ES2930814T3 - Inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros o anillo espiro de cinco miembros y uso del mismo como agente antitumoral - Google Patents

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Abstract

Se describen la actividad antibacteriana y la actividad antitumoral de una clase de nuevo inhibidor de la deformilasa peptídica que contiene un anillo de tres miembros espiro y un anillo de cinco miembros espiro. El anillo espiro de tres miembros y el anillo espiro de cinco miembros que contiene el inhibidor de la deformilasa del péptido espiro de la presente invención, como una clase de nuevo agente antibacteriano, son efectivos contra muchas cepas gram positivas resistentes a los antibióticos al inhibir la actividad del péptido deformilasa requerido en la síntesis de proteínas bacterianas, y no afectan el proceso de síntesis de las principales proteínas del cuerpo humano, matando así selectivamente a las bacterias. El anillo de tres miembros de espiro y el anillo de cinco miembros de espiro que contiene el inhibidor de deformilasa de péptido espiro de la presente invención, como una clase de nuevo agente antibacteriano, (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros o anillo espiro de cinco miembros y uso del mismo como agente antitumoral
Campo técnico
La invención pertenece al campo de la tecnología de fármacos anticancerígenos, y se refiere a un tipo de inhibidor de péptido deformilasa, en particular a un inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros novedoso.
Antecedentes de la invención
Los antibióticos son una serie de productos químicos que pueden inhibir y matar patógenos a una determinada concentración, incluyendo metabolitos producidos por microorganismos, animales y plantas, y compuestos químicamente sintéticos o semisintéticos. Los antibióticos no solo se refieren a sustancias antibacterianas, sino también a sustancias antitumorales, antivirales, antiparasitarias y similares. Los antibióticos son un pilar importante que nos permite prolongar la vida, tener una vida más sana y beneficiarnos de la medicina moderna.
Con la gran cantidad de antibióticos que surgen y el uso generalizado de los mismos, el problema de la resistencia a los antibióticos se ha vuelto cada vez más prominente, y la velocidad de desarrollo de resistencia a fármacos se ha vuelto cada vez más rápida. La velocidad es rápida y el espectro de resistencia a fármacos es amplio, lo que es alarmante.
Más del 95 % de Staphylococcus aureus es resistente a casi todas las penicilinas y el 90 % a meticilina en todo el mundo. Más del 80 % de E. coli. no es sensible a un tercio de las cefalosporinas de tercera generación, y es resistente al 90 % de fluoroquinolonas. No solo eso, muchas bacterias desarrollan resistencia a múltiples fármacos. En el ámbito clínico, Staphylococcus aureus, que es resistente a meticilina, también es resistente a amoxicilina, levofloxacina, rifampicina, e incluso vancomicina. E. coli y K. pneumoniae han formado un nuevo mecanismo de resistencia, produciendo metalo-p-lactamasa 1 (NDM-1) que es resistente a casi todos los fármacos de lactama p.
La quimioterapia es actualmente uno de los medios más importantes de tratamiento clínico para tumores malignos. Sin embargo, debido a que las células tumorales a menudo se vuelven resistentes a fármacos quimioterapéuticos, los pacientes ya no son sensibles a la quimioterapia, lo que finalmente conduce a un fracaso del tratamiento. Aunque los inhibidores del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) tales como Iressa y Tarceva y similares han logrado un gran éxito en el tratamiento del cáncer de pulmón de células no pequeñas, el problema de resistencia a fármacos se ha vuelto cada vez más prominente, y la mitad de la resistencia a fármacos se deriva de la mutación EGFR T790M. El carcinoma hepatocelular es uno de los cánceres malignos más comunes en el mundo y generalmente es altamente tolerante a fármacos quimioterapéuticos. Casi la mitad de los cánceres de mama son resistentes a Herceptin desde el principio.
En vista de la situación cada vez más grave de resistencia a los antibióticos, el desarrollo de antibióticos con nuevos mecanismos de acción es inminente. El inhibidor de péptido deformilasa es uno de los nuevos objetivos para la investigación en los últimos años. La péptido deformilasa (PDF) es una metaloproteinasa que no solo se encuentra ampliamente en bacterias sino también en Plasmodium falciparum y seres humanos. En el proceso de síntesis de proteínas en bacterias, la PDF puede eliminar grupos formilo de metionina, permitiendo que proteínas funcionalizadas se sinteticen en bacterias. El proceso de eliminación de grupos formilo es un proceso necesario para la síntesis de proteínas en bacterias. Sin embargo, el proceso principal de síntesis de proteínas en células humanas no depende del proceso de eliminación de formilo. Esta diferencia en la síntesis de proteínas entre bacterias y seres humanos hace que la PDF bacteriana sea una diana potencial para los fármacos antibacterianos. Por quelación con la enzima PDF, el inhibidor de PDF podría evitar que las bacterias experimenten la etapa de deformilación en el proceso de síntesis de proteínas, inhibiendo de ese modo selectivamente el crecimiento de bacterias. En comparación con las células humanas normales, el gen de PDF humano en diversas células cancerosas tales como cáncer colorrectal, cáncer de pulmón, cáncer de próstata y similares está sobreexpresado, lo que puede afectar al balance energético de las células cancerosas inhibiendo la péptido deformilasa en mitocondrias en las células, de modo que la membrana mitocondrial puede despolarizarse, puede agotarse el ATP y puede promoverse la apoptosis celular. Los inhibidores de PDF pueden desarrollarse para dar agentes antibacterianos de amplio espectro con buena actividad antibacteriana y fármacos contra el cáncer con actividad anticancerosa.
Los inhibidores de PDF englobaron estructuras: grupo de unión a metales (MBG) y cadenas principales peptidomiméticas o no peptídicas que contienen restos p 1, P2 y P3 (fórmula (a): estructura general para inhibidor de PDF).
Figure imgf000003_0001
Formula (a)
Aunque se han desarrollado muchos inhibidores de PDF para estudios preclínicos, e incluso algunos compuestos han entrado en el ámbito clínico (por ejemplo, las fórmulas (b)~(d)), debido a la naturaleza de los propios compuestos, mostraron poca actividad, o toxicidad clínica, y, en última instancia, no pudieron aparecer con éxito en el mercado. Por ejemplo, actinomicina Actinonina es el primer inhibidor de PDF en descubrirse que exhibe buena actividad contra bacterias grampositivas y gramnegativas; pero debido a la inestabilidad en el metabolismo en el cuerpo, en última instancia, no presenta actividad in vivo. Para LBM415, que ha entrado en ensayo clínico de fase I de actividad antibacteriana, que tiene actividad de amplio espectro, y podría causar metahemoglobinemia a una dosis alta (Clin. Pharmacol. Ther. 2011, 90, 256). Para GSK1322322, debido a la presencia de compuestos metabólicamente activos que podrían causar toxicidad al cuerpo, el estudio clínico de fase I de actividad antibacteriana también ha finalizado por la FDA por razones similares (véase el proyecto n.° NCT01818011 en ClinicalTrials.gov para razones de terminación del estudio clínico).
Figure imgf000003_0002
El documento CN101346370A da a conocer compuestos inhibidores de PDF que son útiles como antimicrobianos y antibióticos. El documento CN101193882A da a conocer compuestos de W-formil hidroxilamina y sus derivados como inhibidores de PDF que son útiles como antimicrobianos y antibióticos.
Sumario de la invención
La invención se define por las reivindicaciones adjuntas.
La divulgación proporciona una serie de inhibidores de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros con estructura novedosa, mejor actividad, y poco tóxico, para inhibir bacterias resistentes a antibióticos existentes, incluyendo bacterias grampositivas, tales como Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Streptococcuspneumoniae, y bacterias gramnegativas que afectan gravemente a la salud humana, tales como Moraxella catarrhalis, etc. La invención da a conocer que el inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros puede inhibir selectivamente la proliferación de células cancerosas tales como cáncer colorrectal, cáncer de pulmón, cáncer gástrico, y cáncer de hígado, y similares.
En un aspecto de la invención, se proporciona un inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros para su uso como agente antitumoral, en el que la estructura del inhibidor está representada por la siguiente fórmula (1):
Figure imgf000004_0001
en donde en la fórmula (1), n=2 o 4; R1 es n-butilo o cidopentilmetilo; R2 es un anillo aromático, anillo heterocíclico aromático, anillo heterocíclico, o alquilo; y R3 es hidrógeno o alquilo.
Preferiblemente, n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2se selecciona de 1H-pirazol-3-ilo, 5-fluoropiridin-1-óxido-2-ilo, 5-(terc-butil)isoxazol-3-ilo, 6-metil-A/-(4-(piridin-3-il)pirimidin-2-il)fenil-1-amino-3-ilo, 3-fluoropiridin-2-ilo, 5-metiltiazol-2-ilo, 3-(piridin-3-il)fenilo, A/-(pirimidin-2-il)fenil-1-amino-3-ilo, 4-(piridin-3-il)pirimidin-2-ilo, 4-morfolina fenilo, 2-pirazinilo, 3-piridazinilo, 4-pirimidinilo, 1-metil-1H-pirazol-4-ilo, 5-isoxazolilo, ciclopropilo, 4-metiltiazol-2-ilo, 2-oxazolilo, 5-metilisoxazol-3-ilo, 2-tiazolilo, 1,3,4-tiadiazol-2-ilo, 5-(trifluorometil)tiazol-2-ilo, bisetilsulfonilo, benzotiazol-2-ilo, formiato-2-tienilo de 3-metilo; y R3 es hidrógeno.
Más preferiblemente, el inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros se selecciona de los compuestos de los ejemplos 1-9, 14-23 y 25-41. En otro aspecto de la invención, se proporciona un inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros para su uso como agente antitumoral, en el que la estructura del inhibidor está representada por la siguiente fórmula (2 ):
Figure imgf000004_0002
en donde en la fórmula (2), n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2 es un anillo aromático, o anillo heterocíclico aromático.
Preferiblemente, n=2 o 4, R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2 es un anillo heterocíclico aromático.
Más preferiblemente, n=2 o 4, R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; y R2 es 2-bencimidazolilo, 1,3,4-oxodioxazol, 1,2,4-oxodioxazol, o 1,3,4-triazol.
Más preferiblemente, el inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros se selecciona de los compuestos en los ejemplos 10-13, 24 y 42. En otro aspecto de la invención, se proporciona un inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros para su uso como agente antitumoral, en el que la estructura del inhibidor está representada por la siguiente fórmula (3):
Figure imgf000004_0003
en donde en la fórmula (3), n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2 es un anillo aromático, anillo heterocíclico aromático, anillo heterocíclico, o alquilo; y R3 es hidrógeno o alquilo.
Preferiblemente, n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2 es un anillo heterocíclico aromático; y R3 es hidrógeno.
Preferiblemente, n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2se selecciona de 1H-pirazol-3-ilo, 5-fluoropiridin-1-óxido-2-ilo, 5-(terc-butil)isoxazol-3-ilo, 6-metil-A/-(4-(piridin-3-il)pirimidin-2-il)fenil-1-amino-3-ilo, 3-fluoropiridin-2-ilo, 5-metiltiazol-2-ilo, 3-(piridin-3-il)fenilo, /V-(pirimidin-2-il)fenil-1 -amino-3-ilo, 4-(piridin-3-il)pirimidin-2-ilo, 4-morfolina fenilo, 2-pirazinilo, 3-piridazinilo, 4-pirimidinilo, 1 -metil-1 H-pirazol-4-ilo, 5-isoxazolilo, ciclopropilo, 4-metiltiazol-2-ilo, 2-oxazolilo, 5-metilisoxazol-3-ilo, 2-tiazolilo, 1,3,4-tiadiazol-2-ilo, 5-(trifluorometil)tiazol-2-ilo, bisetilsulfonilo, benzotiazol-2-ilo, formiato-2-tienilo de 3-metilo; y R3 es hidrógeno.
Más preferiblemente, el inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros se selecciona de los compuestos en los ejemplos 43-57, 61-74 y 77-80.
En otro aspecto de la invención, se proporciona un inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros para su uso como agente antitumoral, en el que la estructura del inhibidor está representada por la siguiente fórmula (4):
Figure imgf000005_0001
en donde en la fórmula (4), n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; y R2 es un anillo aromático, o anillo heterocíclico aromático.
Preferiblemente, n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; y R2 es un anillo heterocíclico aromático.
Más preferiblemente, n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; y R2 es 2-bencimidazolilo, 1,3,4-oxodioxazol, 1,2,4-oxodioxazol, 1,3,4-triazol.
Más preferiblemente, el inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros se selecciona de los compuestos en los ejemplos 58-60, 75 y 76.
En otro aspecto de la invención, se proporciona un inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros para su uso como agente antitumoral, en donde el inhibidor comprende
Figure imgf000005_0002
Figure imgf000006_0001
Figure imgf000007_0001
En otro aspecto de la invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende el inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros según cualquiera de los aspectos anteriores, y un portador farmacéuticamente aceptable, para su uso como agente antitumoral.
El inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros representado por las fórmulas (1) a (4) dadas a conocer en el presente documento puede tener un peso molecular de 300-600; es soluble en diclorometano, acetona, acetonitrilo, metanol, etanol, W,A/-dimet¡lformamida, dimetilsulfóxido y similares; es ligeramente soluble en éter, agua, etc.; es insoluble en éter de petróleo; y generalmente es polvo o espuma incoloro o amarillento.
La presente divulgación, que no forma parte de la invención, también proporciona un uso del inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros representado por las fórmulas (1) a (4) para inhibir péptido deformilasa bacteriana.
En donde, las bacterias incluyen Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Streptococcus pneumoniae y Moraxella catarrhalis.
En La presente divulgación, el cribado de actividad antibacteriana de 80 nuevos compuestos sintetizados in vitro se realizó en 46 cepas aisladas clínicamente (véase la tabla 1 para las cepas), con levofloxacina y LBM415 como control (véase la tabla 2 para la lista de 80 compuestos).
La presente divulgación también proporciona un uso del inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros representado por las fórmulas (1) a (4) en la preparación de fármacos antitumorales.
En donde, el tumor se refiere a cáncer colorrectal, leucemia, cáncer de pulmón, cáncer gástrico, cáncer de cuello uterino, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de hígado, y osteosarcoma, y similares.
La invención adopta el método CCK-8 para determinar el efecto de inhibición de los compuestos sobre la proliferación de nueve tipos de células tumorales tales como cáncer colorrectal, leucemia, cáncer de pulmón, cáncer gástrico, cáncer de cuello uterino, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de hígado y osteosarcoma, y similares.
La presente divulgación, que no forma parte de la invención, proporciona un uso del inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros representado por las fórmulas (1) a (4) en la preparación de fármacos antiparasitarios.
En donde, el antiparasitario se refiere a que el inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros inhibe el crecimiento de parásitos inhibiendo la péptido deformilasa en parásitos.
La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende el inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros como se describió anteriormente, y un portador farmacéuticamente aceptable.
En donde, el portador farmacéuticamente aceptable se refiere al portador farmacéutico convencional en el campo farmacéutico, tal como diluyente, excipiente, agua, etc.; carga tal como almidón, sacarosa, lactosa, celulosa microcristalina, etc.; adhesivo tal como derivados de celulosa, alginatos, gelatina y polivinilpirrolidona; agente humectante tal como glicerina; agente disgregante tal como carboximetilalmidón sódico, hidroxipropilcelulosa, croscarmelosa, agar, carbonato de calcio y bicarbonato de sodio; potenciador de absorción tal como compuestos de amonio cuaternario; tensioactivos tales como alcohol cetílico, laurilsulfato de sodio; portador de adsorción tal como caolín y bentonita; lubricante tal como polvo de talco, estearato de calcio y magnesio, gel de microsílice y polietilenglicol. Además, agentes aromatizantes, edulcorantes y similares también pueden usarse como portador.
Los modos de administración del inhibidor o la composición farmacéutica incluyen la administración oral, inyección, implantación, y similares.
El inhibidor o la composición farmacéutica puede administrarse en forma de un comprimido, líquido, o una cápsula, y similares.
El nuevo inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros y anillo espiro de cinco miembros de la presente divulgación tiene actividad antibacteriana y actividad antitumoral. El mecanismo de acción del inhibidor de la péptido deformilasa del anillo espiro de la presente divulgación es: matar selectivamente bacterias inhibiendo la actividad de la péptido deformilasa requerida en la síntesis de proteínas bacterianas, sin afectar al proceso sintético de las principales proteínas en el cuerpo humano; afectar al balance energético de células cancerosas a través de la inhibición de la péptido deformilasa en las mitocondrias en células humanas, de modo que la membrana mitocondrial pueda despolarizarse, puede agotarse el ATP y puede promoverse la apoptosis celular. El inhibidor de la presente divulgación es menos susceptible a la resistencia a fármacos que los antibióticos disponibles comercialmente debido al mecanismo de acción novedoso. El inhibidor de la péptido deformilasa puede usarse no solo como un nuevo tipo de agente antibacteriano, que puede ser eficaz contra una variedad de cepas grampositivas resistentes a antibióticos, tales como Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Enterococcus faecalis, Enterococcus, Streptococcus pneumoniae; sino también puede ser eficaz contra bacterias gramnegativas tales como Moraxella catarrhalis. También puede usarse como un nuevo tipo de fármaco anticancerígeno, que tiene actividad inhibidora contra diversas cepas de células cancerosas tales como cáncer colorrectal, cáncer de pulmón, cáncer gástrico y cáncer de hígado a baja concentración micromolar.
En comparación con los compuestos registrados en la técnica anterior, la presente invención tiene ventajas técnicas significativas:
(1) El inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros de la presente invención se encontró mediante los métodos de estudios de acoplamiento molecular y experimentos de cribado de actividad antibacteriana (véase la tabla 3 para actividades antibacterianas de los 80 compuestos). A través de estudios de acoplamiento molecular, se encontró que la interacción hidrófoba adicional entre el ligando para aumentar la actividad y la proteína diana, es decir, el anillo espiro de tres miembros del inhibidor puede formar una fuerza fuerte con el residuo de arginina en la proteína. Esta conclusión está respaldada por los experimentos, por ejemplo, la concentración inhibidora mínima MIC del compuesto en el ejemplo 2 frente a Staphylococcus resistente a meticilina (MRSA) es 0,125-0,25 |ig/ml, que se ha mejorado significativamente en cuatro veces en comparación con LBM415, cuya MIC es 0,5-1 |ig/ml (véase la tabla 8 en el experimento de control 1). A través de los experimentos se ha descubierto que la introducción del anillo espiro de cinco miembros tiene un impacto significativo en el aumento de la actividad del inhibidor del anillo espiro de cinco miembros, tal como el ejemplo 77, el ejemplo 78, el ejemplo 79, etc.
(2) La presente invención adopta la estrategia de modificación usando amida aromática, de modo que las actividades de algunos compuestos modificados (por ejemplo, el ejemplo 3, el ejemplo 4, el ejemplo 5, el ejemplo 6, el ejemplo 7, el ejemplo 8, el ejemplo 15, el ejemplo 16, el ejemplo 19, el ejemplo 21, el ejemplo 22, el ejemplo 23, el ejemplo 25, el ejemplo 26, el ejemplo 27, el ejemplo 28, el ejemplo 29, el ejemplo 30, el ejemplo 33, el ejemplo 38, etc.) frente a las cepas de ensayo habían mejorado sustancialmente. Por ejemplo, la concentración inhibidora mínima MIC frente a Staphylococcus resistente a meticilina (MRSA) fue < 0,008-0,06 |ig/ml, que fue muy superior al compuesto principal LBM415 (MIC = 0,5-1 |ig/ml) y el fármaco antibiótico lanzado levofloxacina (MIC = 16 > 128 |ig/ml). La aplicación de la estrategia de usar compuestos de azol como el bioisóstero de amida no solo mantiene la actividad de los compuestos, sino que también hace que la MIC de la mayoría de los compuestos sea de 0,5-2 |ig/ml, tales como: el ejemplo 10, el ejemplo 11, el ejemplo 12, el ejemplo 13, el ejemplo 75, etc. La clave es que la presente invención aumenta la estabilidad de los compuestos y también reduce la toxicidad metabólica de los compuestos (véase la tabla 9 en el experimento de control 2).
(3) Experimentos antibacterianos in vitro del inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros mostraron que el inhibidor no solo afecta a bacterias grampositivas tales como Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus resistente a fármacos, Staphylococcus epidermidis resistente a fármacos, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Streptococcus pneumoniae, siendo la concentración inhibidora mínima solo < 0,008 |ig/ml, que es 60 veces mayor que el compuesto principal LBM415, tal como el ejemplo 3, el ejemplo 4, el ejemplo 6, el ejemplo 33, el ejemplo 38, el ejemplo 64, el ejemplo 72, el ejemplo 73, etc.; sino que también mostró una excelente actividad contra bacterias gramnegativas tales como Moraxella catarrhalis que afecta gravemente a la salud humana, siendo la concentración inhibidora mínima tan baja como 0. 06 |ig/ml, tal como el ejemplo 22, el ejemplo 33, etc. (véase la tabla 10 en el experimento de control 3).
