ES2534440T3 - Sistema de vector de ASLV - Google Patents
Sistema de vector de ASLV Download PDFInfo
- Publication number
- ES2534440T3 ES2534440T3 ES10721147.6T ES10721147T ES2534440T3 ES 2534440 T3 ES2534440 T3 ES 2534440T3 ES 10721147 T ES10721147 T ES 10721147T ES 2534440 T3 ES2534440 T3 ES 2534440T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- region
- shows
- vector
- aslv
- promoter
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/11011—Alpharetrovirus, e.g. avian leucosis virus
- C12N2740/11041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2740/11043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Virology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
ARN retroviral con una zona 5' que presenta una región R y una región U5 del Virus de la Leucosis/Sarcoma Aviar (ASLV) y dispuesto en 3' con respecto a esto un sitio de unión de cebador (PBS), una señal de empaquetamiento (y), un casete de expresión, una región U3 3' y una región R, caracterizado por que la región U3 3' presenta una secuencia de nucleótidos correspondiente a la SEC ID Nº: 1, de la cual están delecionados al menos los nucleótidos Nº 28 hasta el Nº 186 inclusive, por lo que se elimina la actividad promotora y potenciadora de la región U3 3' y por que no están contenidas secuencias de ácido nucleico que codifiquen al menos en parte proteínas estructurales virales o un sitio donador de empalme (SD).
Description
5
15
25
35
45
55
65
E10721147
06-04-2015
- -
- La Figura 1 muestra la estructura esquemática del tipo natural de ASLV,
- -
- La Figura 2 muestra la estructura esquemática de un vector SIN y un plásmido que contiene el vector,
- -
- La Figura 3 muestra la estructura esquemática de un primer plásmido auxiliar,
- -
- La Figura 4 muestra la estructura esquemática de un segundo plásmido auxiliar,
- -
- La Figura 5 muestra una comparación de la región U3 de tipo natural (U3) con la región U3 delecionada (dU3)
- de acuerdo con la invención, de la región U3 delecionada de acuerdo con la invención sin caja TATA (dU3
- noTATA) y con la región U3 delecionada de acuerdo con la invención con caja TATA mutada (dU3 TATAmut),
- -
- La Figura 6 muestra un mapa de plásmido de un vector de acuerdo con la invención en el que el casete de
- expresión EGFP codifica como ejemplo un transgén,
- -
- La Figura 7 muestra un mapa de plásmido con el vector de acuerdo con la invención en el que está mutada la
- caja TATA de la región U3,
- -
- La Figura 8 muestra un mapa de plásmido con vector de acuerdo con la invención, en cuya región U3 está
- delecionada adicionalmente la caja TATA,
- -
- La Figura 9 muestra un mapa de plásmido de un primer plásmido auxiliar para la traducción de la proteína de
- fusión gag-pol,
- -
- La Figura 10 muestra un mapa de plásmido de un primer plásmido auxiliar en el que la secuencia que codifica
- la proteína de fusión gag-pol está optimizada en cuanto a codones para una célula de empaquetamiento y/o
- diana humana,
- -
- La Figura 11 muestra gráficamente la magnitud de la expresión de un transgén (EGFP) del vector de acuerdo
- con la invención en comparación con la expresión de un vector viral con LTR 3' de tipo natural,
- -
- La Figura 12 muestra gráficamente la magnitud de la expresión de un transgén (EGFP) de vectores SIN de
- acuerdo con la invención,
- -
- La Figura 13 muestra una representación de la estructura integrada de un vector de acuerdo con la invención
- en comparación con la estructura de un vector SIN lentiviral o γ-retroviral,
- -
- La Figura 14 muestra esquemáticamente construcciones de ácido nucleico de ADN para la transcripción de
- ARN viral con casetes de expresión que contiene funcionalmente en 5' con respecto a un gen indicador la
- secuencia de ácido nucleico que se debe ensayar en cuanto a actividad promotora y potenciadora y
- -
- La Figura 15 muestra la magnitud de la expresión del gen indicador en células que están transfectadas con
- ARN viral de la Figura 14 y que mide la actividad promotora/potenciadora.
En la descripción de la U3 SIN de acuerdo con la invención se efectúa la numeración de los nucleótidos en relación con la secuencia de nucleótidos de la U3 de tipo natural de ASLV y correspondientemente, las deleciones o secciones de la región U3 SIN están indicadas correspondientemente a la numeración de los nucleótidos de la U3 de tipo natural.
La Figura 1 muestra la estructura esquemática del ASLV de tipo natural en el que las LTR contienen una región U3, una región R y una región U5 limitando entre sí. Las LTR son respectivamente idénticas, ya que en la replicación viral la región U3 de la LTR 3' se copia en el extremo 5' y las regiones R y U5 de la LTR 5' se copian en la LTR 3'. El inicio de la transcripción +1 define el extremo 5' de la región R 5'.
