ES2562987T3 - Métodos y medios para diagnosticar espondiloartritis usando marcadores de autoanticuerpos - Google Patents

Métodos y medios para diagnosticar espondiloartritis usando marcadores de autoanticuerpos Download PDF

Info

Publication number
ES2562987T3
ES2562987T3 ES11781733.8T ES11781733T ES2562987T3 ES 2562987 T3 ES2562987 T3 ES 2562987T3 ES 11781733 T ES11781733 T ES 11781733T ES 2562987 T3 ES2562987 T3 ES 2562987T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
spa
subject
autoantibodies
ikbkb
spondyloarthritis
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES11781733.8T
Other languages
English (en)
Inventor
Niklas Thomas Baerlecken
Torsten Witte
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Medizinische Hochschule Hannover
Original Assignee
Medizinische Hochschule Hannover
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Medizinische Hochschule Hannover filed Critical Medizinische Hochschule Hannover
Application granted granted Critical
Publication of ES2562987T3 publication Critical patent/ES2562987T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6854—Immunoglobulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/45—Transferases (2)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
    • C12Q1/485—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase involving kinase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y207/00—Transferases transferring phosphorus-containing groups (2.7)
    • C12Y207/11—Protein-serine/threonine kinases (2.7.11)
    • C12Y207/1101—IkappaB kinase (2.7.11.10)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/564—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for pre-existing immune complex or autoimmune disease, i.e. systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, rheumatoid factors or complement components C1-C9
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70596—Molecules with a "CD"-designation not provided for elsewhere in G01N2333/705
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/10—Musculoskeletal or connective tissue disorders
    • G01N2800/101—Diffuse connective tissue disease, e.g. Sjögren, Wegener's granulomatosis
    • G01N2800/102—Arthritis; Rheumatoid arthritis, i.e. inflammation of peripheral joints
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/10—Musculoskeletal or connective tissue disorders
    • G01N2800/105—Osteoarthritis, e.g. cartilage alteration, hypertrophy of bone
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/50—Determining the risk of developing a disease

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Rehabilitation Therapy (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

Método para diagnosticar la presencia de o para diagnosticar el riesgo de desarrollar, o para el control terapéutico de, espondiloartritis (Spa), como espondilitis anquilosante (AS) y espondiloartritis indiferenciada, en un sujeto que comprende, sobre una muestra biológica obtenida del sujeto, analizar la muestra para determinar la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB, según lo cual la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB es indicativa de la presencia de o el riesgo de desarrollar, o para el control terapéutico de, Spa, como AS.