(4) El inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros de la presente invención puede inhibir eficazmente la proliferación de diversas células cancerosas a una concentración de 30 |iM, tal como cáncer colorrectal, cáncer de pulmón, cáncer gástrico y cáncer de hígado, etc.; destacando la inhibición selectiva contra células cancerosas del tracto digestivo (véanse las tablas 4 y 5). Mientras tanto, el inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros de la presente invención también puede inhibir eficazmente la proliferación de otras diversas células cancerosas tales como: leucemia, cáncer de cuello uterino, cáncer de mama, cáncer de próstata y osteosarcoma, etc.; destacando la inhibición selectiva en células de leucemia y osteosarcoma (véanse las tablas 6 y 7).
Ejemplos preferidos de la invención
La invención se describirá adicionalmente en detalle junto con los siguientes ejemplos específicos. Los procesos, condiciones, métodos experimentales, y similares para llevar a cabo la presente invención son generalmente conocidos en la técnica y en el conocimiento general común, excepto por los contenidos específicamente mencionados a continuación, y la presente invención no está particularmente limitada.
Método experimental
1. La divulgación adopta el método de dilución de agar de dos veces recomendado por el procedimiento de funcionamiento de pruebas de susceptibilidad antimicrobiana establecido por el Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio (American Clinical and Laboratory Standards Institute) (CLSI) para determinar la concentración inhibidora mínima (MIC) de las muestras de prueba frente a las cepas sometidas a prueba. En comparación con la actividad antibacteriana in vitro del fármaco de control LBM415 y levofloxacina, se investigó la actividad antibacteriana in vitro de todos los compuestos sintetizados frente a cuarenta y seis patógenos grampositivos y patógenos gramnegativos aislados en el ámbito clínico en los últimos tres años.
Tabla 1. Cepas aisladas clínicas sometidas a prueba cribadas por actividad antibacteriana in vitro
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2. La presente divulgación adopta el método CCK-8 para determinar el efecto de inhibición de proliferación del inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros como se describe en los ejemplos 1-80 frente a células de cáncer colorrectal, células de cáncer de pulmón, células de cáncer gástrico, células de cáncer de hígado, y similares. En primer lugar, se sometió a prueba la actividad antiproliferación de 80 compuestos frente a células de cáncer colorrectal, y luego se seleccionaron 30 compuestos con buena actividad antiproliferación frente a células de cáncer colorrectal, cuya actividad inhibidora frente a cuatro tipos de células tumorales tales como células de cáncer colorrectal, células de cáncer de pulmón, las células de cáncer gástrico y las células de cáncer de hígado se examinó (véase la tabla 5), en donde, se determinó adicionalmente la concentración inhibidora con efecto a la mitad (CI50) de 6 compuestos con mejor actividad (véase la tabla 6). El compuesto que tenía la mejor actividad sintetizado en el ejemplo 64 se sometió a prueba adicionalmente en cuanto a su actividad inhibidora frente a otras células tumorales incluyendo leucemia de células T, leucemia mieloide aguda, cáncer de cuello uterino, cáncer de mama, cáncer de próstata y osteosarcoma, y similares (véase la tabla 7).
(1) Línea celular de cáncer colorrectal HCT-116, línea celular de cáncer de pulmón A549, línea celular de cáncer gástrico MGC-803, línea celular de cáncer de hígado BEL-7402, línea celular de leucemia de células T Jurkat, línea celular de leucemia mieloide aguda HL60, línea celular de cáncer de cuello uterino Hela, línea celular de cáncer de mama MCF-7, línea celular de cáncer de próstata PC3 y línea celular de osteosarcoma SAOS-2 se convirtieron en una suspensión de células individuales, 180 |il de la cual se inocularon en una placa de cultivo de 96 pocillos, que se cultivó durante la noche en una incubadora de CO2 (37 °C, 5 % de CO2, 95 % de aire).
(2) Cada uno de los inhibidores de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros se disolvieron en DMSO, y se formuló adicionalmente en disolución de fármaco con concentración final diferente requerida usando el medio de cultivo celular correspondiente. Las disoluciones de fármaco se añadieron a las células anteriores respectivamente (20 |il/pocillo), con el grupo de control añadido con DMSO al 1 %, y se cultivaron en una incubadora de CO2 durante 72 horas.
(3) Después de la incubación durante 72 horas, la disolución de cultivo se decantó, y se añadieron 100 |il de disolución de CCK-8 diluida 1:10. Después de la incubación a 37 °C durante 2 horas, se midió la absorbancia A a 450 nm usando un lector de microplacas SpectraMax M5, con la longitud de onda de referencia como 620 nm, y se calcularon las tasas de inhibición en el crecimiento de células tumorales.
En donde, en la etapa (1), la concentración de la suspensión de células individuales fue de 2000 células/pocillo.
En donde, en la etapa (2), se cultivaron células HCT-116 en medio 5A de McCoy (que contenía suero bovino recién nacido al 10 %, 1 % de anticuerpo doble); se cultivaron las células A549 y PC3 en medio F12 (que contenía suero bovino recién nacido al 10 %, 1 % de anticuerpo doble); se cultivaron células MGC-803, BEL-7402, SAOS-2, Jurkat y HL60 en medio 1640 (que contenía suero bovino recién nacido al 10 %, 1 % de anticuerpo doble); y se cultivaron células MCF-7 y Hela en medio DMEM con alto contenido de glucosa (que contenía suero bovino recién nacido al 10 %, 1 % de anticuerpo doble).
En la etapa (2) la fórmula de la tasa de inhibición es 1-(Agrupo de tratamiento con fármaco - Agrupo de control) / (Agrupo de tratamiento libre de fármaco - Agrupo de control), en donde, A es absorbancia.
En la etapa (2), cuando se determinaron los valores de CI50, los compuestos se formularon respectivamente para dar 30 |iM, 10 |iM, 3,3 |iM, 1,1 |iM, 0,37 |iM, 0,12 |iM, 0,04 |iM, y 0,013 |iM, y se añadieron a las células. Después de 72 horas, las absorbancias se midieron como en la etapa (3), y se calcularon las tasas de inhibición de los compuestos con diferentes concentraciones en el crecimiento de células tumorales. Los datos se analizaron mediante GraphPad Prism 5, y se calcularon los valores de CI50 (valor de CI50 se refiere a la concentración del compuesto correspondiente cuando la tasa de inhibición alcanza el 50 %).
Método para preparar compuestos
Fórmula general (X1) de compuestos amino
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Etapa 1: A un ácido, se añadió DMF, luego se añadieron 2,1 equivalentes de W-metilimidazol en un baño de hielo, y luego se añadió lentamente 1 equivalente de MsCl. Después de agitar durante 15 min, se añadió 1 equivalente de amina protegida con Boc a la mezcla. La reacción se monitorizó por TLC. Después de la finalización de la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con EA, y se lavó con ácido cítrico al 10 %; y la fase acuosa se extrajo dos veces con 50 ml de EA. La fase orgánica combinada se lavó sucesivamente con bicloruro de sodio y carbonato de sodio saturado. La fase orgánica se concentró para dar el producto.
Etapa 2: Se añadió una disolución de HCl/MeOH al producto obtenido en la etapa (1) anterior. Después de la finalización de la reacción, se obtuvo el producto.
Fórmula general (X2) de compuesto final
Serie de ácido hidroxámico:
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En donde n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2 es un anillo aromático, anillo heterocíclico aromático, anillo heterocíclico, o grupo alquilo.
Preferiblemente, n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2se selecciona de 1H-pirazol-3-ilo, 5-fluoropiridin-1 -óxido-2-ilo, 5-(terc-butil)isoxazol-3-ilo, 6-metil-A/-(4-(piridin-3-il)pirimidin-2-il)fenil-1-amino-3-ilo, 3-fluoropiridin-2-ilo, 5-metiltiazol-2-ilo, 3-(piridin-3-il)fenilo, A/-(pirimidin-2-il)fenil-1-amino-3-ilo, 4-(piridin-3-il)pirimidin-2-ilo, 4-morfolina fenilo, 2-pirazinilo, 3-piridazinilo, 4-pirimidinilo, 1 -metil-1 H-pirazol-4-ilo, 5-isoxazolilo, ciclopropilo, 4-metiltiazol-2-ilo, 2-oxazolilo, 5-metilisoxazol-3-ilo, 2-tiazolilo, 1,3,4-tiadiazol-2-ilo, 5-(trifluorometil)tiazol-2-ilo, bisetilsulfonilo, benzotiazol-2-ilo, formiato-2-tienilo de 3-metilo.
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En donde, n=2 o 4, R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; y R2 es un anillo aromático, o anillo heterocíclico aromático.
Preferiblemente, n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; y R2 es 2-bencimidazolilo, 1,3,4-oxodioxazol, 1,2,4-oxodioxazol o 1,3,4-triazol.
Etapa 3: En DMF, se disolvió el ácido, y luego 5 equivalentes de DIPEA y agente de condensación HATU (1,05 equivalentes) se añadieron sucesivamente en un baño de hielo. Después de agitar durante 15 min, se añadió amina sintetizada (1,0 equivalentes) a la mezcla. Después de la finalización de la reacción, la disolución de reacción se diluyó con acetato de etilo, y se lavó dos veces con disolución acuosa de ácido cítrico al 10 %; y la fase acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. La fase orgánica combinada se lavó con bicloruro de sodio y carbonato de sodio saturado, y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró, y se concentró para dar un producto en bruto, que se usó directamente en la siguiente etapa.
Etapa 4: En diclorometano (2 ml), se disolvió el producto en bruto, y se añadió ácido trifluoroacético (1 ml) gota a gota. Después se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 2 horas, se neutralizó con disolución acuosa saturada de carbonato de sodio, y la fase orgánica se separó. La fase acuosa se extrajo una vez con cloruro de metileno. La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de evaporación rotatoria para secar para dar un producto en bruto.
Serie de ácido hidroxámico:
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En donde n = 2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; y R2 se selecciona de anillo aromático, anillo heterocíclico aromático, anillo heterocíclico, o grupo alquilo.
Preferiblemente, n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2 se selecciona de 1H-pirazol-3-ilo, 5-fluoropiridin-1-óxido-2-ilo, 5-(terc-butil)isoxazol-3-ilo, 6-metil-N-(4-(piridin-3-il)pirimidin-2-il)fenil-1-amino-3-ilo, 3-fluoropiridin-2-ilo, 5-metiltiazol-2-ilo, 3-(piridin-3-il)fenilo, N-(pirimidin-2-il)fenil-1-amino-3-ilo, 4-(piridin-3-il)pirimidin-2-ilo, 4-morfolina fenilo, 2-pirazinilo, 3-piridazinilo, 4-pirimidinilo, 1-metil-1 H-pirazol-4-ilo, 5-isoxazolilo, ciclopropilo, 4-metiltiazol-2-ilo, 2-oxazolilo, 5-metilisoxazol-3-ilo, 2-tiazolilo, 1,3,4-tiadiazol-2-ilo, 5-(trifluorometil)tiazol-2-ilo, bisetilsulfonilo, benzotiazol-2-ilo, formiato-2-tienilo de 3-metilo.
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Preferiblemente, n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; y R2 es 2-bencimidazolilo, 1,3,4-oxodioxazol, 1,2,4-oxodioxazol, o 1,3,4-triazol.
Etapa 3: fue la misma que en la etapa 3 para la serie de ácido hidroxámico.
Etapa 4: fue la misma que en la etapa 4 para la serie de ácido hidroxámico.
Etapa 5: En DMF, se disolvió el ácido obtenido en la etapa anterior, y 5 equivalentes de DIPEA y agente de condensación HATU (1,05 equivalentes) se añadieron sucesivamente en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla durante 15 min, se añadió 3 veces de clorhidrato de hidroxilamina. Después de la finalización de la reacción, el producto final se obtuvo a través de purificación por HPLC.
Tabla 2. Lista de compuestos sintetizados finales
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Tabla 4. Actividad de tasa de inhibición antiproliferación de los compuestos sobre células de cáncer colorrectal a una concentración de 30 |iM
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Los resultados mostraron que las tasas de inhibición de 21 compuestos en los ejemplos 6, 22, 29, 36, 38, 40, 46, 51, 57, 62, 63, 64, 65, 66, 70, 72, 73, 75, 76, 78, 79 a una concentración de 30 |iM sobre la proliferación de células de cáncer colorrectal HCT116 fue superior al 50 %, en donde, el compuesto del ejemplo 29 tenía la mayor tasa de inhibición de proliferación del 94 %. Se indicó que los compuestos sintetizados tienen efectos inhibidores significativos sobre la proliferación de células de cáncer colorrectal HCT116 a una concentración de 30 |iM.
Tabla 5. Actividad de inhibición de compuestos preferidos sobre la proliferación de células de cáncer colorrectal, células de cáncer de pulmón, células de cáncer gástrico, células de cáncer de hígado y similares, a una concentración de 30 |iM
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Se seleccionaron 30 compuestos que tuvieron un buen efecto de inhibición sobre la proliferación de células de cáncer colorrectal HCT116 (tasa de inhibición > 30 %) en los ejemplos 6, 22, 25, 29, 32, 33, 34, 36, 38, 40, 46, 51, 55, 57, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 70, 71, 72, 73, 75, 76, 77, 78, 79, y se examinaron sus actividades de tasa de inhibición sobre la proliferación de otras células cancerosas tales como células de cáncer de pulmón, células de cáncer gástrico, células de cáncer de hígado, y similares. Los resultados mostraron que: las tasas de inhibición de 13 compuestos en los ejemplos 46, 57, 62, 63, 64, 65, 66, 70, 72, 73, 76, 78, 79 a una concentración de 30 |iM sobre la proliferación de células de cáncer de pulmón A549 fue superior al 50 %, en donde el compuesto del ejemplo 76 tenía la mayor tasa de inhibición de proliferación del 94 %; las tasas de inhibición de 14 compuestos de los ejemplos 6, 29, 38, 40, 62, 63, 64, 65, 66, 72, 73, 75, 76, 79 a una concentración de 30 |iM sobre la proliferación de células de cáncer gástrico MGC-803 fue superior al 50 %, en donde, el compuesto del ejemplo 29 tenía la mayor tasa de inhibición de proliferación del 78 %; las tasas de inhibición de 27 compuestos de los ejemplos 6, 22, 25, 29, 33, 34, 36, 38, 40, 46, 51, 55, 57, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 70, 72, 73, 75, 76, 77, 78, 79 a una concentración de 30 |iM sobre la proliferación de células de cáncer de hígado BEL-7402 fue superior al 50 %, en donde, los compuestos de los ejemplos 64, 65 y 73 tenían la mayor tasa de inhibición de proliferación del 81 %.
Tabla 6. Valores de CI50 (|iM) de compuestos preferidos frente a células de cáncer colorrectal, células de cáncer de pulmón, células de cáncer gástrico, y células de cáncer de hígado
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Tabla 7. Tasa de inhibición del crecimiento de diferentes células tumorales del ejemplo 64 (CI50, |iM)
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Ejemplo 1
Síntesis de ('S/)-5-((R/)-2-((W-h¡drox¡formam¡do)metil)hexanam¡do)-A/-(1H-p¡razol-3-¡l)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-am¡da
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Etapa 1: Se añadieron 3-aminopirazol (1,50 g, 18,0 mmol), trimetilamina (4,5 g, 20,6 mmol), y 4-(dimetilamino)piridina (0,15 g, 1,2 mmol) en 60 ml de dioxano. La mezcla se agitó y se disolvió, y luego se añadió con Boc2O, y se calentó a reflujo durante 8 horas. Después de la finalización de la reacción, el disolvente se retiró por evaporación rotatoria. El residuo se diluyó luego con EA, y se extrajo, y se lavó sucesivamente con ácido cítrico al 10 % y cloruro de sodio saturado. El aceite obtenido por la concentración de la fase orgánica se pasó por columna (PE/d Cm = 2/1) para dar un producto sólido blanco (1,6 g, 48 % de rendimiento).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1). A un ácido (2,05 g, 8,5 mmol) se le añadieron 20 ml de DMF, y N-metilimidazol (1,54 g, 18,7 mmol) en un baño de hielo, y luego se añadió lentamente gota a gota MsCl (1,07 g, 9,4 mmol). La mezcla se agitó durante 15 min, y luego se añadió amina protegida con Boc (1,56 g, 8,5 mmol). La reacción se monitorizó por TLC. Después de la finalización de la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con EA, y se lavó con ácido cítrico al 10 %. La fase acuosa se extrajo dos veces con 50 ml de EA. La fase orgánica combinada se lavó con bicloruro de sodio y carbonato de sodio saturado sucesivamente. El producto oleoso se obtuvo a través de concentración de fase orgánica.
Etapa 3: Se añadieron 20 ml y 10 ml de disolución de HCl/MeOH 5 M al aceite, y la mezcla se hizo reaccionar a temperatura ambiente durante la noche. Después de la finalización de la reacción, la mezcla se secó por evaporación rotatoria para dar un producto oleoso (2,0 g, rendimiento en dos etapas del 100 %).
RMN1H (400 MHz, DMSO) 811,53 (s, 1H), 10,66 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,94 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 6,52 (s, 1H), 4,70-4,51 (m, 1H), 3,31-3,24 (m, 1H), 3,21-3,15 (m, 1H), 2,43-2,27 (m, 1H), 2,01 (dd, J = 12,7, 7,5 Hz, 1H), 0,80-0,57 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8165,97, 144,77, 96,15, 55,94, 51,54, 37,61, 18,42, 10,22, 9,83.
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). El rendimiento alcanzó el 18 % a través de un proceso de síntesis de dos etapas.
LC-MS (ESI) (Cromatografía de Líquidos-Espectroscopía de Masas (Ionización por electropulverización), de sus siglas en inglés, Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (Electrospray ionization)): [M+1]+ = 378,15, tR = 1,88 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 88,36-7,98 (m, 1H), 7,80-7,75 (m, 1H), 6,00-5,84 (m, 1H), 5,67-5,41 (m, 1H), 5,15 (s, 1H), 4,40-3,87 (m, 2H), 3,86-3,31 (m, 2H), 3,26-2,72 (m, 1H), 2,44-2,36 (m, 1H), 2,07-1,83 (m, 1H), 1,84-1,65 (m, 1H), 1,67­ 1,21 (m, 5H), 0,97- 0,82 (m, 3H), 0,76-0,42 (m, 4H).
RMN13C (101 MHz, CDCla) 8172,19, 167,99, 158,69, 157,56, 129,84, 101,83, 58,87, 54,75, 51,31,40,60, 37,93, 29,81, 28,93, 22,74, 20,77, 13,96, 12,89, 8,80.
HRMS (ESI) (Espectroscopía de Masas de Alta Resolución (Ionización por electropulverización), de sus siglas en inglés, High Resolution Mass Spectrometry (Electrospray ionization)): se calculó para C1sH27N5O4Na [M+Na]+ = 400,1961; se encontró 400,1949.
Ejemplo 2
Síntesis de 5-fluoro-2-(SJ-5-(('R/)-2-((W-hidroxifomamido)metil)hexilcarbonil)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-amido)piridina N-óxido de nitrógeno
Figure imgf000037_0001
Figure imgf000037_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1) (2,1 g, sólido blanco, rendimiento en dos etapas del 68 %).
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: Se disolvió en acetato de etilo (3 ml) el producto oleoso obtenido (242 mg, 0,46 mmol), y después se añadió complejo de peróxido de hidrógeno-urea (133 mg, 1,40 mmol) y anhídrido ftálico (207 mg, 1,40 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de la finalización de la reacción, la reacción se interrumpió con tiosulfato de sodio, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó y se concentró para dar un producto en bruto.
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). El rendimiento alcanzó el 45 % a través del proceso de síntesis de tres etapas.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 423,02, tR = 1,80 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3)810,55 (s, 1H), 8,49 (dd, J = 9,4, 6,6 Hz, 1H), 8,21-8,18 (m, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,19-7,09 (m, 1H), 4,97 (dd, J = 8,5, 3,6 Hz, 1H), 4,00-3,78 (m, 2H), 3,50-3,26 (m, 2H), 3,17-2,80 (m, 1H), 2,40-2,25 (m, 1H), 2,11-1,92 (m, 1H), 1,80-1,46 (m, 2H), 1,44-1,26 (m, 4H), 0,89 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 0,76-0,61 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, CDCla) 8173,35, 170,54, 157,91, 154,73 (d, J = 248,1 Hz), 141,69, 127,21 (d, J = 36,5 Hz), 115,69 (d, J = 20,1 Hz), 114,77 (d, J = 7,8 Hz), 61,81, 54,81, 51,31, 40,55, 36,87, 29,81, 28,96, 22,67, 21,25, 13,87, 12,94, 8,46.
HRMS (ESI): se calculó para C20H2yN4O5NaF [M+Na]+ = 445,1863; se encontró 445,1845.
Ejemplo 3
Síntesis de ('S/)-N-(5-(terc-but¡l)¡soxazol-3-¡l)-5-(('R/)-2-((N/-h¡drox¡formam¡do)met¡l)hex¡lcarbon¡l)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000038_0001
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1) (1,4 g, sólido blanco, rendimiento en dos etapas del 47 %).
