ES2629420T3 - Método para eliminar un fluido de un contenedor y dispositivo para ello - Google Patents
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Abstract
El método para extraer un líquido (2) de un contenedor (1) que se utiliza en laboratorios con una muestra, y que consiste en proporcionar un contenedor (1) con una muestra compuesta de constituyentes sólidos y un líquido (2), disponer una abertura (4) en el contenedor (1) y posteriormente centrifugar el contenedor (1) para provocar que el líquido (2) salga del contenedor (1), se caracteriza por que la abertura (4) está dispuesta a una distancia del fondo (3) del contenedor (1) que garantiza que las sustancias sólidas permanezcan en el contenedor y lo suficiente cercanas al fondo (3) para permitir que salga sustancialmente todo el líquido.
Description
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DESCRIPCION
Metodo para eliminar un fluido de un contenedor y dispositivo para ello Campo de la invencion
La presente invencion hace referencia a un metodo para extraer un lfquido de un contenedor de manera sencilla. La invencion hace referencia, ademas, a un dispositivo para adecuar un contenedor para su uso en el metodo.
Antecedentes de la invencion
A menudo se realizan una pluralidad de etapas de centrifugacion en muchos procedimientos microbiologicos y biologicos moleculares como, por ejemplo, en el aislamiento del ADN. En estos procedimientos, se centrifuga un contenedor con una muestra en su interior para separar los constituyentes solidos (denominados granulos o residuos) del lfquido (el sobrenadante). Tras la centrifugacion, se extrae el sobrenadante de cada contenedor con muestra. Debido a que a menudo hay mas de una decena de muestras, este procedimiento resulta muy laborioso y requiere mucha atencion, ademas de costosos materiales de plastico desechables como las puntas de pipeta.
Compendio de la invencion
La invencion tiene por objeto proporcionar un metodo para extraer un lfquido, en particular, un sobrenadante, de un tubo de manera mas sencilla. Asimismo, la presente invencion tiene por objeto proporcionar un dispositivo que adapte los contenedores para el uso de este metodo.
El primer objetivo de la invencion se logra mediante un metodo en el que se proporciona un contenedor con una muestra que consiste en constituyentes solidos y un lfquido, y se dispone una abertura en el contenedor para, posteriormente, centrifugarlo de tal forma que el lfquido salga de dicho contenedor.
La abertura se dispone, preferiblemente, a una distancia determinada del fondo del contenedor antes de la etapa de centrifugacion. A continuacion, se centrifuga el contenedor y el lfquido saldra del tubo a traves de la abertura dispuesta, mientras que los granulos se quedan atras. Gracias a la invencion, se hace innecesario que el sobrenadante rebose en la pipeta, por lo que ya no se requiere una etapa de pipeteo.
La posicion de la abertura a cierta distancia del fondo del contenedor garantiza que las sustancias solidas permanezcan en el contenedor y solo el lfquido salga. Esto impide, ademas, el bloqueo de la abertura por los constituyentes solidos de la solucion, tales como componentes celulares o esferas magneticas. La posicion de la abertura se elige, preferiblemente, a una distancia lo bastante cercana al fondo para permitir, en gran medida, que todo el lfquido salga. Sin embargo, la abertura no se realiza, preferiblemente, en el fondo del contenedor.
La disposicion de una abertura en el contenedor puede llevarse a cabo de diversas maneras como, por ejemplo, mediante agujereado, combustion, un chorro de agua, taladrado, etc. En una realizacion especialmente ventajosa, se hace uso de un laser.
Se pueden aplicar diferentes tecnicas para evitar que el lfquido salga de inmediato durante la disposicion de la abertura. Por ejemplo, se puede dar la vuelta a los contenedores para que el fondo quede arriba y no entre en contacto con el lfquido. El lfquido tambien puede quedar inmovilizado temporalmente, por ejemplo, mediante un proceso de congelacion o gelificacion del lfquido. Este ultimo proceso puede llevarse a cabo con alginato de calcio. La gelificacion se puede revertir con la eliminacion de los iones de calcio mediante el citrato sodico o el fosfato sodico, tras lo cual se puede extraer el lfquido por centrifugacion. Vease tambien la obra de O. Smidsr0d, G. Skjak- Braek. 1990. Alginate as immobilization matrix for cells [El alginato como base de inmovilizacion para las celulas]. Tibtech - Vol. 8, Marzo 1990, 71-78.
