ES2907551T3

ES2907551T3 - Procedimientos y composiciones para el diagnóstico y pronóstico de una lesión renal y una insuficiencia renal

Info

Publication number: ES2907551T3
Application number: ES15853584T
Authority: ES
Inventors: Joseph Anderberg; Paul Mcpherson; Jeff Gray; Kevin Nakamura; James Patrick Kampf; Thomas Kwan
Original assignee: Astute Medical Inc
Current assignee: Astute Medical Inc
Priority date: 2014-10-20
Filing date: 2015-10-20
Publication date: 2022-04-25
Anticipated expiration: 2035-10-20
Also published as: CN110702921A; EP3210018A2; JP2021039112A; AU2015336069A1; CN107003301B; KR20170084102A; KR102431003B1; EP3210018A4; CA2965153A1; CA2965153C; BR112017008218A2; JP2017533427A; EP3968022A1; JP7002623B2; JP2022046669A; CN107003301A; CN110702921B; US20220236286A1; JP6792553B2; JP2023052587A

Abstract

Procedimiento para evaluar el estado renal en un sujeto, que comprende: realizar un procedimiento de ensayo configurado para detectar quimiocina 14 con motivo C-C y, opcionalmente, además, un procedimiento de ensayo configurado para detectar quimiocina 16 con motivo C-C, y/o un procedimiento de ensayo configurado para detectar receptor de proteína tirosina quinasa UFO en una muestra de orina, sangre, suero o plasma obtenida del sujeto para proporcionar uno o más resultados de ensayo; y correlacionar el resultado o resultados del ensayo con el estado renal del sujeto.

Description

DESCRIPCIÓN

Procedimientos y composiciones para el diagnóstico y pronóstico de una lesión renal y una insuficiencia renal

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

[0001] La siguiente discusión de los antecedentes de la invención se proporciona simplemente para ayudar al lector a entender la invención y no se reconoce para describir o representar la técnica anterior de la presente invención.

[0002] El riñón es responsable de la secreción de agua y soluto del cuerpo. Sus funciones incluyen mantenimiento de equilibrio ácido-base, regulación de concentraciones de electrolitos, control de volumen sanguíneo y regulación de presión arterial. Por definición, la perdida de función renal por lesión y/o enfermedad da lugar a morbilidad y mortalidad sustanciales. Una discusión detallada de lesiones renales se proporciona en Harrison's Principles of Internal Medicine, 17a Edición, McGraw Hill, Nueva York, páginas 1741-1830. La enfermedad y/o lesión renal puede ser aguda o crónica. Las enfermedades renales agudas y crónicas se describen de la siguiente forma (de Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47a Edición, McGraw Hill, Nueva York, páginas 785-815: «La insuficiencia renal es el empeoramiento de la función renal durante horas hasta días que lleva a la retención de desechos nitrogenados (tales como, nitrógeno ureico) y creatinina en la sangre. La retención de estas sustancias se denomina azotemia. La insuficiencia renal crónica (enfermedad renal crónica) deriva de una perdida anormal de función renal durante meses hasta años".

[0003] La insuficiencia renal aguda (IRA, también conocida como lesión renal aguada o AKI) es una reducción repentina (típicamente detectada dentro de aproximadamente 48 horas y 1 semana) en filtración glomerular. La perdida de capacidad de filtración lleva a la retención de productos de desechos nitrogenados (urea y creatina) y no nitrogenados que normalmente se segregan por el riñón, una reducción en producción de orina, o ambos. Se notifica que IRA agrava aproximadamente 5% de admisiones hospitalarias, 4-15% de cirugías de bypass cardiopulmonar y hasta 30% de admisiones de cuidados intensivos. IRA se puede categorizar como prerrenal, renal intrínseca o postrenal en causación. La enfermedad renal intrínseca se puede dividir aún más en anomalías glomerulares, tubulares, intersticiales y vasculares. Las causas principales de IRA se describen en la siguiente tabla, que se adapta del Manual de Merck, 17a edición, Capítulo 222:

[0004] En el caso de IRA isquémica, se puede dividir el curso de la enfermedad en cuatro fases. Durante la fase de iniciación que dura desde horas hasta días, la perfusión reducida del riñón se convierte en la lesión. La ultrafiltración glomerular se reduce, el flujo de filtrado se reduce debido a los residuos dentro de túbulos, y se produce el escape interior de filtrado a través de epitelio dañado. Se puede mediar la lesión renal durante esta fase utilizando reperfusión del riñón. La iniciación seguida de una fase de extensión que se caracteriza por lesión isquémica continua e inflamación y puede suponer daño endotelial y congestión vascular. Durante la fase de mantenimiento que dura entre 1 y 2 semanas, se produce lesión de células renales y la filtración glomerular y el gasto urinario alcanza un mínimo. Puede producirse una fase de recuperación en la que el epitelio renal se repara y TFG se recupera gradualmente. A pesar de esto, la tasa de supervivencia de sujetos con IRA puede ser tan baja como aproximadamente 60%.

[0005] La lesión renal aguda causada por agentes de contraste radiológico (también llamados medio de contraste) y otras nefrotoxinas, tal como, ciclosporina, antibióticos que incluyen aminoglucósidos y fármacos contra el cáncer, tal como, cisplatino manifiesta durante un periodo de tiempo desde días hasta aproximadamente una semana. Se cree que la nefropatía inducida por contraste (NIC), que es IRA causada por agentes de contraste radiológico) está causada por vasoconstricción intrarrenal (que lleva a lesión isquémica) y a partir de la generación de especies de oxígeno reactivo que son directamente tóxicos para células epiteliales de túbulo renal. Tradicionalmente NIC se presenta como aumento agudo (aparición dentro de 24-48 horas), pero reversible (pico 3-5 días, resolución dentro de 1 semana) en nitrógeno ureico y creatina en suero en sangre.

[0006] Un criterio declarado comúnmente para definir y detectar IRA es un aumento repentino (típicamente dentro de 2-7 días o dentro de un periodo de hospitalización) de creatina en suero. Aunque el uso de subida de creatina en suero para definir y detectar iRa está consolidado, la magnitud de la subida de creatina en suero y el periodo de tiempo en el que se mide para definir IRA cambia considerablemente entre publicaciones. Tradicionalmente, relativamente altos aumentos en creatina en suero, tales como, 100%, 200%, un aumento de como mínimo 100% para un valor por encima de 2 mg/dL y otras definiciones se utilizaron para definir IRA. Sin embargo, la tendencia reciente está en utilizar aumentos más pequeños de creatina en suero para definir IRA. La relación entre el aumento de creatina en suero, IRA y los riesgos para la salud asociados se evaluaron en Praught and Shlipak, Curr Opin Nephro1Hypertens 14:265-270, 2005 y Chertow et al, J Am Soc Nephrol 16: 3365-3370, 2005.

[0007] Como se describe en estas publicaciones, se reconoce que el empeoramiento agudo de función renal (IRA) y el riesgo aumentado de muerte y otras consecuencias perjudiciales están asociados con aumentos muy pequeños en creatina en suero. Se puede determinar estos aumentos como un valor (porcentaje) relativo o un valor normal. Se ha informado que los aumentos relativos en creatina en suero tan bajos como el 20% del valor antes de la lesión indican el empeoramiento agudo de función renal (IRA) y aumentan el riesgo para la salud, pero el valor declarado más comúnmente para definir IRA y el riesgo aumentado para la salud es un aumento relativo de como mínimo 25%. Se ha informado de los aumentos nominales tan bajos como 0,3 mg/dL, 0,2 mg/dL o incluso 0,1 mg/dL para indicar el empeoramiento de la función renal y el riesgo aumentado de la muerte. Se han utilizado diferentes periodos de tiempo para aumentar la creatina en suero hasta estos límites para definir IRA, por ejemplo, que van desde 2 días, 3 días, 7 días o un periodo de tiempo variable como el tiempo que el paciente está ingresado en el hospital o la unidad de cuidados intensivos. Estos estudios indican que no existe un límite particular de aumento de creatina en suero (o periodo de tiempo para el aumento) para empeorar la función renal o IRA, pero más bien un aumento continuo de riesgo con elevada magnitud de aumento de creatina en suero.

[0008] Un estudio (Lassnigg et all, J Am Soc Nephrol 15:1597-1605, 2004) investigó tanto los aumentos como las disminuciones de creatina en suero. Los pacientes con una caída leve de creatina en suero de -0,1 hasta -0,3 mg/dL después de una cirugía en el corazón tenían la tasa más baja de mortalidad. Los pacientes con una caída mayor de creatina en suero (más de o igual a -0,4 mg/dL) o cualquier aumento de creatina en suero tenían una tasa más alta de mortalidad. Estos descubrimientos han llevado a los autores a la conclusión de que incluso los cambios más sutiles en la función renal (como los detectados por los pequeños cambios de creatina dentro de 48 horas después de la cirugía) afectan seriamente resultados de los pacientes. En un esfuerzo para llegar a un consenso sobre un sistema de clasificación unificado para utilizar la creatina en suero para definir IRA en ensayos clínicos y en práctica clínica, Bellomo et al., Crit Care. 8(4):R204-12, 2004,

propone las siguiente clasificaciones para estratificar los pacientes con IRA:

"Riesgo": la creatina en suero aumentó 1,5 veces a partir de punto de referencia O producción de orina de <0,5 ml/kg de peso corporal/hora durante 6 horas;

"Lesión": la creatina en suero aumentó 2,0 veces a partir de punto de referencia O producción de orina de <0,5 ml/kg/hora durante 12 horas;

"Fallo": la creatina en suero aumentó 3,0 veces a partir de punto de referencia O creatinina >355 pmol/l (con un aumento de >44) o producción de orina inferior a 0,3 ml/kg/hora o anuria durante como mínimo 12 horas;

E incluyó dos resultados clínicos:

"Perdida": necesidad persistente de terapia de reemplazo renal durante más de cuatro semanas.

"ESRD": enfermedad renal en etapa terminal - la necesidad de diálisis durante más de 3 meses.

[0009] Estos parámetros se llaman criterio RIFLE, que proporcionan una herramienta clínica útil para clasificar los estados renales. Como se expuso en Kellum, Crit. Care Med. 36: S141-45, 2008 y Ricci et al., Kidney Int. 73, 538-546, 2008, los criterios RIFLE proporcionan una definición uniforme de IRA que se ha confirmado en numerosos estudios.

[0010] Más recientemente, Mehta et al., Crit. Care 11:R31 (doi:10.1186.cc5713), 2007, propone las siguientes clasificaciones similares para estratificar pacientes con IRA, que se ha modificado a partir de RIFLE:

"Etapa I": aumento de la creatina en suero de más de o igual a 0,3 mg/dL (>□ 26,4 pmol/L) o aumento de más de o igual al 150% (1,5 veces) a partir de punto de referencia O producción de orina inferior a 0,5 mL/kg por hora durante más de 6 horas;

"Etapa II": aumento de la creatina en suero hasta más de 200% (> 2 veces) a partir de punto de referencia O producción de orina inferior a 0,5 mL/kg por hora durante más de 12 horas;

"Etapa III": aumento de la creatina en suero hasta más de 300% (> 3 veces) a partir de punto de referencia O la creatina en suero > □ 354pmol/L acompañada por un aumento agudo de como mínimo 44 pmol/L O producción de orina inferior a 0,3 mL/kg por hora durante 24 horas o anuria durante 12 horas.

[0011] El Comité de Trabajo sobre el Consenso sobre NIC (McCollough et al, Rev Cardiovasc Med. 2006;7(4):177-197) utiliza un aumento de creatina en suero del 25% para definir nefropatía inducida por contraste (que es un tipo de IRAI). Aunque diferentes grupos proponen criterios ligeramente distintos para utilizar la creatina en suero para detectar IRA, el consenso es que los pequeños cambios en la creatina en suero, tales como 0,3 mg/dL o 25%, son suficientes para dectar IRA (empeoramiento de función renal) y que la magnitud del cambio de la creatina en suero es un indicador de la gravedad de iRa y el riesgo de mortalidad.

[0012] Aunque la medición en serie de la creatina en suero durante unos días es un procedimiento aceptable de la detección y el diagnóstico de IRA y se considera una de las herramientas más importantes para evaluar a los pacientes con IRA, se considera generalmente que la creatina en suero tiene diferentes limitaciones en el diagnóstico, la evaluación y el seguimiento de los pacientes con IRA. El periodo de tiempo de la creatina en suero para llegar a los valores (por ejemplo, un aumento de 0,3 mg/dL o 25%) que se considera diagnóstico para IRA puede ser de 48 horas o más dependiendo de la definición utilizada. Dado que la lesión celular en IRA puede producirse en un plazo de horas, los aumentos de la creatina en suero detectados en 48 horas o más pueden ser un indicador tardío de lesión y, por lo tanto, confiar en la creatina en suero puede retrasar el diagnóstico de IRA. Es más, la creatina en suero no es un buen indicador del estado exacto de riñón y los tratamientos que se necesitan durante las fases más agudas de IRA cuando la función renal cambia rápidamente. Algunos pacientes con IRA se recuperarán completamente, algunos necesitarán diálisis (de corto plazo o de largo plazo) y algunos tendrán otros resultados perjudiciales que incluyen muerte, eventos adversos cardíacos graves y enfermedad renal crónica. Debido a que la creatina en suero es un marcador de la tasa de filtración, no distingue entre las causas de IRA (prerrenal, renal intrínseca, obstrucción postrenal, ateroembólica, etc.) o la categoría o la localización de lesión en enfermedad renal intrínseca (por ejemplo, tubular, glomerular o intestinal en origen). El gasto urinario se limita de manera similar. Conocer tales cosas puede ser de vital importancia en la gestión y el tratamiento de pacientes con IRA.

[0013] Estas limitaciones subrayan la necesidad de mejores procedimientos para detectar y evaluar IRA, en particular, durante las etapas tempranas y subclínicas, pero también en etapas tardías cuando ocurre la recuperación y la reparación de riñón. Además, existe una necesidad de identificar mejor a los pacientes que están en riesgo de tener IRA. Los ejemplos de ensayos configurados para detectar una o más marcadores de lesiones renales comprenden proteína 7 de unión del factor de crecimiento similar a la insulina se dan a conocer en EP2666872 A1. Una quimiocina, HCC-1, de plasma humano se identifico en el estudio de Schulz-Knappe et al., J Exp Med (1995);183(1):295-299.

BREVE RESUMEN DE LA DIVULGACIÓN QUE INCLUYE LA INVENCIÓN

[0014] Es un propósito de la divulgación proporcionar procedimientos y composiciones para evaluar función renal en un sujeto. Como se describe en el presente documento, la medición de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y receptor de la proteína tirosina quinasa UFO (a los que se refiere comúnmente en el presente documento como «marcadores de lesión renal» e individualmente como «marcador de lesión renal») pueden utilizarse para diagnosticar, pronosticar, estratificar el riesgo, clasificar por etapas, monitorizar, categorizar y determinar diagnósticos y regímenes de tratamiento adicionales en sujetos que padecen o están en riesgo de padecer una lesión de función renal, función renal reducida y/o insuficiencia renal (también llamada lesión renal aguada).

[0015] Estos marcadores de lesión renal pueden utilizarse individualmente o en paneles que comprenden una multitud de marcadores de lesión renal, para la estratificación de riesgo (es decir, para identificar sujetos en riesgo de una futura lesión de función renal, para futura evolución de función renal reducida, para futura evaluación de IRA, para futura mejora de función renal, etc.); para el diagnóstico de enfermedades existentes (es decir, para identificar sujetos que han sufrido una lesión de función renal, quienes han progresado hasta función renal reducida, quienes han progresado hasta IRA, etc.); para monitorizar el deterioro o la mejora de función renal; y para predecir un resultado médico futuro, tal como, función renal mejorada o en proceso de deterioro, un riesgo de mortalidad disminuido o aumentado, un riesgo disminuido o aumentado que un sujeto necesitará terapia de reemplazo renal (es decir, hemodiálisis, diálisis peritoneal, hemofiltración y/o trasplante de riñón, un riesgo disminuido o aumentado que un sujeto se recuperará de una lesión renal, un riesgo disminuido o aumentado que un sujeto se recuperará de IRA, un riesgo disminuido o aumentado que un sujeto desarrollará la fase final de enfermedad renal, un riesgo disminuido o aumentado que un sujeto padecerá rechazo de un riñón trasplantado, etc. Basándose en la divulgación del presente documento, se proporciona la invención tal como se define en las reivindicaciones adjuntas.

[0016] En un primer aspecto, la presente divulgación se refiere a procedimientos de evaluación de estado renal en un sujeto. Estos procedimientos comprender realizar un procedimiento de ensayo que se configura para detectar uno o más marcadores de lesión renal de la presente divulgación en una muestra de fluido corporal obtenida del sujeto. El(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, a continuación, tiene(n) relación con el estado renal del sujeto. Esta correlación con el estado renal puede incluir la correlación del(los) resultado(s) de ensayo con uno o más de estratificación de riesgo, diagnóstico, pronóstico, clasificación por etapas, clasificación y monitorización del sujeto como se describe en el presente documento. Por consiguiente, la presente divulgación utiliza uno o más marcadores de lesión renal de la presente divulgación para la evaluación de lesión renal.

[0017] En determinados casos, los procedimientos de evaluación de estado renal descritos en el presente documento son procedimientos de estratificación de riesgo del sujeto; es decir, asignan una probabilidad de uno o más cambios futuros en el estado renal al sujeto. En estos casos, el(los) resultado(s) de ensayo se relaciona(n) con uno o más de dichos cambios futuros. A continuación, los casos preferidos de estratificación de riesgo.

[0018] En los casos preferidos de estratificación de riesgo, estos procedimientos comprenden determinar un riesgo para el sujeto de una futura lesión de función renal, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con una probabilidad de dicha futura lesión de función renal. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador de lesión renal con «avance positivo», se asigna al sujeto una probabilidad aumentada de sufrir una futura lesión de función renal, cuando la concentración medida está por encima del umbral en relación con una probabilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral. Para un marcador de lesión renal con «avance negativo», se asigna al sujeto una probabilidad aumentada de sufrir una futura lesión de función renal, cuando la concentración medida está por debajo del umbral en relación con una probabilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral.

[0019] En otros casos preferidos de estratificación de riesgo, estos procedimientos comprenden determinar un riesgo para el sujeto de una futura función renal reducida, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con una probabilidad de dicha futura función renal reducida. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador de lesión renal con «avance positivo», se asigna al sujeto una probabilidad aumentada de sufrir una futura función renal reducida, cuando la concentración medida está por encima del umbral en relación con una probabilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral. Para un marcador de lesión renal con «avance negativo», se asigna al sujeto una probabilidad aumentada de una futura función renal reducida, cuando la concentración medida está por debajo del umbral en relación con una probabilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral.

