ES2633618T3 - Formulaciones farmacéuticas de nitrito y sus usos - Google Patents

Abstract

Una composición farmacéutica de liberación sostenida que comprende de aproximadamente 40 mg a aproximadamente 100 mg de nitrito inorgánico, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmacéuticamente aceptable, en el que la administración de dicha composición farmacéutica a un sujeto humano proporciona una liberación gradual de dicho nitrito inorgánico, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo durante 6 - 12 horas y da como resultado una concentración en plasma de iones de nitrito que se mantiene entre 0,05 mM y 10 mM durante hasta 14 horas y en el que dicha composición farmacéutica se formula para administración oral administración.

Description

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DESCRIPCION

Formulaciones farmaceuticas de nitrito y sus usos Campo de la Invencion

La presente invencion se refiere a composiciones farmaceuticas de nitritos y ya dichas composiciones para uso en un metodo para tratar o prevenir la isquemia cronica de tejidos en un sujeto humano o para suplementar deficiencias en nitrito circulante hallado en un sujeto humano.

La isquemia cronica de tejidos, es decir, la restriccion persistente del suministro de sangre a un tejido, puede perjudicar la funcion del tejido y provocar danos en tejidos y organos, contribuyendo asf significativamente a la morbimortalidad humana. La isquemia cronica del tejido puede provenir de cualquiera de una amplia gama de condiciones medicas que dan como resultado la restriccion persistente o recurrente del suministro de sangre al tejido, por ejemplo, trastornos tales como enfermedad arterial periferica, diabetes tipo 1 o tipo 2, enfermedad cardiovascular aterosclerotica, claudicacion intermitente, enfermedad isquemica de miembro crftico, apoplejfa, infarto de miocardio, enfermedad inflamatoria intestinal y neuropatfa periferica; lesiones traumaticas tales como heridas, quemaduras, laceraciones, contusiones, fracturas oseas, infecciones o procedimientos quirurgicos; malformaciones congenitas como hernias, defectos cardfacos y defectos gastrointestinales.

Asf, la isquemia cronica del tejido puede ocurrir en una variedad de tipos de tejido incluyendo, por ejemplo, musculo esqueletico, musculo liso, musculo cardiaco, tejido neuronal, piel, tejido mesenquimal, tejido conectivo, tejido gastrointestinal y hueso. En consecuencia, existe una necesidad continua de estrategias terapeuticas que restauren el suministro de sangre a las regiones afectadas.

El documento WO 94/01103 describe la administracion continua de un nitrito organico a un paciente en una forma de dosificacion, para uso en un metodo de terapia vasodilatadora durante un perfodo de al menos 24 horas sin desarrollo de tolerancia en el paciente, en donde dicho nitrito puede administrate por una ruta seleccionada entre sublinguales, orales y bucales, y en la que dicha forma de dosificacion puede ser un comprimido o una capsula.

El documento US 5 994 444 describe un material polimerico biocompatible capaz de liberar oxido nftrico en un sitio deseado in vivo o ex vivo y dispositivos medicos que lo comprenden.

Combet E. et al., Bioqufmica Comparada y Fisiologfa, Parte A Fisiologia Molecular y Integrante, vol. 146, no. 4 (2007) pagina S61 describe una investigacion sobre el efecto de los lfpidos sobre la formacion de compuestos N-nitroso a parti r de nitrito en un modelo del estomago humano.

Y. Grosse et al., Lancet Oncology, vol. 7, no. 8, (2006) pages 628-629 describe una revision de la carcinogenicidad potencial de nitratos y nitritos en seres humanos.

El documento US 2009/196930 describe composiciones de formulacion de compuesto de nitrito farmaceuticamente aceptables para administracion pulmonar que comprenden una solucion acuosa de compuesto de nitrito y dichas composiciones para uso en metodos de tratamiento de hipertension arterial pulmonar o lesion de reperfusion isquemica.

El documento US 2007/154569 describe un metodo para tratar o mejorar lesiones hepaticas o cardiacas o de isquemia-reperfusion cerebral; hipertension pulmonar; o vasoespasmo de la arteria cerebral en un sujeto, disminuyendo la presion sangufnea y/o aumentando la vasodilatacion en el sujeto administrando nitrito sodico no acidificado al sujeto.

El documento WO 2008/105731 describe un metodo para disminuir la tasa metabolica en un mamffero mediante la administracion de una composicion farmaceutica que comprende nitrito inorganico y/o nitrato en una cantidad que es suficiente para disminuir el consumo de oxfgeno.

Kumar et al. Proc Natl Acad Sci USA vol. 105, no. 21 (2008) paginas 7540-7545 describe la eficacia reducida de dosis altas de nitrito de ~ 3 mg/kg en el aumento de la densidad vascular del tejido isquemico en comparacion con las dosificaciones inferiores, por ejemplo 165 mg/kg.

Resumen de la Invencion

La presente invencion se expone en las reivindicaciones adjuntas. En particular, la invencion se refiere a una composicion farmaceutica de liberacion sostenida que comprende de aproximadamente 40 mg a aproximadamente 100 mg de nitrito inorganico, o una sal o solvato farmaceuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmaceuticamente aceptable, en el que la administracion de dicha composicion farmaceutica a un sujeto

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humano proporciona la liberacion gradual de dicho nitrito inorganico o una sal o solvato farmaceuticamente aceptable del mismo durante 6-12 horas y da como resultado una concentracion en plasma de ion nitrito que se mantiene entre 0,05 mM y 10 mM durante hasta 14 horas y en el que dicha composicion farmaceutica se formula para administracion oral. La presente invencion se dirige tambien a dichas composiciones para su uso en un metodo para tratar o prevenir la isquemia cronica de tejidos en un sujeto humano, o para suplementar deficits en nitrito circulante hallado en un sujeto humano.

En general, en un primer aspecto, la descripcion presenta una composicion farmaceutica que incluye una cantidad eficaz de nitrito inorganico, o una sal, solvato o profarmaco farmaceuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmaceuticamente aceptable. Deseablemente, la administracion de la composicion farmaceutica a un humano da como resultado una concentracion en plasma de iones nitrito que se mantiene entre 0,05 mM y 10 mM (por ejemplo, entre 0,1 mM y 10 mM, 0,5 mM y 5 mM, 0,1 mM y 3 mM, o 0,1 mM y 1 mM) durante un maximo de 14 horas.

En otras realizaciones, el nitrito inorganico se administra a una dosis que esta entre 0,1 mg-10 mg/kg de peso del ser humano (por ejemplo, entre 1 mg-5 mg/kg, 0,05-10 mg/kg, 0,1-5 mg/kg, 0,5-5 mg / kg, 0,5-3 mg/kg, 0,11,5 mg/kg, 0,1-0,35 mg/kg, 0,35-0,75 mg/kg o 0,75-1 mg/kg). En aun otras realizaciones, la dosis es 0,25 mg/kg, 0,5 mg/kg o 1 mg/kg.

En ciertas realizaciones, la composicion farmaceutica incluye 0,5-5,0 mmol (por ejemplo, 1,0-4,0 mmol) de ion nitrato NaNCL.

En otras realizaciones, el ion nitrito se proporciona como NaNO2, KNO2, o nitrito de arginina. En ciertas realizaciones, el ion nitrito se proporciona como NaNO2.

En aun otras realizaciones, la composicion farmaceutica se formula para administracion oral. En otras realizaciones, la composicion farmaceutica es un comprimido o capsula.

En otras realizaciones, la composicion farmaceutica incluye un excipiente que es un agente alcanizante, un deslizante, un lubricante, un agente de carga, un polfmero que comprende celulosa, o polietilenglicol, o cualquier combinacion de los mismos. En otras realizaciones, la composicion farmaceutica incluye un excipiente farmaceuticamente aceptable (por ejemplo, un polfmero sensible al pH o un polfmero biodegradable) para la liberacion retardada del nitrito inorganico, de manera que, cuando se administra oralmente a un sujeto humano, el nitrito inorganico no es sustancialmente liberado en el estomago del sujeto.

En otras realizaciones, un recubrimiento enterico incluye el excipiente farmaceuticamente aceptable para la liberacion retardada del nitrito inorganico. En ciertas realizaciones, el excipiente farmaceuticamente aceptable es etilcelulosa, acetato de celulosa, acetato butirato de celulosa, triacetato de celulosa, acetato ftalato de celulosa (CAP), trimelitato de celulosa, acetato succinato de hidroxipropilmetilcelulosa o Eudragit® L o S. En otras realizaciones, la composicion farmaceutica Incluye ademas polietilenglicol y/o un plastificante.

En algunas realizaciones, la composicion farmaceutica es una forma de dosificacion multiparticulada. En ciertas realizaciones, la forma de dosificacion multiparticulada incluye bolitas o granulos. En otras realizaciones, las bolitas o granulos se recubren con una capa de recubrimiento que incluye un polfmero biodegradable (por ejemplo, un polisacarido tal como alginato, pectina, carragenano, quitosano, dextrano, goma laca o goma de xantano, o cualquier mezcla de los mismos).

En un segundo aspecto, la descripcion se refiere a una composicion farmaceutica formulada para administracion oral que incluye una cantidad eficaz de nitrito inorganico, o una sal, solvato o profarmaco farmaceuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmaceuticamente aceptable para la liberacion retardada del nitrito inorganico, de manera que, cuando se administra oralmente a un sujeto humano, el nitrito inorganico no se libera sustancialmente en el estomago del sujeto. En ciertas realizaciones, la composicion farmaceutica es un comprimido o capsula.

En un tercer aspecto, la descripcion presenta una composicion farmaceutica adecuada para administracion oral que comprende: (a) una cantidad eficaz de nitrito inorganico, o una sal, solvato o profarmaco farmaceuticamente aceptable de los mismos; y (b) una capa de recubrimiento enterico. Deseablemente, la composicion farmaceutica se formula de manera que, cuando se administra a un sujeto humano, el nitrito inorganico no se libera sustancialmente en el estomago del sujeto.

En ciertas realizaciones, la administracion de la composicion farmaceutica a un humano da como resultado una concentracion en plasma que se mantiene entre 0,05 mM y 10 mM (por ejemplo, entre 0,1 mM y 10 mM, 0,5 mM y 5 mM, 0,1 mM y 3 mM, o 0,1 MM y 1 mM).

