CN1068946C

CN1068946C - 一种癌症尿检试剂

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Publication number: CN1068946C
Application number: CN 97101359
Authority: CN
Inventors: 傅敏恭
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1997-01-30
Filing date: 1997-01-30
Publication date: 2001-07-25
Anticipated expiration: 2017-01-30
Also published as: CN1189619A

Abstract

本发明涉及癌症尿检比色试剂，其显示剂的配方为：30-60%硝酸亚汞为A试剂，15-40%硫酸汞为B试剂，或硝酸汞饱和溶液为B’试剂，以硝酸锌和/或硝酸镉或硼酸为稳定剂，偏重亚硫酸钠或亚硫酸钠或亚硫酸氢钠为抗氧化剂。各种试剂按比例配制后，用安瓿瓶充氮灌装，制成每支含检测剂0.5-1毫升的癌症尿检比色检测剂，本发明的检测剂用于临床显示出灵敏度高，特异性高，且容易操作等特点。

Description

一种癌症尿检试剂

本发明涉及一种疾病的检测试剂，特别涉及一种癌症尿检比色试剂。

根据对大量正常人，一般病人及癌症患者尿样的核磁共振分析。发现癌症患者尿液中有特异性物质，该物质属羟基苯基衍生物。例如羟苯基丙氨酸，羟苯基丙酮酸，羟苯氨基乙酸等。米伦(Millon)据此发明了Hg⁺一硝酸测定羟苯基丙氨酸的米伦试剂US5.066、601提出Hg⁺、Hg²⁺酸性溶液癌症检测试剂，用于临床。CN1096374“癌症显示剂”专利申请，对米伦试剂加以改进，提出了Hg⁺、Hg²⁺和1或Ni²⁺组成的酸性溶液癌症显示试剂。根据大量的临床研究，发现该试剂存在以下问题：(1)HNO₃-H₂SO₄酸性体系的Hg⁺/Hg²⁺浓度较低，因此临床的灵敏度偏低，(2)作为稳定剂的Ni²⁺，由于Ni²⁺离子的兰绿色，当用量过多时会影响沉淀的颜色，因此影响检测。( 3)由于Hg⁺的还原性。在空气中容易被氧化，而该显示剂中缺乏抗氧化剂或者其它抗氧化措施以致显示剂不能长期保存，影响临床应用，(4)该显示剂用金属汞置换方法以及硝酸浓度过高(例如HNO₃浓度为12N)时都会释放出大量的氮化物有害气体。

本发明的目的在于克服已有技术存在的问题。研制一种适用于临床应用的，稳定性优良的，检测准确度较高的癌症检测剂，并设计一种结构简单。使用方便的癌症尿检比色装置。

本发明的目的采用如下方案实现：

对已有技术的癌症尿检比色方法加以改进。首先克服癌症尿检显示剂的缺点，发明新的配方，并设计出其比色装置。

一、癌症尿检显示剂配方(重量％)：

A试剂：硝酸亚汞溶解在硝酸溶液。硝酸溶液的浓度为4-10N，硝酸亚汞含量30～60％，

B试剂：硫酸汞溶解在硝酸溶液，硝酸溶液浓度为4-8N，硫酸汞含量10-40％。

B＇试剂：硝酸汞含量为饱和溶液

C试剂：稳定剂，硝酸锌和(或硝酸镉，浓度为0.5-10％，硼酸浓度为0.5-5％。

D试剂：抗氧化剂，偏重亚硫酸钠，亚硫酸钠、亚硫酸氢钠等。

A试剂和B或B＇试剂按10∶1-1∶10比例混合后，每100毫升加C试剂中的稳定剂硝酸镉或硝酸锌或硼酸。待完全溶解后再加亚硫酸钠等抗氧化试剂D，用安瓿瓶充氮灌装，制成每支含0.5～1毫升的癌症尿检比色检测剂。

