ES2926518T3 - Compuestos de pirazolopiridinona - Google Patents

Compuestos de pirazolopiridinona Download PDF

Info

Publication number
ES2926518T3
ES2926518T3 ES18880606T ES18880606T ES2926518T3 ES 2926518 T3 ES2926518 T3 ES 2926518T3 ES 18880606 T ES18880606 T ES 18880606T ES 18880606 T ES18880606 T ES 18880606T ES 2926518 T3 ES2926518 T3 ES 2926518T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
alkyl
compounds
compound according
compound
heterocyclyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES18880606T
Other languages
English (en)
Inventor
Haibing Guo
Zhao-Kui Wan
Luoheng Qin
Qian Liu
Wing Shun Cheung
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Janssen Pharmaceutica NV
Original Assignee
Janssen Pharmaceutica NV
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Janssen Pharmaceutica NV filed Critical Janssen Pharmaceutica NV
Application granted granted Critical
Publication of ES2926518T3 publication Critical patent/ES2926518T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

Compuestos de pirazolopiridinona, las composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos y el uso de dichos compuestos como inhibidores del FGFR (receptor del factor de crecimiento de fibroblastos) y su uso en el tratamiento de enfermedades, por ejemplo, cáncer. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Compuestos de pirazolopiridinona
CAMPO DE LA INVENCIÓN
La invención se refiere a nuevos compuestos de pirazolopiridinona, a composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos, a procedimientos para la preparación de dichos compuestos y al uso de dichos compuestos como inhibidores del FGFR (siglas inglesas del receptor del factor de crecimiento de fibroblastos) y a su uso en el tratamiento de enfermedades, por ejemplo, cáncer.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
Se ha demostrado que las vías de señalización del factor de crecimiento de fibroblastos (FGF, por sus siglas en inglés) desempeñan papeles críticos en procesos que van desde la embriogénesis y la cicatrización de heridas y también han mostrado fuertes vínculos con varias características distintivas del cáncer. Alteraciones genéticas en los miembros de la familia del FGFR están asociadas con el crecimiento del tumor, la metástasis, la angiogénesis y la supervivencia. Una diversidad de inhibidores del FGFR se encuentra en ensayos clínicos y han mostrado una respuesta clínica en pacientes con aberraciones del FGFR. Sin embargo, se ha informado que las mutaciones que afectan a los aminoácidos en el FGFR, p. ej., FGFR1,2 o 3, pueden provocar resistencia a los inhibidores del FGFR o disminuir la sensibilidad a los inhibidores del FGFR. El desarrollo de mutaciones secundarias en el dominio de la quinasa del FGFR tras el tratamiento con inhibidores del FGFR es un mecanismo importante de resistencia adquirida a la inhibición del FGFR. También existen mutaciones puntuales del FGFR equivalentes de novo en los cánceres. Se han informado mutaciones del guardián como uno de los principales mecanismos que conducen a la resistencia a los inhibidores de la tirosina quinasa. Las mutaciones del guardián incluyen FGFR3 V555L/V555M, FGFR1 V561M, FGFR2 V564F/V564I/V564M y FGFR4 V550L. Se ha informado de mutaciones resistentes al FGFR en ensayos clínicos y sistemas celulares in vitro. Por lo tanto, se necesitan nuevos inhibidores del FGFR (segunda generación) para una actividad más duradera en los cánceres que albergan alteraciones en la vía de señalización del FGFR para superar la resistencia clínica adquirida a la terapia con inhibidores del FGFR de primera generación. Los inhibidores del FGFR de segunda generación son necesarios para superar la actividad reducida observada para los inhibidores del FGFR de primera generación contra los FGFRs que albergan las mutaciones de guardián anteriores y, por lo tanto, mantener la actividad inhibidora del FGFR.
Se encontró que los compuestos de la invención muestran actividad frente a FGFRs mutados, en particular frente a FGFRs que albergan mutaciones guardián o frente a FGFR1 mutado o FGFR2 mutado o FGFR3 mutado, en particular frente a FGFR3 V555L, FGFR3 V555M, FGFR1 V561M y FGFR2 V564I, particularmente frente a FGFR3 V555L y FGFR3 V555M. Los documentos WO2002 /022598, WO2003/087095, WO2004/018419, WO2004/043389, WO2005/046589 describen cada uno una serie de derivados de quinolinona.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
La invención proporciona compuestos de fórmula (I):
Figure imgf000002_0001
incluyendo cualquier forma tautomérica y estereoquímicamente isomérica del mismo, en donde
A1 , A2 y A3 representan, cada uno independientemente, CH, CRa o N, con la condición de que un máximo de dos de A1 , A2 y A3 pueden representar CRa;
C1 es hidrógeno o alquilo C1-4;
C2 es hidrógeno, alquilo C1-4, hidroxilo o alcoxi C1-4;
o C1 y C2 se toman juntos para formar un cicloalquilo C3-6 junto con el átomo de carbono al que están unidos;
Y es un enlace directo, -O-, C(=O), NRy, S(=O)2 o alquilo C1-4
Ry es hidrógenoo alquilo C1-4;
cada uno de los Ra, independientemente, es alquilo C1-6, haloalquilo C1-6 , halo, alcoxi C1-6, carboxilo, alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, ciano, cianoalquilo C1- 6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo C1-4)2, o un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
Rb es hidrógeno, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, alcoxi C1-6, alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6 , cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2, -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo C1-4)2 , cicloalquilo C 3-6, fenilo, un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o alquilo C1-6 sustituido con cicloalquilo C3-6 o con fenilo o con un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
D es un heterociclilo de 3 a 12 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc;
cada uno de los Rc, independientemente, es oxo, halo, alquilo C1-6, alquil C1-6oxi, hidroxialquilo C1-6, haloalquilo C1-6, haloalquil C1-6 oxi, carboxilo, HOOC-alquiloC1-6-, alquilo C1-6 sustituido con -C(=O)-O-alquilo C1-6, alquil C1-6-OC(=O)-, ciano, cianoalquilo C1-6, alquil C1-6 -C(= O)-, -SO2 -alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6,fenilo, un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o un heterociclilo monocíclico aromático de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
B es un carbociclilo de 3 a 12 miembros o un heterociclilo de 3 a 12 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho carbociclilo y heterociclilo está cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes R;
cada uno de los R es independientemente alquilo C1-6, ciano, halo, alcoxi C1-6, haloalcoxi C1-6, hidroxilo, hidroxialquilo C1-6, haloalquilo C1-6, oxo, -SO2 -NH2, -SO2-NH(alquilo C1-4), -SO2-N(alquilo C1-4)2, -NH-C(=O)-alquenilo C2-6, -C(=O)-alquilo C1-6,
-C(=O)-alquenilo C2-6, alquil C1-6-OC(=O)-, cicloalquilo C3-6, fenilo o un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o los solvatos de los mismos.
Las referencias a métodos de tratamiento en los párrafos posteriores de esta descripción deben interpretarse como referencias a los compuestos y composiciones farmacéuticas de la presente invención para uso en un método para el tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia.
En otro aspecto, se proporciona un método para la profilaxis o el tratamiento de un estado de enfermedad o afección mediada por una quinasa del FGFR, cuyo método comprende administrar a un sujeto que lo necesita un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
En un aspecto adicional, se proporciona un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo para uso en la profilaxis o el tratamiento de una enfermedad o afección mediada por una quinasa del FGFR.
En aún un aspecto adicional, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de una enfermedad o afección mediada por una quinasa del FGFR.
En otro aspecto, se proporciona un método para la profilaxis o el tratamiento del cáncer, cuyo método comprende administrar a un sujeto que lo necesita un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo. En particular, el cáncer es un cáncer mediado por una quinasa del FGFR.
En un aspecto adicional, se proporciona un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo para uso en la profilaxis o el tratamiento del cáncer. En particular, el cáncer es un cáncer mediado por una quinasa del FGFR.
En aún un aspecto adicional, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento del cáncer. En particular, el cáncer es un cáncer mediado por una quinasa del FGFR.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
A menos que el contexto indique lo contrario, las referencias a la fórmula (I) en todas las secciones de este documento (incluyendo los usos, métodos y otros aspectos de la invención) incluyen referencias a todas las demás subfórmulas (p.
ej., (I-a), (I-A ), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a)), subgrupos, preferencias, realizaciones y ejemplos tal como se definen en esta memoria.
El prefijo "Cx-y" (en que x e y son números enteros), tal como se utiliza en esta memoria, se refiere al número de átomos de carbono en un grupo dado. Así, un grupo alquilo C1-6 contiene de 1 a 6 átomos de carbono, un grupo cicloalquilo C3-6 contiene de 3 a 6 átomos de carbono, un grupo alcoxi C1-4 contiene de 1 a 4 átomos de carbono, y así sucesivamente.
El término 'halo' o 'halógeno', tal como se utiliza en esta memoria, se refiere a un átomo de flúor, cloro, bromo o yodo.
El término 'alquilo C1-4', o 'alquilo C1-6', tal como se utiliza en esta memoria, como un grupo o parte de un grupo se refiere a un grupo hidrocarbonado saturado, lineal o ramificado, que contiene de 1 a 4 o de 1 a 6 átomos de carbón. Ejemplos de grupos de este tipo incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec.-butilo, terc.-butilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo o hexilo, y similares.
El término 'alquenilo C2-4' o 'alquenilo C2-6', tal como se utiliza en esta memoria, como un grupo o parte de un grupo se refiere a un grupo hidrocarbonado lineal o ramificado que contiene de 2 a 4 o de 2 a 6 átomos de carbono y que contiene un doble enlace carbono-carbono.
El término 'alquinilo C2-4' o 'alquinilo C2-6', tal como se utiliza en esta memoria, como un grupo o parte de un grupo se refiere a un grupo hidrocarbonado lineal o ramificado que tiene de 2 a 4 o de 2 a 6 átomos de carbono y que contiene un triple enlace carbono-carbono.
El término 'alcoxi C1-4' o 'alcoxi C1-6', tal como se utiliza en esta memoria, como un grupo o parte de un grupo se refiere a un grupo -O-alquilo C1-4 o un grupo -O-alquilo C1-6, en donde alquilo C1-4y alquilo C1-6 son como se definen en esta memoria. Ejemplos de grupos de este tipo incluyen metoxi, etoxi, propoxi, butoxi y similares.
El término 'cicloalquilo C3-6', tal como se utiliza en esta memoria, se refiere a un anillo hidrocarbonado monocíclico saturado de 3 a 6 átomos de carbono. Ejemplos de grupos de este tipo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo o ciclohexilo.
El término 'hidroxialquilo C1-4' o 'hidroxialquilo C1-6', tal como se utiliza en esta memoria, como un grupo o parte de un grupo se refiere a un grupo alquilo C1-4 o alquilo C1-6 como se define en esta memoria, en donde uno o más de un átomo de hidrógeno está reemplazado por un grupo hidroxilo. Los términos 'hidroxialquilo C1-4’ o 'hidroxialquilo C1-6' incluyen, por lo tanto, monohidroxialquilo C1-4, monohidroxialquilo C1-6 y también polihidroxialquilo C1-4y polihidroxialquilo C1-6. Puede haber uno, dos, tres o más átomos de hidrógeno reemplazados por un grupo hidroxilo, por lo que el hidroxialquilo C1-4 o el hidroxialquilo C1-6 pueden tener uno, dos, tres o más grupos hidroxilo. Ejemplos de grupos de este tipo incluyen hidroximetilo, hidroxietilo, hidroxipropilo y similares.
El término 'haloalquilo C1-4’ o 'haloalquilo C1-6', tal como se utiliza en esta memoria, como un grupo o parte de un grupo se refiere a un grupo alquilo C1-4 o alquilo C1-6 como se define en esta memoria, en donde uno o más de un átomo de hidrógeno está reemplazado por un halógeno. El término 'haloalquilo C1-4' o 'haloalquilo C1-6' incluye, por lo tanto, monohaloalquilo C1-4, monohaloalquilo C1-6 y también polihaloalquilo C1-4 y polihaloalquilo C1-6. Puede haber uno, dos, tres o más átomos de hidrógeno reemplazados por un halógeno, por lo que el haloalquilo C1-4 o el haloalquilo C1-6 pueden tener uno, dos, tres o más halógenos. Ejemplos de grupos de este tipo incluyen fluoroetilo, fluorometilo, trifluorometilo o trifluoroetilo, y similares.
El término 'haloalcoxi C1-4 ' o ' haloalcoxi C1-6', tal como se utiliza en esta memoria, como un grupo o parte de un grupo se refiere a un grupo -O-alquilo C1-4 o un grupo -O-alquilo C1-6 tal como se define en esta memoria, en donde uno o más de un átomo de hidrógeno está reemplazado por un halógeno. Los términos 'haloalcoxi C1-4' o 'haloalcoxi C1-6' incluyen, por lo tanto, monohaloalcoxi C1-4, monohaloalcoxi C1-6 y también polihaloalcoxi C1 -4y polihaloalcoxi C1-6. Puede haber uno, dos, tres o más átomos de hidrógeno reemplazados por un halógeno, por lo que el haloalcoxi C1-4 o haloalcoxi C1-6 pueden tener uno, dos, tres o más halógenos. Ejemplos de grupos de este tipo incluyen fluoroetiloxi, difluorometoxi o trifluorometoxi, y similares.
El término cianoalquilo C1-4 o cianoalquilo C1-6, tal como se utiliza en esta memoria, se refiere a un grupo alquilo C1-4 o alquilo C1-6 tal como se define en esta memoria que está sustituido con uno o dos grupos ciano, en particular con un grupo ciano.
El término "heterociclilo", tal como se utiliza en esta memoria, a menos que el contexto indique lo contrario, incluirá sistemas de anillos tanto aromáticos como no aromáticos. Así, por ejemplo, el término "heterociclilo" incluye dentro de su alcance sistemas de anillos de heterociclilo aromáticos, no aromáticos, insaturados, parcialmente saturados y totalmente saturados. En general, a menos que el contexto indique lo contrario, sistemas de anillos de este tipo pueden ser monocíclicos o bicíclicos o puenteados y pueden contener, por ejemplo, de 3 a 12 miembros del anillo o de 4 a 10 miembros del anillo, o más habitualmente de 5 a 10 miembros del anillo. La referencia a 4 a 7 miembros del anillo incluye 4, 5, 6 o 7 átomos en el anillo, la referencia a 3 a 6 miembros del anillo incluye 3, 4, 5 o 6 átomos en el anillo y la referencia a 4 a 6 miembros del anillo incluye 4, 5 o 6 átomos en el anillo. Ejemplos de sistemas de anillos de heterociclilo monocíclicos son sistemas de anillos que contienen 3, 4, 5, 6, 7 u 8 miembros del anillo, más habitualmente 3 a 7, y preferiblemente 4, 5, 6 o 7 miembros del anillo, más preferiblemente 5 o 6 miembros del anillo. Ejemplos de sistemas de anillos de heterociclilo bicíclicos son los que contienen 8, 9, 10, 11 o 12 miembros del anillo, y más habitualmente 9 o 10 miembros del anillo. Los sistemas de anillos de heterociclilo contienen al menos un heteroátomo típicamente seleccionado de nitrógeno, oxígeno o azufre, en particular contienen hasta 5, hasta 4, hasta 3, hasta 2 o un solo heteroátomo. Cuando se hace referencia en esta memoria a un sistema de anillo heterociclilo, el anillo heterociclilo puede, a menos que el contexto indique lo contrario, estar opcionalmente sustituido (es decir, sustituido o sin sustituir) con uno o más sustituyentes como se describe en esta memoria.
Los sistemas de anillos de heterociclilo pueden ser sistemas de anillos de heteroarilo que tienen de 5 a 12 miembros del anillo, más habitualmente de 5 a 10 miembros del anillo. El término "heteroarilo" se utiliza en esta memoria para designar un sistema de anillos heterociclilo que tiene carácter aromático. El término "heteroarilo" abarca sistemas de anillos policíclicos (p. ej., bicíclicos), en donde uno o más anillos no son aromáticos, con la condición de que al menos un anillo sea aromático. En sistemas policíclicos de este tipo, el sistema de anillos puede estar fijado al resto del compuesto por un anillo aromático o por un anillo no aromático.
Ejemplos de grupos heteroarilo son grupos monocíclicos y bicíclicos que contienen de cinco a doce miembros del anillo, y más habitualmente de cinco a diez miembros del anillo. El grupo heteroarilo puede ser, por ejemplo, un anillo monocíclico de cinco o seis miembros o una estructura bicíclica formada por anillos condensados de cinco y seis miembros o dos anillos condensados de seis miembros, o dos anillos condensados de cinco miembros. El sistema de anillos de heteroarilo puede contener hasta aproximadamente cinco heteroátomos típicamente seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre. Típicamente, el anillo de heteroarilo contendrá hasta 4 heteroátomos, más típicamente hasta 3 heteroátomos, más habitualmente hasta 2, por ejemplo, un solo heteroátomo. En una realización, el anillo de heteroarilo contiene al menos un átomo de nitrógeno en el anillo. Los átomos de nitrógeno en los anillos de heteroarilo pueden ser de carácter básico como en el caso de un imidazol o una piridina, o esencialmente de carácter no básico como en el caso de un nitrógeno de un indol o pirrol. En general, el número de átomos de nitrógeno básicos presentes en el grupo heteroarilo, incluyendo cualesquiera sustituyentes del grupo amino del anillo, será inferior a cinco.
Ejemplos de grupos heteroarilo de cinco miembros incluyen, pero no se limitan a grupos pirrolilo, furanilo, tienilo, imidazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, oxatriazol, isoxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, isotiazolilo, pirazolilo, triazolilo y tetrazolilo. En particular, ejemplos de grupos heteroarilo de cinco miembros incluyen, pero no se limitan a grupos pirrolilo, furanilo, tienilo, imidazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, isotiazolilo, pirazolilo y triazolilo.
Ejemplos de grupos heteroarilo de seis miembros incluyen, pero no se limitan a piridilo, pirazinilo, piridazinilo, pirimidinilo y triazinilo.
Un grupo heteroarilo bicíclico puede ser, por ejemplo, un grupo seleccionado de:
a) un anillo de benceno condensado con un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 1,2 o 3 heteroátomos en el anillo; b) un anillo de piridina condensado con un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 0, 1,2 o 3 heteroátomos en el anillo; c) un anillo de pirimidina condensado con un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 0, 1 o 2 heteroátomos en el anillo; d) un anillo de pirrol condensado con un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 0, 1,2 o 3 heteroátomos en el anillo; e) un anillo de pirazol condensado con un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 0, 1 o 2 heteroátomos en el anillo; f) un anillo de imidazol condensado con un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 0, 1 o 2 heteroátomos en el anillo; g) un anillo de oxazol condensado con un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 0, 1 o 2 heteroátomos en el anillo; h) un anillo de isoxazol condensado con un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 0, 1 o 2 heteroátomos en el anillo; i) un anillo de tiazol condensado con un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 0, 1 o 2 heteroátomos en el anillo;
j) un anillo de isotiazol condensado con un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 0, 1 o 2 heteroátomos en el anillo; k) un anillo de tiofeno condensado con un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 0, 1,2 o 3 heteroátomos en el anillo; l) un anillo de furano condensado con un anillo de 5 o 6 miembros que contiene 0, 1, 2 o 3 heteroátomos en el anillo; m) un anillo de ciclohexilo condensado con un anillo aromático de 5 o 6 miembros que contiene 1,2 o 3 heteroátomos en el anillo; y
n) un anillo de ciclopentilo condensado con un anillo aromático de 5 o 6 miembros que contiene 1,2 o 3 heteroátomos en el anillo.
Ejemplos particulares de grupos heteroarilo bicíclicos que contienen un anillo de cinco miembros condensado con otro anillo de cinco miembros incluyen, pero no se limitan a imidazotiazolilo (p. ej., imidazo[2,1 -b]tiazol) e imidazoimidazolilo (p. ej., imidazo[1,2-a ]imidazol).
Ejemplos particulares de grupos heteroarilo bicíclicos que contienen un anillo de seis miembros condensado con un anillo de cinco miembros incluyen, pero no se limitan a benzofuranilo, benzotiofenilo, bencimidazolilo, benzoxazolilo, isobenzoxazolilo, benzisoxazolilo, benzotiazolilo, benzisotiazolilo, isobenzofuranilo, indolilo, isoindolilo, indolizinilo, indolinilo, isoindolinilo, purinilo, indazolilo, pirazolopirimidinilo (p. ej., pirazolo[1,5-a]pirimidina), triazolopirimidinilo (p. ej., [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidina), benzodioxolilo, imidazopirazinilo, imidazopiridazinilo, imidazopiridinilo y grupos pirazolopiridinilo (p. ej., pirazolo[1,5-a]piridina).
Ejemplos particulares de grupos heteroarilo bicíclicos que contienen un anillo de seis miembros condensado con un anillo de cinco miembros incluyen, pero no se limitan a grupos benzofuranilo, benzotiofenilo, benzimidazolilo, benzoxazolilo, benzisoxazolilo, benzotiazolilo, benzoisotiazolilo, indolilo, isoindolilo, indolizinilo, indolinilo, isoindolinilo, indazolilo, pirazolopirimidinilo (p. ej., pirazolo[1,5-a]pirimidina), triazolopirimidinilo (p. ej., [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidina), imidazopirazinilo, imidazopiridazinilo, imidazopiridinilo y pirazolopiridinilo (p. ej., pirazolo[1,5-a]piridina).
Ejemplos particulares de grupos heteroarilo bicíclicos que contienen un anillo de seis miembros condensado con un anillo de cinco miembros incluyen pero no se limitan a grupos benzofuranilo, benzotiofenilo, benzimidazolilo, benzotiazolilo, indolilo, isoindolilo, indolizinilo, indolinilo.
Ejemplos particulares de grupos heteroarilo bicíclicos que contienen dos anillos de seis miembros condensados incluyen, pero no se limitan a grupos quinolizinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, cinolinilo, cromanilo, isocromanilo, tiocromanilo, benzopiranilo, benzodioxanilo, benzoxazinilo, piridopiridinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, ftalazinilo, naftiridinilo y pteridinilo.
Ejemplos particulares de grupos heteroarilo bicíclicos que contienen dos anillos de seis miembros condensados incluyen, pero no se limitan a grupos quinolizinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, benzopiranilo, benzodioxanilo, benzoxazinilo, piridopiridinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, ftalazinilo, naftiridinilo y pteridinilo.
Ejemplos particulares de grupos heteroarilo bicíclicos que contienen dos anillos de seis miembros condensados incluyen, pero no se limitan a grupos quinolizinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, ftalazinilo, naftiridinilo y pteridinilo.
Ejemplos de grupos heteroarilo policíclicos que contienen un anillo aromático y un anillo no aromático incluyen tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, dihidrobenzotienilo, dihidrobenzofuranilo, 2,3-dihidro-benzo[1,4]dioxinilo, benzo[1,3]dioxolilo, 4,5,6,7-tetrahidrobenzofuranilo, tetrahidrotriazolopirazinilo (p. ej., 5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazinilo) e indolinilo.
Un anillo heteroarilo que contiene nitrógeno debe contener al menos un átomo de nitrógeno en el anillo. Cada uno de los anillos puede, además, contener hasta aproximadamente otros cuatro heteroátomos típicamente seleccionados de nitrógeno, azufre y oxígeno. Típicamente, el anillo de heteroarilo contendrá hasta 3 heteroátomos, por ejemplo, 1,2 o 3, más habitualmente hasta 2 nitrógenos, por ejemplo, un único nitrógeno. Los átomos de nitrógeno en los anillos de heteroarilo pueden ser de carácter básico, como en el caso de un imidazol o una piridina, o esencialmente de carácter no básico, como en el caso de un nitrógeno de indol o pirrol. En general, el número de átomos de nitrógeno de carácter básico presentes en el grupo heteroarilo, incluyendo cualesquiera sustituyentes del grupo amino del anillo, será inferior a cinco.
Ejemplos de grupos heteroarilo que contienen nitrógeno incluyen, pero no se limitan a piridilo, pirrolilo, imidazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, oxatriazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, pirazolilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, triazinilo, triazolilo (p. ej., 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo), tetrazolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, bencimidazolilo, benzoxazolilo, benzisoxazolilo, benzotiazolilo y benzisotiazol, indolilo, 3H-indolilo, isoindolilo, indolizinilo, isoindolinilo, purinilo, indazolilo, quinolizinilo, benzoxazinilo, piridopiridinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo, ftalazinilo, naftiridinilo y pteridinilo.
Ejemplos de grupos heteroarilo policíclicos que contienen nitrógeno que contienen un anillo aromático y un anillo no aromático incluyen tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo e indolinilo.
La expresión "grupo no aromático" abarca, a menos que el contexto indique lo contrario, sistemas de anillos insaturados sin carácter aromático, sistemas de anillos heterociclilo parcialmente saturados y totalmente saturados. El término "insaturado" y la expresión "parcialmente saturado" se refieren a anillos en los que la o las estructuras del anillo contienen átomos que comparten más de un enlace de valencia, es decir, el anillo contiene al menos un enlace múltiple, p. ej., un enlace C=C, C C o N=C. La expresión "totalmente saturado" se refiere a anillos en los que no hay enlaces múltiples entre los átomos del anillo. Grupos heterociclilo saturados incluyen piperidina, morfolina, tiomorfolina, piperazina. Grupos heterociclilo parcialmente saturados incluyen pirazolinas, por ejemplo, 2-pirazolina y 3-pirazolina.
Ejemplos de grupos heterociclilo no aromáticos son grupos que tienen de 3 a 12 miembros en el anillo, más habitualmente de 5 a 10 miembros en el anillo. Grupos de este tipo pueden ser monocíclicos o bicíclicos, por ejemplo, y típicamente tienen de 1 a 5 miembros del anillo de heteroátomos (más habitualmente 1, 2, 3 o 4 miembros del anillo de heteroátomos), habitualmente seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre. Los grupos heterociclilo pueden contener, por ejemplo, restos éter cíclico (p. ej., en tetrahidrofurano y dioxano), restos tioéter cíclico (p. ej., en tetrahidrotiofeno y ditiano), restos de amina cíclica (p. ej., en pirrolidina) y combinaciones de los mismos (p. ej., tiomorfolina).
Ejemplos particulares incluyen morfolinilo, tiomorfolinilo, piperidinilo (p. ej., 1-piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo y 4-piperidinilo), pirrolidinilo (p. ej., 1-pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo y 3-pirrolidinilo), azetidinilo, piranilo (2H-piranilo o 4H-piranilo), dihidrotiofenilo, dihidropiranilo, dihidrofuranilo, dihidrotiazolilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, dioxanilo, dioxolanilo, tetrahidropiranilo, imidazolinilo, oxazolinilo, oxazolidinilo, oxetanilo, tiazolinilo, 2-pirazolinilo, pirazolidinilo y piperazinilo. En general, grupos heterociclilo no aromáticos preferidos incluyen grupos saturados tales como piperidinilo, pirrolidinilo, azetidinilo, morfolinilo y piperazinilo.
Ejemplos particulares incluyen morfolinilo, tiomorfolinilo, piperidinilo (p. ej., 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo y 4-piperidinilo), pirrolidinilo (p. ej., 1 -pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo y 3-pirrolidinilo), piranilo (2H-piranilo o 4H-piranilo), dihidrotiofenilo, dihidropiranilo, dihidrofuranilo, dihidrotiazolilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, dioxanilo, tetrahidropiranilo, imidazolinilo, oxazolinilo, oxazolidinilo, 2-pirazolinilo, pirazolidinilo y piperazinilo. En general, grupos heterociclilo no aromáticos preferidos incluyen grupos saturados, tales como piperidinilo, pirrolidinilo, azetidinilo, morfolinilo y piperazinilo.
En un anillo de heterociclilo no aromático que contiene nitrógeno, el anillo debe contener al menos un átomo de nitrógeno en el anillo.
Ejemplos particulares de grupos heterociclilo no aromáticos que contienen nitrógeno incluyen aziridinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperidinilo (p. ej., 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo y 4-piperidinilo), pirrolidinilo (p. ej., 1 -pirrolidinilo, 2- pirrolidinilo y 3-pirrolidinilo), dihidrotiazolilo, imidazolinilo, oxazolinilo, tiazolinilo, 2-pirazolinilo, 3-pirazolinilo, pirazolidinilo y piperazinilo.
Ejemplos particulares de heterociclilos saturados monocíclicos de 3 a 6 miembros incluyen sistemas de anillos de morfolinilo, tiomorfolinilo, dioxanilo, piperidinilo (p. ej., 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo y 4-piperidinilo), piperazinilo, pirrolidinilo (p. ej., 1 -pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo y 3-pirrolidinilo), imidazolidinilo, pirazolidinilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo, dioxolanilo, ditiolanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, tetrahidropiranilo (p. ej., 4-tetrahidropiranilo), ditianilo, trioxanilo, tritianilo, aziridinilo, oxiranilo, tiranilo, diaziridinilo, dioxarinilo, oxetanilo, azetidinilo, tietanilo, dioxetanilo.
Ejemplos particulares de heterociclilos saturados monocíclicos de 3 a 6 miembros incluyen sistemas de anillos de morfolinilo, tiomorfolinilo, dioxanilo, piperidinilo (p. ej., 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo y 4-piperidinilo), piperazinilo, pirrolidinilo (p. ej., 1 -pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo y 3-pirrolidinilo), imidazolidinilo, pirazolidinilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo, dioxolanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, tetrahidropiranilo (p. ej., 4-tetrahidropiranilo), oxiranilo, azetidinilo.
Ejemplos particulares de heterociclilos saturados monocíclicos de 3 a 6 miembros incluyen sistemas de anillos de morfolinilo, tiomorfolinilo, dioxanilo, piperidinilo (p. ej., 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo y 4-piperidinilo), piperazinilo, pirrolidinilo (p. ej., 1 -pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo y 3-pirrolidinilo), imidazolidinilo, pirazolidinilo, dioxolanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, tetrahidropiranilo (p. ej., 4-tetrahidropiranilo).
Ejemplos particulares de heterociclilos monocíclicos de 3 a 6 miembros incluyen sistemas de anillos de morfolinilo, tiomorfolinilo, piperidinilo (p. ej., 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo y 4-piperidinilo), pirrolidinilo (p. ej., 1 -pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo y 3- pirrolidinilo), imidazolidinilo, pirazolidinilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo, dioxolanilo, ditiolanilo, piperazinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, dioxanilo, tetrahidropiranilo (p. ej., 4-tetrahidropiranilo), ditianilo, trioxanilo, tritianilo, aziridinilo, oxiranilo, tiranilo, diaziridinilo, dioxarinilo, oxetanilo, azetidinilo, tietanilo, dioxetanilo, azirinilo, azetilo, 1,2-ditietilo, pirrolilo, furanilo, tiofenilo, imidazolilo, pirazolilo, oxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, triazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, ditiazolilo, piridinilo, piranilo, tiopiranilo, pirimidinilo, tiazinilo, oxazinilo, triazinilo.
Ejemplos particulares de heterociclilos monocíclicos de 3 a 6 miembros incluyen sistemas de anillos de morfolinilo, tiomorfolinilo, piperidinilo (p. ej., 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo y 4-piperidinilo), pirrolidinilo (p. ej., 1 -pirrolidinilo, 2- pirrolidinilo y 3-pirrolidinilo), imidazolidinilo, pirazolidinilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo, dioxolanilo, ditiolanilo, piperazinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, dioxanilo, tetrahidropiranilo (p. ej., 4-tetrahidropiranilo), oxiranilo, oxetanilo, azetidinilo, pirrolilo, furanilo, tiofenilo, imidazolilo, pirazolilo, oxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, triazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, ditiazolilo, piridinilo, piranilo, tiopiranilo, pirimidinilo, tiazinilo, oxazinilo, triazinilo.
Ejemplos particulares de heterociclos de 3 a 12 miembros incluyen sistemas de anillos de morfolinilo, tiomorfolinilo, piperidinilo (p. ej., 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo y 4-piperidinilo), pirrolidinilo (p. ej., 1 -pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo y 3- pirrolidinilo ), imidazolidinilo, pirazolidinilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo, dioxolanilo, ditiolanilo, piperazinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, dioxanilo, tetrahidropiranilo (p. ej., 4-tetrahidropiranilo), ditianilo, trioxanilo, tritianilo, aziridinilo, oxiranilo, tiranilo, diaziridinilo, dioxarinilo, oxetanilo, azetidinilo, tietanilo, dioxetanilo, azirinilo, azetilo, 1.2- ditietilo, pirrolilo, furanilo, tiofenilo, imidazolilo, pirazolilo, oxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, triazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, ditiazolilo, piridinilo, piranilo, tiopiranilo, pirimidinilo, tiazinilo, oxazinilo, triazinilo, azepanilo, oxepanilo, tiepanilo, 1.2- diazepanilo, 1,4-diazepanilo, diazepinilo, tiazepinilo, azocanilo, azocinilo, imidazotiazolilo (p. ej., imidazo[2,1-b]tiazolilo), imidazoimidazolilo (p. ej., imidazo[1,2-a]imidazolilo), benzofuranilo, benzotiofenilo, bencimidazolilo, benzoxazolilo, isobenzoxazolilo, benzisoxazolilo, benzotiazolilo, benzoisotiazolilo, isobenzofuranilo, indolilo, isoindolilo, indolizinilo, indolinilo, isoindolinilo, purinilo, indazolilo, pirazolopirimidinilo (p. ej., pirazolo[1,5-a]pirimidinilo), triazolopirimidinilo (p. ej., [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidinilo), benzodioxolilo, imidazopiridinilo y pirazolopiridinilo (p. ej., pirazolo[1,5-a]piridinilo), quinolinilo, isoquinolinilo, cromanilo, tiocromanilo, isocromanilo, benzodioxanilo, quinolizinilo, benzoxazinilo, piridopiridinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo, ftalazinilo, naftiridinilo, pteridinilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, dihidrobenzotienilo, dihidrobenzofuranilo, 2,3-dihidrobenzo[1,4]dioxinilo, benzo[1,3]dioxolilo, 4,5,6,7-tetrahidrobenzofuranilo, tetrahidrotriazolopirazinilo (p. ej., 5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[4, 3-a]pirazinilo), 8-oxa-3-azabiciclo-[3.2.1 ]octanilo, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1 ]heptanilo, 3-oxa-8-azabiciclo[3.2.1 ]octanilo, 3,6-diazabiciclo[3.1.1 ]heptanilo.
Ejemplos particulares de heterociclos de 3 a 12 miembros incluyen sistemas de anillos de morfolinilo, tiomorfolinilo, piperidinilo (p. ej., 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo y 4-piperidinilo), pirrolidinilo (p. ej., 1 -pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo y 3-pirrolidinilo ), imidazolidinilo, pirazolidinilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo, dioxolanilo, piperazinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, dioxanilo, tetrahidropiranilo (p. ej., 4-tetrahidropiranilo), oxiranilo, oxetanilo, azetidinilo, pirrolilo, furanilo, tiofenilo, imidazolilo, pirazolilo, oxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, triazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, ditiazolilo, piridinilo, piranilo, tiopiranilo, pirimidinilo, tiazinilo, oxazinilo, triazinilo, imidazotiazolilo (p, ej., imidazo[2,1-b]tiazolilo), imidazoimidazolilo (p. ej., imidazo[1,2-a]imidazolilo), benzofuranilo, benzotiofenilo, bencimidazolilo, benzoxazolilo, isobenzoxazolilo, benzisoxazolilo, benztiazolilo, benzisotiazolilo, isobenzofuranilo, indolilo, isoindolilo, indolizinilo, indolinilo, isoindolinilo, indazolilo, pirazolopirimidinilo (p. ej., pirazolo[1,5-a]pirimidinilo), triazolopirimidinilo (p. ej., [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidinilo), benzodioxolilo, imidazopiridinilo y pirazolopiridinilo (p. ej., pirazolo[1, 5-a]piridinilo), quinolinilo, isoquinolinilo, benzodioxanilo, quinolizinilo, benzoxazinilo, piridopiridinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo, ftalazinilo, naftiridinilo, pteridinilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, dihidrobenzotienilo, dihidrobenzfuranilo, 2,3-dihidro-benzo[1,4]-dioxinilo, benzo[1,3]dioxolilo, 4,5,6,7-tetrahidrobenzofuranilo, tetrahidrotriazolopirazinilo (p. ej., 5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazinilo).
Ejemplos particulares de heterociclos aromáticos de 5 a 6 miembros incluyen, pero no se limitan a sistemas de anillos de pirrolilo, furanilo, tiofenilo, imidazolilo, furazanilo, oxazolilo, oxadiazolilo, oxatriazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, isotiazolilo, pirazolilo, triazolilo, tetrazolilo, piridinilo, pirazinilo, piridazinilo, pirimidinilo y triazinilo.
Los anillos de heterociclilo y carbociclilo que representan el sustituyente B o D incluyen sistemas de anillos puenteados tales como, por ejemplo, cicloalcanos puenteados tales como, por ejemplo, norbornano (1,4-endo-metileno-ciclohexano), adamantano, oxa-adamantano; anillos de morfolina puenteados tales como, por ejemplo, 8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octano, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptano, 3-oxa-8-azabiciclo[3.2.1]octano; anillos de piperazina puenteados tales como, por ejemplo, 3,6-diazabiciclo[3.1.1]heptano; anillos de piperidina puenteados tales como, por ejemplo, 1,4-etilenpiperidina. Para obtener una explicación de la distinción entre sistemas de anillos condensados y puenteados, véase Advanced Organic Chemistry, de Jerry March, 4a edición, Wiley Interscience, páginas 131-133, 1992.
El término “carbociclilo”, tal como se utiliza en esta memoria, a menos que el contexto indique lo contrario, incluirá sistemas de anillos de carbono tanto aromáticos como no aromáticos. Así, por ejemplo, el término "carbociclilo" incluye dentro de su alcance sistemas de anillos carbocíclicos aromáticos, no aromáticos, insaturados, parcialmente saturados y totalmente saturados. En general, a menos que el contexto indique lo contrario, sistemas de anillos de este tipo pueden ser monocíclicos o bicíclicos o puenteados y pueden contener, por ejemplo, de 3 a 12 miembros del anillo, o de 4 a 10 miembros del anillo, o más habitualmente de 5 a 10 miembros del anillo. La referencia a 4 a 7 miembros del anillo incluye 4, 5, 6 o 7 átomos en el anillo y la referencia a 4 a 6 miembros del anillo incluye 4, 5 o 6 átomos en el anillo. Ejemplos de sistemas de anillos de carbociclilo monocíclicos son sistemas de anillos que contienen 3, 4, 5, 6, 7 y 8 miembros del anillo, más habitualmente 3 a 7, y preferiblemente 4, 5, 6 o 7 miembros del anillo, más preferiblemente 5 o 6 miembros del anillo. Ejemplos de sistemas de anillos de carbociclilo bicíclicos son los que contienen 8, 9, 10, 11 y 12 miembros del anillo, y más habitualmente 9 o 10 miembros del anillo. En los casos en los que se hace referencia en esta memoria a un sistema de anillos de carbociclilo, el anillo carbociclilo puede estar, a menos que el contexto indique lo contrario, opcionalmente sustituido (es decir, no sustituido o sustituido) con uno o más sustituyentes como se comenta en esta memoria.
Los sistemas de anillos de carbociclilo pueden ser sistemas de anillos de arilo. El término "arilo", tal como se utiliza en esta memoria, se refiere a grupos aromáticos de carbociclilo y abarca sistemas de anillos policíclicos (p. ej., bicíclicos) en los que uno o más anillos no son aromáticos, con la condición de que al menos un anillo sea aromático. En sistemas policíclicos de este tipo, el sistema de anillos puede estar fijado al resto del compuesto por un anillo aromático o por un anillo no aromático. El término "arilo" incluye grupos fenilo, naftilo, indenilo y tetrahidronaftilo.
Ejemplos particulares de carbociclos de 3 a 12 miembros incluyen sistemas de anillos de ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclihexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, fenilnaftilo, indenilo, tetrahidronaftilo, azulenilo, norbornano (1,4-endometileno-ciclohexano), adamantano.
Las líneas dibujadas en los sistemas de anillos indican que el enlace puede unirse a cualquiera de los átomos del anillo adecuados y disponibles.
En una realización en la que están implicados dos o más heteroátomos, estos heteroátomos pueden ser iguales o parte o la totalidad de los dos o más heteroátomos pueden ser diferentes.
El término "opcional" u "opcionalmente" significa que el evento descrito a continuación puede ocurrir o no. Este término engloba los casos en que el evento puede ocurrir o no.
Tal como se utiliza en esta memoria, la expresión "uno o más" se refiere a al menos uno, por ejemplo, uno, dos, tres, cuatro, cinco o más, siempre que sea posible y dependiendo del contexto.
En los compuestos de fórmula (I), el átomo de carbono indicado con un en la siguiente fórmula es un centro quiral. La presente invención proporciona compuestos de fórmula (I), en donde dicho centro quiral representa una estereoquímica específica (S o R), en particular compuestos de fórmula (I) en donde dicho centro quiral tiene estereoquímica S. Compuestos de fórmula (I) o cualquier subgrupo de los mismos que tienen la estereoquímica S en el centro quiral * exhiben una alta actividad inhibidora de FGFR.
Figure imgf000009_0001
Por lo tanto, la presente invención proporciona compuestos de fórmula (I-a)
Figure imgf000009_0002
incluyendo cualquier forma tautomérica y estereoquímicamente isomérica de los mismos, en donde
A1 , A2 y A3 representan, cada uno independientemente, CH, CRa o N, con la condición de que un máximo de dos de A1 , A2 y A3 puedan representar CRa;
C1 es hidrógeno o alquilo C1-4;
C2 es hidrógeno, alquilo C1-4, hidroxilo o alcoxi C1-4;
o C1 y C2 se toman juntos para formar un cicloalquilo C3-6 junto con el átomo de carbono al que están unidos;
Y es un enlace directo, -O-, C(=O), NRy, S(=O)2 o alquilo C1-4;
Ry es hidrógeno o alquilo C1-4;
cada uno de los Ra, independientemente, es alquilo C1-6, haloalquilo C1-6 , halo, alcoxi C1-6, carboxilo, alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, ciano, cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo C1-4)2 , o un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
Rb es hidrógeno, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, alcoxi C1-6, alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6 , cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo C1-4)2 , cicloalquilo C 3-6, fenilo, un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o alquilo C1-6 sustituido con cicloalquilo C3-6 o con fenilo o con un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
D es un heterociclilo de 3 a 12 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc;
cada uno de los Rc, independientemente, es oxo, halo, alquilo C1-6, alquil C1-6oxi, hidroxialquilo C1-6, haloalquilo C1-6, haloalquil C1-6 oxi, carboxilo, HOOC-alquil C1-6-, alquilo C1-6 sustituido con -C(=O)-O-alquilo C1-6, alquil C1-6-OC(=O)-, ciano, cianoalquilo Ci-6, alquil Ci-6 -C(= O)-, -SO2 -alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, fenilo, un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o un heterociclilo monocíclico aromático de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
B es un carbociclilo de 3 a 12 miembros o un heterociclilo de 3 a 12 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho carbociclilo y heterociclilo está cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes R;
cada uno de los R es independientemente alquilo C1-6, ciano, halo, alcoxi C1-6, haloalcoxi C1-6, hidroxilo, hidroxialquilo C1-6, haloalquiloC1-6, oxo, -SO2 -NH2, -SO2-NH(alquilo C1-4), -SO2-N(alquilo C1-4)2, -NH-C(=O)-alquenilo C2-6, -C(=O)-alquilo C1-6,
-C(=O)-alquenilo C2-6, alquil C1-6-OC(=O)-, cicloalquilo C3-6, fenilo o un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o los solvatos de los mismos.
La presente invención proporciona compuestos de fórmula (I-A)
Figure imgf000010_0001
incluyendo cualquier forma tautomérica y estereoquímicamente isomérica de los mismos, en donde
A1 , A2 y A3 representan, cada uno independientemente, CH, CRa o N, con la condición de que un máximo de dos de A1 , A2 y A3 puedan representar CRa;
C1 es hidrógeno o alquilo C1-4;
C2 es hidrógeno, alquilo C1-4, hidroxilo o alcoxi C1-4;
o C1 y C2 se toman juntos para formar un cicloalquilo C3-6 junto con el átomo de carbono al que están unidos;
Y es un enlace directo, -O-, C(=O), NRy, S(=O)2 o alquilo C1-4;
Ry es hidrógenoo alquilo C1-4;
cada uno de los Ra, independientemente, es alquilo C1-6, haloalquilo C1-6 , halo, alcoxi C1-6, carboxilo, alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, ciano, cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo C1-4)2 , o un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
Rb es hidrógeno, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, alcoxi C1-6, alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6 , cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo C1-4)2 , cicloalquilo C3-6, fenilo, un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o alquilo C1-6 sustituido con cicloalquilo C3-6 o con fenilo o con un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
D1 es piperazin-1-ilo, en donde dicho piperazin-1-ilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc;
cada uno de los Rc, independientemente, es oxo, halo, alquilo C1-6, alquil C1-6oxi, hidroxialquilo C1-6, haloalquilo C1-6, haloalquil C1-6 oxi, carboxilo, HOOC-alquil C1-6-, alquilo C1-6 sustituido con -C(=O)-O-alquilo C1-6, alquil C1-6-OC(=O)-, ciano, cianoalquilo C1-6, alquil C1-6 -C(= O)-, -SO2 -alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, fenilo, un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o un heterociclilo monocíclico aromático de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
B es un carbociclilo de 3 a 12 miembros o un heterociclilo de 3 a 12 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho carbociclilo y heterociclilo está cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes R;
cada uno de los R es independientemente alquilo Ci-6, ciano, halo, alcoxi Ci-6, haloalcoxi Ci-6, hidroxilo, hidroxialquilo Ci-6, haloalquiloCi-6, oxo, -SO2 -NH2, -SÜ2-NH(alquilo C1-4), -SÜ2-N(alquilo C1-4)2, -NH-C(=O)-alquenilo C2-6, -C(=O)-alquilo C1-6,
-C(=O)-alquenilo C2-6, alquil Ci-6-OC(=O)-, cicloalquilo C3-6, fenilo o un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o los solvatos de los mismos.
La presente invención proporciona compuestos de fórmula (I-A) como se define anteriormente en esta memoria que tienen un estereocentro S como en la siguiente fórmula (I-A-a):
Figure imgf000011_0001
incluyendo cualquier forma tautomérica y estereoquímicamente isomérica de los mismos, en donde los sustituyentes son como se definen arriba para los compuestos de fórmula (I-A);
o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o los solvatos de los mismos.
La presente invención proporciona compuestos de fórmula (I-B)
Figure imgf000011_0002
incluyendo cualquier forma tautomérica y estereoquímicamente isomérica de los mismos, en donde
Ai, A2 y A3 representan, cada uno independientemente, CH, CRa o N, con la condición de que un máximo de dos de Ai, A2 y A3 puedan representar CRa;
C1 es hidrógeno o alquilo C1-4;
C2 es hidrógeno, alquilo C1-4, hidroxilo o alcoxi C1-4;
o C1 y C2 se toman juntos para formar un cicloalquilo C3-6 junto con el átomo de carbono al que están unidos;
Y es un enlace directo, -O-, C(=O), NRy, S(=O)2 o alquilo Ci-4;
Ry es hidrógenoo alquilo C1-4;
cada uno de los Ra, independientemente, es alquilo C1-6, haloalquilo C1-6 , halo, alcoxi C1-6, carboxilo, alquil Ci-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, ciano, cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo Ci-4)2 , o un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
Rb es hidrógeno, alquilo Ci-6, haloalquilo Ci-6, alcoxi Ci-6, alquil Ci-60xicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6 , cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo C1-4)2 , cicloalquilo C3-6, fenilo, un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o alquilo C1-6 sustituido con cicloalquilo C3-6 o con fenilo o con un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
D2 es morfolin-1-ilo, en donde dicho morfolin-1-ilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc;
cada uno de los Rc, independientemente, es oxo, halo, alquilo C1-6, alquil C1-6oxi, hidroxialquilo C1-6, haloalquilo C1-6, haloalquil C1-6 oxi, carboxilo, HOOC-alquil C1-6-, alquilo C1-6 sustituido con -C(=O)-O-alquilo C1-6, alquil C1-6-OC(=O)-, ciano, cianoalquilo C1-6, alquil C1-6-C(= O)-, -SO2 -alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, fenilo, un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o un heterociclilo monocíclico aromático de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
B es un carbociclilo de 3 a 12 miembros o un heterociclilo de 3 a 12 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho carbociclilo y heterociclilo está cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes R;
cada uno de los R es independientemente alquilo C1-6, ciano, halo, alcoxi C1-6, haloalcoxi C1-6, hidroxilo, hidroxialquilo C1-6, haloalquilo C1-6, oxo, -SO2 -NH2, -SO2-NH(alquilo C1-4), -SO2-N(alquilo C1-4)2, -NH-C(=O)-alquenilo C2-6, -C(=O)-alquilo C1-6,
-C(=O)-alquenilo C2-6, alquil C1-6-OC(=O)-, cicloalquilo C3-6, fenilo o un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o los solvatos de los mismos.