[0020] En otros casos preferidos de estratificación de riesgo, estos procedimientos comprenden determinar para el sujeto una probabilidad de una futura mejora en función renal, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con una probabilidad de dicha futura mejora en función renal. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador de lesión renal con «avance positivo», se asigna al sujeto una probabilidad aumentada de una futura mejora en función renal, cuando la concentración medida está por debajo del umbral en relación con una probabilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral. Para un marcador de lesión renal con «avance negativo», se asigna al sujeto una probabilidad aumentada de sufrir una futura mejora en función renal, cuando la concentración medida está por encima del umbral en relación con una probabilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral.

[0021] En otros casos preferidos de estratificación de riesgo, estos procedimientos comprenden determinar un riesgo para el sujeto de una progresión hacia IRA, y el(los) resultado(s), por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con una probabilidad de dicha progresión hacia IRA. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador de lesión renal con «avance positivo», se asigna al sujeto una probabilidad aumentada de progresión hacia IRA, cuando la concentración medida está por encima del umbral en relación con una probabilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral. Para un marcador de lesión renal con «avance negativo», se asigna al sujeto una probabilidad aumentada de progresión hacia IRA, cuando la concentración medida está por debajo del umbral en relación con una probabilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral.

[0022] Y en otros casos preferidos de estratificación de riesgo, estos procedimientos comprenden determinar un resultado de riesgo para el sujeto, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con una probabilidad de la aparición de un resultado clínico relacionado con una lesión renal sufrida por el sujeto. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador de lesión renal con «avance positivo», se asigna al sujeto una probabilidad aumentada de uno o más de: lesión renal aguda, progresión hacia una etapa de deterioro de IRA, mortalidad, una necesidad de terapia de reemplazo renal, una necesidad de retirada de toxinas renales, última etapa de enfermedad renal, insuficiencia cardíaca, derrame, infarto de miocardio, progresión hacia enfermedad renal crónica, etc., cuando la concentración medida está por encima del umbral en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral. Para un marcador de lesión renal con «avance negativo», se asigna al sujeto una probabilidad aumentada de uno o más de: lesión renal aguda, progresión hacia una etapa de deterioro de IRA, mortalidad, una necesidad de terapia de reemplazo renal, una necesidad de retirada de toxinas renales, última etapa de enfermedad renal, insuficiencia cardíaca, derrame, infarto de miocardio, progresión hacia enfermedad renal crónica, etc., cuando la concentración medida está por debajo del umbral en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral.

[0023] En las realizaciones de estratificación de riesgo, preferiblemente la posibilidad o el riesgo asignado es el que es más o menos probable que se produzca un hecho de interés en un periodo de 180 días cuando se obtiene una muestra de fluido corporal del sujeto. En las realizaciones preferidas particulares, la probabilidad o el riesgo asignados se refieren a un hecho de interés que se produce dentro de un periodo corto de tiempo, tal como 18 meses, 120 días, 90 días, 60 días, 45 días, 30 días, 21 días, 14 días, 7 días, 5 días, 96 horas, 72 horas, 48 horas, 36 horas, 24 horas, 12 horas o menos. Un riesgo a las 0 horas de tiempo cuando se obtiene la muestra de fluido corporal del sujeto es equivalente a un diagnóstico de una condición actual.

[0024] En las realizaciones preferidas de estratificación de riesgo, el sujeto se selecciona para la estratificación de riesgo en base a la preexistencia en el sujeto de uno o más factores de riesgo para IRA prerrenal, renal intrínseca o postrenal. Por ejemplo, un sujeto que se somete o se ha sometido a cirugía vascular mayor, bypass de la arteria coronaria u otra cirugía cardíaca; un sujeto que tiene insuficiencia cardíaca congestiva preexistente, preeclampsia, eclampsia, diabetes mellitus, hipertensión, enfermedad de la arteria coronaria, proteinuria, insuficiencia renal, filtración glomerular por debajo del parámetro normal, cirrosis, creatina en suero por encima del parámetro normal o sepsis; o un sujeto que se expone a NSAID, ciclosporinas, tacrolimus, aminoglucósidos, foscarnet, etilenglicol, hemoglobina, mioglobina, ifosfamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radiopacos o estreptozotocina son todos sujetos preferidos para la monitorización de riesgos asociados con los procedimientos descritos en el presente documento. Esta lista no pretende ser limitativa. En este contexto «preexistente» significa que existe el factor de riesgo en el periodo de tiempo que se obtiene la muestra de fluido corporal del sujeto. En las realizaciones preferidas particularmente, un sujeto se escoge para la estratificación de riesgo en base a un diagnóstico existente de lesión en función renal, función renal reducida o IRA.

[0025] En otros casos, los procedimientos para la evaluación de estado renal descrito en el presente documento son los procedimientos para el diagnóstico de una lesión renal en el sujeto; es decir, evaluando si un sujeto ha sufrido o no una lesión de función renal, función renal reducida o IRA. En estos casos, el(los) resultado(s) de ensayo se relaciona(n) con la aparición o no aparición de un cambio en el estado renal. Los siguientes son los casos preferidos de diagnóstico.

[0026] En los casos preferidos de diagnóstico, estos procedimientos comprenden diagnosticar la aparición o la no aparición de una lesión en función renal, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con la aparición o la no aparición de dicha lesión. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador con avance positivo, se asigna al sujeto una posibilidad aumentada de la aparición de una lesión en función renal, cuando la concentración medida está por encima del umbral (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, una posibilidad aumentada de la no aparición de una lesión en función renal puede asignarse al sujeto (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral). Para un marcador con avance negativo, se asigna al sujeto una posibilidad aumentada de la aparición de una lesión en función renal, cuando la concentración medida está por debajo del umbral (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, una posibilidad aumentada de la no aparición de una lesión en función renal puede asignarse al sujeto (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral).

[0027] En otros casos preferidos de diagnóstico, estos procedimientos comprenden diagnosticar la aparición o la no aparición de función renal reducida, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con la aparición o la no aparición de una lesión causada por función renal reducida. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador con avance positivo, se asigna al sujeto una posibilidad aumentada de la aparición de una lesión causada por función renal reducida, cuando la concentración medida está por encima del umbral (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, una posibilidad aumentada de la no aparición de una lesión causada por función renal reducida puede asignarse al sujeto (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral). Para un marcador con avance negativo, se asigna al sujeto una posibilidad aumentada de la aparición de una lesión causada por función renal reducida, cuando la concentración medida está por debajo del umbral (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, una posibilidad aumentada de la no aparición de una lesión causada por función renal reducida puede asignarse al sujeto (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral).

[0028] En otros casos preferidos de diagnóstico, estos procedimientos comprenden diagnosticar la aparición o la no aparición de IRA, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con la aparición o la no aparición de una lesión causada por IRA. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador con avance positivo, se asigna al sujeto una posibilidad aumentada de la aparición de IRA, cuando la concentración medida está por encima del umbral (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, una posibilidad aumentada de la no aparición de IRA puede asignarse al sujeto (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral). Para un marcador con avance negativo, se asigna al sujeto una posibilidad aumentada de la aparición de IRA, cuando la concentración medida está por debajo del umbral (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, una posibilidad aumentada de la no aparición de IRA puede asignarse al sujeto (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral).

[0029] En otros casos preferidos de diagnóstico, estos procedimientos comprenden diagnosticar a un sujeto como el que necesita una terapia de reemplazo renal, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con una necesidad de terapia de reemplazo renal. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador con avance positivo, se asigna al sujeto una posibilidad aumentada de la aparición de una lesión creando una necesidad de terapia de reemplazo renal, cuando la concentración medida está por encima del umbral (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, una posibilidad aumentada de la no aparición de una lesión creando una necesidad de terapia de reemplazo renal puede asignarse al sujeto (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral). Para un marcador con avance negativo, se asigna al sujeto una posibilidad aumentada de la aparición de una lesión creando una necesidad de terapia de reemplazo renal, cuando la concentración medida está por debajo del umbral (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, una posibilidad aumentada de la no aparición de una lesión creando una necesidad de terapia de reemplazo renal puede asignarse al sujeto (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral).

[0030] En otros casos preferidos de diagnóstico, estos procedimientos comprenden diagnosticar a un sujeto como el que necesita un trasplante de riñón, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con una necesidad de trasplante de riñón. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador con avance positivo, se asigna al sujeto una posibilidad aumentada de la aparición de una lesión creando una necesidad de trasplante de riñón, cuando la concentración medida está por encima del umbral (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, una posibilidad aumentada de la no aparición de una lesión creando una necesidad de trasplante de riñón puede asignarse al sujeto (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral). Para un marcador con avance negativo, se asigna al sujeto una posibilidad aumentada de la aparición de una lesión creando una necesidad de trasplante de riñón, cuando la concentración medida está por debajo del umbral (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por encima del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, una posibilidad aumentada de la no aparición de una lesión creando una necesidad de trasplante de riñón puede asignarse al sujeto (en relación con la posibilidad asignada, cuando la concentración medida está por debajo del umbral).

[0031] En otros casos, los procedimientos para la evaluación de estado renal descrito en el presente documento son los procedimientos para la supervisión de una lesión renal en el sujeto; es decir, evaluando si la función renal está mejorando o empeorando en un sujeto que ha sufrido una lesión de función renal, función renal reducida o IRA. En estos casos, el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, tiene(n) relación con la aparición o la no aparición de un cambio en el estado renal. Los siguientes son los casos preferidos de diagnóstico.

[0032] En los casos preferidos de supervisión, estos procedimientos comprenden supervisar el estado renal en un sujeto que padece una lesión en función renal, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con la aparición o la no aparición de un cambio en el estado renal del sujeto. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador con avance positivo, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar al sujeto un deterioro de función renal; alternativamente, cuando la concentración está por debajo del umbral, se puede asignar al sujeto una mejora de función renal. Para un marcador con avance negativo, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar al sujeto un deterioro de función renal; alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar al sujeto una mejora de función renal.

[0033] En los casos preferidos de supervisión, estos procedimientos comprenden supervisar el estado renal en un sujeto que padece función renal reducida, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con la aparición o la no aparición de un cambio en el estado renal del sujeto. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador con avance positivo, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar al sujeto un deterioro de función renal; alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar al sujeto una mejora de función renal. Para un marcador con avance negativo, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar al sujeto un deterioro de función renal; alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar al sujeto una mejora de función renal.

[0034] En otros casos preferidos de supervisión, estos procedimientos comprenden supervisar el estado renal en un sujeto que padece función renal aguda, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con la aparición o la no aparición de un cambio en el estado renal del sujeto. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador con avance positivo, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar al sujeto un deterioro de función renal; alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar al sujeto una mejora de función renal. Para un marcador con avance negativo, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar al sujeto un deterioro de función renal; alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar al sujeto una mejora de función renal.

[0035] En otros casos adicionales preferidos de supervisión, estos procedimientos comprenden supervisar el estado renal en un sujeto que está en riesgo de una lesión de función renal debido a la preexistencia de uno o más factores de riesgo de IRA prerrenal, renal intrínseca o postrenal, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, se relaciona(n) con la aparición o la no aparición de un cambio en el estado renal del sujeto. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador con avance positivo, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar al sujeto un deterioro de función renal; alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar al sujeto una mejora de función renal. Para un marcador con avance negativo, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar al sujeto un deterioro de función renal; alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar al sujeto una mejora de función renal.

[0036] En otras realizaciones preferidas de supervisión, estos procedimientos comprenden supervisar el estado renal en un sujeto que tiene o está en riesgo de una lesión de función renal para futura persistencia de lesión renal aguada. «Futura persistencia» como se utiliza en el presente documento se refiere a una lesión renal aguda existente que permanecerá durante un periodo seleccionado del grupo que consiste en 21 días, 14 días, 7 días, 5 días, 96 horas, 72 horas, 48 horas, 36 horas, 24 horas y 12 horas. En determinadas realizaciones el sujeto tiene una lesión renal aguada cuando se obtiene la muestra. Esto no pretende significar que el sujeto tiene que tener una lesión renal aguada en el momento de la obtención de la muestra, pero más bien que cuando aparece una lesión renal aguda, el sujeto padece una lesión renal aguda que será persistente. En diferentes casos, el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, tiene(n) relación con la futura persistencia de la lesión renal aguda en el sujeto. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración(es) medida(s) puede compararse con un valor umbral. Para un marcador con avance positivo, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar al sujeto una futura persistencia de lesión renal aguda; alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar al sujeto una futura mejora de función renal. Para un marcador con avance negativo, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar al sujeto una futura persistencia de lesión renal aguda; alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar al sujeto una futura mejora de función renal.

[0037] En otros casos adicionales, los procedimientos de evaluación de estado renal descrito en el presente documento son los procedimientos de clasificación de una lesión renal en el sujeto; es decir, determinar si una lesión renal en un sujeto es prerrenal, renal intrínseca o postrenal; y/o subdividir más estas clases en subclases, tales como lesión tubular renal, glomerulonefritis aguda, nefritis tubulointersticial aguda, nefropatía vascular aguada o enfermedad infiltrativa; y/o asignar una probabilidad que un sujeto progresará hasta una etapa particular de RIFLE. En estos casos, el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, tiene(n) relación con una clase y/o subclase particular. Los siguientes son los casos preferidos de clasificación.

[0038] En los casos preferidos de clasificación, estos procedimientos comprenden determinar si una lesión renal en un sujeto es prerrenal, renal intrínseca o postrenal; y/o subdividir más estas clases en subclases, tales como lesión tubular aguda, glomerulonefritis aguda, nefritis tubulointersticial aguda, nefropatía vascular aguada o enfermedad infiltrativa; y/o asignar una probabilidad que un sujeto progresará hasta una etapa particular de RIFLE, y el(los) resultado(s) de ensayo, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO, tiene(n) relación con la clasificación de lesión del sujeto. Por ejemplo, la concentración medida se puede comparar con un valor umbral, y cuando la concentración medida está por encima del umbral, se asigna una clasificación particular; alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se asigna una clasificación diferente al sujeto.

[0039] Un experto puede utilizar una variedad de procedimientos para llegar a un valor umbral deseado para su uso en estos procedimientos. Por ejemplo, el valor umbral se puede determinar a partir de una población de sujetos normales seleccionando una concentración que representa el 75°, 85°, 90°, 95° o 99° percentil de un marcador de lesión renal medido en tales sujetos normales. Alternativamente, el valor umbral puede determinarse a partir de una población «deseada» de sujetos, por ejemplo, aquellos que padecen una lesión o tienen una predisposición para una lesión (por ejemplo, progresión hacia IRA o algún otro resultado clínico, tal como muerte, diálisis, trasplante de riñón, etc.) seleccionando una concentración que representa el 75°, 85°, 90°, 95° o 99° percentil de un marcador de lesión renal medido en tales sujetos. En otra alternativa, el valor umbral puede determinarse a partir de una medición anterior de un marcador de lesión renal en el mismo sujeto; es decir, un cambio temporal en el nivel de un marcador de lesión renal en el sujeto puede utilizarse para asignar un riesgo al sujeto.

[0040] Sin embargo, la discusión anterior no pretende significar, que los marcadores de lesión renal de la presente invención tienen que compararse con los umbrales individuales correspondientes. Los procedimientos de combinación de resultados de ensayo pueden comprender el uso de regresión logística multivariante, modelo loglineal, análisis de redes neuronales, análisis n-de-m, análisis de árbol de decisión, determinación de promedios de marcadores, etc. Esta lista no pretende ser limitativa. En estos procedimientos, un resultado de combinaciones que se determina combinando marcadores individuales puede tratarse como si fuera un marcador por si solo; es decir, un umbral puede determinarse para el resultado de combinaciones como se describe en el presente documento para marcadores individuales, y el resultado de combinaciones para un paciente individual comparado con este umbral.

[0041] La habilidad de una prueba particular de distinguir dos poblaciones puede establecerse utilizando el análisis ROC. Por ejemplo, pueden utilizarse las curvas ROC establecidas a partir de una «primera» subpoblación que está predispuesta a uno o más cambios en el estado renal, y una «segunda» subpoblación que no está predispuesta para calcular una curva ROC, y el área bajo la curva proporciona una medida de la calidad de la prueba. Preferiblemente, las pruebas descritas en el presente documento proporcionan un área de curva ROC más grande que 0,5, preferiblemente como mínimo 0,8, aun más preferiblemente como mínimo 0,9 y lo más preferiblemente como mínimo 0,95.

[0042] En determinados aspectos, la concentración medida de uno o más marcadores de lesión renal o una combinación de tales marcadores puede tratarse como variables continuos. Por ejemplo, cualquier concentración particular puede convertirse en una probabilidad correspondiente a una futura reducción en función renal para el sujeto, la aparición de una lesión, una clasificación, etc. En una alternativa adicional, un umbral que puede proporcionar un nivel aceptable de especificidad y sensibilidad en separar una población de sujetos en «grupos», tal como una «primera» subpoblación (por ejemplo, que esta predispuesta a uno o más cambios futuros en el estado renal, la aparición de una lesión, una clasificación, etc.) y una «segunda» subpoblación que no está tan predispuesta. Un valor de umbral se selecciona para separar estas primera y segunda poblaciones utilizando una o más de las siguientes medidas de precisión de ensayo:

una razón de momios mayor que 1, preferiblemente como mínimo 2 o más o aproximadamente 0,5 o menos, más preferiblemente como mínimo aproximadamente 3 o más o aproximadamente 0,33 o menos, aun más preferiblemente como mínimo aproximadamente 4 o más o aproximadamente 0,25 o menos, incluso más preferiblemente como mínimo aproximadamente 5 o más o aproximadamente 0,2 o menos y lo más preferiblemente como mínimo aproximadamente 10 o más o aproximadamente 0,1 o menos;

una especificidad mayor de 0,5, preferiblemente como mínimo aproximadamente 0,6, más preferiblemente como mínimo aproximadamente 0,7, aún más preferiblemente como mínimo aproximadamente 0,8, incluso más preferiblemente como mínimo aproximadamente 0,9 y lo más preferiblemente como mínimo aproximadamente 0,95, con una sensibilidad correspondiente superior a 0,2, preferiblemente superior a aproximadamente 0,3, más preferiblemente superior a aproximadamente 0,4, aún más preferiblemente superior a aproximadamente 0,5, incluso más preferiblemente superior a aproximadamente 0,6, todavía más preferiblemente superior a aproximadamente 0,7, aún más preferiblemente superior a aproximadamente 0,8, más preferiblemente superior a aproximadamente 0,9 y lo más preferiblemente superior a aproximadamente 0,95;

una sensibilidad mayor de 0,5, preferiblemente como mínimo aproximadamente 0,6, más preferiblemente como mínimo aproximadamente 0,7, aún más preferiblemente como mínimo aproximadamente 0,8, incluso más preferiblemente como mínimo aproximadamente 0,9 y lo más preferiblemente como mínimo aproximadamente 0,95, con una especificidad correspondiente superior a 0,2, preferiblemente superior a aproximadamente 0,3, más preferiblemente superior a aproximadamente 0,4, aún más preferiblemente superior a aproximadamente 0,5, incluso más preferiblemente superior a aproximadamente 0,6, todavía más preferiblemente superior a aproximadamente 0,7, aún más preferiblemente superior a aproximadamente 0,8, más preferiblemente superior a aproximadamente 0,9 y lo más preferiblemente superior a aproximadamente 0,95;

como mínimo aproximadamente 75% de sensibilidad combinada con como mínimo 75% de especificidad;

una proporción de probabilidad positiva (calculada como sensibilidad/(1-especificidad)) mayor de 1, como mínimo aproximadamente 2, más preferiblemente como mínimo aproximadamente 3, aún más preferiblemente como mínimo aproximadamente 5 y más preferiblemente como mínimo aproximadamente 10; o

una proporción de probabilidad negativa (calculada como (1-sensibilidad)/especificidad) menor de 1, menor de o igual a aproximadamente 0,5, más preferiblemente menor de o igual aproximadamente 0,3 y más preferiblemente menor de o igual aproximadamente 0,1.