二、检测方法：

本发明为目视比色试剂，不受尿样颜色的影响。试剂加入尿样后，几分钟就出现沉淀，根据沉淀的有无和沉淀的颜色可以判断被检测者是否患有癌症，其具体操作如下：取新鲜晨尿2毫升于比色试管中刻度处。加入检测试剂0.5毫升(即将安瓿瓶敲开，倒入试剂)，摇匀，放置5分钟，观察沉淀的有无和沉淀的颜色，并与标准色板对照：无沉淀或沉淀呈白色、淡黄、黄色、肉红色者为阴性；沉淀呈红色、棕红色、深红色者为阳性；沉淀呈棕色、灰绿色、绿色者为肝胆阻塞性疾患，是否癌症须进一步检查。

三、检测装置

在底板的中部用护条固定装尿样及癌症检测剂的溶液的试管，在试管下部两侧底板上对称设置左右导板，导板上设左右玻板，在玻板与导板之间插入左右色板，在底板的后部上设固定件，下设撑条，另设一色板袋，大袋分设若干小袋，每一小袋放一片色板，设不颜色的标准色板若干片，标准色板用纸或塑料制成。

本发明的癌症尿检比色方法及其装置曾在江西医学院第一附属医院等有关医院临床检测935病例，其中癌症患者352例，非癌症者(包括良性肿瘤等疾病患者)583例。临床检测结果如下：

1、灵敏度：试验检出有病(即阳性)的人占病人总数的比例，即真阳性率，本发明共检测癌症患者352例，其中阳性278例。灵敏度为79.0％，还有74例癌症者未能检出，在352例癌症患者中，有肺癌、鼻咽癌、淋巴瘤、肠癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、子宫癌等十余种。它们的检测率分别是：肺癌78％、鼻咽癌75％、淋巴瘤75.7％、肠癌81％、胃癌83.3％、乳癌79％、甲状腺癌81.8％等。临床检测结果表明，癌症患者经过有效治疗(包括化疗、放疗和手术等)病情好转者，其尿样检测常呈阴性反应，另外治疗情况也会出现假阴性，例如输液的种类和数量可以影响尿检所以在尿检试剂的应用时应予以注意。

2、特异度：试验检出无癌症(即阴性)的人占非癌症病人总数的比例，即真阴性率。本发明共检测其它疾病患者583例，其中阴性者570例，特异度为97.8％。另外还有13例为阳性(即假阳性)它们是：消化道2例，骨折3例，胆道疾病2例，糖尿病、引产、红斑狼疮、骨质增生、尿毒症和妇科各1例共计13例。据分析骨折患者由于骨组织的破坏引起骨组织蛋白质水解，使尿液中羟苯基衍生增多，容易引起假阳性反应，另外某些用药(例如维生素B₁₂的注射)和过多的食用高蛋白食物都可能出现假阳性。所以值得注意。

本发明的显著效果是：方法简单，检测剂是一种适用于临床应用的稳定性优良的，灵敏度和特异度高的癌症检测剂，本发明的装置是一种结构简单，使用方便的癌症尿检比色装置。

图面说明：

图1为本发明的装置的正视图，

图2为本发明的装置的侧视图，

图3为本发明的装置的色板袋示意图。

下面结合附图与实施例进一步说明本发明。

实施例。

把40克硝酸亚汞溶于100毫升5.0N HNO₃溶液中配成A试剂。把15克硫酸汞溶于100毫升6.0N HNO₃溶液配成B试剂，A试剂与B试剂按1.25∶3.50的比例混合后，每100毫升溶液中加稳定剂C硝酸镉5克，待完全溶解后再加抗氧化剂D亚硫酸钠2克，用安瓿瓶充氮灌装，每支注入溶液0.5毫升，制成瓶装癌症尿检比色检测剂。

采用的比色装置为：在底板1的中部用护条8固定装尿样及癌症检测剂溶液3的试管2，在试管2下部两侧底板1上设左右导板4、9。导板上设左右玻板5、10。在玻板与导板之间插入左右色板6、11，在底板1的后部上设固定件7，下设撑条12，另设一色板袋13，大袋分设10个小袋14，每一小袋放一个色板，共有不同颜色的十块纸质标准色板6、11。

一个典型病例：姚××，女，21岁，于96年2月出现腹胀，腰围增大，日渐消瘦，5月7日门诊腹水待查，收入院治疗，5月9日作癌症尿液比色检测，取新鲜晨尿2毫升于试管2中至刻度处，加入安瓿装中的检测试剂0.5毫升，摇匀。放在底板1上，用护条8固定试管2，放置5分钟，观察到溶液3中出现的沉淀，用标准比色板，插入左右导板4、9与左右玻板5、10之间，发现沉淀呈棕红与深红色之间，即为阳性，5月14日B超诊断右肝占位，5月18日甲胎蛋白)1000毫克，5月21日腹水细胞检查找到癌细胞，确诊为肝癌。

