ES2928331T3 - Composiciones de variantes de anexina II y métodos - Google Patents
Composiciones de variantes de anexina II y métodos Download PDFInfo
- Publication number
- ES2928331T3 ES2928331T3 ES14812331T ES14812331T ES2928331T3 ES 2928331 T3 ES2928331 T3 ES 2928331T3 ES 14812331 T ES14812331 T ES 14812331T ES 14812331 T ES14812331 T ES 14812331T ES 2928331 T3 ES2928331 T3 ES 2928331T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- annexin
- antibodies
- fragment
- variant
- antigen
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 102000004149 Annexin A2 Human genes 0.000 title claims abstract description 160
- 108090000668 Annexin A2 Proteins 0.000 title claims abstract description 160
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 65
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 28
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 56
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 56
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 37
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 32
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 54
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 52
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 52
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 claims description 29
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 23
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 23
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 22
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 12
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 11
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 8
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 8
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims 1
- -1 variants thereof Substances 0.000 abstract description 7
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 51
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 46
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 46
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 41
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 32
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 19
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 18
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 18
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 17
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 17
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 17
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 17
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 16
- 102000000412 Annexin Human genes 0.000 description 15
- 108050008874 Annexin Proteins 0.000 description 15
- 102000008228 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 description 14
- 108010060888 Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 description 14
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 13
- 108010060804 Toll-Like Receptor 4 Proteins 0.000 description 11
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 11
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 10
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 10
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 10
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 10
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 10
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 9
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 9
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 9
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 210000004898 n-terminal fragment Anatomy 0.000 description 8
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 8
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 8
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 7
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 7
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 7
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 7
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 6
- 102000010168 Myeloid Differentiation Factor 88 Human genes 0.000 description 6
- 108010077432 Myeloid Differentiation Factor 88 Proteins 0.000 description 6
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 6
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 6
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 6
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 6
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 5
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 5
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 5
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 5
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 5
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 5
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 5
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 5
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 5
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 4
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 4
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 4
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 4
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 4
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 4
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 3
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 3
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 102100022297 Integrin alpha-X Human genes 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 3
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 3
- 102100031988 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Human genes 0.000 description 3
- 108050002568 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Proteins 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 230000003527 anti-angiogenesis Effects 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 3
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 3
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 3
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 3
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 3
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 229960005267 tositumomab Drugs 0.000 description 3
- 230000005909 tumor killing Effects 0.000 description 3
- JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-4-amino-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-azaniumyl-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-carboxylatobutanoyl]amino]-6-azaniumy Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N 0.000 description 2
- OEDPHAKKZGDBEV-GFPBKZJXSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2r)-3-[2,3-di(hexadecanoyloxy)propylsulfanyl]-2-(hexadecanoylamino)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)CSCC(COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC OEDPHAKKZGDBEV-GFPBKZJXSA-N 0.000 description 2
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102100023700 C-C motif chemokine 16 Human genes 0.000 description 2
- 102100036170 C-X-C motif chemokine 9 Human genes 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 101150064015 FAS gene Proteins 0.000 description 2
- 108010017707 Fibronectin Receptors Proteins 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 2
- 102000001398 Granzyme Human genes 0.000 description 2
- 108060005986 Granzyme Proteins 0.000 description 2
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 2
- 101000978375 Homo sapiens C-C motif chemokine 16 Proteins 0.000 description 2
- 101001027128 Homo sapiens Fibronectin Proteins 0.000 description 2
- 101001063991 Homo sapiens Leptin Proteins 0.000 description 2
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 2
- 101000803709 Homo sapiens Vitronectin Proteins 0.000 description 2
- 102100022337 Integrin alpha-V Human genes 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 108010050808 Procollagen Proteins 0.000 description 2
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 2
- 230000029662 T-helper 1 type immune response Effects 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 2
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 2
- 238000011226 adjuvant chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 229960000548 alemtuzumab Drugs 0.000 description 2
- 230000002494 anti-cea effect Effects 0.000 description 2
- 230000003460 anti-nuclear Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 210000000448 cultured tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 229960001776 edrecolomab Drugs 0.000 description 2
- 229940014425 exodus Drugs 0.000 description 2
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 229960003297 gemtuzumab ozogamicin Drugs 0.000 description 2
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 2
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000049953 human LEP Human genes 0.000 description 2
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 description 2
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 2
- 229950000518 labetuzumab Drugs 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 229950008001 matuzumab Drugs 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 230000000051 modifying effect Effects 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 2
- KZUNJOHGWZRPMI-UHFFFAOYSA-N samarium atom Chemical compound [Sm] KZUNJOHGWZRPMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- BNIFSVVAHBLNTN-XKKUQSFHSA-N (2s)-4-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-1-[(2s)-4-amino-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s,3r)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]hexan Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N1[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)CCC1 BNIFSVVAHBLNTN-XKKUQSFHSA-N 0.000 description 1
- RTQWWZBSTRGEAV-PKHIMPSTSA-N 2-[[(2s)-2-[bis(carboxymethyl)amino]-3-[4-(methylcarbamoylamino)phenyl]propyl]-[2-[bis(carboxymethyl)amino]propyl]amino]acetic acid Chemical compound CNC(=O)NC1=CC=C(C[C@@H](CN(CC(C)N(CC(O)=O)CC(O)=O)CC(O)=O)N(CC(O)=O)CC(O)=O)C=C1 RTQWWZBSTRGEAV-PKHIMPSTSA-N 0.000 description 1
- FSPQCTGGIANIJZ-UHFFFAOYSA-N 2-[[(3,4-dimethoxyphenyl)-oxomethyl]amino]-4,5,6,7-tetrahydro-1-benzothiophene-3-carboxamide Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C(=O)NC1=C(C(N)=O)C(CCCC2)=C2S1 FSPQCTGGIANIJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSJPPGNTCRNQQC-UWTATZPHSA-N 3-phospho-D-glyceric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)COP(O)(O)=O OSJPPGNTCRNQQC-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 102100022749 Aminopeptidase N Human genes 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100023705 C-C motif chemokine 14 Human genes 0.000 description 1
- 102100032367 C-C motif chemokine 5 Human genes 0.000 description 1
- 108090000342 C-Type Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000003930 C-Type Lectins Human genes 0.000 description 1
- 102100036153 C-X-C motif chemokine 6 Human genes 0.000 description 1
- 101710085504 C-X-C motif chemokine 6 Proteins 0.000 description 1
- 101710085500 C-X-C motif chemokine 9 Proteins 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 102100028668 C-type lectin domain family 4 member C Human genes 0.000 description 1
- 102100040843 C-type lectin domain family 4 member M Human genes 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100025221 CD70 antigen Human genes 0.000 description 1
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 102000008203 CTLA-4 Antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 1
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 1
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 1
- 101100178679 Caenorhabditis elegans hsp-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010055166 Chemokine CCL5 Proteins 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 102100030886 Complement receptor type 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100032768 Complement receptor type 2 Human genes 0.000 description 1
- 229940046168 CpG oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 108010037897 DC-specific ICAM-3 grabbing nonintegrin Proteins 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 102100023688 Eotaxin Human genes 0.000 description 1
- 101710139422 Eotaxin Proteins 0.000 description 1
- 102000050554 Eph Family Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008815 Eph receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 1
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 108010040721 Flagellin Proteins 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 101710115997 Gamma-tubulin complex component 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100039289 Glial fibrillary acidic protein Human genes 0.000 description 1
- 101710193519 Glial fibrillary acidic protein Proteins 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 description 1
- 101000757160 Homo sapiens Aminopeptidase N Proteins 0.000 description 1
- 101001111439 Homo sapiens Beta-nerve growth factor Proteins 0.000 description 1
- 101000978381 Homo sapiens C-C motif chemokine 14 Proteins 0.000 description 1
- 101000897486 Homo sapiens C-C motif chemokine 25 Proteins 0.000 description 1
- 101000797762 Homo sapiens C-C motif chemokine 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000858088 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 description 1
- 101000858060 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 11 Proteins 0.000 description 1
- 101000947172 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 9 Proteins 0.000 description 1
- 101000766907 Homo sapiens C-type lectin domain family 4 member C Proteins 0.000 description 1
- 101000749311 Homo sapiens C-type lectin domain family 4 member M Proteins 0.000 description 1
- 101000934356 Homo sapiens CD70 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000993364 Homo sapiens Ciliary neurotrophic factor Proteins 0.000 description 1
- 101000727061 Homo sapiens Complement receptor type 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000941929 Homo sapiens Complement receptor type 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000978392 Homo sapiens Eotaxin Proteins 0.000 description 1
- 101001069921 Homo sapiens Growth-regulated alpha protein Proteins 0.000 description 1
- 101100341519 Homo sapiens ITGAX gene Proteins 0.000 description 1
- 101000998120 Homo sapiens Interleukin-3 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000942967 Homo sapiens Leukemia inhibitory factor Proteins 0.000 description 1
- 101000804764 Homo sapiens Lymphotactin Proteins 0.000 description 1
- 101000961414 Homo sapiens Membrane cofactor protein Proteins 0.000 description 1
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 1
- 101000634196 Homo sapiens Neurotrophin-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000973997 Homo sapiens Nucleosome assembly protein 1-like 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000582950 Homo sapiens Platelet factor 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000763314 Homo sapiens Thrombomodulin Proteins 0.000 description 1