RMN1H (400 MHz, D2O )86,14 (s, 1H), 4,44-4,41 (m, 1H), 3,12-2,93 (m, 2H), 2,19 (dd, J = 13,4, 8,9 Hz, 1H), 1,86 (dd, J = 13,4, 6,1 Hz, 1H), 0,52-0,29 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8183,22, 167,90, 157,06, 93,24, 60,23, 52,67, 37,13, 32,51, 27,67, 20,09, 9,86, 8,49. Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 28 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 435,24, t„ = 2,25 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 89,94 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 6,69 (s, 1H), 4,84 (dd, J = 8,2, 4,2 Hz, 1H), 4,07-3,68 (m, 2H), 3,68-3,30 (m, 2H), 3,20-2,80 (m, 1H), 2,36-1,95 (m, 2H), 1,74-1,43 (m, 2H), 1,39-1,23 (m, 13H), 0,91-0,82 (m, 3H), 0,76-0,60 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, CDCla) 8181,38, 173,47, 169,95, 157,67, 157,62, 93,55, 61,29, 55,06, 51,36, 40,77, 36,21, 32,98, 29,85, 28,92, 28,64, 22,70, 21,28, 13,85, 12,41, 9,18.
HRMS (ESI): se calculó para C22H34N4OaNa [M+Na]+ = 457,2427; se encontró 457,2426.
Ejemplo 4
Síntesis de SJ-5-((R/)-2-((W-hidroxifomamido)metil)hexilcarbonil)-W-(4-metil-3-((4-(piridin-3-il))pirimidin-2-il)amino)fenil)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000038_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1) (3,1 g, sólido amarillo, rendimiento en dos etapas del 66 %).
RMN 1H (400 MHz, D2O) 89,39 (s, 1H), 9,10 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,87 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,39 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 8,16­ 8,11 (m, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,55 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 4,66-4,60 (m, 1H), 3,27 (d, J = 3,3 Hz, 2H), 2,39 (dd, J = 13,1, 8,9 Hz, 1H), 2,12 (s, 3H), 2,10-2,00 (m, 1H), 0,73-0,57 (m, 4H). RMN 13C (101 MHz, D2O) 8167,92, 164,58, 155,40, 151,87, 145,43, 143,57, 141,24, 135,16, 134,34, 133,74, 131,92, 131,34, 127,79, 120,66, 118,45, 108,22, 60,22, 52,71, 37,45, 20,18, 16,50, 9,61, 8,85.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido amarillo claro a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 38 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 572,27, tR = 2,11 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 89,38 (s, 1H), 9,24 (s, 1H), 8,67 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,51-8,25 (m, 3H), 7,87 (s, 1H), 7,49­ 7,39 (m, 1H), 7,38-7,05 (m, 4H), 5,06-4,61 (m, 1H), 4,13-3,61 (m, 2H), 3,57-3,22 (m, 2H), 3,19-2,84 (m, 1H), 2,32-2,24 (m, 3H), 2,21-2,09 (m, 2H), 1,85-1,38 (m, 2H), 1,36-1,12 (m, 4H), 0,94-0,69 (m, 3H), 0,71-0,54 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, CDCla) 8173,98, 168,95, 162,54, 160,62, 159,01, 157,23, 151,09, 148,33, 137,43, 136,89, 135,19, 132,84, 130,57, 124,48, 123,84, 115,34, 113,32, 108,02, 61,63, 55,45, 51,49, 41,14, 35,16, 30,12, 28,89, 22,66, 21,11, 18,40, 17,66, 13,70, 8,32.
HRMS (ESI): se calculó para C31H38N7O4 [M+H]+ = 572,2985; se encontró 572,2980.
Ejemplo 5
Síntesis de ('SJ-W-(3-fluoropiridin-2-il)-5-(('R/)-2-((W-hidroxiformamido)metil)hexilcarbonil)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000039_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1) (1,7 g, sólido blanco, 45 % de rendimiento a través de dos etapas).
RMN 1H (400 MHz, D2O) 88,20 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,06 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 7,56-7,50 (m, 1H), 4,90-4,79 (m, 1H), 3,31 (s, 2H), 2,61-2,39 (m, 1H), 2,15 (dd, J = 13,4, 6,1 Hz, 1H), 0,76-0,54 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,94, 150,12 (d, J = 255,5 Hz), 138,18, 137,92 (d, J = 13,4 Hz), 130,12 (d, J = 16,9 Hz), 123,10 (d, J = 5,8 Hz), 60,39, 52,83, 37,21,20,06, 9,96, 8,50.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo un sólido de color amarillo mediante cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 37 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 406,70, tR = 2,35 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 88,40-8,15 (m, 1H), 8,01-7,79 (m, 1H), 7,65-7,35 (m, 1H), 7,33-7,00 (m, 1H), 5,05-4,66 (m, 1H), 4,30-3,64 (m, 2H), 3,62-3,21 (m, 2H), 3,05 (m, 1H), 2,78-1,90 (m, 2H), 1,84-1,40 (m, 2H), 1,41-1,14 (m, 4H), 1,00­ 0,51 (m, 7H).
RMN 13C (101 MHz, CDCl3) 8173,98, 168,98, 157,19, 150,39 (d, J = 258,5 Hz), 143,63 (d, J = 5,6 Hz), 140,45 (d, J = 12,1 Hz), 123,73 (d, J = 17,4 Hz), 121,04, 61,31, 55,35, 51,28, 40,97, 35,11, 30,08, 28,90, 22,67, 21,10, 13,85, 13,71, 8,13.
HRMS (ESI): se calculó para C20H28FN4O4 [M+H]+ = 407,2110; se encontró 407,2126.
Ejemplo 6
Síntesis de ('S)-5-(^R)-2-(('W-hidroxiformamido)metil)hexilcarbonil)-W-(5-metiltiazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000040_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula (X1) (680 mg, sólido blanco, rendimiento en dos etapas del 100 %).
RMN 1H (400 MHz, D2O )87,24 (s, 1H), 4,77 (dd, J = 8,9, 6,5 Hz, 1H), 3,24 (s, 2H), 2,38 (dd, J = 13,4, 9,1 Hz, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,05 (dd, J = 13,4, 6,3 Hz, 1H), 0,72-0,45 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8168,01, 159,21, 129,86, 124,06, 60,16, 52,75, 36,68, 20,02, 11,03, 9,78, 8,73.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanquecino mediante cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 42 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 408,72, tp = 2,67 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,70 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 4,68 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 3,93 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 3,41 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 3,02 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 2,62 (s, 1H), 2,40 (dd, J = 12,2, 8,0 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,13 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 1,73-1,41 (m, 2H), 1,39-1,16 (m, 4H), 0,88 (t, J = 6,6 Hz, 3H), 0,72-0,50 (m, 2H), 0,30­ 0,05 (m, 2H).
RMN13C (101 MHz, CDCla) 8174,04, 171,12, 158,73, 153,63, 135,01, 126,02, 61,53, 53,99, 53,60, 43,50, 39,25, 31,29, 29,17, 22,90, 19,23, 13,84, 13,26, 11,72, 5,98.
HRMS (ESI): se calculó para C19H29N4O4S [M+H]+ = 409,1910; se encontró 409,1922.
Ejemplo 7
Síntesis de ('S/)-5-((R/)-2-((W-h¡drox¡fomam¡do)met¡l)hex¡lcarbon¡l)-W-(3-(p¡rid¡n-3-¡l)fen¡l)-5-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000040_0002
Etapa 1: A una mezcla de 3-bromopiridina (2,37 g, 15 mmol), monohidrato de ácido 3-aminofenilborónico (2,32 g, 15 mmol) y Pd(PPh3)4 (520 mg, 0,45 mmol), se añadieron etilenglicol dimetil éter (30 ml) y agua (15 ml). Todo el sistema de reacción se reemplazó tres veces con nitrógeno, y se calentó a reflujo durante 12 h. Después de la finalización de la reacción, la mezcla se enfrió, y se retiró el disolvente. Después, el residuo se sometió a cromatografía en columna (DCM/EA: 5/1 a 2/1) para dar un producto semisólido de color amarillo (680 mg, 27 % de rendimiento).
RMN1H (400 MHz, CDCl3)88,81 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,57 (, J = 4,7 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,34 (dd, J = 7,9, 4,8 Hz, 1H), 7,26 (dd, J = 8,8, 6,8 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,88 (s, 1H), 6,73 (dd, J = 8,0, 2,1 Hz, 1H), 3,83 (s. a., 2H).
RMN 13C (101 MHz, CDCh) 8148,31, 148,21, 147,06, 138,96, 136,88, 134,41, 130,05, 123,52, 117,48, 114,82, 113,63.
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1). ácido (S)-5-(tercbutil)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxílico (950 mg, 3,94 mmol) se disolvió en DMF (5 ml), luego se añadió NMI (0,7 ml, 8,67 mmol). Después de enfriar a 0 °C, MsCl (451 mg, 3,94 mmol) se añadió gota a gota, y la mezcla se agitó durante 15 min. A continuación, se añadió 3-(piridin-3-il)anilina (670 mg, 3,94 mmol). El progreso de la reacción se monitorizó por TLC. Después de la finalización de la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con disolución acuosa de ácido cítrico al 10 %. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2x20 ml). Las fases orgánicas se combinaron, y se lavaron con disolución acuosa saturada de carbonato de sodio y cloruro de sodio saturado sucesivamente. El producto en bruto se obtuvo por concentración a presión reducida a través de evaporación rotatoria.
Etapa 3: En 10 ml de éter etílico se disolvió el producto en bruto, y después se añadieron 5 ml de disolución de HCl/MeOH (5 M). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El precipitado se recogió y se secó para dar un sólido marrón (900 mg, rendimiento en dos etapas del 69 %).
RMN 1H (400 MHz, D2O) 88,54 (s, 1H), 8,35 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 8,31 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 7,8, 6,2 Hz, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,15-7,05 (m, 2H), 4,44-4,38 (m, 1H), 3,08 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,03 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 2,16 (dd, J = 13,2, 8,8 Hz, 1H), 1,80 (dd, J = 13,3, 6,6 Hz, 1H), 0,54-0,29 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8167,95, 144,27, 139,57, 138,97, 138,77, 137,47, 133,84, 130,50, 127,45, 124,14, 122,41, 119,26, 60,25, 52,75, 37,49, 20,24, 9,55, 9,03.
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanquecino mediante cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 19 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 464,85, t„ = 2,33 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 89,68 (s, 1H), 8,65 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 8,43 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 7,84-7,71 (m, 2H), 7,66 (s, 1H), 7,39 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,23 (dd, J = 7,8, 4,7 Hz, 1H), 7,16 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,81 (t, 5,2 Hz), 3,92-3,58 (m, 2H), 3,56-3,32 (m, 2H), 3,15-3,02 (m, 1H), 2,14-1,98 (m, 1H), 1,72-1,34 (m, 2H), 1,36-1,11 (m, 4H), 0,80-0,64 (m, 3H), 0,63-0,48 (s, 4H).
RMN 13C (101 MHz, CDCla) 8173,77, 169,72, 157,20, 147,90, 147,76, 139,28, 137,91, 136,55, 134,85, 129,36, 123,65, 122,19, 119,26, 118,10, 61,64, 55,59, 51,68, 50,53, 41,17, 36,00, 30,12, 28,87, 22,66, 21,12, 13,73, 9,05.
HRMS (ESI): se calculó para C26^ 2^ O 4Na [M+Na]+ = 487,2321; se encontró 487,2318.
Ejemplo 8
Síntesis de (S)-5-((R)-2-((W-hidroxiamido)metil)hexilcarbonil)-W-(3-(2-piridilamino)fenil)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000042_0001
Etapa 1: Xantphos (347 mg, 3 % en moles), Pd2(dba)3 (366 mg, 2 % en moles), 2-aminopirimidina (1,92 g, 20 mmol) y terc-butóxido de sodio (1,92 g, 20 mmol) se añadieron a un matraz de reacción. El sistema se reemplazó tres veces con nitrógeno. Una disolución de 3-bromo-1-nitrobenceno (4,04 g, 20 mmol) en tolueno (20 ml) se añadió a la reacción. La mezcla se calentó a 95 °C para reaccionar durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió y se filtró a través de celita (la torta del filtro se lavó con 200 ml de tolueno para retirar impurezas), y después se eluyó con una mezcla de MeOH al 10 % en acetato de etilo (500 ml)) para producir un producto en bruto. El producto sólido amarillo se obtuvo a través de reducción a pulpa con acetato de etilo (2,6 g, 60 % de rendimiento).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 217,00, tR = 2,45 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 88,74 (s, 1H), 8,51 (d, J = 4,7 Hz, 2H), 7,90-7,83 (m, 2H), 7,70 (s, 1H), 7,47 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 6,85 (t, J = 4,7 Hz, 1H).
RMN 13C (101 MHz, CDCla) 8159,57, 158,12, 148,86, 140,74, 129,51, 124,47, 116,94, 113,74, 113,61.
Etapa 2: La disolución de trifluoroetanol (20 ml) que contenía 10 % de Pd/C (50 mg), A/-(3-n¡trofen¡l)p¡rim¡d¡n-2-am¡na (1,3 g, 6,0 mmol) e hidrato de hidrazina al 80 % (1 ml) se calentó a 80 °C para reaccionar durante 5 horas. Después de la finalización de la reacción, el catalizador se separó por filtración, y el filtrado obtenido se concentró para dar un producto (1,1 g, 100 % de rendimiento).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 186,76, tR = 1,17 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 88,39 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 7,86 (s. a., 1H), 7,16 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 7,09 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,94-6,83 (m, 1H), 6,66 (t, J = 4,8 Hz, 1H), 6,37 (dd, J = 7,9, 2,0 Hz, 1H), 3,67 (s. a., 2H).
RMN 13C (101 MHz, CDCls) 8160,29, 157,96, 147,26, 140,52, 129,71, 112,29, 109,95, 109,75, 106,28.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1). Ácido (S)-5-(tercbutoxicarbonil)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxílico (965 mg, 4,0 mmol) se disolvió en DMF (8 ml), y después se añadió NMI (722 mg, 8,8 mmol). La mezcla se enfrió a 0 °C, y después se añadió MsCl (460 mg, 4,0 mmol) gota a gota. Después, la mezcla se agitó durante 15 min. Después de eso, se añadió A/-(2-pirimidinil)benceno-1,3-diamina (745 mg, 4,0 mmol). Después de la finalización de la reacción, la mezcla se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con disolución acuosa de ácido cítrico al 10%. La fase orgánica se extrajo con acetato de etilo (2x50 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio y carbonato de sodio saturado. Se obtuvo un sólido de color amarillo a través de la concentración a presión reducida.
Etapa 4: El sólido se disolvió en disolución de DCM/TFA 2:1 (8 ml/4 ml), y se dejó reaccionar a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de la finalización de la reacción, a la mezcla se añadieron unas pocas gotas de agua y se neutralizó con carbonato de sodio sólido. Después de secar sobre Na2SO4 anhidro, el sólido insoluble se separó por filtración, y el filtrado se concentró para dar álcali libre (500 mg, rendimiento en dos etapas del 50 %).
RMN 1H (400 MHz, CDCls) 89,81 (s. a., 1H), 8,34 (m, 2H), 8,00-7,90 (m, 1H), 7,72-7,50 (m, 1H), 7,46-7,25 (m, 1H), 7.26- 7,09 (m, 1H), 6,71-6,47 (m, 1H), 4,19-3,76 (m, 1H), 3,16-2,85 (m,1H), 2,91-2,52 (m, 1H), 2,28-2,05 (m, 1H), 2,00­ 1,77 (m, 1H), 0,82-0,21 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, CDCla) 8172,97, 160,08, 157,97, 140,14, 138,46, 129,36, 115,19, 113,66, 112,55, 110,39, 61,41, 54.68, 39,12, 22,40, 10,88, 9,55.
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 6: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanquecino mediante cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 37 %. RMN 1H (400 MHz, CDCla) 89,81 (s. a., 1H), 8,34 (m, 2H), 8,00-7,90 (m, 1H), 7,72-7,50 (m, 1H), 7,46-7,25 (m, 1H), 7.26- 7,09 (m, 1H), 6,71-6,47 (m, 1H), 4,19-3,76 (m, 1H), 3,16-2,85 (m,1H), 2,91-2,52 (m, 1H), 2,28-2,05 (m, 1H), 2,00­ 1,77 (m, 1H), 0,82-0,21 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, CDCls) 8172,97, 160,08, 157,97, 140,14, 138,46, 129,36, 115,19, 113,66, 112,55, 110,39, 61,41, 54.68, 39,12, 22,40, 10,88, 9,55.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 481,36, t„ = 2,35 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCls) 89,30 (s, 1H), 8,37 (d, J = 4,7 Hz, 2H), 8,12 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,47 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,24-7,07 (m, 2H), 6,66 (t, J = 4,8 Hz, 1H), 5,06-4,47 (m, 1H), 4,08-3,56 (m, 2H), 3,55-3,30 (m, 2H), 3,23­ 2,76 (m, 1H), 2,29-1,88 (m, 2H), 1,75-1,41 (m, 2H), 1,40-1,19 (m, 4H), 1,05-0,70 (m, 3H), 0,74-0,45 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, CDCh) 8173,78, 169,36, 159,92, 157,93, 157,38, 139,95, 138,86, 129,19, 115,26, 114,12, 112,26, 110,94, 61,66, 55,48, 51,60, 41,14, 35,63, 30,14, 28,92, 22,68, 21,13, 13,78, 12,95, 8,90.
HRMS (ESI): se calculó para C25H33N6O4 [M+1]+ = 481,2563; se encontró 481,2566.
Ejemplo 9
Síntesis de SJ-5-((R/)-2-((W-hidroxifomamido)metil)hexilcarbonil)-W-(4-(3-piridil)pirimidin-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000043_0001
Etapa 1: 3-d¡met¡lam¡no-1-(3-p¡r¡d¡l)-2-propen¡l-1-ona (1,76 g, 10,0 mmol) se suspendió en n-butanol (20 ml), seguido de la adición de clorhidrato de guanidina (1,15 g, 12,0 mmol) y NaOH (480 mg, 12,0 mmol). La mezcla se calentó a 120 °C para reaccionar durante la noche. El sólido precipitado se recogió y se lavó con agua (50 ml), seguido de secado al vacío para dar un cristal amarillo claro (1,51g, 88 % de rendimiento).
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 89,23 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,67 (dd, J = 4,7, 1,3 Hz, 1H), 8,38 (dt, J = 8,0, 1,8 Hz, 1H), 8,36 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 8,0, 4,8 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 6,81 (s, 2H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8163,78, 161,53, 159,36, 151,11, 147,93, 134,11, 132,44, 123,72, 105,99.
Etapa 2: Ácido ('S/)-5-(terc-butoxicarboml)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxíl¡co (2,0 g, 8,5 mmol) se disolvió en DMF (20 ml), seguido de la adición de NMI (2,1 g, 25,5 mmol). La mezcla se enfrió a 0 °C, en la que MsCl (978 mg, 8,5 mmol) se añadió gota a gota. La mezcla se agitó durante 15 min. Después se añadieron 4-(3-p¡r¡dil)pir¡midin-2-amina (980 mg, 5,7 mmol) y cloruro de litio (721 mg, 17,0 mmol). Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 48 horas bajo agitación, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con disolución acuosa de ácido cítrico al 10 %. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2x50 ml). La fase orgánica se lavó con cloruro de sodio y carbonato de sodio saturado. Después de concentrar a presión reducida, se obtuvo producto puro (1,0 g, 44 % de rendimiento) mediante la purificación del producto en bruto a través de columna de gel de sílice (DCM/MeOH = 100/1 -30/1).
RMN 1H (400 MHz, CDCls) (se observaron dos rotámeros) 89,98 (s. a., 0,5H), 9,28 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 9,06 (s. a., 0,5H), 8,83-8,70 (m, 2H), 8,42 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,56-7,40 (m, 2H), 4,96-4,60 (m, 1H), 3,65-3,50 (m, 1H), 3,45-3,10 (m, 1H), 2,50-2,25 (m, 1H), 2,20-2,05 (m, 1H), 1,51 (s, 9H), 0,78-0,54 (s, 4H).
Etapa 3: El producto obtenido se separó y se disolvió en 10 ml de éter dietílico, seguido de la adición de 5 ml de HCl/MeOH (5 M). La mezcla se agitó para reaccionar durante la noche a temperatura ambiente. El precipitado se recogió y se secó para dar un sólido blanco (584 mg, 63 % de rendimiento).
RMN 1H (400 MHz, D2O )89,09 (s, 1H), 8,65 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,62 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 8,47 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 8,0, 5,2 Hz, 1H), 4,79-4,76 (m, 1H), 3,42-3,27 (m, 2H), 2,50 (dd, J = 13,4, 9,0 Hz, 1H), 2,15 (dd, J = 13,2, 6,1 Hz, 1H), 0,94-0,60 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8162,87, 159,54, 149,77, 146,43, 138,16, 137,44, 134,43, 132,17, 124,98, 114,33, 60,83, 52.79, 37,24, 26,35, 20,10, 18,44, 9,85, 8,57.
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanquecino mediante cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 19 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 466,74, tp = 2,20 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 89,91 (s, 1H), 9,37-9,08 (m, 1H), 8,85-8,53 (m, 1H), 8,37 (s, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,65-7,12 (m, 2H), 5,55-5,00 (m, 1H), 4,14-3,64 (m, 2H), 3,55-3,10 (m, 2H), 3,02-2,58 (m, 1H), 2,45-2,10 (m, 2H), 2,05-1,46 (m, 2H), 1,45-1,10 (m, 4H), 1,00-0,30 (m, 7H).
RMN 13C (101 MHz, CDh) 8180,38, 173,69, 162,72, 159,32, 157,91, 157,76, 151,70, 148,31, 134,89, 131,89, 123,83, 111.79, 61,70, 55,39, 51,35, 42,84, 41,02, 35,71, 30,09, 28,87, 22,71,21,02, 13,75, 8,41.
