ES2647913T3 - Solución de preservación mediante perfusión - Google Patents
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Abstract
Una solución de preservación mediante perfusión, solución que comprende: i) agua para inyección; ii) al menos un sacárido; iii) al menos un componente con propiedades tamponantes de pH; iv) al menos un componente con propiedades de bloqueo del transporte de calcio o una actividad anti-acción de calcio; y vi) un inhibidor de tromboxano en la que la solución de preservación mediante perfusión tiene un pH en el intervalo de 6,8-7,0 y el sacárido es sacarosa
Description
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El uso de la solución puede ser en el trasplante, incluidos órganos de donantes de corazón vivo o no vivo, en cirugía que incluye cualquier situación de isquemia cálida o fría, cardioplejia o cirugía a corazón abierto, preservación de miembros enteros o del cuerpo entero, en experimentación en tejidos vivos, en el cultivo y la preservación de células, tejidos y órganos manipulados y similares. Preferentemente, la solución se usa como solución de perfusión puesta en contacto con células, tejidos vivos, órganos, extremidades o todo el cuerpo a través del sistema vascular, y opcionalmente sirve además como solución de preservación para el almacenamiento de células, tejidos y órganos perfundidos. En una realización de la invención, se usa una primera solución como se ha definido anteriormente para lavar las células, el tejido, el órgano, la extremidad o el cuerpo y se usa una segunda solución para su preservación, o parte de la misma. Por ejemplo, la solución de perfusión comprende componentes (i)-(iv) como se define anteriormente y la solución de preservación comprende componentes adicionales para el funcionamiento continuo o la prevención del daño de ciertas funciones celulares u orgánicas específicas de la célula, tejido u órgano en cuestión.
En un aspecto adicional de la invención, se proporciona un método para perfundir, preservar o preservar mediante perfusión de células, en particular células vivas, tejidos u órganos, por lo que las células, tejidos u órganos se ponen en contacto con una solución como se ha definido anteriormente. El método puede ser para el almacenamiento hipotérmico simple, mediante el cual las células, el tejido u órgano se perfunden con solución, se extraen de su lugar normal, se enfrían preferentemente a temperaturas normalmente en el intervalo entre cero y 4 °C y se almacenan. Hemos descubierto que las células, los tejidos u órganos pueden almacenarse durante periodos prolongados superiores a los que se practican en la actualidad, por ejemplo, el corazón se ha almacenado durante periodos del orden de 6 a 12 horas y los riñones y el hígado durante periodos del orden de 48 horas o más. Adicional o alternativamente, el método sirve para la preservación de células, particularmente de tejidos u órganos, mediante lo cual las células, los tejidos u órganos se han perfundido y llevado a un estado hipotérmico y se ponen en contacto con la solución de preservación por inmersión o perfusión.
Preferentemente, el método de la invención comprende administrar a las células, tejidos, órganos o a un paciente una cantidad biológicamente eficaz de la solución de la invención, a una velocidad efectiva o a una concentración efectiva para mantener o mejorar su función. Preferentemente, el método es un método para preservar ciertas funciones celulares, tisulares u orgánicas, por ejemplo el metabolismo celular, y/o para detener temporalmente ciertas funciones, por ejemplo la actividad muscular, la degradación o la excreción de componentes celulares esenciales y similares, y/o productos de excreción, por ejemplo, en forma de bilis u orina y similares.
La isquemia es la situación que resulta de la detención del flujo de sangre a través de un órgano. Los efectos se deben a la falta de oxígeno y nutrientes, y a la acumulación de dióxido de carbono y otros productos de desecho. Es más dañino a la temperatura del cuerpo que en frío, razón por la cual los órganos de trasplante se perfunden y se enfrían. Los donantes de órganos con frecuencia han sufrido traumatismo y, por lo tanto, el órgano donante se ha visto sometido a un periodo de isquemia caliente como resultado del traumatismo. Añadiendo experimentalmente un periodo de isquemia cálida antes de la perfusión se hace frente a esta situación. Es una ventaja que nuestra solución brinde protección frente a esta isquemia cálida.
Preferentemente, la purga de perfusión se lleva a cabo a una presión de hasta 300 mmHg, más preferentemente en el intervalo de presión atmosférica a 200 mmHg, más preferentemente en el intervalo de hasta 160 mmHg, más preferentemente hasta 100 mmHg, lo más preferentemente hasta 50 mmHg.
En un aspecto adicional de la invención, se proporciona un kit de partes que comprende una solución de preservación mediante perfusión que tiene los componentes (i)-(iv) como se ha definido anteriormente en el presente documento, junto con componentes individuales seleccionados entre uno o más de (v)-(xvii) como se ha definido anteriormente, para su uso en la preparación de una o más soluciones de perfusión para fines específicos, y sirve como solución universal de perfusión, preservación o preservación mediante perfusión.
La invención se ilustra ahora de forma no limitante con referencia a los ejemplos.
Ejemplo 1
Soluciones de preservación mediante perfusión usadas en la invención y como comparación
Las soluciones de preservación implicadas en este estudio se muestran en las Tablas 1 2 y 3, las cantidades se dan en mmol/l. Las SOLS se obtuvieron a partir de un matraz medio lleno de agua, al cual se le añadió en secuencia uno
o todos de lactobionato, KOH, fosfato de sodio, glutamina, sacarosa, aspirina, alopurinol y nicardipina, y se disolvieron. Luego se añadió el coloide (PEG) y la solución casi completó el volumen. Se añadió NaOH para ajustar el pH. La solución se completó hasta el volumen. Todas las soluciones se esterilizaron por filtración y se almacenaron en botellas de vidrio a 4 °C y se usaron en los 3 días siguientes desde su preparación. Se añadió glutatión reducido durante la preparación o inmediatamente antes de su uso.
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