ES2894801T3

ES2894801T3 - Agente para prevenir y/o tratar la enfermedad de Alzheimer

Info

Publication number: ES2894801T3
Application number: ES16881847T
Authority: ES
Inventors: Haruhisa Inoue; Takayuki Kondo
Original assignee: Kyoto University
Current assignee: Kyoto University
Priority date: 2015-12-29
Filing date: 2016-12-29
Publication date: 2022-02-15
Anticipated expiration: 2036-12-29
Also published as: EP3398614A4; US11026942B2; EP3398614A1; JP6879560B2; WO2017115873A1; EP3398614B1; JPWO2017115873A1; US20190008860A1

Abstract

Una combinación de bromocriptina y topiramato, y opcionalmente Cromolín para su uso en la profilaxis o el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.

Description

DESCRIPCIÓN

Agente para prevenir y/o tratar la enfermedad de Alzheimer

[Campo técnico]

La presente invención se refiere a un agente profiláctico y/o terapéutico para la enfermedad de Alzheimer que comprende una combinación de bromocriptina, topiramato y opcionalmente Cromolín. Más particularmente, la presente invención se refiere a un agente profiláctico y/o terapéutico para la enfermedad de Alzheimer, que es una combinación de dos o más compuestos clasificados en diferentes agrupaciones y obtenidos agrupando, por huella molecular, fármacos existentes que muestran una patología p amiloide mejorada en células nerviosas inducidas para diferenciarse de células madre pluripotentes inducidas (células iPS) derivadas de pacientes con enfermedad de Alzheimer.

[Técnica anterior]

La enfermedad de Alzheimer (EA) es un tipo de demencia con síntomas principales de deterioro de la función cognitiva y cambio de la personalidad. Las lesiones cerebrales de la EA están caracterizadas por degeneración y desaparición de las células nerviosas y atrofia cerebral asociada con las mismas, aparición frecuente de placas seniles y aparición frecuente de ovillos neurofibrilares (NFT). De estas, se sabe que las placas seniles son agregación y acumulación de péptido p amiloide (Ap). Ap es un péptido que consiste en 38 a 43 aminoácidos producidos como resultado de la escisión de la proteína precursora amiloide (APP) por secretasas p y y. De estos, se sabe que Ap42 tiene una alta actividad de agregación y toxicidad contra las células nerviosas, y se ha informado que se observa un aumento en la proporción Ap 42/40 en células que tienen la mutación causante de la enfermedad de Alzheimer familiar (EAF).

Convencionalmente, es ampliamente reconocido que la disminución de la cantidad de Ap42 se convierte en un punto clave para suprimir el inicio de la EA. Esto también es evidente por el hecho de que se ha demostrado que algunos de los fármacos moduladores de la p- o Y-secretasa reducen el inicio de la EA en un modelo de ratón que sobreexpresa presenilina 1 (PSEN1) o APP mutante.

A pesar del éxito significativo en las pruebas preclínicas con ratones modelo AD, estos fármacos moduladores fallaron en muchas pruebas clínicas cuando se usaron en humanos.

A partir de los resultados de la terapia con anticuerpos, se ha demostrado hasta ahora que las lesiones provocadas por la acumulación de Ap, incluidas las placas seniles, son reversibles. Desafortunadamente, sin embargo, no se ha obtenido eficacia clínica incluso cuando se eliminó la acumulación de Ap, y se considera necesaria la intervención en una etapa anterior al desarrollo de un deterioro cognitivo leve (DCL). La PET de amiloide (tomografía por emisión de positrones) también ha demostrado que el cambio patológico de Ap ya precede en la etapa anterior al desarrollo de DCL, y la intervención en la etapa presintomática es necesaria para personas con riesgo de EA y se prevé que estén presentes en un gran número. En particular, se destaca la importancia de la terapia preventiva, incluida la investigación de la red de Alzheimer de herencia dominante (DIAN). Sin embargo, la aplicación agresiva de medicamentos de anticuerpos muy costosos a tales sujetos no es realista. Además, también se han probado tratamientos por administración oral de muchos compuestos que se dirigen a Ap como diana, pero ninguno de ellos se ha comercializado debido a problemas de efectos secundarios.

Por lo tanto, las soluciones de seguridad de los medicamentos y el tratamiento anticipado (tratamiento temprano) se consideran esenciales para que los medicamentos que se dirigen a Ap como diana sean efectivos.

Por otro lado, un rápido aumento de pacientes con EA asociado con el avance del envejecimiento de la sociedad está ejerciendo presión sobre la economía médica. A partir de 2010, los gastos médicos de 35 millones de pacientes con EA son de 604 mil millones de dólares al año. Se espera que los pacientes con EA aumenten a 114 millones en 2050 y se prevé que los gastos médicos aumenten aún más. En estas circunstancias, se da importancia al reposicionamiento farmacológico (RF) para el tratamiento de la EA, es decir, la aplicación desviada de los medicamentos existentes (documento no de patente 1). Ya se ha acumulado una enorme información clínica relacionada con la seguridad y la farmacocinética de los medicamentos existentes (base de datos Chembl y similares) y ya se ha establecido la seguridad. Así, se puede esperar una intervención como tratamiento anticipado para las personas en riesgo de EA que no tienen síntomas clínicos pero que han sido consideradas positivas mediante la prueba de amiloide. De hecho, Valsartán (depresor) y Liraglutide (fármaco antidiabético) se han sometido a ensayo clínico. Como se describió anteriormente, se prevé que la importancia del RF en el tratamiento de la EA aumente aún más en el futuro.

Por cierto, una célula que causa la enfermedad que se indujo a diferenciarse de las células iPS derivadas del paciente (células iPS de la enfermedad) se supone que reproduce la patología del paciente in vitro. Por consiguiente, se espera que sea un sistema prometedor para la evaluación de la eficacia. En informes recientes relacionados con células nerviosas derivadas de células iPS humanas, se destaca la importancia de las células nerviosas humanas como herramienta para evaluar la respuesta a fármacos (documentos no de patente 2-4).