实施例2

把硝酸亚汞60克溶于100毫升10N HNO₃溶液制成A试剂，将硝酸汞溶液溶于蒸馏水制成饱和溶液B＇，A试剂与B＇试剂按9.1∶1.2的比例混合，每100毫升混合液中加稳定剂2克硼酸和抗氧化剂D偏重亚硫酸钠2克。然后进行充氮灌装，每支安瓿瓶装0.5毫升，制成本发明的检测试剂。用同实施例1的装置，标准色板6.11为塑料制的。对另一典型病例作检测：叶××，男，28岁，于96年2月底因腹胀疼食后常呕吐，在医院作钡餐检查诊断为十二指肠梗阻，5月5日住院，5月7日癌症尿样比色检测呈阳性(+)，5月11日手术发现结肠部恶变，术中取活物病理切片诊断为低分化腺癌(结肠癌)。

实施例3

把45克硝酸亚汞溶于100毫升7.0N HNO₃溶液，配成A试剂，把30克硫酸汞溶于100毫升7.0N HNO₃配成B试剂，A试剂与B试剂按3.5∶1.05的比例混合后，每100毫升溶液中加稳定剂C硝酸锌5克，待溶解后，再加抗氧化剂亚硫酸氢钠4克，用2毫升安瓿瓶充氮灌装，每支注入溶液0.5毫升，制成本发明的检测剂。用同实施例1的装置，对另一典型病例作检测：吴××，男，37岁于96年4月20日门诊体检，自述近期大便不畅，带血。食欲不佳，经癌症尿样比色检测呈阳性(+)，指诊直肠处有硬块感，收入院治疗，4月10日肠镜7.5处有恶变，取组织活检，病理诊断直肠癌。

实施例4

把硝酸亚汞50克溶于100毫升8N HNO₃溶液制成A试剂，将硫酸汞40克溶于8NHNO₃溶液制成B试剂，A试剂与B试剂按2.5∶3.5的比例混合后。每100毫升溶液中加稳定剂C硝酸镉和硝酸锌各3克，进行充氮灌装每支安瓿瓶装0.5毫升，制成本发明的癌症检测比色试剂。用同实施例1的装置。对另一典型病例作检测：张××男46岁，因腰部疼痛伴有全身关节疼痛，门诊体检，取尿样癌症比色检测阳性(+)，进一步X线摄片腰椎L4L5有骨质破坏，本周尿蛋白阳性，之后蛋白电泳检测出现M带，骨髓穿刺浆细胞57％，而确诊为多发性骨髓瘤，患者赴上海治疗。

Claims

1．一种癌症尿检试剂，其配方为：

A试剂：硝酸溶液，浓度为4-10N，硝酸亚汞含量为30-60重量％；

B试剂：硝酸溶液，浓度为4-8N，硫酸汞含量为15-40重量％；

B′试剂：硝酸汞的饱和溶液；

C试剂：稳定剂，浓度为0.5-10重量％的硝酸锌和/或硝酸镉或浓度为0.5-5重量％硼酸；

D试剂：抗氧化剂，浓度为1-10重量％偏重亚硫酸钠或亚硫酸钠或亚硫酸氢钠；

A试剂和B或B′试剂按10∶1-1∶10比例混合后，每100毫升加C试剂中的稳定剂硝酸镉和/或硝酸锌或硼酸，待完全溶解后再加亚硫酸钠或偏重亚硫酸钠或亚硫酸氢钠抗氧化剂D，用安瓿瓶充氮灌装，制成每支含检测试剂0.5-1毫升的癌症尿检比色试剂，

最终尿检试剂中，各成分重量比为：

Hg⁺/Hg²⁺为1-10∶1

硝酸镉∶亚硫酸钠为5∶2

硼酸∶偏重亚硫酸钠为1∶1

硝酸∶亚硫酸氢钠为5∶2

硝酸镉∶硝酸锌为1∶1。