ES2933175T3 - Formulaciones de análogos de prostaciclina - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a una preformulación inyectable que comprende: a) al menos uno de un mono-, di- o tri-acil lípido y/o un tocoferol; b) opcionalmente al menos un fosfolípido; c) al menos un disolvente orgánico biocompatible; yd) al menos un análogo de prostaciclina o una de sus sales; en el que la preformulación forma, o es capaz de formar, al menos una estructura de fase cristalina líquida al entrar en contacto con un exceso de fluido acuoso. Tales composiciones pueden comprender adicionalmente codisolventes polares. Se proporcionan métodos de tratamiento, particularmente para el manejo de la hipertensión arterial pulmonar (PAH), PAH severa, enfermedad de Raynaud, isquemia y condiciones relacionadas, así como los usos correspondientes de las composiciones. También se proporcionan dispositivos de administración que comprenden las formulaciones y kits que comprenden los dispositivos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Formulaciones de análogos de prostaciclina

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a precursores de formulación (preformulaciones) para la generación in situ de composiciones para la liberación controlada de agentes activos y a métodos de tratamiento con tales formulaciones. En particular, la invención se refiere a preformulaciones de componentes anfifílicos y al menos un análogo de prostaciclina seleccionado entre treprostinilo o una sal del mismo, que experimenta una transición de fase al exponerse a fluidos acuosos, tales como los fluidos corporales, formando así una composición de liberación controlada.

ESTADO DE LA TÉCNICA ANTERIOR

Muchos agentes bioactivos, incluyendo los productos farmacéuticos, los nutrientes, las vitaminas, etc., tienen una "ventana funcional". Es decir, existe un intervalo de concentraciones en el cual puede observarse que estos agentes proporcionan algún efecto biológico. Cuando la concentración en la parte adecuada del cuerpo (por ejemplo, localmente o demostrada por la concentración sérica) cae por debajo de un cierto nivel, no puede atribuirse ningún efecto beneficioso al agente. De un modo similar, existe generalmente un nivel de concentración superior por encima del cual no se obtiene ningún beneficio adicional aumentando la concentración. En algunos casos, el aumento de la concentración por encima de un nivel particular da como resultado efectos indeseables o incluso peligrosos.

Algunos agentes bioactivos tienen una larga semivida biológica y/o una amplia ventana funcional y, por lo tanto, pueden ser administrados ocasionalmente, manteniendo una concentración biológica funcional durante un periodo sustancial de tiempo (por ejemplo, de 6 horas a varios días). En otros casos, la tasa de aclaramiento es alta y/o la ventana funcional es estrecha y, por lo tanto, para mantener una concentración biológica dentro de esta ventana se requieren dosis regulares (o incluso continuas) de una pequeña cantidad. Esto puede ser particularmente difícil cuando son deseables o necesarias rutas de administración distintas a la oral (por ejemplo, administración parenteral), puesto que la autoadministración puede ser difícil y, por lo tanto, provoca inconvenientes y/o un cumplimiento deficiente. En tales casos, sería ventajoso que una sola administración proporcionara el agente activo a un nivel terapéutico durante todo el periodo en el que sea necesaria la actividad.

Una clase particular de agentes activos que tienen una alta tasa de aclaración y una semivida corta son la prostaciclina y sus análogos. La prostaciclina es un miembro endógeno de la familia de los eicosanoides y está implicada en varios procesos, incluyendo la activación plaquetaria, la vasodilatación y la regulación de la presión sanguínea. La prostaciclina también es conocida como epoprostenol cuando se hace referencia a material derivado sintéticamente y los términos se utilizan indistintamente en el presente documento.

La FDA aprobó el epoprostenol para el tratamiento de la hipertensión pulmonar arterial (PAH) en 1995. La PAH es una afección potencialmente fatal caracterizada por una presión pulmonar arterial media (mPAP) de >25 mmHg, con una presión arterial pulmonar en cuña normal (PAWP) (<15 mmHg). Sin embargo, como el propio epoprostenol tiene una semivida in vivo de menos de un minuto, requiere administración continua, típicamente por medio de un catéter venoso central. El epoprostenol sódico para terapia intravenosa se comercializa como Flolan® (GlaxoSmithKline). Desde 2008 también hay disponible una formulación estable a temperatura ambiente de epoprostenol (Veletri®, Actelion Pharmaceuticals). Se cree que entre 100.000 y 200.000 individuos se ven afectados por la PAH en todo el mundo.

Se conocen varios análogos de prostaciclina con semividas más largas, incluyendo el iloprost (Bayer) y el treprostinilo. La FDA aprobó el treprostinilo en 2002 y tiene una semivida en plasma de 2,9 a 4,6 horas. A pesar de la semivida más larga en comparación con el epoprostenol, todavía es generalmente necesaria una infusión i.v. continua o una administración s.c. regular de treprostinilo. La terapia I.V. requiere la inserción quirúrgica de un catéter venoso central, lo que conlleva riesgo de infección y trombosis y naturalmente es incómodo para el paciente. El epoprostenol también puede ser administrado a través de rutas de inhalación u orales. Sin embargo, estas rutas proporcionan una dosis acumulada más baja de epoprostenol que la ruta I.V. Por lo tanto, pueden no ser adecuadas para todos los pacientes.

El Remodulin® (United Therapeutics Corporation) es una formulación de treprostinilo diseñada para inyección I.V. o s.c. continua. La inyección s.c. continua se consigue por medio de una bomba de microinfusión. Aunque esto soluciones algunos de los problemas asociados con el equipo de bomba voluminoso, todavía no es ideal y, además, se recomienda que los pacientes tengan acceso inmediato a una bomba de infusión de respaldo.

Aunque la administración s.c. regular resuelve en cierta medida las desventajas de la administración i.v. o s.c. continua, las rutas oral o de inhalación, el dolor en el sitio de administración es un obstáculo significativo en la mayoría de los pacientes (experimentado por el 85 % de los pacientes) y es responsable de casi todas las retiradas del treprostinilo debido a sucesos adversos (un total del 23 % de la población del estudio a largo plazo). Hasta ahora, esto se ha manejado, en la medida de lo posible, mediante una selección adecuada del sitio. El dolor en el sitio alcanza su máximo en los primeros días después de un cambio de sitio y la utilización de un solo sitio durante 4 semanas o más puede ser útil y segura en algunos casos.

Existe una necesidad evidente de una preparación de un(os) análogo(s) de prostaciclina que sea estable al almacenamiento, que pueda administrarse sin la necesidad de una administración continua a través de un catéter venoso central o mediante administración s.c. continua, que no sea susceptible al riesgo de un fallo mecánico y/o que pueda administrarse con menor frecuencia a la vez que provoque menos dolor en el sitio que las formulaciones de s.c. existentes. La presente invención resuelve algunas o todas estas deficiencias.

Los pacientes sometidos a tratamiento para la PAH típicamente requieren que se mantenga una dosis terapéutica durante un periodo considerable y típicamente requieren un tratamiento continuo durante muchos meses o años. Por lo tanto, un sistema de depósito que permita la carga y la liberación controlada de una dosis mayor durante un periodo más largo ofrecería una ventaja considerable sobre los sistemas de administración convencionales.

A este respecto, se han desarrollado sistemas de administración poliméricos que contienen treprostinilo, tales como TransCon Treprostinil (Ascendis Pharma) que ha sido sometido a ensayos clínicos de fase 1. El TransCon Treprostinil está diseñado como una inyección s.c. de treprostinilo autoadministrada una vez al día y está basado en un sistema de administración polimérico, especialmente un polímero a base de poli(oxazolina) o PEG. El TransCon Treprostinil pretende ofrecer la misma eficacia que los análogos de prostaciclina infundidos de forma continua, pero con una ruta de administración más segura y más conveniente con una reacción en el sitio y riesgos de infección del torrente sanguíneo reducidos asociados con las rutas de administración parenteral actuales.

Normalmente, los polímeros de poli-lactato, poli-glicolato y poli-lactato-co-glicolato utilizados para degradar formulaciones de liberación lenta también provocan cierta irritación en al menos algunos pacientes. En particular, estos polímeros contienen típicamente una cierta proporción de impurezas ácidas, tales como ácido láctico y glicólico, que irritarán el sitio de la inyección durante la administración. Después, cuando el polímero se rompe, los productos de degradación son ácido láctico y ácido glicólico, por lo que se provoca una irritación adicional.

A pesar de las ventajas potenciales ofrecidas por el TransCon Treprostinil en términos de comodidad del paciente y una administración en cierta forma menos frecuente (una vez al día), incluso si se utiliza un polímero, tal como PEG, que no se rompe en impurezas ácidas, los sistemas poliméricos tienden a tener una alta viscosidad y, en consecuencia, requieren una inyección por medio de una aguja ancha y/o proporcionan únicamente un producto con una duración bastante corta. El injerto de PEG en un agente activo, tal como treprostinilo, típicamente aumenta la vida biológica, pero puede interferir con la unión y actualmente no puede proporcionar un producto que permanezca activo durante varios días entre inyecciones. Como resultado de los efectos combinados de la administración con una aguja ancha y/o contenidos irritantes, la incomodidad en el sitio de administración y la formación de tejido cicatrizal conectivo son a menudo mayores de lo deseable. Esto aumenta en el caso de la formulación de Treprostinil propuesta, puesto que la inyección es al menos diaria, en lugar de tener una periodicidad semanal o más prolongada. Como resultado, durante un tratamiento de larga duración, deben realizarse múltiples administraciones irritantes en un pequeño número de sitios, o utilizarse un gran número de sitios, con la consiguiente incomodidad generalizada para el sujeto.

Evidentemente, sería una ventaja proporcionar un sistema de baja viscosidad, tal como una solución homogénea, una dispersión de partículas finas, o fase L2, que podría administrarse fácilmente a través de una aguja estrecha, disminuyendo, por tanto, la incomodidad del paciente durante el procedimiento y provocando menos dolor en el sitio. Esta facilidad de administración es particularmente significativa cuando los pacientes estén en un régimen de autoadministración y es posible que ya estén autoadminsitrándose varias veces al día, como es el caso de varios tratamientos existentes con treprostinilo. Proporcionar una formulación sostenida con una duración de unos pocos días, pero que es lo suficientemente compleja de administrar que requiere tratamiento por parte de un profesional de la salud, no será una ventaja para todos los pacientes sobre la autoadministración dos veces al día o la diaria, y es probable que sea más costoso. Proporcionar una formulación que proporciona una duración suficientemente larga para justificar una visita a un profesional de la salud para su administración y/o una preparación que pueda autoadministrarse con facilidad sería una ventaja significativa. Reducir el tiempo de preparación de los profesionales sanitarios o de los pacientes antes de la administración real también es un tema importante.

Desde el punto de vista de la administración del fármaco, las composiciones de depósito de polímero también tienen generalmente la desventaja de aceptar solo cargas de fármaco relativamente bajas y tener un perfil de liberación de "ráfaga/retraso". La naturaleza de la matriz polimérica, especialmente cuando se aplica como solución o prepolímero, provoca un estallido inicial de liberación del fármaco cuando la composición se administra por primera vez. A esto le sigue un período de baja liberación, mientras comienza la degradación de la matriz, seguido finalmente por un aumento en la tasa de liberación hasta el perfil sostenido deseado. Este perfil de liberación de ráfaga/retardo puede hacer que la concentración in vivo de agente activo estalle por encima de la ventana funcional inmediatamente después de la administración, y después vuelva a caer por debajo de la parte inferior de la ventana funcional durante el período de retraso antes de alcanzar una concentración funcional sostenida durante un período de tiempo. Evidentemente, desde un punto de vista funcional y toxicológico, este perfil de liberación súbita/retardada es indeseable y podría ser peligroso. También puede limitar la concentración de equilibrio que se puede proporcionar debido al peligro de efectos adversos en el punto "máximo". Además, la presencia de una fase de retardo puede requerir una dosificación suplementaria con inyecciones repetidas durante el período de inicio del tratamiento de depósito para mantener una dosis terapéutica mientras las concentraciones de activo proporcionadas desde el depósito son subfuncionales.

Las formulaciones de liberación controlada generalmente se generan a partir de polímeros biocompatibles en forma de, por ejemplo, implantes o perlas inyectables. Las formulaciones de microesferas de polímero generalmente deben administrarse por medio de una aguja con un tamaño considerable, típicamente de calibre 20 o más ancha. Esto es necesario como resultado de la naturaleza de los sistemas de dosificación poliméricos utilizados, que son típicamente suspensiones poliméricas. Sería una ventaja proporcionar un sistema de baja viscosidad, tal como una solución homogénea, una dispersión de partículas finas, o fase L2, que pueda administrarse fácilmente a través de una aguja estrecha, disminuyendo, por tanto, la incomodidad del paciente durante el procedimiento. La facilidad de administración es particularmente importante cuando los pacientes se autoadministran, pero también reduce la carga de los profesionales de la salud cuando realizan la administración.

La fabricación de microperlas y suspensiones de PLGA es además una dificultad considerable con ciertos sistemas de depósito existentes. En particular, dado que las perlas son partículas, generalmente no pueden esterilizarse por filtración y, además, dado que el copolímero de PLGA se funde a temperatura elevada, no pueden tratarse térmicamente para esterilizarlas. Como resultado, el complejo proceso de fabricación debe realizarse de forma aséptica.

Otros problemas con las microperlas de polímeros biodegradables incluyen una reconstitución compleja antes de la inyección y una estabilidad de almacenamiento limitada, debido tanto a la agregación como a la degradación del sistema de administración y/o del principio activo.

Se ha descrito una composición de liberación lenta a base de lípidos para ciertos péptidos.

Por ejemplo, la Patente WO2006/131730 desvela un sistema de depósito de lípidos para GLP-1 y análogos del mismo. Esta es una formulación altamente eficaz, pero la concentración de agente activo que puede incluirse en la formulación está limitada a su solubilidad. Evidentemente, una concentración mayor de agente activo permite la posibilidad de productos de depósito de mayor duración, productos que mantienen una concentración sistémica más alta y productos que tienen un volumen de inyección más pequeño, todos estos factores son una ventaja considerable en circunstancias adecuadas. Por lo tanto, tendría un valor considerable establecer una forma de para poder incluir concentraciones mayores de agentes activos en una formulación de depósito basada en lípidos e identificar combinaciones de agente activo y sistema de administración que sean particularmente eficaces desde el punto de vista de la carga, la estabilidad, la fabricación y/o la liberación controlada.