La presente invención proporciona compuestos de fórmula (I-B) como se define anteriormente en esta memoria que tienen un estereocentro S como en la siguiente fórmula (I-B-a):
Figure imgf000012_0001
incluyendo cualquier forma tautómera y estereoquímicamente isomérica de los mismos, en donde los sustituyentes son como se definen arriba para los compuestos de fórmula (I-B);
o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o los solvatos de los mismos.
La presente invención proporciona compuestos de fórmula (I-C)
Figure imgf000012_0002
incluyendo cualquier forma tautomérica y estereoquímicamente isomérica de los mismos, en donde
A1 , A2 y A3 representan, cada uno independientemente, CH, CRa o N, con la condición de que un máximo de dos de A1 , A2 y A3 puedan representar CRa;
C1 es hidrógeno o alquilo C1-4;
C2 es hidrógeno, alquilo C1-4, hidroxilo o alcoxi C1-4;
0 C1 y C2 se toman juntos para formar un cicloalquilo C3-6 junto con el átomo de carbono al que están unidos;
Y es un enlace directo, -O-, C(=O), NRy, S(=O)2 o alquilo C1-4
Ry es hidrógenoo alquilo C1-4;
cada uno de los Ra, independientemente, es alquilo C1-6, haloalquilo C1-6 , halo, alcoxi C1-6, carboxilo, alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, ciano, cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo C1-4)2 , o un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
Rb es hidrógeno, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, alcoxi C1-6, alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6 , cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo C1-4)2 , cicloalquilo C3-6, fenilo, un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o alquilo C1-6 sustituido con cicloalquilo C3-6 o con fenilo o con un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
D3 es un heterociclilo monocíclico de 4, 5, 6 o 7 miembros, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc;
cada uno de los Rc, independientemente, es oxo, halo, alquilo C1-6, alquil C1-6oxi, hidroxialquilo C1-6, haloalquilo C1-6, haloalquil C1-6 oxi, carboxilo, HOOC-alquil C1-6-, alquilo C1-6 sustituido con -C(=O)-O-alquilo C1-6, alquil C1-6-OC(=O)-, ciano, cianoalquilo C1-6, alquil C1-6-C(= O)-, -SO2 -alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, fenilo, un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o un heterociclilo monocíclico aromático de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
B es un carbociclilo de 3 a 12 miembros o un heterociclilo de 3 a 12 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho carbociclilo y heterociclilo está cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes R;
cada uno de los R es independientemente alquilo C1-6, ciano, halo, alcoxi C1-6, haloalcoxi C1-6, hidroxilo, hidroxialquilo C1-6, haloalquilo C1-6, oxo, -SO2 -NH2, -SO2-NH(alquilo C1-4), -SO2-N(alquilo C1-4)2, -NH-C(=O)-alquenilo C2-6, -C(=O)-alquilo C1-6,
-C(=O)-alquenilo C2-6, alquil C1-6-OC(=O)-, cicloalquilo C3-6, fenilo o un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o los solvatos de los mismos.
La presente invención proporciona compuestos de fórmula (I-C) como se define anteriormente en esta memoria que tienen un estereocentro S como en la siguiente fórmula (I-C-a):
Figure imgf000013_0001
incluyendo cualquier forma tautomérica y estereoquímicamente isomérica de los mismos, en donde los sustituyentes son como se definen arriba para los compuestos de fórmula (I-C);
o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o los solvatos de los mismos.
La invención proporciona compuestos de fórmula (I-D):
Figure imgf000014_0001
incluyendo cualquier forma tautomérica y estereoquímicamente isomérica de los mismos, en donde
Ai, A2 y A3 representan, cada uno independientemente, CH, CRa o N, con la condición de que un máximo de dos de A1 , A2 y A3 puedan representar CRa;
C1 es hidrógeno o alquilo C1-4;
C2 es hidrógeno, alquilo C1-4, hidroxilo o alcoxi C1-4;
o C1 y C2 se toman juntos para formar un cicloalquilo C3-6 junto con el átomo de carbono al que están unidos;
cada uno de los Ra, independientemente, es alquilo C1-6, haloalquilo C1-6 , halo, alcoxi C1-6, carboxilo, alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, ciano, cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo C1-4)2 , o un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
Rb es hidrógeno, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, alcoxi C1-6, alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6 , cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo C1-4)2 , cicloalquilo C3-6, fenilo, un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o alquilo C1-6 sustituido con cicloalquilo C3-6 o con fenilo o con un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
D es un heterociclilo de 3 a 12 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc;
cada uno de los Rc, independientemente, es oxo, halo, alquilo C1-6, alquil C1-6oxi, hidroxialquilo C1-6, haloalquilo C1-6, haloalquil C1-6 oxi, carboxilo, HOOC-alquil C1-6-, alquilo C1-6 sustituido con -C(=O)-O-alquilo C1-6, alquil C1-6-OC(=O)-, ciano, cianoalquilo C1-6, alquil C1-6-C(= O)-, -SO2 -alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, fenilo, un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o un heterociclilo monocíclico aromático de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
B es un carbociclilo de 3 a 12 miembros o un heterociclilo de 3 a 12 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho carbociclilo y heterociclilo está cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes R;
cada uno de los R es independientemente alquilo C1-6, ciano, halo, alcoxi C1-6, haloalcoxi C1-6, hidroxilo, hidroxialquilo C1-6, haloalquilo C1-6, oxo, -SO2 -NH2, -SO2-NH(alquilo C1-4), -SO2-N(alquilo C1-4)2, -NH-C(=O)-alquenilo C2-6, -C(=O)-alquilo C1-6,
-C(=O)-alquenilo C2-6, alquil C1-6-OC(=O)-, cicloalquilo C3-6, fenilo o un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o los solvatos de los mismos.
La presente invención proporciona compuestos de fórmula (I-D) como se define anteriormente en esta memoria que tienen un estereocentro S como en la siguiente fórmula (I-D-a):
Figure imgf000015_0001
incluyendo cualquier forma tautomérica y estereoquímicamente isomérica de los mismos, en donde los sustituyentes son como se definen arriba para los compuestos de fórmula (I-D);
o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o los solvatos de los mismos.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), A1 , A2 y A3 representan CH o CRa.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), A1 , A2 y A3 representan CH.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), A1 , A2 y A3 representa CRa.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), al menos uno de A 1 , A2 y A3 representa CRa.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), A1 representa CRa y A2 y A3representan CH.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), A2 representa CRa y A 1 y A3representan CH.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), A1 , A2 y A3 representan N o CH.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), uno de A1 , A2 y A3 representa CRa y Ra representa alquilo C1-6 , en particular alquilo C1-4, p. ej., metilo; haloalquilo C1-6, p. ej., trifluorometilo; o halo, p. ej., fluoro.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), uno de A1 , A2 y A3 representa CRa y Ra representa alquilo C1-6 , en particular alquilo C1-4, p. ej., metilo; haloalquilo C1-6, p. ej., trifluorometilo; halo, p. ej., fluoro; o alcoxi C1-6, en particular alcoxi C1-4, p. ej., metoxi.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), uno de A1 , A2 y A3 representa N y los restantes sustituyentes A representan CH o CRa.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), A2 representa N y A1 y A3 representan CH o CRa, en particular A2 representa N y A1 y A3 representan CH.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), dos de los sustituyentes A1 , A2 y A3 representan N y el restante A representa CH o CRa.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C) o (I-C-a), Y es un enlace directo. En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C) o (I-C-a), Y es -O-, C(=O), NRy, S(=O)2 o alquilo C1-4.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C) o (I-C-a), Y es un enlace directo, C(=O), o NRy, p. ej., NCH3.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C) o (I-C-a), Y es un enlace directo, -O- o C(=O).
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C) o (I-C-a), Y es -O- o C(=O).
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), Ci es hidrógeno.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), C2 es hidrógeno.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), C1 es hidrógeno y C2 es alquilo C1-4.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), C1 y C2 son ambos hidrógeno.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), C1 es hidrógeno y C2 es hidroxilo.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), C1 es hidrógeno y C2 es alcoxi C1-4.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), C1 y C2 se toman juntos para formar cicloalquilo C3-6 junto con el átomo de carbono al que están unidos, en particular ciclopropilo. En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a),
Figure imgf000016_0001
representa -CH3.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a),
Figure imgf000016_0002
c 2 representa -CH2(alqullo C1-4), en particular -CH2CH3 o -CH2CH2CH3.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a),
Figure imgf000016_0003
c 2 representa -CH(alqullo Ci-4)2, en particular -CH(CH3)2.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a),
Figure imgf000016_0004
c 2 representa -ciclopropilo.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C) o (I-C-a), Ry es hidrógeno. En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C) o (I-C-a), Ry es alquilo C14, en particular metilo.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), Rb es hidrógeno.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), Rb es alquilo C1-6 , haloalquilo C1-6, alcoxi C1-6 , alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N( alquilo C1-4)2, cicloalquilo C3-6, fenilo, un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o alquilo C1-6 sustituido con cicloalquilo C3-6 o con fenilo o con un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), Rb es alquilo C1-6, haloalquilo C1-6 , alcoxi C1-6 , alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, cianoalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2, -C(=O)-NH(alquilo C1-4) o -C(=O)-N(alquilo C1-4)2.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), Rb es alquilo C1-6, en particular metilo o etilo.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), D, D1 , D2 o D3 no está sustituido.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), D, D1 , D2 o D3 está sustituido con 1,2, 3 o 4 sustituyentes Rc.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), D, D1 , D2 o D3 está sustituido con 2 sustituyentes Rc.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), D, D1 , D2 o D3 está sustituido con 1 o 2 sustituyentes Rc.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), D, D1 , D2 o D3 está sustituido con 1 o 2 sustituyentes Rc y cada uno de los Rc se selecciona independientemente de oxo; halo, p. ej., fluoro; alquilo C1-6 , en particular alquilo C1-4, p. ej., metilo; alquil C1-6oxi, en particular alquil C1-4oxi, p. ej., metoxi; haloalquilo C1-6, p. ej., trifluorometilo o trifluoroetilo; haloalquil C1-6oxi, p. ej., trifluorometoxi; HOOC-alquil C1-6-, p. ej., -CH2-COOH; carboxilo; alquilo C1-6 sustituido con -C(=O)-O-alquilo C1-6 , p. ej., -CH2-C(=O)-O-CH2-CH3; alquil C1-6 -OC(=O)-, p. ej., -C(=O)-O-CH3.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), D, D1 , D2 o D3 está sustituido con 1 o 2 sustituyentes Rc y cada uno de los Rc se selecciona independientemente de oxo; halo, p. ej., fluoro; alquilo C1-6, en particular alquilo C1-4, p. ej., metilo; alquil C1-6oxi, en particular alquil C1-4oxi, p. ej., metoxi; o haloalquilo C1-6, p. ej., trifluorometilo o trifluoroetilo.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), D, D1 , D2 o D3 está sustituido con 4 sustituyentes Rc y cada uno de los sustituyentes Rc representa independientemente alquilo C1-6, en particular alquilo C1-4, p. ej., metilo.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), D o D3 es un heterociclilo puenteado, p. ej., 8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octano.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), D o D3 es un heterociclilo punteado, en donde el puente es -CH2-, -CH2-CH2- o -CH2-CH2-CH2-, en particular -CH2-CH2- tal como, por ejemplo, en 8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1 ]octano.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I-C) o (I-C-a), D3 es un heterociclilo monocíclico saturado de 4, 5, 6 o 7 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc, con 1 a 4 sustituyentes Rc, con 1 a 3 sustituyentes Rc, con 1 o 2 sustituyentes Rc o con 1 sustituyente Rc.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I-C) o (I-C-a), D3 es un heterociclilo monocíclico saturado de 4, 5, 6 o 7 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo no está sustituido.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I-C) o (I-C-a), D3 es un heterociclilo monocíclico de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc, en particular un heterociclilo monocíclico saturado de 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc, con 1 a 4 sustituyentes Rc, con 1 a 3 sustituyentes Rc, con 1 o 2 sustituyentes Rc o con 1 sustituyente Rc.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I-C) o (I-C-a), D3 es un heterociclilo monocíclico saturado de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc, con 1 a 4 sustituyentes Rc, con 1 a 3 sustituyentes Rc, con 1 o 2 sustituyentes Rc o con 1 sustituyente Rc. En una realización, el heterociclilo no está sustituido. En una realización, D3 es piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, pirrolidinilo o tetrahidropiranilo opcionalmente sustituido. En una realización, D3 es piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, pirrolidinilo o tetrahidropiranilo no sustituido.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I-C) o (I-C-a), D3 es un heterociclilo monocíclico saturado de 4 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc, con 1 a 4 sustituyentes Rc, con 1 a 3 sustituyentes Rc, con 1 o 2 sustituyentes Rc o con 1 sustituyente Rc. En una realización, el heterociclilo no está sustituido. En una realización, D3 es azetidinilo no sustituido.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I-C) o (I-C-a), D3 es un heterociclilo monocíclico saturado de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc, en particular un heterociclilo monocíclico aromático de 5 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc, con 1 a 4 sustituyentes Rc, con 1 a 3 sustituyentes Rc, con 1 o 2 sustituyentes Rc o con 1 sustituyente Rc, por ejemplo, pirazol opcionalmente sustituido.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), cada uno de los Rc es independientemente oxo, alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6 , haloalquilo C1-6, haloalquiloxiC1-6, carboxilo, HOOC-alquil C1-6-, ciano, cianoalquilo C 1-6, alquil C1-6-C(=O)-, -SO2-alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, fenilo, un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o un heterociclilo aromático monocíclico de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), cada uno de los Rc es independientemente oxo, halo, alquilo C1-6, alcoxi C1-6 o haloalquilo C1-6.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), B es un carbociclilo o heterociclilo de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho carbociclilo y heterociclilo están opcionalmente sustituidos con 1 a 5, en particular 1 a 4, o 1 a 3, o 1 o 2, o 1 sustituyentes R. En una realización, B no está sustituido.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), B es fenilo o un heterociclilo aromático de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho fenilo y heterociclilo están opcionalmente sustituidos cada uno con 1 a 5, en particular 1 a 4, o 1 a 3, o 1 o 2, o 1 sustituyentes R. En una realización, B no está sustituido.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), B es un carbociclilo o heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho carbociclilo y heterociclilo están opcionalmente sustituidos en cada caso con 1 a 5, en particular 1 a 4, o 1 a 3, o 1 o 2, o 1 sustituyentes R. En una realización, B no está sustituido.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), B es
un carbociclilo o heterociclilo no aromático monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho carbociclilo y heterociclilo están opcionalmente sustituidos en cada caso con 1 a 5, en particular 1 a 4, o 1 a 3, o 1 o 2, o 1 sustituyentes R. En una realización, B no está sustituido.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), B es un heterociclilo monocíclico aromático de 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 4, en particular 1 a 3, o 1 o 2, o 1 sustituyentes R. Por ejemplo, B es piridilo, pirimidinilo o pirazinilo opcionalmente sustituido, en particular B es piridilo o pirimidinilo opcionalmente sustituido. En una realización, B no está sustituido. En una realización, B está sustituido con 1 sustituyente R. En una realización, el sustituyente R se selecciona de alquilo C1-6, alcoxi C1-6 y cicloalquilo C3-6. En una realización, el sustituyente R es haloalquilo C1-6.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), B es un heterociclilo monocíclico aromático de 5 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 3, en particular 1 o 2, o 1 sustituyentes R. Por ejemplo, B es pirazolilo, oxazolilo o tiazolilo opcionalmente sustituido, en particular B es oxazolilo o tiazolilo opcionalmente sustituido. En una realización, B no está sustituido. En una realización, B está sustituido con 1 sustituyente R. En una realización, el sustituyente R se selecciona de alquilo C1-6, alcoxi C1-6 y cicloalquilo C3-6. En una realización, el sustituyente R es haloalquilo C1-6.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), B es un carbociclilo o heterociclilo bicíclico de 9 a 12 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho carbociclilo y heterociclilo están opcionalmente sustituidos en cada caso con 1 a 5, en particular 1 a 4, o 1 a 3, o 1 o 2, o 1 sustituyentes R. En una realización, B no está sustituido.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), B es pirimidinilo, estando opcionalmente sustituido con 1 a 3, en particular 1 o 2, o 1 sustituyentes R; en particular B es pirimidinilo no sustituido.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), cada uno de los R es independientemente alquilo C1-6 , ciano, halo, alcoxi C1 - 6 , haloalcoxi C1 - 6 , hidroxilo, hidroxialquilo C1-6 , haloalquilo C1-6 , oxo, -SO2-NH2 , -SÜ2-NH(alquilo C1-4), -SÜ2-N(alquilo C1-4)2, -NH-C(=O)-alquenilo C2-6, -C(=O)-alquilo C1-6, -C(=Ü)-alquenilo C2-6, o alquil C1-6-OC(=O)-.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), cada uno de los R es independientemente alquilo C1 - 6 , ciano, halo, alcoxi C1-6, haloalcoxi C1 - 6 , hidroxilo, hidroxialquilo C1-6 , haloalquilo C1-6 , oxo, -SO2-NH2, -SO2-NH(alquilo C1-4), -SO2-N(alquilo C1-4)2, -NH-C(=O)-alquenilo C2-6, -C(=O)-alquilo C1-6, -C(=O)-alquenilo C2-6, cicloalquilo C3-6, fenilo o un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), hay 1 sustituyente R, siendo dicho R haloalquilo C1-6.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), B no está sustituido.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), B está sustituido con 1 a 5 sustituyentes R, en particular 1 a 4 sustituyentes R, o 1 a 3 sustituyentes R, o 1 o 2 sustituyentes R o 1 sustituyente R.
En una realización, en los compuestos de fórmula (I), (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), se aplican una o más, en particular cuando sea posible, todas las condiciones siguientes:
cada uno de A1 , A2 y A3 representa CH; o A1 y A3 representan CH y A2 representaN; o al menos uno de A1 , A2 y A3 representa CRa; o A1 representa CRa y A2 y A3 representan CH;
o A2 representa CRa y A1 y A3 representan CH;
C1 es hidrógeno o alquilo C1-4, en particular hidrógeno o metilo;
C2 es hidrógeno o alquilo C1-4 o alcoxi C1-4, en particular hidrógeno, metilo o metoxi;
Y es un enlace directo, -O- o C(=O);
cada uno de los Ra esindependientemente alquilo C1-6, p. ej., metilo, haloalquilo C1-6, p. ej., trifluorometilo, halo, p. ej., fluoro, o alcoxi C1-6, p. ej., metoxi;
Rb es alquilo C1-6, en particular alquilo C1-4’ p. ej., metilo o etilo;
D es un heterociclilo saturado monocíclico de 4, 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes Rc; en particular, D es piperazinilo, morfolinilo, piperidinilo, tetrahidropiranilo, pirrolidinilo o azetidinilo, en donde dichos sistemas de anillos están opcionalmente sustituidos con 1 o 2 sustituyentes Rc;
cada uno de los Rc independientemente es oxo; alquilo C1-6, p. ej., metilo; halo, p. ej., fluoro; alcoxi C1-6, p. ej., metoxi; o haloalquilo C1-6, p. ej., trifluorometilo o trifluoroetilo;
B es un heterociclilo monocíclico aromático de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 sustituyente R; en particular B es piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, pirazolilo, tiazolilo, oxazolilo;
cada uno de los R es independientemente alquilo C1-6, p. ej., metilo o isopropilo, alcoxi C1-6, p. ej., metoxi, o cicloalquilo C3-6, p. ej., ciclopropilo.
En una realización, el compuesto es un compuesto de fórmula (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a), en donde se aplican una o más, en particular cuando sea posible, todas las condiciones siguientes:
cada uno de A1 , A2 y A3 representa CH; o A1 y A3 representan CH y A2 representaN; o al menos uno de A1 , A2 y A3 representa CRa; o A1 representa CRa y A2 y A3 representan CH;
o A2 representa CRa y A1 y A3 representan CH;
C1 es hidrógeno o alquilo C1-4, en particular, hidrógeno o metilo;
C2 es hidrógeno o alquilo Ci-4 o alcoxi Ci-4, en particular, hidrógeno, metilo o metoxi; en particular, hidrógeno o alquilo Ci-4, p. ej., hidrógeno o metilo;
Y es un enlace directo, -O- o C(=O), en particular un enlace directo o C(=O), más en particular un enlace directo; cada uno de los Ra es independientemente alquilo C1-6, p. ej., metilo, haloalquilo C1-6, p. ej., trifluorometilo, halo, p. ej., fluoro, o alcoxi C1-6, p. ej., metoxi; en particular, hidrógeno, halo o alquilo C1-6;
Rb es alquilo C1-6, en particular, alquilo C1-4’ p. ej., metilo o etilo;
D o D3 es un heterociclilo saturado monocíclico de 4, 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes Rc; en particular, D es piperazinilo, morfolinilo, piperidinilo, tetrahidropiranilo, pirrolidinilo o azetidinilo, en donde dichos sistemas de anillos están opcionalmente sustituidos con 1 o 2 sustituyentes Rc, en particular, D es piperazinilo, morfolinilo o pirrolidinilo opcionalmente sustituido;
cada uno de los Rc independientemente es oxo; alquilo C1-6, p. ej., metilo; halo, p. ej., fluoro; alcoxi C1-6, p. ej., metoxi; o haloalquilo C1-6, p. ej., trifluorometilo o trifluoroetilo; en particular, alquilo C1-6, p. ej., metilo;
B es un heterociclilo monocíclico aromático de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 sustituyente R; en particular B es piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, pirazolilo, tiazolilo, oxazolilo; en particular, B es pirimidinilo no sustituido;
cada uno de los R es independientemente alquilo C1-6, p. ej., metilo o isopropilo, alcoxi C1-6, p. ej., metoxi, o cicloalquilo C3-6, p. ej., ciclopropilo.
En una realización, el compuesto de la invención se selecciona de
Figure imgf000020_0001
o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o los solvatos de los mismos.
En una realización, el compuesto de la invención es
Figure imgf000021_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
En una realización, el compuesto de la invención es
Figure imgf000021_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
En una realización, el compuesto de la invención es
Figure imgf000021_0003
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
En una realización, el compuesto de la invención es
Figure imgf000021_0004
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
Para evitar dudas, debe entenderse que cada preferencia, realización y ejemplo general y específico para un sustituyente puede combinarse, si es químicamente posible, con cada preferencia, realización y ejemplo general y específico para uno o más, preferiblemente, todos los demás sustituyentes como se definen en esta memoria y que todas las realizaciones de este tipo quedan abarcadas por esta solicitud.
Métodos para la Preparación de Compuestos de Fórmula (I)
En esta sección, como en todas las demás secciones de esta solicitud, a menos que el contexto indique lo contrario, las referencias a la fórmula (I) también incluyen todos los demás subgrupos y ejemplos de los mismos (p. ej., (I-a), (I-A), (I-A-a), (I-B), (I-B-a), (I-C), (I-C-a), (I-D) o (I-D-a)) como se define en esta memoria.
En general, compuestos de fórmula (I) se pueden preparar de acuerdo con el siguiente Esquema de reacción 1. En el Esquema 1, W 1 y W2 representan un grupo saliente adecuado tal como, por ejemplo, halo, p. ej., cloro, y P representa un grupo protector adecuado tal como, por ejemplo, 4-metoxibencilo. Todas las demás variables del Esquema 1 se definen de acuerdo con la presente invención.
Figure imgf000022_0001
En el Esquema 1 se aplican las siguientes condiciones de reacción:
1: en presencia de un reactivo protector H-P adecuado tal como, por ejemplo, 4-metoxibenzaldehído, y un agente reductor adecuado tal como, por ejemplo, NaBH4, un ácido adecuado tal como, por ejemplo, ácido trifluoroacético, y un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, acetato de etilo, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, la temperatura ambiente;
2: a) en presencia de cloruro de metil malonilo, un agente reductor adecuado tal como, por ejemplo, hidruro de sodio, y un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, N,N-dimetilformamida, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, la temperatura ambiente; y
b) en presencia de metóxido de sodio, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 110 °C;
3: en presencia de un agente introductor de grupos salientes adecuado tal como, por ejemplo, cloruro de oxalilo o cloruro de fosforilo, en presencia de un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, N,N-dimetilformamida y diclorometano, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, la temperatura ambiente o 15 °C;
4: en presencia de un agente reductor adecuado tal como, por ejemplo, hidruro de diisobutilaluminio y un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, tetrahidrofurano o diclorometano, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, -78 °C;
5: en presencia de fenilmetanamina, una base adecuada tal como, por ejemplo, diisopropiletilamina, y un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, acetonitrilo, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 70 °C;
6: en presencia de un agente reductor adecuado tal como, por ejemplo, H2, y un catalizador adecuado tal como, por ejemplo paladio sobre carbón vegetal, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, un alcohol, p. ej., metanol, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 50 °C;
7: en presencia de un oxidante adecuado tal como, por ejemplo, FeCl3 , y un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, 1,4-dioxano, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 20 °C o 25 °C;
8: en presencia de un agente desprotector adecuado tal como, por ejemplo, ácido trifluorometanosulfónico, y un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, ácido trifluoroacético, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 20 °C, 60 °C, 80 °C u 85 °C;
9: en presencia de una base adecuada tal como, por ejemplo, diisopropiletilamina, bicarbonato de potasio o bicarbonato de sodio, un catalizador de transferencia de fases adecuado tal como, por ejemplo, yoduro de tetrabutilamonio o 18-corona-6, y un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, diclorometano, cloroformo, N,N-dimetilacetamida o un alcohol, p. ej., etanol, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 35 °C, 40 °C, 60 °C, 85 °C o 110 °C.
En el Esquema 1, el compuesto intermedio de fórmula (XII) puede ser un estereoisómero específico, p. ej., el enantiómero S, que da como resultado un estereoisómero específico, p. ej., el enantiómero S, de fórmula (I), tal como se muestra a continuación en el Esquema 1a para la preparación de compuestos de fórmula (I-a).
Figure imgf000023_0001
Los compuestos intermedios de fórmula (IX), en donde Y representa NRy, estando representados dichos compuestos intermedios por la fórmula b (IX-a), también se pueden preparar de acuerdo con el siguiente Esquema de reacción 2. En el Esquema 2, W3 representa un grupo saliente adecuado tal como, por ejemplo, halo, p. ej., bromo. Todas las demás variables del Esquema 2 se definen de acuerdo con la presente invención.
Figure imgf000023_0002
En el Esquema 2 se aplican las siguientes condiciones de reacción:
1: en presencia de un catalizador adecuado tal como, por ejemplo, tris(dibencilidenacetona)-dipaladio (0), un ligando adecuado tal como, por ejemplo, (2-bifenil)di-terc.-butilfosfina, una base adecuada tal como, por ejemplo, terc.-butóxido de sodio, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, tetrahidrofurano, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 60 °C;
2: en presencia de un agente reductor adecuado tal como H2, un catalizador adecuado tal como, por ejemplo, níquel Raney, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, dioxano, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, la temperatura ambiente.
Compuestos intermedios de fórmula (XIV), en donde Y representa -C(=O)-, estando representados dichos compuestos intermedios por la fórmula (XIV-a), también se pueden preparar de acuerdo con el siguiente Esquema de reacción 3. En el Esquema 3, las variables se definen de acuerdo con la presente invención.
Figure imgf000024_0001
Compuestos de fórmula (I) también se pueden preparar de acuerdo con el siguiente Esquema de reacción 4. En el Esquema 4, W4 representa un grupo saliente adecuado tal como, por ejemplo, halo, p. ej., bromo. Todas las demás variables del Esquema 4 se definen de acuerdo con la presente invención.
Figure imgf000024_0002
La reacción del Esquema 4 se realiza en presencia de un catalizador adecuado tal como, por ejemplo, un catalizador de paladio, p. ej., Pd2(dba)3, un ligando adecuado tal como, por ejemplo, davephos (2-diciclohexilfosfino-2'-(N,N-dimetilamino)bifenilo), una base adecuada tal como, por ejemplo, LiHMDS (bis(trimetilsilil)amida de litio) y un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, tetrahidrofurano.
En el Esquema 4, el compuesto intermedio de fórmula (XVI) puede ser un estereoisómero específico, p. ej., el enantiómero S, que da como resultado un estereoisómero específico, p. ej., el enantiómero S, de fórmula (I), tal como se muestra a continuación en el Esquema 4a para la preparación de compuestos de fórmula (I-1 -a).
Figure imgf000025_0001
Compuestos de fórmula (I), en donde Y representa un enlace directo, estando representados dichos compuestos por la fórmula (I-D), también se pueden preparar de acuerdo con el siguiente Esquema de reacción 5. En el Esquema 5, W4 representa un grupo saliente adecuado tal como, por ejemplo, halo, p. ej., bromo. Todas las demás variables del Esquema 5 se definen de acuerdo con la presente invención.
Figure imgf000025_0002
La reacción del Esquema 5 se realiza en presencia de un catalizador adecuado tal como, por ejemplo, un catalizador de paladio, p. ej., Pd2(dba)3 , un ligando adecuado tal como, por ejemplo, PCy3 (triciclohexilfosfina), un base adecuada tal como, por ejemplo, K3PO4 (fosfato tripotásico) y un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, dioxano y agua.
En el Esquema 5, el compuesto intermedio de fórmula (XVI) puede ser un estereoisómero específico, p. ej., el enantiómero S, que da como resultado un estereoisómero específico, p. ej., el enantiómero S, de fórmula (I-D), tal como se muestra a continuación en el Esquema 5a para la preparación de compuestos de fórmula (I-D-a).
Figure imgf000025_0003
Compuestos intermedios de fórmula (XVI) se pueden preparar de acuerdo con el siguiente Esquema de reacción 6. En el Esquema 6 , W 1 representa un grupo saliente adecuado tal como, por ejemplo, halo, p. ej., cloro, y W4 representa un grupo saliente adecuado tal como, por ejemplo, halo, p. ej., bromo. Todas las demás variables del Esquema 6 se definen de acuerdo con la presente invención.
Figure imgf000026_0001
En el Esquema 6 se aplican las siguientes condiciones de reacción:
1 : en presencia de un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, un alcohol, p. ej., etanol, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 70 °C;
2 : en presencia de una base adecuada tal como, por ejemplo, NaHCÜ3, un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, dimetilformamida, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 80 °C.
Los compuestos de fórmula (I) también se pueden convertir entre sí mediante reacciones conocidas en la técnica o transformaciones de grupos funcionales.
Por ejemplo, compuestos de fórmula (I), en donde Rc representa alquilo C1-6 sustituido con -C(=O)-O-alquilo C1-6 o alquil C1-6 -OC(=O)-, se puede convertir en un compuesto de fórmula (I), en donde Rc representa HÜÜC-alquilo C1-6 o carboxilo en presencia de hidróxido de litio, y en presencia de un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, tetrahidrofurano o un alcohol, p. ej., metanol.
Los compuestos de la invención preparados en los procedimientos descritos en esta memoria pueden sintetizarse en forma de mezclas de enantiómeros, en particular mezclas racémicas de enantiómeros, que pueden separarse entre sí siguiendo procedimientos de resolución conocidos en la técnica. Los compuestos racémicos de fórmula (I) que contienen un átomo de nitrógeno básico pueden convertirse en las correspondientes formas de sales diastereoisómeras por reacción con un ácido quiral adecuado. Formas de sales diastereoisómeras de este tipo se separan posteriormente, por ejemplo, mediante cristalización selectiva o fraccionada y los enantiómeros se liberan de ellas mediante álcali. Una manera alternativa de separar las formas enantioméricas de los compuestos de fórmula (I), y las sales por adición y solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos, implica la cromatografía líquida utilizando una fase estacionaria quiral, p. ej., mediante cromatografía de fluidos supercríticos. Dichas formas estereoquímicamente isoméricas puras también pueden derivarse de las correspondientes formas estereoquímicamente isoméricas puras de los materiales de partida apropiados, con la condición de que la reacción se produzca estereoespecíficamente. Preferiblemente, si se desea un estereoisómero específico, dicho compuesto se sintetizaría mediante métodos de preparación estereoespecíficos. Estos métodos emplearán ventajosamente materiales de partida enantioméricamente puros.
En la preparación de compuestos de la presente invención, puede ser necesaria la protección de la funcionalidad remota (p. ej., amina primaria o secundaria) de compuestos intermedios. La necesidad de una protección de este tipo varía dependiendo de la naturaleza de la funcionalidad remota y las condiciones de los métodos de preparación. Grupos protectores de amino adecuados (NH-PG) incluyen acetilo, trifluoroacetilo, t-butoxicarbonilo (Boc), benciloxicarbonilo (CBz) y 9-fluorenilmetilenoxicarbonilo (Fmoc). La necesidad de una protección de este tipo la determina fácilmente un experto en la técnica. Para obtener una descripción general de los grupos protectores y su uso, véase T.W. Greene y P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 4§ ed., Wiley, Hoboken, New Jersey, 2007.
En todas estas preparaciones, los productos de reacción pueden aislarse del medio de reacción y, si es necesario, purificarse adicionalmente de acuerdo con metodologías generalmente conocidas en la técnica, tales como, por ejemplo, extracción, cristalización, trituración y cromatografía. La pureza de los productos de reacción puede determinarse de acuerdo con metodologías generalmente conocidas en la técnica tales como, por ejemplo, LC-MS, TLC, HPLC.
Un aspecto adicional de la invención es un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria, procedimiento que comprende:
(i) hacer reaccionar un compuesto intermedio de fórmula (XI)
Figure imgf000027_0001
en donde Wi representa un grupo saliente adecuado tal como, por ejemplo, halo, p. ej., cloro, con un compuesto intermedio de fórmula (XII)
Figure imgf000027_0002
en presencia de una base adecuada tal como, por ejemplo, N,N-diisopropiletilamina, bicarbonato de potasio o bicarbonato de sodio, un catalizador de transferencia de fases adecuado tal como, por ejemplo, yoduro de tetrabutilamonio o 18-corona-6, y un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, diclorometano, cloroformo, N,N-dimetilacetamida o un alcohol, p. ej., etanol; o
(ii) hacer reaccionar un compuesto intermedio de fórmula (XVI)
Figure imgf000027_0003
en donde W4 representa un grupo saliente adecuado tal como, por ejemplo, halo, p. ej., bromo, con un compuesto intermedio de fórmula (Ry)HN----D en presencia de un catalizador adecuado tal como, por ejemplo, un catalizador de paladio, p. ej., Pd2(dba)3, un ligando adecuado tal como, por ejemplo, davephos (2-diciclohexilfosfino-2'-(N,N-dimetilamino)bifenilo), una base adecuada tal como, por ejemplo, LiHMDS (bis(trimetilsilil)amida de litio) y un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, tetrahidrofurano; o
(iii) hacer reaccionar un compuesto intermedio de fórmula (XVI)
Figure imgf000028_0001
en donde W4 representa un grupo saliente adecuado tal como, por ejemplo, halo, p. ej., bromo, con un compuesto intermedio de fórmula
Figure imgf000028_0002
en presencia de un catalizador adecuado tal como, por ejemplo, un catalizador de paladio, p. ej., Pd2(dba)3, un ligando adecuado tal como, por ejemplo, PCy3 (triciclohexilfosfina), una base adecuada tal como, por ejemplo, K3PO4 (fosfato tripotásico) y un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, dioxano y agua; en donde las variables son como se definen en esta memoria; y opcionalmente convertir posteriormente un compuesto de la fórmula (I) en otro compuesto de la fórmula (I).
Sales Farmacéuticamente Aceptables, Solvatos o Derivados de los mismos
En esta sección, como en todas las demás secciones de esta solicitud, a menos que el contexto indique lo contrario, referencias a la fórmula (I) incluyen referencias a todos los demás sub-grupos, preferencias, realizaciones y ejemplos de los mismos como se define en esta memoria.
A menos que se especifique lo contrario, una referencia a un compuesto particular también incluye formas iónicas, sales, solvatos, isómeros, tautómeros e isótopos, por ejemplo, preferiblemente, las sales o isómeros o solvatos de los mismos. Compuestos de fórmula (I) pueden existir en forma de sales, por ejemplo sales por adición de ácidos o, en determinados casos, sales de bases orgánicas e inorgánicas, tales como sales carboxilato, sulfonato y fosfato. Todas las sales de este tipo están dentro del alcance de esta invención, y las referencias a compuestos de fórmula (I) incluyen las formas de sal de los compuestos.
Las formas de sal de los compuestos de la invención son típicamente sales farmacéuticamente aceptables, y ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables se comentan en Berge et al. (1977) "Pharmaceutically Acceptable Salts", J. Pharm. Sci., Vol. 66, pp 1-19. Sin embargo, sales que no son farmacéuticamente aceptables también se pueden preparar como formas intermedias que luego se pueden convertir en sales farmacéuticamente aceptables. Formas de sales no farmacéuticamente aceptables de este tipo, que pueden ser útiles, por ejemplo, en la purificación o separación de los compuestos de la invención, también forman parte de la invención.
Las sales de la presente invención se pueden sintetizar a partir del compuesto parental que contiene un resto de carácter básico o ácido mediante métodos químicos convencionales tales como los métodos descritos en Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use , P. Heinrich Stahl (Editor), Camille G. Wermuth (Editor), ISBN: 3-90639-026-8, tapa dura, 388 páginas, agosto de 2002. En general, sales de este tipo se pueden preparar haciendo reaccionar las formas de ácido o base libres de estos compuestos con la base o el ácido apropiado en agua o en un disolvente orgánico, o en una mezcla de ambos; generalmente se utilizan medios no acuosos, tales como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Los compuestos de la invención pueden existir en forma de mono- o di-sales dependiendo del pKa del ácido a partir del cual se forma la sal.
Sales por adición de ácidos se pueden formar con una amplia diversidad de ácidos, tanto inorgánicos como orgánicos. Ejemplos de sales por adición de ácidos incluyen sales formadas con un ácido seleccionado del grupo que consiste en los ácidos acético, 2,2-dicloroacético, adípico, algínico, ascórbico (p. ej., L-ascórbico), L-aspártico, bencenosulfónico, benzoico, 4-acetamidobenzoico, butanoico, (+) alcanfórico, alcanfor-sulfónico, (+)-(1S)-alcanfor-10-sulfónico, cáprico, caproico, caprílico, cinámico, cítrico, ciclámico, dodecilsulfúrico, etano-1,2-disulfónico, etanosulfónico, 2-hidroxietanosulfónico, fórmico, fumárico, galactárico, gentísico, glucoheptónico, D-glucónico, glucurónico (p. ej., D-glucurónico), glutámico (p. ej., L-glutámico), a-oxoglutárico, glicólico, hipúrico, bromhídrico, clorhídrico, yodhídrico, isetiónico, láctico (p. ej., (+)-L-láctico, (±)-DL-láctico), lactobiónico, maleico, málico, (-)-L-málico, malónico, (±)-DL-mandélico, metanosulfónico, naftalenosulfónico (p. ej., naftaleno-2-sulfónico), naftaleno-1,5-disulfónico, 1 -hidroxi-2-naftoico, nicotínico, nítrico, oleico, orótico, oxálico, palmítico, pamoico, fosfórico, propiónico, L-piroglutámico, pirúvico, salicílico, 4-amino-salicílico, sebácico, esteárico, succínico, sulfúrico, tánico, (+)-L-tartárico, tiociánico, toluenosulfónico (p. ej., p-toluenosulfónico), undecilénico y valérico, así como aminoácidos acilados y resinas de intercambio catiónico.
Un grupo particular de sales consiste en sales formadas a partir de los ácidos acético, clorhídrico, yodhídrico, fosfórico, nítrico, sulfúrico, cítrico, láctico, succínico, maleico, málico, isetiónico, fumárico, bencenosulfónico, toluenosulfónico, metanosulfónico (mesilato), etanosulfónico, naftalenosulfónico, valérico, acético, propanoico, butanoico, malónico, glucurónico y lactobiónico. Otro grupo de sales por adición de ácidos incluye sales formadas a partir de los ácidos acético, adípico, ascórbico, aspártico, cítrico, DL-láctico, fumárico, glucónico, glucurónico, hipúrico, clorhídrico, glutámico, DL-málico, metanosulfónico, sebácico, esteárico, succínico y tartárico.
Si el compuesto es aniónico, o tiene un grupo funcional que puede ser aniónico (p. ej., -COOH puede ser -COO-), entonces se puede formar una sal con un catión adecuado. Ejemplos de cationes inorgánicos adecuados incluyen, pero no se limitan a iones de metales alcalinos, tales como Na+ y K+, cationes de metales alcalinotérreos, tales como Ca2+ y Mg2+ y otros cationes como Al3+. Ejemplos de cationes orgánicos adecuados incluyen, pero no se limitan a iones amonio (es decir, NH4+) e iones amonio sustituidos (p. ej., NH3R+, NH2R2+, NHR3+, NR4+).
Ejemplos de algunos iones amonio sustituidos adecuados son los derivados de: etilamina, dietilamina, diciclohexilamina, trietilamina, butilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, bencilamina, fenilbencilamina, colina, meglumina y trometamina, así como aminoácidos, tales como lisina y arginina. Un ejemplo de un ion amonio cuaternario común es N(CH3)4+.
En los casos en los que los compuestos de fórmula (I) contienen una función amina, estos pueden formar sales de amonio cuaternario, por ejemplo mediante reacción con un agente alquilante de acuerdo con métodos bien conocidos por la persona experta en la materia. Compuestos de amonio cuaternario de este tipo están dentro del alcance de la fórmula (I).
Los compuestos de la invención pueden formar solvatos, por ejemplo, con agua (es decir, hidratos) o disolventes orgánicos comunes. Tal como se utiliza en esta memoria, el término "solvato" significa una asociación física de los compuestos de la presente invención con una o más moléculas de disolvente, así como sales por adición farmacéuticamente aceptables de los mismos. Esta asociación física implica diversos grados de enlace iónico y covalente, incluyendo el enlace de hidrógeno. En determinados casos, el solvato será capaz de ser aislado, por ejemplo, cuando se incorporan una o más moléculas de disolvente en la red cristalina del sólido cristalino. El término "solvato" pretende abarcar tanto solvatos en fase de solución como aislables. Ejemplos no limitantes de solvatos adecuados incluyen compuestos de la invención en combinación con agua (hidrato), isopropanol, etanol, metanol, DMSO, acetato de etilo, ácido acético o etanolamina y similares. Los compuestos de la invención pueden ejercer sus efectos biológicos mientras estén en solución. Los solvatos pueden ser importantes para los procedimientos de preparación de una sustancia (p. ej., en relación con su purificación, el almacenamiento de la sustancia (p. ej., su estabilidad) y la facilidad de manipulación de la sustancia y, a menudo, se forman como parte de las fases de aislamiento o purificación de una síntesis química. Una persona experta en la técnica puede determinar por medio de técnicas estándares y utilizadas durante mucho tiempo si se ha formado un hidrato u otro solvato mediante las condiciones de aislamiento o las condiciones de purificación utilizadas para preparar un compuesto dado. Ejemplos de técnicas de este tipo incluyen el análisis termogravimétrico (TGA, por sus siglas en inglés), calorimetría diferencial de barrido (DSC, por sus siglas en inglés), cristalografía de rayos X (p. ej., cristalografía de rayos X de cristal único o difracción de rayos X en polvo) y RMN de estado sólido (SS-n Mr , también conocida como r Mn bajo giro en ángulo mágico o MAS, por sus siglas en inglés). Técnicas de este tipo son una parte tan importante del conjunto de herramientas analíticas estándares del químico experto como RMN, IR, HPLC y MS. Alternativamente, la persona experta puede formar deliberadamente un solvato utilizando condiciones de cristalización que incluyen una cantidad del disolvente requerida para el solvato particular. Posteriormente, los métodos estándares arriba descritos pueden utilizarse para establecer si se han formado solvatos.
Además, los compuestos de la presente invención pueden tener una o más formas polimorfas (cristalinas) o amorfas y estas formas como tales están destinadas a estar incluidas en el alcance de la invención.
Compuestos de fórmula (I) pueden existir en un cierto número de formas geométricas isoméricas y tautoméricas diferentes y referencias a compuestos de fórmula (I) incluyen todas esas formas. Para evitar dudas, en los casos en los que un compuesto puede existir en una de varias formas geométricas isoméricas o tautoméricas y solo una se describe o muestra específicamente, todas las demás están, no obstante, incluidas en la fórmula (I). Ejemplos de formas tautoméricas incluyen, por ejemplo, formas ceto, enol y enolato tal como, por ejemplo, en los siguientes pares tautoméricos: ceto/enol (ilustrado más adelante), imina/enamina, amida/imino alcohol, amidina/enediaminas, nitroso/oxima, tiocetona/enetiol y nitro/aci-nitro.
Figure imgf000030_0001
ceto enol enolato
Se pretende que formas de este tipo, en la medida en que puedan existir, queden incluidas dentro del alcance de la presente invención. De ello se deduce que un único compuesto puede existir tanto en forma estereoisomérica como tautomérica.
En los casos en los que los compuestos de fórmula (I) contienen uno o más centros quirales y pueden existir en forma de dos o más isómeros ópticos, las referencias a compuestos de fórmula (I) incluyen todas las formas isoméricas ópticas (p. ej., enantiómeros, epímeros y diastereoisómeros) de los mismos, ya sea como isómeros ópticos individuales o mezclas (p. ej., mezclas racémicas) de dos o más isómeros ópticos, a menos que el contexto requiera lo contrario. Cuando un compuesto de fórmula (I) tiene más de un centro quiral, y se indica que un centro quiral tiene una estereoconfiguración absoluta, como en compuestos de fórmula (I-a), (I-A-a), (I-B-a), (I-C-a) o (I-D-a), el o los otros centros quirales incluyen todas las formas isoméricas ópticas, ya sea como isómeros ópticos individuales o mezclas (p. ej., mezclas racémicas) de dos o más isómeros ópticos, a menos que el contexto requiera lo contrario. Los isómeros ópticos pueden caracterizarse e identificarse por su actividad óptica (es decir, como isómeros y - dependiendo de la dirección en la que giran la luz polarizada en el plano, o isómeros d y I) o pueden caracterizarse en términos de su estereoquímica absoluta utilizando la nomenclatura "R y S" desarrollada por Cahn, Ingold y Prelog, véase Advanced Organic Chemistry de Jerry March, 4a edición, John Wiley & Sons, Nueva York, 1992, páginas 109-114, y véase también Cahn, Ingold y Prelog (1966) Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 5, 385-415. Por ejemplo, los enantiómeros resueltos, cuya configuración absoluta no se conoce, pueden designarse con (+) o (-) dependiendo de la dirección en la que giran la luz polarizada en el plano.
Isómeros ópticos se pueden separar mediante un cierto número de técnicas que incluyen la cromatografía quiral (cromatografía en un soporte quiral) y técnicas de este tipo son bien conocidas por la persona experta en la técnica. Como alternativa a la cromatografía quiral, los isómeros ópticos se pueden separar formando sales diastereoisoméricas con ácidos quirales, tales como ácido (+)-tartárico, ácido (-)-piroglutámico, ácido (-)-di-toluoil-L-tartárico, ácido (+)-mandélico, ácido (-)-málico y (-)-canforsulfónico, separando los diastereoisómeros por cristalización preferencial y luego disociando las sales para dar el enantiómero individual de la base libre.