[0043] El término «aproximadamente» en el contexto de cualquiera de las mediciones anteriores hace referencia a /-5% de una medición dada.

[0044] Pueden utilizarse múltiples umbrales para evaluar el estado renal en un sujeto. Por ejemplo, una «primera» subpoblación que está predispuesta a uno o más cambios futuros en estado renal, la aparición de una lesión, una clasificación, etc., y una «segunda» subpoblación que no está predispuesta pueden combinarse en un grupo único. A continuación el grupo se subdivide en tres o más partes iguales (conocidas como terciles, cuartiles, quintiles, etc., dependiendo del número de subdivisiones). Una razón de momios se asigna a sujetos basándose en una subdivisión a la que pertenecen. Si uno se considera un tercil, el tercil más bajo o el más alto puede utilizarse como una referencia de comparación con otras subdivisiones. A esta subdivisión de referencia se asigna una razón de momios 1. Al segundo tercil se le asigna una razón de momios que está relacionada con aquel primer tercil. Es decir, alguien en el segundo tercil podría estar 3 veces más propenso a padecer uno o más cambios futuros en estado renal en comparación con alguien en el primer tercil. Al tercer tercil se le asigna, también, una razón de momios que está relacionada con aquel primer tercil.

[0045] En determinadas realizaciones, el procedimiento de ensayo es un inmunoensayo. Los anticuerpos que se utilizan en tales ensayos se unirán de manera específica con un marcador de lesión renal de longitud completa de interés y, también, pueden unirse a uno o más polipéptidos que están «relacionados» con los mismos como aquel término se define de aquí en adelante. Un experto en la técnica conoce bien los numerosos formatos de inmunoensayos. Las muestras preferidas de fluidos corporales se seleccionan del grupo que consiste en orina, sangre, suero, saliva, lágrimas y plasma.

[0046] Las etapas de procedimiento anterior no deberían interpretarse como las que significan que el(los) resultado(s) de ensayo de marcador de lesión renal se utiliza(n) de manera aislada en los procedimientos descritos en el presente documento. Más bien, las variables adicionales u otros indicios clínicos pueden incluirse en los procedimientos descritos en el presente documento. Por ejemplo, un procedimiento de estratificación de riesgo, diagnóstico, clasificación, supervisión, etc. puede combinar el(los) resultado(s) de ensayo con una o más variables medidas para el sujeto seleccionado del grupo que consiste en información demográfica (por ejemplo, peso, sexo, edad, raza), historia médica (por ejemplo, historia familiar, tipo de cirugía, enfermedad preexistente, tal como aneurisma, insuficiencia cardíaca congestiva, preeclampsia, eclampsia, diabetes mellitus, hipertensión, enfermedad de arteria coronaria, proteinuria, insuficiencia renal o sepsis, tipo de exposición a toxinas, tales como NSAID, ciclosporinas, tacrolimus, aminoglucósidos, foscarnet, etilenglicol, hemoglobina, mioglobina, ifosfamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radiopacos o estreptozotocina), variables clínicos (por ejemplo, presión arterial, temperatura, velocidad de respiración), puntuaciones de riesgo (puntuación APACHE, puntuación PREDICT, TIMI Risk Score para UA/NSTEMI, puntuación de riesgo de Framingham), tasa de filtración glomerular, una tasa aproximada de filtración glomerular, una tasa de producción de orina, una concentración de creatina en suero o plasma, una concentración de creatina en orina, una excreción fraccional de sodio, una concentración de sodio en orina, un índice de creatina en suero o plasma, una gravedad específica en orina, osmolalidad en orina, una proporción de nitrógeno ureico en orina y nitrógeno ureico en plasma, una proporción de BUN en plasma y creatina, un índice de insuficiencia renal calculado como sodio en orina/(creatina en orina/creatina en plasma), una concentración de gelatinasa de neutrófilos (NGAL) en suero o plasma, una concentración de NGAL en orina, una concentración de cistatina C en suero o plasma, una concentración de troponina cardíaca en suero o plasma, una concentración de BNP en suero o plasma, una concentración de NTproBNP en suero o plasma y una concentración de proBNP en suero o plasma. Otras mediciones de función renal que pueden combinarse con uno o más resultado(s) de ensayo de marcadores de lesión renal se describen de aquí en adelante y en Harrison's Principles of Internal Medicine, 17a Edición, McGraw Hill, New York, páginas 1741-1830, y Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47a Edición, McGraw Hill, New York, páginas 785-815.

[0047] Cuando se mide más de un marcador, pueden medirse los marcadores individuales en las muestras obtenidas al mismo tiempo o pueden determinarse a partir de las muestras obtenidas en tiempos diferentes (por ejemplo, anteriormente o posteriormente). También pueden medirse las marcadores individuales en las mismas o diferentes muestras de fluido corporal. Por ejemplo, se puede medir un marcador de lesión renal en una muestra de suero o plasma y se puede medir otro marcador de lesión renal en una muestra de orina. Adicionalmente, la asignación de una probabilidad puede combinar un resultado de ensayo de marcador individual de lesión renal con cambios temporales en uno o más variables adicionales.

[0048] En diferentes aspectos relacionados, la presente divulgación se refiere también a dispositivos y equipos para llevar a cabo los procedimientos descritos en el presente documento. Los equipos adecuados comprenden suficientes reactivos para llevar a cabo un ensayo para como mínimo uno de los marcadores descritos de lesión renal con las instrucciones para realizar las comparaciones descritas de umbral.

[0049] En determinadas realizaciones, los reactivos para llevar a cabo tales ensayos se proporcionan en un dispositivo de ensayo y tales dispositivos de ensayo pueden incluirse en dicho equipo. Los reactivos preferidos pueden comprender uno o más anticuerpos de fase sólida, el anticuerpo de fase sólida que comprende un anticuerpo que detecta el(los) objetivos deseados de biomarcadores unidos a un soporte sólido. En el caso de los inmunoensayos tipo sándwich, tales reactivos pueden incluir también uno o más anticuerpos detectables etiquetados, el anticuerpo detectable etiquetado que comprende un anticuerpo que detecta el(los) objetivos deseados de biomarcador unido a una etiqueta detectable. Los elementos opcionales adicionales que pueden proporcionarse como una parte de un dispositivo de ensayo se describen de aquí en adelante.

[0050] Las etiquetas detectables pueden incluir moléculas que son detectables ellas mismas (por ejemplo, fracciones fluorescentes, etiquetas electroquímicas, etiquetas ecl (luminiscencia electroquímica), agentes quelantes metálicos, partículas metálicas coloidales, etc.) así como también, moléculas que pueden detectarse indirectamente por la producción de un producto de reacción detectable (por ejemplo, enzimas, tales como peroxidasa de rábano picante, fosfatasa alcalina, etc.) o mediante el uso de una molécula de unión específica que puede detectarse ella misma (por ejemplo, un anticuerpo etiquetado que se une con el segundo anticuerpo, biotina, digoxigenina, maltosa, oligohistidina, 2,4- dinitrobenceno, fenilarsenato, ADNmc, ADNbc, etc.).

[0051] La generación de una señal a partir del elemento de desarrollo de señal puede realizarse utilizando varios procedimientos ópticos, acústicos y electroquímicos que se conocen bien en la técnica. Los ejemplos de modos de detección incluyen fluorescencia, detección radioquímica, reflectancia, absorbancia, amperometría, conductancia, impedancia, interferometría, elipsometría, etc. En algunos de estos procedimientos, el anticuerpo en fase sólida se acopla a un transductor (por ejemplo, una rejilla de difracción, sensor electroquímico, etc.) para generar una señal, mientras en los otros, una señal se genera por un transductor que está espacialmente separado del anticuerpo en fase sólida (por ejemplo, un fluorómetro que utiliza una fuente de luz de excitación y un detector óptico). Esta lista no pretende ser limitativa. Pueden utilizarse biosensores basados en anticuerpos para determinar la presencia o la cantidad de analitos que se eliminan de manera opcional la necesidad de una molécula etiquetada.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA DIVULGACIÓN QUE INCLUYE LA INVENCIÓN

[0052] La presente divulgación se refiere a procedimientos y composiciones diagnóstico, diagnóstico diferencial, estratificación de riesgo, supervisión, clasificación y determinación de regímenes de tratamiento en sujetos que padecen lesión de función renal, función renal reducida y/o insuficiencia renal aguda utilizando la medición de uno o más marcadores de lesión renal. En diferentes ejemplos, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste en quimiocina 16 con motivo C-C, quimiocina 14 con motivo C-C y/o receptor de la proteína tirosina quinasa UFO o uno o más marcadores relacionados con el mismo y, opcionalmente, uno o más marcadores adicionales de lesión renal conocidos en la técnica tienen relación con el estado renal del sujeto.

[0053] Para este documento se aplican las siguientes definiciones:

Como se utiliza en el presente documento, una «lesión de función renal» es una reducción repentina (dentro de 14 días, preferiblemente dentro de 7 días, más preferiblemente dentro de 72 horas y aún más preferiblemente dentro de 48 horas) medible en una medición de función renal. Se puede identificar tal lesión, por ejemplo, mediante una reducción en la tasa de filtración glomerular o TFG aproximada, una reducción en el gasto urinario, un aumento en creatina en suero, un aumento en cistatina C en suero, una necesidad de terapia de reemplazo renal, etc.«Mejoría en Función Renal» es un aumento repentino (dentro de 14 días, preferiblemente dentro de 7 días, más preferiblemente dentro de 72 horas y aún más preferiblemente dentro de 48 horas) medible en una medición de función renal. Los procedimientos preferidos para medir y/o evaluar TFG se describen de aquí en adelante.

Como se utiliza en el presente documento, "función renal reducida" es una reducción repentina (dentro de 14 días, preferiblemente dentro de 7 días, más preferiblemente dentro de 72 horas y aún más preferiblemente dentro de 48 horas) en función renal identificada por un aumento absoluto de creatina en suero superior a o igual a 0,1 mg/dL (> 8,8 pmol/L), un aumento de porcentaje de creatina en suero superior a o igual a 20% (1,2-veces desde el punto de referencia ), o una reducción en el gasto urinario (oliguria documentada inferior a 0,5 ml/kg por hora).

Como se utiliza en el presente documento, "función renal aguda" o IRA es una reducción repentina (dentro de 14 días, preferiblemente dentro de 7 días, más preferiblemente dentro de 72 horas y aún más preferiblemente dentro de 48 horas) en función renal identificada por un aumento absoluto de creatina en suero superior a o igual a 0,3 mg/dL (> 26,4 pmol/L), un aumento de porcentaje de creatina en suero superior a o igual a 50% (1,5-veces desde el punto de referencia ), o una reducción en el gasto urinario (oliguria documentada inferior a 0,5 ml/kg por hora durante como mínimo 6 horas). El término es un sinónimo de «lesión renal aguda» o «IRA».

[0054] A este respecto, el experto en la técnica entenderá que las señales obtenidas a partir de un inmunoensayo son un resultado directo de compuestos formados entre uno o más anticuerpos y la biomolécula diana (es decir, el analito) y polipéptidos que contienen el(los) epítopo(s) necesario(s) con el(los) que se unen los anticuerpos. Mientras que tal ensayo puede detectar los biomarcadores de longitud completa y el resultado de ensayo puede expresarse como una concentración de un biomarcador de interés, la señal del ensayo es en realidad un resultado de todos tales polipéptidos «inmunoreactivos» presentes en la muestra. Se puede determinar la expresión de biomarcadores utilizando otros medios diferentes de inmunoensayos, que incluyen mediciones de proteínas (tales como dot blot, transferencias western, procedimientos cromatográficos, espectrometría de masas, etc.) y mediciones de ácido nucleico (cuantificación de ARNm).Esta lista no pretende ser limitativa.

[0055] Como se utiliza en el presente documento, el término "quimiocina 16 con motivo C-C" hace referencia a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que derivan del precursor de quimiocina 16 con motivo C-C (secuencia humana: Swiss-Prot 015467 (SEQ ID NO: 1)):

MKVSEAALSL L V L IL IIT S A SRSQPKVPEW VNTPSTCCLK YYEKVLPRRL 50

VVGYRKALNC HLPAIIFVTK RNREVCTNPN DDWVQEYIKD PNLPLLPTRN 100

LSTVKIITAK NGQPQLLNSQ 120

[0056] Los siguientes dominios se han identificado en quimiocina 16 con motivo C-C:

Residuos Longitud ID de Dominio

1-23 23 Péptido Señal

24-120 97 Quimiocina 16 con motivo

C-C

[0057] Como se utiliza en el presente documento, el término "quimiocina 14 con motivo C-C" hace referencia a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que derivan del precursor de quimiocina 14 con motivo C-C (secuencia humana: Swiss-Prot Q16627 (SEQ ID NO: 1)):

MKISVAAIPF FLLITIALGT KTESSSRGPY HPSECCFTYT TYKIPRQRIM 50

DYYETNSQCS KPGIVFITKR GHSVCTNPSD KWVQDYIKDM KEN 93

[0058] Los siguientes dominios se han identificado en quimiocina 14 con motivo C-C:

Residuos Longitud ID de Dominio

1-19 19 Péptido Señal

20-93 74 Quimiocina 14 con motivo C-C

22-93 72 HCC-1(3- 74)

23-93 71 HCC-1(4- 74)

28-93 66 HCC-1(9- 74)

27 R ^ QTGGKPKVVKIQLKLVG (SEQ ID NO: 2) en isoforma

2

[0059] Como se utiliza en el presente documento, el término "receptor de la proteína tirosina quinasa UFO" hace referencia a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que derivan del precursor de UFO de receptor de tirosina quinasa (secuencia humana: Swiss-Prot P30530 (SEQ ID NO: 1)):

MAWRCPRMGR VPLAWCLALC GWACMAPRGT QAEESPFVGN PGNITGARGL 50

TGTLRCQLQV QGEPPEVHWL RDGQILELAD STQTQVPLGE DEQDDWIVVS 100

QLRITSLQLS DTGQYQCLVF LGHQTFVSQP GYVGLEGLPY FLEEPEDRTV 150

AANTPFNLSC QAQGPPEPVD LLWLQDAVPL ATAPGHGPQR SLHVPGLNKT 200

SSFSCEAHNA KGVTTSRTAT ITVLPQQPRN LHLVSRQPTE LEVAWTPGLS 250

GIYPLTHCTL QAVLSNDGMG IQAGEPDPPE EPLTSQASVP PHQLRLGSLH 300

PHTPYHIRVA CTSSQGPSSW THWLPVETPE GVPLGPPENI SATRNGSQAF 350

VHWQEPRAPL QGTLLGYRLA YQGQDTPEVL MDIGLRQEVT LELQGDGSVS 400

NLTVCVAAYT AAGDGPWSLP VPLEAWRPGQ AQPVHQLVKE PSTPAFSWPW 450

WYVLLGAVVA AACVLILALF LVHRRKKETR YGEVFEPTVE RGELVVRYRV 500

RKSYSRRTTE ATLNSLGISE ELKEKLRDVM VDRHKVALGK TLGEGEFGAV 550

MEGQLNQDDS ILKVAVKTMK IAICTRSELE DFLSEAVCMK EFDHPNVMRL 600

IGVCFQGSER ESFPAPVVIL PFMKHGDLHS FLLYSRLGDQ PVYLPTQMLV 650

KFMADIASGM EYLSTKRF1H RDLAARNCML NENMSVCVAD FGLSKKIYNG 700

DYYRQGRIAK MPVKWIAIES LADRVYTSKS DVWSFGVTMW EIATRGQTPY 750

PGVENSEIYD YLRQGNRLKQ PADCLDGLYA LMSRCWELNP QDRPSFTELR 800

EDLENTLKAL PPAQEPDEIL YVNMDEGGGY PEPPGAAGGA DPPTQPDPKD 850

SCSCLTAAEV HPAGRYVLCP STTPSPAQPA DRGSPAAPGQ EDGA 894

[0060] En determinadas realizaciones, el ensayo de receptor de la proteína tirosina quinasa UFO detecta una o más formas solubles de receptor de la proteína tirosina quinasa UFO. El receptor de la proteína tirosina quinasa UFO es una proteína de membrana de paso único que tiene un dominio extracelular que se puede encontrar en formas de receptor de la proteína tirosina quinasa UFO de receptor de la proteína tirosina quinasa UFO generado mediante proteólisis de la forma unida a membrana o mediante empalme alternativo. En el caso de un inmunoensayo, pueden utilizarse uno o más anticuerpos que se unen a epítopos dentro de un dominio extracelular para detectar esta(s) forma(s) de receptor de la proteína tirosina quinasa UFO. Los siguientes dominios se han identificado en UFO de receptor de la tirosina quinasa:

Residuos Longitud ID de Dominio

1-25 25 Péptido Señal

26-894 869 receptor de la proteína tirosina quinasa

UFO

473-894 422 dominio citoplasmático

452-472 21 dominio transmembrana

26-451 426 dominio extracelular

429-437 Desaparecido en isoforma 2

[0061] Como se utiliza en el presente documento, el término "relacionar una señal con la presencia o la cantidad" de un analito refleja este conocimiento. Las señales de ensayo se relacionan típicamente con la presencia o la cantidad de un analito usando una curva estándar calculada utilizando concentraciones conocidas del analito de interés. Como se utiliza el término en el presente documento, un ensayo «se configura para detectar» un analito, si un ensayo puede generar una señal detectable indicativa de la presencia o la cantidad de una concentración fisiológicamente relevante del analito. Debido a que un epítopo de anticuerpo es del orden de 8 aminoácidos, un inmunoensayo configurado para detectar un marcador de interés detectará también polipéptidos relacionados con la secuencia de marcador, siempre y cuando aquellos polipéptidos contienen el(los) epítopo(s) necesario(s) para unirse al anticuerpo o los anticuerpos utilizados en el ensayo.

