ES2579941T3 - Composiciones farmacéuticas de ligandos del receptor de secretagogos de la hormona del crecimiento - Google Patents

Composiciones farmacéuticas de ligandos del receptor de secretagogos de la hormona del crecimiento Download PDF

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Abstract

Una composición farmacéutica de una solución transparente, que comprende un péptido que actúa como un ligando del receptor de GHS, en donde el péptido es H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe-Apc-NH2, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, en el que el péptido forma un depósito in situ después de la administración subcutánea o intramuscular a un sujeto, en donde la composición farmacéutica comprende además PEG, en donde dicho péptido está en forma de una sal pamoato, y en donde dicha solución transparente es una solución acuosa.

Description

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DESCRIPCION
Composiciones farmaceuticas de ligandos del receptor de secretagogos de la hormona del crecimiento Antecedentes de la invencion
La presente invencion se refiere a mejoras en las composiciones que contienen peptidos que son ligandos del receptor de secretagogos de la hormona del crecimiento (GHS), o sus sales farmaceuticamente aceptables, metodos para preparar tales composiciones, y metodos para utilizar tales composiciones para tratar mairnferos. En particular, la presente invencion se refiere a una composicion farmaceutica que comprende una sal pamoato de H- Inp-D-Bal-D-Tip-Phe-Apc-NH2, que es un ligando del receptor del GHS, y en el que, despues de la administracion subcutanea o intramuscular a un sujeto, el peptido forma un deposito in situ a pH fisiologico que se disuelve lentamente y se libera en el fluido corporal y en la corriente sangumea. La presente composicion de la invencion comprende ademas polietilenglicol. El polietilenglicol puede tener un peso molecular medio menor de 1.000.
La liberacion pulsatil de la hormona del crecimiento desde los somatotropos de la pituitaria es regulada por dos neuropeptidos hipotalamicos: la hormona liberadora de la hormona del crecimiento y somatostatina. La hormona liberadora de la hormona del crecimiento estimula la liberacion de la hormona del crecimiento, mientras, la somatostatina inhibe la secrecion de la hormona del crecimiento (Frohman et al., Endocr. Rev. 1986, 7, 223-253, y Strobi et al., Pharmacol. Rev. 1994, 46, 1-34).
La liberacion de la hormona del crecimiento desde los somatotropos de la pituitaria se puede controlar tambien mediante los peptidos que liberan la hormona del crecimiento (los GHRP). Se encontro que un hexapeptido, His-D- Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-amida (GHRP-6), libera la hormona del crecimiento desde los somatotropos en una manera que depende de la dosis en varias especies incluido el hombre (Bowers et al., Endocrinology 1984, 114, 1537-1545). Estudios qmmicos posteriores sobre GHRP-6 llevaron a la identificacion de otros potentes secretagogos de la hormona del crecimiento tal como GHRP-1, GHRP-2 y hexarrelina (Cheng et al., Endocrinology 1989, 124, 27912798, Bowers, C. Y. Novel GH-Releasing Peptides. En: Molecular and Clinical Advances in Pituitary Disorders. Ed: Melmed, S.; Endocrine Research and Education, Inc., Los Angeles, CA, EE.UU. 1993, 153-157, y Deghenghi et al., Life Sci. 1994, 54, 1321-1328):
GHRP-1 Ala-His-D-(2')-Nal-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2;
GHRP-2 D-Ala-D-(2')-Nal-Ala-Trp-D-Nal-Lys-NH2;
Hexarrelina His-D-2-MeTip-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2.
GHRP-1, GHRP-2, GHRP-6 y hexarrelina son secretagogos de la hormona del crecimiento (GHS) sintetica. Los GHS estimulan la secrecion de la hormona del crecimiento mediante un mecanismo diferente al de la hormona que libera la hormona del crecimiento (Bowers et al., Endocrinology 1984, 114, 1537-1545, Cheng et al., Endocrinology 1989, 124, 2791-2798, Bowers, C. Y. Novel GH-Releasing Peptides. En: Molecular and Clinical Advances in Pituitary Disorders. Ed: Melmed, S.; Endocrine Research and Education, Inc., Los Angeles, CA, EE.UU. 1993, 153-157, y Deghenghi et al., Life Sci. 1994, 54, 1321-1328).
La baja biodisponibilidad oral (<1%) de los secretagogos de la hormona del crecimiento peptidilo estimulo la busqueda de compuestos peptfdicos que imitan la accion de GHRP-6 en la pituitaria. Se ha informado de que varias benzolactamas y espiroindanos estimulan la liberacion de la hormona del crecimiento en varias especies animales y en el hombre (Smith et al., Science 1993, 260, 1640-1643, Patchett et al., Proc. Natl Acad. Sci. EE.UU. 1995, 92, 7001-7005, y Chen et al., Bioorg. Mod. Chem. Lett. 1996, 6, 2163-2169). Un ejemplo espedfico de un pequeno espiroindano es MK-0677 (Patchett et al., Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU. 1995, 92, 7001-7005):
imagen1
Las acciones de los GHS anteriormente mencionados (tanto peptido como no peptido) parece que son mediadas por un receptor de secretagogo de la hormona del crecimiento espedfico (receptor de GHS) (Howard et al., Science 1996, 273, 974-977, y Pong et al., Molecular Endocrinology 1996, 10, 57-61). Este receptor esta presente en la pituitaria y en el hipotalamo de varias especies de mai^eras (GHSR1a) y es distinto del receptor de la hormona liberadora de la hormona del crecimiento (GHRH). El receptor de GHS tambien se detecto en otras zonas del sistema nervioso central y en tejidos perifericos, por ejemplo, en glandulas adrenales y tiroideas, corazon, pulmon, rinon y musculos esqueleticos (Chen et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1996, 6, 2163-2169, Howard et al., Science 1996,273, 974-977, Pong et al., Molecular Endocrinology 1996, 10, 57-61, Guan et al., Mol. Brain Res. 1997, 48, 23-
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29, y McKee et al., Genomics 1997, 46, 426-434). Se ha informado de una version truncada de GHSRIa (Howard et al., Science 1996, 273, 974-977).