HRMS (ESI): se calculó para C24H31N6O4 [M+1]+ = 467,2407; se encontró 467,2399.
Ejemplo 10
Síntesis de W-^RJ^-^SJ^-OH-bencimidazol^-il^-azaespirop^heptano^-carbom^hexiO-W-hidroxiformamida
Figure imgf000044_0002
Figure imgf000044_0001
Acido, HATU 5. TFA/DCM
Etapa 1: Se añadió ácido ('SJ^terc-butoxicarbonil^-azaspirop^heptano^-carboxílico (2,4 g, 10 mmol) a un matraz. Luego se añadió A/,W-dimetilformamida DMF (25 ml) y se disolvió, seguido de la adición de W-metilimidazol NMI (1,8 ml, 22 mmol) en un baño de hielo, y adición gota a gota de cloruro de metanosulfonilo (0,78 ml, 10 mmol). La mezcla se agitó a 0 °C durante 15 minutos. Después se añadió o-fenilendiamina (2,8 g, 20 mmol). El sistema de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas. Después de la finalización de la reacción, la disolución de reacción se diluyó con acetato de etilo, y la fase orgánica se lavó tres veces con disolución acuosa de ácido cítrico al 10 % para retirar el exceso de o-fenilendiamina. Finalmente, la fase orgánica se secó y se concentró para dar un sólido rosado en bruto, que era un sólido de tipo espuma.
Etapa 2: El sólido obtenido se disolvió en 20 ml de metil terc-butil éter, y se añadieron 4 ml de ácido acético. La disolución se calentó a reflujo durante 3 horas. Después de la finalización de la reacción, se añadió disolución de Na2CO3 saturada para neutralizar el pH a neutro. La capa orgánica se aisló y se concentró para dar un producto de reacción de cierre de anillo.
Etapa 3: En 20 ml de éter dietílico se disolvió el producto de cierre de anillo oleoso, y se añadió una disolución de HCl/MeOH 5 M (10 ml). La mezcla se agitó durante una noche. El sólido blanco precipitado se recogió y se secó al vacío para dar 1,3 g de producto, con el rendimiento total que alcanza el 45 % a través del proceso de síntesis en tres etapas.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 87,67-7,58 (m, 2H), 7,49-7,39 (m, 2H), 5,41 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 3,55-3,46 (m, 1H), 3,25-3,15 (m, 1H), 2,68-2,57 (m, 1H), 2,39-2,28 (m, 1H), 0,85-0,60 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8144,90, 130,95, 127,05, 114,21, 36,52, 20,20, 11,92, 7,25.
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo un semisólido por cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 32 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 385,06, tp = 1,51 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 812,10 (s, 1H), 8,30-7,79 (m, 1H), 7,74-7,34 (m, 2H), 7,29-7,16 (m, 2H), 5,58-5,42 (m, 1H), 4,21-4,01 (m, 1H), 3,97-3,87 (m, 1H), 3,84-3,68 (m, 1H), 3,55-3,40 (m, 1H), 3,31-3,11 (m, 1H), 2,76-2,57 (m, 1H), 2,40­ 2,07 (m, 1H), 1,70-1,45 (m, 2H), 1,39-1,22 (m, 4H), 0,94-0,83 (m, 3H), 0,73-0,49 (m, 2H), 0,32-0,15 (m, 2H).
RMN 13C (101 MHz, CDCla) 8174,59, 161,90, 154,44, 123,20, 122,92, 56,75, 53,81,48,09, 43,15, 41,24, 29,69, 29,11, 22,86, 19,00, 14,11, 13,86, 5,90.
HRMS (ESI): se calculó para C21H28N4O3 [M+1]+ = 385,2060; se encontró 385,2013.
Ejemplo 11
Síntesis de W-h¡drox¡-W-((R/)-2-(('S/)-6-(3-(pir¡d¡n-3-¡l)-1,2,4-oxad¡azol-5-¡l)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-5-carbonil)hexil)carboxamida
Figure imgf000045_0001
Etapa 1: A una disolución de 3-cianopiridina (5,2 g, 50 mmol) disuelta en 50 ml de alcohol etílico, se añadieron clorhidrato de hidroxilamina (4,2 g, 60 mmol), NaHCO3 (5,0 g, 60 mmol) y agua (3 ml). La mezcla se calentó a reflujo durante 12 horas, seguido de la adición de Na2SO4 anhidro. La mezcla se filtró, y después se diluyó con éter dietílico (50 ml) para precipitar un cristal blanco (6,6 g, 96 % de rendimiento).
RMN 1H (400 MHz, DMSO)89,87 (s, 1H), 8,87 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 8,57 (dd, J = 4,8, 1,5 Hz, 1H), 8,03 (dt, J = 8,0, 1,9 Hz, 1H), 7,41 (dd, J = 8,0, 4,8 Hz, 1H), 6,01 (s, 2H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8149,72, 148,92, 146,56, 132,82, 129,01, 123,22.
Etapa 2: Se disolvió ácido ('S)-5-(terc-butoxicarbonil)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxílico (2,49 g, 10,3 mmol) en DMF (25 ml), y se añadió después W,W-carbonildiimidazol (CDI, 1,75 g, 10,3 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 8 horas, a la mezcla se añadió W-hidroxi-(3-piridil)formamidina (1,41 g, 10,3 mmol), y luego otro equivalente de CDI (1,75 g, 10,3 mmol). La mezcla se calentó a 90 °C en una atmósfera de nitrógeno para reaccionar durante 12 horas. A medida que la mezcla de reacción se enfrió, se diluyó con acetato de etilo (50 ml), se lavó con disolución acuosa de ácido cítrico al 10 %, y se extrajo con acetato de etilo (50 ml). La fase orgánica recogida se lavó con disolución acuosa de ácido cítrico al 10 %, disolución acuosa de bicarbonato sódico saturada y cloruro sódico sucesivamente, y después se concentró para obtener el producto en bruto (3,2 g, 84 % de rendimiento).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 343,19, tp = 2,32 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8 (se observaron dos rotámeros) 89,35-9,29 (m, 1H), 8,79-8,73 (m, 1 H), 8,56-8,27 (m, 1H), 7,55-7,37 (m, 1H), 5,38-5,20 (m, 1H), 3,58-3,38 (m, 2H), 2,64-2,41 (m, 1H), 1,47 (s, 4H), 1,32 (s, 5H), 0,81-0,47 (m, 4H).
Etapa 3: A una disolución de la sustancia oleosa (2,1 g, 5,67 mmol) disuelta en 10 ml de éter dietílico, se añadieron 10 ml de disolución de HCl/MeOH (5 M). La reacción se procesó durante la noche bajo agitación. Al líquido de reacción se añadió una pequeña cantidad de agua, y se añadió carbonato de sodio sólido al ácido neutralizado. Después de que las burbujas desaparecieron, el sólido se separó por filtración, y el filtrado se concentró para secarse para dar álcali libre (1,2 g, 80 % de rendimiento).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 243,89, tp = 1,13 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 89,33 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 8,74 (dd, J = 4,8, 1,4 Hz, 1H), 8,37 (dt, J = 7,9, 1,7 Hz, 1H), 7,43 (dd, J = 7,9, 4,9 Hz, 1H), 4,76 (dd, J = 7,7, 6,1 Hz, 1H), 3,14 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,01 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,30 (dd, J = 12,6, 7,8 Hz, 1H), 2,19 (dd, J = 12,6, 5,9 Hz, 1H), 0,65 (s, 4H).
RMN 13C (101 MHz, CDCls) 8182,26, 166,29, 151,99, 148,70, 134,72, 123,59, 123,11, 55,07, 54,87, 40,42, 22,22, 11,54, 11,38.
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). La sustancia oleosa incolora se obtuvo por cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 33 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 413,69, tR = 2,33 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCls) 89,20 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8,79-8,57 (dd, J = 3,6 Hz, 1H), 8,28 (dd, J = 6,2, 1,6 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,35 (dd, J = 7,9, 4,9 Hz, 1H), 5,51 (dd, J = 8,1,4,0 Hz, 1H), 3,94-3,67 (m, 2H), 3,66-3,47 (m, 1H), 3,42­ 3,26 (m, 1H), 3,16-2,82 (m, 1H), 2,40 (dd, J = 12,9, 8,2 Hz, 1H), 2,03-1,78 (m, 1H), 1,64-1,39 (m, 2H), 1,37-1,16 (m, 4H), 0,84 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,74-0,42 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, CDCls) 8180,16, 172,50, 166,33, 157,43, 151,85, 148,55, 134,84, 123,63, 123,28, 54,52, 54,10, 51,66, 40,86, 38,86, 29,99, 28,76, 22,77, 21,17, 13,87, 12,48, 8,58.
HRMS (ESI): se calculó para C21H28N5O4 [M+1]+ = 414,2141; se encontró 414,2146.
Ejemplo 12
Síntesis de W-hidroxi-W-(^R)-2-(('S)-6-(5-(piridin-2-il)-1,3,4-oxadiazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptano-5-carbonil)hexil)carboxamida
Figure imgf000047_0001
Etapa 1: A una disolución de ácido S)-5-(terc-butoxicarbonil)-5-azaespiro[2.4]heptano-6-carboxílico (1,0 g, 4,14 mmol) disuelto en DMF (10 ml), se añadió NMI (1,8 ml, 22 mmol), y MsCI (475 mg, 4,14 mmol) se añadió gota a gota a 0 °C. La mezcla se agitó durante 15 min. A continuación, se añadió 2-piridinformilhidrazida (569 mg, 4,14 mmol). Después de reaccionar durante 6 horas, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con disolución acuosa de ácido cítrico al 10 %. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2x50 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con disolución acuosa de bicarbonato sódico saturada y cloruro sódico sucesivamente, y después se concentró para producir un producto oleoso incoloro (1,5 g, 100 % de rendimiento).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 361,09, tR = 2,10 min.
Etapa 2: A una disolución de la sustancia oleosa (1,5 g, 4,14 mmol) disuelta en THF (20 mmol), se añadió reactivo Burgess (2,9 g, 10,35 mmol) en lotes. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Después de la finalización de la reacción, la disolución de reacción se diluyó con éter dietílico, y luego se añadió agua. La fase orgánica separada se lavó dos veces con cloruro de sodio saturado, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró para dar un producto en bruto (1,4g, 100 % de rendimiento).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 343,13, tR = 2,53 min.
Etapa 3: La sustancia oleosa (1,4 g, 4,13 mmol) se disolvió en DCM/TFA 2:1 (6 ml/3 ml), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de la finalización de la reacción, a la disolución de reacción se añadieron unas pocas gotas de agua, y se neutralizó con carbonato de sodio sólido, seguido de secado sobre sulfato de sodio anhidro, y filtración para retirar material insoluble. El filtrado se concentró para secarse para dar álcali libre (1,0 g, 100 % de rendimiento).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 243,08, tR = 1,34 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCh)8 8,78 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,25 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,89 (td, J = 7,8, 1,6 Hz, 1H), 7,46 (ddd, J = 7,6, 4,9, 0,9 Hz, 1H), 4,78 (dd, J = 7,4, 6,4 Hz, 1H), 3,14 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,98 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,37-2,15 (m, 2H), 0,74-0,52 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, CDCla) 8169,54, 164,25, 150,23, 143,57, 137,21, 125,79, 123,10, 54,79, 54,16, 39,87, 22,21, 11,59, 11,32.
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). La sustancia oleosa incolora se obtuvo por cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 25 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 413,76, tR = 2,47 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 88,45 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,19-7,85 (m, 1H), 7,75-7,25 (m, 2H), 7,22-7,00 (m, 1H), 5,50­ 4,92 (m, 1H), 4,04-3,44 (m, 2H), 3,42-2,96 (m, 2H), 2,98-2,60 (m, 1H), 2,58-2,07 (m, 1H), 2,06-1,57 (m, 1H), 1,45-1,17 (m, 2H), 1,16-0,92 (m, 4H), 0,72-0,53 (m, 3H), 0,47-0,16 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, CDCh) 8175,27, 172,56, 167,63, 166,49, 164,20, 163,74, 161,76, 157,54, 150,29, 150,15, 143,56, 141,99, 138,38, 137,11, 126,75, 125,69, 123,48, 123,00, 54,59, 53,87, 53,56, 53,09, 51,04, 47,66, 41,11, 40,99, 38,69, 38,64, 30,74, 30,04, 29,13, 28,77, 22,91, 22,74, 21,02, 19,07, 15,71, 13,86, 13,78, 12,41, 8,83, 8,68, 6,36.
HRMS (ESI): se calculó para C21H28N5O4 [M+1]+ = 414,2141; se encontró 414,2157.
Ejemplo 13
Síntesis ]heptano-5-carbon¡l) hex¡l)-W-h¡drox¡am¡da
Figure imgf000048_0001
Etapa 1: A una d¡soluc¡ón de ác¡do ('S)-5-(terc-butox¡carbon¡l)-5-azaesp¡ro[2.4]heptano-6-carboxíl¡co (2,4 g, 10 mmol) d¡suelto en DMF (25 ml), se añad¡ó NMI (1,8 ml, 22 mmol). Después de enfr¡ar a 0 °C, MsCl (0,78 ml, 10 mmol) se añad¡ó gota a gota. La mezcla se agitó durante 15 m¡n, segu¡do de la ad¡c¡ón con 2-p¡r¡d¡na h¡draz¡na (1,1 g, 10 mmol). Después de reacc¡onar durante 6 horas, la mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con acetato de et¡lo, se añad¡ó agua (100 ml), y se extrajo con acetato de etilo (2x50 ml). La fase orgán¡ca se lavó con cloruro de sod¡o saturado, segu¡do de evaporac¡ón rotator¡a para dar un producto en bruto. Se obtuvo sól¡do blanquec¡no med¡ante reducc¡ón a pulpa con éter d¡etíl¡co (2,35 g, 71 % de rend¡m¡ento).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 332,86, tR = 1,74 m¡n.
Etapa 2: A una d¡soluc¡ón del sólido (2,35 g, 7,1 mmol) d¡suelto en d¡cloroetano DCE (30 ml), se añad¡ó react¡vo de Lawesson (2,9 g, 7,1 mmol). La mezcla se calentó a 80 °C en atmósfera de n¡trógeno para reacc¡onar durante 3 horas. Después de la f¡nal¡zac¡ón de la reacc¡ón, la d¡soluc¡ón de reacc¡ón se lavó con d¡soluc¡ón de carbonato sód¡co saturada, d¡soluc¡ón acuosa de ác¡do cítrico al 10 %, y cloruro de sod¡o saturado suces¡vamente. La mezcla de reacc¡ón concentrada se pur¡f¡có a través de columna de gel de síl¡ce (eluyente: DCM/MeOH = 50/1 a 30/1) para dar una sustanc¡a oleosa ¡ncolora (2,0 g, 90 % de rend¡m¡ento).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 315,22, tR = 2,19 m¡n.
Etapa 3: A una d¡soluc¡ón de la sustanc¡a oleosa (2,0 g, 6,36 mmol) d¡suelta en 20 ml de éter d¡etíl¡co, se añad¡eron 10 ml de d¡soluc¡ón de HCl/MeOH (5 M). La mezcla se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante la noche. El prec¡p¡tado resultante recog¡do se secó para dar un sól¡do blanco (820 mg, 45 % de rend¡m¡ento).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 214,79, tR = 1,17 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, D2O )88,68 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 8,10-7,95 (m, 2H), 7,55 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 5,76 (dd, J = 6,8 Hz, 1H), 3,61 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,48 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 2,70-2,53 (m, 2H), 0,95-0,71 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8145,96, 143,31, 137,51, 124,76, 118,88, 111,94, 52,75, 52,36, 36,80, 19,88, 10,36, 9,63. Etapa 4: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 4 en la síntes¡s de la fórmula general (X2). La sustanc¡a oleosa ¡ncolora se obtuvo med¡ante cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rend¡m¡ento en dos etapas del 23 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 386,03, tR = 2,00 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCls) 88,49-8,35 (m, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,77-7,71 (m, 1H), 7,28-7,21 (m, 1H), 7,03-6,76 (m, 1H), 5,79-5,39 (m, 1H), 4,04-3,77 (m, 2H), 3,78-3,37 (m, 2H), 3,24-2,90 (m, 1H), 2,87-2,59 (m, 1H), 2,40-2,16 (m, 1H), 1,62­ 1,30 (m, 2H), 1,22-0,99 (m,4H), 0,93-0,47 (m, 7H).
RMN 13C (101 MHz, CDCla) 8172,93, 157,21, 149,67, 147,19, 127,20, 123,46, 116,01, 113,42, 54,93, 51,40, 48,34, 41,16, 39,13, 29,91, 28,77, 22,45, 21,39, 13,72, 11,62, 10,36.
HRMS (ESI): se calculó para C2oH27N5OaNa [M+Na]+ = 408,2012; se encontró 408,2029.
Ejemplo 14
Síntesis de ('S/)-5-((R/)-2-((W-h¡drox¡fonTiam¡do)met¡l)hex¡lcarboml)-A/-(4-morfol¡nofeml)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000049_0001
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 302,05, tR = 1,06 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,82 (s, 1H), 7,52 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,55 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 3,78-3,67 (m, 4H), 3,19 (dd, J = 37,9, 11,2 Hz, 2H), 3,08-3,02 (m, 4H), 2,33 (dd, J = 12,9, 8,2 Hz, 1H), 2,01 (dd, J = 12,9, 7,6 Hz, 1H), 0,78-0,53 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8165,87, 147,72, 130,32, 120,50, 115,35, 66,04, 59,59, 51,66, 48,71, 37,81,20,35, 10,34, 9,73.
Etapa 3: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 4 en la síntes¡s de la fórmula general (X2). Se obtuvo sól¡do blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rend¡m¡ento en dos etapas del 30 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 473,29, tR = 1,79 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, CDCh) 87,80 (s, 1H), 7,40 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 6,82 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 4,83 (s, 1H), 4,17-3,64 (m, 7H), 3,53-3,27 (m, 2H), 3,08 (s, 5H), 2,16 (s, 2H), 1,28 (d, J = 20,0 Hz, 6H), 0,84 (s, 3H), 0,80-0,50 (m, 4H).
Ejemplo 15
Síntes¡s de SJ-5-((RJ-2-(('W-h¡drox¡formam¡do)met¡l)hex¡lcarbon¡l)-W-(p¡raz¡n-2-¡l)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-am¡da
Figure imgf000049_0002
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ =219,14, tR = 0,57 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O )88,98 (d, J = 96,9 Hz, 1H), 8,31 (t, J = 81,8 Hz, 2H), 4,66-4,49 (m, 1H), 3,26-2,81 (m, 2H), 2,29-1,62 (m, 2H), 0,63-0,09 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8148,55, 144,82, 137,12, 133,80, 60,43, 52,76, 37,11, 20,13, 9,77, 8,95, 8,64.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 26 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 390,19, tR = 1,56 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 88,48-8,12 (m, 3H), 7,82 (s, 1H), 5,31 (s, 1H), 4,96 (s 1H), 3,89 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 3,76­ 2,54 (m, 4H), 2,30-2,20 (m, 1H), 1,77-1,28 (m, 7H), 0,86 (s, 3H), 0,81-0,58 (m, 4H).
Ejemplo 16
Síntesis de (^Sj-5-(^Rj-2-(('W-hidroxiformamido)metil)hexanoil)-W-(pirimidin-4-il)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000050_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 219,14, tR = 0,43 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 89,08 (s, 1H), 8,78 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,42 (t, J = 31,2 Hz, 1H), 4,82 (dd, J = 8,7, 6,4 Hz, 1H), 3,50-3,15 (m, 2H), 2,57-2,00 (m, 2H), 0,88-0,58 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,77, 152,74, 150,17, 111,15, 60,98, 52,82, 36,76, 20,08, 9,91, 8,50.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula (X2). Se obtuvo sólido blanco mediante cromatografía (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 28 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 390,19, tR = 1,76 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 89,84 (d, J = 23,5 Hz, 2H), 9,05-6,75 (m, 4H), 4,97 (t, J = 36,3 Hz, 1H), 4,27-2,60 (m, 5H), 1,58-0,98 (m, 8H), 0,97-0,30 (m, 7H).
Ejemplo 17
Síntesis de (^Sj-5-(^Rj-2-(('W-hidroxiformamido)metil)hexilcarbonil)-W-(isoxazol-5-il)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000050_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 208,11, tR = 0,57 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,66 (s, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,51 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,29 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 4,98-4,32 (m, 1H), 3,29-2,98 (m, 2H), 2,45-1,87 (m, 2H), 0,85-0,47 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8165,75, 160,13, 152,15, 88,25, 59,47, 51,64, 37,35, 20,12, 10,27, 9,78
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 27 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 379,17, tR = 1,88 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 88,14 (s, 1H), 7,78 (d, J = 23,1 Hz, 1H), 6,38 (d, J = 41,7 Hz, 1H), 5,03-4,72 (m, 1H), 3,97­ 3,79 (m, 2H), 3,54-2,85 (m, 3H), 2,11 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 1,74-1,17 (m, 7H), 0,88 (s, 3H), 0,78-0,60 (m, 4H).