En los casos en los que los compuestos de fórmula (I) existen como dos o más formas isoméricas, una forma isomérica, p. ej., un enantiómero en un par de enantiómeros, puede exhibir ventajas frente a la otra forma isomérica, p. ej., sobre el otro enantiómero, por ejemplo, en términos de actividad biológica. Por lo tanto, en determinadas circunstancias, puede ser deseable utilizar como agente terapéutico solo uno de un par de enantiómeros, o solo uno de una pluralidad de diastereoisómeros. Se encontró que compuestos en donde el centro quiral se indica con * en la siguiente estructura
Figure imgf000030_0002
tiene la configuración S, exhiben una actividad biológica más alta que la configuración R correspondiente. Cuando se identifica un estereoisómero específico, esto significa que dicho estereoisómero está sustancialmente libre, es decir, está asociado con menos del 50 %, preferiblemente menos del 20 %, más preferiblemente menos del 10 %, incluso más preferiblemente menos del 5 %, en particular menos del 2 % y lo más preferiblemente menos del 1%, de los otros estereoisómeros. Por lo tanto, cuando un compuesto de fórmula (I) se especifica, por ejemplo, como (S), esto significa que el compuesto está sustancialmente libre del isómero (R); cuando un compuesto de fórmula (I) se especifica, por ejemplo, como E, esto significa que el compuesto está sustancialmente libre del isómero Z; cuando un compuesto de fórmula (I) se especifica, por ejemplo, como cis, esto significa que el compuesto está sustancialmente libre del isómero trans.
Tal como se utiliza en esta memoria, cualquier fórmula química con enlaces que se muestran solo como líneas continuas y no como enlaces sólidos continuos en cuña o discontinuos en cuña, o que no se indique de otra manera que tenga una configuración particular (p. ej., R, S) alrededor de uno o más átomos, contempla cada uno de los posibles estereoisómeros, o mezcla de dos o más estereoisómeros.
El término "estereoisómeros" y las expresiones "formas estereoisoméricas" o "formas estereoquímicamente isoméricas" en lo que antecede o en lo sucesivo se utilizan indistintamente.
Los enantiómeros son estereoisómeros que son imágenes especulares no superponibles entre sí. Una mezcla 1:1 de un par de enantiómeros es un racemato o mezcla racémica.
Los atropisómeros (o atropoisómeros) son estereoisómeros que tienen una configuración espacial particular, que resulta de una rotación restringida alrededor de un enlace sencillo, debido a un gran impedimento estérico. Se pretende que todas las formas atropisoméricas de los compuestos de fórmula (I) estén incluidas dentro del alcance de la presente invención.
Diastereómeros (o diastereoisómeros) son estereoisómeros que no son enantiómeros, es decir, no están relacionados como imágenes especulares. Si un compuesto contiene un doble enlace, los sustituyentes pueden estar en la configuración E o Z. Los sustituyentes en radicales bivalentes cíclicos (parcialmente) saturados pueden tener la configuración cis o trans; por ejemplo, si un compuesto contiene un grupo cicloalquilo disustituido, los sustituyentes pueden estar en configuración cis o trans. Por lo tanto, la invención incluye enantiómeros, atropisómeros, diastereómeros, racematos, isómeros E, isómeros Z, isómeros cis, isómeros trans y mezclas de los mismos, siempre que sea químicamente posible.
El significado de todos esos términos, es decir, enantiómeros, atropisómeros, diastereómeros, racematos, isómeros E, isómeros Z, isómeros cis, isómeros trans y mezclas de los mismos, es conocido por la persona experta en la materia.
Los compuestos de la invención incluyen compuestos con una o más sustituciones isotópicas, y una referencia a un elemento particular incluye dentro de su alcance todos los isótopos del elemento, ya sea de origen natural o producido de forma sintética, ya sea que se produzca de forma natural o producido de forma sintética, con abundancia natural o en una forma isotópicamente enriquecida. Por ejemplo, una referencia a hidrógeno incluye dentro de su alcance 1H, 2H (D) y 3H(T). De manera similar, las referencias al carbono y al oxígeno incluyen dentro de su alcance, respectivamente, 12C, 13C y 14C y 16O y 18O. Los isótopos pueden ser radiactivos o no radiactivos. En una realización de la invención, los compuestos no contienen isótopos radiactivos. Compuestos de este tipo son preferidos para uso terapéutico. Sin embargo, en otra realización, el compuesto puede contener uno o más radioisótopos. Compuestos que contienen radioisótopos de este tipo pueden ser útiles en un contexto de diagnóstico. Compuestos radiomarcados de fórmula (I) pueden comprender un isótopo radiactivo seleccionado del grupo de 2H 3H, 11C, 18F, 122I, 123I, 125I, 131I, 75Br, 76Br, 77Br y 82Br. Preferiblemente, el isótopo radiactivo se selecciona del grupo de 2H, 3H, 11C y 18F. Más preferiblemente, el isótopo radiactivo es 2H.
En particular, se pretende que los compuestos deuterados se incluyan dentro del alcance de la presente invención.
Farmacología
Proteína Tirosina Quinasas (PTK, por sus siglas en inglés)
Los compuestos de la invención descritos en esta memoria inhiben o modulan la actividad de determinadas tirosina quinasas y, por lo tanto, los compuestos serán útiles en el tratamiento o la profilaxis, en particular, el tratamiento, de estados patológicos o afecciones mediadas por esas tirosina quinasas, en particular FGFR.
FGFR
La familia del factor de crecimiento de fibroblastos (FGF, por sus siglas en inglés) de receptores de proteína tirosina quinasa (PTK) regula una serie diversa de funciones fisiológicas que incluyen mitogénesis, cicatrización de heridas, diferenciación celular y angiogénesis, y desarrollo. Tanto el crecimiento como la proliferación de células normales y malignas se ven afectados por cambios en la concentración local de FGFs, moléculas de señalización extracelular que actúan como factores autocrinos así como paracrinos. La señalización del FGF autocrino puede ser particularmente importante en la progresión de los cánceres dependientes de hormonas esteroides a un estado independiente de hormonas. Los f Gfs y sus receptores se expresan a niveles elevados en varios tejidos y líneas celulares y se cree que la sobre-expresión contribuye al fenotipo maligno. Además, un cierto número de oncogenes son homólogos de genes que codifican receptores de factores de crecimiento, y existe la posibilidad de una activación aberrante de la señalización dependiente del FGF en el cáncer de páncreas humano (Knights et al., Pharmacology and Therapeutics 2010 125:1 (105-117); Korc M. et al Current Cancer Drug Targets 20099:5 (639-651)).
Los dos miembros prototípicos son el factor de crecimiento de fibroblastos ácido (aFGF o FGF1) y el factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF o FGF2), y hasta la fecha, se han identificado al menos veinte miembros distintos de la familia del FGF. La respuesta celular a los FGFs se transmite a través de cuatro tipos de receptores del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR, por sus siglas en inglés) de proteína tirosina quinasa de transmembrana de alta afinidad numerados del 1 al 4 (FGFR1 a FGFR4).
La interrupción de la vía del FGFR1 debería afectar a la proliferación de células tumorales, ya que esta quinasa se activa en muchos tipos de tumores además de las células endoteliales en proliferación. La sobre-expresión y activación del FGFR1 en la vasculatura asociada a tumores ha sugerido un papel para estas moléculas en la angiogénesis tumoral.
Un estudio reciente ha demostrado un vínculo entre la expresión de FGFR1 y la tumorigenicidad en los carcinomas lobulares clásicos (CLC). Los CLCs representan el 10-15 % de todos los cánceres de mama y, en general, carecen de expresión de p53 y Her2, al tiempo que conservan la expresión del receptor de estrógenos. Se demostró una amplificación del gen 8p12-p11.2 en ~50 % de los casos de CLC y se demostró que esto estaba relacionado con una expresión incrementada del FGFR1. Los estudios preliminares con ARNpi dirigidos contra el FGFR1, o un inhibidor de molécula pequeña del receptor, demostraron que las líneas celulares que albergan esta amplificación son particularmente sensibles a la inhibición de esta vía de señalización. El rabdomiosarcoma (RMS) es el sarcoma de tejido blando pediátrico más común que probablemente resulta de una proliferación y diferenciación anormales durante la miogénesis esquelética. El FGFR1 se sobre-expresa en tumores de rabdomiosarcoma primario y se asocia con hipometilación de una isla CpG en 5' y expresión anormal de los genes AKT1, NOG y BMP4.
El receptor 2 del factor de crecimiento de fibroblastos tiene una alta afinidad por los factores de crecimiento de fibroblastos ácidos y/o básicos, así como por los ligandos del factor de crecimiento de queratinocitos. El receptor 2 del factor de crecimiento de fibroblastos también propaga los potentes efectos osteogénicos de los FGFs durante el crecimiento y la diferenciación de los osteoblastos. Se demostró que las mutaciones en el receptor 2 del factor de crecimiento de fibroblastos, que conducen a alteraciones funcionales complejas, inducen la osificación anormal de las suturas craneales (craneosinostosis), lo que implica un papel importante de la señalización del FGFR en la formación de hueso intramembranoso. Por ejemplo, en el síndrome de Apert (AP), caracterizado por una osificación prematura de la sutura craneal, la mayoría de los casos están asociados con mutaciones puntuales que generan una ganancia de función en el receptor 2 del factor de crecimiento de fibroblastos. Además, la selección de mutaciones en pacientes con craneosinostosis sindrómica indica que un cierto número de mutaciones recurrentes de FGFR2 explican las formas graves del síndrome de Pfeiffer. Mutaciones particulares de FGFR2 incluyen W290C, D321 A, Y340C, C342R, C342S, C342W, N549H, K641R en FGFR2.
Varias anomalías graves en el desarrollo del esqueleto humano, incluyendo los síndromes de Apert, Crouzon, Jackson-Weiss, Beare-Stevenson cutis gyrata y Pfeiffer, están asociadas con la aparición de mutaciones en el receptor 2 del factor de crecimiento de fibroblastos. La mayoría, si no todos los casos de síndrome de Pfeiffer (PS, por sus siglas en inglés) también son provocados por una mutación de novo del gen del receptor 2 del factor de crecimiento de fibroblastos, y recientemente se demostró que mutaciones en el receptor 2 del factor de crecimiento de fibroblastos rompen una de las reglas cardinales que rigen la especificidad del ligando. A saber, dos formas mutantes de corte y empalme del receptor del factor de crecimiento de fibroblastos, FGFR2c y FGFR2b, han adquirido la capacidad de unirse a y ser activados por ligandos de FGF atípicos. Esta pérdida de especificidad para el ligando conduce a una señalización aberrante y sugiere que los fenotipos graves de estos síndromes patológicos resultan de la activación ectópica dependiente del ligando del receptor 2 del factor de crecimiento de fibroblastos.
Aberraciones genéticas del receptor de tirosina quinasa FGFR3, tales como translocaciones cromosómicas o mutaciones puntuales, dan como resultado receptores FGFR3 constitutivamente activos, expresados ectópicamente o desregulados. Anomalías de este tipo están vinculadas a un subconjunto de mielomas múltiples y en carcinomas de vejiga, hepatocelulares, orales de células escamosas y carcinomas de cuello uterino. Por consiguiente, los inhibidores del FGFR3 serían útiles en el tratamiento de mieloma múltiple, carcinomas de vejiga y de cuello uterino. El FGFR3 también se sobre­ expresa en el cáncer de vejiga, en particular en el cáncer de vejiga invasivo. El FGFR3 se activa con frecuencia por mutación en el carcinoma urotelial (UC, por sus siglas en inglés). El aumento de la expresión se asoció con la mutación (el 85 % de los tumores mutantes mostraron un alto nivel de expresión), pero también el 42 % de los tumores sin mutación detectable mostraron una sobre-expresión, incluyendo muchos tumores invasivos de los músculos.
La sobre-expresión del FGFR4 se ha vinculado con un mal pronóstico tanto en carcinomas de próstata como de tiroides. Además, un polimorfismo de la línea germinal (Gly388Arg) está asociado con una incidencia incrementada de cánceres de pulmón, mama, colon, hígado (HCC, por sus siglas en inglés) y próstata. Además, también se ha encontrado que una forma truncada del FGFR4 (incluyendo el dominio quinasa) está presente en el 40 % de los tumores hipofisarios, pero no está presente en el tejido normal. Se ha observado sobre-expresión del FGFR4 en tumores de hígado, colon y pulmón. El FGFR4 se ha implicado en el cáncer colorrectal y de hígado, en que la expresión de su ligando FGF19 está frecuentemente elevada.
Las condiciones fibróticas son un problema médico principal que resulta del depósito anormal o excesivo de tejido fibroso. Esto ocurre en muchas enfermedades, incluyendo la cirrosis hepática, la glomerulonefritis, la fibrosis pulmonar, la fibrosis sistémica, la artritis reumatoide, así como en el proceso natural de cicatrización de heridas. Los mecanismos de la fibrosis patológica no se comprenden completamente, pero se cree que son el resultado de las acciones de diversas citoquinas (incluyendo el factor de necrosis tumoral (TNF, por sus siglas en inglés), los factores de crecimiento de fibroblastos (FGFs), el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF, por sus siglas en inglés) y el factor de crecimiento transformante beta. (TGF", por sus siglas en inglés) implicados en la proliferación de fibroblastos y el depósito de proteínas de la matriz extracelular (incluyendo colágeno y fibronectina). Esto resulta en la alteración de la estructura y función del tejido y la patología subsiguiente.
Un cierto número de estudios preclínicos han demostrado la regulación al alza de los factores de crecimiento de fibroblastos en modelos preclínicos de fibrosis pulmonar. Se ha informado que TGF"1 y PDGF están implicados en el proceso fibrogénico y trabajos publicados adicionales sugieren que la elevación de FGFs y el consiguiente aumento en la proliferación de fibroblastos puede ser en respuesta a TGF"1 elevado.
El potencial beneficio terapéutico de actuar sobre el mecanismo fibrótico en afecciones tales como la fibrosis pulmonar idiopática (IPF, por sus siglas en inglés) se sugiere por el efecto clínico reseñado del agente antifibrótico pirfenidona. Fibrosis pulmonar idiopática (a la que también se alude como alveolitis fibrosante criptogénica) es una afección progresiva que implica la cicatrización del pulmón. Gradualmente, los sacos de aire en los pulmones se reemplazan por tejido fibrótico, que se vuelve más grueso, lo que provoca una pérdida irreversible de la capacidad del tejido de transferir oxígeno al torrente sanguíneo. Los síntomas de la afección incluyen dificultad para respirar, tos seca crónica, fatiga, dolor en el pecho y pérdida de apetito que resulta en una rápida pérdida de peso. La afección es extremadamente grave con aproximadamente un 50 % de mortalidad después de 5 años.
Como tal, los compuestos que inhiben el FGFR serán útiles para proporcionar medios para prevenir el crecimiento o inducir la apoptosis en tumores, en particular mediante la inhibición de la angiogénesis. Por lo tanto, se anticipa que los compuestos demostrarán ser útiles en el tratamiento o la prevención de trastornos proliferativos tales como cánceres. En particular, los tumores con mutantes activadores de tirosina quinasas receptoras o regulación al alza de tirosina quinasas receptoras pueden ser particularmente sensibles a los inhibidores. Los pacientes con mutantes activadores de cualquiera de las isoformas de los RTKs específicos comentados en esta memoria también pueden encontrar particularmente beneficioso el tratamiento con inhibidores de RTK.
Como se indicó anteriormente, una diversidad de inhibidores del FGFR se encuentra en ensayos clínicos y han demostrado una respuesta clínica en pacientes con aberraciones del FGFR. Sin embargo, se ha reseñado que las mutaciones que afectan a los aminoácidos en el FGFR, p. ej., FGFR1, 2 o 3, pueden provocar resistencia a los inhibidores de FGFR o disminuir la sensibilidad a los inhibidores del FGFR. El desarrollo de mutaciones secundarias en el dominio de la quinasa del FGFR tras el tratamiento con inhibidores del FGFR es un mecanismo importante de resistencia adquirida a la inhibición del FGFR. También existen mutaciones puntuales de FGFR equivalentes de novo en los cánceres. Se han reseñado mutaciones de guardián como uno de los principales mecanismos que conducen a la resistencia a los inhibidores de la tirosina quinasa. Mutaciones del guardián incluyen FGFR3 V555L/V555M, FGFR1 V561M, FGFR2 V564F/V564I/V564M y FGFR4 V550L. Se han reseñado mutaciones resistentes al FGFR en ensayos clínicos y sistemas celulares in vitro. Por lo tanto, se necesitan nuevos inhibidores del FGFR (segunda generación) para superar la resistencia clínica adquirida a la terapia con inhibidores de FGFR de primera generación y para mantener al mismo tiempo la actividad inhibidora del FGFR frente a las mutaciones activadoras primarias del FGFR.
Se encontró que los compuestos de la invención muestran actividad contra el FGFR de tipo salvaje, en particular FGFR1, 2, 3 o 4, más en particular FGFR3, pero también contra FGFRs mutados, en particular contra FGFRs que albergan mutaciones guardián o contra FGFR1 mutado o FGFR2 mutado o FGFR3 mutado, en particular contra FGFR3 V555L, FGFR3 V555M, FGFR1 V561M y FGFR2 V564I, en particular contra FGFR3 V555L y FGFR3 V555M.
Actividad Biológica y Usos Terapéuticos
Los compuestos de la invención, y sub-grupos de los mismos, tienen actividad inhibidora o moduladora del receptor del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR) y serán útiles para prevenir o tratar, en particular tratar estados patológicos o afecciones descritos en esta memoria. Además, los compuestos de la invención y los sub-grupos de los mismos serán útiles para prevenir o tratar, en particular, tratar enfermedades o afecciones mediadas por las quinasas. Las referencias a la prevención, profilaxis o el tratamiento de un estado patológico o afección tal como el cáncer incluyen dentro de su alcance el alivio o la reducción de la incidencia del cáncer.
En una realización, compuestos de fórmula (I) son inhibidores de la quinasa FGFR competitivos con ATP.
Tal como se utiliza en esta memoria, el término "modulación", aplicado a la actividad de una quinasa, pretende definir un cambio en el nivel de actividad biológica de la proteína quinasa. Por lo tanto, la modulación abarca cambios fisiológicos que provocan un aumento o una disminución de la actividad de proteína quinasa relevante. En este último caso, la modulación puede describirse como "inhibición". La modulación puede surgir directa o indirectamente, y puede estar mediada por cualquier mecanismo y en cualquier nivel fisiológico, incluyendo, por ejemplo, al nivel de la expresión génica (incluyendo, por ejemplo, la transcripción, traducción y/o modificación post-traducción), al nivel de expresión de genes que codifican elementos reguladores que actúan directa o indirectamente sobre los niveles de la actividad quinasa. Por lo tanto, la modulación puede implicar expresión elevada/suprimida o la sobre-expresión o sub-expresión de una quinasa, incluyendo la amplificación génica (es decir, múltiples copias de genes) y/o expresión aumentada o disminuida por un efecto transcripcional, así como hiper- (o hipo-)actividad y (des)activación de la o las proteínas (incluyendo la (des)activación) por mutación o mutaciones. Los términos "modulado", "modulando" y "modular" deben interpretarse en consecuencia.
Como se usa en este documento, el término "mediado", tal como se utiliza, p. ej., junto con una quinasa como se describe en esta memoria (y se aplica, por ejemplo, a diversos procesos fisiológicos, enfermedades, estados, afecciones, terapias, tratamientos o intervenciones) está destinado a operar limitativamente, de modo que los diversos procesos, enfermedades, estados, afecciones, tratamientos e intervenciones a los que se aplica el término son aquellos en los que la quinasa desempeña un papel biológico. En los casos en los que el término se aplica a un estado patológico o afección, el papel biológico desempeñado por una quinasa puede ser directo o indirecto y puede ser necesario y/o suficiente para la manifestación de los síntomas del estado patológico o afección (o su etiología o progresión). Por lo tanto, la actividad de la quinasa (y, en particular, los niveles aberrantes de actividad de la quinasa, p. ej., la sobre-expresión de la quinasa) no tiene que ser necesariamente la causa proximal del estado patológico o afección: más bien, se contempla que las enfermedades, estados o afecciones mediados por la quinasa incluyan aquellos que tienen etiologías multifactoriales y progresiones complejas en las que la quinasa en cuestión está solo parcialmente implicada. En los casos en los que el término se aplique a tratamiento, profilaxis o intervención, el papel desempeñado por la quinasa puede ser directo o indirecto y puede ser necesario y/o suficiente para el funcionamiento del tratamiento, la profilaxis o el resultado de la intervención. Por lo tanto, un estado patológico o afección mediado por una quinasa incluye el desarrollo de resistencia a cualquier fármaco o tratamiento contra el cáncer particular.
Así, por ejemplo, los compuestos de la invención pueden ser útiles para aliviar o reducir la incidencia de cáncer.
Más particularmente, los compuestos de fórmulas (I) y sub-grupos de los mismos son inhibidores de los FGFRs. Por ejemplo, compuestos de la invención tienen actividad contra FGFR1, FGFR2, FGFR3 y/o FGFR4 y, en particular, contra FGFR1,2 y 3. Más en particular, los compuestos de la presente invención muestran actividad contra FGFRs de tipo salvaje y/o contra FGFRs mutados, en particular FGFRs con mutaciones puntuales, más en particular contra mutaciones de guardianes. Las mutaciones de guardianes incluyen FGFR3 V555L/V555M, FGFR1 V561M, FGFR2 V564F/V564I/V564M y FGFR4 V550L. En particular, los compuestos de la presente invención muestran actividad contra FGFR1, FGFR2 y FGFR3 con mutación guardián, más en particular contra FGFR3 V555L, FGFR3 V555M, FGFR1 V561M y FGFR2 V564I, en particular contra FGFR3 V555L y FGFR3 V555M.
El diagnóstico de tumores con mutaciones podría realizarse utilizando técnicas conocidas por una persona experta en la técnica y como se describe en esta memoria, tales como RT-PCR y FISH.
Ejemplos de cánceres que se pueden tratar (o inhibir) incluyen, pero no se limitan a carcinoma, por ejemplo, un carcinoma de vejiga, mama, colon (p. ej., carcinomas colorrectales tales como adenocarcinoma de colon y adenoma de colon), riñón, urotelial, útero, epidermis, hígado, pulmón (por ejemplo, cáncer de pulmón de células pequeñas y carcinomas de pulmón de células no pequeñas (p. ej., adenocarcinoma y carcinoma de células escamosas)), esófago , cabeza y cuello, vesícula biliar, ovario, páncreas (p. ej., carcinoma de páncreas exocrino), estómago, cáncer gastrointestinal (también conocido como gástrico) (p. ej., tumores del estroma gastrointestinal), cuello uterino, endometrio, tiroides, próstata o piel (por ejemplo, carcinoma de células escamosas o dermatofibrosarcoma protuberans); cáncer pituitario, un tumor hematopoyético de linaje linfoide, por ejemplo, leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfocítica crónica, linfoma de células B (p. ej., linfoma difuso de células B grandes), linfoma de células T, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, linfoma de células pilosas o linfoma de Burkett; un tumor hematopoyético de linaje mieloide, por ejemplo, leucemias, leucemias mielógenas agudas y crónicas, leucemia mielomonocítica crónica (CMML, por sus siglas en inglés), trastorno mieloproliferativo, síndrome mieloproliferativo, síndrome mielodisplásico o leucemia promielocítica; mieloma múltiple; cáncer folicular de tiroides; cáncer hepatocelular, un tumor de origen mesenquimatoso (p. ej., sarcoma de Ewing), por ejemplo, fibrosarcoma o rabdomiosarcoma; un tumor del sistema nervioso central o periférico, por ejemplo, astrocitoma, neuroblastoma, glioma (tal como glioblastoma multiforme) o schwannoma; melanoma; seminoma; teratocarcinoma; osteosarcoma; xeroderma pigmentoso; queratoctantoma; cáncer folicular de tiroides; o sarcoma de Kaposi. En particular, cáncer de pulmón escamoso, cáncer de mama, cáncer colorrectal, glioblastoma, astrocitomas, cáncer de próstata, cáncer de pulmón de células pequeñas, melanoma, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de tiroides, cáncer de útero, cáncer gástrico, cáncer hepatocelular, cáncer de cuello uterino, mieloma múltiple, cáncer de vejiga, cáncer de endometrio, cáncer urotelial, cáncer de colon, rabdomiosarcoma, cáncer de hipófisis, colangiocarcinoma.
Ejemplos de cánceres que pueden tratarse (o inhibirse) incluyen, pero no se limitan a cáncer de vejiga, cáncer urotelial, cáncer urotelial metastásico, cáncer no resecable quirúrgicamente, cáncer urotelial, cáncer de mama, glioblastoma, cáncer de pulmón, cáncer de pulmón de células no pequeñas, cáncer de pulmón de células escamosas, adenocarcinoma del pulmón, adenocarcinoma pulmonar, cáncer de pulmón de células pequeñas, cáncer de ovario, cáncer de endometrio, cáncer de cuello uterino, sarcoma de tejidos blandos, carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello, cáncer gástrico, cáncer de esófago, carcinoma de células escamosas de esófago, adenocarcinoma de esófago, colangiocarcinoma, carcinoma hepatocelular.
Determinados cánceres son resistentes al tratamiento con fármacos particulares. Esto puede deberse al tipo de tumor o puede surgir debido al tratamiento con el compuesto. A este respecto, las referencias a mieloma múltiple incluyen mieloma múltiple sensible a bortezomib o mieloma múltiple refractario. De manera similar, referencias a leucemia mielógena crónica incluyen leucemia mielógena crónica sensible a imitanib y leucemia mielógena crónica refractaria. La leucemia mielógena crónica también se conoce como leucemia mieloide crónica, leucemia granulocítica crónica o CML (por sus siglas en inglés). Asimismo, la leucemia mielógena aguda, también se denomina leucemia mieloblástica aguda, leucemia granulocítica aguda, leucemia no linfocítica aguda leucemia o AML (por sus siglas en inglés).
Los compuestos de la invención también se pueden utilizar en el tratamiento de enfermedades hematopoyéticas de proliferación celular anormal, ya sean premalignas o estables, tales como enfermedades mieloproliferativas. Enfermedades mieloproliferativas ("MPD"s, por sus siglas en inglés) son un grupo de enfermedades de la médula ósea en las que se produce un exceso de células. Están relacionados y pueden evolucionar hacia el síndrome mielodisplásico. Enfermedades mieloproliferativas incluyen policitemia vera, trombocitemia esencial y mielofibrosis primaria. Un trastorno hematológico adicional es el síndrome hipereosinofílico. Enfermedades linfoproliferativas de células T incluyen las derivadas de células asesinas naturales.
Además, los compuestos de la invención se pueden utilizar para tratar el cáncer gastrointestinal (también conocido como gástrico), p. ej., tumores del estroma gastrointestinal. El cáncer gastrointestinal se refiere a afecciones malignas del tracto gastrointestinal, incluyendo el esófago, el estómago, el hígado, el sistema biliar, el páncreas, los intestinos y el ano. Por lo tanto, en las composiciones farmacéuticas, usos o métodos de esta invención para tratar una enfermedad o afección que comprende un crecimiento celular anormal, la enfermedad o afección que comprende un crecimiento celular anormal en una realización es un cáncer.
Subconjuntos particulares de cánceres incluyen mieloma múltiple, cánceres de vejiga, de cuello uterino, de próstata, de tiroides, de pulmón, de mama y de colon.
Un subconjunto adicional de cánceres incluye carcinoma de mieloma múltiple, de vejiga, hepatocelular, oral de células escamosas y carcinomas cervicales.
Los compuestos de la invención, que tienen actividad inhibidora de FGFR, tal como FGFR1, pueden ser particularmente útiles en el tratamiento o la prevención de cáncer de mama, en particular carcinomas lobulares clásicos (CLC) y cáncer de pulmón con amplificación de FGFR1 o mutaciones de FGFR1.
Dado que los compuestos de la invención tienen actividad FGFR4, también serán útiles en el tratamiento de cánceres de próstata o pituitaria, o serán útiles en el tratamiento de cáncer de mama, cáncer de pulmón, cáncer de próstata, cáncer de hígado (HCC) o cáncer de pulmón.
En particular, los compuestos de la invención como inhibidores de FGFR son útiles en el tratamiento de mieloma múltiple, trastornos mieloproliferativos, cáncer de endometrio, cáncer de próstata, cáncer de vejiga, cáncer de pulmón, caáncer de ovario, cáncer de mama, cáncer gástrico, cáncer colorrectal y carcinoma oral de células escamosas.
Sub-conjuntos adicionales de cáncer son el mieloma múltiple, el cáncer de endometrio, el cáncer de vejiga, el cáncer de cuello uterino, el cáncer de próstata, el cáncer de pulmón, el cáncer de mama, el cáncer colorrectal y los carcinomas de tiroides.
En particular, los compuestos de la invención son útiles en el tratamiento de mieloma múltiple (en particular, mieloma múltiple con translocación t(4;14) o que sobre-expresa FGFR3), cáncer de próstata (carcinomas de próstata refractarios a hormonas), cáncer de endometrio (en particular tumores endometriales con mutaciones activadoras en FGFR2) y cáncer de mama (en particular cáncer de mama lobular).
En particular, los compuestos de la invención son útiles en el tratamiento de colangiocarcinoma, en particular colangiocarcinoma con translocaciones y mutaciones de FGFR, o amplificaciones de FGF19.
En particular, los compuestos son útiles en el tratamiento de carcinomas lobulares tales como CLC (carcinoma lobular clásico).
Dado que los compuestos tienen actividad contra FGFR3, serán útiles en el tratamiento del mieloma múltiple y el cáncer de vejiga.
En particular, los compuestos tienen actividad contra tumores con translocación FGFR3-TACC3, en particular tumores de vejiga o cerebro con translocación FGFR3-TACC3.
En particular, los compuestos son útiles para el tratamiento de mieloma múltiple positivo para translocación t( 4;14). En una realización, los compuestos pueden ser útiles para el tratamiento del sarcoma. En una realización, los compuestos pueden ser útiles para el tratamiento del cáncer de pulmón, p. ej., el carcinoma de células escamosas.
Dado que los compuestos tienen actividad contra FGFR2, serán útiles en el tratamiento de cánceres de endometrio, ovario, gástrico, hepatocelular, uterino, de cuello uterino y colorrectal. FGFR2 también se sobre-expresa en el cáncer de ovario epitelial, por lo que los compuestos de la invención pueden ser específicamente útiles en el tratamiento del cáncer de ovario tal como el cáncer de ovario epitelial.
En una realización, los compuestos pueden ser útiles para el tratamiento de cáncer de pulmón, en particular NSCLC (siglas inglesas de cáncer de pulmón de células no pequeñas), carcinoma de células escamosas, cáncer de hígado, cáncer de riñón, cáncer de mama, cáncer de colon, cáncer colorrectal, cáncer de próstata.
Los cánceres pueden ser cánceres que son sensibles a la Inhibición de uno cualquiera o más FGFRs seleccionados de FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGFR4, por ejemplo, uno o más FGFRs seleccionados de FGFR1, FGFR2 o FGFR3.
El que un cáncer particular sea o no sensible a la inhibición de la señalización de FGFR puede determinarse mediante un ensayo de crecimiento celular como se establece más adelante o mediante un método como se establece en la sección titulada "Métodos de Diagnóstico".
Los compuestos de la invención pueden ser particularmente útiles en el tratamiento o la prevención de cánceres de un tipo asociado o caracterizado por la presencia de niveles elevados de FGFR.
Los compuestos de la invención pueden ser útiles en el tratamiento de otras afecciones que resultan de trastornos en la proliferación, tales como diabetes mellitus tipo II o no insulinodependiente, enfermedades autoinmunes, traumatismo craneoencefálico, apoplejía, epilepsia, enfermedades neurodegenerativas tales como el Alzheimer, enfermedades motoras enfermedad neuronal, parálisis supranuclear progresiva, degeneración corticobasal y enfermedad de Pick, por ejemplo enfermedades autoinmunes y enfermedades neurodegenerativas.
Un subgrupo de estados patológicos y afecciones en los que los compuestos de la invención pueden ser útiles consiste en enfermedades inflamatorias, enfermedades cardiovasculares y cicatrización de heridas.
También se sabe que el FGFR desempeña un papel en la apoptosis, angiogénesis, proliferación, diferenciación y transcripción y, por lo tanto, los compuestos de la invención también podrían ser útiles en el tratamiento de las siguientes enfermedades distintas del cáncer; enfermedades inflamatorias crónicas, por ejemplo, lupus eritematoso sistémico, glomerulonefritis mediada por autoinmunidad, artritis reumatoide, psoriasis, enfermedad inflamatoria del intestino, diabetes mellitus autoinmune, reacciones de hipersensibilidad al eczema, asma, EPOC, rinitis y enfermedad del tracto respiratorio superior; enfermedades cardiovasculares, por ejemplo, hipertrofia cardiaca, restenosis, aterosclerosis; trastornos neurodegenerativos, por ejemplo, enfermedad de Alzheimer, demencia relacionada con el SIDA, enfermedad de Parkinson, esclerosis lateral amiotrópica, retinitis pigmentosa , atrofia muscular espinal y degeneración cerebelosa; glomerulonefritis; síndromes mielodisplásicos, infartos de miocardio asociados con lesión isquémica, apoplejía y lesión por reperfusión, arritmia, aterosclerosis, enfermedades hepáticas inducidas por toxinas o relacionadas con el alcohol, enfermedades hematológicas, por ejemplo, anemia crónica y anemia aplásica; enfermedades degenerativas del sistema musculo-esquelético, por ejemplo, osteoporosis y artritis, rinosinusitis sensible a la aspirina, fibrosis quística, esclerosis múltiple, enfermedades renales y dolor por cáncer.
Además, mutaciones del FGFR2 están asociadas con varias anomalías graves en el desarrollo del esqueleto humano y, por lo tanto, los compuestos de la invención podrían ser útiles en el tratamiento de anomalías en el desarrollo del esqueleto humano, incluyendo la osificación anormal de las suturas craneales (craneosinostosis), síndrome de Apert (AP), síndrome de Crouzon, síndrome de Jackson-Weiss, síndrome de Beare-Stevenson cutis gyrate y síndrome de Pfeiffer.
El compuesto de la invención, que tiene actividad inhibidora del FGFR, tal como FGFR2 o FGFR3, puede ser particularmente útil en el tratamiento o la prevención de enfermedades del esqueleto. Enfermedades del esqueleto particulares son acondroplasia o enanismo tanatofórico (también conocido como displasia tanatofórica).
El compuesto de la invención, que tiene actividad inhibidora del FGFR, tal como FGFR1, FGFR2 o FGFR3, puede ser particularmente útil en el tratamiento o la prevención de patologías en las que la fibrosis progresiva es un síntoma. Afecciones fibróticas en las que los compuestos de la invención pueden ser útiles en el tratamiento incluyen enfermedades que exhiben un depósito anormal o excesiva de tejido fibroso, por ejemplo en cirrosis hepática, glomerulonefritis, fibrosis pulmonar, fibrosis sistémica, artritis reumatoide, así como el proceso natural de cicatrización de heridas. En particular, los compuestos de la invención también pueden ser útiles en el tratamiento de la fibrosis pulmonar, en particular en la fibrosis pulmonar idiopática.
La sobre-expresión y activación de FGFR y VEGFR en la vasculatura asociada a tumores también ha sugerido un papel para los compuestos de la invención en la prevención y la interrupción del inicio de la angiogénesis del tumor. En particular, los compuestos de la invención pueden ser útiles en el tratamiento del cáncer, metástasis, leucemias tales como CLL, enfermedades oculares tales como degeneración macular relacionada con la edad, en particular la forma húmeda de degeneración macular relacionada con la edad, retinopatías proliferativas isquémicas tales como retinopatía de prematuridad (ROP, por sus siglas en inglés) y retinopatía diabética, artritis reumatoide y hemangioma.
La actividad de los compuestos de la invención como inhibidores de FGFR1 -4, en particular FGFR3 mutado puntualmente, tal como por ejemplo FGFR3 V555L y FGFR3 V555M, se puede medir utilizando los ensayos establecidos en los ejemplos que figuran más adelante y el nivel de actividad exhibida por un compuesto dado se puede definir en términos del valor CI50. Compuestos preferidos de la presente invención son compuestos que tienen un valor CI50 de menos de 1 pM, más preferiblemente menos de 0,1 pM, menos de 0,01 pM o menos de 0,001 pM.
La invención proporciona compuestos que tienen actividad de inhibición o modulación del FGFR, y que pueden ser útiles para prevenir o tratar estados patológicos o afecciones mediadas por quinasas de FGFR.
En una realización, se proporciona un compuesto como se define en esta memoria para uso en terapia, para uso como un medicamento. En una realización adicional, se proporciona un compuesto como se define en esta memoria para uso en la profilaxis o el tratamiento, en particular en el tratamiento, de un estado patológico o afección mediada por una quinasa FGFR.
Así, por ejemplo, los compuestos de la invención pueden ser útiles para aliviar o reducir la incidencia de cáncer. Por lo tanto, en una realización adicional, se proporciona un compuesto como se define en esta memoria para uso en la profilaxis o el tratamiento, en particular el tratamiento del cáncer. En una realización, el compuesto como se define en esta memoria es para uso en la profilaxis o el tratamiento, en particular el tratamiento del cáncer dependiente de FGFR. En una realización, el compuesto como se define en esta memoria es para uso en la profilaxis o el tratamiento, en particular el tratamiento del cáncer mediado por quinasas FGFR.
Por consiguiente, la invención proporciona, entre otras cosas:
- Un método para la profilaxis o el tratamiento de un estado patológico o afección mediada por una quinasa FGFR, método que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria.
- Un método para la profilaxis o el tratamiento de un estado patológico o afección como se describe en esta memoria, método que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria.
- Un método para la profilaxis o el tratamiento del cáncer, método que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria, en particular un cáncer que alberga FGFR1, FGFR2 o FGFR3 mutado guardián, más en particular un cáncer que alberga fGf R3 V555L, FGFR3 V555M, FGFR1 V561M o FGFR2 V564I, en particular FGFR3 V555L o FGFR3 V555M. En una realización, el cáncer alberga, además de un FGFR1, FGFR2 o FGFR3 mutado guardián, una o más aberraciones del FGFR tales como, por ejemplo, una o más mutaciones del FGFR o una o más translocaciones del FGFR, como las definidas en esta memoria.
- Un método para aliviar o reducir la incidencia de un estado patológico o afección mediada por una quinasa FGFR, método que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria.
- Un método para inhibir una quinasa FGFR, método que comprende poner en contacto la quinasa con un compuesto inhibidor de quinasa de fórmula (I) como se define en esta memoria.
- Un método para modular un proceso celular (por ejemplo, la división celular) mediante la inhibición de la actividad de una quinasa FGFR utilizando un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria.
- Un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria para su uso como un modulador de un proceso celular (por ejemplo, la división celular) mediante la inhibición de la actividad de una quinasa FGFR.
- Un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria para uso en la profilaxis o el tratamiento del cáncer, en particular el tratamiento del cáncer, en particular un cáncer que alberga FGFR1, FGFR2 o FGFR3 mutado guardián, más en particular un cáncer que alberga FGFR3 V555L, FGFR3 V555M, FGFR1 V561M o FGFR2 V564I, en particular FGFR3 V555L o FGFR3 V555M. En una realización, el cáncer alberga, además de un FGFR1, FGFR2 o fGfr3 mutado guardián, una o más aberraciones del FGFR tal como, por ejemplo, una o más mutaciones del FGFR o una o más translocaciones del FGFR tales como las definidas en esta memoria.
- Un compuesto de fórmula (I) como se define esta memoria para uso como un modulador (p. ej., inhibidor) del FGFR.
- Uso de un compuesto de fórmula (I) como se define esta memoria para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento, en particular el tratamiento, de un estado patológico o afección mediada por una quinasa FGFR, teniendo el compuesto la fórmula (I) como se define en esta memoria.
- El uso de un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de un estado patológico o afección como se describe en esta memoria.
- El uso de un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento, en particular el tratamiento, del cáncer, en particular un cáncer que alberga el FGFR1, FGFR2 o FGFR3 mutado guardián, más en particular un cáncer que alberga FGFR3 V555L, f Gf R3 V555M, FGFR1 V561M o FGFR2 V564I, en particular FGFR3 V555L o FGFR3 V555M. En una realización, el cáncer alberga, además de un FGFR1, FGFR2 o FGFR3 mutado guardián, una o más de otras aberraciones de FGFR tales como, por ejemplo, una o más mutaciones del FGFR o una o más translocaciones del FGFR, como las definidas en esta memoria.
- Uso de un compuesto de fórmula (I) como se define esta memoria para la fabricación de un medicamento para modular (p. ej., inhibir) la actividad de FGFR.
- Uso de un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria en la fabricación de un medicamento para modular un proceso celular (por ejemplo, la división celular) mediante la inhibición de la actividad de una quinasa FGFR.
- Uso de un compuesto de la fórmula (I) como se define esta memoria para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de una enfermedad o afección caracterizada por la regulación al alza de una quinasa FGFR (p. ej., FGFR1 o FGFR2 o FGFR3 o FGFR4).
- Uso de un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de un cáncer, siendo el cáncer uno que se caracteriza por la regulación al alza de una quinasa FGFR (p. ej., FGFR1 o FGFR2 o FGFR3 o FGFR4).
- Uso de un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento del cáncer en un paciente seleccionado de una subpoblación que posee aberraciones genéticas de la quinasa FGFR3.
- Uso de un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria para la fabricación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento del cáncer en un paciente que ha sido diagnosticado como parte de una sub-población que posee aberraciones genéticas de la quinasa FGFR3.
- Un método para la profilaxis o el tratamiento de una enfermedad o afección caracterizada por la regulación al alza de una quinasa FGFR (p. ej., FGFR1 o FGFR2 o FGFR3 o FGFR4), comprendiendo el método administrar un compuesto de la fórmula (I) como se define en esta memoria.
- Un método para aliviar o reducir la incidencia de una enfermedad o afección caracterizada por la regulación al alza de una quinasa FGFR (p. ej., FGFR1 o FGFR2 o FGFR3 o FGFR4), comprendiendo el método administrar un compuesto de la fórmula (I) como se define en esta memoria.
- Un método para la profilaxis o el tratamiento (o el alivio o la reducción de la incidencia) del cáncer en un paciente que padece o se sospecha que padece cáncer; método que comprende (i) someter a un paciente a una prueba de diagnóstico para determinar si el paciente posee aberraciones genéticas del gen FGFR3; y (ii) cuando el paciente posee dicha variante, administrar después al paciente un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria que tiene actividad inhibidora de la quinasa FGFR3.
- Un método para la profilaxis o el tratamiento de (o el alivio o la reducción de la incidencia de) un estado patológico o afección caracterizada por la regulación al alza de una quinasa FGFR (p. ej., FGFR1 o FGFR2 o FGFR3 o FGFR4); método que comprende (i) someter a un paciente a una prueba de diagnóstico para detectar un marcador característico de la regulación al alza de una quinasa FGFR (p. ej., FGFR1 o FGFR2 o FGFR3 o FGFR4) y (ii) cuando la prueba diagnóstica es indicativa de regulación al alza de una quinasa FGFR, administrando después al paciente un compuesto de fórmula (I) como se define en esta memoria que tiene actividad inhibidora de la quinasa FGFR.
En una realización, la enfermedad mediada por FGFR quinasas es una oncología enfermedad relacionada con la oncología (p. ej., cáncer). En una realización, la enfermedad mediada por FGFR quinasas es una enfermedad no relacionada con la oncología (p. ej., cualquier enfermedad descrita en esta memoria, excluyendo el cáncer). En una realización, la enfermedad mediada por FGFR quinasas es una afección descrita en esta memoria. En una realización, la enfermedad mediada por FGFR quinasas es una afección del esqueleto descrita en esta memoria. Anomalías particulares en el desarrollo del esqueleto humano incluyen osificación anormal de las suturas craneales (craneosinostosis), síndrome de Apert (AP), síndrome de Crouzon, síndrome de Jackson-Weiss, síndrome de Beare-Stevenson cutis gyrate, síndrome de Pfeiffer, acondroplasia y enanismo tanatofórico (también conocido como displasia tanatofórica).
Quinasas Mutadas
Como se indicó anteriormente, pueden surgir mutaciones de quinasas resistentes a los fármacos en poblaciones de pacientes tratados con inhibidores de quinasa. Éstas ocurren, en parte, en las regiones de la proteína que se unen a o interactúan con el inhibidor particular utilizado en la terapia. Mutaciones de este tipo reducen o aumentan la capacidad del inhibidor de unirse e inhibir la quinasa en cuestión. Esto puede ocurrir en cualquiera de los residuos de aminoácidos que interactúan con el inhibidor o que son importantes para apoyar la unión de dicho inhibidor a la diana. Un inhibidor que se une a una quinasa diana sin requerir la interacción con el residuo de aminoácido mutado, probablemente no se verá afectado por la mutación y seguirá siendo un inhibidor eficaz de la enzima.
Un estudio en muestras de pacientes con cáncer gástrico mostró la presencia de dos mutaciones en FGFR2, Ser167Pro en el exón IIIa y una mutación del sitio de corte y empalme 940-2A-G en el exón 11 Ic. Estas mutaciones son idénticas a las mutaciones activadoras de la línea germinal que provocan los síndromes de craneosinotosis y se observaron en el 13 % de los tejidos de cáncer gástrico primario estudiados. Además, se observaron mutaciones activadoras en FGFR3 en el 5 % de las muestras de pacientes testadas y la sobre-expresión de FGFRs se ha correlacionado con un mal pronóstico en este grupo de pacientes.
Además, hay translocaciones cromosómicas o mutaciones puntuales que se han observado en el FGFR que dan lugar a estados biológicos de ganancia de función, sobre-expresados o constitutivamente activas.
Por lo tanto, los compuestos de la invención encontrarían una aplicación particular en relación con los cánceres que expresan una diana molecular mutada tal como el FGFR. El diagnóstico de tumores con mutaciones de este tipo podría realizarse utilizando técnicas conocidas por una persona experta en la técnica y como se describe en esta memoria, tales como RT-PCR y FISH.
Se ha sugerido que mutaciones de un residuo de treonina conservado en el sitio de unión de ATP de FGFR darían como resultado una resistencia al inhibidor. El aminoácido valina 561 ha sido mutado a una metionina en FGFR1, que corresponde a las mutaciones reseñadas previamente encontradas en Abl (T315) y EGFR (T766) que se ha demostrado que confieren resistencia a los inhibidores selectivos. Los datos del ensayo para FGFR1 V561M demostraron que esta mutación confería resistencia a un inhibidor de la tirosina quinasa en comparación con el tipo salvaje. Otras mutaciones que se han encontrado son las mutaciones guardianes FGFR3 V555L/V555M, FGFR1 V561M, FGFR2 V564F/V564I/V564M y FGFR4 V550L. Los compuestos de la invención son específicamente activos frente a mutaciones guardianes, en particular frente a FGFR3 V555L, FGFR3 V555M, FGFR1 V561M y FGFR2 V564I, particularmente frente a FGFR3 V555L y FGFR3 V555M.
Los compuestos de la presente invención pueden ser útiles para el tratamiento de la población adulta. Los compuestos de la presente invención pueden ser útiles para el tratamiento de la población pediátrica.
Métodos de Diagnóstico
Antes de la administración de un compuesto de fórmula (I), se puede seleccionar a un paciente para determinar si una enfermedad o afección que padece o puede padecer el paciente es susceptible de tratamiento con un compuesto que tiene actividad contra FGFR, en particular FGFR que alberga mutaciones puntuales, en particular mutaciones guardianes de FGFR, tales como, por ejemplo, FGFR3 V555L, FGFR3 V555M, FGFR1 V561M y FGFR2 V564I, en particular FGFR3 V555L y FGFR3 V555M. En una realización, el cáncer alberga, además de una mutación guardián frente a FGFR, en particular, un FGFR1, FGFR2 o FGFR3 mutado guardián, tal como, por ejemplo, FGFR3 V555L, FGFR3 V555M, FGFR1 V561M y FGFR2 V564I, en particular FGFR3 V555L y f Gf R3 V555M, una o más de otras aberraciones del FGFR tales como, por ejemplo, una o más mutaciones del FGFR o una o más translocaciones del FGFR, como las definidas en esta memoria.