- 101000933296 Homo sapiens Transcription factor TFIIIB component B'' homolog Proteins 0.000 description 1
- 101000638161 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 102100033493 Interleukin-3 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 1
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 108010031099 Mannose Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000000440 Melanoma-associated antigen Human genes 0.000 description 1
- 108050008953 Melanoma-associated antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100039373 Membrane cofactor protein Human genes 0.000 description 1
- 108010047660 Mitochondrial intermediate peptidase Proteins 0.000 description 1
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 1
- 101100327190 Mus musculus Ccl5 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 1
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 1
- 239000012648 POLY-ICLC Substances 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100025067 Potassium voltage-gated channel subfamily H member 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710163352 Potassium voltage-gated channel subfamily H member 4 Proteins 0.000 description 1
- 102000029797 Prion Human genes 0.000 description 1
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 101100022557 Rattus norvegicus Cd46 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000993333 Rattus norvegicus Ciliary neurotrophic factor Proteins 0.000 description 1
- 101100449534 Rattus norvegicus Cxcl1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000628941 Rattus norvegicus Mitochondrial intermediate peptidase Proteins 0.000 description 1
- 102100020718 Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3 Human genes 0.000 description 1
- 101710151245 Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3 Proteins 0.000 description 1
- 229910052772 Samarium Inorganic materials 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000037453 T cell priming Effects 0.000 description 1
- BPEGJWRSRHCHSN-UHFFFAOYSA-N Temozolomide Chemical compound O=C1N(C)N=NC2=C(C(N)=O)N=CN21 BPEGJWRSRHCHSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 102100026966 Thrombomodulin Human genes 0.000 description 1
- 102100026002 Transcription factor TFIIIB component B'' homolog Human genes 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 1
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102100039037 Vascular endothelial growth factor A Human genes 0.000 description 1
- 102100035140 Vitronectin Human genes 0.000 description 1
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 description 1
- 108010048673 Vitronectin Receptors Proteins 0.000 description 1
- JSTADIGKFYFAIY-GJNDDOAHSA-K [2-[bis[[hydroxy(oxido)phosphoryl]methyl]amino]ethyl-(phosphonomethyl)amino]methyl-hydroxyphosphinate;samarium-153(3+) Chemical compound [H+].[H+].[H+].[H+].[H+].[153Sm+3].[O-]P([O-])(=O)CN(CP([O-])([O-])=O)CCN(CP([O-])([O-])=O)CP([O-])([O-])=O JSTADIGKFYFAIY-GJNDDOAHSA-K 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 150000001294 alanine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011122 anti-angiogenic therapy Methods 0.000 description 1
- 230000003092 anti-cytokine Effects 0.000 description 1
- 230000003172 anti-dna Effects 0.000 description 1
- 230000010100 anticoagulation Effects 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 230000014102 antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007416 antiviral immune response Effects 0.000 description 1
- 108010018755 aquaporin 0 Proteins 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 239000005667 attractant Substances 0.000 description 1
- CXQCLLQQYTUUKJ-ALWAHNIESA-N beta-D-GalpNAc-(1->4)-[alpha-Neup5Ac-(2->8)-alpha-Neup5Ac-(2->3)]-beta-D-Galp-(1->4)-beta-D-Glcp-(1<->1')-Cer(d18:1/18:0) Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC[C@H](NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)[C@H](O)\C=C\CCCCCCCCCCCCC)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@]2(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C2)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@]2(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C2)[C@H](O)[C@H](O)CO)C(O)=O)C(O)=O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](CO)O1 CXQCLLQQYTUUKJ-ALWAHNIESA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000011748 cell maturation Effects 0.000 description 1
- 150000005829 chemical entities Chemical class 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000031902 chemoattractant activity Effects 0.000 description 1
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000004940 costimulation Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960002806 daclizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 230000004041 dendritic cell maturation Effects 0.000 description 1
- 229940029030 dendritic cell vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000002059 diagnostic imaging Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- NFDRPXJGHKJRLJ-UHFFFAOYSA-N edtmp Chemical compound OP(O)(=O)CN(CP(O)(O)=O)CCN(CP(O)(O)=O)CP(O)(O)=O NFDRPXJGHKJRLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 229950009760 epratuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229940082789 erbitux Drugs 0.000 description 1
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 229960000578 gemtuzumab Drugs 0.000 description 1
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 1
- 210000005046 glial fibrillary acidic protein Anatomy 0.000 description 1
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 1
- 208000029824 high grade glioma Diseases 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 102000046956 human CCL25 Human genes 0.000 description 1
- 102000045341 human CCL5 Human genes 0.000 description 1
- 102000044446 human CD46 Human genes 0.000 description 1
- 102000055297 human CXCL1 Human genes 0.000 description 1
- 102000046438 human CXCL10 Human genes 0.000 description 1
- 102000055715 human CXCL11 Human genes 0.000 description 1
- 102000046645 human LIF Human genes 0.000 description 1
- 102000057550 human NAP1L4 Human genes 0.000 description 1
- 102000046917 human NGF Human genes 0.000 description 1
- 102000057714 human NTF3 Human genes 0.000 description 1
- 102000052196 human PF4 Human genes 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001001 ibritumomab tiuxetan Drugs 0.000 description 1
- 229940124669 imidazoquinoline Drugs 0.000 description 1
- 229960002751 imiquimod Drugs 0.000 description 1
- DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N imiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C3N(CC(C)C)C=NC3=C(N)N=C21 DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 229960000598 infliximab Drugs 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 150000002519 isoleucine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 1
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 108010051618 macrophage stimulatory lipopeptide 2 Proteins 0.000 description 1
- 201000011614 malignant glioma Diseases 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229950003063 mitumomab Drugs 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229950007283 oregovomab Drugs 0.000 description 1
- 229960000402 palivizumab Drugs 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- SZZACTGRBZTAKY-NKNBZPHVSA-F pentasodium;samarium-153(3+);n,n,n',n'-tetrakis(phosphonatomethyl)ethane-1,2-diamine Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[153Sm+3].[O-]P([O-])(=O)CN(CP([O-])([O-])=O)CCN(CP([O-])([O-])=O)CP([O-])([O-])=O SZZACTGRBZTAKY-NKNBZPHVSA-F 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 108010012038 peptide 78 Proteins 0.000 description 1
- 229940125863 peptide 78 Drugs 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 229940115270 poly iclc Drugs 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229940087876 quadramet Drugs 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000009877 rendering Methods 0.000 description 1
- 229950010550 resiquimod Drugs 0.000 description 1
- BXNMTOQRYBFHNZ-UHFFFAOYSA-N resiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C(N(C(COCC)=N3)CC(C)(C)O)C3=C(N)N=C21 BXNMTOQRYBFHNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229960004964 temozolomide Drugs 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 230000029069 type 2 immune response Effects 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 description 1
- 229960001134 von willebrand factor Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/15—Cells of the myeloid line, e.g. granulocytes, basophils, eosinophils, neutrophils, leucocytes, monocytes, macrophages or mast cells; Myeloid precursor cells; Antigen-presenting cells, e.g. dendritic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4615—Dendritic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/462—Cellular immunotherapy characterized by the effect or the function of the cells
- A61K39/4622—Antigen presenting cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/46449—Melanoma antigens
- A61K39/464492—Glycoprotein 100 [Gp100]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55516—Proteins; Peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
- A61K2039/572—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2 cytotoxic response
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
- A61K2039/6081—Albumin; Keyhole limpet haemocyanin [KLH]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Hematology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Virology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Esta divulgación describe fragmentos de polipéptidos de anexina II, variantes de los mismos, composiciones que incluyen tales fragmentos y/o variantes, y métodos para usar tales fragmentos y/o variantes. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)
Description
DESCRIPCIÓN
Composiciones de variantes de anexina II y métodos
Referencia cruzada a la solicitud relacionada
Esta solicitud reivindica la prioridad de la solicitud de patente provisional US con número de serie 61/903.628, presentada el 13 de noviembre de 2013, que se incorpora aquí como referencia.
Financiación pública
Esta invención se realizó con el apoyo del gobierno bajo NIH R01 CA15434 otorgado por Institutos Nacionales de Salud. El gobierno tiene ciertos derechos en la invención.
Antecedentes
Se estima que cada año se diagnostican 200.000 nuevos tumores cerebrales en Norteamérica. De estos, más de 50.000 casos son tumores primarios. Los cánceres cerebrales primarios afectan aproximadamente a 14 de cada 100.000 personas y son responsables de más de 13000 muertes al año. Los tumores cerebrales metastásicos son más comunes que los tumores cerebrales primarios y representan aproximadamente 150.000 casos nuevos diagnosticados por año. El pulmón y la mama son ubicaciones habituales de tumores primarios que pueden hacer metástasis en el cerebro.
Las opciones de tratamiento para ciertos tumores cerebrales pueden ser limitadas. Por ejemplo, los gliomas de alto grado pueden tratarse en algunos casos mediante reducción quirúrgica, pero la cirugía no siempre es posible. La radiación puede ser otra opción, ya sea con o sin quimioterapia adyuvante. En algunos casos, el tratamiento preferido puede no proporcionar una supervivencia significativa a largo plazo. Por ejemplo, los pacientes que reciben radioterapia para glioblastoma, incluso con quimioterapia adyuvante con temozolomida, pueden afrontar una tasa de supervivencia a los tres años de no mucho más del 25 %.
Otra opción terapéutica implica vacunas que incluyen, por ejemplo, vacunas de lisado de células tumorales. Tales vacunas implican el cultivo por separado de monocitos obtenidos de un paciente y células tumorales obtenidas del paciente, lisando las células tumorales cultivadas y recogiendo uno o más antígenos expresados por las células tumorales cultivadas. Los antígenos recogidos se utilizan para pulsar células dendríticas (DC) derivadas del cultivo de monocitos. Las DC pulsadas se administran de nuevo al paciente, proporcionando al paciente una población de DC cebadas y activadas por la exposición a los antígenos tumorales, que pueden cebar aún más el propio sistema inmunitario del paciente contra el tumor.
Los métodos que emplean el sistema inmunitario de un paciente para ayudar a curar tumores pueden beneficiarse de los avances en adyuvantes que pueden aumentar la eficacia de dichos tratamientos. Se ha identificado que el monómero de 36 kDa de anexina II tiene propiedades inmunoestimuladoras. En particular, el documento WO 2012/048190 A1 divulga composiciones que comprenden el monómero de 36 kDa de anexina II o un fragmento inmunoestimulador del mismo, que pueden ser útiles, por ejemplo, en inmunoterapia.
Sumario de la invención
Esta divulgación describe fragmentos polipeptídicos de anexina II, sus variantes, composiciones que incluyen tales fragmentos y/o variantes y métodos para usar tales fragmentos y/o variantes.
En un aspecto, esta divulgación describe una variante de anexina II.
En otro aspecto, esta divulgación describe composiciones que incluyen una variante de anexina II. En algunas realizaciones, dicha composición puede incluir además al menos un antígeno y/o un segundo adyuvante. En algunas de estas realizaciones, el antígeno y/o el segundo adyuvante pueden acoplarse a la variante de anexina II.
En otro aspecto, esta divulgación describe un método que generalmente incluye administrar a un sujeto que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de composición que incluye una variante de anexina II.
En otro aspecto, esta divulgación describe un método que generalmente incluye poner en contacto células dendríticas con una composición que incluye una variante de anexina II y un antígeno. En algunas realizaciones, el método puede incluir además la administración posterior de células dendríticas a un sujeto.
En particular, la presente invención proporciona un fragmento de anexina II que consiste en una secuencia de aminoácidos según cualquiera de SEQ ID NO: 2 - 4 y una composición que comprende dicho fragmento de anexina II que consiste en una secuencia de aminoácidos según cualquiera de SEQ ID NO: 2 - 4.
Breve descripción de las figuras
Figura 1. Datos que muestran actividad adyuvante de N-terminal de anexina II.
Figura 2. Datos que demuestran mejora de la respuesta IFN-y frente al antígeno modelo OVA usando, como adyuvante, un péptido N-terminal de anexina II.
Figura 3. Datos que muestran que la actividad de la proteína de fusión anexina II-OVA está mediada por TLR2. Figura 4. (A) Protocolo experimental; (B) Datos que demuestran la actividad de la proteína de fusión anexina II-OVA in vivo.
Figura 5. (A) Protocolo experimental; (B) Datos que demuestran la actividad de la proteína de fusión anexina II-OVA en la reducción del tamaño de un tumor in vivo; (C) Datos que demuestran la actividad de la proteína de fusión anexina II-OVA en el aumento de supervivencia.
