ES2962827T3

ES2962827T3 - Formulaciones que comprenden reactivos que contienen mercurio para detectar una enfermedad

Info

Publication number: ES2962827T3
Application number: ES16746008T
Authority: ES
Inventors: Allan J Chisholm; Luca Nicolas De
Original assignee: Ath Australia Ltd
Current assignee: Ath Australia Ltd
Priority date: 2015-02-05
Filing date: 2016-02-05
Publication date: 2024-03-21
Anticipated expiration: 2036-02-05
Also published as: US10845361B2; EP3254112A4; AU2016214976B2; WO2016123673A1; CN107407680B; US20180031544A1; AU2016214976A1; EP3254112A1; EP3254112C0; CN107407680A; US20210041424A1; EP3254112B1

Abstract

En el presente documento se divulga una formulación para detectar una especie indicativa de una enfermedad en un paciente. La formulación comprende un reactivo que contiene mercurio que, cuando se pone en contacto con una muestra de fluido del paciente, indica colorimétricamente si la muestra de fluido contiene la especie. El reactivo que contiene mercurio está contenido dentro de un vehículo que no fluye que, tras la exposición a la muestra de fluido, provoca una mezcla rápida de sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio y la muestra de fluido. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Formulaciones que comprenden reactivos que contienen mercurio para detectar una enfermedad

Campo Técnico

[0001]La presente invención se refiere a una formulación, una almohadilla absorbente y un kit para detectar una especie indicativa de una enfermedad en un paciente. En una realización particular, la presente invención se refiere a una formulación, una almohadilla absorbente y un kit para detectar tirosina o sus metabolitos en la orina de un paciente.

Antecedentes de la Técnica

[0002]La presencia de determinadas especies en fluidos corporales de una persona a menudo puede ser indicativas de que esa persona padece una enfermedad o una afección. El diagnóstico temprano de tal enfermedad o afección puede aumentar considerablemente la posibilidad de éxito de cualquier régimen de tratamiento y es un desafío permanente en el campo médico desarrollar nuevas pruebas de diagnóstico temprano. Tales pruebas de diagnóstico temprano preferiblemente son relativamente simples para llevar a cabo y proporcionar resultados fiables de una manera relativamente rápida.

[0003]Están disponibles pruebas para cáncer colorrectal, tal como, por ejemplo, la prueba de sangre oculta en heces (FOB,faecal occult blood).Sin embargo, la prueba de FOB depende de las heces de un paciente que contienen sangre (de un pólipo que sangra), lo que no tiene lugar todo el tiempo y, por consiguiente, es propensa a falsos negativos. De hecho, algunos informes han indicado que la sensibilidad de la prueba de FOB para detectar cáncer colorrectal es en el mejor caso del 25 %. La prueba de FOB requiere también recogida de una muestra fecal, con muchas pruebas que no se llevan a cabo debido a que los pacientes son reacios a la obtención de muestras fecales (se devuelven menos del 20 % de los kits de FOB que se entregan a los australianos en la franja de edad de 50-75 años). Además, cuando se obtiene, la muestra fecal necesita ser analizada en un laboratorio, lo que complica el procedimiento y aumenta su coste.

[0004]La presencia de compuestos fenólicos, tales como tirosina y sus metabolitos, en la orina de un paciente puede ser un indicativa de que el paciente padece cáncer, por ejemplo, cáncer colorrectal. Se conocen pruebas para tirosina y sus metabolitos utilizando un reactivo de Millon o variaciones del mismo. El reactivo de Millon se obtiene disolviendo mercurio metálico en ácido nítrico y diluyendo con agua. Cuando el reactivo de Millon se expone a una muestra de fluido que contiene compuestos fenólicos (por ejemplo, tirosina y sus metabolitos), se forma un precipitado de color rojo marrón. La presencia de tal precipitado de color rojo marrón después de la exposición de la orina de un paciente al reactivo de Millon incitaría al paciente a someterse a pruebas adicionales.

[0005]Debido a que el reactivo de Millon contiene mercurio, es necesario que sea manipulado con mucho cuidado. Típicamente, el reactivo de Millon se proporciona en una ampolla de vidrio con una parte frágil. Inmediatamente antes de ser utilizada, la ampolla se rompe y se añade la muestra de orina al reactivo de Millon. Sin embargo, la ampolla de vidrio rota tiene bordes afilados y presenta un riesgo para la salud y existe un riesgo de que el usuario puede exponerse a mercurio (por ejemplo, debido a un derrame). Además, si la ampolla no se rompe con un rápido golpe seco, puede romperse en añicos. Por como mínimo estas razones, las pruebas existentes que implican el reactivo de Millon no son realmente adecuadas para el uso no especializado.

[0006]El documento US 5,094,836 divulga la utilización de una forma mejorada del reactivo de Millon en el cribado de pacientes para detectar la presencia de cáncer. La forma mejorada del reactivo de Millon se refiere principalmente a una composición mixta de Hg-Ni, que mejora la estabilidad del precipitado de color que se forma en presencia de tirosina. El documento US 5,094,836 divulga también que la composición se puede mezclar con un material para formar un gel, reduciendo de manera ventajosa la fase gelatinosa resultante las condiciones peligrosas planteadas por una solución que contiene mercurio. Sin embargo, se reconoce que la sensibilidad relativa de la gelatina es propensa a disminuir en cierto modo en comparación con la sensibilidad de la solución y, en los ejemplos proporcionados, se señaló que el precipitado se forma solamente en el límite de las fases de gelatina y orina.

El documento US 5,066,601 da a conocer otra forma mejorada del reactivo de Millon en el cribado a pacientes para detectar la presencia de cáncer. La forma mejorada del reactivo de Millon tal como se describe es una solución acuosa que contiene una mezcla de sales de Hg+ y Hg2+, que se dice que mejora el revelado del color del precipitado.

El documento US 4,163,039 da a conocer soportes absorbentes impregnados con una sustancia indicadora para indicar iones de sodio o cloruro a través de un cambio de color. Los soportes absorbentes se utilizan para el diagnóstico de mucoviscidosis utilizando iones de sodio o cloruro en el sudor de un paciente como marcador, y se pueden impregnar con sales de mercurio cuyo producto de solubilidad excede notablemente al del cloruro de plata o cloruro de mercurio.

El documento US 3,895,039 da a conocer una tira reactiva para la detección de diferentes barbitúricos en fluidos biológicos. Una parte de la tira reactiva se impregna con un compuesto de mercurio, tal como acetato de mercurio tamponado, que, en combinación con otros productos químicos en otras partes de la tira reactiva, da como resultado una indicación colorimétrica en presencia de barbitúricos en fluidos biológicos que se ponen a prueba. El documento US 2009/311142 da a conocer productos desechables de un solo uso para determinar la concentración de compuestos de tiol en una muestra de fluido. Un reactivo de detección se impregna en una matriz que comprende como mínimo un material absorbente en una cantidad capaz de proporcionar una señal que indica la concentración de compuestos de tiol en la muestra.

Características de la Invención

[0007]En un primer aspecto, la presente invención proporciona una formulación para la detección de una especie indicativa de una enfermedad en un paciente. La formulación comprende un reactivo que contiene mercurio que comprende mercurio disuelto en una solución ácida y que, cuando entra en contacto con una muestra de fluido en forma de una muestra de orina del paciente, indica de manera colorimétrica si la muestra de orina contiene la especie. El reactivo que contiene mercurio está contenido en un gel portador que, tras exponerse a la muestra de orina, se disgrega en menos de 3 minutos para liberar sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio, provocando de este modo una mezcla rápida del reactivo que contiene mercurio y la muestra de orina.

[0008]En un segundo aspecto, la presente invención proporciona una formulación para la detección de una especie indicativa de una enfermedad en un paciente. La formulación comprende un reactivo que contiene mercurio que comprende mercurio disuelto en una solución ácida y que, cuando entra en contacto con una muestra de fluido en forma de una muestra de orina del paciente, indica de manera colorimétrica si la muestra de orina contiene la especie. El reactivo que contiene mercurio está contenido en un material absorbente que, tras la exposición a la muestra de orina, absorbe la muestra de orina en menos de 3 minutos, provocando de este modo la mezcla rápida de sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio y la muestra de orina.

[0009]El inventor reconoció que proporcionar el reactivo que contiene mercurio en un portador no fluido, tal como un gel portador o un material absorbente, posee una serie de ventajas, en particular, seguridad del usuario, pero que estas ventajas no deben ser a costa de evitar que sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio sea capaz de mezclarse rápidamente con la muestra de fluido tras la exposición a la muestra del fluido. Los experimentos han mostrado, por ejemplo, que las reacciones que tienen lugar solamente en el límite de las fases de gelatina y orina son mucho más propensas a generar resultados falsos (positivos o negativos). El inventor reconoció que a menos que el reactivo que contiene mercurio y la muestra de fluido sean capaces de mezclarse íntimamente de manera relativamente rápida, entonces, el riesgo de resultados falsos o no concluyentes es un motivo de preocupación. La presente invención proporciona una prueba muy selectiva y fiable para la presencia de especie indicativa de una enfermedad en una muestra de orina de un paciente.

[0010]Tal como se entendería, la disgregación rápida del gel portador muy rápidamente da como resultado que una mayoría amplia del reactivo que contiene mercurio esté disponible para reaccionar con cualquier especie en la muestra del fluido de paciente, proporcionando de este modo un análisis casi tan rápido y preciso como el que tiene lugar cuando el reactivo que contiene mercurio se proporciona en una forma líquida. El inventor se dio cuenta de que si el gel portador no se disgrega rápidamente, entonces, existe un riesgo importante de que las reacciones que tienen lugar e indican de manera colorimétrica la presencia de especies no tendrán lugar en un grado suficiente para ser detectables de manera visual o solamente tendrán lugar en partes dispersadas de la mezcla, impidiendo adicionalmente la detección visual del cambio del color.