Por ejemplo, una muestra biológica tomada de un paciente puede analizarse para determinar si una afección o enfermedad, tal como el cáncer, que el paciente padece o puede padecer se caracteriza por una anomalía genética o una expresión anormal de proteínas que conduce a la regulación al alza de los niveles o la actividad del FGFR o a la sensibilización de una vía a la actividad normal del FGFR, o a la regulación al alza de estas vías de señalización del factor de crecimiento tales como los niveles del ligando del factor de crecimiento o la actividad del ligando del factor de crecimiento, o a la regulación al alza de una vía bioquímico aguas abajo de la activación del FGFR.
Ejemplos de anomalías de este tipo que dan como resultado la activación o sensibilización de la señal del FGFR incluyen pérdida o inhibición de vías apoptóticas, regulación al alza de los receptores o ligandos, o la presencia de variantes mutantes de los receptores o ligandos, p. ej., variantes de PTK. Tumores con mutantes de FGFR1, FGFR2 o FGFR3 o FGFR4 o regulación al alza, en particular sobre-expresión de FGFR1, o mutantes de ganancia de función de FGFR2 o FGFR3 pueden ser particularmente sensibles a los inhibidores del FGFR.
Por ejemplo, se han identificado mutaciones puntuales que generan ganancia de función en FGFR2 en un cierto número de afecciones. En particular, se han identificado mutaciones activadoras en FGFR2 en el 10 % de los tumores endometriales.
Además, se han identificado aberraciones genéticas del receptor FGFR3 tirosina quinasa tales como translocaciones cromosómicas o mutaciones puntuales que dan como resultado receptores FGFR3 expresados ectópicamente o desregulados, constitutivamente activos, y están vinculados a un subconjunto de mielomas múltiples, carcinomas de vejiga y de cuello uterino. Se ha identificado una mutación particular T674I del receptor PDGF en pacientes tratados con imatinib. Además, se demostró una amplificación del gen 8p12-p11.2 en ~50 % de los casos de cáncer de mama lobular (CLC) y se demostró que esto está vinculado a una expresión incrementada de FGFR1. Estudios preliminares con ARNpi dirigidos contra FGFR1, o una molécula pequeña inhibidora del receptor, demostraron que las líneas celulares que albergan esta amplificación son particularmente sensibles a la inhibición de esta vía de señalización.
Alternativamente, se puede analizar una muestra biológica tomada de un paciente para determinar la pérdida de un regulador negativo o supresor del FGFR. En el presente contexto, el término "pérdida" abarca la deleción de un gen que codifica el regulador o supresor, el truncamiento del gen (por ejemplo, por mutación), el truncamiento del producto transcrito del gen o la inactivación del producto transcrito (p. ej., por mutación puntual) o secuestro por otro producto génico.
La expresión regulación al alza incluye expresión elevada o sobre-expresión, incluyendo la amplificación de genes (es decir, múltiples copias de genes) y expresión incrementada por un efecto transcripcional e hiperactividad y activación, incluyendo la activación por mutaciones. Por lo tanto, el paciente puede someterse a una prueba de diagnóstico para detectar un marcador característico de la regulación al alza del FGFR. El término diagnóstico incluye selección. Por marcador los autores de la invención incluyen marcadores genéticos que incluyen, por ejemplo, la medición de la composición del ADN para identificar mutaciones del FGFR. El término marcador también incluye marcadores que son característicos de la regulación al alza de FGFR, incluyendo la actividad enzimática, los niveles de enzima, el estado de la enzima (p. ej., fosforilado o no) y los niveles de ARNm de las proteínas antes mencionadas.
Los tests y exámenes de diagnóstico se realizan típicamente en una muestra biológica seleccionada de muestras de biopsias de tumores, muestras de sangre (aislamiento y enriquecimiento de células tumorales excretadas), biopsias de heces, esputo, análisis de cromosomas, líquido pleural, líquido peritoneal, muestras bucales, biopsia u orina.
Métodos de identificación y análisis de mutaciones y regulación al alza de proteínas son conocidos por un experto en la técnica. Los métodos de selección podrían incluir, pero no se limitan a métodos estándares tales como la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RT-PCR, por sus siglas en inglés) o la hibridación in situ, tal como la hibridación in situ con fluorescencia (FISH, por sus siglas en inglés).
La identificación de un individuo que porta una mutación en el FGFR puede significar que el paciente sería particularmente adecuado para el tratamiento con un inhibidor del FGFR. Preferiblemente, los tumores pueden seleccionarse para detectar la presencia de una variante de FGFR antes del tratamiento. El proceso de selección implicará típicamente la secuenciación directa, el análisis de micromatrices de oligonucleótidos o un anticuerpo específico mutante. Además, el diagnóstico de tumores con mutaciones de este tipo podría realizarse utilizando técnicas conocidas por una persona experta en la técnica y como se describe en esta memoria, tales como RT-PCR y FISH.
Además, las formas mutantes de, por ejemplo, FGFR, pueden identificarse mediante secuenciación directa de, por ejemplo, biopsias tumorales utilizando la PCR y métodos para secuenciar productos de PCR directamente como se describe anteriormente en esta memoria. El experto en la materia reconocerá que todas estas técnicas bien conocidas para la detección de la sobre-expresión, activación o mutaciones de las proteínas antes mencionadas podrían ser aplicables en el presente caso.
En la selección por RT-PCR, el nivel de ARNm en el tumor se evalúa creando una copia de ADNc del ARNm, seguido de la amplificación del ADNc por PCR. Métodos de amplificación por PCR, la selección de cebadores y las condiciones para la amplificación son conocidos por una persona experta en la técnica. Manipulaciones de ácidos nucleicos y la PCR se llevan a cabo mediante métodos estándares tal como se describe, por ejemplo, en Ausubel, F.M. eta l, eds. (2004) Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons Inc., o Innis, M.A. et al, eds. (1990) PCR Protocols: a guide to methods and applications, Academic Press, San Diego. Las reacciones y manipulaciones que implican técnicas de ácidos nucleicos también se describen en Sambrook et al, (2001), 3a ed., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press. Alternativamente, se puede utilizar un kit comercialmente disponible para RT-PCR (por ejemplo, Roche Molecular Biochemicals) o la metodología que se recoge en las patentes de Estados Unidos 4.666.828; 4.683.202; 4.801.531; 5.192.659, 5.272.057, 5.882.864 y 6.218.529. Un ejemplo de una técnica de hibridación in situ para evaluar la expresión de ARNm sería la hibridación in situ con fluorescencia (FISH) (véase Angerer (1987) Meth. Enzymol., 152: 649).
Generalmente, la hibridación in situ comprende las siguientes etapas principales: (1) fijación del tejido a analizar; (2) tratamiento de prehibridación de la muestra para aumentar la accesibilidad del ácido nucleico diana y para reducir la unión no específica; (3) hibridación de la mezcla de ácidos nucleicos con el ácido nucleico en la estructura o tejido biológico; (4) lavados post-hibridación para eliminar los fragmentos de ácido nucleico no unidos en la hibridación, y (5) detección de los fragmentos de ácido nucleico hibridados. Las sondas utilizadas en aplicaciones de este tipo están típicamente marcadas, por ejemplo, con radioisótopos o indicadores fluorescentes. Sondas preferidas son lo suficientemente largas, por ejemplo, desde aproximadamente 50, 100 o 200 nucleótidos hasta aproximadamente 1000 o más nucleótidos, para permitir la hibridación específica con el o los ácidos nucleicos diana en condiciones estrictas. Métodos estándares para realizar la FISH se describen en Ausubel, F.M. et al, eds. (2004) Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons Inc y Fluorescence In Situ Hybridization: Technical Overview por John M.S. Bartlett en Molecular Diagnosis of Cancer, Methods and Protocols, 2a ed.; ISBN: 1-59259-760-2; marzo de 2004, pp. 077-088; Serie: Methods in Molecular Medicine.
Métodos para el perfilado de la expresión génica se describen en (DePrimo et al. (2003), BMC Cancer, 3:3). Brevemente, el protocolo es el siguiente: se sintetiza ADNc de doble cadena a partir de ARN total utilizando un oligómero (dT)24 para cebar la síntesis de ADNc de la primera cadena, seguido de la síntesis de ADNc de la segunda cadena con cebadores hexámeros aleatorios. El ADNc de doble cadena se utiliza como un molde para la transcripción in vitro de ARNc utilizando ribonucleótidos biotinilados. El ARNc se fragmenta químicamente de acuerdo con los protocolos descritos por Affymetrix (Santa Clara, CA, EE.UU.) y luego se hibrida durante la noche en matrices de genoma humano.
Alternativamente, los productos proteicos expresados a partir de los ARNm pueden analizarse mediante inmunohistoquímica de muestras de tumores, inmunoensayo en fase sólida con placas de microtitulación, transferencia Western, electroforesis en gel de poliacrilamida-SDS bidimensional, ELISA, citometría de flujo y otros métodos conocidos en la técnica para la detección de proteínas específicas. Métodos de detección incluirían el uso de anticuerpos específicos del sitio. La persona experta en la materia reconocerá que todas estas técnicas bien conocidas para la detección de la regulación al alza del f Gfr o la detección de variantes o mutantes de FGFR podrían ser aplicables en el presente caso.
Niveles anormales de proteínas tales como FGFR pueden medirse utilizando ensayos enzimáticos estándares, por ejemplo, los ensayos descritos en esta memoria. La activación o sobre-expresión también podría detectarse en una muestra de tejido, por ejemplo, un tejido tumoral. Midiendo la actividad de tirosina quinasa con un ensayo como el de Chemicon International. La tirosina quinasa de interés se inmunoprecipitaría a partir del lisado de muestra y se mediría su actividad.
Métodos alternativos para la medición de la sobre-expresión o activación de FGFR, incluyendo sus isoformas, incluyen la medición de la densidad de microvasos. Esto puede medirse, por ejemplo, utilizando métodos descritos por Orre y Rogers (Int J Cancer (1999), 84(2) 101-8).
Por lo tanto, todas estas técnicas también podrían utilizarse para identificar tumores particularmente adecuados para el tratamiento con los compuestos de la invención.
Los compuestos de la invención son particularmente útiles en el tratamiento de un paciente que tiene un FGFR mutado. La mutación G697C en FGFR3 se observa en el 62 % de los carcinomas orales de células escamosas y provoca la activación constitutiva de la actividad quinasa. También se han identificado mutaciones activadoras de FGFR3 en casos de carcinoma de vejiga. Estas mutaciones fueron de 6 tipos con diferentes grados de prevalencia: R248C, S249C, G372C, S373C, Y375C, K652Q. Además, se ha encontrado que un polimorfismo Gly388Arg en FGFR4 está asociado con una incidencia y agresividad incrementadas del cáncer de próstata, colon, pulmón, hígado (HCC) y mama. Los compuestos de la invención son particularmente útiles en el tratamiento de un paciente que tiene una translocación FGFR3-TACC3.
Por lo tanto, en un aspecto adicional, la invención incluye el uso de un compuesto de acuerdo con la invención para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la profilaxis de un estado patológico o afección en un paciente que ha sido seleccionado y se ha determinado que padece de, o está en riesgo de padecer, una enfermedad o afección que sería susceptible de tratamiento con un compuesto que tiene actividad contra el FGFR.
Mutaciones particulares para las que se selecciona un paciente incluyen mutaciones G697C, R248C, S249C, G372C, S373C, Y373C, K652Q en FGFR3 y polimorfismo Gly388Arg en FGFR4, en particular FGFR3 R248C, FGFR3 S249C, FGFR3 G370C o FGFR3 Y373C.
Mutaciones particulares para las que se selecciona un paciente incluyen, en particular, mutaciones de guardianes de FGFR. Las mutaciones de guardianes incluyen FGFR3 V555L/V555M, FGFR1 V561M, FGFR2 V564F/V564I/V564M y FGFR4 V550L. Mutaciones particulares para las que se selecciona a un paciente incluyen FGFR3 V555L, FGFR3 V555M, FGFR1 V561M y FGFR2 V564I, en particular FGFR3 V555L y FGFR3 V555M.
En otro aspecto, la invención incluye un compuesto de la invención para uso en la profilaxis o el tratamiento del cáncer en un paciente seleccionado de una sub-población que posee una variante del gen FGFR (por ejemplo mutación G697C en FGFR3 y polimorfismo Gly388Arg en FGFR4).
Los compuestos de la invención son particularmente útiles en el tratamiento de un paciente que tiene una fusión o translocación de FGFR, en particular f Gf R3:TACC3 v1; FGFR3:TACC3 v3; FGFR3:intrón TACC3; FGFR3:BAIAP2L1;
FGFR2:AFF3; FGFR2:BICC1; FGFR2:CASP7; FGFR2:CCDC6; y FGFR2:OFD1. Se utilizan las siguientes abreviaturas: FGFR (receptor del factor de crecimiento de fibroblastos); FGFR3: TACC3 (fusión entre genes que codifican FGFR3 y proteína 3 que contiene espiral ácida transformadora); FGFR3:BAIAP2L1 (fusión entre genes que codifican FGFR3 y proteína 2 asociada al inhibidor de la angiogénesis específica del cerebro 1; FGFR2:AFF3 (fusión entre genes que codifican FGFR2 y familia AF4/FMR2, miembro 3); FGFR2:BICC1 (fusión entre genes que codifican FGFR2 y el homólogo 1 de C bicaudal); FGFR2: CASP7 (fusión entre genes que codifican FGFR2 y caspasa 7); FGFR2:CCDC6 (fusión entre genes que codifican FGFR2 y dominio enrollado que contiene 6); FGFR2:OFD1 (fusión entre genes que codifican FGFR2 y síndrome oral-facial-digital 1).
Composiciones y Combinaciones Farmacéuticas
En vista de sus propiedades farmacológicas útiles, los compuestos objeto pueden formularse en diversas formas farmacéuticas para fines de administración.
En una realización, la composición farmacéutica (p. ej., formulación) comprende al menos un compuesto activo de la invención junto con un soporte farmacéuticamente aceptable que puede incluir adyuvantes, excipientes, diluyentes, cargas, tampones, estabilizantes, conservantes, lubricantes u otros materiales bien conocidos por los expertos en la técnica y, opcionalmente, otros agentes terapéuticos o profilácticos.
Para preparar las composiciones farmacéuticas de esta invención, una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invención, como el ingrediente activo, se combina en una mezcla íntima con un soporte farmacéuticamente aceptable, soporte que puede adoptar una amplia diversidad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración. Las composiciones farmacéuticas pueden estar en cualquier forma adecuada para la administración oral, parenteral, tópica, intranasal, oftálmica, ótica, rectal, intravaginal o transdérmica. Estas composiciones farmacéuticas están deseablemente en forma de dosificación unitaria adecuada, preferiblemente, para la administración por vía oral, rectal, percutánea o por inyección parenteral. Por ejemplo, en la preparación de las composiciones en forma de dosificación oral, se puede emplear cualquiera de los medios farmacéuticos habituales, tales como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes y similares en el caso de preparaciones líquidas orales, tales como suspensiones, jarabes , elixires y soluciones; o soportes sólidos, tales como almidones, azúcares, caolín, lubricantes, aglutinantes, agentes disgregantes y similares en el caso de polvos, píldoras, cápsulas y comprimidos.
Debido a su facilidad de administración, los comprimidos y las cápsulas representan la forma unitaria de dosificación oral más ventajosa, en cuyo caso se emplean obviamente soportes farmacéuticos sólidos. Para las composiciones parenterales, el soporte comprenderá habitualmente agua estéril, al menos en gran parte, aunque se pueden incluir otros ingredientes, por ejemplo, para ayudar a la solubilidad. Se pueden preparar soluciones inyectables, por ejemplo, en las que el soporte comprenda solución salina, solución de glucosa o una mezcla de solución salina y glucosa. También se pueden preparar suspensiones inyectables, en cuyo caso se pueden emplear soportes líquidos apropiados, agentes de suspensión y similares. En las composiciones adecuadas para la administración percutánea, el soporte comprende opcionalmente un agente potenciador de la penetración y/o un agente humectante adecuado, combinado opcionalmente con aditivos adecuados de cualquier naturaleza en proporciones menores, aditivos que no provocan un efecto perjudicial significativo para la piel. Dichos aditivos pueden facilitar la administración a la piel y/o pueden ser útiles para preparar las composiciones deseadas. Estas composiciones se pueden administrar de diversas formas, p. ej., como un parche transdérmico, como una unción, como una pomada. Es especialmente ventajoso formular las composiciones farmacéuticas antes mencionadas en forma de unidades de dosificación para facilitar la administración y uniformidad de la dosificación. La forma de unidad de dosificación como se utiliza en esta memoria se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitarias, conteniendo cada una de las unidades una cantidad predeterminada de ingrediente activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el soporte farmacéutico requerido. Ejemplos de formas unitarias de dosificación de este tipo son comprimidos (incluyendo comprimidos ranuradas o recubiertos), cápsulas, píldoras, paquetes de polvo, obleas, soluciones o suspensiones inyectables, cucharaditas, cucharadas y similares, y múltiplos separados de los mismos.
El compuesto de la invención se administra en una cantidad suficiente para ejercer su actividad antitumoral o para ejercer su efecto inhibidor del FGFR.
En una realización, el compuesto de la invención o la composición farmacéutica de la invención es para administración oral.
Los expertos en la técnica podrían determinar la cantidad eficaz a partir de los resultados de las pruebas que se presentan más adelante. En general, se contempla que una cantidad terapéuticamente eficaz sería de 0,005 mg/kg a 100 mg/kg de peso corporal y, en particular, de 0,005 mg/kg a 10 mg/kg de peso corporal. Puede ser apropiado administrar la dosis requerida como dosis única, dos, tres, cuatro o más sub-dosis a intervalos apropiados a lo largo del día. Dichas sub-dosis pueden formularse como formas de dosificación unitaria, por ejemplo, que contienen de 0,5 a 500 mg, en particular de 1 mg a 500 mg, más en particular de 10 mg a 500 mg de ingrediente activo por forma de dosificación unitaria.
Dependiendo del modo de administración, la composición farmacéutica comprenderá preferiblemente de 0,05 a 99 % en peso, más preferiblemente de 0,1 a 70 % en peso, incluso más preferiblemente de 0,1 a 50 % en peso del compuesto de la presente invención y de 1 a 99,95 % en peso, más preferiblemente de 30 a 99,9 % en peso, incluso más preferiblemente de 50 a 99,9 % en peso de un soporte farmacéuticamente aceptable, estando todos los porcentajes basados en el peso total de la composición.
Se ha descubierto que algunos inhibidores del FGFR se pueden utilizar en combinación con otros agentes anticancerosos. Por ejemplo, puede ser beneficioso combinar un inhibidor que induce la apoptosis con otro agente que actúa a través de un mecanismo diferente para regular el crecimiento celular, tratando así dos de los rasgos característicos del desarrollo del cáncer. Más adelante se exponen ejemplos de combinaciones de este tipo.
Como otro aspecto de la presente invención, se contempla una combinación de un compuesto de la presente invención con otro agente anticanceroso, especialmente para uso como un medicamento, más específicamente para uso en el tratamiento del cáncer o enfermedades relacionadas, en particular una afección o enfermedad mediada por una quinasa FGFR.
Para el tratamiento de las afecciones anteriores, los compuestos de la invención pueden emplearse ventajosamente en combinación con uno o más de otros agentes medicinales, más particularmente, con otros agentes anticancerígenos o adyuvantes en la terapia del cáncer. Ejemplos de agentes anticancerígenos o adyuvantes (agentes de apoyo en la terapia) incluyen pero no se limitan a:
- compuestos de coordinación de platino, por ejemplo, cisplatino opcionalmente combinado con amifostina, carboplatino u oxaliplatino;
- compuestos de taxano, por ejemplo, paclitaxel, partículas unidas a proteínas de paclitaxel (Abraxane™) o docetaxel;
- inhibidores de la topoisomerasa I tales como los compuestos de camptotecina, por ejemplo, irinotecán, SN-38, topotecán, topotecán hcl;
- inhibidores de la topoisomerasa II tales como derivados de epipodofilotoxinas o podofilotoxina antitumorales, por ejemplo, etopósido, etopósido fosfato o tenipósido;
- alcaloides de la vinca antitumorales, por ejemplo, vinblastina, vincristina o vinorelbina;
- derivados de nucleósidos antitumorales, por ejemplo, 5-fluorouracilo, leucovorina, gemcitabina, gemcitabina hcl, capecitabina, cladribina, fludarabina, nelarabina;
- agentes alquilantes, tales como mostaza nitrogenada o nitrosourea, por ejemplo, ciclofosfamida, clorambucilo, carmustina, tiotepa, mefalán (melfalán), lomustina, altretamina, busulfán, dacarbazina, estramustina, ifosfamida, opcionalmente en combinación con mesna, pipobroman, procarbazina, estreptozocina, telozolomida, uracilo;
- derivados de antraciclina antitumorales, por ejemplo, daunorrubicina, doxorrubicina opcionalmente en combinación con dexrazoxano, doxil, idarrubicina, mitoxantrona, epirrubicina, epirrubicina hcl, valrubicina;
- moléculas que fijan como objetivo el receptor de IGF-1, por ejemplo, picropodofilina;
- derivados de tetracarcina, por ejemplo, tetrocarcina A;
- glucocorticoides, por ejemplo, prednisona;
- anticuerpos, por ejemplo trastuzumab (anticuerpo HER2), rituximab (anticuerpo CD20), gemtuzumab, gemtuzumab ozogamicina, cetuximab, pertuzumab, bevacizumab, alemtuzumab, eculizumab, ibritumomab tiuxetan, nofetumomab, panitumumab, tositumomab, CNTO 328;
- antagonistas de los receptores de estrógenos o moduladores selectivos de los receptores de estrógenos o inhibidores de la síntesis de estrógenos, por ejemplo, tamoxifeno, fulvestrant, toremifeno, droloxifeno, faslodex, raloxifeno o letrozol;
- inhibidores de aromatasa, tales como exemestano, anastrozol, letazol, testolactona y vorozol;
- agentes diferenciadores, tales como retinoides, vitamina D o ácido retinoico y agentes bloqueadores del metabolismo del ácido retinoico (RAMBA, por sus siglas en inglés), por ejemplo accutane;
- inhibidores de la ADN metil transferasa, por ejemplo, azacitidina o decitabina;
- antifolatos, por ejemplo, premetrexed disódico;
- antibióticos, por ejemplo, antinonomicina D, bleomicina, mitomicina C, dactinomicina, carminomicina, daunomicina, levamisol, plicamicina, mitramicina;
- antimetabolitos, por ejemplo, clofarabina, aminopterina, arabinósido de citosina o metotrexato, azacitidina, citarabina, floxuridina, pentostatina, tioguanina;
- agentes inductores de la apoptosis y agentes antiangiogénicos, tales como inhibidores de Bcl-2 por ejemplo YC 137, BH 312, ABT 737, gosipol, HA 14-1, TW 37 o ácido decanoico;
- agentes de unión a tubulina, por ejemplo combrestatina, colchicinas o nocodazol;
- inhibidores de la quinasa (p. ej., inhibidores del EGFR (siglas inglesas del receptor del factor de crecimiento epitelial), MTKI (siglas inglesas de los inhibidores de la quinasa multidiana), inhibidores de mTOR, inhibidores de cmet), por ejemplo, flavoperidol, mesilato de imatinib, erlotinib, gefitinib, dasatinib, lapatinib, ditosilato de lapatinib, sorafenib, sunitinib, maleato de sunitinib, temsirolimus, 6-{difluoro[6-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3-iljmetiljquinolina o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, 6-[difluoro(6-piridin-4-il[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3-il)metil]quinolina o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;
- inhibidores de farnesiltransferasa, por ejemplo, tipifarnib;
- inhibidores de la histona desacetilasa (HDAC, por sus siglas en inglés), por ejemplo, butirato de sodio, ácido hidroxámico suberoilanilida (SAHA, por sus siglas en inglés), depsipéptido (FR 901228), NVP-LAQ824, R306465, JNJ-26481585, tricostatina A, vorinostat;
- inhibidores de la vía de la ubiquitina-proteasoma, por ejemplo, PS-341, MLN .41 o bortezomib;
- Yondelis;
- inhibidores de la telomerasa, por ejemplo telomestatina;
- inhibidores de metaloproteinasas de la matriz, por ejemplo, batimastat, marimastat, prinostat o metastat.
- interleuquinas recombinantes, por ejemplo, aldesleuquina, denileuquina diftitox, interferón alfa 2a, interferón alfa 2b, peginterferón alfa 2b
- inhibidores de MAPK
- retinoides, por ejemplo, alitretinoína, bexaroteno, tretinoína
- trióxido arsénico
- asparaginasa
- esteroides, por ejemplo, propionato de dromostanolona, acetato de megestrol, nandrolona (decanoato, fenpropionato), dexametasona
- agonistas o antagonistas de la hormona liberadora de gonadotropina, por ejemplo, abarelix, acetato de goserelina, acetato de histrelina, acetato de leuprolida
- talidomida, lenalidomida
- mercaptopurina, mitotano, pamidronato, pegademasa, pegaspargasa, rasburicasa
- miméticos BH3, por ejemplo ABT-737
- inhibidores de MEK, por ejemplo, PD98059, AZD6244, CI-1040
- análogos del factor estimulante de colonias, por ejemplo, filgrastim, pegfilgrastim, sargramostim; eritropoyetina o análogos de la misma (p. ej., darbepoyetina alfa); interleuquina 11; oprelvequina; zoledronato, ácido zoledrónico; fentanilo; bisfosfonato; palifermina
- un inhibidor de la 17alfa-hidroxilasa-17,20-liasa del citocromo P450 esteroide (CYP17), p. ej., abiraterona, acetato de abiraterona
- un anticuerpo que bloquea la interacción entre PD-1 y PD-L1.
En una realización, la presente invención se refiere a una combinación de un compuesto de fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, o cualesquiera subgrupos y ejemplos del mismo, y 6-{difluoro[6-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)[1,2,4]triazolo[4,3-b]-piridazin-3-il]metil}quinolina o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En una realización, la presente invención se refiere a una combinación de un compuesto de fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, o cualesquiera subgrupos y ejemplos del mismo, y 6-[difluoro(6-piridin-4-il[1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-3-il)-metil]quinolina o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En una realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, o cualesquiera subgrupos y ejemplos del mismo, y 6-{difluoro[6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)[1,2,4]-triazolo[4,3-b]piridazin-3-il]metil}quinolina o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En una realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, o cualesquiera de subgrupos y ejemplos del mismo, y 6-[difluoro(6-piridin-4-il[1,2,4]triazolo[4,3-b]-piridazin-3-il)metil]quinolina o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
Los compuestos de la presente invención también tienen aplicaciones terapéuticas en la sensibilización de células tumorales para radioterapia y quimioterapia.
Por lo tanto, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar como "radiosensibilizador" y/o "quimiosensibilizador" o se pueden administrar en combinación con otro "radiosensibilizador" y/o "quimiosensibilizador".
El término " radiosensibilizador ", tal como se utiliza en esta memoria, se define como una molécula, preferiblemente una molécula de bajo peso molecular, administrada a animales en cantidades terapéuticamente eficaces para aumentar la sensibilidad de las células a la radiación ionizante y/o para fomentar el tratamiento de enfermedades que se pueden tratar con radiaciones ionizantes.
El término "quimiosensibilizador", tal como se utiliza en esta memoria, se define como una molécula, preferiblemente una molécula de bajo peso molecular, administrada a animales en cantidades terapéuticamente eficaces para aumentar la sensibilidad de las células a la quimioterapia y/o fomentar el tratamiento de enfermedades que se pueden tratar con quimioterapia.
En la bibliografía se han sugerido varios mecanismos para el modo de acción de los radiosensibilizadores, que incluyen: radiosensibilizadores de células hipóxicas (p. ej., compuestos de 2-nitroimidazol y compuestos de dióxido de benzotriazina) que imitan el oxígeno o, alternativamente, se comportan como agentes biorreductores bajo hipoxia; radiosensibilizadores de células no hipóxicas (p. ej., pirimidinas halogenadas) pueden ser análogos de las bases de ADN y preferentemente incorporarse en el ADN de células cancerosas y, por lo tanto, fomentar la ruptura inducida por radiación de las moléculas de ADN y/o prevenir los mecanismos normales de reparación del ADN; y se han formulado hipótesis sobre diversos otros mecanismos de acción potenciales para los radiosensibilizadores en el tratamiento de enfermedades.
Muchos protocolos de tratamiento del cáncer emplean actualmente radiosensibilizadores junto con la radiación de rayos X. Ejemplos de radiosensibilizadores activados por rayos X incluyen, pero no se limitan a los siguientes: metronidazol, misonidazol, desmetilmisonidazol, pimonidazol, etanidazol, nimorazol, mitomicina C, RSU 1069, SR 4233, EO9, RB 6145, nicotinamida, 5-bromodesoxiuridina (BUdR), 5-yododesoxiuridina (IUdR), bromodesoxicitidina, fluorodesoxiuridina (FudR), hidroxiurea, cisplatino y análogos y derivados terapéuticamente efectivos de los mismos.
La terapia fotodinámica (PDT, por sus siglas en inglés) de cánceres emplea luz visible como activador de la radiación del agente sensibilizante. Ejemplos de radiosensibilizadores fotodinámicos incluyen los siguientes, pero no se limitan a: derivados de hematoporfirina, Photofrin, derivados de benzoporfirina, etioporfirina de estaño, feoborbida-a, bacterioclorofila-a, naftalocianinas, ftalocianinas, ftalocianina de zinc y análogos y derivados terapéuticamente efectivos de los mismos. Los radiosensibilizadores pueden administrarse junto con una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más compuestos, incluyendo, pero no limitados a: compuestos que fomentan la incorporación de radiosensibilizadores a las células diana; compuestos que controlan el flujo de agentes terapéuticos, nutrientes y/u oxígeno a las células diana; agentes quimioterapéuticos que actúan sobre el tumor con o sin radiación adicional; u otros compuestos terapéuticamente efectivos para tratar el cáncer u otras enfermedades.
Los quimiosensibilizadores pueden administrarse junto con una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más de otros compuestos, incluyendo, pero no limitados a: compuestos que fomentan la incorporación de quimiosensibilizadores a las células diana; compuestos que controlan el flujo de agentes terapéuticos, nutrientes y/u oxígeno a las células diana; agentes quimioterapéuticos que actúan sobre el tumor u otros compuestos terapéuticamente eficaces para tratar el cáncer u otra enfermedad. Antagonistas del calcio, por ejemplo verapamilo, resultan útiles en combinación con agentes antineoplásicos para establecer la quimiosensibilidad en células tumorales resistentes a agentes quimioterapéuticos aceptados y para potenciar la eficacia de compuestos de este tipo en tumores malignos sensibles a fármacos.
En vista de sus útiles propiedades farmacológicas, los componentes de las combinaciones de acuerdo con la invención, es decir, el uno o más de otros agentes medicinales y el compuesto de acuerdo con la presente invención, pueden formularse en diversas formas farmacéuticas con fines de administración. Los componentes pueden formularse por separado en composiciones farmacéuticas individuales o en una composición farmacéutica unitaria que contenga todos los componentes.
Por lo tanto, la presente invención también se refiere a una composición farmacéutica que comprende el uno o más de los otros agentes medicinales y el compuesto de acuerdo con la presente invención junto con un soporte farmacéuticamente aceptable.
La presente invención se refiere, además, al uso de una combinación de acuerdo con la invención en la fabricación de una composición farmacéutica para inhibir el crecimiento de células tumorales.
La presente invención se refiere, además, a un producto que contiene como primer ingrediente activo un compuesto de acuerdo con la invención y como ingrediente activo adicional uno o más agentes anticancerígenos, como una preparación combinada para uso simultáneo, separado o secuencial en el tratamiento de pacientes que padecen cáncer.
El uno o más de los otros agentes medicinales y el compuesto de acuerdo con la presente invención pueden administrarse simultáneamente (p. ej., en composiciones separadas o unitarias) o secuencialmente en cualquier orden. En este último caso, los dos o más compuestos se administrarán en un plazo y en una cantidad y forma suficientes para asegurar que se consiga un efecto ventajoso o sinérgico. Se apreciará que el método preferido y el orden de administración y las respectivas cantidades y regímenes de dosificación para cada uno de los componentes de la combinación dependerán del otro agente medicinal y compuesto particular de la presente invención que se administre, de su vía de administración, del tumor particular que esté siendo tratando y del huésped particular que esté siendo tratado. El método y el orden de administración óptimos y las cantidades y el régimen de dosificación pueden determinarse fácilmente por los expertos en la técnica utilizando métodos convencionales y en vista de la información recogida en esta memoria.
La relación ponderal del compuesto de acuerdo con la presente invención y el uno o más de los otros agentes anticancerígenos cuando se administran como una combinación puede ser determinada por la persona experta en la técnica. Dicha relación y la dosificación exacta y la frecuencia de administración dependen del compuesto particular de acuerdo con la invención y de los otros agentes anticancerígenos utilizados, de la afección particular que se esté tratando, de la gravedad de la afección que se esté tratando, de la edad, del peso, del sexo, de la dieta, del momento de la administración y del estado físico general del paciente particular, del modo de administración, así como de otros medicamentos que el individuo pueda estar tomando, como es bien sabido por los expertos en la técnica. Además, es evidente que la cantidad diaria eficaz puede reducirse o aumentarse dependiendo de la respuesta del sujeto tratado y/o dependiendo de la evaluación del médico que prescribe los compuestos de la presente invención. Una relación ponderal particular para el presente compuesto de fórmula (I) y otro agente anticancerígeno puede variar de 1/10 a 10/1, más en particular de 1/5 a 5/1, incluso más en particular de 1/3 a 3/1.
El compuesto de coordinación de platino se administra ventajosamente en una dosificación de 1 a 500 mg por metro cuadrado (mg/m2 ) de superficie corporal, por ejemplo de 50 a 400 mg/m2, particularmente para el cisplatino en una dosificación de aproximadamente 75 mg/m2 y para carboplatino en aproximadamente 300 mg/m2 por ciclo de tratamiento.
El compuesto de taxano se administra ventajosamente en una dosificación de 50 a 400 mg por metro cuadrado (mg/m2) de superficie corporal, por ejemplo de 75 a 250 mg/m2, particularmente para paclitaxel en una dosificación de aproximadamente 175 a 250 mg/m2 y para docetaxel en aproximadamente de 75 a 150 mg/m2 por ciclo de tratamiento.
El compuesto de camptotecina se administra ventajosamente en una dosificación de 0,1 a 400 mg por metro cuadrado (mg/m2) de superficie corporal, por ejemplo de 1 a 300 mg/m2, particularmente para irinotecán en una dosificación de aproximadamente 100 a 350 mg/m2 y para topotecan en aproximadamente 1 a 2 mg/m2 por ciclo de tratamiento.
El derivado de podofilotoxina antitumoral se administra ventajosamente en una dosificación de 30 a 300 mg por metro cuadrado (mg/m2) de superficie corporal, por ejemplo de 50 a 250 mg/m2, particularmente para el etopósido en una dosificación de aproximadamente 35 a 100 mg/m2 y para tenipósido en aproximadamente de 50 a 250 mg/m2 por ciclo de tratamiento.
El alcaloide de la vinca antitumoral se administra ventajosamente en una dosificación de 2 a 30 mg por metro cuadrado (mg/m2) de superficie corporal, particularmente para la vinblastina en una dosificación de aproximadamente 3 a 12 mg/m2, para la vincristina en una dosificación de aproximadamente 1 a 2 mg/m2, y para la vinorelbina en una dosificación de aproximadamente 10 a 30 mg/m2 por ciclo de tratamiento.
El derivado de nucleósido antitumoral se administra ventajosamente en una dosificación de 200 a 2500 mg por metro cuadrado (mg/m2 ) de superficie corporal, por ejemplo 700 a 1500 mg/m2, particularmente para 5-FU en una dosificación de 200 a 500 mg/m2, para gemcitabina en una dosificación de aproximadamente 800 a 1200 mg/m2 y para capecitabina en aproximadamente 1000 a 2500 mg/m2 por ciclo de tratamiento.
Los agentes alquilantes tales como la mostaza nitrogenada o la nitrosourea se administran ventajosamente en una dosificación de 100 a 500 mg por metro cuadrado (mg/m2) de superficie corporal, por ejemplo 120 a 200 mg/m2, particularmente para ciclofosfamida en una dosificación de aproximadamente 100 a 500 mg/m2, para clorambucilo en una dosificación de aproximadamente 0,1 a 0,2 mg/kg, para carmustina en una dosificación de aproximadamente 150 a 200 mg/m2 y para lomustina en una dosificación de aproximadamente 100 a 150 mg/m2 por ciclo de tratamiento.
El derivado de antraciclina antitumoral se administra ventajosamente en una dosificación de 10 a 75 mg por metro cuadrado (mg/m2) de superficie corporal, por ejemplo de 15 a 60 mg/m2, en particular para doxorrubicina en una dosificación de aproximadamente 40 a 75 mg/m2, para daunorrubicina en una dosificación de aproximadamente 25 a 45 mg/m2 y para idarrubicina en una dosificación de aproximadamente 10 a 15 mg/m2 por ciclo de tratamiento.
El agente antiestrógeno se administra ventajosamente en una dosificación de aproximadamente 1 a 100 mg diarios dependiendo del agente particular y de la afección que se esté tratando. Tamoxifeno se administra ventajosamente por vía oral en una dosificación de 5 a 50 mg, preferiblemente de 10 a 20 mg dos veces al día, continuando la terapia durante el tiempo suficiente para lograr y mantener un efecto terapéutico. Toremifeno se administra ventajosamente por vía oral en una dosificación de aproximadamente 60 mg una vez al día, continuando la terapia durante el tiempo suficiente para lograr y mantener un efecto terapéutico. Anastrozol se administra ventajosamente por vía oral en una dosificación de aproximadamente 1 mg una vez al día. Droloxifeno se administra ventajosamente por vía oral en una dosificación de aproximadamente 20-100 mg una vez al día. Raloxifeno se administra ventajosamente por vía oral en una dosificación de aproximadamente 60 mg una vez al día. Exemestano se administra ventajosamente por vía oral en una dosificación de aproximadamente 25 mg una vez al día.
Los anticuerpos se administran ventajosamente en una dosificación de aproximadamente 1 a 5 mg por metro cuadrado (mg/m2) de superficie corporal, o como se conoce en la técnica, si es diferente. T rastuzumab se administra ventajosamente en una dosificación de 1 a 5 mg por metro cuadrado (mg/m2) de superficie corporal, particularmente de 2 a 4 mg/m2 por ciclo de tratamiento.
Estas dosificaciones pueden administrarse, por ejemplo, una, dos o más veces por ciclo de tratamiento, que puede repetirse, por ejemplo, cada 7, 14, 21 o 28 días.
Los compuestos de fórmula (I), las sales por adición farmacéuticamente aceptables, en particular sales por adición de ácidos farmacéuticamente aceptables, y formas estereoisoméricas de los mismos pueden tener valiosas propiedades de diagnóstico, porque pueden utilizarse para detectar o identificar la formación de un complejo entre un compuesto marcado y otras moléculas, péptidos, proteínas, enzimas o receptores.
Los métodos de detección o identificación pueden utilizar compuestos que están marcados con agentes de marcaje, tales como radioisótopos, enzimas, sustancias fluorescentes, sustancias luminosas, etc. Ejemplos de radioisótopos incluyen 125I, 131I, 3H y 14C. Las enzimas generalmente se hacen detectables por conjugación de un sustrato apropiado, el cual, a su vez, cataliza una reacción detectable. Ejemplos de los mismos incluyen, por ejemplo, beta-galactosidasa, beta-glucosidasa, fosfatasa alcalina, peroxidasa y maleato deshidrogenasa, preferiblemente peroxidasa de rábano picante. Las sustancias luminosas incluyen, por ejemplo, luminol, derivados de luminol, luciferina, aecuorina y luciferasa.
Muestras biológicas se pueden definir como tejido corporal o fluidos corporales. Ejemplos de fluidos corporales son fluido cerebroespinal, sangre, plasma, suero, orina, esputo, saliva y similares.
Parte experimental
En los siguientes ejemplos se ilustran varios métodos para preparar los compuestos de la invención. A menos que se indique lo contrario, todos los materiales de partida se obtuvieron de proveedores comerciales y se utilizaron sin purificación adicional.
Cuando un estereocentro se indica con 'RS', esto significa que se obtuvo una mezcla de estereoisómeros en el centro indicado, a menos que se indique lo contrario. La configuración estereoquímica para un estereocentro en algunos compuestos se designa como "R" o "S" y/o con un enlace continuo en cuña o discontinuo en cuña que indica que se conoce la estereoconfiguración absoluta. Para algunos compuestos, la configuración estereoquímica en un estereocentro indicado ha sido designada como "R*" o "S " con un enlace de línea continua, o un enlace continuo en cuña o discontinuo en cuña que indica que la estereoquímica absoluta en el estereocentro es indeterminada, aunque es absoluta. Entonces, un estereocentro indicado como S* significa que es un estereocentro absoluto, pero no se determina si es S o R.
De aquí en adelante, los términos: 'TA' o 'ta' significa temperatura ambiente; 'TFA' significa ácido trifluoroacético, 'FA' significa ácido fórmico, 'TfOH' significa ácido trifluorometanosulfónico, 'DIPEA' significa etildiisopropilamina o N-etil-N-isopropilpropan-2-amina o N,N-diisopropiletilamina, 'Rt' o 'Rt' significa tiempo de retención, '18-corona-6' significa 1,4,7,10,13,16-hexaoxaciclo-octadecano, 'SFC' significa cromatografía de fluidos supercríticos, 'ACN' significa acetonitrilo, 'DEA' significa dietilamina, 'IPA' significa alcohol isopropílico, 'DIBAL-H' significa hidruro de diisopropilaluminio, 'PMB' significa 4-metoxibencilo, 'EtOAc' significa acetato de etilo, 'DMF' significa N,N-dimetilformamida, 'DCM' significa diclorometano, ' DMAc' significa N,N-dimetilacetamida, 'THF' significa tetrahidrofurano, 'Bn' significa bencilo, 'P.F.' o 'p.f.' significa punto de fusión, 'HPLC' significa cromatografía líquida de alta resolución, 'TLC' significa cromatografía en capa fina, 'LC-MS' significa cromatografía líquida-espectrometría de masas, 'ee' significa exceso enantiomérico.
Preparación del compuesto 1
Figure imgf000048_0001
a) Preparación del compuesto intermedio 1
4-(3,5-difluoro-4-nitrofenil)morfolina
Figure imgf000049_0001
El compuesto intermedio 1 se sintetizó como se describe en Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2012, vol. 22, n° 18, 5876 - 5884.