Description

5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
METODOS Y MEDIOS PARA DIAGNOSTICAR ESPONDILOARTRITIS USANDO MARCADORES DE
AUTOANTICUERPOS
DESCRIPCION
Campo de la invencion
La presente invencion se refiere en general a metodos para diagnosticar la presencia de o el riesgo de desarrollar, o al control terapeutico de, espondiloartritis (Spa), en particular, de la espondilitis anquilosante (AS) en un sujeto, en particular en mamferos. Ademas, la presente invencion se refiere a kits de prueba para su uso en el diagnostico de la presencia de o el riesgo de desarrollar, o para el control terapeutico de, Spa, como AS, en un sujeto. En particular, la presente invencion se refiere a un metodo para diagnosticar la presencia de o el riesgo de desarrollar, o para el control terapeutico de, Spa, como AS, en un sujeto analizando la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB en un sujeto. La presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB es indicativa de la presencia de o el riesgo de desarrollar, o para el control terapeutico de, Spa, como AS. En particular, la deteccion de la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB permite un diagnostico precoz de Spa, en particular, AS.
Antecedentes de la invencion
La espondiloartritis (Spa) tambien conocida como espondiloartropatfa o espondilitis identifica un grupo de enfermedades que afectan principalmente a la columna vertebral (espondilo-) y otras articulaciones. Este grupo de enfermedades tambien se identifica como espondiloartritis seronegativa. El termino “seronegativa” se refiere al hecho de que habitualmente no estan presentes factores reumatoides en la sangre. El grupo de Spa puede dividirse en espondilitis anquilosante (AS), artritis reactiva y su manifestacion especial, smdrome de Reiter, y en artritis psoriasica (PsA), artritis enteropatica y espondiloartritis indiferenciada. Varias de estas enfermedades tambien pueden manifestarse solo como artritis periferica sin inflamacion del esqueleto axial. En vista del hecho de que este grupo de enfermedades es una enfermedad seronegativa, el diagnostico precoz es diffcil tal como se detalla a continuacion.
La espondilitis anquilosante (AS) tambien conocida como enfermedad de Bechterew es una enfermedad reumatoide inflamatoria comun, que afecta principalmente al esqueleto axial y esta asociada con sacroilitis, uveftis y entesitis. Afecta a mas del 0,1% de la poblacion y puede estar asociada con uveftis, fibrosis pulmonar apical y enfermedad cardiaca. La AS es un miembro del grupo de las espondiloartropatfas seronegativas. Se cree que hay predisposicion genetica. Adicionalmente, en la literatura se describe que la AS es una enfermedad autoinmunitaria. Normalmente se ven afectadas las articulaciones en la columna vertebral y la articulacion sacroiftaca en la pelvis. Finalmente, puede producirse una fusion de la columna vertebral. La etiologfa de la AS se desconoce, pero se cree que esta mediada de manera inmunitaria. Por ejemplo, se describen fenomenos autoinmunitarios frente al proteoglicano agrecano. Normalmente, los primeros smtomas de la enfermedad aparecen entre los 20 y los 25 anos de edad. Los pacientes sin tratamiento habitualmente padecen rigidez matutina en la parte inferior de la columna vertebral o en ocasiones en toda la columna vertebral, a menudo con dolor referido en una u otra nalga o la parte trasera del muslo procedente de la articulacion sacroiftaca. Los hombres se ven mas afectados que las mujeres. De manera interesante, la AS esta asociada con una inflamacion del ojo (iridociclitis y uveftis) en aproximadamente el 40% de los casos.
En el transcurso de la enfermedad, la columna vertebral se vuelve porosa, lo que finalmente conduce a la rotura de las vertebras. Se asume que aproximadamente el 1,75% de los adultos tienen prevalencia de desarrollar AS y espondiloartritis indiferenciada.
El diagnostico de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, representa una tarea desafiante para el diagnostico de laboratorio. Es bastante comun, para el diagnostico de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, que no se detecte o se retarde notablemente, particularmente, en el entorno de atencion primaria. Por ejemplo, en promedio, hay un retardo de 7-10 anos en el diagnostico de AS desde la aparicion de los smtomas. El motivo de este retardo es el hecho de que no hay ninguna prueba directa para diagnosticar Spa, como AS. Por tanto, la Spa, como AS, espondiloartritis indiferenciada o PsA, debe diagnosticarse mediante un diagnostico diferencial excluyendo otra enfermedad con smtomas similares, como osteoartritis, osteoporosis, hernia de disco o infecciones bacterianas. Hoy en dfa, el examen cftnico en estudios de rayos X de la columna vertebral que muestran cambios caractensticos de la columna vertebral y sacroilitis es la principal herramienta de diagnostico. Sin embargo, los estudios de rayos X conducen a un retardo prolongado en el diagnostico, dado que los cambios evidentes utilizando rayos X solo se producen varios anos tras la aparicion de la enfermedad. Aunque la formacion de imagenes mediante resonancia magnetica puede permitir establecer un diagnostico precoz, el diagnostico mediante resonancia magnetica es caro y ademas no todos los pacientes que tengan dolor se diagnosticanan mediante espectrometna de resonancia magnetica.
Aunque existe la necesidad de marcadores de diagnostico de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, en particular de marcadores que permitan un diagnostico precoz de dichas enfermedades, aun no se ha establecido ningun marcador espedfico. En la tecnica se han descrito varios posibles marcadores de diagnostico. Por ejemplo,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
las variaciones del gen HLA-B aumentan el riesgo de desarrollar AS, aunque no es una prueba de diagnostico. Se ha descrito que sujetos con la variante HLA-B27 corren un riesgo mayor que la poblacion general de desarrollar el trastorno. El hecho de que los sujetos sean positivos para HLA-B27 tambien es indicativo de otros tipos de enfermedades, como enfermedad de Reiter asf como artritis psoriasica, pero tambien de artritis reumatoide seropositiva. Incluso el 10% de los individuos sanos porta el antigeno HLA-B27. Por tanto, puede producirse un diagnostico de falso positivo y la especificidad de HLA-B27 para Spa, en particular, para As y espondiloartritis indiferenciada, es baja.
Recientemente, se han descrito anticuerpos anti-agalactosil-IgG en AS y artritis psoriasica (PsA), Chou, C.-L., et al., Clin Rheumatol, 2010, DOI 10.1007/s1o067-010-1413-7. Sin embargo, el anticuerpo anti-agalactosil-IgG descrito en ese documento tambien se ha descrito como un marcador serologico util para la artritis reumatoide. Ademas, en la espondiloartropatfa seronegativa, de la que son representativas AS y PsA, tambien se han detectado anticuerpos anti-agalactosil-IgG. Por tanto, el anticuerpo anti-agalactosil-IgG no permite discriminar entre AS y PsA y entre AS y otros trastornos reumaticos inflamatorios.