En otras realizaciones, el nitrito inorganico se administra a una dosis que esta entre 0,1 mg-10 mg/kg de

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peso del ser humano (por ejemplo, entre 1 mg-5 mg/kg, 0,05 - 10 mg / kg, 0,1-5 mg/Kg, 0,5-5 mg/kg, 0,5-3 mg/kg, 0,1-1,5 mg/kg, 0,1-0,35 mg/kg, 0,35-0,75 mg/kg o 0,75-1 mg/kg). En otras realizaciones, la dosis es de 0,25 mg/kg, 0,5 mg/kg o 1 mg/kg.

En aun otras realizaciones, la composicion farmaceutica incluye 0,5-5,0 mmol (por ejemplo, 1,0-4,0 mmol) de ion nitrito (NO2').

En ciertas realizaciones, el ion nitrito se proporciona como NaNO2, KNO2 o nitrito de arginina. En otras realizaciones, el ion nitrito se proporciona como NaNO2.

En otras realizaciones, la capa de revestimiento enterico incluye un excipiente farmaceuticamente aceptable es un polfmero sensible al pH o un polfmero biodegradable.

En aun otras realizaciones, la composicion farmaceutica es un comprimido o capsula.

En cualquiera de los aspectos anteriores, la concentracion plasmatica de ion nitrito se mantiene durante un periodo de hasta 14 horas (por ejemplo, 4-14 horas, 6-12 horas, o 6-10 horas). Los perfodos de concentracion plasmatica mantenida pueden ocurrir, por ejemplo, durante y/o despues del momento de concentracion plasmatica maxima. En algunas realizaciones, 30-50% del ion nitrito se libera en la primera hora y el resto del ion nitrato se libera en las 2-14 horas siguientes.

En otro aspecto, la descripcion presenta un metodo para tratar o prevenir la isquemia cronica del tejido en un ser humano. Deseablemente, el metodo incluye la administracion de cualquiera de las composiciones farmaceuticas descritas en la presente invencion a un ser humano. En ciertas realizaciones, la administracion es oral.

En otro aspecto mas, la descripcion presenta un metodo para complementar deficits en nitrito circulante hallado en un paciente, en el que dicho metodo comprende la administracion de cualquiera de las composiciones farmaceuticas descritas en la presente invencion a un ser humano.

La presente invencion se refiere a composiciones farmaceuticas de nitrito (por ejemplo, nitrito inorganico) y dichas posiciones para uso en el tratamiento de la isquemia cronica del tejido, incluyendo isquemia de tejido cronica asociada con un trastorno, trauma o defecto congenito.

Tal como se usa en la presente memoria, el termino "liberacion retardada" se refiere a una preparacion farmaceutica, por ejemplo, una formulacion administrada oralmente, que pasa a traves del estomago sustancialmente intacto y se disuelve en el intestino delgado y/o grande (por ejemplo, el colon). En algunas realizaciones, la liberacion retardada del agente activo (por ejemplo, nitrito como se describe aquf) resulta del uso de un recubrimiento enterico de un medicamento oral (por ejemplo, una forma de dosificacion oral).

El termino una "cantidad eficaz" de un agente, tal como se utiliza aquf, es esa cantidad suficiente para producir resultados beneficiosos o deseados, tales como resultados clfnicos y, como tal, una "cantidad efectiva" depende del contexto en el que se esta aplicado.

Los terminos "liberacion prolongada" o "liberacion sostenida" se refieren indistintamente a una formulacion de farmaco que proporciona la liberacion gradual de un farmaco durante un periodo de tiempo prolongado, por ejemplo, 6-12 horas o mas, en comparacion con una formulacion de liberacion inmediata de la misma droga. Preferiblemente, aunque no necesariamente, los resultados en niveles de sangre sustancialmente constantes de un farmaco durante un periodo de tiempo prolongado que estan dentro de los niveles terapeuticos y caen dentro de un rango de concentracion plasmatica maxima que esta entre, por ejemplo, 0,05-10 mM, 0,1-10 mM, 0,1-5,0 mM, o 0,11 mM.

Tal como se usa en la presente memoria, los terminos "formulado para liberacion enterica" y "formulacion enterica" se refieren a composiciones farmaceuticas, por ejemplo, formas de dosificacion oral, para administracion oral, capaces de proporcionar proteccion contra la disolucion en el entorno de acido alto (bajo pH) del estomago. Las formulaciones entericas se pueden obtener, por ejemplo, incorporando en la composicion farmaceutica un polfmero resistente a la disolucion en jugos gastricos. En algunas realizaciones, los polfmeros tienen un pH optimo para la disolucion en el intervalo de aprox. 5,0 a 7,0 ("polfmeros sensibles al pH").

Ejemplos de polfmeros incluyen copolfmeros de acido metacrilato que son conocidos por el nombre comercial Eudragit® (por ejemplo, Eudragit® L100, Eudragit® S100, Eudragit® L-30D, Eudragit® FS 30D y Eudragit® L100-55), acetato ftalato de celulosa, celulosa Acetato de trimetilo, acetato de ftalato de polivinilo (por ejemplo, Coateric®), ftalato de hidroxietilcelulosa, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa o goma laca, o una dispersion acuosa de los mismos. Las dispersiones acuosas de estos polfmeros incluyen dispersiones de acetato ftalato de celulosa (Aquateric®) o goma laca (por ejemplo, MarCoat 125 y 125N). Una formulacion enterica reduce el

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porcentaje de la dosis administrada liberada al estomago en al menos 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% o incluso 98% en comparacion con una formulacion de liberacion inmediata. Cuando dicho polfmero recubre un comprimido o capsula, esta capa es tambien denominado "revestimiento enterico".

El termino "composicion farmaceutica", tal como se usa en el presente documento, representa una composicion que contiene un compuesto descrito aqrn (por ejemplo, nitrito inorganico, o cualquier sal farmaceuticamente aceptable, solvato o profarmaco del mismo), formulado con un excipiente farmaceuticamente aceptable y tfpicamente fabricado o vendido con la aprobacion de un organismo regulador gubernamental como parte de un regimen terapeutico para el tratamiento de la enfermedad en un mairnfero. Las composiciones farmaceuticas pueden formularse, por ejemplo, para la administracion oral en forma de dosificacion unitaria (por ejemplo, un comprimido, capsula, gelcap o jarabe); para administracion topica (por ejemplo, como crema, gel, locion o unguento); para administracion intravenosa (por ejemplo, como una solucion esteril libre de embolos en partfculas y en un sistema disolvente adecuado para uso intravenoso); o en cualquier otra formulacion descrita en la presente memoria.

Un "excipiente farmaceuticamente aceptable", tal como se utiliza en la presente memoria, se refiere a cualquier ingrediente distinto de los compuestos descritos aqrn (por ejemplo, un vefnculo capaz de suspender o disolver el compuesto activo) y que tiene las propiedades de no ser toxico y no inflamatorio en un paciente. Los excipientes pueden incluir, por ejemplo: antiadherentes, antioxidantes, aglutinantes, recubrimientos, auxiliares de compresion, desintegrantes, colorantes, emolientes, emulsionantes, cargas (diluyentes), formadores de pelfcula o revestimientos, aromatizantes, fragancias, deslizantes (mejoradores de flujo), lubricantes, conservantes, tintas de impresion, sorbentes, agentes suspensores o dispersantes, edulcorantes o aguas de hidratacion.

Ejemplos de excipientes incluyen, pero no se limitan a: hidroxitolueno butilado (BHT), carbonato calcico, fosfato calcico (dibasico), estearato calcico, croscarmelosa, polivinilpirrolidona reticulada, acido citrico, crospovidona, cistema, etilcelulosa, gelatina, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, lactosa, estearato de magnesio, maltitol, maltosa, manitol, metionina, metilcelulosa, metilparabeno, celulosa microcristalina, polietilenglicol, polivinilpirrolidona, povidona, almidon pregelatinizado, propilparabeno, palmitato de retinilo, goma laca, dioxido de silicio, carboximetilcelulosa sodica, citrato de sodio, glicolato de almidon sodico, sorbitol, almidon (mafz), acido estearico, acido estearico, sacarosa, talco, dioxido de titanio, vitamina A vitamina E, vitamina C y xilitol.

El termino "profarmacos farmaceuticamente aceptables", tal como se usa en el presente documento, representa los profarmacos de los compuestos de la presente descripcion que son, dentro del alcance de un juicio medico acertado, adecuados para su uso en contacto con tejidos de seres humanos y animales con toxicidad, y la respuesta alergica, proporcional a una relacion beneficio/riesgo razonable, y eficaz para el uso previsto, asf como las formas zwitterionicas, cuando sea posible, de los compuestos de la descripcion.

El termino "sal farmaceuticamente aceptable", tal como se usa en la presente memoria descriptive, representa aquellas sales que son, dentro del alcance de un criterio medico acertado, adecuadas para su uso en contacto con tejidos humanos y animales sin toxicidad, irritacion y respuesta alergica indebidas y son proporcionales con una relacion beneficio/riesgo razonable. Las sales farmaceuticamente aceptables son bien conocidas en la tecnica. Por ejemplo, las sales farmaceuticamente aceptables se describen en: Berge et al., J. Pharmaceutical Sciences 66: 1-19, 1977 y en Sales Farmaceuticas: Propiedades, Seleccion y Uso (Eds. PH Stahl y CG Wermuth), Wiley-VCH, 2008. Las sales se pueden preparar in situ durante el aislamiento y purificacion final de los compuestos de la invencion o por separado haciendo reaccionar el grupo de base libre con un acido organico o inorganico adecuado.

Las sales de adicion de acido representativas incluyen acetato, adipato, alginato, ascorbato, aspartato, bencenosulfonato, benzoato, bisulfato, borato, butirato, canforato, canforsulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanosulfonato, fumarato, glucoheptonato, glicerofosfato, hemisulfato, heptonato, hexanoato , Hidrobromuro, hidrocloruro, hidroyoduro, 2 - hidroxi - etanosulfonato, lactobionato, lactato, laurato, laurilsulfato, malato, maleato, malonato, metanosulfonato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, toluenosulfonato, undecanoato y valerato sales. Las sales representativas de metales alcalinos o alcalinoterreos incluyen sodio, litio, potasio, calcio y magnesio, asf como cationes no toxicos de amonio, amonio cuaternario y amina, incluyendo, pero sin limitacion, amonio, tetrametilamonio, tetraetilamonio, metilamina, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina y etilamina.

