JPH07325088A - グリコシル化たんぱくの判定方法およびその方法に使用する装置 - Google Patents
グリコシル化たんぱくの判定方法およびその方法に使用する装置Info
- Publication number
- JPH07325088A JPH07325088A JP3352453A JP35245391A JPH07325088A JP H07325088 A JPH07325088 A JP H07325088A JP 3352453 A JP3352453 A JP 3352453A JP 35245391 A JP35245391 A JP 35245391A JP H07325088 A JPH07325088 A JP H07325088A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sample
- determining
- substance
- glycosylated protein
- protein level
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6842—Proteomic analysis of subsets of protein mixtures with reduced complexity, e.g. membrane proteins, phosphoproteins, organelle proteins
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
- G01N33/721—Haemoglobin
- G01N33/723—Glycosylated haemoglobin
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【目的】簡単にしかも迅速に、血糖中のグリコシル化た
んぱく、ひいてはぶどう糖濃度を測定する。 【構成】血液試料をフェニル硼酸１８を含有するカート
リッジ１２と接触させる前（ＲＥＡＤ１）と接触させた
後（ＲＥＡＤ ２）とに、緩衝溶液内の血液試料に関す
る示度を光度計２８で読み取る。試料はカートリッジ１
２を通って移動され、またはカートリッジ１２が試料内
に浸漬される。グリコシル化たんぱくの含有量は電気化
学的又はエンタルピー計量的に検知されてもよい。
んぱく、ひいてはぶどう糖濃度を測定する。 【構成】血液試料をフェニル硼酸１８を含有するカート
リッジ１２と接触させる前（ＲＥＡＤ１）と接触させた
後（ＲＥＡＤ ２）とに、緩衝溶液内の血液試料に関す
る示度を光度計２８で読み取る。試料はカートリッジ１
２を通って移動され、またはカートリッジ１２が試料内
に浸漬される。グリコシル化たんぱくの含有量は電気化
学的又はエンタルピー計量的に検知されてもよい。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はグリコシル化たんぱくの
判定方法およびその方法に使用する装置に関し、特に生
物学的液体におけるグリコシル化ヘモグロビンおよびそ
の他のグリコシル化たんぱくの判定に関する。
判定方法およびその方法に使用する装置に関し、特に生
物学的液体におけるグリコシル化ヘモグロビンおよびそ
の他のグリコシル化たんぱくの判定に関する。
【０００２】
【従来の技術】特定の時点における血液中のぶどう糖濃
度を判定する従来の方法として、一連のスティックテス
トとメーター（stick tests and meters）があり、これ
らの方法は、例えば糖尿病患者等による日常的検査にし
ばしば使用される。
度を判定する従来の方法として、一連のスティックテス
トとメーター（stick tests and meters）があり、これ
らの方法は、例えば糖尿病患者等による日常的検査にし
ばしば使用される。
【０００３】ところが、このような従来の方法や装置に
より得られた結果は、血中ぶどう糖濃度の長期にわたる
制御について、正確な経過を表すために十分な信頼性の
置けるものではなかった。
より得られた結果は、血中ぶどう糖濃度の長期にわたる
制御について、正確な経過を表すために十分な信頼性の
置けるものではなかった。
【０００４】患者が医者を訪れると、患者から血液サン
プルが採血され、検査分析にまわされる。検査分析に
は、グリコシル化ヘモグロビンや、その他のグリコシル
化たんぱくの判定が含まれ、これにより信頼性のある長
期平均血中ぶどう糖濃度の経過が明らかにされる。
プルが採血され、検査分析にまわされる。検査分析に
は、グリコシル化ヘモグロビンや、その他のグリコシル
化たんぱくの判定が含まれ、これにより信頼性のある長
期平均血中ぶどう糖濃度の経過が明らかにされる。
【０００５】現在行われている検査分析技術としては、
ゲルクロマトグラフィやイオン交換液体クロマトグラフ
ィ（ＩＥＬＣ）がある。
ゲルクロマトグラフィやイオン交換液体クロマトグラフ
ィ（ＩＥＬＣ）がある。
【０００６】ゲルクロマトグラフィを使用した血液サン
プルの分析に要する時間は２〜３時間もかかる。
プルの分析に要する時間は２〜３時間もかかる。
【０００７】ＩＥＬＣ装置は大規模で高価である。ＩＥ
ＬＣを使用したクロマトグラムの実施までに、サンプル
を作成するための所要時間として４０分程度を要する。
更にクロマトグラムの実施のため７分程度を要する。
ＬＣを使用したクロマトグラムの実施までに、サンプル
を作成するための所要時間として４０分程度を要する。
更にクロマトグラムの実施のため７分程度を要する。