[0062] El término "marcador relacionado" como se utiliza en el presente documento con respecto a un biomarcador, tal como uno de los marcadores de lesión renal descrito en el presente documento hace referencia a uno o más fragmentos, variantes, etc., de un marcador particular o su pariente biosintético que puede detectarse como un sustituto para el marcador por sí solo o como los biomarcadores independientes. El término también hace referencia a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que se derivan del precursor de biomarcador que forma complejos con especies adicionales, tales como proteínas de unión, receptores, heparina, lípidos, azucares, etc.

[0063] El término marcador con "avance positivo" como aquel término que se utiliza en el presente documento hace referencia a un marcador que está definido como elevado en sujetos que padecen una enfermedad o una condición en relación con sujetos que no padecen aquella enfermedad o condición. El término marcador con "avance negativo" como aquel término que se utiliza en el presente documento hace referencia a un marcador que está definido como reducido en sujetos que padecen una enfermedad o una condición en relación con sujetos que no padecen aquella enfermedad o condición.

[0064] El término «sujeto» como se utiliza en el presente documento hace referencia a un organismo humano o no humano. Por consiguiente, los procedimientos y las composiciones descritas en el presente documento son aplicables tanto a las enfermedades humanas como veterinarias. Además, mientras un sujeto es preferiblemente un organismo vivo, la invención descrita en el presente documento puede utilizarse en análisis post mórtem también. Los sujetos preferidos son humanos, y más preferiblemente «pacientes» los que como se utiliza en el presente documento hacen referencia a humanos vivos que reciben cuidados médicos para una enfermedad o una condición. Esto incluye personas con enfermedad no definida en los que se investigan signos de patología.

[0065] Preferiblemente, un analito se mide en una muestra. Tal muestra se puede obtener de un sujeto o puede obtenerse a partir de materiales biológicos previstos a ser suministrados al sujeto. Por ejemplo, se puede obtener una muestra de un riñón que se está evaluando para un posible trasplante a un sujeto, y una medición de analito utilizada para evaluar el riñón para daño preexistente. Las muestras preferidas son muestras de fluido corporal.

[0066] El término "muestra de fluido corporal" como se utiliza en el presente documento hace referencia a una muestra de fluido corporal obtenida con el fin de diagnóstico, pronóstico, clasificación o evaluación de un sujeto de interés, tal como un paciente o un donante de trasplante. En determinadas realizaciones, tal muestra puede obtenerse con el fin de determinar el resultado de una condición actual o el efecto de un régimen de tratamiento de una condición. Las muestras preferidas de fluido corporal incluyen sangre, suero, plasma, fluido cerebroespinal, orina, saliva, esputo y efusiones pleurales. Adicionalmente, un experto en la técnica comprendería que determinadas muestras de fluido corporal se analizarían más fácilmente después de un procedimiento de fraccionamiento o purificación, por ejemplo, separación de toda la sangre en componentes de suero o plasma.

[0067] El término "diagnóstico" como se utiliza en el presente documento hace referencia a los procedimientos con los que el experto en la técnica puede evaluar y/o determinar la posibilidad («una probabilidad») de si un paciente padece o no dada enfermedad o condición. En el caso de la presente invención, «diagnóstico» incluye utilizar los resultados de un ensayo, más preferiblemente un inmunoensayo, para un marcador de lesión renal de la presente invención, opcionalmente conjuntamente con otras características clínicas para llegar a un diagnóstico (es decir, la aparición o no aparición) de una lesión renal aguada o IRA en el sujeto del que se obtuvo y se puso a prueba la muestra. Que tal diagnóstico esta «determinado» no pretende significar que el diagnóstico es 100% preciso. Muchos biomarcadores son indicativos de múltiples condiciones. El médico clínico experto no utiliza los resultados de biomarcadores en un vacío de información, pero más bien los resultados de pruebas se utilizan en conjunto con otros indicios clínicos para llegar a un diagnóstico. Por lo tanto, un nivel medido de biomarcador en un lado de un umbral de diagnóstico predeterminado indica una probabilidad más alta de la aparición de enfermedad en el sujeto en relación con un nivel medido de otro lado de umbral de diagnóstico predeterminado.

[0068] De manera similar, un riesgo de pronóstico señala una posibilidad ("una probabilidad") que se produzca un determinado curso o resultado. Se hace referencia a un nivel o un cambio de nivel de un indicador de pronóstico que a su vez se asocia con una posibilidad aumentada de morbilidad (por ejemplo, deterioro de función renal, futura IRA o muerte) como «indicativo de una probabilidad aumentada» de un resultado adverso en un paciente.

Ensayos de Marcadores

[0069] En general, los inmunoensayos implican poner en contacto una muestra que contiene o se sospecha que tiene un biomarcador de interés con como mínimo un anticuerpo que se une de manera específica al biomarcador. A continuación se genera una señal indicativa de la presencia o la cantidad de complejos formados por las uniones de polipéptidos en la muestra con el anticuerpo. A continuación la señal se relaciona con la presencia o la cantidad del biomarcador en la muestra. El experto en la técnica conoce bien numerosos procedimientos y dispositivos para detectar y analizar biomarcadores. Véanse, por ejemplo, las Patentes de Estados Unidos 6.143.576; 6.113.855; 6.019.944; 5.985.579; 5.947.124; 5.939.272; 5.922.615; 5.885.527; 5.851.776; 5.824.799; 5.679.526; 5.525.524; y 5.480.792, y The Immuno assay Handbook, David Wild, edición Stockton Press, Neueva York, 1994.

[0070] Los dispositivos y los procedimientos de ensayo conocidos en la técnica pueden utilizar moléculas etiquetadas en diferentes formatos de ensayo tipo sándwich, competitivo o no competitivo para generar una señal que está relacionada con la presencia o la cantidad del biomarcador de interés. Los formatos adecuados de ensayo incluyen también procedimientos cromatográficos, espectrometría de masas y de «transferencia» de proteína. Adicionalmente, pueden emplearse determinados procedimientos y dispositivos, tales como biosensores e inmunoensayos ópticos para determinar la presencia o la cantidad de analitos sin la necesidad de una molécula etiquetada. Véanse, por ejemplo, las Patentes de Estados Unidos 5.631.171; y 5.955.377.

[0071] Un experto en la técnica reconocerá también la instrumentación robótica que incluye, pero no se limita a, sistemas Beckman ACCESS®, Abbott AXSYM®, Roche ELECSYS®, Dade Behring STRAt Us® que están entre los analizadores de inmunoensayos que son capaces de llevar a cabo los inmunoensayos. Aunque se puede utilizar cualquier inmunoensayo adecuado, por ejemplo, inmunoensayos ligados a enzimas (ELISA), radioinmunoensayos (RIAs), ensayos de unión competitiva y similares.

[0072] Los anticuerpos u otros polipéptidos pueden inmovilizarse en una variedad de soportes sólidos para su uso en ensayos. Las fases sólidas que pueden utilizarse para inmovilizar miembros de unión específicos incluyen aquellos desarrollados y/o utilizados como fases sólidas en ensayos de unión de fase sólida. Los ejemplos de fases sólidas adecuadas incluyen filtros de membrana, papeles con base de celulosa, bolitas (incluyendo partículas poliméricas, de látex y paramagnéticas), vidrio, obleas de silicio, micropartículas, nanopartículas, TentaGels, AgroGels, geles PEGA, geles SPOCC y placas con múltiples orificios. Se podría preparar una tira de ensayo recubriendo el anticuerpo o una multitud de anticuerpos en una matriz sobre un soporte sólido. A continuación se podría sumergir esta tira en la muestra de prueba y a continuación procesar rápidamente utilizando las etapas de lavado y detección para generar una señal medible, tal como una mancha de color. Los anticuerpos u otros polipéptidos pueden unirse a zonas específicas de dispositivos de ensayo o por unión directa con una superficie de dispositivo de ensayo o mediante unión indirecta. En un ejemplo del último caso, los anticuerpos u otros polipéptidos pueden inmovilizarse sobre partículas u otros soportes sólidos y aquel soporte sólido puede inmovilizarse sobre la superficie del dispositivo.

[0073] Los ensayos biológicos requieren procedimientos de detección y uno de los procedimientos más comunes para la cuantificación de resultados es conjugar una etiqueta detectable con una proteína o ácido nucleico que tiene afinidad con uno de los componentes en el sistema biológico que se está estudiando. Las etiquetas detectables pueden incluir moléculas que son detectables ellas mismas (por ejemplo, fracciones fluorescentes, etiquetas electroquímicas, agentes quelantes metálicos, etc.) así como también, moléculas que pueden detectarse indirectamente por la producción de un producto de reacción detectable (por ejemplo, enzimas, tales como peroxidasa de rábano picante, fosfatasa alcalina, etc.) o mediante una molécula de unión específica que puede detectarse ella misma (por ejemplo, biotina, digoxigenina, maltosa, oligohistidina, 2,4- dinitrobenceno, fenilarsenato, ADNmc, ADNbc, etc.).

[0074] La preparación de conjugados de fases sólidas y con etiqueta detectable a menudo comprende el uso de enlazadores reticulados químicos. Los reactivos reticulados contienen como mínimo dos grupos de reactivos y se dividen generalmente en reticulados homofuncionales (que contienen grupos de reactivos idénticos) y reticulados heterofuncionales (que contienen grupos de reactivos no idénticos). Los reticulados homobifuncionales que se acoplan a través de aminas, sulfhidrilos o reaccionan de manera no específica están disponibles en muchas fuentes comerciales. Maleimidas, haluros de alquilo y arilo, disulfuros de alfa-haloacilos y piridilo son grupos de reactivo tiol.Maleimidas, haluros de alquilo y arilo y alfa-haloacilos reaccionan con sulfhidrilos para formar enlaces de éter de tiol, mientras disulfuros de piridilo reaccionan con sulfhidrilos para producir disulfuros mixtos. El producto de disulfuro de piridilo es disociable. Los imidoésteres también son muy útiles para reticulados de proteína-proteína. Una variedad de reticulados heterobifuncionales, cada uno combinando diferentes características para conjugación exitosa está disponible comercialmente.

[0075] En determinados aspectos, la presente divulgación proporciona equipos para el análisis de los marcadores de lesión renal descritos. El equipo comprende reactivos para el análisis de como mínimo una muestra de prueba que comprende como mínimo un anticuerpo que es un marcador de lesión renal. El equipo puede incluir también dispositivos e instrucciones para realizar una o más correlaciones de diagnóstico y/o pronóstico descritas en el presente documento. Los equipos preferidos comprenden una pareja de anticuerpos para llevar a cabo un ensayo tipo sándwich o una especie etiquetada para realizar un ensayo competitivo para el analito. Preferiblemente, una pareja de anticuerpos comprende un primer anticuerpo conjugado con una fase sólida y un segundo anticuerpo conjugado con una etiqueta detectable, en donde cada uno de los anticuerpos primero y segundo se une con un marcador de lesión renal. Más preferiblemente cada uno de los anticuerpos son anticuerpos monoclonales. Las instrucciones para el uso del equipo y la realización de las correlaciones puede estar en forma de etiquetado, que se refiere a cualquier material escrito o registrado que se adjunta a o, de otro modo, acompaña a un equipo en cualquier momento durante su fabricación, transporte, venta o uso. Por ejemplo, el término etiquetado abarca prospectos y folletos publicitarios, materiales de embalaje, instrucciones, casetes de audio y vídeo, discos informáticos, así como también escritos impresos directamente sobre los equipos.

Anticuerpos

[0076] El 'termino "anticuerpo" como se utiliza en el presente documento hace referencia a un péptido o polipéptido derivado de, modelado según o sustancialmente codificado por un gen de inmunoglobulina o genes de inmunoglobulina o fragmentos de los mimos capaces de unirse de manera específica a un antígeno o un epítopo. Véanse, por ejemplo, Fundamental Immunology, 3a Edición, W.E. Paul, ed., Raven Press, N.Y. (1993); Wilson (1994; J. Immunol. Methods 175:267-273; Yarmush (1992) J. Biochem. Biophys. Methods 25:85-97. El término anticuerpo incluye porciones que se unen a antígeno, es decir, «sitios de unión a antígeno», (por ejemplo, fragmentos, subsecuencias, regiones determinantes de la complementariedad (CDR)) que retienen la capacidad de unión a antígeno, que incluye (i) un fragmento Fab, un fragmento monovalente que consiste en los dominios VL, VH, CL y Chl; (ii) un fragmento F(ab')2 , un fragmento bivalente que comprende dos fragmentos Fab unidos por un puente de disulfuro en la región bisagra; (iii) un fragmento Fd que consiste en los dominios VH y Chl; (iv) un fragmento Fv que consiste en los dominios VL y VH de un único brazo de un anticuerpo, (v) un fragmento dAb (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546), que consiste en un dominio VH; y (vi) una región determinante de la complementariedad aislada (CDR). Los anticuerpos de cadena única se incluyen también por referencia en el término «anticuerpo».

[0077] Los anticuerpos utilizados en los inmunoensayos descritos en el presente documento preferiblemente se unen de manera específica a un marcador de lesión renal de la presente invención. El término «se une de manera específica» no pretende indicar que un anticuerpo se une exclusivamente a su diana deseada, como se señala anteriormente, un anticuerpo se une a cualquier polipéptido que muestra el(los) epítopo(s) al(los) que se une el anticuerpo. Más bien, un anticuerpo «se une de manera específica», si su afinidad por su diana preferida es aproximadamente 5 veces mayor cuando se compara con su afinidad por una molécula no diana que no muestra el(los) epítopo(s) apropiado(s). Preferiblemente, la afinidad del anticuerpo será como mínimo aproximadamente 5 veces, preferiblemente 10 veces, más preferiblemente 25 veces, aún más preferiblemente 50 veces y más preferiblemente 100 veces o más, superior para una molécula diana que su afinidad para una molécula no diana. En realizaciones preferidas, los anticuerpos preferidos se unen con afinidades de como mínimo aproximadamente 107 M‘ 1, y preferiblemente entre aproximadamente 108 M'1 y aproximadamente 109 M-1, aproximadamente 109 M'1 y aproximadamente 1010 M-1, o aproximadamente 1010 M_1 y aproximadamente 1012 M-1.

[0078] La afinidad se calcula como Kd = koff/kon ( k f es la constante del grado de disociación, Kon es la constante del grado de asociación y Kd es la constante de equilibrio). La afinidad puede determinarse en equilibrio midiendo la fracción unida (r) del ligando etiquetado en diferentes concentraciones (c). Los datos están representados mediante la ecuación de Scatchard: r/c = K(n-r): en la que r = moles de ligando unido/mole de receptor en equilibrio; c = concentración de ligando libre en equilibrio; K= constante de asociación de equilibrio; y n = número de sitios de unión a ligando por molécula de receptor. Mediante el análisis gráfico, r/c se muestra en el eje Y frente a r en el eje X, representando, de esta manera, un gráfico de Scatchard. La medición de afinidad de anticuerpo utilizando el análisis de Scatchard se conoce bien en la técnica. Véanse, por ejemplo, van Erp et al., J. Immuno assay 12: 425-43, 1991; Nelson y Griswold, Comput. Methods Programs Biomed. 27: 65-8, 1988.

[0079] El término "epítopo" se refiere a un determinante antigénico capaz de unirse de manera específica a un anticuerpo. Normalmente los epítopos consisten en agrupaciones de superficie químicamente activas de moléculas, tales como aminoácidos y cadenas laterales de azúcares y normalmente tienen características estructurales tridimensionales específicas, así como también características específicas de carga. Los epítopos conformacionales y no conformacionales se distinguen en que la unión con los primeros y no con los últimos se pierde en presencia de disolventes desnaturalizantes.

[0080] Numerosas publicaciones tratan del uso de tecnología de representación sobre fagos para producir y cribar bibliotecas de polipéptidos para unión con un analito seleccionado. Véanse, por ejemplo, Cwirla et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87, 6378-82, 1990; Devlin et al., Science 249, 404-6, 1990, Scott y Smith, Science 249, 386-88, 1990; y Ladner et al., Patente de Estados Unidos Número 5.571.698. Un concepto básico de procedimientos de representación sobre fagos es la creación de una asociación física entre ADN que codifica un polipéptido que se va a cribar y el polipéptido. Esta asociación física se proporciona mediante la partícula de fago, que muestra un polipéptido como una parte de una cápside que rodea el genoma de fago que codifica el polipéptido. La creación de una asociación física entre polipéptidos y su material genético permite cribado de masas simultáneo de números muy grandes de fagos que contienen diferentes polipéptidos. Los fagos que representan un polipéptido con afinidad a una diana se unen a una diana y estos fagos se enriquecen utilizando cribado de afinidades con la diana. La identidad de polipéptidos mostrada a partir de estos fagos puede determinarse a partir de sus genomas respectivos. Utilizando estos procedimientos se puede sintetizar en masa un polipéptido identificado como el que tiene una afinidad de unión con una diana deseada utilizando procedimientos convencionales. Véanse, por ejemplo, la Patente de Estados Unidos 6.057.098.

[0081] Los anticuerpos que se generan utilizando estos procedimientos pueden seleccionarse a continuación mediante el primer cribado para afinidad y especificidad con el polipéptido de interés purificado y, si se necesita, comparar los resultados de la afinidad y la especificidad de los anticuerpos con los polipéptidos que se desea que se excluyan de la unión. El procedimiento de cribado puede implicar inmovilización de los polipéptidos purificados en pocillos separados de placas de microtitulación. La solución que contiene un anticuerpo potencial o grupos de anticuerpos se coloca a continuación en los pocillos de microtitulación respectivos y se incuba durante un periodo de aproximadamente 30 minutos a 2 horas. A continuación los pocillos de microtitulación se lavan y se añade un anticuerpo etiquetado secundario (por ejemplo, un anticuerpo anti ratón conjugado con fosfatasa alcalina, si los anticuerpos criados son anticuerpos de ratón) a los pocillos y se incuba durante un periodo de aproximadamente 30 minutos y a continuación se lava. Se añade un sustrato a los pocillos y aparecerá una reacción de color, donde el anticuerpo y el(los) polipéptido(s) inmovilizado(s) está(n) presente(s).

[0082] Los anticuerpos identificados de esta manera pueden analizarse a continuación para la afinidad y la especificidad en el diseño de ensayo seleccionado. En el desarrollo de inmunoensayos para una proteína diana, la proteína diana purificada actúa como un estándar con el que se juzga la sensibilidad y la especificidad del inmunoensayo utilizando los anticuerpos que se han seleccionado. Dado que la afinidad de unión de diferentes anticuerpos puede variar; determinadas parejas de anticuerpos (por ejemplo, en ensayo tipo sándwich) pueden interferir unas con las otras estéricamente, etc., la realización de ensayo de un anticuerpo puede ser una medida más importante que la afinidad y la especificidad absolutas de un anticuerpo.