El receptor de GHS es un receptor acoplado a protema G. Los efectos de la activacion del receptor de GHS incluyen la despolarizacion y la inhibicion de canales de potasio, un aumento en las concentraciones intercelulares de trifosfato de inositol (IP3), y un aumento transitorio en las concentraciones de calcio intracelular (Pong et al., Molecular Endocrinology 1996,10, 57-61, Guan et al., Mol. Brain Res. 1997, 48, 23-29, y McKee et al., Genomics 1997, 46, 426-434).
La ghrelina es un peptido de origen natural que se cree que es un ligando endogeno del receptor de GHS (Kojima et al., Nature 1999, 402, 656-660). Se conocen las estructuras nativas de las ghrelinas de varias especies de animales mairnferos y no mairnferos (Kaiya et al., J. Biol. Chem. 2001, 276, 40441-40448; solicitud de patente internacional PCT/JP00/04907 (WO 01/07475)). Se encontro que una zona central presente en la ghrelina proporcionaba la actividad en el receptor de GHS. La zona central comprende los cuatro aminoacidos N-terminales, donde la serina en posicion 3 es normalmente modificada con acido n-octanoico. Ademas de la acilacion mediante acido n-octanoico se ha observado que la ghrelina natural tambien es acilada con acido n-decanoico (Kaiya et al., J. Biol. Chem. 2001, 276, 40441-40448). Analogos de la ghrelina tienen una variedad de usos terapeuticos diferentes asf como usos como herramientas de investigacion.
Compendio de la invencion
La presente descripcion proporciona la formulacion de una composicion farmaceutica que comprende una sal pamoato de un peptido que actua como un ligando del receptor de GHS. Particularmente, el peptido es el siguiente peptido que se denomina en lo sucesivo "Ejemplo 1": H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe-Apc-NH2, que es un ligando del receptor de GHS, en donde, despues de la administracion subcutanea o intramuscular a un sujeto, el peptido forma un precipitado a pH fisiologico que se disuelve lentamente y se libera en el fluido corporal y en la corriente sangumea, en el que da como resultado efectos secundarios atenuados y una mejorada eficacia.
En consecuencia, la invencion proporciona una composicion farmaceutica de una solucion transparente, que comprende un peptido que actua como un ligando del receptor del GHS, en donde el peptido es H-Inp-D-Bal-D-Trp- Phe-Apc-NH2, o una sal del mismo farmaceuticamente aceptable, en el que el peptido forma un deposito in situ despues de la administracion subcutanea o intramuscular a un sujeto, en donde la composicion farmaceutica comprende ademas PEG, en donde dicho peptido esta en forma de una sal pamoato, y en donde dicha solucion transparente es una solucion acuosa. La invencion se define ademas en las reivindicaciones.
La descripcion del presente documento puede resumirse, a continuacion, en los siguientes apartados, asf como tambien en las reivindicaciones.
(1) En un aspecto, la presente descripcion se refiere a una composicion farmaceutica de una solucion transparente, un gel o un semisolido o una suspension, que comprende un peptido que actua como un ligando del receptor del GHS, o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, en el que el peptido forma un precipitado despues de la administracion subcutanea o intramuscular a un sujeto.
(2) La composicion farmaceutica segun el apartado 1, en donde dicho peptido en dicha solucion transparente precipita in vivo para formar un deposito in situ que se disuelve lentamente y se libera en el fluido corporal y en la corriente sangumea, y en donde dicha solucion transparente es una solucion totalmente acuosa, una solucion totalmente organica, o una solucion acuosa que tiene un componente organico.
(3) La composicion farmaceutica segun el apartado 1 o el apartado 2, en donde dicho peptido es el Ejemplo 1, es decir, H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe-Apc-NH2.
(4) La composicion farmaceutica segun uno cualquiera de los apartados precedentes, en donde dicho peptido esta en forma de una sal pamoato.
(5) La composicion farmaceutica segun uno cualquiera de los apartados precedentes, que comprende ademas un componente organico que aumenta la solubilidad de dicho peptido en una solucion acuosa o disminuye la viscosidad de un gel o de un semisolido.
(6) La composicion farmaceutica segun el apartado 5, en donde dicho componente organico es un polfmero organico, un alcohol, DMSO, DMF o dimetilacetamida (DMA).
(7) La composicion farmaceutica segun el apartado 6, en donde dicho polfmero organico es PEG.
(8) La composicion farmaceutica segun el apartado 7, en donde dicho PEG tiene un peso molecular medio de desde aproximadamente 200 a aproximadamente 10.000.
(9) La composicion farmaceutica segun el apartado 8, en donde dicho peptido esta disuelto en una solucion acuosa de PEG200 o PEG400, en la que la relacion volumen/volumen de PEG frente a agua es desde aproximadamente 1:99 hasta aproximadamente 99:1.
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(10) La composicion farmaceutica segun el apartado 9, en donde dicho peptido esta disuelto en una solucion acuosa de PEG200 o PEG400, en la que la relacion volumen/volumen de PEG frente a agua es desde aproximadamente 1:9 hasta aproximadamente 1:1.
(11) La composicion farmaceutica segun el apartado 6, en donde dicho alcohol es etanol o alcohol isopropflico.
(12) La composicion farmaceutica segun uno cualquiera de los apartados precedentes, en donde la concentracion peso/volumen de dicho peptido esta entre aproximadamente 0,1 mg/ml y aproximadamente 600 mg/ml.
(13) La composicion farmaceutica segun uno cualquiera de los apartados precedentes, en donde el pH de dicha composicion esta entre aproximadamente 3,0 y aproximadamente 8,0.
(14) La composicion farmaceutica segun el apartado 13, en donde dicha sal pamoato de H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe- Apc-NH2 esta disuelta en solucion acuosa de PEG400, en el que la relacion volumen/volumen de PEG400 frente a agua es aproximadamente 1:1, y en la que la concentracion peso/volumen del peptido es aproximadamente 200 mg/ml.
(15) La composicion farmaceutica segun el apartado 13, en donde dicha sal pamoato de H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe- Apc-NH2 esta disuelta en PEG200/solucion acuosa, en el que la relacion volumen/volumen de PEG200 frente a agua es aproximadamente 1:1, y en la que la concentracion peso/volumen del peptido es aproximadamente 200 mg/ml.
