ES2738248B2 - Uso de inhibidores de la tirosina hidroxilasa para el tratamiento del aneurisma de aorta - Google Patents
Uso de inhibidores de la tirosina hidroxilasa para el tratamiento del aneurisma de aorta Download PDFInfo
- Publication number
- ES2738248B2 ES2738248B2 ES201830607A ES201830607A ES2738248B2 ES 2738248 B2 ES2738248 B2 ES 2738248B2 ES 201830607 A ES201830607 A ES 201830607A ES 201830607 A ES201830607 A ES 201830607A ES 2738248 B2 ES2738248 B2 ES 2738248B2
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- mice
- aorta
- ang
- treatment
- ampt
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 208000007474 aortic aneurysm Diseases 0.000 title claims description 40
- 229940082991 antihypertensives tyrosine hydroxylase inhibitors Drugs 0.000 title description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 24
- 210000000702 aorta abdominal Anatomy 0.000 claims description 12
- 229940122110 Tyrosine hydroxylase inhibitor Drugs 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 239000005541 ACE inhibitor Substances 0.000 claims description 3
- 229940044094 angiotensin-converting-enzyme inhibitor Drugs 0.000 claims description 3
- 229940127291 Calcium channel antagonist Drugs 0.000 claims description 2
- 210000002376 aorta thoracic Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 claims description 2
- 229940097320 beta blocking agent Drugs 0.000 claims description 2
- 239000000480 calcium channel blocker Substances 0.000 claims description 2
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 claims description 2
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 claims description 2
- NHTGHBARYWONDQ-JTQLQIEISA-N L-α-methyl-Tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@](N)(C)CC1=CC=C(O)C=C1 NHTGHBARYWONDQ-JTQLQIEISA-N 0.000 claims 2
- 229940097420 Diuretic Drugs 0.000 claims 1
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 claims 1
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 claims 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 40
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 description 38
- 108091000117 Tyrosine 3-Monooxygenase Proteins 0.000 description 36
- 102000048218 Tyrosine 3-monooxygenases Human genes 0.000 description 36
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 28
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 23
- 101001109689 Homo sapiens Nuclear receptor subfamily 4 group A member 3 Proteins 0.000 description 22
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 21
- 102100022673 Nuclear receptor subfamily 4 group A member 3 Human genes 0.000 description 20
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 19
- 208000002223 abdominal aortic aneurysm Diseases 0.000 description 17
- 238000011161 development Methods 0.000 description 15
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 15
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 13
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 12
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 11
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 description 10
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 9
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 8
- 102000005862 Angiotensin II Human genes 0.000 description 7
- 101800000733 Angiotensin-2 Proteins 0.000 description 7
- CZGUSIXMZVURDU-JZXHSEFVSA-N Ile(5)-angiotensin II Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C([O-])=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=[NH2+])NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC([O-])=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 CZGUSIXMZVURDU-JZXHSEFVSA-N 0.000 description 7
- 229950006323 angiotensin ii Drugs 0.000 description 7
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 7
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 6
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 6
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 6
- 208000032594 Vascular Remodeling Diseases 0.000 description 5
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 5
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- QFIIYGZAUXVPSZ-UHFFFAOYSA-N 8-(2,4-dihydroxy-6-methylanilino)-2-(2,4-dihydroxy-6-methylphenyl)imino-7-hydroxy-1,9-dimethyldibenzofuran-3-one Chemical compound CC1=CC(=CC(=C1NC2=C(C3=C(C=C2O)OC4=CC(=O)C(=NC5=C(C=C(C=C5C)O)O)C(=C43)C)C)O)O QFIIYGZAUXVPSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 4
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 4
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 4
- 239000004218 Orcein Substances 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- -1 dehydrate Chemical class 0.000 description 4
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 4
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 235000019248 orcein Nutrition 0.000 description 4
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 4
- 210000004509 vascular smooth muscle cell Anatomy 0.000 description 4
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 3
- 102000013918 Apolipoproteins E Human genes 0.000 description 3
- 108010025628 Apolipoproteins E Proteins 0.000 description 3
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 3
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 3
- 108020005497 Nuclear hormone receptor Proteins 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 210000004177 elastic tissue Anatomy 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 102000006255 nuclear receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020004017 nuclear receptors Proteins 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- HCUOEKSZWPGJIM-IYNMRSRQSA-N (e,2z)-2-hydroxyimino-6-methoxy-4-methyl-5-nitrohex-3-enamide Chemical compound COCC([N+]([O-])=O)\C(C)=C\C(=N\O)\C(N)=O HCUOEKSZWPGJIM-IYNMRSRQSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- 102100033312 Alpha-2-macroglobulin Human genes 0.000 description 2
- 108010064733 Angiotensins Proteins 0.000 description 2
- 102000015427 Angiotensins Human genes 0.000 description 2
- 102100029470 Apolipoprotein E Human genes 0.000 description 2
- 101710095339 Apolipoprotein E Proteins 0.000 description 2
- 101100162200 Aspergillus parasiticus (strain ATCC 56775 / NRRL 5862 / SRRC 143 / SU-1) aflD gene Proteins 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108091008638 NR4A Proteins 0.000 description 2
- 102100034374 S-phase kinase-associated protein 2 Human genes 0.000 description 2
- 101710175497 S-phase kinase-associated protein 2 Proteins 0.000 description 2
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 150000003943 catecholamines Chemical class 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000047217 human NR4A3 Human genes 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 2
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 2
- 239000000865 liniment Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- HRLIOXLXPOHXTA-UHFFFAOYSA-N medetomidine Chemical compound C=1C=CC(C)=C(C)C=1C(C)C1=CN=C[N]1 HRLIOXLXPOHXTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002140 medetomidine Drugs 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 230000009038 pharmacological inhibition Effects 0.000 description 2
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 230000035488 systolic blood pressure Effects 0.000 description 2
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 2
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- RQPKNXVVIBYOBX-KDBLBPRBSA-N (2s)-2-amino-3-(3,4-dihydroxyphenyl)propanoic acid;(2s)-2-(dihydroxyamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1.ON(O)[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 RQPKNXVVIBYOBX-KDBLBPRBSA-N 0.000 description 1
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100023995 Beta-nerve growth factor Human genes 0.000 description 1
- 241000195940 Bryophyta Species 0.000 description 1
- 108010058546 Cyclin D1 Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102100024165 G1/S-specific cyclin-D1 Human genes 0.000 description 1
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 244000062730 Melissa officinalis Species 0.000 description 1