Los inventores de la presente invención han establecido ahora que proporcionando una preformulación según se define en las reivindicaciones, que comprende al menos un lípido mono, di o triacilo neutro y/o un tocoferol, opcionalmente al menos un fosfolípido, al menos un disolvente monoalcohólico orgánico biocompatible, y al menos un análogo de prostaciclina seleccionado entre treprostinilo o una sal del mismo en una fase de baja viscosidad, tal como una fase de solución molecular o L2 (micelar invertida), puede generarse una preformulación que afronta muchas de las deficiencias de las formulaciones de treprostinilo conocidas, y que puede aplicarse para proporcionar una liberación controlada del análogo de prostaciclina. Mediante el uso de componentes específicos en proporciones cuidadosamente seleccionadas, puede generarse una formulación de depósito que tenga una combinación de propiedades que exceda el rendimiento de las formulaciones de análogo de prostaciclina existentes y proporcione una ventaja sobre las composiciones de treprostinilo conocidas, tales como Remodulin® o TransCon Treprostinil. En particular, la preformulación muestra un perfil de liberación altamente ventajoso, es fácil de fabricar, puede esterilizarse por filtración, tiene una baja viscosidad (lo que permite una administración fácil y menos dolorosa típicamente a través de una aguja estrecha), permite incorporar un alto nivel de agente bioactivo (lo que permite potencialmente que se utilice una cantidad más pequeña de composición y/o agente activo), requiere una inyección superficial y/o forma una composición de depósito no laminar deseada in vivo que tiene un perfil de liberación de "ráfaga baja". Las composiciones también se forman a partir de materiales que son no tóxicos, biotolerables y biodegradables, que pueden administrarse mediante una sola inyección i.m. o s.c. en lugar de un catéter venoso central o inyección s.c. continua, y son adecuadas para la autoadministración. La preformulación puede tener adicionalmente un nivel muy bajo de irritación en la inyección y, en los casos preferidos, no provoca irritación en el sitio de inyección (incluyendo una irritación transitoria). Las preformulaciones pueden administrarse con menor frecuencia que las formulaciones de "liberación lenta", lo que da como resultado un mejor cumplimiento por parte del paciente y/o menos irritación debida a las administraciones repetidas y frecuentes.

Las formulaciones de la presente invención generan una fase cristalina líquida no laminar tras la administración. El uso de estructuras de fase no laminar (tales como fases cristalinas líquidas no laminares) en la administración de agentes ahora está relativamente bien establecido. En la Patente WO2005/117830 se describe un sistema de depósito de lípidos más eficaz y, en ese documento, se describe un depósito de lípidos altamente preferido. Sin embargo, aún queda margen para conseguir formulaciones de depósito que tengan un rendimiento mejorado en varios aspectos y, en particular, pueden conseguirse mejoras sorprendentes mediante la cuidadosa selección y optimización de la gama de componentes y proporciones desveladas en los trabajos anteriores.

Las ventajas de las composiciones de la presente invención sobre las formulaciones poliméricas, tales como microesferas de PLGA, incluyen la facilidad de fabricación (incluyendo la esterilización), las propiedades de manejo y uso combinadas con una baja liberación inicial ("perfil de ráfaga baja") de agente activo. Esto puede definirse de tal manera que el área bajo la curva de una concentración de plasma frente al tiempo durante las primeras 24 horas de un periodo de dosificación de una semana es inferior al 50 % del área bajo la curva para toda la curva (medida o extrapolada desde el tiempo 0 hasta el infinito o desde el tiempo 0 hasta el último punto del tiempo de muestreo), más preferiblemente menos del 40 % y lo más preferiblemente menos del 30 %. Además, puede definirse de tal manera que la concentración plasmática máxima de agente activo in vivo tras la inyección de la preformulación (Cmáx) no sea mayor a 10 veces, preferiblemente no más de 8 veces y lo más preferiblemente no más de 5 veces la concentración plasmática promedio durante el periodo terapéutico (Cave) (es decir, Cmáx/Cave < 10, preferiblemente < 8, más preferiblemente < 5).

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

La presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una combinación adecuada de excipientes lipídicos, disolvente alcohólico orgánico y análogo de prostaciclina y ciertos componentes opcionales, que pueden utilizarse como una formulación de depósito precursora (denominada en el presente documento por brevedad como una preformulación) para abordar una o más de las necesidades descritas anteriormente. Los inventores han establecido que optimizando estos componentes, pueden generarse composiciones de depósito del treprostinilo análogo de prostaciclina o una sal del mismo y las correspondientes formulaciones precursoras con una combinación de propiedades altamente ventajosa.

En una primera realización, la invención proporciona una preformulación que comprende:

a) del 20 al 80 % en peso de al menos uno de un lípido mono, di o triacilo y/o un tocoferol;

b) opcionalmente al menos un fosfolípido;

c) del 1 al 30 % en peso de al menos un disolvente orgánico biocompatible; y

d) al menos un análogo de prostaciclina seleccionado entre treprostinilo o una sal del mismo;

en donde la preformulación forma al menos una estructura de fase cristalina líquida al entrar en contacto con al menos una cantidad equivalente en volumen de fluido acuoso.

El análogo de prostaciclina comprende o consiste en treprostinilo (TNP) o una sal del mismo, preferiblemente sal sódica de treprostinilo.

En una realización preferida, el análogo de prostaciclina (ácido libre) está presente a un nivel del 0,1 al 10 % de la preformulación, preferiblemente del 0,2 al 6 %. En una realización, el análogo de prostaciclina (ácido libre) está presente a un nivel, tal como del 0,2 al 5 %, del 0,5 al 5 %, especialmente del 0,2 al 4 % o del 0,75 al 4 %.

En una realización preferida, el componente c) comprende o consiste en al menos un disolvente seleccionado entre el grupo que consiste en: alcoholes, aminas, amidas, sulfóxidos y/o ésteres.

En una realización preferida, c) comprende o consiste en etanol o mezclas de etanol y propilenglicol, preferiblemente en donde la proporción de etanol con respecto a PG es de 1:1 a 10:1, más preferiblemente de 1,5:1 a 8:1, lo más preferiblemente 2:1 a 5:1 (por ejemplo, aproximadamente 3:1).

En otra realización preferida, la preformulación tiene una estabilidad después de 3 meses de al menos el 96 %, preferiblemente al menos el 97 %, especialmente al menos el 98 % en términos de ensayo de agente activo, según se midió por HPLC, a 25 °C y una HR del 60 %, preferiblemente después de 6 meses, especialmente después de 12 meses, según se define en el presente documento.

En otra realización preferida, la preformulación tiene una estabilidad después de 1 mes de al menos el 96 %, preferiblemente al menos el 97 %, especialmente al menos el 98 %, en términos de ensayo de agente activo, según se midió por HPLC después de un almacenamiento a 40 °C y una HR del 75 %, después de preferiblemente 3 meses, especialmente después de 6 meses.

En una realización especialmente preferida

el componente a) comprende o consiste en GDO,

el componente b) comprende o consiste en PC de soja;

el componente c) comprende etanol y opcionalmente propilenglicol; y

el componente d) comprende o consiste en treprostinilo o una sal del mismo (por ejemplo, sodio).

Se describe el uso de una preformulación según se define en el presente documento en la administración sostenida de un análogo de prostaciclina.

En otro aspecto, la invención proporciona una preformulación según la primera realización para su uso como medicamento (por ejemplo, para su uso en el tratamiento de las afecciones descritas en el presente documento). En otro aspecto, la invención proporciona una preformulación según se describe en el presente documento, para su uso en un método para el tratamiento de un sujeto humano o mamífero no humano.

En una realización, el método de tratamiento (así como los correspondientes usos y otros aspectos) es un método para el tratamiento de un sujeto humano o mamífero no humano (especialmente uno que lo necesite). En una realización adicional, el método de tratamiento (así como los correspondientes usos y otros aspectos) es un método para el tratamiento de al menos una afección seleccionada entre hipertensión arterial pulmonar (PAH), enfermedad pulmonar obstructiva crónica asociada con PAH (COPD), enfermedad de Raynaud grave, isquemia y afecciones relacionadas.

En una realización, el método de tratamiento implica la administración de una preformulación según se define en el presente documento cada 1 a 60 días, preferiblemente cada 1, 2, 3, 7, 14, 21, 28, 30 o 60 días (por ejemplo, ± 3 días, o el 20 % en cualquier caso), lo más preferiblemente cada 7 (± 1) días o cada 14 (± 2) días o cada 30 (± 3) días.

En una realización, el método de tratamiento implica administrar dicho análogo de prostaciclina o sal del mismo a un nivel de 0,005 a 2,5 mg/kg/semana, preferiblemente a un nivel de 0,01 a 1 mg/kg/semana, especialmente de 0,015 a 0,7 mg/kg/semana.

En otro aspecto, la invención se refiere a una preformulación según se describe en el presente documento para su uso en un método de tratamiento según se describe en el presente documento (incluyendo todas las enfermedades, afecciones, dosis, métodos o protocolos de administración y administración descritos en el presente documento). Se desvela el uso de una preformulación según se define en el presente documento en la fabricación de un medicamento para su uso en la formación in vivo de un depósito para el tratamiento de al menos una afección seleccionada entre hipertensión arterial pulmonar (PAH), COPD asociada con PAH, enfermedad de Raynaud, isquemia y afecciones relacionadas.

En otro aspecto, la invención proporciona un dispositivo de administración precargado que contiene una preformulación según se define en el presente documento.

Se describe un kit que comprende un dispositivo de administración según se define en el presente documento, que incluye preferiblemente un autoinyector, un cartucho y/o una pluma.

BREVE RESUMEN DE LAS FIGURAS ADJUNTAS

Figura 1. Perfiles de liberación in vitro de formulaciones seleccionadas de la Tabla 1 en función del tiempo (a) y la raíz cuadrada del tiempo (b).

Figura 2. Resultados del cambio de peso corporal en ratas durante la dosificación del estudio piloto usando las formulaciones B1 y B2 (véase el Ejemplo 2 y la Tabla 2).

Figura 3. Viscosidad de formulaciones seleccionadas L-AA (véase Ejemplo 3 y Tabla 6)

Figura 4. Perfiles de liberación in vitro de las formulaciones N, P, Q, R y S (liberación porcentual acumulada) (a) con la región de liberación del 0 al 20 % en vista ampliada (b).

Figura 5. Difractogramas de rayos X a 25 °C, 37 °C y 42 °C de las Formulaciones L a S después del equilibrio en medio acuoso. Figura 6. Difractogramas de rayos X a 25 °C, 37 °C y 42 °C de las Formulaciones T a AA después del equilibrio en medio acuoso.

Figura 7. Concentraciones plasmáticas medias de TPN en ratas tras la administración de las Formulaciones EE, FF, GG o HH. Figura 8. Perfiles de liberación in vitro (liberación porcentual acumulada) de las formulaciones FF, EE, X y HH.

Figura 9. Perfiles medios de concentración plasmática-tiempo de treprostinilo después de una única inyección subcutánea de 3, 15, 22,5 y 30 mg de TPN en preformulación en perros Beagle machos y hembras.

Figura 10. Valores medios de Treprostinil AUC0-168hr después de una sola inyección subcutánea de 3, 15, 22,5 y 30 mg de TPN en preformulación a perros Beagle machos y hembras.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

Las formulaciones de la presente invención generan una fase cristalina líquida no laminar tras la administración. El uso de estructuras de fase no laminar (tales como fases cristalinas líquidas) en la administración de agentes ahora está relativamente bien establecido. Un sistema de depósito de lípidos más eficaz para uso general se describe en la Patente WO2005/117830, y una matriz lipídica adecuada para su uso en la presente invención se describe en términos generales en ese documento.

Para una descripción de las estructuras de fase más favorables de tales formulaciones, se llama la atención a la descripción en la Patente WO2005/117830 y particularmente a la página 29 de la misma.

Todos los % se especifican en peso en todo el presente documento, a menos que se indique lo contrario. Además, el % en peso indicado es el % de la preformulación total, incluyendo todos los componentes indicados aquí cuando el contexto lo permita. Los porcentajes en peso de análogo de prostaciclina se calcularán sobre la base del peso de ácido libre independientemente de si se usa el ácido o una de sus sales. Las formulaciones previas pueden opcionalmente consistir esencialmente en únicamente los componentes indicados en el presente documento (incluyendo cuando sea apropiado los componentes opcionales adicionales indicados a continuación en el presente documento y en las reivindicaciones adjuntas) y en un aspecto consisten completamente en tales componentes. Cuando una formulación se indica como "que consiste esencialmente en" ciertos componentes en el presente documento, significa que los componentes especificados proporcionan la naturaleza esencial de esa formulación, tal como cuando los componentes especificados constituyen al menos el 95 %, preferiblemente al menos el 98 %, de la formulación.

Preferiblemente, la preformulación según la invención es una solución molecular o tiene una estructura de fases L2 (antes de la administración). La preformulación forma una fase no laminar (por ejemplo, líquida cristalina) después de la administración. Dicho cambio de fase normalmente se produce mediante la absorción de fluido acuoso del entorno fisiológico, como se indica en el presente documento. Aunque se ha establecido previamente en la Patente WO2012/160213 que puede tolerarse una cantidad cuidadosamente controlada de agua siempre que esté presente un disolvente monoalcohólico, se entenderá que, tras la administración, la preformulación se expone a una gran cantidad de fluido acuoso. Típicamente, la preformulación formará una fase no laminar al entrar en contacto con al menos una cantidad equivalente en volumen de fluido acuoso.