Se pueden disponer una o mas aberturas por contenedor.
Segun la invencion, un dispositivo comprende medios de perforacion para disponer una abertura en un contenedor con una muestra que consiste en constituyentes solidos y un lfquido. Tambien puede estar presente en el interior del dispositivo un soporte para los contenedores a perforar, aunque dicho soporte tambien puede proporcionarse por separado.
Asimismo, los medios de posicionamiento se proporcionan preferiblemente de una manera ventajosa con los que el contenedor a perforar se pone en contacto con los medios de perforacion. Los medios de perforacion pueden estar formados por todo dispositivo con el que se pueda disponer una abertura en el contenedor. Algunos ejemplos de estos dispositivos son un taladro, un dispositivo de agujereado, un chorro de agua a presion, un elemento de calentamiento, un laser y similares. Se pueden colocar una pluralidad de medios de perforacion unos junto a otros para realizar una pluralidad de aberturas de manera simultanea. Por lo tanto, se puede hacer uso de una especie de cama de clavos en la que los medios de perforacion estan a la misma distancia unos de otros que los contenedores a perforar en la gradilla. Con un solo movimiento, los medios de perforacion, en concreto los medios de agujereado, pueden entonces presionarse de manera simultanea a traves de una pluralidad de tubos.
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Segun una realizacion preferida de la invencion, la abertura se dispone mediante un laser. La ventaja de dicha realizacion radica en que la abertura dispuesta se calienta de manera simultanea. Tampoco entra en contacto ffsico con los tubos. Se evita, por lo tanto, la contaminacion cruzada.
La invencion es adecuada para todos los contenedores de los que ha de extraerse el lfquido mientras que los constituyentes solidos deben permanecer detras. La invencion se utiliza en contenedores utilizados en laboratorios, tales como placas microtituladoras, tubos de reaccion, tambien conocidos como tubos Eppendorf, pocillos profundos, tubos de ensayo, etc. Los contenedores pueden fabricarse a partir de diversos materiales como plastico o vidrio.
En una realizacion espedfica, la invencion comprende los denominados pocillos profundos a perforar a una determinada altura con un laser. Dichos contenedores se utilizan mucho, por ejemplo, en trabajos de microbiologfa y biologfa molecular.
La perforacion se realiza, por ejemplo, varios mm por encima del fondo. Los residuos llegan a descansar en el fondo del tubo y la abertura debe estar por encima de estos. Despues de realizar el agujero con el laser, los pocillos profundos se colocan en una centnfuga, tras lo cual el sobrenadante entra en la gradilla que rodea los pocillos profundos durante la centrifugacion.
La invencion se ilustra, ademas, en las figuras adjuntas.
La Fig. 1 muestra el principio de la invencion.
La Fig. 2 muestra una vista en perspectiva de un dispositivo segun la invencion.
La Fig. 3 muestra una vista detallada del dispositivo de la Fig. 2.
La Fig. 4 muestra una vista en perspectiva con partes despiezadas del soporte de los contenedores a perforar.
La Fig. 1A muestra un contenedor invertido 1 con lfquido 2. Una abertura 4 se dispone, a continuacion, a cierta distancia del fondo 3 mediante un rayo laser 5 (Fig. 1B). A continuacion, se le da la vuelta al contenedor (Fig. 1C) y se coloca en una centnfuga tal y como se indica esquematicamente con una flecha 6, por lo que el lfquido 2 en el tubo sale a traves de la abertura 4 (Fig. 1D).
La Fig. 2 muestra una vista en perspectiva de un dispositivo segun la invencion. Colocado sobre un bastidor 9, hay un tablero 10 sobre el cual esta previsto un alojamiento de proteccion 12 equipado con una cubierta de acceso 11. Situado en el alojamiento, hay un dispositivo laser 13 que produce un rayo laser 14. Se coloca una gradilla 15 para que los contenedores 16 a perforar esten en la trayectoria del rayo laser 14. La posicion de la gradilla 15 con contenedores 16 se controla mediante celulas fotoelectricas 17.