[Lista de documentos]

[Documentos no de patente]

Documento no de patente 1: Parte delantera. Biosci. (Ed. Schol.). 7, 184-8 (2015)

Documento no de patente 2: PLoS One 6, e25788 (2011)

Documento no de patente 3: JAMA Neurol. 71, 1481-9 (2014)

Documento no de patente 4: Informes sobre células madre 1,491-498 (2013).

La solicitud internacional de patente WO 2012/117073 describe tratamientos combinados para la enfermedad de Alzheimer (EA) que comprenden por ejemplo, bromocriptina con, por ejemplo, ácido aminocaproico, terbinafina, trimetazidina o ifenopridil.

Yukiko Hori y col. (JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 2015, vol. 290, n.° 4, páginas 1966-1978) describen que Cromolín (cromoglicato) inhibe la agregación de beta amiloide, por lo que tiene potencial para el tratamiento de la EA. Edward Morley John y col. (ALZHEIMER'S & DEMENTIA, 2014, vol. 10, n.° 4 Abstract P2-021) describen que el topiramato mejoró el aprendizaje y la memoria en un modelo de ratón de EA.

[Compendio de la invención]

[Problemas que debe resolver la invención]

Un objeto de la presente invención es encontrar fármacos que tengan un efecto profiláctico y/o terapéutico sobre la enfermedad de Alzheimer a partir de fármacos existentes cuya seguridad y farmacocinética ya se haya confirmado realmente en humanos, proporcionando así un medio para un tratamiento anticipado de personas en riesgo de EA y en una etapa antes del desarrollo de DCL.

[Medios para resolver los problemas]

En un intento de lograr el objeto antes citado, los autores de la presente invención han examinado una biblioteca de fármacos existente que consiste en 1280 tipos de compuestos farmacéuticos aprobados por la Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) de los Estados Unidos mediante el uso de células nerviosas inducidas para diferenciarse de las células iPS derivadas de paciente con EA, y extrajeron 129 tipos (incluido un tipo de fármaco concomitante) de compuestos que mejoran la patología Ap en las células nerviosas como fármacos terapéuticos candidatos para la EA. Además, han clasificado estos compuestos candidatos en 10 grupos de compuestos basados en la estructura y propiedades, y encontraron una combinación de grupos que actúa de forma aditiva en comparación con un solo agente. Los autores de la presente invención han llevado a cabo estudios adicionales basados en estos hallazgos y han completado la presente invención.

La presente invención proporciona una combinación de bromocriptina y topiramato, y opcionalmente Cromolín para su uso en la profilaxis o el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.

La presente descripción proporciona además lo siguiente.

[1] Un agente profiláctico o terapéutico para la enfermedad de Alzheimer que comprende una combinación de dos o más compuestos seleccionados del grupo que consiste en los compuestos mostrados por los compuestos números 1 a 130.

[2] El agente de [1], donde los dos o más tipos de compuestos combinados pertenecen a dos o más grupos seleccionados del grupo que consiste en los grupos 1, 2, 4 y 5.

[3] El agente de [2], donde el compuesto que pertenece al grupo 1 es Cromolín, el compuesto que pertenece al grupo 2 es bromocriptina y/o fluvastatina, el compuesto que pertenece al grupo 4 es probucol y el compuesto que pertenece al grupo 5 es cilostazol y/o topiramato.

[4] El agente de cualquiera de [1] a [3], donde los dos o más compuestos combinados se seleccionan del grupo que consiste en bromocriptina, cilostazol, Cromolín, fluvastatina, probucol y topiramato.

[5] El agente de [4], donde se combinan bromocriptina, cilostazol y probucol.

[6] Un método para prevenir o tratar la enfermedad de Alzheimer en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de cada uno de los dos o más compuestos seleccionados del grupo que consiste en los compuestos mostrados por los compuestos números 1 a 130.

[7] El método de [6], donde la cantidad terapéuticamente eficaz mencionada anteriormente no es más que una dosis máxima no tóxica conocida de cada compuesto.

[Efecto de la invención]

Según la presente invención, es posible prevenir y/o tratar la enfermedad de Alzheimer para la que no existe un fármaco profiláctico o terapéutico eficaz. En particular, se usan como ingredientes activos en la presente invención medicamentos existentes que se ha confirmado que son seguros, es menor el temor a efectos secundarios y se puede llevar a cabo un tratamiento anticipado agresivo en personas con riesgo de EA y en una etapa antes del desarrollo de DCL.

[Breve descripción de los dibujos]

[Fig. 1] La Fig. 1a es una vista esquemática del método de inducción de la célula iPS en una neurona cortical. La Fig. 1b muestra los resultados de la tinción de células iPS preparadas a partir de un paciente con EAF1 para Tra-1-80 y Nanog. La Fig. 1c muestra una imagen de neuronas inducidas a partir de células iPS preparadas a partir de un paciente con EAF1, que se tiñeron para MAP2 y CTIP2. La figura de la derecha es una figura ampliada de la figura de la izquierda. La Fig. 1d muestra los resultados representados para cada índice (Ap40, Ap42, proporción Ap42/Ap40 y número de células viables) en el rastreo primario. La Fig. 1e muestra un método de clasificación del rastreo primario y la clasificación de 129 fármacos candidatos.

[Fig. 2-1] La Fig. 2a muestra la estrategia de reclasificación y los elementos de estudio basados en la estructura del compuesto y que no dependen de la eficacia conocida. La Fig. 2b muestra los resultados de la clasificación por grupos de 129 fármacos candidatos y compuestos moduladores de Ap conocidos basados en las fórmulas estructurales, y el gráfico de eficacia en Ap42 proporcionado por los fármacos candidatos clasificados.

[Fig. 2-2] La Fig. 2c muestra la dependencia de la dosis de bromocriptina, cilostazol, Cromolín, fluvastatina, probucol y topiramato con Ap40, Ap42, proporción Ap42/Ap40 como índices.