Ejemplo 18
Síntesis de ('S/)-5-((R/)-3-c¡clopent¡l-2-((W-h¡drox¡formam¡do)met¡l)hexano¡l)-A/-c¡clopropil-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000051_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 182,98,= 0,55 min
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,82 (s, 1H), 3,93 (dd, J = 8,7, 5,2 Hz, 1H), 3,00-2,95 (m, 1H), 2,89 (s, 1H), 2,77-2,71 (m, 2H), 2,24-1,78 (m, 2H), 0,97-0,25 (m, 8H).
RMN 13C (101 MHz, CDCh) 8175,92, 60,94, 54,70, 39,27, 22,37, 22,09, 11,00, 9,48, 6,30, 6,27.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 28 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 352,14, tR = 1,46 min
RMN 1H (400 MHz, CDCh) 88,35 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 8,02-7,48 (m, 1H), 7,10-6,43 (m, 1H), 4,84-4,32 (m, 1H), 4,02­ 3,80 (m, 1H), 3,77-3,41 (m, 2H), 3,18-3,02 (m, 1H), 3,01-2,38 (m, 2H), 2,27-1,90 (m, 2H), 1,45-1,05 (m, 6H), 0,99-0,78 (m, 4H), 0,76-0,35 (m, 7H).
Ejemplo 19
Síntesis de ^S)-5-(^R)-2-(('W-hidroxiformamido)metil)hexanoil)-W-(4-metiltiazol-2-il)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000052_0001
general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 237,60, tR = 0,66 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 89,09 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 4,92-4,46 (m, 1H), 3,42-2,98 (m, 2H), 2,48-1,85 (m, 5H), 0,88-0,41 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,14, 157,01, 146,07, 108,59, 59,22, 51,52, 37,47, 20,13, 16,53, 10,22, 9,90.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco mediante cromatografía (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 28 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 409,53, tR = 1,90 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8 11,53 (s, 1H), 7,84 (S, 1H), 6,86 (s, 1H), 5,31 (s, 1H), 5,13-2,78 (m,5H), 2,68-1,89 (m, 4H), 1,42 (dd, J = 104,6, 66,9 Hz,7H), 1,11-0,17 (m, 7H).
Ejemplo 20
Síntesis de SJ-5-(('R/)-3-ciclopropil-2-((W-hidroxiformamido)metil)propionil)-W-(oxazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000052_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 208,32, tR = 0,36 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,77 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 4,64 (s, 1H), 3,19 (dd, J = 12,2, 6,2 Hz, 2H), 2,38 (dd, J = 12,9, 8,5 Hz, 1H), 2,01 (dd, J = 12,8, 6,7 Hz, 1H), 0,67 (d, J = 9,3 Hz, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,30, 152,62, 136,22, 125,77, 59,63, 51,56, 37,35, 20,08, 10,36, 9,71.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), el rendimiento para las tres etapas fue del 22 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 379,52, tR = 1,83 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,57-7,39 (m, 1H), 7,02 (d, J = 15,1 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 3,77 (d, J = 9,5 Hz, 2H), 3,48 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,12-2,89 (m, 2H), 2,83-2,63 (m, 2H), 1,75-1,13 (m, 11H), 0,96-0,60 (m, 4H).
Ejemplo 21
Síntesis de S)-5-((RJ-2-(('A/-h¡drox¡formam¡do)met¡l)hexano¡l)-A/-(5-met¡l¡soxazol-3¡l)-5-esp¡ro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000053_0001
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 221,79, tR = 0,93 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,71 (s, 1H), 6,62 (s, 1H), 4,56 (s, 1H), 3,17 (d, J = 11,9 Hz, 2H), 2,39 (s, 2H), 2,33 (dd, J = 12,8, 8,5 Hz, 1H), 1,98 (dd, J = 12,9, 7,0 Hz, 1H), 0,65 (d, J = 14,3 Hz, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8170,05, 167,12, 157,36, 96,21, 59,47, 51,57, 37,49, 20,16, 12,10, 10,16, 9,88.
Etapa 3: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El proced¡m¡ento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntes¡s de la fórmula general (X2). Se obtuvo sól¡do blanco med¡ante cromatografía (DCM: MeOH = 10:1), con un rend¡m¡ento en dos etapas del 32 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 393,22, tR = 1,69 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 811,00 (d, J = 65,0 Hz, 1H), 8,45-7,49 (m, 1H), 6,61 (s, 1H), 4,66 (d, J = 79,9 Hz, 1H), 3,73-3,15 (m, 5H), 2,43 (d, J = 56,1 Hz, 5H), 2,20-1,69 (m, 2H), 1,66-1,02 (m, 6H), 0,86 (s, 3H), 0,58 (d, J = 30,4 Hz, 4H).
Ejemplo 22
Síntes¡s de SJ-5-((RJ-2-(('W-h¡drox¡formam¡do)met¡l)hex¡lcarbon¡l)-W-(t¡azol-2-¡l)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-am¡da
Figure imgf000053_0002
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 224,38, tR = 0,92 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,84 (s, 1H), 7,53 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,79-4,59 (m, 1H), 3,21 (ddd, J = 15,7, 10,7, 5,6 Hz, 2H), 2,37 (dd, J = 12,9, 8,4 Hz, 1H), 2,03 (dd, J = 13,0, 6,9 Hz, 1H), 0,77-0,57 (m, 4H). RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,07, 157,46, 137,44, 114,41, 59,19, 51,59, 37,46, 20,16, 10,22, 9,94.
Etapa 3: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 26 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 395,04, tR = 1,69 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCh) 87,88 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,49-6,90 (m, 1H), 5,38 (d, J = 29,3 Hz, 1H), 4,10 (dd, J = 25,4, 13,2 Hz, 1H), 4,01 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,41 (dd, J = 33,5, 11,2 Hz, 2H), 3,14 (s, 1H), 2,49-2,25 (m, 1H), 1,76 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 1,39-1,26 (m, 6H), 1,02-0,80 (m, 3H), 0,69-0,53 (m, 4H).
Ejemplo 23
Síntesis de SJ-5-((R/)-2-((W-hidroxiformamido)metil)hexanoil)-A/-(1,3,4-tiadiazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000054_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 224,87, tR = 0,63 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,85 (dd, J = 52,8, 47,6 Hz, 1H), 9,13 (t, J = 28,8 Hz, 1H), 4,96-4,50 (m, 1H), 3,47-2,92 (m, 2H), 2,46-1,89 (m, 2H), 1,15-0,23 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,60, 158,24, 149,57, 59,31, 51,59, 37,35, 20,10, 10,31, 9,77.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 32 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 396,18, tR = 1,53 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 88,53 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 5,39-4,77 (s, 1H), 4,76-4,21(m, 1H), 4,20-3,63 (m, 1H), 3,61­ 3,44 (m,2H), 3,43-3,28 (m, 2H), 3,27-2,74 (m, 1H), 2,70-2,31 (m, 1H), 1,52-1,17 (m, 2H), 1,12-0,88 (m, 4H), 0,87-0,54 (m, 3H), 0,52-0,03 (m, 4H).
Ejemplo 24
Síntesis de W-(('R/)-2-(S)-6-(1-(2-(W,W-d¡met¡l)et¡l)-1H-benzo[d]¡m¡dazol-2-¡l)-5-azaspiro[2.4]heptano-5-carbonil)hexanoil)-W-hidroxiformamida
Figure imgf000054_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 del ejemplo 1.
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 del ejemplo 1.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 del ejemplo 1.
Etapa 4: El producto obtenido en la etapa 3 se disolvió en THF, luego se añadieron 2,5 veces equivalentes de NaH.
30 minutos después, se añadieron 1,5 veces equivalentes de dimetilaminocloroetano. La mezcla se calentó a reflujo para reaccionar a 50 °C. Después de la finalización de la reacción, la mezcla de reacción se añadió con agua y eA, se extrajo, y se secó sobre sulfato de sodio anhidro para la concentración, seguido de hacerse pasar a través de columna para dar un producto.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 285,17, tR = 0,57 min.
RMN1H (400 MHz, D2O) 87,80-7,61 (m, 2H), 7,58-7,39 (m, 2H), 5,50 (dd, J = 9,1,7,8 Hz, 1H), 4,93-4,76 (m, 2H), 3,69­ 3,22 (m, 4H), 2,96 (s, 6H), 2,67-2,22 (m, 2H), 0,88-0,63 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8147,40, 135,78, 132,90, 126,31, 126,04, 117,18, 111,46, 54,06, 52,87, 52,72, 43,42, 39,33, 38,01, 20,39, 11,70, 7,58.
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 6: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco por liofilización, con un rendimiento en dos etapas del 27 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 456,35, tR = 1,56 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 88,35 (s, 1H), 7,90-7,72 (m, 2H), 7,40-7,31 (m, 2H), 5,89-5,44 (m, 1H), 5,45-5,21 (m, 1H), 4,67-4,47 (m, 1H), 4,31-3,97 (m, 3H), 3,85-3,72 (m, 1H), 3,55-3,50 (m 1H), 3,46-3,30 (m,1H), 2,92-2,66 (m, 8H), 2,16­ 1,89 (m, 1H), 1,87-1,62 (m, 1H), 1,46-1,34 (m, 2H), 1,32-1,19 (m, 5H), 0,84-0,71 (m, 3H), 0,69-049 (m, 4H).
Ejemplo 25
Síntesis de ('S/)-5-((R/)-3-c¡clopent¡l-2-(('A/-h¡drox¡formam¡do)met¡l)prop¡onil)-W-(4-morfol¡nofen¡l)-5-esp¡ro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000055_0001
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 302,05, tR = 1,06 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,82 (s, 1H), 7,52 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,55 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 3,78-3,67 (m, 4H), 3,19 (dd, J = 37,9, 11,2 Hz, 2H), 3,08-3,02 (m, 4H), 2,33 (dd, J = 12,9, 8,2 Hz, 1H), 2,01 (dd, J = 12,9, 7,6 Hz, 1H), 0,78-0,53 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8165,87, 147,72, 130,32, 120,50, 115,35, 66,04, 59,59, 51,66, 48,71, 37,81, 20,35, 10,34, 9,73.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco mediante cromatografía (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 35 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 499,31, tR = 1,76 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3)8 7,84 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 7,54-7,32 (m, 2H), 6,87 (dd, J = 13,7, 10,3 Hz, 2H), 5,05-4,71 (m, 1H), 4,22-3,80 (m, 8H), 3,23-3,00 (m, 5H), 2,06 (d, J = 8,2 Hz, 4H), 1,90-1,37 (m, 10H), 0,75-0,40 (m, 3H).
Ejemplo 26
Síntesis de SJ-5-(('RJ-3-c¡dopent¡l-2-(('A/-h¡drox¡formam¡do)met¡l)prop¡lcarbon¡l)-W-(p¡raz¡n-2-¡l)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000056_0001
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ =219,14, tR = 0,57 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 88,98 (d, J = 96,9 Hz, 1H), 8,31 (t, J = 81,8 Hz, 2H), 4,66-4,49 (m, 1H), 3,26-2,81 (m, 2H), 2,29-1,62 (m, 2H), 0,63-0,09 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8148,55, 144,82, 137,12, 133,80, 60,43, 52,76, 37,11, 20,13, 9,77, 8,95, 8,64.
Etapa 3: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 4 en la síntes¡s de la fórmula general (X2). Se obtuvo sól¡do blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rend¡m¡ento en dos etapas del 32 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 416,21, tR = 1,65 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 89,48 (s, 1H), 8,42-8,25 (m, 1H), 8,22 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 46,4 Hz, 1H), 4,93 (s, 1H), 4,03-3,50 (m, 3H), 3,36 (m, 1H), 3,19 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 2,23 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 2,02-1,19 (m, 12H), 0,83­ 0,59 (m, 4H).
Ejemplo 27
Síntes¡s de SJ-5-((RJ-3-c¡clopent¡l-2-(('W-h¡drox¡formam¡do)met¡l)prop¡on¡l)-W-(p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)-5-esp¡ro[2.4]heptano-6-carboxam¡da
Figure imgf000056_0002
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 219,14, tR = 0,43 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 89,08 (s, 1H), 8,78 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,42 (t, J = 31,2 Hz, 1H), 4,82 (dd, J = 8,7, 6,4 Hz, 1H), 3,50-3,15 (m, 2H), 2,57-2,00 (m, 2H), 0,88-0,58 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,77, 152,74, 150,17, 111,15, 60,98, 52,82, 36,76, 20,08, 9,91, 8,50.
Etapa 3: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco mediante cromatografía (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 28 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 416,21, tR = 1,26 min.
RMN1H (400 MHz, CDCls) 811,25-9,16 (m, 2H), 9,12-8,46 (m, 2H), 8,42-7,54 (m, 2H), 5,30 (s, 1H), 4,15-3,60 (m, 2H), 3,23 (ddt, J = 86,3, 30,4, 19,1 Hz, 3H), 2,36-1,19 (m, 13H), 0,80-0,24 (m, 4H).
Ejemplo 28
Síntesis de SJ-5-((R/)-3-ciclopentil-2-((W-hidroxiformamido)metil)propionil)-W-(5-fluoropiridin-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000057_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 236,09, tR = 1,00 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O )88,25 (s, 1H), 7,98-7,87 (m, 1H), 7,64 (dd, J = 9,2, 3,9 Hz, 1H), 4,75-4,73 (m, 1H), 3,48-3,21 (m, 2H), 2,44 (dd, J = 13,3, 9,0 Hz, 1H), 2,13 (dd, J = 13,3, 6,4 Hz, 1H), 0,79-0,54 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,10, 156,72 (d, 1 Jc -f = 250,3 Hz), 144,96, 131,48 (d, 2Jc -f = 30,9 Hz), 131,10 (d, 2Jc -f = 18,7 Hz), 118,14 (d, 3Jc -f = 6,2 Hz).
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 36 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 434,22, tR = 1,95 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 810,33 (s, 1H), 8,64-7,75 (m, 2H), 7,61-6,95 (m, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,11-3,74 (m, 1H), 3,71­ 3,49 (m, 1H), 3,46-2,87 (m, 2H), 2,86-2,50 (m, 1H), 2,47-2,07 (m, 1H), 1,72 (m, 6H), 1,53-1,17 (m, 4H), 1,16-0,76 (m, 2H), 0,73-0,21 (m, 3H).
Ejemplo 29
Síntesis de SJ-5-((RJ-3-c¡clopent¡lmet¡l-2-(('W-hidrox¡formam¡do)met¡l)prop¡on¡l)-W-(5-met¡lt¡azol-2-¡l)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000057_0002
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 238,45, tR = 1,09 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O )87,24 (s, 1H), 4,77 (dd, J = 8,9, 6,5 Hz, 1H), 3,24 (s, 2H), 2,38 (dd, J = 13,4, 9,1 Hz, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,05 (dd, J = 13,4, 6,3 Hz, 1H), 0,72-0,45 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8168,01, 159,21, 129,86, 124,06, 60,16, 52,75, 36,68, 20,02, 11,03, 9,78, 8,73.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula (X2). Se obtuvo sólido blanco mediante cromatografía (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 35 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 435,24, tp = 1,93 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCls) 813,75 (d, J = 200,5 Hz, 1H), 10,54 (s, 1H), 7,67 (dd, J = 86,8, 36,9 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 89,5 Hz, 1H), 5,67-4,98 (m, 1H), 4,85-2,78 (m, 5H), 2,58-1,06 (m, 17H), 0,96-0,31 (m, 4H).
Ejemplo 30
Síntesis de ('SJ-5-((R/)-3-ciclopentil-2-((W-hidroxiformamido)metil)propionil)-W-(3-fluoropiridin-2-il)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000058_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 235,90, tp = 0,60 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 88,20 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,06 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 7,56-7,50 (m, 1H), 4,90-4,79 (m, 1H), 3,31 (s, 2H), 2,61-2,39 (m, 1H), 2,15 (dd, J = 13,4, 6,1 Hz, 1H), 0,76-0,54 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,94, 150,12 (d, J = 255,5 Hz), 138,18, 137,92 (d, J = 13,4 Hz), 130,12 (d, J = 16,9 Hz), 123,10 (d, J = 5,8 Hz), 60,39, 52,83, 37,21,20,06, 9,96, 8,50.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula (X2). Se obtuvo sólido blanco mediante cromatografía (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 38 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 433,22, tR = 1,65 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 89,40 (d, J = 352,7 Hz, 1H), 8,24 (dd, J = 55,9, 22,9 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 28,7 Hz, 1H), 7,65-7,41 (m, 1H), 7,39-7,03 (m, 1H), 5,24-4,45 (m, 1H), 4,24-3,99 (m, 1H), 3,97-3,58 (m, 2H), 2,88 (dddd, J = 100,0, 91,1, 60,9, 42,5 Hz, 2H), 2,44-1,37 (m, 11H), 1,18-0,98 (m, 2H), 0,93-0,50 (m, 4H).
Ejemplo 31
Síntesis de ^S)-5-(('R)-3-ciclopentil-2-(('W-hidroxiformamido)metil)propionil)-W-(1H-pirazol-3-il)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000059_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
RMN1H (400 MHz, DMSO) 811,53 (s, 1H), 10,66 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,94 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 6,52 (s, 1H), 4,70-4,51
(m, 1H), 3,31-3,24 (m, 1H), 3,21-3,15 (m, 1H), 2,43-2,27 (m, 1H), 2,01 (dd, J = 12,7, 7,5 Hz, 1H), 0,80-0,57 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8165,97, 144,77, 96,15, 55,94, 51,54, 37,61, 18,42, 10,22, 9,83.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 31 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 404,56, tp = 1,16 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 811,40 (s, 1H), 11,18 (s, 1H), 7,92-7,62 (m, 1H), 7,58-7,36 (m, 1H), 6,92 (d, J = 66,8 Hz,
1H), 5,51-5,21 (m, 1H), 4,60 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 4,36-3,96 (m, 2H), 3,81-3,66 (m, 2H), 2,81-2,44 (m, 2H), 2,36-1,62 (m,
11H), 0,76-0,19 (m, 4H).
Ejemplo 32
Síntesis de ('S/)-5-((R/)-3-c¡clopent¡l-2-((W-h¡drox¡formam¡do)met¡l)propion¡l)-A/-c¡cloprop¡l-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000059_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 182,98, tp = 0,550 min
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,82 (s, 1H), 3,93 (dd, J = 8,7, 5,2 Hz, 1H), 3,00-2,95 (m, 1H), 2,89 (s, 1H), 2,77-2,71 (m,
2H), 2,24-1,78 (m, 2H), 0,97-0,25 (m, 8H).
RMN 13C (101 MHz, CDCh) 8175,92, 60,94, 54,70, 39,27, 22,37, 22,09, 11,00, 9,48, 6,30, 6,27.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula
Figure imgf000059_0003
general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 27 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 378,16, tR = 1,60 min
RMN 1H (400 MHz, CDCh) 88,67-7,74 (m, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,05-6,31 (m, 1H), 4,89-4,33 (dt, J = 14,5, 10,4 Hz, 1H),
4,04-3,79 (m, 1H), 3,79-3,64 (m, 1H), 3,61-3,13 (m, 2H), 3,13-2,84 (m, 1H), 2,84-2,57 (m, 1H), 2,29-2,05 (m, 1H), 1,88­
1,54 (m, 6H), 1,53-1,04 (m, 4H), 1,03-0,18 (m, 7H).
Ejemplo 33
Síntesis de SJ-5-((R/)-3-c¡clopent¡lmet¡l-2-(('A/-h¡drox¡formam¡do)met¡l)prop¡on¡l)-W-(4-met¡lt¡azol-2-¡l)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000060_0001
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 237,60, tR = 0,66 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 89,09 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 4,92-4,46 (m, 1H), 3,42-2,98 (m, 2H), 2,48-1,85 (m, 5H), 0,88-0,41 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,14, 157,01, 146,07, 108,59, 59,22, 51,52, 37,47, 20,13, 16,53, 10,22, 9,90.
Etapa 3: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El proced¡m¡ento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntes¡s de la fórmula general (X2). Se obtuvo sól¡do blanco med¡ante cromatografía (DCM: MeOH = 10:1), con un rend¡m¡ento en dos etapas del 29 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 435,24, tR = 1,91 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,87 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 6,75-6,30 (m, 1H), 4,93 (s, 1H), 4,26-3,35 (m, 6H), 2,22-1,36 (m, 16H), 0,83-0,48 (m, 4H).
Ejemplo 34
Síntes¡s de éster metíl¡co de ác¡do 3-(SJ-5-(('RJ-3-c¡clopent¡l-2-(('W-h¡drox¡lam¡no)met¡l)prop¡on¡l)-5-esp¡ro[2.4]heptano-6-form¡l)t¡ofeno-2-carboxíl¡co
Figure imgf000060_0002
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 281,76, tR = 1,85 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 811,86 (s, 1H), 8,11 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 3,92 (dt, J = 16,2, 8,1 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H), 2,98 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,71 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,11 (dd, J = 12,4, 9,0 Hz, 1H), 1,80 (dd, J = 12,4, 4,4 Hz, 1H), 0,63-0,33 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8173,46, 163,00, 143,39, 133,02, 121,38, 109,96, 61,15, 54,16, 51,94, 39,11, 22,40, 11,14, 9,04.
Etapa 3: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 4 en la síntes¡s de la fórmula general (X2). Se obtuvo sól¡do blanco med¡ante cromatografía (DCM: MeOH = 10:1), con un rend¡m¡ento en dos etapas del 37 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 478,45, tR = 2,19 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCls) 811,29-10,18 (m, 1H), 8,61-7,01 (m, 3H), 4,73 (ddd, J = 34,4, 10,2, 5,4 Hz, 1H), 4,17-3,27 (m, 6H), 2,14-1,00 (m, 14H), 0,94-0,37 (m, 4H).