Los terminos "solvato farmaceuticamente aceptable" o "solvato", como se usa en la presente memoria, significa un compuesto de la invencion en el que se incorporan moleculas de un disolvente adecuado en la red cristalina. Un disolvente adecuado es fisiologicamente tolerable a la dosis administrada. Por ejemplo, los solvatos pueden prepararse por cristalizacion, recristalizacion o precipitacion a partir de una solucion que incluye disolventes organicos, agua o una mezcla de los mismos. Ejemplos de disolventes adecuados son etanol, agua (por ejemplo mono-, di- y trihidratos), N-metilpirrolidinona (NmP), dimetilsulfoxido (DMSO), N, N'- dimetilformamida (DMF), N, N - dimetilacetamida (DMAC), 1,3 - dimetil - 2 - imidazolidinona (DMEU), 1,3 - dimetil - 3,4,5,6 - tetrahidro - 2- (1H) -

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pirimidinona (DMPU), acetonitrilo (ACN), propilenglicol, acetato de etilo, alcohol bencflico, 2 - pirrolidona y benzoato de bencilo. Cuando el agua es el disolvente, el solvato se denomina "hidrato".

El termino "prevenir", como se usa en este documento, se refiere a un tratamiento o tratamiento profilactico que evita uno o mas sfntomas o condiciones de una enfermedad, trastorno o afecciones descritas en la presente memoria (por ejemplo, isquemia cronica del tejido). El tratamiento puede iniciarse, por ejemplo, antes ("profilaxis previa a la exposicion") o despues ("profilaxis postexposicion"), un evento que precede al inicio de la enfermedad, trastorno o condiciones. El tratamiento que incluye la administracion de un compuesto de la invencion, o una composicion farmaceutica del mismo, puede ser agudo, de corto plazo o cronico. Las dosis administradas pueden variar durante el curso del tratamiento preventivo.

El termino profarmaco, tal como se utiliza en la presente memoria, representa compuestos que se transforman rapidamente in vivo en el compuesto precursor de la formula anterior. Los profarmacos tambien abarcan compuestos bioequivalentes que, cuando se administran a un ser humano, conducen a la formacion in vivo de ion nitrito (NO2-) o oxido nitroso (NO). En T. Higuchi y V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, vol. 14 de la AC.S. , Y Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, Asociacion Farmaceutica Americana y Pergamon Press, 1987. Preferiblemente, los profarmacos de los compuestos de la presente descripcion son farmaceuticamente aceptables tales como los descritos en EP 1336602A1.

Tal como se usa en el presente documento, y como se entiende bien en la tecnica, el "tratamiento" es un enfoque para obtener resultados beneficiosos o deseados, tales como resultados clfnicos. Los resultados beneficiosos o deseados pueden incluir, pero no se limitan a, el alivio o mejora de uno o mas sfntomas o condiciones; disminucion de la extension de la enfermedad, trastorno o condicion; estado estabilizado (es decir, que no empeora) de enfermedad, trastorno o condicion; prevenir la propagacion de enfermedades, trastornos o condiciones; retardar o acortar el progreso de la enfermedad, trastorno o condicion; mejorfa o paliacion de la enfermedad, trastorno o condicion; y la remision (ya sea parcial o total), ya sea detectable o indetectable. "Tratamiento" tambien puede significar prolongar la supervivencia en comparacion con la supervivencia esperada si no se recibe tratamiento. Como se usa en este documento, los terminos "tratar" y "tratamiento" tambien pueden referirse a retrasar la aparicion, retardar o revertir el progreso de, o aliviar la enfermedad o condicion a la que se aplica el termino, o uno o mas sfntomas de dicha enfermedad o condicion.

El termino "formas de dosificacion unitarias" se refiere a unidades ffsicamente discretas adecuadas como dosis unitarias para sujetos humanos y otros mamfferos, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de material activo calculada para producir el efecto terapeutico deseado, en asociacion con cualquier excipiente o excipiente farmaceutico adecuado.

Tal como se utiliza en la presente memoria, el termino "concentracion en plasma" se refiere a la cantidad de ion nitrito presente en el plasma de un sujeto tratado (por ejemplo, medida en un conejo usando un ensayo descrito a continuacion o en un ser humano).

Otras caracterfsticas y ventajas de la invencion seran evidentes a partir de la siguiente descripcion detallada, los dibujos y las reivindicaciones

Breve Descripcion de los Dibujos

Las Figuras 1-10 muestran los resultados de las simulaciones de los niveles plasmaticos de nitrito de la formulacion de liberacion controlada 1 (Figura 1), la formulacion 2 (Figura 2), la formulacion 5 (Figura 3), la formulacion 9 (Figura 4), la formulacion 9C , la formulacion 10C (Figura 6), la formulacion 12 (Figura 7), la formulacion 12C (Figura 8) y la formulacion 13 (Figura 9), asf como de una formulacion de liberacion inmediata de control (Figura 10).

La Figura 11 muestra el perfil de liberacion de NOx total para las formulaciones 100A 200A y 300A en conejos.

La Figura 12 muestra el perfil de liberacion de nitrato, nitrosotiol, nitrosoheme y nitrosaminas para las f ormulaciones 100A 200A y 300A en conejos.

La Figura 13 muestra el perfil de liberacion de nitrito libre para las formulaciones 100A 200A y 300A en conejos.

Descripcion Detallada

La invencion presenta composiciones fisiologicamente aceptables de nitrito, tales como nitrito inorganico, y dichas composiciones para su uso en metodos mediante los cuales las composiciones se pueden administrar a un paciente diagnosticado como que tiene, por ejemplo, un trastorno isquemico cronico del tejido.

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Nitrito

Nitrito inorganico

Las composiciones farmaceuticamente aceptables de la invencion incluyen nitrito inorganico, por ejemplo, una sal o ester de acido nitroso (HNO2), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. Las sales de nitrito pueden incluir, sin limitacion, sales de metales alcalinos, por ejemplo sodio, potasio; sales de metales alcalinoterreos, por ejemplo, calcio, magnesio y bario; y sales de bases organicas, por ejemplo, bases de amina y bases inorganicas. Los compuestos de la invencion tambien incluyen todos los isotopos de atomos que se producen en los compuestos intermedios o finales. Los isotopos incluyen aquellos atomos que tienen el mismo numero atomico pero diferentes numeros de masa. Por ejemplo, los isotopos de hidrogeno incluyen tritio y deuterio. El termino "compuesto", tal como se usa en este documento con respecto a cualquier nitrito inorganico o sal, solvato o profarmaco farmaceuticamente aceptable de los mismos. Todos los compuestos, y sus sales farmaceuticamente aceptables, tambien se entiende que incluyen formas solvatadas (por ejemplo, hidratadas). El nitrito tiene la formula qufmica NO2" y puede existir como un ion en agua. El nitrito de sodio tiene la formula qufmica NaNO2 y se disuelve tfpicamente en agua para formar el ion sodio Na+ y el ion nitrito NO2". Se entendera ademas que la presents invencion abarca todas estas formas solvatadas (por ejemplo, hidratos) de los compuestos de nitrito. Ejemplos de compuestos de nitrito se describen en el documento WO 2008/105730.

Ademas del nitrito de sodio, los compuestos de nitrito inorganico representativos incluyen nitrito de amonio (NH4NO2) nitrito de bario (Ba(NO2)2; por ejemplo, nitrito de bario anhidro o monohidrato de nitrito de bario), nitrito de calcio (Ca2NO2), por ejemplo calcio anhidro Nitrito de cobalto (II), cobalto (III) nitrito de potasio (CoK3(NO2)6; por ejemplo, sesquihidrato de nitrito de potasio de cobalto (III)), nitrito de calcio Nitrito de litio (LiNO2, por ejemplo, nitrito de litio anhidro o monohidrato de nitrito de litio), nitrito de magnesio (MgNO2, por ejemplo nitrito de magnesio trihidratado), nitrito de potasio (KNO2), nitrito de rubidio (RbNO2), nitrito de plata (Sr(NO2)2), y nitrito de cinc (Zn(NOs)2).

Los compuestos de la presente invencion se pueden preparar de diversas maneras conocidas por un experto en la tecnica de sfntesis qufmica. Los metodos para preparar sales de nitrito son bien conocidos en la tecnica y una amplia gama de precursores y sales de nitrito estan facilmente disponibles comercialmente. Los nitrites de los metales alcalinos y alcalinoterreos se pueden sintetizar haciendo reaccionar una mezcla de monoxdo de nitrogeno (NO) y dioxido de nitrogeno (NO2) con una solucion de hidroxido metalico correspondiente,

Asf como a traves de la descomposicion termica del nitrato correspondiente. Otros nitritos estan disponibles a traves de la reduccion de los nitratos correspondientes.

Los presentes compuestos se pueden preparar a partir de materiales de partida facilmente disponibles utilizando los metodos y procedimientos conocidos en la tecnica. Se apreciara que cuando se dan las condiciones de proceso tfpicas o preferidas (es decir, temperaturas de reaccion, tiempos, relaciones molares de reactivos, disolventes, presiones, etc.), pueden usarse otras condiciones del proceso a menos que se indique lo contrario. Las condiciones de reaccion optimas pueden variar con los reactivos o disolventes particulares utilizados, pero tales condiciones pueden ser determinadas por un experto en la tecnica mediante procedimientos de optimizacion de rutina.

Las sales farmaceuticamente aceptables adecuadas incluyen, por ejemplo, nitrito de sodio, nitrito de potasio o nitrito de calcio. Aun otras sales ejemplares se encuentran en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17a ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, pag. 1418, Berge et al., J. Pharmaceutical Sciences 66: 1-19, 1977 y Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, (Eds P.H. Stahl y C.G. Wermuth), Wiley-VCH, 2008.

Composiciones Farmaceuticas

Las composiciones farmaceuticamente aceptables de la invencion incluyen nitrito inorganico, por ejemplo, una sal de acido nitroso (HNO2) tal como NaNO2, o una sal, o solvato farmaceuticamente aceptable del mismo. Cuando se emplean como farmacos, cualquiera de los presentes compuestos se puede administrar en forma de composiciones farmaceuticas. Estas composiciones se pueden preparar de una manera bien conocida en la tecnica farmaceutica, y pueden administrate por una variedad de vfas, dependiendo de si se desea un tratamiento local o sistemico y sobre el area a tratar. La administracion puede ser topica, parenteral, intravenosa, intra-arterial, subcutanea, intramuscular, intracraneal, intraorbitaria, oftalmica, intraventricular, intracapsular, intraespinal, intracisternal, intraperitoneal, intranasal, aerosol, por supositorios o administracion oral.

