ES2474166T3 - Compuestos novedosos para la modulación de la actividad del receptor gamma huérfano (ROR gamma, NR1F3) relacionado con RAR del receptor nuclear huérfano y para el tratamiento de enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria crónica - Google Patents

Compuestos novedosos para la modulación de la actividad del receptor gamma huérfano (ROR gamma, NR1F3) relacionado con RAR del receptor nuclear huérfano y para el tratamiento de enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria crónica Download PDF

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Abstract

Compuesto representado por la formula (1)**Fórmula** y los enantiOmeros, diastereomeros, tautOmeros, solvatos y sales farmaceuticamente aceptables del mismo, en la que: R1 es hidrogeno; alquilo C1.42; alquenilo C1..12; alquinilo C1-12; cicloalquilo C3-10; COO-alquilo Ci_6; C0NR10R11; CN; NR1°R11; un heterociclo saturado de 3-10 miembros que contiene 1 0 2 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2, 3 6 4 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros en el que los grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo y heterociclico no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, halo-alquilo C1_6, 0-alquilo Ct.6, 0-(halo-alquilo C1.6), C0NR 10R11 y NR10R11; y en el que los sistennas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, alquilo C1_6, halo-alquilo C1-12, cicloalquilo C3-6, 0- alquilo Ci_6, 0-(halo-alquilo C1_6), COOH, CO2NR10R11, NR10.-.11, un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, un sistema de anillos aromatico mono o biciclico de 6-10 miembros, y un heterociclo saturado de 3-8 miembros que contiene 1 02 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S en el que los sistemas de anillos, los grupos alquilo y cicloalquilo, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, alquilo Ci.6, halo-alquilo C1-6, 0-alquilo Ci_6, 0-(halo-alquilo Ci_6) y COOH; o en el que los sistennas de anillos heteroaromaticos y aromaticos estan condensados con un heterociclo saturado de 5-8 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S en el que el sistema de anillos condensado no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogeno, ciano, alquilo halo-alquilo C1.6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6, 0-(halo-alquilo COOH, CO2NR 10R11 y NRiuR11;

Description

Compuestos novedosos para la modulacion de la actividad del receptor gamma huerfano (ROR gamma, NR1F3) relacionado con RAR del receptor nuclear huerfano y para el tratamiento de enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria cr6nica
Lainvencion proporciona moduladores para el receptor nuclear huerfano RORy y metodos para tratar enfermedades autoinmunitarias e inflamatorias crenicas mediadas por RORy mediante la administracion de estos moduladores novedosos de RORy a un ser humano o un mamifero que los necesita.
Los receptores huerfanos relacionados con el receptor retinoide consisten en tres miembros de familia, concretamente RORa (Beckerandre etal. ,Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993, 194:1371), RORp (Andre etal. , Gene 1998, 516:277) y RORy (He etal. ,Immunity 1998, 9:797) y constituyen el subgrupo de NR1F (ROR/RZR) de la superfamilia de receptores nucleares (Mangelsdorf et al. , Cell 1995, 83:835).
La superfamilia de receptores nucleares comparte dominios estructurales modulares comunes que consisten en un dominio N-terminal hipervariable, un dominio de union a ADN (DBD) conservado, una regi6n bisagra y un dominio de uni6n a ligando (LBD) conservado. El DBD tiene como diana el receptor para secuencias de ADN especificas (elementos de respuesta a hormonas nucleares o NRE) y el LBD funciona en el reconocimiento de ligandos quimicos end6genos o exogenos. Un dominio de activacion de la transcripciOn constitutivo se encuentra en el extremo N-terminal (AF1) y un dominio de activaciOn de la transcripcion regulado por ligando esta incluido dentro del
LBD C-terminal de los NR tipicos. Los receptores nucleares pueden existir en un estado de activacion o de represi6n de la transcripciOn cuando se unen a sus NRE diana. El mecanismo basic° de la activacien genica implica intercambio dependiente de ligando de proteinas correguladoras, concretamente coactivadores y correpresores (McKenna et al. , Endocrine Rev. 1999, 20:321). Un NR en el estado de represion se une a su elemento de reconocimiento de ADN y se asocia con proteinas correpresoras que reclutan histona desacetilasas (HDAC). En presencia de un agonista, los correpresores se intercambian con coactivadores que reclutan factores de transcripci6n, que contribuyen al ensamblaje de un complejo de remodelacion de cromatina, que libera la represion dela transcripcion y estimula el inicio de la transcripcion a traves de la acetilacion de histona. El dominio AF-2 del LBD actua como interruptor molecular dependiente de ligando que presenta superficies de interaccidm para proteinas correpresoras o coactivadoras y que proporciona un mecanismo conservado para la activacion o represiOn genica que se comparte por los miembros de la superfamilia de receptores nucleares.
Se ha considerado que los miembros de la familia de NR1F de receptores nucleares (tal como RORy) son factores
detranscripcion constitutivamente activos en ausencia de ligandos conocidos, lo que es similar al receptor alfa relacionado con estrogenos (Vanacker etal. , Mol. Endocrinol. 1999, 13:764). Lo mas recientemente, se identified, que oxiesteroles 7-oxigenados son ligandos de alta afinidad para RORa y RORy (Wang etal. , J. Biol. Chem. 2010,
285:5013). El 7-hidroxicolesterol es un metabolito cave durante la conversiOn de colesterol en acidos biliares, pero hasta la fecha no esta claro si es un autentico ligando endogeno para los ROR. En cualquier caso, puede esperarse que los agonistas inversos de RORy reduzcan la actividad de transcripciOn de RORy e influyan en las rutas biologicas controladas por RORy.
Los ROR se expresan como isoformas que surgen de sitios de corte y empalme diferencial o inicio de la transcripcion alternativos. Hasta ahora, se han descrito isoformas que difieren solo en su dominio N-terminal (dominio A/B). En seres humanos, se han identificado cuatro isoformas de RORa diferentes (RORa 1-4) mientras que solo se conocen dos isoformas tanto para RORp (1 y 2) como para RORy (1 y 2) (Andre et al. , Gene 1998, 216:277; Villey et al. , Eur. J. lmmunol. 1999, 1529:4072). RORy se usa en el presente documento como termino que describe RORy1 y/o RORy2.
Las isoformas de ROR muestran diferentes patrones de expresiOn tisular y regulan diferentes genes diana y rutas fisiologicas. Por ejemplo, la RORy2 (tambien denominada RORyt) esta altamente restringida a timocitos CD4+CD8+ y acelulas T que producen interleucina 17 (IL-17) mientras que otros tejidos expresan RORy1 (Eberl etal. , Science 2004, 305:248, Zhou y Littmann, Curr. Opin. lmmunol. 2009, 21: 146).
Los ROR muestran una arquitectura estructural que es tipica de receptores nucleares. Los ROR contienen cuatro dominios funcionales principales: un domino amino terminal (NB), un dominio de uni6n a ADN (DBD), un dominio bisagra y un dominio de uni6n a ligando (LBD) (Evans et al. , Science 1988, 240:889). El DBD consiste en dos motivos de dedo de cinc altamente conservados implicados en el reconocimiento de los elementos de respuesta de ROR (RORE) que consisten en el motivo consenso AGGTCA precedido por una secuencia rica en AT (Andre etal. , Gene 1998, 216:277) que es similar a la de los receptores nucleares Rev-ErbAa y Rev-Erbp (NR1D1 y D2, respectivamente) (Giguere et al. , Genomics 1995, 28:596). Estos elementos de reconocimiento tambien muestran alta similitud con los identificados para los receptores relacionados con estr6genos y en particular ERRa (ERR,
NR3B1,
-2, -3) (Vanacker etal., Mol. Endocrinol. 1999, 13:764), factor esteroidogenico 1 (SF-1, NR5A) y NGFI-B (NR4A1, -2, -3) (Wilson etal. ,Mol. Cell. Biol. 1993, 13:5794).
RORa se expresa altamente en diferentes regiones cerebrales y lo mas altamente en el cerebelo y el talamo. Los
ratones deficientes en RORa muestran ataxia con fuerte atrofia cerebelar, altamente similar a los sintomas mostrados en el denominado rat& mutante tambaleante (quot;staggerer) (RORasglsg) . Este raton porta mutaciones en RORa, lo que da como resultado un RORa truncado que no contiene un LBD (Hamilton et al. , Nature 1996, 379:736).
Los analisis de los ratones tambaleantes RORasgisg han revelado un fuerte efecto sobre el metabolismo lipidico mas alla de los defectos en el SNC, concretamente disminuciones significativas en los trigliceridos sericos y hepaticos, niveles colesterol HDL serico reducidos y adiposidad reducida. SREBP1c y los transportadores de colesterol ABCA1 y ABCG1 estan reducidos en higados de ratones tambaleantes y el analisis de CHIP sugiere que RORa se recluta
directamente a y regula el promotor de SREBP1c. Adernas, se encontr6 que PGC1a, PGC18, lipina1 y el receptor
82-adrenergico estaban aumentados en tejidos tales como el higado o el tejido adiposo blanco y marron, lo que puede ayudar a explicar la resistencia observada a la obesidad inducida por dieta en ratones tambaleantes (Lau et al. , J. 15 Biol. Chem. 2008, 283:18411).
La expresiOn de ROR8 este restringida principalmente al cerebro y se encuentra lo mas abundantemente en la retina. Los ratones deficientes en ROR8 muestran un modo de andar similar al de un pato y degeneraci6n de la retina que conduce a ceguera (Andre etal. ,EMBO J. 1998, 17:3867). Los mecanismos moleculares detras de esta degeneracion de la retina todavia no se entienden bien.
Los ratones mutantes nulos para RORy (particularmente RORy2) carecen de ganglios linfaticos y places de Peyer (Eberl y Littmann, Immunol. Rev. 2003, 195:81) y las celulas inductoras de tejido linfatico (LTi) ester' completamente ausentes del bazo, mesenterio e intestino. Ademas, el tamario del timo y el nt.imero de timocitos este enormemente
reducido en ratones nulos para RORy (Sun et al. , Science 2000, 288:2369) debido a una reducci& en celulas CD4+CD8+ dobles positives y CD4-CD8+ o CD4+CD8-simples positives lo que sugiere un papel muy importante de RORy2 en el desarrollo de timocitos.
El desarrollo de tinnocitos sigue un programa complejo que implica ciclos coordinados de proliferacion, diferenciaciOn, muerte celular y recombined& *lice en poblaciones celulares especializadas por su microentorno. Los progenitores de linfocitos pluripotentes que migran desde el higado fetal o la medula ()sea de adulto hasta el timo ester' asignandose al linaje de celulas T. Se desarrollan a traves de una serie de etapas desde celulas dobles negatives CD4-CD8-hasta celulas CD4+CD8+ y los que tienen baja afinidad hacia los propios peptidos del MHC se eliminan por seleccion negative. Estos se desarrollan adicionalmente para dar linajes de celulas T CD4+CD8+ (citotoxicas) o CD4+CD8-(cooperadoras). RORy2 no se expresa en timocitos dobles negativos y se expresa poco en
timocitos simples negativos inmaduros (He et al. , J. lmmunol. 2000, 164:5668), aunque se regula altamente por incremento en timocitos dobles positivos y se regula por disminucion durante la diferenciacion en timocitos simples positivos. La deficiencia de RORy da como resultado un aumento de la apoptosis en celulas CD4+CD8+ y el raimero de timocitos en sangre periferica disminuye en 6 veces (timocitos CD4+ en 10 veces y CD8+ en 3 veces).
Experimentos recientes en un modelo de inflamed& inducida por ovoalbOrnina (OVA) en ratones, como modelo
para enfermedad alergica de vies respiratorias, demostraron un deterioro grave del desarrollo del fenotipo alergico en ratones deficientes en RORy con nOmeros disminuidos de celulas CD4+ y expresion de ARNm y proteina citocina/quimiocina de Th2 inferior en los pulmones tras exposiciOn con OVA (Tilley et al. , J. Immunol. 2007,
178:3208). La producci6n de IFN-y e IL-10 estaba aumentada en esplenocitos tras la estimulaciOn de nuevo con el antigen° OVA en compared& con los esplenocitos silvestres lo que sugiere un cambio hacia la respuesta inmunitaria de tipo Th1 a expensas de una reducci& de la respuesta de tipo Th2. Esto sugiere que la modulaci
por disminuci6n de la actividad de transcripciOn de RORy con un ligando podria dar como resultado un cambio similar de la respuesta inmunitaria hacia una respuesta de tipo Th 1, lo que podria ser beneficioso en el tratamiento de determinadas enfermedades pulmonares como asma o estados inflamatorios alergicos.
Anteriormente se consideraba que las celulas T cooperadoras consistian en celulas Th1 y Th2. Sin embargo,
tambien se identifico una nueva clase de celulas Th, las celulas Th17, que producen IL-17, como una clase Unica de celulas que se considera que son proinfiamatorias. Se reconocen como factores cave en enfermedades autoinmunitarias e infiamatorias puesto que la expresi6n de IL-17 se ha asociado con muchas enfermedades infiamatorias tales como artritis reumatoide, lupus eritematoso sistemico (LES) y rechazo de aloinjerto (Tesmer etal. , lmmunol. Rev. 2008, 223:87).
RORy2 se expresa exclusivamente en celulas del sistema inmunitario y se ha identificado como un regulador maestro de la diferenciaci& de celulas Th17. La expresiOn de RORy2 este inducida por TGF-beta o IL-6 y la sobreexpresion de RORy2 da como resultado la expresiOn aumentada del linaje de celulas Th17 e IL-17. Los ratones deficientes en RORy2 muestran muy pocas celulas Th17 en la lamina propia intestinal y demuestran una respuesta atenuada a exposiciones que conducen habitualmente a enfermedad autoinmunitaria (Ivanov et al. , Cell 2006,
126:1121 ).
La inhibiciOn de la producci6n de IL-17 a traves de la inhibiciOn del desarrollo de celulas Th17 tambien puede ser ventajosa en dermatitis atOpica y psoriasis donde la IL-17 este implicada profundamente. Resulta interesante que se presentaran pruebas recientes de que la IL-10 suprime la expresi6n de la IL-17 secretada tanto por macrofagos
como por celulas T. Ademas, se suprimio la expresi6n del factor de transcripciOn de Th17, RORy2 (Gu etal. , Eur. J. Immunol. 2008, 38:1807). Adernas, los ratones deficientes en IL-10 proporcionan un buen modelo para la enfermedad inflamatoria del intestino (Ell) donde se observe frecuentemente un cambio hacia una respuesta inflamatoria de tipo Th1. La administraci6n de IL-10 oral supone una posible opciOn de tratamiento para Ell.
Las acciones proinflamatorias de las celulas Th17 que producen IL-17 se contrarrestan por otro tipo de celulas T cooperadoras, denominadas celulas T reguladoras o Treg. Las celulas T virgenes se diferencian a Treg tras la estimulacion por TGFP. Esto da como resultado la regulaciOn por incremento del modulador de la transcripcion FoxP3 dando como resultado Treg CD4+FoxP3+. En el caso en que las celulas T virgenes se coestimulen por IL-6, se suprime la expresion de FoxP3 y se induce la expresion de RORyt. Estas celulas T cooperadoras CD4+FoxP3
RORyt+ se diferencian entonces dando lugar a celulas Th17 que producen IL-17 (revisado en Awasthi y Kuchroo, Int. lmmunol. 2009, 21:489, y Zhou y Littmann, Curr. Opin. Immunol. 2009, 21:146). Varias lineas de evidencia sugieren que estas celulas Th17 celulas son responsables de la etiologia de una variedad completa de enfermedades autoinmunitarias tales como esclerosis mOltiple, artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, psoriasis, enfermedad de Crohn y otros tipos de enfermedad inflamatoria del intestino, lupus eritematoso y asma. La gravedad de la
enfermedad parece estar correlacionada con la presencia de celulas Th17 IL-17+ y se cree que la intercepci6n de RORyt por un antarnista o agonista inverso de molecule pequeno debe dar como resultado una reducciOn en estas celulas Th17 IL-17 , lo que conduce finalmente al alivio de los sintomas y el desenlace de la enfermedad (Crome et al. , Clin. Exp. Immunol. 2010, 159:109).
Ligandos para los ROR:
Senotific6 que el colesterol y sus derivados sulfatados podrian funcionar como ligandos de RORa y en particular el sulfato de colesterol podria restablecer la actividad de transcripciOn de RORa en celulas con colesterol reducido (Kellen et al. , Structure 2002, 10:1697). Anteriormente, se sugiri6 que la melatonina (Missbach et al. , J. Biol. Chem. 1998, 271:13515) y las tiazolidindionas se unian a RORa. (Wiesenberg et al. , Nucleic Acid Res. 1995, 23:327). Sin embargo, ninguno de estos ha mostrado ser un ligando funcional de RORa ni de ningiin otro de los ROR.
Determinados retinoides, incluyendo el acid° retinoide todo trans, han demostrado unirse a RORp y funcionar como antagonistas parciales para RORp pero no para RORa (Stehlin-Gaon etal. , Nat. 35 Struct. Biol. 2003, 10:820).
Recientemente, los esteroles 7-oxigenados tales como el 7-hidroxi-colesterol y el 7-ceto-colesterol se identificaron como moduladores altamente potentes de la actividad de RORy (Wang et al. , J. Biol. Chem. 2010, 285:5013) en ensayos in vitro. El mismo grupo de investigadores tambien encontr6 quo un agonista conocido de LXR, T0901317 ([N-(2,2,2-trifluoroetil)-N[442,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluoro-metil)etil]fenin-bencenosulfonamidap act:0 como agonista inverso de RORy a potencia submicromolar (Kumar et al. , Mol. Pharmacol. 2010, 77:228). En ningi:in caso, sin embargo, se obtuvieron datos in vivo quo demuestren un efecto beneficioso de estos compuestos de modulacion de RORy. En el caso de los 7-oxiexteroles, su presencia endogena como metabolitos producidos de manera natural por el propio cuerpo, asi como su rapid° recambio y sus actividades biolOgicas sobre muchas proteinas celulares
impide un estudio animal significativo que permita extraer conclusiones sobre el papel de RORy. En el caso de T0901317, sus propiedades polifarmacodinamicas, quo actilan sobre al menos seis receptores nucleares diferentes (LXRcc/13, FXR, PXR, RORa/y) impide su utilidad como farmaco candidato para el desarrollo en una aplicacion de enfermedad autoinmunitaria (Houck etal. , Mol. Genet. Metab. 152004, 83:184; Xue etal. , Bioorg. Med. Chem. 2007, 15:2156).