Ademas, el documento WO 2010/037184 describe marcadores de diagnostico para AS. En ese documento se describen metodos de diagnostico y agentes para diagnosticar la presencia o el riesgo de desarrollar AS en mairnferos. Dichos metodos de diagnostico y agentes se basan en la deteccion de polimorfismos dentro de diversos genes. Los marcadores de diagnostico y la prueba de diagnostico descritos en ese documento se basan en la deteccion de moleculas de acido nucleico o la deteccion de protemas de los respectivos genes y protemas.
Muy recientemente, el examen y la evaluacion del peptido de simulacion como biomarcador serico util de AS usando la tecnica de presentacion en fago se han descrito por Wang, M., et al., Rheumatol Int, DOI 10.1007/s00296-010- 1403-8. En ese documento, los autores dan a conocer una secuencia peptfdica denominada AS1 que debe representar un peptido util que reacciona con sueros de pacientes con AS y, por tanto, puede ser un candidato para un biomarcador serico espedfico. En ese documento se identifica que el peptido corto no tiene ninguna similitud significativa con otras secuencias. Wright, C., et al., 2010, Mol Cell Proteomics, DOI 10.1074, mcp 11900384- MCP200, muestra la deteccion de multiples autoanticuerpos en pacientes con AS usando ensayos de protemas programables con acido nucleico.
En vista de lo anterior, existe la necesidad actual de proporcionar una herramienta y un metodo de diagnostico que permitan diagnosticar y evaluar el riesgo de desarrollar Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, asf como una herramienta y un metodo para el control terapeutico de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada. Ademas, esta herramienta, por ejemplo un kit, o metodo debe permitir preferiblemente diferenciar entre diferentes espondiloartropatias seronegativas. En particular, el marcador de diagnostico puede permitir diferenciar entre AS y PsA y entre AS y otros trastornos reumaticos inflamatorios.
Breve descripcion de la presente invencion
Los presentes inventores se propusieron proporcionar un metodo de diagnostico para determinar la presencia de o el riesgo de desarrollar Spa, como AS, asf como para el control terapeutico de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, en un sujeto. Es decir, los presentes inventores reconocieron que los sujetos que padecen Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, tienen autoanticuerpos dirigidos contra la molecula CD74 y/o la molecula IKBKB. Por tanto, es posible un diagnostico precoz de Spa, en particular AS y espondiloartritis indiferenciada, incluso antes de tener evidencias por rayos X.
Por tanto, una primera realizacion de la presente invencion se refiere a un metodo para diagnosticar la presencia de o el riesgo de desarrollar, o para el control terapeutico de, espondiloartritis (Spa), en particular de espondilitis anquilosante (AS) y espondiloartritis indiferenciada, en un sujeto que comprende
a. obtener del sujeto una muestra biologica, y
b. analizar la muestra para determinar la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB,
segun lo cual la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB es indicativa de la presencia de o el riesgo de desarrollar, o para el control terapeutico de, Spa, en particular, AS y espondiloartritis indiferenciada.
Preferiblemente, se determina la presencia de autoanticuerpos frente a tanto CD74 como IKBKB.
Preferiblemente, dicha deteccion de autoanticuerpos se lleva a cabo usando inmunoensayos, como ELISA. Normalmente, la muestra biologica que va a someterse a prueba se obtiene de sangre, en particular, suero.
Se prefiere que el metodo segun la presente invencion permita discriminar entre AS y PsA. Por tanto, el metodo de diagnostico segun la presente invencion representa el primer metodo que permite un diagnostico positivo de AS y espondiloartritis indiferenciada en un sujeto. El diagnostico es posible en una fase temprana de la enfermedad.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Otra realizacion de la presente invencion se refiere a un kit de prueba para su uso en un metodo segun la presente invencion, concretamente para diagnosticar la presencia de o el riesgo de desarrollar, asf como para el control terapeutico de, Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, en un sujeto que comprende medios para determinar autoanticuerpos frente a IKBKB y/o CD74 en una muestra biologica de un sujeto que va a someterse a prueba e instrucciones sobre como usar dicho kit de prueba. Preferiblemente, dicho kit de prueba es un ensayo ELISA.
Breve descripcion de los dibujos
Figura 1: La figura muestra los tftulos de autoanticuerpos de tipo anti-IgG frente a CD74 en diferentes enfermedades. El tftulo se considera positivo, si era de 40 U/ml o superior (punto de corte 40 U/ml). De izquierda a derecha, se enumeran los diferentes grupos de prueba: donantes de sangre (BD), espondilitis anquilosante (AS), AS con BASDAI > 4 (mdice de actividad de la enfermedad espondilitis anquilosante de Bath, una puntuacion de actividad para AS), artritis psoriasica (PsA), artritis reumatoide (RA), lupus eritematoso sistemico (SLE), fiebre.
Figura 2: En la figura 2 se muestra el porcentaje de resultados positivos para autoanticuerpos de tipo anti-IgG frente a CD74 en las siguientes enfermedades: espondilitis anquilosante (AS), AS con BASDAI > 4, donantes de sangre (BD), artritis psoriasica (PsA), artritis reumatoide (RA), lupus eritematoso sistemico (SLE), fiebre, smdrome de dolor cronico (SFS).
Figura 3: La figura muestra los tftulos de autoanticuerpos de tipo anti-IgG frente a IKBKB en diferentes enfermedades. El tftulo se considera positivo, si era de 40 U/ml o superior (punto de corte 40 U/ml). De izquierda a derecha, se enumeran los diferentes grupos de prueba: donantes de sangre (BD), espondilitis anquilosante (AS), HIV, lupus eritematoso sistemico (SLE), smdrome de dolor cronico (SFS), artritis psoriasica (PsA), artritis reumatoide (RA), fiebre, AS con BASDAI > 4.
Figura 4: En la figura 4 se muestra el porcentaje de resultados positivos para autoanticuerpos de tipo anti-IgG frente a IKBKB en las siguientes enfermedades: donantes de sangre (BD), espondilitis anquilosante (AS), AS con BASDAI > 4, VIH, lupus eritematoso sistemico (SLE), fiebre, smdrome de dolor cronico (SFS), artritis reumatoide (RA), artritis psoriasica (PsA).
Figura 5: La figura muestra los tftulos de autoanticuerpos de tipo anti-IgA frente a CD74 en diferentes enfermedades. El tftulo se considera positivo, si es de 5 U/ml o superior (punto de corte 5 U/ml). De izquierda a derecha, se enumeran los diferentes grupos de prueba: espondilitis anquilosante (AS), psoriasis, donantes de sangre (BD).
Figura 6: La figura muestra un resumen de la sensibilidad y la especificidad para AS de cada autoanticuerpo solo y en combinacion y para espondiloartritis indiferenciada.