Correlaciones de Ensayo

[0083] El término "correlacionar" como se utiliza en el presente documento con referencia al uso de biomarcadores se refiere a comparar la presencia o la cantidad del(los) biomarcador(es) en un paciente con su presencia o cantidad en personas que se sabe que padecen de o se sabe que están en riesgo de, una determinada condición; o en personas que se conocen que están libres de una determinada condición. A menudo, esto tiene forma de comparar un resultado de ensayo en forma de una concentración de biomarcadores con un umbral predeterminado seleccionado para indicar la aparición o la no aparición de una enfermedad o la probabilidad de algún resultado en el futuro.

[0084] Seleccionar un umbral de diagnóstico implica, entre otras cosas, considerar la probabilidad de enfermedad, distribución de diagnósticos verdaderos y falsos en diferentes umbrales de prueba, y evaluaciones de las consecuencias de tratamiento (o un fallo de tratamiento) basado en el diagnóstico. Por ejemplo, cuando se considera administrar una terapia específica que es altamente eficaz y tiene un nivel bajo de riesgo, se necesitan menos pruebas debido a que los médicos pueden aceptar una duda diagnóstica sustancial. Por otro lado, en situaciones donde las opciones de tratamiento son menos eficaces y conllevan más riesgo, los médicos a menudo necesitan un nivel más alto de seguridad de diagnóstico. Por consiguiente, el análisis de coste/beneficio está involucrado en la selección de un umbral de diagnóstico.

[0085] Los umbrales adecuados pueden determinarse en una multitud de maneras. Por ejemplo, un umbral de diagnóstico recomendado para el diagnóstico de infarto de miocardio agudo que utiliza troponina cardíaca es el percentil 97,5 de la concentración observada en una población normal. Otro procedimiento puede ser observar muestras en serie del mismo paciente, donde un resultado «punto de referencia» anterior se utiliza para supervisar cambios temporales en un nivel de biomarcador.

[0086] También pueden utilizarse los estudios de población para seleccionar un umbral de decisión. La Característica Operativa de receptor («ROC») surgió de la teoría de campo de detección de señal desarrollada durante la Segunda Guerra Mundial para el análisis de imágenes de radar, y el análisis ROC se utiliza a menudo para seleccionar un umbral capaz de distinguir mejor una subpoblación «enferma» de una subpoblación «no enferma». En este caso un falso positivo ocurre cuando la persona da positivo, pero en realidad no tiene la enfermedad. Por otro lado, un falso negativo ocurre cuando las personas dan negativo, suponiendo que estén sanas, cuando en realidad tienen la enfermedad. Para dibujar una curva ROC, se determinan la tasa de verdaderos positivos (TPR) y la tasa de falsos positivos (FPR) aunque el umbral de decisión varía constantemente. Dado que TPR es equivalente a sensibilidad y FPR es igual a 1 - especificidad, el gráfico ROC se llama a veces el gráfico de sensibilidad frente a (1 - especificidad). Una prueba perfecta tendrá un área bajo la curva ROC de 1,0; una prueba aleatoria tendrá un área de 0,5. Se selecciona un umbral para proporcionar un nivel aceptable de especificidad y sensibilidad.

[0087] En este contexto, "enferma" pretende hacer referencia a una población que tienen una característica (la presencia de una enfermedad o una condición o la aparición de algún resultado) y «no enferma» pretende hacer referencia a una población que carece de la característica. Mientras que un umbral de decisión único es la aplicación más sencilla de tal procedimiento, pueden utilizarse umbrales de decisión múltiples. Por ejemplo, por debajo de un primer umbral, puede asignarse la ausencia de enfermedad con relativamente alta confianza, y por encima de un segundo umbral puede asignarse también la presencia de enfermedad con relativamente alta confianza. Entre los dos umbrales puede considerarse indeterminado. Esto pretende ser solamente de naturaleza ejemplar.

[0088] Además de comparación de umbrales, otros procedimientos para correlacionar los resultados de ensayos con una clasificación de pacientes (aparición o no aparición de enfermedad, probabilidad de un resultado, etc.) incluyen arboles de decisión, conjuntos de reglas, procedimientos bayesianos y procedimientos de redes neuronales. Estos procedimientos pueden producir valores de probabilidad que representan el nivel al que pertenece el sujeto en una clasificación de una multitud de clasificaciones.

[0089] Los indicadores de precisión de prueba pueden obtenerse como se describe en Fischer et al., Intensive Care Med. 29: 1043-51, 2003, y utilizarse para determinar la eficacia de un biomarcador dado. Estos indicadores incluyen sensibilidad y especificidad, valores de predicción, índices de probabilidad, razón de momios para diagnóstico y áreas de curva ROC. El área bajo la curve («AUC») de un gráfico ROC es igual a la probabilidad que un clasificador ordenará un caso positivo elegido aleatoriamente más alto que un caso negativo elegido aleatoriamente. El área bajo la curva ROC puede considerarse equivalente a la prueba U de Mann-Whitney, que examina la diferencia mediana entre puntuaciones obtenidas en dos grupos considerando si los grupos son de datos continuos o de las clasificaciones de prueba de Wilcoxon.

[0090] Como se trata anteriormente, las pruebas adecuadas pueden mostrar uno o más de los siguientes resultados de estas medidas diferentes: una especificidad mayor de 0,5, preferiblemente como mínimo 0,6, más preferiblemente como mínimo 0,7, aún más preferiblemente como mínimo 0,8,incluso más preferiblemente como mínimo 0,9 y lo más preferiblemente como mínimo 0,95, con una sensibilidad correspondiente superior a 0,2, preferiblemente superior a 0,3, más preferiblemente superior a 0,4, aún más preferiblemente como mínimo 0,5, incluso más preferiblemente 0,6, aun más preferiblemente superior a 0,7, todavía más preferiblemente superior a 0,8, más preferiblemente superior a 0,9, y lo más preferiblemente superior a 0,95; una sensibilidad superior a 0,5, preferiblemente como mínimo 0,6, más preferiblemente como mínimo 0,7, aún más preferiblemente como mínimo 0,8, incluso más preferiblemente como mínimo 0,9 y lo más preferiblemente como mínimo 0,95, con una especificidad correspondiente superior a 0,2, preferiblemente superior a 0,3, más preferiblemente superior a 0,4, aún más preferiblemente como mínimo 0,5, incluso más preferiblemente 0,6, aún más preferiblemente superior a 0,7, aún más preferiblemente superior a 0,8, más preferiblemente superior a 0,9, y lo más preferiblemente superior a 0,95; como mínimo 75% de sensibilidad, en combinación con como mínimo 75% de especificidad; un área de curva ROC superior a 0,5, preferiblemente como mínimo 0,6, más preferiblemente 0,7, aún más preferiblemente como mínimo 0,8, incluso más preferiblemente como mínimo 0,9, y lo más preferiblemente como mínimo 0,95; una razón de momios diferente de 1, preferiblemente como mínimo aproximadamente 2 o superior o aproximadamente 0,5 o inferior, más preferiblemente como mínimo aproximadamente 3 o superior o aproximadamente 0,33 o inferior, aún más preferiblemente como mínimo aproximadamente 4 o superior o aproximadamente 0,25 o inferior, incluso más preferiblemente como mínimo aproximadamente 5 o superior o aproximadamente 0,2 o inferior, y lo más preferiblemente como mínimo aproximadamente 10 o superior o aproximadamente 0,1 o inferior; una proporción de probabilidad positiva (calculada como sensibilidad/(1-especificidad)) superior a 1, como mínimo 2, más preferiblemente como mínimo 3, aún más preferiblemente como mínimo 5, y lo más preferiblemente como mínimo 10; y o una proporción de probabilidad negativa (calculada como (1-sensibilidad)/especificidad) inferior a 1, inferior a o igual a 0,5, más preferiblemente inferior a o igual a 0,3, y lo más preferiblemente inferior a o igual a 0,1.

[0091] Los indicios clínicos adicionales pueden combinarse con el(los) resultado(s) de ensayo de marcadores de lesión renal de la presente invención. Estos incluyen otros biomarcadores relacionados con el estado renal. Los ejemplos incluyen los siguientes, que enumeran el nombre de biomarcador común, seguido del número de entrada de Swiss-Prot para aquel biomarcador o su progenitor: Actina (P68133); Proteína de unión a adenosina desaminasa (DPP4, P27487); Alfa-l-glicoproteína ácida 1 (P02763); Alfa-1-microglobulina (P02760); Albumina (P02768); Angiotensinogenasa (Renina, P00797); Anexina A2 (P07355); Beta-glucuronidasa (P08236); B-2-microglobulina (P61769); Beta-galactosidasa (P16278); BMP-7 (P18075); Péptido natriurético cerebral (proBNP, BNP-32, NTproBNP; P16860); Beta proteína de unión a calcio (S100-beta, P04271); Anhidrasa carbónica 9 (Q16790); Caseína Quinasa 2 (P68400); Clusterina (P10909); Complemento C3 (P01024); Proteína rica en cisteína (CYR61, O00622); Citocromo C (P99999); Factor de crecimiento epidérmico (EGF, P01133); Endotelina-1 (P05305); Fetuína-A exosomal (P02765); Proteína de unión a ácidos grasos, corazón (FABP3, P05413); Proteína de unión a ácidos grasos, hígado (P07148); Ferritina (cadena ligera, P02792; cadena pesada P02794); Fructosa-1,6-bifosfatasa (P09467); GRO-alfa (CXCL1, (P09341); Hormona de Crecimiento (P01241); Factor de crecimiento de hepatocitos (P14210); Factor I de crecimiento similar a insulina (P05019); Inmunoglobulina G; Cadenas Ligeras de Inmunoglobulina (Kappa y Lambda); Interferón gamma (P01308); Lisozima (P61626); Interleucina-l alfa (P01583); Interleucina-2 (P60568); Interleucina-4 (P05112); Interleucina-9 (P15248); Interleucina-12p40 (P29460); Interleucina-13 (P35225); Interleucina-16 (Q14005); molécula de adhesión celular L1 (P32004); Lactato deshidrogenasa (P00338); Leucina Aminopeptidasa (P28838); Subunidad alfa de Meprina A (Q16819); Subunidad beta de Meprina A (Q16820); Midkina (P21741); MIP2-alfa (CXCL2, P19875); MMP-2 (P08253); MMP-9 (P14780); Netrina-1 (095631); Endopeptidasa neutral (P08473); Osteopontina (014788); Antígeno papilar renal 1 (RPA1); Antígeno papilar renal 2 (RPA2); Proteína de unión a retinol (P09455); Ribonucleasa; Proteína A6 de unión a calcio S100 (P06703); Componente P de Amiloide Sérico (P02743); Isoforma de intercambiador de sodio/hidrógeno (NHE3, P48764); Espermidina/espermina Nl-acetiltransferasa (P21673); TGF-Beta l (P01137); Transferrina (P02787); Factor trefoil 3 (TFF3, Q07654); Proteína de tipo Toll 4 (000206); Proteína total; Antígeno de nefritis tubulointersticial (Q9UJW2); Uromodulina (proteína de Tamm-Horsfall, P07911).

[0092] Con fines de estratificación de riesgo, Adiponectina (Q15848); Fosfatasa alcalina (P05186); Aminopeptidasa N (P15144); CalbindinD28k (P05937); Cistatina C (P01034); subunidad 8 of FIFO ATPasa (P03928); Gamma-glutamil transferasa (P19440); GSTa (alfa-glutatión-S-transferasa, P08263); GSTpi (Glutatión-S-transferasa P; GST clase-pi; P09211); IGFBP-1 (P08833); IGFBP-2 (P18065); IGFBP-6 (P24592); Proteína integral de membrana 1 (Itml, P46977); Interleucina-6 (P05231); Interleucina-8 (P10145); Interleucina-18 (Q14116); IP-10 (proteína inducida por interferóngamma de 10 kDa, P02778); IRPR (IFRD1, O00458); Isovaleril-CoA deshidrogenasa (IVD, P26440); I-TAC/CXCL11 (014625); Queratina 19 (P08727); Kim-1 (receptor celular 1 de virus de la hepatitis A, O43656); L-arginina:glicina amidinotransferasa (P50440); Leptina (P41159); Lipocalina2 (NGAL, P80188); MCP-1 (P13500); MIG (Monoquina inducida por gamma-interferón Q07325); MIP-la (P10147); MIP-3a (P78556); MIP-lbeta (P13236); MIP-ld (Q16663); NAG (N-acetil-beta-D-glucosaminidasa, P54802); Transportador de iones orgánicos (OCT2, 015244); Osteoprotegerina (014788); proteína P8 (O60356); Inhibidor de activador del plasminógeno 1 (PAI-1, P05121); ProANP(l-98) (P01160); Proteína fosfatasa 1-beta (PPI-beta, P62140); Rab GDI-beta (P50395); Calicreína renal (P06870); cadena (alfa) de la proteína integral de membrana RTl.B-1 (Q5Y7A8); miembro lA de superfamilia del receptor del factor de necrosis tumoral soluble (sTNFR-I, P19438); miembro IB de superfamilia del receptor del factor de necrosis tumoral soluble (sTNFR-II, P20333); Inhibidor tisular de metaloproteinasa 3 (TIMP-3, P35625); uPAR (Q03405) pueden combinarse con el(los) resultado(s) de ensayo de marcador de lesión renal de la presente invención.

[0093] Los indicios clínicos adicionales que pueden combinarse con el(los) resultado(s) de ensayo de marcadores de lesión renal de la presente invención incluyen información demográfica (por ejemplo, peso, sexo, edad, raza), historia médica (por ejemplo, historia familiar, tipo de cirugía, enfermedad preexistente, tal como aneurisma, insuficiencia cardíaca congestiva, preeclampsia, eclampsia, diabetes mellitus, hipertensión, enfermedad de arteria coronaria, proteinuria, insuficiencia renal o sepsis, tipo de exposición a toxinas, tales como NSAID, ciclosporinas, tacrolimus, aminoglucósidos, foscarnet, etilenglicol, hemoglobina, mioglobina, ifosfamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radiopacos o estreptozotocina), variables clínicos (por ejemplo, presión arterial, temperatura, velocidad de respiración), puntuaciones de riesgo (puntuación APACHE, puntuación PREDICT, TIMI Risk Score para UA/NSTEMI, puntuación de riesgo de Framingham), una medición de proteína total en orina, una tasa de filtración glomerular, una tasa aproximada de filtración glomerular, una tasa de producción de orina, una concentración de creatina en suero o plasma, un antígeno papilar renal 1 (RPAI), un antígeno papilar renal 2 (RPA2); una concentración de creatina en orina, una excreción fraccional de sodio, una concentración de sodio en orina, un índice de creatina en suero o plasma, una gravedad específica en orina, una osmolalidad en orina, una proporción de nitrógeno ureico en orina y nitrógeno ureico en plasma, una proporción de BUN en plasma y creatina, y/o un índice de insuficiencia renal calculado como sodio en orina/(creatina en orina/creatina en plasma). Otras mediciones de función renal que pueden combinarse con el(los) resultado(s) de ensayo de marcadores de lesión renal se describen de aquí en adelante y en Harrison's Principles of Internal Medicine, 17a Edición, McGraw Hill, New York, páginas 1741-1830, y Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47a Edición, McGraw Hill, New York, páginas 785-815.

[0094] La combinación de resultados de ensayo/indicios clínicos de este modo puede comprender el uso de regresión logística multivariante, modelo loglineal, análisis de redes neuronales, análisis n-de-m, análisis de árbol de decisión, etc. Esta lista no pretende ser limitativa.

Diagnóstico de Insuficiencia Renal Aguda

[0095] Como se indicó anteriormente, los términos «lesión renal (o de riñón) aguda» y «insuficiencia renal (o de riñón) aguda» como se utilizan en el presente documento se definen en parte en términos de cambios en creatina en suero a partir de un valor de punto de referencia. La mayoría de definiciones de IRA tienen elementos comunes que incluyen el uso de creatina en suero y, a menudo, el gasto urinario. Los pacientes pueden presentar disfunción renal sin una medida de punto de referencia disponible de función renal para su uso en esta comparación. En tal caso, se puede calcular un valor de creatina en suero de punto de referencia asumiendo que el paciente tenía inicialmente una TFG normal. Una tasa de filtración glomerular es el volumen de fluido filtrado a través de los capilares glomerulares renales (de riñón) en la cápsula de Bowman por unidad de tiempo. La tasa de filtración glomerular (TFG) puede calcularse midiendo cualquier sustancia química que tiene un nivel estable en la sangre y se filtra libremente pero ni se vuelve a absorberse ni se secreta por los riñones. La TFG se expresa típicamente en unidades de ml/min:

T F G __ Concentración en orina X Flujo de orina

~ Concentración en plasma

[0096] Normalizando la TFG con el área de superficie corporal, se puede asumir una TFG de aproximadamente 75 100 ml/min por 1,73 m2 Por lo tanto, la tasa medida es la cantidad de sustancia en la orina que se origina a partir de un volumen calculable de sangre.

[0097] Existen varias técnicas diferentes utilizadas para calcular o evaluar la tasa de filtración glomerular (TFG o TFGe). Sin embargo, en la práctica clínica se utiliza la depuración de creatina para medir la TFG. La creatina se produce de manera natural en el cuerpo (creatina es un metabolito de creatina, que se encuentra en el músculo) Se filtra libremente por el glomérulo, pero también se secreta activamente por los túbulos renales en cantidades muy pequeñas de tal modo que la depuración de creatina sobreestima la TFG actual en 10-20 %. Este margen de error es aceptable considerando la facilidad con la que se mide la depuración de creatina.

[0098] Se puede calcular la depuración de creatina (DCr), si se conocen los valores de concentración de creatina en orina (OCr), velocidad de flujo de orina (V), y concentración de creatina en plasma (PCr). Dado que el producto de concentración en orina y la velocidad de flujo en orina proporciona la tasa de excreción de creatina, también, se dice que la depuración de creatina es su tasa de excreción (UorxV) dividida por su concentración en plasma. Comúnmente esto se representa matemáticamente como:

DCr = Qcr >■ v

Per

[0099] Comúnmente se realiza una recogida de orina de 24 horas, de la vejiga vacía una mañana hasta los contenidos de la vejiga la siguiente mañana con una prueba de sangre comparativa recogida a continuación:

r-v Ocr X ^{volumen de 24 horas}

Dcr = -------------------------------------Per x 24 X so min

[0100] Para permitir la comparación de resultados entre personas de diferentes tamaños, la DCr a menudo tiene relación con el área de superficie corporal (ASC) y se expresa en comparación con el hombre de tamaño medio como ml/min/1,73 m2 Mientras que la mayoría de los adultos tienen un ASC que se aproxima a 1,7 (1,6-1,9), los pacientes extremadamente obesos o delgados deberían tener su Dcr en relación con su ASC actual:

[0101] La precisión de una medición de depuración de creatina (incluso cuando la recogida está completa) está limitada porque según la tasa de filtración glomerular (TFG) cae, la secreción de creatina aumenta, y, por lo tanto, el aumento en la creatina en suero es menor. Por consiguiente, la excreción de creatina es mucho mayor que la carga filtrada, que da lugar a una sobreestimación potencialmente grande de la TFG (tanto como una diferencia de dos veces). Sin embargo, para los fines clínicos es importante determinar si la función renal es estable o empeora o mejora. A menudo esto se determina supervisando la creatina en suero sola. Como la depuración de creatina, la creatina en suero no será un reflejo preciso de TFG en la condición de estado no constante de TFG. No obstante, el grado hasta cual cambia la creatina en suero desde el punto de referencia reflejará el cambio en la TFG. La creatina en suero se mide rápidamente y fácilmente y es específica para función renal.