Los inventores de la presente invención han establecido sorprendentemente ahora que mediante la elección apropiada de tipos, cantidades absolutas y proporciones de componentes lipídicos, junto con el análogo trepostinilo de prostaciclina o una sal del mismo y un disolvente orgánico biocompatible, las propiedades de liberación de las composiciones de depósito formadas a partir de las preformulaciones de la invención pueden resultar altamente ventajosas y superiores a las formulaciones de depósito existentes de treprostinilo. En particular, la duración de liberación de una sola administración del análogo de prostaciclina es mucho mayor que la de los depósitos de treprostinilo existentes, con la concentración plasmática máxima in vivo siendo solo un pequeño múltiplo de la concentración media o incluso mínima durante el periodo de dosificación.

Componente a) - Lípido de acilo/Tocoferol

Las proporciones para el componente a) son del 20 al 80 %, preferiblemente del 30 al 60 % en peso, preferiblemente del 35 al 55 %, tal como del 38 al 52 %, especialmente del 38 a 52 %. Los niveles de aproximadamente el 43 % (por ejemplo, del 41 a 45 %) son particularmente preferidos en algunas realizaciones.

Las proporciones preferibles para el componente b) son del 15 al 85 % en peso, preferiblemente del 20 al 80 %, preferiblemente del 30 al 60 % en peso, preferiblemente del 35 al 55 %, tal como del 38 al 52 %, especialmente del 38 al 52 %. Los niveles de aproximadamente el 43 % (por ejemplo, del 41 a 45 %) son particularmente preferidos en algunas realizaciones.

Las proporciones de a:b son típicamente de 40:60 a 60:40, preferiblemente de 45:55 a 55:45 y más preferiblemente de 47:53 a 53:47. Las proporciones de aproximadamente el 50:50 (por ejemplo, 62) son altamente eficaces. El componente "a", según se indica en el presente documento, comprende uno o más de un lípido mono- o diacilo y/o un tocoferol. Lo más preferiblemente, el componente a) comprende o consiste en un lípido mono- o diacilo y, por lo tanto, tiene uno o dos grupos de "cola" no polares. Los acil gliceroles para su uso en la presente invención (por ejemplo, mono- o di-acil gliceroles) generalmente no formarán estructuras de fase cristalina líquida no laminar como un compuesto puro en agua a 25 °C.

En una realización, el componente a) puede ser un lípido mono-acilo. Los lípidos mono-acilo contienen un grupo de "cabeza" polar y un "grupo de cola" no polar. El grupo de "cabeza" puede ser glicerol, diglicerol, restos de azúcar (tales como restos basados en inositol y glucosilo); y ésteres de polioles, tales como ésteres de acetato o succinato. Una clase preferida de lípidos mono-acilo son los ésteres de hexitanos, tales como el sorbitán. En esta terminología, "hexitan" indica un hexitol de fórmula HOCH2(CHOH)4CH2OH que ha ciclado perdiendo un equivalente de agua para formar un anillo de cinco o seis miembros, preferiblemente un anillo de furanosa de cinco miembros. El sorbitán es un grupo de cabeza particularmente preferido. El grupo de cabeza está unido al grupo de cola, preferiblemente a través de engarce de éster. Los grupos de cola adecuados se discuten a continuación.

En una realización particularmente preferida, el componente a) comprende o consiste en al menos un lípido diacilo, preferiblemente un diacilglicerol (dAg ). Un lípido diacilo comprende un grupo de cabeza polar como se ha descrito anteriormente y dos grupos de cola apolares, preferiblemente unidos al grupo de cabeza polar a través de un engarce de éster. El grupo de cabeza polar más preferido para los lípidos de diacilo es glicerol.

El(los) grupo(s) no polar(es) puede(n) tener el mismo número de átomos de carbono o diferente y cada uno puede ser independientemente saturado o insaturado. Los ejemplos de grupos no polares incluyen grupos alquilo y alquenilo C6-C32, que están típicamente presentes como los ésteres de ácidos carboxílicos de cadena larga. A menudo estos se describen por referencia al número de átomos de carbono y el número de insaturaciones en la cadena de carbono. Por lo tanto, CX:Z indica una cadena de hidrocarburo que tiene X átomos de carbono y Z insaturaciones. Los ejemplos incluyen particularmente los grupos lauroílo (C12:0), miristoílo (C14:0), palmitoílo (C16:0), fitanoílo (C16:0), palmitoleoílo (C16:1), estearoílo (C18:0), iso-estearoílo (C18:0), oleoílo (C18:1), elaidoílo (C18:1), linoleoílo (C18:2), linolenoílo (C18:3), araquidonoílo (C20:4), behenoílo (C22:0) y lignoceroílo (C24:9). Por lo tanto, las cadenas no polares típicas están basadas en los ácidos grasos de lípidos de éster naturales, incluyendo los ácidos caproico, caprílico, cáprico, láurico, mirístico, palmítico, fitánico, palmitólico, esteárico, oleico, elaídico, linoleico, linolenico, araquidónico, behénico o lignocérico, o los alcoholes correspondientes. Las cadenas no polares preferibles son los ácidos palmítico, esteárico, oleico y linoleico, en particular el ácido oleico.

Pueden utilizarse mezclas de cualquier número de lípidos mono- o diacilo como el componente a). Preferiblemente, este componente incluirá al menos una porción de lípidos C18 (por ejemplo, DAG que tiene uno o más (es decir, uno o dos) grupos no polares C18:0, C18:1, C18:2 o C18:3), tal como monooleato de sorbitán (SMO), dioleato de glicerol (GDO) y/o dilinoleato de glicerol (GDL). Un ejemplo altamente preferido es DAG que comprende al menos el 50 %, preferiblemente al menos el 80 % e incluso que comprende sustancialmente el 100 % de GDO.

Dado que GDO y otros mono y diacil gliceroles son productos derivados de fuentes naturales, generalmente hay una cierta proporción de lípidos "contaminantes" que tienen otras longitudes de cadena, etc. En un aspecto, el GDO que se utiliza en el presente documento, se utiliza, por tanto, para indicar cualquier calidad comercial de GDO con impurezas contaminantes, (es decir, GDO de pureza comercial). Estas impurezas pueden separarse y eliminarse mediante purificación, pero rara vez es necesario a condición de que la calidad sea constante. Si es necesario, sin embargo, el "GDO" puede ser esencialmente GDO químicamente puro, tal como al menos el 80 % puro, preferiblemente al menos el 85 % puro y más preferiblemente GDO al menos el 90 % puro.

Una clase alternativa o adicional preferida de compuestos para su uso como todo o parte del componente a) son los tocoferoles. Como se utiliza en el presente documento, la expresión "un tocoferol" se utiliza para indicar el tocoferol lípido no iónico, a menudo conocido como vitamina E y/o cualquier de sus sales y/o análogos adecuados. Los análogos adecuados serán aquellos que proporcionen el comportamiento de fase, la falta de toxicidad y el cambio de fase tras la exposición a fluidos acuosos, que caracterizan las composiciones de la presente invención. Generalmente, dichos análogos no formarán estructuras de fase líquida cristalina, no laminar como un compuesto puro en agua a 25 °C. El más preferido de los tocoferoles es el propio tocoferol, que tiene la estructura siguiente. Evidentemente, en particular cuando se purifica a partir de una fuente natural, puede haber una pequeña proporción de "contaminante" distinto de tocoferol, pero esto no será suficiente para alterar el comportamiento de fase ventajoso o la falta de toxicidad. Típicamente, un tocoferol contendrá no más del 10 % de compuesto análogo distinto del tocoferol, preferiblemente no más del 5 % y lo más preferiblemente no más del 2 % en peso.

Tocoferol

En una realización de la invención, el componente a) consiste esencialmente en tocoferoles, en particular tocoferol como se ha mostrado anteriormente.

Una combinación preferida de constituyentes para el componente a) es una mezcla de al menos un diacilglicerol (DAG - por ejemplo, al menos un DAG de C16 a C18, tal como GDO) con al menos un tocoferol. Tales mezclas incluyen de un 2:98 a un 98:2 en peso de tocoferol:DAG, por ejemplo, de 10:90 a 90:10 de tocoferol:DAG y especialmente de 20:80 a 80:20 de estos compuestos. También son adecuadas mezclas similares de tocoferol con otros acil gliceroles, tal como cualquiera de los descritos en el presente documento.

Componente b) - Fosfolípido

El componente opcional "b" en las matrices lipídicas preferidas de la presente invención es al menos un fosfolípido. Como con el componente a), este componente comprende un grupo de cabeza polar y al menos un grupo de cola no polar. La diferencia entre los componentes a) y b) radica principalmente en el grupo polar. Por lo tanto, las porciones no polares pueden derivarse adecuadamente de los ácidos grasos o los alcoholes correspondientes considerados anteriormente para el componente a). El fosfolípido (por ejemplo, PC) contendrá dos grupos no polares. De nuevo, se prefieren los grupos C18 y pueden combinarse con cualquier otro grupo no polar adecuado, en particular grupos C16. Los fosfolípidos para su uso en la invención pueden ser aquellos que no forman estructuras de fase cristalina líquida, no laminar como un compuesto puro en agua a 25 °C. Como alternativa, los fosfolípidos para su uso en la invención pueden ser aquellos que forman una estructura de fase cristalina líquida no laminar, por ejemplo, una fase cristalina líquida hexagonal, en agua a 25 °C.

La porción de fosfolípido, incluso más adecuadamente que cualquier porción de diacilglicerol, puede obtenerse a partir de una fuente natural. Las fuentes adecuadas de fosfolípidos incluyen huevo, corazón (por ejemplo, bovino), cerebro, hígado (por ejemplo, bovino) y fuentes vegetales, incluyendo la semilla de soja. Dichas fuentes pueden proporcionar uno o más constituyentes del componente b, que pueden comprender cualquier mezcla de fosfolípidos. Los grupos de cabeza polares adecuados para el componente b) incluyen fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina y fosfatidilinositol. Los más preferidos son la fosfatidilcolina (PC) y/o la fosfatidiletanolamina (PE). Se ha demostrado en las Patentes WO2013/038460 y WO2013/083459 que la utilización de al menos un 50 % en peso de PE de la cantidad total de fosfolípido puede dar como resultado una robustez de depósito mejorada.

Se sabe por la Patente WO2016/066655 que las matrices lipídicas de liberación lenta basadas en lípidos de triacilo pueden formar composiciones de depósito al exponerse a fluidos acuosos sin la necesidad de que esté presente un componente de fosfolípido, aunque también puede haber presente un fosfolípido. Por lo tanto, en una realización, el componente a) comprende, consiste en o consiste esencialmente en uno o más lípidos de triacilo y el componente b) es opcional. Sin embargo, en otra realización, si el componente a) incluye más del 50 % de lípidos de monoacilo o diacilo, o al menos un tocoferol, o mezclas de cualquiera de estos componentes, entonces estará presente preferentemente un componente de fosfolípido b). En una realización, el componente a) incluye menos del 50 % (por ejemplo, del 0 a 49 % o del 0,1 a 45 %) de lípido de triacilo (basado en la cantidad total de componente a)) y el componente b) está presente (por ejemplo, del 20 al 80 % en peso de la preformulación o en otras cantidades según se indica en las diversas realizaciones del presente documento).

En la presente invención, se prefiere particularmente que el componente b) comprenda o consista en una o más PC. Por ejemplo, al menos el 50 % de los grupos de cabeza del componente b) deberían ser PC, preferiblemente más del 65 % de los grupos de cabeza, especialmente más del 85 % o más del 90 %. Puede utilizarse cualquier PC individual o mezclas de PC de estas y otras fuentes, pero las mezclas que comprenden PC de soja o PC de huevo son altamente adecuadas. El componente de PC contiene preferiblemente al menos el 50 % de PC de soja o PC de huevo, más preferiblemente al menos el 75 % de PC de soja o PC de huevo y lo más preferiblemente PC de soja o PC de huevo esencialmente puro.

En una realización aplicable a todos los aspectos de la invención, el componente b) comprende o consiste en PC. Preferiblemente, la PC se deriva de la soja. Preferiblemente, la PC comprende ácidos grasos 18:2 como el componente de ácido graso principal con 16:0 y/o 18:1 como los componentes de ácido graso secundarios. Estos están presentes preferiblemente en la PC a una proporción de entre 1,5:1 y 6:1. Teniendo la PC aproximadamente del 60 al 65 % de 18:2, del 10 al 20 % de 16:0, del 5 al 15 % de 18:1, prefiriéndose que predominen en equilibrio otros 16 carbonos y 18 ácidos grasos y que es típico de la PC de soja.

En una realización alternativa, pero igualmente preferida, también aplicable a todos los aspectos de la invención, el componente de PC puede comprender PC de dioleoílo sintética (DOPC). Se cree que esto proporciona una mayor estabilidad y, por tanto, será particularmente preferible para composiciones que necesiten ser estables al almacenamiento a largo plazo y/o que tengan un periodo de liberación in vivo largo. En esta realización, el componente de PC contiene preferiblemente al menos un 50 % de PC de dioleoílo sintética, más preferiblemente al menos un 75 % de PC de dioleoílo sintética y lo más preferiblemente PC de dioleoílo sintética esencialmente pura. Cualquier PC restante es preferiblemente PC de soja o huevo como se ha indicado anteriormente.

En una realización, las formulaciones de precursor de la presente invención están compuestas al menos parcialmente de DOPC sintético (es decir, PC que tiene al menos un 95 % de grupos de cabeza de PC y al menos un 90 % de grupos acil oleoílo (C18:1)) y tiene una estabilidad al almacenamiento a 15-25 °C, definida como menos del 5 % de degradación del agente activo, según se ensayó mediante HPLC, después de al menos 6 meses, más preferiblemente al menos 12 meses y lo más preferiblemente al menos 24 meses.

Dado que las preformulaciones de la invención deben administrarse a un sujeto para la liberación controlada de un análogo de prostaciclina, es importante que los componentes sean biocompatibles. A este respecto, las matrices lipídicas preferidas para su uso en las preformulaciones de la presente invención son muy ventajosas, ya que tanto la PC y como los ^dA^g se toleran bien y se rompen in vivo en componentes que están presentes de forma natural en el cuerpo de los mamíferos.