Esta invencion tambien incluye composiciones farmaceuticas que pueden contener uno o mas vehfculos farmaceuticamente aceptables. Al preparar las composiciones farmaceuticas de la invencion, el ingrediente activo se mezcla tfpicamente con un excipiente, se diluye con un excipiente o se encierra dentro de dicho vehfculo en forma de, por ejemplo, una capsula, una bolsita, un papel u otro recipiente. Cuando el excipiente sirve como diluyente, puede ser un material solido, semisolido o lfquido (por ejemplo, solucion salina normal), que actua como vehfculo,

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vehfculo o medio para el ingrediente activo. Por lo tanto, las composiciones pueden estar en forma de tabletas, polvos, pastillas, bolsitas, sellos, elixires, suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes y capsulas de gelatina blanda y dura. Como se conoce en la tecnica, el tipo de diluyente puede variar dependiendo de la ruta de administracion deseada. Las composiciones resultantes pueden incluir agentes adicionales, tales como conservantes.

Los agentes terapeuticos de la invencion se pueden administrar solos, o en una mezcla, en presencia de un excipiente o vehfculo farmaceuticamente aceptable. El excipiente o portador se selecciona en base al modo y via de administracion. Los vehfculos farmaceuticos adecuados, asf como las necesidades farmaceuticas para uso en formulaciones farmaceuticas, se describen en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21a Ed., Gennaro, Ed., Lippencott Williams & Wilkins (2005), un conocido texto de referencia en este campo, y en la USP/NF (Farmacopea de los Estados Unidos y el Formulario Nacional). En la preparacion de una formulacion, el compuesto activo se puede moler para proporcionar el tamano de partfcula apropiado antes de combinar con los otros ingredientes. Si el compuesto activo es sustancialmente insoluble, puede ser molido hasta un tamano de partfcula de menos de 200 mallas. Si el compuesto activo es sustancialmente soluble en agua, el tamano de partfcula puede ajustarse por molienda para proporcionar una distribucion sustancialmente uniforme en la formulacion, por ejemplo aproximadamente 40 mallas.

Ejemplos de excipientes adecuados son lactosa, dextrosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidones, goma de acacia, fosfato de calcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato calcico, celulosa microcristalina, poli vi nilpi rrol idona, celulosa, agua, jarabe y metilcelulosa. Las formulaciones pueden incluir adicionalmente: agentes lubricantes tales como talco, estearato de magnesio y aceite mineral; agentes humectantes; agentes emulsionantes y de suspension; agentes conservantes tales como hidroxibenzoatos de metilo y propilo; Agentes edulcorantes; y agentes aromatizantes. Otros excipientes ejemplares se describen en Hand-book of Pharmaceutical Excipients, 6a edicion, Rowe et al., Eds., Pharmaceutical Press (2009).

La composicion farmaceutica puede incluir sales de nitrato, o profarmacos de las mismas, u otros agentes terapeuticos. Ejemplos de sales de nitrato se describen en el documento WO 2008/105730. Los agentes terapeuticos ejemplares que pueden incluirse en las composiciones descritas aquf son agentes terapeuticos cardiovasculares (por ejemplo, antitromboticos (por ejemplo, dipiridamol y clopidogrel), antihipertensivos (por ejemplo, bloqueadores de canales de Ca++, bloqueadores de AT-2 e inhibidores de ACE) , Anti-colesteroles (por ejemplo, estatinas y fibratos), y terapeuticos de tiazolidindiona.

Las composiciones farmaceuticas pueden formularse de manera que proporcionen una liberacion inmediata, prolongada o retardada del ingrediente activo despues de la administracion al paciente empleando procedimientos conocidos en la tecnica.

Las composiciones pueden formularse en una forma de dosificacion unitaria, conteniendo cada dosificacion, por ejemplo, de 0,1 a 500 mg del ingrediente activo. Por ejemplo, las dosificaciones pueden contener de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 50 mg, de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 40 mg, de

aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 20 mg, de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 10 mg, de

aproximadamente 0,2 mg a aproximadamente 20 Mg, de aproximadamente 0,3 mg a aproximadamente 15 mg, de

aproximadamente 0,4 mg a aproximadamente 10 mg, de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 1 mg; de

aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 100 mg, de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 50 mg, de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 30 mg "de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 20 mg, de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 10 mg, de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 50 mg, desde aproximadamente 1 mg hasta aproximadamente 50 mg, desde aproximadamente 1 mg hasta aproximadamente 30 mg, desde aproximadamente 1 mg hasta aproximadamente 20 mg, desde aproximadamente 1 mg hasta aproximadamente 10 mg, desde aproximadamente 1 mg hasta aproximadamente 5 mg; De aproximadamente 5 mg a aproximadamente 50 mg, de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 20 mg, de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 10 mg; De aproximadamente 10 mg a aproximadamente 100 mg, de aproximadamente 20 mg a aproximadamente 200 mg, de aproximadamente 30 mg a aproximadamente 150 mg, de aproximadamente 40 mg a aproximadamente 100 mg, de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 100 mg del ingrediente activo, de De aproximadamente 50 mg a aproximadamente 300 mg, de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 250 mg, de aproximadamente 100 mg a aproximadamente 300 mg, o de aproximadamente 100 mg a aproximadamente 250 mg del ingrediente activo. Para preparar composiciones solidas tales como comprimidos, el ingrediente activo principal se mezcla con uno o mas excipientes farmaceuticos para formar una composicion de formulacion en masa solida que contiene una mezcla homogenea de un compuesto de la presente invencion. Cuando se hace referencia a estas composiciones de formulacion en masa como homogeneas, el ingrediente activo se dispersa tfpicamente uniformemente a traves de la composicion de modo que la composicion puede subdividirse facilmente en formas de dosificacion unitaria igualmente eficaces tales como tabletas y capsulas. Esta formulacion solida a granel se subdivide a continuacion en formas de dosificacion unitarias del tipo descrito anteriormente que contienen, por ejemplo, de 0,1 a aproximadamente 500 mg del ingrediente activo de la presente invencion

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Composiciones para la Administration Oral

Las composiciones farmaceuticas contempladas por la invencion se formulan para administracion oral ("formas de dosificacion oral"). Las formas de dosificacion oral pueden estar, por ejemplo, en forma de comprimidos, capsulas, una solucion o suspension lfquida, un polvo o cristales lfquidos o solidos que contengan el o los ingredientes activos en una mezcla con excipientes no toxicos farmaceuticamente aceptables. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes o cargas inertes (por ejemplo, sacarosa, sorbitol, azucar, manitol, celulosa microcristalina, almidones incluyendo almidon de patata, carbonato de calcio, cloruro de sodio, lactosa, fosfato de calcio, sulfato de calcio o fosfato sodico); agentes de granulacion y desintegracion (por ejemplo, derivados de celulosa incluyendo celulosa microcristalina, almidones que incluyen almidon de patata, croscarmelosa sodica, alginatos o acido algfnico); agentes aglutinantes (por ejemplo, sacarosa, glucosa, sorbitol, acacia, acido algfnico, alginato de sodio, gelatina, almidon, almidon pregelatinizado, celulosa microcristalina, silicato de magnesio y aluminio, carboximetilcelulosa sodica, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, etilcelulosa, polivinilpirrolidona o polietilenglicol); y agentes lubricantes, deslizantes y antiadhesivos (por ejemplo, estearato de magnesio, estearato de zinc, acido estearico, sflices, aceites vegetales hidrogenados o talco). Otros excipientes farmaceuticamente aceptables pueden ser colorantes, agentes aromatizantes, plastificantes, humectantes y agentes tamponantes.

Las formulaciones para administracion oral tambien pueden presentarse como comprimidos masticables, como capsulas de gelatina dura en las que el ingrediente activo se mezcla con un diluyente solido inerte (por ejemplo, almidon de patata, lactosa, celulosa microcristalina, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolfn) o como capsulas de gelatina suaves en las que el ingrediente activo se mezcla con agua o un medio oleoso, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina lfquida o aceite de oliva. Pueden prepararse polvos, granulados y granulos utilizando los ingredientes mencionados anteriormente en tabletas y capsulas de una manera convencional usando, por ejemplo, un mezclador, un aparato de lecho fluido o un equipo de secado por pulverizacion.

Las composiciones de liberacion controlada para uso oral pueden construirse para liberar el farmaco activo controlando la disolucion y/o la difusion de la sustancia farmacologica activa. Cualquiera de una serie de estrategias puede ser perseguida con el fin de obtener la liberacion controlada y la concentracion plasmatica dirigida vs perfil de tiempo. En un ejemplo, la liberacion controlada se obtiene mediante la seleccion apropiada de diversos parametros e ingredientes de la formulacion, incluyendo, por ejemplo, diversos tipos de composiciones y revestimientos de liberacion controlada. De este modo, el farmaco se formula con excipientes apropiadas en una composicion farmaceutica que, tras la administracion, libera el farmaco de una manera controlada. Los ejemplos incluyen composiciones de comprimidos unitarios o capsulas individuals o multiples, soluciones de aceite, suspensiones, emulsiones, microcapsulas, microesferas, nanopartfculas, parches y liposomas. En ciertas realizaciones, las composiciones incluyen revestimientos polimericos biodegradables, pH, y/o sensibles a la temperatura.

La disolucion o liberacion controlada por difusion se puede lograr mediante el recubrimiento apropiado de una formulacion de comprimidos, capsulas, granulos o granulados de compuestos, o incorporando el compuesto en una matriz apropiada. Un revestimiento de liberacion controlada puede incluir una o mas de las sustancias de revestimiento mencionadas anteriormente y/o, por ejemplo, goma laca, cera de abejas, glicol, cera de ricino, cera de carnauba, alcohol estearflico, monoestearato de glicerilo, diestearato de glicerilo, palmitoestearato de glicerol, etilcelulosa, di-acido polilactico, butirato de acetato de celulosa, cloruro de polivinilo, acetato de polivinilo, vinilpirrolidona, polietileno, polimetacrilato, metilmetacrilato, 2-hidroximetacrilato, hidrogeles de metacrilato, 1,3-butil- leno-glicol, metacrilato de etilenglicol y/o polietilenglicoles. En una formulacion de matriz de liberacion controlada, el material de matriz tambien puede incluir, por ejemplo, metilcelulosa hidratada, cera de carnauba y alcohol estearflico, carbopol 934, silicona, triestearato de glicerilo, acrilato de metilo-metacrilato de metilo, cloruro de polivinilo, polietileno y/o fluorocarbono halogenado.