【０００８】上記従来の方法や装置はいずれも病院の医
師による使用には適していない。
師による使用には適していない。
【０００９】実用上、これらのテストの結果は、何日間
も検査機関から戻って来ないため、その間医師は検査結
果を患者に伝えたり、食事や治療法についてアドバイス
や変更をすることが出来ないという問題がある。
も検査機関から戻って来ないため、その間医師は検査結
果を患者に伝えたり、食事や治療法についてアドバイス
や変更をすることが出来ないという問題がある。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】本発明が解決しようと
する課題は、従来の方法の上記難点を解決することであ
る。
する課題は、従来の方法の上記難点を解決することであ
る。
【００１１】
【課題を解決するための手段】上記課題は、一定量の試
料を、水準測定の対象となるグリコシル化たんぱくに対
して親和性を有するか、または水準判定の対象となるグ
リコシル化たんぱく以外の試料内物質に対して親和性を
有する物質と接触させ、前記試料を光学的、電気化学的
またはエンタルピー測量的に判定し、および／または前
記物質を光学的、電気化学的またはエンタルピー測量的
に判定する試料の、グリコシル化たんぱく水準の判定方
法において、前記試料および／または物質がそれぞれ物
質および／または試料と接触する前に判定され、且つ前
記試料および／または物質がそれぞれ物質および／また
は試料と接触した後に判定され、これにより試料におけ
るグリコシル化たんぱく水準を表す示度を実質上即時に
得ることにより解決される。
料を、水準測定の対象となるグリコシル化たんぱくに対
して親和性を有するか、または水準判定の対象となるグ
リコシル化たんぱく以外の試料内物質に対して親和性を
有する物質と接触させ、前記試料を光学的、電気化学的
またはエンタルピー測量的に判定し、および／または前
記物質を光学的、電気化学的またはエンタルピー測量的
に判定する試料の、グリコシル化たんぱく水準の判定方
法において、前記試料および／または物質がそれぞれ物
質および／または試料と接触する前に判定され、且つ前
記試料および／または物質がそれぞれ物質および／また
は試料と接触した後に判定され、これにより試料におけ
るグリコシル化たんぱく水準を表す示度を実質上即時に
得ることにより解決される。
【００１２】また更には、試料のグリコシル化たんぱく
水準の判定装置であって、水準判定の対象となるグリコ
シルたんぱく質に対して親和性を有するか、または水準
判定の対象となるグリコシルたんぱく以外の試料内物質
に対して親和性を有する物質の担体と、前記試料を前記
物質と接続させる手段とからなり：
水準の判定装置であって、水準判定の対象となるグリコ
シルたんぱく質に対して親和性を有するか、または水準
判定の対象となるグリコシルたんぱく以外の試料内物質
に対して親和性を有する物質の担体と、前記試料を前記
物質と接続させる手段とからなり：
【００１３】前記試料を光学的、電気的化学的またはエ
ンタルピー測量的に判定し、および／または前記物質を
試料が物質と接触する前に光学的、電気化学的またはエ
ンタルピー測量的に判定すると共に、前記物質を接触後
においても光学的、電気化学的またはエンタルピー測量
的に判定するための手段を備えた装置を使用することに
より解決される。
ンタルピー測量的に判定し、および／または前記物質を
試料が物質と接触する前に光学的、電気化学的またはエ
ンタルピー測量的に判定すると共に、前記物質を接触後
においても光学的、電気化学的またはエンタルピー測量
的に判定するための手段を備えた装置を使用することに
より解決される。
【００１４】
【発明の構成並びに作用】たんぱくに対する親和性を有
する物質は、好ましくはフェニル酸またはその誘導体で
ある。
する物質は、好ましくはフェニル酸またはその誘導体で
ある。
【００１５】上記物質は、微粒子状態のヒドロキシエチ
ルメタクリレート共重合体やポリアミド膜等の適宜の保
持体に結合されるのが好ましい。あるいは、上記物質を
フィルム状としても良い。
ルメタクリレート共重合体やポリアミド膜等の適宜の保
持体に結合されるのが好ましい。あるいは、上記物質を
フィルム状としても良い。
【００１６】グリコシル化たんぱく水準は、グリコシル
化ヘモグロビン、グリコシル化アルブミンまたはグリコ
シル化血清たんぱく等について判定することが出来る。
化ヘモグロビン、グリコシル化アルブミンまたはグリコ
シル化血清たんぱく等について判定することが出来る。
【００１７】サンプルは好ましくはサイペロニック窒素
（Syperonic N）等のリジン（血清内細胞溶解）剤で、
化学的に処理されるウイック（灯心材）を使用して採取
される。適当なサンプルサイズを表すため、ウイック上
に少なくとも１つの表示が設けられる。この表示は、ウ
イックがさらなるサンプルを吸収する付加容量を有する
ように、ウイックの中途に設けられる。ウイック上方に
位置するウイックの少なくとも一部は、透明のカバーで
覆われ、ウイックが反応混合物と接触され、サンプルを
この反応混合物内に移すようにした際に、ウイックの覆
われた部分からの溶解量が、減少するようにするのが好
ましい。ウイックの頂部の径は、ウイック本体の径より
小さいほうが好ましい。またウイックは酢酸セルロー
ス、またはその誘導体から作成され、この酢酸セルロー
ス物質は従来たばこのフィルターチップに使用されてい
るものと同様の物である。
（Syperonic N）等のリジン（血清内細胞溶解）剤で、