La Figura 2 muestra el vector a nivel de plásmido, en cuyo extremo 5' está dispuesto un promotor delante de la región R para posibilitar la transcripción a partir de la región R 5'. Este promotor 5' de la LTR 5', a causa del inicio de la transcripción en +1 como primer nucleótido de la región R 5' no está contenido en el ARN viral; el ARN viral que se genera está compuesto de las zonas entre el nucleótido +1 de la región R 5' y el extremo 3' de la región R 3' más cola de poliA. Correspondientemente, las partículas virales contienen un ARN viral que se produce a partir de la sección del vector que comprende la región R 5' (incluyendo el nucleótido +1) hasta el extremo 3' de la región R 3' con cola de poliA adjunta. El promotor mostrado en la Figura 2 cadena arriba de la región R 5' del vector viral, que preferentemente está compuesto de un potenciador de SV40 y una región U3 del tipo natural de RSV (Virus del Sarcoma de Rous), no se convierte en parte del ARN viral, sino que controla la transcripción eficaz del ARN viral de una secuencia de ADN correspondiente en la Figura 2. En el presente caso está mostrado el vector en el nivel de plásmido, como una secuencia de ADN que codifica el ARN viral que puede ser parte de un plásmido del cual se transcribe el ARN viral.
Como se indica en la Figura 2, el vector viral entre las LTR y correspondientemente después de la región líder contiene un casete de expresión que presenta al menos un promotor interno, por ejemplo, el promotor de SFFV y EFS (factor de elongación 1α), con una secuencia de nucleótidos que codifica un transgén (gen), preferentemente con un PRE dispuesto en 3'.
El PRE, que preferentemente es WPRE, del casete de expresión presenta preferentemente una deleción X-ORF y/o mutaciones de ATG:
El vector y el ARN viral de acuerdo con la invención presentan al menos en la LTR 3' una región U3 con deleciones que inactivan cualquier actividad promotora de la LTR. En 5' delante de la LTR SIN 3' y/o dentro de la región U3 3', el vector viral puede contener elementos genéticos homólogos y/o heterólogos, por ejemplo, secuencias que comprenden miARN, ARNhc, ARN potenciadores de la poliadenilación, secuencias de reconocimiento de recombinasa, USE y/o aisladores.
7
Claims (1)
-
imagen1 imagen2
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE102009021592A DE102009021592A1 (de) | 2009-05-15 | 2009-05-15 | ASLV-Vektorsystem |
| DE102009021592 | 2009-05-15 | ||
| PCT/EP2010/056757 WO2010130844A1 (de) | 2009-05-15 | 2010-05-17 | Aslv-vektorsystem |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2534440T3 true ES2534440T3 (es) | 2015-04-22 |
Family
ID=42470559
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES10721147.6T Active ES2534440T3 (es) | 2009-05-15 | 2010-05-17 | Sistema de vector de ASLV |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8642570B2 (es) |
| EP (1) | EP2430167B1 (es) |
| AU (1) | AU2010247368B2 (es) |
| CA (1) | CA2766676C (es) |
| DE (1) | DE102009021592A1 (es) |
| DK (1) | DK2430167T3 (es) |
| ES (1) | ES2534440T3 (es) |
| RU (1) | RU2566563C2 (es) |
| WO (1) | WO2010130844A1 (es) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2018049273A1 (en) * | 2016-09-08 | 2018-03-15 | Centro De Investigaciones Energeticas Medioambientales Y Tecnologicas | Gene therapy for patients with fanconi anemia |
| DE102020111571A1 (de) | 2020-03-11 | 2021-09-16 | Immatics US, Inc. | Wpre-mutantenkonstrukte, zusammensetzungen und zugehörige verfahren |
| US20230193212A1 (en) | 2020-05-06 | 2023-06-22 | Orchard Therapeutics (Europe) Limited | Treatment for neurodegenerative diseases |
| EP4192487A4 (en) | 2020-08-07 | 2024-10-02 | Spacecraft Seven Llc | GENE THERAPY FOR PLAKOPHILIN-2 (PKP2) INVOLVING AAV VECTOR |
| EP4086352A1 (en) * | 2021-05-07 | 2022-11-09 | Medizinische Hochschule Hannover | Glycoproteins for pseudotyping retroviral vector particles |
| GB202114532D0 (en) * | 2021-10-12 | 2021-11-24 | Oxford Biomedica Ltd | Lentiviral Vectors |
| CN114349829B (zh) * | 2022-01-14 | 2023-04-21 | 华南农业大学 | Alv-j mhc-b2限制性表位肽的鉴定及其应用 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EE03492B1 (et) * | 1994-09-02 | 2001-08-15 | GSF-Forschungszentrum f�r Umwelt und Gesundheit GmbH | Mitte-autoinaktiveeruvad ekspressiooni suunavad retroviiruslikud vektorid |
| DE10045016B4 (de) * | 2000-09-12 | 2004-07-29 | Heinrich-Pette-Institut | Retrovirale Vektoren mit Fremdsequenzinsertion zwischen retroviraler Primerbindungsstelle und retroviralem Spleißdonor |