Sumario de la descripcion
Por tanto, el objeto de la presente invencion es proporcionar compuestos, que se unen a los receptores nucleares huerfanos RORy1 y/o ROR12 y, por tanto, a nuevos metodos abiertos para tratar enfermedades asociadas con la modulacion de RORy, tal como enfermedades autoinmunitarias, enfermedades cutaneas inflamatorias o esclerosis
multiple.
Este objeto se resuelve mediante el sorprendente descubrimiento de ligandos de molecule pequeria para el RORy humano.
Por tanto, la presente invenciOn proporciona moduladores de RORy, quo pueden usarse para tratar o prevenir una enfermedad o un trastorno asociado con la inactivaciOn o activaciOn del receptor RORy.
Ademas, la presente invencion se refiere a compuestos identificados mediante los metodos descritos en el presente documento.
La presente invenci6n se refiere a un modulador de RORy para su uso en el tratamiento o la profilaxis de una enfermedad o un trastorno asociado con la inhibicion o activacion de RORy.
Cuando se trata la enfermedad o el trastorno asociado con la modulacion del receptor RORy, la actividad de dicho receptor se reduce preferiblemente.
Preferiblemente, la enfermedad o el trastorno se selecciona del grupo que consiste en enfermedades autoinmunitarias. Las enfermedades autoinmunitarias comprenden un grupo de enfermedades con una etiologia similar de una respuesta inmunitaria excesiva contra dianas end6genas que da como resultado inflamacion cronica y discapacidades fisicas u otros sintomas graves. Las enfermedades autoinmunitarias comprenden por ejemplo artritis
5 reumatoide, espondilitis anquilosante, lupus eritematoso, psoriasis, eccema atopico, enfermedades inflamatorias del intestino tales como enfermedad de Crohn, asma, esclerosis mOltiple, diabetes tipo 1 y esclerosis lateral amiotrOfica.
El documento JP-A-2006/056881 describe compuestos de pirimidina condensados heterociclicos de 6 a 9 miembros
como agonistas del receptor de TGF para el tratamiento de por ejemplo insuficiencia cardiaca o infarto de miocardio.
Tal como se muestra a modo de ejemplo en la formula (A), todos los ejemplos en el documento JP-A-2006/056881
10 portan una estructura ciclica como sustituyente en la posiciOn de atom° vecina al atom° que forma el puente quot;*quot;.
(A)
La sintesis de 1,5-benzoxazocinas, 1,4-benzoxazepinas sustituidas y N y S-variantes de las mismas se describe por Rujirawanisch y Gallagher en Org. Lett. 2009, 20 11:5494.
R. Mohan y R. A. Heyman (Curr. Top. Med. Chem. 2003, 3:1637) describen receptores nucleares huerfanos y las
15 oportunidades para intervencion terapeutica con farmacos de molecula pequena, sin embargo, no se presentaron ligandos sinteticos para RORyt (vease la tabla 1 de dicha referencia).
Breve descripcidn de las figures
La figura 1 muestra en general el desarrollo diario de los niveles plasmaticos de citocina cave tras la inmunizaciOn con CFA + PTX solo (quot;CPquot;), con peptido MOG + CFA + PTX (quot;MCPquot;) y dosificacion de vehiculo con peptido MOG + 20 CFA + PTX (quot;MCPquot;) y dosificaciOn de 2 x 10 mg/(kg x dia) del compuesto del ejemplo de preparaciOn 1/8.
La figura la muestra el desarrollo de los niveles de interleucina-17 tras la dosificacion del compuesto del ejemplo de preparaci6n 1/8.
La figura lb describe el desarrollo de los niveles de interferOn gamma tras la dosificacion del compuesto del ejemplo de preparaci6n 1/8.
25 Lafigura 1 c muestra el desarrollo de los niveles de interleucina-6 tras la dosificacion del compuesto del ejemplo de preparaci6n 1/8.
La figura 2a y la figura 2b muestran ejemplos de preparacion de compuestos segun la fOrmula (1) con efectos inhibidores selectivos sobre la producci6n de citocina por Th17 en PBMC humanas activadas.
La presente invencion proporciona compuestos que van a usarse en el tratamiento de enfermedades o trastornos 30 asociados con la inactivacion o activaciOn del receptor RORy. Especificamente, la presente invenci6n proporciona compuestos de formula (1)
(1)
y los enantiOmeros, diastereOmeros, tautomeros, solvatos y sales farmaceuticamente aceptables de los mismos, en la que
CONR10R1i;
35 R.' es hidr6geno; alquilo C1-12; alquenilo C1-12; alquinilo C1-12; cicloalquilo 03_10; COO-alquilo
NRio-ii
, un heterociclo saturado de 3-10 miembros que contiene 1 6 2 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2, 3 6 4 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
enel que los grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo y heterociclico no estan sustituido o estan sustituidos
con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, 11
ciano, halo-alquilo Cie, 0-alquilo Ci_6, 0-(halo-alquilo C1_6), COOH, C0NR y NR16R11;
o en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que
consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, alquilo halo-alquilo C1-12, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1.6, 00R11,
(halo-alquilo C1_6), COOH, CO2NR1 unsistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros, y un heterociclo saturado de 3-8 miembros que contiene 1 6 2 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y
en el que los sistemas de anillos, los grupos alquilo y cicloalquilo, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halOgeno, ciano, alquilo C1-6, halo-alquilo C1-6, 0-alquilo C1_6, 0-(halo-alquilo C1_6) y COOH;
o en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos estan condensados con un heterociclo
saturado de 5-8 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S
en el que el sistema de anillos condensado no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halOgeno, ciano, alquilo C1_6,
10R11;
halo-alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6, 0-(halo-alquilo C1.6), COOH, CO2NR10R11 y NR
R2es un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo; oxo, halOgeno, ciano, alquilo C1_6, halo-alquilo C, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6, 0-(haloalquilo C1), 0-alquilo C1_6 sustituido con un heterociclo saturado de 5 6 6 miembros que contiene 1 6 2 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, COOH, CO2(alquilo C1-6),
C0NR10R11, NRioRii,
S02(alquilo C14, un heterociclo saturado de 3-10 miembros que contiene 1 6 2 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, un sistema de anillos
heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, y un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 610 miembros
en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, alquilo C1_6, halo-alquilo C1.6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1_6,
CO2NR1uR1110R11;
0-(halo-alquilo C1_6), COOH, y NR
o en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos estan condensados con un heterociclo saturado de 5-8 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S
enel que el sistema de anillos condensado no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, alquilo C1_6,
yNRioRii;
halo-alquilo C1-6, cicloalquilo C3_6, 0-alquilo C1.6, 0-(halo-alquilo C1-6), COOH, CO2NR16R11
L es -(CR62)x-, -NR7-(CR62),-, -(CR62)),-NR7-, -(CR62)x-0-o -(CR62)x-0-(CR62)x;
R6 es independientemente H, alquilo Ci, halo-alquilo C1.6 o halogeno;
R7es H, alquilo C1_6, halo-alquilo C1_6 e hidroxi-alquilo C1-6;
y
R 1 1 en
R1° cada aparicion se seleccionan independientemente de hidrOgeno, alquilo C1.6, halo-alquilo cicloalquilo C3-6; 0 R1° y R11 cuando se toman junto con el nitr6geno al que estan unidos completan un anillo de 3 a 8 miembros que contiene atomos de carbono y que contiene opcionalmente un heteroatomo seleccionado de 0, S, SO, SO2 o NR7 y que esta opcionalmente sustituido con uno o mas de halogen°, oxo o alquilo Ci_6;
R12 es H, alquilo C1-6 o halo-alquilo C1-6;
x es independientemente 1, 2, 3 6 4;
Ar es un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos
seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un sistema de anillos aromatic° mono o 5 biciclico de 6-10 miembros
en el que el sistema de anillos heteroaromatico y aromatic° no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3
sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, halOgeno, ciano, haloCO2NRIOR11, NR10R11, un
alquilo C1.6, alquilo C1_6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1_6, 0-(halo-alquilo C1.6), COOH,
heterociclo saturado de 3-10 miembros que contiene 1 6 2 heteroatomos seleccionados independientemente del 10 grupo que consiste en N, 0 y S, un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que
contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, OySy un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
en el que el sistema de anillos heteroaromatico y aromatic° no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3
sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halOgeno, ciano, 15 halo-alquilo C1_12, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6 y COOH, y
en el que en el circulo que representa el grupo Ar en la fOrmula (1) los atomos que forman el puente que conecta
Ar con el sistema de anillos de 8 miembros pueden ser independientemente entre si un atom° de carbono o un atom° de nitrOgeno y ambos atomos que forman el puente son vecinos entre sl;
X e Y se seleccionan independientemente entre si del grupo que consiste en 0, CH2, C(CH3)2, NH, N(alquilo C1-6), 20 N(hidroxi-alquilo C1-6), S, SO2, C=0 y
lt;o>
,
en los que alquilo C1-6 no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen° y ciano;
Z es CH2, C(CH3)2 o CO;
por lo que se excluyen
25 (1)
combinaciones de X, Y y Z donde 0 esta conectado directamente a 0, NH, N(alquilo C1_6), N(hidroxi-alquilo Ci), S, CO o SO2,
(2)
combinaciones de X, Y y Z donde NH, N(alquilo C14, N(hidroxi-alquilo C1_6) esta conectado directamente a S, NH, N(alquilo C1-6), N(hidroxi-alquilo C1-6)
(3)
combinaciones de X, Y y Z donde S esta conectado directamente a S, CO o SO2
30 ycon la condiciOn de que se excluyen
(1)
el compuesto en el que Ar es fenilo no sustituido, X es 0, Y es CH2, Z es CH2, R2 es fenilo para-sustituido con CH3 y (L),-R1 es CH2Ph y
(2)
los compuestos, donde el atom° de carbono en el anillo de Ar que es vecino directamente del atom° que forma el puente marcado con quot;*quot; esta sustituido con un grupo heterociclico o cicloalquilo C3-6 aromatic°.
35 En
una realizaciOn preferida en combinacion con cualquiera de las realizaciones anteriores o siguientes, el radical X representa NH o un grupo CH2. Mas preferiblemente, X representa un grupo CH2.
En una realizacion adicional preferida en combinaci6n con cualquiera de las realizaciones anteriores o siguientes, el radical Y representa un atom° de oxigeno, NH, o N(alquilo C1_6), en el que el grupo alquilo no esta sustituido o esta
sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, 40 halOgeno y ciano. Mas preferiblemente, Y representa un atom° de oxlgeno o un grupo CH2.
En una realizacion adicional preferida en combinacion con cualquiera de las realizaciones anteriores o siguientes, el radical Z representa un grupo CH2.
Se prefieren as siguientes combinaciones de X, Y y Z dentro de la invencion en combinacion con cualquiera de las realizaciones anteriores o siguientes:
X
NRquot; CO
CH2,
C(CH3)2 NR13 CH2 CH2, C(CH3)2 NRquot; SO2 CH2, C(CH3)2 S CH2, CH2, C(CH3)2 C(CH3)2 CH2, S CH2, C(CH3)2 C(CH3)2 SO2 CH2, CH2, C(CH3)2 C(CH3)2 SO2 NR' CH2, C(CH3)2 SO2 NR' CO CH2, CO CH2, C(CH3)2 C(CH3)2 CH2, CH2, CO C(CH3)2 C(CH3)2 CH2, SO2 CH2, C(CH3)2 C(CH3)2 CH2, CH2, CH2, C(CH3)2 C(CH3)2 C(CH3)2 CH2, NR' CH2, C(CH3)2 C(CH3)2 CH2, NR' CO C(CH3)2 CO CH2, CH2, C(CH3)2 C(CH3)2 CO NR' CH2, C(CH3)2
seleccionandose R13 de H, alquilo C, halo-alquilo C1-6 e hidroxi-alquilo C1-6.
En una realizacion adicional preferida en combinaciOn con cualquiera de las realizaciones anteriores o siguientes, el radical L es preferiblemente -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, -CF2-, -CH2CF2-, -CF2CH2-, -CH2CH2CF2-, -CH2-NH-, -CH2-N(CH3)-, -CH2-0-, -CH2CH2-0-o -CH2-0-CH2-, mas preferiblemente -CH2-, -CF2-, 5 -CH2-NH-, -CH2-0-CH2-o -CH2-0-. En una realizaciOn preferida particular en combinaciOn con cualquiera de las realizaciones anteriores o siguientes, el radical L es -CH2-, -CH2-0-o -CH2OCH2.
En una realizaciOn adicional preferida en combinacion con cualquiera de las realizaciones anteriores o siguientes, Ar es fenilo, piridilo, pirazilo, piridazilo y pirimidilo, en los que Ar no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, halt:gem, ciano, alquilo C1_6,
10 halo-alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1.-6 y halo-(alquilo C1_6). Mas preferiblemente, Ar es fenilo, piridilo o pirimidilo, en los que Ar no esta sustituido
o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados
independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, halOgeno, alquilo C1_4, halo-alquilo C1_4, 0-alquilo C1-4 y halo-(alquilo C14.
En una realizacion adicional preferida en combinaci6n con cualquiera de las realizaciones anteriores o siguientes, el 15 radical R1 es alquilo C1-12; cicloalquilo C310, un anillo heteroaromatico monociclico de 5-6 miembros que contiene 1, 2, 3 6 4 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un anillo aromatic°
monociclico de 6 miembros en el que el grupo alquilo, el grupo cicloalquilo, los anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, halo-alquilo C1-12,
20 alquilo C1.6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6, COOH, un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatonnos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, y un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no ester' sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, 25 oxo, halOgeno, ciano, halo-alquilo C1-12, alquilo C, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6 y COOH.
Mas preferiblemente, el grupo alquilo, el grupo cicloalquilo, los anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 O 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, halo-alquilo C1_12, 0-alquilo Ci.s y 0-(haloalquilo C1-6).
En una realizacion mas preferida en combinacion con cualquiera de las realizaciones anteriores o siguientes, el radical R1 es alquilo C1-12, cicloalquilo C3-10 o un sistema de anillos aromatic° de 6 miembros
en el que los grupos alquilo y cicloalquilo no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halOgeno, ciano, halo-alquilo Ci_6, 0-alquilo C1-6 y O-
S (halo-alquilo Ci-6);
y en el que el sistema de anillos aromatic° de 6 miembros no esta sustituidos o esta sustituido con 1, 2 6 3
sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halogen°, ciano, alquilo C1_6, halo-alquilo
C1_6, 0-alquilo C1.6 y 0-(halo-alquilo C1-6).
En una realizacion preferida en combinacion con cualquiera de las realizaciones anteriores o siguientes, L-R1
10 representa
HN-14 0
quot;MOH
cy's) ,0
En otra realizacion preferida en combinaci6n con cualquiera de las realizaciones anteriores o siguientes, el radical R2 representa un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 yS o un sistema de anillos 15 aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros en el que los sistemas de anillos no estan sustituido o estan sustituidos tal como se defini6 anteriormente. En una realizaciOn mas preferida en combinaci6n con cualquiera de las realizaciones anteriores o siguientes, R2 representa un anillo heteroaromatico biciclico de 10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, un sistema de anillos heteroaromatico biciclico de 8-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados 20 independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, o un fenilo, en el que cada anillo de anillos biciclicos y del fenilo no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halOgeno, alquilo C1-6, halo-alquilo Ci.e, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6 y 0-(halo-alquilo C1_6). En una realizacion igualmente mas preferida, R2 representa un fenilo condensado con un heterociclo saturado de 5 O 6
miembros que contiene 1 6 2 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S.
25 Lo mas preferiblemente R2 representa
9
CI CF3
CF3
CI 0 e F
OH
OMe
CI CI
Cl CICN
N—N
CI CI
En el context° de la presente invencion alquilo C1-12 significa una cadena de alquilo saturada que tiene de 1 a 12 atomos de carbon° que puede ser de cadena lineal o ramificada. Los ejemplos del mismo incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, terc-butilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo,
5 undecilo y dodecilo.
El tannin° quot;halo-alquilo C1_12quot; significa que uno o mas atomos de hidr6geno en la cadena de alquilo estan reemplazados por un halogen°. Un ejemplo preferido del mismo es CF3.
Alquenilo C1-12 significa una cadena de alquilo que tiene de 1 a 12 atomos de carbon° que puede ser de cadena lineal o ramificada, que contiene al menos un doble enlace carbono-carbono. Los ejemplos del mismo incluyen
10 etenilo, propenilo, dodecenilo, 2-metilenhexilo y (2E,4E)-hexa-2,4-dienilo.
Alquinilo C1.12.significa una cadena de alquilo que tiene de 1 a 12 atomos de carbono que puede ser de cadena lineal o ramificada, que contiene al menos un triple enlace de carbono-carbono. Los ejemplos del mismo incluyen etinilo, propinilo y dodecenilo.
Un grupo cicloalquilo C3_10.significa un sistema de anillos mono, bi o multiciclico, saturado, que comprende de 3 a 10 atomos de carbono. Los ejemplos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, biciclo[2.2.2]octilo, biciclo[2.2.1]heptilo, pentaciclo[4.2.0.025.038.047]octilo y adamantilo.
Un heterociclo saturado que tiene al menos de 3 hasta 10 miembros de anillo y que contiene hasta 3 heteroatomos
5 significa un anillo mono, bi o multiciclico de carbono de 3 a 10 miembros en el que 1, 2 6 3 atomos de carbono estan reemplazados por 1, 2 6 3 heteroatomos, respectivamente, en el que los heteroatomos se seleccionan independientemente de N, 0 y S. Los ejemplos del mismo incluyen epOxido, oxirano, pirrolidina, tetrahidrofurano, piperidina, piperazina, tetrahidropirano, dioxano, morfolina y 4-quinuclidinilo.