Figura 6. Datos que demuestran actividad de anexina II del péptido N-terminal de 15 aminoácidos.
Figura 7. Datos que demuestran la actividad de anexina II de variantes de anexina II.
Figura 8. Datos que comparan in vivo la actividad de anexina II de longitud completa y el fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos.
Figura 9. Datos que comparan in vivo la actividad de anexina II con el fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos y una variante de anexina II.
Figura 10. Datos que comparan in vitro la actividad de anexina II de longitud completa y el fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos.
Figura 11. Datos que comparan in vitro la actividad de anexina II del fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos y una variante de anexina II.
Figura 12. Datos que comparan in vitro la actividad de anexina II del fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos y una variante de anexina II.
Descripción detallada
Esta divulgación describe fragmentos polipeptídicos de anexina II y sus variantes. Los fragmentos y/o variantes pueden presentar actividad de anexina II, incluida actividad terapéutica. Debido a que los fragmentos y/o variantes son más pequeños que la proteína anexina II de longitud completa, pueden usarse más fácilmente en composiciones farmacéuticas. En particular, la presente invención proporciona un fragmento de anexina II que consiste en una secuencia de aminoácidos según cualquiera de SEQ ID NO: 2 - 4 y una composición que comprende dicho fragmento de anexina II que consiste en una secuencia de aminoácidos según cualquiera de SEQ ID NO: 2 - 4.
A lo largo de la siguiente descripción, los siguientes términos tendrán los significados indicados.
Por “antígeno” y sus variantes se entiende cualquier material capaz de inducir una respuesta inmunitaria en un sujeto al que se ha aplicado el material. En varias realizaciones, un antígeno puede inducir una respuesta inmunitaria mediada por células, una respuesta inmunitaria humoral o ambas. Los antígenos adecuados pueden ser sintéticos o de origen natural y, cuando se producen de forma natural, pueden ser endógenos (p. ej., un autoantígeno) o exógenos. Materiales antigénicos adecuados incluyen, entre otros, péptidos o polipéptidos (incluido un ácido nucleico, al menos una parte del cual codifica el péptido o polipéptido); lípidos; glicolípidos; polisacáridos; carbohidratos; polinucleótidos; priones; bacterias vivas o inactivadas, virus, hongos o parásitos; e inmunógenos, toxinas o toxoides bacterianos, virales, fúngicos, protozoarios, derivados de tumores o derivados de organismos.
Por “fracción” y sus variantes se entiende una porción de un compuesto químico que presenta un carácter particular tal como, por ejemplo, una función biológica o química particular (por ejemplo, inmunomodulación y/o especificidad diana).
Por “profiláctico” y sus variantes se entiende un tratamiento que limita, en cualquier medida, el desarrollo y/o la aparición de un síntoma o signo clínico de una enfermedad (p. ej., una enfermedad neoplásica o una enfermedad infecciosa), incluida la prevención o limitación del desarrollo inicial y/o aparición de la enfermedad, previniendo o limitando la propagación de una enfermedad subclínica existente, o ambas. Por “subclínica” se entiende el estado de una enfermedad antes de la manifestación de un síntoma o signo de la enfermedad.
Por “signo” o “signo clínico” se entiende un hallazgo físico objetivo relacionado con una enfermedad particular que puede encontrar alguien que no sea el paciente.
Por “fracción estabilizante” se entiende esa porción de una composición que posee actividad funcional que aumenta la estabilidad de la composición en el cuerpo en comparación con una composición correspondiente sin la fracción estabilizante.
Por “síntoma” se entiende cualquier evidencia subjetiva de patología o de enfermedad de un paciente. Por “fracción de direccionamiento” se entiende esa porción de una composición que posee afinidad específica por la diana. La fracción de direccionamiento puede ser, o derivar de, un anticuerpo, pero, por otro lado, puede ser o derivar de una proteína o péptido que no sea un anticuerpo, o un material que no sea una proteína que incluye, por ejemplo, una molécula pequeña.
Por “terapéutico” y sus variantes se entiende un tratamiento que mejora uno o más síntomas o signos clínicos existentes asociados con una enfermedad.
Por “tratar” o sus variantes se entiende reducir, limitar la progresión, mejorar o resolver, en cualquier medida, los síntomas o signos relacionados con una enfermedad. Por “mejorar” se entiende cualquier reducción del grado, gravedad, frecuencia y/o probabilidad de un síntoma o signo clínico característico de una enfermedad particular.
El término “y/o” significa uno o todos los elementos enumerados o una combinación de dos o más de los elementos enumerados; los términos “comprende” y sus variantes no tienen un significado limitativo cuando estos términos aparecen en la descripción y las reivindicaciones, a menos que se especifique lo contrario, “un”, “uno”, “el” y “al menos uno” se usan indistintamente y significan uno o más de uno; y las relaciones de rangos numéricos por criterios de valoración incluyen todos los números incluidos dentro de ese rango (por ejemplo, 1 a 5 incluye 1, 1,5, 2, 2,75, 3, 3,80, 4, 5, etc.).
La familia de proteínas anexinas incluye al menos diez genes de mamíferos. Las anexinas generalmente unen calcio y fosfolípidos en presencia de calcio. La anexina II (también denominada a veces “anexina A2” o “AII”) es una anexina abundante que se sabe que existe como un monómero (AIIm, 36 kDa), un heterodímero (AIId) o un heterotetrámero (AIIt). El heterodímero incluye una subunidad AIIm y una subunidad de 3-fosfoglicerato quinasa. El heterotetrámero incluye dos subunidades AIIm y dos subunidades de 11 kDa.
El monómero de 36 kDa de anexina II posee actividad modificadora de la respuesta inmunitaria (solicitud de patente internacional PCT/US2011/055211; publicación de solicitud de patente US 2013/0331546 A1). Esta divulgación informa sobre la identificación de un fragmento del monómero de 36 kDa de anexina II que posee actividad de anexina II y variantes del fragmento. Por razones de brevedad en la siguiente descripción, a menos que se especifique lo contrario, la referencia a la anexina II se refiere al monómero de 36 kDa en oposición al heterodímero o heterotetrámero. La referencia a una “variante de anexina II” se refiere a un fragmento del monómero de 36 kDa o una forma modificada de dicho fragmento. Una forma modificada de un fragmento del monómero de 36 kDa de anexina II puede ser cualquier polipéptido que posea un nivel medible de actividad de anexina II y similitud estructural con una secuencia de aminoácidos de referencia correspondiente de una porción correspondiente del monómero de 36 kDa de anexina II de tipo salvaje. Además, debido a que una variante de anexina II se refiere a un fragmento del monómero de 36 kDa, una variante de anexina II incluye necesariamente menos que la secuencia de aminoácidos de anexina II de longitud completa. En consecuencia, el análisis de realizaciones de variantes de anexina II que pueden incluir residuos de aminoácidos adicionales, por definición, excluye necesariamente el polipéptido de anexina II de tipo salvaje de longitud completa.
Tal como se usa en el presente documento, un polipéptido es “estructuralmente similar” a una secuencia de aminoácidos de un fragmento de anexina II de tipo salvaje de referencia si la secuencia de aminoácidos del polipéptido posee una cantidad específica de identidad en comparación con la secuencia de aminoácidos de referencia. La similitud estructural de dos polipéptidos se puede determinar alineando los residuos de los dos polipéptidos (por ejemplo, un polipéptido candidato y el polipéptido de, por ejemplo, cualquiera de las SEQ ID NO: 1 - 6) para optimizar el número de aminoácidos idénticos a lo largo de sus secuencias; se permiten huecos en una o ambas secuencias al hacer el alineamiento para optimizar el número de aminoácidos idénticos, aunque no obstante los aminoácidos en cada secuencia deben permanecer en su orden correcto. Un polipéptido candidato es el polipéptido que se compara con el polipéptido de referencia (por ejemplo, cualquiera de las SEQ ID NO: 1 - 6). Un polipéptido candidato puede aislarse, por ejemplo, de un animal, o puede producirse utilizando técnicas recombinantes, o sintetizarse química o enzimáticamente.
Puede llevarse a cabo un análisis comparativo por pares de secuencias de aminoácidos usando el algoritmo BESTFIT en el paquete GCG (versión 10.2, Madison WI). Alternativamente, los polipéptidos pueden compararse usando el programa Blastp del algoritmo de búsqueda BLAST 2, como describen Tatiana et al, (FEMS Microbiol Lett, 174, 247 250 (1999)), y disponible en la página web del Centro Nacional de Información Biotecnológica (NCBI). Se pueden utilizar los valores por defecto para todos los parámetros de búsqueda BLAST 2, incluidos matrix = BLOSUM62; penalización por hueco abierto = 11, penalización por extensión de hueco = 1, hueco x_ dropoff = 50, expectativa = 10, tamaño de palabra = 3 y filtro activado.
En la comparación de dos secuencias de aminoácidos, se puede hacer referencia a la similitud estructural mediante porcentaje de “identidad” o mediante porcentaje de “similitud”. Por “identidad” se entiende la presencia de aminoácidos idénticos. Por “similitud” se entiende la presencia no solo de aminoácidos idénticos sino también la presencia de sustituciones conservadoras. Una sustitución conservadora de un aminoácido en un polipéptido, según se describe en el presente documento, se puede seleccionar de entre otros miembros de la clase a la que pertenece el aminoácido. Por ejemplo, es bien conocido en el campo de la bioquímica de proteínas que un aminoácido que pertenece a un grupo de aminoácidos que tienen un tamaño o característica particular (tal como carga, hidrofobicidad o hidrofilicidad) puede sustituirse por otro aminoácido sin alterar la actividad de una proteína, particularmente en regiones de la proteína que no están directamente asociadas con la actividad biológica. Por ejemplo, los aminoácidos no polares (hidrofóbicos) incluyen alanina, leucina, isoleucina, valina, prolina, fenilalanina, triptófano y tirosina. Los aminoácidos
polares neutros incluyen glicina, serina, treonina, cisteína, tirosina, asparagina y glutamina. Los aminoácidos cargados positivamente (básicos) incluyen arginina, lisina e histidina. Los aminoácidos cargados negativamente (ácidos) incluyen ácido aspártico y ácido glutámico. Las sustituciones conservadoras incluyen, por ejemplo, Lys para Arg y viceversa para mantener una carga positiva; Glu para Asp y viceversa para mantener una carga negativa; Ser para Thr de modo que se mantenga un Oh libre; y Gln para Asn para mantener un NH2 libre. Asimismo, también se contemplan los análogos biológicamente activos de un polipéptido que contiene deleciones o adiciones de uno o más aminoácidos contiguos o no contiguos que no eliminan una actividad funcional del polipéptido.