Las formas lfquidas en las que pueden incorporarse los compuestos y composiciones de la presente invencion para administracion oral incluyen soluciones acuosas, jarabes aromatizados adecuadamente, suspensiones acuosas o oleosas y emulsiones aromatizadas con aceites comestibles tales como aceite de semilla de algodon, aceite de sesamo, aceite de coco, o aceite de cacahuete, asf como elixires y vehfculos farmaceuticos similares.

Revestimientos

Las composiciones farmaceuticas formuladas para administracion oral, tales como comprimidos o capsulas de la presente invencion, pueden revestirse o combinarse de otro modo para proporcionar una forma de dosificacion que proporcione la ventaja de liberacion retardada o prolongada. El recubrimiento puede estar adaptado para liberar la sustancia farmaco activa en un patron predeterminado (por ejemplo, para conseguir una formulacion de liberacion controlada) o puede adaptarse para no liberar la sustancia farmacologica activa hasta despues del paso del estomago, por ejemplo, mediante el uso de un revestimiento enterico (por ejemplo, polfmeros que son sensibles al pH ("liberacion controlada por el pH"), polfmeros con una velocidad lenta o dependiente del pH de hinchamiento, disolucion o erosion ("liberacion controlada en el tiempo"), polfmeros que son degradados por enzimas ("liberacion controlada por enzimas" o "liberacion biodegradable") y polfmeros que forman capas firmes que se destruyen por un

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aumento de la presion ("liberacion controlada por presion")). Los revestimientos entericos ejemplares que pueden usarse en las composiciones farmaceuticas descritas aquf incluyen revestimientos de azucar, recubrimientos de pelfcula (por ejemplo, basados en h id rox propil metilcelulosa, metilcelulosa, metil hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, carboxi metilcelulosa, copolfmeros de acrilato, polietilenglicoles y/o polivnilpirrolidona) o recubrimientos a base de copolfmero de acido metacrflico, ftalato de acetato de celulosa, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa, succinato de acetato de hidroxpropilmetilcelulosa, ftalato de acetato de polivinilo, goma laca y/o etilcelulosa. Ademas, se puede emplear un material de retardo de tiempo tal como, por ejemplo, monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo.

Por ejemplo, la tableta o capsula puede comprender una dosificacion interna y un componente de dosificacion exterior, estando esta ultima en forma de una envoltura sobre la primera. Los dos componentes pueden estar separados por una capa enterica que sirve para resistir la desintegracion en el estomago y permitir que el componente interior pase intacto al duodeno o se retrase en su liberacion.

Cuando se usa un recubrimiento enterico, deseablemente, se libera una cantidad sustancial del farmaco en el tracto gastrointestinal inferior.

Ademas de los recubrimientos que efectuan una liberacion retardada o prolongada, las composiciones de tabletas solidas pueden incluir un revestimiento adaptado para proteger la composicion de cambios qufmicos no deseados (por ejemplo, degradacion qufmica antes de la liberacion de la sustancia farmacologica activa). El recubrimiento se puede aplicar sobre la forma de dosificacion solida de una manera similar a la descrita en Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, vol. 5 y 6, Eds. Swarbrick y Boyland, 2000.

Formulaciones Para la Liberacion de farmacos de colon

En algunas realizaciones, pueden usarse sistemas de suministro de farmacos dirigidos al colon. Los enfoques ejemplares incluyen, pero no se limitan a:

(a) enlace covalente del farmaco con el vehfculo para formar un profarmaco que es estable en el estomago y el intestino delgado y libera el farmaco en el intestino grueso tras la transformacion enzimatica por la microflora intestinal; ejemplos de estos profarmacos incluyen azo conjugados, conjugados de ciclodextrina, conjugados de glicosido, conjugados de glucuronato, conjugados de dextrano, polipeptidos y conjugados polimericos;

(b) enfoques para suministrar una molecula intacta al colon, tal como recubrimiento con polfmeros sensibles al pH para liberar el farmaco a pH neutro a alcalino o recubrimiento con polfmeros biodegradables que liberan el farmaco tras la degradacion por las bacterias en el colon;

(c) incrustar el farmaco en matrices y hidrogeles biodegradables que liberan el farmaco en respuesta al pH o la biodegradacion;

(d) sistemas de liberacion de tiempo en los que una vez que la formulacion multicapa pasa por el estomago, el farmaco se libera despues de un tiempo de latencia de 3-5 horas que es equivalente al tiempo de transito del intestino delgado;

(e) usar polfmeros sensibles al redox donde una combinacion de polfmeros azo y disulfuro, proporciona liberacion del farmaco en respuesta al potencial redox del colon;

(f) usar polfmeros bioadhesivos que se adhieren selectivamente a la mucosa colonica liberando lentamente el farmaco; y

(g) suministro de farmaco controlado osmotico en el que el farmaco se libera a traves de una membrana semipermeable debido a la presion osmotica.

Administracion parenteral

Dentro del alcance de la presente descripcion tambien hay sistemas de deposito parenteral a partir de polfmeros biodegradables. Estos sistemas se inyectan o se implantan en el musculo o tejido subcutaneo y liberan el farmaco incorporado durante largos perfodos de tiempo, que van desde varios dfas hasta varios meses. Tanto las caracterfsticas del polfmero como la estructura del dispositivo pueden controlar la cinetica de liberacion que puede ser continua o pulsatil. Los sistemas de deposito parenteral basados en polfmeros se pueden clasificar como implantes o micropartfculas. Los primeros son dispositivos cilfndricos inyectados en el tejido subcutaneo, mientras que los ultimos se definen como partfculas esfericas en el intervalo de 10-100 mm. La extrusion, la compresion o el moldeo por inyeccion se utilizan para fabricar implantes, mientras que para micropartfculas se emplean frecuentemente el metodo de separacion de fases, la tecnica de secado por pulverizacion y las tecnicas de emulsion agua en aceite en agua son frecuentemente usadas. Los polfmeros biodegradables mas comunmente usados para formar micropartfculas son poliesteres de acido lactico y/o glicolico, es decir, poli (acido glicolico) y poli (acido L- lactico) (microesferas PLG/PLA). De particular interes son los sistemas de deposito de formacion in situ, tales como pastas termoplasticas y sistemas de gelificacion formados por solidificacion, por enfriamiento, o debido a la transicion sol-gel, sistemas de reticulacion y organogeles formados por lfpidos anfifflicos. Ejemplos de polfmeros termosensibles utilizados en los sistemas mencionados anteriormente incluyen N-isopropilacrilamida, poloxameros

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(oxido de etileno y copolfmeros de bloque de oxido de propileno, tales como poloxamero 188 y 407), poli (N-vinil caprolactama), poli (siloetilenglicol), polifosfazenos Derivados y PLGA - PEG - PLGA

Regimenes de dosificacion

Los presentes metodos para tratar la isquemia cronica del tejido de la descripcion se llevan a cabo administrando un nitrito inorganico durante un tiempo y en una cantidad suficiente para dar lugar al crecimiento de nuevos vasos sangufneos en el tejido isquemico.

La cantidad y la frecuencia de administracion de las composiciones pueden variar dependiendo, por ejemplo, de lo que se administra, del estado del paciente y de la forma de administracion. En aplicaciones terapeuticas, las composiciones pueden administrate a un paciente que sufre de isquemia cronica del tejido en una cantidad suficiente para aliviar o al menos aliviar parcialmente los sfntomas de la isquemia cronica del tejido y sus complicaciones. Es probable que la dosificacion dependa de variables tales como el tipo y la extension de la progresion de la isquemia cronica del tejido, la gravedad de la isquemia cronica del tejido, la edad, el peso y el estado general del paciente particular, la eficacia biologica relativa de la composicion seleccionada, la formulacion del excipiente, la via de administracion y el juicio del clfnico asistente. Las dosis efectivas pueden ser extrapoladas a partir de curvas dosis-respuesta derivadas de un sistema de ensayo de modelo in vitro o animal. Una dosis efectiva es una dosis que produce un resultado clfnico deseable, por ejemplo, mejorando un signo o sfntoma de isquemia cronica del tejido o retardando su progresion.

La cantidad de nitrito inorganico por dosis puede variar. Por ejemplo, un sujeto puede recibir de aproximadamente 0,1 mg/kg a aproximadamente 10.000 mg/kg. Generalmente, el nitrito se administra en una cantidad tal que la concentracion plasmatica maxima oscile entre 150 nM-250 mM. Las cantidades de dosificacion ejemplares pueden caer entre 0,1-5000 mg/kg, 100-1500 mg/kg, 100-350 mg/kg, 340-750 mg/kg o 750-1000 mg/kg. Las dosificaciones ejemplares pueden ser de 0,25, 0,5, 0,75 o 1 mg/kg. Las concentraciones pico de plasma ejemplares pueden variar desde 0,05-10 mM, 0,1-10 mM, 0,1-5,0 mM, o 0,1-1 mM. Las concentraciones plasmaticas maximas pueden mantenerse durante 6-14 horas, por ejemplo, durante 6-12 o 6-10 horas.

La frecuencia del tratamiento tambien puede variar. El sujeto puede ser tratado una o mas veces al dfa (por ejemplo, una, dos, tres, cuatro o mas veces) o cada tantas horas (por ejemplo, aproximadamente cada 2, 4, 6, 8, 12 o 24 horas). Preferiblemente, la composicion farmaceutica se administra 1 o 2 veces por 24 horas. La duracion del tratamiento puede ser de duracion variable, por ejemplo, durante dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, diez o mas dfas. Por ejemplo, el tratamiento puede ser dos veces al dfa durante tres dfas, dos veces al dfa durante siete dfas, dos veces al dfa durante diez dfas. Los ciclos de tratamiento pueden repetirse a intervalos, por ejemplo semanales, bimensuales o mensuales, que se separan por perfodos en los que no se da tratamiento. El tratamiento puede ser un solo tratamiento o puede durar tanto como la vida util del sujeto (por ejemplo, muchos anos).