- 235000010654 Melissa officinalis Nutrition 0.000 description 1
- 108010093163 Member 3 Group A Nuclear Receptor Subfamily 4 Proteins 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 108010015078 Pregnancy-Associated alpha 2-Macroglobulins Proteins 0.000 description 1
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 description 1
- 108050003267 Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 101150076211 TH gene Proteins 0.000 description 1
- 201000008982 Thoracic Aortic Aneurysm Diseases 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 208000035868 Vascular inflammations Diseases 0.000 description 1
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 description 1
- 102100035140 Vitronectin Human genes 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003815 abdominal wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- QPMSXSBEVQLBIL-CZRHPSIPSA-N ac1mix0p Chemical compound C1=CC=C2N(C[C@H](C)CN(C)C)C3=CC(OC)=CC=C3SC2=C1.O([C@H]1[C@]2(OC)C=CC34C[C@@H]2[C@](C)(O)CCC)C2=C5[C@]41CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C2O QPMSXSBEVQLBIL-CZRHPSIPSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002220 antihypertensive agent Substances 0.000 description 1
- 229940030600 antihypertensive agent Drugs 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- RMRJXGBAOAMLHD-IHFGGWKQSA-N buprenorphine Chemical compound C([C@]12[C@H]3OC=4C(O)=CC=C(C2=4)C[C@@H]2[C@]11CC[C@]3([C@H](C1)[C@](C)(O)C(C)(C)C)OC)CN2CC1CC1 RMRJXGBAOAMLHD-IHFGGWKQSA-N 0.000 description 1
- 229960001736 buprenorphine Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 1
- 229940111134 coxibs Drugs 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000003255 cyclooxygenase 2 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 229940030606 diuretics Drugs 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 229960003722 doxycycline Drugs 0.000 description 1
- XQTWDDCIUJNLTR-CVHRZJFOSA-N doxycycline monohydrate Chemical compound O.O=C1C2=C(O)C=CC=C2[C@H](C)[C@@H]2C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@H](N(C)C)[C@@H]1[C@H]2O XQTWDDCIUJNLTR-CVHRZJFOSA-N 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 208000003457 familial thoracic 1 aortic aneurysm Diseases 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 150000004687 hexahydrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000010842 high-capacity cDNA reverse transcription kit Methods 0.000 description 1
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002471 hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000000260 hypercholesteremic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003516 hyperlipidaemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 229940040145 liniment Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000001617 migratory effect Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000004682 monohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 235000011929 mousse Nutrition 0.000 description 1
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 1
- 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 1
- SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 108010071584 oxidized low density lipoprotein Proteins 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000001023 pro-angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000207 pro-atherogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009696 proliferative response Effects 0.000 description 1
- 238000002278 reconstructive surgery Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000007614 solvation Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 150000004684 trihydrates Chemical class 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006200 vaporizer Substances 0.000 description 1
- 210000005167 vascular cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
- A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
DESCRIPCIÓN
USO DE INHIBIDORES DE LA TIROSINA HIDROXILASA PARA EL TRATAMIENTO
DEL ANEURISMA DE AORTA
La presente invención se refiere al uso de un compuesto que es capaz de inhibir la tirosina hidroxilasa para la prevención o el tratamiento del aneurisma de aorta, preferiblemente de aorta abdominal. Por tanto, la presente invención puede englobarse en el campo de la farmacología.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
El aneurisma de aorta abdominal (AAA) es una enfermedad con una elevada tasa de morbimortalidad y una prevalencia que, en varones de más de 65 años, puede alcanzar el 8%. En esta patología, habitualmente asintomática, se produce una degeneración irreversible de la pared vascular que provoca la dilatación progresiva de la aorta y su eventual ruptura (mortal en más de un 80% de los casos). Entre los aspectos más destacados del remodelado vascular en esta patología se encuentran la inflamación, la neovascularización, la degradación de los componentes de la matriz extracelular por un aumento de la actividad de metaloproteinasas de matriz (MMPs) y la muerte por apoptosis de las células musculares lisas vasculares (CMLV). Actualmente no existen estrategias farmacológicas que limiten el desarrollo del AAA. La única medida terapéutica disponible es la intervención quirúrgica (cirugía abierta o endovascular) de aquellos aneurismas que presentan un alto riesgo de ruptura (diámetro aórtico > 5,5 cm). Aunque se ha sugerido que las estatinas, la doxiciclina, los inhibidores de COX-2 o del enzima convertidora de angiotensina, entre otros, podrían reducir la progresión del AAA, ninguno de ellos ha demostrado un beneficio clínico de forma concluyente. Por tanto, existe la necesidad en este ámbito de desarrollar nuevas herramientas farmacológicas para el tratamiento y prevención de esta patología.
La expresión del receptor nuclear NR4A3 (también conocido como NOR-1) está aumentada en las arterias coronarias y en la aorta con aterosclerosis de pacientes con cardiopatía isquémica. NR4A3 pertenece a la subfamilia de receptores nucleares NR4A, que son receptores nucleares singulares, ya que se comportan como genes de
respuesta temprana cuya expresión es inducida de forma rápida y muy acentuada por diferentes estímulos. Estos receptores regulan la expresión de genes uniéndose como monómeros a un elemento NBRE (Nerve growth Factor Responsive Element) o como dímeros a un elemento NuRE (repetición palíndroma de NBRE). Asimismo, pueden regular la expresión génica de forma indirecta a través de la modulación de vías de señalización y de la actividad de otros factores de transcripción. NR4A3 modula la respuesta migratoria y proliferativa de las CMLV inducida por diferentes agentes proaterogénicos como factores de crecimiento, trombina, lipoproteínas de baja densidad (LDL) nativas y LDL oxidadas. NR4A3 es también crítico en la proliferación y en la respuesta pro-angiogénica inducida por VEGF y trombina en células endoteliales vasculares. Para ejercer estas funciones NR4A3 regula la expresión de genes/proteínas como la ciclina D1 y SKP2 (S phase kinase-associated protein 2) que participan en la proliferación celular, la vitronectina que contribuye a la migración celular o la alfa-2-macroglobulina (A2M) que regula la actividad de MMPs que participan en el remodelado vascular. El papel de NR4A3 en la aterosclerosis es complejo, ya que además de regular la migración/proliferación y la supervivencia/apoptosis de las células vasculares, también regula la activación y expresión de moléculas de adhesión en las células endoteliales que favorecen la infiltración de células inflamatorias y la captación lipídica de los monocitos/macrófagos. La deficiencia de NR4A3 reduce la aterosclerosis en un modelo de ratón ApoE-/-tratado con dieta hipercolesterolémica. Recientemente, hemos observado que la expresión de NR4A3 está incrementada en el AAA humano y que la sobreexpresión de la proteína NR4A3 funcional en la pared vascular de la aorta en ratón (animales TgNR4A3) desarrolla aneurisma de aorta tras ser infundido con angiotensina II, sin requerir un fondo genético hiperlipémico y en ausencia de aterosclerosis como ocurre con los modelos animales descritos hasta la fecha.