化学的に処理されるウイック（灯心材）を使用して採取
される。適当なサンプルサイズを表すため、ウイック上
に少なくとも１つの表示が設けられる。この表示は、ウ
イックがさらなるサンプルを吸収する付加容量を有する
ように、ウイックの中途に設けられる。ウイック上方に
位置するウイックの少なくとも一部は、透明のカバーで
覆われ、ウイックが反応混合物と接触され、サンプルを
この反応混合物内に移すようにした際に、ウイックの覆
われた部分からの溶解量が、減少するようにするのが好
ましい。ウイックの頂部の径は、ウイック本体の径より
小さいほうが好ましい。またウイックは酢酸セルロー
ス、またはその誘導体から作成され、この酢酸セルロー
ス物質は従来たばこのフィルターチップに使用されてい
るものと同様の物である。
【００１８】サンプルは、上記物質にサンプルを注入す
る前に、緩衝溶液で希釈されることが好ましい。
る前に、緩衝溶液で希釈されることが好ましい。
【００１９】上記物質は、容器またはカートリッジに保
持され、その壁部を１以上の微細孔が貫通し、これによ
りサンプルが物質にアクセス出来るようにしている。
持され、その壁部を１以上の微細孔が貫通し、これによ
りサンプルが物質にアクセス出来るようにしている。
【００２０】使用されるサンプルの量は少量であること
が好ましく、いかなる場合も公知の方法で必要とされる
サンプル量より大幅に少ない。
が好ましく、いかなる場合も公知の方法で必要とされる
サンプル量より大幅に少ない。
【００２１】本発明の一実施例では、結合フェニル硼酸
等の物質を入れた容器にサンプルを添加する。そして光
度計等のモニター手段を使用して、カートリッジのサン
プルを加える前に、一定のたんぱくの総量（ＲＥＡＤ
１）を光学的に判定する。モニター手段を使用して、サ
ンプルがカートリッジを通過した後に、グリコシル化た
んぱくの総量（ＲＥＡＤ ２）を差し引いたたんぱくの
総量を光学的に判定する。
等の物質を入れた容器にサンプルを添加する。そして光
度計等のモニター手段を使用して、カートリッジのサン
プルを加える前に、一定のたんぱくの総量（ＲＥＡＤ
１）を光学的に判定する。モニター手段を使用して、サ
ンプルがカートリッジを通過した後に、グリコシル化た
んぱくの総量（ＲＥＡＤ ２）を差し引いたたんぱくの
総量を光学的に判定する。
【００２２】サンプルにおけるこのグリコシル化たんぱ
くのパーセンテージ（ＧＰ％）は次の［式１］から導く
ことが出来る：
くのパーセンテージ（ＧＰ％）は次の［式１］から導く
ことが出来る：
【００２３】
【式１】
【００２４】あるいはサンプルを収容し、これに結合フ
ェニル硼酸等の上記物質のカートリッジがサンプルに加
えられ次第、グリコシル化たんぱくの総量（ＲＥＡＤ
２）を差し引いたたんぱく総量を光学的に判定する。
ェニル硼酸等の上記物質のカートリッジがサンプルに加
えられ次第、グリコシル化たんぱくの総量（ＲＥＡＤ
２）を差し引いたたんぱく総量を光学的に判定する。
【００２５】次にサンプル内のグリコシル化たんぱくの
パーセンテージ（ＧＰ％）を上記［式１］により求め
る。
パーセンテージ（ＧＰ％）を上記［式１］により求め
る。
【００２６】更に別の方法として、上記物質のカートリ
ッジを、例えばグリコシル化たんぱく等の、アナライト
を結合すると、反射率、逆反射率、蛍光性、燐光性等が
変化する、一定の光学的特質を有する結合フェニル硼酸
で構成しても良い。この変化は、サンプル内に存在する
グリコシル化たんぱくの量を判定するためモニターする
ことが出来る。
ッジを、例えばグリコシル化たんぱく等の、アナライト
を結合すると、反射率、逆反射率、蛍光性、燐光性等が
変化する、一定の光学的特質を有する結合フェニル硼酸
で構成しても良い。この変化は、サンプル内に存在する
グリコシル化たんぱくの量を判定するためモニターする
ことが出来る。
【００２７】反射率がモニターされると、サンプル内の
グリコシル化たんぱくのパーセンテージ（ＧＰ％）は次
の［式２］から導くことが出来る：
グリコシル化たんぱくのパーセンテージ（ＧＰ％）は次
の［式２］から導くことが出来る：
【００２８】
【式２】
【００２９】ここでＲＥＡＤ ２はサンプルを物質と接
触させた後のカートリッジ内物質の反射率、ＲＥＡＤ
１はサンプルを物質と接触させる前のサンプルの吸収率
である。
触させた後のカートリッジ内物質の反射率、ＲＥＡＤ
１はサンプルを物質と接触させる前のサンプルの吸収率
である。
【００３０】
【実施例】本発明の理解を一層容易にするため、その特
定の実施例を添付図面に基づき説明する。
定の実施例を添付図面に基づき説明する。
【００３１】図１はグリコシル化たんぱくの水準を判断
すべき血液サンプルを、採血する装置の一例を示す。
すべき血液サンプルを、採血する装置の一例を示す。
【００３２】図２は本発明に係る装置の第一実施例の側
面図を示す。
面図を示す。
【００３３】図３は本発明に係る装置の第二実施例の側
面図を示す。
面図を示す。
【００３４】図４は上記物質がサンプルに添加された状
態の図３の装置の側面図である。
態の図３の装置の側面図である。
【００３５】図１において、１は酢酸セルロース系物質
からなるパッドで構成されたウイックを示す。この物質
は血液サンプルの６０〜７０％溶液を許容する。凹部２
とマーキング３は、ウイック１への途中に設けられ、ウ
イック１により、採取されるべきサンプルの所要量につ
いて、使用者に表示を提供するようになっている。ここ
でウイック１は、所要量のサンプルが採取されたとき