Un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene hasta 4 heteroatomos
10 significa un anillo heteroaromatico monociclico tal como pirrol, imidazol, furano, tiofeno, piridina, pirimidina, pirazina, pirazol, oxazol, isoxazol, triazol, oxadiazol y tiadiazol. Significa ademas un sistema de anillos biciclico en el que el/los heteroatomo(s) puede(n) estar presente(s) en uno o ambos anillos incluyendo los atomos que forman el puente. Los ejemplos del mismo incluyen quinolina, isoquinolina, quinoxalina, benzimidazol, benzisoxazol, benzodioxano, benzofurano, benzoxazol, indol, indolizina y pirazolo[1,5-a]pirimidina.
15 Unsistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros significa un ciclo de carbonos aromatic° tal como fenilo o naftaleno.
Halt:germ se selecciona de fluor, cloro, bromo y yodo.
Los compuestos de la presente invenciOn son isOmeros Opticos. Se prefiere el estereoisomero de fOrmula (1) con la siguiente estructura:
(1)
Ademas, los compuestos de la presente invencion se someten parcialmente a tautomeria. Por ejemplo, Si un grupo
heteroaromatico que contiene un atom° de nitrogen° en el anillo se sustituye con un grupo hidroxilo en el atom° de
carbono adyacente al atom de nitrogen°, puede aparecer la siguiente tautomeria:
0
25 Ademas, en el circulo que representa el grupo Ar en la fOrmula (1) ha de interpretarse que los atomos que forman el puente que conectan Ar con el sistema de anillos de 8 miembros pueden ser independientemente entre si un atom° de carbono o un atom° de nitrogen° y, ademas, ha de interpretarse que ambos atomos que forman el puente son
vecinos entre si.
El expert° apreciara que cuando las listas de sustituyentes alternativos incluyen miembros que, debido a sus
30 necesidades de valencia u otras razones, no pueden usarse para sustituir un grupo particular, se pretende que la lista se interprete con el conocimiento del expert° para incluir sOlo aquellos miembros de la lista que son adecuados para sustituir el grupo particular.
Los compuestos usados en la presente invencion pueden estar en forma de una sal farmaceuticamente aceptable o de un solvato. El termino quot;sales farmaceuticamente aceptablesquot; se refiere a sales preparadas a partir de bases o 35 acidos no tOxicos farmaceuticamente aceptables, incluyendo bases o acidos inorganicos y bases o acidos organicos. En caso de que los compuestos de la presente invencion contengan uno o mas grupos acidos o basicos, la invenciOn tambien comprende sus correspondientes sales farmaceutica o toxicolOgicamente aceptables, en particular sus sales farmaceuticamente utilizables. Por tanto, los compuestos de la presente invencion que contienen grupos acidos pueden usarse segun la invencion, por ejemplo, como sales de metales alcalinos, sales de metales 40 alcalinoterreos o sales de amonio. Los ejemplos mas precisos de tales sales incluyen sales de sodio, sales de potasio, sales de calcio, sales de magnesio o sales con amoniaco o aminas organicas tales como, por ejemplo, etilamina, etanolamina, trietanolamina o aminoacidos. Los compuestos de la presente invencion que contienen uno o
mas grupos basicos, es decir grupos que pueden protonarse, pueden usarse segim la invencion en forma de sus sales de adici6n con acidos organicos o inorganicos. Los ejemplos de acidos adecuados incluyen cloruro de hidrogeno, bromuro de hidrogeno, acid° fosforico, acid° sulfilrico, acid° nitric°, acid° metanosulfOnico, acid° ptoluenosulfonico, acid° naftalenodisulfonico, acid° oxalic°, acid° acetic°, acid° tartaric°, acid° lactic°, acid° salicilico, acid° benzoico, acid° formic°, acid° propionico, acid° pivalico, acid° dietilacetico, acid° malOnico, acid° succinico, acid° pimelico, acid° furnarico, acid° maleico, acid° malico, acid° sulfaminico, acid° fenilpropionico, acid° gluconico, acid° ascorbic°, acid° isonicotinico, acid° citric°, acid° adipico y otros acidos conocidos por el expert° en la tecnica. Si los compuestos de la presente invencion contienen simultaneamente grupos acidos y basicos en la molecula, la invencion tambien incluye, ademas de las formas de sal mencionadas, sales internas o betainas
(zwitteriones). Las sales respectivas pueden obtenerse mediante metodos habituales que conoce el expert° en la tecnica como, por ejemplo, poniendo en contacto las mismas con una base o acid° organic° o inorganic° en un disolvente o dispersante, o mediante intercambio anionic° o intercambio catiOnico con otras sales. La presente invencion tambien incluye todas las sales de los compuestos de la presente invencion que, debido a la baja compatibilidad fisiologica, no son directamente adecuadas para su uso en productos farmaceuticos pero que pueden usarse, por ejemplo, como productos intermedios para reacciones quimicas o para la preparacion de sales farmaceuticamente aceptables.
En el uso practico, los compuestos usados en la presente invencion pueden combinarse como el principio activo en mezcla intima con un portador farmaceutico segijn tecnicas de obtencion de compuestos farmaceuticos convencionales. El portador puede adoptar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparaciOn deseada para su administraci6n, por ejemplo, oral o parenteral (incluyendo intravenosa). En la preparaciOn de las composiciones para forma farmaceutica oral, puede emplearse cualquiera de los medios farmaceuticos habituales, tales como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes saborizantes, conservantes, agentes colorantes y similares en el caso de preparaciones liquidas orales, tales como, por ejemplo, suspensiones, elixires y disoluciones; o portadores tales como almidones, am:mares, celulosa microcristalina, diluyentes, agentes de
granulacion, lubricantes, aglutinantes, agentes disgregantes y similares en el caso de preparaciones solidas orales tales como, por ejemplo, polvos, comprimidos y capsulas duras y blandas, prefiriendose las preparaciones solidas orales con respecto a las preparaciones liquidas.
Debido a su facilidad de administracion, los comprimidos y las capsulas representan la forma unitaria de dosificaciOn oral mas ventajosa en cuyo caso se emplean obviamente los portadores farmaceuticos sOlidos. Si se desea, los comprimidos pueden recubrirse mediante tecnicas acuosas o no acuosas convencionales. Tales composiciones y preparaciones deben contener al menos el 0,1 por ciento de compuesto activo. El porcentaje de compuesto activo en estas composiciones puede variarse, naturalmente, y puede estar convenientemente entre aproximadamente el 2
por ciento y aproximadamente el 60 por ciento del peso de la unidad. La cantidad de compuesto activo en tales composiciones terapeuticamente Utiles es tal que se obtendra una dosificacion eficaz. Los compuestos activos tambien pueden administrarse por via intranasal como, por ejemplo, pulverizaciOn o gotas de liquido.
Los comprimidos, pildoras, capsulas y similares tambien pueden contener un aglutinante tal como goma tragacanto, goma arabiga, almidOn de maiz o gelatina; excipientes tales como fosfato de dicalcio; un agente disgregante tal como almidOn de maiz, almidon de patata, acid° alginico; un lubricante tal como estearato de magnesio; y un agente edulcorante tal como sacarosa, lactosa o sacarina. Cuando una forma unitaria de dosificaciOn es una capsula, puede contener, adernas de los materiales del tipo anterior, un portador liquido tal como un acid° graso.
Pueden estar presentes otros materiales diversos como recubrimientos o para modificar la forma fisica de la unidad
de dosificacion. Por ejemplo, los comprimidos pueden recubrirse con goma laca, azkar o ambos. Un jarabe o elixir puede contener, ademas del principio activo, sacarosa como agente edulcorante, metil y propilparabenos como conservantes, un colorante y un saborizante tal como sabor de cereza o naranja.
Los
compuestos usados en la presente invencion tambien pueden administrarse por via parenteral. Pueden prepararse disoluciones o suspensiones de estos compuestos activos en agua mezclada de manera adecuada con un tensioactivo tal como hidroxipropilcelulosa. Tambien pueden prepararse dispersiones en glicerol, polietilenglicoles liquidos y mezclas de los mismos en aceites. En condiciones habituales de almacenamiento y uso, estas preparaciones contienen un conservante para impedir el crecimiento de microorganismos.
Las formas farmaceuticas adecuadas para el uso inyectable incluyen dispersiones o disoluciones acuosas esteriles y polvos esteriles para la preparaci6n extemporanea de dispersiones o disoluciones inyectables esteriles. En todos los casos, la forma debe ser esteril y debe ser fluida hasta el punto de que exista facilidad de inyeccion (jeringabilidad). Debe ser estable en las condiciones de fabricacion y almacenamiento y debe estar protegida contra la accion
contaminante de microorganismos tales como bacterias y hongos. El portador puede ser un medio de dispersion o
disolvente que contiene por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol liquido), mezclas adecuadas de los mismos y aceites vegetales.
Puede emplearse cualquier via de administraciOn adecuada para proporcionar a un mamifero, especialmente a un ser humano, una dosis eficaz de un compuesto de la presente invenciOn. Por ejemplo, puede emplearse via oral, rectal, tOpica, parenteral (incluyendo intravenosa), ocular, pulmonar, nasal y similares. Las formas farmaceuticas incluyen comprimidos, trociscos, dispersiones, suspensiones, disoluciones, capsulas, cremas, pomadas, aerosoles y
similares. Preferiblemente, los compuestos de la presente invencion se administran por via oral.
La dosificaci6n eficaz del principio activo empleado puede variar dependiendo del compuesto particular empleado, del modo de administraci6n, del estado que este tratandose y de la gravedad del estado que este tratandose. Tal dosificacion puede determinarse facilmente por un expert° en la tecnica.
Cuando se tratan o previenen estados mediados por RORy para los que estan indicados los compuestos de fOrmula (1), se obtienen resultados generalmente satisfactorios cuando los compuestos se administran a una dosificacion diaria de desde aproximadamente 0,1 miligramos hasta aproximadamente 100 miligramos por kilogramo de peso corporal de mamifero, preferiblemente administrados como una dosis diaria Unica o en dosis divididas de dos a seis veces al dia, o en forma de liberacion sostenida. Para los mamiferos mas grandes, la dosificacion diaria total es de
desde aproximadamente 1,0 miligramos hasta aproximadamente 1000 miligramos, preferiblemente desde aproximadamente 1 miligramo hasta aproximadamente 50 miligramos. En el caso de un ser humano adulto de 70 kg, la dosis diaria total sera generalmente de desde aproximadamente 7 miligramos hasta aproximadamente 350 miligramos. Este regimen de dosificacion puede ajustarse para proporcionar la respuesta terapeutica Optima.
La presente invenciOn describe moduladores, tambien denominados ligandos en lo que sigue, que se unen al
receptor RORy. Sorprendentemente, se ha encontrado que los compuestos de formula (1) act:Ian como moduladores del receptor RORy.
Se considera que el receptor RORy este implicado en el desarrollo de timocitos, por tanto los moduladores descritos en el presente documento pueden ser utiles en el tratamiento de enfermedades cutaneas inflamatorias tales como eccema atopico y psoriasis. Se sugiere ademas que la modulacion por disminucion de la actividad de la transcripcion
de RORy con un ligando podria dar como resultado un cambio de la respuesta inmunitaria hacia una respuesta de tipo Th2, lo que podria ser beneficioso en el tratamiento de determinados estados inflamatorios alergicos tales como artritis reumatoide, lupus eritematoso sistemico, enfermedad inflamatoria del intestino (enfermedad de Crohn) y esclerosis mUltiple (Tesmer et. al., Immunol. Rev. 2008, 223:97).
Los compuestos de fOrmula (1) muestran actividad antagonista, con respecto a la modulacion dependiente de la dosis de la interaccion constitutiva del dominio de union a ligando de RORy con peptidos derivados de coactivadores tales como SRC-1, TRAP 2200 TIF-2.
Se ha encontrado sorprendentemente que la interaccion entre el dominio de uniOn a ligando de RORy y los peptidos puede determinarse mediante ensayos de deteccion de ligando basados en FRET homogeneos. Indus° mas sorprendente fue la identificaciOn de compuestos de formula (1) como ligandos para RORy.
LaidentificaciOn de ligandos de alta afinidad para RORy con propiedades agonistas y antagonistas es la base para permitir que expertos conocedores del campo establezcan ensayos para la identificacion de ligandos de RORy agonistas y antagonistas novedosos a partir de bibliotecas de moleculas pequenas. La identificacion de ligandos que se unen a y modulan la actividad de RORyl y RORy2 es la primera etapa obligatoria para desarrollar nuevos medicamentos basados en molecula pequena con potencial para desarrollarse para el tratamiento de enfermedades
que estan controladas directa o indirectamente por la actividad de ROR71 o RORy2. Tales enfermedades incluyen, pero no se limitan a enfermedades inflamatorias, asma, artritis reumatoide, enfermedades autoinmunitarias o enfermedades con un componente autoinmunitario tal como lupus eritematoso sistemico, enfermedad inflamatoria del intestino (enfermedad de Crohn), colitis ulcerosa, enfermedades cutaneas inflamatorias tales como eccema atopico o psoriasis, esclerosis mOltiple o enfermedades similares.
Los compuestos de la presente invencion pueden prepararse mediante una combinacion de metodos conocidos en la tecnica incluyendo los procedimientos descritos en los esquemas I a IV a continuacion.
El esquema I representa la alquilaciOn de un aminoalcohol de formula (A-II) con un metilester (hetero)aromatico ortosustituido con un sustituyente de bromometilo (A-I) en presencia de una base apropiada en un disolvente adecuado. El producto intermedio de eter resultante (A-III) puede desprotegerse de amina sucesivamente y saponificarse para
producir aminoacidos de formula (A-IV). El anillo de lactama de ocho miembros puede formarse mediante el uso de reactivos de acoplamiento de amida adecuados y tras la reducci6n a las aminas ciclicas correspondientes (A-VI) mediante reactivos donadores de hidruro pueden obtenerse los compuestos finales (A-VI I) mediante la reaccion con cloruros de sulfonilo en presencia de bases apropiadas en disolventes apropiados.
Esquema I
Pg
base, disolvente
01.
HO A-111
A-I1 desproteccion de amino hidrOlisis de ester
NH RI
rformacien
de lactama
OH NH2
0 A-V
1A-IV donador de hidruro
NH cloruro de sulfonilo base, disolvente
A-VI
Alternativamente, tal como se muestra en el esquema II, los productos intermedios de formula (A-III) pueden reducirse a los alcoholes correspondientes (B-I) mediante el uso de reactivos donadores de hidruro apropiados. B-I
5 puede hacerse reaccionar con tribromuro de fosforo para proporcionar el producto intermediario de bromometilo (B- II). Tras la desprotecciOn del grupo amino en condiciones acidas (B-III) puede transformarse en un producto intermedio ciclico (A-VI) mediante el tratamiento con una base apropiada. La reaccion con cloruros de sulfonilo en presencia de una base proporciona los compuestos finales (A-VII).
Esquema II
donador de Pg, hidruro OHHN
B-I
A-II IPer3,R1
disolvente
desproteccion de amino ,Pg Br NH3+X-HXacido
BrHN
0.,.1.
0.R1 B-III
R1
B-11
I base
H R1 cloruro de sulfonilo base, disolvente
0 A-1/1
Otra forma de preparar compuestos de la presente invencion se representa en el esquema III. Se alquila la aminoetilsulfonamida protegida (C-I) con compuestos de formula (A-I) en presencia de una base como NaH en 5 disolventes como DMF para proporcionar productos intermedios (C-I1). La hidrolisis de ester y la desproteccion de
amino proporcionan compuestos (C-III) que pueden ciclarse dando lugar a lactamas de ocho nniembros (C-IV)
mediante el uso de reactivos de acoplamiento de amida apropiados. La alquilacion del nitr6geno de lactama y la
reducci6n de la lactama a una amina produce los compuestos finales (C-VI).
Esquema III
02
R2-S,
R2
NPhth
MN base, disolvente
C-1
0C-I1
02 R2-S.
NI.12
OH C-III
0
P02 N\r_Ri
R3
Otra forma de preparar compuestos de la presente invenci6n se representa en el esquema IV. Se reduce el aminoester protegido (D-I) al aldehido correspondiente seguido por reacciOn de Wittig para proporcionar productos
5 intermedios (D-I1). La desprotecciOn de amino y la posterior sulfonilacion produce los compuestos (D-III). La NalquilaciOn con bromo ester y base proporciona productos intermedios (D-IV). La reduccion seguida por hidrolisis de ester proporciona productos intermedios de aminoacido (D-V) que pueden ciclarse a lactamas de ocho miembros (C- VI) mediante el uso de reactivos de acoplamiento de amida apropiados. La tionacion de lactama-carbonilo proporciona productos intermedios (D-VII) que pueden convertirse en compuestos heterociclicos (D-VIII).