Actualmente, se desconoce el mecanismo específico a través del cual el receptor NR4A3 incide en el desarrollo del aneurisma de aorta. Los genes regulados por este receptor nuclear en la pared vascular constituyen potenciales nuevas dianas terapéuticas en la patología aneurismática y su identificación es uno de los objetivos de la presente invención ante la ausencia de estrategias farmacológicas útiles en esta enfermedad. También es objeto de la presente invención proporcionar un nuevo método terapéutico eficaz para el tratamiento del aneurisma de aorta humano.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
Los autores de la presente invención han demostrado un incremento en la expresión de la tirosina hidroxilasa (TH) en muestras de aorta de pacientes con aneurisma de aorta abdominal en comparación con donantes sanos. Además, tanto en la aorta de los ratones transgénicos para NR4A3 como en la de ratones deficientes en la apolipoproteína E (Apo E-/-), ambos modelos susceptibles al desarrollo de aneurismas de aorta, los autores detectan una fuerte inducción de la expresión de la TH en comparación con ratones control resistentes al desarrollo de esta patología. La TH es el enzima limitante en la síntesis de catecolaminas; cataliza la hidroxilación de la tirosina a dihidroxifenilalanina (L-DOPA) a partir de la cual se sintetizan las catecolaminas dopamina, epinefrina y norepinefrina. En la regulación de la TH participan los factores de transcripción de la familia NR4A
La presente invención se refiere al uso de inhibidores de la TH como fármacos para el tratamiento de la enfermedad aneurismática y proporciona un método para el tratamiento, la prevención, regresión o la ralentización del desarrollo de la enfermedad aneurismática humana que comprende administrar al individuo una cantidad de un inhibidor de la TH suficiente para reducir el diámetro vascular o ralentizar su dilatación, disminuir la inflamación y/o la degeneración aórtica. Tal y como se usan aquí, los términos terapia y tratamiento se definen de forma general de manera que comprendan la cura de la enfermedad, o cualquier mejora, inhibición, mitigación o control de la presencia, prevalencia, gravedad, síntomas etc. de la enfermedad.
En un primer aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto inhibidor de la tirosina hidroxilasa para uso en el tratamiento o prevención del aneurisma aórtico.
El "aneurisma aórtico”, "aneurisma de aorta” o "enfermedad aneurismática de la aorta” es la enfermedad, habitualmente asintomática, que cursa con un ensanchamiento anormal de las paredes de la aorta, siendo la aorta la arteria principal que va desde el corazón por el pecho y el abdomen. En esta enfermedad se produce una degeneración de la pared vascular que provoca la dilatación progresiva de la aorta y su eventual ruptura. Por tanto, si un aneurisma crece puede llegar a romperse y provocar una hemorragia peligrosa e incluso la muerte. Preferiblemente, se consideran aneurisma aórtico aquellas dilataciones que dan lugar a un incremento del diámetro
aórtico externo superior o igual a 1,5 veces con respecto al diámetro externo de la aorta de un individuo sano de la misma especie que no presenta aneurisma. Los aspectos más destacados del remodelado vascular que ocurre en presencia de la enfermedad aneurismática son, aunque sin limitarnos, inflamación, neovascularización, degradación de los componentes de la matriz extracelular por un aumento de la actividad de metaloproteinasas de matriz y la muerte por apoptosis de las CMLV. Hay dos tipos de aneurisma aórtico, ambos incluidos en el contexto de la presente invención: el aneurisma aórtico torácico, que ocurre en la parte de la aorta que pasa por el pecho, y el aneurisma aórtico abdominal, que ocurre en la parte de la aorta que pasa por el abdomen.
En una realización preferida, dicho aneurisma aórtico se presenta en la aorta torácica o en la aorta abdominal. En una realización más preferida, el aneurisma aórtico se presenta en la aorta abdominal.
En una realización preferida, dicho compuesto inhibidor de la TH es alfa-metil-ptirosina (AMPT).
El compuesto inhibidor de la TH debe estar en una forma farmacéuticamente aceptable para uso terapéutico de la invención. Como se usa en el presente documento, "farmacéuticamente aceptable" significa adecuado para el uso en contacto con los tejidos humanos y animales sin toxicidad indebida, irritación, respuesta alérgica y similares, acorde con una relación beneficio / riesgo razonable, y eficaz para su uso previsto dentro del alcance del buen juicio médico.
Para el propósito de la presente invención, el compuesto inhibidor de la TH puede estar en forma de solvato o sales.
Como se usa en este documento, "solvato" significa un complejo formado por solvatación (la combinación de moléculas de disolvente con moléculas o iones del agente activo de la presente invención), o un agregado que consiste en un ion o molécula de soluto (el agente activo de la presente invención) con una o más moléculas de disolvente. En la presente invención, el solvato preferido es hidrato. Los ejemplos de hidrato incluyen, pero sin limitación, hemihidrato, monohidrato, deshidrato, trihidrato, hexahidrato, etc. Un experto en la técnica debe entender que la sal
farmacéuticamente aceptable del presente compuesto también puede existir en un solvato.