[0102] Con fines de determinar el gasto urinario en una Producción de orina en base a mL/kg/hr, es adecuada la recogida y la medición de orina cada hora. En el caso cuando, por ejemplo, solamente estaba disponible una producción acumulativa de 24 horas y no se proporcionaron pesos de pacientes, se han descrito modificaciones menores de criterios de producción de orina RIFLE. Por ejemplo, Bagshaw et al., Nephrol. Dial. Transplant. 23: 1203 1210, 2008, asume un peso medio de paciente de 70 kg, y se asigna una clasificación RIFLE a los pacientes basándose en lo siguiente: <35 mL/h (Riesgo), <21 mL/h (Lesión) o <4 mL/h (Insuficiencia).

Selección de Régimen de Tratamiento

[0103] Una vez se obtiene un diagnóstico, el médico puede seleccionar fácilmente un régimen de tratamiento que es compatible con el diagnóstico, tal como iniciar terapia de reemplazo renal, retirar la administración de compuestos que se conocen que son dañinos para el riñón, trasplante de riñón, retrasar o evitar procedimientos que se conocen que son dañinos para el riñón, modificar administración terapéutica, iniciar terapia dirigida, etc. El experto en la materia conoce los tratamientos apropiados para numerosas enfermedades tratadas en relación con los procedimientos de diagnóstico descritos en el presente documento. Véanse, por ejemplo, Merck Manual of Diagnosis and Therapy, 17a Edición Merck Research Laboratories, Whitehouse Station, NJ, 1999. Adicionalmente, dado que los procedimientos y las composiciones descritos en el presente documento proporcionan información pronóstica, los marcadores de la presente invención pueden utilizarse para supervisar un proceso de tratamiento. Por ejemplo, el estado pronóstico mejorado o empeorado puede indicar que un tratamiento particular es o no es eficaz.

[0104] Un experto en la técnica aprecia fácilmente que la presente invención se adapta bien para cumplir los objetivos y obtener los resultados y las ventajas mencionadas, así como aquellas inherentes en los mismos. Los ejemplos proporcionados en el presente documento son representativos de las realizaciones preferidas, son ejemplares y no pretenden ser limitativas en el ámbito de la invención.

Ejemplo 1: Recogida de muestras de nefropatía inducida por contraste

[0105] El objetivo de este estudio de recogida de muestras es recoger muestras de plasma y orina y datos clínicos de pacientes antes y después de recibir medios de contraste intravascular. Se inscribieron aproximadamente 250 adultos sometidos a procedimientos radiográficos/angiográficos que implican administración intravascular de medio de contraste yodado. Para inscribirse en el estudio, cada paciente debe cumplir todos de los siguientes criterios y ninguno de los siguientes criterios de exclusión:

Criterios de Inclusión

hombres y mujeres de 18 años de edad o mayores;

sometidos a procedimientos radiográficos/angiográficos (tales como un TAC o intervención coronaria) que implican la administración intravascular de medio de contraste;

espera estar hospitalizado durante como mínimo 48 horas después de la administración de contraste.

capaz y dispuesto a proporcionar consentimiento escrito informado para la participación en el estudio y a cumplir con todos los procedimientos de estudio.

Criterios de Exclusión

[0106]

receptores de trasplante renal;

deterioro agudo de función renal antes del procedimiento de contraste;

ya recibe diálisis (tanto aguda como crónica) o tiene necesidad inminente de diálisis al inscribirse;

se espera que se someta a un procedimiento de cirugía mayor (tal como el que implica bypass cardiopulmonar) o un procedimiento de imagen adicional con medio de contraste con riesgo significativo para el agravio renal adicional dentro de 48 horas después de administración de contraste;

participación en un estudio clínico intervencionista con una terapia experimental en los 30 días anteriores; infección conocida con el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) o un virus de hepatitis.

[0107] Inmediatamente después de la primera administración de contraste (y después de cualquier preprocedimiento de hidratación) se recogen una muestra de sangre anticoagulada con EDTA (10 mL) y una muestra de orina (10 mL) de cada paciente. A continuación se recogen las muestras de sangre y orina a las 4 (±0,5), 8 (±1), 24 (±2), 48 (±2) y72 (±2) horas después de la última administración de medio de contraste durante el procedimiento de índice de contraste. La sangre se recoge por la venipunción directa o utilizando otro acceso venoso disponible, tal como una vaina femoral existente, línea venosa central, línea intravenosa periférica o vía de heparina. Estas muestras de sangre se procesan hasta plasma en el sitio clínico, se congelan y se envían a Astute Medical, Inc., San Diego, CA. Las muestras de orina del estudio se congelan y se envían a Astute Medical, Inc.

[0108] La creatina en suero se evalúa en el sitio inmediatamente antes de la primera administración (después de cualquier preprocedimiento de hidratación) y las 4 (±0,5), 8 (±1), 24 (±2) y 48 (±2), y 72 (±2) horas después de la última administración de contraste (idealmente al mismo tiempo que se obtienen las muestras de estudio). Adicionalmente, cada estatus de paciente se evalúa hasta el día 30 con respecto a mediciones adicionales de creatina en suero y orina, una necesidad de diálisis, estado de hospitalización y resultados clínicos adversos (incluyendo mortalidad).

[0109] Antes de la administración de contraste, se asigna a cada paciente un riesgo basado en la siguiente evaluación: presión arterial sistólica <80 mm Hg = 5 puntos; bomba de globo intraaórtico = 5 puntos; insuficiencia cardíaca congestiva (Clase III-IV o historia de edema pulmonar) = 5 puntos; edad >75 años = 4 puntos; nivel de hematocritos <39% para hombres, <35% para mujeres = 3 puntos; diabetes = 3 puntos; volumen de medio de contraste = 1 punto por cada 100 mL; nivel de creatina en suero >1,5 g/dL = 4 puntos O TFG aproximada 40-60 mL/min/1,73 m2 = 2 puntos, 20-40 mL/min/1,73 m2 = 4 puntos, < 20 mL/min/1,73 m2 = 6 puntos. Los riesgos asignados son los siguientes: riesgo de NIC y diálisis; 5 o menos puntos totales riesgo de NIC - 7,5%, riesgo de diálisis - 0,04%; 6-10 puntos totales = riesgo de NIC - 14%, riesgo de diálisis - 0,12%; 11-16 puntos totales = riesgo de NIC - 26,1%, riesgo de diálisis -1,09%; >16 puntos totales = riesgo de NIC - 57,3%, riesgo de diálisis -12,8%.

Ejemplo 2: Recogida de muestra de cirugía cardíaca

[0110] El objetivo de este estudio de recogida de muestra es recoger muestras de plasma y orina y datos clínicos de pacientes antes y después de recibir cirugía cardiovascular, un procedimiento que se considera potencialmente dañino para la función renal. Se inscribieron aproximadamente 900 adultos sometidos a tal cirugía. Para inscribirse en el estudio, cada paciente debe cumplir todos de los siguientes criterios y ninguno de los siguientes criterios de exclusión: Criterios de Inclusión

[0111]

hombres y mujeres de 18 años de edad o mayores; sometido a cirugía cardiovascular;

puntuación de riesgo del Índice Predictivo de Riesgo Toronto/Ottawa para Reemplazo Renal de como mínimo 2 (Wijeysundera et al., JAMA 297: 1801-9, 2007); y

Criterios de Inclusión

[0112]

embarazo conocido;

trasplante renal previo;

deterioro agudo de función renal antes de la inscripción (por ejemplo, cualquier categoría de criterios RIFLE); ya recibe diálisis (tanto aguda como crónica) o tiene necesidad inminente de diálisis al inscribirse; actualmente inscrito en otro estudio clínico o se espera que se inscriba en otro estudio clínico en el periodo de 7 días después de la cirugía cardíaca que implica infusión de fármacos o una intervención para AKI;

infección conocida con el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) o un virus de hepatitis.

[0113] 3 horas después de la primera incisión (y después de cualquier preprocedimiento de hidratación) se recogen una muestra de sangre anticoagulada con EDTA (10 mL), sangre completa (3mL) y una muestra de orina (10 mL) de cada paciente. A continuación se recogen las muestras de sangre y orina a las 3 (±0,5), 6 (±0,5), 12 (±2), 24 (±2) y 48 (±2) horas después del procedimiento y a continuación cada día desde el día 3 hasta el día 7, si el sujeto permanece en el hospital. La sangre se recoge por la venipunción directa o utilizando otro acceso venoso disponible, tal como una vaina femoral existente, línea venosa central, línea intravenosa periférica o vía de heparina. Estas muestras de sangre se congelan y se envían a Astute Medical, Inc., San Diego, CA. Las muestras de orina del estudio se congelan y se envían a Astute Medical, Inc.

Ejemplo 3: Recogida de muestra de sujeto sumamente enfermo

[0114] El objetivo de este estudio es recoger muestras de pacientes sumamente enfermos. Aproximadamente 900 adultos Se inscribirán aproximadamente 900 adultos que se espera que estén en la UCI durante al menos 48 horas. Para inscribirse en el estudio, cada paciente debe cumplir con todos los siguientes criterios de inclusión y ninguno de los siguientes criterios de exclusión:

Criterios de inclusión

[0115]

Hombres y mujeres de 18 años de edad o mayores;

Población de estudio 1: aproximadamente 300 pacientes que tienen al menos uno de:

shock (PAS <90 mmHg y/o necesidad de soporte vasopresor para mantener PAM > 60 mmHg y/o caída documentada de PAS de al menos 40 mmHg); y

sepsis;

Población de estudio 2: aproximadamente 300 pacientes que tienen al menos uno de:

antibióticos intravenosos solicitados en la entrada computarizada de órdenes médicas (CPOE) dentro de las 24 horas posteriores a la inscripción;

exposición a medios de contraste dentro de las 24 horas posteriores a la inscripción;

aumento de la presión intraabdominal con insuficiencia cardíaca aguda descompensada; y trauma severo como la razón principal para la admisión en la UCI y es probable que sea hospitalizado en la UCI durante 48 horas después de la inscripción;

Población de estudio 3: aproximadamente 300 pacientes

se espera que sea hospitalizado en un entorno de cuidados intensivos (UCI o DE) con un factor de riesgo conocido de lesión renal aguda (por ejemplo, sepsis, hipotensión/shock (Shock = PA sistólica < 90 mmHg y/o la necesidad de soporte vasopresor para mantener PAM > 60 mmHg y/o una caída documentada de PAS > 40 mmHg), traumatismo mayor, hemorragia o cirugía mayor); y/o se espera que sea hospitalizado en la UCI durante al menos 24 horas después de la inscripción.

Criterio de exclusión

[0116]

embarazo conocida;

individuos recluidos;

trasplante renal previo;

empeoramiento agudo conocido de la función renal antes de la inscripción (p. ej., cualquier categoría de criterios RIFLE);

diálisis recibida (ya sea aguda o crónica) dentro de los 5 días anteriores a la inscripción o en necesidad inminente de diálisis en el momento de la inscripción;

infección conocida por el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) o el virus de la hepatitis;

solo cumple con el criterio de inclusión de PAS < 90 mmHg establecido anteriormente, y no tiene impacto en la opinión del médico tratante o del investigador principal.

[0117] Después de proporcionar el consentimiento informado, se recogen una muestra de sangre anticoagulada con EDTA (10 ml) y una muestra de orina (25-30 ml) de cada paciente. A continuación, se recogen muestras de sangre y orina 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración del contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. La sangre se extrae mediante venopunción directa o mediante otro acceso venoso disponible, tal como una vaina femoral existente, una vía venosa central, una vía intravenosa periférica o un “hep-lock”. Estas muestras de sangre del estudio se procesan a plasma en la línica, se congelan y se envían a Astute Medical, Inc., San Diego, CA. Las muestras de orina del estudio se congelan y se envían a Astute Medical, Inc.

Ejemplo 4. Formato de inmunoensayo

[0118] Los analitos se miden usando técnicas estándar de inmunoensayo enzimático tipo sándwich. Un primer anticuerpo que se une al analito se inmoviliza en los pocillos de una microplaca de poliestireno de 96 pocillos. Los patrones de analito y las muestras de prueba se pipetean en los pocillos apropiados y cualquier analito presente se une al anticuerpo inmovilizado. Después de lavar cualquier sustancia no unida, se añade a los pocillos un segundo anticuerpo conjugado con peroxidasa de rábano picante que se une al analito, formando así complejos sándwich con el analito (si está presente) y el primer anticuerpo. Después de un lavado para eliminar cualquier reactivo de enzimaanticuerpo no unido, se añade a los pocillos una solución de sustrato que comprende tetrametilbencidina y peróxido de hidrógeno. El color se revela en proporción a la cantidad de analito presente en la muestra. Se detiene el revelado del color y se mide la intensidad del color a 540 nm o 570 nm. Se asigna una concentración de analito a la muestra de prueba en comparación con una curva patrón determinada a partir de los patrones de analito. Las unidades para la quimiocina 16 con motivo C-C descritas en el presente documento son ng/ml. Las unidades para la quimiocina 14 con del motivo C-C descritas en el presente documento son ng/ml. Las unidades para el receptor de proteína tirosina quinasa soluble UFO descritas en el presente documento son ng/ml.

Ejemplo 5. Muestras de donantes aparentemente sanos y pacientes con enfermedades crónicas

[0119] Se adquirieron muestras de orina humana de donantes sin enfermedad crónica o aguda conocida ("donantes aparentemente sanos") de dos proveedores (Golden West Biologicals, Inc., 27625 Commerce Center Dr., Temecula, CA 92590 y Virginia Medical Research, Inc., 915 First Colonial Rd., Virginia Beach, VA 23454). Las muestras de orina se transportaron y almacenaron congeladas a menos de -20 °C. Los proveedores proporcionaron información demográfica de los donantes individuales, incluido el sexo, la raza (negro/blanco), el tabaquismo y la edad.

[0120] Se adquirieron muestras de orina humana de donantes con diversas enfermedades crónicas ("Pacientes con enfermedades crónicas") que incluyen insuficiencia cardíaca congestiva, enfermedad de las arterias coronarias, enfermedad renal crónica, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, diabetes mellitus e hipertensión de Virginia Medical Research, Inc., 915 First Colonial Rd., Virginia Beach, VA 23454. Las muestras de orina se transportaron y almacenaron congeladas a menos de -20 grados centígrados. El proveedor proporcionó un formulario de caso clínico para cada donante individual con edad, sexo, raza (negro/blanco), estado de tabaquismo y consumo de alcohol, altura, peso, diagnóstico de enfermedades crónicas, medicamentos actuales y cirugías previas.

Ejemplo 6. Uso de quimiocina 14 con motivo C-C para evaluar el estado renal en pacientes ingresados en la UCI: Recuperación a RIFLE 0 de RIFLE I y F

[0121] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) están inscritos en el siguiente estudio. Se recogen muestras de sangre anticoaguladas con EDTA (10 ml) y muestras de orina (25-30 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración de contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. La quimiocina 14 con motivo C-C se mide en las primeras muestras recogidas, mientras los pacientes estaban en RIFLE I o F mediante procedimientos de inmunoensayo estándar utilizando reactivos de ensayo disponibles comercialmente.

[0122] El estado renal se evalúa según los criterios de RIFLE basados en la creatinina sérica, el gasto urinario o ambos creatinina sérica y gasto urinario durante un período que comienza a los 12, 24, 48, o 72 horas después de la recogida de muestras o en cualquier momento dentro de los 7 días después de la recogida de muestra. Se definen dos cohortes para representar una población "recuperada" y una "no recuperada". "Recuperado" indica aquellos pacientes cuya etapa máxima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas es sin lesión (RIFLE 0). "No recuperado" indica aquellos pacientes cuya etapa máxima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas están en riesgo de lesión (R), lesión (I) o insuficiencia (F). Si un paciente muere o se coloca en una terapia de reemplazo renal (TRR) dentro de los 9 días posteriores a la inscripción, el paciente se considera "no recuperado".

[0123] La capacidad de distinguir los cohortes "recuperados" y "no recuperados" se determina usando análisis característica operativa del receptor (ROC).

Ejemplo 7. Uso de quimiocina 14 con motivo C-C para evaluar el estado renal en pacientes ingresados en la UCI: Recuperación a RIFLE 0 de RIFLE I y F

[0124] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) están inscritos en el siguiente estudio. Se recogen muestras de sangre anticoaguladas con EDTA (10 ml) y muestras de orina (25-30 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración de contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. La quimiocina 14 con motivo C-C se mide en las primeras muestras recogidas, mientras los pacientes estaban en RIFLE I o F mediante procedimientos de inmunoensayo estándar utilizando reactivos de ensayo disponibles comercialmente.

[0125] El estado renal se evalúa según los criterios de RIFLE basados en la creatinina sérica, el gasto urinario o ambos creatinina sérica y gasto urinario durante un período que comienza a los 12, 24, 48, o 72 horas después de la recogida de muestras o en cualquier momento dentro de los 7 días después de la recogida de muestra. Se definen dos cohortes para representar una población "recuperada" y una "no recuperada". "Recuperado" indica aquellos pacientes cuya etapa máxima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas es sin lesión (RIFLE 0) o en riesgo de lesión (R). "No recuperado" indica aquellos pacientes cuya etapa máxima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas es con lesión (I) o insuficiencia (F). Si un paciente muere o se coloca en una terapia de reemplazo renal (TRR) dentro de los 9 días posteriores a la inscripción, el paciente se considera "no recuperado".

[0126] La capacidad de distinguir los cohortes "recuperados" y "no recuperados" se determina usando análisis característica operativa del receptor (ROC).

Ejemplo 8. Uso de quimiocina 16 con motivo C-C para evaluar el estado renal en pacientes ingresados en la UCI: Recuperación a RIFLE 0 de RIFLE I y F

[0127] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) están inscritos en el siguiente estudio. Se recogen muestras de sangre anticoaguladas con EDTA (10 ml) y muestras de orina (25-30 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración de contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. La quimiocina 18 con motivo C-C se mide en las primeras muestras recogidas, mientras los pacientes estaban en RIFLE I o F mediante procedimientos de inmunoensayo estándar utilizando reactivos de ensayo disponibles comercialmente.