Las PC sintéticas o altamente purificadas, tal como dioleoil fosfatidilcolina (DOPC) y palmitoil oleoil fosfatidilcolina (POPC), así como las otras diversas PC de alta pureza descritas en el presente documento, son altamente adecuadas como todo o parte del componente b).

En una realización altamente preferida, el componente b) es una PC de "alta pureza" que consiste en fosfolípidos que tienen grupos de cabeza polares que comprenden al menos un 95 % de fosfatidil colina y dos cadenas de acilo que tienen cada una independientemente de 16 a 20 carbonos, en donde al menos una cadena de acilo tiene al menos una insaturación en la cadena de carbono, y no hay más de cuatro insaturaciones en dos cadenas de carbono.

Típicamente, puede ser PC con al menos un 95 % de grupos de cabeza de PC y al menos un 95 % de cadenas de acilo de C16 a C20 que tienen de 0 a 3 insaturaciones.

La PC de dioleoílo sintética es lo más preferiblemente 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfocolina, y otros componentes sintéticos de PC incluyen DDPC (1,2-didecanoil-sn-glicero-3-fosfocolina); DEPC (1,2-dierucoil-sn-glicero-3-fosfocolina); DLOPC (1,2-dilinoleoil-sn-glicero-3-fosfocolina); DLPC (1,2-dilauroil-sn-glicero-3-fosfocolina); DMPC (1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfocolina); DOPC (1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfocolina); DPPC (1,2-dipalmitoil-snglicero-3-fosfocolina); DSPC (1,2-diestearoil-sn-glicero-3-fosfocolina); MPPC (1-miristoil-2-palmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina) MSPC (1-miristoil-2-estearoil-sn-glicero-3-fosfocolina); PMPC (1-palmitoil-2-miristoil-sn-glicero-3-fosfocolina) POPC (1-palmitoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfocolina); PSPC (1-palmitoil-2-estearoil-sn-glicero-3-fosfocolina) SMPC (1-estearoil-2-miristoil-sn-glicero-3-fosfocolina); SOPC (1-estearoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfocolina) y SPPC (1-estearoil-2-palmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina), o cualquier combinación de los mismos.

Una combinación particularmente favorecida de componentes a) y b) son SMO con PC, GDO con PC, especialmente GDO con PC de soja y/o PC de "alta pureza". Las cantidades apropiadas de cada componente adecuado para la combinación son las cantidades indicadas aquí para los componentes individuales en cualquier combinación. Esto se aplica también a cualquier combinación de componentes indicada en el presente documento, donde el contexto lo permita.

La proporción de componentes a:b está en el intervalo de 40:60 a 60:40. Preferiblemente, la proporción a:b está en el intervalo de 45:55 a 55:45, más preferiblemente de 47:53 a 53:47. Lo más preferiblemente, la proporción a:b es aproximadamente 50:50, tal como de 48:52 a 52:48.

En una realización, la cantidad absoluta de componente a) será del 40 al 47 %, la cantidad absoluta de componente b) será del 40 al 47 %, la proporción de a:b será de 48:52 a 52:48, la cantidad de componente c) será del 5 al 20 %, preferiblemente del 8 al 12 % en donde el componente c) consiste en etanol y propilenglicol a una proporción de 2,5:1 a 3,5:1, y el componente d) será treprostinilo sódico a 2,5 a 50 mg/ml (basado en ácido libre), tal como de 5 a 50 mg/ml (basado en ácido libre).

Componente c) - Disolvente orgánico biocompatible

El componente c) de las preformulaciones de la invención es un disolvente orgánico biocompatible. Dado que la preformulación es para generar una composición de depósito tras la administración (por ejemplo, in vivo), típicamente al entrar en contacto con fluido acuoso, es deseable que este disolvente sea tolerable para el sujeto y sea capaz de mezclarse con el fluido acuoso y/o difundirse o disolverse fuera de la preformulación en el fluido acuoso. Por lo tanto, se prefieren los disolventes que tienen una solubilidad en agua al menos moderada. El componente c) comprende o consiste en un disolvente orgánico biocompatible seleccionado entre el grupo que consiste en: alcoholes incluyendo disolventes monoalcohólicos y disolventes di y polialcohólicos, aminas, amidas, sulfóxidos o ésteres. Se prefiere particularmente que el componente c) comprenda o consista en un disolvente monoalcohólico. El componente c) puede comprender dos o más componentes de la lista de disolventes anterior, en particular un disolvente monoalcohólico y un disolvente seleccionado entre amidas, sulfóxidos o disolventes dialcohólicos. Cualquier disolvente que no sea un disolvente monoalcohólico puede denominarse codisolvente en el presente documento. Cuando hay presentes dos o más disolventes, las combinaciones especialmente preferidas son etanol y una amida (tal como etanol y NMP), etanol y un sulfóxido (tal como etanol y DMSO), o etanol y un disolvente di o polialcohólico disolvente (tal como etanol y PG). Una combinación altamente preferida de disolventes es etanol y PG, en particular cuando la proporción de etanol con respecto a PG es de 1:5 a 20:1, preferiblemente de 1:1 a 10:1, más preferiblemente de 1,5:1 a 8:1, lo más preferiblemente de 2:1 a 5:1 (por ejemplo, aproximadamente 3:1, tal como de 2,8:1 a 3,2:1). El componente c) puede comprender o consistir en etanol, propanol, isopropanol, alcohol bencílico o mezclas de los mismos. Lo más preferiblemente, el componente c) comprende o consiste en etanol.

La cantidad de componente c) en la preformulación tendrá un efecto considerable sobre varias características. En particular, la viscosidad y la tasa (y duración) de liberación se alterarán significativamente con el nivel de disolvente. La cantidad de disolvente será, por lo tanto, al menos suficiente para proporcionar una mezcla de baja viscosidad, pero además se determinará para proporcionar la tasa de liberación deseada. Esto puede determinarse mediante métodos de rutina a la vista de los Ejemplos siguientes. El nivel del 1 al 30 %, en particular del 2 al 25 % de disolvente, proporcionará propiedades adecuadas de liberación y viscosidad. Esta será preferentemente del 2 al 20 %, preferentemente del 5 al 15 % y una cantidad de aproximadamente el 10 % (por ejemplo, 10±3 %) es muy eficaz. Estos niveles incluyen cualquier codisolvente presente como parte del componente c), como se ha mencionado anteriormente.

Como se ha indicado anteriormente, la cantidad de componente c) en las preformulaciones de la invención será al menos suficiente para proporcionar una mezcla de baja viscosidad (por ejemplo, una solución molecular) de componentes a), b), c) y d) y se determinará fácilmente para cualquier combinación particular de componentes por métodos estándar.

El comportamiento de fase puede analizarse por técnicas, tales como observación visual en combinación con microscopía de luz polarizada, técnicas de difracción y dispersión de rayos X, resonancia magnética nuclear, y microscopía electrónica de crio-transmisión (crio-TEM) para buscar soluciones, fases L2 o L3, o fases cristalinas líquidas o, como en el caso de la crio-TEM, fragmentos dispersos de dichas fases. La viscosidad puede medirse directamente por medios estándar. Como se ha descrito anteriormente, una viscosidad práctica adecuada es aquella que se puede inyectar con eficacia y filtrar de forma particularmente estéril. Esto se evaluará fácilmente según se indica en este documento.

Una combinación altamente preferida para los componentes a), b) y c) es GDO, PC de soja y/o "PC de alta pureza" y etanol o SMO, PC de soja y etanol. Otras combinaciones preferidas incluyen GDO/SPC/etanol/DMSO, GDO/SPC/etanol/NMP y GDO/SPC/etanol/PG. Como se ha indicado anteriormente, las cantidades apropiadas de cada componente adecuado para la combinación son las cantidades indicadas aquí para los componentes individuales, en cualquier combinación.

El componente c), según se utiliza en el presente documento, puede ser un solo disolvente o una mezcla de disolventes adecuados, pero generalmente será de baja viscosidad. Esto es importante porque uno de los aspectos clave de la presente invención es que proporciona preformulaciones que son de baja viscosidad y una función principal de un disolvente adecuado es reducir esta viscosidad. Esta reducción será una combinación del efecto de la menor viscosidad del disolvente y el efecto de las interacciones moleculares entre el disolvente y la composición lipídica. Una observación de los presentes inventores es que los disolventes de baja viscosidad que contienen oxígeno descritos en el presente documento tienen interacciones moleculares inesperadas y altamente ventajosas con las partes lipídicas de la composición, proporcionando así una reducción no lineal de la viscosidad con la adición de un pequeño volumen de disolvente.

La viscosidad del componente de disolvente de "baja viscosidad" c) (disolvente individual o mezcla) típicamente no debería ser no más de 18 mPas a 20 °C. Esto es preferiblemente no más de 15 mPas, más preferiblemente no más de 10 mPas y lo más preferiblemente no más de 7 mPas a 20 °C.

Se ha establecido en la Patente WO2012/160213 que la utilización de un disolvente alcohólico en combinación con un "disolvente polar" o "codisolvente", tal como un diol o agua, permite una mejora significativa en el rendimiento de ciertas composiciones de liberación controlada basadas en lípidos. En particular, se ha observado que la adición de un diol (como propilenglicol) o agua permite aumentar la proporción de alcohol sin afectar adversamente el perfil de liberación y/o permite una mejora en el perfil de liberación y/o permite una mayor carga del agente activo.

Los codisolventes típicos tendrán una constante dieléctrica comparativamente alta correspondiente a su alta polaridad. Por lo tanto, los codisolventes adecuados tendrán generalmente una constante dieléctrica de al menos 28 a 25 °C, más preferiblemente al menos 30 a 25 °C. Los ejemplos altamente adecuados incluyen agua (~80), propilenglicol (~32), dimetilsulfóxido (~47) y N-metil-2-pirrolidona (Nm P, ~32).

En algunas realizaciones, una combinación particularmente adecuada de disolventes para el componente c) incluye un disolvente monoalcohólico y un codisolvente seleccionado entre el grupo que consiste en: amidas, sulfóxidos o dioles. Una combinación especialmente preferida es etanol y una amida, etanol y un sulfóxido o etanol y un diol. Algunas combinaciones particularmente preferidas son etanol y propilenglicol (PG); etanol y dimetilsulfóxido (DMSO); y etanol y N-metil-pirrolidona (NMP).

Cuando esté presente, una cantidad adecuada del codisolvente será normalmente superior al 1 % en peso de la preformulación, por ejemplo, del 2 al 15 %, en particular del 4 al 12 %, especialmente del 4 al 10 % en peso. La combinación de un disolvente monoalcohólico y un codisolvente como componente c) tiene ventajas potenciales en las composiciones de la invención. En particular, mediante la inclusión de algún codisolvente que sea miscible con el componente monoalcohólico, se puede eliminar sustancialmente la ligera sensación que puede causar el contenido de alcohol en el sitio de la inyección. Por tanto, en una realización, la proporción de componente monoalcohólico:codisolvente puede estar en el intervalo de 30:70 a 90:10, más preferiblemente de 50:50 a 80:20, especialmente de 60:40 a 80:20. Son altamente adecuadas cantidades aproximadamente iguales de componentes (p/p).

Componente d) - Análogo de prostaciclina

Las preformulaciones de la presente invención contienen al menos un análogo de prostaciclina seleccionado entre treprostinilo o una sal del mismo. A continuación se muestran la prostaciclina y los análogos sintéticos beraprost, epoprostenol, iloprost (para comparación) y treprostinilo.

El componente d) comprende o consiste en treprostinilo.

También puede utilizarse cualquier sal biológicamente aceptable del análogo de prostaciclina treprostinilo. Cuando las cantidades del componente d) se dan como un porcentaje en peso, se entiende el peso basado en el ácido libre a menos que el contexto permita lo contrario. El componente d) comprende o consiste en ácido libre de treprostinilo (TPN) o una sal del mismo, lo más preferiblemente sal sódica de treprostinilo (TPN(Na)).

El componente d) está presente en una cantidad del 0,1 al 15 % basada en el ácido libre del análogo de prostaciclina, preferiblemente del 0,1 al 10 %, tal como del 1 al 12 %, especialmente del 2 al 8 %. En algunas realizaciones, el nivel de análogo de prostaciclina puede ser del 4 al 8 %.

Es un hallazgo sorprendente de los inventores que la duración de la liberación del análogo de prostaciclina treprostinilo depende fuertemente tanto de la cantidad de agente activo como de la naturaleza del componente de disolvente c). En consecuencia, las propiedades de liberación del depósito pueden ajustarse variando uno o más de estos parámetros.

Además, es un hallazgo sorprendente de los inventores de la presente invención que la liberación del análogo de prostaciclina, treprostinilo, puede controlarse eficazmente mediante la selección adecuada del disolvente de formulación y la proporción de disolvente.

En general, con formulaciones de depósito de mono- y/o diacil lípidos (como GDO) con fosfolípidos como fosfatidilcolina, la liberación de agente activo está controlada principalmente por el comportamiento de fase de la formulación, que a su vez está controlado principalmente por la naturaleza y proporción de los componentes lipídicos. Sin embargo, en el presente caso, los inventores han establecido que las propiedades de liberación, y en particular la concentración máxima in vivo alcanzada después de la administración (Cmáx) puede optimizarse de forma útil eligiendo el disolvente y la proporción de disolventes. En una realización, por ejemplo, la presente invención proporciona formulaciones de precursor de la presente invención, donde el componente c) comprende, comprende esencialmente o consiste en etanol y propilenglicol, en donde la proporción de etanol con respecto a PG está entre 1:1 y 10:1, más preferiblemente de 1,5:1 a 8:1, lo más preferiblemente de 2:1 a 5:1 (por ejemplo, aproximadamente 3:1). En particular, las formulaciones que tienen tanto etanol como PG (por ejemplo, al menos un 0,5 % de cada) donde la cantidad de etanol es mayor que la cantidad de PG pueden proporcionar una Cmáx menor (es decir, un "pico" de concentración in vivo más bajo) que las formulaciones donde hay una cantidad igual o menor de etanol con comparación con PG. Dicho control de las propiedades de liberación es de gran importancia en una formulación de liberación lenta y no se espera que se proporcione mediante la elección de la proporción de disolvente.