Kits

Cualquiera de las composiciones farmaceuticas de la invencion descritas en la presente memoria pueden usarse junto con un conjunto de instrucciones, es decir, para formar un kit. El kit puede incluir instrucciones para el uso de las composiciones farmaceuticas como una terapia como se describe en el presente documento. Por ejemplo, las instrucciones pueden proporcionar dosificaciones y regimenes terapeuticos para el uso de los compuestos de la invencion para reducir la isquemia cronica del tejido.

Metodos de tratamiento

Nitrito como suplemento nutricional

Se ha demostrado que los niveles de nitrito plasmatico estan inversamente correlacionados con los factores de riesgo cardiovascular, con los sujetos que tienen el mayor numero de factores de riesgo, con el nivel mas bajo de nitritos plasmaticos (Kleinbongard et al., Free Radical Biology & Medicine 40: 295-302, 2006 ). En sujetos normales, el ejercicio produce una liberacron de nitrito almacenado en el plasma, aumentando los niveles plasmaticos de nitrito; sin embargo, en pacientes diabeticos y con PAD, el ejercicio no aumenta el nivel de nitrito plasmatico y, de hecho, conduce a una disminucion adicional de los niveles circulantes de nitrito (Alen et al., Nitric Oxide 20: 231-237, 2009). Por lo tanto, una suplementacion nutricional de nitrito podrfa ser eficaz para superar estos deficits en los niveles plasmaticos de nitrito en los trastornos cardiovasculares y vasculares y dada la relacron del nitrito con el oxido nftrico, los deficit de oxido nftrico encontrados en estas enfermedades o debido a deficiencias dieteticas en nitrito.

La presente descripcion proporciona composiciones nutricionales de nitrito, por ejemplo, nitrito inorganico, o un profarmaco farmaceuticamente aceptable del mismo, para la administracion de suplementos nutricionales profilacticos y terapeuticos, especfficamente en enfermedades cardiovasculares, metabolicas, inflamatorias o

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vasculares. Especfficamente, la presente descripcion se refiere a nuevas composiciones de nitrito, por ejemplo, nitrito inorganico, o un profarmaco farmaceuticamente aceptable del mismo, que puede usarse para complementar las deficiencias nutricionales observadas en pacientes con diabetes, enfermedad arterial periferica, infecciones cronicas, infecciones agudas, insuficiencia cardiaca, enfermedad cardiovascular ate ros cl erotica, claudicaaon intermitente, enfermedad isquemica crftica del miembro, cicatrizacion defectuosa de heridas, accidente cerebrovascular, infarto de miocardio, enfermedad inflamatoria intestinal, fractura osea, infeccion osea o neuropatia periferica, enfermedades de celulas madre y/o restricciones dieteticas. Ademas, las composiciones pueden usarse para tratar las deficiencias nutricionales de pacientes que sufren de un estado de enfermedad que da como resultado niveles disminuidos de nitrito o nitrogeno en plasma.

Enfermedades Inflamatoiias

Las composiciones farmaceuticas y los metodos descritos en la presente memoria pueden usarse para tratar enfermedades inflamatorias innatas y adquiridas. Las enfermedades inflamatorias abarcadas por los metodos de esta descripcion pueden provenir de una amplia gama de condiciones medicas que causan inflamacion. Un tipo de enfermedad inflamatoria que pueden ser tratadas por las composiciones y metodos descritos en esta descripcion son enfermedades inmunoinflamatorias. Ejemplos de enfermedades inmunoinflamatorias incluyen artritis reumatoide, artritis reumatoide juvenil, osteoartritis, rechazo de trasplante, sepse, sfndrome de dificultad respiratoria aguda, asma y cancer. Otro tipo de enfermedades inflamatorias que pueden ser tratadas por la composicion y metodos descritos en esta descripcion son las enfermedades autoinmunes. Ejemplos de enfermedades autoinmunes incluyen afecciones tales como esclerosis multiple, psoriasis, enfermedad inflamatoria del intestino, glomerulonefritis, lupus, uveitis y hepatitis cronica. Otras enfermedades inflamatorias tambien pueden ser tratadas por las composiciones y metodos descritos en esta descripcion, incluyendo condiciones tales causadas por traumatismo, estres oxidativo, muerte celular, dano por irradiacion, isquemia, reperfusion, cancer, rechazo de trasplante e infeccion viral.

Regeneraddn Tisular

Las composiciones farmaceuticas y los metodos descritos en la presente memoria pueden usarse para estimular la regeneracion de tejidos, por ejemplo, despues de un dano a un tejido u organo causado por condiciones tales como traumatismo, cicatrizacion, deposicion anormal de proteinas, amiloidosis, isquemia o diabetes, infecciones o procedimientos quirurgicos; malformaciones congenitas tales como hernias, defectos cardiacos y defectos gastrointestinales que como resultado danan al tejido.

Isquemia Cronica de los Tejidos

La isquemia cronica de tejidos se asocia con una amplia gama de condiciones medicas que resultan en una reduccion parcial, sustancialmente completa o completa del flujo sanguineo a una parte del cuerpo o tejido que comprende una parte del cuerpo y puede ser el resultado de una enfermedad, lesion o de una causa desconocida, y puede ser influenciado por su constitucion genetica. Independientemente de la afeccion medica que conduce a la isquemia cronica del tejido, un paciente que tiene isquemia cronica del tejido es un candidato para el tratamiento con las composiciones farmaceuticamente aceptables que comprenden nitrito inorganico descrito en el presente documento. El tratamiento puede eliminar total o parcialmente algunos o todos los signos y sintomas de la isquemia cronica del tejido, disminuir la gravedad de los sintomas, retrasar su aparicion o disminuir la progresion o la gravedad de los sintomas desarrollados posteriormente.

Nuevo crecimiento de los vasos sangufneos

Como se describe mas adelante, las composiciones de la descripcion se administran durante un tiempo y en una cantidad suficiente para dar lugar al crecimiento de nuevos vasos sangufneos en el tejido isquemico. Podemos usar los terminos "crecimiento de vasos sangufneos nuevos", "nueva formacion de vasos sangufneos" y "desarrollo de nuevos vasos sangufneos" de forma intercambiable. El nuevo crecimiento de los vasos sangufneos se refiere a todas las fases del proceso de formacion de los vasos sangufneos, incluyendo los eventos iniciales de senalizacion, el reclutamiento celular de celulas endoteliales, la formacion y ampliacion de nuevos vasos y la conexion de nuevos vasos con vasos preexstentes. El nuevo crecimiento de los vasos sangufneos puede provenir de cualquier proceso que da lugar a revascularizacion o neovascularizacion del tejido isquemico, por ejemplo, angiogenesis, o arteriogenesis, o una combinacion de angiogenesis y arteriogenesis. El termino vasculogenesis se utiliza tfpicamente para describir el desarrollo embrionario de vasos sangufneos de angioblastos. Generalmente se entiende que la angiogenesis es un proceso fisiologico postnatal requerido para la curacion. Generalmente, la angiogenesis abarca la formacion de nuevos capilares o ramas capilares por brotacion, brotacion e intususcepcion a partir de capilares preexistentes. La arteriogenesis, es decir, el crecimiento de las conexiones arteriolares preexistentes en arterias colaterales verdaderas, se entiende generalmente que abarca la formacion de arterias maduras a partir de arteriolas de interconexion preeXstentes despues de una oclusion arterial. Comparte algunas caracterfsticas con la angiogenesis, pero las vfas que conducen a ella pueden diferir, al igual que los resultados finales: la arteriogenesis es potencialmente capaz de reemplazar completamente una arteria ocluida, mientras que la

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angiogenesis tfpicamente no puede. El aumento del numero de capilares dentro de la region isquemica no puede aumentar el flujo sangufneo cuando la estructura limitante se encuentra aguas arriba de los nuevos capilares; la formacion de nuevos vasos colaterales que desvfan el flujo sangufneo alrededor del sitio de un bloqueo. Ademas, las estructuras producidas por la angiogenesis y la arteriogenesis difieren en su composicion celular. Los capilares son tubos formados por celulas endoteliales que estan soportadas por pericitos vasculares. Las arterias y venas son tubos que constan de multiples capas: la fntima, que esta compuesta de celulas endoteliales, pericitos y una membrana basal; el medio, que se compone principalmente de celulas de musculo liso y su matriz extracelular; y, en los vasos mas grandes, la adventicia, que se compone principalmente de fibroblastos y su matriz extracelular.

Isquemia cronica del tejido fino

Los procedimientos de la descripcion son aplicables a cualquiera de una amplia gama de condiciones medicas que tienen como caracterfstica subyacente una reduccion persistente o bloqueo parcial o completo del flujo sangufneo a un tejido u organo. Por lo tanto, los metodos son aplicables al tratamiento de la isquemia cronica del tejido asociada con un trastorno, con un trauma o un estres ambiental. La reduccion del flujo sangufneo a un tejido puede ser, por ejemplo, el resultado de un bloqueo progresivo de una arteria debido al endurecimiento y/o perdida de elasticidad debida a una placa ateromatosa o la presencia de un coagulo. La reduccion del flujo sangufneo a un tejido tambien puede ser el resultado de un insulto ambiental, por ejemplo, una lesion traumatica o procedimiento quirurgico que interrumpe el flujo sangufneo a un tejido u organo. Tfpicamente, la tension de oxfgeno de una herida disminuye rapida y progresivamente con el desarrollo de diversos grados de hipoxia en toda la region de la herida. Las condiciones ambientales que inducen hipoxia tambien estan dentro del alcance de la descripcion.