(16) La composicion farmaceutica segun el apartado 13, en donde dicha sal pamoato de H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe- Apc-NH2 esta disuelta en PEG400/solucion de PBS, en la que la relacion volumen/volumen de PEG400 frente a PBS es aproximadamente 1:1, y en la que la concentracion peso/volumen del peptido es aproximadamente 300 mg/ml.
(17) La composicion farmaceutica segun el apartado 13, en donde dicha sal pamoato de H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe- Apc-NH2 esta disuelta en PEG400/solucion salina, en la que la relacion volumen/volumen de PEG400 frente a solucion salina es aproximadamente 1:1, y en la que la concentracion peso/volumen del peptido es aproximadamente 300 mg/ml.
(18) La composicion farmaceutica segun uno cualquiera de los apartados precedentes, que comprende ademas un conservante.
(19) La composicion farmaceutica segun el apartado 18, en donde dicho conservante se selecciona del grupo que consiste en m-cresol, fenol, alcohol bendlico y metilparabeno.
(20) La composicion farmaceutica segun el apartado 19, en donde dicho conservante esta presente en una concentracion desde aproximadamente 0,01 mg/ml hasta aproximadamente 100 mg/ml.
(21) La composicion farmaceutica segun uno cualquiera de los apartados precedentes, que comprende ademas un agente isotonico.
(22) La composicion farmaceutica segun el apartado 21, en donde dicho agente isotonico esta presente en una concentracion desde aproximadamente 0,01 mg/ml hasta aproximadamente 100 mg/ml.
(1) La composicion farmaceutica segun uno cualquiera de los apartados precedentes, que comprende ademas un estabilizante.
(2) La composicion farmaceutica segun el apartado 23, en donde dicho estabilizante se selecciona del grupo que consiste en imidazol, arginina e histidina.
(3) La composicion farmaceutica segun uno cualquiera de los apartados precedentes, que comprende ademas un tensioactivo.
(4) La composicion farmaceutica segun uno cualquiera de los apartados precedentes, que comprende ademas un agente quelante.
(5) La composicion farmaceutica segun uno cualquiera de los apartados precedentes, que comprende ademas un tampon.
(6) La composicion farmaceutica segun el apartado 27, en donde dicho tampon se selecciona del grupo que consiste en Tris, acetato de amonio, acetato sodico, glicina, acido aspartico y Bis-Tris.
(7) La composicion farmaceutica segun uno cualquiera de los apartados precedentes, que comprende ademas un metal divalente.
(8) La composicion farmaceutica segun el apartado 29, en donde dicho metal divalente es zinc.
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Los siguientes compuestos tambien pueden emplearse ventajosamente para constituir las farmaceuticas de la presente divulgacion:
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2: H-Inp-D-1Nal-D-Trp-3Pal-Lys-NH2;
3: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-4Pal-Lys-NH2;
4: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Orn-Lys-NH2;
5: H-Inp-D-Bip-D-Trp-Phe-Lys-NH2;
6: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Thr(Bzl)-Lys-NH2; 7: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Pff-Lys-NH2;
8: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2;
9: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Taz-Lys-NH2;
10: H-Inp-D-Dip-D-Trp-Phe-Lys-NH2;
11: H-Inp-D-Bpa-D-Trp-Phe-Lys-NH2;
12: H-Inp-D-2Nal-D-Bpa-Phe-Lys-NH2; 13: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-3Pal-NH2;
14: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-4Pal-NH2;
15: H-Inp-D-1Nal-D-Trp-3Pal-NH2;
16: H-Inp-D-Bip-D-Trp-Phe-NH2;
17: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Thr(Bzl)-NH2;
18: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Pff-NH2;
19: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-2Thi-NH2;
20: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Taz-NH2;
21: H-Inp-D-Dip-D-Trp-Phe-NH2;
22: H-Inp-D-2Nal-D-Dip-Phe-NH2;
23: H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe-NH2;
24: H-Inp-D-2Nal-D-Bal-Phe-NH2;
25: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-3Pal-Lys-NH2; 26: H-Inp-D-Bal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2;
27: H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe-Lys-NH2;
28: H-Inp-D-1Nal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2; 29: H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Phe-Apc-NH2; 30: H-Inp-D-1Nal-D-Trp-Phe-Apc-NH2; 31: H-Apc-D-2Nal-D-Trp-Phe-Lys-NH2; 32: H-Apc-D-1Nal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2; 33: H-Inp-D-1Nal-D-Trp-2Thi-NH2;
34: H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Phe-NH2;
35: H-Inp-D-1Nal-D-Trp-Taz-Lys-NH2;
36: H-Inp-D-Bal-D-Trp-Taz-Lys-NH2;
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Ejemplo 37: H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Taz-Lys-NH2;
Ejemplo 38: H-Apc-D-Bal-D-Trp-Taz-Lys-NH2;
Ejemplo 39: H-Apc-D-Bal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2;
Ejemplo 40: H-Inp-D-1Nal-D-Trp-2Thi-Apc-NH2;
Ejemplo 41: H-Inp-D-Bal-D-Trp-2Thi-Apc-NH2;
Ejemplo 42: H-Apc-D-1Nal-D-Trp-2Thi-Apc-NH2;
Ejemplo 43: H-Apc-D-Bal-D-Trp-2Thi-Apc-NH2;
Ejemplo 44: H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Phe-Lys-NH2;
Ejemplo 45: H-Apc-D-Bal-D-Trp-Phe-Lys-NH2;
Ejemplo 46: H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Phe-Apc-NH2;
Ejemplo 47: H-Apc-D-Bal-D-Trp-Phe-Apc-NH2;
Ejemplo 48: H-Apc-D-1Nal-D-1Nal-Phe-Apc-NH2;
Ejemplo 49: H-Apc-D-1Nal-D-2Nal-Phe-Apc-NH2;
Ejemplo 50: H-Apc-D-1Nal-D-1Nal-Phe-Lys-NH2;
Ejemplo 51: H-Apc-D-Bal-D-1Nal-Phe-Apc-NH2;
Ejemplo 52: H-Apc-D-Bal-D-2Nal-Phe-Apc-NH2;
Ejemplo 53: H-Apc-D-Bal-D-1Nal-Phe-Lys-NH2;
Ejemplo 54: H-Apc-D-Bal-D-2Nal-Phe-Lys-NH2;
Ejemplo 55: H-Apc-D-1Nal-D-Trp-2Thi-NH2;
Ejemplo 56: H-Apc-D-Bal-D-Trp-Phe-NH2;
Ejemplo 57: H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Taz-NH2;
Ejemplo 58: H-Apc-D-Bal-D-Trp-2Thi-NH2;
Ejemplo 59: H-Apc-D-Bal-D-Trp-Taz-NH2;
Ejemplo 60: H-Apc-D-2Nal-D-Trp-2Thi-NH2;
Ejemplo 61: H-Apc-D-2Nal-D-Trp-Taz-NH2;
Ejemplo 62: H-Inp-D-1Nal-D-Trp-Taz-Apc-NH2;
Ejemplo 63: H-Inp-D-Bal-D-Trp-Taz-Apc-NH2;
Ejemplo 64: H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Taz-Apc-NH2;
Ejemplo 65: H-Apc-D-Bal-D-Trp-Taz-Apc-NH2;
Ejemplo 66: H-Inp-D-2Nal-D-Trp(^)-Pim;
Ejemplo 67: H-Inp-D-1Nal-D-Trp(^)-Pim;
Ejemplo 68: H-Inp-D-Bal-D-Trp(^)-Pim;
Ejemplo 69: H-Aib-D-Ser(Bzl)-D-Trp(^)-Pim; y Ejemplo 70: H-Inp-D-Trp-D-2Nal(^)-Pim.