Con respecto al nivel del componente d), la Figura 4a ilustra la liberación in vitro de TPN desde las formulaciones que contienen entre un 1,53 y un 7,76 % de TPN(Na) en una matriz de GDO/PC/EtOH (45:45:10). Con cargas del 7,76 % de TPN(Na), las formulaciones exhiben características de "ráfaga", es decir, aproximadamente el 50 % del TPN(Na) se libera después de un período de aproximadamente 24 horas, mientras que a niveles del 6,17 % e inferiores, la liberación de TPN (Na) es mucho más gradual. Ser capaz de alterar el perfil de ráfaga simplemente eligiendo los componentes apropiados es potencialmente una característica muy útil de las preformulaciones de la invención. En una realización, estos pueden verse afectados por la elección del disolvente y la proporción de disolventes.

En una realización, particularmente cuando se desea que la formulación proporcione una liberación a corto plazo durante 1 a 3 días, puede ser deseable operar con un nivel de treprostinilo o una de sus sales, como TPN o TPN(Na), del 6,5 % o más, especialmente del 6,7 % o más o del 7 % o más. Sin embargo, en general, el nivel de treprostinilo o una sal del mismo no será superior al 5 % en peso, preferiblemente no superior al 4 % en peso (por ejemplo, del 0,5 al 4 % en peso, tal como alrededor del 1 %, alrededor del 2 % o alrededor del 3 % en peso).

Los depósitos de liberación a corto plazo que proporcionen una liberación eficaz durante un período de 1 a 3 días pueden formularse con etanol como único componente c) un nivel de al menos el 11 %, preferiblemente al menos el 12 %, especialmente al menos el 13 %. Alternativamente, puede utilizarse una mezcla de etanol y un sulfóxido, especialmente etanol y DMSO, como componente c) en una cantidad del 20 % o menos, como del 10 al 20 %, especialmente del 12 al 18 %. En esta realización, la proporción de etanol:sulfóxido está en el intervalo de 20:80 a 60:40 (p:p), especialmente en el intervalo de 30:70 a 50:50.

Cuando se desea proporcionar una liberación más gradual de treprostinilo, por ejemplo, para un depósito de una semana, una quincena o un mes, puede ser deseable operar con niveles de d) de menos del 6,5 %, tal como del 6,2 % o menos, especialmente del 5,5 % o menos o puede ser deseable del 5 % o menos. Como se ha indicado anteriormente, normalmente el nivel de treprostinilo o una sal del mismo no será superior al 5 % en peso, preferiblemente no superior al 4 % en peso (por ejemplo, del 0,5 al 4 % en peso, tal como alrededor del 1 %, alrededor del 2 % o alrededor del 3 % en peso). Por tanto, una preformulación para una administración una vez a la semana o una vez cada dos semanas puede comprender preferiblemente del 1 al 7 % de treprostinilo o una sal del mismo, tal como del 1 al 3%, especialmente de TPN o TPN(Na).

Los depósitos de liberación a largo plazo que proporcionen una liberación eficaz durante un período superior a 5 días, tal como semanal o quincenal, pueden formularse con etanol como único componente c) a un nivel inferior al 11 %, tal como un 10 % o menos. Como alternativa, puede utilizarse una mezcla de etanol y un disolvente di o polialcohólico, especialmente etanol y PG o etanol y agua en una cantidad del 5 a 20 %, especialmente del 5 al 15 %, con una proporción de etanol:PG o etanol:agua en el intervalo de 40:60 a 60:40 (p:p), se prefieren particularmente niveles de aproximadamente 50:50. Una cantidad de aproximadamente 2,5 % de PG y aproximadamente 7,5 % de etanol es altamente eficaz.

En un aspecto, cada una de las realizaciones del presente documento puede contener opcionalmente un agente antimicrobiano o microestático, que incluye agentes bacteriostáticos y conservantes. Dichos agentes incluyen cloruro de benzalconio, m-cresol, alcohol bencílico u otros conservantes fenólicos. Pueden utilizarse concentraciones típicas conocidas en la técnica.

Los componentes adicionales por encima de los mencionados como componentes a) a d), cuando estén presentes, estarán presentes preferiblemente en una cantidad del 0 al 5 % (por ejemplo, del 0,01 % al 5 %) en peso, preferiblemente no más del 2 % en peso y más preferiblemente no más del 1 % en peso.

En una realización, los componentes a) y b) (teniendo en cuenta cualquier impureza inherente a la naturaleza de estos componentes) constituyen al menos el 95 % de los componentes lipídicos de la composición. Preferiblemente, al menos el 99 % del contenido total de lípidos de la preformulación consiste en los componentes a) y b). Preferiblemente, el componente lipídico de la preformulación consiste esencialmente en los componentes a) y b). Administración

Las preformulaciones de la presente invención generalmente se formulan para administrarse por vía parenteral. Generalmente, esta administración no será un método intravascular, sino que será preferiblemente subcutánea (s.c.), intracavitaria o intramuscular (i.m.). Es importante señalar que las preformulaciones de la invención tienen la ventaja de que no necesitan ser administradas por vía intravenosa ni por medio de una inyección s.c. continua. Preferiblemente, la administración no es intravenosa o s.c. continua.

Típicamente, la administración será por inyección, término que se utiliza en el presente documento para indicar cualquier método en el que la formulación se pasa a través de la piel, como por ejemplo con una aguja, catéter o inyector sin aguja (libre de aguja). La administración parenteral preferida es por inyección i.m. o s.c., lo más preferiblemente por inyección s.c. Una característica importante de la composición de la invención es que puede administrarse tanto por vía i.m. como por vía s.c. y otras vías sin toxicidad o efectos locales significativos, especialmente sin causar dolor significativo en el sitio. También es adecuado para la administración intracavital. La inyección s.c. tiene la ventaja de ser menos profunda y menos dolorosa para el sujeto que la inyección i.m. (profunda) y técnicamente es la más adecuada en el presente caso, ya que combina la facilidad de inyección con un bajo riesgo de efectos secundarios locales. Es una observación sorprendente de los inventores de la presente invención que las formulaciones proporcionan una liberación sostenida del agente activo durante un período de tiempo predecible mediante inyección subcutánea, y normalmente las formulaciones de la invención ponen a disposición duraciones de liberación mucho más largas en comparación con las formulaciones existentes de análogos de prostaciclina.

Las preformulaciones lipídicas preferidas de la presente invención proporcionan composiciones de depósito cristalinas líquidas no laminares tras la exposición a fluidos acuosos, especialmente in vivo. Como se usa en el presente documento, la expresión "no laminar" se usa para indicar una fase cristalina líquida normal o más preferiblemente inversa (tal como una fase cúbica o hexagonal inversa) o la fase L3 o cualquier combinación de las mismas. El término líquido cristalino indica todas las fases cristalinas líquidas hexagonales, todas cúbicas y/o todas sus mezclas. Hexagonal como se usa en el presente documento indica hexagonal "normal" o "invertido" (preferiblemente invertido) y "cúbico" indica cualquier fase cristalina líquida cúbica a menos que se especifique lo contrario. El lector experto no tendrá dificultad para identificar aquellas composiciones que tienen un comportamiento de fase adecuado con referencia a la descripción y los ejemplos proporcionados en este documento, y a la Patente WO2005/117830, pero el área de composición más favorecida para el comportamiento de fase es donde la proporción de componentes a:b es como se ha descrito en las secciones anteriores. Las proporciones de aproximadamente 50:50 (por ejemplo, 62) son altamente preferidas para la mayoría de las formulaciones, lo más preferentemente aproximadamente de 50:50.

Es importante apreciar que las preformulaciones de la presente invención son de baja viscosidad. Como resultado, estas preformulaciones no deben estar en ninguna fase cristalina líquida a granel, ya que todas las fases cristalinas líquidas tienen una viscosidad significativamente más alta que la que podría administrarse con una jeringa o un dispensador de inyección similar. Por tanto, las preformulaciones de la presente invención estarán así en un estado cristalino no líquido, tal como una solución, fase L2 o L3, en particular solución o L2. La fase L2 como se utiliza en todo el presente documento es preferiblemente una fase L2 "hinchada" que contiene más del 5 % en peso, preferiblemente más del 7 %, y lo más preferiblemente más del 9 % de disolvente orgánico (componente c) que tiene un efecto reductor de la viscosidad. Las preformulaciones de la invención que están en fase L2 forman un conjunto preferido de preformulaciones.

Como se utiliza en el presente documento, la expresión "mezcla de baja viscosidad" o "preformulación de baja viscosidad" se utiliza para indicar una mezcla que puede administrarse fácilmente a un sujeto y, en particular, administrarse fácilmente por medio de una disposición estándar de jeringa y aguja. Esto puede estar indicado, por ejemplo, por la capacidad de dispensarse desde una jeringa desechable de 1 ml a través de una aguja de pequeño calibre. Preferiblemente, las mezclas de baja viscosidad pueden dispensarse a través de una aguja de calibre 19, preferiblemente más pequeña que el calibre 19, más preferiblemente calibre 23 (o incluso más preferiblemente calibre 27) mediante presión manual. En una realización particularmente preferida, la mezcla de baja viscosidad debería ser una mezcla capaz de pasar a través de una membrana de filtración estéril estándar, tal como un filtro de jeringa de 0,22 mm. Un intervalo típico de viscosidades adecuadas sería, por ejemplo, de 10 a 1000 mPas, más preferiblemente de 10 a 800 mPas y lo más preferiblemente de 200 a 700 mPas a 20 °C.

Tras la administración, las preformulaciones basadas en lípidos preferidas de la presente invención experimentan una transición de estructura de fase desde una mezcla de baja viscosidad a una composición de depósito de alta viscosidad (generalmente adherente al tejido). En general, esto será una transición desde una mezcla molecular, fase L2 y/o L3 hinchada, a una o más fases cristalinas líquidas (alta viscosidad) tales como fases cristalinas líquidas hexagonales o cúbicas invertidas o mezclas de las mismas. También pueden tener lugar otras transiciones de fase después de la administración. Obviamente, la transición de fase completa no es necesaria para el funcionamiento de la invención, pero al menos una capa superficial de la mezcla administrada formará una estructura cristalina líquida. Generalmente, esta transición será rápida, por lo menos para la región de la superficie de la formulación administrada (la parte en contacto directo con el aire, las superficies corporales y/o los fluidos corporales). Esta será lo más preferiblemente durante unos pocos segundos o minutos (por ejemplo, desde 1 segundo hasta 30 minutos, preferiblemente hasta 10 minutos, más preferiblemente 5 minutos o menos). El resto de la composición puede cambiar de fase a una fase cristalina líquida más lentamente por difusión y/o a medida que se dispersa la región superficial.

Sin quedar ligado a teoría alguna, se cree que tras la exposición a un exceso de fluido acuoso, las preformulaciones de la invención pierden parte o la totalidad del disolvente orgánico incluido en las mismas (por ejemplo, por difusión) y toman fluido acuoso del entorno corporal (por ejemplo, el entorno in vivo). Para preformulaciones de lípidos, al menos una parte de la formulación genera preferiblemente una estructura de fase cristalina no laminar particularmente líquida. En la mayoría de los casos, estas estructuras no laminares son muy viscosas y no se disuelven o dispersan fácilmente en el ambiente in vivo. El resultado es un "depósito" monolítico generado in vivo con solo un área limitada de exposición a fluidos corporales. Además, debido a que la estructura no laminar tiene grandes regiones polares, apolares y límite, el depósito de lípidos es muy eficaz para solubilizar y estabilizar agentes activos y protegerlos de los mecanismos de degradación. A medida que la composición de depósito formada a partir de la preformulación se degrada gradualmente durante un período de días, semanas o meses, el agente activo se libera gradualmente y/o se difunde fuera de la composición. Dado que el entorno dentro de la composición de depósito está relativamente protegido, las formulaciones previas de la invención son muy adecuadas para agentes activos con una semivida biológica relativamente corta.

Mediante la incorporación de al menos un 2 % (por ejemplo, al menos un 5 %) de un codisolvente polar (especialmente al menos un 5 % de PG, agua, NMP o DMSO) en las preformulaciones, se cree que la tasa de transición de fase a una fase no laminar (por ejemplo, líquida cristalina) en la superficie de la preformulación inyectada puede mejorarse en comparación con las composiciones que contienen disolventes orgánicos en ausencia sustancial de agua. De este modo se mejora el rendimiento del depósito resultante y se logra un mayor control sobre la liberación del agente activo.

Los sistemas de depósito formados por las formulaciones de la presente invención son muy eficaces para proteger el agente activo de la degradación y, por lo tanto, permiten un período de liberación prolongado. Por lo tanto, las formulaciones de la invención pueden proporcionar in vivo depósitos del análogo de prostaciclina, treprostinilo o una sal del mismo que requieren administración solo una vez cada 1 a 60 días. Los intervalos típicos de administración serán, por ejemplo, cada 1, 2, 3, 7, 14, 21, 28, 30 o 60 días y pueden variarse sistemática u ocasionalmente en pequeñas cantidades (por ejemplo, en ± 3 días, o en ± 20 % en cualquier caso adecuado). Las frecuencias de administración altamente preferidas incluyen cada 7 (± 1) días o cada 14 (± 2) días o cada 30 (± 3) días. En una realización, las formulaciones que contienen un nivel comparativamente bajo de análogo de prostaciclina (por ejemplo, del 0,5 al 2,0 %) pueden administrarse una vez a la semana, quincenal o mensualmente, y las formulaciones que tienen un nivel más alto de análogo de prostaciclina (por ejemplo, del 2,5 % al 4 % o mayor en peso) pueden administrarse una vez a la semana o con mayor frecuencia, tal como una vez cada 3 días, una vez cada 2 días o diariamente.