[0011]De manera similar, la absorción rápida de la muestra de fluido por el material absorbente muy rápidamente da como resultado una mayoría amplia del reactivo que contiene mercurio que está disponible para reaccionar con cualquier especie en la muestra del fluido del paciente, proporcionando de este modo un análisis casi tan rápido y preciso como el que tiene lugar cuando el reactivo que contiene mercurio se proporciona en una forma líquida.

[0012]La muestra de fluido es una muestra de orina de un paciente. Las muestras de orina son relativamente fáciles de obtener, en especial por los propios pacientes, lo que hace la detección de la especie indicativa de una enfermedad más fácil desde un punto de vista logístico. También los pacientes tienden a ser más receptivos para recoger muestras de orina que no muestras de heces, por lo que se esperaría que el examen de orina por tanto diera como resultado un mayor grado de conformidad del paciente y, por lo tanto, pruebas completadas. Incluso los pacientes pueden ser capaces de realizar una prueba por sí mismos para detectar la presencia de una especie indicativa de una enfermedad en su orina.

[0013]La especie indicativa de una enfermedad en un paciente puede ser tirosina (o uno o más de sus metabolitos). Tal como se señala anteriormente, se ha descubierto que la tirosina y sus metabolitos tienen niveles altos en la orina de pacientes que padecen tumores, especialmente tumores asociados con cánceres gastrointestinales, tales como cáncer colorrectal (aunque otros tumores malignos pueden dar como resultado también niveles elevados de tirosina y sus metabolitos o metabolitos de triptófano en la orina de un paciente, tal como se indica a continuación). Una prueba positiva utilizando la presente invención incitaría al paciente a buscar un consejo médico más especializado.

[0014]El gel portador puede disgregarse rápidamente para liberar sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio en menos de aproximadamente 1 minuto después de la exposición a la muestra de fluido. El material absorbente puede absorber la muestra de fluido en menos de aproximadamente 1 minuto después de la exposición a la muestra de fluido.

[0015]El gel portador es una sustancia que es miscible en, se disuelve en o, en cualquier caso, se dispersa rápidamente cuando se expone a la muestra de fluido. El gel portador puede ser (o puede comprender) un hidrogel. El gel portador se puede formar a partir de cualquiera de los siguientes: poliacrilamidas, carboximetilcelulosa, alcohol polivinílico, poli(acrilamida-co-ácido maleico), poli(vinilpirrolidona), alginatos, carbómeros, polioxímeros, gomas naturales y sintéticas y mezclas de los mismos. Cuando el gel portador incluye mezclas de sustancias, las sustancias pueden seleccionarse para proporcionar un gel portador resultante con propiedades mejoradas (por ejemplo, propiedades de disgregación mejoradas, interacciones reducidas con reactivos que contienen mercurio específicos, mejor estabilidad en condiciones altamente ácidas, etc.).

[0016]El material absorbente puede ser (o puede comprender) un material fibroso. El material absorbente puede estar formado a partir de cualquiera de los siguientes: pulpa de papel, algodón, fibras de celulosa, fibras sintéticas, polímeros super absorbentes y fibras de alcohol polivinílico. Se pueden utilizar combinaciones de materiales para proporcionar un material absorbente que posea propiedades mejoradas.

[0017]El reactivo que contiene mercurio comprende sales de mercurio disueltas en una solución ácida (por ejemplo, que comprende uno o más ácidos minerales). Dicho reactivo se conoce como el reactivo de Millon que, tal como se ha señalado anteriormente, ha sido utilizado para detectar compuestos fenólicos, tales como tirosina y sus metabolitos. La producción de una coloración o un precipitado rojo-marrón, cuando la formulación de la presente invención y la muestra de fluido del paciente se mezclan indica la presencia de tirosina (y/o sus metabolitos) en la muestra. Tal como se ha indicado anteriormente, la presencia de cantidades significativas de tirosina (y/o sus metabolitos) en la orina de un paciente puede ser indicativa de cáncer, y una prueba positiva utilizando la presente invención debería incitar al paciente a buscar cuidados médicos más especializados.

[0018]El reactivo que contiene mercurio puede contener compuestos adicionales. Tales compuestos adicionales, y las propiedades ventajosas que transmiten sobre la formulación resultante, se indicarán con más detalle a continuación.

[0019]La formulación puede comprender adicionalmente agentes, tales como agentes de dispersión, agentes solubilizantes, agentes humidificantes o agentes emulsionantes para mejorar (o de manera ventajosa alterar) las propiedades del gel portador (por ejemplo, sus propiedades de disgregación) o el material absorbente (por ejemplo, sus propiedades de absorción). Cualquiera de dichos agentes adicionales también está incluido en el portador no fluido. Las propiedades ventajosas que transmiten sobre la formulación resultante se indicarán con más detalle a continuación.

[0020]En un tercer aspecto, la presente invención proporciona una almohadilla absorbente para la detección de una especie indicativa de una enfermedad en un paciente. La almohadilla comprende un material absorbente adaptado para la rápida absorción de la muestra de fluido en forma de una muestra de orina del paciente. El material absorbente contiene un reactivo que contiene mercurio que comprende mercurio disuelto en una solución ácida y que es capaz de indicar de manera colorimétrica si la muestra de orina del paciente contiene la especie al entrar en contacto con la muestra de orina. Cuando la almohadilla se expone a la muestra de orina, el material absorbente absorbe la muestra de orina en menos de 3 minutos, provocando de este modo la mezcla rápida de sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio y la muestra de orina.

[0021]El tercer aspecto de la presente invención puede ser tal como se describe en el presente documento con relación al segundo aspecto de la presente invención en el que el portador no fluido es un material absorbente.

[0022]En un cuarto aspecto, la presente invención proporciona un kit para la detección de una especie indicativa de una enfermedad en un paciente. El kit que comprende un reactivo que contiene mercurio que comprende mercurio disuelto en una solución ácida y que, cuando entra en contacto con una muestra de fluido en forma de una muestra de orina del paciente, indica de manera colorimétrica si la muestra de orina contiene la especie, y un portador no fluido en forma de un gel portador en el que el reactivo que contiene mercurio está contenido, pero que, tras la exposición a la muestra de orina, se disgrega en menos de 3 minutos para liberar sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio, provocando de este modo la mezcla rápida del reactivo que contiene mercurio y la muestra de orina. El kit comprende, también, un recipiente en el que se contienen el gel portador y el reactivo que contiene mercurio. En un quinto aspecto, la presente invención proporciona un kit para la detección de una especie indicativa de una enfermedad en un paciente. El kit que comprende un reactivo que contiene mercurio que comprende mercurio disuelto en una solución ácida y que, cuando entra en contacto con una muestra de fluido en forma de una muestra de orina del paciente, indica de manera colorimétrica si la muestra de orina contiene la especie, y un portador no fluido en forma de un material absorbente en el que el reactivo que contiene mercurio está contenido, pero que tras la exposición a la muestra de orina, absorbe la muestra de orina en menos de 3 minutos, provocando de este modo la mezcla rápida de sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio y la muestra de orina. El kit comprende, también, un recipiente en el que se contienen el material absorbente y el reactivo que contiene mercurio.

[0023]El reactivo que contiene mercurio y el portador no fluido en los kits del cuarto y el quinto aspectos de la presente invención pueden ser tal como se describen en el presente documento con respecto al primero y el segundo aspectos de la presente invención, respectivamente.

[0024] El recipiente se puede adaptar para recibir la muestra de fluido del paciente. El recipiente se puede adaptar para recibir un volumen predeterminado de la muestra de fluido del paciente.

[0025] De manera ventajosa, se puede proporcionar el kit de la presente invención en una forma simple segura y suficientemente fiable para el uso por pacientes en casa (por ejemplo, con una muestra de orina), con instrucciones que se proporcionan con el kit que destacan la importancia para el paciente de buscar consejo médico adicional en el caso de que el kit muestre un resultado positivo.

[0026] El recipiente puede comprender una pluralidad de celdas, con como mínimo una de la pluralidad de celdas que contiene el portador no fluido y el reactivo que contiene mercurio; y como mínimo otra de la pluralidad de celdas que contiene una muestra de control del portador no fluido que no contiene el reactivo que contiene mercurio. La pluralidad de celdas se configura para permitir una comparación visual del color en cada una de la pluralidad de celdas.

[0027] Se puede realizar una comparación visual directa entre como mínimo dos de las celdas en el recipiente para proporcionar un resultado incluso más fiable debido a que se tienen en cuenta factores, tales como el color de orina de un paciente (por ejemplo) o el daltonismo potencial del paciente (o persona que evalúa los resultados).

Breve descripción de los dibujos

[0028] La presente invención se describirá a continuación en lo que se respecta a la figura adjunta en la que:

La Figura 1 muestra un kit para detectar una especie indicativa de una enfermedad en un paciente de acuerdo con la presente invención.

Descripción de las Realizaciones

[0029] Tal como se señala anteriormente, en algunos de sus diferentes aspectos, la presente invención proporciona formulaciones para detectar especies indicativas de una enfermedad en un paciente.

[0030] Las formulaciones y la almohadilla absorbente de la presente invención pueden utilizarse para la detección de una especie indicativa de una enfermedad en un paciente. Se puede detectar cualquier especie que se pueda detectar de manera colorimétrica mediante la exposición a un reactivo que contiene mercurio utilizando la formulación de la presente invención.

