ES2531759T3 - Composición farmacéutica en base a especies de Stachytarpheta, un proceso para obtener la misma y su uso para tratar el vitíligo - Google Patents

Abstract

1. Composición farmacéutica para su uso en la profilaxis o tratamiento del vitíligo, que comprende un extracto obtenido de una o más partes de plantas seleccionadas del grupo que consiste en Stachytarpheta cayennensis, Stachytarpheta jamaicensis, Stachytarpheta eliotis o sus mezclas, en la que el extracto comprende de 0,001 a 99 % de al menos uno de los compuestos o sus mezclas, en forma libre o en forma de sal, de estructura química (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) y (VII): 2. **Fórmula** en las que R es idéntico o diferente y cada uno se selecciona independientemente entre H, CH3, CH2CH3, CH2OH, COCH3, metales alcalinos, halógenos, monosacáridos, disacáridos o polisacáridos, CO(CH2)nCH3, (CH2)nCH3, donde n varía de 2 a 16.

Description

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02-03-2015

Las evaluaciones de las actividades biológicas del extracto alcohólico y sus reparticiones líquido-líquido (hexánicos, clorofórmicos y acuosos), obtenidos todos de las partes aéreas de S. cayennensis, S. jamaicensis y S. eliotis, así como de componentes químicos aislados, se llevaron a cabo en pruebas n vivo, del siguiente modo: Las pruebas de citotoxicidad se llevaron a cabo usando alevines de Poecilia reticulata; las pruebas de toxicidad usaron larvas de Artemia salina y las pruebas de microbiológicas usaron 7 bacterias, 5 hongos similares a levaduras y 6 hongos filamentosos

Los ensayos para evaluar las características ictiotóxicas o piscicidas se realizaron con alevines de Poecilia reticulata recolectados del río Jaguaribe de la ciudad de João Pessoa-PB [estado de Paraíba], aclimatados en laboratorio durante 48 horas, alimentados con alimento para peces. Los alevines usados en los ensayos biológicos tenían un promedio de 17.1 mm de longitud. Los extractos hidroalcohólicos, alcohólicos y acuosos (decocción) se diluyeron en agua destilada en las concentraciones de 1, 10 y 100 µg/ml.

Las soluciones del producto, en las tres concentraciones, se usaron en las pruebas de evaluación biológica en un vaso de precipitados de 1.000 ml cubierto por redes de tul, que contienen 400 ml de la solución de cada producto. Los ensayos se llevaron a cabo con grupos de 10 alevines, individualmente, con un tiempo de exposición de 24 horas. Durante este periodo, las soluciones citadas se airearon con dispositivos adecuados a temperatura ambiente. Para cada ensayo biológico se llevó a cabo una prueba de control en agua destilada y aireada con 10 alevines recogidos y tratados igual.

La evaluación macroscópica de la actividad de dichas sustancias alrededor de los alevines se llevó a cabo por medio de cambios fisiológicos y conductuales, tales como: hiperactividad, movimientos convulsivos, pérdida de equilibrio, intentos de escapar de los recipientes y muerte. Los resultados revelaron que los productos eran no tóxicos en las tres concentraciones analizadas.

La evaluación de la actividad citotóxica de los extractos alcohólicos e hidroalcohólicos y la decocción se llevó a cabo en un medio salino con microlarvas recién eclosionadas de Artemia salina Leach, a concentraciones de 1, 10 y 100 µg/ml. Para realizar los bioensayos se usó la metodología adaptada de Fontenele et al. Cada solución se evaluó en las pruebas tóxicas por triplicado usando 10 larvas de Artemia salina. Este experimento se mantuvo a temperatura ambiente (26-28 ºC) con luz artificial durante un periodo de hasta 24 horas seguidas. Se preparó una prueba de control usando 5 ml de solución salina con 10 larvas de A. salina, en las mismas condiciones experimentales de las pruebas descritas anteriormente. Los resultados de dichos bioensayos revelaron que ninguno de los extractos presentaba toxicidad a concentraciones de hasta 100 µg/ml.

Las pruebas microbiológicas se llevaron a cabo con extractos alcohólicos e hidroalcohólicos y con la decocción obtenida individualmente de las partes aéreas de las 3 especies (S. cayennensis, S. jamaicensis y S. eliotis), a concentraciones de 2.500, 1.250, 625, 313 y 156 mg/ml, solubilizados en dimetilsulfóxido (DMSO).

Los ensayos microbiológicos con los extractos citados se llevaron a cabo en medio sólido usando la técnica de dilución en serie en una proporción de 2, en agar dextrosa Sabouraud (DIFCO) y agar nutritivo (Merck). En tubos de ensayo de 12 x 120 mm se añadieron 3 ml del medio al 1er tubo y 1,5 ml a los demás; se añadieron 15 mg del extracto al 1er tubo, creando las demás diluciones. Después se añadieron 10 µl de la suspensión de microorganismos normalizada a 106 UFC, de acuerdo con el tubo 0,5 de la escala de McFarland, y se ajustó al 90 % de T (530 nm). Asimismo, los extractos se analizaron mediante las técnicas de Vicent y Vicent y Allegrini; el medio de cultivo añadido con la suspensión de microorganismos también se añadió a discos de papel de filtro (CECO/SP) impregnados con 0,02 ml de cada extracto. Se creó un control para cada microorganismo con antimicrobianos convencionales (cloranfenicol a 30 µg/ml, tetraciclina a 30 µg/m y ketoconazol a 1.000 µg/ml). Los ensayos se incubaron a 37 ºC durante 24-48 horas (bacterias y levaduras) y a temperatura ambiente durante 10-14 días (hongos filamentosos). Los ensayos microbiológicos de los productos mencionados se llevaron a cabo contra bacterias grampositivas y gramnegativas; los ensayos con hongos de tipo levadura y hongos filamentosos se realizaron contra los microorganismos siguientes: Bacterias: Bacillus cereus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus; Hongos de tipo levadura: Candida albicans, Candida tropicali y Cryptococcus neoforman; hongos filamentosos: Aspergillus parasiticus, Penicilium sp y Trichophyton rubrum. Los ensayos microbiológicos de los productos mencionados no presentaron actividad antimicrobiana contra ninguno de los microorganismos analizados.

Las evaluaciones farmacológicas, preclínicas y clínicas del extracto alcohólico y los extractos acuosos (decocción) de las partes aéreas de S. cayennensis, S. jamaicensis y S. eliotis se llevaron a cabo individualmente tanto in vitro como in vivo para las actividades descritas más adelante.

Las evaluaciones se realizaron en ratones Swiss-Webster (10/grupo), que recibieron dosis de 0,5 a 1,0 mg/kg de extracto por vía oral. Los animales en el grupo control recibieron solución salina al 0,9 % (10 ml/kg; por vía oral) únicamente. Este resultado no produjo ninguna muerte en los grupos tratados con los extractos alcohólicos, hidroalcohólicos y acuosos (decocción) de las 3 especies de plantas. Solo un grupo tratado con extracto alcohólico de S. eliotis presentó una tasa de mortalidad del 10 %. No se observaron signos de toxicidad con respecto a un cambio significativo en la evolución del peso, el peso de los órganos (corazón, bazo, hígado, estómago, riñones,

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