[Fig. 3-1] La Fig. 3a muestra la dependencia de la dosis de bromocriptina, Cromolín y topiramato (BCroT) o bromocriptina, cilostazol y probucol (BCiP) con Ap40, Ap42, proporción Ap42/Ap40 como índices. La Fig. 3b muestra la dependencia de la dosis del uso combinado de donepezilo y BCroT o BCiP con Ap40, Ap42, proporción Ap42/Ap40 como índices. La Fig. 3c muestra los resultados de EC50 y Emax de la relación Ap40, Ap42, Ap42/Ap40 por bromocriptina, cilostazol, Cromolín, fluvastatina, probucol, topiramato, BCroT, BCiP, uso combinado de donepezilo y BCroT y uso combinado de donepezilo y BCiP. La Fig. 3d muestra el proceso de reevaluación de la eficacia de fármacos existentes basados en células iPS humanas y un diagrama conceptual de una "prueba clínica in vitro" que utiliza células nerviosas derivadas de células iPS humanas derivadas de un gran número de personas. La Fig. 3e muestra una lista de pacientes e individuos sanos utilizados en la prueba clínica in vitro.

[Fig. 3-2] La Fig.3f muestra los efectos de la bromocriptina, cilostazol, Cromolín, fluvastatina, probucol, topiramato, BCroT, BCiP sobre Ap40, Ap42, proporción Ap42/Ap40 en cada neurona derivada de la célula iPS mostrada en la Fig. 3e.

[Fig. 3-3] Las Fig. 3g y h muestran los efectos sobre el Ap intracerebral proporcionado por la administración oral de BCroT y BCiP a un ratón ICR.

[Fig. 4] La Fig. 4a muestra los resultados de la tinción de cada célula iPS para Tra-1-80 y Nanog. La Fig. 4b muestra imágenes de neuronas inducidas de cada célula iPS, que se tiñeron para MAP2 y CTIP2. La Fig. 4c muestra la proporción positiva de marcadores neurales (MAP2 y CTIP2) en la neurona inducida por cada célula iPS. La Fig. 4d muestra el protocolo de inducción de diferenciación de células iPS (EAF1) y los resultados del estudio de cambios en el transcurso del tiempo en la expresión de un gen marcador neural endógeno y un gen exógeno. La Fig. 4e muestra los resultados de la prueba electrofisiológica en la neurona derivada de la célula iPS (EAF1). La Fig. 4f muestra los resultados de la medición de los cambios en el transcurso del tiempo en Ap40, Ap42 y la proporción Ap42/Ap40 producidos por cada neurona derivada de la célula iPS.

[Fig. 5] La Fig. 5a muestra los resultados de medición de la eficacia de compuestos que tienen una acción conocida de regulación de la cantidad de Ap, la Fig. 5b muestra los de los moduladores de Y-secretasa previamente informados, la Fig. 5c muestra los de los fármacos terapéuticos disponibles comercialmente para la EA, respectivamente en neurona derivada de la célula iPS del paciente EAF1.

[Fig. 6] La Fig.6a muestra la dependencia de la dosis cuando se administraron BSI IV y JNJ-40418677 como control positivo a neuronas derivadas de células iPS (EAF1) con Ap40, Ap42 y la proporción Ap42/Ap40 como índices. La Fig. 6b muestra el factor Z' en el método de rastreo primario con Ap40, Ap42 y la proporción Ap42/Ap40 como índices. La Fig. 6c muestra un diagrama de Venn de fármacos eficaces para Ap40, Ap42 o la proporción Ap42/Ap40 a partir de 129 fármacos seleccionados mediante rastreo primario.

[Fig. 7] Las Fig.7a, b, c, d, e, f y g muestran respectivamente efectos sobre Ap40, Ap42, la proporción Ap42/40, Ap38, sAPPbeta, sAPPalpha o Ap43 de cada grupo.

[Fig. 8] La Fig. 8 muestra los resultados del estudio de los efectos de meticrane, ácido niflúmico, bifonazol, belamiprón, quiropiramina, tioxolona, cetrimonium, pinacidil, dapsom y verapamilo sobre Ap40, Ap42 o la proporción Ap42/Ap40 en neuronas derivadas de células iPS (EAF1).

[Fig. 9] La Fig. 9 muestra los efectos de topiramato, bromocriptina, Cromolín, fluvastatina, cilostazol y probucol como agentes únicos y combinaciones de 2 agentes, 3 agentes o todos los agentes sobre Ap40, Ap42 o la proporción Ap42/Ap40.

[Fig. 10] La Fig.10a muestra los resultados del estudio de los efectos de la dopamina, agonista de DA (SKF38393, bromocriptina y PD168077) sobre Ap40, Ap42 o la proporción Ap42/Ap40 en neuronas derivadas de células iPS (EAF1). La Fig. 10b muestra los resultados del estudio de los efectos de talipexol, pramipexol, ropinirol y cabergolina sobre Ap40, Ap42 o la proporción Ap42/Ap40 en neuronas derivadas de células iPS (EAF1).

[Fig. 11] La Fig.11 muestra gráficos que muestran cambios dependientes de la dosis en sAPPa, sAPPp, la proporción sAPPp/a cuando se añadieron el inhibidor de BACE IV, JNJ-40418677, semagacestat, bromocriptina, cilostazol, Cromolín, fluvastatina, probucol, topiramato.

[Descripción de formas de forma de realización]

La presente invención se explica a continuación. Los términos usados en la presente memoria descriptiva tienen los significados generalmente usados en el campo pertinente a menos que se especifique de otro modo.

La presente invención proporciona un agente profiláctico y/o terapéutico para la enfermedad de Alzheimer (en lo sucesivo también denominado "el medicamento de la presente invención") compuesto por una combinación según las reivindicaciones adjuntas de dos o más compuestos, cada uno de los cuales puede mejorar la patología por Ap en una célula nerviosa humana que muestra la patología de la enfermedad de Alzheimer (en lo sucesivo también denominada "célula nerviosa AD") y que proporciona un efecto aditivo de mejora de la patología por Ap en combinación en comparación con su uso como agentes solos.