Por lo tanto, una variante de anexina II puede incluir un polipéptido con al menos 50 %, al menos 55 %, al menos 60 %, al menos 65 %, al menos 70 %, al menos 75 %, al menos 80 %, al menos 81 %, al menos el 82 %, al menos el 83 %, al menos el 84 %, al menos el 85 %, al menos el 86 %, al menos el 87 %, al menos el 88 %, al menos el 89 %, al menos el 90 %, al menos el 91 %, al menos 92 %, al menos 93 %, al menos 94 %, al menos 95 %, al menos 96 %, al menos 97 %, al menos 98 % o al menos 99 % de similitud de secuencia con una secuencia de aminoácidos de referencia del fragmento de anexina II de tipo salvaje adecuada.
En algunas realizaciones, una variante de anexina II puede incluir un polipéptido con al menos 50 %, al menos 55 %, al menos 60 %, al menos 65 %, al menos 70 %, al menos 75 %, al menos 80 %, al menos 81%, al menos 82%, al menos 83%, al menos 84%, al menos 85%, al menos 86%, al menos 87%, al menos 88%, al menos 89%, al menos 90%, al menos 91 %, al menos 92 %, al menos 93 %, al menos 94 %, al menos 95 %, al menos 96 %, al menos 97 %, al menos 98 % o al menos 99 % de identidad de secuencia con un secuencia de aminoácidos de referencia del fragmento de anexina II de tipo salvaje adecuada.
También se puede diseñar una variante de anexina II para proporcionar secuencias adicionales, tales como, por ejemplo, aminoácidos C-terminal o N-terminal adicionales que pueden, por ejemplo, facilitar la purificación mediante atrapamiento en columna o usando anticuerpos. Tales etiquetas incluyen, por ejemplo, etiquetas ricas en histidina que permiten la purificación de polipéptidos en columnas de níquel.
En algunas realizaciones, una variante de anexina II puede incluir una secuencia de aminoácidos que incorpora una o más sustituciones de aminoácidos independientemente de si cada sustitución de aminoácidos es natural o modificada (p. ej., utilizando técnicas recombinantes u otras técnicas de laboratorio). En algunas realizaciones, una variante de anexina II puede incluir una combinación de sustituciones de aminoácidos y cada una, independientemente de cualquier otra sustitución, puede ser natural o modificada. Variantes de anexina II ejemplares se reflejan en las secuencias de aminoácidos de las SEQ ID NO: 12 - 26. Una realización de este tipo, que tiene una sustitución de alanina por isoleucina en la posición seis (16A, A-6, Tabla 1, a continuación) de un fragmento de anexina II de 15 aminoácidos, posee un aumento en la actividad de anexina II (figuras 7, 9, 11 y 12).
El monómero de 36 kDa de anexina II posee actividad modificadora de respuesta inmunitaria (solicitud de patente internacional PCT/US2011/055211; publicación de solicitud de patente US 2013/0331546 A1). La anexina II puede aumentar la eficacia de vacunas que dependen de las respuestas de las células CD8+ T para mediar un efecto terapéutico o profiláctico. Por consiguiente, las composiciones que incluyen anexina II pueden ser útiles como adyuvantes en inmunoterapias tales como, por ejemplo, vacunas contra el cáncer y vacunas dirigidas contra agentes infecciosos (por ejemplo, virus, bacterias, parásitos).
De ese modo, tal como se usa en el presente documento, “actividad de la anexina II” incluye la modulación de una respuesta inmunitaria. Por ejemplo, la “actividad de la anexina II” puede incluir redirigir el antígeno endocitosado a la molécula MHC I sin cambiar de manera apreciable la expresión de la molécula coestimuladora, poseer actividad agonista del receptor tipo Toll 2 (TLR2), poseer actividad agonista del receptor tipo Toll 4 (TLR4), aumentar de manera selectiva la presentación de antígenos en MHC I, reducir la producción de citoquinas “tipo II” (p. ej., IL-10, IL-4), inducir la secreción de citoquinas tipo I (p. ej., IL-12, TFN-a, IL-1p), potenciar la maduración de células dendríticas, potenciar la maduración de células B y/o estimular la producción de anticuerpos o células T.
Fragmento N-terminal de anexina II como adyuvante
Para probar si el N-terminal de 35 aminoácidos de anexina II, que distingue la anexina II de otras anexinas, presenta actividad adyuvante, pulsamos células dendríticas derivadas de médula ósea (BMDC) con gp100 ± A2OVA, conteniendo el péptido de fusión este fragmento de 35 aminoácidos. A2OVA ejerció actividad adyuvante tanto en concentraciones iguales como en relación molecular en comparación con la proteína anexina II de longitud completa en una medida de la respuesta de células CD8 T específicas de gp100 (figura 1). Después probamos si este péptido de fusión mejoraba la actividad adyuvante con respecto a la de la adición de OVA y la proteína anexina II de longitud completa. Se pulsaron BMDC con A2OVA y medimos la respuesta de las células T CD8 OT-1 específicas de OVA. El péptido de fusión A2OVA indujo una respuesta en IFNy superior a la del monómero A2 (A2m) OVA añadido como agentes separados (figura 2). Para investigar más a fondo la capacidad de derivar un nuevo péptido de fusión de antígeno único, construimos péptidos de fusión OVA en los que un péptido OVA (SEQ ID No: 9) se fusionó con un fragmento de anexina II N-terminal o con un péptido de 35 aminoácidos codificado para producir las SEQ ID No: 30 y SEQ ID No: 29, respectivamente. Los péptidos se pulsaron sobre células transfectadas con TLR2 y se usó actividad de fosfatasa alcalina para determinar actividad de NF-Kp (figura 3). La proteína de fusión A2OVA estimuló NF-Kp a
través de TLR2. Sin embargo, para nuestra sorpresa, la proteína de fusión (SEQ ID No: 30) que carece de los aminoácidos de anexina II más terminales no provocó una respuesta.
El péptido de fusión anexina II-OVA estimula una respuesta de células T específicas de antígeno in vivo
A continuación, investigamos el uso del A2OVA in vivo. El péptido A2OVA (SEQ ID No: 32) se administró a ratones libres de tumor como se describe en la figura 4A para ver si provocaba una respuesta de células T específicas de OVA. El péptido de fusión A2OVA estimuló respuesta in vivo de células T CD8+ específicas de antígeno (figura 4B). Para determinar si el fragmento de anexina II de 35 aminoácidos puede prolongar la supervivencia en animales portadores de tumores de manera no específica de antígeno, utilizamos ratones BALB/c portadores de tumores de mama que carecen del haplotipo MHC para presentar SIINFEKL. Los ratones se trataron con péptido A2OVA como se resume en la figura 5A y se les hizo un seguimiento de supervivencia. Los ratones a los que se les inyectó el péptido A2OVA demostraron una mayor supervivencia en comparación con el control de solución salina o codificado. Una vez más, se requerían los primeros 15 aminoácidos N-terminal, ya que el A2OVA-S100 (denominado de otro modo en el presente documento como A2OVA-pp11, SEQ ID No: 30) no confería ningún beneficio de supervivencia (figura 5B).
Los 15 aminoácidos N-terminal de anexina II tienen actividad agonista de TLR2 y actividad agonista de TLR4
Para caracterizar mejor los 35 aminoácidos N-terminal como adyuvante, eliminamos en serie cinco aminoácidos del extremo de C-terminal del fragmento N-terminal para producir variantes de anexina II SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5 y SEQ ID NO: 6. Se ensayaron los péptidos resultantes para determinar la actividad de NF-Kp. El fragmento de anexina II que consiste en la mayoría de los 15 aminoácidos N-terminal (SEQ ID NO: 5) activó TLR2 y, en menor medida, TLR4 (figura 6). Con el fin de probar la capacidad del fragmento de anexina II de 15 aminoácidos (SEQ ID NO: 5) para estimular una respuesta inmunitaria, y para determinar si su capacidad para hacerlo está mediada a través de TLR2, se administró a ratones de tipo salvaje y de tipo knockout TLR-2 OVA ± anexina II u OVA ± el fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos (SEQ ID No:5).
Un fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos induce la secreción de citoquinas a partir de células dendríticas derivadas de médula ósea (BDMC)
Para determinar la actividad del fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos en células dendríticas, se derivaron BMDC para ratones de tipo salvaje, knockout TLR4 y knockout MyD88. Los diferentes BMDC se pulsaron con el fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos (SEQ ID NO: 5). Esto demostró que el fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos (SEQ ID NO: 5) mediaba la inducción de secreción de TFN y que la actividad era dependiente de MyD88 (figura 10).
La sustitución de isoleucina por alanina en el sexto aminoácido N-terminal mejora la señalización de TLR2 y TLR4
Para caracterizar aún más el fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos, construimos variantes del fragmento en las que cada fragmento albergaba una única sustitución del aminoácido alanina por un aminoácido diferente. Las variantes se enumeran en la Tabla 1. La variante que albergaba una sustitución de isoleucina por alanina (A-6, SEQ ID NO: 17) mostró una señalización mejorada de Tl R2 y TLR4 (figura 7). Además, la variante A-6 (SEQ ID NO: 17) puede inducir in vivo un cebado de células T específico de OVA mejorado (figura 9, 15aaP6).
Para caracterizar aún más la actividad de la variante A-6 (SEQ ID NO: 17), se pulsaron BMDC de ratones de tipo salvaje, knockout TLR2, knockout TLR4 y knockout MyD88 con el péptido y se analizaron en busca de moléculas coestimuladoras CD80 (figura 11) y CD86 (figura 12). Tanto el fragmento N-terminal de 15 aminoácidos (SEQ ID NO: 5) como la variante A-6 (SEQ ID NO: 17) aumentaron la expresión de las moléculas coestimuladoras CD80 y CD86 de manera dependiente de TLR4 y MyD88.
En consecuencia, en un aspecto, esta divulgación describe una composición que incluye una variante de anexina II tal como, por ejemplo, un fragmento inmunomodulador de anexina II. Se puede determinar si una variante de anexina II posee actividad inmunomoduladora mediante cualquier método adecuado que incluya, por ejemplo, cualquier método descrito en el presente documento. Sin embargo, otros ensayos estándar de actividad inmunomoduladora están dentro de la capacidad de un experto en la materia.
En algunas realizaciones, una variante de anexina II puede incluir una porción N-terminal de anexina II tal como, por ejemplo, cualquiera de las secuencias de aminoácidos reflejadas en las SEQ ID NO: 1 - 6. En algunas de estas realizaciones, la variante de anexina II puede incluir un fragmento de 15 aminoácidos de anexina II (por ejemplo, SEQ ID NO: 5) o una forma modificada del mismo (por ejemplo, cualquiera de las SEQ ID NO: 12 - 26). En una realización particular (SEQ ID NO: 17), la variante de anexina II puede incluir una sustitución de aminoácidos de alanina por isoleucina en la posición seis (16A, A-6 en la Tabla 1) del fragmento de 15 aminoácidos que se muestra en la SEQ ID NO: 5.