El laser utilizado proviene, por ejemplo, de la empresa Synrad Inc., Mukilteo, Washington, EE. UU., y es del tipo Synrad 25W Laser de marcado FSV25SFB con cabezal de marcado inteligente; tamano del campo 110x100 (FH30- 200).
Los tubos y soportes que pueden utilizarse en la maquina mostrada provienen, por ejemplo, de la empresa Matrix Technologies Corp., Hudson, NH, EE.UU. Los pocillos profundos son, por ejemplo, tubos correspondientes al artfculo 4430 segun el catalogo. El soporte es, por ejemplo, un Snaprack (artfculo 4893).
La Fig. 3 muestra el posicionamiento de la gradilla 15 mediante un dispositivo de posicionamiento 19 que consiste en dos carros 20 y 21 moviles uno respecto del otro. El carro 20 puede moverse en direccion X y el carro 21 en direccion Y. Como se muestra en la Fig.2, el dispositivo de posicionamiento 19 esta situado durante el uso bajo el tablero 10 provisto de un hueco 18, a traves del cual sobresale la gradilla 15 con contenedores 16. El dispositivo laser 13 produce un rayo laser 14 que incide a traves de la unidad de espejo 22 sobre el contenedor y dispone allf una abertura.
Para disponer las aberturas en el lugar correcto, se desea un posicionamiento preciso de los contenedores. La Fig. 4 muestra la gradilla 15 para los contenedores 16 a perforar, con una parte del dispositivo de posicionamiento 19. La gradilla 15, en la que se colocan los tubos al reves, esta fijada sobre una plataforma 22. Situados sobre la plataforma 22, hay pasadores de centrado 23 que aseguran que la gradilla este posicionada correctamente con respecto al dispositivo laser. Los propios contenedores se mantienen en la posicion correcta mediante un bloque separador 24 provisto de huecos para recibir los contenedores. La plataforma 22 esta montada sobre uno de los carros 20 del dispositivo de posicionamiento 19 a traves de un bloque de relleno 25.
El dispositivo mostrado en las figuras es tan solo una realizacion del dispositivo segun la invencion. Muchas variaciones del mismo principio son posibles y todas forman parte de la invencion.
Claims (6)
- REIVINDICACIONES1. El metodo para extraer un Kquido (2) de un contenedor (1) que se utiliza en laboratorios con una muestra, y que consiste en proporcionar un contenedor (1) con una muestra compuesta de constituyentes solidos y un Ifquido (2), disponer una abertura (4) en el contenedor (1) y posteriormente centrifugar el contenedor (1) para provocar que el5 lfquido (2) salga del contenedor (1), se caracteriza por que la abertura (4) esta dispuesta a una distancia del fondo (3) del contenedor (1) que garantiza que las sustancias solidas permanezcan en el contenedor y lo suficiente cercanas al fondo (3) para permitir que salga sustancialmente todo el lfquido.
- 2. El metodo segun se reivindica en la reivindicacion 1 se caracteriza por que la abertura (4) esta dispuesta mediante agujereado, combustion, chorro de agua, taladrado, laser.10 3. El metodo segun se reivindica en las reivindicaciones 1 o 2 se caracteriza por que se evita la salida precipitada dellfquido (2) al colocar el contenedor (1) al reves de la disposicion de la abertura (4).
- 4. El metodo segun se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2 se caracteriza por que el lfquido (2) del contenedor (1) se inmoviliza antes de disponer la abertura (4), y la inmovilizacion se revierte antes de la centrifugacion.15 5. El metodo segun se reivindica en la reivindicacion 4 se caracteriza por que el lfquido (2) queda inmovilizadomediante un proceso de congelacion y la inmovilizacion se revierte mediante el calentamiento.
- 6. El metodo segun se reivindica en la reivindicacion 4 se caracteriza por que el lfquido (2) queda inmovilizado mediante un proceso de gelificacion.
- 7. El metodo segun se reivindica en la reivindicacion 6 se caracteriza por que la gelificacion se realiza mediante el 20 alginato de calcio, y la gelificacion se revierte mediante la eliminacion de los iones de calcio, por ejemplo, con elcitrato sodico o el fosfato sodico.
- 8. En el metodo segun se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde el lfquido es un sobrenadante.
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