Descripcion detallada de la presente invencion
En un primer aspecto, la presente invencion se refiere a un metodo para diagnosticar la presencia de o el riesgo de desarrollar, o para el control terapeutico de, espondiloartritis (Spa), en particular espondilitis anquilosante (AS) y espondiloartritis indiferenciada, en un sujeto que comprende
a. obtener del sujeto una muestra biologica, y
b. analizar la muestra para determinar la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB,
segun lo cual la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB es indicativa de la presencia de o el riesgo de desarrollar, o para el control terapeutico de, Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada.
Es decir, la presente invencion se basa en la observacion de los presentes inventores de que los sujetos aquejados de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, o que corren el riesgo de desarrollar Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, asf como para el control terapeutico de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, tienen autoanticuerpos frente a las protemas CD74 y/o IKBKB, respectivamente.
Con respecto al termino “autoanticuerpo” o “autoanticuerpos” quiere decirse un anticuerpo que se dirige contra una o mas de las protemas propias de los sujetos.
IKBKB tambien se conoce como inhibidor de la subunidad beta del factor nuclear kappa B cinasa o IKK-beta. CD74 tambien se conoce como la cadena invariante del complejo mayor de histocompatibilidad de clase II. Es decir, la forma de superficie celular de la cadena invariante se conoce como CD74.
Ambas protemas se expresan por una variedad de celulas. Los presentes inventores demuestran que CD74 e IKBKB solas o en combinacion representan entidades para las que pueden encontrarse autoanticuerpos en sujetos aquejados de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada. Por tanto, la determinacion de la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB es indicativa de la presencia de o el riesgo de desarrollar, o para el control
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
terapeutico de, Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, en un sujeto. Como se demuestra en los ejemplos, la determinacion de autoanticuerpos frente a una de estas moleculas permite identificar individuos que padecen Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada.
En particular, en el presente documento se demuestra que la determinacion de la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB permite un diagnostico espedfico de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, en particular, en fases tempranas, lo cual no era posible anteriormente. Hasta hoy, la Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, solo puede diagnosticarse mediante un diagnostico extenso y costoso, o mediante la exclusion de otras enfermedades, trastornos o estados. Por tanto, por primera vez es posible diagnosticar la presencia de o el riesgo de desarrollar Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, en un sujeto con un sistema de prueba o kit de prueba simple basado en el metodo descrito en el presente documento. Adicionalmente, es posible permitir un control terapeutico de sujetos aquejados de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada.
Por ejemplo, la presente invencion permite identificar el regimen de terapia de un individuo que lo necesite. Es decir, la identificacion de la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB apunta a una terapia que comprende un empobrecimiento de celulas B o una induccion de tolerancia en celulas T.
En una realizacion preferida, se determina la presencia de autoanticuerpos frente a tanto CD74 como IKBKB. Es decir, determinando la presencia de autoanticuerpos frente a tanto CD74 como IKBKB, la especificidad de diagnostico de AS es de casi el 100%.
En otra realizacion, los metodos segun la presente invencion permiten diferenciar entre espondiloartropatfas seronegativas, concretamente diferenciar entre AS y PsA. A diferencia de los metodos sugeridos previamente para diagnosticar AS, que incluyen normalmente el diagnostico de PsA y que no permiten la diferenciacion entre As y PsA, la presente invencion permite espedficamente diagnosticar AS al tiempo que excluye PsA.
Los terminos “paciente” y “sujeto” se usan de manera intercambiable y hacen referencia a pacientes y sujetos de seres humanos u otros mairnferos e incluyen cualquier individuo que se desee examinar o tratar usando los metodos de la invencion. Sin embargo, se entendera que “paciente” no implica que esten presentes smtomas.
El termino “muestra biologica” tal como se usa en el presente documento se refiere a una muestra de un paciente que puede extraerse, no tratarse, tratarse, aislarse o concentrarse. De manera adecuada, la muestra biologica se selecciona de cualquier parte del cuerpo de un paciente, incluyendo, pero sin limitarse a, pelo, piel, unas, tejidos o fluidos corporales, tales como saliva, sinovia y sangre.
A lo largo de toda esta memoria descriptiva, a menos que el contexto requiera lo contrario, se entendera que la palabra “comprender” implica la inclusion de una etapa o elemento o grupo de etapas o elementos estipulado, pero no la exclusion de cualquier otra etapa o elemento o grupo de etapas o elementos.
Con el termino “obtenido de” quiere decirse que una muestra tal como, por ejemplo, suero se afsla de o se deriva de una fuente particular del sujeto. Por ejemplo, el extracto puede obtenerse de un tejido o un fluido corporal aislado directamente del sujeto.
Tal como se usa en el presente documento, los terminos “un”, “una” y “el/la” significan “uno/a o mas” cuando se usa en esta solicitud, incluyendo las reivindicaciones.
A menos que se defina lo contrario, todos los terminos tecnicos y cientfficos usados en el presente documento tienen el mismo significado que el que entiende comunmente un experto habitual en la tecnica a la que pertenece la presente materia dada a conocer.
Los terminos “diagnosticar” y “diagnostico” tal como se usan en el presente documento se refieren a metodos mediante los que un experto en la tecnica puede estimar e incluso determinar si un sujeto padece o no una enfermedad, trastorno o estado dado. El experto en la tecnica hace el diagnostico basandose en uno o mas indicadores de diagnostico, concretamente autoanticuerpos, cuya cantidad (incluyendo la presencia o ausencia) es un indicador de la presencia, gravedad o ausencia del estado.
Junto con el diagnostico, el control terapeutico y el pronostico clmico es tambien un area de gran preocupacion e interes. Es importante conocer la gravedad de la enfermedad asf como la actividad de la enfermedad con el fin de disenar la terapia mas eficaz.
Por tanto, “hacer un diagnostico” o “diagnosticar”, tal como se usa en el presente documento, puede incluir ademas hacer un pronostico que puede proporcionar la prediccion de un desenlace clmico, la seleccion de un tratamiento adecuado o la monitorizacion de un tratamiento actual, y potencialmente un cambio en el tratamiento basandose en la medida de un autoanticuerpo de diagnostico.