に、サンプルにより飽和されることはない。
からなるパッドで構成されたウイックを示す。この物質
は血液サンプルの６０〜７０％溶液を許容する。凹部２
とマーキング３は、ウイック１への途中に設けられ、ウ
イック１により、採取されるべきサンプルの所要量につ
いて、使用者に表示を提供するようになっている。ここ
でウイック１は、所要量のサンプルが採取されたとき
に、サンプルにより飽和されることはない。
【００３６】上記ウイック１はサイペロニック窒素等の
リジン（血清内細胞溶解）剤で化学処理される。この処
理は、ウイック１がリジン剤で飽和されるまで、ウイッ
ク１を、リジン剤に接触させることにより達成される。
ウイック１は次に乾燥される。
リジン（血清内細胞溶解）剤で化学処理される。この処
理は、ウイック１がリジン剤で飽和されるまで、ウイッ
ク１を、リジン剤に接触させることにより達成される。
ウイック１は次に乾燥される。
【００３７】ウイック１の先端４は、ウイック１の本体
よりも狭小な直径を有するか、ウイック１の直径を均一
にしても良い。
よりも狭小な直径を有するか、ウイック１の直径を均一
にしても良い。
【００３８】ウイック１の頂部はキャップ５内に配置さ
れる。このキャップ５はカバー６とハンドル７とからな
る。カバー５の高さは、所定位置にあるとき、カバー５
の基部８が、実質上マーク２、３と隣接する高さであ
る。カバー５はウイック１の上部が、カバー５を透過し
て視認出来るようにするため、透明又は半透明プラスチ
ック材で形成すると好ましい。
れる。このキャップ５はカバー６とハンドル７とからな
る。カバー５の高さは、所定位置にあるとき、カバー５
の基部８が、実質上マーク２、３と隣接する高さであ
る。カバー５はウイック１の上部が、カバー５を透過し
て視認出来るようにするため、透明又は半透明プラスチ
ック材で形成すると好ましい。
【００３９】ウイック１の先端４が血液と接触すると、
毛管現象により血液がウイック１まで上昇してくる。そ
して血液がウイック１まで上昇すると、ウイック１に配
置されたリジン剤が、赤血球膜の破裂を生じ、細胞から
のヘモグロビンの解放を許容する。
毛管現象により血液がウイック１まで上昇してくる。そ
して血液がウイック１まで上昇すると、ウイック１に配
置されたリジン剤が、赤血球膜の破裂を生じ、細胞から
のヘモグロビンの解放を許容する。
【００４０】血液の液位（レベル）が目盛２、３に到達
すると、ウイック１はサンプルから取り外される。この
場合、ウイック１の先端４に位置する血液の残存量があ
るため、血液レベルは目盛２、３の上方まで上昇し、オ
ーバーサンプリング（過剰採血）を生じる。この結果、
何パーセントかの誤差が生じる。しかし、リジン剤がウ
イックの全長に沿って存在するので、実質上溶解されな
い赤血球がウイックに存在することになる。この種の分
析ではこの点を考慮することが極めて重要である。
すると、ウイック１はサンプルから取り外される。この
場合、ウイック１の先端４に位置する血液の残存量があ
るため、血液レベルは目盛２、３の上方まで上昇し、オ
ーバーサンプリング（過剰採血）を生じる。この結果、
何パーセントかの誤差が生じる。しかし、リジン剤がウ
イックの全長に沿って存在するので、実質上溶解されな
い赤血球がウイックに存在することになる。この種の分
析ではこの点を考慮することが極めて重要である。
【００４１】サンプルは、緩衝溶液内で、ウイック１を
振り混ぜて（撹拌して）、サンプルの溶解を生じさせる
ことにより、ウイック１から移される。しかし、キャッ
プ５がウイック１の上部を覆っているので、目盛２、３
より上方でのサンプル溶解は実質上防止される。
振り混ぜて（撹拌して）、サンプルの溶解を生じさせる
ことにより、ウイック１から移される。しかし、キャッ
プ５がウイック１の上部を覆っているので、目盛２、３
より上方でのサンプル溶解は実質上防止される。
【００４２】次に図２に関して、サンプルのグリコシル
化たんぱくレベルの判定（本実施例では血液のグリコシ
ル化ヘモグロビンの判定）用装置１０は、入口１４と出
口１６とを設けたカートリッジ１２を備える。このカー
トリッジは担体１８に吸収される結合フェニル硼酸を有
する。
化たんぱくレベルの判定（本実施例では血液のグリコシ
ル化ヘモグロビンの判定）用装置１０は、入口１４と出
口１６とを設けたカートリッジ１２を備える。このカー
トリッジは担体１８に吸収される結合フェニル硼酸を有
する。
【００４３】流入管１０の一端は、入口１４内に収容さ
れ、他端はバイパス管２４に接続される。排出管２２の
一端は出口１６内に収容され、他端はバイパス管２４に
接続される。
れ、他端はバイパス管２４に接続される。排出管２２の
一端は出口１６内に収容され、他端はバイパス管２４に
接続される。
【００４４】バイパス管２４においては、流入管２０と
排出管２２との各接合部の中間に栓２５が設けられる。
排出管２２との各接合部の中間に栓２５が設けられる。
【００４５】別の栓２６が流入管２０の接合部に設けら
れ、更に別の栓２７が排出管２２の出口に設けられる。
れ、更に別の栓２７が排出管２２の出口に設けられる。
【００４６】実際の使用においては、例えば血液サンプ
ルを緩衝液で希釈し、これをバイパス管２４の一端２１
に加える。栓２６、２７を閉じ、栓２５を解放すること
により、この混合液はバイパス管２４を流下する。光度
計２８を使用して、バイパス管２４の出口２３における
サンプル（ＲＥＡＤ １）内の合計ヘモグロビンレベル
を判定する。
ルを緩衝液で希釈し、これをバイパス管２４の一端２１