Esquema IV
desproteccien
02S:R2
de amino;
reduccien
cioruro se suifonilo,
reaccien
NH
NHPg
base
de Wittig W NC R' D-I D-111 BrCO2Et I TEA
R2 AO'
formacien „R2 02S, reduccien; hidrelisis R2 02S:
111 de-41
lactama H2N CO211 de ester CO2Et
HN
NC /
D-VIreactivo
D-V D-IV
1
de Lawesson
02S-R2
formacien de heterocicio
Los compuestos descritos en la presente invencion son racematos y pueden prepararse como enantiOmeros individuales cuando se usan aminoalcoholes homoquirales (All) o diaminas (C-I). El estereoisOmero de formula (1) 5 conla siguiente estructura habitualmente muestra una actividad biologica superior:
R2, SO2 I12
N R
10L—R1 ,Z
X–Y
(1)
En los siguientes ejemplos se usan las abreviaturas enumeradas a continuaci6n. ACN Acetonitrilo Boc terc-butiloxicarbonilo
10 BOP-CI cloruro (bis(2-oxo-3-oxazolidin)il)fosfOnico CC cromatografia en columna DCM diclorometano DIBAL-H hidruro de diisobutilaluminio DIPEA diisopropil-etilamina
15 DMAP 4-(dimetilamino)-piridina DMF dimetilformamida DPPA azidade difenilfosforilo
AE acetatode etilo Et Etilo
HATU hexafluorofosfato de 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-0-1,1,3,3-tetrametiluronio LAH hidrurode litio y aluminio
5 mCPBA acid°meta-cloroperoxibenzoico Ms metanosulfonilo NBS N-bromo-succinimida Phth ftalato Pg grupode protecciOn
10 EP eter de petroleo ta temperatura ambiente MP material de partida TEA trietilamina TEA acid°trifluoroacetico
15 THF tetrahidrofurano CCF cromatografia en capa fina Ejemplos Eiemplo de preparaciOn 1
00 OH NH HCI Co)/dioxano
THF. 45% 98%
lb
20 Etapa 1: 2-((2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-fenilpropoxi)metil)benzoato de metilo (1 al A una disolucion de 2-(bromometil)benzoato de metilo (25,1 g, 100 mmol) en THE seco (600 ml) se le afiadio NaH
(60 por ciento, 8,8 g, 220 mmol) en pequerias porciones a 5°C y se agitO durante 10 min. Entonces se anadid) gota a gota 1-hidroxi-3-fenilpropan-2-ilcarbamato de terc-butilo (22,9 g, 100 mmol) en THF (100 ml) y se permiti6 que la mezcla de reaccion se agitara a ta durante la noche. Se extingui6 la reaccion con agua (400 ml) y se extrajo con AE (2 x 400 ml). Se secaron los extractos organicos combinados sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron a presion reducida. Se purified) el residuo mediante CC eluyendo con EP:AE = 7:1 para dar el compuesto la como un sOlido
blanco (18,0 g, rendimiento del 45%). 1H-RMN (400 MHz, CDCI3): 6 7,93 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,62 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,52 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,33 (t, J=7,2 Hz, 1H), 7,25-7,16 (m, 5H), 4,95-4,93 (m, 1H), 4,90-4,79 (m, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,49-3,43 (m, 2H), 2,91-2,84 (m, 2H), 1,40 (s, 9H).
Etaga 2: acid° 2-((2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-feniloropoxi)metil)benzoico (1b)
SecalentO la suspension de compuesto la (39,9 g, 100 mmol) en NaOH acuoso 3,5 N (130 ml) y Me0H (350 ml) hasta 50°C durante 3 h. Entonces se enfri6 la mezcla hasta ta y se acidified, hasta pH=3 con HCI acuoso 3,5 N, se extrajo con AE (2 x 300 m1). Se combinaron los extractos organicos y se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se concentraron a presi6n reducida para conseguir el compuesto lb como un solid° blanco (34,7 g, rendimiento del 90%). 1H-RMN (400 MHz, CDCI3): 8 8,08-8,06 (m, 1H), 7,73-7,53 (m, 2H), 7,42-7,40 (m, 1H), 7,30-7,19 (m, 5H),
4,95-4,84 (m, 2H), 4,05-4,02 (m, 1H), 3,55-3,48 (m, 2H), 2,93-2,91 (m, 2H), 1,45 (s, 9H).
Etapa 3: clorhidrato del acid° 2-((2-amino-3-fenilpropoxi)metil)benzoico (1c)
Se trat6 el compuesto lb (34,7 g, 90 mmol) con HCI (g) en dioxano (700 ml) a ta durante la noche. El concentrado a vacio dio la sal de clorhidrato del compuesto lc que se us6 para la siguiente etapa sin ninguna purificaciOn adicional (28,3 g, rendimiento del 98%). EM (ESI+): 286 DA-or.
Etapa 4: 4-bencil-4,5-dihidro-1H-benzollfil,41oxazocin-6(3H)-ona (1d)
A una disoluciOn del compuesto lc (28 g, 87 mmol) obtenido anteriormente en CH3CN (1,5 I) se le afiadi6 DIPEA (68 g, 520 mmol) a 0°C, seguido por BOP-C1 (70 g, 275 mmol). Se agito la mezcla resultante a 0°C durante 30 min y entonces se calento hasta ta durante la noche. Se retir6 el solid° mediante filtraciOn y se concentr6 el filtrado a vacio. Se disolvio el residuo en AE, se lave) con HCI 2 N y se sec6 sobre Na2SO4 anhidro. La concentraci6n a vacio y purificaciOn mediante CC eluyendo con EP:AE = 1:2 dio el compuesto 1 d como un aceite amarillo (7,0 g, rendimiento del 30%). 1H-RMN (400 MHz, CDCI3): 8 7,50 (dd, J=7,6, 1,6 Hz, 1H), 7,41-7,34 (m, 2H), 7,28-7,19 (m, 4H), 7,05 (d, J=7,2 Hz, 2H), 5,83 (m, 1H), 4,82 (d, J=14,0 Hz, 1H), 4,61 (d, J=13,6 Hz, 1H), 3,82-3,78 (m, 1H), 3,78-3,67 (m, 1H),
3,58-3,55 (m, 1H), 2,75-2,71 (m, 2H). EM (ESI+): 268 [m+i].
Etapa 5: clorhidrato de 4-bencil-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzo[f1[1,41oxazocina (1e)
Auna disoluciOn del compuesto ld (7,0 g, 26,2 mmol) en THF (150 ml) se le atiadio lentamente LiAIH4 (6,0 g, 157 mmol) a 0°C. Se calento la mezcla resultante hasta reflujo durante 2 h. Entonces se enfriO la reacci6n hasta 5°C, se extingui6 con agua (6 ml) y NaOH acuoso (15% p/p; 6 ml) con agitaci6n vigorosa. Se retiro el precipitado mediante filtraciOn y se concentr6 el filtrado a vacio. Se disolvi6 el residuo en HCI 2 N (100 ml) y se extrajo con AE (2 x 80 ml). Se basific6 la fase acuosa con NaOH ac. 2 N y se extrajo con AE (2 x 100 m1). Se secaron las fases
organicas combinadas sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron a vacio para dar el compuesto le como un aceite amarillo palido (3,7 g, rendimiento del 56%). 'H-RMN (400 MHz, CDCI3): 5 7,27-7,16 (m, 5H), 7,12-7,06 (m, 4H), 4,96-4,82 (m, 2H), 4,34 (d, J=14,4 Hz, 1H), 3,96 (d, J=14,4 Hz, 1H), 3,82 (dd, J=12,0, 2,0 Hz, 1H), 3,60 (dd, J=12,0, 8,0 Hz, 1H), 3,20-3,14 (m, 1H), 2,63 (dd, J=14,0, 5,2 Hz, 1H), 2,52 (dd, J=14,0, 8,4 Hz, 1H).
Preparacion de sal de clorhidrato del compuesto (1e)
Setrate) la disoluciOn del compuesto le (5,4 g, 21 mmol) en AE (10 ml) con HCI (1,0 N en AE, 45 ml) a ta durante 10 min y entonces se concentr6 a vacio hasta un quinto de su volumen original. Se afiadio hexano (50 ml) al residuo con agitacion. Se recogid) el solid° formado mediante filtraciOn y se lave, con hexano, se sec6 a vacio para proporcionar la sal de clorhidrato del compuesto le como un sOlido rosa claro (5,95 g, rendimiento del 96%). 1H- RMN (400 MHz, CDCI3): 8 10,36 (s a, 1H), 10,21 (s a, 1H), 7,62 (d, J=6,8 Hz, 1H), 7,42-7,11 (m, 8H), 5,18 (d,
J=12,8 Hz,1H), 5,10 (d, J=16,0 Hz, 1H), 4,63 (d, J=16,4 Hz, 1H), 4,50 (d, J=12,4 Hz, 1H), 4,25 (dd, J=12,8, 9,2 Hz, 1H), 3,73 (dd, J=13,2, 2,8 Hz, 1H), 3,52-3,49 (m, 2H), 3,09 (t, J=12,0 Hz, 1H). EM (ESI+): 254 [M+H].
Etapa 6: 4-bencil-5-(2-metoxifenilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1 H-benzonl ,41-oxazocina (1)
A una disolucion del compuesto le-sal de HCI (50 mg, 0,17 mmol) en DCM (3 ml) y Et3N (34 mg, 0,34 mmol) se le anadid) cloruro de 2-metoxibenceno-l-sulfonilo (41 mg, 0,2 mmol). Se agit6 la mezcla a ta durante la noche. Se elimino el disolvente a vacio y se purified) el product° bruto resultante mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto objetivo 1 (46 mg, rendimiento del 64%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13): 8 7,89 (d, J=6,0Hz, 1H), 7,46 (m, 1H), 7,25-7,10 (m, 5H), 7,06-6,99 (m, 4H), 6,82 (d, J=8,4Hz, 1H), 5,10 (d, J=14,8 Hz, 1H), 4,93 (d, J=14,7, 1H), 4,82 (d, J=14,7, 1H), 3,99 (d, J=10,8 Hz, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,75-3,73 (m, 1H), 3,51 (d, J=12,8 Hz, 1H), 3,15 (t, J=12,4 Hz,
1H), 2,49-2,45 (m, 1H). EM (ESI+): 424 [M+H].
Ejemplos de preparacion 1/1 a 1/44
Siguiendo procedimientos similares a los descritos en el ejemplo de preparaci6n 1, se prepararon los siguientes
compuestos.
n.° Estructura
1/1
0
con separaci6n posterior mediante cromatografia quiral
1/2
a partir de MP homoquiral
F'\c,
1/3
o
1/4
\16
o„s, 1/5 o
1/6 ci
1/7
1/8
1/9
PM
(g/mol)
423,5
423,5
477,5
418,5
441 ,5
458,0
453,6
444,5
435,5
m/z medido de [M+H]
424
424
478
441 de [M+Na]+
442
458;460
454
445
436
1/39 451,5 452
1/40 474,6 475
1/41 389,5 390
1/42 410,5 411
1/43 p02 424,5 425 N
1/44 436,6 437
Ejemplo de preparacion 2, 2g y 2h
quot;00
2g 2
Etapal: 2-(2-amino-3-fenilpropil)isoindolin-1,3-diona (2b)
Se agitO una disolucion de 2-(2-terc-butiloxicarbonilamino-3-fenilpropil)isoindolin-1,3-diona (1,14 g, 3 mmol) en TFA (5 ml) y DCM (30 ml) a ta durante 2 h. Se concentrO la disolucion para dar el compuesto como un sOlido blanco que
sedisolvio en Na2CO3 (sat.) y se extrajo mediante AE (3 x 50 m1). Se lavo la fase organica con salmuera (20 ml) y se sec6 sobre Na2SO4 anhidro y se concentr6 a vacio para dar el compuesto 2b como un aceite incoloro (800 mg, rendimiento del 95%).
Etapa 2: N-(1-(1,3-dioxoisoindolin-2-i1)-3-fenilpropan-2-0-2-metoxibencenosulfonamida (2c)
A una disolucion del compuesto 2b (800 mg, 2,8 mmol) en piridina (20 ml) se le anadio cloruro de 2-metoxibenceno
1-sulfonilo (942 mg, 4,5 mmol) a 10°C. Se agitO la mezcla a ta durante la noche y entonces se concentro a vacio. Se disolvio el residuo en DCM (20 ml), se lav6 con agua (20 ml) y salmuera (20 ml). Se seed) la fase organica sobre Na2SO4 anhidro y se concentro a vacio. Se purified el residuo mediante cromatografia ultrarrapida sobre gel de silice (EP:AE = 2:1) para dar el compuesto 2c como un sOlido blanco (1,13 g, rendimiento del 83%).
Etapa 3: 24(N-(1-(1,3-dioxoisoindolin-2-i1)-3-fenilpropan-2-i1)-2-metoxifenilsulfonamido)metil)benzoato de metilo (2d)
Auna disolucion del compuesto 2c (500 mg, 1,1 mmol) en DMF (10 ml) a 10°C, se le afiadio NaH (60% en peso, 44 mg, 1,1 mmol) en porciones. Se agito la mezcla durante 30 min adicionales y entonces se afiadio gota a gota la disoluciOn de 2-(bromometil)-benzoato de metilo (253 mg, 1,1 mmol) en DMF (2 m1). Se agit6 la mezcla resultante a 10°C durante 30 min y se calento hasta ta durante la noche. Se extingui6 la reaccion con agua y se diluyo con AE (40 ml), se lave) con salmuera (3 x 20 ml). Se secO la fase organica sobre Na2SO4 anhidro y se concentro a vacio. Se
purified el residuo mediante cromatografla ultrarrapida sobre gel de silice (EP:AE = 2:1) para dar el compuesto 2d como un solido blanco (520 mg, rendimiento del 79%).
Etapa 4: acid° 2-((N-(1-(1 3-dioxoisoindolin-24)-3-fenilpropan-2-0-2-metoxifenilsulfonamido)metil)benzoico (2e)
A la disolucion del compuesto 2d (100 mg, 0,17 mmol) en H20 (2 ml) y Me0H (10 ml) se le anadi6 NaOH acuoso (33 mg, 0,84 mmol). Se calento la mezcla resultante hasta reflujo durante 2 h. Entonces se enfriO la mezcla hasta ta
yse acidified hasta pH=3 con HCI acuoso 3,5 N, se concentro a vaclo para eliminar el disolvente volatil. Se extrajo la mezcla resultante con AE (2 x 30 ml). Se combinaron los extractos organicos y se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se concentraron a vacio para dar el compuesto 2e como un solido blanco (80 mg, rendimiento del 80%).
Etapa 5: acid° 24(N-(1-amino-3-fenilpropan-2-i1)-2-metoxifenilsulfonamido)nnetip-benzoico (2f)
Se calentaron la mezcla del compuesto 2e (100 mg, 0,17 mmol) y monohidrato de hidrazina al 98% (85 mg, 1,7
mmol) en etanol (5 ml) hasta reflujo durante 2 h. Se enfrio la mezcla de reacciOn hasta ta y se acidified) hasta pH=3 con HCI acuoso 1 N. Se retire) el precipitado mediante filtracion y se concentr6 el filtrado a vacio. Se purified) el residuo mediante HPLC preparativa para dar el compuesto 2f como un solido blanco (30 mg, rendimiento del 39%).
Etapa 6: 4-bencil-5-(2-metoxifenilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidrobenzoffIll ,41diazocin-1(2H)-ona (2g)
A una disolucion del compuesto 2f (45 mg, 0,1 mmol) en DMF seca (15 ml) se le atiadiO 4-metilmorfolina (33 mg,
0,32 mmol). Se agito la mezcla a ta durante 10 min y se anadiO DPPA (41 mg, 0,15 mmol). Se agitO esta mezcla resultante a ta durante 24 h y entonces se concentro a vacio para eliminar el disolvente. Se disolvio el residuo en AE (10 ml), se lavo con NH4Clacuoso saturado y salmuera, se see6 sobre Na2SO4 anhidro. La concentraciOn a vacio y purificaciOn mediante CCF preparativa dio el compuesto 2g como un solid° blanco (40 mg, rendimiento del 91%). 1H-
NMR (400 MHz, CDCI3) 8 8,03 (dd, 1H, J=8,0, 1,6 Hz), 7,47-6,99 (m, 11 H), 6,86 (d, 1H, J=8,0 Hz), 6,15 (m, 1H), 5,02 (d, J=15,6 Hz, 1H), 4,22 (d, J=15,6 Hz, 1H), 4,18 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,20 (dd, J=15,2, 8,8 Hz, 1H), 3,02-2,88 (m, 2H), 2,39 (d, J=8,8 Hz, 1H). EM (ESI+) m/z: 437 [M+Hr, 459 [M+Nar.
Etapa 7: 4-bencil-5-(2-metoxifenilsulfoni1)-2-metil-3,4,5,6-tetrahidrobenzoffl[1,41diazocin-1(2H)-ona (2h)
A una disoluciOn del compuesto 2g (120 mg, 0,28 mmol) en DMF (15 ml) a 10°C, se le anadio NaH (al 60% en aceite mineral; 13 mg, 0,33 mmol) en porciones. Se agito la mezcla durante 45 min adicionales y entonces se ariadid) gota a gota Mel (116 mg, 0,82 mmol). Se agit6 la mezcla resultante a 10°C durante 30 min y se calento hasta ta durante la noche. Se extingui6 la reaccion con agua (30 ml) y se extrajo con AE (40 ml). Se lava la fase organica con salmuera (2 x 20 ml) y se seed, sobre Na2SO4 anhidro. La concentraciOn a vacio y purificacion mediante CCF preparativa (EP:AE = 1:1) dio el compuesto 2h como un solido blanco (110 mg, rendimiento del 89%). 1H-NMR (400 MHz,
CD30D) 8 7,82 (dd, 1H, J=8,0, 1,6 Hz), 7,51 (t, J=8,8 Hz, 1H), 7,36-7,23 (m, 4H), 7,05-6,99 (m, 5H), 6,72-6,70 (m, 2H), 5,41 (d, J=18,8 Hz, 1H), 4,55 (d, J=19,2 Hz, 1H), 4,10 (m, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,28 (dd, J=14,4, 11,6 Hz, 1H), 2,98 (dd, J=15,2, 4,8 Hz, 1H), 2,86 (s, 3H), 2,61 (dd, J=12,8, 9,6 Hz, 1H), 2,47 (dd, J=12,8, 4,8 Hz, 1H). EM (ESI+) m/z: 451 [M+H].