Las combinaciones que comprenden bromocriptina y topiramato, y opcionalmente Cromolín, son combinaciones según la invención. Las combinaciones descritas en el presente documento, que no comprenden bromocriptina y topiramato, y opcionalmente Cromolín, no son combinaciones de acuerdo con la invención, pero son parte de la presente descripción. Se describe adicionalmente un medicamento que comprende dos o más compuestos seleccionados del grupo que consiste en los compuestos números 1 a 130 descritos en las siguientes Tablas 1-1 a 1-19 como ingredientes activos.

[Tabla 1-1]

[Tabla 1 -2]

[Tabla 1 -3]

[Tabla 1-4]

[Tabla 1-5]

[Tabla 1-6]

[Tabla 1-7]

[Tabla 1-8]

[Tabla 1-9]

[Tabla 1-10]

[Tabla 1-11]

[Tabla 1-12]

[Tabla 1-13]

[Tabla 1-14]

[Tabla 1-15]

[Tabla 1-16]

[Tabla 1-17]

[Tabla 1-18]

[Tabla 1-19]

Puede usarse un producto disponible comercialmente, o cada compuesto puede producirse mediante cada método conocido per se. Por ejemplo, se puede conocer una fuente comercial de cada compuesto en los Estados Unidos Drugs@FDA (http://www.accessdata.fda.gov/scripts/cder/drugsatfda/index.cf m) y similares.

Cada compuesto de la Tabla 1 descrito abarca no solo una forma libre sino también una sal farmacológicamente aceptable del mismo. Si bien la sal farmacológicamente aceptable varía dependiendo del tipo de compuesto, los ejemplos de las mismas incluyen sales de adición de bases tales como sales con base inorgánica tales como sales de metales alcalinos (sal de sodio, sal de potasio, etc.), sales de metales alcalinotérreos (sal de calcio, sal de magnesio, etc.), sal de aluminio, sal de amonio y similares, y sales con base orgánica tales como trimetilamina, trietilamina, piridina, picolina, etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, diciclohexilamina, N,N'-dibenciletilendiamina y similares, y similares, y sales de adición de ácidos tales como sales con ácido inorgánico como hidrocloruro, hidrobromuro, sulfato, hidroyoduro, sal nitrato, fosfato y similares, y sales con ácido orgánico como citrato, oxalato, acetato, formiato, propionato, benzoato, trifluoroacetato, maleato, tartrato, metanosulfonato, bencenosulfonato, paratoluensulfonato y similares, y similares.

Además, cada compuesto descrito en la Tabla 1 también puede ser un haluro (fluoruro, cloruro, bromuro, yoduro, etc.). Cuando uno cualquiera de los compuestos descritos en la Tabla 1 contiene isómeros tales como un isómero óptico, un estereoisómero, un regioisómero o un rotámero, uno cualquiera de los isómeros y mezclas también están incluidos en el compuesto. Por ejemplo, cuando uno cualquiera de los compuestos descritos en la Tabla 1 contiene un isómero óptico, también se incluye en el compuesto un isómero óptico resuelto a partir del racemato. Estos isómeros se pueden obtener como productos individuales mediante un método de síntesis, un método de separación (por ejemplo, concentración, extracción con disolvente, cromatografía en columna, recristalización, etc.), un método de resolución óptica (por ejemplo, recristalización fraccionada, método de columna quiral, método de diastereoisómeros, etc.) y similares, cada uno conocido per se.

Cada compuesto descrito en la Tabla 1 puede ser un cristal y está incluido en el compuesto de la presente invención y descripción, ya sea en forma de monocristal o en una mezcla de cristales. El cristal se puede producir cristalizando al aplicar un método de cristalización conocido per se.

Cada compuesto descrito en la Tabla 1 puede ser un solvato (por ejemplo, hidrato, etc.) o un no solvato (por ejemplo, no hidrato, etc.), ambos incluidos en el compuesto de la presente invención y descripción.

Además, también está incluido en el compuesto descrito en la Tabla 1 un compuesto marcado con un isótopo (por ejemplo, 3H, 14C, 35S, 125I, etc.), etc.

Cada compuesto descrito en la T abla 1 es un compuesto farmacéutico aprobado por la FDA para aplicaciones distintas de la AD (véase la Fig. 1e) (los compuestos números 14 y 124 fueron aprobados como fármaco concomitante (DIMENHiDr INATO)). En los ejemplos que se mencionan a continuación, se demostró que estos compuestos tienen una o más acciones para mejorar los cambios patológicos de la Ap en células nerviosas de la EA (es decir, (1) disminución del nivel de Ap42, (2) disminución del nivel de Ap40, (3) disminución en la proporción Ap42/40) (Tabla 2, Fig. 1e, Fig. 6c). Estos compuestos pueden tener una acción para cambiar uno o más del nivel de otras especies de péptidos Ap (Ap38, Ap43) y el nivel de APP soluble (sAPP-a, sAPP-p) obtenido por escisión mediante a- o p-secretasa hacia la dirección que mejora la patología de la EA.

Cada compuesto descrito en la Tabla 1 se clasifica en 10 grupos convirtiendo la estructura molecular del mismo en información de huellas dactilares utilizando el método de la Huella de Conectividad Extendida (ECFP) (Rogers D y col. J Chem Inf. Model 2010 24; 50 (5): 742-54.) y llevando a cabo un análisis de agrupamiento basado en la matriz de distancias (Fig. 2a) (Tabla 1, Fig. 2b). Es decir, los compuestos que pertenecen al mismo grupo forman un grupo de compuestos que tiene similitud dependiendo de la fórmula estructural y no está sesgado por la eficacia conocida.