Una composición puede incluir múltiples variantes de anexina II. Por lo tanto, en algunas realizaciones, una composición puede incluir un polipéptido de fusión que incluya una pluralidad de variantes de anexina II.
En algunos casos, una composición puede incluir además uno o más antígenos contra los que se desea una respuesta inmunitaria. Aunque aquí se describe en el contexto de una realización ilustrativa en la que el antígeno modelo es el antígeno ovoalbúmina, las composiciones y los métodos descritos en el presente documento pueden implicar el uso de cualquier antígeno de interés. Así, el antígeno puede ser, por ejemplo, un antígeno tumoral o un antígeno expresado por un agente infeccioso. En algunas realizaciones, el antígeno puede derivar de un lisado de células tumorales. Ejemplos de antígenos tumorales incluyen, por ejemplo, gp100 (un antígeno asociado a melanoma), IL 13raa2, Epha2 (receptor 2 de efrina tipo A), fragmentos inmunogénicos de los mismos y fusiones de tales antígenos y/o fragmentos.
En algunas realizaciones, la variante de anexina II y el antígeno pueden proporcionarse en una mezcla, suspensión, emulsión, etc. Si se proporciona en una emulsión, es posible que la variante de anexina II y el antígeno se proporcionen en fases separadas de la emulsión.
En otras realizaciones, la variante de anexina II y el antígeno pueden acoplarse de manera que el antígeno y la variante de anexina II, como adyuvante, puedan presentarse conjuntamente a células del sistema inmunitario. La variante de anexina II y el antígeno pueden acoplarse covalentemente (p. ej., reticulación), acoplarse por afinidad (p. ej., avidinabiotina) o acoplarse como un polipéptido de fusión. La elaboración de dichas realizaciones se describe en el ejemplo 3.
Aún en otra realización, un polinucleótido que codifica una secuencia de codificación de la variante de anexina II (en lo sucesivo, un polinucleótido de la variante de anexina II), por ejemplo, una secuencia de nucleótidos que codifica cualquier variante de anexina II (por ejemplo, una secuencia de nucleótidos que codifica la secuencia de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID No: 1 - 6, l2 - 26), puede clonarse en el genoma de un virus atenuado de modo que la cápside del virus incluya al menos una variante de anexina II. Cuando se crea el virus, la superficie de la cápside se puede decorar con al menos una variante de anexina II que puede mejorar la respuesta inmunitaria antiviral. Este enfoque también puede ser útil para tratar ciertas enfermedades bacterianas. Por ejemplo, un polinucleótido de la variante de anexina II se puede clonar en una micobacteria atenuada que cause tuberculosis tal como, por ejemplo, Mycobacterium tuberculosis, de modo que el microbio exprese la variante de anexina II.
En algunas realizaciones, una variante de anexina II puede acoplarse a una fracción diana. La fracción diana de la composición puede ser cualquier material que pueda proporcionar una administración dirigida de la composición. En muchas realizaciones, la fracción diana puede proporcionar una diana inmunoespecífica, es decir, puede ser una porción suficiente de una inmunoglobulina (es decir, un anticuerpo) para promover la unión inmunoespecífica de la composición a un antígeno diana. Sin embargo, tales realizaciones pueden ponerse en práctica utilizando materiales de direccionamiento que no sean inmunoglobulinas, por ejemplo ciertas moléculas pequeñas o ligandos de receptores, tales como, por ejemplo, hormonas (naturales o sintéticas), lípidos, etc. Tal como se usa en el presente documento, “específico” y sus variantes (p. ej., “inmunoespecífico”, que tiene “especificidad”, etc.) se refieren a tener una afinidad diferencial o no genérica, en cualquier grado, con una diana particular.
Por lo tanto, en algunas realizaciones, una variante de anexina II se puede acoplar a una fracción diana antitumoral tal como, por ejemplo, un ligando de un marcador específico de tumor, un anticuerpo antitumoral o una fracción derivada de un anticuerpo antitumoral. Tal como se usa en el presente documento, un anticuerpo antitumoral se refiere a un anticuerpo (Ab) que reconoce células de un tumor con cierto grado de especificidad de entre las células de tejido normal. La composición acoplada variante de anexina II/Ab puede aprovechar la especificidad tumoral proporcionada por el anticuerpo para administrar de manera dirigida la variante de anexina II acoplada en los alrededores de los antígenos tumorales.
Dado que los anticuerpos antitumorales, como todas las inmunoglobulinas, son proteínas, se pueden realizar modificaciones en un anticuerpo antitumoral particular sin que el anticuerpo antitumoral modificado resulte inadecuado para su uso como una fracción diana. Por ejemplo, se pueden eliminar o sustituir una o más porciones de la secuencia de aminoácidos del anticuerpo antitumoral o se pueden agregar aminoácidos adicionales a un anticuerpo antitumoral, y el anticuerpo antitumoral aún puede retener suficiente carácter inmunoespecífico para ser adecuado para la práctica de la invención. Por lo tanto, en la descripción que sigue, la referencia a un anticuerpo antitumoral particular incluye anticuerpos antitumorales modificados que tienen dichas modificaciones (por ejemplo, adiciones, deleciones y/o sustituciones de aminoácidos) ya que éstos son posibles mientras mantengan una cantidad suficiente del carácter inmunoespecífico del anticuerpo.
Por lo tanto, en general, una fracción diana puede incluir un anticuerpo que dirija, por ejemplo, un antígeno microbiano (por ejemplo, antígenos bacterianos, virales, parasitarios o fúngicos), un antígeno asociado a un cáncer o a un tumor, una célula inmunitaria y/o un autoantígeno. En muchas realizaciones, un anticuerpo adecuado es el que reconoce y se une a un antígeno presente en o dentro de una célula. Un anticuerpo que se une a un material en particular (es decir, un antígeno) puede denominarse, indistintamente, “antiantígeno” o “anticuerpo de antígeno”. En algunos casos, se puede hacer referencia a un anticuerpo con un nombre genérico o una marca comercial.
Anticuerpos ilustrativos incluyen, entre otros, rituximab, anticuerpo anti-CD20 (p. ej., RITUXAN, Genentech, Inc., sur de San Francisco, CA/Biogen idec, Cambridge, MA); trastuzumab (p. ej., HERCEPTIN, Genentech, Inc., sur de San Francisco, CA); samarium (Sm153) lexidronam (samarium-153-etilendiaminotetrametilenfosfonato, abreviado samarium-153 EDTMP, por ejemplo, QUADRAMET, Lantheus Medical Imaging, Inc., Bellerica norte, MA); edrecolomab (MAb17-1A, por ejemplo, PANOREX, Centocor Ortho Biotech, Inc., Horsham, PA); IDEC-Y2B8; BEC2 (un anticuerpo monoclonal antiidiotípico que imita a GD3); cetixumab (C225 y anticuerpo monoclonal anti-EGFR, por ejemplo, ERBITUX, ImClone LLC, Nueva York, NY)); un anticuerpo anti-lyml (p. ej., On COLYM, Alpha Therapeutic Corp., Los Ángeles, CA); SMART M195 (por ejemplo, ZAMYL, Protein Design Labs, Inc., Freemont, CA); tretinoína (por ejemplo, ATRAGe N, Genzyme Corp., Cambridge, MA); un anticuerpo anti-CA125 (p. ej., OVAREX, AltaRex Medical Corp., Edmonton, AB, Canadá); tositumomab (p. ej., BEXXAR, Glaxo SmithKline l Lc , Wilmington, DE); LDP-03; ior t6; FcyRi (CD64)/HER-2/nuevo anticuerpo biespecífico MDX-210; MDX-11; MDX-22; OV103; anticuerpo monoclonal anti-interleucina-2 3622W94; un anticuerpo anti-VEGF; daclizumab (p. ej., ZENAPAX, Hoffman-LaRoche AG, Basilea, Suiza); anti-TAG-72 (MDX-220); el anticuerpo biespecífico FcyR1 (CD64)/EGFR MDX-447; MELIMMUNE-1 (Biogen idec, Cambridge, MA); Me LIMMUNE-2 (Biogen idec, Cambridge, MA); labetuzumab (p. ej., CEA-CIDE, Immunomedics, Inc., Morris Plains, NJ); PRETARGET, Aletheon Pharmaceuticals, Inc., Seattle, Wa); GNI-250; matuzumab (p. ej., EMD-72000, Merck Serono, Darmstadt, Alemania); epratuzumab (p. ej., LYMPHOCIDE, Immunomedics, Inc., Morris Plains, NJ); gemtuzumab zogamicina (CMA-676, por ejemplo, m YlOTARG, Pfizer Inc., Nueva York, NY); Monopharm-C; anticuerpo monoclonal anti-her-2/neu 4B5 (Ventana Medical Systems, Inc., Tucson, arizona); anticuerpo monoclonal anti-EGFR ior egf.r3; anticuerpo monoclonal anti-antígeno asociado a tumor (TAA) ior c5; un anticuerpo anti-FLK-2; el FcyRi (CD64)/HER-2/nuevo anticuerpo biespecífico MDX-260; un anticuerpo antinuclear (An A Ab); SMART ID10Ab; SMART A b L 364Ab; el anticuerpo monoclonal anti-tag72 CC49; ImmuRAIT-CEA (Immunomedics, Inc., Morris Plains, NJ); un anticuerpo anti-IL-4; un anticuerpo anti-IL-5; un anticuerpo anti-IL-9; un anticuerpo anti-Ig; un anticuerpo anti-IgE; un anticuerpo contra la hepatitis B derivado del suero; un anticuerpo contra la hepatitis B recombinante; un anticuerpo anti-CD40; un anticuerpo anti-OX40; un anticuerpo anti-receptor de citoquinas; y similares.
Otros anticuerpos igualmente útiles en la composición y/o métodos descritos en este documento, e indicaciones médicas para las que cada uno puede ser útil, incluyen alemtuzumab (leucemia linfocítica crónica de células B), gemtuzumab ozogamicina (leucemia mieloide aguda CD33+), hP67.6 (leucemia mieloide aguda CD33+), infliximab (enfermedad inflamatoria intestinal y artritis reumatoide), etanercept (artritis reumatoide), tositumomab, MDX-210, oregovomab, anti-receptor de EGF (mAb), proteína anti-factor tisular tisular (TF), edrecolomab, ibritumomab tiuxetan, mAb anti-idiotípico imitador del epítopo gangliósido GD3, mAb anti-HLA-Dr10, mAb humanizado anti-CD33, humAb anti-CD52, mAb anti-CD 1 (ior t6), m DX-22, celogovab, mAb anti-17-1A, bevacizumab, mAb antiidiotípico imitador del proteoglicano de alto peso molecular (I-Mel-1), mAb antiidiotípico imitador del proteoglicano de alto peso molecular (I-Mel-2), Ab anti-CEA, hmAbH11, mAb proteínas asociadas Ad N o anti-ADN (histonas), mAb Gliomab-H, mAb GNI-250, anti-CD22, CMA 676), mAb humano antiidiotípico del gangliósido GD2 ior egf/r3, mAb antiglicoproteína ior c2, mAb anti-FLK- 2/FLT-3, mAb biespecífico anti-GD-2, autoanticuerpos antinucleares, Ab anti-HLA-DR, mAb anti-CEA, palivizumab, alemtuzumab, BLyS-mAb, anti-VEGF2, anti-receptor Trail; mAb B3, mAb BR96, y mAb Abx-Cb1.