Procedimiento general A: 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO- d) (Varian) 5 = 6,43 - 6,39 (m, 1H), 6,39 - 6,34 (m, 1H), 3,93 - 3,74 (m, 4H), 3,41 - 3,22 (m, 4H)
b) Preparación del compuesto intermedio 2 N-bencil-3-fluoro-5-morfolino-2-nitroanilina
Figure imgf000049_0002
A una solución del compuesto intermedio 1 (4-(3,5-difluoro-4-nitrofenil)morfolina) (5,00 g, 20,5 mmoL) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (7,94 g, 61,4 mmol ) en acetonitrilo (150 mL) se añadió gota a gota fenilmetanamina (2,19 g, 20,5 mmol) a 20 °C. La mezcla de reacción se calentó a 70 °C durante 12 horas. Luego, la mezcla se concentró a presión reducida para eliminar la mayor parte del disolvente y el aceite naranja resultante se disolvió en acetato de etilo (1 L). La mezcla se lavó con agua (200 mL x 3) y salmuera (300 mL), se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se filtró. El filtrado se concentró para dar el producto bruto que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (eluyendo con: éter de petróleo: acetato de etilo de 1:0 a 1:1) para dar el compuesto intermedio 2 (4,80 g, 70,8 % de rendimiento) en forma de sólidos de color amarillo azafrán.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO- d6) (Varian) 8,58 - 8,47 (m, 1H), 7,44-7,32 (m, 4H), 7,31 - 7,22 (m, 1H), 6,38 - 6,26 (m, 1H), 5,80 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,54 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 3,67 - 3,57 (m, 4H), 3,30 - 3,22 (m, 4H). c) Preparación del compuesto intermedio 3
3-fluoro-5-morfolinobenceno-1,2 -diamina
Figure imgf000049_0003
Paladio húmedo sobre carbono activado (642 mg, 10 % sobre carbono activado) se añadió a una solución que consistía en el compuesto intermedio 2 (N-bencil-3-fluoro-5-morfolino-2-nitroanilina) (2,00 g, 6,04 mmol) y metanol (60 mL) en un matraz de fondo redondo de 250 mL. La suspensión se desgasificó en vacío y se roció con hidrógeno y luego se agitó a 50 °C bajo hidrógeno (1,03 bar) durante 2 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se evaporó en vacío para proporcionar el compuesto intermedio 3 (1,10 g, 75,5 % de pureza, 65,1 % de rendimiento) en forma de sólidos negros.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B, Método 6): Rt = 1,26 min, masa calculada para C10H14FN3O 211,11, m/z encontrado 212,2 [M+H]+.
d) Preparación del compuesto intermedio 4
4-amino-1-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo
Figure imgf000050_0001
El compuesto intermedio 4 se sintetizó como se describe en ACS Medicinal Chemistry Letters, 2013, vol. 4, n° 10, 979 -984.
e) Preparación del compuesto intermedio 5
4-((4-metoxibencil)amino)-1-metil-1 H-pirazol-3-carboxilato de metilo
Figure imgf000050_0002
A una solución del compuesto intermedio 4 (4-amino-1-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo) (7,50 g, 48,3 mmol) en acetato de etilo (150 mL) se añadió 4-metoxibenzaldehído (7,90 g, 58,0 mmol) y ácido trifluoroacético (7,2 mL, 96,7 mmol). Se añadió borohidruro de sodio (1,83 g, 48,3 mmol) a la mezcla en porciones al tiempo que la temperatura se mantenía por debajo de 35 °C. Después de la adición, la mezcla se agitó a 25 °C durante 30 minutos. La mezcla de reacción se extinguió con agua (100 mL) y se agitó a 25 °C durante 1 hora. Luego, la mezcla se separó y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron sobre Na2SÜ4 anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró para dar el producto bruto que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (eluyendo con: éter de petróleo:acetato de etilo de 1 : 0 a 5 : 4) para dar el compuesto intermedio 5 (7,92 g, 73,9 % de pureza, 73,2 % de rendimiento) en forma de sólidos blancos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General C, Método 9): Rt = 0,663 min, masa calculada para C14H17N3O3 275,13, m/z encontrado 275,9 [M+H]+.
f) Preparación del compuesto intermedio 6
7-hidroxi-4-(4-metoxibencil)-2-metil-5-oxo-4,5-dihidro-2HLpirazolo[4,3-b]-piridina-6-carboxilato de metilo
Figure imgf000050_0003
A una solución del compuesto intermedio 5 (4-((4-metoxibencil )amino)-1-metil-1 H-pirazol-3-carboxilato de metilo) (13,2 g, 47.9 mmol) en N,N-dimetilformamida (300 mL) se añadió hidruro de sodio (2,68 g, 67,1 mmol) en porciones. La mezcla se agitó a 20 °C durante 10 minutos y se enfrió a 0 °C. Se añadió gota a gota a la mezcla cloruro de metilmalonilo (6,54 g, 47.9 mmol) y la mezcla se agitó adicionalmente a 20 °C durante 15 minutos. Se añadió metóxido de sodio (5,18 g, 95,9 mmol) a la reacción y la mezcla se calentó a 110 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró para dar un residuo que se disolvió en agua (200 mL) y se filtró. El filtrado se extrajo con terc.-butil metil éter (100 mL). A la capa acuosa se añadió ácido clorhídrico concentrado para ajustar el pH a 3-4, separándose por precipitación sólidos blancos. El precipitado recogido se disolvió en diclorometano (200 mL). La solución orgánica resultante se lavó con salmuera (300 mL), se secó sobre Na2SÜ4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró para dar el compuesto intermedio 6 (10,0 g, bruto) en forma de un aceite amarillo que se utilizó directamente para la siguiente etapa.
g) Preparación del compuesto intermedio 7
7-cloro-4-(4-metoxibencil)-2-metil-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazolo[453-b]-piridin-6-carboxilato de metilo
Figure imgf000051_0001
A una solución del compuesto intermedio 6 (7-hidroxi-4-(4-metoxibencil)-2-metil-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazolo[4,3-b]piridina-6-carboxilato de metilo) (10,0 g, 29,1 mmol) en diclorometano (200 mL) se añadió cloruro de oxalilo (4,9 mL, 58,2 mmol) y N,N-dimetilformamida (10 gotas). La mezcla se agitó a 25 °C durante 16 horas. Luego, la mezcla se concentró para dar un residuo que se disolvió en diclorometano (200 mL). La solución resultante se lavó con agua (100 mL x 2), salmuera (100 mL), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró para dar un residuo. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de resolución instantánea (eluyendo con: éter de petróleo: acetato de etilo de 1 : 0 a 5 : 4) para dar el compuesto intermedio 7 (10,0 g, 94,9% de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) # 8,22 (s, 1H), 7,29 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,88 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 5,06 (s, 2H), 4,07 - 4,02 (m, 3H), 3,87 (s, 3H), 3,70 (s, 3H).
h) Preparación del compuesto intermedio 8
7-cloro-4-(4-metoxibencil)-2-metil-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazolo[453-b]piridina-6-carbaldehído
Figure imgf000051_0002
A una solución del compuesto intermedio 7 (7-cloro-4-(4-metoxibencil)-2-metil-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazolo[4,3-b]piridina-6- carboxilato de metilo) (7,00 g, 19,3 mmol) en tetrahidrofurano (200 mL) se añadió gota a gota hidruro de diisobutilaluminio en tolueno (38,7 ml, 1 M en tolueno, 38,7 mmol) a -78 °C. La mezcla se agitó a -78 °C durante 1 hora. La reacción se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (50 mL) a -78 °C y la temperatura se dejó aumentar hasta 25 °C. La mezcla se agitó durante 1 hora. La mezcla se añadió a 200 mL de CHCh y se filtró. La torta del filtro se lavó con 200 mL de CHCta y se filtró 3 veces. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró para dar un residuo. Se añadieron 30 mL de ferc.-butil metil éter y se agitó a 25 °C durante 30 minutos. El precipitado se filtró para dar el compuesto intermedio 8 (5,00 g, 73,2 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General C, Método 9): Rt = 0,69 min, masa calculada para C16H14ClN3O3 331,07, m/z encontrado 331,9 [M+H]+.
i) Preparación del compuesto intermedio 9:
7- cloro-6-(4-fluoro-6-morfolino-7H-benzo[d]imidazol-2-il)-4-(4-metoxibencil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000052_0001
Una solución del compuesto intermedio 8 (7-cloro-4-(4-metoxibencil)-2-metil-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazolo[4,3-b]piridina-6-carbaldehído) (400 mg, 1,21 mmol), compuesto intermedio 3 (3-fluoro-5-morfolinobenceno-1,2-diamina) (255 mg, 1,21 mmol) y tricloruro férrico (391 mg, 2,41 mmol) en 1,4-dioxano (15 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se filtró y el filtrado se extrajo 3 veces con diclorometano (300 mL en total). La capa orgánica combinada se lavó con solución saturada de bicarbonato de sodio (200 mL) y agua (300 mL), se secó sobre Na2SÜ4 anhidro y se filtró. El filtrado se evaporó en vacío para proporcionar el compuesto intermedio 9 (360 mg, 36,8 % de rendimiento, 64,5 % de pureza) en forma de sólidos pardos. LC-MS (ESI) (Procedimiento General C, Método 9): Rt = 0,77 min, masa calculada para C26H24ClFN6Ü3522,16, m/z encontrado 523,1 [M+H]+.
j) Preparación del compuesto intermedio 10
7-cloro-6-(4-fluoro-6-morfolino-7H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000052_0002
A una solución del compuesto intermedio 9 (7-cloro-6-(4-fluoro-6-morfolino-1H-benzo[a]imidazol-2-il)-4-(4-metoxibencil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona) (350 mg, 0,432 mmol) en ácido trifluoroacético (6 mL) se añadió ácido trifluorometanosulfónico (2 mL). La mezcla de reacción se agitó a 20 °C durante 1 hora. Luego, la mezcla se evaporó para eliminar la mayor parte del ácido trifluoroacético. El residuo se disolvió en diclorometano (100 mL) y la mezcla se alcalinizó con solución saturada de bicarbonato de sodio hasta pH > 7. La mezcla se separó y la capa orgánica se lavó con salmuera (50 mL), se secó sobre Na2SÜ4 anhidro y se filtró. El filtrado se evaporó en vacío para proporcionar el compuesto intermedio 10 (160 mg, bruto) en forma de sólidos pardos que se utilizaron directamente para la siguiente etapa.
k) Preparación del compuesto 1
(S)-6-(4-fluoro-6-morfolino-1H-benzo[d ]imidazol-2-il)-2-metil-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000052_0003
Una solución del compuesto intermedio 10 (7-cloro-6-(4-fluoro-6-morfolino-1H-benzo[a]imidazol-2-il)-2-metil-2H-pirazolo[4,3- b]piridin-5(4H)-ona) (150 mg, 0,372 mmol), compuesto intermedio 11 (hidrocloruro de ((S)-1 -(pirimidin-2-il)etanamina) (71,3 mg, 0,447 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (241 mg, 1,86 mmol) en etanol (5 mL) se agitó a 85 °C durante 1 hora. La mezcla se concentró a presión reducida para dar el producto bruto que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*50 10u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 28 % de B a 58 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío y luego se liofilizó para dar el compuesto, que se separó adicionalmente por cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: columna AD (250 mm *30 mm, 5 um); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: NH3-H2Ü al 0,1 % MeOH, A:B =50 : 50 a 55 mL/min, Temp. de la Columna: 38 °C, Presión de la Boquilla: 100 bar, Temp. de la Boquilla: 60 °C, Temp. del Evaporador: 20 °C; Temp. del recortador: 25 °C; Longitud de onda: 220 nm). Se recogió la fracción pura y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y la mezcla resultante se liofilizó para dar el compuesto 1 (15,5 mg, 98,9 % de pureza, 8,41 % de rendimiento) en forma de un polvo pardo.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Tr = 4,35 min, masa calculada para C24H24FN9O2489,20, m/z encontrado 490,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) 13,26 (d, J = 2,0 Hz, 0,1 H), 13,00 (d, J = 2,0 Hz, 0,9 H), 12,53 ( d, J = 7,9 Hz, 0,9 H), 12,43 (d, J = 7,9 Hz, 0,1 H), 11,05 (s, 0,1 H), 10,90 (s, 0,9 H), 8,86 (d, J = 4,9 Hz, 0,1 H), 8,81 (d, J = 4,9 Hz, 1,9 H), 7,71 (s, 0,1 H), 7,67 (s, 0,9 H), 7,41 (t, J = 4,9 Hz, 1 H), 7,04 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,75 (dd, J = 1,9, 13,8 Hz, 1H), 6,41 (quint, J = 7,1 Hz, 1H), 3,99 - 3,94 (m, 3H), 3,80 - 3,73 (m, 4H), 3,16 - 3,07 (m, 4H), 1,75 - 1,67 (m, 3H). SFC (Método 14): Tr = 2,63 min, Área Pico: 100 %.
Ejemplo 2
Preparación del compuesto 2
Figure imgf000053_0001
a) Preparación del compuesto intermedio 12
Ácido 4-amino-2-metil-5-nitrobenzoico
Figure imgf000053_0002
El compuesto intermedio 12 se sintetizó como se describe en el documento WO201199832A2.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Varian) # = 8,54 (s, 1H), 7,73 (s ancho, 2H), 6,79 (s, 1H), 2,42 (s , 3H)
b) Preparación del compuesto intermedio 13
(4-amino-2-metil-5-nitrofenil)(pirrolidin-1-il)metanona
Figure imgf000054_0001
Hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDCI, por sus siglas en inglés) (835 mg, 4,36 mmol) se añadió a una solución del compuesto intermedio 12 (ácido 4-amino-2-metil-5-nitrobenzoico) (600 mg, 95 % de pureza, 2,91 mmol), pirrolidina (207 mg, 2,91 mmol), N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (1,13 g, 8,74 mmol) y 1-hidroxibenzotriazol (HOBT) (588 mg, 4,35 mmol) en N,N-dimetilformamida anhidra (6 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente (ta) durante 8 horas. La mezcla de reacción se vertió cuidadosamente en acetato de etilo (50 mL) y agua (40 mL). Luego se separó la capa orgánica. La fase acuosa se lavó con acetato de etilo (40 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (éter de petróleo: acetato de etilo de 1 : 0 a 0:1) para dar el compuesto intermedio 13 (700 mg, 95 % de pureza, 91,8 % rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Varian) 5 = 7,77 (s, 1H), 7,47 (s ancho, 2H), 6,81 (s, 1H), 3,39 ( t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,13 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,13 (s, 3H), 1,87 - 1,69 (m, 4H)
c) Preparación del compuesto intermedio 14
(4,5-diamino-2-metilfenil)(pirrolidin-1-il)metanona
Figure imgf000054_0002
A una solución del compuesto intermedio 13 ((4-amino-2-metil-5-nitrofenil)(pirrolidin-1-il)-metanona) (500 mg, 95 % de pureza, 1,91 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL) se añadió níquel Raney (200 mg) bajo argón. La suspensión se desgasificó en vacío y se roció tres veces con argón y luego se roció tres veces con hidrógeno. La mezcla se agitó bajo hidrógeno (2,06 bar) a 25 °C durante 24 horas. La mezcla se filtró. Luego, el filtrado se utilizó en la siguiente etapa sin elaboración adicional. LC-MS (ESI) (Procedimiento General B, Método 6): Rt = 0,71 min, masa calculada para C12H17N3O 219,14, m/z encontrado 220,2 [M+H]+.
d) Preparación del compuesto intermedio 15
7-cloro-4-(4-metoxibencil)-2-metil-6-(5-metil-6-(pirrolidin-1-carbonil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)-2H-pirazolo[4,3-b]-piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000054_0003
Una varilla agitadora, compuesto intermedio 8 (7-cloro-4-(4-metoxibencil)-2-metil-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazolo[4,3-b]piridina-6-carbaldehído) (650 mg, 93,1 % de pureza, 1,82 mmol) y 1,4-dioxano anhidro (5 mL) se añadieron a un matraz de fondo redondo de 100 mL. Se añadió cloruro de hierro (III) (592 mg, 3,65 mmol) a la mezcla antes de agitar la mezcla a temperatura ambiente durante 5 minutos. Se añadió gota a gota a la mezcla el compuesto intermedio 14 ((4,5 -diamino-2-metilfenil)(pirrolidin-1 -il)-metanona) (el filtrado). Después de agitar a temperatura ambiente durante 20 minutos, la mezcla de reacción se diluyó con agua (30 mL) y se trató con bicarbonato de sodio sólido hasta pH = 9. La mezcla resultante se extrajo con diclorometano (30 mL). El extracto orgánico se lavó con salmuera (20 mL x 3), se secó sobre Na2SÜ4 anhidro, se filtró y se concentró a sequedad a presión reducida para proporcionar el producto bruto, que se purificó mediante cromatografía en columna de resolución instantánea (acetato de etilo: tetrahidrofurano de 1:0 a 1:1) para proporcionar el compuesto intermedio 15 (677 mg, 87,9 % de pureza, 61,4 % de rendimiento) en forma de sólidos pardos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General C, Método 8): Rt = 2,22 min, masa calculada para C28H27ClN6Ü3530,18, m/z encontrado 531,1 [M+H]+.
e) Preparación del compuesto intermedio 16
7-cloro-2-metil-6-(5-metil-6-(pirrolidin-1-carbonil)-1flLbenzo[d]imidazol-2-il)-2flLpirazolo[4,3-b]piridin-5(4fl)-ona
Figure imgf000055_0001
Una varilla agitadora, compuesto intermedio 15 (7-cloro-4-(4-metoxibencil)-2-metil-6-(5-metil-6-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona) (677 mg, 87,9 % de pureza, 1,12 mmol) y ácido 2,2,2-trifluoroacético (10 mL) se añadieron a un matraz de fondo redondo de 100 mL. Luego se añadió a la mezcla ácido trifluorometanosulfónico (505 mg, 3,37 mmol). El recipiente de reacción se agitó a 80 °C durante 2 horas. Se añadió ácido trifluorometanosulfónico (505 mg, 3,37 mmol) a la mezcla una vez más. Y la mezcla se agitó durante 1 hora. La mezcla se concentró a sequedad bajo presión reducida antes de diluir con agua (30 mL) y tratar con bicarbonato de sodio sólido hasta pH = 9. La mezcla resultante se extrajo con diclorometano (30 mL x 3). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SÜ4 anhidro, se filtraron y se concentraron a sequedad a presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio 16. Luego, el compuesto intermedio 16 se trituró con terc.-butil metil éter (15 mL) para producir el compuesto intermedio 16 (400 mg, 97,9 % de pureza, 85,1 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General C, Método 9): Rt = 0,53 min, masa calculada para C20H^ClN6Ü2410,13, m/z encontrado 411,0 [M+H]+.
f) Preparación del compuesto 2
(S)-2-metil-6-(5-metil-6-(pirrolidin-1-carbonil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1 -(pirimidin-2-il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3- b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000055_0002
Una varilla agitadora, compuesto intermedio 16 (7-cloro-2-metil-6-(5-metil-6-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-benzo[a]imidazol-2-il)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona) (400 mg, 97,9 % de pureza, 0,953 mmol), compuesto intermedio 11 ((S)-1 -(pirimidin-2-il)etanamina hidrógeno cloruro) (152 mg, 0,952 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (615 mg, 4,76 mmol) en diclorometano (10 mL) se añadieron a un matraz de fondo redondo de 25 mL. La mezcla resultante se agitó a 40 °C durante 12 horas. La mezcla resultante se vertió en dlclorometano (20 mL) y se lavó con agua (10 mL x 3). La capa orgánica separada se secó sobre Na2SÜ4 anhidro, se filtró y se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250 x 5010 um, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, condición de gradiente de 22 % de B a 52 %, Tiempo de Gradiente: 11,2 min, Caudal: 22 mL/min). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío y luego se liofilizó para dar un polvo amarillo. El producto se purificó adicionalmente mediante separación por cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: Chiralpak AS-H (150 mm x 4,6 mm, 5 um); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: Etanol (0,05 % DEA); Gradiente: mantener 5 % durante 0,5 minutos, luego del 5 % al 40 % de B en 3,5 minutos y mantener el 40 % de B durante 2,5 minutos, luego el 5 % de B durante 1,5 minutos; Caudal: 3 mL/min; Temp. de la Columna: 40 °C; Presión de la Boquilla: 100 bar; Temp. de la Boquilla: 60 °C; Temp. del Evaporador: 20 °C; Temp, del Recortador: 25 °C; Longitud de onda: 220 nm). La fracción se recogió y el disolvente se evaporó en vacío y luego se liofilizó para dar el compuesto 2 (200 mg, 98,8 % de pureza, 41,6 % de rendimiento) en forma de un polvo de color amarillo pálido.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 1): masa calculada. para C26H27N9O2497,20, m/z encontrado 498,1 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) 5 = 13,01 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 12,75 (d, J= 8,2 Hz, 0,5H), 12,67 (d, J= 8,2 Hz, 0,5H), 10,91 (s, 1H), 8,89 - 8,84 (m, 2H), 7,67 (s, 1H), 7,53 - 7,38 (m, 3H), 6,53 - 6,42 (m, 1H), 3,99 -3,96 (m, 3H), 3,54 - 3,47 (m, 2H), 3,14 - 3,02 (m, 2H), 2,34 - 2,29 (m, 3H), 1,94 - 1,85 (m, 2H), 1,84 - 1,77 (m, 2H), 1,75 -1,70 (m, 3H).
SFC (Método 12): Rt = 4,88 min, Área pico: 99,9 %
Ejemplo 3
Preparación del compuesto 3
Figure imgf000057_0001
a) Preparación del compuesto intermedio 17
4-amino-1-etil-7HLpirazol-3-carboxilato de metilo
Figure imgf000057_0002
El compuesto intermedio 17 se sintetizó como se describe en el documento WO201218909A1.
b) Preparación del compuesto intermedio 18
-etil-4-((4-metoxibencil)amino)-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo
Figure imgf000058_0001
En un vaso de precipitados (3 L) equipado con un agitador magnético, se preparó una solución del compuesto intermedio 17 (4-amino-1-etil-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo) (120 g, 709 mmol), ácido trifluoroacético (162 g, 1,42 mol) y 4-metoxibenzaldehído (116 g, 852 mmol) en acetato de etilo (1,2 L). Se añadió borohidruro de sodio (21,5 g, 568 mmol) a la mezcla en porciones en un baño de agua con hielo manteniendo la temperatura por debajo de 30 °C. Luego se añadió agua (1 L) a la mezcla para extinguir la reacción y la mezcla se agitó a 25 °C durante 2 horas. La mezcla se separó y la capa orgánica separada se lavó con agua (1 L x 3), salmuera (1 L), se secó sobre Na2SÜ4 y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida para dar un producto bruto que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (equivalente de gradiente: éter de petróleo: acetato de etilo de 100: 0 a 1: 1) para proporcionar el compuesto intermedio 18 (180 g, bruto) en forma de un aceite amarillo claro.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSÜ-d 6) (Varian) # 7,34 - 7,20 (m, 3H), 6,91 - 6,76 (m, 2H), 4,16 - 4,03 (m, 2H), 4,03 - 3,97 (m, 2H), 3,80 - 3,68 (m, 6H), 1,37 - 1,21 (m, 3H)
c) Preparación del compuesto intermedio 19
2-etil-7-hidroxi-4-(4-metoxibencil)-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazolo[4,3-b]-piridina-6-carboxilato de metilo
Figure imgf000058_0002
Una solución del compuesto intermedio 18 (1 -etil-4-((4-metoxibencil)amino)-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo) (90,0 g, 121 mmol) en A/,A/-dimetilformamida seca (600 mL) se añadió a un matraz de tres bocas de 2 L. Se añadió hidruro de sodio (16,2 g, dispersión al 60 % en aceite, 405 mmol) a la mezcla en un baño de hielo-agua en porciones. Después de la adición, la mezcla se agitó a 0 °C durante 15 minutos y se añadió gota a gota a la mezcla cloruro de metilmalonilo (44,6 g, 327 mmol) a 0 °C. La mezcla se agitó durante otros 15 minutos, luego se añadió metóxido de sodio (33,6 g, 622 mmol) a la mezcla en una porción y la mezcla se agitó a 110 °C durante 3 horas. La mezcla se concentró a presión reducida para dar un residuo. Luego el residuo se suspendió en 300 mL de agua y acetato de etilo (400 mL). La fase acuosa separada se acidificó con HCl (12 M) hasta un pH de 6-7. La fase acuosa se extrajo con diclorometano (400 mL x 4). Los extractos de diclorometano combinados se secaron sobre Na2SÜ4 y se filtraron. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (equivalente de gradiente: éter de petróleo: acetato de etilo de 10:0 a 1:9) para proporcionar el compuesto intermedio 19 (15,0 g, 85,9% de pureza), 11,6% de rendimiento) en forma de sólidos pegajosos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B, Método 4): Rt = 1,76 min, masa calculada para C18H19N3O5357,13, m/z encontrado 358,1 [M+H]+.
d) Preparación del compuesto intermedio 20
7-cloro-2-etil-4-(4-metoxibencil)-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazolo-[4,3-b]piridin-6-carboxilato de metilo
Figure imgf000058_0003
Una varilla agitadora, compuesto intermedio 19 (2-etil-7-hidroxi-4-(4-metoxibencil)-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazolo[4,3-b]piridina- 6-carboxilato de metilo) (25,0 g, 70,0 mmol) y diclorometano (150 mL) se añadieron a un matraz de fondo redondo de 500 mL. Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (8,9 mL, 104 mmol) a 0 °C. Luego se añadió N,N-dimetilformamida (0,26 g, 3,56 mmol) a 0 °C y la mezcla resultante se agitó a 15 °C. Después de 16 horas, la mezcla de reacción se concentró a sequedad bajo presión reducida. El residuo se suspendió en diclorometano (300 mL) y se alcalinizó con solución saturada de bicarbonato de sodio hasta pH > 7. La mezcla se separó y la capa orgánica separada se secó sobre Na2SÜ4 y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida para dar un residuo, que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (equivalente de gradiente: éter de petróleo: acetato de etilo de 1:0 a 1:2) para proporcionar el compuesto intermedio 20 (7,50 g, 25,7% de rendimiento) en forma de sólidos de color amarillo claro. LC-MS (ESI) (Procedimiento General C, Método 7): Rt = 2,93 min, masa calculada para C^H 18ClN3Ü4375,10, m/z encontrado 375,9 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSÜ-d 6 ) (Bruker) # = 8,31 (s, 1H), 7,30 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,88 (d, J= 8,8 Hz, 2H), 5,06 (s, 2H), 4,32 (c, J= 7,3 Hz, 2H), 3,89 - 3,82 (m, 3H), 3,73 - 3,70 (m, 3H), 1,44 (t, J= 7,3 Hz), 3H)
e) Preparación del compuesto intermedio 21
7-cloro-2-etil-4-(4-metoxibencil)-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazolo[453-b]piridina-6-carbaldehído
Figure imgf000059_0001
Una varilla agitadora, compuesto intermedio 20 (7-cloro-2-etil-4-(4-metoxibencil)-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazolo[4,3-b]piridina- 6-carboxilato de metilo) (7,50 g, 20,0 mmol) y diclorometano (150 mL) se añadieron a un matraz de tres bocas de 500 mL bajo nitrógeno. Luego se añadió gota a gota hidruro de diisobutilaluminio (29,9 mL, 1 M en tolueno, 29,9 mmol) a -78 °C, y la mezcla resultante se agitó a -78 °C. Después de 2 horas, la mezcla de reacción se extinguió con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (50 mL) a -78 °C. La mezcla se agitó a -78 °C durante 20 minutos antes de añadir diclorometano (100 mL). La mezcla de reacción se filtró después de que la mezcla se calentara a 25 °C. La torta del filtro se lavó con diclorometano (300 mL x 5) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SÜ4 y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para dar el producto bruto que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (equivalente de gradiente: éter de petróleo: acetato de etilo de 1:0 a 1:3) para dar el producto, que se purificó adicionalmente por HPLC prep. (Columna: Phenomenex luna C18250 *50 mm * 10 um, Fase Móvil A: agua (TFA al 0,1 %), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 120 mL/min, condición de gradiente de 20 % de B a 50 %). Las fracciones puras recogidas se neutralizaron con solución saturada de bicarbonato de sodio hasta pH > 7. Luego, la mezcla se extrajo con diclorometano (200 mL x 3).
Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SÜ4 y se filtraron. El filtrado se evaporó a sequedad, se resuspendió en agua (10 mL) y la mezcla resultante se liofilizó para dar el compuesto intermedio 21 (5,50 g, 90,0 % de pureza, 71,7 % de rendimiento) en forma de sólidos de color amarillo claro.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General C, Método 9): Tr = 0,80 min, masa calculada para C17H16ClN3Ü3345,09, m/z encontrado 346,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Varian) # = 10,28 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 7,38 - 7,30 (m, 2H), 6,91 - 6,83 (m, 2H), 5,09 (s, 2H), 4,34 (c, J = 7,3 Hz, 2H), 3,70 (s, 3H), 1,44 (t, J = 7,3 Hz, 3H)
f) Preparación del compuesto intermedio 23
7-cloro-2-etil-4-(4-metoxibencil)-6-(6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000059_0002
Una varilla agitadora, compuesto intermedio 21 (7-cloro-2-etil-4-(4-metoxibencil)-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazol [4,3-b]piridina-6-carbaldehído) (800 mg, 2,31 mmol), compuesto intermedio 22 (4-morfolinobenceno-1,2-diamina) (537 mg, 2,78 mmol) (sintetizado como se describe en Medicinal Chemistry, 2013, vol. 9, n° 5 p. 651 - 659) y 1,4-dioxano seco (10 mL) se añadieron a un frasco de vidrio de 40 mL. Luego se añadió cloruro férrico (751 mg, 4,63 mmol) a la mezcla de reacción y la mezcla se agitó a 25 °C durante 1 hora. La mezcla se ajustó a alrededor de pH = 9,0 mediante solución saturada de bicarbonato de sodio (20 mL) y se filtró. El filtrado se extrajo con diclorometano (20 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SÜ4 anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida para dar el producto que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (gradiente equivalente: diclorometano: metanol de 1:0 a 9:1) para dar el compuesto intermedio 23 (800 mg, 68,9 % de rendimiento, 45,9 % de rendimiento) en forma de un polvo negro.
g) Preparación del compuesto intermedio 24
7-cloro-2-etil-6-(6-morfolino-1flLbenzo[d]imidazol-2-il)-2flLpirazolo[4,3-b]-piridin-5(4fl)-ona
Figure imgf000060_0001
Una varilla agitadora, compuesto intermedio 23 (7-cloro-2-etil-4-(4-metoxibencil)-6-(6-morfolino-1H-benzo[a]imidazol-2-il)-2H- pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona) (800 mg, 1,06 mmol) y ácido 2,2,2-trifluoroacético (3 mL) se añadieron a un matraz de fondo redondo de 50 mL. Luego se añadió gota a gota a la mezcla ácido trifluorometanosulfónico (0,280 mL) y la mezcla se agitó a 60 °C durante 2 horas. La mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se alcalinizó con solución saturada de bicarbonato de sodio hasta pH = 9. La mezcla se extrajo con cloroformo (10 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SÜ4 anhidro, se filtraron y concentraron a presión reducida para dar el compuesto intermedio 24 (800 mg, bruto) en forma de un polvo negro que se utilizó para la etapa siguiente sin purificación adicional.
h) Preparación del compuesto 3
(S*)-2-etil-6-(6-morfolino-1flLbenzo[d ]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il )propil)-amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000060_0002
Una varilla agitadora, compuesto intermedio 24 (7-cloro-2-etil-6-(6-morfolino-1H-benzo[a]imidazol-2-il)-2H-pirazol[4,3-b]piridin-5(4H)-ona) (265 mg, 0,664 mmol), compuesto intermedio 25 (hidrocloruro de (S* )-1 -(pirimidin-2-il)propan-1 -amina) (173 mg, 0,996 mmol), yoduro de tetrabutilamonio (TBAI) (24,5 mg, 0,066 mmol), bicarbonato de sodio (167 mg, 1,99 mmol), cloroformo (6 mL) y agua (1 mL) se añadieron a un matraz de fondo redondo de 100 mL. La mezcla resultante se agitó a 60 °C durante 12 horas. Luego, la mezcla se extrajo con diclorometano (20 mL). La capa orgánica separada se lavó con agua (20 mL x 3), se secó sobre Na2SÜ4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida para dar un residuo, que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250 *50 10u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 23 % de B a 53 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. La mezcla se liofilizó a sequedad para dar el compuesto 3 (118 mg, 97,3 % de pureza, 34,7 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Tr = 4,00 min, masa calculada para C26H29N9O2499,24, m/z encontrado 500,1 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) # 12,87 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 12,64 (d, J= 7,9 Hz, 0,4H), 12,57 ( d, J= 7,9 Hz, 0,6H), 10,89 - 10,85 (m, 1H), 8,83 - 8,79 (m, 2H), 7,65 (s, 1H), 7,53 (d, J= 8,6 Hz, 0,4H), 7,43 (d, J= 8,8 Hz, 0,6H), 7,40 - 7,35 (m, 1H), 7,23 - 7,19 (m, 0,6H), 7,06 - 7,03 (m, 0,4H), 6,95 - 6,87 (m, 1H), 6,34 - 6,26 (m, 1H), 4,19 (c, J= 7,3 Hz, 2H), 3,82 - 3,73 (m, 4H), 3,14 - 3,05 (m, 4H), 2,25 - 2,09 (m, 2H), 1,30 ( t, J= 7,3 Hz, 3H), 1,09 - 0,97 (m, 3H) SFC (Método 12): Rt = 2,26 min, Área Pico: 99,0%.
Ejemplo 4
Preparación de los compuestos 4, 4A y 4B
Figure imgf000061_0001
a) Preparación del compuesto 4
(Rac)-2-etil-6-(6-morfolino-7H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(oxazol-4-il )etil )-amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000061_0002
Una varilla agitadora, compuesto intermedio 24 (7-cloro-2-etil-6-(6-morfolino-1H-benzo[a]imidazol-2-il)-2H-pirazol[4,3-b]piridin-5(4H)-ona) (800 mg, 2,01 mmol), compuesto intermedio 26 hidrocloruro de (rac)-1-(oxazol-4-il)etanamina (447 mg, 3,01 mmol), N,A/-diisopropiletilamina (2,61 g, 20,2 mmol) y N,N-dimetilacetamida (10 mL) se añadieron a un frasco de vidrio de 40 mL. La mezcla se agitó a 110 °C durante 1 hora. Luego, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con diclorometano (30 mL) y se lavó con agua (8 mL x 5). La capa orgánica separada se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para dar el producto bruto que se purificó por cromatografía en capa fina prep. (diclorometano : metanol = 10 : 1) para dar el compuesto 4 (350 mg, 95 % de pureza, 35,0 % de rendimiento) en forma de un polvo amarillo.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General C, Método 9): Rt = 0,63 min, masa calculada para C24H26N8O3474,21, m/z encontrado 475,1 [M+H]+.
b) Preparación del compuesto 4A
(S*)-2-etil-6-(6-morfolino-7H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(oxazol-4-il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000062_0001
y compuesto 4B
(R*)-2-etil-6-(6-morfolino-1H- benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(oxazol-4-il)etil)-amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000062_0002
El compuesto racémico 4 se separó mediante cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: AD (250 mm *30 mm, 10 um); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2Ü EtOH, A:B = 45:55 a 80 mL/min; Temp. de la Columna: 38 °C; Presión de la Boquilla: 100 bar; Temp. de la Boquilla: 60 °C; Temp. del evaporador: 20 °C; Temp. del recortador: 25 °C; Longitud de onda: 220 nm). Las fracciones puras se recogieron y los componentes volátiles se eliminaron en vacío. El residuo se suspendió en acetonitrilo (2 mL) y agua (10 mL). La mezcla se liofilizó a sequedad para dar el compuesto 4A (77,1 mg, 97,4 % de pureza, 21,5 % de rendimiento) en forma de un polvo amarillo y el compuesto 4B (80,1 mg, 99,1 % de pureza, 22,7 % de rendimiento) en forma de un polvo amarillo.
Compuesto 4A:
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Tr = 3,86 min, masa calculada para C24H26N8O3474,21, m/z encontrado 475,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Varian) # 12,89 (s, 0,4 H), 12,87 (s, 0,6 H), 12,40 (d, J = 8,4 Hz, 0,4 H ), 12,32 (d, J = 8,6 Hz, 0,6H), 10,93 (s ancho, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,02 - 7,99 (m, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,52 ( d, J = 8,6 Hz, 0,4 H), 7,38 (d, J = 8,6 Hz, 0,6 H), 7,20 (d, J = 2,2 Hz, 0,6 H), 7,03 (d, J = 2,0 Hz, 0,4 H), 6,93 - 6,86 (m, 1H), 6,44 - 6,32 (m, 1H), 4,38 - 4,26 (m, 2H), 3,80 - 3,72 (m, 4H), 3,12 - 3,03 (m, 4H), 1,71 - 1,66 (m , 3H), 1,48 - 1,41 (m, 3H)
SFC (Método 13): Rt = 1,77 min, Área Pico: 100%.
Compuesto 4B:
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 3,86 min, masa calculada para C24H26N8O3474,21, m/z encontrado 475,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Varian) # 12,89 (s, 0,4 H), 12,87 (s, 0,6 H), 12,40 (d, J = 8,6 Hz, 0,4 H ), 12,32 (d, J = 8,6 Hz, 0,6H), 10,93 (s ancho, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,02 - 7,99 (m, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,52 ( d, J = 8,8 Hz, 0,4 H), 7,39 (d, J = 8,8 Hz, 0,6 H), 7,20 (d, J - 2,2 Hz, 0,6 H), 7,03 (d, J - 2,0 Hz, 0,4 H), 6,93 - 6,88 (m, 1H), 6,44 - 6,33 (m, 1H), 4,33 (c, J = 7,4 Hz, 2H), 3,80 - 3,73 (m, 4H), 3,12 - 3,05 (m, 4H), 1,72 - 7,65 (m, 3H), 1,48 - 1,42 (m, 3H)
SFC (Método 13): Rt = 2,07 min, Área Pico: 100%.
Ejemplo 5
Preparación del compuesto 5
Figure imgf000063_0001
a) Preparación del compuesto intermedio 284-metil-5-morfolinobenceno-1,2-diamina
Una mezcla del compuesto Intermedio 27 (4-met¡l-5-morfol¡no-2-n¡troan¡l¡na) (1,0 g, 4,22 mmol) y Ni Raney (100 mg) en dioxano (40 mL) se ag¡tó a temperatura amb¡ente bajo la pres¡ón del globo de h¡drógeno gaseoso durante 4 horas. N¡ Raney se separó por f¡ltrac¡ón y el f¡ltrado se ut¡l¡zó d¡rectamente en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.
LC-MS (ESI) (Proced¡m¡ento General B-2, método 2): Rt = 0,49 m¡n, masa calculada para C11 H17N3O 207,1, m/z encontrado 208,2 [M+H]+.
b) Preparación del compuesto intermedio 29
7-cloro-2-etil-4-(4-metoxibencil)-6-(5-metil-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2,4-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b] piridin-5-ona
A una mezcla del compuesto ¡ntermed¡o 28 (4-met¡l-5-morfol¡nobenceno-1,2-d¡am¡na) en d¡oxano (40 mL) se añad¡ó 4-cloro-2-oxo-1,2-d¡h¡droqu¡nol¡na-3-carbaldehído (1,45 g, 4,20 mmol) en un baño de h¡elo. Se añad¡ó FeCl3 (1,36 g, 8,40 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura amb¡ente durante 15 m¡n. El pH de la mezcla se ajustó a 8 con NaHCO3 saturado. La mezcla se extrajo con CH2Cl2 (50 mL * 2). La fase orgán¡ca comb¡nada se lavó con H2O y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se f¡ltró y se concentró a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía en gel de síl¡ce (grad¡ente, CH2G 2 : EtOAc = 6 :1 a 2 :1) para dar el compuesto del título (1,59 g, 71,0 % de rend¡m¡ento) en forma de sól¡dos amar¡llos. LC-MS (ESI) (Proced¡m¡ento General B-2, método 4): Rt = 1,15 m¡n, masa calculada para C28H29GN6O3532,2, m/z encontrado 533,3 [M+H]+.
c) Preparación del compuesto intermedio 30
7-cloro-2-etil-6-(5-metil-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2,4-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b]piridin-5-ona
A una soluc¡ón del compuesto ¡ntermed¡o 29 (7-cloro-2-et¡l-4-(4-metox¡benc¡l)-6-(5-met¡l-6-morfol¡no-1 H-benzo[d]¡m¡dazol-2-¡l)-2,4-d¡h¡dro-5H-p¡razolo[4,3-b]p¡r¡d¡n-5-ona) (1,59 g, 2,99 mmol) en CF3COOH (20 mL) se añad¡ó TfOH (1,35 g, 9,00 mmol). La mezcla se ag¡tó a 85 °C durante 3 horas. Luego se concentró a pres¡ón reduc¡da. El pH del res¡duo se ajustó a 8 con NaHCO3 saturado. La mezcla resultante se extrajo con CH2G 2 (50 mL * 2). La fase orgán¡ca comb¡nada se lavó con H2O y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se f¡ltró y se concentró para dar el compuesto ¡ntermed¡o 30 (1,6 g, bruto, rend¡m¡ento >100 %) en forma de sól¡dos amar¡llos que se ut¡l¡zaron en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. LC-MS (ESI) (Proced¡m¡ento General B-2, método 4): Rt = 0,93 m¡n, masa calculada para C20H21GN6O2412,1, m/z encontrado 413,3 [M+H]+.
d) Preparación del compuesto 5
(S)-2-etil-6-(5-metil-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il)-etil)amino)-2,4-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b]piridin-5-ona
A una solución del compuesto intermedio 30 (7-cloro-2-etil-6-(5-metil-6-morfolino-1H-benzo[d]-imidazol-2-il)-2,4-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b]piridin-5-ona) (300 mg, 0,73 mmol) en CH2Cl2 (10 mL) se añadió el compuesto intermedio 11 (hidrocloruro de (S)-1-(pirimidin-2-il)etano-1-amina) (232 mg, 1,46 mmol) y DIPEA (471 mg, 3,65 mmol). La mezcla se agitó a 35 °C durante 16 horas. Luego se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente, CH2Cl2 : MeOH = 60:1 a 50:1) para dar el compuesto 5 (300 mg, rendimiento del 82,3 %, pureza del 99,4 %, ee : 95,84 %) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B-2, método 4): Rt = 1,44 min, masa calculada para C26H29N9O2499,57, m/z encontrado 500,4 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, CD3OD) 58,78-8,76 (m, 2H), 7,50 (s, 1H), 7,34-7,32 (m, 3H), 6,46-6,41 ( m, 1H), 4,23-4,19 (m, 2H), 3,86-3,84 (m, 4H), 2,94-2,92 (m, 4H), 2,42 (s, 3H), 1,85 (d, J = 6,8 Hz, 3H) , 1,39 (t, J = 7,6 Hz, 3H).
Ejemplo 6
Preparación del compuesto 6
Figure imgf000064_0001
a) Preparación del compuesto intermedio 32
2-fluoro-4-morfolino-6-nitroanilina
A una suspensión desgasificada del compuesto intermedio 31 (4-bromo-2-fluoro-6-nitroanilina) (5,0 g, 21,3 mmol), tris(dibencilidenacetona) dipaladio(0) (586 mg, 0,64 mmol), (2-bifenil)di-terc.- butilfosfina (JohnPhos ) (379 mg, 1,27 mmol) y í-BuONa (2,86 g, 29,78 mmol) en THF (50 mL) se añadió morfolina (5,55 g, 63,8 mmol). La mezcla se agitó a 60 °C durante 18 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se concentró a presión reducida para dar un residuo que se purificó por cromatografía en gel de sílice (éter de petróleo: EtOAc = 5:1) para dar el compuesto intermedio 32 (780 mg, 15,2 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento general A-2, método 2): Rt = 1,60 min, masa calculada para C10H12FN3O3 241,1, m/z encontrado 242,2 [M+H]+.
b) Preparación del compuesto intermedio 33
3-fluoro-5-morfolinobenceno-1,2-diamina
Una mezcla del compuesto intermedio 32 (2-fluoro-4-morfolino-6-nitroanilina) (780 mg, 3,23 mmol) y Ni Raney (1 g) en dioxano (15 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo la presión del globo de hidrógeno gaseoso durante 4 horas. Ni Raney se separó por filtración y el filtrado se utilizó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.
LC-MS (ESI) (Procedimiento general A-2, método 2): Rt = 1,27 min, masa calculada para C10H14FN3O 211,1, m/z encontrado 212,2 [M+H]+.
c) Preparación del compuesto intermedio 34
7-cloro-2-etil-6-(4-fluoro-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-4-(4-metoxi-bencil)-2,4-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b]piridin-5-ona
A una mezcla del compuesto intermedio 21 (7-cloro-4-(4-metoxibencil)-2-etil-5-oxo-4,5-dihidro-2H-pirazolo[4,3-b]piridina-6- carbaldehído) (1,11 g, 3,23 mmol) en dioxano (25 mL) se añadió FeCb (1,04 g, 6,46 mmol), seguido de una solución del compuesto intermedio 33 (3-fluoro-5-morfolinobenceno-1,2-diamina) en dioxano (15 mL). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos, luego se vertió en NaHCO3 saturado (50 mL) y se extrajo con CH2G 2 (100 mL * 2). La fase orgánica combinada se lavó con H2O y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente, CH2G 2 : MeOH = 100: 0 a 60:1) para dar el compuesto intermedio 35 (650 mg, 37,5 % de rendimiento) en forma de sólidos pardos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento general A-2, método 2): Rt = 1,62 min, masa calculada para C27H26CFN6O3 536,2, m/z encontrado 537,3 [M+H]+.
d) Preparación del compuesto intermedio 35
7- cloro-2-etil-6-(4-fluoro-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2,4-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b]piridin-5-ona
A una solución del compuesto intermedio 34 (7-cloro-2-etil-6-(4-fluoro-6-morfolino-1H-benzo[d]-imidazol-2-il)-4-(4-metoxibencilo)-2,4-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b]piridin-5-ona) (650 mg, 1,21 mmol) en CF3COOH (20 mL) se añadió TfOH (537 mg, 3,63 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Luego se concentró a presión reducida. El pH del residuo se ajustó a 8 con NaHCO3 saturado. La mezcla resultante se extrajo con CH2G 2 (50 mL*2). La fase orgánica combinada se lavó con H2O y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para dar el compuesto intermedio 35 en forma de sólidos amarillos (700 mg, rendimiento > 100 %) que se utilizó en la etapa siguiente sin purificación adicional.
LC-MS (ESI) (Procedimiento general A-2, método 2): Rt = 1,32 min, masa calculada para C19H18CFN6O2416,1, m/z encontrado 417,3 [M+H]+.
e) Preparación del compuesto 6
(S)-2-etil-6-(4-fluoro-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il)-etil)amino)-2,4-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b]piridin-5-ona
A una solución del compuesto intermedio 35 (7-cloro-2-etil-6-(4-fluoro-6-morfolino-1H-benzo[d]-imidazol-2-il)-2,4-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b]piridin-5-ona) (700 mg, 1,68 mmol) en CHCb (20 mL) se añadió el compuesto intermedio 11 (hidrocloruro de (S)-1-(pirimidin-2-il)etano-1-amina) (402 mg, 2,52 mmol), KHCO3 (504 mg, 5,04 mmol) y 18-corona-6 (665 mg, 2,52 mmol). La mezcla se agitó a 60 °C durante 16 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se extrajo con CH2G 2 (50 mL*2). La fase orgánica combinada se lavó con KHCO3 saturado (50 mL*3), H2O y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (CH2G 2 : MeOH = 80: 1 ) para proporcionar el compuesto 6 (316,18 mg, rendimiento del 35,7 %, pureza del 97,3 %, ee : 96,08 %) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A-2, método 2): Rt = 1,43 min, masa calculada para C25H26FN9O2503,5, m/z encontrado 504,4 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, CD3OD) 58,77 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 7,53 (s, 1H), 7,36-7,35 (m, 1H), 6,93 -6,922 (m, 1H), 6,74-6,68 (m, 1H), 6,42-6,35 (m, 1H), 4,27-4,19 (m, 2H), 3,88-3,83 (m, 4H), 3,17-3,13 (m, 4H), 1,84 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,41 (t, J = 6,8 Hz, 3H).
Los siguientes compuestos se prepararon de acuerdo con los protocolos de reacción de uno de los Ejemplos anteriores utilizando materiales de partida alternativos según fuera apropiado. (En la Tabla 1, el Ej. X indica que la preparación de este compuesto se describe en el Ejemplo X o se prepara según el Ejemplo X).
Como entenderá una persona experta en la técnica, los compuestos sintetizados utilizando los protocolos indicados pueden existir en forma de solvatos, p. ej., hidratos, y/o pueden contener disolvente residual o impurezas menores. Los compuestos aislados en forma de una sal pueden ser estequiométricos enteros, es decir, monosales o disales, o de estequiometría intermedia.
Tabla 1
Figure imgf000066_0001
Figure imgf000067_0001
Figure imgf000068_0001
Figure imgf000069_0001
Figure imgf000070_0001
Figure imgf000071_0001
Figure imgf000072_0001
Figure imgf000073_0001
Figure imgf000074_0001
Figure imgf000075_0001
Figure imgf000076_0001
Figure imgf000077_0002
Ejemplo 7
Preparación de los compuestos intermedios 39 y 41 utilizados en la síntesis de los compuestos 7 y 8 de acuerdo con el ejemplo 1.
Figure imgf000077_0001
a) Preparación del compuesto intermedio 37 (rac)-4-(3,4-dinitrofenil)-2-(trifluorometil)morfolina
Figure imgf000078_0001
La mezcla del compuesto intermedio 36 (4-fluoro-1,2-dinitrobenceno) (800 mg, 4,30 mmol), hidrocloruro de (rac)-2-(trifluorometil)morfolina (988 mg, 5,16 mmol) y diisopropiletilamina (2,18 g , 21,5 mmol) en etanol (10 mL) se agitó a 45 °C durante 16 horas. La mezcla se concentró en vacío para dar un residuo, que se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/acetato de etilo de 100/0 a 85/15). Se recogieron las fracciones deseadas y el disolvente se concentró a sequedad en vacío para dar el compuesto intermedio 37 (1,00 g, 95 % de pureza, 68,8 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos. Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Varian) 5 = 8,08 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,63 (d, J= 2,6 Hz, 1H), 7,29 - 7,19 (m, 1H), 4,44 - 4,29 (m, 1H), 4,20 - 4,02 (m, 2H), 3,99 - 3,88 (m, 1H), 3,78 - 3,65 (m, 1H), 3,19 - 3,07 (m, 2H).
b) Preparación del compuesto intermedio 38
(S*)-4-(3,4-dinitrofenil)-2-(trifluorometil)morfolina
Figure imgf000078_0002
y
preparación del compuesto intermedio 40 (R*)-4-(3,4-dinitrofenil)-2-(trifluorometil)morfolina
Figure imgf000078_0003
El compuesto intermedio 37 ((rac)-4-(3,4-dinitrofenil)-2-(trifluorometil)morfolina) se separó mediante cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: AS(250 mm *30 mm, 10 um); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2O EtOH, A:B =50:50 a 60 mL/min, Temp. de la Columna: 38 °C, Presión de la Boquilla: 100 bar, Temp. de la Boquilla: 60 °C, Temp. del Evaporador: 20 °C; Temp. del Recortador: 25 °C; Longitud de onda: 220 nm). Las fracciones puras se recogieron y los componentes volátiles se eliminaron en vacío para dar el compuesto intermedio 38 (480 mg, 99,5 % de pureza, 47,8 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos. SFC (Método 21): R t = 3,42 min, Área Pico: 100 %, y para dar el compuesto intermedio 40 que se utilizó directamente para sintetizar el compuesto intermedio 41.
c) Preparación del compuesto intermedio 39 (S*)-4-(2-(trifluorometil)morfolino)benceno-1,2-diamina
Figure imgf000078_0004
Se añadió paladio húmedo sobre carbono activado (100 mg, 10 % sobre carbono activado) a una solución del compuesto intermedio 38 ((S*)-4-(3,4-dinitrofenil)-2-( trifluorometil)morfolina) (480 mg, 1,49 mmol) en metanol (25 mL). La suspensión se desgasificó en vacío y se roció con hidrógeno varias veces y luego la mezcla se agitó bajo hidrógeno (2,7 bar) a 25 °C durante 12 horas. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de Celite y la torta del filtro se lavó con metanol (50 mL x 2). El filtrado se concentró en vacío para dar el compuesto intermedio 39 (450 mg, bruto) en forma de sólidos pardos, que se utilizaron para la etapa siguiente sin purificación adicional.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B, Método 6): Rt = 1,75 min, masa calculada para C11 H14F3N3O 261,11, m/z encontrado 262,1 [M+H]+.
d) Preparación del compuesto intermedio 41
(R*)-4-(2-(trifluorometil)morfolino)benceno-1,2-diamina
Figure imgf000079_0001
La síntesis del compuesto intermedio 41 era similar a la del compuesto intermedio 39 para dar el compuesto intermedio 41 (460 mg, bruto) (a partir del compuesto intermedio 40) en forma de sólidos pardos. LC-MS (ESI) (Procedimiento General B, Método 6): Rt = 1,75 min, masa calculada para C11 H14F3N3O 261,11, m/z encontrado 262,1 [M+H]+.