5 Etapa 8: 3-bencil-2-(2-metoxifenilsulfoni1)-5-metil-1,2,3,4,5,6-hexahidrobenzolli[1,4]-diazocina (2)
A una disolucion del compuesto 2h (150 mg, 0,33 mmol) en tetrahidrofurano (10 ml) a 5°C, se le anadio LAH (76 mg, 2 mmol). Se calento la mezcla resultante hasta reflujo durante 2 h y entonces se enfri6 hasta 5°C, se extingui6 con una gota de agua. Se retir6 el precipitado formado mediante filtracion. Se diluy6 el filtrado con NaOH acuoso 1 N y se extrajo con AE. Se lavO la fase organica con salmuera y se seco sobre Na2SO4 anhidro, se concentrO a vacio. Se
10 purifico el residuo mediante HPLC preparativa para dar el compuesto 2 como un solid° amarillo (20 mg, rendimiento del 13%). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) 8 8,00 (dd, 1H, J=8,0, 2,0 Hz), 7,44 (m, 1H), 7,19-7,00 (m, 8H), 6,87-6,81 (m, 3H), 5,30 (d, J=17,6 Hz, 1H), 4,59-4,55 (m, 2H), 4,29 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,45 (d, J=12,4 Hz, 1H), 2,62 (dd, J=13,2, 10,4 Hz, 1H), 2,49-2,39 (m, 3H), 2,24 (s, 3H). EM (ESI+) m/z: 437 [M+H]
Ejemplo de preparacion 3
3
15
Etapa 1: 2-(bromometil)benzoato de metilo (3b)
A una disolucion de 2-(metil)benzoato de metilo 3a (9,46 g, 6,3 mmol) en cloroformo (200 ml) se le anadieron NBS (13,8 g, 7,6 mmol) y peroxido de benzollo (760 mg, 0,32 mmol). Se agit6 la mezcla de reacci6n a reflujo durante la noche. Cuando se enfrio la mezcla hasta ta, se filtro y se concentr6. Se puriflco el residuo mediante CC, se eluyo
20 con EP para dar 3b como un aceite incoloro (9 g, rendimiento del 62%).
Etapa 2: 2-amino-3-(4-bromofeninpropanoato de metilo (3d)
Se agito una mezcla de acido 2-amino-3-(4-bromofenil)propanoico 3c (24,4 g, 100 mmol) en HCl/Me0H (300 ml) a reflujo durante la noche. El analisis mediante CCF indic6 el consumo total del compuesto 3c. Se concentro la mezcla para dar 3d como un solid° amarillo palido (24 g, rendimiento del 92%).
25 Etapa 3: 3-(4-bromofeni1)-2-((terc-butoxicarbonipamino)propanoato de metilo (3e)
A una mezcla con agitaciOn del compuesto 3d (24 g, 93 mmol) y TEA (19 g, 186 mmol) en DCM (300 ml) se le anadio (Boc)20 (22 g, 102,3 mmol) a 0°C. Entonces se agito la mezcla a ta durante la noche. El analisis mediante CCF indico el consumo total del compuesto 3d. Se anadio HCI diluido hasta que se ajusto el pH de la mezcla hasta
7. Entonces se extrajo la mezcla con DCM (3 x 200 ml). Se lava la fase organica con salmuera, se seco sobre 30 Na2SO4 y se concentro para dar 3e como un solid° amarillo palido (32 g, rendimiento del 96%).
Etapa 4: (1-(4-bromofeniI)-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butilo (3f1
A una disoluciOn del connpuesto 3e (15 g, 42 mmol) en etanol (50 ml) y THF (50 ml) se le afiadi6 LiCI.H20 (10 g, 170 mmol) y NaBH4 (6,3 g, 170 mmol) a 0°C. Se agito la mezcla a ta durante la noche. El analisis mediante CL/EM indic6 el consumo total del compuesto 3e. Se retir6 el precipitado mediante filtraciOn y se concentr6 el filtrado a vacio
35 para dar 3f como un sOlido blanco (13 g, rendimiento del 94%).
Etapa 5: 24(3-(4-bromofeni1)-2-((terc-butoxicarboniflamino)propoxi)metil)-benzoato de metilo (3g)
A una disolucion del compuesto 3f (6,6 g, 20 mmol) en THF seco (100 ml) se le ariadi6 NaH (60%, 960 mg, 24 mmol)
en pequerias porciones a 0°C y se agito durante 1 h. Entonces se anadio gota a gota el compuesto 3b (5 g,
22 mmol) en THF (50 ml) y se permitio que la mezcla de reacci6n se agitara a ta durante la noche. Se extingui6 la
40 reaccion con agua y se extrajo con AE (2 x 100 m1). Se secaron los extractos organicos combinados sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante CC eluyendo con EP:AE = 9:1 para dar 3g como un solid° blanco (3,2 g, rendimiento del 34%).
Etapa 6: (1-(4-bromofeni1)-34(2-(hidroximetil)bencil)oxi)propan-2-incarbamato de terc-butilo (3h)
A una disoluciOn del compuesto 3g (5 g, 10 mmol) en eter seco (80 ml) se le anadi6 lentamente LiA11-14 (1 M en THF, 15,7 ml, 15,7 mmol) a 0°C. Se agit6 la mezcla a 0°C durante 30 min. Entonces se extingui6 la mezcla con agua (1 ml) con agitaciOn vigorosa. Se retire) el precipitado mediante filtraciOn y se concentr6 el filtrado a vacio para dar 3h como un solid° blanco (4,3 g, rendimiento del 92%).
5 Etapa 7: (14(2-(bromometipbencil)oxi)-3-(4-bromofenil)propan-2-il)carbamato de terc-butilo (3i)
A una disolucion del compuesto 3h (4,15 g, 9,2 mmol) en THF seco (50 ml) se le anadi6 NBS (4,1 g, 23 mmol) y PPh3 (6 g, 23 mmol) a 0°C. Se agit6 la mezcla a 0°C durante 20 min. Entonces se agit6 la mezcla a ta durante 2 h. Se evaporo el disolvente a vacio y se purifico mediante CC eluyendo con EP:AE = 4:1 para dar 31 como un solid() blanco (2,3 g, rendimiento del 50%).
10 Etapa 8: sal de acido trifluoroacetico de 1((2-(bromometil)bencil)oxi)-3-(4-bromofenil)propan-2-amina (3k1
A una disolucion del compuesto 31(2,2 g, 4,3 mmol) en DCM (20 ml) se le anadio lentamente TFA (2 ml) a 0°C. Se agit6 la mezcla a 0°C durante 2 h. El analisis mediante CL/EM indico el consumo total del compuesto 31. Se elimin6 el disolvente a vacio para dar 3k como un solid° blanco (1,68 g, rendimiento del 95%).
Etapa 9: 4-(4-bromobencil)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzoM[1,41oxazocina (31)
15 Seagito una mezcla del compuesto 3k (1,6 g, 3,9 mmol) y K2CO3 (1,6 g, 12 mmol) en THF seco (30 ml) a ta durante la noche. CL/EM indic6 el consumo total del compuesto 3k. Se filtr6 la mezcla de reaccion y se evapor6 el filtrado a vacio para dar 31 como un solid() blanco (1,1 g, rendimiento del 86%).
Etapa 10: 4-(4-bromobencil)-54(2-metoxifenihsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzoM[1,41oxazocina (3)
A una mezcla del compuesto 31 (900 mg, 2,7 mmol) y TEA (546 mg, 5,4 mmol) en acetonitrilo (30 ml) se le anadi6
20 cloruro de 2-metoxibencenosulfonilo (559 mg, 2,7 mmol) y cantidad catalitica de DMAP. Se agit6 la mezcla de reaccion a ta durante la noche. Se evaporo el disolvente a vacio y se purific6 mediante CC para dar 3 como un solido blanco (510 mg, rendimiento del 38%).
Eiemplos de preparacion 3/1 a 3/2
Siguiendo procedimientos similares a los descritos en el ejemplo de preparaci6n 3, se prepararon los siguientes 25 compuestos.
PM m/z medido de
n.° Estructura
(g/mol) [M+H]
OCFI3
po,
3/1 502,4 502;504
OCH3
p02
3/2 502,4 502;504
Eiemplo de preparacion 4
Siguiendo un procedimiento similar al descrito en Org. Lett. 2009, 11:5494, se preparo el compuesto 4-bencil-5-(2metoxifenilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-2H-benzo[b][1,5]oxazocina (4).
Ejemplos de preparaciOn 5/1 a 5/6 Usando sustitucion de Br catalizada por Pd se prepararon los siguientes compuestos.
n.°5/1
Estructura ocH3 ocH3 po2 MP n° 3/1 PM (g/mol ) 453, 6 m/z medi do de [M+Fi] 454
5/2 5/3
CN ocH3 po2 0 OCH3 P°2 CN 3/1 3/2 448, 5 448, 5 449 449
5/4
3 448, 5 449
5/5
3/2 501 , 6 502
5/6
3/2 530, 6 531
Ejemplo de preparaciOn 6
BocHN
grBr Br
NBS NaHCO/Pd(OAc)2/DPPP
BocHN
I
Br
6a 6b
6c
Br
NBS
COIF:MN
LAH PPh3
BocHN
I I 0
6d 69
6f
H2+ a-SO2CI NaH
DIPEA/DMAP
6g
6h
Etapa 1: Compuesto 6b
Se calentO una mezcla de 6a (1 g, 5,8 mmol), per6xido de benzoilo (101 mg, 0,4 mmol) y NBS (1,1 g, 6,39 mmol) en CC14 (58 ml) a reflujo durante 4 h. Se enfrio la mezcla de reacciOn hasta ta, se extingui6 con H20 y se extrajo con 5 DCM (3 x 30 ml). Se secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. Se purific6 el residuo mediante CC sobre gel de silice, eluyendo con EP:AE = 15:1 para proporcionar 6b (1,1 g, rendimiento del 78%) como un aceite amarillo.
Etapa 2: Compuesto 6c
A una disoluciOn de (R)-1-hidroxi-3-fenilpropan-2-11-carbamato de terc-butilo (200 mg, 0,8 mmol) en DMF (8 ml) a 0°C
10 sele afiadio NaH (29 mg, 1,2 mmol) en porciones. Se agito la mezcla de reacci6n a ta durante 10 min y se anadio 6b (200 mg, 0,8 mmol). Se agitO la mezcla a ta durante 16 h, se extingui6 con H20 y se extrajo con AE (3 x 30 m1). Se secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presi6n reducida. Se purifico el producto bruto mediante CCF preparativa para proporcionar 6c (70 mg, rendimiento del 21%) como un aceite
incoloro.
15 Etapa 3: Compuesto 6d
Se agito una mezcla de 6c (1,3 g, 3 mmol), acetato de paladio (106 mg, 0,5 mmol), 1,3-bis(difenilfosfino)propano (635 mg, 1,54 mmol) y trietilamina (939 mg, 9,3 mmol) en Me0H (30 ml) a 120°C bajo una atm6sfera de monOxido de carbono (10 bar) durante 30 h. Se enfri6 la mezcla de reaccion hasta ta y se concentro a presi6n reducida. Se purifico el producto bruto mediante CC sobre gel de silice, se eluy6 con EP/AE = 5:1 para proporcionar 6d (840 mg,
20 rendimiento del 68%) como un aceite incoloro.
Etapa 4: Compuesto 6e
A una disoluciOn de 6d (200 mg, 0,5 mmol) en dietil eter (10 ml) a 0°C se le anadio LiA1H4 (76 mg, 2 mmol). Se agito la mezcla de reacciOn a ta durante 0,5 h y se extinguio con H20. Se diluyo la mezcla con AE, se secO sobre Na2SO4, se filtrO y se concentro a presi6n reducida. Se purific6 el residuo mediante CC sobre gel de silice, se eluyo con
25 EP/AE = 5:1 para proporcionar 6e (181 mg, rendimiento del 97%) como un aceite incoloro.
Etapa 5: Compuesto 6f
A una disolucion de 6e (65 mg, 0,18 mmol) en THF a 0°C se le afiadio NBS (78 mg, 0,44 mmol) seguido por PPh3 (115 mg, 0,44 mmol). Se agit6 la mezcla de reacciOn a ta durante 2 h y se concentr6 a presi6n reducida. Se purific6 el residuo mediante CC sobre gel de silice, se eluy6 con EP/AE = 5:1 para proporcionar 6f (28 mg, rendimiento del
30 37%) como un aceite incoloro.
Etapa 6: Compuesto 6q
A una disoluciOn de 6f (133 mg, 0,31 mmol) en DMF (40 ml) a 0°C se le ariadio NaH (60%, 42 mg, 0,62 mmol) en porciones. Se agito la mezcla de reacci6n a ta durante 24 h, se extinguio con H20 y se extrajo con AE (3 x 30 ml). Se
secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presi6n reducida. Se purific6 el residuo mediante HPLC preparativa, se eluyo con EP/AE = 5:1 para proporcionar 6g (79 mg, rendimiento del 72%) como un aceite incoloro.
Etapa 7: Compuesto 6h
Seagito una disolucion de 6g (109 mg, 0,31 mmol) en AE-HC1 (3 ml) a ta durante 1 h y se concentro a presion reducida para proporcionar 6h (130 mg, 100%) como un sOlido blanco.
Etapa 8: (R)-7-bencil-6-(auinolin-8-ilsulfoni1)-6,7,8,10-tetrahidro-5H-piridor3,24111,41oxazocina (6)
A una disoluciOn de 6h (79 mg, 0,31 mmol) y DIPEA (120 mg, 0,93 mmol) en DCM (3 ml) a 0°C se le anadio cloruro de quinolin-8-sulfonilo (71 mg, 0,31 mmol) seguido por DMAP (8 mg, 0,07 mmol). Se agit6 la mezcla de reaccion a ta 10 durante 24 h y se concentr6 a presi6n reducida. Se purifico el residuo mediante CC sobre gel de silice, se eluy6 con EP/AE = 5:1 para proporcionar 6 (54 mg, 39%) como un &Slid° blanco. 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) 8 9,08 (s, 1H), 8,57 (d, J=8,0 Hz, 1H), 8,34-8,33 (m, 1H), 8,21 (d, 1H, J=8,0 Hz), 8,04 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,81 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,69 (t, 1H, J=8,0 Hz), 7,51-7,48 (m, 1H), 7,22-7,12 (m, 3H), 7,03-6,96 (m, 3H), 5,47 (d, 1H, J=16,0 Hz), 5,20-5,14 (m, 2H), 4,79 (d, 1H, J=16,0 Hz), 4,34 (m, 1H), 3,98 (d, 1H, J=8,4 Hz), 3,57-3,51 (m, 1H), 3,12 (m, 1H), 2,22 (m, 1H). EM
15 (ESI+) m/z: 446,5 [M+H].
Ejemplo de preparacion 6/1 a 6/5
Siguiendo procedimientos similares a los descritos en el ejemplo de preparaciOn 6, se prepararon los siguientes compuestos.
n.° Estructura
po2
6/1
OCF3 P°2
6/2
N
OEt
t•r°2
6/3
yNjlt; 0/ F SO2
6/4
N
0/
6/5 PO2
ys'ellt;
PM
m/z medi do de
(g/mol )
[M+Hr
441 , 5
442
474, 5
475
442, 5
453
426, 5
427
432, 5
433
Ejemplo de preparacion 7
Me0H BocHN
EDC.HCI HO
0 Ta
Br
H2sor
Br
SO2C1
Het
N
7c1 1.
7
Etapa 1: Cornpuesto 7b
A una disolucion de 7a (110 mg, 0,41 mmol) y Et3N (83 mg, 0,82 mmol) en Me0H (4 ml) se le anadio EDC•HCI (118,5 mg, 0,62 mmol). Se agito la mezcla de reaccion a ta durante 3 h y se concentrO a presiOn reducida. Se
5 reparti6 el residuo entre agua y AE. Se seco la fase organica sobre Na2SO4, se filtro y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante CC sobre gel de silice, eluyendo con EP/AE = de 3:1 a 1:2 para proporcionar 7b (89 mg, rendimiento del 77%) como un sOlido blanco.
Etapa 2: Compuesto 7c
A una disolucion de 7b (4,18 g, 15 mmol) en Et20 (100 ml) a ta se le anadi6 lentamente LiAIH4 (567 mg, 30 mmol). 10 Seagit6 la mezcla de reacciOn durante 0,5 h, se extingui6 con H20 y se diluy6 con AE. Se sec6 la mezcla sobre Na2SO4, se filtr6 y se concentr6 a presi6n reducida para proporcionar 7c (3,52 g, rendimiento del 93%) como un aceite amarillo palido.
Etapa 3: Compuesto 7d
A una disoluciOn de 7c (418 mg, 1,66 mmol) y 1,2-bis(bromometil)benceno (480 mg, 1,83 mmol) en DMF seca (3 ml) 15 a0°C se le anadi6 NaH (166 mg, 4,15 mmol). Se agito la mezcla de reaccion a 0°C durante 1,5 h, se extingui6 con H20 y se extrajo con AE (10 ml).
Se sec6 la fase organica sobre Na2504, se filtr6 y se concentr6 a presion reducida. Se purific6 el residuo mediante CC sobre gel de silice, eluyendo con EP/AE = de 5:1 a 1:1 para dar 7d (92 mg, rendimiento del 15%).
Etapa 4: Compuesto 7e
20 Seagito una disoluciOn de 7d (92 mg, 0,26 mmol) en AE-HCI (3 ml) a ta durante 1 h y se filtro para proporcionar 7e (73 mg, rendimiento del 100%) como un sOlido blanco.
Etapa 5: (R)-4-(piridin-3-ilmetil)-5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzoff111,41oxazocina (7)
A una disoluciOn de 7e (73 mg, 0,25 mmol) en piridina seca (2,5 ml) a ta se le afiadio cloruro de quinolin-8-sulfonilo (86 mg, 0,38 mmol). Se agit6 la mezcla de reaccion a ta durante 16 h y se concentro a presi6n reducida. Se purific6
25 el residuo mediante CCF preparativa para dar 7 (13 mg, 11%).1H-RMN (400 MHz, CDCI3) 8 8,89-8,87 (m, 1H), 8,56 (d, 1H, J=8,0 Hz), 8,45-8,40 (m, 2H), 8,16 (d, 1H, J=8,0 Hz), 8,00 (d, 2H, J=8,0 Hz), 7,62-7,58 (m, 2H), 7,45-7,42 (m, 1H), 7,20-7,17 (m, 2H), 7,02 (t, 1H, J=7,6 Hz), 6,93-6,86 (m, 2H), 5,10-5,01 (m, 3H), 4,62-4,57 (m, 2H), 3,82 (d, 1H, J=8,0 Hz), 3,79 (d, 1H, J=8,0 Hz), 3,15-3,09 (m, 1H), 2,63-2,60 (m, 1H). EM (ESI+) m/z: 446,2 [m+H].