| EP1757702A1 (en) * | 2005-08-24 | 2007-02-28 | Medizinische Hochschule Hannover | Self-inactivating gammaretroviral vector |
| EP1757703A3 (en) * | 2005-08-24 | 2007-12-05 | Medizinische Hochschule Hannover | Self-inactivating retroviral vector |
| EP2126071A4 (en) * | 2007-01-26 | 2010-12-08 | Synageva Biopharma Corp | TRANSGENEXPRESSION IN BIRDS |
-
2009
- 2009-05-15 DE DE102009021592A patent/DE102009021592A1/de not_active Withdrawn
-
2010
- 2010-05-17 EP EP10721147.6A patent/EP2430167B1/de active Active
- 2010-05-17 ES ES10721147.6T patent/ES2534440T3/es active Active
- 2010-05-17 CA CA2766676A patent/CA2766676C/en active Active
- 2010-05-17 WO PCT/EP2010/056757 patent/WO2010130844A1/de active Application Filing
- 2010-05-17 DK DK10721147T patent/DK2430167T3/en active
- 2010-05-17 US US13/320,179 patent/US8642570B2/en active Active
- 2010-05-17 RU RU2012130149/10A patent/RU2566563C2/ru active
- 2010-05-17 AU AU2010247368A patent/AU2010247368B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2566563C2 (ru) | 2015-10-27 |
| AU2010247368A1 (en) | 2012-01-19 |
| DK2430167T3 (en) | 2015-04-13 |
| EP2430167B1 (de) | 2015-01-07 |
| CA2766676C (en) | 2017-01-03 |
| DE102009021592A1 (de) | 2010-11-18 |
| CA2766676A1 (en) | 2010-11-18 |
| EP2430167A1 (de) | 2012-03-21 |
| WO2010130844A1 (de) | 2010-11-18 |
| AU2010247368B2 (en) | 2014-12-11 |
| RU2012130149A (ru) | 2014-01-27 |
| US8642570B2 (en) | 2014-02-04 |
| US20120172418A1 (en) | 2012-07-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2534440T3 (es) | Sistema de vector de ASLV | |
| ES2821782T3 (es) | Episomas estables basados en vectores lentivirales no integrativos | |
| Fekete et al. | Replication-competent retroviral vectors encoding alkaline phosphatase reveal spatial restriction of viral gene expression/transduction in the chick embryo | |
| van Ooyen et al. | Structure and nucleotide sequence of the putative mammary oncogene int-1; proviral insertions leave the protein-encoding domain intact | |
| Dougherty et al. | A promoterless retroviral vector indicates that there are sequences in U3 required for 3'RNA processing. | |
| Naviaux et al. | The pCL vector system: rapid production of helper-free, high-titer, recombinant retroviruses | |
| ES2601141T3 (es) | Método para la expresión de moléculas de ARN pequeño dentro de una célula | |
| Luciw et al. | Location and function of retroviral and SV40 sequences that enhance biochemical transformation after microinjection of DNA | |
| ES2959326T3 (es) | Líneas celulares estables para producción retroviral | |
| Suerth et al. | Self-inactivating alpharetroviral vectors with a split-packaging design | |
| TR201802323T4 (tr) | Polipürin yolu modifiye edilmiş retroviral vektörler. | |
| CA1341119C (en) | Human erythroid-specific transcriptional enhancer | |
| Logg et al. | Tissue-specific transcriptional targeting of a replication-competent retroviral vector | |
| Yu et al. | Jaagsiekte sheep retrovirus and enzootic nasal tumor virus promoters drive gene expression in all airway epithelial cells of mice but only induce tumors in the alveolar region of the lungs | |
| CA1335798C (en) | Retroviral vector | |
| Greenhouse et al. | Helper-independent retrovirus vectors with Rous-associated virus type O long terminal repeats | |
| Hu et al. | Generation of a stable mammalian cell line for simultaneous expression of multiple genes by using 2A peptide-based lentiviral vector | |
| Schön et al. | Human endogenous retroviral long terminal repeat sequences as cell type-specific promoters in retroviral vectors | |
| Akiyama et al. | Gene structure and cell type-specific expression of the human ATP synthase α subunit | |
| Rollini et al. | Expression pattern of mouse mammary tumor virus in transgenic mice carrying exogenous proviruses of different origins | |
| EP1283895A2 (en) | Retroviral vectors comprising an enhanced 3' transcription termination structure | |
| Schwartz et al. | DNA recombination is sufficient for retroviral transduction. | |
| D'Agostino et al. | Influence of Rex and intronic sequences on expression of spliced mRNAs produced by human T cell leukemia virus type I | |
| Schambach et al. | Retroviral vectors for cell and gene therapy | |
| Sakoda et al. | Lentivirus vector-mediated gene transfer to cardiomyocytes |