Anticuerpos adecuados también incluyen los siguientes:
Anticuerpos que se dirigen a células presentadoras de antígenos tales como, por ejemplo, anti-Dec205, anti-MHC II, anti-CD11c.
Anticuerpos de apoptosis tales como, por ejemplo, anticuerpos contra el ligando Fas/Fas, que incluyen, entre otros, anticuerpos contra el ligando Fas/Fas antihumano, anticuerpos contra el ligando Fas/Fas anti-murino, anticuerpos Granzyme, anticuerpos Granzyme B; anticuerpos Bcl, que incluyen, entre otros, anticuerpos anti-citocromo C, anticuerpos contra Bcl antihumano (monoclonales), anticuerpos contra Bcl antihumano (policlonales), anticuerpos contra Bcl anti-murino (monoclonales) y anticuerpos contra Bcl anti-murino (policlonales);
Diversos anticuerpos de apoptosis tales como, por ejemplo, anticuerpos anti-TRADD, anti-TRAIL y anti-DR3;
Diversos anticuerpos de apoptosis tales como, por ejemplo, anticuerpos contra Bim que incluyen, entre otros, anticuerpos contra bim antihumano murino (policlonales), anticuerpos contra bim antihumano murino (monoclonales); Anticuerpos caspasa tales como, por ejemplo, anticuerpos caspasa antihumana (monoclonales) y anticuerpos caspasa anti-murina.
Anticuerpos anti-CD tales como, por ejemplo, anti-CD25, anti-CD29, anti-CD29, anti-CD41a, anti-CD42b, anti-CD42b, anti-CD42b, anti-CD43, anti-CD46, anti-CD61, anti-CD61, anti-CD62/P-slctn, anti-CD62/P-slctn, y anti-CD 154; Anticuerpos de quimioquinas humanas tales como, por ejemplo, anticuerpos CNTF humanos, anticuerpos eotaxina humanos, anticuerpos péptido-78 activador de neutrófilos epiteliales humanos (ENA-78), anticuerpos éxodo humanos, anticuerpos GRO humanos HCC-1, anticuerpos 1-309 humanos, anticuerpos IP-10 humanos, anticuerpos I-TAC humanos, anticuerpos LIF humanos, anticuerpos de quimioquina expresadas en el hígado (LEC), anticuerpos de linfotaxinas humanos, anticuerpos MCP humanos, anticuerpos MIP humanos, monocina humana inducida por anticuerpos IFN-y (MIG/CXCL9), anticuerpos NAP-2 humanos, anticuerpos NP-1 humanos, anticuerpos del factor 4 plaquetario humanos, anticuerpos RANTES humanos, anticuerpos SDF humanos y anticuerpos TECK humanos; Anticuerpos de quimioquinas murinos tales como, por ejemplo, anticuerpos quimioquinas murina atrayentes de células B humanas, anticuerpos de quimioquina-1, anticuerpos eotaxina murinos, anticuerpos de éxodo murino, anticuerpos GCP-2 murinos, anticuerpos KC murinos, anticuerpos MCP murinos, anticuerpos MIP murinos y anticuerpos RANTES murinos;
Anticuerpos de quimioquinas de rata, tales como, por ejemplo, anticuerpos CNTF de rata, anticuerpos GRO de rata, anticuerpos MCP de rata, anticuerpos MIP de rata y anticuerpos RANTES de rata;
Anticuerpos de citoquinas/receptores de citoquinas tales como, por ejemplo, anticuerpos de citoquinas/receptores de citoquinas biotinilados humanos, anticuerpos de interferón humano (IFN), anticuerpos interleuquina humanos (IL), anticuerpos leptina humanos, anticuerpos oncostatina humanos, anticuerpos del factor de necrosis tumoral humanos (TFN), anticuerpos de la familia de receptores TFN humanos, anticuerpos de citoquinas/receptores de citoquinas biotiniladas murinas, anticuerpos IFN murinos, anticuerpos IL murinos, anticuerpos TFN murinos, anticuerpos receptores de TFN murinos, anticuerpos de citoquinas/receptores de citoquinas biotiniladas de rata, anticuerpos IFN de rata, anticuerpos IL de rata y anticuerpos TFN de rata;
Anticuerpos de matriz extracelular tales como, por ejemplo, anticuerpos de colágeno/procolágeno, anticuerpos de laminina, anticuerpos de colágeno humano, anticuerpos de laminina humana, anticuerpos de procolágeno humano, anticuerpos de vitronectinas/receptores de vitronectinas, anticuerpos de vitronectina humana, anticuerpos de receptores de vitronectina humanos, anticuerpos de fibronectina/receptores de fibronectina, anticuerpos de fibronectina humanos y anticuerpos de receptores de fibronectina humanos;
Anticuerpos del factor de crecimiento tales como, por ejemplo, anticuerpos del factor de crecimiento humano, anticuerpos del factor de crecimiento murino y anticuerpos del factor de crecimiento porcino;
Diversos anticuerpos tales como, por ejemplo, anticuerpos de baculovirus, anticuerpos de cadherina, anticuerpos de complemento, anticuerpos Clq, anticuerpos del factor VonWillebrand, anticuerpos Cre, anticuerpos VIH, anticuerpos de la gripe, anticuerpos de leptina humanos, anticuerpos de leptina murinos, anticuerpos CTLA-4 murinos, anticuerpos contra P450 y anticuerpos de ARN polimerasa; y
Anticuerpos neurobiológicos tales como, por ejemplo, anticuerpos amiloides, anticuerpos GFAP, anticuerpos NGF humanos, anticuerpos NT-3 humanos y n T-4 humanos.
Otros anticuerpos adecuados para su uso en la invención incluyen, por ejemplo, los anticuerpos enumerados en referencias tales como el catálogo MSRS de Anticuerpos Primarios y el Directorio de Linscott.
En algunas realizaciones, la fracción de direccionamiento puede incluir, en lugar de un anticuerpo completo, un fragmento de anticuerpo. Un fragmento de anticuerpo se puede obtener digiriendo (por ejemplo, con pepsina o papaína) un anticuerpo completo mediante cualquier método convencional para producir, por ejemplo, un fragmento 5S denominado F(ab')2, un fragmento monovalente Fab' 3,5S, un fragmento Fab' monovalente y/o un fragmento Fc. Alternativamente, se puede preparar un fragmento de anticuerpo mediante métodos conocidos habituales, que incluyen la expresión en una célula huésped heteróloga (p. ej., E. coli) de un polinucleótido que codifica el fragmento.
Fracciones de direccionamiento de moléculas pequeñas pueden incluir, por ejemplo, ligandos de marcadores expresados por células diana. En algunos casos, la fracción de direccionamiento puede incluir un ligando de TLR2 (receptor tipo Toll 2). Ligandos ilustrativos de TLR2 incluyen, por ejemplo, poliICLC, resiquimod, imiquimod, CpG ODN, flagelina, PAMCys3K, MALP2 y lipopolisacárido (LPS).
Otras fracciones de direccionamiento ejemplares incluyen fracciones que pueden dirigirse a células o tejidos tales como, por ejemplo, células del sistema inmunitario o tejidos endoteliales.
En algunas realizaciones alternativas, una variante de anexina II puede acoplarse en una fracción de direccionamiento de células dendríticas. La fracción de direccionamiento puede ser un anticuerpo (p. ej., un anticuerpo anti-DC) o un ligando que no sea un anticuerpo que reconozca un marcador específico de d C.
Marcadores específicos de DC adecuados pueden incluir, por ejemplo, un marcador coestimulador tal como, por ejemplo, cualquier miembro de la superfamilia TFNR (p. ej., CD40), CD70, CD80, CD86, B7-CD, B7.1, B7.2, etc. Otros marcadores específicos de DC incluyen algunos receptores de azúcar tales como, por ejemplo, el receptor de manosa. Por lo tanto, en algunas realizaciones, una variante de anexina II puede acoplarse con un azúcar tal como, por ejemplo, manosa, para dirigir la administración de la variante de anexina II, por ejemplo, a células dendríticas presentadoras de antígeno.
Una composición inmunomoduladora que incluye una fracción de direccionamiento que reconoce un marcador coestimulador puede usarse para administrar dos estímulos activadores de DC (es decir, variante de anexina II y coestimulación) en una sola entidad química.
Tal como se usa en el presente documento, un anticuerpo anti-DC se refiere a un anticuerpo que reconoce un antígeno de células dendríticas. Una fracción de direccionamiento de células dendríticas adecuada puede unirse a cualquier antígeno que se exprese diferencialmente, ya sea cualitativa o cuantitativamente, mediante células dendríticas. Fracciones de direccionamiento de células dendríticas adecuadas pueden unirse a antígenos tales como, por ejemplo, DEC205, BDCA-1, BDCA-2, BDCA-3, BDCA-4, DC-SIGN, L-SIGN, HLR-DR, CD11c, CD13, CD14, CD21, CD33, CD35, CD123, lectinas de tipo C, integrinas (p. ej., a4, a6, a lp l) y/o cualquiera de los receptores tipo Toll (TLR), etc.
Independientemente de si la fracción de direccionamiento ha reconocido un marcador o un antígeno específico de DC, acoplar una variante de anexina II a la fracción de direccionamiento puede limitar la disponibilidad sistémica de la variante de anexina II, incluso aunque se administre por una vía de administración sistémica. Además, la variante de
anexina II puede concentrarse en los alrededores de células dendríticas, madurando y activando así las células dendríticas de manera más eficaz. Las células dendríticas activadas en el sitio de un tumor, o incluso dentro de una masa tumoral, pueden utilizar un antígeno tumoral presente en la superficie de las células tumorales para iniciar una respuesta inmunitaria contra el tumor. Este método podría proporcionar una terapia antitumoral generalizada sin necesidad de anticuerpos específicos contra un tumor.
En otras realizaciones alternativas, una variante de anexina II puede acoplarse a una fracción de direccionamiento anti-macrófagos. Los macrófagos a menudo se localizan en los alrededores de células tumorales. Por lo tanto, de nuevo, la disponibilidad sistémica de la variante de anexina II se puede limitar y la variante de anexina II se puede concentrar en los alrededores de las células diana (es decir, macrófagos), activando así los macrófagos de manera más eficaz. Se sabe que los macrófagos activados poseen actividad antitumoral. Por lo tanto, este método podría proporcionar una terapia tumoral generalizada sin necesidad de anticuerpos específicos contra un tumor.