Evidentemente, es deseable un período de liberación estable más prolongado para la comodidad y el cumplimiento del paciente, así como para demandar menos tiempo a los profesionales de la salud si la composición no se va a autoadministrar. Cuando la composición se va a autoadministrar, el cumplimiento del paciente se puede ayudar con una administración semanal (por ejemplo, cada 7 días, opcionalmente ±1 día) o mensual (por ejemplo, cada 28 o 30 días (opcionalmente ± 7 días)) de modo que la necesidad de administrar no sea olvidada. Incluso proporcionar una formulación que no necesitara administrarse continuamente o más de una vez al día mejoraría en gran medida el bienestar del paciente en este campo en muchos casos.

En una realización de la presente invención, aplicable a todos los aspectos, pero particularmente al uso en los métodos de tratamiento, la dosis y la frecuencia de administración pueden escalarse gradualmente para corresponder con la progresión de la enfermedad subyacente (como cualquiera de las enfermedades indicadas en el presente documento). Por lo tanto, las dosis de 1 mg/semana o 5 mg/semana de análogo de prostaciclina pueden ser suficientes para un sujeto en una etapa temprana y se pueden proporcionar como administraciones semanales, quincenales o mensuales, según sea necesario (por ejemplo, una inyección de 1,5 ml a 10 mg/ml cada 4 semanas daría una dosis promedio de 3,75 mg/semana y puede ser suficiente para una etapa temprana de la enfermedad). A medida que avanza la enfermedad, las dosis pueden aumentarse a 1 ml (a 10 mg/ml) cada quince días (5 mg/semana), 0,75 ml cada semana (7,5 mg/semana) y 1,0 ml/semana (10 mg/semana). Después, pueden conseguirse aumentos posteriores mediante concentraciones más altas de formulación, como 1,0 ml de una formulación de 30 mg/ml cada quince días (15 mg/semana), que aumenta al aumentar la frecuencia y el volumen, por ejemplo, a 1,0 ml semanalmente (30 mg/semana) y después si es necesario a múltiples administraciones por semana.

Las dosis iniciales de análogos de prostaciclina conocidos utilizando infusión continua de aproximadamente 1 a 4 ng/kg/min son típicas como dosis iniciales de infusión, correspondientes a aproximadamente de 10 a 40 mg/kg por semana, particularmente para epoprostenol y sus sales (por ejemplo, sal de sodio). Dichas dosis forman dosis iniciales adecuadas para las formulaciones de la presente invención, que después pueden ajustarse hacia arriba hasta que se logre un equilibrio adecuado de eficacia/tolerabilidad. Para el treprostinilo (y sales, tales como la sal sódica), las dosis iniciales adecuadas suelen ser alrededor de la mitad de las del epoprostenol, lo que corresponde a entre 0,5 y 2 ng/kg/min (alrededor de 5 a 20 mg/kg por semana). Nuevamente, se puede aplicar un ajuste de dosis ascendente hasta que se establezca una dosis adecuada.

Es un aspecto importante de los métodos de administración que, aunque las formulaciones precursoras descritas en este documento preferiblemente proporcionarán una liberación controlada del análogo de prostaciclina durante al menos 7 días, la frecuencia de administración puede ser más rápida que esta. Por lo tanto, por ejemplo, la concentración plasmática del análogo de prostaciclina a los 7 días después de una sola inyección de las preformulaciones de la presente invención puede caer a no menos de 10-3, preferiblemente no menos de 10-2 y lo más preferiblemente no menos de 10-1 de la concentración plasmática al final del día 1 después de esa administración. Dicho rendimiento de liberación controlada puede ser suficiente para un producto de 7 días de duración en una etapa temprana de la enfermedad y proporciona una ventaja significativa a ese respecto. Sin embargo, la administración de dicho producto que tiene propiedades de liberación como las descritas puede repetirse más frecuentemente que cada 7 días (por ejemplo, dos veces por semana, cada 3 días, cada 2 días o diariamente). Esta administración tendrá lugar significativamente antes de que los efectos de la primera administración dejen de ser efectivos. Sin embargo, las inyecciones múltiples (por ejemplo, en múltiples sitios) de productos de larga duración descritos aquí proporcionan una nivelación aún mayor de la concentración plasmática del análogo de prostaciclina y permiten dosis muy altas sin necesidad de grandes volúmenes de inyección.

Por lo tanto, por ejemplo, la inyección dos veces a la semana de 1,0 ml de una formulación de 30 mg/ml proporcionará 60 mg/semana sin grandes inyecciones y con un perfil de liberación muy estable, ya que el "pico" de una liberación corresponde al nivel de meseta estable de la administración anterior. De esta manera, las preformulaciones de la presente invención que tienen una duración teórica de 7 días o más (por ejemplo, un perfil de liberación de 7 días descrito anteriormente) pueden usarse dos veces por semana, cada 3 días, cada 2 días o diariamente para proporcionar concentraciones altas y estables de análogos de prostaciclina cuando el avance de la enfermedad lo requiera.

Otra ventaja considerable de los precursores de depósito de la presente invención es que son fases homogéneas estables. Es decir, pueden almacenarse durante periodos considerables (preferiblemente al menos 6 meses, especialmente al menos 12 meses) a temperatura ambiente o de refrigeración, sin separación de fases. Además de proporcionar un almacenamiento ventajoso y una fácil administración, esto permite seleccionar la dosis del análogo de prostaciclina en función de la especie, la edad, el sexo, el peso y/o la condición física del sujeto individual, mediante la inyección de un volumen seleccionado.

Por lo tanto, la presente invención proporciona métodos que comprenden la selección de una cantidad de dosificación específica para un individuo, particularmente por el peso del sujeto. El medio para esta selección de dosis es la elección del volumen de administración.

Las preformulaciones de la presente invención son altamente ventajosas porque son estables al almacenamiento prolongado en su forma final "lista para la administración". Como resultado, pueden ser suministradas fácilmente para su administración por profesionales de la salud o por pacientes o sus cuidadores, quienes no necesitan ser profesionales de la salud completamente capacitados y pueden no tener la experiencia o las habilidades para preparar preparaciones complejas. Esto es particularmente importante en enfermedades de larga duración y efecto lento como la diabetes.

Inhibidores de PDE5

Las formulaciones de precursor de la presente invención comprenderán al menos una prostaciclina o un análogo de prostaciclina, como los descritos en el presente documento, y pueden comprender adicionalmente al menos un inhibidor de PDE5. Los inhibidores de PDE5 se han administrado típicamente para el tratamiento inmediato de la disfunción eréctil (DE) y se han proporcionado ventajosamente en formulaciones de acción rápida. Sin embargo, los inhibidores de PDE5 en dosis adecuadas han sido indicados y/o probados en el tratamiento a largo plazo de varias afecciones clínicamente significativas, incluida la hipertensión arterial pulmonar (PAH). Como tales, se pueden añadir dosis adecuadas de inhibidores de PDE5 a cualquiera de las formulaciones de la presente invención para proporcionar un tratamiento de doble efecto.

Los inhibidores de PDE5 adecuados incluyen inhibidores conocidos, tales como avanafil, lodenafil, mirodenafil, sildenafil, tadalafil, vardenafil, udenafil, zaprinast, Icariin (y derivados sintéticos de los mismos), benzamidenafil, dasantafil, sales, profármacos y mezclas de los mismos. Los inhibidores de la PDE5 altamente adecuados incluyen Tadalafil (Cialis) y vardenafil (Levitra).

Las dosis de inhibidor de PDE5 adecuadas para una administración una vez a la semana normalmente estarían en el intervalo de 1 a 75 mg de inhibidor de PDE5 (calculado como base libre o molécula de fármaco no protegida), preferiblemente de 2 a 50 mg por semana (es decir, por administración) y lo más preferiblemente de 5 a 25 mg por semana.

Las dosis de inhibidor de PDE5 adecuadas para una administración una cada quince días normalmente estarían en el intervalo de 2 a 150 mg de inhibidor de PDE5 (calculado como base libre o molécula de fármaco no protegida), preferiblemente de 5 a 100 mg cada quince días (es decir, por administración) y lo más preferiblemente de 10 a 50 mg cada quince días.

Las dosis de inhibidor de PDE5 adecuadas para una administración una vez al mes normalmente estarían en el intervalo de 5 a 300 mg de inhibidor de PDE5 (calculado como base libre o molécula de fármaco no protegida), preferiblemente de 10 a 200 mg al mes (es decir, por administración) y lo más preferiblemente de 20 a 100 mg al mes.

Como alternativa, los precursores de depósito de la presente invención pueden administrarse junto con una formulación equivalente que comprenda al menos un inhibidor de PDE5 (es decir, una administración de una preformulación que contiene un análogo de prostaciclina y otra administración de una preformulación que contiene un inhibidor de PDE5). Dicha administración concomitante puede ser simultánea o secuencial en cualquier orden, pero típicamente será el mismo día y con formulaciones de precursores de depósito que tendrán duraciones similares (por ejemplo, ambas serán formulaciones mensuales o ambas semanales). Preferiblemente, la administración concomitante será de formulaciones precursoras que comprendan matrices de liberación controlada similares (por ejemplo, ambos lípidos o ambos polímeros, como cualquiera de los sistemas preferidos indicados en el presente documento) y más preferiblemente será de formulaciones precursoras que sean ambas formulaciones lipídicas y que comprendan los mismos o sustancialmente los mismos componentes lipídicos (opcionalmente con los mismos o sustancialmente los mismos componentes de disolvente). Los componentes más preferidos incluirán DAG (por ejemplo, GDO) y fosfolípidos (por ejemplo, PC) como se describe en el presente documento.

Dispositivos

En otro aspecto más, la presente invención proporciona un dispositivo de administración desechable (que también debe incluir un componente del dispositivo) precargado con una dosis medida de una preformulación de la presente invención. Dicho dispositivo contendrá normalmente una sola dosis lista para la administración y, en general, estará envasado en condiciones estériles de manera que la composición esté almacenada dentro del dispositivo hasta la administración. Los dispositivos adecuados incluyen cartuchos, ampollas y particularmente jeringas y cilindros de jeringas, tanto con agujas integrales o con accesorios estándar (por ejemplo, luer) adaptados para recibir una aguja desechable adecuada. Los dispositivos igualmente apropiados incluyen un inyector sin aguja, un autoinyector de un solo uso o multiuso combinado con una jeringa precargada, un cartucho, opcionalmente combinado con un dispositivo de pluma multiuso o un vial. Evidentemente, dichas jeringas y cartuchos precargados pueden ser para cualquier dispositivo de inyección apropiado, tal como un inyector multiuso o de un solo uso o una unidad de inyección sin aguja.

Los dispositivos de la invención pueden contener preferiblemente la preformulación de la invención que administra una dosis en el intervalo de 2 a 50 mg/ml, preferiblemente de 5 a 40 mg/ml, lo más preferiblemente de 7 a 35 o de 10 a 30 mg/ml. Los volúmenes de dosis normalmente no serán superiores a 2 ml (por ejemplo, de 0,1 a 2 ml), por ejemplo, de 0,25 a 1,5 ml o de 0,5 a 1 ml. Una formulación que se administra semanalmente o más a menudo puede tener preferiblemente un volumen de no más de 1,2 ml o 1,0 ml, mientras que una formulación para administración quincenal o mensual puede tener preferiblemente un volumen de no más de 2 ml o 1,5 ml.

En una realización aplicable a todos los aspectos de la invención, los dispositivos de la invención pueden contener una dosis única de 1 a 200 mg, por ejemplo, de 2 a 150 mg (por ejemplo, de 5 a 120 mg) de análogo de prostaciclina.

Los dispositivos de la invención pueden contener análogo de prostaciclina a aproximadamente de 0,005 a 2,5 mg/kg/semana, preferiblemente a un nivel de 0,01 a 1 mg/kg/semana, especialmente de 0,015 a 0,7 mg/kg/semana. Las dosis para un sujeto de 50 kg, 70 kg u 80 kg, así como para todos los demás sujetos o rangos de pesos de sujetos, pueden calcularse de forma correspondiente. Por ejemplo, una dosis adecuada de análogo de prostaciclina para un sujeto de 70 kg estaría en el intervalo de 0,35 a 175 mg/semana, preferiblemente de 0,7 a 70 mg/semana, especialmente de 1 a 50 mg/semana.

Los dispositivos de la invención pueden contener un volumen total para administración de no más de 2 ml, preferiblemente no más de 1 ml, especialmente no más de 0,5 ml.

Los dispositivos precargados de la invención también pueden incluirse adecuadamente en un kit de administración, kit que también forma un aspecto adicional de la invención. Se desvela un kit para la administración de al menos un análogo de prostaciclina, conteniendo dicho kit una dosis medida de una formulación de la invención y opcionalmente un dispositivo de administración o componente del mismo. Preferiblemente, la dosis se mantendrá dentro del dispositivo o componente, que será adecuado para la administración i.m. o preferiblemente s.c. Los kits pueden incluir componentes de administración adicionales, tales como agujas, hisopos, etc. y opcional y preferiblemente contendrán instrucciones para la administración. Dichas instrucciones normalmente estarán relacionadas con la administración por una vía como se describe en el presente documento y/o para el tratamiento de una enfermedad indicada anteriormente en el presente documento.

Kits

La invención proporciona un dispositivo de administración precargado como se indica en el presente documento. Se desvela un kit según se indica en el presente documento que comprende una preformulación según se describe en el presente documento. Los kits adecuados pueden incluir un dispositivo de inyección de uso único o múltiple, tal como un autoinyector, o pueden incluir cartuchos o componentes para su uso en dichos dispositivos.

Los kits incluirán adicionalmente (opcional pero preferiblemente) cualquiera de los siguientes componentes:

i) un dispositivo de inyección, tal como una jeringa o un autoinyector

ii) un dispositivo de medición de dosis (por ejemplo, un dispositivo graduado para medir o ajustar el volumen de administración)

iii) una tabla, gráfico, aplicación de teléfono o calculadora electrónica para calcular y/o establecer el volumen de dosificación en función de parámetros, tales como el peso del sujeto y/o la frecuencia de la dosis. Factores tales como el progreso de la enfermedad y/o la concentración de análogos de prostaciclina pueden tenerse en cuenta en dichos cálculos, ya sea explícita o implícitamente.

iv) instrucciones para la dosificación y/o para escalar la dosificación de acuerdo con factores, tales como el peso del sujeto y/o la frecuencia de la dosis, el progreso de la enfermedad (por ejemplo, presión arterial pulmonar media) y/o la concentración de análogos de prostaciclina.