[0128] El estado renal se evalúa según los criterios de RIFLE basados en la creatinina sérica, el gasto urinario o ambos creatinina sérica y gasto urinario durante un período que comienza a los 12, 24, 48, o 72 horas después de la recogida de muestras o en cualquier momento dentro de los 7 días después de la recogida de muestra. Se definen dos cohortes para representar una población "recuperada" y una "no recuperada". "Recuperado" indica aquellos pacientes cuya etapa máxima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas es sin lesión (RIFLE 0). "No recuperado" indica aquellos pacientes cuya etapa máxima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas están en riesgo de lesión (R), lesión (I) o insuficiencia (F). Si un paciente muere o se coloca en una terapia de reemplazo renal (TRR) dentro de los 9 días posteriores a la inscripción, el paciente se considera "no recuperado".

[0129] La capacidad de distinguir los cohortes "recuperados" y "no recuperados" se determina usando análisis característica operativa del receptor (ROC).

Tabla 8.7: Comparación de niveles de marcadores y el área bajo la curva ROC (AUC) en muestras con EDTA para los cohortes “recuperados” y “no recuperados”, donde la recuperación empieza a las 24 horas después de la recogida de muestras y el estado renal se evalúa mediante la creatinina sérica (sCr) únicamente, gasto urinario (UO) únicamente o el criterio RIFLE de creatinina sérica (sCr) o gasto urinario.

continuación

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Ejemplo 9. Uso de quimiocina 16 con motivo C-C para evaluar el estado renal en pacientes ingresados en la UCI: Recuperación a RIFLE 0 de RIFLE I y F

[0130] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) están inscritos en el siguiente estudio. Se recogen muestras de sangre anticoaguladas con EDTA (10 ml) y muestras de orina (25-30 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración de contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. La quimiocina 16 con motivo C-C se mide en las primeras muestras recogidas, mientras los pacientes estaban en RIFLE I o F mediante procedimientos de inmunoensayo estándar utilizando reactivos de ensayo disponibles comercialmente.

[0131] El estado renal se evalúa según los criterios de RIFLE basados en la creatinina sérica, el gasto urinario o ambos creatinina sérica y gasto urinario durante un período que comienza a los 12, 24, 48, o 72 horas después de la recogida de muestras o en cualquier momento dentro de los 7 días después de la recogida de muestra. Se definen dos cohortes para representar una población "recuperada" y una "no recuperada". "Recuperado" indica aquellos pacientes cuya etapa máxima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas es sin lesión (RIFLE 0) o en riesgo de lesión (R). "No recuperado" indica aquellos pacientes cuya etapa máxima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas están con lesión (I) o insuficiencia (F). Si un paciente muere o se coloca en una terapia de reemplazo renal (TRR) dentro de los 9 días posteriores a la inscripción, el paciente se considera "no recuperado".

[0132] La capacidad de distinguir los cohortes "recuperados" y "no recuperados" se determina usando análisis característica operativa del receptor (ROC).

'O O₀

Ejemplo 10. Uso del receptor de proteína tirosina quinasa UFO para evaluar el estado renal en pacientes ingresados en la UCI: Recuperación a RIFLE 0 de RIFLE I y F

[0133] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) están inscritos en el siguiente estudio. Se recogen muestras de sangre anticoaguladas con EDTA (10 ml) y muestras de orina (25-30 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración de contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. El receptor de proteína tirosina quinasa UFO se mide en las primeras muestras recogidas, mientras los pacientes estaban en RIFLE I o F mediante procedimientos de inmunoensayo estándar utilizando reactivos de ensayo disponibles comercialmente.

[0134] El estado renal se evalúa según los criterios de RIFLE basados en la creatinina sérica, el gasto urinario o ambos creatinina sérica y gasto urinario durante un período que comienza a los 12, 24, 48, o 72 horas después de la recogida de muestras o en cualquier momento dentro de los 7 días después de la recogida de muestra. Se definen dos cohortes para representar una población "recuperada" y una "no recuperada". "Recuperado" indica aquellos pacientes cuya etapa máxima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas es sin lesión (RIFLE 0). "No recuperado" indica aquellos pacientes cuya etapa máxima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas están en riesgo de lesión (R), lesión (I) o insuficiencia (F). Si un paciente muere o se coloca en una terapia de reemplazo renal (TRR) dentro de los 9 días posteriores a la inscripción, el paciente se considera "no recuperado".

[0135] La capacidad de distinguir los cohortes "recuperados" y "no recuperados" se determina usando análisis característica operativa del receptor (ROC).

'O 0

Ejemplo 11. Uso del receptor de proteína tirosina quinasa UFO para evaluar el estado renal en pacientes ingresados en la UCI: Recuperación a RIFLE 0 de RIFLE I y F

[0136] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) están inscritos en el siguiente estudio. Se recogen muestras de sangre anticoaguladas con EDTA (10 ml) y muestras de orina (25-30 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración de contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. El receptor de proteína tirosina quinasa UFO se mide en las primeras muestras recogidas, mientras los pacientes estaban en RIFLE I o F mediante procedimientos de inmunoensayo estándar utilizando reactivos de ensayo disponibles comercialmente.

[0137] El estado renal se evalúa según los criterios de RIFLE basados en la creatinina sérica, el gasto urinario o ambos creatinina sérica y gasto urinario durante un período que comienza a los 12, 24, 48, o 72 horas después de la recogida de muestras o en cualquier momento dentro de los 7 días después de la recogida de muestra. Se definen dos cohortes para representar una población "recuperada" y una "no recuperada". "Recuperado" indica aquellos pacientes cuya etapa máxima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas es sin lesión (RIFLE 0) o con riesgo de lesión (R). "No recuperado" indica aquellos pacientes cuya etapa máxima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas están con lesión (I) o insuficiencia (F). Si un paciente muere o se coloca en una terapia de reemplazo renal (TRR) dentro de los 9 días posteriores a la inscripción, el paciente se considera "no recuperado".

[0138] La capacidad de distinguir los cohortes "recuperados" y "no recuperados" se determina usando análisis característica operativa del receptor (ROC).

Ejemplo 12. Uso de quimiocina 14 con motivo C-C para evaluar el estado renal en pacientes ingresados en la UCI: persistente en RIFLE F

[0139] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) están inscritos en el siguiente estudio. Se recogen muestras de sangre anticoaguladas con EDTA (10 ml) y muestras de orina (25-30 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración de contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. La quimiocina 14 con motivo C-C se mide en las primeras muestras recogidas mientras los pacientes estaban en RIFLE I o F mediante procedimientos de inmunoensayo estándar utilizando reactivos de ensayo disponibles comercialmente.

[0140] El estado renal se evalúa mediante los criterios RIFLE basados en la creatinina sérica, el gasto urinario o tanto la creatinina sérica como el gasto urinario. Se definen dos cohortes para representar una población "persistente" y una "no persistente". "Persistente" indica aquellos pacientes cuya etapa RIFLE mínima durante un período de 24, 48 o 72 horas es insuficiencia (F) donde el período de persistencia puede comenzar desde el momento de la recogida de la muestra hasta 24, 48, 72, 96 o 168 horas después de la recogida de la muestra. "No persistente" indica aquellos pacientes que no son persistentes en la insuficiencia (F) y cuya etapa de RIFLE mínima durante un período de 24, 48 o 72 horas es sin lesión (RIFLE 0), riesgo de lesión (R) o lesión (I) donde el período de persistencia puede comenzar desde el momento de la recogida de la muestra hasta 24, 48, 72, 96 o 168 horas después de la recogida de la muestra.

[0141] La capacidad de distinguir las cohortes "persistentes" y "no persistentes" se determina usando análisis característica operativa del receptor (ROC).

Ejemplo 13. Uso de quimiocina 14 con motivo C-C para evaluar el estado renal en pacientes ingresados en la UCI: persistente en RIFLE I o F

[0142] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) están inscritos en el siguiente estudio. Se recogen muestras de sangre anticoaguladas con EDTA (10 ml) y muestras de orina (25-30 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración de contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. La quimiocina 14 con motivo C-C se mide en las primeras muestras recogidas mientras los pacientes estaban en RIFLE I o F mediante procedimientos de inmunoensayo estándar utilizando reactivos de ensayo disponibles comercialmente.

[0143] El estado renal se evalúa mediante los criterios RIFLE basados en la creatinina sérica, el gasto urinario o tanto la creatinina sérica como el gasto urinario. Se definen dos cohortes para representar una población "persistente" y una "no persistente". "Persistente" indica aquellos pacientes cuya etapa RIFLE mínima durante un período de 24, 48 o 72 horas es lesión (I) o insuficiencia (F) donde el período de persistencia puede comenzar desde el momento de la recogida de la muestra hasta 24, 48, 72, 96 o 168 horas después de la recogida de la muestra. "No persistente" indica aquellos pacientes que no persisten en la lesión (I) o insuficiencia (F) y cuya etapa de RIFLE mínima durante un período de 24, 48 o 72 horas es sin lesión (RIFLE 0) o riesgo de lesión (R) donde el período de persistencia puede comenzar desde el momento de la recogida de la muestra hasta 24, 48, 72, 96 o 168 horas después de la recogida de la muestra.

[0144] La capacidad de distinguir las cohortes "persistentes" y "no persistentes" se determina usando análisis característica operativa del receptor (ROC).

Ejemplo 14. Uso de quimiocina 16 con motivo C-C para evaluar el estado renal en pacientes ingresados en la UCI: persistente en RIFLE F

[0145] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) están inscritos en el siguiente estudio. Se recogen muestras de sangre anticoagulada con EDTA (10 ml) y muestras de orina (25-30 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración de contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. La quimiocina 16 con motivo C-C se mide en las primeras muestras recogidas mientras los pacientes estaban en RIFLE I o F mediante procedimientos de inmunoensayo estándar utilizando reactivos de ensayo disponibles comercialmente.

[0146] El estado renal se evalúa mediante los criterios RIFLE basados en la creatinina sérica, el gasto urinario o tanto la creatinina sérica como el gasto urinario. Se definen dos cohortes para representar una población "persistente" y una "no persistente". "Persistente" indica aquellos pacientes cuya etapa RIFLE mínima durante un período de 24, 48 o 72 horas es insuficiencia (F) donde el período de persistencia puede comenzar desde el momento de la recogida de la muestra hasta 24, 48, 72, 96 o 168 horas después de la recogida de la muestra. "No persistente" indica aquellos pacientes que no son persistentes en la insuficiencia (F) y cuya etapa mínima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas es sin lesión (RIFLE 0), riesgo de lesión (R) o lesión (I) donde el período de persistencia puede comenzar desde el momento de la recogida de la muestra hasta 24, 48, 72, 96 o 168 horas después de la recogida de la muestra.

[0147] La capacidad de distinguir las cohortes "persistentes" y "no persistentes" se determina usando análisis característica operativa del receptor (ROC).

Ejemplo 15. Uso de quimiocina 16 con motivo C-C para evaluar el estado renal en pacientes ingresados en la UCI: persistente en RIFLE I o F

[0148] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) están inscritos en el siguiente estudio. Se recogen muestras de sangre anticoagulada con EDTA (10 ml) y muestras de orina (25-30 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración de contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. La quimiocina 16 con motivo C-C se mide en las primeras muestras recogidas mientras los pacientes estaban en RIFLE I o F mediante procedimientos de inmunoensayo estándar utilizando reactivos de ensayo disponibles comercialmente.

[0149] El estado renal se evalúa mediante los criterios RIFLE basados en la creatinina sérica, el gasto urinario o tanto la creatinina sérica como el gasto urinario. Se definen dos cohortes para representar una población "persistente" y una "no persistente". "Persistente" indica aquellos pacientes cuya etapa RIFLE mínima durante un período de 24, 48 o 72 horas es lesión (I) o insuficiencia (F) donde el período de persistencia puede comenzar desde el momento de la recogida de la muestra hasta 24, 48, 72, 96 o 168 horas después de la recogida de la muestra. "No persistente" indica aquellos pacientes que no persisten en la lesión (I) o insuficiencia (F) y cuya etapa de RIFLE mínima durante un período de 24, 48 o 72 horas es sin lesión (RIFLE 0) o riesgo de lesión (R) donde el período de persistencia puede comenzar desde el momento de la recogida de la muestra hasta 24, 48, 72, 96 o 168 horas después de la recogida de la muestra.

[0150] La capacidad de distinguir las cohortes "persistentes" y "no persistentes" se determina usando análisis característica operativa del receptor (ROC).

'O ₀

'O ₀

'O ₀

Ejemplo 16. Uso del receptor de proteína tirosina quinasa UFO para evaluar el estado renal en pacientes ingresados en la UCI: persistente en RIFLE F

[0151] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) están inscritos en el siguiente estudio. Se recogen muestras de sangre anticoagulada con EDTA (10 ml) y muestras de orina (25-30 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración de contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. El receptor de proteína tirosina quinasa UFO se mide en las primeras muestras recogidas mientras los pacientes estaban en RIFLE I o F mediante procedimientos de inmunoensayo estándar usando reactivos de ensayo disponibles comercialmente.

[0152] El estado renal se evalúa mediante los criterios RIFLE basados en la creatinina sérica, el gasto urinario o tanto la creatinina sérica como el gasto urinario. Se definen dos cohortes para representar una población "persistente" y una "no persistente". "Persistente" indica aquellos pacientes cuya etapa RIFLE mínima durante un período de 24, 48 o 72 horas es insuficiencia (F) donde el período de persistencia puede comenzar desde el momento de la recogida de la muestra hasta 24, 48, 72, 96 o 168 horas después de la recogida de muestra. "No persistente" indica aquellos pacientes que no son persistentes en la insuficiencia (F) y cuya etapa mínima de RIFLE durante un período de 24, 48 o 72 horas es sin lesión (RIFLE 0), riesgo de lesión (R) o lesión (I) donde el período de persistencia puede comenzar desde el momento de la recogida de la muestra hasta 24, 48, 72, 96 o 168 horas después de la recogida de la muestra.

[0153] La capacidad de distinguir las cohortes "persistentes" y "no persistentes" se determina usando análisis característica operativa del receptor (ROC).

Ejemplo 17. Uso del receptor de proteína tirosina quinasa UFO para evaluar el estado renal en pacientes ingresados en la UCI: persistente en RIFLE I o F

[0154] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) están inscritos en el siguiente estudio. Se recogen muestras de sangre anticoagulada con EDTA (10 ml) y muestras de orina (25-30 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, 4 (± 0,5) y 8 (± 1) horas después de la administración de contraste (si corresponde); a las 12 (± 1), 24 (± 2) y 48 (± 2) horas después de la inscripción, y posteriormente diariamente hasta del día 7 al día 14 mientras el sujeto está hospitalizado. El receptor de proteína tirosina quinasa UFO se mide en las primeras muestras recogidas mientras los pacientes estaban en RIFLE I o F mediante procedimientos de inmunoensayo estándar usando reactivos de ensayo disponibles comercialmente.

[0155] El estado renal se evalúa mediante los criterios RIFLE basados en la creatinina sérica, el gasto urinario o tanto la creatinina sérica como el gasto urinario. Se definen dos cohortes para representar una población "persistente" y una "no persistente". "Persistente" indica aquellos pacientes cuya etapa RIFLE mínima durante un período de 24, 48 o 72 horas es lesión (I) o insuficiencia (F) donde el período de persistencia puede comenzar desde el momento de la recogida de la muestra hasta 24, 48, 72, 96 o 168 horas después de la recogida de la muestra. "No persistente" indica aquellos pacientes que no persisten en la lesión (I) o insuficiencia (F) y cuya etapa de RIFLE mínima durante un período de 24, 48 o 72 horas es sin lesión (RIFLE 0) o riesgo de lesión (R) donde el período de persistencia puede comenzar desde el momento de la recogida de la muestra hasta 24, 48, 72, 96 o 168 horas después de la recogida de la muestra.

[0156] La capacidad de distinguir las cohortes "persistentes" y "no persistentes" se determina usando análisis característica operativa del receptor (ROC).

Ejemplo 18. Biomarcadores de IRA en pacientes de UCI

[0157] Los pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) se inscriben en el siguiente estudio. Cada paciente se clasifica por el estado renal como sin lesión (0), riesgo de lesión (R), lesión (I) e insuficiencia (F) de acuerdo con la etapa máxima alcanzada dentro de los 7 días posteriores a la inscripción según lo determinado por los criterios RIFLE. Se recogen muestras de sangre anticoagulada con EDTA (10 ml) y muestras de orina (50 ml) de cada paciente en el momento de la inscripción, a las 12 (± 1), 24 (± 2), 36 (± 2), 48 (± 2), 60 (± 2), 72 (± 2) y 84 (± 2) horas después de la inscripción, y luego diariamente hasta el día 7 mientras el sujeto está hospitalizado. La quimiocina 14 con motivo C-C, la quimioquina 16 con motivo C-C y el receptor de proteína tirosina quinasa UFO se miden mediante procedimientos de inmunoensayo estándar utilizando reactivos de ensayo disponibles comercialmente en las muestras de orina y el componente de plasma de las muestras de sangre recogidas.

[0158] Dos cohortes se definen que representan una población "enferma" y una población "normal". Si bien estos términos se utilizan por conveniencia, "enferma" y "normal" simplemente representan dos cohortes para la comparación (digamos RIFLE 0 vs RIFLE R, I y F; R iFl E 0 vs RIFLE R; RIFLE 0 y R vs RIFLE I y F; etc.). El tiempo "etapa máxima previa" representa el momento en el que se recoge una muestra, en relación con el momento en que un paciente en particular alcanza la etapa de enfermedad más baja definida para esa cohorte, agrupada en tres grupos que son /-12 horas. Por ejemplo, "24 horas antes", que usa 0 frente a R, I, F como las dos cohortes significaría 24 horas (+/-12 horas) antes de alcanzar la etapa R (o I si no hay muestra en R, o F si no muestra en R o I).

[0159] Se genera una curva característica operativa del receptor (ROC) para cada biomarcador y se determina el área bajo la curva ROC (AUC). Los pacientes de la cohorte 2 también se separan según el motivo de adjudicación de la cohorte 2, que se basa en las mediciones de creatinina sérica (sCr), se basa en el gasto urinario (UO) o se basa en las mediciones de creatinina sérica o gasto urinario. Usando el mismo ejemplo discutido anteriormente (0 vs R, I, F), para aquellos pacientes adjudicados al estadio R, I o F sobre la base de las mediciones de creatinina sérica únicamente, la cohorte del estadio 0 puede incluir pacientes adjudicados al estadio R, I, o F sobre la base del gasto urinario; para aquellos pacientes adjudicados al estadio R, I o F sobre la base del gasto urinario únicamente, la cohorte del estadio 0 puede incluir pacientes adjudicados al estadio R, I o F sobre la base de las mediciones de creatinina sérica; y para aquellos pacientes adjudicados a la etapa R, I o F sobre la base de las mediciones de creatinina sérica o el gasto urinario, la cohorte del estadio 0 contiene solo pacientes en el estadio 0 tanto para las mediciones de creatinina sérica como para el gasto urinario. Además, en los datos de los pacientes adjudicados sobre la base de las mediciones de creatinina sérica o el gasto urinario, se utiliza el procedimiento de adjudicación que produjo la etapa RIFLE más grave.