El término "sales" incluye derivados de un agente activo, en donde el agente activo se modifica haciendo sales de adición de ácido o base del mismo. Preferentemente, las sales son sales farmacéuticamente aceptables. Tales sales incluyen, pero no se limitan a, sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables, sales de adición de bases farmacéuticamente aceptables, sales de metales farmacéuticamente aceptables, sales de amonio y sales de amonio alquilado. Las sales de adición de ácido incluyen sales de ácidos inorgánicos y ácidos orgánicos. Los ejemplos representativos de ácidos inorgánicos adecuados incluyen ácidos clorhídrico, hidrobrómico, hidroyódico, fosfórico, sulfúrico, nítrico y similares.
En otra realización preferida, dicho compuesto se administra en combinación con al menos uno de otros agentes seleccionados de entre fármacos hipolipemiantes, antihipertensivos, betabloqueantes, bloqueantes de canales de calcio, diuréticos, nitratos o inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina.
En otra realización preferida, dicho compuesto se administra en una composición farmacéutica que comprende al menos un excipiente biocompatible.
En la presente invención, se entiende por “composición farmacéutica” aquella composición que contiene al menos un excipiente y uno o más agentes activos en los que al menos uno de ellos es un inhibidor de la TH. El inhibidor de la TH puede inhibir el gen y/o la proteína y/o la actividad de la TH. Tales inhibidores pueden ser moléculas o compuestos de cualquier naturaleza (biológica, sintética/química o una combinación de ambas), disponibles comercialmente o moléculas en desarrollo.
La composición puede administrarse por cualquier ruta incluyendo, aunque sin limitarnos, por vía oral o parenteral, tales como intravenosa, intramuscular, subcutánea, intracapsular, intraperitoneal, intrarectal, intranasal, o dérmica o intradérmica, mediante por ejemplo un parche dérmico o transdérmico. Además, el sistema de administración puede ser, por ejemplo, aunque sin limitarnos, inyección, oral, espray o inhalador. Sin embargo, la vía de administración de un agente candidato en particular dependerá en parte de su estructura química y puede ser determinada
por los expertos en la materia. El inhibidor de la TH además podrá combinarse con un excipiente, adyuvante y/o vehículo farmacéuticamente aceptable y formularse para su adecuada administración. Formulaciones apropiadas son, aunque sin limitarnos, formas sólidas (cápsulas, pastillas, píldoras, comprimidos, etc.), semisólidas (polvos, formas granuladas, geles o hidrogeles, cremas, ungüentos, bálsamos, mousses, pomadas, espumas, lociones, etc.) o líquidas (solución, suspensión, emulsión, aceite, linimento, jarabe, suero, vaporizador, aerosol, etc.), o el inhibidor puede ir incluido en un sistema de liberación sostenida.
Los compuestos inhibidores de TH de la presente invención se pueden administrar por vía oral a seres humanos en un intervalo de dosificación de 1 a 100 mg/kg de peso corporal en dosis divididas. Sin embargo, se ha de entender que el nivel de dosis específico y la frecuencia de dosificación para cualquier paciente particular puede variar y dependerá de una diversidad de factores que incluyen la actividad del compuesto específico empleado, la estabilidad metabólica y duración de acción de ese compuesto, la edad, peso corporal, estado general de salud, sexo, dieta, modo y momento de administración, tasa de excreción, combinación de fármacos, la gravedad de la afección particular, y la terapia que experimenta el hospedador.
Otro aspecto de la invención se refiere al uso de un inhibidor de la TH para la fabricación de un medicamento para el tratamiento del aneurisma aórtico. En una realización preferida, dicho inhibidor es el AMPT.
Otro aspecto de la invención es un método de tratamiento o prevención del aneurisma aórtico que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto inhibidor de la tirosina hidroxilasa a un paciente que lo necesite. Preferiblemente, dicho compuesto es el AMPT.
Se entiende por "cantidad terapéuticamente efectiva” de una composición farmacéutica, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente efectiva. Una "cantidad terapéuticamente efectiva” se refiere a una cantidad efectiva, a las dosis y por los periodos de tiempo necesarios para lograr el efecto terapéutico deseado, que es una mejora en el fenotipo de la aorta o cualquier mejora, inhibición, mitigación o control de la presencia, prevalencia, gravedad, síntomas etc. de la enfermedad. La cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto puede variar según factores
como el estadio de la enfermedad, la edad, el sexo y el peso del sujeto. El régimen de dosificación debe ajustarse para proporcionar la respuesta terapéutica óptima. La cantidad terapéuticamente efectiva es también aquella en la que cualquier efecto tóxico o adverso sea compensada con creces por el efecto terapéutico beneficioso. Una cantidad “profilácticamente efectiva” se refiere a una cantidad efectiva, a las dosis y durante los periodos de tiempo necesarios, para conseguir el resultado profiláctico deseado, tal como una mejora en el fenotipo de la aorta. Habitualmente, una dosis profiláctica se usa en sujetos en un estadio temprano de la enfermedad en el que la cantidad profilácticamente efectiva es menor que la cantidad terapéuticamente efectiva. Los valores de dosis pueden variar con la gravedad de la condición a ser tratada. Para un sujeto en particular, el régimen de dosis debe ajustarse a lo largo del tiempo, según las necesidades individuales y el criterio de los profesionales responsables de su administración, y ajustarse para proporcionar la respuesta terapéutica óptima.
Se entiende por “mejora en el fenotipo de la aorta” cualquier cambio fenotípico (anatómico) en la aorta que suponga una mejora con respecto al fenotipo (anatomía) de la aorta en presencia de aneurisma y en ausencia de la molécula o compuesto a analizar. Dicha mejora puede ser, por ejemplo, pero sin limitarnos, una reducción en el diámetro de la aorta, o en los parámetros de inflamación, neovascularización, degradación de los componentes de la matriz extracelular o muerte de las CMLV o una reducción en la gravedad de la patología preferiblemente de acuerdo con la escala de Manning.
A lo largo de la descripción y las reivindicaciones la palabra "comprende" y sus variantes no pretenden excluir otras características técnicas, aditivos, componentes o pasos. Para los expertos en la materia, otros objetos, ventajas y características de la invención se desprenderán en parte de la descripción y en parte de la práctica de la invención. Los siguientes ejemplos y figuras se proporcionan a modo de ilustración, y no se pretende que sean limitativos de la presente invención.
DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
FIG. 1. Expresión de NR4A3 y tirosina hidroxilasa (TH) en la aorta de pacientes con aneurisma de aorta abdominal (AAA). (A y B) Niveles de ARNm (A) y de proteína (B)
TH en aorta abdominal de pacientes con AAA. A) Nivel de expresión de TH en pacientes con AAA (n=42) y en donantes sanos (n=10) analizados mediante PCR a tiempo real. Los resultados se expresan como la media ± SEM relativos a los niveles de expresión en donantes. *P < 0,001 vs. Donantes. B) Niveles de proteína de TH analizados por western-blot en dichas muestras. Se muestra la imagen de un resultado representativo. Los niveles de la p-actina se utilizaron como control de carga. C) Niveles de ARNm de NR4A3 analizado por PCR a tiempo real en las muestras descritas en (A). Los resultados se expresan como la media ± SEM relativos a los niveles de expresión en donantes. *P < 0,001 vs. Donantes. D) Correlación entre los niveles de mRNA de TH y NR4A3 en dichas muestras (r=0,4484, P< 0,005, Spearman Rank-Order Correlation).
FIG. 2. Expresión de la tirosina hidroxilasa (TH) en modelos animales de aneurisma aórtico. Niveles de ARNm de la TH analizados mediante PCR a tiempo real en la aorta de dos modelos susceptibles al desarrollo de aneurisma por infusión de Ang II (ratones TgNR4A3CML y deficientes para la apolipoproteína E (ApoE'/_)), y en ratones C57BL/6J (control no transgénico, WT) resistentes al desarrollo de AAA. Los datos relativos a los animales WT se expresan como la media ± SEM (al menos n=7). * P < 0,001 vs. ratones WT.
FIG. 3. El tratamiento con AMPT inhibe el desarrollo de aneurisma de aorta en ratones ApoE-/" infundidos con angiotensina II. (A) Gráfica en la que se representa la evolución semanal del diámetro aórtico de los ratones ApoE-/" infundidos con suero salino (s. salino) o angiotensina II (Ang II; 1000 ng/kg/min durante 28 días) analizado por ultrasonografía. Los animales infundidos con Ang II fueron tratados o no con AMPT (100 mg/kg vía i.p., administrado dos veces al día desde el día anterior a la implantación de la bomba de Ang II). Los valores corresponden a la media ± SEM (suero salino, n = 9; Ang II, n= 14; Ang II+AMPT, n=19). P < 0,05: * vs. tiempo 0 del mismo grupo experimental; # vs. animales infundidos con suero salino al mismo tiempo; $ vs. animales infundidos con Ang II (no tratados con AMPT) al mismo tiempo. (B) Imágenes representativas obtenidas mediante ultrasonografía de la visión transversal de la aorta de cada uno de los grupos experimentales indicados en (A) al cabo de las 4 semanas de tratamiento. (C) Fotografías representativas de las aortas de los ratones en los 3 grupos de estudio al finalizar el estudio.
FIG. 4. El tratamiento con AMPT limita las alteraciones estructurales y el infiltrado inflamatorio en la aorta de los ratones ApoE-/- infundidos con angiotensina II. Se infundieron ratones ApoE-/- con suero salino (s. salino) o angiotensina II (Ang II; 1000 ng/kg/min durante 28 días). Los animales infundidos con Ang II fueron tratados o no con AMPT (100 mg/kg, vía i.p., administrado dos veces al día desde el día anterior a la implantación de la bomba de Ang II). (A y B) Imágenes representativas del análisis histológico mediante tinción de tricrómico de Masson (A) y de orceína (B) en secciones de la aorta abdominal de los grupos de estudio indicados. Las flechas indican rupturas de las fibras elásticas. (C) Tinción representativa para MAC3 (marcador de macrófagos) en secciones de la aorta abdominal de cada uno de los grupos experimentales. Las flechas indican regiones positivas para MAC3. Barra: 100 micras.
FIG. 5 El tratamiento con AMPT inhibe el desarrollo de aneurisma de aorta en ratones TgNR4A3CML infundidos con angiotensina II. (A) Diámetro de la aorta de los ratones no transgénicos (controles; C57BL/6J; WT) y transgénicos para NR4A3 humano (TgNR4A3CML) infundidos con suero salino (s. salino) o angiotensina II (Ang II; 1000 ng/kg/min durante 28 días). Un grupo de ratones TgNR4A3CML infundidos con Ang II fue tratado con AMPT (100 mg/kg, vía i.p., administrado dos veces al día desde el día anterior a la implantación de la bomba de Ang II). El diámetro de la aorta se determinó mediante ultrasonografía. Los valores se expresan como media ± SEM (al menos n=7). P < 0,05: * vs. tiempo 0 del mismo grupo experimental; # vs. el mismo animal infundido con suero salino al mismo tiempo; ^ vs. TgNR4A3CML infundidos con Ang II y tratados con AMPT. (B) Imágenes representativas obtenidas mediante ultrasonografía de la visión transversal de la aorta de cada uno de los grupos experimentales indicados en (A) al cabo de las 4 semanas de tratamiento. (C) Fotografías representativas de las aortas de los ratones de los 5 grupos al finalizar el estudio.
FIG. 6. El tratamiento con AMPT limita las alteraciones estructurales y el infiltrado inflamatorio en la aorta de los ratones TgNR4A3CML infundidos con angiotensina II. Se infundieron ratones no transgénicos (controles; C57BL/6J; WT) y transgénicos para NR4A3 humano (TgNR4A3CML) con suero salino (s. salino) o angiotensina II (Ang II; 1000 ng/kg/min durante 28 días). Un grupo de animales transgénicos infundidos con Ang II fueron tratados o no con AMPT (100 mg/kg, vía i.p., administrado dos veces al día desde el día anterior a la implantación de la bomba de Ang II). (A y B) Imágenes
representativas del análisis histológico mediante tinción de tricrómico de Masson (A) y de orceína (B) en secciones de la aorta abdominal de los grupos de estudio indicados. Las flechas indican rupturas de las fibras elásticas. (C) Tinción representativa para MAC3 (marcador de macrófagos) en secciones de la aorta abdominal de cada uno de los grupos experimentales. Las flechas indican regiones positivas para MAC3. Barra: 100 micras.