Breve descripcion de los dibujos
La FIG. 1A y la FIG. 1B muestran graficos de recorrido a tiempo completo de los perfiles farmacocineticos (valores de la mediana) obtenidos despues de una unica administracion subcutanea a ratas de Sprague-Dawley dosificadas
a 2,5 mg/kg de peso corporal, de una formulacion que comprende 200 mg/ml (20 % peso/vol) de una sal pamoate del Ejemplo 1 disuelta en 50 % de PEG200 y 50 % de disolvente agua (v/v), a escala normal y a escala logantmica, respectivamente.
La FIG. 2 muestra un grafico de comparacion de diferentes formulaciones del Ejemplo 1 dosificadas mediante 5 inyecciones subcutaneas.
Descripcion detallada de la invencion
La nomenclatura usada para definir los peptidos en el presente documento es la normalmente utilizada en la tecnica en donde el grupo amino en el N-terminal aparece a la izquierda y el grupo carboxilo en el C-terminal aparece a la derecha. Cuando el aminoacido tiene formas isomeras, es la forma L del aminoacido la que se representa a menos 10 que se indique explteitamente lo contrario. A menos que se defina lo contrario, todos los terminos tecnicos y cientfficos empleados en el presente documento tienen el mismo significado que el que entiende normalmente el experto corriente en la tecnica a la que pertenece esta invencion.
Las abreviaturas utilizadas en el presente documento se definen a continuacion:
Apc
acido aminopiperidinilcarboxflico, es decir, -db '-----' NH /
Bal
3-benzotienilalanina, es decir, 1 o .
Bip
4,4'-bifenilalanina, es decir, O .
Bpa
4-benzoilfenilalanina, es decir, o Ou ' o .
Dip
p,p-difenilalanina, es decir,
Inp
acido isonipecotico, es decir,
Lys o K
lisina
1Nal
p-(1-naftil)alanina:
2Nal
p-(2-naftil)alanina;
Orn
ornitina
3Pal
p-(3-piridil)-alanina, es decir, o .
4Pal
p-(4-piridil)-alanina, es decir, • H II ' O .
Pff
pentafluorofenilalanina, es decir, F ’ O .
Phe o F
fenilalanina
Pim
2'-(4-fenil)imidazolilo, es decir,
Ser o S
serina
Taz
p-(4-tiazolil)alanina, es decir, N=r, /Vs rH in O .
2Thi
p-(2-tienil)alanina, es decir, ‘ H II '' 0 .
Thr o T
treonina
Trp o W
triptofano
Algunas otras abreviaturas utilizadas en el presente documento se definen a continuacion:
BSA:
seroalbumina bovina
DMF:
dimetilformamida
HPLC:
cromatograffa lfquida de alto rendimiento
Pamoato sodico:
sal disodica del acido pamoico que tiene la estructura de
COO- Xai r~(3~a' COO- \a+
LC-MS:
cromatograffa lfquida-espectrometna de masas
LOQ:
lfmite de cuantificacion
MRM:
control de la reaccion multiple
PEG:
poli(etilenglicol), que tiene la estructura de , en donde n es un numero entero entre 1 y 2.000
PEG200:
poli(etilenglicol) con un peso molecular medio de aproximadamente 200 Da
PEG400:
poli(etilenglicol) con un peso molecular medio de aproximadamente 400 Da
Tris-HCl:
tris(hidroximetil)aminometano hidrocloruro
Salvo que sea evidente lo contrario, las abreviaturas (p. ej., Ala) de aminoacidos en esta descripcion representan la estructura de -NH-C(R)(R')-CO-, en donde R y R' son, cada uno independientemente, hidrogeno o la cadena lateral 5 de un aminoacido (p. ej., R = CH3 y R' = H para Ala), o R y R' pueden estar unidos formando un sistema de anillo.