Los trastornos abarcados por la descripcion incluyen, por ejemplo, enfermedad cardiovascular, enfermedad de la arteria periferica, arteriosclerosis, enfermedad cardiovascular aterosclerotica, infarto de miocardio, enfermedad isquemica de extremidad crftica, accidente cerebrovascular, sfndrome coronario agudo, claudicacion intermitente, diabetes incluyendo tipo 1 y tipo 2 de diabetes, ulceras de la piel, neuropatfa periferica, enfermedad inflamatoria intestinal, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, isquemia intestinal y isquemia mesenterica cronica. Los metodos de la descripcion son tambien aplicables a la isquemia cronica del tejido asociada con un trauma, por ejemplo, una lesion traumatica tal como una herida, laceracion, quemadura, contusion, fractura osea o infeccion cronica. Tambien se incluyen en la descripcion las lesiones tisulares sufridas como parte de cualquier procedimiento quirurgico, por ejemplo, en darterectomfa. Los procedimientos que implican el trasplante de tejidos o organos estan dentro del alcance de la descripcion. Los ejemplos incluyen injertos de bypass vascular, corazon, higado, pulmon, transplants de celulas de islotes pancreaticos asi como trasplante de tejidos generados ex vivo para implantacion en un huesped. Los metodos de la descripcion son tambien utiles para tratar una condicion isquemica cronica provocada por la exposicion a un insulto ambiental, por ejemplo, exposicion cronica a condiciones hipoxicas, por ejemplo, altitud elevada o esfuerzo aerobico sostenido.

Los procedimientos proporcionados aquf son aplicables a cualquiera de una amplia gama de tipos de tejidos incluyendo, por ejemplo, musculo, musculo liso, musculo esqueletico, musculo cardiaco, tejido neuronal, piel, tejido mesechfmalo, tejido conectivo, tejido gastrointestinal u hueso. Tejido blando, tal como tejido epitelial, por ejemplo, epitelio escamoso simple, epitelio escamoso estratificado, epitelio cuboidal o epitelio dlindrico, tejido conectivo suelto (tambien conocido como tejido conectivo areolar), tejido conectivo fibroso, tal como tendones, que unen los musculos al hueso, y ligamentos, que unen huesos juntos en las articulaciones.

Asi, por ejemplo, los sfntomas de isquemia cronica de tejido en la enfermedad arterial periferica (PAD), una forma de enfermedad vascular periferica en la que hay bloqueo parcial o total de una arteria, usualmente debido a aterosclerosis en un vaso o vasos que conducen a una pierna o brazo, puede incluir claudicacion intermitente, es decir, fatiga, calambres y dolor en la cadera, la nalga, el muslo, la rodilla, la espinilla o el pie superior durante el esfuerzo que desaparece con el reposo, claudicacion durante el descanso, entumecimiento, hormigueo o frialdad en las piernas o los pies inferiores, la neuropatfa o la cicatrizacion de heridas de tejido defectuosa. El PAD en la extremidad inferior se asocia a menudo con la diabetes, en particular la diabetes tipo 2. La enfermedad arterial del brazo no es generalmente debido a la aterosclerosis sino a otras condiciones tales como una enfermedad autoinmune, un coagulo de sangre, radioterapia, enfermedad de Raynaud, movimiento repetitivo, y trauma. Los sfntomas comunes cuando el brazo esta en movimiento incluyen malestar, pesadez, cansancio, calambres y dolor en los dedos. El PAD puede ser diagnosticado realizando una o mas pruebas diagnosticas incluyendo, por ejemplo, una prueba de fndice braquial de tobillo (ABI), angiograffa, ultrasonido o analisis de MRI.

La isquemia miocardica puede tener pocos o ningun sfntoma, aunque por lo general, se asocia con sfntomas como angina, dolor, fatiga elevada presion arterial. Las pruebas diagnosticas para la isquemia miocardica incluyen: angiograffa, reposo, ejercicio o electrocardiogramas ambulatorios; estudios de escintigraffa (exploraciones cardfacas radiactivas); ecocardiograffa; angiografia coronaria; y, rara vez, la tomograffa por emision de positrones.

El metodo de la descripcion tambien puede usarse junto con otros remedios conocidos en la tecnica que se usan para tratar la isquemia cronica de tejidos, incluyendo terapia con farmacos, cirugfa, agentes antiinflamatorios, anticuerpos, ejercicios o cambios en el estilo de vida. La eleccion del tratamiento especffico puede variar y

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dependera de la gravedad de la isquemia cronica del tejido, la salud general del sujeto y el juicio del clfnico que lo atiende.

Las presentes composiciones tambien pueden formularse en combinadon con uno o mas ingredientes activos adicionales, que pueden incluir cualquier agente farmaceutico tales como antihipertensivos, agentes antidiabeticos, estatinas, agentes antiplaquetarios (clopidogrel y cilostazol), anticuerpos, inmunosupresores, agentes inflamatorios, antibioticos y quimioterapeuticos. En algunas realizaciones, la composicion incluye tambien un nitrato inorganico; en otras realizaciones, la composidon excluye los nitratos inorganicos. Por ejemplo, la presente composicion puede induir nitrito inorganico y nitratos en una relacion que esta entre 1-5 a 1-100 nitrito: nitrato, por ejemplo, 1-5, 1-10, 1-30, 1-50, 1-70 , O 1-100 nitrito: nitrato.

EJ EMPLOS

Formulaciones Farmaceuticas de Liberacion Controlada

Las formulaaones ejemplares para administracion oral incluyen formulaciones de tabletas y capsulas. Por ejemplo, los componentes en polvo descritos para una formulacion de tableta se pueden usar para preparar una formulacion de capsula, un tamano de capsula adecuado dependiendo de la dosis del activo y densidad del relleno, tal como capsulas de tamano 1,0, o 00. En algunas realizaciones, la mesa o capsula puede no tener un revestimiento enterico. En otras realizaciones, las composiciones farmaceuticas de la descripcion pueden formularse para la liberacion controlada de iones nitrito. Si se describe una capsula como recubierta, el recubrimiento se puede aplicar a la capsula despues del llenado. Las formulaciones de capsulas pueden emplear opcionalmente envolturas de capsulas autobloqueantes (por ejemplo, Coni-Snap®, Posilok® y Snap-Fit®) para facilitar el manejo durante el proceso de recubrimiento.

Las composiciones ejemplares incluyen entre 0,5 - 4,0 mmol de ion nitrito total; Especfficamente, entre 1,83,6 mmol de NaNO2. Las composiciones pueden incluir cualquier profarmaco de nitrito del mismo, por ejemplo, 125250 mg de NaNO2 154 - 308 mg de KNO2 o 201-402 mg de nitrito de arginina. La cantidad de ion nitrito usada en las composiaones farmaceuticas puede variarse como se describe en la presente memoria. Por ejemplo, las formulaciones tambien pueden induir cualquiera de los excipientes descritos en la presente memoria, preferiblemente un agente alcanizante (por ejemplo, bicarbonato de sodio o carbonato de calcio), un deslizante (por ejemplo, sflice ahumada), un lubricante (una sal de acido graso (por ejemplo estearato de magnesio), un acido graso solido, o polietilenglicol solido), o un agente de carga con buenas propiedades de flujo (por ejemplo, celulosa microcristalina silicificada (Prosolv® SMCC90)). Las composiciones tambien pueden incluir cualquiera de los excipientes descritos para uso en composiciones que estan formuladas para liberacion enterica, por ejemplo, en formulaciones entericas. Las formulaciones tambien pueden incluir revestimientos polfmeros que controlan la velocidad (por ejemplo, etilcelulosa, acetato de celulosa, acetato-butirato de celulosa y triacetato de celulosa, que pueden combinarse con PEG-4000). Si se desea, la cantidad de PEG-4000 usada puede variar para generar poros acuosos en el revestimiento a traves del cual el nitrito de sodio puede difundir. Tambien se pueden usar revestimientos de polfmeros entericos, y los polfmeros ejemplares incluyen acetato ftalato de celulosa (CAP), trimelitato de celulosa, sucdnato de acetato de hidroxipropilmetilcelulosa, Eudragit® L o S cuando se usa un revestimiento de polfmero, la formulacion tambien puede incluir un plastificante (por ejemplo, Triacetina y acetil monogliceridos). La capa enterica total (polfmero + plastificante) se puede anadir en una cantidad que, por ejemplo, da como resultado una ganancia de peso del 10%. La produccion y ensayo de varias formulaciones de comprimidos y pastillas para la liberacion controlada de nitrato se describe a continuaaon.

Procedimientos de Preparacion de Tabletas

Todos los componentes solidos, incluyendo nitrito de sodio, se pesaron para producir tabletas con las proporciones en peso deseadas de los componentes. Se preparo una mezcla de polvo suficiente para preparar 4-5 comprimidos. Los componentes en polvo se mezclaron a fondo antes de comprimir en comprimidos. Para los comprimidos que contienen un componente ceroso (es decir, Castorwax®), el nitrito de sodio y otros componentes se dispersaron en cera fundida y la mezcla se solidifico mientras se mezclaba para mantener una mezcla homogenea. Despues de solidificar, la mezcla se trituro en polvo para su posterior mezcla, si era necesario. La mezcla de todos los componentes en polvo se realizo con un mortero y una maja.

Las tabletas se comprimieron en una prensa Carver® con un punzon y troquel de 1/2 "(1,27 cm). Se aplico una fuerza de 5000 libras durante 30 segundos para obtener comprimidos para pruebas de liberacion.

Las dimensiones del comprimido fueron:

comprimidos de 580 mg: 1,27 cm de diametro. X 0,38 cm de espesor (1/2 "x 1/7")

o comprimidos de 480 mg: 1,27 cm de diametro. X 0,32 cm de espesor (1/2 "x 1/8")

Los espesores de la tableta dependfan del peso total de los componentes en polvo y de la naturaleza de los excipientes empleados. Asf, los espesores descritos varfan entre 10-15%, dependiendo de la compresion de la

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mezcla.

Las tabletas se empujaron cuidadosamente de la matriz despues de la compresion y se almacenaron en un desecador hasta la prueba de disolucion. Algunos comprimidos se revistieron con materiales de revestimiento enterico o de liberacion controlada para alterar sus perfiles de liberacion.

Procedimientos para la Preparacion de Pellets

Se prepararon pequenas pastillas que contenfan 5 mg de nitrito sodico de acuerdo con el siguiente procedimiento para ensayos con animales (administracion oral a conejos). Todos los componentes solidos, incluyendo nitrito de sodio, se pesaron para producir granulos con las proporciones en peso deseadas de los componentes. Se preparo suficiente mezcla en polvo para preparar 40-50 granulos.

Los componentes en polvo se tamizaron (150-250 micrometros) y se mezclaron por dilucion geometrica antes de comprimir en granulos. Los granulos se comprimieron con una prensa de granulos Parr Modelo 2811 con un troquel y punzon de 3 mm. La prensa de pellets operaba con compresion manual y no permitfa el control de la fuerza aplicada, pero producfa pellets cohesivos para todas las formulaciones. Los granulos pesaban 23-35 mg dependiendo de la formulacion empleada. Una pastilla de pellets se recubrio manualmente con un recubrimiento de etilcelulosa/triacetina (4/1) que era 11-15% del peso del granulo.