[0031] La especie indicativa de una enfermedad en un paciente puede ser tirosina (4-hidroxifenilalanina) y/o sus metabolitos. La presencia de cantidades elevadas de tirosina (y/o sus metabolitos) en una muestra de orina obtenida de un paciente puede ser indicativa de que el paciente tenga tumores, en especial tumores asociados con cánceres gastrointestinales, tales como cáncer colorrectal. La tirosina es utilizada por las células para sintetizar proteínas, y los niveles elevados de tirosina (y/o sus metabolitos) en la muestra de orina del paciente pueden ser indicativos de que su cuerpo esté produciendo un número superior al habitual de células, tal como sucede a menudo con tumores que crecen rápido. Otros tumores que podrían provocar cantidades elevadas de tirosina en una muestra de orina de un paciente incluyen cáncer de próstata, cáncer de ovarios, cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer cervical, cáncer de estómago, cáncer de pulmón, cáncer de larínge, cáncer de esófago, cáncer biliar, hepatoma, cáncer duodenal, cáncer broncogénico y cáncer de la médula ósea. Las especies indicativas de una enfermedad en un paciente pueden incluir también metabolitos de triptófano, tales como 5-hidroxitriptamina (serotonina) y ácido 5-hidroxiindolacético (5-HIAA). Las células cancerígenas metabolizan grandes cantidades de triptófano y la presencia de niveles elevados de metabolitos de triptófano en una muestra de orina de un paciente puede ser indicativo de cáncer.

[0032] Es importante reconocer que la presente invención no está limitada a detectar solamente la tirosina, sus metabolitos o metabolitos de triptófano. Por ejemplo, también se puede utilizar la presente invención para detectar los niveles elevados de nucleótidos urinarios, tales como pseudouridina, 2-piridona-5-carboxamida-N1-ribofuranosido, N2,N2-dimetilguanina, 1-metil-guanosina, 2-metilguanosina y 1-metiladenosina, la presencia de los cuales en las muestras de orina de pacientes se puede utilizar para la detección temprana y el diagnóstico clínico de cánceres, tales como cánceres colorrectales, gástricos, de hígado, de pulmón y mama.

[0033] Tal como se indica anteriormente, las muestras de orina son relativamente fáciles de obtener y a menudo contienen una especie indicativa de una enfermedad en un paciente. Típicamente, la muestra de orina se obtiene a media micción (en general cualquier contaminante potencial estará presente en la micción de orina inicial del paciente) de la primera micción del paciente por la mañana (que contiene la mayor concentración de marcadores).

[0034] La formulación comprende un reactivo que contiene mercurio que cuando entra en contacto con una muestra de orina del paciente, indica de manera colorimétrica si la muestra de orina contiene la especie. Es decir, cuando la muestra de orina se mezcla con el reactivo que contiene mercurio, se produce una reacción que da como resultado un cambio de color. Por ejemplo, la reacción puede ser dar como resultado la formación de un precipitado de color.

De manera alternativa (o adicionalmente), la reacción puede dar como resultado un cambio de color de la mezcla.

[0035]El reactivo que contiene mercurio comprende mercurio disuelto en una solución ácida. Dicho reactivo se conoce como el reactivo de Millon que, tal como se indica anteriormente, ha sido utilizado de manera fiable para detectar compuestos fenólicos (tales como tirosina) en muestras de fluido a lo largo de muchos años. Típicamente la solución ácida es un ácido mineral (preferiblemente un ácido mineral fuerte), tal como ácido nítrico, ácido sulfúrico o una combinación de los mismos.

[0036]El reactivo que contiene mercurio puede comprender formas diferentes de mercurio (por ejemplo, sales que tienen estados de oxidación diferentes como Hg+ y Hg2+) o compuestos adicionales, que transmiten propiedades ventajosas al reactivo o que lo convierten en más adecuado para detectar una especie particular. Por ejemplo, el reactivo que contiene mercurio puede comprender una fuente de iones de Hg+ y una fuente de iones de Hg2+ (por ejemplo, sulfato de mercurio (II) y nitrato mercuroso), típicamente en una solución ácida. Dicho reactivo es una forma mejorada del reactivo de Millon y posee una sensibilidad superior a tirosina y sus metabolitos. Cualquier precipitado que se forme puede ser más estable que lo sería en el caso de reactivos que contienen solamente Hg+.

[0037]El reactivo que contiene mercurio puede comprender entre aproximadamente el 10 y el 90 % en peso de mercurio, por ejemplo, entre aproximadamente el 20 y el 80 % en peso, entre aproximadamente el 30 y el 70 % en peso, entre aproximadamente el 40 y el 60 % en peso de mercurio. El reactivo que contiene mercurio puede comprender aproximadamente el 10 % en peso, 20 % en peso, 30 % en peso, 40 % en peso, 50 % en peso, 60 % en peso, 70 % en peso, 80 % en peso o 90 % en peso de mercurio. Cuando el reactivo que contiene mercurio comprende Hg+ y Hg2+, la proporción de Hg+ : Hg2+ puede ser de 0,1 a 1 : 0,1 a 1,0.

[0038]El reactivo que contiene mercurio puede incluir también una fuente de iones Ni2+, por ejemplo, una sal de níquel, tal como sulfato de níquel, a efectos de mejorar la estabilidad del precipitado que se forma en presencia de la especie, y, de este modo, mejorar la fiabilidad de la prueba (los precipitados que poseen estabilidad mejorada son más propensos a formarse de forma fiable y, cuando se forman, duran más tiempo, convirtiéndose de este modo en más fáciles de detectar visualmente). Si está presente, el reactivo que contiene mercurio puede incluir níquel en una cantidad de aproximadamente 0,1 y 0,5 partes en peso a 1 parte en peso de mercurio.

[0039]El reactivo que contiene mercurio puede incluir también una fuente de iones Cd2+, por ejemplo, una sal de cadmio, tal como sulfato de cadmio, a efectos de mejorar la estabilidad del precipitado que se forma en presencia de la especie, y, de este modo, mejorar la fiabilidad de la prueba. Si está presente, el reactivo que contiene mercurio puede incluir cadmio en una cantidad de entre aproximadamente 0,05 a 0,5 partes en peso y 1 parte en peso de mercurio.

[0040]Cuando las especies que se detectan incluyen tirosina o sus metabolitos y, de manera opcional, metabolitos de triptófano, el reactivo que contiene mercurio puede incluir también un compuesto, tal como 1-nitroso-2-naftol. Los complejos de 1-nitroso-2-naftol con ácidos fenólicos 4-hidroxilados, tales como tirosina y los metabolitos de triptófano, serotonina y 5-HIAA, forman un producto que tiene un color rojo (el producto es un producto diferente al que se forma cuando la especie indicativa de una enfermedad reacciona con el reactivo que contiene mercurio). Los niveles elevados de 5-HIAA en muestras de fluidos de paciente (en especial muestras de orina) están bien documentados en tumores gastrointestinales, y la presencia de 1-nitroso-2-naftol en el reactivo que contiene mercurio puede ayudar por tanto a aumentar la sensibilidad de la formulación para detectar especies indicativas de una enfermedad. Si está presente, el reactivo que contiene mercurio puede incluir 1-nitroso-2-naftol en una cantidad de entre aproximadamente 0,05 a 0,5 partes en peso y 1 parte en peso de mercurio.

[0041]El reactivo que contiene mercurio puede incluir también compuestos de diazonio, tales como cloruro de bencenodiazonio, sales de 2,4-dicloroanilina diazonio, tetrafluoroborato de 2,6-diclorobenceno-diazonio y ptoluenosulfonato de p-nitrobenceno-diazonio, que puede crear un complejo con tirosina y sus metabolitos, incluso bajo condiciones altamente ácidas, a efectos de aumentar la sensibilidad del reactivo.

[0042]El reactivo que contiene mercurio puede incluir también sales de tetrazonio, tales como diaminodifenilamina de tetrazonio. Tales sales pueden formar un colorante rojo fluorescente en presencia de tirosina y triptófano.

[0043]La composición exacta del reactivo que contiene mercurio dependerá de factores, tales como la naturaleza de la muestra de orina, portador no fluido y las especies a detectar. La preparación de un reactivo que contiene mercurio adecuado para ser utilizado en la presente invención se encuentra dentro de la capacidad de un experto en la materia.

[0044]La cantidad o la proporción del reactivo que contiene mercurio contenido en la formulación o la almohadilla absorbente dependerá de factores, tales como la concentración esperada de la especie en la muestra, el volumen de la muestra, la forma del portador no fluido, etc. Está dentro de la capacidad de un experto en la materia estimar la cantidad o la proporción del reactivo que contiene mercurio que se necesita para cualquiera de las formulaciones o almohadillas absorbentes determinadas y, si es necesario, llevar a cabo las pruebas de rutina para determinar si la proporción estimada es adecuada.

[0045]Cuando el portador no fluido es un gel, por ejemplo, la formulación puede comprender entre aproximadamente el 20 y aproximadamente el 80 % en volumen, por ejemplo, entre aproximadamente el 30 y aproximadamente el 70 % en volumen, entre aproximadamente el 40 y aproximadamente el 60 % en volumen, entre aproximadamente el 30 y aproximadamente el 80 % en volumen, entre aproximadamente el 50 y aproximadamente el 80 % en volumen del reactivo que contiene mercurio. La formulación puede comprender aproximadamente el 20 % en volumen, aproximadamente el 30 % en volumen, aproximadamente el 40 % en volumen, aproximadamente el 50 % en volumen, aproximadamente el 60 % en volumen, aproximadamente el 70 % en volumen o aproximadamente el 80 % en volumen del reactivo que contiene mercurio.

[0046]La formulación o la almohadilla absorbente puede comprender entre aproximadamente 0,01 y aproximadamente 5 ml, entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente 3 ml, entre aproximadamente 1 y aproximadamente 2 ml o entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente 1,5 ml (por ejemplo, aproximadamente 1 ml) del reactivo que contiene mercurio.

Gel portador

[0047]El reactivo que contiene mercurio puede estar contenido en un gel portador. El reactivo que contiene mercurio está contenido de manera segura en el gel portador durante las condiciones de almacenamiento y manipulación. Sin embargo, tras la exposición a la muestra de orina, el gel portador se adapta para disgregarse rápidamente y liberar sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio. El gel portador puede disgregarse, por ejemplo, debido a que es miscible en la muestra de orina. El gel portador puede disgregarse, por ejemplo, debido a que se disuelve en la muestra de orina. El gel portador puede disgregarse, por ejemplo, debido a que se dispersa en la muestra de orina.