Cuando un resto imidazol no aminoacido (p. ej., Pim, definido anteriormente) esta presente en el C-terminal de un compuesto de la invencion se comprende que el resto imidazol esta unido al aminoacido adyacente a traves de un enlace pseudopeptfdico, en donde se forma un enlace entre el carbono en la posicion 2 del anillo de imidazol y el carbono alfa del aminoacido. Por ejemplo, en el caso en el que el aminoacido adyacente es D-triptofano (D-Trp) y el 10 resto imidazol es Pim, el C-terminal del peptido aparecena de la forma siguiente:
imagen2
Para claridad, en la formula escrita para un compuesto de este tipo la presencia de este enlace se indica mediante la letra griega "V sola entre parentesis. Por ejemplo, la formula escrita H-Inp-D-Trp-D-2Nal(^)-Pim indica la estructura:
imagen3
Smtesis
Los peptidos de esta descripcion se pueden preparar utilizando las tecnicas descritas en WO 2004/014415, en las paginas 34-42. Ademas, ejemplos de tecnicas de las smtesis bioqmmicas que suponen la introduccion de un acido 5 nucleico en una celula y la expresion de acidos nucleicos se proporcionan en Ausubel, Current Protocol in Molecular Biology, John Wiley, 1987-1998, y Sambrook et al., in Molecular-Cloning, A Laboratory Manual, 2a Edicion, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989. Tambien son muy conocidas en la tecnica las tecnicas de la smtesis qmmica de polipeptidos (vease, p. ej., Vincent in Peptide and Protein Drug Delivery, Nueva York, N.Y., Dekker, 1990). Por ejemplo, los peptidos de esta invencion se pueden preparar mediante smtesis estandar de peptidos en fase solida 10 (vease, p. ej., Stewart, J. M., et al., Solid Phase Synthesis (Pierce Chemical Co., 2a ed. 1984)). Los datos ffsicos de los peptidos de ejemplo se dan en la Tabla 1.
Tabla 1
Ej. n.°
Secuencia Peso mol. (Calc.) Peso mol. (MS-ES) Pureza (%)
1
H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe-Apc-NH2 790,99 790,4 97
2
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-3Pal-Lys-NH2 787,96 787,4 96
3
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-4Pal-Lys-NH2 787,96 787,4 99
4
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Orn-Lys-NH2 753,94 753,4 98
5
H-Inp-D-Bip-D-Trp-Phe-Lys-NH2 813,01 812,4 99
6
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Thr(Bzl)-Lys-NH2 831,03 830,4 98
7
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Pff-Lys-NH2 876,92 876,3 98
8
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Thi-Lys-NH2 793,00 792,4 98
9
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Taz-Lys-NH2 793,99 793,4 97
10
H-Inp-D-Dip-D-Trp-Phe-Lys-NH2 813,01 812,4 98
11
H-Inp-D-Bpa-D-Trp-Phe-Lys-NH2 841,02 840,4 95
12
H-Inp-D-2Nal-D-Bpa-Phe-Lys-NH2 852,04 851,3 99
13
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-3Pal-NH2 659,79 659,3 99
14
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-4Pal-NH2 659,79 659,3 98
15
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-3Pal-NH2 659,79 659,3 98
16
H-Inp-D-Bip-D-Trp-Phe-NH2 684,84 684,3 99
Ej. n.°
Secuencia Peso mol. (Calc.) Peso mol. (MS-ES) Pureza (%)
17
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Thr(Bzl)-NH2 702,85 702,3 99
18
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Pff-NH2 748,75 748,2 99
19
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-2Thi-NH2 664,83 664,2 99
20
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Taz-NH2 665,82 665,3 98
21
H-Inp-D-Dip-D-Trp-Phe-NH2 684,84 684,3 98
22
H-Inp-D-2Nal-D-Dip-Phe-NH2 695,86 695,3 99
23
H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe-NH2 664,83 664,3 97
24
H-Inp-D-2Nal-D-Bal-Phe-NH2 675,85 675,2 99
25
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-3Pal-Lys-NH2 787,96 787,5 97
26
H-Inp-D-Bal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2 799,03 798,4 99
27
H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe-Lys-NH2 793,00 792,4 99
28
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2 793,00 792,4 99
29
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Phe-Apc-NH2 784,96 784,4 98
30
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-Phe-Apc-NH2 784,96 784,4 98
31
H-Apc-D-2Nal-D-Trp-Phe-Lys-NH2 801,99 801,4 98
32
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2 808,02 807,4 99
33
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-2Thi-NH2 664,83 664,2 98
34
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Phe-NH2 673,81 673,3 99
35
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-Taz-Lys-NH2 793,99 793,5 99
36
H-Inp-D-Bal-D-Trp-Taz-Lys-NH2 800,02 799,4 99
37
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Taz-Lys-NH2 809,00 808,5 99
38
H-Apc-D-Bal-D-Trp-Taz-Lys-NH2 815,03 814,4 99
39
H-Apc-D-Bal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2 814,04 813,4 98
40
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-2Thi-Apc-NH2 790,99 790,5 97
41
H-Inp-D-Bal-D-Trp-2Thi-Apc-NH2 797,01 796,4 97
42
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-2Thi-Apc-NH2 806,00 805,5 97
Ej. n.°
Secuencia Peso mol. (Calc.) Peso mol. (MS-ES) Pureza (%)
43
H-Apc-D-Bal-D-Trp-2Thi-Apc-NH2 812,03 811,4 98
44
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Phe-Lys-NH2 801,99 801,5 98