Características y combinaciones preferidas

En combinación con las características y características preferidas indicadas en el presente documento, las preformulaciones de la invención pueden tener una o más de las siguientes características preferidas de forma independiente o en combinación:

Todas las proporciones indicadas en el presente documento pueden variar opcionalmente hasta en un 10 % de la cantidad especificada, opcional y preferentemente hasta en un 5 %;

El componente a) comprende, consiste esencialmente en o preferiblemente consiste en GDO;

El componente b) comprende, consiste esencialmente en o preferiblemente consiste en PC de soja y/o "PC de alta pureza", tal como DOPC;

El componente c) comprende, consiste esencialmente en o consiste en un alcohol de 1, 2, 3 o 4 carbonos, preferiblemente isopropanol o más preferiblemente etanol;

El componente c) comprende un disolvente polar, tal como agua, NMP, DMSO, propilenglicol o mezclas de los mismos;

La preformulación tiene una viscosidad según se indica en el presente documento.

La preformulación comprende formas de una fase cristalina líquida como se indica en el presente documento tras la administración in vivo.

La preformulación genera un depósito después de la administración in vivo, depósito que libera al menos un análogo de prostaciclina seleccionado entre treprostinilo o una sal del mismo durante un periodo de al menos 3 días, preferiblemente al menos 5 días, más preferiblemente al menos 7 días.

La preformulación genera un depósito tras la administración in vivo a un sujeto, depósito que libera al menos un análogo de prostaciclina, tal como la concentración plasmática de análogo de prostaciclina en dicho sujeto al final del séptimo día tras la administración no es inferior a 10-4 o 10-3, preferiblemente no menos de 10-2, más preferiblemente no menos de 10-1 veces la concentración plasmática de análogo de prostaciclina en dicho sujeto al final del primer día tras la administración (es decir, a las 24 horas después de la administración).

En combinación con las características y características preferidas indicadas en el presente documento, el método o métodos de tratamiento pueden tener una o más de las siguientes características preferidas independientemente o en combinación:

El método comprende la administración de al menos una formulación con una o más características preferidas como ha indicado anteriormente;

El método comprende la administración de al menos una formulación como se indica en el presente documento mediante inyección i.m., s.c. o preferiblemente s.c. profunda;

El método comprende la administración por medio de un dispositivo de administración precargado como se indica en el presente documento;

El método comprende la administración a través de una aguja de calibre no superior a 20, preferentemente de calibre inferior a 20 y lo más preferentemente de calibre 23 o inferior;

El método comprende una sola administración cada 3 a 10 días, preferentemente cada 5 a 8 días.

El método comprende el aumento de la dosis y la frecuencia con el progreso de la enfermedad (los indicados en el presente documento) de manera que la frecuencia aumenta de no más de una vez por semana a no menos de la administración cada 3 días y la dosis aumenta de no más de 10 o 20 mg/semana a no menos de 30 o 40 mg/semana.

En combinación con las características y características preferidas indicadas en el presente documento, el uso o los usos de las preformulaciones indicados en el presente documento en la fabricación de medicamentos pueden tener una o más de las siguientes características preferidas independientemente o en combinación:

El uso comprende la utilización de al menos una formulación con una o más características preferidas como se ha indicado anteriormente;

El uso comprende la fabricación de un medicamento para la administración de al menos una formulación como se indica en el presente documento mediante inyección i.m., s.c. o preferiblemente s.c. profunda;

El uso comprende la fabricación de un medicamento para la administración por medio de un dispositivo de administración precargado como se indica en el presente documento;

El uso comprende la fabricación de un medicamento para la administración a través de una aguja de calibre no superior a 20, preferentemente de calibre inferior a 20 y lo más preferentemente de calibre 23 o inferior;

El uso comprende la fabricación de un medicamento para la administración diaria, o una vez cada 2, 3, 7, 14, 21, 28, 30 o 60 días y o puede variarse sistemática u ocasionalmente en pequeñas cantidades (por ejemplo, en ± 3 días, o en ± 20 % en cualquier caso adecuado).

En combinación con las características y características preferidas indicadas en el presente documento, los dispositivos precargados de la invención pueden tener una o más de las siguientes características preferidas independientemente o en combinación:

Contienen una formulación preferida como se indica en el presente documento;

Comprenden una aguja de calibre inferior a 20, preferiblemente de calibre no superior a 23;

Contienen una dosis única de 2,5 a 50 mg/ml de análogo de prostaciclina (basado en ácido libre), tal como de 5 a 50 mg/ml (basado en ácido libre).

Contienen una mezcla homogénea de una composición de la invención en forma lista para inyectar.

Contienen una formulación de los componentes a) a c) para la combinación con un análogo de prostaciclina mediante lo cual se forma una preformulación de la invención.

Contienen un volumen total para la administración de no más de 5 ml, preferiblemente no más de 3 ml, por ejemplo no más de 2 ml, más preferiblemente no más de 1,5 ml.

En combinación con las características y características preferidas indicadas en el presente documento, los kits pueden tener una o más de las siguientes características preferidas independientemente o en combinación:

Contienen una formulación preferida como se indica en el presente documento;

Contienen un dispositivo precargado como se indica en el presente documento;

Contienen una aguja de calibre inferior a 20, preferiblemente de calibre no superior a 23;

Contienen una dosis única de 1 a 100 mg de un análogo de prostaciclina (como se describe en este documento), preferiblemente de 2 a 75 mg, más preferiblemente de 3,5 a 60 mg.

Contienen un "kit de dos compartimentos" que comprende al menos dos recipientes que contienen una formulación lipídica de la invención y un análogo de prostaciclina, respectivamente.

Contienen un volumen total para la administración de no más de 5 ml, preferiblemente no más de 3 ml, por ejemplo no más de 2 ml, más preferiblemente no más de 1,5 ml.

Contienen instrucciones para la administración por una ruta y/o a una frecuencia como se indica en el presente documento;

Contienen instrucciones para la administración para su uso en un método de tratamiento como se describe en el presente documento.

Como se utiliza en el presente documento, el término "aproximado", "alrededor de", "sustancialmente" o "aproximadamente" en relación con un número o un intervalo de números generalmente indicará que se prefiere el número o rango especificado, pero que dicho número puede variar hasta cierto punto sin afectar materialmente a las propiedades del material, composición o producto similar relevante. El trabajador experto normalmente podrá establecer fácilmente el grado en el que pueden variar tales números sin perjudicar las ventajas clave de la presente invención. Como guía general, tales números o los extremos de tales intervalos pueden variar en ± 10 %, preferiblemente ± 5 % y más preferiblemente ± 1 %. Puede atribuirse un significado correspondiente a las composiciones "que consisten esencialmente en" ciertos componentes, que pueden incluir hasta el 10 %, preferiblemente hasta el 5 % y lo más preferiblemente hasta el 1 % de otros componentes, además de los especificados. Cuando un grupo químico, cadena u otro resto se describe en el presente documento como opcionalmente sustituido, dicha sustitución puede estar ausente o uno o más átomos en el resto (típicamente uno o más hidrógenos y/o carbonos) pueden estar sustituidos con grupo, tales como grupos haluro (por ejemplo, F, Cl, Br, I), restos basados en oxígeno, tales como éteres, alcoholes, ésteres, ácidos carboxílicos o epóxidos, grupos basados en nitrógeno, tales como aminas, amidas, nitrilos o grupos nitro, o grupos basados en azufre, tales como tioles, disulfuros, tioésteres, etc. Pueden hacerse hasta aproximadamente 10 de tales sustituciones cuando lo permita el contexto, pero normalmente serán típicas 3 sustituciones o menos, tal como 1, 2 o 3 sustituciones con grupos de sustituyentes seleccionados independientemente.

La invención se ilustrará ahora adicionalmente con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes y a las figuras adjuntas.

EJEMPLOS

Materiales

Sal sódica de treprostinilo, TPN(Na), de Sanofi; fosfatidilcolina de soja, SPC, Lipoid S100 de Lipoid; dioletao de glicerol, GDO, Citrol GDO HP-SO-(LK) de Croda; dioleoil fosfatidilcolina, DOPC, de NOF; etanol, EtOH (99,7 % Ph. Eur), de Solveco; propilenglicol, PG (Ph. Eur), de Fischer; N-metil pirrolidona, NMP, y dimetilsulfóxido, DMSO, de Sigma-Aldrich se utilizaron tal como se recibieron. Todos los demás productos químicos fueron de pureza de calidad analítica.

Preparación de preformulaciones

Se prepararon mezclas de reserva de lípidos pesando cantidades adecuadas de SPC, GDO y disolventes en viales de vidrio esterilizados. Después, los viales sellados se colocaron en un mezclador de rodillos a temperatura ambiente (TA) hasta que se mezclaron completamente en una solución líquida homogénea y transparente (<24 horas). Se añadió polvo de TPN(Na) a las respectivas formulaciones de placebo de lípidos en viales de vidrio nuevos. Después, los viales sellados se colocaron en un mezclador de rodillos a TA hasta que se mezclaron completamente en una solución líquida homogénea y transparente (<24 horas). Las formulaciones preparadas se almacenaron a TA en la oscuridad hasta otros experimentos. Para la evaluación exploratoria de la estabilidad, las formulaciones se dividieron en viales de vidrio 2R esterilizados (1 g de formulación por vial). Los viales se sellaron y se colocaron en gabinetes de almacenamiento de ambiente controlado. En puntos de muestreo predefinidos, se extrajeron dos viales de formulación de cada gabinete de almacenamiento, se pusieron a temperatura ambiente durante 1 hora y se analizó el contenido y la pureza mediante HPLC de gradiente con detección UV.

Ejemplo 1: Evaluación de la solubilidad de TPN(Na) y liberación in vitro

La solubilidad se evaluó añadiendo TPN(Na) a las respectivas mezclas madre de lípidos, seguido de mezclado en un mezclador de rodillos a temperatura ambiente (TA) hasta que se mezcló completamente en una solución líquida homogénea y transparente. Durante la preparación, las muestras se inspeccionaron visualmente. Los resultados mostraron que la TPN(Na) tiene una buena solubilidad en una diversidad de preformulaciones y que es factible una carga de fármaco de al menos el 7 % en peso (~78 mg de TPN(O)/ml). Como se muestra en la Tabla 1, las viscosidades medidas de las formulaciones varían entre 185 y 628 mPas dependiendo del tipo de codisolvente, la concentración y la composición.

Las pruebas de liberación in vitro de TPN(Na) se realizaron mediante un ensayo sencillo basado en la espectroscopia UV/VIS para la cuantificación. En el ensayo, se prepararon depósitos inyectando de 0,03 a 0,10 g (objetivo 0,1 g) de la preformulación respectiva en 10 ml de PBS (pH 7,4) guardados en viales de inyección de vidrio 20R. La cantidad exacta de formulación añadida a cada vial se determinó mediante pesaje. Los viales se sellaron con tapones de goma y cápsulas de aluminio y pusieron en agitación en una incubadora mantenida a 37 °C. Se tomaron muestras de los medios de liberación en puntos de tiempo programados, se diluyeron y se transfirieron a cubetas de cuarzo y se analizaron en un espectrómetro Perkin Elmer Lambda 25, de doble haz, UV-VIS a 273 nm.

Los resultados de las mediciones de liberación in vitro se muestran en la Figura 1a. A partir de los resultados, es evidente que tanto la cantidad como la composición del disolvente afectan a la liberación inicial in vitro de treprostinilo. Las formulaciones que comprenden PG como codisolvente tienen una liberación inicial más lenta (24 h) que las formulaciones con DMSO. También, cuando se comparan formulaciones con EtOH como único solvente, la liberación inicial es más rápida para un mayor contenido de disolvente. La figura 1b indica además que la liberación in vitro es bifásica, después de la fase inicial en la que el disolvente y el fármaco se liberan de forma concomitante, la liberación es lineal con la raíz cuadrada del tiempo, como se esperaba mediante un mecanismo de liberación controlado por difusión desde una matriz de depósito monolítica.

Ejemplo 2: Administración de preformulaciones con TPN(Na) en ratas: formulaciones y cambio de peso corporal

El objetivo principal de este estudio piloto fue evaluar la tolerabilidad de TPN, tanto a nivel local como sistémico después de inyecciones subcutáneas individuales de preformulaciones con TPN(Na) en ratas (las composiciones de las formulaciones se dan en la Tabla 2). El estudio se diseñó como un estudio de aumento progresivo de la dosis, con dosis de administración de 3, 9 y 27 mg/kg de TPN (Tabla 3).

T l 2. m ii n f rm l i n iliz n l i il n r .

T l . r ^ r mi n i TPN iliz n l i il .

La figura 2 muestra el cambio de peso corporal relativo medio durante el estudio. Las formulaciones B1 y B2 se monitorearon en el estudio piloto para detectar eritema/edema en el lugar de la inyección de la siguiente manera:

El grado de formación de eritema y edema después de la administración de las formulaciones B1 y B2 se indica en la Tabla 4 a continuación:

T l 4. R mn ri m m n l ii in i n r n l i il to.

(continuación)

Las formulaciones B1 y B2 se monitorearon en el estudio piloto para angiogénesis/hemorragia de la siguiente manera:

El nivel de angiogénesis se definió en un rango de 0 a 3:

0 para ausencia de angiogénesis.

1 para angiogénesis menor. Crecimiento limitado de los vasos sanguíneos.

2 para angiogénesis media. Crecimiento expandido de los vasos sanguíneos

3 para angiogénesis mayor. Crecimiento expandido de los vasos sanguíneos.

El nivel de hemorragia se definió en un rango de 0 a 3:

0 para ninguna hemorragia.

1 para hemorragia menor. Zona o zonas de enrojecimiento difuso.

2 para hemorragia media. Al menos un área roja bien definida.

3 para hemorragia mayor. Varias áreas rojas bien definidas.