El termino “determinar” o “analizar” tal como se usa en el presente documento se refiere a evaluar la presencia,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
ausencia, cuantfa, nivel o cantidad de los respectivos autoanticuerpos dentro de la muestra derivada del sujeto, incluyendo niveles de concentracion cualitativos o cuantitativos de dichas sustancias, que evaluan por lo demas los valores o la categorizacion de un parametro clmico del sujeto.
Los inventores han determinado que la produccion de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB puede correlacionarse con la presencia de AS y espondiloartritis indiferenciada.
Ademas, en algunas realizaciones de la materia dada a conocer en el presente documento, pueden hacerse multiples determinaciones de los autoanticuerpos a lo largo del tiempo para facilitar el diagnostico y/o el pronostico.
En algunas realizaciones de los metodos dados a conocer en el presente documento, la deteccion, determinacion o analisis de la presencia de los autoanticuerpos en la muestra puede incluir la union de los autoanticuerpos a un antigeno y despues la deteccion o bien del evento de union o bien de la presencia del autoanticuerpo aislado de la muestra biologica. Las tecnicas a modo de ejemplo para detectar los autoanticuerpos incluyen, pero no se limitan a, ensayo de inmunoabsorcion ligado a enzimas (ELISA), radioinmunoanalisis (RIA), inmunoensayo multiplex, inmunoprecipitacion e inmunotransferencia (incluyendo, por ejemplo, inmunotransferencia de tipo Western y transferencia puntual).
El experto conoce ampliamente metodos de inmunodeteccion utiles que permiten analizar la muestra para determinar la presencia o ausencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB. Por ejemplo, la muestra biologica obtenida del sujeto se pone en contacto con un antfgeno, concretamente con un oligo-, polipeptido o protema CD74 y/o IKBKB que representa el peptido inmunorreactivo al autoanticuerpo, por tanto, permitiendo la union del autoanticuerpo a dicho peptido. En este contexto, el termino polipeptido o protema que se usan de manera intercambiable en el presente documento, hacen referencia a un polfmero de aminoacidos que tiene una longitud de al menos 50 aa. El termino “oligopeptido” se refiere a un polfmero de aminoacidos que tiene una longitud de desde 5 hasta 49 aa.
Poner en contacto la muestra biologica elegida del antfgeno en condiciones eficaces y durante un periodo de tiempo suficiente para permitir la formacion de inmunocomplejos, es generalmente una cuestion de anadir la composicion a la muestra e incubar la mezcla durante un periodo de tiempo suficientemente largo para que los autoanticuerpos formen inmunocomplejos con los antfgenos presentados. Dicha mezcla de antfgeno-anticuerpo puede detectarse mediante medios y metodos conocidos. Es decir, la deteccion de formacion de inmunocomplejos de antfgeno- autoanticuerpo puede conseguirse a traves de la aplicacion de numerosos enfoques. Estos metodos se basan generalmente en la deteccion de una etiqueta o marcador, tal como cualquier etiqueta o marcador radiactivo, fluorescente, biologico o enzimatico de uso convencional en la tecnica. Naturalmente, pueden encontrarse ventajas adicionales a traves del uso de un ligando de union secundario tal como un segundo anticuerpo o una disposicion de union a ligando de biotina/avidina (estreptavidina) tal como se conoce en la tecnica.
En algunas realizaciones, el inmunocomplejo primario puede detectarse mediante un segundo ligando de union que tiene afinidad de union por el antfgeno o el autoanticuerpo presentado en la muestra, por ejemplo reactividad con la region Fc de los autoanticuerpos o que tiene reactividad con una region del antfgeno diferente de la region de union del autoanticuerpo. En estos casos, el segundo ligando de union puede unirse a una molecula de etiqueta o marcador detectable. El segundo ligando de union es en sf mismo a menudo un anticuerpo, que por tanto puede denominarse anticuerpo secundario. Normalmente, los inmunocomplejos primarios se ponen en contacto con el anticuerpo o ligando de union secundario etiquetado, en condiciones eficaces y durante un periodo de tiempo suficiente para permitir la formacion de inmunocomplejos secundarios. Los inmunocomplejos secundarios se lavan entonces generalmente para eliminar cualquier ligado o anticuerpo secundario etiquetado no unido, y entonces se detecta la etiqueta restante en el inmunocomplejo secundario.
El segundo ligando de union, tal como un anticuerpo, que tiene actividad de union para o bien el antfgeno o bien el autoanticuerpo, tambien puede usarse para unirse a los inmunocomplejos primarios. El segundo ligando de union contiene una enzima que puede procesar un sustrato detectable para dar un producto y, por tanto, amplificar una senal a lo largo del tiempo. Tras el lavado, los inmunocomplejos secundarios se ponen en contacto con el sustrato, permitiendo la deteccion.
Alternativamente puede usarse una inmunodeteccion comparativa. El experto en la tecnica conoce ampliamente metodos adecuados.
Se prefiere particularmente que la muestra biologica sea un fluido corporal, preferiblemente sangre. En particular, la muestra biologica es suero del sujeto que va a diagnosticarse.
Tal como se explico de manera resumida anteriormente, el metodo segun la presente invencion es particularmente util para permitir la diferenciacion entre AS y PsA. Adicionalmente, en otra realizacion, los metodos segun la presente invencion permiten la estratificacion del regimen terapeutico de un sujeto aquejado de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, o que corre el riesgo de desarrollar Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada. Es decir, la presente invencion permite identificar el estado de la enfermedad, en particular, el estado activo de la
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
enfermedad en un sujeto aquejado de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada.
Los autoanticuerpos que van a detectarse pueden ser del tipo anti-IgA y/o IgG. Es decir, es posible determinar la presencia de autoanticuerpos anti-IgA y/o IgG en la muestra biologica obtenida del sujeto. Aunque es suficiente detectar solo un tipo de anticuerpos, autoanticuerpos o bien anti-IgA o bien anti-IgG, se prefiere que se detecten ambos autoanticuerpos anti-IgA y anti-IgG frente a CD74 e IKBKB.
En una realizacion particular preferida, el sujeto es un ser humano y los autoanticuerpos son autoanticuerpos humanos.