EJEMPLOS
A continuación, se ilustrará la invención mediante unos ensayos realizados por los inventores, que ponen de manifiesto la efectividad del tratamiento con AMPT, un inhibidor de la TH, para reducir la incidencia y gravedad de los aneurismas aórticos desarrollados en respuesta a la infusión con Ang II en ratones transgénicos para NOR-1 y ratones Apo E-/-.
Ejemplo 1. Análisis de los niveles de expresión de NR4A3 y TH en la aorta de pacientes con AAA y donantes sanos.
Se obtuvieron muestras de pared arterial aneurismática procedentes de pacientes sometidos a cirugía abierta reparadora y de aorta abdominal de donantes multiorgánicos que fueron congeladas inmediatamente en nitrógeno líquido para posteriores análisis de ARNm y proteína. Se analizaron los niveles de expresión (ARNm) de NR4A3 y TH en dichas muestras mediante PCR a tiempo real. Para ello se extrajo el ARN total de las muestras de aorta indicadas con el sistema RNeasy Micro kit (Qiagen). El ARN (1 pg) se retrotranscribió a ADNc mediante el High Capacity cDNA Reverse Transcription kit (Applied Biosystems) en presencia de secuencias aleatorias. Asimismo, para la determinación de los niveles proteicos por Western blot, las muestras de tejido se homogeneizaron en un tampón de lisis frío que contenía 50 mM Tris-HCl pH 7.5, 1% (p/v) Triton X-100, 150 mM NaCl y 1 10 mM DTT, suplementado con inhibidores de proteasas y fosfatasas (Roche). Las proteínas se resolvieron por SDS-PAGE bajo condiciones reductoras y se transfirieron a membranas de fluoruro de polivinilideno (Immobilon, Millipore). El análisis por Western blot se realizó mediante anticuerpos contra la TH (ab75875, Abcam) y contra la pactina (A5441, Sigma), y la detección usando el anticuerpo secundario conjugado a peroxidasa de rábano adecuado y el sistema de detección Supersignal (Pierce). La homogeneidad de carga proteica en cada carril se verificó mediante la tinción de
Ponceau y la determinación de los niveles de p-actina. Estos análisis evidenciaron un incremento en la expresión (ARNm y proteína) de TH en la aorta de pacientes con AAA frente a la de donantes sanos (Figura 1A y B), así como mayores niveles de ARNm de NR4A3 en la aorta aneurismática (Figura 1C). Además, observamos la existencia de una correlación positiva entre los niveles de ARNm de NR4A3 y los de la TH en dichas muestras tras aplicar el coeficiente de correlación de Spearman sobre los datos transformados a Log10 (Figura 1D).
Ejemplo 2. Análisis de los niveles de expresión de TH en modelos animales de susceptibles al desarrollo de aneurisma aórtico.
Los estudios se desarrollaron en dos modelos que desarrollan AAA tras la infusión con Ang II: ratones macho transgénicos que sobreexpresan el receptor humano NR43A específicamente en CMLV y ratones macho ApoE-/-. En estos estudios se incluyó un grupo control de ratones macho no transgénicos (C57BL/6J, WT), animales que presentan una baja susceptibilidad al desarrollo de aneurisma por infusión de Ang II. Animales de los 3 grupos de estudio (ratones no transgénicos, transgénicos para NR4A3 y ApoE-/-) fueron sacrificados mediante anestesia terminal por vía intraperitoneal con una mezcla de medetomidina (1 mg/kg) y ketamina (75 mg/kg) en suero salino (volumen final de 200 ^l), las aortas se recogieron inmediatamente, se eliminó el tejido conectivo y el exceso de grasa perivascular, se congelaron inmediatamente en nitrógeno y almacenaron a -80 °C hasta su procesamiento para la extracción del ARN total tal y como se indica en el Ejemplo 1. El análisis de la expresión de la TH por PCR a tiempo real en la aorta de estos animals mostró que los dos modelos (ratones TgNR4A3CML y ApoE-/-) presentaban niveles de mRNA de la TH muy superiores a los detectados en ratones no transgénicos (Figura 2). El incremento en la expresión de la TH en ambos modelos fue de magnitud similar al observado en pacientes con AAA frente a donantes (Figura 1A). Por tanto, la expresión de TH está fuertemente incrementada en aquellos modelos animales susceptibles al desarrollo de AAA.
Ejemplo 3. Análisis del impacto de la inhibición farmacológica de la TH sobre el desarrollo de aneurisma inducido por la Ang II en ratones ApoE-/-.
Los estudios se desarrollaron en ratones macho ApoE-/- que se aclimataron a la instalación durante 1 semana antes del estudio. Los animales fueron infundidos con Ang II (1000 ng/kg/min) mediante minibombas osmóticas (modelo 1004, Alzet)
implantadas subcutáneamente en el espacio interescapular de los ratones previa anestesia con isoflurano. El procedimiento dura aproximadamente 15 minutos por animal. Inmediatamente tras la cirugía se administraron antibióticos (penicilina, 22.000 u/Kg, i.m.) y analgésicos (buprenorfina 0,05 mg/Kg, i.m.) para prevenir infecciones y limitar el malestar de los animales, los cuales se mantuvieron sobre una almohadilla térmica hasta que se despertaron tras la intervención y fueron cuidadosamente monitorizados durante el periodo post-cirugía. Un grupo de los ratones infundidos con Ang II recibió tratamiento con AMPT (100 mg/kg, vía i.p) administrado dos veces al día desde el día anterior a la implantación de la bomba de Ang II y a lo largo de todo el estudio (28 días). El grupo control estaba constituido por ratones ApoE-/- infundidos con suero salino. La presión arterial se evaluó semanalmente (a los 0, 7, 14, 21 y 28 días) mediante el método de la pletismografía en la cola. El diámetro de la aorta también se evaluó semanalmente mediante ecografía abdominal utilizando un equipo de ultrasonidos (Vevo2100 Imaging systems; Visualsonics) con un transductor de 30 MHz. Para ello los ratones se anestesiaron mediante inhalación de isofluorano al 1,5% y se aseguraron en posición supina sobre una plataforma térmica. Tras afeitar la región del precordio se aplicó el transductor a la pared abdominal para realizar las mediciones de la aorta abdominal. Aquellas aortas abdominales con diámetros externos superiores o iguales a 1,5 mm se consideraron aneurismáticas. Todas las medidas se realizaron a partir de las imágenes captadas mediante la utilización del software de análisis. Al cabo de 4 semanas los animales fueron sacrificados mediante anestesia terminal por vía intraperitoneal con una mezcla de medetomidina (1 mg/kg) y ketamina (75 mg/kg) en suero salino (volumen final de 200 pl), las aortas se recogieron inmediatamente, se examinaron para determinar la presencia de aneurismas y se congelaron inmediatamente en nitrógeno o se fijaron en paraformadehído para la caracterización macroscópica o ser embebidos en parafina y procesados para los estudios histoquímicos. Estos análisis constataron que la infusión con Ang II incrementó la presión arterial, parámetro que no se vio significativamente alterado como consecuencia del tratamiento con AMPT (Tabla I).