Ejemplo 35
Síntesis de W-((R/)-2-(c¡dopent¡lmet¡l)-3-(('S/)-6-(1,1-d¡ox¡t¡omorfol¡na-4-carboml)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-5-¡l)-3-prop¡lcarboml)-W-h¡drox¡formamida
Figure imgf000061_0001
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 259,00, tR = 0,37 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 89,94 (t, J = 76,9 Hz, 1H), 8,16 (t, J = 56,7 Hz, 1H), 4,42-3,90 (m, 1H), 3,64-3,25 (m, 2H), 3,21-2,53 (m, 8H), 2,53-2,01 (m, 2H), 2,01-0,66 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,37, 57,55, 51,79, 50,64, 50,55, 43,26, 40,80, 36,27, 33,89, 20,33, 10,13, 9,41.
Etapa 3: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 4 en la síntes¡s de la fórmula general (X2). Se obtuvo sól¡do blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rend¡m¡ento en dos etapas del 27 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 456,16, tR = 1,63 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,88 (s, 1H), 4,99 (s, 1H), 4,66 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 4,26 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,98 (s, 2H), 3,93-3,66 (m, 3H), 3,61-2,94 (m, 7H), 2,09-1,94 (m, 2H), 1,92-1,20 (m, 10H), 0,80-0,50 (m, 4H).
Ejemplo 36
Síntes¡s de SJ-5-(('RJ-3-c¡clopent¡l-2-(('W-h¡drox¡formam¡do)met¡l)prop¡lcarbon¡l)-W-(oxazol-2-¡l)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-am¡da
Figure imgf000061_0002
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 208,32, tR = 0,36 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,77 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 4,64 (s, 1H), 3,19 (dd, J = 12,2, 6,2 Hz, 2H), 2,38 (dd, J = 12,9, 8,5 Hz, 1H), 2,01 (dd, J = 12,8, 6,7 Hz, 1H), 0,67 (d, J = 9,3 Hz, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,30, 152,62, 136,22, 125,77, 59,63, 51,56, 37,35, 20,08, 10,36, 9,71.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 24 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 405,06, tR = 1,58 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCls) 88,72 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,14 (s, 1H), 5,36 (s, 1H), 4,18 (s, 1H), 3,65 (s, 1H), 3,42-2,94 (m, 3H), 2,20 (s, 1H), 1,93-0,72 (m, 12H), 0,42-0,13 (m, 4H).
Ejemplo 37
Síntesis de ('SJ-5-(('R/)-3-ciclopentil-2-((W-hidroxiformamido)metil)propionil)-W-(isoxazol-5-il)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000062_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 208,11, tR = 0,57 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,66 (s, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,51 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,29 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 4,98-4,32 (m, 1H), 3,29-2,98 (m, 2H), 2,45-1,87 (m, 2H), 0,85-0,47 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8165,75, 160,13, 152,15, 88,25, 59,47, 51,64, 37,35, 20,12, 10,27, 9,78
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 32 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 405,53, tR = 1,32 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 810,59 (d, J = 42,7 Hz, 1H), 8,26-8,04 (m, 1H), 7,81 (s, 1H), 6,44-6,16 (m, 1H), 4,98-4,70 (m, 1H), 3,94-3,69 (m, 2H), 3,56-3,28 (m, 2H), 2,31-2,06 (m, 2H), 1,85-1,08 (m, 11H), 0,84-0,54 (m, 4H).
Ejemplo 38
Síntesis de ('S)-W-(5-(terc-butil)isoxazol-3-il)-5-(^R)-3-ciclopentil-2-(('W-hidroxiformamido)metil)propionil)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000062_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 265,07, tR = 1,44 min.
RMN1H (400 MHz, D2O)86,14 (s, 1H), 4,44-4,41 (m, 1H), 3,12-2,93 (m, 2H), 2,19 (dd, J = 13,4, 8,9 Hz, 1H), 1,86 (dd, J = 13,4, 6,1 Hz, 1H), 0,52-0,29 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8183,22, 167,90, 157,06, 93,24, 60,23, 52,67, 37,13, 32,51, 27,67, 20,09, 9,86, 8,49. Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 31 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 461,66, tR = 1,46 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 811,25 (s, 1H), 9,77 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,02-7,46 (m, 1H), 6,68 (d, J = 28,5 Hz, 1H), 4,92-4,53 (m, 1H), 4,09-3,73 (m, 2H), 3,63-3,41 (m, 2H), 3,31-2,71 (m, 2H), 1,76-1,25 (m, 20H), 0,80-0,49 (m, 4H). Ejemplo 39
Síntesis de ('S/)-5-((R/)-3-c¡clopent¡l-2-((W-h¡drox¡formam¡do)met¡l)propilcarbon¡l)-A/-(5-met¡l¡soxazol-3-¡l)-5-azaespiro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000063_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 221,79, tR = 0,93 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,71 (s, 1H), 6,62 (s, 1H), 4,56 (s, 1H), 3,17 (d, J = 11,9 Hz, 2H), 2,39 (s, 2H), 2,33 (dd, J = 12,8, 8,5 Hz, 1H), 1,98 (dd, J = 12,9, 7,0 Hz, 1H), 0,65 (d, J = 14,3 Hz, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8170,05, 167,12, 157,36, 96,21, 59,47, 51,57, 37,49, 20,16, 12,10, 10,16, 9,88.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 16 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 419,11, tR = 1,84 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,81 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 4,73 (d, J = 74,6 Hz, 1H), 3,73 (d, J = 67,7 Hz, 2H), 3,25 (m, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,05 (m, 2H), 1,66-1,16 (m, 11H), 0,57 (m, 4H).
Ejemplo 40
Síntesis de SJ-5-(SJ-3-c¡clopent¡l-2-(('W-hidrox¡formam¡do)met¡l)prop¡on¡l)-W-(t¡azol-2-¡l)-5-esp¡ro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000064_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 224,38, tR = 0,92 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,84 (s, 1H), 7,53 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,79-4,59 (m, 1H), 3,21 (ddd, J = 15,7, 10,7, 5,6 Hz, 2H), 2,37 (dd, J = 12,9, 8,4 Hz, 1H), 2,03 (dd, J = 13,0, 6,9 Hz, 1H), 0,77-0,57 (m, 4H). RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,07, 157,46, 137,44, 114,41, 59,19, 51,59, 37,46, 20,16, 10,22, 9,94.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco mediante cromatografía (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 42 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 421,00, tR = 1,84 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 811,84 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 8,51-7,68 (m, 1H), 7,34 (d, J = 60,6 Hz, 1H), 7,04-6,56 (m, 1H), 5,26-4,62 (m, 1H), 4,43-2,80 (m, 5H), 2,34-1,68 (m, 6H), 1,44-0,98 (m, 7H), 0,72 (ddt, J = 59,3, 52,3, 23,7 Hz, 4H).
Ejemplo 41
Síntesis de ('S/)-5-(('R/)-3-c¡clopent¡l-2-((W-h¡drox¡formam¡do)met¡l)propion¡l)-W-(1,3,4-t¡ad¡azol-2-¡l)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000064_0002
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 224,87, tR = 0,63 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,85 (dd, J = 52,8, 47,6 Hz, 1H), 9,13 (t, J = 28,8 Hz, 1H), 4,96-4,50 (m, 1H), 3,47-2,92 (m, 2H), 2,46-1,89 (m, 2H), 1,15-0,23 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,60, 158,24, 149,57, 59,31, 51,59, 37,35, 20,10, 10,31, 9,77.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 33 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 422,14, tR = 1,65 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3)88,80 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 6,06-5,12 (m, 1H), 5,15-4,62 (m, 1H), 4,29-3,82 (m, 1H), 3,79­ 3,02 (m, 3H), 2,99-2,34 (m, 1H), 2,31-2,15(m, 1H), 2,10-1,50 (m, 7H), 1,48-1,26 (m, 5H), 1,17-0,95 (m, 2H), 0,86-0,69 (m, 2H).
Ejemplo 42
Síntesis de W-(('R/)-3-(('SJ-6-(1H-benc¡m¡dazol-2-¡l)-5-azaesp¡ro[2.4]heptano-5-¡l)-2-(c¡clopent¡lmet¡lo)-3-prop¡lcarbon¡l)-W-hidroxiformamida
Figure imgf000065_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 del ejemplo 1.
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 del ejemplo 1.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 del ejemplo 1.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 214,16, tR = 0,94 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 87,67-7,58 (m, 2H), 7,49-7,39 (m, 2H), 5,41 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 3,55-3,46 (m, 1H), 3,25-3,15 (m, 1H), 2,68-2,57 (m, 1H), 2,39-2,28 (m, 1H), 0,85-0,60 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8144,90, 130,95, 127,05, 114,21, 36,52, 20,20, 11,92, 7,25.
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2). Se obtuvo sólido blanco a través de cromatografía en columna (DCM: MeOH = 10:1), con un rendimiento en dos etapas del 33 %. LC-MS (ESI): [M+1]+ = 412,18, tR = 1,60 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 88,44-7,11 (m, 5H), 5,58 (s, 1H), 4,04 (s, 1H), 3,89-2,64 (m, 4H), 2,51-2,02 (m, 2H), 1,95­ 0,94 (m, 11H), 0,89-0,29 (m, 4H).
Ejemplo 43
Síntesis de ^S)-5-(('R)-2-(2-(hidrox¡am¡no)-2-oxoet¡l)hexano¡l)-W-(4-morfol¡nofen¡l)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000065_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 302,05, tR = 1,06 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO)810,82 (s, 1H), 7,52 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,55 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 3,78-3,67 (m, 4H), 3,19 (dd, J = 37,9, 11,2 Hz, 2H), 3,08-3,02 (m, 4H), 2,33 (dd, J = 12,9, 8,2 Hz, 1H), 2,01 (dd, J = 12,9, 7,6 Hz, 1H), 0,78-0,53 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8165,87, 147,72, 130,32, 120,50, 115,35, 66,04, 59,59, 51,66, 48,71, 37,81, 20,35, 10,34, 9,73.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2). El rendimiento en tres etapas alcanzó el 20 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 514,83, tp = 1,56 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,34 (s, 1H), 6,90 (s, 1H), 5,06 (s, 1H), 4,46 (s, 1H), 3,71 (d, J = 18,0 Hz, 3H), 3,17 (d, J = 17,6 Hz, 3H), 2,82 (d, J = 28,7 Hz, 1H), 2,36 (s, 1H), 1,97 (s, 1H), 1,67-1,08 (m, 3H), 0,89-0,52 (m, 4H).
Ejemplo 44
Síntesis de ('Sj-5-(^Rj-2-(2-(hidroxiamino)-2-oxoetil)hexanoil)-W-(pirazin-2-il)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000066_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ =219,14, tp = 0,57 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 88,98 (d, J = 96,9 Hz, 1H), 8,31 (t, J = 81,8 Hz, 2H), 4,66-4,49 (m, 1H), 3,26-2,81 (m, 2H), 2,29-1,62 (m, 2H), 0,63-0,09 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8148,55, 144,82, 137,12, 133,80, 60,43, 52,76, 37,11, 20,13, 9,77, 8,95, 8,64.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2). El rendimiento en tres etapas alcanzó el 20 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 390,52, tR = 1,36 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 812,86-11,39 (m, 1H), 10,31 (d, J = 98,3 Hz, 1H), 7,83-6,53 (m, 3H), 5,52-4,73 (m, 1H), 4,11 (dd, J = 44,5, 40,2 Hz, 1H), 3,94-3,35 (m, 2H), 3,03-0,74 (m, 13H), 0,71-0,24 (m, 4H).
Ejemplo 45
Síntesis de SJ-5-((RJ-2-(2-(h¡drox¡am¡no)-2-oxoetil)hexano¡l)-W-(p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)-5-esp¡ro[2.4]heptano-6-carboxam¡da
Figure imgf000067_0001
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 219,14, tR = 0,43 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O)89,08 (s, 1H), 8,78 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,42 (t, J = 31,2 Hz, 1H), 4,82 (dd, J = 8,7, 6,4 Hz, 1H), 3,50-3,15 (m, 2H), 2,57-2,00 (m, 2H), 0,88-0,58 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,77, 152,74, 150,17, 111,15, 60,98, 52,82, 36,76, 20,08, 9,91, 8,50.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2). El rendimiento en tres etapas alcanzó el 20 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 390,52, tR = 1,38 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 88,97 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 4,94 (s, 1H), 3,52-2,98 (m, 3H), 2,89-2,34 (m, 3H), 1,92-1,09 (m, 7H), 0,89 (s, 3H), 0,68-0,42 (m, 4H).
Ejemplo 46
Síntesis de ('S/)-A/-(5-fluorop¡r¡d¡n-2-il)-5-((R/)-2-(2-(h¡drox¡am¡no)-2-oxoet¡l)hexano¡l)-5-esp¡ro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000067_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 236,09, tR = 1,00 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 88,25 (s, 1H), 8,11-7,80 (m, 1H), 7,65 (dd, J = 9,1, 3,7 Hz, 1H), 4,74 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 3,44­ 3,15 (m, 2H), 2,59-1,94 (m, 2H), 0,84-0,47 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,09, 157,99, 155,50, 144,99, 118,16, 118,10, 60,33, 52,77, 37,08, 20,12, 9,73, 8,73. Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2). El rendimiento en tres etapas alcanzó el 36 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 407,52, tR = 1,93 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla)810,41 (d, J = 191,4 Hz, 1H), 9,42 (d, J = 136,3 Hz, 1H), 8,11 (dt, J = 70,7, 24,8 Hz, 2H), 7,65-7,17 (m, 1H), 5,20-4,40 (m, 1H), 4,16-1,83 (m, 7H), 1,79-0,97 (m, 9H), 0,97-0,21 (m, 6H).
Ejemplo 47
Síntesis de ('S/)-5-((R/)-2-(2-(h¡drox¡am¡no)-2-oxoet¡l)hexano¡l)-W-(5-met¡lt¡azol-2-¡l)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-am¡da
Figure imgf000068_0001
Etapa 1: ¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: ¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 238,45, tR = 1,09 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 87,24 (s, 1H), 4,77 (dd, J = 8,9, 6,5 Hz, 1H), 3,24 (s, 2H), 2,38 (dd, J = 13,4, 9,1 Hz, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,05 (dd, J = 13,4, 6,3 Hz, 1H), 0,72-0,45 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8168,01, 159,21, 129,86, 124,06, 60,16, 52,75, 36,68, 20,02, 11,03, 9,78, 8,73.
Etapa 3: ¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 4: ¡ento fue el m¡smo que en la etapa 4 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 5 en la síntes¡s de la fórmula general (X2), y el rend¡m¡ento en tres etapas fue del 25 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 409,53, tR = 1,38 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 812,02 (d, J = 79,3 Hz, 1H), 10,37 (s, 1H), 9,07-8,35 (m, 1H), 7,38-6,92 (m, 1H), 5,51-4,35 (m, 1H), 3,83-3,38 (m, 2H), 3,34 (s, 2H), 2,97-2,61 (m, 1H), 2,54-2,43 (m, 2H), 2,40-2,28 (m, 2H), 2,28-1,67 (m, 4H), 1,56-1,06 (m, 6H), 0,99-0,81 (m, 2H), 0,78-0,19 (m, 4H).
Ejemplo 48
Síntes¡s de SJ-5-((RJ-2-(2-(h¡drox¡am¡no)-2-oxoet¡l)hexano¡l)-W-(p¡r¡daz¡n-3-¡l)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-am¡da
Figure imgf000068_0002
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 219,14, tR = 0,55 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 89,19 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 8,78 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,29 (dd, J = 9,2, 5,2 Hz, 1H), 4,92-4,78 (m, 1H), 3,47-3,15 (m, 2H), 2,50 (dd, J = 13,4, 9,1 Hz, 1H), 2,20 (dd, J = 13,4, 6,3 Hz, 1H), 0,85-0,59 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,33, 155,57, 145,59, 134,68, 128,12, 60,68, 52,82, 36,96, 20,13, 9,84, 8,65.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 20 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 390,26, tR = 1,68 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 810,42 (s, 1H), 8,88 (s, 1H), 8,44 (t, J = 36,8 Hz, 1H), 7,50 (s, 1H), 5,17-4,79 (m, 1H), 3,83­ 3,65 (m, 1H), 3,58 (dd, J = 19,5, 9,4 Hz, 1H), 3,18 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 2,41-2,16 (m, 2H), 2,04 (t, J = 18,5 Hz, 1H), 1,62 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 1,50-1,36 (m, 6H), 0,84 (s, 3H), 0,75-0,48 (m, 4H).
Ejemplo 49
Síntesis de ('SJ-W-(3-fluoropiridin-2-il)-5-(('R/)-2-(2-(hidroxiamino)-2-oxoetil)hexanoil)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000069_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 235,90, tR = 0,60 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 88,20 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,06 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 7,56-7,50 (m, 1H), 4,90-4,79 (m, 1H), 3,31 (s, 2H), 2,61-2,39 (m, 1H), 2,15 (dd, J = 13,4, 6,1 Hz, 1H), 0,76-0,54 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,94, 150,12 (d, J = 255,5 Hz), 138,18, 137,92 (d, J = 13,4 Hz), 130,12 (d, J = 16,9 Hz), 123,10 (d, J = 5,8 Hz), 60,39, 52,83, 37,21,20,06, 9,96, 8,50.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 22 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 407,33, tR = 1,63 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,57-10,32 (m, 1H), 10,30-10,06 (m, 1H), 9,11-8,61 (m, 1H), 8,59-7,77 (m, 2H), 7,82­ 7,13 (m, 1H), 5,25-4,52 (m, 1H), 3,75-3,52 (m, 2H), 3,34 (s, 2H), 3,22-3,01 (m, 2H), 2,95-2,57 (m, 1H), 2,36-1,70 (m, 2H), 1,55-1,25 (m, 7H), 1,11-0,35 (m, 4H).
Ejemplo 50
Síntesis de ('S)-W-ciclopropil-5-(('R)-2-(2-(hidroxiamino)-2-oxoetil)hexanoil)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000070_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la
Figure imgf000070_0002
fórmula general (X1). LC-MS (ESI): [M+1]+ = 182,98, tR = 0,550 min
RMN 1H (400 MHz, CDCh) 87,82 (s, 1H), 3,93 (dd, J = 8,7, 5,2 Hz, 1H), 3,00-2,95 (m, 1H), 2,89 (s, 1H), 2,77-2,71 (m, 2H), 2,24-1,78 (m, 2H), 0,97-0,25 (m, 8H).
RMN 13C (101 MHz, CDCla) 8175,92, 60,94, 54,70, 39,27, 22,37, 22,09, 11,00, 9,48, 6,30, 6,27.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la
Figure imgf000070_0003
fórmula general (X2). Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la
Figure imgf000070_0004
fórmula general (X2). Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 25 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 352,33, tR = 1,47 min
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 86,13-5,33 (m, 1H), 3,72 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 3,33-2,98 (m, 2H), 2,64-1,84 (m, 1H), 1,70­ 1,62 (m, 1H), 1,52-1,41 (m, 12H), 1,39-1,21 (m, 4H), 1,19-0,52 (m, 3H).
Ejemplo 51
Síntesis de ('S/)-5-((R/)-2-(2-(h¡drox¡am¡no)-2-oxoet¡l)hexanoil)-W-(4-met¡lt¡azol-2-¡l)-5-esp¡ro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000070_0005
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 219,14, tR = 0,43 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 89,09 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 4,92-4,46 (m, 1H), 3,42-2,98 (m, 2H), 2,48-1,85 (m, 5H), 0,88-0,41 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,14, 157,01, 146,07, 108,59, 59,22, 51,52, 37,47, 20,13, 16,53, 10,22, 9,90.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 29 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 409,34, tR = 1,84 min.
RMN1H (400 MHz, DMSO)8 12,02 (d, J = 79,3 Hz, 1H), 10,37 (s, 1H), 9,07-8,35 (m, 1H), 7,38-6,92 (m, 1H), 5,51-4,35 (m, 1H), 3,83-3,38 (m, 2H), 3,34 (s, 2H), 2,97-2,61 (m, 1H), 2,54-2,43 (m, 2H), 2,40-2,28 (m, 2H), 2,28-1,67 (m, 4H), 1,56-1,06 (m, 6H), 0,99-0,81 (m, 2H), 0,78-0,19 (m, 4H).
Ejemplo 52
Síntesis de SJ-A/-(1-(2-(d¡met¡lam¡no)et¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-5-((R/)-2-(2-(h¡drox¡am¡no)-2-oxoet¡l)hexano¡l)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000071_0001
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 278,38, tR = 1,10 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 88,01-7,76 (m, 1H), 7,59 (d, J = 22,1 Hz, 1H), 4,53-4,38 (m, 2H), 3,69-3,39 (m, 3H), 2,86­ 2,73 (m, 6H), 2,41-2,27 (m, 1H), 2,11-1,94 (m, 1H), 1,32-0,90 (m, 2H), 0,74-0,53 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8167,17, 133,04, 123,88, 119,97, 56,50, 52,60, 48,83, 46,22, 43,03, 37,19, 20,12, 9,59, 8,76.
Etapa 3: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 4 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 5 en la síntes¡s de la fórmula general (X2), y el rend¡m¡ento en tres etapas fue del 20 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 449,35, tR = 1,13 m¡n.