に加える。栓２６、２７を閉じ、栓２５を解放すること
により、この混合液はバイパス管２４を流下する。光度
計２８を使用して、バイパス管２４の出口２３における
サンプル（ＲＥＡＤ １）内の合計ヘモグロビンレベル
を判定する。
【００４７】次に栓２５を閉じ、栓２６、２７を解放す
ると、混合液は流入管２０内を流下し、図示しない適宜
の装置による圧力で、フェニル硼酸およびその担体１８
を通過する。
ると、混合液は流入管２０内を流下し、図示しない適宜
の装置による圧力で、フェニル硼酸およびその担体１８
を通過する。
【００４８】サンプルがフェニル硼酸を通過する際に、
血液サンプル中のグリコシル化ヘモグロビンがカートリ
ッジ１２内に収集される。
血液サンプル中のグリコシル化ヘモグロビンがカートリ
ッジ１２内に収集される。
【００４９】血液サンプルの残りの部分は、カートリッ
ジ１２を通過し、更に排出管２２およびバイパス管２４
の出口２３を通る。
ジ１２を通過し、更に排出管２２およびバイパス管２４
の出口２３を通る。
【００５０】光度計２８を使用して、サンプルからグリ
コシル化ヘモグロビン（ＲＥＡＤ２）の含有量を差し引
いたレベルを判定する。光度計２８から発せられる光の
波長は測定される物質の種類により変化する。
コシル化ヘモグロビン（ＲＥＡＤ２）の含有量を差し引
いたレベルを判定する。光度計２８から発せられる光の
波長は測定される物質の種類により変化する。
【００５１】本実施例の場合、光度計から発せられた光
の波長は４１４ｍｍである。
の波長は４１４ｍｍである。
【００５２】血液サンプル内のグリコシル化ヘモグロビ
ンのパーセンテージレベルは［式１］を使用して判定さ
れる。
ンのパーセンテージレベルは［式１］を使用して判定さ
れる。
【００５３】必要な測定に要する時間は約２分程度であ
る。
る。
【００５４】上記のカートリッジ装置は安価なので、１
回きりで使い捨てる。
回きりで使い捨てる。
【００５５】図３及び図４に関して、例えば血液サンプ
ルのグリコシル化ヘモグロビン水準等、サンプルのグリ
コシル化たんぱくの水準を判定するための装置３０は、
ヒドロキシエチルメタクリレート３４の共重合体等の担
体に、結合されたフェニル硼酸を有するカートリッジ３
２を備える。このカートリッジ３２は２つの孔３６、３
８を有する。
ルのグリコシル化ヘモグロビン水準等、サンプルのグリ
コシル化たんぱくの水準を判定するための装置３０は、
ヒドロキシエチルメタクリレート３４の共重合体等の担
体に、結合されたフェニル硼酸を有するカートリッジ３
２を備える。このカートリッジ３２は２つの孔３６、３
８を有する。
【００５６】緩衝溶液に希釈された血液サンプル４０
は、容器４２内に収容される。
は、容器４２内に収容される。
【００５７】実際の使用においては、光度計等のモニタ
ー装置を使用して、血液サンプル４０（ＲＥＡＤ １）
内に存在するヘモグロビンの量を、光学的に判定する。
ー装置を使用して、血液サンプル４０（ＲＥＡＤ １）
内に存在するヘモグロビンの量を、光学的に判定する。
【００５８】次に、カートリッジ３２は、図３に示され
るように、血液サンプル４０と緩衝溶液中に完全に浸漬
され、血液サンプルが孔３２を介して結合フェニル硼酸
に接近することが出来る。血液サンプル４０内のグリコ
シル化ヘモグロビンは、カートリッジ内に含有するフェ
ニル硼酸に対して、親和性を有する。
るように、血液サンプル４０と緩衝溶液中に完全に浸漬
され、血液サンプルが孔３２を介して結合フェニル硼酸
に接近することが出来る。血液サンプル４０内のグリコ
シル化ヘモグロビンは、カートリッジ内に含有するフェ
ニル硼酸に対して、親和性を有する。
【００５９】次に光度計等の適宜のモニター手段を利用
して、２回目の測定を行って、血液サンプル内のヘモグ
ロビン総量から、グリコシル化ヘモグロビン量（ＲＥＡ
Ｄ２）を光学的に判定する。
して、２回目の測定を行って、血液サンプル内のヘモグ
ロビン総量から、グリコシル化ヘモグロビン量（ＲＥＡ
Ｄ２）を光学的に判定する。
【００６０】血液サンプル内のグリコシル化ヘモグロビ
ンのレベルは、［式１］を使用して判定される。
ンのレベルは、［式１］を使用して判定される。
【００６１】以上の実施例の説明から、本発明は医師の
検査において、容易に実行し得る血液等の物質のサンプ
ル内のグリコシル化たんぱくの水準を、迅速かつ安価
に、モニターする方法を提供するものである。
検査において、容易に実行し得る血液等の物質のサンプ
ル内のグリコシル化たんぱくの水準を、迅速かつ安価
に、モニターする方法を提供するものである。
【００６２】上記実施例は本発明の一例にすぎず、本発
明の範囲内で多くの変形が可能である。例えば、サンプ
ル内のグリコシル化たんぱくの水準を、電気化学的また
はエンタルピー測量的に判定しても良い。
明の範囲内で多くの変形が可能である。例えば、サンプ
ル内のグリコシル化たんぱくの水準を、電気化学的また
はエンタルピー測量的に判定しても良い。
【００６３】
図１はグリコシル化たんぱくの水準を判断すべき血液サ
ンプルを、採血する装置の一例を示す。
ンプルを、採血する装置の一例を示す。
【００６４】図２は本発明に係る装置の第一実施例の側
面図を示す。
面図を示す。
【００６５】図３は本発明に係る装置の第二実施例の側
面図を示す。
面図を示す。
【００６６】図４は上記物質がサンプルに添加された状
態の図３の装置の側面図である。