En otras realizaciones alternativas, una variante de anexina II puede acoplarse a una fracción específica de direccionamiento que reconozca un antígeno de superficie en un tipo de célula que puede matar directamente células tumorales tales como, por ejemplo, células T citotóxicas CD8+, células NK o células NKT. Una vez más, aunque la composición inmunomoduladora se administre sistémicamente, la variante de anexina II se puede concentrar alrededor de las células que matan tumores, (a) activando así las células que matan tumores de manera más efectiva y/o (b) limitando la disponibilidad sistémica de la variante de anexina II. Las células que matan tumores activadas en el sitio de un tumor, o incluso dentro de una masa tumoral, pueden utilizar un antígeno tumoral presente en la superficie de las células tumorales para iniciar una respuesta inmunitaria contra el tumor. Este método podría proporcionar una terapia tumoral generalizada sin necesidad de anticuerpos específicos contra un tumor.
En otras realizaciones alternativas, una variante de anexina II puede acoplarse a una fracción de direccionamiento que reconoce, por ejemplo, una diana endotelial. Existen diferencias significativas en los entornos del endotelio de masas tumorales en comparación con lechos capilares normales. Existen diferencias, por ejemplo, en la identidad y el grado en que se expresan ciertas proteínas de superficie endotelial, moléculas de adhesión (p. ej., integrinas), proteínas de la matriz extracelular, receptores del factor de crecimiento, etc. Estas diferencias pueden aprovecharse para dirigir la administración de una variante de anexina II al endotelio relacionado con el tumor. Se ha demostrado que algunos reactivos que se dirigen específicamente a tales diferencias son útiles como terapias antiangiogénicas. El acoplamiento de un agente antiangiogénico de este tipo, como una fracción de direccionamiento, a una variante de anexina II puede combinar dos terapias antitumorales eficaces: inmunoterapia y terapia antiangiogénesis.
Reactivos antiangiogénesis adecuados incluyen, por ejemplo, anticuerpos anti-CD 105 (CD 105 se sobreexpresa en el endotelio tumoral), anticuerpos anti-ED-B (ED-B es una isoforma de fibronectina que se encuentra en masas tumorales), péptidos reconocidos por integrinas endoteliales asociadas con tumores y factores de crecimiento cuyos receptores están regulados positivamente en el endotelio tumoral (p. ej., factor de crecimiento endotelial vascular).
El uso de reactivos antiangiogénicos de este modo puede ofrecer una combinación de antiangiogénesis e inmunoterapia. Además, la administración dirigida de una variante de anexina II al endotelio tumoral, a diferencia del propio tumor, puede proporcionar un tratamiento a largo plazo más efectivo ya que, en general, el endotelio es un tejido menos mutagénico que una masa tumoral. Por lo tanto, es mucho menos probable que la terapia dirigida al endotelio cause resistencia a medicamentos. Además, una terapia dirigida hacia el endotelio puede ser eficaz contra prácticamente cualquier tumor vascularizado (p. ej., cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de pulmón) sin necesidad de reactivos específicos al tumor.
En algunas realizaciones, una variante de anexina II puede acoplarse a una fracción estabilizante. La fracción estabilizante puede ser, o derivarse de, cualquier material adecuado de modo que la fracción estabilizante aumente la estabilidad de la composición en el cuerpo en comparación con una composición correspondiente sin la fracción estabilizante. Por lo tanto, la fracción estabilizante puede aumentar la vida media de la composición. Tal como se usa en el presente documento, “vida media” puede referirse a la vida media biológica, es decir, el tiempo que tarda la composición en perder la mitad de su actividad biológica, o puede referirse a la vida media en plasma, es decir, el tiempo que tarda la concentración plasmática de la composición en disminuir a la mitad. La relación entre la vida media biológica y la vida media plasmática de una sustancia puede no estar necesariamente correlacionada entre sí debido, por ejemplo, a la acumulación de la sustancia en tejidos, la presencia de metabolitos activos y las interacciones sustancia-receptor. Los expertos en la materia entienden, para cada conjunto dado de circunstancias, si la vida media biológica o la vida media plasmática es más relevante para el conjunto dado de circunstancias. En algunos casos, la fracción estabilizante puede disminuir la tasa de eliminación, es decir, la tasa a la que los riñones eliminan la composición de la circulación. En otros casos, la fracción estabilizante puede disminuir la tasa a la que se degrada la composición. Fracciones estabilizadoras ejemplares incluyen, por ejemplo, polietilenglicol (PEG) y/o región Fc (fragmento cristalizable) de un anticuerpo.
La composición puede incluir además uno o más adyuvantes adicionales. Adyuvantes adicionales adecuados incluyen, por ejemplo, nucleótidos CpG, aminas imidazoquinolina o polipéptidos inmunomoduladores tales como, por ejemplo, diversas proteínas de choque térmico. Al igual que con las combinaciones de variante de anexina II/antígeno, una combinación de variante de anexina II/adyuvante puede mezclarse entre sí, en cosuspensión o proporcionarse en una
emulsión. Cuando se proporciona en una emulsión, la variante de anexina II y el segundo adyuvante se pueden proporcionar en la misma fase de la emulsión o en fases separadas.
Cuando el segundo adyuvante incluye un polipéptido inmunomodulador, la combinación de variante de anexina II y adyuvante pueden acoplarse entre sí de manera que la variante de anexina II y el segundo adyuvante puedan funcionar como coadyuvantes. La variante de la anexina II y el segundo polipéptido inmunomodulador pueden acoplarse covalentemente, acoplarse por afinidad o acoplarse como un polipéptido de fusión.
En otras realizaciones, la composición puede incluir una o más moléculas asociadas a anexina, tales como, por ejemplo, la subunidad heterotetrámera de 11 kDa, una proteína de choque térmico (por ejemplo, Hsp1, Hsp8 o Hsp9) o un no proteico asociado con anexina tal como, por ejemplo, un fosfolípido o un carbohidrato.
En algunas realizaciones, las composiciones descritas en el presente documento pueden incluir opcionalmente además un vehículo farmacéuticamente aceptable. “Farmacéuticamente aceptable” se refiere a un diluyente, un vehículo, un excipiente, sal, etc., compatible con los demás ingredientes de la composición y no perjudicial para su receptor. Típicamente, una composición tal como se describe en este documento puede incluir un vehículo farmacéuticamente aceptable cuando la composición se usa como se describe en este documento. Una composición se puede formular en una preparación farmacéutica en cualquiera de una variedad de formas adaptadas a la vía de administración elegida, incluidas vías adecuadas para estimular una respuesta inmunitaria a un antígeno. Por lo tanto, se puede preparar una composición para la administración por vías conocidas que incluyen, por ejemplo, oral; parenteral incluyendo intradérmica, transcutánea, subcutánea, intramuscular, intravenosa, intraperitoneal, etc.; y/o vía tópica, tal como intranasal, intrapulmonar, intramamaria, intravaginal, intrauterina, intradérmica, transcutánea y/o rectal.
En algunas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento pueden incluir la administración de una cantidad de variante de anexina II suficiente para proporcionar una dosis de, por ejemplo, aproximadamente 100 ng/kg a aproximadamente 50 mg/kg, al sujeto, aunque en algunas realizaciones los métodos pueden realizarse mediante la administración de la variante de anexina II en una dosis fuera de este rango. En algunas de estas realizaciones, el método incluye administrar la variante de anexina II suficiente para proporcionar una dosis de alrededor de 10 pg/kg a alrededor de 5 mg/kg al sujeto, por ejemplo, una dosis de alrededor de 100 pg/kg a alrededor de 1 mg/kg o desde aproximadamente 50 pg/kg a aproximadamente 500 pg/kg.
Alternativamente, la dosis se puede calcular utilizando el peso corporal real obtenido justo antes del comienzo de un ciclo de tratamiento. Para las dosis calculadas de esta manera, la superficie corporal (m2) se calcula antes del comienzo del ciclo de tratamiento utilizando el método de Dubois: m2 = (peso kg0425 x altura cm0725) x 0,007184. En algunas realizaciones, los métodos pueden incluir la administración de variante de anexina II suficiente para proporcionar una dosis de, por ejemplo, aproximadamente 0,01 mg/m2 a aproximadamente 10 mg/m2.
En otro aspecto, esta divulgación describe varios métodos para proporcionar inmunoterapia a un sujeto que necesita dicho tratamiento. En general, los métodos implican la administración de una cantidad eficaz de una composición descrita en el presente documento a un sujeto que necesita dicho tratamiento. Tal como se usa aquí, una cantidad eficaz se refiere a una cantidad administrada en una dosis y régimen adecuados que proporciona una inmunoterapia profiláctica o terapéutica. Una cantidad eficaz puede ser cualquier cantidad que reduzca, limite la progresión, mejore o resuelva, en cualquier medida, los síntomas o signos clínicos relacionados con una enfermedad en comparación con un individuo en situación similar pero no tratado. “Mejorar” se refiere a cualquier reducción del grado, severidad, frecuencia y/o probabilidad de un síntoma o signo clínico característico de una enfermedad particular.
Las composiciones descritas en el presente documento proporcionan una nueva estrategia para proporcionar inmunoterapia aplicable a inmunoterapia dirigida contra una amplia gama de enfermedades. Tal como se ha analizado anteriormente, tales enfermedades pueden incluir tumores o enfermedades que resultan de la infección por un agente infeccioso, inmunoterapia en la que se desea una respuesta inmunitaria Th1 (es decir, una respuesta inmunitaria mediada por células). Por consiguiente, los métodos también pueden ser aplicables para terapia dirigida contra enfermedades mediadas porTh2 tales como, por ejemplo, alergia y/o asma. En tales casos, las composiciones tienen utilidad porque la administración de las composiciones predispone el sistema inmunitario a favor de una respuesta inmunitaria dominante Th1/ mediada por células y en contra de una respuesta inmunitaria Th2.
En algunas realizaciones, los métodos pueden implicar la preparación de una vacuna de células dendríticas, que luego se puede administrar a un sujeto que necesite dicho tratamiento. Las células dendríticas se pueden pulsar con una composición variante de anexina II/antígeno, tal como se describe en el presente documento. La preparación de las células dendríticas de esta manera puede aumentar la presentación cruzada del antígeno en MHC I y, por tanto, la respuesta de las células CD8+ T provocada por las células dendríticas de la vacuna.
Para cualquier método descrito en este documento que incluya pasos específicos, los pasos se pueden realizar en cualquier orden factible. Y, según corresponda, cualquier combinación de dos o más pasos puede realizarse simultáneamente.