Usando dos o más compuestos que tienen diferentes estructuras de medicamentos en combinación, se puede llevar a cabo una acción simultánea sobre varias dianas de tratamiento. Como resultado, se exhibe un efecto de tratamiento superior (por ejemplo, efecto aditivo, preferiblemente un efecto sinérgico) en comparación con la administración única de compuestos individuales. Que "se exhibe un efecto superior en comparación con la administración única de compuestos individuales" significa que el valor del efecto máximo (Emax) o la concentración del efecto al 50% (EC50) es superior al de la administración única o el tipo de cambios patológicos mejorado en comparación con la administración única aumenta en uno o más de los efectos de mejora del cambio patológico de Ap de los (1) - (3) mencionados anteriormente.

Por lo tanto, en el medicamento de la presente descripción, es preferible combinar dos o más compuestos que pertenecen a diferentes grupos y se describen en la Tabla 1. Cuando se combinan compuestos clasificados en diferentes grupos, la combinación de grupos no está particularmente limitada siempre que se consiga un efecto superior en comparación con la administración del compuesto solo. Por ejemplo, es preferible una combinación de dos o más tipos de compuestos que pertenecen a dos o más grupos seleccionados del grupo que consiste en los grupos 1, 2, 4 y 5. Cuando se combinan 3 o más tipos de compuestos, dos o más tipos de compuestos pueden pertenecer al mismo grupo siempre que uno tipo cualquiera de los compuestos pertenezca a un grupo diferente.

En una forma de realización preferible, el medicamento de la presente descripción puede ser una combinación de (1) no menos de dos tipos de compuestos que pertenecen a dos tipos de grupos (por ejemplo, grupos 1 y 2, grupos 1 y 4, grupos 1 y 5, grupos 2 y 4, grupos 2 y 5, grupos 4 y 5), (2) no menos de tres tipos de compuestos que pertenecen a tres tipos de grupos (por ejemplo, grupos 1,2 y 4, grupos 1, 2 y 5, grupos 1,4 y 5, grupos 2, 4 y 5), o (3) no menos de cuatro tipos de compuestos pertenecientes a cuatro clases de grupos (grupos 1, 2, 4 y 5), cada uno seleccionado del grupo que consiste en los grupos 1, 2, 4 y 5. En una forma de realización más preferible, el medicamento de la presente descripción es una combinación de no menos de tres tipos de compuestos que pertenecen a tres tipos de grupos, de manera particularmente preferible, puede ser una combinación de no menos de tres tipos de compuestos que pertenecen a los grupos 1, 2 y 5 o grupos 2, 4 y 5.

En otra forma de realización, el medicamento de la presente descripción puede combinar adicionalmente, además de no menos de dos tipos de compuestos que pertenecen a dos o más grupos seleccionados del grupo que consiste en los grupos 1,2, 4 y 5, uno o más tipos de compuestos que pertenecen a otros grupos (grupos 3 y 6 - 10).

Como compuestos que pertenecen a los grupos 1, 2, 4 y 5, se pueden mencionar preferiblemente los siguientes compuestos.

(a) grupo 1: Cromolín y ácido niflúmico, preferiblemente Cromolín

(b) grupo 2: Bromocriptina y fluvastatina

(c) grupo 4: Probucol y tioxolona, preferiblemente probucol

(d) grupo 5: Cilostazol y topiramato

Por lo tanto, en una descripción preferible, el medicamento de la presente invención es una combinación de dos tipos de compuestos ((a) y (b), (a) y (c), (a) y (d), (b) y (c), (b) y (d), (c) y (d)), 3 tipos de compuestos ((a), (b) y (c), (a), (b) y (d), (a), (c) y (d), y (b), (c) y (d)), o 4 tipos de compuestos ((a), (b), (c) y (d)) seleccionados de uno o más compuestos seleccionados de (a) (Cromolín y/o ácido niflúmico, preferiblemente Cromolín) mencionados anteriormente, uno o más compuestos seleccionados de (b) (bromocriptina y/o fluvastatina) mencionados anteriormente, uno o más compuestos seleccionados de (c) mencionado anteriormente (probucol y/o tioxolona, preferiblemente probucol), y uno o más compuestos seleccionados de (d) mencionado anteriormente (cilostazol y/o topiramato).

Más preferiblemente, el medicamento de la presente descripción es una combinación de dos o más compuestos, preferiblemente 3 o más compuestos, seleccionados del grupo que consiste en bromocriptina, cilostazol, Cromolín, Fluvastatina, Probucol y Topiramato (proporcionado cuando bromocriptina y fluvastatina o cilostazol y topiramato se combinan, deseablemente se combinan adicionalmente uno o más compuestos diferentes).

De forma particularmente preferible, el medicamento de la presente invención es una combinación de bromocriptina, Cromolín y topiramato (a veces se abrevia como "BCroT"). También se describe una combinación de bromocriptina, cilostazol y probucol (a veces se abrevia como "BciP").

Por otro lado, como compuestos pertenecientes a los grupos 3 y 6-9, se pueden mencionar preferiblemente los siguientes compuestos.

(e) grupo 3: Pinacidil y verapamilo

(f) grupo 6: Cetrimonio

(g) grupo 7: Metricrane

(h) grupo 8: Dapsona

(i) grupo 9: Cloropiramina

En el medicamento de la presente invención y descripción, dos o más compuestos como ingredientes activos descritos en la Tabla 1 pueden formularse individualmente o producirse como un agente de combinación. En el primer caso, cada preparación se puede administrar al mismo sujeto simultáneamente o con retraso de tiempo.

El medicamento de la presente invención y descripción se puede administrar por vía oral o parenteral en la forma del compuesto descrito en la Tabla 1 tal como es solo como ingrediente activo, o como una composición farmacéutica en una forma de dosificación apropiada mezclada con un vehículo, excipiente, diluyente y similares farmacéuticamente aceptables.