態の図３の装置の側面図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 デニス マリア ウォルウァース イギリス国 シー・ダブリュー 12 ３・ ユー・エー コングルトン クロス レー ン 12 クロスランド（番地なし) (72)発明者 ブライアン グリーン イギリス国 シー・ヴィ・３ ５・エル・ エス コヴェントリー チェイルズモア 67 モンタルト ロード（番地なし)
Claims (26)
- 【請求項１】一定量の試料を、水準測定の対象となるグ
リコシル化たんぱくに対して親和性を有するか、または
水準判定の対象となるグリコシル化たんぱく以外の試料
内物質に対して親和性を有する物質と、接触させ、前記
試料を、光学的、電気化学的またはエンタルピー測量的
に判定し、および／または前記物質を、光学的、電気化
学的またはエンタルピー測量的に判定する試料のグリコ
シル化たんぱく水準の判定方法において、前記試料およ
び／または物質が、それぞれ物質および／または試料と
接触する前に判定され、前記試料および／または物質
が、それぞれ物質および／または試料と接触した後に判
定され、これにより、試料におけるグリコシル化たんぱ
く水準を表す示度を、実質上即時に得ることを特徴とす
る試料のグリコシルたんぱく水準の測定方法。 - 【請求項２】前記物質がフィルムとして存在する、請求
項１に記載の試料のグリコシル化たんぱく水準の測定方
法。 - 【請求項３】前記試料が、前記物質を試料に注入する前
に、緩衝溶液で希釈される、請求項１または２に記載の
試料のグリコシル化たんぱく水準の判定方法。 - 【請求項４】前記物質が、溶液またはカートリッジ内に
保持される、請求項１、２、または３に記載の試料のグ
リコシル化たんぱく水準の判定方法。 - 【請求項５】前記物質が、単体またはグリコシル化たん
ぱくが、前記物質に結合されると変化する組み合わせの
いずれかにおいて、反射性、逆反射性、蛍光性または燐
光性のいずれかの性質を有する、請求項１に記載の試料
のグリコシル化たんぱく水準の判定方法。 - 【請求項６】溶液またはカートリッジが、試料内に浸漬
される、請求項４に記載の試料のグリコシル化たんぱく
水準の判定方法。 - 【請求項７】試料が、溶液またはカートリッジを貫流す
る、請求項４に記載の試料のグリコシル化たんぱく水準
の判定方法。 - 【請求項８】試料が、グリコシル化アルブミン、グリコ
シル化ヘモグロビンまたはグリコシル化血清たんぱくの
少なくとも１つからなる、請求項１に記載の試料のグリ
コシル化たんぱく水準の判定方法。 - 【請求項９】試料が、計量装置により採取される、前記
請求項１に記載の試料のグリコシル化たんぱく水準の判
定方法。 - 【請求項１０】計量装置が、酢酸セルロースまたはその
誘導体からなる、請求項９に記載の試料のグリコシル化
たんぱく水準の判定方法。 - 【請求項１１】計量装置が、一定量の試料を計量装置に
より採取したことを明示するための表示を備えた、請求
項９または１０に記載の試料のグリコシル化たんぱく水
準の判定方法。 - 【請求項１２】計量装置が、所定量の試料を採取した時
に試料より完全に飽和されない、請求項９乃至１１のい
ずれかに記載の試料のグリコシル化たんぱく水準の判定
方法。 - 【請求項１３】計量装置が、リジン剤を備えた、請求項
９乃至１２のいずれかに記載の試料のグリコシル化たん
ぱく水準の判定方法。 - 【請求項１４】使用上試料が採取される物質と接触され
る計量装置の先端が、計量装置本体に対して、縮径され
ている、請求項９乃至１３のいずれかに記載の試料のグ
リコシル化たんぱく水準の判定方法。 - 【請求項１５】計量装置が、少なくとも計量装置の一部
を覆い、少なくとも計量装置の一部からの試料移転を防
止するキャップを備えた、請求項１に記載の試料のグリ
コシル化たんぱく水準の判定方法。 - 【請求項１６】計量装置が、ウイックを備えた、請求項
１に記載の試料のグリコシル化たんぱく水準の判定方
法。 - 【請求項１７】試料のグリコシル化たんぱく水準の判定
装置であって、水準判定の対象となるグリコシル化たん
ぱく質に対して親和性を有するか、または水準判定の対
象となるグリコシル化たんぱく以外の試料内物質に対し
て親和性を有する物質の担体と、前記試料を前記物質と
接続させる手段とからなり、前記試料を光学的、電気化
学的またはエンタルピー測量的に判定し、および／また
は前記物質を試料が物質と接触する前に光学的、電気化
学的またはエンタルピー測量的に判定すると共に、前記
物質を接触後においても光学的、電気化学的またはエン
タルピー測量的に判定するための手段を備えたことを特
徴とする、グリコシル化たんぱく水準の判定装置。 - 【請求項１８】前記物質が、フェニル硼酸またはその誘
導体である、請求項１７に記載の試料のグリコシル化た
んぱく水準の判定装置。 - 【請求項１９】前記物質が、担体に結合された、請求項
１７または１８に記載の試料のグリコシル化たんぱく水
準の判定装置。 - 【請求項２０】担体が、少なくとも粒状のヒドロキシエ
チルメタクリレート共重合体またはポリアミド膜の１つ
からなる、請求項１９に記載の試料のグリコシル化たん
ぱく水準の判定装置。 - 【請求項２１】前記物質が、フィルムとして存在する、
請求項１７または１８に記載の試料のグリコシル化たん
ぱく水準の判定装置。 - 【請求項２２】試料が、前記物質に試料を注入する前
に、緩衝溶液に希釈される、請求項１７に記載の試料の
グリコシル化たんぱく水準の判定装置。 - 【請求項２３】前記物質が、容器またはカートリッジ内
に保持される、請求項１７に記載の試料のグリコシル化