El grado de angiogénesis y hemorragia tras la administración de las formulaciones B1 y B2 se indica a continuación en la Tabla 5.

Tabla 5. R m n l h ll z n l ii l in i n n l n r i n l tudio piloto.

(continuación)

Ejemplo 3: Efecto sobre la nanoestructura de las preformulaciones completamente hidratadas en función de diferentes cantidades de TPN(Na)

Se prepararon las siguientes formulaciones L a AA cuyas composiciones y viscosidades medidas se dan en la Tabla 6 y la Figura 3, respectivamente.

T a l . i f rm l i n m i i n iliz r l v l i n n n r ral.

La nanoestructura de las formulaciones completamente hidratadas de la Tabla 6 se evaluó usando difracción de rayos X de ángulo pequeño. Brevemente, se inyectaron alrededor de 100 mg de la formulación en 5 ml de tampón PBS y se dejó equilibrar a temperatura ambiente en viales todavía en reposo durante 8 días antes de las mediciones SAXD. La nanoestructura de las formulaciones totalmente hidratadas en función de la concentración de TPN(Na) se estudió usando mediciones de sincrotrón SAXD, realizadas en la línea de haz 1911-4 en el laboratorio MAX IV (acelerador de electrones Max II funcionando a 1,5 GeV, Universidad de Lund, Suecia), usando un detector PILATUS 2D de 1M (Dectris) que contiene un total de 981 X 1043 píxeles. Las muestras se montaron entre películas finas de poliimida en un portamuestras de acero hecho a medida a una distancia de la muestra al detector de 1919,5 mm. Se registraron difractogramas con una longitud de onda de rayos X de 0,91 A y la sección transversal del haz de 0,25 X 0,25 mm (ancho total en la mitad del máximo) en la muestra. El control de la temperatura se logró usando un termostato Lauda RE 420G controlado por ordenador (Lauda-Brinkmann, LP). Los experimentos se realizaron sucesivamente a 25, 37 y 42 °C con un tiempo de exposición de 60 s a cada temperatura y una espera de 10 minutos entre los pasos de temperatura. Las imágenes CCD resultantes se integraron y analizaron utilizando el software Fit2D proporcionado por ESRF (European Synchrotron Radiation Facility, Francia). Se usaron la distancia de la muestra al detector y las posiciones del detector calibradas con behenato de plata.

La figura 5 y la figura 6 muestran los resultados SAXD obtenidos de la nanoestructura de las formulaciones de lípido/EtOH (90/10% en peso) y lípido/EtOH/PG (85/7,5/7,5) completamente hidratadas en función de la concentración y la temperatura de TPN. Los datos de la figura 5 muestran que en la región de temperatura de 37­ 42 °C, las formulaciones basadas en EtOH al 10 % totalmente hidratadas forman mezclas de fases hexagonal inversa (H2) y cúbica micelar inversa (Fd3m) hasta un 3,1 % en peso de TPN. A 4,65 y 6,2 % en peso de TPN se forma un solo H2 que, incluso a concentraciones más altas de TPN, comienza a transformarse en una solución micelar desordenada (L2). Además, con el aumento de la concentración de TPN, el parámetro de red para la fase Fd3m permanece sin cambios, mientras que comienza a aumentar para la fase H2. El aumento del parámetro de red a partir del 4,65 % en peso de TPN(Na) probablemente esté relacionado con el aumento de la suavidad mecánica de los depósitos observados en los experimentos de gelificación. En general, la transformación observada de una mezcla de Fd3m y H2 a H2 simple y luego a una mezcla de fases H2 y L2 con una concentración creciente de TNP se correlaciona con los resultados de liberación in vitro obtenidos donde se encuentra un aumento drástico en TPN liberado a 6,2 y 7,75 % en peso de TPN (Figura 4). Como comparación, la figura 6 muestra los resultados de SAXD obtenidos para las formulaciones completamente hidratadas preparadas al 7,5/7,5 % en peso de la mezcla de EtOH/PG. Aquí, en la región de temperatura de 37-42 °C, se forma una mezcla claramente pronunciada de las fases Fd3m y H2 solo hasta el 1,55 % en peso de TPN. Al aumentar la concentración de TPN entre el 2,33 y el 6,2 % en peso de TPN, se observa una mezcla de fase H2 con fase L2. Además, al 7,75 % en peso de TPN se forma una mezcla de fase laminar (La) y L2. Además, el parámetro de red para la fase hexagonal comienza a aumentar ya en el 3,10 % en peso de TPN(Na). Basándose en estos resultados, se puede concluir que las formulaciones completamente hidratadas preparadas con EtOH/PG 7,5/7,5 pueden acomodar menos TPN antes de transformarse en fases cristalinas líquidas más hinchadas (especialmente La) que son menos favorables desde la perspectiva de la liberación sostenida.

Se midieron los perfiles de liberación in vitro para las formulaciones N, P, Q, R y S y se muestran en las figuras 4a-b (% de liberación acumulado).

Ejemplo 4: Estabilidad física y química de las preformulaciones que contienen TPN(Na)

La estabilidad al almacenamiento de las formulaciones BB, CC y DD (Tablas 7 y 8) se estudió mediante HPLC en condiciones de: < -25 °C (condiciones congeladas); 25 °C/HR del 60 %; y 40 °C/Hr del 75 %. Los resultados de las pruebas exploratorias de estabilidad indican una buena estabilidad tanto física como química de la TPN en las preformulaciones que utilizan EtOH al 10 % como disolvente y una mezcla de EtOH/PG. La TPN muestra una buena estabilidad durante al menos 3 meses cuando se almacena a 25 °C/60 % de HR y 40 °C/75 % de HR (Tabla 9).

Tabla 7. i f rm l i n m i i n iliz r l v l i n l ili fí i química.

T l . i f rm l i n vi i iliz r l v l i n l ili fí i ími a.

Tabla 9. Resultados del ensayo TPN (HPLC) en las formulaciones del estudio exploratorio de estabilidad en función del tiem o en diferentes condiciones de almacenamiento.

Ejemplo 5: Administración de preformulaciones con TPN(Na) en ratas

Las formulaciones EE-HH se prepararon utilizando diferentes composiciones de disolventes (Tabla 10) y se administraron a un grupo de 24 ratas y se controló el eritema, edema, angiogénesis y hemorragia utilizando el sistema de puntuación de los ejemplos anteriores.

Tabla 10. Com osiciones de formulación dosis de TPN utilizadas en el estudio de farmacocinética en ratas.

HOJA DE SUSTITUCIÓN (REGLA 26)

Tabla 11. Extensión del eritema des ués de la administración de las Formulaciones EE-HH.

(continuación)

Tabla 12. Extensión del edema des ués de la administración de las formulaciones EE-HH.

(continuación)

T l 1. ii in in n n r i r l mini r i n l f rm l i n EE-HH.

(continuación)

Ejemplo 6: Datos farmacocinéticos en ratas de preformulaciones con TPN(Na).

Se recogieron datos farmacocinéticos durante 14 días para las formulaciones EE a HH del ejemplo 7 administradas a ratas. Los datos se ilustran gráficamente en la Figura 7 y los perfiles de liberación in vitro correspondientes en la Figura 8.

Tabla 14. Parámetros farmacocinéticos para las formulaciones EE-HH en ratas. Los datos se ilustran gráficamente

Ejemplo 7: Inyección subcutánea de preformulaciones con TPN(Na) en perros

El objetivo de este estudio fue evaluar la exposición a TPN después de la inyección subcutánea de la preformulación con TPN(Na) (código de formulación JJ, composición TPN(Na)/GDO/SPC/EtOH/PG 3,38/43,31/43,31/7,50/2,50 % en peso) a perros Beagle en un estudio de toxicidad de dosis máxima tolerada. Las dosis de TPN (calculadas como forma ácida de TPN) utilizadas en el estudio con perros se dan en la Tabla 15. Los perfiles farmacocinéticos dependientes de la dosis obtenidos y los valores de exposición (AUC0-168h) se presentan en la Figura 9 y la Figura 10, respectivamente.

Tabla 15. Niveles de dosis volúmenes de TPN utilizados en el estudio farmacocinéticos en perros.

Claims (24)

REIVINDICACIONES

1. Una preformulación que comprende:

a) del 20 al 80 % en peso de al menos uno de un lípido mono, di o triacilo y/o un tocoferol;

b) opcionalmente al menos un fosfolípido;

c) del 1 al 30 % en peso de al menos un disolvente orgánico biocompatible; y

d) treprostinilo o una sal del mismo;

en donde la preformulación forma al menos una estructura de fase cristalina líquida al entrar en contacto con al menos una cantidad equivalente en volumen de fluido acuoso.

2. Una preformulación, según la reivindicación 1, que comprende del 0,1 al 10 % en peso de componente d) basado en el ácido libre de treprostinilo, preferiblemente del 0,2 al 6 % en peso, tal como del 0,2 a 5 % en peso, especialmente del 0,2 al 4 % en peso.

3. Una preformulación, según la reivindicación 1, que comprende del 0,5 al 4,0 % en peso de componente d) basado en el ácido libre de treprostinilo.

4. Una preformulación, según cualquier reivindicación precedente, en donde el componente d) comprende o consiste en una sal de treprostinilo (TPN), preferiblemente sal sódica de treprostinilo.

5. Una preformulación, según cualquier reivindicación precedente, en donde el componente a) comprende o consiste en un diacil y/o monoacil lípido neutro, un diacil glicerol, tal como dioleato de glicerol (GDO) o un monoacil hexitán.

6. Una preformulación, según cualquier reivindicación precedente, que comprende del 35 al 55 % en peso de componente a), preferiblemente del 38 al 52 % en peso, especialmente del 40 al 50 % en peso.

7. Una preformulación, según cualquier reivindicación precedente, en donde el componente b) comprende o consiste en una fosfatidil colina (PC), una fosfatidil etanolamina (PE) o un fosfatidil inositol (PI), lo más preferiblemente PC de soja.

8. Una preformulación, según cualquier reivindicación precedente, que comprende del 30 al 60 % en peso de componente b), preferiblemente del 35 al 55 % en peso, especialmente del 38 al 52 % en peso, especialmente del 40 al 50 % en peso.

9. Una preformulación, según cualquier reivindicación precedente, en donde el componente c) comprende o consiste en al menos un disolvente seleccionado entre el grupo que consiste en: alcoholes, aminas, amidas, sulfóxidos y/o ésteres; o en donde el componente c) comprende o consiste en un disolvente monoalcohólico; o en donde el componente c) comprende o consiste en etanol, propanol, isopropanol, alcohol bencílico o mezclas de los mismos.

10. Una preformulación, según la reivindicación 9, en donde el componente c) comprende o consiste en etanol o mezclas de etanol y propilenglicol, preferiblemente en donde la proporción de etanol con respecto a PG es 1:1 a 10:1, más preferiblemente de 1,5:1 a 8:1, lo más preferiblemente de 2:1 a 5:1 (por ejemplo, aproximadamente 3:1).

11. Una preformulación, según cualquier reivindicación precedente, en donde el componente c) está presente a un nivel del 2 al 20 % en peso, preferiblemente del 5 al 15 % en peso.

12. Una preformulación, según cualquier reivindicación precedente, en donde la proporción de componentes a:b está en el intervalo de 40:60 a 60:40, especialmente en el intervalo de 45:55 a 55:45.

13. Una preformulación, según cualquier reivindicación precedente, que tiene una viscosidad de 100 a 700 mPas a 20 °C.

14. Una preformulación, según cualquier reivindicación precedente, en donde:

el componente a) comprende o consiste en GDO;

el componente b) comprende o consiste en PC;

el componente c) comprende etanol; y

el componente d) comprende o consiste en TPN o una sal del mismo, preferiblemente TPN(Na).

15. Una preformulación, según la reivindicación 14, en donde el componente b) comprende o consiste en PC de soja.

16. Una preformulación, según la reivindicación 14 o 15, que comprende además un codisolvente seleccionado entre el grupo que consiste en PG, DMSO o NMP, en donde la proporción de etanol:codisolvente está en el intervalo de 30:70 a 70:30 (p/p).

17. Una preformulación que comprende:

a) del 38 al 52 % en peso de glicerol (GDO);

b) del 35 al 55 % en peso de fosfatidil colina (PC);

c) del 1 al 30 % en peso de al menos un disolvente orgánico biocompatible; y

d) sal de treprostinilo (TPN), preferiblemente sal sódica de treprostinilo;

en donde la preformulación comprende del 0,1 al 10 % en peso de componente d) basado en el ácido libre de treprostinilo; y en donde la preformulación forma al menos una estructura de fase cristalina líquida al entrar en contacto con al menos una cantidad equivalente en volumen de fluido acuoso.

18. Una preformulación, según la reivindicación 17, en donde el componente c) comprende o consiste en etanol o mezclas de etanol y propilenglicol, en donde la proporción de etanol con respecto a PG es 1:1 a 10:1 y en donde el componente c) está presente a un nivel del 2 a 20 % en peso.

19. Una preformulación, según cualquier reivindicación precedente, para su uso como medicamento.

20. Una preformulación, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18, para su uso en el tratamiento de un sujeto humano que lo necesita para combatir al menos una afección seleccionada entre hipertensión arterial pulmonar (PAH), PAH grave, enfermedad de Raynaud e isquemia.

21. La preformulación para su uso, según la reivindicación 20, en donde la vía de administración no es intravenosa; o es una inyección subcutánea superficial o profunda, tópica o intraoral.

22. La preformulación para el uso, según la reivindicación 20 o 21, que implica la administración cada 1 a 60 días, preferiblemente cada 1, 2, 3, 7, 14, 21, 28, 30 o 60 días (por ejemplo, ± 1 día, ± 3 días o ± 20 % en cualquier caso), lo más preferiblemente cada 7 (± 1) días o cada 14 (± 2) días o cada 30 (± 3) días.

23. Un dispositivo de administración precargado que contiene una preformulación, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18.

24. Un dispositivo de administración precargado, según la reivindicación 23, que comprende < 1 ml, preferiblemente < 0,5 ml de una preformulación según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18.