Ejemplos
Tabla 1. Variantes de anexina II
Ejemplo 1
Se diferenciaron células dendríticas derivadas de médula ósea (BMDC) de ratones C57BL/6 y se pulsaron con hgp10025-33 (SEQ ID NO: 27) con proteína de fusión anexina II-Ov A (SEQ ID NO: 32) a la misma concentración (*) o igual relación molecular (**) como monómero A2 (SEQ ID NO: 28) y se incubó durante 24 horas. El monómero de anexina A2 se utilizó como control positivo. Se añadieron células T CD8+ Pmel purificadas y se cocultivaron durante 48 horas más. Se cuantificó IFN-y en el sobrenadante de cultivo tisular mediante matriz de perlas. Los resultados se muestran en la figura 1.
Se pulsaron BMDC con OVA248-274 (SEQ ID NO: 31), anexina II (monómero A2, SEQ ID NO: 28), una combinación de OVA248-274 y anexina II (monómero A2 OVA), o proteína de fusión anexina II-OVA (A2OVA, SEQ ID NO: 32), y se incubó durante 24 horas. Se añadieron células CD8+ T OT-1 purificadas y se cocultivaron durante 48 horas adicionales. Se cuantificó IFN-y en el sobrenadante de cultivo tisular mediante matriz de perlas. Los resultados se muestran en la figura 2.
Se cultivaron BMDC (tipo salvaje, TLR4'/_, y MyD88'/_) con 20 ng/ml de GM-CSF durante seis días, luego se pulsaron con 50 ng de Pam3CSK4, 50 ng de LPS o 5o |jg del péptido de fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos (SEQ ID NO: 5, A2-15aa). Después de 48 horas, se analizó el TFN en el sobrenadante de cultivo celular mediante matriz de perlas. Los resultados se muestran en la figura 10
Se cultivaron BDMC (tipo salvaje, TLR2'/_, TLR4'/_ y MyD88'/_) con 20 ng/ml de GM-CSF durante seis días, luego se pulsaron con 50 ng de Pam3CSK4, 50 ng de LPS, 50 jg del fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos (SEQ ID NO: 5, 15aa A2p) o 50 |jg de variante de anexina II A-6 (SEQ ID NO: 17, 15aa A2p6 AL). Después de 48 horas, las células se tiñeron para CD11c, MHC II, CD80 y CD86 y se analizaron por citometría de flujo. El MFI que se muestra es de una célula viva, prueba CD11C+MHCII+. Los resultados de la prueba CD80 se muestran en la figura 11; los resultados de la prueba CD86 se muestran en la figura 12
Ejemplo 2
Células Azules HEK 293 (Invivogen, San Diego, CA) transfectadas de manera estable con hTLR2 se pulsaron con proteína de fusión anexina II-OVA (A2OVA, SEQ ID NO: 32) a la misma concentración que el monómero de anexina II (péptido A2, SEQ ID NO: 28). Se usaron polipéptido N-terminal de anexina II codificado (SEQ ID NO: 29, codificado) y un fragmento de anexina II (SEQ ID NO: 30, minus p11) como controles. Las células se incubaron durante 48 horas. Después de la incubación, se añadió sobrenadante a Quanti-Blue (Invivogen, San Diego, CA) para la detección de fosfatasa alcalina secretada. Los resultados se muestran en la figura 3.
Ejemplo 3
Tal como se muestra en la figura 4A, se vacunaron ratones BL/6 durante cuatro días consecutivos en la pata trasera con Poly:ICLC y 50 jg de proteína de fusión A2OVA (SEQ ID NO:32), A2OVA-pp11 (SEQ ID NO:30, o péptido A2OVA codificado (SEQ ID NO: 29). El día 8, se extrajo sangre de los ratones y se analizó la sangre completa para determinar la expansión de CD8+ SIINFEKL+. Los resultados se muestran en la figura 4B.
Los ratones BL/6 se vacunaron por separado durante cuatro días consecutivos en la pata trasera con ovoalbúmina (OVA), ovoalbúmina 50 jg del péptido de fragmento N-terminal de anexina II de 15 aminoácidos (SEQ ID NO: 5, 15aa), u ovoalbúmina 50 jg de anexina II (SEQ ID NO: 28, rA2). El día 8, se extrajo sangre de los ratones y se
Claims (15)
1. Fragmento de anexina II que consta de una secuencia de aminoácidos según cualquiera de SEQ ID NO: 2 - 4.
2. Composición que comprende el fragmento de anexina II según la reivindicación 1.
3. Composición según la reivindicación 2 que comprende además al menos un antígeno.
4. Composición según la reivindicación 2 o la reivindicación 3 que comprende además un segundo adyuvante.
5. Composición según la reivindicación 3 o la reivindicación 4, en la que el antígeno o el segundo adyuvante se acopla al fragmento de anexina II.
6. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5, que comprende además una fracción de direccionamiento acoplada al fragmento de anexina II.
7. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 6 que comprende además una fracción estabilizante acoplada al fragmento de anexina II.
8. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en la que el acoplamiento comprende un acoplamiento covalente.
9. Composición según la reivindicación 8, en la que el acoplamiento covalente comprende un entrecruzamiento covalente entre:
el fragmento de anexina II; y
el antígeno, la fracción de direccionamiento, la fracción estabilizante o el segundo adyuvante.
10. Composición según la reivindicación 8 o 9, en la que el acoplamiento covalente comprende una fusión polipeptídica entre:
el fragmento de anexina II; y
el antígeno, la fracción de direccionamiento, la fracción estabilizante o el segundo adyuvante.
11. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en la que el acoplamiento comprende un acoplamiento por afinidad.
12. Composición según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende además un vehículo farmacéuticamente aceptable.
13. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 12 para usar en medicina.
14. Método in vitro que comprende:
poner en contacto células dendríticas con la composición según cualquiera de las reivindicaciones 3 a 12, en donde la composición comprende un antígeno.
15. Composición para usar según la reivindicación 13, en la que las células dendríticas se ponen en contacto con la composición según el método de acuerdo con la reivindicación 14 y las células dendríticas se administran a un sujeto.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201361903628P | 2013-11-13 | 2013-11-13 | |
PCT/US2014/065390 WO2015073632A1 (en) | 2013-11-13 | 2014-11-13 | Annexin ii variant compositions and methods |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
ES2928331T3 true ES2928331T3 (es) | 2022-11-17 |
Family
ID=52101577
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES14812331T Active ES2928331T3 (es) | 2013-11-13 | 2014-11-13 | Composiciones de variantes de anexina II y métodos |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10206986B2 (es) |
EP (1) | EP3068428B1 (es) |
AU (1) | AU2014348645B2 (es) |
CA (1) | CA2930567C (es) |
DK (1) | DK3068428T3 (es) |
ES (1) | ES2928331T3 (es) |
HU (1) | HUE060293T2 (es) |
PL (1) | PL3068428T3 (es) |
WO (1) | WO2015073632A1 (es) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20180133327A1 (en) * | 2015-03-16 | 2018-05-17 | Amal Therapeutics Sa | Cell Penetrating Peptides and Complexes Comprising the Same |
FI3468621T3 (fi) * | 2016-06-10 | 2023-01-13 | Anneksiinien ydindomeeni ja sen käyttöjä antigeenin kuljettamisessa ja rokottamisessa | |
KR20190057345A (ko) * | 2016-09-21 | 2019-05-28 | 아말 테라퓨틱스 에스에이 | 암 치료를 위한, 세포 투과 펩타이드, 멀티 에피토프 및 tlr 펩타이드 작용제를 포함하는 융합체 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7262167B2 (en) | 1995-11-06 | 2007-08-28 | Exibona Ltd. | Drug, in particular for modulating the immunological response for the control of viruses, tumors, bacteria and parasites |
US6645465B2 (en) | 1999-08-06 | 2003-11-11 | Michigan, University Of The Regents | Annexin proteins and autoantibodies as serum markers for cancer |
DK1313504T3 (da) | 2000-09-01 | 2007-02-26 | Philadelphia Health & Educatio | Fremgangsmåder og sammensætninger til hæmning af angiogenese |
DE10225144A1 (de) | 2002-05-29 | 2003-12-18 | Immatics Biotechnologies Gmbh | An MHC-Moleküle bindende Tumor-assoziierte Peptide |
US7695725B2 (en) | 2003-02-06 | 2010-04-13 | Aduro Biotech | Modified free-living microbes, vaccine compositions and methods of use thereof |
WO2010065613A2 (en) | 2008-12-03 | 2010-06-10 | The Johns Hopkins University | Annexina2 as immunological target |
KR101121198B1 (ko) * | 2009-05-20 | 2012-03-23 | (주)노바셀테크놀로지 | 태반에서 추출된 펩타이드 혼합물, 그의 제조 방법 및 용도 |
US9555074B2 (en) | 2010-10-08 | 2017-01-31 | Regents Of The University Of Minnesota | Annexin II compositions |
-
2014
- 2014-11-13 US US15/036,115 patent/US10206986B2/en active Active
- 2014-11-13 HU HUE14812331A patent/HUE060293T2/hu unknown
- 2014-11-13 WO PCT/US2014/065390 patent/WO2015073632A1/en active Application Filing
- 2014-11-13 EP EP14812331.8A patent/EP3068428B1/en active Active
- 2014-11-13 CA CA2930567A patent/CA2930567C/en active Active
- 2014-11-13 ES ES14812331T patent/ES2928331T3/es active Active
- 2014-11-13 DK DK14812331.8T patent/DK3068428T3/da active
- 2014-11-13 PL PL14812331.8T patent/PL3068428T3/pl unknown
- 2014-11-13 AU AU2014348645A patent/AU2014348645B2/en active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20160279212A1 (en) | 2016-09-29 |
AU2014348645B2 (en) | 2019-01-24 |
CA2930567C (en) | 2023-09-26 |
EP3068428A1 (en) | 2016-09-21 |
AU2014348645A1 (en) | 2016-06-02 |
US10206986B2 (en) | 2019-02-19 |
WO2015073632A1 (en) | 2015-05-21 |
PL3068428T3 (pl) | 2023-03-13 |
DK3068428T3 (da) | 2022-10-17 |
HUE060293T2 (hu) | 2023-02-28 |
CA2930567A1 (en) | 2015-05-21 |
EP3068428B1 (en) | 2022-08-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US10117928B2 (en) | Annexin II compositions | |
JP7550745B2 (ja) | Il2アゴニスト | |
JP7505984B2 (ja) | サイトカインをコードするrnaを用いた治療 | |
US20230074462A1 (en) | Methods and compositions for stimulating immune response | |
ES2928331T3 (es) | Composiciones de variantes de anexina II y métodos | |
US20220143144A1 (en) | Treatment involving interleukin-2 (il2) and interferon (ifn) | |
JP2022539543A (ja) | Il2アゴニスト | |
Mincheff et al. | Immune responses against PSMA after gene-based vaccination for immunotherapy–A: results from immunizations in animals | |
JP2023554155A (ja) | 癌を治療するための治療用rna | |
US20240041999A1 (en) | Therapeutic RNA for Treating Cancer | |
JP2023554154A (ja) | サイトカインタンパク質の治療スケジュール |