En una realizacion adicional, la materia dada a conocer en el presente documento proporciona kits de prueba o kits de diagnostico para su uso en un metodo segun la presente invencion. En particular, kits inmunologicos para su uso en la deteccion de autoanticuerpos en muestras biologicas que permiten el diagnostico de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada. Es decir, la presente invencion proporciona un kit de prueba para su uso en un metodo segun la presente invencion para diagnosticar la presencia de o el riesgo de desarrollar, asf como para el control terapeutico de, Spa, como AS, en un sujeto que comprende medios para determinar autoanticuerpos frente a IKBKB y/o CD74 en una muestra biologica de un sujeto que va a someterse a prueba e instrucciones sobre como usar el kit de prueba. En una realizacion preferida, dicho kit de prueba es un ELISA.
Tales kits pueden comprender generalmente uno o mas antfgenos, concretamente, oligo- o polipeptidos de CD74 y/o IKBKB que pueden inmunorreaccionar con los autoanticuerpos. Normalmente, los kits de inmunodeteccion comprenderan en recipiente(s) adecuado(s), uno o mas antfgenos de peptidos inmunorreactivos con autoanticuerpos derivados de CD74 y/o IKBKB. Dichos antfgenos utiles en los metodos y kits de prueba reivindicados en el presente documento pueden ser la protema CD74 y/o IKBKB completa o peptidos inmunorreactivos derivados de las mismas.
En determinadas realizaciones, el antfgeno puede proporcionarse unido a un soporte solido, tal como por ejemplo una matriz de columna o un pocillo de una placa de microtitulacion, una membrana, perlas, tiras reactivas o similares. Alternativamente, el soporte puede proporcionarse como un elemento separado del kit.
Es decir, el kit de prueba segun la presente invencion para diagnosticar Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, incluye, ademas del antfgeno, un agente de deteccion para los autoanticuerpos que puede ser un anticuerpo, fragmento de anticuerpo, etc. Ademas, el kit puede comprender mas de un agente de deteccion. Si se requiere, el kit comprende ademas un sustrato y medios adicionales para permitir la reaccion con una enzima usada como etiqueta para el agente de deteccion que puede ser un anticuerpo.
Los agentes de inmunodeteccion del kit pueden incluir etiquetas detectables que estan asociadas con o unidas al agente de deteccion dado, en particular, el anticuerpo de deteccion. Tambien se contemplan etiquetas detectables que estan asociadas con o acopladas a un ligando de union secundario. Las etiquetas detectables incluyen colorantes, moleculas luminiscentes o fluorescentes, biotina, radioetiquetas o enzimas. Los ejemplos tfpicos para etiquetas adecuadas incluyen las moleculas fluorescentes conocidas comunmente, como rodamina, fluorescema, protema verde fluorescente o luciferasa, o fosfatasa alcalina y peroxidasa del rabano como ejemplos de enzimas adecuadas.
Opcionalmente, los kits comprenden ademas controles positivos y negativos para verificar los resultados obtenidos cuando se usa el kit. Los componentes de los kits pueden envasarse o bien en medio acuoso o bien en forma liofilizada y, ademas, los kits comprenden uno o mas recipientes que permiten llevar a cabo la deteccion. Ademas, el kit de prueba comprende instrucciones para el uso del kit.
En este contexto, el termino “peptidos inmunorreactivos” se refiere a fragmentos de peptido de IKBKB y/o CD74 que permiten la union con los autoanticuerpos derivados del sujeto.
Ejemplos
Se han incluido los siguientes ejemplos para ilustrar modos de la presente materia dada a conocer. A la luz de la presente divulgacion y el nivel general del experto en la tecnica, los expertos apreciaran que los siguientes ejemplos pretenden ser solo a modo de ejemplo y que pueden emplearse numerosos cambios, modificaciones y alteraciones sin apartarse del alcance de la presente materia dada a conocer.
Ejemplo 1
Se examinaron 45 sueros de pacientes con diferentes enfermedades inflamatorias y reumaticas por medio de la tecnologfa de microdisposicion de protemas. Se han identificado dos nuevos marcadores de espondiloartritis, que se han evaluado adicionalmente para determinar sus frecuencias y asociaciones mediante diferentes ELISA.
Se efectuo una evaluacion con sueros de 34 pacientes con AS, 10 con espondiloartritis indiferenciada y de 55
5
10
15
20
25
30
donantes de sangre. Los pacientes se habfan caracterizado ampliamente en cuanto a la actividad de la enfermedad, los datos demograficos y el tratamiento. Se habfan almacenado los sueros de los pacientes y de los controles en un congelador a -20°C hasta su uso.
Para realizar las pruebas de ELISA, se recubrieron placas de 96 pocillos (Nunc Maxisorb) con 20 |ig de CD74 de longitud completa recombinante de E. coli con etiqueta GST, Abnova GmbH, Alemania, y un polipeptido sintetico de CD74, Abcam, EE.UU., o con 20 |ig de IKBKB de longitud completa recombinante con etiqueta GST, Abnova GmbH, Alemania. Se incubaron las placas con sueros con una dilucion 1:100 en PBS durante de 30 a 60 minutos a temperatura ambiente. Como patron se uso un suero de un paciente con AS sumamente activa. Se definio la concentracion de anticuerpos en este suero como 100 U/ml para los autoanticuerpos frente a CD74 e IKBKB de tipo anti-IgG y como 10 U/ml para los autoanticuerpos frente a CD74 de tipo anti-IgA. Despues de 30 a 60 minutos de incubacion, se lavaron las placas 3 veces con PBS. A continuacion, se anadieron 100 |il de un anticuerpo de cabra anti-IgG humana secundario (KPL inc, EE.UU.) con una dilucion 1 |ig/ml o 100 |il de anticuerpo anti-IgA humana etiquetado con fosfatasa alcalina, Antikorper-online, Alemania, con una dilucion 1:1000. Se incubaron las placas durante 30 min a temperatura ambiente y se lavaron 3 veces con PBS. Se realizo la reaccion colorimetrica con Blue- Phos, KPL, durante hasta 15 min segun las instrucciones del fabricante y se leyeron las DO a 620nm en un lector de ELISA.
En las primeras pruebas, la prueba para autoanticuerpos de tipo anti-IgG frente a IKBKB tema una sensibilidad para la AS del 66% (20 de 29 pacientes con AS) y una especificidad del 96% (3 de 78 donantes de sangre), la prueba para los autoanticuerpos de tipo anti-IgG frente a CD74 tema una sensibilidad para la AS del 65% (13 de 20 pacientes con AS) y una especificidad del 96% (2 de 55 donantes de sangre), la prueba para los autoanticuerpos de tipo anti-IgA frente a CD74 tema una sensibilidad para la AS del 85,5% (29 de 34 pacientes con AS) y una especificidad del 92% (4 de 48 donantes de sangre). Si se combinan estas pruebas, la sensibilidad alcanza el 60% y la especificidad es del 100%. Ademas, 8 de 10 individuos con espondiloartritis indiferenciada eran positivos para autoanticuerpos de tipo anti-IgG e IgA frente a CD74 (sensibilidad del 80%). Esto indica que los autoanticuerpos estan presentes antes de que puedan detectarse radiologicamente determinados cambios.
Ademas se sometieron a prueba diferentes enfermedades autoinmunitarias y otras enfermedades como SLE, RA, SFS, fiebre, psoriasis. En estos grupos, la frecuencia era de entre el 5 y el 15%. Esto indica una alta especificidad para el diagnostico de Spa, en particular AS y espondiloartritis indiferenciada.