45
H-Apc-D-Bal-D-Trp-Phe-Lys-NH2 808,02 807,5 99
46
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Phe-Apc-NH2 799,97 799,5 98
47
H-Apc-D-Bal-D-Trp-Phe-Apc-NH2 806,00 805,5 98
48
H-Apc-D-1Nal-D-1Nal-Phe-Apc-NH2 811,00 810,5 95
49
H-Apc-D-1Nal-D-2Nal-Phe-Apc-NH2 811,00 810,5 96
50
H-Apc-D-1Nal-D-1Nal-Phe-Lys-NH2 813,01 812,5 99
51
H-Apc-D-Bal-D-1Nal-Phe-Apc-NH2 817,02 816,5 96
52
H-Apc-D-Bal-D-2Nal-Phe-Apc-NH2 817,02 816,5 94
53
H-Apc-D-Bal-D-1Nal-Phe-Lys-NH2 819,04 818,5 99
54
H-Apc-D-Bal-D-2Nal-Phe-Lys-NH2 819,04 818,5 98
55
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-2Thi-NH2 679,84 679,2 98
56
H-Apc-D-Bal-D-Trp-Phe-NH2 679,84 679,3 99
57
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Taz-NH2 680,83 680,3 99
58
H-Apc-D-Bal-D-Trp-2Thi-NH2 685,87 685,2 97
59
H-Apc-D-Bal-D-Trp-Taz-NH2 686,86 686,2 99
60
H-Apc-D-2Nal-D-Trp-2Thi-NH2 679,84 679,2 95
61
H-Apc-D-2Nal-D-Trp-Taz-NH2 680,83 680,2 97
62
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-Taz-Apc-NH2 791,97 791,5 98
63
H-Inp-D-Bal-D-Trp-Taz-Apc-NH2 798,00 797,4 99
64
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Taz-Apc-NH2 806,99 806,5 99
65
H-Apc-D-Bal-D-Trp-Taz-Apc-NH2 813,02 812,4 98
66
H-Inp-D-2Nal-D-Trp(^)-Pim 610,77 611,4 99
67
H-Inp-D-1Nal-D-Trp(^)-Pim 610,77 611,3 99
68
H-Inp-D-Bal-D-Trp(^)-Pim 616,79 617,3 99
5
10
15
20
25
Ej. n.°
Secuencia Peso mol. (Calc.) Peso mol. (MS-ES) Pureza (%)
69
H-Aib-D-Ser(Bzl)-D-Trp(^)-Pim 564,69 565,3 99
70
H-Inp-D-Trp-D-2Nal(^)-Pim 610,77 611,4 99
• Preparacion de sal pamoate del Ejemplo 1
La sal acetato del Ejemplo 1 (200 mg, 0,22 mmol) se disolvio en 10 ml de agua. El pamoate sodico (190 mg, 0,44 mmol) se disolvio en 10 ml de agua. Las dos soluciones se combinaron y se mezclaron bien. Los precipitados se recogieron por centrifugacion a 3.000 rpm durante 20 minutos, se lavaron tres veces con agua y se secaron mediante liofilizacion.
Estudios in vitro
Los compuestos de la presente invencion pueden ser y fueron ensayados en cuanto a la actividad de ligandos del receptor del GHS segun los siguientes procedimientos. El experto en la tecnica sabna que procedimientos similares a los descritos en el presente documento pueden ser utilizados para ensayar las actividades de enlace de los compuestos de la invencion frente a moleculas receptoras de melanocortina.
• Ensayos de enlace del radioligando
Las membranas celulares utilizadas para el ensayo in vitro de enlace del receptor se obtuvieron de celulas CHO-K1 transgenicas que expresan de forma estable el receptor del GHS recombinante humano. Las celulas CHO-K1 que expresan de forma estable el receptor del hGHS se homogeneizaron en 20 ml de Tris-HCl 50 mM helado con un Brinkman Polytron (Westbury, NY, EE.UU.) (ajuste 6, 15 s). Los homogeneizados se lavaron dos veces mediante centrifugacion (39.000 g/10 min), y los sedimentos finales se resuspendieron en Tris-HCl 50 mM que contema MgCh 2,5 mM y 0,1% de BSA. Para el ensayo, se incubaron alteuotas (0,4 ml) con 0,05 nM (125I)ghrelina (~2.000 Ci/mmol, Perkin Elmer Life Sciences, Boston, MA, EE.UU.), con y sin 0,05 ml de compuestos de ensayos competidores no etiquetados de la invencion. Despues de una incubacion de 60 min (4 °C), la (125I)ghrelina ligada se separo de la libre por filtracion rapida a traves de filtros GF/C (Brandel, Gaithersburg, MD, EE.UU.), que habfan sido previamente humedecidos en 0,5 % de polietilenimina/0,1 % de BSA. Los filtros se lavaron despues tres veces con alteuotas de 5 ml de Tris-HCl 50 mM helado y 0,1 % de seroalbumina bovina, y la radioactividad ligada atrapada en los filtros se conto mediante espectrometna gamma (Wallac LKB, Gaithersburg, MD, EE.UU.). La union espedfica se definio como la (125I)ghrelina ligada total menos la ligada en presencia de ghrelina 1.000 nM (Bachem, Torrence, CA, EE.UU.). Los datos de la union espedfica de los peptidos de ejemplo se dan en la Tabla 2.
Tabla 2
Ej. n.°
Secuencia Ki (nM) del hGHS
1
H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe-Apc-NH2 0,42
2
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-3Pal-Lys-NH2 1,05
3
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-4Pal-Lys-NH2 7,35
4
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Orn-Lys-NH2 243,00
5
H-Inp-D-Bip-D-Trp-Phe-Lys-NH2 1,35
6
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Thr(Bzl)-Lys-NH2 1,55
7
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Pff-Lys-NH2 25,43
8
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2 0,45
9
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Taz-Lys-NH2 0,80
Ej. n.°
Secuencia Ki (nM) del hGHS
10
H-Inp-D-Dip-D-Trp-Phe-Lys-NH2 46,78
11
H-Inp-D-Bpa-D-Trp-Phe-Lys-NH2 93,75
12
H-Inp-D-2Nal-D-Bpa-Phe-Lys-NH2 419,00
13
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-3Pal-NH2 11,35
14
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-4Pal-NH2 113,50
15
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-3Pal-NH2 16,10
16
H-Inp-D-Bip-D-Trp-Phe-NH2 20,00
17
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Thr(Bzl)-NH2 4,46
18
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Pff-NH2 36,31
19