Como composición para administración oral, se pueden mencionar las formas de dosificación sólidas o líquidas, específicamente los comprimidos (incluidos los comprimidos recubiertos de azúcar y los comprimidos revestidos de película), las píldoras, los gránulos, los polvos, las cápsulas (incluidas las cápsulas blandas), los jarabes, las emulsiones, las suspensiones y similares. Mientras tanto, como ejemplos de la composición para administración parenteral, se utilizan inyecciones, supositorios y similares; las inyecciones pueden incluir formas de dosificación tales como inyecciones intravenosas, inyecciones subcutáneas, inyecciones intracutáneas, inyecciones intramusculares e inyecciones de infusión por goteo. Estas preparaciones se producen mediante un método bien conocido que utiliza aditivos, incluidos excipientes (por ejemplo, excipientes orgánicos tales como derivados del azúcar como lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y sorbitol; derivados del almidón tales como almidón de maíz, almidón de patata, almidón a y dextrina; derivados de la celulosa tales como celulosa cristalina; goma arábiga; dextrano; y pululano; y excipientes inorgánicos como derivados de silicato tales como ácido silícico anhidro ligero, silicato de aluminio sintético, silicato de calcio y metasilicoaluminato de magnesio; fosfatos tales como hidrogenofosfato de calcio; carbonatos tales como carbonato de calcio; y sulfatos tales como sulfato de calcio), lubricantes (por ejemplo, ácido esteárico, sales metálicas de ácido esteárico tales como estearato de calcio y estearato de magnesio; talco; sílice coloidal; ceras tales como cera de abejas y espermaceti; ácido bórico; ácido adípico; sulfatos tales como sulfato de sodio; glicol; ácido fumárico; benzoato de sodio; leucina DL; lauril sulfatos tales como lauril sulfato de sodio y lauril sulfato de magnesio; silicatos tales como anhídrido silícico e hidratos silícicos; y los derivados de almidón antes mencionados), aglutinantes (por ejemplo, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, polivinilpirrolidona, macrogol y los mismos compuestos que los excipientes antes mencionados), disgregantes (por ejemplo, derivados de la celulosa tales como hidroxipropilcelulosa de baja sustitución, carboximetilcelulosa de calcio, y carboximetilcelulosa de sodio reticulada internamente; almidones y celulosas químicamente modificados tales como carboximetil almidón, carboximetil almidón sódico y polivinilpirrolidona reticulada), emulsionantes (por ejemplo, arcillas coloidales tales como bentonita y Veegum; hidróxidos metálicos tales como hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; tensioactivos aniónicos tales como y lauril sulfato de sodio y estearato de calcio; tensioactivos catiónicos tales como cloruro de benzalconio; y tensioactivos no iónicos tales como éteres de alquilo de polioxietileno, éster de ácido graso de polioxietilensorbitán y éster de ácido graso de sacarosa), estabilizadores (ésteres de ácido paraoxibenzoico tales como metil parabeno y propil parabeno; alcoholes tales como clorobutanol, alcohol bencílico y alcohol feniletílico; cloruro de benzalconio; fenoles como fenol y cresol; timerosal; ácido deshidroacético; y ácido sórbico), correctores de sabor/olor (por ejemplo, edulcorantes, agentes agrificantes y aromas de uso común), diluyentes y similares.

La forma de administración del medicamento de la presente invención y la descripción pueden seleccionarse apropiadamente de acuerdo con la forma de dosificación del mismo. Por ejemplo, (1) cuando dos o más compuestos descritos en la Tabla 1 se formulan como una única preparación (agente de combinación), el agente de combinación puede administrarse mediante una vía de administración deseada. Por otro lado, (2) cuando dos o más compuestos descritos en la Tabla 1 se formulan por separado en un fármaco concomitante que consiste en dos o más tipos de preparaciones, (2a) estas dos o más preparaciones pueden administrarse simultáneamente por la misma vía de administración, (2b) estas dos o más preparaciones pueden administrarse con una diferencia de tiempo por la misma vía de administración, (2c) estas dos o más preparaciones pueden administrarse simultáneamente por diferentes vías de administración, o (2d) estas dos o más preparaciones pueden administrarse con una diferencia de tiempo por diferentes vías de administración.

La dosis de cada compuesto descrito en la Tabla 1 como ingrediente activo del medicamento de la presente invención y la descripción puede ser variable de acuerdo con diversas condiciones tales como el tipo de compuesto, vía de administración, síntomas, edad, peso, receptividad al fármaco de un sujeto y similares. Para administración oral, se pueden administrar a un adulto de 1 a 6 veces al día al menos 0,1 mg (adecuadamente 0,5 mg) hasta como máximo 1000 mg (adecuadamente 500 mg) por dosis para administración oral, o al menos 0,01 mg (adecuadamente 0,05 mg) hasta como máximo 100 mg (adecuadamente 50 mg) por dosis para administración parenteral. La dosis puede aumentarse o reducirse según los síntomas. Dado que todos los compuestos descritos en la Tabla 1 ya están comercializados como productos farmacéuticos para enfermedades distintas de la EA, se puede determinar una dosis apropiada de cada compuesto dentro del intervalo confirmado como seguro.

Por ejemplo, la información relacionada con la seguridad de los compuestos descritos en la Tabla 1 está disponible en DailyMed (http://dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/index.cfm) administrado por la Biblioteca Nacional de Medicina de los Estados Unidos.

Adicionalmente, el medicamento de la presente invención se puede usar en combinación con otros fármacos, por ejemplo, los compuestos descritos en la Fig. 5a y que se sabe que tienen un efecto mejorador de la patología por Ap, los fármacos terapéuticos existentes para la EA descritos en las Figs. 5b y 5c, preferiblemente donepezilo y similares. El medicamento de la presente invención y estos otros fármacos se pueden administrar de forma simultánea, secuencial o separada.

La presente invención se explica con más detalle a continuación haciendo referencia a los Ejemplos, que no deben interpretarse como limitantes. Los Ejemplos que no se refieren a la combinación de bromocriptina y topiramato, y opcionalmente Cromolín, son Ejemplos de referencia.

