipeta (6), la tapa (10) y el recipiente (2) están configurados mutuamente de manera que al acoplarse las porciones de tope cooperantes (14, 16), la punta (8) de la pipeta (6) se detiene por encima de un primera nivel predeterminado (18) pero por debajo de un segundo nivel predeterminado (20) en el recipiente (2); siendo el primer nivel predeterminado (18) un nivel para medios facilitadores de la lisis sumergidos con solución tampón de lisis (26) en el recipiente (2);
siendo el segundo nivel predeterminado (20) un nivel para la solución tampón de lisis (26), y
siendo el primer nivel (18) inferior al segundo nivel (20);
b) colocar una cantidad predeterminada de medios facilitadores de la lisis en el recipiente (2) en o por debajo del primer nivel predeterminado (18); y una cantidad predeterminada de solución tampón de lisis (26);
c) sellar el extremo abierto (4) del recipiente (2) de manera hermética con la tapa (10);
d) colocar una cantidad predeterminada de material biológico de muestra en el recipiente (2), disponiéndose la mezcla resultante en el recipiente (2) en o por encima del segundo nivel predeterminado (20);
e) someter la muestra a lisis en el recipiente (2);
f) insertar la punta de pipeta (8) en el recipiente (2) a través de la tapa (10) hasta que las porciones de tope cooperantes (14, 16) de la tapa (10) y la pipeta (6) se apliquen y la punta (8) de la pipeta (6) se detenga por encima del primer nivel predeterminado (18); y
g) aspirar el lisato obtenido;
el que el paso f) es secaracteriza por
colocar la punta de la pipeta (8) aproximadamente a medio camino entre el primer y el segundo nivel (18, 20).
11. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 10, en el que tras el acoplamiento de las porciones de tope cooperantes (14, 16), la punta de la pipeta (8) queda separara una distancia predeterminada por encima del primer nivel predeterminado (18).
12. Un conjunto (1) para preparar una muestra de material, en el que el conjunto (1) se monta a partir de un kit de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9.
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