Ejemplos de preparaciOn 8 y 9
OH
OH
MsC1
NH2 ea
NaH,Mel $02 N
HATU
(R) "
81
Etapa 1: Compuesto 8b
A una disolucion de 8a (4 g, 29,2 mmol) en DCM (20 ml) y Me0H (10 ml) se le anadio Boc20 (6,4 g, 29,2 mmol). Se agit6 la mezcla de reaccion a ta durante 24 h y se concentro a presi6n reducida. Se purifico el residuo mediante CC 5 sobre gel de silice, eluyendo con EP/AE = de 10:1 a 5:1 para dar 8b (3,2 g, rendimiento del 46%) como un solido blanco.
Etapa 2: Compuesto 8c
A una disolucien de 8b (1 g, 4,21 mmol) en DCM (10 ml) a ta se le anadio DIPEA (1,6 g, 12,4 mmol) seguido por cloruro de metanosulfonilo. Se agit6 la mezcla a ta durante 3 h y se concentr6 a presi6n reducida para dar 8c bruto 10 (1,2 g, rendimiento del 100%) como un aceite amarillo.
Etapa 3: Compuesto 8d
A una disolucion de clorhidrato de (R)-2-amino-3-fenilpropanoato de terc-butilo (1,08 g, 4,21 mmol) en dioxano
(15 ml) se le afiadio DIPEA (1,6 g, 12,4 nnmol) seguido por 8c (1,2 g, 4,21 mmol). Se calent6 la mezcla a reflujo
durante 14 h, se enfri6 hasta ta y se concentrO a presiOn reducida. Se repartio el residuo entre AE (100 ml) y H20
15 (50m1). Se separo la fase organica, se lave con salmuera (50 ml), se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro a presiOn reducida. Se purified el residuo mediante CC sobre gel de silice, eluyendo con EP/AE = de 10:1 a 2:1 para dar 8d (1 g, rendimiento del 54%) como un aceite amarillo palido.
Etapa 4: Compuesto 8e
A una disolucion de 8d (1 g, 2,27 mmol) en piridina (10 ml) a ta se le anadio cloruro de quinolin-8-sulfonilo (0,517 g,
20 2,27 mmol). Se agito la mezcla durante 16 h y se concentr6 a presion reducida. Se repartio el residuo entre AE (100 ml) y H20 (50 ml). Se separ6 la fase organica, se lave) con salmuera (30 ml), se seed) sobre Na2SO4, se filtr6 y se concentro a presi6n reducida. Se purified el residuo mediante CC sobre gel de silice, eluyendo con EP/AE = de
5:1 a 1:1 para dar 8e (620 mg, rendimiento del 44%) como un aceite amarillo palido.
Etapa 5: Compuesto 8f
25 Seagito una mezcla de 8e (620 mg, 0,98 mmol) en DCM (2 ml) y TEA (5 ml) a ta durante 4 h y se concentr6 a presi6n reducida. Se reparti6 el residuo entre AE (100 ml) y NaHCO3 sat. ac. (50 m1). Se separ6 la fase organica, se lava con salmuera (30 ml), se seco sobre Na2SO4, se Nit y se concentrO a presion reducida. Se purified el residuo mediante CC sobre gel de sllice, eluyendo con DCM/Me0H = de 20:1 a 8:1 para dar 8f (400 mg, rendimiento del
86%) como un aceite amarillo palido.
30 Etapa 6: (R)-4-bencil-5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-1,2,5,6-tetrahidrobenzoffl[1,41diazocin-3(4H)-ona (8)
A una disoluciOn de 8f (400 mg, 0,84 mmol) en DMF (5 ml) a ta se le ariadio HATU (479 mg, 1,26 mmol). Se agito la mezcla de reaccion durante 16 h, se diluy6 con AE (20 ml) y se lave con H20 (20 ml) y salmuera (10 ml). Se seed) la disolucion organica sobre Na2SO4, se filtr6 y se concentr6 a presion reducida. Se purified' el residuo mediante CC sobre gel de silice, eluyendo con DCM-AE (de 10:1 a 2:1) para dar el producto bruto (200 mg), que se purific6 35 mediante CCF preparativa y cristalizaciOn en dietil eter para dar 8 (50 mg, rendimiento del 13%) como un sOlido blanco. 1H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 9,01-8,99 (m, 1H), 8,24 (d, J=7,2 Hz, 1H), 8,18 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,93 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,51-7,40 (m, 2H), 7,30-7,20 (m, 2H), 7,12 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,10-6,95 (m, 5H), 6,81 (d, J=7,2 Hz,
1H), 5,96 (t, J=6,8 Hz, 1H), 5,45-5,36 (m, 2H), 5,08-5,03 (m, 1H), 4,45 (d, J=16,8 Hz, 1H), 3,77-3,71 (m, 1H), 3,323,25 (m, 1H), 2,90-2,87 (m, 1H); EM (ESI+) m/z: 458 [M+H].
Etna 7: (R)-4-bencil-2-metil-5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-1,2,5,6-tetrahidrobenzoM[1,41diazocin-3(4H)-ona (9)
A una disolucion de 8 (50 mg, 0,11 mmol) en THF (3 ml) a -10°C se le atiadi6 lentamente NaH (5,2 mg, 0,12 mmol).
5 SecalentO la mezcla hasta ta y se agitO durante 1 h. Se le anadio CH3I (50 mg, 0,33 mmol). Se agit6 la mezcla de reacciOn a ta durante 16 h, se diluy6 con H20 (10 ml) y se extrajo con AE (2 x 20 ml). Se secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presi6n reducida. Se purificc5 el residuo mediante CCF
preparativa para dar 9 (50 mg, rendimiento del 96%) como un solid° blanco. 1H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 9,14-9,11 (m, 1H), 8,24-8,19 (m, 2H), 7,92 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,59-7,54 (m, 1H), 7,44-7,36 (m, 3H), 7,22-7,13 (m, 5H), 7,0810 7,04 (m, 1H), 6,72 (d, J=7,2 Hz, 1H), 5,80-5,76 (m, 1H), 5,43-5,30 (m, 2H), 4,20 (d, J=16,8 Hz, 1H), 3,46-3,30 (m, 2H), 3,06-3,00 (m, 1H), 2,75 (s, 3H); EM (ESI+) m/z: 472 [M+H].
Ejemplo de preoaracion 10 y 11
OH Cs2CO3, Dioxano 150T
1/5 10 11
Etna 1: 2-(4-bencil-3,4-dihidro-1H-benzofflf1,41oxazocin-5(6H)-ilsulfoni1)-4-fluorofenol (10)
15 Auna mezcla del compuesto del ejemplo 1/5 (441 mg, 1 mmol) en THF (10 ml), se le atiadio BCI3 (234 mg, 2 mmol) a -78°C y se agit6 durante la noche a ta. Se evaporo el disolvente a vacio y se purifico mediante CC para dar el compuesto 10 como un sOlido blanco (400 mg, rendimiento del 90%).
Etapa 2: (R)-4-bencil-5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-1,2,5,6-tetrahidrobenzo ff111,41diazocin-3(4H)-ona (11)
Se calento una mezcla de 10 (43 mg, 0,1 mmol), carbonato de cesio (130 mg, 0,4 mmol) y 4-(2-cloroetil)-morfolina
20 (45 mg, 0,3 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) en un horno microondas a 160°C durante 2 h. Se filtro la mezcla de reacci6n y se elimin6 el disolvente a presion reducida. Se purifico el residuo mediante HPLC preparativa para dar el compuesto 11 como un sOlido blanco (20 mg, rendimiento del 30%). 1H-NMR (400 MHz, CDC13) 7,65-7,60 (m, 1H),
7,37-7,02 (m, 9H), 6,83 (s a, 2H), 5,35-5,31 (m, 1H), 5,10-4,90 (m, 3H), 3,83-3,75 (m, 2H), 3,65-3,61 (m, 4H), 3,433,41 (m, 1H), 3,32-3,18 (m, 2H), 3,00-2,90 (m, 1H), 2,86-2,79 (m, 1H), 2,41-2,20 (m, 6H). EM (ESI+) m/z: 541,2 25 [M+H].
Ejemplo de oreoaracion 12
Cs2CO3,
1,4-dioxano Cul
160•C
12a 12
Se calento una mezcla de 12a (preparado de manera similar al ej. de prep. 1; 43 mg, 0,1 mmol), carbonato de cesio (130 mg, 0,4 mmol), Cu! (10 mg, 0,05 mmol) y morfolina (35 mg, 0,4 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) en un horno 30 microondas a 160°C durante 2 h. Tras enfriar hasta ta se filtr6 la mezcla de reacciOn y se elimino el disolvente a presion reducida. Se purifico el residuo mediante HPLC preparativa para dar 4-bencil-5-(5-fluoro-2morfolinofenilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzo[f][1,4]oxazocina (12) como un solid° blanco (30 mg, rendimiento del 61%). 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) 8 7,70-7,68 (m, 1H), 7,35-7,15 (m, 8H), 7,10 (d, J=6,4 Hz, 2H), 6,96 (d, J=6,5 Hz, 1H), 5,16 (d, J=12,5 Hz, 1H), 5,04 (d, J=12,5 Hz, 1H), 4,89 (d, J=12,5 Hz, 1H), 4,65 (d, J=12,5 Hz, 1H), 4,25-4,21
35 (m, 1H), 3,91-3,85 (m, 2H), 3,79-3,65 (m, 3H), 3,51-3,46 (m, 1H), 3,32-3,25 (m, 1H), 3,14 (t, J=10 Hz, 1H), 2,58-2,50 (m, 2H), 2,38-2,31 (m, 1H), EM (ESI+) m/z: 497,0 [M+H].
Eiemplo de oreparaciOn 13
BBr3, DCM
13
Al ejemplo de preparaci6n 1/40 (474 mg, 1 mmol) en DCM seco (10 ml) a -78°C se le ariadi6 BBr3 (1 ml, 2 M en DCM, 2 mol) y se agit6 la mezcla a -78°C durante 2 h. Se anadi6 NH4C1 saturado ac. (5 ml) para extinguir la reacci6n. Se separo la fase organica y se extrajo la fase acuosa con DCM. Se lavO la fase organica con salmuera y
se sec6 sobre Na2SO4 anhidro. Se elimin6 el disolvente a presi6n reducida y se purifico el residuo mediante CC para dar 4-bencil-5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzo[f][1,4joxazocin-10-ol (13) como un solido blanco (312 mg, rendimiento del 68%). EM (ESI+) m/z: 461,1 [M+Hr.
Ejemplo de preparaciOn 14, 15 y 16
0
clorotormiato de Isobel!lo, N-metilmorfoline,
0 Na8H4 HOOC Br O' t1HCbz
HeIV.%Crk NHCbz
NaH
14b 14e
1. Pd/C. /12
1;4112
2. LiOH THF 0 HATU
LiA1H4
0-1‹
14d
14e
HCI
OH
15
NaH, Mel
14
10 Etapa 1: (S)-(1-(terc-butoxi)-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de bencilo (14b)
A una disolucion del compuesto 14a (5 g, 17 mmol) y cloroformiato de isobutilo (2,79 g, 20,4 mmol) en THF (60 ml) a -20°C se le ariadio N-metilmorfolina (2,06 g, 20,4 mmol). Se agito la mezcla de reaccion durante 10 min y se filtrO. Se enfrio el filtrado hasta -20°C y se le anadio NaBH4 (969 mg, 25,5 mmol) seguido por H20 (40 m1). Se agit6 la mezcla durante 30 min, se vertio en H20 y se extrajo con AE (150 ml). Se sec6 la fase organica sobre Na2SO4, se filtro y se
15 concentro a presi6n reducida para dar el compuesto 14b (4,14 g, rendimiento del 87%) como un aceite.
Etapa 2: (S)-24(2-(((benciloxilcarbonil)amino)-3-(terc-butoxi)propoxi)metil)benzoato de metilo (14c)
A una disolucion del compuesto 14b (562 mg, 2,0 mmol) en DMF (10 ml) a 0°C se le ariadi6 NaH (200 mg, 5,0 mmol). Se agito la reacciOn durante 30 min y se le ariadio 2-(bromometil)benzoato de metilo (366 mg, 1,6 mmol). Se agitO la mezcla de reacciOn durante 3 h, se vertiO en H20 y se extrajo con AE (10 ml). Se sec6 la fase organica
20 sobre Na2SO4, se filtrO y se concentr6 a presiOn reducida. Se purificO el residuo mediante CCF preparativa para dar el compuesto 14c (275 mg, rendimiento del 40%) como un aceite.
Etapa 3: acido (S)-2-((2-amino-3-(terc-butoxi)propoxi)metil)benzoico (14d)
Se agito una mezcla del compuesto 14c (1,4 g, 3,3 mmol) y Pd-C (37 mg) en Me0H (20 ml) bajo una atmOsfera de H2 (1 atm) a ta durante 16 h. Se filtro la mezcla de reacciOn y se concentr6 a presion reducida. Se purifico el residuo
mediante CC sobre gel de silice para dar el ester (900 mg, rendimiento del 92%) como un aceite. A una disolucion de este ester (900 mg, 3,05 mmol) en THF (10 ml) a 0°C se le ariadio una disolucion de LiOH (513 mg, 12,2 mmol) en H20 (3 ml). Se agito la mezcla de reaccion a ta durante 16 h, se acidifico con HCI 1 N hasta pH=3 y se extrajo con AE (3 x 15 ml). Se secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a
presion reducida para dar el compuesto 14d (720 mg, rendimiento del 84%) como un solido blanco.
Etapa 4: (S)-4-(terc-butoximetil)-4,5-dihidro-1H-benzon1,41oxazocin-6(3H)-ona (14e)
A una disoluciOn del compuesto 14d (394 mg, 1,4 mmol) y HATU (639 mg, 1,68 mmol) en DMF (20 ml) a ta se le ariadio DIPEA (1 ml). Se agit6 la mezcla de reacciOn durante 16 h, se extingui6 con H20 y se extrajo con AE (100 ml). Se sec6 la fase organica sobre Na2SO4, se filtrO y se concentro a presi6n reducida. Se purifico el residuo
mediante CC sobre gel de silice, eluyendo con EP/AE = 4:1 para dar el compuesto 14e (171 mg, rendimiento del 46%) como un solid° amarillo.
Etapa 5: (S)-4-(terc-butoximetil)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzoffill ,41oxazocina (140
A una disoluciOn del compuesto 14e (171 mg, 0,65 mmol) en THF (6 ml) a 0°C se le anadio LiA1H4 (247 mg, 6,5 mmol). Se calento la mezcla de reacci6n a reflujo durante 16 h, se enfri6 hasta ta, se extingui6 con H20 y se
filtro. Se extrajo la mezcla con CHCI3 (10 ml), se lay() con salmuera, se sect!) sobre Na2SO4, se Ural y se concentro a presion reducida. Se lava el residuo con hexanos para dar el compuesto 14f (129 mg), que se us6 en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 6: (S)-4-(terc-butoximetil)-5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzolTIM .41oxazocina (14)
A una mezcla del compuesto 14f (bruto, 129 mg, 0,5 mmol) en piridina (4 ml) a ta se le anadio cloruro de quinolin-8
sulfonilo (142 mg, 0,6 mmol). Se agit6 la mezcla de reacciOn durante 16 h y se concentro a presi6n reducida. Se repartio el residuo entre CHCI3 y H20. Se laves la fase organica con salmuera, se seco sobre Na2SO4, se Rai y se concentr6 a presi6n reducida. Se purifico el residuo mediante CCF preparative para dar el compuesto 14 (100 mg, rendimiento del 44%). 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) 68,97 (s, 1H), 8,49 (d, 1H, J=8,0 Hz), 8,17 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,97 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,56 (t, 1H, J=8,0 Hz), 7,47-7,44 (m, 1H), 7,21 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,02-7,00 (m, 1H), 6,94-6,93 (m,
1H), 6,87 (d, 1H, J=8,0 Hz), 5,17 (d, 1H, J=8,0 Hz), 4,98-4,93 (m, 2H), 4,66 (d, 1H, J=8,0 Hz), 4,51 (s, 1H), 4,27 (d, 1H, J=8,0 Hz), 3,78 (d, 1H, J=8,0 Hz), 3,53 (t, 1H, J=7,2 Hz), 3,21-3,18 (m, 1H), 1,00 (s, 9H). EM (ESI) calc. para [C24H28N204S+H] (m/z): 441,56, hallado: 441,3.
Etapa 7: (R)-(5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzolffil,41oxazocin-4-ihmetanol (15)
Se agito una disolucion del compuesto 14 (58 mg, 0,13 mmol) en HCI-Me0H (1 M, 5 ml) a ta durante 24 h. Se
elimino el disolvente a presion reducida para dar el compuesto 15 (45 mg, rendimiento del 89%) como un sOlido. 1H- RMN (400 MHz, CDCI3) 8 8,94-8,93 (m, 1H), 8,59 (d, 1H, J=8,0 Hz), 8,22 (d, 1H, J=8,0 Hz), 8,03 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,63 (t, 1H, J=8,0 Hz), 7,51-7,47 (m, 1 H), 7,03 (t, 2H, J=8,0 Hz), 6,94-6,87 (m, 2H), 4,94 (d, 2H, J=8,0 Hz), 4,85-4,80 (m, 2H), 4,60 (d, 1H, J=8,0 Hz), 4,24-4,19 (m, 1H), 3,82 (d, 1H, J=8,0 Hz), 3,73-3,71 (t, 2H), 2,79-2,76 (m, 1H). EM (ESI) calc. para [C201-120N204S+H]]+ (m/z): 385,45, hallado: 384,8.
Etapa 8: (R)-4-(metoximetil)-5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzolTIF1,41oxazocina (16)
A una disolucion del compuesto 15 (40 mg, 0,1 mmol) en DMF (3 ml) a 0°C se le anadio NaH (168 mg, 0,4 mmol). Se agito la mezcla a ta durante 0,5 h y se le &ladle) Mel (22 mg, 0,16 mmol). Se agito la reaccion a ta durante 2,5 h, se extingui6 con H20 y se extrajo con AE (3 x 10 ml). Se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante CCF
preparative para dar el compuesto 16 (22 mg, rendimiento del 53%) como un solido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) 8 8,93 (s, 1H), 8,51 (d, 1H, J=8,0 Hz), 8,16 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,97 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,60 (t, 1H, J=8,0 Hz), 7,46-7,43 (m, 1H), 7,18 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,00 (d, 1H, J=7,6 Hz), 6,91-6,82 (m, 2H), 5,12 (d, 1H, J=8,0 Hz), 4,99-4,90 (m, 2H), 4,72 (s, 1H), 4,62-4,59 (d, 1H), 4,23 (d, 1H, J=8,0 Hz), 3,76 (d, 1H, J=8,8 Hz), 3,60 (t, 1H, J=8,0 Hz), 3,33-3,29 (m, 1H), 3,17 (s, 3H). EM (ESI) calc. para [C21H22N204S+H] (m/z): 399,48, hallado: 399,2.