Ejemplo 8
Preparación del compuesto intermedio 44 utilizado en la síntesis del compuesto 12 de acuerdo con el ejemplo 1
Figure imgf000079_0002
a) Preparación del compuesto intermedio 43
5-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-2-nitroanilina
Figure imgf000079_0003
Una suspensión del compuesto intermedio 42 (5-fluoro-2-nitroanilina) (0,904 g, 5,79 mmol), (2R,6R)-2,6-dimetilmorfolina (1,00 g, 8,68 mmol), A¿N-diisopropiletilamina (3 mL, 18,2 mmol) y 1-butanol (10 mL) se agitó a 120 °C durante 12 horas. Enfriando a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se vertió en agua (50 mL). Luego, la mezcla se extrajo con diclorometano (50 mL x 3) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (50 mL x 3) y salmuera (50 mL x 3). La capa orgánica separada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto, que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (eluyente: éter de petróleo:acetato de etilo de 1:0 a 1:1) para proporcionar el compuesto intermedio 43 (0,950 g, 99,7 % de pureza), 65,1% de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General C, Método 9): Rt = 0,79 min, masa calculada para C12H17N3O3251,13, m/z encontrado 252,0 [M+H]+.
b) Preparación del compuesto intermedio 44
4-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)benceno-1,2-diamina
Figure imgf000080_0001
Se añadió zinc (1,11 g, 16,9 mmol) a una solución que consistía en el compuesto intermedio 43 (5-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-2-nitroanilina) (0,850 g, 3,38 mmol), cloruro de amonio (2,71 g, 50,7 mmol) en tetrahidrofurano (25 mL), etanol (25 mL) y agua (10 mL) a 20 °C. Luego, la mezcla de reacción se agitó a 90 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y la suspensión se filtró a través de una almohadilla de Celite® y la almohadilla se lavó con agua (10 mL). El filtrado se vertió en agua (100 mL) y se extrajo con acetato de etilo (100 mL x 3). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto, que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (eluyente: éter de petróleo:acetato de etilo de 1:0 a 0:1) para proporcionar el compuesto intermedio 44 (0,810 g, 87% de pureza, 94% de rendimiento) en forma de un sólido amarillo pálido.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B, Método 5): Rt = 0,32 min, masa calculada para C12H19N3O 221,15, m/z encontrado 222,0 [M+H]+.
Ejemplo 9
Preparación del compuesto intermedio 47 utilizado en la síntesis del compuesto 13 de acuerdo con el Ejemplo 1
Figure imgf000080_0002
a) Preparación del compuesto intermedio 45
4-bromo-3-fluoro-2-nitroanilina
Figure imgf000081_0001
El compuesto intermedio 45 se sintetizó a partir de 3-fluoro-2-nitroanilina como se describe en el documento WO2012/83170A1.
b) Preparación del compuesto intermedio 46
4-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)-3-fluoro-2-nitroanilina
Figure imgf000081_0002
Compuesto intermedio 45 (4-bromo-3-fluoro-2-nitroanilina) (2,00 g, 8,51 mmol), 2-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (1,97 g, 9,36 mmol), carbonato de sodio (0,902 g, 8,51 mmol), 1,4-dioxano (48 mL) y agua (12 mL) se añadieron a un matraz de fondo redondo. La mezcla se burbujeó con nitrógeno durante 5 minutos y luego se trató con [1,1'-bis-(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II) (1,24 g, 1,70 mmol). La mezcla se burbujeó con nitrógeno durante otros 5 minutos y luego se calentó a 100 °C durante 16 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto. El residuo se extrajo con diclorometano (100 mL x 3). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4(s) y se filtraron . El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto, que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (eluyente: éter de petróleo: acetato de etilo = 3:1) para proporcionar el compuesto intermedio 46 en forma de sólidos amarillos (1,60 g, 95 % de pureza, 74,98 % de rendimiento).
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) 57,30 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 6,87 (s ancho, 2H), 6,73 (dd, J = 0,9, 9,0 Hz, 1H), 5,95 (s, 1H), 4,25 - 4,12 (m, 2H), 3,76 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 2,34 (s, 2H).
c) Preparación del compuesto intermedio 47
3-fluoro-4-(tetrahidro-2H-piran-4-il)benceno-1,2-diamina
Figure imgf000081_0003
Paladio húmedo sobre carbono activado (0,5 g, 10 % sobre carbono activado) se añadió a una solución que consistía en el compuesto intermedio 46 (4-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)-3-fluoro-2-nitroanilina) (1,00 g, 4,20 mmol) y metanol (30 mL). La mezcla se burbujeó con hidrógeno durante 5 minutos y luego se agitó a 50 °C bajo hidrógeno (2,7 bar) durante 12 horas. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de Celite® y la almohadilla se lavó con metanol (10 mL). El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio 47 (0,85 g, 90 % de pureza por TLC, 86,7 % de rendimiento) en forma de un aceite pardo.
Ejemplo 10
Preparación del compuesto intermedio 50 utilizado para preparar los compuestos 15 y 16 de acuerdo con el Ejemplo 1
Figure imgf000082_0001
Compuesto intermedio 48 Compuesto intermedio 49 Compuesto intermedio 50
a) Preparación del compuesto intermedio 49
2-fluoro-6-nitro-3-(piperidin-1-il)anilina
Figure imgf000082_0002
Una solución del compuesto intermedio 48 (2,3-difluoro-6-nitroanilina) (5,00 g, 28,7 mmol), piperidina (3,67 g, 43,1 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (15 mL, 85,9 mmol) en alcohol n-butílico (30 mL) se agitó a 80 °C durante 12 horas. La mezcla resultante se vertió en acetato de etilo (15 mL) y se lavó con agua (30 mL x 3). La capa orgánica separada se secó sobre Na2SÜ4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio bruto 49 (7,060 g, bruto) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General C, Método 9): Rt = 0,91 min, masa calculada para C11 H14FN3O2 239,11, m/z encontrado 239,9 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, CDCh) (Varian) 7,85 (dd, J= 1,8, 9,7 Hz, 1H), 6,27 (dd, J= 8,8, 9,5 Hz, 1H), 6,10 ( s, 2H), 3,32 - 3,25 (m, 4H), 1,75 - 1,63 (m, 6H)
b) Preparación del compuesto intermedio 50
3-fluoro-4-(piperidin-1 -il)benceno-1,2-diamina
Figure imgf000082_0003
Una solución que consiste en el compuesto intermedio 49 (2-fluoro-6-nitro-3-(piperidin-1 -il)anilina) (1,02 g, 4,28 mmol), zinc (1,40 g, 21,4 mmol), cloruro de amonio (3,40 g, 63,6 mmol), THF (20 mL), etanol (20 mL) y agua (5 mL) se agitó a 95 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió a 25 °C y se filtró a través de una almohadilla de Celite®. El filtrado se vertió en agua (5 mL) y se extrajo con acetato de etilo (10 mL x 3). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SÜ4 anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio 50 (875 g, bruto) en forma de un sólido amarillo que se utilizó directamente para la siguiente etapa.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General C, Método 9): Tr = 0,151 min, masa calculada para C11 H16FN3 209,13, m/z encontrado 209,8
Procedimiento general A: [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCls) (Varian) 6,43 - 6,39 (m, 1H), 6,37 - 6,31 (m, 1H), 2,91 - 2,90 (m, 4H), 1,76 - 1,68 (m, 4H), 1,57 - 1,50 (m, 2H)
Ejemplo 11
Preparación del compuesto intermedio 54 utilizado en la síntesis del compuesto 17 de acuerdo con el Ejemplo 1
Figure imgf000083_0001
a) Preparación del compuesto intermedio 52
2,3,5-trifluoro-6-nitroanilina
Figure imgf000083_0002
Una mezcla que consistía en el compuesto intermedio 51 (2,3,4,6-tetrafluoronitrobenceno) (2,00 g, 10,3 mmol) y amoniaco en dioxano (51 mL) se burbujeó con nitrógeno durante 5 minutos. Luego, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla resultante se vertió en acetato de etilo (50 mL) y se lavó con agua (30 mL x 3). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SÜ4 anhidro, se filtraron y se concentraron a sequedad a presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio bruto 52, que se purificó mediante cromatografía en columna de resolución instantánea (eluyente: éter de petróleo: acetato de etilo = 8:1 a 4:1) para proporcionar el compuesto intermedio 52 (1,12 g, 53,9 % de rendimiento) en forma de un sólido amarillo.
Procedimiento general A: 1H RMN (400 MHz, CDCh) (Varian) 6,40 - 6,25 (m, 1H), 5,91 (s ancho, 2H).
b) Preparación del compuesto intermedio 53
2,5-difluoro-3-morfolino-6-nitroanilina
Figure imgf000083_0003
Una solución del compuesto intermedio 52 (2,3,5-trifluoro-6-nitroanilina) (100 mg, 0,495 mmol), morfolina (47,0 mg, 0,539 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (192 mg, 1,49 mmol) en alcohol n-butílico (1 mL) se agitó a 80 °C durante 12 horas. La mezcla resultante se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto. La mezcla resultante se vertió en acetato de etilo (20 mL) y se lavó con agua (10 mL x 3). La capa orgánica separada se secó sobre Na2SÜ4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto, que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (eluyente: éter de petróleo: acetato de etilo = 8:1 a 4:1) para proporcionar el compuesto intermedio 53 (45,0 mg, rendimiento del 31,6 %) en forma de un sólido amarillo.
Procedimiento general A: 1H RMN (400 MHz, DMSÜ- d6) (Varian) 6,52 (dd, J = 6,8, 12,3 Hz, 1H), 6,30 (s, 2H), 3,62 - 3,54 (m, 4H ), 2,85 - 2,74 (m, 4H).
c) Preparación del compuesto intermedio 54
3,6-difluoro-4-morfolinobenceno-1,2-diamina
Figure imgf000084_0001
Paladio húmedo sobre carbono activado (50 mg) se añadió a una solución que consistía en el compuesto intermedio 53 (2,5-difluoro-3-morfolino-6-nitroanilina) (45,0 mg, 0,156 mmol) y metanol (10 mL) en un matraz de fondo redondo de 50 mL. La mezcla se burbujeó con hidrógeno (1,03 bar) durante 5 minutos y luego se agitó a 45 °C durante 4 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de una almohadilla de Celite®. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio 54 (34,4 mg, 53 % de pureza, 50,9 % de rendimiento) en forma de un sólido de color púrpura.
Procedimiento general A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) 6,36 - 6,21 (m, 1H), 4,80 (s, 2H), 4,33 (s, 2H), 3,71 - 3,66 (m , 4H), 2,69 - 2,63 (m, 4H).
Ejemplo 12
Preparación del compuesto intermedio 58 utilizado para sintetizar el compuesto 25 de acuerdo con el Ejemplo 1
Figure imgf000084_0002
a) Preparación del compuesto intermedio 55
4-bencil-2,2-difluoromorfolina
Figure imgf000085_0001
El compuesto intermedio 55 se sintetizó como se describe en el documento US2016176896A1.
b) Preparación del compuesto intermedio 56
Trifluoroacetato de 2,2-difluoromorfolina
Figure imgf000085_0002
Paladio húmedo sobre carbono activado (90 mg, 10 % sobre carbono activado) se añadió a una solución del compuesto intermedio 55 (4-bencil-2,2-difluoromorfolina) (930 mg, 4,36 mmol) y metanol (10 mL) en un matraz de fondo redondo de 100 mL. La mezcla se roció con hidrógeno durante 5 minutos y luego se agitó a 45 °C bajo hidrógeno (1,03 bar) durante 16 horas. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de Celite® y la almohadilla se lavó con acetato de etilo (10 mL). El pH del filtrado se ajustó a 4 - 6 con ácido trifluoroacético y se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio 56 (1,0 g, bruto) en forma de sólidos blancos, que se utilizaron para la etapa siguiente sin purificación adicional.
c) Preparación del compuesto intermedio 57
4-(3,4-dinitrofenil)-2,2-difluoromorfolina
Figure imgf000085_0003
Una solución que consiste en 4-fluoro-1,2-dinitrobenceno (777 mg, 4,18 mmol), compuesto intermedio 56 (trifluoroacetato de 2,2-difluoromorfolina) (900 mg, bruto) y A/,A/-diisopropiletilamina (1,47 g, 11,4 mmol) en n-butanol (20 mL) se agitó a 80 °C durante 15 horas antes de enfriar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto, que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (eluyente: éter de petróleo: acetato de etilo de 10:1 a 0:1) para proporcionar el compuesto intermedio 57 (700 mg, 95 % de pureza) en forma de sólidos amarillos.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO- d6) ( Varían ) 58,12 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,60 (d, J= 2,9 Hz, 1H), 7,24 (dd , J= 2,9, 9,5 Hz, 1H), 4,20 (t, J = 5,1 Hz, 2H), 4,10 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 3,68 (t, J= 4,9 Hz, 2H)
d) Preparación del compuesto intermedio 58
4-(2,2-difluoromorfolino)benceno-1,2-diamina
Figure imgf000085_0004
Paladio húmedo sobre carbono activado (50 mg, 10 % sobre carbono activado) se añadió a una solución que consistía en el compuesto intermedio 57 (4-(3,4-dinitrofenil)-2,2-difluoromorfolina) (500 mg, 1,73 mmol) y metanol (10 mL) en un matraz de fondo redondo de 100 mL. La mezcla se roció con hidrógeno durante 5 minutos y luego se agitó a 45 °C bajo hidrógeno (1,03 bar) durante 16 horas antes de enfriar a temperatura ambiente. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de Celite® y la almohadilla se lavó con acetato de etilo (10 mL). El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio 58 (390 mg, 95 % de pureza, 93 % de rendimiento) en forma de sólidos pardos. Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) # 6,39 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,22 (d, J= 2,6 Hz, 1H), 6,04 (dd , J= 2,6, 8,4 Hz, 1H), 4,41 (s, 2H), 4,12 - 4,03 (m, 4H), 3,18 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 2,98 (t, J = 4,5 Hz, 2H) .
Ejemplo 13
Preparación del compuesto intermedio 61 utilizado para sintetizar el compuesto 26 de acuerdo con el Ejemplo 1
Figure imgf000086_0001
a) Preparación del compuesto intermedio 60
2-nitro-5-(4-(2,2,2-trifluoroetil)piperazin-1-il)anilina
Figure imgf000086_0002
Una solución de hidrocloruro de 1-(2,2,2-trifluoroetil)piperazina (1,00 g, 4,15 mmol), compuesto intermedio 59 (5-fluoro-2-nitroanilina) (0,432 g, 2,77 mmol) y N,A/-diisopropiletilamina (2,4 mL, 14 mmol) en n-butanol (5 mL) se agitó a 80 °C durante 18 horas. La mezcla resultante se vertió en acetato de etilo (20 mL). La capa orgánica separada se lavó con agua (10 mL x 3), se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio 60 (836,5 mg, bruto) en forma de un sólido amarillo, que se utilizó directamente para la siguiente etapa.
b) Preparación del compuesto intermedio 61
4-(4-(2,2,2-trifluoroetil)piperazin-1 -il)benceno-1,2-diamina
Figure imgf000087_0001
Una solución que consiste en el compuesto intermedio 60 (2-nitro-5-(4-(2,2,2-trifluoroetil)piperazin-1 -il)-anilina) (1,00 g, 3,29 mmol), zinc (1,08 g, 16,4 mmol), cloruro de amonio (2,64 g, 49,3 mmol), THF (20 mL), etanol (20 mL) y agua (10 mL) se agitó a 95 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 25 °C y se filtró. El filtrado se vertió en agua (50 mL) y se extrajo con acetato de etilo (70 mL x 3). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SÜ4 anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (eluyente: acetato de etilo: éter de petróleo de 0:1 a 1:1) para dar el compuesto intermedio 61 (390 mg, 86,3 % de pureza, 37,3 % de rendimiento) en forma de sólidos pardos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B, Método 6): Rt = 1,55 min, masa calculada para C12H17F3 N4 274,14, m/z encontrado 275,1 [M+H]+.
Ejemplo 14
Preparación del compuesto intermedio 67 utilizado para preparar el compuesto 27 de acuerdo con el Ejemplo 1
Figure imgf000087_0002
a) Preparación del compuesto intermedio 63
2-fluoro-6-nitro-3-(piperidin-1 -il) anilina
Figure imgf000087_0003
Una solución del compuesto intermedio 62 (2,3-difluoro-6-nitroanilina) (10,0 g, 57,4 mmol), piperidina (7,34 g, 86,2 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (7,42 g, 57,4 mmol) en n-butanol (400 mL) se agitó a 80 °C durante 18 horas. La mezcla resultante se concentró a sequedad bajo presión reducida para dar un producto bruto que se disolvió en acetato de etilo (800 mL). La capa orgánica se lavó con agua (400 mL x 3), se secó sobre Na2SÜ4 anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio 63 (10,02 g, 96,3 % de pureza, 70,2 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSÜ-d 6 ) (Varian) 7,74 (dd, J= 1,3, 9,7 Hz, 1H), 7,09 (s ancho, 2H), 6,38 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 3,26 - 3,24 (m, 4H), 1,60 - 1,58 (m, 6H)
b) Preparación del compuesto intermedio 64
(2-fluoro-6-nitro-3-(piperidin-1 -il)fenil)carbamato de terc.-butilo
Figure imgf000088_0001
Una solución del compuesto intermedio 63 (2-fluoro-6-nitro-3-(piperidin-1-il)anilina) (2,00 g, 8,36 mmol), dicarbonato de diterc.-butilo ((Boc)2Ü) (3,65 g, 16,7 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (DMAP) (204 mg, 1,67 mmol) en acetonitrilo (50 mL) se agitó a 80 °C durante 2 horas. La reacción se vertió en diclorometano (100 mL). La capa orgánica se lavó con agua (300 mL), se secó con Na2SÜ4 anhidro y se filtró. El filtrado se evaporó para proporcionar el producto bruto que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (eluyente: acetato de etilo: éter de petróleo de 0:1 a 1:3) para proporcionar el compuesto intermedio 64 (2,2 g, 57,8 % de rendimiento, 96,5 % de pureza) en forma de sólidos amarillos. Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Varian) 8,02 - 7,95 (m, 1H), 7,16 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 3,26 - 3,24 (m, 4H) ), 1,62 - 1,60 (m , 6H), 1,33 (s, 18H)
c) Preparación del compuesto intermedio 65
(2-fluoro-6-nitro-3-(2-oxopiperidin-1 -il)fenil)carbamato de terc.-butilo
Figure imgf000088_0002
Bajo aire, a una mezcla de óxido de rutenio (IV) (115 mg, 0,865 mmol) en agua (30 mL) a 23 °C se añadió peryodato de sodio (3,70 g, 17,3 mmol). Después de agitar durante 3 minutos a 23 °C, se añadieron acetato de etilo (30 mL) y compuesto intermedio 64 (2-fluoro-6-nitro-3-(piperidin-1-il) fenil)carbamato de terc.-butilo) (1,90 g, 4,32 mmol). La mezcla se agitó durante 2 horas a 23 °C. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite® y el filtrado se extrajo con acetato de etilo (100 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (200 mL), se secaron sobre Na2SÜ4 y se filtraron. El filtrado se concentró para proporcionar el compuesto intermedio 65 (1,7 g, 86,7 % de rendimiento) en forma de un sólido pardo.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Varian) 8,16 - 8,03 (m, 1H), 7,80 - 7,65 (m, 1H), 3,71 - 3,56 (m, 2H), 2,47 - 2,41 (m, 2H), 1,90 - 1,89 (m, 4H), 1,47 - 1,26 (m, 18H)
d) Preparación del intermedio 66
1-(3-amino-2-fluoro-4-nitrofenil)piperidin-2-ona
Figure imgf000088_0003
A una solución del compuesto intermedio 65 (2-fluoro-6-nitro-3-(2-oxopiperidin-1-il)fenil)carbamato de terc.-butilo) (1,70 g, 3,75 mmol) en diclorometano (10 mL) se añadió lentamente ácido trifluoroacético (5 ml) a 20 °C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. La mezcla resultante se concentró a sequedad bajo presión reducida para dar un producto bruto que se suspendió en acetato de etilo (500 mL) y agua (200 mL), y el pH se ajustó a alrededor de 8 añadiendo solución saturada de bicarbonato de sodio. La capa orgánica separada se secó sobre Na2SÜ4 anhidro, se filtró y se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio 66 (1,05 g, 84,5% de pureza, 93,5 de rendimiento) en forma de un sólido amarillo.
Procedimiento General A: 1H FMN (400 MHz, DMSÜ-d 6 ) (Varian) 7,92 - 7,81 (m, 1H), 7,43 - 7,29 (m, 2H), 6,64 (dd, J = 7,1,9,3 Hz, 1H), 3,55 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 2,41 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 1,94 - 1,77 (m, 4H).
e) Preparación del compuesto intermedio 67
1-(3,4-diamino-2-fluorofenil)piperidin-2-ona
Figure imgf000089_0001
Una solución del compuesto intermedio 66 (1-(3-amino-2-fluoro-4-nitrofenil)piperidin-2-ona) (1,05 g, 4,15 mmol) y paladio húmedo sobre carbono activado (100 mg, 10 % sobre carbono activado) en metanol (50 mL) se agitó a 35 °C bajo hidrógeno (1,03 bar) durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 25 °C y se filtró. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio 67 (900 mg, 75,5 % de pureza, 73,4 % de rendimiento) en forma de sólidos pardos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B, Método 6): Rt = 0,69 min, masa calculada para C11 H14FN3O 223,11, m/z encontrado 224,1 [M+H]+.
Ejemplo 15
Preparación del compuesto intermedio 70 utilizado para sintetizar el compuesto 28 de acuerdo con el Ejemplo 1
Figure imgf000089_0002
a) Preparación del compuesto intermedio 68
3-fluoro-2-metil-6-nitroanilina
Figure imgf000089_0003
El compuesto intermedio 68 se sintetizó como se describe en el documento WÜ2007115947A1.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) 7,98 (dd, J = 9,6 Hz, 1H), 7,40 (s ancho, 2H), 6,54 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 2,09 - 2,07 (m, 3H)
b) Preparación del compuesto intermedio 69
2-metil-3-morfolino-6-nitroanilina
Figure imgf000090_0001
A una solución del compuesto intermedio 68 (3-fluoro-2-metil-6-nitroanilina) (1,50 g, 8,82 mmol) y carbonato de potasio (2,44 g, 17,6 mmol) en dimetilsulfóxido (80 mL) se añadió morfolina (1,16 mL, 13,2 mmol) y la mezcla se agitó a 100 °C durante 15 horas. La mezcla se vertió en agua (200 mL). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (150 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SÜ4 y se filtraron. El filtrado se evaporó para proporcionar un producto bruto que se purificó mediante cromatografía en columna de resolución instantánea (eluyente: acetato de etilo: éter de petróleo = 0:1 a 1:1) para dar el compuesto intermedio 69 (1,33 g, 97,7 % de pureza, 62,1 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B, Método 6): Rt = 2,13 min, masa calculada para C11 H15N3O3237,11, m/z encontrado 238,1 [M+H]+.
c) Preparación del compuesto intermedio 70
3-metil-4-morfolinobenceno-1,2-diamina
Figure imgf000090_0002
Una solución que consiste en el compuesto intermedio 69 (2-metil-3-morfolino-6-nitroanilina) (1,00 g, 4,22 mmol), zinc (1,38 g, 21,1 mmol), cloruro de amonio (3,38 g, 63,2 mmol), THF (8 mL), etanol (8 mL) y agua (4 mL) se agitó a 95 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. El filtrado se vertió en agua (50 mL) y se extrajo con acetato de etilo (100 mL x 3). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SÜ4 anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el compuesto intermedio 70 (870 mg, 96,7 % de pureza, 96,3 % de rendimiento) en forma de un sólido pardo. LC-MS (ESI) (Procedimiento General B, Método 6): Rt = 1,34 min, masa calculada para C11 H17N3O 207,14, m/z encontrado 208,2 [m H]+.
Método de purificación, LC MS, SFC y RMN para compuestos preparados de acuerdo con los procedimientos indicados en la Tabla 1
Compuesto 7
2-metil-7-(((S )-1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-6-(6-((R*)-2-(trifluorometil)-morfolino)-1HLbenzo[d]imidazol-2-il)-2HL pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000090_0003
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró en vacío para dar un residuo, que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*50 10 u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 42 % de B a 72 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío para dar el compuesto 7 (104 mg, 98,6 % de pureza, 24,6 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos. LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 4,72 min, masa calculada para C25H24F3N9O2539,20, m/z encontrado 540,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) ( Bruker): # = 12,95 - 12,90 (m, 1H), 12,72 - 12,62 (m, 1H), 10,88 (s ancho, 1H ), 8,88 - 8,82 (m, 2H), 7,68 - 7,64 (m, 1H), 7,56 (d, J = 8,5 Hz, 0,4H), 7,49 (d, J= 8,5 Hz, 0,6H), 7,44 - 7,39 ( m, 1H), 7,33 - 7,29 (m, 0,6H), 7,20 - 7,16 (m, 0,4H), 7,00 - 6,95 (m, 1H), 6,53 - 6,42 (m, 1H), 4,45 - 4,33 (m, 1H ), 4,15 -4,07 (m, 1H), 4,02 - 3,92 (m, 3H), 3,90 - 3,78 (m, 1H), 3,72 - 3,62 (m, 1H), 3,55 - 3,47 (m, 1H), 2,89 - 2,71 (m, 2H), 1,79 -1,69 (m, 3H).
SFC (Método 13): Rt = 1,32 min, Área Pico: 97,6 %.
Compuesto 8
2-metil-7-(((S*)-1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-6-(6-((S*)-2-(trifluorometil)-morfolino)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000091_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró en vacío para dar un residuo, que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*50 10 u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 42 % de B a 72 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío para dar el compuesto 8 (32,0 mg, 99,1 % de pureza, 8,31 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos. LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 4,77 min, masa calculada para C25H24F3N9O2539,20, m/z encontrado 540,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Bruker) # = 12,96 - 12,89 (m, 1H), 12,71 - 12,62 (m, 1H), 10,87 (s ancho, 1H) , 8,89 - 8,81 (m, 2H), 7,69 - 7,64 (m, 1H), 7,56 (d, J= 8,8 Hz, 0,4H), 7,49 (d, J= 8,5 Hz, 0,6H), 7,45 - 7,39 (m , 1H), 7,33 - 7,29 (m, 0,6H), 7,20 - 7,16 (m, 0,4H), 7,01 - 6,94 (m, 1H), 6,53 - 6,42 (m, 1H), 4,46 - 4,33 (m, 1H) , 4,16 - 4,07 (m, 1H), 4,01 - 3,92 (m, 3H), 3,89 - 3,79 (m, 1H), 3,71 - 3,62 (m, 1H), 3,55 - 3,46 (m, 1H), 2,88 - 2,72 ( m, 2H), 1,79 - 1,70 (m, 3H).
SFC (Método 10): Rt = 1,02 min, Área Pico: 98,7 %.
Compuesto 9
(S*)-6-(5-fluoro-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2H-pirazol[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000092_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró en vacío para dar un residuo, que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*50 10 u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 30 % de B a 60 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío para dar el compuesto 9 (16,9 mg, 94,0 % de pureza, 8,71 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos. LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 1): Rt = 4,49 min, masa calculada para C24H24FN9O2489,20, m/z encontrado 490,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) # = 12,97 (s ancho, 1H), 12,60 - 12,50 (m, 1H), 10,90 -10,83 (m, 1H) ), 8,89 - 8,78 (m, 2H), 7,63 (d, J= 4,6 Hz, 1H), 7,48 - 7,30 (m, 2,5H), 7,18 (d, J= 7,7 Hz, 0,5H), 6,48 - 6,36 ( m, 1H), 3,93 (d, J= 6,4 Hz, 3H), 3,78 - 3,71 (m, 4H), 3,01 - 2,92 (m, 4H), 1,74 - 1,63 (m, 3H).
SFC (Método 14): Rt = 2,73 min, Área Pico: 98,2 %.
Compuesto 10
(S*)-2-metil-6-(6-morfolino-5-(trifluorometil)-1flLbenzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(oxazol-4-il)etil)amino)-2flLpirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000092_0002
Una vez completada la reacción, la mezcla se purificó por HPLC prep. (Columna: P Agela Durashell C18150*255u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 55 % de B a 85 %). Las fracciones puras recogidas se evaporaron en vacío para eliminar la mayor parte del disolvente y luego se liofilizaron a sequedad. El residuo se separó adicionalmente mediante cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: Columna: AD (250 mm *30 mm, 5 um); Fase Móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2O EtOH, A:B =60: 40 a 60 mL/min; Temp. de la Columna: 38 °C; Presión de la Boquilla: 100 bar; Temp. de la Boquilla: 60 °C; Temp. del Evaporador: 20 °C; Temp. del Recortador: 25 °C; Longitud de onda: 220 nm). La fracción pura se recogió y el disolvente se evaporó en vacío a sequedad. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y las mezclas resultantes se liofilizaron a sequedad para dar el compuesto 10 (61,8 mg, 100 % de pureza, 5,30 % de rendimiento) en forma de sólidos de color amarillo claro. LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 5,67 min, masa calculada para C24H23F3N8O3528,18, m/z encontrado 529,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) # = 13,31 (s, 1H), 12,28 (d, J = 8,6 Hz, 0,5H), 12,20 (d, J = 8,6 Hz, 0,5H), 11,02 (s, 1H), 8,38 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,09 - 8,02 (m, 1,5H), 7,91 (s, 0,5H), 7,80 (s, 0,5H) ), 7,74 (d, J= 1,8 Hz, 1H), 7,72 (s, 0,5H), 6,44 (qd, J= 6,7, 13,8 Hz, 1H), 4,06 (s, 3H), 3,79 - 3,65 (m, 4H ), 2,97 - 2,79 (m, 4H), 1,70 (t, J = 6,6 Hz, 3H).
SFC (Método 18): Rt = 5,07 min, Área Pico: 100,0%.
Compuesto 11
(fi*)-2-metil-6-(6-morfolino-5-(trifluorometil)-1flLbenzo[d]imidazol-2-il)-7-((1 -(oxazol-4-il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H )-ona
Figure imgf000093_0001
La mezcla se purificó mediante HPLC prep. (Columna: P Agela Durashell C18 150*255 u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 55 % de B a 85 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío para eliminar la mayor parte del disolvente y luego se liofilizó a sequedad. El residuo se separó más mediante cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: Columna: AD (250 mm*30 mm, 5 um); Fase Móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2Ü EtOH, A:B =60:40 a 60 mL/min; Temp. de la Columna: 38 °C; Presión de la Boquilla: 100 bar; Temp. de la Boquilla: 60 °C; Temperatura del Evaporador: 20 °C; Temp. del Recortador: 25 °C; Longitud de onda: 220 nm). La fracción pura se recogió y el disolvente se evaporó en vacío a sequedad. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y las mezclas resultantes se liofilizaron a sequedad para dar el compuesto 11 (57,6 mg, 99,5 % de pureza, 4,91 % de rendimiento) en forma de sólidos de color amarillo claro. LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 5,66 min, masa calculada para C24H23F3N8O3528,18, m/z encontrado 529,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) # = 13,31 (s, 1H), 12,29 (d, J = 8,4 Hz, 0,5H), 12,20 (d, J = 8,6 Hz, 0,5H), 11,02 (s, 1H), 8,39 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,08 - 8,03 (m, 1,5H), 7,91 (s, 0,5H), 7,80 (s, 0,5H) ), 7,74 (d, J= 1,8 Hz, 1H), 7,72 (s, 0,5H), 6,50 - 6,38 (m, 1H), 4,07 (s, 3H), 3,77 - 3,66 (m, 4H), 2,96 - 2,81 (m, 4H), 1,76 - 1,63 (m, 3H). SFC (Método 18): Tr = 5,63 min, Área Pico: 97,6 %.
Compuesto 12
6-(6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-1 HLbenzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-(((S*)-1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2HL pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000093_0002
Una vez completada la reacción, la mezcla resultante se concentró a sequedad bajo presión reducida para dar un residuo, que se purificó mediante HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*5010 u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 22 % de B a 52 %). Las fracciones puras se recogieron y evaporaron a sequedad. Luego, el residuo se resuspendió en agua (20 mL) y se liofilizó a sequedad para dar el producto en forma de sólidos rojos. El compuesto se purificó adicionalmente mediante cromatografía de fluidos supercríticos (condiciones de separación: AD (250 mm*30 mm, 10 um)); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1% NH3-H2O IPA, A:B = 45:55 a 80 mL/min). Las fracciones se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y las mezclas resultantes se liofilizaron a sequedad para dar el compuesto 12 (6,5 mg, 99,1 % de pureza, 7,08 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 4,17 min, masa calculada para C26H29N9O2499,24, m/z encontrado 500,1 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Bruker) # 12,87 (s, 0,5 H), 12,85 (s, 0,5 H), 12,69 (d, J = 8,3 Hz, 0,5 H ), 12,64 (d, J = 8,3 Hz, 0,5H), 10,87 (s ancho, 0,5H), 10,87 (s, 0,5H), 8,89 - 8,80 (m, 2H), 7,65 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 8,8 Hz, 0,5H), 7,45 (d, J = 8,5 Hz, 0,5H), 7,41 (t, J = 4,8 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 2,0 Hz, 0,5H), 7,06 (s, 0,5H), 6,89 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,52 - 6,40 (m, 1H), 4,15 - 4,04 (m, 2H), 3,98 - 3,90 (m, 3H), 3,20 - 3,06 (m, 2H), 2,82 (dd, J = 5,8, 11,8 Hz, 2H), 1,77 - 1,69 (m, 3H), 1,27 - 1,23 (m, 6H).
SFC (Método 10): Rt = 1,05 min, Área Pico: 99,5%.
Compuesto 13
(S)-6-(7-fluoro-6-(tetrahidro-2flLpiran-4-il)-1flLbenzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2flL pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000094_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla resultante se concentró a sequedad bajo presión reducida para dar un residuo, que se purificó mediante HPLC prep. (Columna: Gemini 150*255 um, Fase Móvil A: agua (NH4 HCO310 mM), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 30 mL/min, condición de gradiente de 45 % de B a 70 %). Las fracciones puras se recogieron y los componentes volátiles se eliminaron en vacío. El residuo se resuspendió en agua (20 mL) y la mezcla resultante se liofilizó a sequedad para dar el compuesto 13 (20,5 mg, 98,9 % de pureza, 18,6 % de rendimiento) en forma de sólidos de color amarillo pálido.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 1): Rt = 5,05 min, masa calculada para C25H25FN8O2488,21, m/z encontrado 489,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6) (Varian) # 13,39 (s, 0,1 H), 13,11 (s, 0,9 H), 12,68 (d, J = 7,9 Hz, 0,9 H ), 12,43 (d, J = 8,8 Hz, 0,1 H), 11,07 (s, 0,1H), 10,94 (s, 0,9H), 8,87 (d, J = 4,9 Hz, 0,3H), 8,83 (d, J = 4,9 Hz, 1,7 H), 7,72 (s, 0,1 H), 7,68 (s, 0,9 H), 7,49 - 7,40 (m, 2 H), 7,15 (d, J = 6,6 Hz, 0,1 H), 7,11 - 7,04 (m , 0,9H), 6,51 - 6,37 (m, 1H), 4,02 - 3,95 (m, 5H), 3,50 (t, J = 10,8 Hz, 2H), 3,21 (t, J = 12,0 Hz, 1H), 1,90 - 1,77 (m, 2H), 1,76 - 1,64 (m, 5H).
SFC (Método 13): Rt = 1,19 min, Área Pico: 100%.
Compuesto 14
(S*)-6-(7-fluoro-6-morfolino-7H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2flLpirazol[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000094_0002
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró en vacío para dar un residuo, que se purificó por HPLC prep. (Columna: Xtimate C18150*25 mm*5 um, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 25 mL/min, condición de gradiente de 27 % de B a 57 %). Las fracciones puras se recogieron y los componentes volátiles se eliminaron en vacío. El residuo se resuspendió en agua (20 mL) y la mezcla resultante se liofilizó a sequedad para dar el compuesto 14 (20,0 mg, 98,6 % de pureza, 16,1 % de rendimiento) en forma de sólidos de color amarillo pálido.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 1): Rt = 4,51 min, masa calculada para C24H24FN9O2489,20, m/z encontrado 490,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6) (Varian) # 13,32 (s, 0,2 H), 13,05 (s, 0,8 H), 12,68 (d, J= 7,9 Hz, 0,8 H ), 12,41 (d, J= 8,2 Hz, 0,2H), 11,06 (s ancho, 0,2H), 10,92 (s, 0,8H), 8,86 (d, J = 4,9 Hz, 0,5H), 8,82 (d , J = 4,9 Hz, 1,5H), 7,72 (s, 0,2H), 7,67 (s, 0,8H), 7,46 - 7,36 (m, 2H), 7,00 - 6,89 (m, 1H), 6,51 - 6,37 (m, 1H), 4,01 - 3,93 (m, 3H), 3,78 (t, J= 4,5 Hz, 4H), 3,09 - 2,95 (m, 4H), 1,75 - 1,68 (m, 3H).
SFC (Método 13): Rt = 1,15 min, Área Pico: 100%.
Compuesto 15
(S*)-6-(7-fluoro-6-(piperidin-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-((1 -(pirimidin-2-il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000095_0001
y compuesto 16
(fi*)-6-(7-fluoro-6-(piperidin-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-((1-( pirimidin-2-il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000095_0002
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró en vacío para dar un residuo, que se purificó por HPLC prep.
(Columna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 um, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 22 % de B a 52 %). Las fracciones puras se recogieron y los componentes volátiles se eliminaron en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y la mezcla resultante se liofilizó a sequedad para dar el producto racémico. El producto racémico se separó por cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación:
C2 (250 mm 30 mm, 10 um); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2O MeOH, A : B = 60 : 40 a 55 mL/min; Temp. de la columna: 38 °C; Presión de la Boquilla: 100 bar; Temp. de la Boquilla: 60 °C; Temp. del Evaporador: 20 °C; Temp. del Recortador: 25 °C; Longitud de onda: 220 nm). Las fracciones se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y las mezclas resultantes se liofilizaron para dar el compuesto 15 (10,0 mg, 100 % de pureza, 1,18 % de rendimiento) en forma de un sólido amarillo y el compuesto 16 (9,3 mg, 95,4 % de pureza, 1,04 % de rendimiento) en forma de un sólido amarillo.
Compuesto 15
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 3,79 min, masa calculada para C25H26FN9O 487,22, m/z encontrado 488,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Varian) 13,25 (s ancho, 0,2 H), 13,00 (s ancho, 0,8 H), 12,66 (d, J = 7,9 Hz, 0,8 H), 12,40 (d, J = 7,7 Hz, 0,2 H), 11,05 (s ancho, 0,2 H), 10,92 (s ancho, 0,8 H), 8,84 (d, J = 4,9 Hz , 0,4H), 8,80 (d, J = 4,9 Hz, 1,6H), 7,70 (s, 0,2H), 7,65 (s, 0,8H), 7,41 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,97 - 6,87 (m, 1H), 6,47 - 6,35 (m, 1H), 3,99 - 3,89 (m, 3H), 3,02 - 2,87 (m, 4H), 1,78 - 1,59 (m, 7H), 1,58 - 1,45 (m, 2H).
SFC (Método 21): Rt = 8,17 min, pico: 100 %.
Compuesto 16
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 3,78 min, masa calculada para C25H26FN9O 487,22, m/z encontrado 488,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Varian) 13,34 - 13,26 (s ancho, 0,2 H), 13,01 (s ancho, 0,8 H), 12,66 (d, J = 7,9 Hz, 0,8H), 12,39 (d, J = 8,2 Hz, 0,2H), 10,93 (s ancho, 1H), 8,84 (d, J = 4,9 Hz, 0,4H), 8,80 (d, J = 4,9 Hz, 1,6 H), 7,70 (s, 0,2 H), 7,65 (s, 0,8 H), 7,41 (t, J = 4,9 Hz, 1 H), 7,34 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 6,96 - 6,88 (m, 1H), 6,45 - 6,36 (m, 1H), 3,97 - 3,92 (m, 3H), 3,00 - 2,90 (m, 4H), 1,73 - 1,63 (m, 7H), 1,56 - 1,47 (m, 2H) ).
SFC (Método 21): Rt = 10,4 min, pico: 99,5 %.
Compuesto 17
(S*)-6-(457-difluoro-6-morfolino-7H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]pridina-5(4H)-ona
Figure imgf000096_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (20 mL). La capa orgánica separada se lavó con agua (10 mL x 3), se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró a sequedad bajo presión reducida. El residuo se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*5010 u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 46 % de B a 76 %). Las fracciones puras se recogieron y los componentes volátiles se eliminaron en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y la mezcla resultante se liofilizó a sequedad para dar el compuesto 17 (5,0 mg, 98,3 % de pureza, 10,3 % de rendimiento) en forma de un sólido púrpura.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 1): Rt = 4,92 min, masa calculada para C24H23F2N9O2507,19, m/z encontrado 508,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Varian) 13,72 (s, 1H), 11,76 (s, 1H), 11,10 (s, 1H), 8,86 - 8,71 (m, 2H) ), 7,73 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,89 - 6,41 (m, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,77 (s, 4H), 3,32 - 2,92 (m, 4H), 1,72 ( d, J = 6,8 Hz, 3H).
SFC (Método 16): Rt = 4,87 min, pico: 98,9 %.
Compuesto 18
(S)-2-metil-6-(6-(4-metilpiperazin-1-il)-1H -benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-feniletil)amino)-2H-pirazol[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000096_0002
Una vez completada la reacción, la mezcla se filtró y el filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida. El residuo se extrajo con diclorometano (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 (sólido), se filtraron y el filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para dar un residuo, que se purificó mediante HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*50 10 u, Fase Móvil A: agua (0,05 % de hidróxido amónico v/v), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 48 % de B a 78 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y se liofilizó a sequedad para proporcionar el compuesto 18 (1,8 mg, 98,6 % de pureza, 0,98 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos. LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 4,35 min, masa calculada para C27H30N8O 482,25, m/z encontrado 483,1 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) = 12,88 (s ancho, 0,4H), 12,86 (s ancho, 0,6H), 12,63 (d, J= 9,3 Hz, 0,4H), 12,54 (d, J= 8,6 Hz, 0,6H), 10,87 (s ancho, 1H), 7,67 - 7,64 (m, 1H), 7,51 (d, J= 8,8 Hz, 0,4H), 7,48 (d, J= 8,8 Hz, 0,6H), 7,47 - 7,45 (m, 1,6H), 7,43 (s, 0,4H), 7,34 (dt, J = 4,0, 7,6 Hz, 2H), 7,24 - 7,18 (m, 1,6H), 7,10 (s, 0,4H), 6,95 - 6,88 (m, 1H), 6,45 - 6,34 (m, 1H), 4,01 (s, 3H), 3,17 - 3,09 (m, 4H) , 2,60 - 2,53 (m, 4H), 2,31 - 2,24 (m, 3H), 1,72 -1,64 (m, 3H).
SFC (Método 10): Rt = 2,71 min, área pico: 100%.
Compuesto 19
(Rac)-2-metil-6-(6-morfolino-5-(trifluorometil)-1HLbenzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2HL pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000097_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró en vacío para dar un residuo, que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*50 10 u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 40 % de B a 70 %). Las fracciones puras se recogieron y los componentes volátiles se eliminaron en vacío. El residuo se suspendió en agua (15 mL) y se liofilizó para dar el compuesto 19 (10,0 mg, 5,90 % de rendimiento, 98,1 % de pureza) en forma de sólidos de color amarillo pálido.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 5,66 min, masa calculada para C25H24F3N9O2539,20, m/z encontrado 540,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Bruker) # 13,30 (s, 0,5 H), 13,28 (s, 0,5 H), 12,65 (d, J = 8,0 Hz, 0,5 H ), 12,53 (d, J = 8,3 Hz, 0,5H), 10,96 (s ancho, 0,5H), 10,96 (s ancho, 0,5H), 8,89 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,85 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,05 (s, 0,5H), 7,92 (s, 0,5H), 7,83 (s, 0,5H), 7,74 (s, 0,5H), 7,69 (s, 1H), 7,47 - 7,39 (m, 1H), 6,53 - 6,44 (m, 1H), 4,00 - 3,94 (m, 3H), 3,80 - 3,66 (m, 4H), 2,97 - 2,90 (m, 2H), 2,89 - 2,83 (m , 2H), 1,74 (dd, J = 3,5, 6,8 Hz, 3H).
SFC (Método 16): Rt = 1,99 min, área pico: 50,8 %; Rt= 2,15 min, área pico: 49,2 %.
Compuesto 20
(S*)-2-metil-6-(6-morfolino-5-(trifluorometil)-1HLbenzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2HL pirazolo[4,3- b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000097_0002
Compuesto 21
(fl*)-2-metil-6-(6-morfolino-5-(trifluorometil)-1flLbenzo[d]imidazol-2-il)-7-((1 -(pirimidin-2-il)etil)amino)-2HL pirazolo[4,3-b]piridin-5(4fl)-ona
Figure imgf000098_0001
El compuesto 19 se separó mediante cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: AD (250 mm*30 mm, 10 um); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2Ü EtOH, A:B = 55:45 a 80 mL/min; Temp. de la Columna: 38 °C; Presión de la Boquilla: 100 bar; Temp. de la Boquilla: 60 °C; Temp. del Evaporador: 20 °C; Temp. del Recortador: 25 °C; Longitud de onda: 220 nm). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y las mezclas resultantes se liofilizaron a sequedad para dar el compuesto 20 (7,9 mg, 99,2 % de pureza, 4,71 % de rendimiento) en forma de sólidos de color amarillo pálido y el compuesto 21 (4,5 mg, 99,6 % de pureza, 2,69% de rendimiento) en forma de sólidos de color amarillo pálido.
Compuesto 20
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 5,53 min, masa calculada para C25H24F3N9O2539,20, m/z encontrado 540,0 [M+H]+.
Procedimiento general A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6 ) (Varian) # 13,30 (s ancho, 0,5 H), 13,28 (s, 0,5 H), 12,65 (d, J = 8,2 Hz) , 0,5H), 12,53 (d, J = 8,4 Hz, 0,5H), 10,97 (s ancho, 1H), 8,89 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,85 (d, J = 4,9 Hz, 1H ), 8,05 (s, 0,5H), 7,92 (s, 0,5H), 7,83 (s, 0,5H), 7,74 (s, 0,5H), 7,69 (s, 1H), 7,49 - 7,37 (m, 1H), 6,49 (quint, J = 7,1 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,81 - 3,62 (m, 4H), 3,03 - 2,77 (m, 4H), 1,80 - 1,68 (m, 3H).
SFC (Método 16): Rt = 5,34 min, área pico: 100%.
Compuesto 21
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 5,50 min, masa calculada para C25H24F3N9O2539,20, m/z encontrado 540,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) # 13,31 (s ancho, 0,5H), 13,29 (s ancho, 0,5H), 12,65 (d, J = 8,2 Hz, 0,5H), 12,52 (d, J = 8,4 Hz, 0,5H), 10,97 (s ancho, 1H), 8,89 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,85 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,05 (s, 0,5H), 7,92 (s, 0,5H), 7,83 (s, 0,5H), 7,74 (s, 0,5H), 7,69 (s, 1H), 7,48 - 7,39 (m, 1H), 6,49 (quint, J = 7,1 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,86 - 3,60 (m, 4H), 3,02 - 2,77 (m, 4H), 1,80 - 1,67 (m, 3H).
SFC (Método 16): Rt = 5,82 min, área pico: 99,8%.