たんぱく水準の判定装置。 - 【請求項２４】前記物質が単体、またはグリコシル化た
んぱくが前記物質に、結合されると変化する組み合わせ
のいずれかにおいて、反射性、逆反射性、蛍光性または
燐光性のいずれかの性質を有する、請求項１７乃至２３
のいずれかに記載の試料のグリコシル化たんぱく水準の
判定装置。 - 【請求項２５】溶液またはカートリッジが、試料内に浸
漬される、請求項２３に記載の試料のグリコシル化たん
ぱく水準の判定装置。 - 【請求項２６】試料が、溶液またはカートリッジを貫流
する、請求項２３に記載の試料のグリコシル化たんぱく
水準の判定装置。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB8913586.7 | 1989-06-13 | ||
| GB898913586A GB8913586D0 (en) | 1989-06-13 | 1989-06-13 | A method of determining the glycosylated protein level of a sample and an apparatus for use in the method |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07325088A true JPH07325088A (ja) | 1995-12-12 |
Family
ID=10658369
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3352453A Pending JPH07325088A (ja) | 1989-06-13 | 1991-12-13 | グリコシル化たんぱくの判定方法およびその方法に使用する装置 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0478620B1 (ja) |
| JP (1) | JPH07325088A (ja) |
| AT (1) | ATE164009T1 (ja) |
| AU (1) | AU5823690A (ja) |
| DE (1) | DE69032131T2 (ja) |
| ES (1) | ES2115593T3 (ja) |
| GB (1) | GB8913586D0 (ja) |
| WO (1) | WO1990015995A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6709856B2 (en) | 2000-03-28 | 2004-03-23 | Nec Corporation | Liquid sample measuring device containing electrode sensor with enzyme layer |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5312760A (en) * | 1992-06-08 | 1994-05-17 | Modrovich, Ivan Endre | Fructosamine reagent and calibrator system |
| US5728553A (en) | 1992-09-23 | 1998-03-17 | Delta Biotechnology Limited | High purity albumin and method of producing |
| GB9902000D0 (en) | 1999-01-30 | 1999-03-17 | Delta Biotechnology Ltd | Process |
| GB0305587D0 (en) * | 2003-03-11 | 2003-04-16 | Smart Holograms Ltd | Sensor |
| CN101484793B (zh) * | 2006-03-24 | 2012-07-04 | 爱科来株式会社 | 糖基血红蛋白浓度测定方法和浓度测定装置 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2464475A1 (fr) * | 1979-08-30 | 1981-03-06 | Amicon Corp | Procede et produit pour la separation des glycoproteines et leur application notamment a la determination de l'hemoglobine glycosylee |
| DE3720736A1 (de) * | 1987-06-23 | 1989-01-05 | Erwin Dr Schleicher | Verfahren, reagenzien und ausruestung zur einfachen bestimmung von nicht-enzymatisch glykosylierten proteinen in koerperfluessigkeiten |
-
1989
- 1989-06-13 GB GB898913586A patent/GB8913586D0/en active Pending
-
1990
- 1990-06-12 DE DE69032131T patent/DE69032131T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-06-12 WO PCT/GB1990/000907 patent/WO1990015995A1/en active IP Right Grant