[Ejemplos]

Para llevar a cabo la inducción desde las células iPS al nervio de la corteza cerebral de forma temprana y con alta reproductibilidad, se utilizaron células iPS introducidas con el gen de Neurogenina 2 humana (NGN2) unido al promotor inducible por doxiciclina mediante PiggyBac (Fig. 1a, Fig. 1b, Fig. 4a y Fig. 4b). Se utilizaron células IPS preparadas a partir de 4 pacientes con enfermedad de Alzheimer familiar (EAF), 2 pacientes con enfermedad de Alzheimer esporádica (EAE) y 4 individuos sanos (HC). Las células iPS se establecieron mediante el método descrito en Okita K y col., Nature. 2007, vol 448, págs. 313-317. Se confirmó que las células iPS humanas pueden convertirse en nervio cortical cerebral introduciendo el gen NGN2 en estas células iPS y permitiendo que se expresen transitoriamente durante 5 días mediante la adición de doxiciclina sin dejar NGN2 exógena (Fig. 1c, Fig. 4b, Fig. 4c y Fig. 4d). También se confirmó que el nervio cortical cerebral convertido induce un potencial de acción espontáneo y una corriente dependiente del potencial eléctrico (Fig. 4e). Para determinar el tiempo adecuado para el ensayo de Ap, se analizaron los cambios en el transcurso del tiempo en la cantidad de Ap en el medio y se confirmó que las neuronas en el día 8 muestran una secreción de Ap estable y una maduración suficiente (Fig. 4f). Además, en neuronas de la corteza cerebral derivadas de pacientes con EAF y con mutaciones en el gen PSEN1 o APP, se demostró que la cantidad de Ap42 y la proporción Ap42/40, que son Ap tóxicos, son de 1,5 a 3 veces mayores que las de las células nerviosas derivadas de pacientes con TAE o individuos sanos (Fig. 4f).

A partir de los resultados anteriores, como célula iPS que se utilizará para el rastreo de alto rendimiento (HTS), se seleccionó la célula iPS derivada de pacientes con EAF (EAF1) que tienen la mutación G384A de PSEN1 con la proporción Ap 42/40 más alta. Sucesivamente, 8 días después de la inducción de la diferenciación de las células iPS en células nerviosas, se añadieron compuestos conocidos por reducir la producción de Ap y la proporción Ap42/40, como el inhibidor IV de BACE, JNJ-40418677, semagacestat y acitretina y similares, y se confirmó la cantidad de Ap dos días después. Como resultado, se confirmó que todos los compuestos mejoraron la lesión por Ap (Fig. 5a). Sin embargo, Ap42 aumentó con una dosis baja de semagacestat (Fig.5a), y la patología por Ap no mejoró con una dosis baja de sulindaco y flurbiprofeno, que son fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINE), o un agente anticanceroso imatinib que tiene un efecto inhibidor. acción sobre Bcr-Abl y C-kit, contrariamente a informes anteriores que verificaron la acción reguladora de la Y-secretasa mediante el uso de células que sobreexpresan genes relacionados con la EA (Fig. 5b). Además, la evaluación de fármacos terapéuticos para la EA, ya comercializados y ampliamente utilizados, incluidos los inhibidores de colinesterasa y los bloqueadores de NMDa , mostró que estos fármacos terapéuticos sintomáticos son ineficaces para la mejora de la patología Ap (Fig. 5c). A partir de los resultados anteriores, se confirmó que la célula nerviosa EAF1 era utilizable para el rastreo.

A continuación, se examinó la biblioteca de medicamentos existente que consiste en 1280 medicamentos aprobados por la FDA para explorar medicamentos para mejorar la patología por Ap. Como control negativo, se usó DMSO al 0,1%, como control positivo para Ap40, se usó inhibidor IV de BACE 2 pM y, como control positivo para la proporción Ap42 y Ap42/40, se usó JNJ-404186772 pM. El factor Z’ que significa practicabilidad y reproducibilidad de HTS no fue menor de 0,5, lo que indica un HTS apropiado (Fig. 6a y Fig. 6b). Como resultado del rastreo primario, se encontraron 130 compuestos candidatos (dado que los compuestos números 14 y 124 se comercializan como fármacos concomitantes, se encontraron 129 fármacos candidatos) (Fig. 6c). Las fórmulas estructurales (aquellas en forma de sal o haluro también se describen como forma libre) y los nombres generales de los compuestos candidatos se muestran en la Tabla 1.

Para estudiar más a fondo la reproducibilidad de los fármacos candidatos obtenidos mediante el rastreo primario, se realizó un rastreo secundario. Además de Ap40, Ap42, proporción Ap42/40, también se estudiaron Ap38, Ap43, sAPPa, sAPPp y se obtuvo cada valor numérico. Los resultados de lo anterior se muestran en la Tabla 2 y la Fig.7.

[Tabla 2-1]

[Tabla 2-2]

[Tabla 2-3]

[Tabla 2-4]

[Tabla 2-5]

[Tabla 2-6]

La importancia de la terapia combinada se ha estudiado en varios campos en los últimos años. Para lograr un efecto sinérgico, se examinaron combinaciones de fármacos con mayores diferencias en lugar de combinaciones de compuestos similares. Las estructuras del fármaco se convirtieron en información de "huellas dactilares" utilizando el método ECFP4 (Rogers D y col. Modelo J Chem Inf. 201024; 50 (5): 742-54.) apto para procesamiento informático, y se estudió la similitud en función de las fórmulas estructurales mediante análisis de agrupamientos basado en matriz de distancias, y se probó la clasificación sin sesgo sin basarse en la eficacia conocida. Como resultado, 129 fármacos candidatos se clasificaron en 10 grupos. Los resultados se muestran en la Tabla 2 y la Fig. 2b.