Compuesto 22
(S*)-2-metil-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-6-(6-(tetrahidro-2HLpiran-4-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2HLpirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000098_0002
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró en vacío para dar un residuo, que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini 150*25 mm*10 um, Fase Móvil A: agua (0,05 % de hidróxido amónico v/v), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 30 % de B a 60 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío para dar el compuesto 22 (32,9 mg, 96,3 % de pureza, 9,57 % de rendimiento) en forma de sólidos blancos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 4,22 min, masa calculada para C25H26N8O2470,22, m/z encontrado 471,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) # 12,97-12,92 (m, 1H), 12,79 - 12,71 (m, 1H), 10,89 (d, J= 5,50 Hz, 1H), 8,86 (t, J= 5,20 Hz, 2H), 7,67 (s, 1H), 7,59 - 7,50 (m, 1,5H), 7,45 - 7,40 (m, 1,5H), 7,07 (d, J= 8,20 Hz, 1H), 6,52 - 6,43 (m, 1H), 4,01 - 3,94 (m, 5H), 3,49 - 3,41 (m, 2H), 2,93 - 2,81 (m, 1H), 1,80 - 1,69 (m, 7H)
SFC (Método 10): Rt = 1,38 min, área pico: 95,8%.
Compuesto 23
(S*)-2-metil-7-((2-metil-1-(pirimidin-2-il)propil)amino)-6-(6-(4-metilpiperazin-1-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000099_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se extrajo con diclorometano (20 mL). La capa orgánica separada se lavó con agua (10 mL x 5), se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida para dar el producto bruto que se purificó por cromatografía prep. en capa fina (diclorometano : metanol = 10 : 1). Luego, el producto se purificó adicionalmente mediante HPLC prep. (Columna: Gemini 150*255 u, Fase Móvil A: agua (0,05 % hidróxido amónico v/v), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 25 % de B a 55 %). Las fracciones puras se recogieron y los componentes volátiles se eliminaron en vacío. El residuo se resuspendió en acetonitrilo (2 mL) y agua (10 mL). La mezcla se liofilizó a sequedad para dar el compuesto 23 (10,1 mg, 97,6 % de pureza, 4,64 % de rendimiento) en forma de un polvo amarillo.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 1): Rt = 4,21 min, masa calculada para C26H31N11O 513,27, m/z encontrado 514,1 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6) (Varian) # 13,03 (s, 0,3 H), 12,98 (s, 0,7 H), 12,57 (d, J = 9,0 Hz, 0,3 H ), 12,42 (d, J = 9,0 Hz, 0,7H), 10,89 (s ancho, 1H), 8,80 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 8,55 - 8,40 (m, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,37 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 6,99 (s, 0,7H), 6,78 (s, 0,3H), 6,47 - 6,40 (m, 1H), 3,92 - 3,89 (m, 3H), 3,44 - 3,38 (m, 4H), 2,65 - 2,57 (m, 1H), 2,48 - 2,42 (m, 4H), 2,23 (s, 3H), 1,08 - 1,00 (m, 6H)
SFC (Método 12): Rt = 2,11 min, Área Pico: 100%.
Compuesto 24
6-(6-((c/s)-2,6-dimetilmorfolino)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-(((S)-1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000099_0002
Una vez completada la reacción, la mezcla se extrajo con diclorometano (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (30 mL x 3) y salmuera (30 mL), se secaron sobre Na2SÜ4, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar el producto bruto que se purificó mediante HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*50 10 u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 20 % de B a 50 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. Luego, el residuo se liofilizó a sequedad para dar el compuesto deseado en forma de sólidos amarillos. El producto se purificó adicionalmente mediante cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: AD (250 mm*30 mm, 10 um); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2Ü IPA, A:B = 55:45 a 50 mL/min; Temp. de la Columna: 38 °C; Presión de la Boquilla: 100 bar; Temp. de la Boquilla: 60 °C; Temp. del Evaporador: 20 °C; Temp. del Recortador: 25 °C; longitud de onda: 220 nm) para dar el compuesto 24 (3,20 mg, 98,0 % de pureza, 3,05 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 3,93 min, masa calculada para C26H29N9O2499,24, m/z encontrado 500,1 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) 512,87 (s ancho, 0,4H), 12,85 (s ancho, 0,6H), 12,68 (d, J = 8,4 Hz, 0,4H), 12,64 (d, J= 8,2 Hz, 0,6H), 10,87 (s ancho, 1H), 8,84 (dd, J= 5,0, 6,3 Hz, 2H), 7,65 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 7,51 (d, J= 8,6 Hz, 0,4H), 7,45 (d, J= 8,8 Hz, 0,6H), 7,43 - 7,38 (m, 1H), 7,20 (d, J = 2,0 Hz, 0,6H), 7,06 (s, 0,4H), 6,92 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,54 - 6,41 (m, 1H), 3,95 (d, J= 7,3 Hz, 3H), 3,84 - 3,68 ( m, 2H), 3,61 - 3,45 (m, 2H), 2,36 - 2,21 (m, 2H), 1,79 - 1,66 (m, 3H), 1,17 (d, J = 6,2 Hz, 6H)
SFC (Método 10): Rt = 1,02 min, Área Pico: 100%.
Compuesto 25
(S)-6-(6-(252-difluoromorfolino)-1HLbenzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-((1-(pirimidin-2-il)etil) amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000100_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se extrajo con diclorometano (10 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 mL), se secaron sobre Na2SÜ4 anhidro, se filtraron y se concentraron a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto, que se purificó mediante HPLC prep. (Columna: Kromasil 150 x 25 mm x 10 pm, Fase Móvil A: agua (0,05 % de hidróxido amónico), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 32 % de B a 62 %). Las fracciones puras se recogieron y los componentes volátiles se eliminaron en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y la mezcla resultante se liofilizó para dar el compuesto 25 (5,00 mg, 95,1 % de pureza, 4,7 % de rendimiento) en forma de un polvo blanco.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 4,49 min, masa calculada para C24H23F2N9O2507,19 m/z, encontrado 508,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Bruker) 512,94 - 12,93 (m, 1H), 12,70 (d, J= 8,4, 0,5 H), 12,64 (d, J= 8,4, 0,5 H), 10,89 (s, 1H), 8,86 (d, J= 4,5 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 8,5 Hz, 0,5H), 7,50 (d, J = 8,5 Hz, 0,5H), 7,42 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 7,28 (d, J= 2,0 Hz, 0,5H), 7,16 (d, J= 1,2 Hz, 0,5H) , 7,00 - 6,93 (m, 1H), 6,55 - 6,41 (m, 1H), 4,25 - 4,17 (m, 2H), 3,96 (d, J= 4,0 Hz, 3H), 3,60 - 3,47 (m, 2H), 3,32 - 3,27 (m, 2H), 1,73 (t, J= 6,8 Hz, 3H).
SFC (Método 19): Rt = 5,06 min, Área Pico: 99,1%.
Compuesto 26
(S*)-2-metil-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-6-(6-(4-(2,2,2-trifluoroetil)piperazin-1-il)-1HLbenzo[d]imidazol-2-il)-2HL pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000101_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto que se purificó por HPLC prep. (Columna: Xtimate C18 150*25 mm*5 um, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 27 % de B a 37 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se suspendió en agua (50 mL) y se liofilizó a sequedad para proporcionar el compuesto bruto. El compuesto bruto se separó por cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: OJ (250 mm*30 mm, 10 um); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2O MeOH, A:B =65:35 a 50 mL/min; Temp. de la Columna: 38 °C; Presión de la Boquilla: 100 bar; Temp. de la Boquilla: 60 °C; Temp. del Evaporador: 20 °C; Temp. del Recortador: 25 °C; Longitud de onda: 220 nm). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (50 mL) y las mezclas resultantes se liofilizaron a sequedad para dar el compuesto 26 (1,5 mg, 99,85 % de pureza, 1,684 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 4,10 min, masa calculada para C26H27F3N10O 552,23 m/z encontrado 553,1 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6) (Varian) 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 12,85 (s ancho, 1H), 12,73 (d, J=7,9 Hz, 0,4H), 12,64 (d, J=8,2 Hz, 0,6H), 10,86 (s ancho, 1H), 8,85 (d, J=3,1 Hz, 1H), 8,84 (d, J=3,1 Hz, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,50 (d, J=8,6 Hz, 0,4H), 7,44 (d, J=9,3 Hz, 0,6H), 7,42 - 7,37 (m, 1H), 7,21 - 7,17 (m, 0,6H), 7,09 - 7,05 (m, 0,4H), 6,93 - 6,86 (m, 1H), 6,51 - 6,41 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,26 - 3,21 (m, 2H), 3,16 - 3,09 (m, 4H), 2,85 - 2,77 (m, 4H), 1,72 (t, J=6,2 Hz, 3H)
SFC (Método 12): Rt = 2,05 min, Área Pico: 100%.
Compuesto 27
(S)-6-(7-fluoro-6-(2-oxopiperidin-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3- b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000101_0002
Una vez completada la reacción, la mezcla se extrajo con EtOAc (200 mL). La capa orgánica separada se lavó con agua (100 mL), se secó sobre Na2SO4 y se concentró bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini 150*25 mm*10 um, Fase Móvil A: agua (0,05 % de hidróxido amónico v/v), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 24 % de B a 54 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se liofilizó a sequedad para proporcionar el compuesto 27 (19,3 mg, 99,1 % de pureza, 7,91 % de rendimiento) en forma de sólidos blancos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 1): Rt = 4,25 min, masa calculada para C25H24FN9O2501,20, m/z encontrado 502,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) 13,22 (s ancho, 1H), 12,65 - 12,59 (m, 1H), 8,84 - 8,78 (m, 2H), 7,69 (s, 1H), 7,52 - 7,46 (m, 1H), 7,43 (t, J= 4,9 Hz, 1H), 7,07 - 6,98 (m, 1H), 6,45 (quint, J = 7,1 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,66 - 3,53 (m, 2H), 2,45 - 2,37 (m, 2H), 1,96 - 1,83 (m, 4H), 1,70 (d, J= 6,8 Hz, 3H)
SFC (Método 13): Rt = 0,75 min, Área Pico: 100%.
Compuesto 28
(S*)-2-metil-6-(7-metil-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000102_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró en vacío para dar un residuo, que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*50 10 u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 30 % de B a 60 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (50 mL) y las mezclas resultantes se liofilizaron a sequedad, que se separó por cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: AD (250 mm*30 mm, 5 um); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2O EtOH, A:B = 50:50 a 50 mL/min, Temp. de la Columna: 38 °C, Presión de la Boquilla: 100 bar, Temp. de la Boquilla: 60 °C, Temp. del Evaporador: 20 °C, Temp. del Recortador: 25 °C, Longitud de onda: 220 nm). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (50 mL) y la mezcla resultante se liofilizó a sequedad para dar el compuesto 28 (26,2 mg, 97,7 % de pureza, 10,5 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 1): Rt = 4,71 min, masa calculada para C25H27N9O2485,23, m/z encontrado 486,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-a6) (Varian) 13,04 - 12,90 (m, 1H), 12,87 (s ancho, 1H), 10,92 (s, 1H), 8,86 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,48 - 7,44 (m, 1H), 7,44 - 7,40 (m, 1H), 7,03 - 6,93 (m, 1H), 6,51 (t, J = 6,7 Hz, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,84 - 3,72 (m, 4H), 2,96 - 2,81 (m, 4H), 2,71 - 2,58 (m, 3H), 1,70 (d, J = 6,8 Hz, 3H)
SFC (Método 13): Rt = 2,47 min, Área Pico: 100%.
Compuesto 29
(S*)-6-(4-fluoro-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((2-metoxi-1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000102_0002
y
Compuesto 30
(R*)-6-(4-fluoro-6-morfolino- 7H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((2-metoxi-1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000102_0003
Una vez completada la reacción, la mezcla se extrajo con diclorometano (100 mL). La capa orgánica separada se lavó con agua (50 mL x 3), se secó sobre Na2SÜ4, se filtró y se concentró bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto que se purificó mediante HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*5010 u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 30 % de B a 60 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se liofilizó a sequedad para dar el producto racémico, que se separó por cromatografía de fluidos supercríticos (condiciones de separación: AD (250 mm*30 mm, 5 um); Fase móvil: A: CÜ2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2Ü IPA, A : B =60 : 40 a 50 mL/min, Temp. de la Columna: 38 °C, Presión de la Boquilla: 100 bar, Temp. de la Boquilla: 60 °C, Temp. del Evaporador: 20 °C, Temp. del Recortador: 25 °C, Longitud de onda: 220 nm). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (50 mL) y las mezclas resultantes se liofilizaron a sequedad para dar el compuesto 29 (26,3 mg, 96,4 % de pureza, 12,8 % de rendimiento) en forma de sólidos blancos y el compuesto 30 (21,9 mg, 100 % de pureza), 11,1% de rendimiento) en forma de sólidos blancos.
Compuesto 29
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 4,07 min, masa calculada para C25H26FN9O3519,21, m/z encontrado 520,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) 13,24 - 13,21 (m, 0,1 H), 13,01 - 12,95 (m, 0,9 H), 12,52 - 12,46 (m, 0,9 H) ), 12,46 - 12,42 (m, 0,1 H), 11,06 (s, 0,1 H), 10,91 (s, 0,9H), 8,83 (d, J = 4,9 Hz, 0,2H), 8,77 (d, J = 4,9 Hz, 1,8 H), 7,69 (s, 0,1 H), 7,64 (s, 0,9 H), 7,43 - 7,41 (m, 0,1 H), 7,40 - 7,36 (m, 0,9 H), 7,06 - 7,02 (m, 0,9 H), 6,89 - 6,87 (m, 0,1H), 6,87 - 6,82 (m, 0,1 H), 6,78 - 6,71 (m, 0,9H), 6,64 - 6,59 (m, 0,1H), 6,56 - 6,49 (m, 0,9H), 4,16 - 4,09 (m, 1H), 4,03 -3,96 (m, 1H), 3,92 (s, 0,3H), 3,89 (s, 2,7H), 3,80 - 3,72 (m, 4H), 3,33 - 3,30 (m, 3H ), 3,15 - 3,06 (m, 4H)
SFC (Método 20): Rt = 7,83 min, Área Pico: 100%.
Compuesto 30
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 4,07 min, masa calculada para C25H26FN9O3519,21, m/z encontrado 520,0 [M+H]+.
Procedimiento general A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) 13,24 - 13,22 (m, 0,1 H), 13,02 - 12,95 (m, 0,9 H), 12,52 - 12,47 (m, 0,9 H) ), 12,46 - 12,43 (m, 0,1 H), 11,06 (s, 0,1 H), 10,91 (s, 0,9 H), 8,83 (d, J = 4,9 Hz, 0,2 H), 8,77 (d, J = 4,9 Hz , 1,8 H), 7,69 (s, 0,1 H), 7,64 (s, 0,9 H), 7,43 - 7,40 (m, 0,1 H), 7,40 - 7,35 (m, 0,9 H), 7,07 - 7,02 (m, 0,9 H), 6,89 - 6,88 (m, 0,1 H), 6,87 - 6,82 (m, 0,1H), 6,78 - 6,71 (m, 0,9H), 6,64 - 6,58 (m, 0,1 H), 6,55 - 6,49 (m, 0,9H), 4,16 - 4,10 (m, 1H), 4,03 - 3,96 (m, 1H), 3,92 (s, 0,3H), 3,89 (s, 2,7H), 3,80 - 3,71 (m, 4H), 3,33 - 3,31 (m, 3H ), 3,15 - 3,06 (m, 4H)
SFC (Método 20): Rt = 11,76 min, Área Pico: 100 %.
Compuesto 31
(S*)-2-metil-6-(6-(4-metilpiperazin-1-il)-1HLbenzo[d]imidazol-2-il)-7-((1 -(3-(trifluorometil)piridin-2-il)etil)amino)-2HL pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona 0,3 formiato
Figure imgf000103_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró en vacío para dar un residuo, que se extrajo con diclorometano (10 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se filtraron. El filtrado se concentró para proporcionar el producto bruto que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*50 10 u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 2,5 % de B a 16 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (30 mL) y las mezclas resultantes se liofilizaron a sequedad para dar el compuesto 31 (2,2 mg, 97,6 % de pureza, 4,07 % de rendimiento). LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 4,49 min, masa calculada para C27H28F3N9O 551,24, m/z encontrado 552,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) 12,86 - 12,82 (m, 0,4H), 12,78 - 12,76 (m, 0,6H), 12,76 - 12,73 (m, 1H), 10,88 (s ancho, 0,4H), 10,87 (s ancho, 0,6H), 9,13 - 9,07 (m, 1H), 8,37 (s ancho, 0,3H), 8,21 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 7,70 (s, 0,6H), 7,69 (s, 0,4H), 7,65 - 7,58 (m, 1H), 7,47 (d, J = 8,8 Hz, 0,4H), 7,44 (d, J = 8,8 Hz, 0,6 H), 7,17 (d, J = 2,0 Hz, 0,6H), 7,05 (d, J= 1,0 Hz, 0,4H), 6,95 - 6,85 (m, 2H), 4,06 - 3,99 (m, 3H), 3,15 - 3,07 (m, 4H), 2,57 - 2,52 (m, 4H), 2,28 - 2,20 (m, 3H), 1,69 - 1,61 (m, 3H)
SFC (Método 17): R t = 2,92 min, Área Pico: 100%.
Compuesto 32
(R*)-2-metil-6-(6-(4-metilpiperazin-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(3-(trifluorometil)piridina-2-il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona 0,2 formiato
Figure imgf000104_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró para eliminar la mayor parte del disolvente, que se extrajo con diclorometano (10 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SÜ4 y se filtraron. El filtrado se concentró para proporcionar el producto bruto que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18 250*50 10 u, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 2,5 % de B a 16 %). El producto se suspendió en agua (30 mL) y se liofilizó a sequedad para proporcionar el compuesto 32 (4,2 mg, 97,4 % de pureza, 7,82 % de rendimiento).
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 4,35 min, masa calculada para C27H28F3N9O 551,24, m/z encontrado 552,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSÜ-d6) (Varian) 12,87 - 12,73 (m, 2H), 10,89 (s ancho, 0,4H), 10,88 (s, 0,6H), 9,14 - 9,08 (m, 1H), 8,22 (d ancho, J = 8,2 Hz, 1H), 8,14 (s, 0,2 H), 7,71 (s, 0,5H), 7,70 (s, 0,5H), 7,65 - 7,58 (m, 1H), 7,50 (d, J= 8,6 Hz, 0,4H), 7,46 (d, J= 8,8 Hz, 0,6H), 7,20 (d, J = 1,0 Hz, 0,6H), 7,09 (d, J= 1,0 Hz, 0,4H), 6,95 - 6,87 (m, 2H), 4,06 - 3,99 (m, J= 3,5 Hz, 3H), 3,24 - 3,18 (m, 3H), 2,95 - 2,69 (m, 4H), 2,46 - 2,37 (m, 4H), 1,70 - 1,62 (m, 3H) SFC (Método 17): Rt = 3,98 min, Área Pico: 98,3%.
Compuesto 33
(S )-2-metil-6-(6-(piperidin-1 -il)-1 H-benzo[d ]imidazol-2-il)-7-((1 -(piridin-2-il)etil)-amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000104_0002
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró en vacío para dar un residuo, que se extrajo con diclorometano:metanol (20 mL, v/v = 10:1). La capa orgánica se separó y se recogió en vacío. El producto bruto se purificó mediante columna de resolución instantánea (diclorometano: metanol de 100:0 a 90:10) para dar el producto en forma de sólidos amarillos que se purificaron adicionalmente mediante HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini 150 mm*25 mm, 10 pm, Fase Móvil A: agua (0,05 % de hidróxido amónico), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 25 mL/min, condición de gradiente de 15 % de B a 45 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío y luego se liofilizó para dar el compuesto 33 (3,5 mg, 95,1 % de pureza, 5,93 % de rendimiento) en forma de un polvo blanco.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 3,62 min, masa calculada para C26H28N8Ü 468,24, m/z encontrado 469,1 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) 12,86 (s, 0,4 H), 12,82 (s, 0,6 H), 12,64 (d, J = 8,8 Hz, 0,4 H), 12,56 (d, J = 8,6 Hz, 0,6H), 10,86 (s ancho, 1H), 8,66 - 8,56 (m, 1H), 8,41 (s ancho, 0,2H), 7,81 - 7,72 (m, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,48 (dd, J = 3,4, 8,3 Hz, 1,4H), 7,41 (d, J = 8,8 Hz, 0,6H), 7,27 (dd, J = 4,7, 7,2 Hz, 1H), 7,19 (d , J = 2,0 Hz, 0,6H), 7,06 (d, J = 2,2 Hz, 0,4H), 6,95 - 6,84 (m, 1H), 6,49 - 6,37 (m, 1H), 4,00 (d, J = 2,2 Hz, 3H), 3,08 (c, J = 5,1 Hz, 4H), 1,75 -1,59 (m, 7H), 1,54 (d, J = 3,5 Hz, 2H).
SFC (Método 10): Rt = 1,69 min, Área Pico: 100%.
Compuesto 34
(S*)-2-metil-6-(6-(piperidin-1-il)-1HLbenzo[d ]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il)-etil)amino)-2flLpirazolo[4,3-b]piridin-5(4 H)-ona
Figure imgf000105_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se extrajo con diclorometano:metanol (10:1,20 mL). La capa orgánica separada se evaporó a sequedad. El producto bruto se purificó mediante columna de resolución instantánea (diclorometano : metanol de 100 : 0 a 90 : 10) en forma de sólidos amarillos, que luego se separaron mediante cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: OD (250 mm x 30 mm, 5 um)); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2O EtOH, A : B = 55 :45 a 50 mL/min; Temp. de la Columna: 38 °C; Presión de la Boquilla: 100 bar; Temp. de la Boquilla: 60 °C; Temp. del Evaporador: 20 °C; Temp. del Recortador: 25 °C; Longitud de onda: 220 nm). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y las mezclas resultantes se liofilizaron a sequedad para dar el compuesto 34 (2,6 mg, 97,5 % de pureza, 14,9 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos y el compuesto 35 (2,3 mg, 97,7 % de pureza, 13,2% de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
Compuesto 34
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 3,74 min, masa calculada para C25H27N9O 469,2, m/z encontrado 470,1 [M+H]+
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6) (Varian) 12,83 (s, 0,4 H), 12,80 (s, 0,6 H), 12,73 (d ancho, J = 8,2 Hz, 0,4 H ), 12,66 (d ancho, J = 8,2 Hz, 0,6H), 10,90 - 10,81 (m, 1H), 8,84 (dd, J = 2,4, 4,9 Hz, 2H), 7,66 (s, 1H), 7,48 (d, J = 8,6 Hz, 0,4H), 7,45 - 7,36 (m, 1,6H), 7,19 (d, J = 1,8 Hz, 0,6H), 7,06 (s, 0,4H), 6,93 - 6,84 (m, 1H) , 6,54 - 6,39 (m, 1H), 3,96 (d, J = 3,7 Hz, 3H), 3,14 - 3,04 (m, 4H), 1,78 - 1,62 (m, 7H), 1,54 (d ancho, J = 5,1 Hz, 2H)
SFC (Método 17): Rt = 5,19 min, Área Pico: 99,2%.
Compuesto 35
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 3,76 min, masa calculada para C25H27N9O 469,23, m/z encontrado 470,1 [M+H]+
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Bruker) 12,83 (s, 0,4 H), 12,80 (s, 0,6 H), 12,73 (d ancho, J = 8,2 Hz, 0,4H), 12,66 (d ancho, J = 7,9 Hz, 0,6H), 10,91 - 10,82 (m, 1H), 8,84 (dd, J = 2,4, 4,9 Hz, 2H), 7,66 (s, 1H), 7,48 (d, J = 8,6 Hz, 0,4H), 7,45 - 7,37 (m, 1,6H), 7,19 (d, J = 2,0 Hz, 0,6H), 7,06 (s, 0,4H), 6,93 - 6,84 (m, 1H), 6,52 - 6,39 (m, 1H), 3,96 (d, J = 3,7 Hz, 3H), 3,16 - 3,01 (m, 4H), 1,75 - 1,63 (m, 7H), 1,54 (d ancho, J = 5,3 Hz, 2H)
SFC (Método 17): Rt = 6,64 min, Área Pico: 96,8 %.
Compuesto 36
(S*)-2-metil-7-((1-(oxazol-4-il)etil)amino)-6-(6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)oxi)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000106_0001
y
Compuesto 37
(R*)-2-metil-7-((1-(oxazol-4-il)etil)amino)-6-(6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)oxi)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000106_0002
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró en vacío para dar un residuo, que se purificó mediante cromatografía de resolución instantánea en columna (diclorometano:metanol de 100:0 a 90:10) para dar el producto, que se purificó adicionalmente mediante HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*50 10 u, Fase Móvil A: agua (0,05 % de hidróxido amónico v/v), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 48 % de B a 78 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y se liofilizó a sequedad para proporcionar el compuesto 36 (2,1 mg, 98,5 % de pureza, 2,32 % de rendimiento) en forma de sólidos blancos y el compuesto 37 (1,0 mg, 96,0 % de pureza, 1,08 % de rendimiento) en forma de sólidos blancos.
Compuesto 36
LC-MS (ESI) (Procedimiento General C, Método 8): Rt = 3,20 min, masa calculada para C24H25N7O5475,20, m/z encontrado 476,1 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) (Bruker) 8,20 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,47 (d, J=8,8 Hz, 0,6H), 7,41 (d, J=8,8 Hz, 0,4H), 7,20 (d, J=2,0 Hz, 0,4H), 7,15 (d, J=2,0 Hz, 0,6H), 6,86 (dt, J=2,3, 8,0 Hz, 1H), 6,61 - 6,44 (m, 1H), 4,56 (td, J=3,9, 8,0 Hz, 1H), 4,07 (s, 3H), 4,02 - 3,95 (m, 2H), 3,66 - 3,51 (m, 2H), 2,12 - 1,99 (m, 2H), 1,80 - 1,76 (m, 3H), 1,76 - 1,70 (m, 2H).
SFC (Método 13): Rt = 1,66 min, área pico: 100%.
Compuesto 37
LC-MS (ESI) (Procedimiento general C, Método 8): Rt = 3,17 min, masa calculada para C24H25N7O4475,20, m/z encontrado 476,1 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, METANOL-d 4) (Bruker) 8,20 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,47 (d , J=8,8 Hz, 0,6H), 7,41 (d, J=8,8 Hz, 0,4H), 7,20 (d, J=2,0 Hz, 0,4H), 7,15 (d, J=2,0 Hz, 0,6H), 6,86 (dt, J=2,3, 8,0 Hz, 1H), 6,61 - 6,44 (m, 1H), 4,56 (td, J=3,9, 8,0 Hz, 1H), 4,07 (s, 3H), 4,02 - 3,95 (m, 2H), 3,66 - 3,51 (m, 2H), 2,12 - 1,99 (m, 2H), 1,80 - 1,76 (m, 3H), 1,76 - 1,70 (m, 2H).
SFC (Método 13): Rt = 2,55 min, área pico: 99,4%.
Compuesto 38
(S)-2-metil-6-(6-morfolino- 7H-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-7-((1 -(pirimidin-2-il)-etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-(4H)-ona 0,8 formiato
Figure imgf000107_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se extrajo con diclorometano (20 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 mL x 3), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto, que se purificó por cromatografía en columna de resolución instantánea (diclorometano:tetrahidrofurano de 1:0 a 2:3) para proporcionar el producto que se trituró con ferc.-butil metil éter (10 mL) para dar el producto bruto. El producto bruto se purificó adicionalmente mediante HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250 x 50 10 um, Fase Móvil A: agua (0,225 % FA), Fase Móvil B: acetonitrilo, condición de gradiente de 8 % de B a 38 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío y luego se liofilizó para dar el compuesto 38 (213 mg, 97,7 % de pureza, 44,6 % de rendimiento) en forma de un polvo amarillo.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 1): Rt = 3,87 min, masa calculada para C23H24N10O2 472,21, m/z encontrado 473,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) 5 = 13,09 - 12,98 (m, 1H), 12,74 (d, J = 8,2 Hz, 0,3H), 12,60 (d, J = 7,9 Hz, 0,7H), 11,01 - 10,92 (m, 1H), 8,92 - 8,83 (m, 2H), 8,57 (s, 0,3H), 8,54 (s, 0,7H), 8,20 (s ancho, 0,8H), 7,70 (s, 1H), 7,46 - 7,39 (m, 1H), 7,00 (s, 0,7H), 6,91 (s, 0,3H), 6,58 - 6,36 (m, 1H), 4,02 - 3,94 (m , 3H), 3,82 - 3,69 (m, 4H), 3,45 - 3,30 (m, 4H), 1,78 - 1,69 (m, 3H)
SFC (Método 14): Rt = 3,46 min, Área pico: 97,3 %
Compuesto 39
(S*)-2-metil-6-(6-morfolino-7H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il)-propil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000107_0002
Compuesto 40
(fi*)-2-metil-6-(6-morfolino-7H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il)-propil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000108_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró a sequedad bajo presión reducida, que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*50 mm*10 um, Fase Móvil A: agua (0,05 % de hidróxido amónico), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 30 % de B a 60 %). Las fracciones puras se recogieron y los componentes volátiles se eliminaron en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y la mezcla resultante se liofilizó a sequedad para dar el producto en forma de sólidos pardos. El producto se separó por cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: AD (250 mm x 30 mm, 10 pm); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2Ü EtOH, A:B =55: 45 a 50 mL/min; Temp. de la Columna: 38 °C; Presión de la Boquilla: 100 bar; Temp. de la boquilla: 60 °C; Temp. del Evaporador: 20 °C; Temp. del recortador: 25 °C; Longitud de onda: 220 nm). Las fracciones puras se recogieron y los componentes volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y luego se liofilizó a sequedad para dar el compuesto 39 (43,1 mg, 99,8 % de pureza, 17,0 % de rendimiento) en forma de sólidos pardos y el compuesto 40 (17,3 mg, 97,3 % de pureza, 6,67 % de rendimiento) en forma de sólidos pardos.
Compuesto 39
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 3,64 min, masa calculada para C25H27N9O2485,23, m/z encontrado 486,1 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Bruker) # 12,91 - 12,82 (m, 1H), 12,72 - 12,58 (m, 1H), 10,87 (s ancho, 1H) , 8,88 - 8,79 (m, 2H), 7,64 (s, 1H), 7,56 - 7,36 (m, 2H), 7,24 - 7,01 (m, 1H), 6,95 - 6,86 (m, 1H), 6,46 - 6,32 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,83 - 3,73 (m, 4H), 3,16 - 3,05 (m, 4H), 2,22 - 2,08 (m, 2H), 1,05 - 0,93 (m, 3H)
SFC (Método 13): Rt = 2,26 min, Área pico: 99,7 %
Compuesto 40
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 3,65 min, masa calculada para C25H27N9O2485,23, m/z encontrado 486,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Bruker) # 12,96 - 12,83 (m, 1H), 12,72 - 12,57 (m, 1H), 10,87 (s ancho, 1H), 8,87 - 8,79 (m, 2H), 7,64 (s, 1H), 7,56 - 7,36 (m, 2H), 7,24 - 7,02 (m, 1H), 6,95 - 6,87 (m, 1H), 6,44 - 6,33 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,83 - 3,73 (m, 4H), 3,14 - 3,03 (m, 4H), 2,23 - 2,08 (m, 2H), 1,09 - 0,94 (m, 3H)
SFC (Método 13): Rt = 1,64 min, Área pico: 100 %
Compuesto 41
(S*)-2-metil-6-(6-morfolino-7H-benzo[d ]imidazol-2-il)-7-((1-(tiazol-4-il)etil)-amino)-2H-pirazolo[453-b]pindin-5(4H)-ona
Figure imgf000108_0002
Compuesto 42
(fl*)-2-metil-6-(6-morfolino-7H-benzo[d|imidazol-2-il)-7-((1-(tiazol-4-il)etil)-amino)-2H-pirazolo[453-b]pi N din-5(4H)-ona
Figure imgf000109_0001
Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró a sequedad bajo presión reducida y se purificó mediante HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini C18250*50 mm*10 um, Fase Móvil A: agua (0,05 % de hidróxido amónico), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 22 mL/min, condición de gradiente de 40 % de B a 50 %) . Las fracciones puras se recogieron y los componentes volátiles se eliminaron en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y la mezcla resultante se liofilizó a sequedad para dar el producto racémico en forma de sólidos pardos, que se separaron mediante cromatografía de fluidos supercríticos (condición de separación: AD (250 mm*30 mm, 10 um); Fase móvil: A: CO2 supercrítico, B: 0,1 % NH3-H2Ü IPA, A:B = 50:50 a 50 mL/min, Temp. de la Columna: 38 °C, Presión de la Boquilla: 100 bar, Temp. de la Boquilla: 60 °C; Temp. del evaporador: 20 °C; Temp. del Recortador: 25 °C; Longitud de onda: 220 nm) para dar el compuesto 41 (6,5 mg, 99,4 % de pureza, 8,08 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos y el compuesto 42 (12,4 mg, 99,8 % de pureza, 15,5 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos.
Compuesto 41
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 3,78 min, masa calculada para C23H24N8O2S 476,17, m/z encontrado 477,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) # 12,92 - 12,85 (m, 1H), 12,57 (d, J = 9,0 Hz, 0,4H), 12,49 (d, J =8,8 Hz, 0,6H), 10,96 - 10,88 (m, 1H), 9,11 (d, J =2,0 Hz, 1H), 7,74 - 7,67 (m, 1H), 7,60 - 7,49 (m, 1,4H), 7,44 -7,39 (m, 0,6H), 7,22 - 7,18 (m, 0,6H), 7,07 - 7,02 (m, 0,4H), 6,94 - 6,87 (m, 1H), 6,69 - 6,57 (m, 1H), 4,08 - 4,00 ( m, 3H), 3,81 - 3,73 (m, 4H), 3,13 - 3,04 (m, 4H), 1,79 - 1,70 (m, 3H)
SFC (Método 10): Rt = 2,16 min, Área Pico: 99,4%.
Compuesto 42
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 2): Rt = 3,77 min, masa calculada para C23H24N8O2 S 476,2, m/z encontrado 477,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) (Varian) # 12,91 - 12,85 (m, 1H), 12,56 (d, J = 8,8 Hz, 0,4H), 12,48 (d, J = 8,8 Hz, 0,6H), 10,93 - 10,89 (m, 1H), 9,11 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,72 - 7,68 (m, 1H), 7,59 - 7,49 (m, 1,4H), 7,42 ( d, J= 8,8 Hz, 0,6H), 7,22 - 7,18 (m, 0,6H), 7,06 - 7,03 (m, 0,4H), 6,94 - 6,88 (m, 1H), 6,67 - 6,58 (m, 1H), 4,06 - 4,01 (m, 3H), 3,80 - 3,73 (m, 4H), 3,12 - 3,05 (m, 4H), 1,78 - 1,70 (m, 3H)
SFC (Método 10): Rt = 2,79 min, Área Pico: 98,1%.
Compuesto 43
(S)-2-etil-6-(6-morfolino-7H-imidazo[455-c]piridin-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)-amino)-2H-pirazol[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000109_0002
Una vez completada la reacción, la mezcla se extrajo con diclorometano (10 mL x 3). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a sequedad bajo presión reducida para proporcionar el producto bruto, que se purificó por HPLC prep. (Columna: Phenomenex Gemini 150*25 mm*10 um, Fase Móvil A: agua (0,05 % de hidróxido amónico v/v), Fase Móvil B: acetonitrilo, Caudal: 25 mL/min, condición de gradiente de 26 % de B a 56 %). Las fracciones puras se recogieron y el disolvente se evaporó en vacío. El residuo se resuspendió en agua (10 mL) y las mezclas resultantes se liofilizaron a sequedad para dar el compuesto 43 (116 mg, 95,8 % de pureza, 18,3 % de rendimiento) en forma de sólidos blancos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A, Método 1): Rt = 4,04 min, masa calculada para C24H26N10O2 486,22, m/z encontrado 487,0 [M+H]+.
Procedimiento General A: 1H RMN (400 MHz, DMSO - d6) (Varian) 513,05 - 12,97 (m, 1H), 12,66 (d, J= 7,9 Hz, 0,3H), 12,51 (d, J = 7,9 Hz, 0,7H), 10,98 - 10,92 (m, 1H), 8,88 - 8,80 (m, 2H), 8,56 (s, 0,3H), 8,52 (s, 0,7H), 7,69 (s, 1H), 7,44 -7,36 (m, 1H), 7,00 (s, 0,7H), 6,89 (s, 0,3H), 6,47 - 6,31 (m, 1H), 4,39 - 4,10 (m, 2H), 3,81 - 3,70 (m, 4H) , 3,43 - 3,36 (m, 4H), 1,82 - 1,67 (m, 3H), 1,39 - 1,26 (m, 3H)
SFC (Método 14): Rt = 2,46 min, Área Pico: 99,2%.
Compuesto 44
(R*)-2-metil-7-((2-metil-1-(piridin-2-il)propil)amino)-6-(6-(4-metilpiperazin-1-il)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000110_0001
El compuesto se purificó mediante el Procedimiento General E para HPLC, método 3.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A-2, método 2): Rt = 0,95 min, masa calculada para C28H33N9O, 511,28, m/z encontrado 512,5 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, CD3OD) 58,53 (d, J= 4,0 Hz, 1H), 7,71 (d, J= 6,8 Hz, 1H), 7,52-7,44 (m, 3H), 7,24-7,18 (m, 2H), 7,03-7,00 (m, 1H), 6,42-6,41 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,25-3,22 (m, 4H), 2,70-2,68 (m, 4H), 2,58-2,56 (m, 1H), 2,39 (s, 3H), 1,16 (t, J = 6,4 Hz, 6H).
Compuesto 45
(S*)-2-metil-7-((2-metil-1-(piridin-2-il)propil)amino)-6-(6-(4-metilpiperazin-1-il)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000110_0002
El compuesto se purificó mediante el Procedimiento general E para HPLC, método 3.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A-2, método 2): Rt = 0,95 min, masa calculada para C28H33N9O, 511,28, m/z encontrado 512,5 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, CD3 OD) 58,53 (d, J= 4,0 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,52-7,44 (m, 3H), 7,24-7,18 (m, 2H), 7,03-7,00 (m, 1H), 6,42-6,41 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,25-3,22 (m, 4H), 2,70-2,68 (m, 4H), 2,58-2,56 (m, 1H), 2,39 (s, 3H), 1,16 (t, J = 6,4 Hz, 6H).
Compuesto 46
(S)-2-etil-6-(6-morfolino-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)-amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000111_0001
El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente, CH2CI2 : MeOH = 150:1 a 50:1) para dar el producto bruto (600 mg, 44,8 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos. El compuesto bruto se purificó adicionalmente mediante SFC prep. (Condición de separación: Instrumento: SFC80 (Waters); Columna: OD 2,5*25 cm, 10 um; Fase móvil A: CO2 supercrítico, Fase móvil B: IPA/ACN/DEA = 60/40/0.2, A:B = 50 /50 a 80 mL/min, Temperatura. de la columna: 25 °C, contrapresión: 100 bar) para proporcionar el compuesto 46 (262,95 mg, rendimiento del 43,8 %, pureza del 99,3 %, ee: > 99 %) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A-2, método 2): Rt = 1,20 min, masa calculada para C25H27N9O2485,54, m/z encontrado 486,4 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 512,86 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 12,63-12,58 (m, 1H), 10,86 (s, 1H), 8,82 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 7,65 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,54-7,36 (m, 2H), 7,23-7,07 (m, 1H), 6,94-6,87 (m, 1H) , 6,40-6,38 (m, 1 H), 4,24-4,19 (m, 2H), 3,78-3,76 (m, 4H), 3,11-3,10 (m, 4H), 1,75 (t, J = 6,4 Hz, 3H), 1,35 -1,30 (m, 3H).
Compuesto 47
(S)-2-etil-6-(6-morfolino-1 H-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-7-((1-(piridin-2-il)etil)-amino)-254-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b]piridin-5-ona
Figure imgf000111_0002
El residuo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (CH2Cl2 :MeOH = 100:1) para dar el compuesto 47 (139,8 mg, rendimiento 28,8 %, pureza 97,8 %, ee: > 99 %) en forma de sólidos amarillos. LC-MS (ESI) (Procedimiento General C-2, método 2): Rt = 1,309 min, masa calculada para C25H27N9O2485,5, m/z encontrado 486,3 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, CD3OD) 58,57-8,45 (m, 2H), 7,78-7,71 (m, 1H), 7,55-7,46 (m, 2H), 7,26­ 7,25 (m, 1H), 6,99-6,90 (m, 1H), 6,46-6,40 (m, 1H), 4,27-4,20 (m, 2H), 3,89-3,82 (m, 4H), 3,41-3,37 (m, 4H ), 1,82 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,39 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Compuesto 48
(S)-2-etil-6-(4-fluoro-6-(4-metilpiperazin-1-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2 -il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000112_0001
El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente, CH2CI2 : MeOH = 50:1 a 20:1) para dar el compuesto bruto (149 mg, 50 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos. El compuesto bruto se purificó adicionalmente mediante SFC prep. (Condición de separación: Instrumento: SFC80 (Waters); Columna: OD 2,5*25cm, 10 um; Fase móvil A: CO2 supercrítico, Fase móvil B: IPA/ACN/DEA = 60/40/0.2, A:B = 60/40 a 70 mL/min, Temperatura de la columna: 25 °C, contrapresión: 100 bares) para proporcionar el compuesto 48 (95,9 mg, rendimiento del 32,0 %, pureza del 98,4 %, ee: > 99 %) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B-2, método 4): Rt = 0,95 min, masa calculada para C26H29FN10O 516,57, m/z encontrado 517,4 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, CD3OD) 58,78-8,77 (m, 2H), 7,53 (s, 1H), 7,36-7,33 (m, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,74-6,71 (m, 1H), 6,40-6,38 (m, 1H), 4,25-4,20 (m, 2H), 3,30-3,28 (m, 4H), 2,88 (m, 4H), 2,54 (s, 3H), 1,83 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,40 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Compuesto 49
(S)-2-etil-6-(4-fluoro-6-(3-metoxiazetidin-1-il)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000112_0002
El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente, CH2Cl2 :MeOH = 100:1 a 50:1) para dar el compuesto bruto (200 mg, rendimiento del 83,0 %, pureza del 90,6 %). El compuesto se purificó adicionalmente mediante SFC prep. (Condición de separación: Instrumento: SFC80 (Waters); Columna: OD 2,5*25 cm, 10 um; Fase móvil A: CO2 supercrítico, Fase móvil B:MeOH/DEA = 100/0,2, A:B = 70/30 a 70 mL/min, Temperatura de la columna: 25 °C, contrapresión: 100 bares) para proporcionar el compuesto 49 (106,7 mg, rendimiento del 44,0 %, pureza del 99,4 %, ee: > 99 %) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B-2, método 4): Rt = 1,56 min, masa calculada para C25H26FN9O2503,53, m/z encontrado 504,4 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, CD3OD) 58,78-8,76 (m, 2H), 7,52 (s, 1H), 7,36-7,33 (m, 1H), 6,44-6,38 (m, 2H), 6,23-6,20 (m, 1H), 4,36-4,33 (m, 1H), 4,26-4,20 (m, 2H), 4,13-4,10 (m, 2H), 3,68-3,66 (m, 2H), 3,35 (s, 3H), 1,84­ 1,82 (m, 3H), 1,40 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Compuesto 50 y compuesto 51
El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente, CH2Cl2 : MeOH = 20:1 a 10:1) para dar el producto bruto (120 mg, 50 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos. El compuesto bruto se purificó adicionalmente mediante SFC prep. (Condición de separación: Instrumento: SFC80 (Waters); Columna: AD 2,5*25 cm, 10 um; Fase móvil A: CO2 supercrítico, Fase móvil B:MeOH/ACN/DEA = 60/40/0,2, A:B= 50 /50 a 80 mL/min, Temperatura de la columna: 25 °C, Contrapresión: 100 bar) para proporcionar el compuesto 50 (12,27 mg, rendimiento del 12,2 %, pureza del 95,2 %, ee: > 99 %) y el compuesto 51 (43,28 mg, rendimiento del 36,1 %, pureza del 97,3 %, ee: > 99 %).
Compuesto 50
(R*)-6-(4-metoxi-6-morfolino-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-((1 -(pirimidin-2-il)etil)amino)-2,4-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b]piridin-5-ona
Figure imgf000113_0001
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B-2, método 2): Rt = 1,35 min, masa calculada para C25H27N9O3501,55, m/z encontrado 502,3 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 512,99 (s, 1H), 12,83 (s, 1H), 12,50-12,48 (m, 1H), 11,00-10,84 (m , 1H), 8,87-8,80 (m, 2H), 7,68-7,64 (m, 1H), 7,41 (s, 1H), 6,80-6,43 (m, 3H), 4,13-4,12 (m, 2H), 4,07-4,03 (m, 4H), 3,95­ 3,88 (m, 4H), 3,32-3,05 (m, 4H), 1,72-1,69 (m, 3H).
Compuesto 51
(S*)-6-(4-metoxi-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)-2,4-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b]piridin-5-ona
Figure imgf000113_0002
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B-2, método 2): Rt = 1,35 min, masa calculada para C25H27N9O3501,55, m/z encontrado 502,3 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 513,00 (s, 1H), 12,84 (s, 1H), 12,51-12,48 (m, 1H), 11,00-10,86 (m , 1H), 8,85-8,80 (m, 2H), 7,68-7,65 (m, 1H), 7,42-7,40 (m, 1H), 6,80-6,71 (m, 1H), 6,56-6,43 (m, 2H), 4,06 (s, 2H), 3,96 (s, 4H), 3,78-3,75 (m, 4H), 3,14-3,09 (m, 4H), 1,74-1,69 (m, 3H).
Compuesto 52
(S)-6-(5-metoxi-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metil-7-((1-(pirimidin-2-il)etil)amino)- 2H-pirazol[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000113_0003
La mezcla de reacción se purificó por cromatografía en gel de sílice (CH2CI2 : MeOH = 25:1) para dar el producto bruto (200 mg, rendimiento 70,0 %) en forma de un sólido amarillo. El producto bruto se purificó adicionalmente mediante SFC prep. (Condición de separación: Instrumento: SFC80 (Waters); Columna: OD 2,5*25 cm, 10 um; Fase móvil A: CO2 supercrítico, Fase móvil B:IPA/ACN/DEA = 60/40/0,2, A:B = 60/40 a 80 mL/min, Temperatura de la columna: 25 °C, Contrapresión: 100 bar) para dar el compuesto 52 (88,09 mg, rendimiento del 44,0 %, pureza del 94,2 %, ee: > 99 %) en forma de un sólido amarillo.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General B-2, método 2): Rt = 1,29 min, masa calculada para C25H27N9O3501,54, m/z encontrado 502,3 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) # 12,88-12,84 (m, 1H), 12,61-21,58 (m, 1H), 12,85-12,81 (m, 1H), 8,85 -8,84 (m, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,42-7,10 (m, 3H), 6,47-6,45 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 3,76-3,74 (m, 4H), 3,00-2,97 (m, 4H), 1,74-1,72 (m, 3H).
Compuesto 53 y compuesto 54
El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (CH2CL : MeOH = 150:1 a 50:1) para dar el producto bruto (509 mg, 54,8 % de rendimiento) en forma de sólidos amarillos. El producto bruto se purificó adicionalmente mediante SFC prep. (Condición de separación: Instrumento: SFC80 (Waters); Columna: OD 2,5*25 cm, 10 um; Fase móvil A: CO2 supercrítico, Fase móvil B:MeOH/ACN/DEA = 60/40/0,2, A:B = 50 /50 a 80 mL/min, Temperatura de la columna: 25 °C, Contrapresión: 100 bar) para proporcionar el compuesto 53 (153,89 mg, rendimiento del 30,2 %, pureza del 99,4 %, ee: > 99 %) y el compuesto 54 (162,32 mg, 31,9 % de rendimiento, pureza 99,6 %, ee: > 99 %).