[0048]El gel portador debe disgregarse rápidamente a efectos de liberar rápidamente sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio, de tal modo que pueda entonces reaccionar con las especies (si están presentes) en la muestra de orina del paciente. La determinación de si la muestra contiene las especies puede llevar aproximadamente 5 minutos. De este modo, a efectos de que el reactivo que contiene mercurio pueda tener tiempo para reaccionar con las especies (si están presentes) para generar una respuesta colorimétrica, se debe liberar del gel (para que pueda reaccionar con las especies) una parte sustancial del reactivo que contiene mercurio en significativamente menos de 5 minutos. El tiempo en el que se disgrega el gel portador dependerá de factores, tales como los volúmenes relativos de la muestra de orina y el gel portador, la naturaleza de la muestra de orina, la acidez del reactivo que contiene mercurio, etc. Sin embargo, de acuerdo con la presente invención, sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio se libera en menos de aproximadamente 1-3 minutos (por ejemplo, 1-2 minutos) después de la exposición a la muestra de orina. El tiempo en el que se disgrega el gel portador después de estar expuesto a la muestra de orina puede ser aproximadamente de 150 segundos, aproximadamente de 120 segundos, aproximadamente de 90 segundos, aproximadamente de 60 segundos o aproximadamente de 30 segundos.

[0049]Aunque depende de muchos factores, en el contexto de la presente invención, «sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio» pretende significar que más de aproximadamente el 80 %, 85 %, 90 % o 95 % del reactivo que contiene mercurio contenido en el gel portador se libera dentro del periodo de tiempo especificado.

[0050]El gel portador puede estar formado de cualquier sustancia o combinación de sustancias, siempre y cuando sean capaz de formar un gel inmóvil semisólido (sustancialmente no fluido) que pueda contener el reactivo que contiene mercurio (cabe indicar que esta sustancia puede ser altamente ácida) durante un tiempo de almacenamiento adecuado, pero que se disgregará rápidamente para liberar sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio tras la exposición a la muestra de orina. A pesar de que tiene que disgregarse rápidamente tras la exposición a la muestra de orina, el gel portador debe, durante la manipulación y uso normales, garantizar que escape muy poco (si ocurriera) mercurio. Está dentro de la capacidad de un experto en la materia utilizar las enseñanzas proporcionadas en el presente documento y experimentos de rutina, para determinar si un gel portador particular es adecuado para ser utilizado en la presente invención.

[0051]Aunque no se requiere que el gel sea sólido y pueda tener cierta capacidad de fluir, debe ser suficientemente viscoso, de tal manera que no sea capaz de fluir fácilmente a temperaturas que cabe esperar durante el uso normal, ni siquiera en el caso de un recipiente que contenga la formulación y sea volcado por accidente. El gel portador puede tener una viscosidad que oscila de aproximadamente 50.000 a aproximadamente 1.000.000 cps a temperatura ambiente. La viscosidad del gel portador puede ser, por ejemplo, aproximadamente 50.000 cps, aproximadamente 100.000 cps, aproximadamente 150.000 cps, aproximadamente 200.000 cps, aproximadamente 250.000 cps, aproximadamente 300.000 cps, aproximadamente 350.000 cps, aproximadamente 400.000 cps, aproximadamente 450.000 cps, aproximadamente 500.000 cps, aproximadamente 550.000 cps, aproximadamente 600.000 cps, aproximadamente 650.000 cps, aproximadamente 700.000 cps, aproximadamente 750.000 cps, aproximadamente 800.000 cps, aproximadamente 850.000 cps, aproximadamente 900.000 cps, aproximadamente 950.000 cps o aproximadamente 1.000.000 cps.

[0052]El gel portador puede ser una sustancia que se disgrega rápidamente (por ejemplo, se dispersa), cuando se expone a una solución acuosa. Una clase de sustancias adecuadas son hidrogeles, que son una red de cadenas de polímeros que son hidrófilos, y son redes poliméricas naturales o sintéticas altamente absorbentes (pueden contener más del 90 % de agua). El reactivo que contiene mercurio puede transportarse en los espacios intersticiales definidos entre las cadenas de polímeros.

[0053]El inventor ha descubierto que no todos los geles pueden utilizarse en la presente invención (es decir, cumplen con los requisitos funcionales del gel portador). De hecho, la presente invención se refiere, como mínimo, en parte, al desafío del inventor del sentido común de que contener el reactivo de Millon en un gel no funciona (por ejemplo, tal como se indica en el documento US 5,094,836), y de manera sorprendente e inesperada al descubrimiento de que los reactivos que contienen mercurio, tal como el reactivo de Millon, pueden en realidad estar contenidos en un gel. El inventor se dio cuenta de que las sustancias, tales como gelatina y geles de agar, generalmente no son adecuadas para ser utilizados en la presente invención debido a que no son estables a pH bajo o no se disgregan rápidamente tras la exposición a la muestra de orina de un paciente. Sin embargo, los geles divulgados de manera específica en el presente documento son adecuados para ser utilizados en la presente invención, y las pruebas de rutina llevadas a cabo por un experto en la materia según las enseñanzas de la presente invención indicarán la idoneidad de cualquier gel portador determinado para ser utilizado en la presente invención.

[0054]El gel portador se puede formar a partir de cualquiera o una combinación de poliacrilamidas, carboximetil celulosa, alcohol polivinílico, poli(acrilamida-co-ácido maleico), poli(vinilpirrolidona), alginatos, carbómeros, polioxímeros, gomas naturales y sintéticas. Cuando el gel portador incluye una combinación de sustancias, estas sustancias pueden seleccionarse para proporcionar un gel portador resultante con propiedades de disgregación mejoradas, probabilidad reducida de interacciones con reactivos que contienen mercurio específicos, estabilidad aumentada en condiciones ácidas o similares. Las mezclas de sustancias formadoras de gel pueden permitir también una mejor dispersión de los componentes que interactúan en la formulación y la muestra de orina del paciente, mejorando potencialmente la detección de marcadores diana específicos.

[0055]Entre los ejemplos específicos de sustancias que se pueden utilizar para formar el gel portador se incluyen PVP K30 (un polímero de polivinilpirrolidona sintético), PLURONIC F88 (un tensioactivo de copolímero de bloque difuncional que termina en grupos hidroxilo primario), PVPP (polivinilpirrolidona - una versión de PVP altamente reticulada), PAM SAP (un polímero superabsorbente de poliacrilamida) y CMC HV (una carboximetil celulosa de sodio de grado técnico, con alta viscosidad).

[0056]La proporción del gel portador con relación al reactivo que contiene mercurio en la formulación dependerá de factores, tales como la cantidad del reactivo que contiene mercurio que se incluye, la concentración esperada de las especies en la muestra, el volumen de la muestra, etc. Un experto en la materia es capaz de estimar la proporción del gel portador que se necesita para cualquier formulación determinada y, si es necesario, llevar a cabo las pruebas de rutina para determinar si la proporción estimada es la correcta.

[0057]La formulación puede comprender entre aproximadamente 0,5 ml y aproximadamente 2,0 ml del gel portador. La formulación puede comprender entre aproximadamente 20 y aproximadamente 80 % en volumen, por ejemplo, entre aproximadamente 30 y aproximadamente 70 % en volumen, entre aproximadamente 40 y aproximadamente 60 % en volumen, entre aproximadamente 30 y aproximadamente 80 % en volumen, entre aproximadamente 50 y aproximadamente 80 % en volumen, del gel portador. La formulación puede comprender aproximadamente el 20 % en volumen, aproximadamente el 30 % en volumen, aproximadamente el 40 % en volumen, aproximadamente el 50 % en volumen, aproximadamente el 60 % en volumen, aproximadamente el 70 % en volumen o aproximadamente el 80 % en volumen del gel portador.

[0058]Típicamente, el gel portador se formaría poco después de la mezcla con el reactivo que contiene mercurio (o precursores del reactivo que contiene mercurio) de tal modo que, después de agitación enérgica, se obtiene una dispersión sustancialmente homogénea del reactivo que contiene mercurio con el gel portador. De hecho, el reactivo que contiene mercurio se mezcla con el gel portador. Sin embargo, se entenderá que cualquier procedimiento que da como resultado el reactivo que contiene mercurio que se incluya de forma segura en el gel portador sería adecuado.

Material absorbente

[0059]El reactivo que contiene mercurio puede estar contenido en un material absorbente que, cuando se expone a la muestra de orina, se adapta para absorber rápidamente la muestra de orina. Se puede utilizar cualquier material absorbente que sea capaz de permanecer estable mientras contiene el reactivo que contiene mercurio (potencialmente altamente ácido) de una manera segura (es decir, sustancialmente sin ningún escape) durante el almacenamiento, pero que absorba rápidamente la muestra de orina cuando se expone a la misma. De manera ideal, el material absorbente no debería cambiar sustancialmente de forma química o física durante la vida útil de la formulación. Cualquier cambio de color en la mezcla después de la exposición (por ejemplo, cuando se forma un precipitado rojo) debe ser también claramente visible al usuario, a pesar de que pueda quedar cualquier material absorbente.

[0060]El material absorbente puede utilizar cualquier mecanismo adecuado para absorber la muestra de orina (por ejemplo, acción capilar o hinchamiento), siempre y cuando cause una absorción rápida de la muestra de orina, después de lo cual la muestra de orina y el reactivo que contiene mercurio quedan bien mezclados. El material absorbente puede absorber la muestra de orina en su matriz, donde tiene lugar las reacciones y es visible cualquier cambio de color resultante en el propio material. La absorción de la muestra de orina puede provocar que el material absorbente libere el reactivo que contiene mercurio, en el que cualquier cambio de color resultante es visible en el líquido sobrenadante (y posiblemente contrastado con cualquier material absorbente restante). La absorción de la muestra de orina puede provocar que el material absorbente se hinche, se disuelva o se disgregue, en el que es visible cualquier cambio de color resultante en el líquido restante.