Eiemplos de preparacion 16/1 a 16/4
Siguiendo procedimientos similares a los descritos en el ejemplo de preparacion 14 a 16, etapa 8, se prepararon los siguientes compuestos.
PM m/z medido de
n.° Estructura
(g/mol) [M+H]
16/1 474,6 475,2
N 0
16/2 po. 442,5 443,0
16/3 452,6 453,3
16/4 438,5 439,2
-c)
Eiemplo de preparaciOn 17
MeS02C1, NEt3 VMS
01-1
15 17a 17
Etapa 1: metanosulfonato de (S)-(5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzoffill .4joxazocin-4-il)metilo (17a)
A la mezcla del compuesto 15 (200 mg, 0,52 mmol) y TEA (0,2 ml, 1,5 mmol) en THF (25 ml) a ta, se le anadio
5 cloruro de metanosulfonilo (71 mg, 0,62 mmol). Se agito la mezcla resultante a ta durante la noche. Se vertio la mezcla de reacci6n en agua con hielo (100 ml), se extrajo con AE (3 x 100 ml). Se lax/6 la fase organica combinada con agua (100 ml) y salmuera (100 ml), se sec6 sobre Na2SO4 anhidro. La concentracion a vacio y la purificaciOn mediante CC, eluyendo con EP:AE = 2:1 proporcion6 el compuesto 17a como un solido blanco (210 mg, rendimiento
del 87%).
10 Etapa 2: (R)-4-((1H-pirazol-1-il)metil)-5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzon1 ,41oxazocina (17)
Se anadi6 el compuesto 17a (100 mg, 0,21 mmol) a DMSO (1 ml) y Cs2003 (500 mg, 1,5 mmol). Se ariadio 1Hpirazol (70 mg, 1,0 mmol) a la mezcla y se sell() en un tubo de microondas. Se calento la mezcla hasta 110°C durante 30 min bajo irradiacion con microondas. Se vertio la mezcla de reacci6n en hielo/agua (50 ml) y se extrajo con AE (3 x 50 ml) y se lava con salmuera (2 x 50 ml) y se secO sobre Na2SO4 anhidro. Se purifico el residuo
15 mediante CC eluyendo con EP:AE = 3:1 para dare! compuesto 17 como un solid° blanco (30 mg, rendimiento del 32%). 1H-NMR (400 MHz, CD30D) 8: 8,73 (d, J=1,6 Hz, 1H), 8,33 (d, J=7,2 Hz, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,97 (d, 1H), 7,527,50 (m, 2H), 7,40-7,38 (m, 2H), 6,80 (d, 1H), 6,70 (t, 1H), 6,14 (s, 1H), 5,10 (m, 1H), 4,92 (d, J=14,4 Hz, 1H), 4,80 (m, 2H), 4,43 (d, J=14,4 Hz, 1H), 4,35 (q, 1H), 4,22 (q, 1H), 3,76 (d, 1H), 3,66 (d, 1H). EM (ESI+) m/z: 435,0 [M+Hr.
Eiemplos de preparaciOn 17/1 a 17/5
Siguiendo procedimientos similares a los descritos en el ejemplo de preparaci6n 17, etapa 2, se prepararon los
siguientes compuestos.
PM m/z medido de
n.° Estructura
(g/mol) [M+FI]
17/1 435,5 436,2
17/2 451 ,6 452,4
17/3 467,6 468,3
17/4 453,6 454,4
17/5 434,5 435,4
Elenalo de preparaciOn 18
Me0H-HCI
NBS, AIBN
OH
lea 18b
)0Li LAH, THF
Boc20, TEA, DCM
Me0H+101
0 HO
HO)Cr NH2 NHBoc NHBoc
18d 18f
189
NaBH4 PBr3, Ca,
OH NHBocBr tIHBoc 18c
18h 18i 181
Na, THF
TFA, K2CO3,
DCM Et0H
Br
NH2
18k 181 18
Etapa 1: 2-metilbenzoato de metilo (18b)
Se agit6 una disolucion de acid° 2-metilbenzoico (18a) (5 g, 36,8 mmol) en Me0H.HCI (2,4 M, 50 ml) a 70°C durante la noche. Se concentro la mezcla a presiOn reducida para dar el compuesto 18b (4,5 g, rendimiento del 82%), que se 5 us6sin purificacion.
Etapa 2: 2-(bromometil)benzoato de metilo (18c)
Se someti6 a reflujo una disoluci6n del compuesto 18b (4,5 g, 30 mmol), NBS (5,9 g, 33 mmol) y AIBN (0,5 g, 3 mmol) en CCI4 (20 ml) durante la noche. Se Ilev6 la mezcla a H20 (20 ml) y se extrajo con DCM (100 ml). Se lavO la fase organica con salmuera, se sec6 sobre Na2SO4, se filtro y se concentro. Se purific6 el product° bruto mediante 10 ccpara dar el compuesto 18c (5,5 g, rendimiento del 80%).
Etapa 3: (R)-2-aminopent-4-enoato de metilo (18e)
Se agito una disolucion de acid° (R)-2-aminopent-4-enoico (18d) (5 g, 43,5 mmol) en Me0H-HCI (2,4 M, 50 ml) a 70°C durante la noche. Se concentr6 la mezcla a presiOn reducida para dar el compuesto 18e (5,5 g, rendimiento del 98%), que se us6 sin purificaci6n.
15 Etapa 4: (R)-2-((terc-butoxicarboninamino)pent-4-enoato de metilo (18f)
Se agitO una disoluciOn del compuesto 18e (5,5 g, 42,6 mmol) en DCM (50 ml) que contenia Boc20 (12,1 g, 55,4 mmol) y TEA (9,4 g, 85,2 mmol) a ta durante 1 h. Se concentro la mezcla a presi6n reducida para dar el compuesto 18f (9,5 g, rendimiento del 98%), que se uso sin purificacion.
Etapa 5: (R)-(1-hidroxioent-4-en-2-incarbamato de terc-butilo (18g)
20 Seenfrio una disolucion del compuesto 18f (9,5 g, 41,5 mmol) en THF (50 ml) en un bafio de hielo bajo argon. A esta mezcla se le anadio LAH (3,9 g, 104 mmol) en porciones, y entonces se retire) el bafio de hielo y se permitio que la mezcla de reaccion se agitara a ta durante 2 h y entonces se extingui6 con agua (30 m1). Se extrajo la fase acuosa con AE (3 x 50 m1). Se lavaron los extractos combinados con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, se concentraron y se purificaron mediante CC para dar el compuesto 18g (6,2 g, rendimiento del 75%) como un aceite
25 amarillo.
Etaoa 6: (R)-2-(((2-((terc-butoxicarbonil)amino)pent-4-en-1-il)oxi)metil)benzoato de metilo (18h)
Se enfri6 una disolucion del compuesto 18g (6,2 g, 30,8 mmol) y el compuesto 18c (8,5 g, 36,9 mmol) en THF
(30 ml) en un bah° de hielo bajo arg6n. A esta mezcla se le anadio NaH (2,5 g, 61,6 mmol, 60% en peso en aceite)
en porciones. Se retire) el ban° de hielo y se permiti6 que se agitara la mezcla de reaccion a ta durante 2 h y
30 entonces se extinguio con Me0H (10 ml). Se concentr6 la mezcla a presion reducida y se purific6 el residuo mediante CC para dar el compuesto deseado 18h (4,2 g, rendimiento del 39%) como un aceite amarillo. CL/EM (m/z): 350,2 (MH+).
Etna 7: (R)-(14(2-(hidroximetinbencil)oxi)Dent-4-en-2-il)carbamato de terc-butilo (18i)
Se trat6 una disoluciOn del compuesto 18h (4,2 g, 12,0 mmol) en Et0H/THF (30 ml, v/v = 1/1) con CaCl2 (5,3 g, 48,0 mmol) y se enfrio la suspension espesa resultante bajo argon en un bano de hielo. A esta mezcla se le ariadio NaBH4 (3,6 g, 96 mmol) en porciones. Tras 1 h se retir6 el ban° de hielo y se permitio que la mezcla de reaccien se agitara a ta durante 16 h. Se extinguio la mezcla con Na2CO3 ac. al 10% y agua y se extrajo la suspension espesa
5 blanca, densa con Et0Ac (3 x 50 m1). Se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. Se purified, el producto bruto mediante CC para dar el compuesto deseado 18i (3,0 g, rendimiento del 78%) como un aceite amarillo. CL/EM (m/z): 322,1 (MH+).
Etapa 8: (R)-(1-((2-(bromometil)bencil)oxi)pent-4-en-2-11)carbamato de terc-butilo (18i)
Se enfri6 una disolucion del compuesto 18i (3,0 g, 9 mmol) en CCI4 (10 ml) en un ban° de hielo. A esta mezcla se le
10 anadio PBr3 (1,0 g, 4,5 mmol) gota a gota y se agit6 la mezcla a 0°C durante 2 h. Se extingui6 la mezcla con agua y se extrajo con DCM (3 x 50 ml). Se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera y se concentraron. Se uso el compuesto bruto 18j (2,8 g, rendimiento del 80%) en la siguiente etapa sin purificacion. CL/EM (m/z): 385,1 (MH+).
Etapa 9: (R)-1-((2-(bromometil)bencil)oxi)pent-4-en-2-amina (18k)
Se agitO una disolucion del compuesto 18j (2,8 g, 7,3 mmol) en TFA/DCM (25 ml, v/v = 1/4) a ta durante 1 h. Se 15 concentre la mezcla a presi6n reducida para dar el compuesto 18k (2,0 g, rendimiento del 98%), que se us6 sin purificaciOn. CL/EM (m/z): 285,1 (MH+).
Etapa 10: (R)-4-ali1-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzon1,41oxazocina (181)
A una disolucion del compuesto 18k (2,0 g, 7,0 mmol) en Et0H (20 ml) se le anadio K2CO3 (4,8 g, 35,0 mmol) en porciones. Se calento la mezcla hasta reflujo durante 2 h para completar la reaccion. Se enfrio la mezcla de reaccion
20 hasta ta y se concentr6 a presi6n reducida para dar el compuesto 181 (1,2 g, rendimiento del 84%), que se use:, sin purificacion. CL/EM (m/z): 204,1 (MH+).
Etapa 11: (R)-4-ali1-5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzoffill ,41oxazocina (18)
Se agit6 una disoluciOn del compuesto 181 (1,2 g, 5,9 mmol), cloruro de quinolin-8-sulfonilo (1,5 g, 6,5 mmol), TEA (1,8 g, 17,7 mmol) y DMAP (366 mg, 3 mmol) en 20 ml de DCM a ta durante la noche. Se concentro la mezcla y se
25 purified, el residuo mediante CC para dar el compuesto deseado 18 (1,3 g, rendimiento del 56%) como un solid° blanco. 1H-RMN (500 MHz, CDCI3) 68,94 (m, 1H), 8,46 (d, J=7,5 Hz, 1H), 8,13 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,93 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,54 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,43 (dd, J=4,0, 8,0 Hz, 1H), 7,20 (d, J=7,5 Hz, 1H), 6,98 (m, 1H), 6,91 (m, 1H), 6,80 (d, J=7,5 Hz, 1H), 5,69 (m, 1H), 5,07-4,86 (m, 5H), 4,58 (d, J=15,0 Hz, 1H), 4,54 (m, 1H), 4,01 (d, J=12,5 Hz, 1H), 3,68 (d, J=12,5 Hz, 1H), 2,47 (m, 1H), 2,09 (m, 1H). CL/EM (m/z): 395,5 (MH+).
30 Ejemplo de preparacion 20
Et2Zn, CH212, THF
0
20
Etapa 1: (R)-4-(ciclopropilmetil)-5-(ouinolin-8-ilsulfonil)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzon1.41oxazocina (20)
A una disolucion con agitacion del compuesto 18 (100 mg, 0,25 mmol) en THF seco (5 ml) se le ariadi6 dietil-cinc (disolucion 1 M en hexano, 2,5 ml) a 0°C bajo atmosfera de nitr6geno seguido por diyodometano (667 mg, 35 2,5 mmol). Se agito la reaccion a 0°C durante 6 h y se vertiO sobre disoluciOn acuosa fria de cloruro de amonio. Se separo la fase organica y se extrajo la fase acuosa repetidamente con AE. Se lavO la fase organica combinada con salmuera, se sec6 sobre Na2SO4, se filtro y se concentre. Se purified, el producto bruto mediante CCF preparativa para proporcionar el compuesto 20 (32 mg, rendimiento del 31%). 1H-RMN (500 MHz, CDCI3) 8 8,94 (m, 1H), 8,47 (d, J=7,5 Hz, 1H), 8,13 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,93 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,55 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,43 (dd, J=8,0 Hz, 4,0 Hz
40 1H), 7,17 (d, J=7,5 Hz, 1H), 6,98 (t, J=7,5 Hz, 1H), 6,89 (m, 1H), 6,80 (d, J=7,5 Hz, 1H), 5,07 (d, J=15,5 Hz, 1H), 4,95 (d, J=15,0 Hz, 1H), 4,86 (d, J=15,5 Hz, 1H), 4,60 (d, J=15,0 Hz, 1H), 4,49 (m, 1H), 4,14 (d, J=12,0 Hz, 1H), 3,75 (d, J=12,0 Hz, 1H), 1,71 (m, 1H), 1,10 (m, 1H), 0,63 (m, 1H), 0,33 (m, 2H), -0,11 (m, 2H). EM (ESI+) m/z: 409 [M+H]. CL/EM (m/z): 409,2 (MH+).
Ejemplo de preparacien 21 y 22
N
N P P 0.
o Ruci3, pio.o s002,
CH3Mg8r
• Na104 CH3OH
/
•
00
0
0
18 21a 21
Etapa 1: acid° (R)-2-(5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzofflf1,41oxazocin-4-iflacetico (21a)
A una disolucion del compuesto 18 (1,0 g, 2,5 mmol) y Na104 (2,1 g, 10 mmol) en CCI4/CH3CN/H20 (10 ml, v/v/v = 1:1:1,5) se le arladio RuCI3 (11 mg, 0,05 mmol). Se agit6 la disolucion resultante a ta durante 16 h. Se diluy6 la
5 mezcla de reaccion con DCM y se extrajo adicionalmente la fase acuosa con DCM. Se lavaron los extractos organicos combinados con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. Se purifico el producto bruto mediante CC para dar el compuesto 21a (800 mg, rendimiento del 77%) como un solid° blanco. CL/EM (m/z): 413,2 (MH+).
Etapa 2: (R)-2-(5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzoffill .41oxazocin-4-inacetato de metilo (21)
10 Seagito una disolucion del compuesto 19 (200 mg, 0,48 mmol) en SOCl2 (5 ml) a ta durante 0,5 h, y se anadio CH3OH (10 ml) tras enfriarse la mezcla de reacci6n hasta 0°C. Se agito la mezcla durante otras 0,5 h y se elimino el disolvente. Se diluyo el residuo con DCM y se lava con agua y salmuera, se concentraron las fases organicas para obtener el compuesto deseado 21 (160 mg, rendimiento del 78%) sin purificaci6n. CL/EM (m/z): 427,2 (MH+).
Etapa 3: (R)-2-metil-1-(5-(ouinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzolf111 ,41oxazocin-4-il)propan-2-ol (22)
15 Sedisolvio el compuesto 21 (160 mg, 0,37 mmol) en THF anhidro (5 ml) y se enfrio la disolucion en un [Dario de hielo-agua. Se ariadi6 gota a gota una disolucion de bromuro de metilmagnesio 3 M en THF (0,25 ml, 0,74 mmol) por medio de jeringuilla y se permitio que se calentara la mezcla de reaccion con agitacion hasta ta y que reaccionara durante 2 h. Se extingui6 la mezcla de reaccion con disolucion de NH4CI y se extrajo con AE. Se secaron los extractos organicos sobre Na2504 anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purifico el producto brut° mediante
20 CCFpreparativa para dar el compuesto deseado 22 (35 mg, rendimiento del 22%). CL/EM (m/z): 427,2 (MH+).
Eiemplo de preparaciOn 23, 24y 25
Cel
NH4OH (CF3C0)30 -HAM, pi ddlna , DIPEA, DCM OCIA
)
) 0 0
25
21a 23
Etapa 1: (R)-2-(5-(ouinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzo[fill ,41oxazocin-4-il)acetamida (23)
Se agito una disolucion del compuesto 21a (100 mg, 0,24 mmol), HATU (137 mg, 0,36 mmol), DIPEA (77 mg,
25 0,6 mmol) en DCM (5 ml) a ta durante 0,5 h. Se anadi6 hidroxido de amonio (12 mg, 0,36 mmol) y se agito la mezcla a ta durante 2 h. Se extingui6 la mezcla de reaccion con agua y se extrajo con DCM. Se secaron los extractos organicos sabre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purifico el producto bruto mediante CCF preparativa para dar el compuesto deseado 23 (32 mg, rendimiento del 32%). CL/EM (m/z): 412,2 (MH+).
Etapa 2: (R)-2-(5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3.4,5,6-tetrahidro-1H-benzolf111 ,41oxazocin-4-iflacetonitrilo (24)
30 SeagitO una disolucion del compuesto 23 (100 mg, 0,24 mmol), piridina (47 mg, 0,6 mmol) y (CF3C0)20 (76 mg, 0,36 mmol) en DCM (5 ml) a ta durante 2 h. Se extinguio la mezcla de reaccion con agua y se extrajo con DCM. Se secaron los extractos organicos sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purific6 el producto bruto
mediante CCF preparativa para dar el compuesto deseado 24 (34 mg, rendimiento del 36%). CL/EM (m/z): 394,2 (MH+).