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-2Thi-NH2 4,11
20
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Taz-NH2 6,17
21
H-Inp-D-Dip-D-Trp-Phe-NH2 104,83
22
H-Inp-D-2Nal-D-Dip-Phe-NH2 104,80
23
H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe-NH2 2,30
24
H-Inp-D-2Nal-D-Bal-Phe-NH2 27,40
25
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-3Pal-Lys-NH2 1,58
26
H-Inp-D-Bal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2 0,42
27
H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe-Lys-NH2 0,33
28
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2 0,31
29
H-Inp-D-2Nal-D-Trp-Phe-Apc-NH2 0,64
30
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-Phe-Apc-NH2 0,36
31
H-Apc-D-2Nal-D-Trp-Phe-Lys-NH2 0,42
32
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2 0,29
33
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-2Thi-NH2 0,87
34
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Phe-NH2 0,70
35
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-Taz-Lys-NH2 1,11
Ej. n.°
Secuencia Ki (nM) del hGHS
36
H-Inp-D-Bal-D-Trp-Taz-Lys-NH2 0,52
37
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Taz-Lys-NH2 0,45
38
H-Apc-D-Bal-D-Trp-Taz-Lys-NH2 0,50
39
H-Apc-D-Bal-D-Trp-2Thi-Lys-NH2 0,36
40
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-2Thi-Apc-NH2 0,53
41
H-Inp-D-Bal-D-Trp-2Thi-Apc-NH2 0,40
42
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-2Thi-Apc-NH2 0,46
43
H-Apc-D-Bal-D-Trp-2Thi-Apc-NH2 0,51
44
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Phe-Lys-NH2 0,42
45
H-Apc-D-Bal-D-Trp-Phe-Lys-NH2 0,32
46
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Phe-Apc-NH2 0,46
47
H-Apc-D-Bal-D-Trp-Phe-Apc-NH2 0,71
48
H-Apc-D-1Nal-D-1Nal-Phe-Apc-NH2 1,99
49
H-Apc-D-1Nal-D-2Nal-Phe-Apc-NH2 1,71
50
H-Apc-D-1Nal-D-1Nal-Phe-Lys-NH2 1,32
51
H-Apc-D-Bal-D-1Nal-Phe-Apc-NH2 3,48
52
H-Apc-D-Bal-D-2Nal-Phe-Apc-NH2 1,49
53
H-Apc-D-Bal-D-1Nal-Phe-Lys-NH2 1,46
54
H-Apc-D-Bal-D-2Nal-Phe-Lys-NH2 0,68
55
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-2Thi-NH2 0,73
56
H-Apc-D-Bal-D-Trp-Phe-NH2 0,89
57
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Taz-NH2 1,41
58
H-Apc-D-Bal-D-Trp-2Thi-NH2 0,98
59
H-Apc-D-Bal-D-Trp-Taz-NH2 1,62
60
H-Apc-D-2Nal-D-Trp-2Thi-NH2 0,95
61
H-Apc-D-2Nal-D-Trp-Taz-NH2 2,11
Ej. n.°
Secuencia Ki (nM) del hGHS
62
H-Inp-D-1Nal-D-Trp-Taz-Apc-NH2 1,19
63
H-Inp-D-Bal-D-Trp-Taz-Apc-NH2 0,83
64
H-Apc-D-1Nal-D-Trp-Taz-Apc-NH2 0,98
65
H-Apc-D-Bal-D-Trp-Taz-Apc-NH2 1,13
66
H-Inp-D-2Nal-D-Trp(^)-Pim 116,68
67
H-Inp-D-1Nal-D-Trp(^)-Pim 50,55
68
H-Inp-D-Bal-D-Trp(^)-Pim 48,73
69
H-Aib-D-Ser(Bzl)-D-Trp(^)-Pim 753,33
70
H-Inp-D-Trp-D-2Nal(^)-Pim 182,00
• Estudio de solubilidad
La sal pamoato del Ejemplo 1 (50 mg) se peso en un tubo de microcentnfuga, y despues se anadieron 125 |jl de PEG200 y 125 jl de agua. La mezcla se sometio a ultrasonidos para facilitar la disolucion. Se obtuvo una solucion 5 transparente.
La solubilidad de la sal pamoato del Ejemplo 1 se determino mezclando el peptido en agua o PBS, seguido de determinacion por HPLC de la concentracion en el sobrenadante, y los resultados se muestran en la Tabla 3.
Tabla 3
Solubilidad de
Agua, pH 7,0 PBS, pH 7,4
Sal pamoato del Ejemplo 1
0,06 mg/ml 0,07 mg/ml
Sal pamoato del Ejemplo 1 con Zn
0,14 mg/ml 0,08 mg/ml
10 • Estudios farmacocineticos de formulaciones del Ejemplo 1
La "Formulacion 1" del Ejemplo 1 se preparo disolviendo una sal pamoato del Ejemplo 1 en una solucion (v/v) de 50 % de PEG200 y 50% de agua, a una concentracion de 200 mg/ml (20 % peso/vol).
La "Formulacion 2" del Ejemplo 1 se preparo disolviendo una sal acetato del Ejemplo 1 en una solucion salina/2 % suero de raton desactivado por calor/5 % de DMA/2 % de solucion Tween-80.
15 • Dosificacion
Para la Formulacion 1, las ratas Sprague-Dawley se dosificaron mediante inyeccion subcutanea de una cantidad fija de 5 jl/rata o de 1,0 mg/rata, o de una cantidad variable de aproximadamente 2,5 mg/kg de peso corporal.
Para la Formulacion 2, las ratas Sprague-Dawley se dosificaron mediante inyeccion subcutanea de una cantidad variable de 2,1 mg/kg de peso corporal.
20 • Preparacion de la muestra
Para las Formulaciones 1 y 2, 50 jl de plasma se acidificaron con 2,5 jl de acido formico y se precipitaron con 150 jl de acetonitrilo. El sobrenadante se recogio mediante centrifugacion. Se inyectaron 50 jl de la preparacion para analisis mediante LC-MS/MS.
• Analisis por LC-MS/MS
Para las Formulaciones 1 y 2, el analisis por LC-MS/MS se realizo con un sistema de espectrometro de masas API4000 equipado con una sonda de Turbopulverizacion de Iones. Se utilizo el modo MRM de deteccion de iones moleculares con un par de iones de 396,5/112,3. La separacion mediante HPLC se realizo con una columna Luna 5 C8(2) 2x30 mm de 3pm que ejecuta desde 0 % B hasta 80 % B en 10 minutos a un caudal de 0,3 ml/minuto. El
tampon A es 1% de acido formico en agua y el tampon B es 1% de acido formico en acetonitrilo. El LOQ era de 5 ng/ml.
• Resultados y Resumen
Las concentraciones de plasma del Ejemplo 1, dosificadas con la Formulacion 1, se calcularon con su grafico de 10 calibracion estandar y los resultados se muestran en la Tabla 4.