RMN 1H (500 MHz,CDCla) 87,86 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 5,30 (d, J = 161,0 Hz, 3H), 3,75 (d, J = 12,0 Hz, 3H), 3,28-2,38 (m, 10H), 2,27-0,72 (m, 11H), 0,37 (d, J = 91,8 Hz, 4H).
Ejemplo 53
Síntes¡s de SJ-5-((RJ-2-(2-(h¡drox¡am¡no)-2-oxoet¡l)hexano¡l)-W-(oxazol-2-¡l)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-carboxam¡da
Figure imgf000071_0002
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 208,32, tR = 0,36 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,77 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 4,64 (s, 1H), 3,19 (dd, J = 12,2, 6,2 Hz, 2H), 2,38 (dd, J = 12,9, 8,5 Hz, 1H), 2,01 (dd, J = 12,8, 6,7 Hz, 1H), 0,67 (d, J = 9,3 Hz, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,30, 152,62, 136,22, 125,77, 59,63, 51,56, 37,35, 20,08, 10,36, 9,71.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 23 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 379,23, tR = 1,49 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 811,57-10,73 (m, 1H), 10,59-9,67 (m, 1H), 9,10-8,40 (m, 1H), 7,86 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,17-6,58 (m, 1H), 3,71-3,47 (m, 1H), 3,34 (s, 1H), 3,03-2,77 (m, 1H), 2,70 (d, J = 8,0 Hz, 4H), 2,55-2,41 (m, 2H), 2,29­ 1,79 (m, 2H), 1,63-0,89 (m, 7H), 0,85 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 0,63-0,14 (m, 2H).
Ejemplo 54
Síntesis de ('Sj-5-(^Rj-2-(2-(hidroxiamino)-2-oxoetil)hexanoil)-W-(isoxazol-5-il)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000072_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 208,11, tR = 0,57 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,66 (s, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,51 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,29 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 4,98-4,32 (m, 1H), 3,29-2,98 (m, 2H), 2,45-1,87 (m, 2H), 0,85-0,47 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8165,75, 160,13, 152,15, 88,25, 59,47, 51,64, 37,35, 20,12, 10,27, 9,78
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 20 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 379,23, tR = 1,53 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 810,99 (t, J = 150,4 Hz, 1H), 9,89 (s, 1H), 8,45-7,95 (m, 1H), 7,27 (s, 1H), 6,63-6,16 (m, 1H), 5,05-4,48 (m, 1H), 3,98-3,33 (m, 2H), 3,11-1,04 (m, 12H), 1,01-0,28 (m, 6H).
Ejemplo 55
Síntesis de ('SJ-A/-(5-(terc-butil)isoxazol-3-il)-5-(('R/)-2-(2-(hidroxiamino)-2-oxoetil)hexanoil)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000072_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 265,07, tR = 1,44 min.
RMN1H (400 MHz, D2O )86,14 (s, 1H), 4,44-4,41 (m, 1H), 3,12-2,93 (m, 2H), 2,19 (dd, J = 13,4, 8,9 Hz, 1H), 1,86 (dd, J = 13,4, 6,1 Hz, 1H), 0,52-0,29 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8183,22, 167,90, 157,06, 93,24, 60,23, 52,67, 37,13, 32,51, 27,67, 20,09, 9,86, 8,49. Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 23 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 435,30, tR = 2,02 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 811,01 (d, J = 134,6 Hz, 1H), 10,47-9,87 (m, 1H), 6,74-6,29 (m, 1H), 5,65 (s, 1H), 5,05­ 4,42 (m, 1H), 3,96-3,16 (m, 2H), 3,05-2,71 (m, 2H), 2,51-1,95 (m, 2H), 1,36-1,13 (m, 18H), 0,90-0,50 (m, 4H).
Ejemplo 56
Síntesis de ('S/)-5-(('R/)-2-(2-(h¡drox¡amino)-2-oxoet¡l)hexano¡l)-A/-(5-met¡l¡soxazol-3-¡l)-5-esp¡ro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000073_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 221,79, tR = 0,93 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,71 (s, 1H), 6,62 (s, 1H), 4,56 (s, 1H), 3,17 (d, J = 11,9 Hz, 2H), 2,39 (s, 2H), 2,33 (dd, J = 12,8, 8,5 Hz, 1H), 1,98 (dd, J = 12,9, 7,0 Hz, 1H), 0,65 (d, J = 14,3 Hz, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8170,05, 167,12, 157,36, 96,21, 59,47, 51,57, 37,49, 20,16, 12,10, 10,16, 9,88.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 29 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 393,42, tR = 1,79 min.
RMN 1H (500 MHz, CDCla) 86,59 (s, 1H), 4,98 (s, 1H), 4,06 (d, J = 161,2 Hz, 2H), 3,46-2,23 (m, 7H), 1,96 (s, 1H), 1,72-1,14 (m, 6H), 1,03-0,28 (m, 7H).
Ejemplo 57
Síntesis de ^S)-5-(('R)-2-(2-(hidroxiamino)-2-oxoetil)hexanoil)-W-(5-(trifluorometil)tiazol-2-il)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000074_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 292,22, tR = 1,28 min
RMN 1H (400 MHz, DMSO)810,46 (s, 1H), 8,09 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 4,67 (dd, J = 8,1, 7,0 Hz, 1H), 3,26-3,17 (m, 2H), 2,36 (dd, J = 13,2, 8,5 Hz, 1H), 2,06 (dd, J = 13,2, 6,6 Hz, 1H), 0,76-0,61 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,88, 159,26, 121,96, 119,23, 117,58, 59,25, 51,77, 37,12, 20,13, 10,32, 9,60. Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 32 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 463,08, tR = 2,00 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 812,92-11,05 (m, 1H), 10,14 (s, 1H), 8,07-6,63 (m, 1H), 5,60-4,50 (m, 1H), 3,71 (ddd, J = 49,1, 46,6, 9,5 Hz, 2H), 3,46-2,27 (m, 2H), 2,08 (ddd, J = 54,9, 36,3, 19,1 Hz, 2H), 1,80-1,12 (m, 6H), 1,10-0,31 (m,7H). Ejemplo 58
Síntesis de ('R/)-3-(('S/)-6-(1H-benc¡m¡dazol-2-¡l)-5-azaesp¡ro[2.4]heptano-5-formil)-W-h¡drox¡heptanam¡da
Figure imgf000074_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 del ejemplo 1.
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 del ejemplo 1.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 del ejemplo 1.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 214,16, tR = 0,94 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 87,67-7,58 (m, 2H), 7,49-7,39 (m, 2H), 5,41 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 3,55-3,46 (m, 1H), 3,25-3,15 (m, 1H), 2,68-2,57 (m, 1H), 2,39-2,28 (m, 1H), 0,85-0,60 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8144,90, 130,95, 127,05, 114,21, 36,52, 20,20, 11,92, 7,25.
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 6: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 17 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 385,49, tR = 1,65 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 87,48 (s, 2H), 7,15 (t, J = 21,2 Hz, 2H), 5,48-5,07 (m, 1H), 3,88-3,53 (m, 2H), 3,41 (dd, J = 23,6, 16,5 Hz, 2H), 2,81 (d, J = 51,3 Hz, 1H), 2,40-2,11 (m, 2H), 1,84-1,00 (m, 9H), 0,79-0,30 (m, 4H).
Ejemplo 59
Síntesis de (R/)-3-((R/)-6-(1H-bencimidazol-2-il)-5-azaespiro[2.4]heptano-5-carbonil)-A/-hidroxiheptanamida
Figure imgf000075_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 del ejemplo 1.
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 del ejemplo 1.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 del ejemplo 1.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 385,49, tR = 1,65 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,57 (s, 2H), 7,22 (s, 2H), 5,43 (dd, J = 36,1, 29,6 Hz, 1H), 3,93-3,79 (m, 1H), 3,48-3,31 (m, 1H), 3,09-2,28 (m, 5H), 2,07-1,90 (m, 1H), 1,24 (dd, J = 26,4, 11,2 Hz, 5H), 0,78-0,61 (m, 7H).
Ejemplo 60
Síntesis de (R/)-3-(SJ-6-(1-(2-(dimetilamino)etil)-1H-bencimidazol-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptano-5-carbonil)-A/-hidroxiheptanamida
Figure imgf000075_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 del ejemplo 1.
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 del ejemplo 1.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 del ejemplo 1.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 285,17, tR = 0,57 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 87,80-7,61 (m, 2H), 7,58-7,39 (m, 2H), 5,50 (dd, J = 9,1,7,8 Hz, 1H), 4,93-4,76 (m, 2H), 3,69­ 3,22 (m, 4H), 2,96 (s, 6H), 2,67-2,22 (m, 2H), 0,88-0,63 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8147,40, 135,78, 132,90, 126,31, 126,04, 117,18, 111,46, 54,06, 52,87, 52,72, 43,42, 39,33, 38,01, 20,39, 11,70, 7,58.
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 6: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 17 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 456,34 tR = 1,23 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO)810,34 (d, J = 47,3 Hz, 1H), 9,91 (d, J = 51,5 Hz, 1H), 8,00-7,62 (m, 2H), 7,57-7,26 (m, 2H), 5,40 (dd, J = 26,3, 18,9 Hz, 1H), 5,03-4,68 (m, 2H), 4,02 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 3,76-3,66 (m, 1H), 3,64-3,50 (m, 2H), 3,04-2,76 (m, 6H), 2,50 (s, 2H), 2,48-1,85 (m, 4H), 1,46-1,17 (m, 7H), 1,20-0,99 (m, 2H), 0,86-0,58 (m, 6H).
Ejemplo 61
Síntesis de ('SJ-5-(('R/)-2-(ddopentilmetil)-4-(hidroxiamino)-4-oxobutil)-A/-(4-morfolinofenil)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000076_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 302,05, tR = 1,06 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,82 (s, 1H), 7,52 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,55 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 3,78-3,67 (m, 4H), 3,19 (dd, J = 37,9, 11,2 Hz, 2H), 3,08-3,02 (m, 4H), 2,33 (dd, J = 12,9, 8,2 Hz, 1H), 2,01 (dd, J = 12,9, 7,6 Hz, 1H), 0,78-0,53 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8165,87, 147,72, 130,32, 120,50, 115,35, 66,04, 59,59, 51,66, 48,71, 37,81,20,35, 10,34, 9,73.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 23 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 499,68, tR = 1,68 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,38 (s, 1H), 9,96-9,56 (m, 1H), 8,70 (s, 1H), 7,43 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 6,81 (t, J = 44,5 Hz, 2H), 4,63-4,33 (m, 1H), 3,72 (s, 2H), 3,60 (dd, J = 31,0, 9,4 Hz, 1H), 3,22 (d, J = 11,5 Hz, 2H), 3,03 (d, J = 3,8 Hz, 2H), 2,50 (s, 8H), 2,25-0,45 (m, 15H).
Ejemplo 62
Síntesis de ('S)-5-(^R)-2-(cidopentilmetil)-4-(hidroxilamino)-4-oxobutil)-W-(pirazin-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000077_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ =219,14, tR = 0,57 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O )88,98 (d, J = 96,9 Hz, 1H), 8,31 (t, J = 81,8 Hz, 2H), 4,66-4,49 (m, 1H), 3,26-2,81 (m, 2H), 2,29-1,62 (m, 2H), 0,63-0,09 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8148,55, 144,82, 137,12, 133,80, 60,43, 52,76, 37,11, 20,13, 9,77, 8,95, 8,64.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 27 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 416,59, tR = 1,59 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 810,15 (s, 1H), 8,46-7,88 (m, 3H), 4,78 (s, 1H), 3,88 (dd, J = 28,6, 9,4 Hz, 1H), 3,64-3,39 (m, 1H), 3,24-2,54 (m, 3H), 2,08-1,91 (m, 1H), 1,87-1,17 (m, 12H), 0,81-0,46 (m, 4H).
Ejemplo 63
Síntesis de ('S/)-5-(('R/)-2-(ddopent¡lmet¡l)-4-(h¡drox¡am¡no)-4-oxobut¡l)-W-(pir¡m¡d¡n-4-¡l)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000077_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 219,14, tR = 0,43 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 89,08 (s, 1H), 8,78 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,42 (t, J = 31,2 Hz, 1H), 4,82 (dd, J = 8,7, 6,4 Hz, 1H), 3,50-3,15 (m, 2H), 2,57-2,00 (m, 2H), 0,88-0,58 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,77, 152,74, 150,17, 111,15, 60,98, 52,82, 36,76, 20,08, 9,91, 8,50.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 24 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 416,57, tR = 1,54 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 810,08 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,58 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 8,13 (s, 1H), 4,83 (s, 1H), 3,84 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 3,73-2,64 (m, 4H), 2,13 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 1,96-1,20 (m, 12H), 0,72-0,45(m, 4H).
Ejemplo 64
Síntesis de ^Sj-5-(^Rj-2-(cidopentilmetil)-4-(hidroxiamino)-4-oxobutil)-W-(5-fluoropiridin-2-il)-5-azaspiro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000078_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 236,09, tR = 1,00 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 88,25 (s, 1H), 7,98-7,87 (m, 1H), 7,64 (dd, J = 9,2, 3,9 Hz, 1H), 4,75-4,73 (m, 1H), 3,48-3,21 (m, 2H), 2,44 (dd, J = 13,3, 9,0 Hz, 1H), 2,13 (dd, J = 13,3, 6,4 Hz, 1H), 0,79-0,54 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,10, 156,72 (d, 1 Jc -f = 250,3 Hz), 144,96, 131,48 (d, 2Jc -f = 30,9 Hz), 131,10 (d, 2Jc -f = 18,7 Hz), 118,14 (d, 3Jc -f = 6,2 Hz).
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 18 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 433,56, tR = 1,56 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 89,60 (s, 1H), 8,36-7,72 (m, 2H), 7,43-7,12 (m, 1H), 4,82 (d, J = 63,6 Hz, 1H), 3,88 (dd, J = 25,2, 9,4 Hz, 1H), 3,27-2,40 (m, 4H), 2,01-1,86 (m, 1H), 1,85-1,18 (m, 12H), 0,72-0,50 (m, 4H).
Ejemplo 65
Síntesis de SJ-5-(('RJ-2-(c¡clopent¡lmetil)-4-(h¡drox¡am¡no)-4-oxobut¡l)-A/-(5-met¡lt¡azol-2-¡l)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-amida
Figure imgf000078_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 238,45, tR = 1,09 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O )87,24 (s, 1H), 4,77 (dd, J = 8,9, 6,5 Hz, 1H), 3,24 (s, 2H), 2,38 (dd, J = 13,4, 9,1 Hz, 1H),
2,28 (s, 3H), 2,05 (dd, J = 13,4, 6,3 Hz, 1H), 0,72-0,45 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8168,01, 159,21, 129,86, 124,06, 60,16, 52,75, 36,68, 20,02, 11,03, 9,78,
Figure imgf000079_0001
8,73.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento tres etapas fue del 19 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 435,59, tR = 1,35 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCls) 810,34 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 5,01-4,58 (m, 1H), 3,95-3,64 (m, 1H), 3,54 (d, J = 10,0 Hz,
1H), 3,10-2,82 (m, 1H), 2,58-2,11 (m, 5H), 1,87-0,91 (m, 12H), 0,72-0,58 (m, 4H).
Ejemplo 66
Síntesis de ('SJ-5-(('R/)-2-(ciclopentilmetil)-4-(hidroxiamino)-4-oxobutil)-A/-(piridazin-3-il)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000079_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 219,14, tR = 0,55 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 89,19 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 8,78 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,29 (dd, J = 9,2, 5,2 Hz, 1H), 4,92-4,78
(m, 1H), 3,47-3,15 (m, 2H), 2,50 (dd, J = 13,4, 9,1 Hz, 1H), 2,20 (dd, J = 13,4, 6,3 Hz, 1H), 0,85-0,59 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,33, 155,57, 145,59, 134,68, 128,12, 60,68, 52,82, 36,96, 20,13, 9,84, 8,65.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 20 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 416,59, tR = 1,48 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 811,83-9,51 (m, 2H), 9,12-8,70 (m, 1H), 8,46 (dd, J = 30,4, 8,8 Hz, 1H), 7,69-7,34 (m, 1H),
5,44-4,71 (m, 1H), 4,31-0,87 (m, 18H), 0,83-0,17 (m, 4H).
Ejemplo 67
Síntesis de ^S)-5-(('R)-2-(ciclopentilmetil)-4-(hidroxiamino)-4-oxobutil)-W-(3-fluoropiridin-2-il)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000080_0001
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 235,90, tR = 0,60 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O )88,20 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,06 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 7,56-7,50 (m, 1H), 4,90-4,79 (m, 1H), 3,31 (s, 2H), 2,61-2,39 (m, 1H), 2,15 (dd, J = 13,4, 6,1 Hz, 1H), 0,76-0,54 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8169,94, 150,12 (d, J = 255,5 Hz), 138,18, 137,92 (d, J = 13,4 Hz), 130,12 (d, J = 16,9 Hz), 123,10 (d, J = 5,8 Hz), 60,39, 52,83, 37,21,20,06, 9,96, 8,50.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 20 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 433,56, tR = 1,49 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 810,25 (d, J = 63,9 Hz, 1H), 9,75 (s, 1H), 8,23 (dd, J = 59,2, 44,9 Hz, 1H), 7,45 (tq, J = 16,9, 8,5 Hz, 1H), 7,09 (dd, J = 26,9, 23,5 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 52,3 Hz, 1H), 4,04-3,29 (m, 2H), 3,02-0,93 (m, 16H), 0,92-0,31 (m, 4H).
Ejemplo 68
Síntesis de ('S/)-5-((R/)-2-(c¡dopent¡lmet¡l)-4-(h¡drox¡am¡no)-4-oxobut¡l)-A/-c¡cloprop¡l-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000080_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 182,98, tR = 0,550 min
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,82 (s, 1H), 3,93 (dd, J = 8,7, 5,2 Hz, 1H), 3,00-2,95 (m, 1H), 2,89 (s, 1H), 2,77-2,71 (m, 2H), 2,24-1,78 (m, 2H), 0,97-0,25 (m, 8H).
RMN 13C (101 MHz, CDCh) 8175,92, 60,94, 54,70, 39,27, 22,37, 22,09, 11,00, 9,48, 6,30, 6,27.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 25 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 378,59, tR = 1,49 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO)8 10,37 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,88-8,46 (m, 1H), 7,89-7,36 (m, 1H), 4,55-4,09 (m, 1H), 3,69­ 3,37 (m, 2H), 3,38-3,26 (m, 2H), 3,25-2,89 (m, 1H), 2,87-2,55 (m, 2H), 2,42-2,12 (m, 1H), 2,08-1,81 (m, 2H), 1,80-1,24 (m, 9H), 1,00-0,24 (m, 8H).
Ejemplo 69
Síntesis de ('S/)-5-(('R/)-2-(ddopent¡lmet¡l)-4-(h¡droxiam¡no)-4-oxobut¡l)-A/-(oxazol-2-¡l)-5-esp¡ro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000081_0001
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 208,32, tR = 0,36 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,77 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 4,64 (s, 1H), 3,19 (dd, J = 12,2, 6,2 Hz, 2H), 2,38 (dd, J = 12,9, 8,5 Hz, 1H), 2,01 (dd, J = 12,8, 6,7 Hz, 1H), 0,67 (d, J = 9,3 Hz, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,30, 152,62, 136,22, 125,77, 59,63, 51,56, 37,35, 20,08, 10,36, 9,71.
Etapa 3: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 4 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 5 en la síntes¡s de la fórmula general (X2), y el rend¡m¡ento en tres etapas fue del 25 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 405,49, tR = 1,48 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,60 (s, 1H), 7,15 (s, 1H), 5,07 (s, 1H), 3,63-3,00 (m, 3H), 2,89-2,39 (m, 3H), 1,93-1,19 (m, 12H), 0,62-0,48 (m, 4H).
Ejemplo 70
Síntes¡s de SJ-5-(('RJ-2-(c¡dopent¡lmet¡l)-4-(h¡drox¡am¡no)-4-oxobut¡l)-A/-(¡soxazol-5-¡l)-5-esp¡ro[2.4]heptano-6-carboxam¡da
Figure imgf000081_0002
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 208,32, tR = 0,36 m¡n.
RMN1H (400 MHz, DMSO)810,77 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 4,64 (s, 1H), 3,19 (dd, J = 12,2, 6,2 Hz, 2H), 2,38 (dd, J = 12,9, 8,5 Hz, 1H), 2,01 (dd, J = 12,8, 6,7 Hz, 1H), 0,67 (d, J = 9,3 Hz, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,30, 152,62, 136,22, 125,77, 59,63, 51,56, 37,35, 20,08, 10,36, 9,71.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 20 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 405,46, tp = 1,53 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 811,40-9,93 (m, 1H), 8,54-7,96 (m, 1H), 6,56-6,17 (m, 1H), 4,92-4,22 (m, 1H), 4,11-3,12 (m, 2H), 3,10-0,92 (m, 15H), 0,91-0,22 (m, 4H).