s. sal: solución salina. Los valores expresados en mm Hg corresponden a la media ± SEM, *p < 0.001 vs. ratones infundidos con s. salina
Tabla I. Efecto de la administración de AMPT sobre la presión sistólica en ratones Apo E-/- infundidos con solución salina o Ang II
Los estudios por ultrasonografía demostraron que la infusión con Ang II en ratones ApoE-/- incrementó significativamente el diámetro de la aorta respecto a los animales control infundidos con suero salino, y que este efecto se atenuó por el tratamiento con AMPT (Figura 3A y B). La administración de AMPT redujo el incremento en el diámetro aórtico a valores similares a los de los animales control, un efecto significativo a los 14 días de tratamiento y que se acentuó de forma progresiva hasta la finalización del estudio tras 28 días, tal y como puede determinarse también a través de la visualización macroscópica de la aorta (Figura 3C).
Los análisis histológicos mediante la tinción de tricrómico de Masson de secciones de 5 pm de las muestras de aorta fijadas y embebidas en parafina, demostró que en los ratones ApoE-/- la infusión de Ang II produce un importante remodelado vascular caracterizado por un incremento en la deposición de colágeno que se atenúa por el tratamiento con AMPT (Figura 4A). Asimismo, la tinción de orceína mostró que el AMPT limitaba la desorganización y ruptura de las fibras elásticas inducida por la infusión de Ang II en estos animales (Figura 4B). La inhibición de la TH mediante el tratamiento con AMPT también previno el importante infiltrado de macrófagos (células positivas para MAC3) en la pared vascular inducido por la infusión de Ang II en los ratones ApoE-/-(Figura 4C).
Ejemplo 4. Análisis del impacto de la inhibición farmacológica de la TH sobre el desarrollo de aneurisma inducido por la Ang II en ratones transgénicos para NR4A3
Los estudios se desarrollaron de modo similar a como se ha descrito en el Ejemplo 3. En este caso se analizó el efecto de la infusión de Ang II sobre el diámetro de la aorta
en animales control (C57BL/6J; WT) y en ratones transgénicos para NR4A3 (TgNR4A3CML). Los ratones transgénicos infundidos con Ang II fueron divididos en dos grupos, uno de los cuales recibió tratamiento con AMPT desde el día anterior a la implantación de las bombas de Ang II, tal y como se indicó en el Ejemplo 3, mientras el segundo grupo sólo recibió el vehículo en el que se administró este fármaco (solución salina). Los grupos control estaban constituidos por ratones transgénicos y por controles no transgénicos infundidos con suero salino. Estos estudios mostraron que la infusión con Ang II incrementó la presión arterial tanto en animales WT como en los ratones transgénicos sin que se observaran diferencias significativas entre ellos o como consecuencia del tratamiento con AMPT (Tabla II).
28 97,09±3,65 100,65±3,61 147,08±3,14* 157,80±12,53* 158,59±3,61* WT: animales control no t ransgénicos; 1"G: ratones TgN r4 A 3 cml+; sal: solución salina. L valores expresados en mm Hg corresponden a la media±SEM, p < 0.05, * vs. animales infundidos con solución salina.
Tabla II. Efecto del tratamiento con AMPT sobre la presión sistólica en ratones WT y TgNR4A3CML infundidos con solución salina o Ang II
Los análisis por ultrasonografía demostraron que la infusión con Ang II incrementó de forma significativa el diámetro de la aorta de los animales transgénicos respecto a los animales WT. El tratamiento con AMPT previno este efecto de forma significativa al cabo de 21 y 28 días (Figura 5A y B) alcanzando valores similares a los de los ratones WT infundidos con Ang II. La atenuación de la dilatación aórtica inducida por la Ang II en los los ratones TgNR4A3CML tratados con AMPT se visualizó también a punto final tras la extracción y fijación de la aorta (Figura 5C).
Análogamente a lo descrito en el Ejemplo 3, el tratamiento con AMPT en ratones
TgNR4A3CML atenuó el exacerbado remodelado vascular y la deposición de colágeno inducido por la Ang II en los animales transgénicos, tal y como se observa tras la tinción de tricrómico de Masson (Figura 6A). La tinción de orceína constató que la inhibición de la TH mediante AMPT en animales infundidos con Ang II limitó la desestructuración y ruptura de las láminas elásticas observada en la aorta de los ratones TgNR4A3CML y los estudios inmunohistoquímicos para MAC3 demostraron que este fármaco redujo el importante infiltrado inflamatorio vascular desencadenado por la Ang II en estos animales.
Claims (5)
1. Compuesto inhibidor de la tirosina hidroxilasa para uso en el tratamiento o prevención del aneurisma aórtico.
2. Compuesto inhibidor de la tirosina hidroxilasa para uso según la reivindicación 1, donde dicho compuesto es alfa-metil-p-tirosina (AMPT).
3. Compuesto inhibidor de la tirosina hidroxilasa para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, donde dicho aneurisma aórtico se presenta en la aorta torácica o en la aorta abdominal.
4. Compuesto inhibidor de la tirosina hidroxilasa para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde dicho compuesto se administra en combinación con al menos uno de otros agentes seleccionados de entre fármacos hipolipemiantes, antihipertensivos, betabloqueantes, bloqueantes de canales de calcio, diuréticos, nitratos o inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina.
5. Compuesto inhibidor de la tirosina hidroxilasa para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde dicho compuesto se administra en una composición farmacéutica que comprende al menos un excipiente biocompatible.