Claims (12)

  1. 10
  2. 2.
  3. 3. 15
  4. 4.
  5. 5.
    20
  6. 6.
    25
  7. 7.
    30
  8. 8.
  9. 9.
    35
  10. 10.
    40
  11. 11.
    45
  12. 12.
    REIVINDICACIONES
    Metodo para diagnosticar la presencia de o para diagnosticar el riesgo de desarrollar, o para el control terapeutico de, espondiloartritis (Spa), como espondilitis anquilosante (AS) y espondiloartritis indiferenciada, en un sujeto que comprende, sobre una muestra biologica obtenida del sujeto, analizar la muestra para determinar la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB,
    segun lo cual la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 y/o IKBKB es indicativa de la presencia de o el riesgo de desarrollar, o para el control terapeutico de, Spa, como AS.
    Metodo segun la reivindicacion 1, caracterizado porque la muestra biologica del sujeto se analiza para determinar la presencia de autoanticuerpos frente a CD74 e IKBKB.
    Metodo segun la reivindicacion 1 o 2, caracterizado porque se detectan autoanticuerpos anti- IgA y/o IgG.
    Metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el sujeto es un ser humano y los autoanticuerpos son autoanticuerpos humanos.
    Metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la deteccion se realiza usando un inmunoensayo, preferiblemente con acoplamiento directo o indirecto de un reactante a una sustancia marcadora detectable.
    Metodo segun la reivindicacion 5, caracterizado porque la deteccion se lleva a cabo usando un ELISA, RIA, inmunoensayo multiplex o ensayo de inmunofluorescencia, inmunotransferencia de tipo Western, ensayo lineal, ensayo de transferencia puntual.
    Metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la muestra biologica se selecciona de sangre, tejido o fluido, seleccionado preferiblemente de pelo, piel, unas, saliva, sinovia, lfquido cefalorraqrndeo y sangre.
    Metodo segun la reivindicacion 7, en el que la muestra biologica es un fluido corporal, preferiblemente sangre, en particular, suero.
    Metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, para la estratificacion del regimen terapeutico de un sujeto aquejado de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada, o que corre el riesgo de desarrollar Spa, como AS.
    Metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, para identificar el estado de la enfermedad, en particular, la actividad de la enfermedad en un sujeto aquejado de Spa, como AS y espondiloartritis indiferenciada.
    Kit de prueba para su uso en un metodo segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, que comprende medios para determinar autoanticuerpos frente a IKBKB y/o CD74 en una muestra biologica de un sujeto que va a someterse a prueba e instrucciones sobre como usar dicho kit de prueba.
    Kit de prueba segun la reivindicacion 11, que es un ELISA, RIA, inmunoensayo multiplex, inmunotransferencia o transferencia puntual.
ES11781733.8T 2010-08-16 2011-08-16 Métodos y medios para diagnosticar espondiloartritis usando marcadores de autoanticuerpos Active ES2562987T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP10172861A EP2420834A1 (en) 2010-08-16 2010-08-16 Methods and means for diagnosing spondyloarthritis using autoantibody markers
EP10172861 2010-08-16
PCT/EP2011/004098 WO2012022459A1 (en) 2010-08-16 2011-08-16 Methods and means for diagnosing spondylarthritis using autoantibody markers