Se seleccionaron fármacos con una gran tasa de cambio de Ap basada en los valores numéricos obtenidos por el rastreo secundario y los fármacos clasificados en diferentes grupos, y también se encontró reactividad dependiente de la dosis utilizando un compuesto que tenía la misma estructura y obtenido de un proveedor diferente (Fig. 2c). Seis tipos de fármacos existentes con EC50 particularmente baja y Emax alta fueron seleccionados como los mejores. Además, en vista de la permeabilidad del sistema nervioso central y la idoneidad para la edad que recibe la administración como medicamento anticipado, se encontraron dos tipos de cócteles de medicamentos existentes, bromocriptina, Cromolín y topiramato (BCroT) y bromocriptina, cilostazol y probucol (BCiP) (Figura 3a, Fig. 9). Como resultado del uso de diferentes grupos en la agrupación química (Fig. 2b), se encontró que actúan de forma aditiva en comparación con los agentes individuales (Fig. 3a, Fig. 9). Además, se encontró que aumentaban la CE50 de Ap40 reconocido como Ap de tipo salvaje o protector en combinación con donepezilo, que es el fármaco terapéutico más utilizado para la EA (Fig. 3b, c).

Adicionalmente, se produjeron células nerviosas de la corteza cerebral a partir de células iPS (Fig. 4a) establecidas a partir de un total de 11 individuos diferentes, incluidos pacientes con EAFEAE e individuos sanos en el momento de la biopsia de células somáticas (Fig. 3d, e, Tabla 3) de forma similar mediante la expresión forzada de NGN2 (Fig. 4b, c), y se administraron 6 tipos de los mejores fármacos existentes seleccionados y un cóctel de BCroT, BCiP. Como resultado, se encontraron los efectos del tratamiento con Ap de los mismos (Fig. 3f).

[Tabla 3]

Por último, se administraron por vía oral BCroT y BCiP a un ratón ICR de tipo salvaje y se examinaron los cambios en la cantidad de Ap intracerebral 16 horas después (Fig. 3g). La dosis se convirtió en la dosis usada clínicamente en base al peso corporal y se examinó en cantidades de 5 y 25 veces la dosis. El cóctel BCroT en la dosis usada clínicamente mostró una disminución suficiente en la proporción de Ap42 y Ap42/40. Por otro lado, el cóctel BCiP mostró una disminución en la proporción de Ap42 y Ap42/40, por el contrario, en cantidades de 5 y 25 veces de la dosis usada clínicamente (Fig. 3h).

6 tipos de los mejores fármacos existentes seleccionados tienen información clara de seguridad, concentración adecuada para su uso, efectos secundarios y similares, y muestran permeabilidad del sistema nervioso central. La presente invención ha aclarado un efecto directo de los mejores fármacos existentes sobre las células nerviosas de la EA. La bromocriptina se clasifica en el grupo 1 de inhibidores de la p-secretasa (BSI) por huella (Fig. 2b) y se sugiere que tiene una acción similar a BSI también por el metabolismo de sAPP (Tabla 2, Fig. 11). Por otro lado, dado que la anfetamina, la dopamina y el agonista de la dopamina del cornezuelo de centeno muestran efectos junto con la bromocriptina, se encontró que se puede esperar un efecto supresor de Ap por la serie de dopamina.

Como se muestra en este ejemplo, se aclaró que los resultados experimentales utilizando ratones y líneas celulares que expresan a la fuerza genes causantes de la EA en niveles de expresión no fisiológicos y los resultados del estudio de eficacia utilizando células nerviosas de la corteza cerebral derivadas de células iPS humanas en niveles de expresión génica fisiológica son diferentes. Es decir, los estudios que utilizan células nerviosas de la corteza cerebral derivadas de células iPS humanas son útiles para una evaluación de la eficacia más apropiada. En el futuro, la confirmación de la eficacia mediante el uso de células nerviosas humanas se puede realizar de forma más precisa aumentando aún más el número de células iPS humanas que se utilizarán para la evaluación de la eficacia en la etapa final. Tiene la posibilidad de convertirse en un paso importante en el descubrimiento y desarrollo de fármacos como un ensayo clínico in vitro que puede evaluar la eficacia mediante el uso de células nerviosas derivadas de células iPS humanas antes de llegar al Ensayo de fase 1 (evaluación de seguridad en un pequeño número de sujetos sanos) y Ensayo de fase 2 (evaluación de la seguridad y eficacia en un pequeño número de pacientes) de los ensayos clínicos actuales.

Esta solicitud se basa en una solicitud de patente N°. 2015-257706 presentada en Japón (fecha de presentación: 29 de diciembre de 2015).

[Aplicabilidad industrial]

Las combinaciones reivindicadas tienen efectos superiores en la mejora de los cambios patológicos de Ap en la EA, como una disminución en la proporción Ap42/40, en las células nerviosas derivadas de pacientes con EA.

Adicionalmente, como resultado de agrupar estos compuestos basándose en la similitud de la estructura molecular, se ha encontrado que, al usar una combinación de dos o más tipos de compuestos pertenecientes a diferentes grupos, se obtiene una mejora aditiva en la eficacia en comparación con el uso único de cada compuesto. Todos los compuestos descritos en la Tabla 1 ya han sido aprobados como productos farmacéuticos para indicaciones distintas de la EA y comercializados, y se ha acumulado información relacionada con la seguridad y farmacocinética de los mismos.

Por tanto, el uso de una combinación de dos o más tipos de compuestos pertenecientes a diferentes grupos y descritos en la Tabla 1, puede mejorarse la patología por Ap de manera segura y efectiva en pacientes con EA, y es extremadamente útil puesto que puede esperarse la intervención como tratamiento anticipado para personas en riesgo de EA que no presenten síntomas clínicos pero que hayan sido considerados positivos mediante la prueba de amiloide.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una combinación de bromocriptina y topiramato, y opcionalmente Cromolín para su uso en la profilaxis o el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.

2. La combinación para su uso según la reivindicación 1, donde se combinan bromocriptina, Cromolín y topiramato.

3. La combinación para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 o 2, donde cada compuesto se usa en una dosis no tóxica máxima conocida del mismo o menor.