Ejemplo 71
Síntesis de SJ-5-((R/)-2-(ciclopentilmetil)-4-(hidroxiamino)-4-oxobutil)-W-(5-metilisoxazol-3-il)-5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000082_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 221,79, tp = 0,93 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,71 (s, 1H), 6,62 (s, 1H), 4,56 (s, 1H), 3,17 (d, J = 11,9 Hz, 2H), 2,39 (s, 2H), 2,33 (dd, J = 12,8, 8,5 Hz, 1H), 1,98 (dd, J = 12,9, 7,0 Hz, 1H), 0,65 (d, J = 14,3 Hz, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8170,05, 167,12, 157,36, 96,21, 59,47, 51,57, 37,49, 20,16, 12,10, 10,16, 9,88.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 45 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 419,59, tR = 1,32 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 810,80-9,61 (m, 2H), 7,27 (s, 1H), 6,83-6,31 (m, 1H), 5,32 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 4,76 (d, J = 35,4 Hz, 1H), 4,32-1,82 (m, 12H), 1,79-1,10 (m, 6H), 1,06-0,20 (m, 6H).
Ejemplo 72
Síntesis de SJ-5-((RJ-2-(c¡clopentilmet¡l)-4-(h¡drox¡am¡no)-4-oxobutano¡l)-W-(t¡azol-2-¡l)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000083_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis
Figure imgf000083_0002
a fórmula general (X1). Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis
Figure imgf000083_0003
a fórmula general (X1). LC-MS (ESI): [M+1]+ = 224,38, tR = 0,92 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,84 (s, 1H), 7,53 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,79-4,59 (m, 1H), 3,21 (ddd, J = 15,7, 10,7, 5,6 Hz, 2H), 2,37 (dd, J = 12,9, 8,4 Hz, 1H), 2,03 (dd, J = 13,0, 6,9 Hz, 1H), 0,77-0,57 (m, 4H). RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,07, 157,46, 137,44, 114,41, 59,19, 51,59, 37,46, 20,16, 10,22, 9,94.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis
Figure imgf000083_0004
a fórmula general (X2). Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis
Figure imgf000083_0005
a fórmula general (X2). Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 21 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 421,46, tR = 1,46 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 812,13 (s, 1H), 10,35 (d, J = 21,1 Hz, 1H), 8,87-8,56 (m, 1H), 7,46 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,65 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 3,80-3,41 (m, 2H), 2,99-2,75 (m, 1H), 2,23 (dd, J = 14,7, 8,7 Hz, 1H), 2,11­ 1,95 (m, 2H), 1,92-1,63 (m, 4H), 1,50 (ddd, J = 27,3, 13,9, 6,3 Hz, 5H), 1,21 (dd, J = 13,7, 7,3 Hz, 2H), 1,04 (ddd, J = 19,6, 11,1, 7,4 Hz, 2H), 0,76-0,59 (m, 3H), 0,58-0,45 (m, 2H).
Ejemplo 73
Síntesis de ('Sj-5-(^Rj-2-(ciclopentilmetil)-4-(hidroxiamino)-4-oxobutil)-W-(5-(trifluorometil)tiazol-2-il)5-espiro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000083_0006
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 292,22, tR = 1,28 min
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,46 (s, 1H), 8,09 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 4,67 (dd, J = 8,1, 7,0 Hz, 1H), 3,26-3,17 (m, 2H), 2,36 (dd, J = 13,2, 8,5 Hz, 1H), 2,06 (dd, J =13,2, 6,6 Hz, 1H), 0,76-0,61 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,88, 159,26, 121,96, 119,23, 117,58, 59,25, 51,77, 37,12, 20,13, 10,32, 9,60. Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 20 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 489,17, tR = 2,12 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 813,14-11,09 (m, 1H), 10,14 (d, J = 58,3 Hz, 1H), 7,44 (dd, J = 111,4, 81,1 Hz, 2H), 5,29­ 4,55 (m, 1H), 4,17-3,27 (m, 2H), 3,24-2,51 (m, 2H), 2,48-0,84 (m, 14H), 0,82-0,28 (m, 3H).
Ejemplo 74
Síntesis de ('S/)-5-((R/)-2-(c¡dopent¡lmet¡l)-4-(h¡drox¡am¡no)-4-oxobut¡l)-A/-(1,3,4-t¡ad¡azol-2-¡l)-5-azasp¡ro[2.4]heptano-6-carboxamida
Figure imgf000084_0001
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 1 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 en la síntes¡s de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 224,87, tR = 0,63 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,85 (dd, J = 52,8, 47,6 Hz, 1H), 9,13 (t, J = 28,8 Hz, 1H), 4,96-4,50 (m, 1H), 3,47-2,92 (m, 2H), 2,46-1,89 (m, 2H), 1,15-0,23 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8167,60, 158,24, 149,57, 59,31, 51,59, 37,35, 20,10, 10,31, 9,77.
Etapa 3: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 3 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 4 en la síntes¡s de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 5 en la síntes¡s de la fórmula general (X2), y el rend¡m¡ento en tres etapas fue del 23 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 422,14, tR = 1,58 m¡n.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 812,64 (s, 1H), 10,35 (d, J = 21,9 Hz, 1H), 9,36-9,02 (m, 1H), 8,96-8,41 (m, 1H), 4,89-4,51 (m, 1H), 2,25-1,98 (m, 2H), 1,95-0,95 (m, 12H), 0,94-0,24 (m, 4H).
Ejemplo 75
Síntes¡s de ('R/)-4-(SJ-6-(1H-benc¡m¡dazol-2-¡l)-5-azaesp¡ro[2.4]heptano-5-¡l)-3-(c¡clopent¡lmet¡lo)-W-h¡drox¡-4-oxobutanam¡da
Figure imgf000084_0002
Etapa 1: El proced¡m¡ento fue
Figure imgf000084_0003
Etapa 2: El proced¡m¡ento fue el m¡smo que en la etapa 2 del ejemplo 1.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 del ejemplo 1.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 214,16, tR = 0,94 min.
RMN 1H (400 MHz, D2O) 87,67-7,58 (m, 2H), 7,49-7,39 (m, 2H), 5,41 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 3,55-3,46 (m, 1H), 3,25-3,15 (m, 1H), 2,68-2,57 (m, 1H), 2,39-2,28 (m, 1H), 0,85-0,60 (m, 4H).
RMN 13C (101 MHz, D2O) 8144,90, 130,95, 127,05, 114,21, 36,52, 20,20, 11,92, 7,25.
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 6: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 16 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 411,53, tR = 1,34 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,97-7,47 (m, 2H), 7,49-7,28 (m, 1H), 7,21 (dd, J = 15,3, 12,4 Hz, 2H), 5,66-5,29 (m, 1H), 3,93-3,26 (m, 2H), 3,18-2,90 (m, 2H), 2,87-2,58 (m, 1H), 2,55-2,10 (m, 2H), 1,94-0,99 (m, 11H), 0,81-0,25 (m, 4H). Ejemplo 76
Síntesis de ('R/)-4-((R/)-6-(1H-bencimidazol-2-il)-5-azaespiro[2.4]heptano-5-il)-3-(dclopentilmetilo)-A/-hidroxi-4-oxobutanamida
Figure imgf000085_0001
Rotámeros preparados y aislados
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 411,53, tR = 1,32 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 812,46 (s, 1H), 7,53 (s, 2H), 7,16 (s, 2H), 5,25 (s, 1H), 3,84 (s, 1H), 2,98 (d, J = 42,9 Hz, 2H), 2,74-2,31 (m, 3H), 2,08 (s, 1H), 1,88-1,06 (m, 11H), 0,69-0,52 (m, 4H).
Ejemplo 77
Síntesis de ('S)-2-(^R)-2-(2-(hidroxiamino)-2-oxoetil)hexanoil)-W-(pirazin-2-il)-2-azaspiro[4.4]nonano-3-carboxamida
Figure imgf000085_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 246,92, tR = 1,02 min.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 23 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 418,5, tR = 1,38 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 811,17-10,66 (m, 1H), 10,24 (d, J = 95,0 Hz, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,38 (d, J = 17,7 Hz, 2H), 4,69-4,37 (m, 1H), 3,95-3,06 (m, 2H), 3,02-2,64 (m, 1H), 2,42-1,76 (m, 4H), 1,74-0,43 (m, 17H).
Ejemplo 78
Síntesis de ('SJ-W-(5-fluoropiridin-2-il)-2-(('R/)-2-(2-(hidroxiamino)-2-oxoetil)hexanoil)-2-espiro[4.4]nonano-3-carboxamida
Figure imgf000086_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 263,93, tR = 1,28 min.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 20 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 435,18, tR = 2,03 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 89,77 (d, J = 529,3 Hz, 2H), 7,82-6,38 (m, 2H), 4,73 (s, 1H), 3,96-2,84 (m, 3H), 2,63-1,91 (m, 6H), 1,89-0,45 (m, 17H).
Ejemplo 79
Síntesis de ('S)-2-(^R)-2-(2-(hidroxiamino)-2-oxoetil)hexanoil)-W-(5-metiltiazol-2-il)-2-azaspiro[4.4]nonano-3-amida
Figure imgf000086_0002
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 268,09, tR = 1,21 min.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 21 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 437,39, tR = 2,02 min.
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 87,18 (s, 1H), 5,25 (s, 1H), 3,36-3,28 (m, 2H), 3,13-3,08 (m, 1H), 2,63 (dd, J = 24,7, 10,3 Hz, 1H), 2,51-2,31 (m, 4H), 1,87-1,13 (m, 16H), 0,89 (s, 3H).
Ejemplo 80
Síntesis de SJ-2-((R/)-2-(2-(hidroxiamino)-2-oxoetil)hexanoil)-A/-(5-metilisoxazol-3-il)-2-espiro[4.4]nonano-3-carboxamida
Figure imgf000087_0001
Etapa 1: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 1 en la síntesis de la fórmula general (X1).
Etapa 2: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 2 en la síntesis de la fórmula general (X1).
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 249,23, tR = 0,98 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,71 (s, 1H), 6,62 (s, 1H), 4,56 (s, 1H), 3,17 (d, J = 11,9 Hz, 2H), 2,39 (s, 2H), 2,33 (dd, J = 12,8, 8,5 Hz, 1H), 1,98 (dd, J = 12,9, 7,0 Hz, 1H), 0,65 (d, J = 14,3 Hz, 4H).
RMN 13C (101 MHz, DMSO) 8170,05, 167,12, 157,36, 96,21, 59,47, 51,57, 37,49, 20,16, 12,10, 10,16, 9,88.
Etapa 3: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 3 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 4: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 4 en la síntesis de la fórmula general (X2).
Etapa 5: El procedimiento fue el mismo que en la etapa 5 en la síntesis de la fórmula general (X2), y el rendimiento en tres etapas fue del 30 %.
LC-MS (ESI): [M+1]+ = 421,31, tR = 1,49 min.
RMN 1H (400 MHz, DMSO) 810,88 (s, 1H), 6,62 (d, J = 31,4 Hz, 1H), 4,48-4,05 (m, 1H), 3,33 (s, 8H), 2,50 (dt, J = 3,5, 1,7 Hz, 9H), 1,87-0,99 (m, 8H), 0,96-0,73 (m, 2H).
Experimento de control 1
Los compuestos B y C fueron de las patentes CN101584694A y CN101869563A.
Tabla 8. Efecto de la introducción del anillo de tres miembros sobre la actividad
Figure imgf000087_0002
MIC medida
Puntuación de Sybyl 8,7015 7,9033 8,7192_________ 8,8965
La puntuación de Sybyl se da usando la función de puntuación del software Sybyl X2. Cuanto mayor sea la puntuación, menor será la concentración inhibidora mínima predicha. En combinación con la concentración inhibidora mínima medida en el experimento, no fue difícil encontrar que el efecto de la introducción del anillo de tres miembros sobre la actividad era obvio.
Experimento de control 2
Debido a que los inhibidores de PDF tales como LBM415 y GSK1322322 pueden producir especies activas tales como hidroxilamina aromática e hidrazinas aromáticas en el proceso metabólico, y causar metahemoglobinemia humana. Para este fin, se adoptó un método de longitud de onda continua en esta divulgación para escanear el espectro de absorción de muestras de sangre en el intervalo de longitudes de onda de 500 a 700 nm en el espectrofotómetro de ultravioleta-visible, y se calcularon los contenidos de metahemoglobina en muestras de sangre de tres voluntarios sanos, después de efectuarse por los compuestos sintetizados.
Materiales experimentales: Sistema de reducción de nicotinamida adenina dinucleótido fosfato (NADPH): glucosasfosfato de disodio, nicotinamida adenina dinucleósido fosfato y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (comprada a Shanghai yuanye Bio-Technology Co., Ltd) se añadieron a 1 ml de disolución tampón de fosfato (PBS, pH 7,4), y la mezcla se agitó en un baño de agua de tipo agitador a 37 °C durante 10 min, y después se enfrió a 0 °C. La fracción S9 de hepatocitos humanos mixtos se adquirió de Xenotech (20 mg de proteína S9 /1 ml de medio de suspensión). Se prepararon compuestos para almacenar la disolución a una concentración de 50 mM, que se almacenó a -20 °C para su uso. Se usó dapsona como reactivo experimental de control positivo, que se adquirió de Sigma Aldrich. Se preparó por cuenta propia tritón X-100 1 % p/v, se recogieron muestras de sangre usando tubos Vacutainer que contenían anticoagulantes de EDTA (BD, Franklin Lakes, EE.UU.), de las cuales se tomaron muestras de tres voluntarios sanos y se usaron inmediatamente después de la toma de muestras.
Preparación del sistema de incubación para muestras de sangre y fármacos: 250 |il del sistema de incubación consistieron en 220 |il de sangre completa, 25 |il de S9 (concentración final: 2 mg de proteína S9 / ml de disolución de incubación), 2,5 |il del sistema de formación de NADPH (concentración final: G-6-P 10 mM, NADP 1 mM, 7,5 unidades/ml) y 2,5 |il de disolución madre de un compuesto (concentración final 500 |iM). Se colocaron 2 ml de sistema de incubación en un tubo Eppendorf y se incubaron durante 5 horas a 37 °C en un baño de agua.
Determinación del contenido de metahemoglobina: Se tomaron 60 |il de una muestra incubada y se lisaron con 3,0 ml de Triton X-100 al 1 %. El contenido de metahemoglobina (MetHb) se midió mediante un espectrofotómetro ultravioleta-visible, con la disolución Triton X-100 utilizada como control en bruto. Se colocó una muestra en una cubeta, 1 minuto después, se registraron los espectros de la muestra en el intervalo de longitudes de onda de 500 nm a 700 nm. A la muestra se añadieron 2 mg de ferricianuro de potasio, y se dejó que permaneciera estacionario durante 2 minutos para la oxidación completa de hierro ferroso en la muestra, y el espectro estándar de metahemoglobina con ferricianuro de potasio saturado. El porcentaje de formación de metahemoglobina (% de MetHb) se obtuvo por la relación de absorbancia a 630 nm. % de MetHb = (A'-AB')/AM', en donde, A' fue la absorbancia total de la muestra a 630 nm, AB' fue la absorbancia de base de la sangre reducida en la muestra a 630 nm, y AM' fue la absorbancia de sangre oxidada con ferricianuro de potasio saturado a 630 nm.
Tabla 9. Evaluación de toxicidad de los compuestos sobre la metahemoglobina in vitro
Figure imgf000088_0001
Los resultados de la prueba de toxicidad in vitro mostraron que, en comparación con los fármacos de control LBM415 y GSK1322322, los compuestos de tres miembros espiro sintetizados 2, 3, 6, 7, 8 y 9 tenían menor probabilidad de formación de metahemoglobina en sangre; y la toxicidad de los compuestos de azol de isóstero de bioelectrón de amida fue muy baja.
Experimento de control 3
Tabla 10. Comparación de MIC de compuestos en ejemplos y compuesto de control frente a bacterias gramnegativas Moraxella catarrhalis
Figure imgf000089_0001
En comparación con el compuesto de control, los compuestos sintetizados tenían una actividad antibacteriana notablemente mejorada frente a las bacterias gramnegativas Moraxella catarrhalis.

Claims (11)

REIVINDICACIONES
1. Un inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros para su uso como agente antitumoral, en el que la estructura del inhibidor está representada por la siguiente fórmula (1 ):
Figure imgf000090_0001
en donde en la fórmula (1), n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2 se selecciona de anillo aromático, anillo heterocíclico aromático, anillo heterocíclico, o alquilo; y R3 es hidrógeno o alquilo.
2. El inhibidor para su uso según la reivindicación 1, en el que, en la fórmula (1), n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2se selecciona de 1H-pirazol-3-ilo, 5-fluoropiridin-1-óxido-2-ilo, 5-(terc-butil)isoxazol-3-ilo, 6-metil-N-(4-(piridin-3-il)pirimidin-2-il)fenil-1-amino-3-ilo, 3-fluoropiridin-2-ilo, 5-metiltiazol-2-ilo, 3-(piridin-3-il)fenilo, /V-(pirimidin-2-il)fenil-1 -amino-3-ilo, 4-(piridin-3-il)pirimidin-2-ilo, 4-morfolina fenilo, 2-pirazinilo, 3-piridazinilo, 4-pirimidinilo, 1-metil-1 H-pirazol-4-ilo, 5-isoxazolilo, ciclopropilo, 4-metiltiazol-2-ilo, 2-oxazolilo, 5-metilisoxazol-3-ilo, 2-tiazolilo, 1,3,4-tiadiazol-2-ilo, 5-(trifluorometil)tiazol-2-ilo, bisetilsulfonilo, benzotiazol-2-ilo, formiato-2-tienilo de 3-metilo; y R3 es hidrógeno.
3. Un inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros para su uso como agente antitumoral, en el que la estructura del inhibidor está representada por la siguiente fórmula (2 ):
Figure imgf000090_0002
en donde en la fórmula (2), n=2 o 4, R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2 es un anillo aromático, o anillo heterocíclico aromático.
4. El inhibidor para su uso según la reivindicación 3, en el que, en la fórmula (2), n = 2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; y R2 es 2-bencimidazolilo, 1,3,4-oxadioxazol, 1,2,4-oxadioxazol, o 1,3,4-triazol.
5. Un inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros para su uso como agente antitumoral, en el que la estructura del inhibidor está representada por la siguiente fórmula (3):
Figure imgf000090_0003
en la fórmula (3), n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; R2 es un anillo aromático, anillo heterocíclico aromático, anillo heterocíclico, o alquilo; y R3 es hidrógeno o alquilo.
6. El inhibidor para su uso según la reivindicación 5, en el que, en la fórmula (3), n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; y R2 se selecciona de 1H-pirazol-3-ilo, 5-fluoropiridin-1-óxido-2-ilo, 5-(terc-butil)isoxazol-3-ilo, 6-metil-W-(4-(piridin-3-il)pirimidin-2-il)fenil-1-amino-3-ilo, 3-fluoropiridin-2-ilo, 5-metiltiazol-2-ilo, 3-(piridin-3-il)fenilo, W-(pirimidin-2-il)fenil-1-amino-3-ilo, 4-(piridin-3-il)pirimidin-2-ilo, 4-morfolina fenilo, 2-pirazinilo, 3-piridazinilo, 4-pirimidinilo, 1 -metil-1 H-pirazol-4-ilo, 5-isoxazolilo, ciclopropilo, 4-metiltiazol-2-ilo, 2-oxazolilo, 5-metilisoxazol-3-ilo, 2-tiazolilo, 1,3,4-tiadiazol-2-ilo, 5-(trifluorometil)tiazol-2-ilo, bisetilsulfonilo, benzotiazol-2-ilo, o formiato-2-tienilo de 3-metilo; y R3 es hidrógeno.
7. Un inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros para su uso como agente antitumoral, en el que la estructura del inhibidor está representada por la siguiente fórmula (4):
Figure imgf000091_0001
en donde en la fórmula (4), n=2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; y R2 es un anillo aromático, o anillo heterocíclico aromático.
8. El inhibidor para su uso según la reivindicación 7, en el que, en la fórmula (4), n = 2 o 4; R1 es n-butilo o ciclopentilmetilo; y R2 es 2-bencimidazolilo, 1,3,4-oxodioxazol, 1,2,4-oxodioxazol, o 1,3,4-triazol.
9. Un inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros para su uso como agente antitumoral según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el inhibidor comprende:
Figure imgf000091_0002
Figure imgf000092_0001
Figure imgf000093_0001
El inhibidor para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en el que el agente antitumoral significa que el inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros inhibe la proliferación de células tumorales, y opcionalmente en donde que:
el inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros afecta el balance energético de células tumorales inhibiendo la péptido deformilasa de mitocondrias en células tumorales, de modo que la membrana mitocondrial se despolariza, ATP se agota y se promueve la apoptosis celular; o
el tumor comprende cáncer colorrectal, leucemia, cáncer de pulmón, cáncer gástrico, cáncer de cuello uterino, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de hígado, y osteosarcoma; o
las células tumorales comprenden línea celular de cáncer colorrectal HCT-116, línea celular de leucemia de células T Jurkat, línea celular de leucemia mieloide aguda HL60, línea celular de cáncer de pulmón A549, línea celular de cáncer gástrico MGC-803, línea celular de cáncer de cuello uterino Hela, línea celular de cáncer de mama MCF-7, línea celular de cáncer de próstata PC3, línea celular de cáncer de hígado BEL-7402, y línea celular de osteosarcoma SAOS-2.
11. Una composición farmacéutica que comprende el inhibidor de péptido deformilasa de anillo espiro de tres miembros, anillo espiro de cinco miembros como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, y un portador farmacéuticamente aceptable, para usar un agente antitumoral.
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