[0160] La capacidad de distinguir cohorte 1 de la cohorte 2 se determina utilizando análisis ROC. SE es el error estándar de la AUC, n es el número de muestras o pacientes individuales ("pts", como se indica). Los errores estándar se calculan como se describe en Hanley, J. A., y McNeil, B. J. The meaning and use of the area under a receiver operating characteristic (ROC) curve. Radiology (1982) 143: 29-36; Los valores p se calculan con una prueba Z de dos colas. Un AUC < 0,5 es indicativo de un marcador hacia negativo para la comparación, y un AUC > 0,5 es indicativo de un marcador hacia positivo para la comparación.

[0161] Se seleccionan varias concentraciones umbral (o "corte") de biomarcador y se determinan la sensibilidad y especificidad asociadas para distinguir cohorte 1 de la cohorte 2. OR es la relación de probabilidades calculada para la concentración de corte particular, y el IC del 95% es el intervalo de confianza para la relación de probabilidades.

Tabla 18.1 Comparación de niveles de marcador en muestras de orina recogidas del cohorte 1 (pacientes que no progresaron más allá de RIFLE estadio 0) y en muestras de orina recogidas de los sujetos a las 0, 24 horas y 48 horas antes de alcanzar el estadio R I o F en el cohorte 2.

Tabla 18.2 Comparación de niveles de marcador en muestras de orina recogidas del cohorte 1 (pacientes que no progresaron más allá de RIFLE estadio 0 o R) y en muestras de orina recogidas de los sujetos a las 0, 24 horas y 48 horas antes de alcanzar el estadio I o F en el cohorte 2.

Tabla 18.3 Comparación de niveles de marcador en muestras de orina recogidas dentro de las 12 horas de alcanzar el estadio R del cohorte 1(pacientes que alcanzaron, pero no progresaron más allá de RIFLE estadio R) y del cohorte 2 acientes ue alcanzaron RIFLE estadio I o F.

Tabla 18.4 Comparación de niveles máximo de marcador en muestras de orina recogidas del cohorte 1 (pacientes que no progresaron más allá de RIFLE estadio 0) y los valores máximos en muestras de orina recogidas de los suetos entre la inscri ción 0 24 horas 48 horas antes de alcanzar el estadio F en el cohorte 2.

T a b la 18.7 C o m p a ra c ió n de n ive le s de m a rca d o r en m ue s tra s de o rina reco g idas de n tro de las 12 ho ras de a lca n za r el e s ta d io R de l coh o rte 1 (p ac ien tes que a lcan za ron , pero no p ro g re sa ro n m ás a llá de R IF LE e s ta d io R) y del h r 2 i n l n z r n R IF LE i I F .

T a b la 18.9 C o m p a ra c ió n de n ive les de m a rca d o r en m u e s tra s de o rina reco g idas del coh o rte 1 (p a c ie n te s que no p ro g re sa ro n m ás a llá de R IF LE e s ta d io 0) y en m u e s tra s de o rina reco g idas de los su je tos a las 0, 24 ho ras y 48 h r n l n z r l i R I F n l h r 2.

T a b la 18.10 C o m p a ra c ió n de n ive les de m a rca d o r en m u e s tra s de o rina reco g idas de l coh o rte 1 (p a c ie n te s que no p ro g re sa ro n m ás a llá de R IF LE e s ta d io 0 o R) y en m ue s tra s de o rina reco g idas de los su je tos a las 0, 24 ho ras y 48 ho ras an tes de a lc a n z a r el e s ta d io I oF en el coh o rte 2.

T a b la 18.11 C o m p a ra c ió n de n ive les de m a rc a d o r en m u e s tra s de o rina reco g idas de n tro de las 12 ho ras de a lc a n z a r el e s ta d io R de l coh o rte 1 (p ac ien tes que a lcan za ron , pero no p ro g re sa ro n m ás a llá de R IF LE e s ta d io R) y l h r 2 i n l n z r n R IF LE i I F .

Tabla 18.12 Comparación de niveles máximos de marcador en muestras de orina recogidas del cohorte 1 (pacientes que no progresaron más allá de RIFLE estadio 0) y los valores máximos en muestras de orina recogidas de los suetos entre la inscri ción las 0 24 horas 48 horas antes de alcanzar el estadio F en el cohorte 2.

[0162] Los ejemplos proporcionados en el presente documento son representativos de realizaciones preferidas, son solo ejemplos, y no pretenden ser limitaciones en el alcance de la invención. A los expertos en la técnica se les ocurrirán modificaciones y otros usos.

[0163] Todas las patentes y publicaciones mencionadas en la memoria descriptiva son indicativas de los niveles de los expertos en la técnica a la que pertenece la invención.

[0164] La presente invención descrita ilustrativamente en el presente documento se puede poner en práctica de manera adecuada en ausencia de cualquier elemento o elementos, limitación o limitaciones que no se describan específicamente en el presente documento. Así, por ejemplo, en cada caso de la presente memoria, cualquiera de los términos "que comprende", "que consiste esencialmente en" y "que consiste en" puede reemplazarse por cualquiera de los otros dos términos. Los términos y expresiones que se han empleado se utilizan como términos de descripción y no de limitación, y no hay intención de que en el uso de dichos términos y expresiones se excluya cualquier equivalente de las características mostradas y descritas o partes de las mismas, pero se reconoce que son posibles varias modificaciones dentro del alcance de la invención reivindicada. Por lo tanto, debe entenderse que aunque la presente invención se ha descrito específicamente mediante realizaciones preferidas y características opcionales, un experto en la materia puede recurrir a una modificación y variación de los conceptos descritos en el presente documento, y que dichas modificaciones y variaciones se consideran dentro del alcance de la presente invención, tal como se define por las reivindicaciones adjuntas.

[0165] Otras realizaciones se exponen en las siguientes reivindicaciones.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Procedimiento para evaluar el estado renal en un sujeto, que comprende:

realizar un procedimiento de ensayo configurado para detectar quimiocina 14 con motivo C-C y, opcionalmente, además, un procedimiento de ensayo configurado para detectar quimiocina 16 con motivo C-C, y/o un procedimiento de ensayo configurado para detectar receptor de proteína tirosina quinasa UFO en una muestra de orina, sangre, suero o plasma obtenida del sujeto para proporcionar uno o más resultados de ensayo; y

correlacionar el resultado o resultados del ensayo con el estado renal del sujeto.

2. Procedimiento, según la reivindicación 1, en el que dicha etapa de correlación comprende correlacionar el resultado o resultados del ensayo con uno o más de estratificación de riesgo, diagnóstico, estadificación, pronóstico, clasificación y seguimiento del estado renal del sujeto.

3. Procedimiento, según la reivindicación 1, en el que dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de uno o más cambios futuros en el estado renal al sujeto basándose en el resultado o resultados del ensayo.

4. Procedimiento, según la reivindicación 3, en el que dichos uno o más cambios futuros en el estado renal comprenden uno o más de una futura lesión de la función renal, una futura reducción de la función renal, una futura mejora de la función renal y una futura insuficiencia renal aguda (IRA).

5. Procedimiento, según una de las reivindicaciones 1-4, en el que dicho resultado o resultados del ensayo comprenden una concentración medida de quimiocina 14 con motivo C-C y, opcionalmente, además, una concentración medida de quimiocina 16 con motivo C-C, y/o una concentración medida de receptor de proteína tirosina quinasa UFO.

6. Procedimiento, según la reivindicación 3, en el que dichos uno o más cambios futuros en el estado renal comprenden un resultado clínico relacionado con una lesión renal sufrida por el sujeto, o

en el que la probabilidad de uno o más cambios futuros en el estado renal es que un evento de interés es probable que ocurra más o menos dentro de los 30 días, 21 días, 14 días, 7 días, 5 días, 96 horas, 72 horas, 48 horas, 36 horas, 24 horas o 12 horas del momento en que se obtiene una muestra de orina, sangre, suero o plasma del sujeto, preferiblemente en el que dichos uno o más cambios futuros en el estado renal comprenden uno o más de una futura lesión de la función renal, una futura reducción de la función renal, una futura mejora de la función renal y una futura insuficiencia renal aguda (IRA).

7. Procedimiento, según una de las reivindicaciones 1-5, en el que el sujeto se selecciona para la evaluación del estado renal basándose en la preexistencia en el sujeto de uno o más factores de riesgo conocidos de IRA prerrenal, renal intrínseca o posrenal, o

en el que el sujeto se selecciona para la evaluación del estado renal en base a un diagnóstico existente de uno o más de insuficiencia cardíaca congestiva, preeclampsia, eclampsia, diabetes mellitus, hipertensión, enfermedad de las arterias coronarias, proteinuria, insuficiencia renal, filtración glomerular por debajo del rango normal, cirrosis, creatinina sérica por encima del intervalo normal, sepsis, lesión de la función renal, función renal reducida o IRA, o en base a someterse o haber sido sometido a cirugía vascular mayor, derivación de arterias coronarias u otra cirugía cardíaca, o en base a exposición a AINE, ciclosporinas , tacrolimus, aminoglucósidos, foscarnet, etilenglicol, hemoglobina, mioglobina, ifosfamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radiopacos o estreptozotocina.

8. Procedimiento, según una de las reivindicaciones 1-5, en el que dicha etapa de correlación comprende asignar un diagnóstico de la aparición o no aparición de una o más de una lesión de la función renal, función renal reducida o IRA al sujeto en base al resultado del ensayo.

9. Procedimiento, según una de las reivindicaciones 1-5, en el que dicha etapa de correlación comprende evaluar si la función renal está mejorando o empeorando en un sujeto que ha sufrido una lesión en la función renal, función renal reducida o IRA basada en el resultado del ensayo.

10. Procedimiento, según una de las reivindicaciones 1-5, en el que dicho procedimiento es un procedimiento para diagnosticar la aparición o no aparición de una lesión en la función renal, o de una función renal reducida, o de insuficiencia renal aguda, o de una necesidad de terapia de reemplazo renal, o de una necesidad de un trasplante renal en dicho sujeto.

11. Procedimiento, según una de las reivindicaciones 1-5, en el que dicho procedimiento es un procedimiento para asignar un riesgo de aparición o no aparición futura de una lesión en la función renal, o de una función renal reducida, o de insuficiencia renal aguda, o de una necesidad de terapia de reemplazo renal, o de una necesidad de un trasplante renal en dicho sujeto.

12. Procedimiento, según una de las reivindicaciones 1-5, en el que el sujeto se encuentra en la etapa de RIFLE 0 o R.

13. Procedimiento, según una de las reivindicaciones 1-5, en el que el sujeto se encuentra en la etapa RIFLE 0, y dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcance la etapa RIFLE R,

I o F en 72 horas, o en 48 horas, o en 24 horas, o

en el que el sujeto está en la etapa RIFLE 0 o R, y dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanza la etapa RIFLE I o F en 72 horas, o en 48 horas, o en 24 horas, o

en el que el sujeto está en la etapa RIFLE 0, R o I, y dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanza la etapa F de RIFLE en 72 horas, o en 48 horas, o en 24 horas.

14. Procedimiento, según una de las reivindicaciones 1-5,

(a) en el que el sujeto no ha experimentado un aumento de 1,5 veces o más en la creatinina sérica sobre un valor de referencia determinado antes del momento en que se obtiene la muestra de orina, sangre, suero o plasma, o

(b) en el que el sujeto tiene un gasto urinario de al menos 0,5 ml/kg/h durante las 6 horas anteriores al momento en que se obtiene la muestra de orina, sangre, suero o plasma, o

(c) en el que el sujeto no ha experimentado un aumento de 0,3 mg/dl o más en la creatinina sérica sobre un valor de referencia determinado antes del momento en que se obtiene la muestra de orina, sangre, suero o plasma, o

(d) en el que el sujeto no ha experimentado un aumento del doble o más en la creatinina sérica sobre un valor de referencia determinado antes del momento en el que se obtiene la muestra de orina, sangre, suero o plasma, o (e) en el que el sujeto tiene un gasto urinario de al menos 0,5 ml/kg/h durante las 12 horas anteriores al momento en el que se obtiene la muestra de orina, sangre, suero o plasma, o

(f) en el que el sujeto no ha experimentado un aumento de 3 veces o más de la creatinina sérica sobre un valor de referencia determinado antes del momento en que se obtiene la muestra de orina, sangre, suero o plasma, o

(g) en el que el sujeto tiene un gasto urinario de al menos 0,3 ml/kg/h durante las 24 horas anteriores al momento en que se obtiene la muestra de orina, sangre, suero o plasma, o anuria durante las 12 horas anteriores al momento en el que se obtiene la muestra de orina, sangre, suero o plasma.

15. Procedimiento, según una de las reivindicaciones 1-5,

(a) en el que dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que en 72 horas, en 48 horas o en 24 horas el sujeto experimentará un aumento de 1,5 veces o más en la creatinina sérica, o

(b) en el que dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que en 72 horas, en 48 horas o en 24 horas el sujeto tendrá un gasto urinario de menos de 0,5 ml/kg/h durante un período de 6 horas, o

(c) en el que dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que en 72 horas, en 48 horas o en 24 horas el sujeto experimentará un aumento de 0.3 mg/dl o más en la creatinina sérica, o

(d) en el que dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que en 72 horas, en 48 horas o en 24 horas el sujeto experimentará un aumento 2 veces o más de creatinina sérica, o

(e) en el que dicha etapa de correlación comprende asignar un probabilidad de que en 72 horas, en 48 horas o en 24 horas el sujeto experimentará un aumento de 3 veces o más de creatinina sérica, o

(f) en el que dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que en 72 horas, en 48 horas o en 24 horas, el sujeto tendrá un gasto urinario de menos de 0,3 ml/kg/h durante un período de 24 horas o anuria durante un período de 12 horas.

16. Procedimiento, según una de las reivindicaciones 1-15, en el que el procedimiento de ensayo comprende introducir la muestra de orina, sangre, suero o plasma obtenida del sujeto en un instrumento de ensayo que (i) pone en contacto la muestra de orina, sangre, suero o plasma con uno o más reactivos que se unen específicamente para la detección de quimiocina 14 con motivo C-C, y, opcionalmente, además, de uno o más de quimiocina 16 con motivo C-C y receptor de proteína tirosina quinasa UFO; (ii) genera uno o más resultados de ensayo indicativos de quimiocina 14 con motivo C-C y, opcionalmente, además, de uno o más de quimiocina 16 con motivo C-C y receptor de proteína tirosina quinasa UFO en la muestra de orina, y (iii) utiliza el resultado o resultados del ensayo para asignar el sujeto a una subpoblación predeterminada de individuos que tiene una predisposición conocida de una lesión renal aguda actual o futura o una insuficiencia renal aguda actual o futura.

17. Procedimiento, según la reivindicación 16, que comprende además seleccionar un tratamiento para el sujeto en función de la subpoblación predeterminada de individuos a la que está asignada el paciente, en el que el tratamiento comprende uno o más de iniciar la terapia de reemplazo renal, retirar la administración de compuestos que se sabe que son dañinos para el riñón, retrasar o evitar procedimientos que se sabe que son dañinos para el riñón y modificar la administración de diuréticos.

18. Procedimiento, según la reivindicación 16, en el que el sujeto no tiene una lesión renal aguda actual o insuficiencia renal aguda actual, y el resultado del ensayo se usa para asignar el sujeto a una subpoblación predeterminada de individuos que tienen una predisposición conocida de una futura lesión renal aguda o futura insuficiencia renal aguda, en el que la futura lesión renal aguda o la futura insuficiencia renal aguda preferiblemente se encuentra dentro de un período seleccionado del grupo que consiste en 21 días, 14 días, 7 días, 5 días, 96 horas, 72 horas, 48 horas, 36 horas, 24 horas y 12 horas.

19. Procedimiento, según la reivindicación 16, en el que el sujeto tiene una lesión renal aguda actual o insuficiencia renal aguda actual, y el resultado del ensayo se usa para asignar al sujeto a una subpoblación predeterminada de individuos que tienen una predisposición conocida de futura recuperación de una lesión renal aguda o insuficiencia renal aguda,

en el que la futura recuperación de una lesión renal aguda o insuficiencia renal aguda se realiza preferiblemente dentro de un período seleccionado del grupo que consiste en 21 días, 14 días, 7 días, 5 días, 96 horas, 72 horas, 48 horas, 36 horas, 24 horas y 12 horas o

en el que el resultado del ensayo se usa para asignar el sujeto a una subpoblación predeterminada de individuos que tienen una predisposición conocida de persistencia futura de una lesión renal aguda o insuficiencia renal aguda, en el que la futura persistencia es preferiblemente durante un período seleccionado del grupo que consiste en 21 días, 14 días, 7 días, 5 días, 96 horas, 72 horas, 48 horas, 36 horas, 24 horas y 12 horas; y/o

en el que el sujeto preferiblemente tiene una lesión renal aguda o insuficiencia renal aguda en el momento en que se obtiene la muestra de orina, sangre, suero o plasma.

20. Uso de quimiocina 14 con motivo C-C y, opcionalmente, además, de uno o más de quimiocina 16 con motivo C-C y receptor de proteína tirosina quinasa UFO para la evaluación de lesión renal, particularmente lesión renal aguda en un sujeto, en el que la evaluación comprende detectar una quimiocina 14 con motivo C-C en una muestra de orina, sangre, suero o plasma obtenida del sujeto.

21. Uso de la reivindicación 20, para ser realizado con un kit que comprende:

reactivos para realizar uno o más ensayos configurados para detectar quimiocina 14 con motivo C-C, y opcionalmente, además, uno o más de quimiocina 16 con motivo C-C y receptor de proteína tirosina quinasa UFO, y

un dispositivo que contiene una o más curvas de calibración codificadas para correlacionar los resultados de la realización de dicho ensayo u ensayos con una concentración de quimiocina 14 con motivo CC y, opcionalmente, además, de uno o más de quimiocina 16 con motivo C-C y receptor de proteína tirosina quinasa UFO, en el que el intervalo de concentraciones de dicha curva o curvas de calibración comprende una concentración normal de quimiocina 14 con motivo C-C y, opcionalmente, además, de uno o más de quimiocina 16 con motivo C-C y receptor de proteína tirosina quinasa UFO y una concentración umbral de quimiocina 14 con motivo C-C y, opcionalmente, además, de uno o más de quimiocina 16 con motivo C-C y receptor de proteína tirosina quinasa UFO que indica lesión renal aguda en un ser humano.