[0061] El material absorbente debe absorber rápidamente la muestra de orina. La determinación de si la muestra contiene las especies puede llevar aproximadamente 5 minutos. De este modo, a efectos de que el reactivo que contiene mercurio tenga tiempo para reaccionar con las especies (si están presentes) para generar su respuesta colorimétrica, una parte sustancial de la muestra de orina debe ser absorbida por el material absorbente (de manera que cualquier especie en la muestra pueda reaccionar con el reactivo que contiene mercurio) en significativamente menos de 5 minutos. El tiempo en el que el material absorbente absorbe la muestra de orina dependerá de factores, tales como los volúmenes relativos de la muestra de orina y el tamaño del material absorbente, la naturaleza de la muestra de orina, la acidez del reactivo que contiene mercurio, etc. Sin embargo, de acuerdo con la presente invención, la muestra de orina (o como mínimo un volumen apropiado de la misma) es absorbida en menos de 3 minutos (por ejemplo, 1-2 minutos) después de la exposición del material absorbente a la muestra de orina. El tiempo necesario para el que el material absorbente absorba la muestra de orina puede ser aproximadamente de 150 segundos, aproximadamente de 120 segundos, aproximadamente de 90 segundos, aproximadamente de 60 segundos o aproximadamente de 30 segundos.

[0062] El material absorbente puede ser, por ejemplo, un material fibroso (por ejemplo, proporcionado como una almohadilla o alfombrilla) o un polvo compacto (por ejemplo, proporcionado como un comprimido). Por ejemplo, el material absorbente puede formarse a partir de cualquiera de los siguientes materiales: pulpa de papel, algodón, fibras de celulosa (por ejemplo, cáñamo blanqueado y fibras de bambú), fibras sintéticas (por ejemplo, en forma de microfibra de tal modo que absorben por vía capilar), fibras o polímeros superabsorbentes (por ejemplo, basados en derivados de ácido acrílico), fibras de alcohol polivinílico (PVA) y fibras sintéticas o naturales que contienen polímeros superabsorbentes (SAPs). También se puede utilizar un material absorbente que comprende dos o más de estos materiales.

[0063] Se puede proporcionar el material absorbente en cualquier forma física adecuada, por ejemplo, forma fibrosa (por ejemplo, para materiales textiles), forma compacta (por ejemplo, para alfombrillas o comprimidos fabricados a partir de polvos comprimidos), en forma de lámina (por ejemplo, para materiales de celulosa) o forma de pelusa (floca). Cuando el material absorbente es algodón, el algodón puede estar en forma de lámina, tejido y/o pelusa. Cuando el material absorbente es pulpa de papel, la pulpa de papel puede estar en forma de lámina o pulpa de pelusa. Cuando el material absorbente es PVA, el PVA puede estar en forma de lámina o fibra. Los polímeros superabsorbentes pueden hilarse en hilos, pueden flocarse o tejerse y pueden estar reticulados con acrilato de sodio, ácido acrílico o acrilato de metilo.

[0064] El material absorbente puede tener cualquier tamaño conveniente. Las dimensiones del material absorbente pueden seleccionarse para coincidir con las de las celdas de un recipiente de prueba, de tal modo que puedan encajar perfectamente en las mismas (tal como se describe a continuación).

[0065] La cantidad de reactivo que contiene mercurio contenido en el material absorbente dependerá de factores, tales como la concentración esperada de las especies en la muestra, el volumen de la muestra, etc. Está dentro de la capacidad de un experto en la materia estimar la cantidad de reactivo que contiene mercurio que se necesita para cualquier formulación determinada, así como la forma, tamaño, densidad y tipo correspondientes del material absorbente adecuado para una aplicación particular. Estos parámetros pueden seleccionarse de tal modo que el material absorbente pueda encajar perfectamente en una celda de un kit de prueba (descrito a continuación), absorber rápidamente sustancialmente toda la orina que se espera que se introduzca en la celda y mostrar claramente cualquier cambio de color resultante.

[0066] La formulación puede comprender entre aproximadamente el 10 y el 30 % en volumen (por ejemplo, entre aproximadamente el 15 y el 25 % en volumen, entre aproximadamente el 15 y el 20 % en volumen o aproximadamente el 20 % en volumen) del volumen total del material absorbente. El material absorbente puede contener entre aproximadamente 0,01 y aproximadamente 5 ml, entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente 3 ml, entre aproximadamente 1 y aproximadamente 2 ml o entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente 1,5 ml (por ejemplo, aproximadamente 1 ml) del reactivo que contiene mercurio.

[0067] El reactivo que contiene mercurio se puede incorporar en el material absorbente de cualquier manera adecuada, siempre y cuando, cuando se incorpora, no exista sustancialmente ningún escape del reactivo que contiene mercurio. De manera ideal, el material absorbente será sustancialmente seco, con el reactivo que contiene mercurio contenido de manera segura en la parte interior del material.

[0068] El material absorbente se puede impregnar en una solución que contiene el reactivo que contiene mercurio durante un periodo de tiempo suficiente para absorber una cantidad eficaz del reactivo que contiene mercurio. A continuación, se puede dejar secar el material absorbente, ya sea con aire o mediante calor (siempre y cuando el reactivo que contiene mercurio sea estable térmicamente).

Otros componentes

[0069]El reactivo que contiene mercurio o la formulación de la presente invención pueden incluir también otros componentes. El reactivo que contiene mercurio o la formulación de la presente invención pueden incluir también agentes, tales como agentes de dispersión, agentes solubilizantes, agentes humectantes o agentes emulsionantes para mejorar (o de manera ventajosa alterar) las propiedades del gel portador (por ejemplo, sus propiedades de disgregación) o el material absorbente (por ejemplo, sus propiedades de absorción). Por ejemplo:

• los agentes de dispersión pueden ayudar a dispersar rápidamente el reactivo que contiene mercurio por la muestra de orina de un paciente, o para ayudar a dispersar rápidamente el gel portador;

• los agentes solubilizantes pueden ayudar en la solubilización de los componentes de la formulación y la muestra de orina de un paciente, lo que puede potenciar cualquier reacción entre los mismos;

• los agentes humectantes pueden ayudar a los componentes en la formulación y la muestra de orina de un paciente a mezclarse, lo que puede potenciar cualquier reacción entre los mismos; y

• los agentes emulsionantes pueden ayudar a componentes ligeramente inmiscibles en la formulación y la muestra de orina de un paciente a mezclarse más íntimamente (y, por lo tanto, potenciar cualquier reacción entre los mismos).

[0070]Las formulaciones de la presente invención se pueden proporcionar en cualquier forma conveniente. Sin embargo, debido a la naturaleza tóxica del mercurio, aunque la formulación podría suministrarse a granel, normalmente se proporcionaría en forma unitaria para minimizar la manipulación. Por ejemplo, una cantidad adecuada (por ejemplo, en volumen, cuando el reactivo que contiene mercurio está incluido en el gel portador) de la formulación se puede suministrar en una forma unitaria. De manera similar, una cantidad adecuada (por ejemplo, en volumen o peso) del reactivo que contiene mercurio se puede suministrar en una pieza de tamaño pequeño de material absorbente. Esta forma unitaria, por ejemplo, se suministraría en su propio recipiente (por ejemplo, vial o ampolla) para su uso posterior por el paciente o el médico cuando se administre la prueba. El recipiente se puede adaptar para recibir un volumen de la muestra de orina en el mismo (de tal modo que el volumen apropiado de una muestra de orina simplemente se puede añadir al recipiente, el recipiente se sella y, a continuación, se agita hasta la disgregación del gel y permitir que el reactivo que contiene mercurio reaccione con las especies en la orina).

[0071]El volumen de la muestra de orina que se necesita para detectar si la muestra de orina contiene las especies puede variar dependiendo de la naturaleza de las especies a detectar, su probable concentración en la muestra de orina del paciente y otros factores conocidos por un experto en la materia o fácilmente determinables utilizando experimentación de rutina. El volumen de la muestra de orina que se necesita para detectar si la muestra de orina contiene las especies puede variar entre aproximadamente 50-150 % del volumen de la formulación (por ejemplo, el volumen de la muestra de orina es aproximadamente el 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 100 %, 110 %, 120 %, 130 %, 140 % o 150 % del volumen de la formulación). Si el volumen de la muestra de orina utilizado es demasiado bajo, entonces, la cantidad de especies presentes puede ser demasiado baja para ser detectadas y/o el gel portador puede no disgregarse completamente. Si el volumen de la muestra de orina utilizado es demasiado alto, entonces, el precipitado resultante puede no formarse o puede estar demasiado disperso para ser detectado.

[0072]Por ejemplo, 2-20 ml de una muestra de orina de un paciente pueden mezclarse con un volumen equivalente de la formulación.

Kit

[0073]La presente invención proporciona también un kit de detección de una especie indicativa de una enfermedad en un paciente. El kit incluye un reactivo que contiene mercurio que, cuando entra en contacto con una muestra de orina del paciente, indica de manera colorimétrica si la muestra de orina contiene la especie, y un portador no fluido en el que está incluido el reactivo que contiene mercurio, pero que, después de la exposición a la muestra de orina, provoca la mezcla rápida de sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio y la muestra de orina. El kit incluye también un recipiente en el que se contienen el portador no fluido y el reactivo que contiene mercurio. El reactivo que contiene mercurio y el portador no fluido en este kit son como se han descrito anteriormente.