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ES201830607A ES2738248B2 (es) | 2018-06-21 | 2018-06-21 | Uso de inhibidores de la tirosina hidroxilasa para el tratamiento del aneurisma de aorta |
| EP19823676.2A EP3811942A4 (en) | 2018-06-21 | 2019-06-21 | USE OF TYROSINE HYDROXYLASE INHIBITORS FOR THE TREATMENT OF AORTIC ANEURYSM |
| PCT/ES2019/070434 WO2019243653A1 (es) | 2018-06-21 | 2019-06-21 | Uso de inhibidores de la tirosina hidroxilasa para el tratamiento del aneurisma de aorta |
| US17/252,677 US20210283083A1 (en) | 2018-06-21 | 2019-06-21 | Use of tyrosine hydroxylase inhibitors for the treatment of aortic aneurysm |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ES201830607A ES2738248B2 (es) | 2018-06-21 | 2018-06-21 | Uso de inhibidores de la tirosina hidroxilasa para el tratamiento del aneurisma de aorta |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2738248A1 ES2738248A1 (es) | 2020-01-21 |
| ES2738248B2 true ES2738248B2 (es) | 2023-03-10 |
Family
ID=68983785
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES201830607A Expired - Fee Related ES2738248B2 (es) | 2018-06-21 | 2018-06-21 | Uso de inhibidores de la tirosina hidroxilasa para el tratamiento del aneurisma de aorta |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210283083A1 (es) |
| EP (1) | EP3811942A4 (es) |
| ES (1) | ES2738248B2 (es) |
| WO (1) | WO2019243653A1 (es) |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH04506967A (ja) * | 1989-07-27 | 1992-12-03 | ジー．ディー．サール アンド カンパニー | 高血圧症治療用腎選択性生成物 |
| IT1291633B1 (it) * | 1997-04-22 | 1999-01-11 | Pharmaconsult S A S | Uso dell'alfa-metil-p-tirosina per inibire la produzione di melanina nei melanociti dell'iride |
| US20050187278A1 (en) * | 2003-08-28 | 2005-08-25 | Pharmacia Corporation | Treatment or prevention of vascular disorders with Cox-2 inhibitors in combination with cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors |
-
2018
- 2018-06-21 ES ES201830607A patent/ES2738248B2/es not_active Expired - Fee Related
-
2019
- 2019-06-21 EP EP19823676.2A patent/EP3811942A4/en not_active Withdrawn
- 2019-06-21 US US17/252,677 patent/US20210283083A1/en active Pending
- 2019-06-21 WO PCT/ES2019/070434 patent/WO2019243653A1/es unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP3811942A1 (en) | 2021-04-28 |
| EP3811942A4 (en) | 2022-04-20 |
| US20210283083A1 (en) | 2021-09-16 |
| WO2019243653A1 (es) | 2019-12-26 |
| ES2738248A1 (es) | 2020-01-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Li et al. | Berberine improves pressure overload-induced cardiac hypertrophy and dysfunction through enhanced autophagy | |
| ES2390534T3 (es) | Uso de beta-bloqueante para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de hemangiomas | |
| ES2952727T3 (es) | Tratamiento de la enfermedad de Alzheimer en una población de pacientes particular | |
| CN106456662A (zh) | 口服给药的戊聚糖多硫酸盐的组合物及其使用方法 | |
| Yabuki et al. | Oral L-citrulline administration improves memory deficits following transient brain ischemia through cerebrovascular protection | |
| US20040209850A1 (en) | Methods of treating pain and compositions for use therefor | |
| JP2014205696A (ja) | 細胞ストレス応答の調節を通したアルツハイマー病および関連障害の処置のための新たな治療アプローチ | |
| Tomić et al. | Clinical uses of nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) and potential benefits of NSAIDs modified-release preparations | |
| EA027524B1 (ru) | Способ ингибирования гиперпроницаемости сосудов при отеке маклы | |
| KR20200014791A (ko) | 육종 치료에 사용하기 위한 티노스타무스틴 | |
| JP5550906B2 (ja) | 嚢胞性疾患の治療のためのプリン誘導体 | |
| KR20190075968A (ko) | 심혈관-관련 질환의 치료를 위한 아펠린의 신규 peg화 리포솜 제제 | |
| US20180353479A1 (en) | Bisamide derivative of dicarboxylic acid as an agent for stimulating tissue regeneration and recovery of diminished tissue function | |
| Jiang et al. | Autophagy: a new mechanism for esketamine as a depression therapeutic | |
| AU2022235569A1 (en) | BYL719 (Alpelisib) for use in the treatment of PIK3CA-Related Overgrowth Spectrum (PROS - CLOVES syndrome) | |
| ES2738248B2 (es) | Uso de inhibidores de la tirosina hidroxilasa para el tratamiento del aneurisma de aorta | |
| WO2009019473A1 (en) | Treatments for inflammatory arthritis | |
| WO2019050429A1 (ru) | Применение производного глутаримида для лечения заболеваний, связанных с аберрантной активностью цитокинов | |
| KR20190090509A (ko) | Trpv4 길항제를 포함하는 척수 손상 예방 또는 치료용 조성물 | |
| AU2014330225B2 (en) | A use of the mixture of a salt and sugar in the manufacture of a medicament employed for treating lax vagina syndrome or colpoxerosis disease in a mammal | |
| Akscyn | Pathophysiology and metabolic dysfunction following polytrauma | |
| GAERTNER | A. Anesthetics | |
| JP2019073449A (ja) | 筋・筋膜性疼痛用の内服治療剤 | |
| Dezfuli | Experimental studies of subdiaphragmatic vagotomy and nicotine for reducing body weight | |
| CA2684171A1 (fr) | Utilisation du 4-cyclopropylmethoxy-n-(3,5-dichloro-1-oxydo-4-pyridin-4-yl)-5-(methoxy)pyridine-2-carboxamide pour le traitement des traumatismes craniens |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BA2A | Patent application published |
Ref document number: 2738248 Country of ref document: ES Kind code of ref document: A1 Effective date: 20200121 |
|
| FG2A | Definitive protection |
Ref document number: 2738248 Country of ref document: ES Kind code of ref document: B2 Effective date: 20230310 |
|
| FD2A | Announcement of lapse in spain |
Effective date: 20240402 |