- 1990-06-12 ES ES90909175T patent/ES2115593T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-12 AU AU58236/90A patent/AU5823690A/en not_active Abandoned
- 1990-06-12 EP EP90909175A patent/EP0478620B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-12 AT AT90909175T patent/ATE164009T1/de not_active IP Right Cessation
-
1991
- 1991-12-13 JP JP3352453A patent/JPH07325088A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6709856B2 (en) | 2000-03-28 | 2004-03-23 | Nec Corporation | Liquid sample measuring device containing electrode sensor with enzyme layer |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0478620B1 (en) | 1998-03-11 |
| GB8913586D0 (en) | 1989-08-02 |
| WO1990015995A1 (en) | 1990-12-27 |
| AU5823690A (en) | 1991-01-08 |
| DE69032131T2 (de) | 1998-07-23 |
| ATE164009T1 (de) | 1998-03-15 |
| DE69032131D1 (de) | 1998-04-16 |
| ES2115593T3 (es) | 1998-07-01 |
| EP0478620A1 (en) | 1992-04-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2510277C (en) | Rapid test for glycated albumin | |
| US9128085B2 (en) | Rapid test for glycated albumin in blood | |
| US6576193B1 (en) | Device and method for collecting and testing fluid specimens | |
| CA2493699C (en) | Integrated confirmation sample in a body fluid test device | |
| US7132078B2 (en) | Assay apparatus | |
| EP1038176B1 (en) | Embossed test strip system | |
| KR100755156B1 (ko) | 액세스가 용이한 검정장치 및 그 사용방법 | |
| KR19990067532A (ko) | 진단 시험 장치 | |
| JP2002514755A (ja) | 電気化学的分析用カートリッジ | |
| US20090042237A1 (en) | Aptamer based point-of-care test for glycated albumin | |
| KR20180016513A (ko) | 혈액 검사 키트, 및 그것을 이용한 분석 방법 | |
| US20230131712A1 (en) | Blood volume measurement with fluorescent dye | |
| EP1739407A1 (en) | Sensor, measuring equipment and measuring method | |
| US5807747A (en) | Method and apparatus for determination of glycosylated protein | |
| CN111965173A (zh) | 一种尿液检测仪及其检测方法 | |
| JPH07325088A (ja) | グリコシル化たんぱくの判定方法およびその方法に使用する装置 | |
| CN115867804B (zh) | 用于检测生物样本中的错误折叠蛋白质的装置和方法 | |
| KR101240962B1 (ko) | 당화혈색소 측정장치 | |
| Caflisch et al. | In situ micropuncture study of pancreatic duct pH | |
| US20070292959A1 (en) | Sample Age Monitoring Devices And Methods | |
| AU2003254203B2 (en) | Integrated confirmation sample in a body fluid test device | |
| GB2622865A (en) | A housing for sample collection | |
| JPH05164759A (ja) | アルブミン測定具 |