[0074]Se puede utilizar cualquier recipiente con el kit, siempre y cuando el portador no fluido y el reactivo que contiene mercurio puedan contenerse de manera estable en el interior durante su vida útil (por ejemplo, se puede requerir que el recipiente sea estable con sustancias altamente ácidas). El recipiente se puede utilizar simplemente para albergar el reactivo que contiene mercurio y el portador no fluido hasta que el kit esté listo para ser utilizado, tras lo cual se transfieren a otra ubicación. El recipiente puede ser un vial o una ampolla, tal como se ha descrito anteriormente. Sin embargo, tales viales o ampollas son más adecuados para ser utilizados por personal médico profesional y, de manera alternativa, el recipiente se puede adaptar para ser más «fácil de utilizar», incluso hasta el punto de ser adecuado para ser utilizado por el propio paciente, tal como se indica con más detalle a continuación.

[0075]El recipiente se puede adaptar para recibir la muestra de orina del paciente (por ejemplo, por un paciente ya sea orinando directa o indirectamente en el recipiente). El recipiente se puede adaptar para recibir un volumen predeterminado de la muestra de orina del paciente. Tal como se entendería, esto ayudaría a mejorar la precisión y la consistencia de los resultados de pruebas.

[0076]Tal como se describe en el presente documento, sería ventajoso proporcionar una prueba fiable para ser utilizada por el propio paciente. Por tanto, se puede proporcionar el kit de la presente invención en una forma que sea suficientemente sencilla para ser utilizada por los pacientes en casa (por ejemplo, con una muestra de orina), con instrucciones que se proporcionan con el kit que destacan la importancia de que el paciente busque consejo médico adicional en el caso de un resultado positivo.

[0077]El recipiente puede comprender una pluralidad de celdas, con como mínimo una de la pluralidad de celdas que contiene el portador no fluido y el reactivo que contiene mercurio; y como mínimo otra de la pluralidad de celdas que contiene una muestra de control del portador no fluido que no contiene el reactivo que contiene mercurio. La pluralidad de celdas se configura para permitir una comparación visual del color en cada una de la pluralidad de celdas.

[0078]Se puede realizar una comparación visual directa entre como mínimo dos de las celdas en el recipiente para proporcionar un resultado incluso más fiable debido a que se tienen en cuenta factores, tales como el color de la orina de un paciente (por ejemplo) o daltonismo potencial del paciente (o persona que evalúa los resultados).

[0079]En cada una de la pluralidad de celdas que contienen el portador no fluido y el reactivo que contiene mercurio pueden estar contenidas cantidades diferentes del reactivo que contiene mercurio. Después de exponerse a la muestra de orina de un paciente, la gradación de color a lo largo de estas celdas puede proporcionar resultados indicativos de una cantidad de las especies para ser detectadas (por ejemplo, tirosina) en la muestra, que puede tener correlación con la gravedad de la enfermedad.

[0080]A continuación se describirá una realización específica del recipiente para ser utilizado con el kit de la presente invención con referencia a la Figura 1. En la Figura 1 se muestra un dispositivo de prueba 10, que de manera general tiene una forma rectangular con lados opuestos 12, 14 que definen las partes de sujeción. La parte central del dispositivo 10 incluye una cavidad 16 que incluye cinco celdas separadas (aproximadamente 5 ml en volumen) que se muestran de manera general como 18, que están divididas por paredes que se muestran de manera general como 20. Las almohadillas con forma rectangular 22 de un material absorbente en el que que se ha absorbido el reactivo que contiene mercurio se ubican en la parte inferior de tres de las celdas 18. Las otras dos celdas 18 contienen almohadillas con forma rectangular 24 del mismo material absorbente, pero que no contienen ningún reactivo que contiene mercurio. Cada almohadilla 22, 24 tiene una forma para encajar perfectamente en su celda correspondiente 18, de tal modo que no sea probable que se caiga del dispositivo 10, ni siquiera en el caso de que el dispositivo 10 se vuelque boca abajo. Las paredes 20 están ligeramente más bajas que un borde 26 de la cavidad 16 por las razones descritas a continuación.

[0081]Durante su uso, un paciente desenvolvería el dispositivo y lo colocaría sobre una superficie estable y plana. A continuación, el paciente orinaría en una taza separada (no se muestra), rellenándola hasta un nivel estipulado (por ejemplo, tal como se muestra por un indicador de nivel en el recipiente). A continuación, el paciente puede sostener el dispositivo en la mano agarrándolo por los lados opuestos 12, 14 y, a continuación, puede volcar la orina de la taza en la cavidad 16 que, con la condición de que la cantidad estipulada de orina esté en la taza, rellenará la cavidad 16. Preferiblemente, por las razones indicadas anteriormente, la orina que se introduce en el dispositivo 10 debería ser de la mitad de la micción de la primera micción del paciente del día. Dado que las paredes 20 son ligeramente más bajas que el borde 26 de la cavidad 16, la orina tenderá a fluir desde una celda 18 a una celda adyacente 18 antes de alcanzar el nivel del borde 26. De este modo, todas las cinco celdas 18 deberían rellenarse con orina antes de que la orina alcance el borde 26, en cuyo momento el dispositivo 10 está lleno.

[0082]Cuando el dispositivo está lleno con la orina del paciente, el dispositivo 10 debería colocarse a un lado durante un periodo de tiempo establecido (por ejemplo, 1-5 minutos), durante cuyo tiempo las almohadillas absorbentes 22, 24 absorberán la orina rápidamente. Cuando haya pasado el periodo de tiempo establecido, el paciente simplemente vacía la orina restante del dispositivo 10 y examina visualmente el color de las almohadillas absorbentes 22, 24. El color resultante de las almohadillas absorbentes 22 es un indicativo de si la orina del paciente contiene las especies relevantes (por ejemplo, la almohadilla se habrá vuelto de color rojo si está presente la tirosina en la orina del paciente, cuando se utiliza el dispositivo 10 para detectar cáncer colorrectal). El color resultante de las almohadillas absorbentes 24 se puede contrastar visualmente con el de las almohadillas 22 en el caso de que el paciente sea daltónico o la orina del paciente esté altamente coloreada (por ejemplo, como puede ser el caso si el paciente está deshidratado, por ejemplo).

[0083]La cantidad del reactivo que contiene mercurio que se encuentra en las almohadillas 22 puede ser diferente para proporcionar una gradación en el color para un resultado positivo, lo cual puede proporcionar resultados indicativos de la cantidad de las especies que se detectan (por ejemplo, tirosina) en la orina del paciente. También se puede proporcionar una tabla de colores (no se muestra) para proporcionar asistencia adicional al apaciente en la evaluación de los resultados.

[0084]La muestra de orina del paciente se puede exponer a la formulación utilizando cualquier técnica adecuada, pero de la manera más común esto involucraría añadir la muestra de orina a la formulación y agitar la mezcla resultante (por ejemplo, en formulaciones que contienen un gel portador) o dejar reposar la mezcla resultante (por ejemplo, en las formulaciones que contienen un material absorbente) durante un periodo de tiempo adecuado (por ejemplo, 1-2 minutos). A continuación, la mezcla se puede dejar reposar durante un periodo de tiempo adecuado (por ejemplo, 1-5 minutos), durante el cual la formación de un producto de color (por ejemplo, un precipitado rojo) es indicativa de la presencia de las especies. El procedimiento completo podría tardar tan poco como aproximadamente 2, 3, 4, 5, 6 o 7 minutos, y se podría llevar a cabo por los propios pacientes.

[0085]Tal como se indica anteriormente, la muestra de fluido es una muestra de orina del paciente. De manera preferente, la muestra de orina se obtiene a media micción de la primera micción del paciente. Pueden utilizarse dispositivos de recogida de orina especializados para recoger las muestras de orina de un paciente.

[0086]La presente invención proporciona la formulación de acuerdo con el primer aspecto de la presente invención para ser utilizada en la detección de una especie indicativas de una enfermedad en un paciente.

Ejemplos

Ejemplo 1A

[0087]Se preparó una formulación de acuerdo con una realización de la presente invención mezclando 2 ml del componente (1), 2,4 ml de (2), 0,6 ml de (3) y 0,1 ml de (4), donde los componentes son los siguientes

1) solución al 18 % de sulfato de mercurio en ácido sulfúrico 6 M

2) solución al 65 % de nitrato de mercurio en ácido nítrico 12 M

3) solución al 3 % de sulfato de níquel en agua destilada

4) solución al 4 % de 1-nitroso-2-naftol en ácido nítrico 6 M

[0088]1 ml de esta mezcla se pipeteó en un tubo de ensayo de 7 ml con un tapón dosificador de 1 ml. A continuación, se añadió 1 g de PVP K30 y la mezcla se agitó hasta que se formó un gel. El tubo de ensayo se tapó, con la formulación lista para ser utilizada.

[0089]Se descubrió que la formulación era estable (es decir, no se produjo licuación) utilizando una prueba de estabilidad acelerada bien conocida en la técnica, en la que la temperatura de la formulación se repitió en ciclos entre 50 °C y -50 °C cada hora durante 2 semanas (lo que equivale a una estabilidad de almacenamiento de aproximadamente 2 años a temperatura ambiente). Cuando se añadió la formulación envejecida a una muestra acuosa, se disolvió por completo en menos de 60 segundos.

Ejemplo 1B

[0090]1 ml de la mezcla del Ejemplo 1A se pipeteó en un tubo de ensayo de 7 ml con un tapón dosificador de 1 ml. A continuación, se añadió 1 g de Pluronic F88 y la mezcla se agitó hasta que se formó un gel. El tubo de ensayo se tapó, con la formulación lista para ser utilizada.

[0091]Se llevaron a cabo las pruebas de estabilidad similares a las indicadas anteriormente en el Ejemplo 1A sobre la formulación, obteniéndose resultados similares (es decir, estabilidad y tiempo de disolución).