Tabla 4
Tiempo
Concentracion de plasma (ng/ml) del Ejemplo 1, dosificada con la Formulacion 1 Concentracion de plasma (ng/ml) del Ejemplo 1, dosificada con la Formulacion 2
5 minutos
47,0 520
10 minutos
62,4 N/A
15 minutos
85,4 860
30 minutos
162,5 990
1 hora
312,5 820
2 horas
485,0 560
3 horas
N/A 480
4 horas
509,5 330
6 horas
N/A 130
8 horas
396,0 0
12 horas
334,0 0
16 horas
132,7 0
20 horas
121,0 0
24 horas
84,0 0
Los graficos de recorrido a tiempo completo de los perfiles farmacocineticos de la Formulacion 1 se muestran a escala normal en la FIG. 1A, y a escala logantmica en la FIG. 1B.
15 Algunos parametros farmacocineticos del Ejemplo 1, dosificado con la Formulacion 1, se muestran en la Tabla 5.
Tabla 5
Ejemplo 1 dosificado con la Formulacion 1 Ejemplo 1 dosificado con la Formulacion 2
Tmax (horas)
4 0,5
Cmax (ng/ml)
543 990
AUC (ng-hora/ml)
7.493 3.239
CL (ml/hora)
333 725
T1/2 (horas)
6,7 1,8
Los resultados indican que las formulaciones del Ejemplo 1 segun la presente invencion descritas en el presente documento proporcionan formulaciones de liberacion sostenida aceptables con parametros farmacocineticos 5 mejorados y perfiles de liberacion mas planos que pueden dar como resultado efectos secundarios atenuados y una eficacia mejorada. Por ejemplo, se demuestra que la Formulacion 1 tiene un perfil de liberacion de mas de 24 horas despues de una unica inyeccion subcutanea, con Cmax significativamente baja y Tmax significativamente largo. Ademas, se demuestra que la formulacion de la sal pamoato del Ejemplo 1, es decir, la Formulacion 1, tiene un T1/2 significativamente aumentado comparado con la formulacion de la sal acetato del Ejemplo 1, es decir, la 10 Formulacion 2.
Las realizaciones adicionales de la presente invencion seran evidentes de la siguiente descripcion y se entiende que estan abarcadas por la invencion como se describe en su totalidad en el presente documento y se define en las siguientes reivindicaciones.

Claims (9)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    REIVINDICACIONES
    1. Una composicion farmaceutica de una solucion transparente, que comprende un peptido que actua como un ligando del receptor de GHS, en donde el peptido es H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe-Apc-NH2, o una sal del mismo farmaceuticamente aceptable, en el que el peptido forma un deposito in situ despues de la administracion subcutanea o intramuscular a un sujeto, en donde la composicion farmaceutica comprende ademas PEG, en donde dicho peptido esta en forma de una sal pamoato, y en donde dicha solucion transparente es una solucion acuosa.
  2. 2. La composicion farmaceutica segun la reivindicacion 1, en donde dicho PEG tiene un peso molecular medio de desde aproximadamente 200 hasta aproximadamente 10.000.
  3. 3. La composicion farmaceutica segun la reivindicacion 2, en donde dicho peptido esta disuelto en una solucion acuosa de PEG200 o PEG400, en el que la relacion volumen/volumen de PEG frente a agua es desde aproximadamente 1:9 hasta aproximadamente 1:1.
  4. 4. La composicion farmaceutica segun una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la concentracion peso/volumen de dicho peptido esta entre aproximadamente 0,1 mg/ml y aproximadamente 2.000 mg/ml, y/o en donde el pH de dicha composicion esta entre aproximadamente 3,0 y aproximadamente 8,0.
  5. 5. La composicion farmaceutica segun la reivindicacion 4, en donde dicha sal pamoato de H-Inp-D-Bal-D-Trp-Phe- Apc-NH2 esta disuelta:
    (a) en solucion acuosa de PEG400, en la que la relacion volumen/volumen de PEG400 frente a agua es de aproximadamente 1:1, y en la que la concentracion peso/volumen del peptido es de aproximadamente 200 g/ml;
    (b) en solucion acuosa de PEG200, en la que la relacion volumen/volumen de PEG200 frente a agua es de aproximadamente 1:1, y en la que la concentracion peso/volumen del peptido es de aproximadamente 200 mg/ml;
    (c) en solucion en PBS de PEG400, en la que la relacion volumen/volumen de PEG400 frente a PBS es de aproximadamente 1:1, y en la que la concentracion peso/volumen del peptido es de aproximadamente 300 mg/ml; o
    (d) en una solucion salina de PEG400, en la que la relacion volumen/volumen de PEG400 frente a solucion salina es de aproximadamente 1:1, y en la que la concentracion peso/volumen del peptido es de aproximadamente 300 mg/ml;
  6. 6. La composicion farmaceutica segun una cualquiera de las reivindicaciones precedentes que comprende ademas un metal divalente.
  7. 7. La composicion farmaceutica segun la reivindicacion 6, en donde dicho metal divalente es zinc.
  8. 8. La composicion farmaceutica segun una cualquiera de las reivindicaciones precedentes que comprende ademas un conservante; un agente isotonico; un estabilizante; un tensioactivo; un agente quelante; y/o un tampon.
  9. 9. La composicion farmaceutica segun la reivindicacion 8:
    (a) en donde dicho conservante se selecciona del grupo que consiste en m-cresol, fenol, alcohol bendlico y metilparabeno;
    (b) en donde dicho conservante esta presente en una concentracion desde aproximadamente 0,01 mg/ml hasta aproximadamente 100 mg/ml;
    (c) en donde dicho agente isotonico esta presente en una concentracion desde aproximadamente 0,01 mg/ml hasta aproximadamente 100 mg/ml;
    (d) en donde dicho estabilizante se selecciona del grupo que consiste en imidazol, arginina e histidina; y
    (e) en donde dicho tampon se selecciona del grupo que consiste en Tris, acetato de amonio, acetato sodico, glicina, acido aspartico, y Bis-Tris.
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