Las dimensiones de los granulos eran: 3 mm de diametro. X 5-7 mm de espesor. Los gruesos de granulos dependfan del peso total de los componentes en polvo y de la naturaleza de los excipientes empleados. Por lo tanto, los espesores descritos varfan aproximadamente 50% dependiendo de la compresion de la mezcla.

Los pellets se empujaron cuidadosamente de la matriz despues de la compresion y se almacenaron en un desecador hasta su envfo para ensayos con animales. Se recubrio un lote de granulos con un revestimiento de liberacion controlada para alterar su perfil de liberacion. El recubrimiento

Procedimiento se describe por separado a continuacion. Los pellets de Castorwax se comprimieron dos veces. La primera compresion fue a temperatura ambiente; la segunda compresion estaba en la matriz de 3 mm despues de calentar la matriz a 50-60°C en un horno. La segunda compresion indujo un mejor flujo de la Castorwax alrededor de las partfculas de nitrito de sodio y acetato de sodio.

Procedimiento de revestimiento de tabletas/granulos

Las tabletas de nitrito sodico se revistieron manualmente dejando caer cuidadosamente un volumen medido de solucion de revestimiento sobre la tableta y extendiendola cuidadosamente sobre las superficies y el borde de la pastilla. Despues de la evaporacion del disolvente, se repitio el proceso varias veces hasta que se aplico una cantidad adecuada de revestimiento. Para granulos y algunos lotes de tabletas, se empleo un proceso de revestimiento por inmersion que implico sumergir cuidadosamente el pellet/tableta en una solucion de revestimiento y dejar que se secara al aire mientras se sostenfa con forceps. Se repitio el proceso de inmersion hasta que se aplico una cantidad adecuada de revestimiento. Los revestimientos empleados fueron etilcelulosa (EC) con triacetina como plastificante y acetato ftalato de celulosa (CAP, Cellacefate, NF). Se emplearon diversas proporciones de EC y triacetina para obtener capas con diferentes fragilidades y diferentes permeabilidades al agua y al nitrito de sodio. Se aplico EC/triacetina a comprimidos o pellets a partir de soluciones que contenfan cloroformo, cloruro de metileno o etanol al 95%. Se empleo CAP como material de revestimiento enterico que se aplico a tabletas a partir de una solucion de dioxano. Otros disolventes de revestimiento dieron comprimidos recubiertos de CAP que no resistieron el fluido gastrico simulado durante dos horas sin desintegrarse.

Componentes de la tableta

• Nitrito de Sodio, Reactivo ACS Certificado, cristalino, Fisher Scientific, Lote # 080939A

• Coagulante Polyox®, mezcla # C-289, 5 millones de MW, N.F. Grado, Union Carbide,

• Polyox® WSR 303, 7 millones de MW, N.F. Grado, Colorcon

• Avicel®PH-302, celulosa microcristalina, FMC Corporation, Lote # Q939C

• Ethocel® etilcelulosa, Standard 100 premium, Colorcon

• Castorwax®, NF, aceite de ricino hidrogenado, CASCHEM, Lote # 00121431

• Methocel® K100M, hidroxipropil metilcelulosa, grado CR superior, Colorcon

• Klucel® HXAF Pharm., Hidroxipropilcelulosa, 1,15 millones de MW, Division Aqualon, Hercules, Inc.

• Klucel® MF Pharm., Hidroxipropilcelulosa, 850.000 MW, Division Aqualon, Hercules, Inc.

• Cloruro de Sodio, Reactivo ACS Certificado, Fisher Scientific

• Trihidrato de Acetato de Sodio, Reactivo ACS, Fisher Scientific

Procedimiento de Prueba de Liberacion para Tabletas

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El metodo de paleta USP se empleo a 50 RPM de agitacion para todas las pruebas de liberacion de nitrito. Se utilizo un aparato de disolucion de 6 estaciones Vankel® USP. Se utilizo un volumen de 500 ml de agua destilada a 37°C como medio de liberacion en cada recipiente de liberacion.

Los estudios de liberacion de comprimidos se realizaron por duplicado o triplicado para cada formulacion ensayada.

Se tomaron muestras de 35 mL del medio de liberacion de cada recipiente a intervalos de tiempo regulares (tfpicamente 1/2, 1,2, 3, 4 horas (o mas). El medio se relleno con 35 mL de agua destilada.

Al final de una liberacion, los comprimidos se trituraron y se dejo liberar completamente su contenido de nitrito de sodio disuelto para determinar el contenido total de nitrito de sodio en el comprimido.

Ensayo de Liberacion de Nitrito de Sodio

La absorbancia UV a 355 nm se midio con un espectrofotometro UV-visible de matriz de diodos Hewlett- Packard® 8453 para cada muestra de liberacion en una cubeta de cuarzo de 10 cm.

A partir de un grafico de calibracion previamente preparado, se calculo la concentracion de nitrito de sodio en cada muestra y se convirtio en cantidad total y porcentaje liberado para cada comprimido. Se calculo el porcentaje medio de liberacion y la desviacion estandar para dos o tres tabletas administradas simultaneamente. El promedio de porcentaje liberado frente a los perfiles de tiempo se representaron para cada formulacion.

Las formulaciones y perfiles de liberacion de los comprimidos y granulos producidos por los metodos anteriores se exponen en las tablas 1-7.

Tabla 1

Composiciones de tabletas de Polyox (mg/tablet)

Formulacion

Polyox Polyox Avicel Nitrito de Revestimiento de Peso

No.

Coagulante WSR 303 PH 302 Sodio etilcelulosa/triacetina total

1

200 200 100 80 580

9

100 300 100 80 580

9C

100 300 100 80 87 (13% w/w) 667

14

0 400 0 80 - 480

La formulacion 9 C es la misma que la formulacion 9 excepto que se aplico al comprimido un revestimiento al 13% de etilcelulosa 100/triacetina (1/10) a partir de una disolucion de etanol al 95%.

Resultados de la liberacion de la tableta Polyox

Tiempo (horas)

Formulacion 1 %SD Formulacion 9 %SD Formulacion 9C %SD Formulacion 14 %S D

1

41.9% 7.0% 29.1% 8.3% 8.2% 0.4% 33.6% 8.3%

2

54.1% 5.1% 47.9% 9.0% 20.7% 0.8% 59.7% 11.0 %

3

66.2% 3.2% 64.2% 8.3% 34.0% 2.9% 75.5% 9.7%

4

76.9% 2.5% 75.2% 6.3% 48.4% 5.9% 86.4% 6.7%

6

91.0% 0.7% 91.7% 3.7% 74.6% 9.4% 93.5% 2.4%

8

100.0% 0.0% 100.0% 0.0% 100% 9.0% 100.0% 0.0%

Tabla 3

Composiciones de pellets para estudios con animales (mg/pellet)

Formulacion No.

Polyox WSR 303 Castor wax Acetato de Sodio Hid roxi p rop ilcelu losa Nitriro de Sodio Revestimiento de etilcelulosa/triacetina Peso Total

100A

25 5 30

200A

12 6 5 23

300A

25 5 4-5 (11-15% w/w) 34-35

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La formulacion 200A se comprimio dos veces. La primera compresion se realizo a temperatura ambiente. La segunda compresion estaba en el troquel de 3 mm despues de calentar el troquel a 50-60°C en un homo. La formulacion 300A se recubrio por inmersion con una disolucion de revestimiento de etilcelulosa 100/triacetina (4/1) con etanol al 95% como disolvente.

Tabla 4

Las composiciones de tabletas de ricino (mg/comprimido)

Formulacion

Castorwax HPMC Acetato Nitrito Revestimiento Peso

No

(K100M) De Sodio de Sodio Etilcelul osa/Triacetina Total

12

200 200 - 80 - 480

12C

200 200 80 71 (14.8%) 551

13

300 - 100 80 - 480

15

200 - - 80 - 380

15 C1

200 - - 80 36.5 (9.6%) 416.5

15 C2

200 - - 80 16 (4.15%) 396

Claims (7)

1. 5

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   1. Una composicion farmaceutica de liberacion sostenida que comprende de aproximadamente 40 mg a aproximadamente 100 mg de nitrito inorganico, o una sal o solvato farmaceuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmaceuticamente aceptable, en el que la administracion de dicha composicion farmaceutica a un sujeto humano proporciona una liberacion gradual de dicho nitrito inorganico, o una sal o solvato farmaceuticamente aceptable del mismo durante 6-12 horas y da como resultado una concentracion en plasma de iones de nitrito que se mantiene entre 0,05 mM y 10 mM durante hasta 14 horas y en el que dicha composicion farmaceutica se formula para administracion oral administracion.
2. 2. La composicion farmaceutica de acuerdo con la reivindicacion 1, en la que el perfodo de concentracion plasmatica mantenida se produce despues del momento de concentracion plasmatica maxima, o en el que entre 30-50% de dicho ion nitrito se libera en la primera hora y el resto de dicho ion nitrito se libera en las 2 a 14 horas siguientes.
3. 3. La composicion farmaceutica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, en la que dicho ion nitrito se proporciona como NaNO2 o KNO2, preferiblemente en el que dicho ion nitrito se proporciona como NaNO2.
4. 4. La composicion farmaceutica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que comprende ademas un excipiente farmaceuticamente aceptable para la liberacion retardada del nitrito inorganico, de manera que, cuando se administra oralmente a un sujeto humano, el nitrito inorganico no se libera sustancialmente en el estomago de dicho sujeto.
5. 5. Una composicion farmaceutica segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que dicha composicion farmaceutica comprende una capa de revestimiento enterica o de liberacion retardada, y en la que dicha composicion farmaceutica se formula de tal manera que, cuando se administra a un sujeto humano, el nitrito inorganico no es sustancialmente liberado en el estomago de dicho sujeto.
6. 6. La composicion farmaceutica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para su uso en un metodo para tratar o prevenir la isquemia cronica del tejido en un sujeto humano.
7. 7. La composicion farmaceutica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para su uso en un metodo para complementar deficits en nitrito circulante encontrado en un sujeto humano.

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