Ejemplo 2A

[0092]Se preparó una formulación de acuerdo con otra realización de la presente invención mezclando 2 ml del componente (1), 2,0 ml de (2), 1,0 ml de (3) y 0,1 ml de (4), donde los componentes son los siguientes:

(1) Solución al 18 % de sulfato de mercurio en 6 mol de ácido sulfúrico

(2) Solución al 65 % de nitrato de mercurio en 12 mol de ácido nítrico

(3) Solución al 3 % de sulfato de níquel en agua destilada

(4) Solución al 10 % de sulfato de cadmio en 6 mol de ácido nítrico

[0093]1 ml de esta mezcla se pipeteó en un tubo de ensayo de 7 ml con un tapón dosificador de 1 ml. A continuación, se añadió 1 g de PVP K30 y la mezcla se agitó hasta que se formó un gel. El tubo de ensayo se tapó, con la formulación lista para ser utilizada.

[0094]Se llevaron a cabo las pruebas de estabilidad similares a las indicadas anteriormente en el Ejemplo 1A sobre la formulación, obteniéndose resultados similares (es decir, estabilidad y tiempo de disolución).

Ejemplo 2B

[0095]Se pipeteó 1 ml de la mezcla del Ejemplo 2A en un tubo de ensayo de 7ml con un tapón dosificador de 1 ml. A continuación, se añadió 1 g de Pluronic F88 y la mezcla se agitó hasta que se formó un gel. El tubo de ensayo se tapó, con la formulación lista para ser utilizada.

[0096]Se llevaron a cabo pruebas de estabilidad similares a las descritas anteriormente en el Ejemplo 1A sobre la formulación, donde se obtuvieron resultados similares (es decir, estabilidad y tiempo de disolución).

Ejemplo 3

[0097]Los experimentos se llevaron a cabo para confirmar la estabilidad de las formulaciones de acuerdo con la presente invención bajo las condiciones de almacenamiento, así como su capacidad de disgregarse rápidamente cuando se exponen a una muestra de orina. En estos experimentos, la estabilidad y el tiempo de disolución del gel se evaluaron de manera visual, evaluándose la estabilidad mediante la confirmación de que el gel no licuaba (es decir, antes de ser mezclado con la muestra de orina), cuando se sometía a ciclos de temperaturas entre -50 °C y 50 °C cada hora durante 2 semanas. La disolución total se definió como el tiempo tomado a partir de la mezcla de la formulación/muestra de orina y la agitación hasta que no queden fragmentos visibles del gel en la mezcla.

[0098]Se prepararon las formulaciones que contenían el mismo reactivo que contiene mercurio, pero diferentes gel portadores, y se evaluaron sus tiempos de disolución y estabilidad. Los resultados se muestran a continuación en la Tabla 1.

Tabla 1

Ejemplo 4

[0099]En un estudio clínico, la formulación del Ejemplo 1A se mezcló con muestras de la orina de la mitad de la micción de la primera micción de los pacientes indicados a continuación, se agitó y el color de la mezcla resultante se evaluó con referencia a la Tabla 2. Los pacientes se habían diagnosticado por separado para las afecciones especificadas utilizando técnicas convencionales (por ejemplo, una colonoscopia para el cáncer colorrectal), y este estudio clínico se llevó a cabo para evaluar la fiabilidad de una formulación de acuerdo con la presente invención.

[0100]De los 100 pacientes a quienes se les había diagnosticado mediante procedimientos conocidos que padecían cánceres colorrectales, 99 pacientes mostraron un resultado altamente positivo a la formulación, mientras que uno mostró un resultado débilmente positivo. Esto equivale a una tasa de detección del 100 %.

[0101]De los 36 pacientes a quienes se les había diagnosticado cáncer de mama mediante procedimientos conocidos, 33 pacientes mostraron un resultado altamente positivo a la formulación, mientras que dos tuvieron resultados débilmente positivos y uno fue negativo. Esto equivale a una tasa de detección de > 97 %.

[0102]De los 40 pacientes a quienes se les había diagnosticado cáncer de vejiga mediante procedimientos conocidos, todos los pacientes mostraron un resultado altamente positivo a la formulación. Esto equivale a una tasa de detección del 100 %.

[0103]En estas pruebas los resultados se clasificaron en cuatro categorías: negativo, débilmente positivo, positivo y altamente positivo. La categoría pertinente se determinó basándose en el color al que se cambió la formulación después de la mezcla con la muestra de fluido de paciente, tal como se muestra en la Tabla 2. El inventor ha llevado a cabo pruebas exhaustivas para confirmar que los colores enumerados en la Tabla 2 tienen correlación con la cantidad indicada de tirosina. También se puede proporcionar una carta de colores para ayudar a distinguir entre rojo claro, rojo y rojo intenso (aunque cualquier forma de resultado positivo debería incitar al paciente a buscar el consejo de un médico registrado para pruebas adicionales).

T l 2

[0104]A modo de comparación, 118 personas sanas normales se sometieron a pruebas durante chequeos de salud regulares, y se descubrió que la tasa de falsos positivos era inferior al 2,54 %.

Ejemplo 5

[0105]La capacidad de diferentes materiales absorbentes para absorber y contener el reactivo que contiene mercurio y entonces posteriormente absorber la orina, se analizó del modo que se describe a continuación. En primer lugar, se evaluó la capacidad de diversos materiales absorbentes para absorber el reactivo y la solución de orina bajo condiciones de hinchamiento libre. En segundo lugar, se evaluó su capacidad para retener el reactivo y la orina cuando posteriormente se colocó bajo presión.

Materiales:

[0106]

Material absorbente (véase la Tabla 3)

Reactivo que contiene mercurio (1 ml) - conforme al Ejemplo 1A

La muestra de orina (5 ml) - se analizó por separado mediante HPLC y mostró que contenía aproximadamente 2 mg/ml de tirosina, que es una cantidad normal de tirosina en la orina de un hombre adulto.

Materiales:

[0107]

Vaso de precipitados de vidrio de perfil bajo Griffin de 10 ml de Pyrex Vists con una altura de 33 mm y un diámetro exterior de 25 mm

Embudo Buchner de Pyrex con disco Sintaglass (poro de 50 micrómetros (micras)) con diámetro de 20 mm Émbolo para encajar en el embudo (100 g, con diámetro de 19 mm). Encajar un anillo de goma de sellado al émbolo para evitar el derrame de líquido. Este émbolo está diseñado para ejercer una presión de 3,45 kilopascales (0,5 psi) sobre el material de prueba que está contenido en el embudo.

Balanza (capaz de medir 0,001 g)

Cronómetro

Espátula de acero

Guantes quirúrgicos (para evitar la transferencia de humedad)

Procedimiento:

A) Reactivo que contiene mercurio

[0108]

1. Humedecer previamente el embudo con agua destilada y escurrir completamente

2. Colocar 1,0 g del material absorbente en el tubo de muestra y registrar el peso como P1.

3. Añadir 1 ml del reactivo que contiene mercurio y registrar el peso como<p>2.

4. Mantener el material absorbente humedecido hasta que se haya absorbido el reactivo (1 minuto).

5. Transferir el contenido del tubo de muestra al embudo Sintaglass

6. Permitir que el reactivo que contiene mercurio no absorbido se vacíe en un tubo pesado previamente (P3) durante 5 minutos y registrar el peso total como P4. Asegurar que todo el material absorbente ha sido transferido utilizando la espátula de acero

7. Colocar el émbolo (sin ejercer presión) sobre el material absorbente

8. Vaciar durante cinco minutos adicionales bajo la carga del émbolo en el tubo pesado previamente

9. Medir el peso total del reactivo que contiene mercurio en el tubo pesado previamente junto con el que se hubiera salido al pasar el émbolo y registrar como P5.

10. Registrar la apariencia visible del reactivo que contiene mercurio en el material absorbente

B) La orina en el material absorbente que contiene 1 ml del reactivo que contiene mercurio (es decir, preparado de acuerdo con el procedimiento A))

[0109]

1. Humedecer previamente el embudo con agua destilada y escurrir completamente

2. Colocar el material absorbente en el tubo de muestra y registrarlo como R1.

3. Añadir 5 ml de orina y registrarla como R2

4. Mantener el material humedecido hasta que se haya absorbido la orina (2 minutos).

5. Transferir el contenido del tubo de muestra al embudo Sintaglass

6. Permitir que la orina no absorbida se vacíe en un tubo pesado previamente (R3) durante 5 minutos y registrar el peso total como R4. Asegurar que todo el material ha sido transferido utilizando la espátula de acero

7. Colocar el émbolo (sin ejercer presión) sobre el material restante

9. Medir el peso total de la orina en el tubo pesado previamente junto con la que se hubiera salido al pasar el émbolo y registrar como R5.

10. Registrar la apariencia visible de la orina en el material absorbente

Cálculos:

Reactivo:

[0110]

La hinchamiento libre (g/g) se calcula como: (P2 - [P4 - P3]) / P1

La retención (g/g) se calcula como: (P2 - [P5 - P3]) / P1

Orina:

[0111]

La hinchamiento libre (g/g) se calcula como: (R2 - [R4 - R3]) / R1

La retención (g/g) se calcula como: (R2 - [R5 - R3]) / R1

[0112]Estos resultados muestran que todos los tipos de materiales absorbentes de ejemplo absorben muy rápidamente el reactivo con muy poco hinchamiento y retienen el reactivo en los mismos, incluso cuando se someten a cantidades importantes de presión. Los materiales absorbentes también absorben rápidamente (en menos de un minuto) la orina. El color del material absorbente después de que se haya absorbido la orina normalmente era de un color de orina amarillento típico, tal como se esperaría, ya que la orina no contenía niveles elevados de tirosina.