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2562987T3 true ES2562987T3 (es) 2016-03-09

Family

ID=43042345

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES11781733.8T Active ES2562987T3 (es) 2010-08-16 2011-08-16 Métodos y medios para diagnosticar espondiloartritis usando marcadores de autoanticuerpos

Country Status (4)

Country Link
US (2) US9915664B2 (es)
EP (2) EP2420834A1 (es)
ES (1) ES2562987T3 (es)
WO (1) WO2012022459A1 (es)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8414648B2 (en) 2004-08-09 2013-04-09 Si-Bone Inc. Apparatus, systems, and methods for achieving trans-iliac lumbar fusion
US8986348B2 (en) 2004-08-09 2015-03-24 Si-Bone Inc. Systems and methods for the fusion of the sacral-iliac joint
US9949843B2 (en) 2004-08-09 2018-04-24 Si-Bone Inc. Apparatus, systems, and methods for the fixation or fusion of bone
US8425570B2 (en) 2004-08-09 2013-04-23 Si-Bone Inc. Apparatus, systems, and methods for achieving anterior lumbar interbody fusion
US20180228621A1 (en) 2004-08-09 2018-08-16 Mark A. Reiley Apparatus, systems, and methods for the fixation or fusion of bone
JP6091529B2 (ja) 2012-03-09 2017-03-08 エスアイ−ボーン・インコーポレイテッドＳｉ−Ｂｏｎｅ， Ｉｎｃ． 一体化インプラント
US10363140B2 (en) 2012-03-09 2019-07-30 Si-Bone Inc. Systems, device, and methods for joint fusion
JP6629068B2 (ja) 2012-05-04 2020-01-15 エスアイ−ボーン・インコーポレイテッドＳｉ−Ｂｏｎｅ， Ｉｎｃ． 有窓のインプラント
WO2014145902A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Si-Bone Inc. Implants for spinal fixation or fusion
EP2816354B1 (en) 2013-06-19 2016-09-28 Medizinische Hochschule Hannover Biomarker for complex regional pain syndrome (CRPS)
US11147688B2 (en) 2013-10-15 2021-10-19 Si-Bone Inc. Implant placement
US9839448B2 (en) 2013-10-15 2017-12-12 Si-Bone Inc. Implant placement
JP6542362B2 (ja) 2014-09-18 2019-07-10 エスアイ−ボーン・インコーポレイテッドＳｉ−Ｂｏｎｅ， Ｉｎｃ． マトリックス・インプラント
WO2016044731A1 (en) 2014-09-18 2016-03-24 Si-Bone Inc. Implants for bone fixation or fusion
US10376206B2 (en) 2015-04-01 2019-08-13 Si-Bone Inc. Neuromonitoring systems and methods for bone fixation or fusion procedures
CN109072278A (zh) * 2016-03-18 2018-12-21 上海锐翌生物科技有限公司 分离的核酸及应用
LU100002B1 (en) * 2017-01-04 2018-07-04 Eo Sol Gmbh New testing device and method for detecting Ankylosing Spondylitis
EP3687422A4 (en) 2017-09-26 2021-09-22 SI-Bone, Inc. SYSTEMS AND PROCESSES FOR DECORTICATION OF THE SACROILIAC JOINT
US11369419B2 (en) 2019-02-14 2022-06-28 Si-Bone Inc. Implants for spinal fixation and or fusion
EP3923829A4 (en) 2019-02-14 2022-12-14 SI-Bone, Inc. IMPLANTS FOR SPINE FIXATION AND/OR FUSION
AU2020392121A1 (en) 2019-11-27 2022-06-09 Si-Bone, Inc. Bone stabilizing implants and methods of placement across SI joints
US12083026B2 (en) 2019-12-09 2024-09-10 Si-Bone Inc. Sacro-iliac joint stabilizing implants and methods of implantation
WO2022125619A1 (en) 2020-12-09 2022-06-16 Si-Bone Inc. Sacro-iliac joint stabilizing implants and methods of implantation

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040098756A1 (en) * 2002-10-29 2004-05-20 Sujay Singh Transgenic animals for use in protein expression and antibody production
EP2337863A4 (en) 2008-10-02 2012-11-14 Univ Queensland DIAGNOSTIC MARKERS FOR MORBUS BECHTEREW

Also Published As

Publication number Publication date
US20180224463A1 (en) 2018-08-09
US9915664B2 (en) 2018-03-13
EP2606356A1 (en) 2013-06-26
US20130203088A1 (en) 2013-08-08
EP2420834A1 (en) 2012-02-22
US11199549B2 (en) 2021-12-14
WO2012022459A1 (en) 2012-02-23
EP2606356B1 (en) 2015-10-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2562987T3 (es) Métodos y medios para diagnosticar espondiloartritis usando marcadores de autoanticuerpos
WO2012039161A1 (ja) 新規血管炎の検査方法および検査用試薬
ES2714216T3 (es) Composiciones y métodos para caracterizar afecciones artríticas
US20130296184A1 (en) Novel Method for Diagnosing Lyme Disease Using a Cellular Immunological Test
Villalta et al. Antibodies to fibrillarin, PM-Scl and RNA polymerase III detected by ELISA assays in patients with systemic sclerosis
US9778250B2 (en) Detecting inclusion body myositis
US20150185226A1 (en) Method for Diagnosing Scleroderma
EP2707716A1 (en) Method for the diagnosis of early rheumatoid arthritis
ES2436547T3 (es) Procedimiento para el diagnóstico de una granulomatosis de Wegener
ES2703999T3 (es) Predicción diagnóstica de artritis reumatoide y lupus eritematoso sistémico
JP6312302B2 (ja) 脳梗塞の診断マーカー
US20170199202A1 (en) Marker sequences for diagnosing and stratifying systemic sclerosis patients
US11460467B2 (en) Diagnosis method for lupus
US10036746B2 (en) Method for the diagnosis of neuromyelitis optica
JP5605375B2 (ja) Ｋｕ８６に対する自己抗体の免疫測定方法、それに用いるキット、及びそれを用いた原発性肝細胞癌の判定方法
WO2022176958A1 (ja) リンパ球性下垂体前葉炎及びその類縁疾患のマーカー並びにその利用
ES2727261B2 (es) INMUNOCOMPLEJOS ARTIFICIALES Y SU USO COMO CALIBRES EN SISTEMAS DE DETECCION DE INMUNOCOMPLEJOS CIRCULANTES B2GP1-aB2GP1
WO2020035123A1 (en) Autoantibodies binding to negative elongation factor e (nelf-e) for diagnosing sarcoidosis
CN109725155A (zh) 多肽sle2018-v004在诊断系统性红斑狼疮试剂盒中的应用
ITMI962054A1 (it) Saggio per la determinazione di anticorpi anti-endomisio
JP2014240772A (ja) Ｋｕ７０に対する自己抗体の免疫測定方法、それに用いるキットおよびそれを用いた癌判定方法