Compuesto 53
(S*)-2-metil-6-(5-metil-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1-(pirimidin-2-il)propil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000114_0001
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A-2, método 2): Rt = 1,44 min, masa calculada para C26H29N9O2499,57, m/z encontrado 500,4 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6) # 12,87 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 12,65-12,63 (m, 1H), 10,84 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 8,84-8,82 (m, 2H), 7,63 (s, 1H), 7,46-7,22 (m, 3H), 6,40-6,38 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,77-3,76 ( m, 4H), 2,88­ 2,85 (m, 4H), 2,38 (s, 3H), 2,19-2,14 (m, 2H), 1,02-0,97 (m, 3H).
Compuesto 54
(R*)-2-metil-6-(5-metil-6-morfolino-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1 -(pirimidin-2-il)propil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000114_0002
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A-2, método 2): Rt = 1,43 min, masa calculada para C26H29N9O2499,57, m/z encontrado 500,4 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 12,87 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 12,64 (dd, J = 8,4, 4,0 Hz, 1H), 10,84 ( d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,83 (dd, J = 8,8, 3,2 Hz, 2H), 7,64 (s, 1H), 7,47-7,22 (m, 3H), 6,40-6,39 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,79-3,75 (s, 4H), 2,89-2,84 (m, 4H), 2,38 (s, 3H), 2,17-2,14 (m, 2H), 1,00 (t, J = 6,8 Hz, 3H ).
Compuesto 55
(S)-2-metil-6-(5-metil-6-morfolino-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-7-((1 -(oxazol-4-il)-etil)amino)-2H-pirazolo[4,3-b]piridin-5(4H)-ona
Figure imgf000115_0001
El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente, CH2Cl2 : MeOH = 150:1 a 50:1) para dar el compuesto 55 (369,51 mg, 48,5 % de rendimiento, pureza 99,4 %, ee: > 99 %) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A-2, método 2): Rt = 1,46 min, masa calculada para C24H26N8O3474,52, m/z encontrado 475,4 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6) 512,88 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 12,37-12,35 (m, 1H), 10,90 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,45-7,21 (m, 2H), 6,47-6,35 (m, 1H), 4,05 (s, 3H) , 3,77-3,75 (m, 4H), 2,88-2,83 (m, 4H), 2,37 (s, 3H), 1,68 (t, J = 6,8 Hz, 3H).
Compuesto 56
(S)-2-metil-6-(6-morfolino-1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-7-((1 -(oxazol-4-il)etil)-amino)-2,4-dihidro-5H-pirazolo[4,3-b]piridin-5-ona
Figure imgf000115_0002
El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (CH2Cl2 :MeOH = 100:1) para dar el compuesto 56 (37,15 mg, rendimiento 6,89 %, pureza 95,4 %, ee: > 99 %) en forma de sólidos amarillos.
LC-MS (ESI) (Procedimiento General A-2, método 2): Rt = 1,14 min, masa calculada para C22H23N9O3461,5, m/z encontrado 462,4 [M+H]+.
Procedimiento General A-2: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d 6) 513,13-13,10 (m, 1H), 12,31-12-11 (m, 1H), 11,01-10,97 (m, 1H) , 8,53-8,36 (m, 2H), 8,05 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,03-6,91 (m, 1H), 6,46-6,40 (m, 1H), 4,06 (s, 3H), 3,77 -3,75 (m, 4H), 3,39-3,37 (m, 4H), 1,68 (d , J = 4,0 Hz, 3H).
Parte Analítica
LCM S
Procedim iento general A
La medición de LC se realizó utilizando un sistema HPLC Agilent 1200 que comprende un desgasificador, una bomba binaria, un muestreador automático, un calentador de columna, un detector de matriz de diodos (DAD, por sus siglas en inglés) y una columna como se especifica en los métodos respectivos que figuran a continuación. El flujo del DAD se dividió en un espectrómetro MS (Agilent 6110 o 6140) y un ELSD. El detector MS se configuró con una fuente de ionización por electropulverización. Se utilizó nitrógeno como gas nebulizador. La temperatura del gas de secado se mantuvo en 350 °C. La tensión capilar fue de 2,5 V para el modo de ionización positiva y de 3,0 V para el modo de ionización negativa. Los espectros de masas se adquirieron escaneando de 100 a 1000 en un tamaño de paso de 0,1. El tiempo de ciclo es de 0,89 s/ciclo. La adquisición de los datos se realizó con un Chemstation B.04.03
M étodo 1
Además del procedimiento general A: se llevó a cabo una HPLC de fase inversa en una columna Waters XBridge Shield RP18 (50*2,1 mm 5 gm) con un caudal de 0,8 mL/min. Se utilizaron dos fases móviles (fase móvil A: agua con 0,05% NH3 H2 O; fase móvil B: acetonitrilo). Primero, se mantuvo 100% de A durante 1 minuto. Luego se aplicó un gradiente a 40 % de A y 60 % de B en 4 minutos y luego a 5 % de A y 95 % de B en 2,5 minutos. Finalmente, se vuelve al 100 % de A en 2 minutos y se mantiene así durante 0,5 minutos. El tiempo en el horno es de 0,5 minutos. La temperatura del horno era de 40 °C. El volumen de inyección es de 2 uL. (Polaridad MS: positiva)
M étodo 2
Además del procedimiento general A: se llevó a cabo una HPLC de fase inversa en una columna Phenomenex Luna-C18 (5 gm, 2,0 x 50 mm) con un caudal de 0,8 mL/min. Se utilizaron dos fases móviles (fase móvil A: agua con TFA al 0,1 %; fase móvil B: acetonitrilo con TFA al 0,05 %). Se mantuvo 100 % de A durante 1 minuto, se aplicó un gradiente de 100 % de A a 40 % de A en 4 minutos, y de 40 % de A hasta 15 % de A en 2,5 minutos. Y luego se vuelve al 100% de A en 2 minutos y se mantiene durante 0,5 minutos. El tiempo es de 0,5 min. La temperatura del horno era de 50 °C. El volumen de inyección es de 2 uL. (Polaridad MS: positiva)
Procedim iento general B
La medición de LCMS se realizó utilizando un sistema de la serie Agilent1200 que comprende una bomba cuaternaria con desgasificador, un muestreador automático, un horno de columna (ajustado a 50 °C, a menos que se indique lo contrario), un detector de matriz de diodos (DAD) y una columna como se especifica en los métodos respectivos que figuran a continuación. El flujo de la columna se dividió en un espectrómetro Ms . El detector MS se configuró con una fuente de ionización por electropulverización. Los espectros de masas se adquirieron escaneando de 100 a 1000 utilizando un tiempo de ciclo de 0,52 segundos. La tensión de la aguja capilar fue de 2,5 kV y la temperatura de la fuente se mantuvo en 350 °C. Se utilizó nitrógeno como gas nebulizador. La adquisición de datos se realizó con un sistema de datos LC/MSD ChemStation.
M étodo 4
Además del procedimiento general B: se llevó a cabo una HPLC de fase inversa en una columna Xtimate C18 (2,1*30 mm, 3 um) con un caudal de 1,2 mL/min. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil A: agua (4 L) TFA (1,5 mL); fase móvil B: acetonitrilo (4 L) TFA (0,75 mL)) para ejecutar una condición de gradiente de 100 % de A a 40 % de A, 60% de B en 0,9 minutos, y mantener en estas condiciones durante 0,6 minutos, hasta 40% de A y 60% de B en 0,01 minutos y reequilibrar con 40% de A durante 0,49 minutos. Se utilizó un volumen de inyección de 0,1-20 gL. La tensión del cono fue de 70 V para el modo de ionización positiva.
M étodo 5
Además del procedimiento general B: se llevó a cabo una HPLC de fase inversa en una columna MERCK C18 (RP-18e 25-2 mm) con un caudal de 1,2 mL/min. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil A: agua (4 L) TFA (1,5 mL); fase móvil B: acetonitrilo (4 L) TFA (0,75 mL)) para ejecutar una condición de gradiente de 95 % de A a 5 % de A, 95% de B en 0,7 minutos, y mantener en estas condiciones durante 0,4 minutos, hasta 95% de A y 5% de B en 0,01 minutos y reequilibrar con 95 % de A durante 0,49 minutos. Se utilizó un volumen de inyección de 0,1 -20 gL. La tensión del cono fue de 70 V para el modo de ionización positiva.
M étodo 6
Además del procedimiento general B: se llevó a cabo una HPLC de fase inversa en una columna Xbridge Shield RP-18 (5 um, 2,1*50 mm) con un caudal de 1,0 mL/min. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil A: agua (1 L) NH3 H2O (0,5 mL); fase móvil B: acetonitrilo) para ejecutar una condición de gradiente de 90 % de A a 20 % de A, 80 % de B en 2 minutos, y mantener en estas condiciones durante 0,48 minutos, a 90 % de A y 10 % de B en 0,01 minutos y reequilibrar con 90 % de A durante 0,11 minutos. Se utilizó un volumen de inyección de 0,1 -20 gL. La tensión del cono fue de 70 V para el modo de ionización positiva.
Procedim iento general C
La medición de LCMS se realizó utilizando un sistema de la serie Shimadzu LCMS-2010 EV que comprende una bomba cuaternaria con desgasificador, un muestreador automático, un horno de columna (ajustado a 50 °C, a menos que se indique lo contrario), un detector de matriz de diodos (DAD) y una columna como se especifica en los métodos respectivos que figuran a continuación. El flujo de la columna se dividió en un espectrómetro MS. El detector MS se configuró con una fuente de ionización por electropulverización. Los espectros de masas se adquirieron escaneando de 100 a 1000 utilizando un tiempo de ciclo de 0,25 segundos. La tensión del detector fue de 1,6 kV y la temperatura de la fuente se mantuvo en 250 °C. Se utilizó nitrógeno como gas nebulizador. La adquisición de datos se realizó con un sistema de datos de solución LCMS.
M étodo 7
Además del procedimiento general C: se llevó a cabo una HPLC de fase inversa en una columna Xtimate C18 (2,1*30 mm, 3 um) con un caudal de 1,2 mL/min. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil A: agua (4 L) TFA (1,5 mL); fase móvil B: acetonitrilo (4 L) TFA (0,75 mL)) para ejecutar una condición de gradiente de 100 % de A a 40 % de A, 60% de B en 6 minutos, y mantener en estas condiciones durante 0,5 minutos, hasta 40 % de A y 60 % de B en 0,01 minutos y reequilibrar con 40 % de A durante 0,49 minutos. Se utilizó un volumen de inyección de 0,1 -20 pL. La tensión del cono fue de 70 V para el modo de ionización positiva.
M étodo 8
Además del procedimiento general C: se llevó a cabo una HPLC de fase inversa en una columna Xtimate C18 (2,1 *30 mm, 3 um) con un caudal de 0,8 mL/min. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil A: agua (4 L) TFA (1,5 mL); fase móvil B: acetonitrilo (4 L) TFA (0,75 mL)) para ejecutar una condición de gradiente de 90 % de A a 20 % de A, 80 % de B en 6 minutos, y mantener en estas condiciones durante 0,5 minutos, hasta 90 % de A y 10 % de B en 0,01 minutos y reequilibrar con 90 % de A durante 0,49 minutos. Se utilizó un volumen de inyección de 0,1-20 pL. La tensión del cono fue de 70 V para el modo de ionización positiva.
M étodo 9
Además del procedimiento general C: se llevó a cabo una HPLC de fase inversa en una columna MERCK C18 (RP-18e 25-2 mm) con un caudal de 1,2 mL/min. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil A: agua (4 L) TFA (1,5 mL); fase móvil B: acetonitrilo (4 L) TFA (0,75 mL)) para ejecutar una condición de gradiente de 95 % A a 5 % de A, 95 % de B en 0,7 minutos, y mantener en estas condiciones durante 0,4 minutos, a 95 % de A y 5 % de B en 0,01 minutos y reequilibrar con 95 % de A durante 0,49 minutos. Se utilizó un volumen de inyección de 0,1-20 pL. La tensión del cono fue de 70 V para el modo de ionización positiva.
Procedim iento general A -2
La medición de LCMS se realizó utilizando un sistema Waters UPLC-QDa que comprende una bomba cuaternaria, un muestreador automático, un horno de columna (ajustado a 50 °C, a menos que se indique lo contrario), un detector de matriz de fotodiodos (PDA, por sus siglas en inglés) y una columna como se especifica en los métodos respectivos que figuran a continuación. El flujo de la columna se dividió en un espectrómetro m S. El detector MS era un detector QDa y estaba configurado con una fuente de ionización por electropulverización. Los espectros de masas se adquirieron escaneando de 100 a 1000. La tensión de la aguja capilar fue de 0,8 kV y la temperatura de la fuente se mantuvo en 120 °C. Se utilizó nitrógeno como gas nebulizador. La adquisición de datos se realizó con un sistema de datos Waters-Micromass MassLynx-Openlynx.
M étodo 2 (90:10)
Además del procedimiento general A-2: se llevó a cabo una HPLC de fase inversa en una columna ACQUITY UPLC BEH C18 (1,7 pm 2,1 x 50 mm) con un caudal de 0,6 mL/min. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil C: ácido fórmico al 0,1 % en agua; fase móvil D: ácido fórmico al 0,1 % en acetonitrilo) para mantener 90 % de C y 10 % de D durante 1,2 minutos, luego mantener 5 % de C y 95 % de D durante 0,8 minutos. Un volumen de inyección de entre 0,3 y 5 pL dependía de la concentración de la muestra. La tensión del cono fue de 15 V para el modo de ionización positiva.
Procedim iento general B -2
La medición de LCMS se realizó utilizando un sistema Shimadzu LC-MS2020 que comprende una bomba (LC-20AD) con desgasificador (DGU-20 A3), un automuestreador (SIL-20AHT), un horno de columna (CTO-20A) (ajustado a 40 °C, a menos que se indique lo contrario), un detector de matriz de fotodiodos (PDA) (SPD-M20A), un detector de dispersión de luz evaporativa (ELSD) (Alltech 3300ELSD) y una columna como se especifica en los métodos respectivos que figuran a continuación. El flujo de la columna se dividió en un espectrómetro MS. El detector MS se configuró con una fuente de ionización por electropulverización. Los espectros de masas se adquirieron escaneando de 80 a 1000. Se utilizó nitrógeno como gas nebulizador. La adquisición de datos se realizó con un sistema de datos Labsolution.
Método 2
Además del procedimiento general B-2: se llevó a cabo una UPLC de fase inversa en un Shimadzu SunFire C18 (5 gm 50*4,6 mm) con un caudal de 2,0 mL/min. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil A: ácido fórmico al 0,1 % en agua; fase móvil B: ácido fórmico al 0,1 % en acetonitrilo) para mantener el 90 % de A y el 10 % de B durante 1,6 minutos, luego mantener el 5 % de A y el 95 % de B durante 1,0 minutos. Un volumen de inyección de entre 0,3-5 gL dependía de la concentración de la muestra. La tensión del cono fue de 20 V para el modo de ionización positiva y negativa. Los espectros de masas se adquirieron escaneando de 100 a 1000 en 0,2 segundos utilizando un retraso entre escaneos de 0,1 segundos.
M étodo 4
Además del procedimiento general B-2: se llevó a cabo una UPLC de fase inversa en un Shimadzu SunFire C18 (5 gm 50*4,6 mm) con un caudal de 2,0 mL/min. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil A: ácido fórmico al 0,1 % en agua; fase móvil B: ácido fórmico al 0,1 % en acetonitrilo) para mantener el 70 % de A y el 30 % de B durante 1,6 minutos, luego mantener el 5 % de A y el 95 % de B durante 1,0 minutos. Un volumen de inyección de entre 0,3-5 gL dependía de la concentración de la muestra. La tensión del cono fue de 20 V para el modo de ionización positiva y negativa. Los espectros de masas se adquirieron escaneando de 100 a 1000 en 0,2 segundos utilizando un retraso entre escaneos de 0,1 segundos.
Procedim iento general C-2
La medición de LCMS se realizó utilizando un sistema AB que comprende una bomba cuaternaria (G1311A), un muestreador automático (CTC Analytic HTS), un horno de columna (G1316A TCC, ajustado a 40 °C, a menos que se indique lo contrario), un detector DAD (G1315B) y una columna como se especifica en los métodos respectivos que figuran a continuación. El flujo de la columna se dividió en un espectrómetro MS. El MS (API3000) configurado con una fuente de ionización por electropulverización. Los espectros de masas se adquirieron escaneando de 80 a 1000. Se utilizó nitrógeno como gas nebulizador.
M étodo 2 (90:10)
Además del procedimiento general C-2: se llevó a cabo una HPLC de fase inversa en un SunFire C18 (5 gm 50*4,6 mm) con un caudal de 1,0 mL/min. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil C: 0,1 % NH3 H2O en agua; fase móvil D: 0,1 % NH3 H2O en acetonitrilo) para mantener 95 % de C y 5 % de D durante 3 minutos, luego mantener el 5 % de C y el 95 % de D durante 1 minuto. El volumen de inyección dependía de la concentración de la muestra.
RMN
Procedimiento General A
Los siguientes experimentos de RMN se llevaron a cabo utilizando espectrómetros Bruker Avance III 400 y Varian 400 a temperatura ambiente, utilizando bloqueo de deuterio interno y equipado con un cabezal de sonda BBO de 400 MHz para el Bruker Avance III 400 y con Varian 400 ASW PFG 4nuc (1H, 13C, 19F, 31P) cabezal de sonda para el Varian 400. Los desplazamientos químicos (5) se reseñan en partes por millón (ppm).
Procedimiento General A-2
Los siguientes experimentos de RMN se llevaron a cabo utilizando un espectrómetro Bruker Avance III400 a temperatura ambiente, utilizando bloqueo interno de deuterio y equipado con un cabezal de sonda PABBO de 5 mm (1H, 13C, 15N, 31P, 19F). Los desplazamientos químicos (5) se reseñan en partes por millón (ppm)
SFC
Procedim iento general D
La prueba SFC-MS se realizó utilizando un sistema SFC Berger que comprende una bomba binaria, un muestreador automático, un calentador de columna, un detector de matriz de diodos (DAD), una válvula de conmutación de columna de 6 posiciones, una válvula de conmutación de disolvente y un regulador de contrapresión (BPR, por sus siglas en inglés). Típicamente, la temperatura de la columna y el BPR se ajustaron a 40 °C y 100 bar, respectivamente. El flujo del DAD se dividió en un espectrómetro MS (Agilent 6110). El detector MS se configuró con una fuente de ionización química a presión atmosférica. Se utilizó nitrógeno como gas nebulizador. La temperatura del gas de secado se mantuvo en 250 °C. La tensión capilar fue de 3000 V para el modo de ionización positiva y de 3000 V para el modo de ionización negativa. Los espectros de masas se adquirieron escaneando de 100 a 1000 en un tamaño de paso de 0,1. El tiempo de ciclo es de 1,06 s/ciclo. La adquisición de datos se realizó con un Chemstation B.04.03.
M étodo 10
La SFC se llevó a cabo en una columna Chiralpak AD-350*4,6 mm D.I., 3 um con un caudal de 4 mL/min. Dos fases móviles (Fase móvil: A: CO2 B: iso-propanol (0,05% DEA)). El gradiente se mantuvo en 40%. La temp. de la columna fue de 40 °C. (Polaridad MS: positiva)
Método 12
La SFC se llevó a cabo en una columna Chiralcel OD-350*4,6 mm D.I., 5 um con un caudal de 4 mL/min. Dos fases móviles (Fase móvil: A: CO2 B: etanol (0,05% DEA)). El gradiente fue de 5 % a 40 % de B en 5 min y se mantuvo en 40 % durante 2,5 min, luego en 5 % de B durante 2,5 min. La temp. de la columna fue de 40 °C. (Polaridad MS: positiva)
M étodo 13
La SFC se llevó a cabo en una columna Chiralpak AD-350*4,6 mm D.I., 3 um con un caudal de 4 mL/min. Dos fases móviles (Fase móvil: A: CO2 B: etanol (0,05% DEA)). El gradiente se mantuvo en 40%. La temperatura de la columna fue de 40 °C. (Polaridad MS: positiva)
M étodo 14
La SFC se llevó a cabo en una columna Chiralpak AD-350*4,6 mm D.I., 3 um con un caudal de 4 mL/min. Dos fases móviles (Fase móvil: A: CO2 B: Metanol (0,05% DEA)). El gradiente se mantuvo en 40%. La temp. de la columna fue de 40 °C. (Polaridad MS: positiva)
Procedim iento general E
La prueba SFC se realizó utilizando un sistema SFC Agilent 1260 que comprende un desgasificador, una bomba binaria, un muestreador automático, un calentador de columna, un detector de matriz de diodos (DAD), una válvula de conmutación de columna de 6 posiciones, una válvula de conmutación de disolvente y un regulador de contrapresión (BPR). Típicamente, la temperatura de la columna y el BPR se fijaron en 40 °C y 100 bar, respectivamente.
M étodo 16
La SFC se llevó a cabo en una columna Chiralpak AD-3 de 100 x 4,6 mm de D.I., 3 um con un caudal de 2,8 mL/min. Dos fases móviles (Fase móvil: A: CO2 B: etanol (0,05 % DEA)). El gradiente fue de 5 % a 40 % de B en 4,5 min y se mantuvo en 40 % durante 2,5 min, luego 5 % de B durante 1 min. La temp. de la columna fue de 40 °C. (Polaridad m S: positiva)
M étodo 17
La SFC se llevó a cabo en un Chiralpak AD-3 de 100 x 4,6 mm de D.I., 3 um con un caudal de 2,8 mL/min. Dos fases móviles (Fase móvil: A:CO2 B: etanol (0,05% DEA)). El gradiente se mantuvo en 40 % de etanol (0,05 % DEA) en CO2. La temp. de la columna fue de 40 °C. (Polaridad MS: positiva)
M étodo 18
La SFC se llevó a cabo en una columna Chiralpak AD-3 de 100 x 4,6 mm de D.I., 3 um con un caudal de 2,8 mL/min. Dos fases móviles (Fase móvil: A: CO2 B: iso-propanol (0,05% DEA)). El gradiente fue de 5 % a 40 % de B en 4,5 min y se mantuvo en 40 % durante 2,5 min, luego 5 % de B durante 1 min. La temp. de la columna fue de 40 °C. (Polaridad MS: positiva)
M étodo 19
La SFC se llevó a cabo en una columna Chiralpak AS-3 de 100 x 4,6 mm de D.I., 3 gm con un caudal de 2,5 mL/min. Dos fases móviles (Fase móvil: A: CO2 B: etanol (0,05 % DEA). El gradiente fue de 5 % a 40 % de B en 4,5 min y se mantuvo en 40 % durante 2,5 min, luego 5 % de B durante 1 min La temp. de la columna fue de 40 °C (polaridad MS: positiva)
Procedim iento general F
La prueba SFC se realizó utilizando un sistema Waters UPCA2 que comprende un desgasificador, una bomba binaria, un muestreador automático, un calentador de columna, un detector de matriz de diodos (PDA), una válvula de conmutación de columna de 6 posiciones, un válvula de conmutación de disolvente y un regulador de contrapresión (BPR). Típicamente, la temperatura de la columna y el BPR se ajustaron a 35 °C y 103,4 bares, respectivamente.
M étodo 20
La SFC se llevó a cabo en una columna Chiralpak AS-3 de 150 x 4,6 mm de D.I., 3 um con un caudal de 2,5 mL/min. Dos fases móviles (Fase móvil: A: CO2 B: iso-propanol (0,05% DEA)). El gradiente se mantuvo en 40 %. La temp. de la columna fue de 40 °C. (Polaridad MS: positiva)
Procedim iento general G
La prueba SFC se realizó utilizando un sistema SFC Thar que comprende una bomba binaria, un muestreador automático, un calentador de columna, un detector de matriz de diodos (PDA), una válvula de conmutación de columna de 10 posiciones, una válvula de conmutación de disolvente y un regulador de contrapresión (BPR). Típicamente, la temperatura de la columna y el BPR se fijaron en 35 °C y 100 bar, respectivamente.
Método 21
La SFC se llevó a cabo en una columna Pheno Lux Cellulose-2150 x 4,6 mm D.I., 5 gm con un caudal de 2,0 mL/min. Dos fases móviles (Fase móvil: A: CO2 B: etanol (0,05% DEA)). El gradiente se mantuvo en 50 % de etanol (0,05% DEA) en CO2. La temp. de la columna fue de 40 °C. (Polaridad MS: positiva)
HPLC
Procedim iento general E para HPLC
La medición de HPLC se realizó utilizando un sistema LC-20A SHIMADZU que comprende una bomba cuántica LC-20AD con desgasificador DGU-20A, un muestreador automático SIL-20AC, un horno de columna CTO-20AC (ajustado a 25 °C, a menos que se indique lo contrario), un detector de matriz de diodos (SPD-M20A) y una columna como se especifica en los métodos respectivos que figuran a continuación.
M étodo 3
Además del procedimiento general E: se llevó a cabo una HPLC de fase inversa en una columna Waters Sunfire C18-5 gm-4,6-150 mm (1,7 gm 2,1 x 50 mm) con un caudal de 1,0 mL/min. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil C: TFA al 0,03 % en agua; fase móvil D: TFA al 0,03 % en acetonitrilo) para mantener 95 % de C y 5 % de D durante 13 minutos, luego mantener 5 % de C y 95 % de D durante 3 minutos. El volumen de inyección dependía de la concentración de la muestra.
Parte farmacológica
Ensayos biológicos
Ensayo de desplazamiento de movilidad de FGFR3 de tipo salvaje (ensayo enzimático)
En un volumen de reacción final de 25 gL se incubaron 0,04 ng/gL de enzima de tipo salvaje FGFR3 humano (dominio citoplásmico, de Carna Biosciences) con ATP 75 gM, sustrato FL-péptido 30 1 gM y 250 nL de compuesto de ensayo (DMSO al 1 % final) en tampón de ensayo (HEPES 100 mM pH 7,4, MgCl210 mM, Brij35 al 0,003 %, DTT 1 mM). Después de 50 minutos de incubar durante a 30 °C, la reacción se detuvo con 10 gL de EDTA 0,5 M pH 8,0 y luego se transfirieron 25 gL de la mezcla de reacción a la placa de lectura y se midió en el lector Caliper EZ reader II. La tasa de conversión de sustrato-producto se utilizó como datos sin procesar para la normalización y la curva de concentración-respuesta (10 puntos de dosis con dilución en serie 4x, comenzando con 10 gM) se representó utilizando Prism para calcular la CI50 (M), pCI50 (-logCI50) y el valor HillSlope.
Ensayo de desplazamiento de movilidad de FGFR3 V555M (ensayo enzimático)
En un volumen de reacción final de 25 gL se incubaron 0,04 ng/gL de enzima FGFR3 V555M humana (dominio citoplásmico que porta la mutación V555M, de Carna Biosciences) con ATP 30 gM, sustrato FL-péptido 301 gM y 250 nL de compuesto de ensayo (DMSO al 1 % final) en tampón de ensayo (HEPES 100 mM pH 7,4, MgCl2 10 mM, Brij35 al 0,003 %, DTT 1 mM). Después de 45 minutos de incubación a 30 °C, la reacción se detuvo con 10 gL de EDTA 0,5 M pH 8,0 y luego se transfirieron 25 gL de la mezcla de reacción a la placa de lectura y se midió en el lector Caliper EZ reader II. La tasa de conversión de sustrato-producto se utilizó como datos sin procesar para la normalización y la curva de concentración-respuesta (10 puntos de dosis con dilución en serie 4x, partiendo de 10 gM) se representó utilizando Prism para calcular la CI50 (M), pCI50 (-logCIsü) y el valor HillSlope.
Ensayo de desplazamiento de movilidad de FGFR3 V555L (ensayo enzimático)
En un volumen de reacción final de 25 gL, se incubaron 0,04 ng/gL de enzima FGFR3 V555L humana (dominio citoplásmico que porta la mutación V555L, de Carna Biosciences) con ATP 40 gM, sustrato FL-péptido 301 gM y 250 nL de compuesto de ensayo (DMSO al 1 % final) en tampón de ensayo (HEPES 100 mM, pH 7,4, MgCl210 mM, Brij35 al 0,003 %, DTT 1 mM). Después de 50 minutos de incubación a 30 °C, la reacción se detuvo con 10 gL de EDTA 0,5 M, pH 8,0 y luego se transfirieron 25 gL de la mezcla de reacción a la placa de lectura y se midieron en el lector Caliper EZ reader II. La tasa de conversión de sustrato-producto se utilizó como datos sin procesar para la normalización y la curva de concentraciónrespuesta (10 puntos de dosis con dilución en serie 4x, comenzando con 10 gM) se representó utilizando Prism para calcular la CI50 (M), pCI50 (-logCI50) y el valor HillSlope.
Ensayo de proliferación celular NIH/3T3 FGFR3 WT-TACC3
En el día 1,90 gL de suspensión celular (células NIH/3T3 que sobre-expresan la proteína de fusión FGFR3 WT-TACC3) (un total de 30.000 células por pocillo en medio de crecimiento (DMEM que contiene Glutamax al 1 %, FBS al 10 % y Pen/Strep al 1 %) se sembró en una placa de 96 pocillos y luego se incubó durante la noche a 37 °C y 5 % de CO2. En el día 2, se añadieron 10 gL de medio de crecimiento que contenía 10 veces la solución madre del compuesto de ensayo a los cultivos celulares (9 puntos de dosis con dilución en serie 4x, partiendo de 10 gM, DMSO al 0,1 % final). Después de 72 h de incubación a 37 °C y 5 % de CO2, en el día 5 se añadió un volumen de 50 gL de reactivo CellTiter Glo (CTG) a una placa de 96 pocillos que contenía células y la placa se incubó a temperatura ambiente durante 10 minutos antes de medir las RLUs (siglas inglesas de unidad de luz relativa) en un lector de mlcroplacas con módulo de detección de luminiscencia. El valor de RLU se normalizó al % de supervivencia y la curva de concentración-respuesta se trazó utilizando Prism para calcular la CI50 (M), PCI50 (-logCÍ50 ) y el valor HillSlope.
Ensayo de proliferación celular NIH/3T3 FGFR3 V555M-TACC3
En el día 1,90 gL de suspensión celular (células NIH/3T3 que sobre-expresan la proteína de fusión FGFR3 V555M-TACC3) (un total de 30.000 células por pocilio en medio de cultivo (DMEM que contiene Glutamax al 1 %, FBS al 10 % y Pen/Strep al 1 %) se sembró en una placa de 96 pocillos y luego se incubó durante la noche a 37°C y 5% de CO2. En el día 2, se añadieron 10 gL de medio de crecimiento que contenía 10 veces la solución madre del compuesto de ensayo a los cultivos celulares (9 puntos de dosis con dilución en serie 4x, partiendo de 10 gM, DMSO al 0,1 % final). Después de 72 h de incubación a 37 °C y 5 % de CO2 , en el día 5 se añadió un volumen de 50 gL de reactivo CellTiter Glo (Ct G) a una placa de 96 pocillos que contenía células y la placa se incubó a temperatura ambiente durante 10 minutos antes de medir las RLUs (unidad de luz relativa) en un lector de microplacas con módulo de detección de luminiscencia. El valor RLU se normalizó al % de supervivencia y la curva de concentración-respuesta se trazó utilizando Prism para calcular la CI50 (M), pCI50 (-logCI50) y el valor HillSlope.
Ensayo de proliferación celular simulado NIH/3T3
En el día 1, 90 gL de suspensión celular (células NIH/3T3 transfectadas con el mismo vector de control que en los dos ensayos de proliferación anteriores) (un total de 30.000 células por pocillo en medio de crecimiento (DMEM que contiene Glutamax al 1 %, FBS al 10 % y Pen/Strep al 1 %)) en una placa de 96 pocillos y luego se incubó durante la noche a 37 °C y 5 % de CO2. En el día 2, se añadieron 10 gL de medio de crecimiento que contenía una solución madre de 10 veces del compuesto de prueba a los cultivos celulares (9 puntos de dosis con dilución en serie 3x, partiendo de 30 gM, DMSO al 0,3 % final). Después de 72 h de incubación a 37 °C y 5 % de CO2, en el día 5 se añadió un volumen de 50 gL de reactivo CellTiter Glo (CTG) a una placa de 96 pocillos que contenía células y la placa se incubó a temperatura ambiente durante 10 minutos antes de medir las RLUs (unidad de luz relativa) en un lector de microplacas con módulo de detección de luminiscencia. El valor RLU se normalizó al % de supervivencia y la curva de concentración-respuesta se trazó utilizando Prism para calcular la CI50 (M), pCI50 (-logCI50 ) y el valor HillSlope. Este ensayo sirvió como contraensayo para los ensayos de proliferación celular NIH/3T3 FGFR WT/VM-TACC3 para indicar la toxicidad general de los compuestos de ensayo provocada por un efecto fuera del objetivo.
Ensayo de fosfo-ERK celular NIH/3T3 FGFR3 WT-TACC3 (ensayo de DP in vitro)
50 gL de suspensión celular (células NIH/3T3 que sobre-expresan la proteína de fusión FGFR3 WT-TACC3) (un total de 10.000 células por pocillo en medio de cultivo (DMEM que contiene Glutamax al 1 %, FBS al 10 % y Pen/Strep al 1%) se sembraron en una placa de 384 pocillos. Después de la incubación durante la noche a 37 °C y 5 % de CO2 se añadieron 5.5 gL de medio de crecimiento que contenía el compuesto de ensayo 10 veces a los cultivos celulares (10 puntos de dosis con dilución en serie 4x, comenzando con 10 gM, DMSO al 0,1 % final). Después de 1 h de incubación a 37 °C y 5 % de CO2, se agotó el medio y se aplicó el kit de ensayo AlphaLISA SureFire Ultra pERK1/2 (Thr202/Tyr204) (de PerkinElmer) para la detección del nivel de fosfo-ERK de acuerdo con las instrucciones del kit. Las RFUs (unidades relativas de fluorescencia se midieron en el lector de microplacas EnVision (p. ej., 680 nm, em. 615 nm) y la curva de concentraciónrespuesta se trazó utilizando Prism para calcular la CI50 (M), pCI50 (-logCbü) y el valor HillSlope.
Ensayo de fosfo-ERK celular NIH/3T3 FGFR3 V555M-TACC3 (ensayo de DP in vitro)
50 gL de suspensión celular (células NIH/3T3 que sobre-expresan la proteína de fusión FGFR3 V555M-TACC3) (un total de 10.000 células por pocillo en medio de cultivo (DMEM que contiene Glutamax al 1 %, FBS al 10 % y Pen/Strep al 1 %) se sembraron en una placa de 384 pocillos. Después de la incubación durante la noche a 37 °C y 5 % de CO2 se añadieron 5.5 gL de medio de crecimiento que contenía el compuesto de ensayo 10x a los cultivos celulares (10 puntos de dosis con dilución en serie 4x, partiendo de 10 gM, DMSO al 0,1 % final). Después de 1 h de incubación a 37 °C y 5 % de CO2, se agotó el medio y se aplicó el kit de ensayo AlphaLISA SureFire Ultra p-ERK1/2 (Thr202/Tyr204) (de PerkinElmer) para la detección del nivel de fosfo-ERK de acuerdo con las instrucciones del kit. Las RFUs (unidades relativas de fluorescencia se midieron en el lector de microplacas EnVision (p. ej., 680 nm, em. 615 nm) y la curva de concentración-respuesta se trazó utilizando Prism para calcular la CI50 (M), pCI50 (-logCIsQ ) y el valor HillSlope.
Figure imgf000122_0001
Figure imgf000123_0001
Figure imgf000124_0001

Claims (25)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de fórmula (I):
Figure imgf000125_0001
incluyendo cualquier forma tautomérica y estereoquímicamente isomérica del mismo, en donde
A1 , A2 y A3 representan, cada uno independientemente, CH, CRa o N, con la condición de que un máximo de dos de A1 ,
A2 y A3 pueden representar CRa;
C1 es hidrógeno o alquilo C1-4;
C2 es hidrógeno, alquilo C1-4, hidroxilo o alcoxi C1-4;
o C1 y C2 se toman juntos para formar un cicloalquilo C3-6 junto con el átomo de carbono al que están unidos;
Y es un enlace directo, -O-, C(=O), NRy, S(=O)2 o alquilo C1-4
Ry es hidrógenoo alquilo C1-4;
cada uno de los Ra, independientemente, es alquilo C1-6, haloalquilo C1-6 , halo, alcoxi C1-6, carboxilo, alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, ciano, cianoalquilo C1- 6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2, -C(=O)-NH(al N(alquilo C1-4)2 , o un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
Rb es hidrógeno, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, alcoxi C1-6, alquil C1-6oxicarbonilo, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6 , cianoalquilo
C1-6, hidroxialquilo C1-6, -C(=O)-NH2 , -C(=O)-NH(alquilo C1-4), -C(=O)-N(alquilo C1-4)2 , cicloalquilo C 3-6, fenilo, un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o alquilo
C1-6 sustituido con cicloalquilo C3-6 o con fenilo o con un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
D es un heterociclilo de 3 a 12 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc;
cada uno de los Rc, independientemente, es oxo, halo, alquilo C1-6, alquil C1-6oxi, hidroxialquilo C1-6, haloalquilo C1-6, haloalquil C1-6 oxi, carboxilo, HOOC-alquil C1-6-, alquilo C1-6 sustituido con -C(=O)-O-alquilo C1-6, alquil C1-6-OC(=O)-, ciano, cianoalquilo C1-6, alquil C1-6 -C(= O)-, -SO2 -alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, fenilo, un heterociclilo saturado monocíclico de 3 a
6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, o un heterociclilo monocíclico aromático de
5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
B es un carbociclilo de 3 a 12 miembros o un heterociclilo de 3 a 12 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho carbociclilo y heterociclilo está cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes R;
cada uno de los R es independientemente alquilo C1-6, ciano, halo, alcoxi C1-6, haloalcoxi C1-6, hidroxilo, hidroxialquilo C1-6, haloalquilo C1-6, oxo, -SO2 -NH2, -SO2-NH(alquilo C1-4), -SO2-N(alquilo C1-4)2, -NH-C(=O)-alquenilo C2-6, -C(=O)-alquilo C1-6,
-C(=O)-alquenilo C2-6, alquil C1-6-OC(=O)-, cicloalquilo C3-6, fenilo o un heterociclilo monocíclico de 3 a 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene la siguiente fórmula (I-a)
Figure imgf000126_0001
3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde D es piperazin-1-ilo, en donde dicho piperazin-1-ilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc.
4. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde D es morfolin-1-ilo, en donde dicho morfolin-1-ilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc.
5. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde D es un heterociclilo monocíclico de 4, 5, 6 o 7 miembros, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes Rc.
6. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde cada uno de A 1 , A2 y A3 representa CH.
7. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde uno de A1 , A2 y A3 representa N y los sustituyentes A restantes representan CH o CRa.
8. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde A1 , A2 y A3 representan N o CH.
9. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde Y es un enlace directo.
10. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en donde Y es -O- o C(=O).
11. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde C1 es hidrógeno y C2 es alquilo C1-4.
12. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en donde C1 y C2 son hidrógeno.
13. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde Rb es alquilo C1-6.
14. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde D está opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes Rc y cada uno de los Rc se selecciona independientemente de oxo; alquilo C1-6, p. ej., metilo; halo, p. ej., fluoro; alcoxi C1-6, p. ej., metoxi; y haloalquilo C1-6, p. ej., trifluorometilo o trifluoroetilo.
15. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde D no está sustituido.
16. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde B es un heterociclilo de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes R.
17. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 16, en donde B es un heterociclilo aromático.
18. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde
cada uno de A1 , A2 y A3 representa CH; o A1 y A3 representan CH y A2 representa N; o al menos uno de A1 , A2 y A3 representa CRa; o A1 representa CRa y A2 y A3 representan CH; o A2 representa CRa y A 1 y A3 representan CH;
C1 es hidrógeno o alquilo C1-4, en particular hidrógeno o metilo;
C2 es hidrógeno o alquilo C1-4 o alcoxi C1-4, p. ej., hidrógeno, metilo o metoxi; en particular hidrógeno o alquilo C1-4, p. ej., hidrógeno o metilo;
Y es un enlace directo, -O- o C(=O), en particular un enlace directo o C(=O), más en particular un enlace directo; cada uno de los Ra, independientemente, es alquilo Ci-6, p. ej., metilo, haloalquilo Ci-6, p. ej., trifluorometilo, halo, p. ej., fluoro, o alcoxi C1-6, p. ej., metoxi; en particular hidrógeno, halo o alquilo C1-6;
Rb es alquilo C1-6, en particular alquilo C1-4, p. ej., metilo o etilo;
D es un heterociclilo saturado monocíclico de 4, 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes Rc; en particular, D es piperazinilo, morfolinilo, piperidinilo, tetrahidropiranilo, pirrolidinilo o azetidinilo, en donde dichos sistemas de anillos están opcionalmente sustituidos con 1 o 2 sustituyentes Rc; en particular D es piperazinilo, morfolinilo o pirrolidinilo opcionalmente sustituido;
cada uno de los Rc es independientemente oxo, alquilo C1-6, p. ej., metilo, halo, p. ej., fluoro, alcoxi C1-6, p. ej., metoxi, o haloalquilo C1-6, p. ej., trifluorometilo o trifluoroetilo; en particular alquilo C1-6, p. ej., metilo;
B es un heterociclilo monocíclico aromático de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S, en donde dicho heterociclilo está opcionalmente sustituido con 1 sustituyente R; en particular B es piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, pirazolilo, tiazolilo, oxazolilo; en particular, B es pirimidinilo no sustituido;
cada uno de los R, independientemente, es alquilo C1-6, p. ej., metilo o isopropilo, alcoxi C1-6, p. ej., metoxi, o cicloalquilo C3-6 , p. ej., ciclopropilo.
19. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el compuesto se selecciona de
Figure imgf000127_0001
o un sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
20. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 19, en donde el compuesto es
Figure imgf000127_0002
o un sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
21. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 19, en donde el compuesto es
Figure imgf000128_0001
o un sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
22. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 19, en donde el compuesto es
Figure imgf000128_0002
o un sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
23. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 19, en donde el compuesto es
Figure imgf000128_0003
0 un sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
24. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 23 y un soporte farmacéuticamente aceptable.
25. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 23
(i) para uso en terapia;
(ii) para uso en la profilaxis o el tratamiento de un estado patológico o afección mediada por una quinasa FGFR;
(iii) para uso en el tratamiento del cáncer;
(iv) para uso en el tratamiento del cáncer, en donde el cáncer es un cáncer que alberga FGFR3 V555M.
ES18880606T 2017-11-24 2018-11-23 Compuestos de pirazolopiridinona Active ES2926518T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2017112835 2017-11-24
PCT/CN2018/117295 WO2019101182A1 (en) 2017-11-24 2018-11-23 Pyrazolopyridinone compounds

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2926518T3 true ES2926518T3 (es) 2022-10-26

Family

ID=66630492

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES18880606T Active ES2926518T3 (es) 2017-11-24 2018-11-23 Compuestos de pirazolopiridinona

Country Status (11)

Country Link
US (1) US11691970B2 (es)
EP (1) EP3713941B1 (es)
JP (1) JP7312171B2 (es)
KR (1) KR20200092987A (es)
CN (1) CN111655690B (es)
AU (1) AU2018370903B2 (es)
BR (1) BR112020010012A2 (es)
CA (1) CA3082509A1 (es)
ES (1) ES2926518T3 (es)
MX (1) MX2020005344A (es)
WO (1) WO2019101182A1 (es)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020135483A1 (en) * 2018-12-26 2020-07-02 Janssen Pharmaceutica Nv Thienopyridinone compounds
CN110172062B (zh) * 2019-06-21 2022-01-07 南京药石科技股份有限公司 一种单氟代螺环化合物的合成方法及其中间体
CN111454214B (zh) * 2020-05-27 2023-04-07 龙曦宁（上海）医药科技有限公司 一种2-甲氧基1-嘧啶乙胺盐酸盐的合成方法

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4666828A (en) 1984-08-15 1987-05-19 The General Hospital Corporation Test for Huntington's disease
US4801531A (en) 1985-04-17 1989-01-31 Biotechnology Research Partners, Ltd. Apo AI/CIII genomic polymorphisms predictive of atherosclerosis
US5272057A (en) 1988-10-14 1993-12-21 Georgetown University Method of detecting a predisposition to cancer by the use of restriction fragment length polymorphism of the gene for human poly (ADP-ribose) polymerase
US5192659A (en) 1989-08-25 1993-03-09 Genetype Ag Intron sequence analysis method for detection of adjacent and remote locus alleles as haplotypes
US6218529B1 (en) 1995-07-31 2001-04-17 Urocor, Inc. Biomarkers and targets for diagnosis, prognosis and management of prostate, breast and bladder cancer
US5882864A (en) 1995-07-31 1999-03-16 Urocor Inc. Biomarkers and targets for diagnosis, prognosis and management of prostate disease
AUPQ969800A0 (en) 2000-08-28 2000-09-21 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Pyrazolopyridine compound and pharmaceutical use thereof
AU2001293233A1 (en) 2000-09-01 2002-03-13 Chiron Corporation Aza heterocyclic derivatives and their therapeutic use
EP1650203B1 (en) 2000-09-11 2008-02-20 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Process of preparation of benzimidazol-2-yl quinolinone derivatives
US20030028018A1 (en) 2000-09-11 2003-02-06 Chiron Coporation Quinolinone derivatives
AU2003288899B2 (en) * 2002-08-23 2009-09-03 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Benzimidazole quinolinones and uses thereof
BR0316229A (pt) 2002-11-13 2005-10-04 Chiron Corp Métodos de tratamento de câncer e métodos relacionados
JP4890255B2 (ja) 2003-11-07 2012-03-07 ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス，インコーポレーテッド 改良された薬物特性を有するキノリノン化合物の薬学的に受容可能な塩
DE102006006072B3 (de) 2006-02-09 2007-08-23 Siemens Ag Verfahren zum Sichern der Authentizität von Nachrichten, die gemäß einem Mobile Internet Protokoll ausgetauscht werden
JP2009532423A (ja) 2006-04-06 2009-09-10 グラクソ グループ リミテッド 抗菌剤としてのピロロ−キノキサリノン誘導体
WO2011099832A2 (en) 2010-02-12 2011-08-18 Crystalgenomics, Inc. Novel benzimidazole compound, preparation method thereof and pharmaceutical composition comprising the same
WO2012018909A1 (en) 2010-08-04 2012-02-09 Takeda Pharmaceutical Company Limited Fused heterocyclic compounds
EP2651885A1 (en) 2010-12-16 2013-10-23 Abbvie Inc. Anti-viral compounds
TWI704151B (zh) 2014-12-22 2020-09-11 美商美國禮來大藥廠 Ｅｒｋ抑制劑
EP3717483B1 (en) * 2017-11-24 2023-09-06 Janssen Pharmaceutica NV Pyrazolopyridinone compounds

Also Published As

Publication number Publication date
AU2018370903B2 (en) 2023-09-21
WO2019101182A1 (en) 2019-05-31
MX2020005344A (es) 2020-08-13
CN111655690B (zh) 2023-01-10
CA3082509A1 (en) 2019-05-31
US20210147411A1 (en) 2021-05-20
EP3713941A4 (en) 2021-04-14
EP3713941B1 (en) 2022-06-22
KR20200092987A (ko) 2020-08-04
JP2021504334A (ja) 2021-02-15
RU2020120784A (ru) 2021-12-24
EP3713941A1 (en) 2020-09-30
AU2018370903A1 (en) 2020-05-14
US11691970B2 (en) 2023-07-04
CN111655690A (zh) 2020-09-11
BR112020010012A2 (pt) 2020-10-13
JP7312171B2 (ja) 2023-07-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2739348T3 (es) Pteridinas como inhibidores del FGFR
ES2791179T3 (es) Derivados de piridopirazina y naftiridina para el tratamiento del cáncer
BR112014010179B1 (pt) composto, composição farmacêutica, e, uso de um composto
US11384075B2 (en) Quinolinone compounds
ES2926518T3 (es) Compuestos de pirazolopiridinona
US20220340598A1 (en) Pyrazolopyridinone compounds
CN113227100B (zh) 噻吩并吡啶酮化合物
RU2806751C2 (ru) Соединения на основе пиразолопиридинона