Ejemplo 6

[0113]Se llevó a cabo un conjunto de pruebas clínicas a efectos de confirmar que las almohadillas absorbentes descritas en el presente documento son portadores adecuados para un reactivo que contiene mercurio y para el uso en la presente invención. En estas pruebas clínicas, se añadió la orina de una variedad de pacientes a un recipiente que incluía 4-6 celdas, en cada una de las cuales se encontraba una almohadilla absorbente que comprendía un polímero superabsorbente. Algunas de las almohadillas absorbentes eran placebos, tal como se describe anteriormente, otras almohadillas absorbentes contenían el reactivo que contiene mercurio del Ejemplo 1A.

[0114]Una mujer de 88 años de edad presentaba una deficiencia moderada de hierro, pero con niveles normales de hemoglobina. Una FOBT (prueba de sangre oculta en heces) también había mostrado un resultado positivo. Se analizó su muestra de orina y se produjo un resultado positivo (cambio de color positivo en una de las celdas), lo que indica un riesgo alto de tumor maligno y, por consiguiente, se inició una investigación más urgente. Una colonoscopia mostró que la paciente tenía cáncer de colon en fase 1 (adenocarcinoma).

[0115]Un paciente de 57 años de edad presentaba anemia con deficiencia de hierro. Su CEA fue normal y un escáner CT de su abdomen/pelvis no mostró ningún fallo agudo. Sin embargo, se obtuvo un resultado moderamente positivo utilizando la prueba de la presente invención, lo que indica la urgencia de investigación adicional. Una colonoscopia posterior reveló un pólipo grande de 8 x 3 cm transversal proximal que se eliminó mediante endoscopia. La histología reveló un pequeño foco de adenocarcinoma moderamente diferenciado, por lo que se recomendó cirugía para limpiar la región. La hemicolectomía derecha posterior reveló un pequeño cáncer residual en fase 1.

[0116]Un paciente hombre de 75 años de edad con cáncer de colon en fase 3B devolvió una prueba FOB positiva, así como un resultado positivo utilizando la prueba de la presente invención. Se llevó a cabo una colonoscopia urgente, que reveló cáncer de sigmoide con úlceras que precisaba de hemicolectomía izquierda. Su CEA también era elevado de 11 (0-5) y un escáner de CT mostró cáncer de sigmoide y nódulos sospechosos en hígado, posiblemente con metástasis.

[0117]Un hombre de 85 años de edad presentaba diarrea y pérdida de peso. Un escáner de CT mostró engrosamiento del sigmoide con metástasis sospechosa en hígado. Su orina se analizó y mostró un resultado apositivo (cambio de color positivo en una de las celdas). La cirugía posterior confirmó adenocarcinoma peritoneal metastásico (fase 4).

[0118]Un hombre de 73 años de edad presentaba anemia y melena mientras tomaba Xarelto para FA. Mostró PET y escáner de CT negativos. Sin embargo, se analizó su orina y mostró un resultado apositivo (cambio de color positivo en una de las celdas). Una gastroscopia posterior reveló un adenocarcinoma gástrico de 5 cm y se someterá a quimioterapia neoadyuvante antes de la futura cirugía.

[0119]Una mujer de 69 años de edad presentaba una repentina pérdida de peso y anemia con deficiencia de hierro. Los escáneres de CT mostraron una enfermedad hepática metastásica con metástasis omental y engrosamiento de la pared derecha del colon y posible cáncer de células renales. Se analizó su orina y mostró un resultado apositivo (cambio de color positivo en una de las celdas). Una colonoscopia posterior reveló cáncer de colon derecho -adenocarcinoma.

[0120]Un hombre de 85 años de edad con cáncer de vesícula biliar con metástasis tuvo un tumor incidental que se descubrió mediante un escáner de CT realizado debido al comienzo de un nuevo estreñimiento. Sin embargo, una colonoscopia de pólipos de la vesícula biliar de seguimiento fue normal. El pólipo creció en tamaño desde 4 mm hasta 25 mm a lo largo de un periodo de 18 meses, pero era asintomático. Sin embargo, se analizó su orina y mostró un resultado apositivo (cambio de color positivo en una de las celdas). La cirugía posterior confirmó adenocarcinoma de vesícula biliar.

[0121]La orina de un hombre de 58 años de edad mostró un resultado positivo (cambio de color positivo en una de las celdas). Una colonoscopia posterior reveló un pólipo rectal que parecía maligno, que se extirpó por completo mediante endoscopia con solamente un foco de adenocarcinoma. Su CEA fue normal, y un escáner de CT de su abdomen/pelvis y un MRI de su recto fueron todos normales. Su PSA era elevado 6,0 (0-3,5). Pendiente de investigación adicional.

[0122]Se entenderá que la presente invención proporcione una serie de resultados nuevos y útiles y ventajas sobre pruebas de diagnóstico existentes. Por ejemplo, la presente invención puede proporcionar una o más de las siguientes ventajas:

• el reactivo que contiene mercurio está contenido de forma segura en el gel o material absorbente;

• se pueden obtener resultados fiables debido a la mezcla rápida del reactivo que contiene mercurio y la muestra de orina (no hay lugar para dudas);

• el recipiente no necesariamente debe ser un recipiente de vidrio; se pueden utilizar recipientes de plástico (incluso si el reactivo que contiene mercurio es altamente ácido);

• se puede proporcionar el recipiente en forma de un dispositivo de recogida de orina, convirtiéndolo en incluso más sencillo para ser utilizado;

• la aprobación regulatoria es posiblemente más sencilla de obtener debido a que la prueba es simplemente indicativa de una enfermedad o afección potencial, donde la necesidad de que el paciente busque consejo médico profesional en caso de un resultado positivo; y

• las personas con relativamente poca (o ninguna) formación médica pueden llevar a cabo las pruebas, por ejemplo, los pacientes por sí mismos.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Formulación para la detección de una especie indicativa de una enfermedad en un paciente, comprendiendo la formulación:

un reactivo que contiene mercurio que comprende mercurio disuelto en una solución ácida y que, cuando entra en contacto con una muestra de orina del paciente, indica de manera colorimétrica si la muestra de orina contiene la especie,

en la que el reactivo que contiene mercurio está contenido en un gel portador que, tras exponerse a la muestra de orina, se disgrega en menos de 3 minutos para liberar sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio, provocando de este modo una mezcla rápida del reactivo que contiene mercurio y la muestra de orina.

2. Formulación, según la reivindicación 1, en la que el gel portador se disgrega para liberar sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio en menos de 1 minuto después de la exposición a la muestra de orina.

3. Formulación, según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en la que el gel portador es un hidrogel.

4. Formulación, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que el gel portador se forma a partir de cualquiera de los siguientes: poliacrilamidas, carboximetil celulosa, alcohol polivinílico, poli(acrilamida-co-ácido maleico), poli(vinilpirrolidona), alginatos, carbómeros, polioxímeros, gomas naturales y sintéticas y mezclas de los mismos.

5. Formulación para la detección de una especie indicativa de una enfermedad en un paciente, comprendiendo la formulación:

en la que el reactivo que contiene mercurio está contenido en un material absorbente que, tras la exposición a la muestra de orina, absorbe la muestra de orina en menos de 3 minutos, provocando de este modo la mezcla rápida de sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio y la muestra de orina.

6. Formulación, según la reivindicación 5, en donde el material absorbente es un material fibroso.

7. Formulación, según la reivindicación 5 o la reivindicación 6, en la que el material absorbente se forma a partir de cualquiera o más de los siguientes: pulpa de papel, algodón, fibras de celulosa, fibras sintéticas, polímeros superabsorbentes y fibras de alcohol polivinílico.

8. Formulación, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que el reactivo que contiene mercurio comprende una fuente de iones de Hg+ y una fuente de iones de Hg2+ en una solución ácida.

9. Formulación, según la reivindicación 8, en la que el reactivo que contiene mercurio comprende además uno o más de los siguientes: una fuente de iones de Ni2+, una fuente de iones de Cd2+, 1-nitroso-2-naftol, un compuesto de diazonio y un compuesto azo.

10. Formulación, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en la que la especie indicativa de una enfermedad en un paciente es tirosina.

11. Almohadilla absorbente para la detección de una especie indicativa de una enfermedad en un paciente, comprendiendo la almohadilla:

un material absorbente adaptado para absorber rápidamente una muestra de orina del paciente;

un reactivo que contiene mercurio que comprende mercurio disuelto en una solución ácida y contenido en el material absorbente, siendo el reactivo que contiene mercurio capaz de indicar de manera colorimétrica si la muestra de orina del paciente contiene la especie al entrar en contacto con la muestra de orina;

mediante lo cual, tras la exposición de la almohadilla a la muestra de orina, el material absorbente absorbe la muestra de orina en menos de 3 minutos, provocando de este modo la mezcla rápida de sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio y la muestra de orina.

12. Kit para la detección de una especie indicativa de una enfermedad en un paciente, comprendiendo el kit: un reactivo que contiene mercurio que comprende mercurio disuelto en una solución ácida y que, cuando entra en contacto con una muestra de orina del paciente, indica de manera colorimétrica si la muestra de orina contiene la especie,

un gel portador en el que está contenido el reactivo que contiene mercurio, pero que, tras exponerse a la muestra de orina, se disgrega en menos de 3 minutos para liberar sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio, provocando de este modo una mezcla rápida del reactivo que contiene mercurio y la muestra de orina; y un recipiente en el que están contenidos el gel portador y el reactivo que contiene mercurio.

13. Kit para la detección de una especie indicativa de una enfermedad en un paciente, comprendiendo el kit: un reactivo que contiene mercurio que comprende mercurio disuelto en una solución ácida y que, cuando entra en contacto con una muestra de orina del paciente, indica de manera colorimétrica si la muestra de orina contiene la especie,

un material absorbente en el que está contenido el reactivo que contiene mercurio, pero que, tras exponerse a la<muestra de orina, absorbe la muestra de orina en menos de 3 minutos, provocando de este modo una mezcla rápida>de sustancialmente todo el reactivo que contiene mercurio y la muestra de orina; y

un recipiente en el que están contenidos el material absorbente y el reactivo que contiene mercurio.