35 Etapa 3: (R)-4-((1H-tetrazol-5-ipmetil)-5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzoffif1,41oxazocina (25)
A la mezcla de azida de sodio (48 mg, 0,75 mmol) y cloruro de amonio (40 mg, 0,75 mmol) en DMF seca (5 ml) se le anadio el compuesto 24 (100 mg, 0,25 mmol) bajo una atmOsfera de nitrogeno. Se agito la mezcla a 125°C durante 48 h. Se veto la reaccion enfriada en agua con hielo y se acidifico hasta pH=1 con HCI 1 N. Se concentro la mezcla a vacio y se purifico mediante HPLC preparativa para obtener el compuesto 25 (30 mg, rendimiento del 27%).
CL/EM (m/z): 437,2 (MH+).
Ejemplo de preparaciOn 26
SOCl2, Et3N, Me2NH, DCM
21a
Etapa 1: (R)-N,N-dimetil-2-(5-(quinolin-8-ilsulfonil)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzon1,41oxazocin-4-iDacetamida (26)
5 Seagito una disolucion del compuesto 21a (100 mg, 0,24 mmol) en SOC12 (3 ml) a ta durante 1 h y se concentro. Se ariadieron dimetilamina (32,8 mg, 0,4 mmol) y trietilamina (81 mg, 0,81 mmol) en DCM (5 ml) al residuo anterior. Se agito la mezcla a ta durante 1 h. Se Ilevo la mezcla a H20 (10 ml) y se extrajo con DCM (30 ml). Se secaron las
fases organicas sobre Na2SO4 y se concentraron. Se purific6 el producto bruto mediante CCF preparativa para dar el compuesto puro 26 (40 mg, rendimiento del 38%). CL/EM (m/z): 440,1 (MH+).
10 Ejemplo de preparacion 27
SOCl2, AcNHNH2, Et3N, DCM POCI3
27a
27
Etapa 1: (R)-N'-acetil-2-(5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzoffl[1,41oxazocin-4-il)acetohidrazida (27a)
Se agito una disoluciOn del compuesto 21a (412 mg, 1 mmol) en SOC12 (3 ml) durante 1 h a ta y se concentro. Se afiadieron acetohidrazida (148 mg, 2 mmol) y trietilamina (303 mg, 3 mmol) en DCM (5 ml) al residuo anterior. Se
15 agit6 la mezcla a ta durante 1 h. Se neva la reaccion a H20 (10 ml) y se extrajo con DCM (30 ml). Se secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4 y se concentraron. Se purifico el producto bruto mediante CC para dar el compuesto 27a (400 mg, rendimiento del 85%).
Etapa 2: (R)-4((5-metil-1 ,3,4-oxadiazol-2-il)metil)-5-(quinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzoffli1,41oxazocina
(27)
20 SeagitO una mezcla del compuesto 27a (100 mg, 0,21 mmol) y POCI3 (3 ml) a 110°C durante 3 h. Se Have) la mezcla
a H20 (10 ml) y se extrajo con DCM (30 ml). Se secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. Se purifico el producto bruto mediante CCF preparativa para dar el compuesto puro 27 (40 mg, rendimiento del 42%). CL/EM (m/z): 451,1 (MH+).
Eiemplo de preparacion 28
NH2
SOCl2, Et3N, DCM
25
Etapa 1: (R)-N-(2-oxo-2-feniletil)-2-(5-(ouinolin-8-ilsulfoni1)-3,4,5,6-tetrahidro-1H-benzoffill,41oxazocin-4-ihacetamida (28a)
Se agit6 una mezcla del compuesto 21a (412 mg, 1 mmol) y SOC12 (3 ml) a ta durante 1 h y se concentr6. Se anadieron 2-amino-1-feniletanona (342 mg, 2 mmol) y trietilamina (303 mg, 3 mmol) en DCM (5 ml) al residuo
anterior. Se agit6 la mezcla a ta durante 1 h. Se neva la reaccion a H20 (10 ml) y se extrajo con DCM (30 ml). Se secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. Se purific6 el producto bruto mediante CC para dar el compuesto 28a (400 mg, rendimiento del 75%).
Etapa 2: (R)-4-((4-feni1-1H-imidazol-2-il)metil)-5-(auinolin-8-ilsulfoni1)-3 4 5,6-tetrahidro-1H-benzoM[1.41oxazocina 5 (28)
Se cargo un tubo de microondas con compuesto 28a (100 mg, 0,19 mmol), AcONH4 (44 mg, 0,57 mmol) y DMF (3 ml), y entonces se sell6 y se calento hasta 150°C durante 1 h bajo irradiacion de microondas. Se Ilevo la mezcla a H20 (10 ml) y se extrajo con DCM (30 ml). Se secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. Se purific6 el producto bruto mediante CCF preparativa para dar el compuesto 28 (30 mg,
10 rendimiento del 30%). CL/EM (m/z): 511,1 (MH+).
Eiemplo de preparaciOn 29
1.
PPh3, NBS
2.
TFAMCM
3.
K2CO3, THF
4.
cloruro de (2-metold4enti)
HO
sulfonilo, TEA, DMAP
5. mCPBA, OCM
Etapa 1: A una disolucion del compuesto 29a (2,2 g, 6,7 mmol) en THF seco (30 ml) se le anadio NBS (1,8 g, 10 mmol) y PPh3 (2,6 g, 10 mmol) a 0°C. Se agitO la mezcla a 0°C durante 30 min. Entonces se permiti6 que se 15 agitara la mezcla a ta durante 2 h. Se elimino el disolvente a vacio para dar un solid° blanco (2,44 g).
Etapa 2: A una disolucion del sOlido blanco de la etapa 1 (2,44 g) en DCM (20 ml) se le afiadi6 lentamente TFA (2 ml) a 0°C. Se agito la mezcla a 0°C durante 2 h. Se elimino el disolvente a vacio para dar un solid° blanco (1,96 g).
Etapa 3: Se agit6 una mezcla del residuo solid° de la etapa 2 (1,969) y K2CO3 (1,969, 14,3 mmol) en THF seco (30 20 ml) a ta durante la noche. Se filtro la mezcla de reacci6n y se evapor6 el filtrado a vacio para dar un solid° blanco (1,28 g).
Etapa 4: A una mezcla del residuo solid° de la etapa 3 (256 mg) y TEA (360 mg, 3,57 mmol) en ACN (20 ml) se le
ariadi6 cloruro de 2-metoxi-fenilsulfonilo (267 mg, 1,31 mmol) y una cantidad catalitica de DMAP. Se agit6 la mezcla
de reacciOn a ta durante la noche. Se evapor6 el disolvente a vacio para dar un solid° blanco (384 mg).
25 Etapa 5: Se agito una mezcla del residuo sOlido de la etapa 4 (38 mg) y mCPBA (70%, 68,8 mg, 0,28 mmol) en DCM (10 ml) a ta durante la noche. Se evapor6 el disolvente a vacio y se purifico mediante CC eluyendo con EP:AE = 3:1 para dar un solid° blanco (40 mg). 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 8,03 (d, J=6,4 Hz, 1H), 7,74 (t, J=6,1Hz, 1H), 7,45-7,42 (m, 2H), 7,26-7,24 (m, 2H), 7,23-7,18 (m, 5H), 6,85 (d, J=6,4 Hz, 2H), 5,45 (d, J=15,2 Hz, 1H), 5,35 (d, J=11,6 Hz, 1H), 4,82 (d, J=15,2 Hz, 1H), 4,42-4,32 (m, 2H), 4,03 (s, 3H), 3,47-3,37 (m, 1H), 2,89 (t, J=9,6 Hz, 1H),
30 2,45 (d, J=8,0 Hz, 1H), 2,22 (d, J=7,8 Hz, 1H); EM (ESI+) m/z: 472,0 [M+H].
Ejemplo de preparaciOn 30
Pd/C, H2
30k
301
30
Etapa 1: 1-fenilpent-4-en-2-ol (30b)
A una mezcla de fenilacetaldehido 30a (7,84 g, 65,3 mmol) y 3-bromoprop-1-eno (11,1 g, 91,5 mmol) en agua (50 ml), se le afiadieron KI (3,25 g, 19,6 mmol) y NiC12.6H20 (3,1 g, 13 mmol). Tras agitarse la mezcla durante varios
5 minutos, se anadio SnC12:H20 (29,5 g, 13 mmol). Se agit6 la mezcla vigorosamente a ta durante la noche y entonces se extrajo con AE. Se lav6 la fase organica combinada con salmuera, se seco sobre sulfato de sodio anhidro, se evapor6 a vacio. Se purifico el residuo mediante CC usando EP:AE = 5:1 como fase mOvil para dar el product° deseado (5,75 g, rendimiento del 54%).
Etapa 2: (E)-2-(4-hidroxi-5-fenilpent-1-en-1-il)benzoato de metilo (30c)
10 Sesometio a reflujo una mezcla de trietilamina (7,6 ml, 54,7 mmol), trifenilfosfina (0,778 g, 2,97 mmol) y acetato de paladio (0,35 g, 1,56 mmol) en 1,4-dioxano (50 ml) para formar una disolucion de color rojo oscuro homogenea. Entonces se redujo la temperatura de reaccion hasta justo por debajo de reflujo. A continuacion se aliadieron el compuesto 30b (4,56 g, 28 mmol), 2-yodobenzoato de metilo (4,10 g, 15,6 mmol) y trietilamina (2,88 ml, 10,2 mmol) con agitaciOn. Entonces se someti6 a reflujo la mezcla de reacciOn durante aproximadamente 30 min hasta que la
15 CCF mostro que el MP habia desaparecido. Se filtro la mezcla de reacci6n en caliente a traves de Celite, que se lava con 1,4-dioxano. Se evaporaron el filtrado combinado y los lavados a vacio hasta un pequelio volumen y se purificaron mediante CC usando EP:AE = 5:1 como fase movil para dar el producto deseado (2,59 g, rendimiento del 56%).
Etapa 3: 2-(4-hidroxi-5-fenilpentil)benzoato de metilo (30d)
20 Se hidrogen6 una disoluciOn de 30c (2,59 g, 8,75 mmol) en Me0H (100 ml) usando Pd al 10%/C (0,93 g, 0,88 mmol) como catalizador a presiOn atmosferica durante la noche. Se retire) el catalizador mediante filtracion y se evaporo la disoluciOn a presiOn reducida para proporcionar el producto deseado (2,27 g, rendimiento del 97%).
Etapa 4: 2-(4-((metilsulfonil)oxi)-5-fenilpentil)benzoato de metilo (30e)
A una disolucion de 30d (2,27 g, 7,62 mmol) y Et3N (2,12 ml, 15,2 mmol), se anadiO gota a gota MsCI (1,2 ml, 15,2
25 mmol) a 0°C. Tras completarse la adicion, se agito la reacci6n a ta hasta que el analisis mediante CL-EM indica el consumo total del MP. Se elimin6 el disolvente y se purificO el residuo mediante CC usando EP:AE = 5:1 como fase mOvil para proporcionar el product° deseado (2,9 g, cuant.)
Etapa 5: 2-(4-azido-5-fenilpentil)benzoato de metilo (30f)
Se atiadieron azida de sodio (1 g, 15,4 mmol) y 15-corona-5 (0,17 g, 0,77 mmol) a una disoluciOn con agitaci6n de 30e (2,9 g, 7,7 mmol) en DMF (60 ml). Se calento la mezcla a 85°C durante 24 h bajo atmosfera de argon. Entonces se atiadio DCM (300 ml), se law!' la disolucion con una disoluciOn saturada de NaHCO3 (2 x 150 ml) y salmuera (3 x 200 ml) y se sec6 sobre Na2SO4. Tras la eliminacion del disolvente a presiOn reducida, se obtuvo el producto
deseado como un aceite amarillo, que se us6 sin purificaciOn adicional en la siguiente etapa.
Etapa 6: 2-(4-amino-5-fenilpentil)benzoato de metilo (30g)
Se hidrogen6 una disolucion de 30f (bruto, 7,7 mmol) en Me0H (40 ml) usando Pd al 10%/C (817 mg, 0,77 mmol) como catalizador a presion atmosferica durante la noche. Se retir6 el catalizador mediante filtracion, y se evaporo la disolucion a presiOn reducida para proporcionar el producto deseado bruto como un aceite amarillo, que se us6 sin
purificacien adicional en la siguiente etapa.
Etapa 7: 2-(4-((terc-butoxicarbonil)amino)-5-fenilpentil)benzoato de metilo (30h)
A una disoluciOn de 30g (2,42 g 8,17 mmol) y Et3N (2,27 ml, 16,4 mmol) en DCM (60 ml), se le afiadiO gota a gota (Boc)20 (3,56 g, 16,4 mmol) a 0°C. Se agit6 la mezcla a ta hasta que el analisis mediante CCF indic6 el consumo total del MP. Se elimin6 el disolvente y se purifico el residuo mediante CC usando EP:AE = 5:1 como fase mOvil para
proporcionar el producto deseado (2,2 g, rendimiento del 68% a lo largo de tres etapas).
Etapa 8: (5-(2-(hidroximetil)feniI)-1-fenilpentan-2-il)carbamato de terc-butilo (301)
Se anadie gota a gota 30h (1,8 g, 4,55 mmol) en THE (5 ml) a una disolucion con agitacien de LiAIH4 (0,35 g, 9,1 mmol) en THF (25 ml) a 0°C. Entonces se agito la mezcla a ta hasta que el analisis mediante CCF indico el consumo total del MP. Se extinguio cuidadosamente la reaccion mediante la adicion lenta de agua (10 ml) y
entonces se decanto el liquid° separandolo del precipitado. Se lava el precipitado con DCM (3 x 50 ml) y se combinaron las fases organicas y se secaron sobre Na2SO4. Se elimino el disolvente y se purific6 el residuo mediante CC usando EP:AE = 5:1 como fase mOvil para proporcionar el producto deseado (1,3 g, rendimiento del 79%).
Etapa 9: (5-(2-(bromometipfeni1)-1-fenilpentan-2-il)carbamato de terc-butilo (30i)
Auna mezcla de NBS (550 mg, 3,65 mmol) y PPh3 (978 mg, 3,65 mmol) en DCM (25 ml), se le anadi6 la disolucion de 30i (900 mg, 2,44 mmol) en DCM (15 ml) a ta. Se agit6 la mezcla a ta hasta que el analisis mediante CCF indica el consumo total del MP. Se evaporo el disolvente y se purific6 el residuo mediante CC usando EP:AE = 6:1 como fase movil para proporcionar el producto deseado (680 mg, rendinniento del 65%).
Etapa 10: 5-(2-(bromometinfeni1)-1-fenilpentan-2-amina (30k)
Auna disolucion de 30j (680 mg, 1,58 mmol) en DCM (20 ml) se le anadio CF3COOH (1,79 g, 15,8 mmol). Se dej6
que la disolucion se agitara a ta hasta que el analisis mediante CCF indica. el consumo total del MP. Entonces se elimin6 el disolvente para obtener el producto deseado bruto como un aceite amarillo, que se us6 sin purificacion adicional en la siguiente etapa.
Etapa 11: 3-bencil-1,2,3,4,5,6-hexahidrobenzo[clazocina (301)
Auna disolucion de 30k (bruto, 1,58 mmol) en THF (10 ml) se le anadio K2CO3 (436 mg, 3,16 mmol). Se dej6 que la mezcla se agitara a ta hasta que el analisis mediante CL-EM indico el consumo total del MP. Entonces se retire) el solid° mediante filtracian y se concentr6 la disolucion a presion reducida para obtener el producto deseado bruto. Se us6 sin purificacion adicional en la siguiente etapa.
Etapa 12: 3-bencil-2-(ouinolin-8-ilsulfoni1)-1,2,3,4,5,6-hexahidrobenzolelazocina (30)
Auna disolucion de 301 (bruto, 1,58 mmol), Et3N (0,33 ml, 2,4 mmol) y DMAP (39 mg, 0,32 mmol) en DCM (25 ml), se le &ladle gota a gota cloruro de quinolin-8-sulfonilo (538 mg, 2,37 mmol) en DCM (5 ml) a 0°C. Tras completarse la adicion, se dej6 que la disolucion se agitara a ta durante la noche. Se lave' la mezcla con agua (2 x 30 ml) y salmuera. Se combin6 la fase organica, se sece sobre Na2SO4, se concentro a vacio. Se anadio Me0H (10 ml) al
residuo y se filtro el precipitado para dar el producto deseado (60 mg, 81% a lo largo de tres etapas). 1H-RMN (500 MHz, CDCI3) 8: 9,07 (m, 1H), 8,51 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,93 (d, 1H), 7,57 (t, 1H), 7,44 (m, 1H), 7,29 (d, 1H), 7,12 (m, 2H), 6,98 (m, 1H), 6,90 (m, 3H), 6,59 (d, 2H), 5,76 (d, 1H), 5,53 (d, 1H), 4,34 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 2,59 (m, 1H), 2,27 (t, 1H), 2,07 (m, 1H), 1,88 (m, 1H), 1,60 (m, 1H), 1,34 (m, 1H), 1,24 (m, 1H). EM (ESI+) m/z: 443 [M+H].
Elemplo de preparacion 31
MCI, *MOH Whip
—0 DISAL-H NHS= 6quot;--lt; 0 '
31* 31b 31c
NHBoc
(Et0)2POCH2C61,
OCE3
LiCi, DOU
/ Me0H, TEA
NH HC1
NC
NC
NC —1
31g
31e
0
00F3 OCF3
04s ocE
3 4.162
K2CO3 RUC tO2Et H2h1—c.
CO2Et DMAP BecHN\_/—e CO2Et
NC **
311
31h
OCF3 O CF3 gop-a S=0
LICH o4.°CF3 TEA N—\ DCM
BecHN\_y—e CO28 CO2H --e-„o
31m
31k 311
ocF,
CE3CONHNH2, Hg(0Ac)2
reactive de o
Lawesson
0
MN
31
31n
Etapa 1: (R)-2-amino-3-fenilpropanoato de metilo (31b)
Se sometio a reflujo una mezcla del compuesto 31a y HCI 2 M/Me0H durante 4 h. Se enfri6 la mezcla hasta ta y se concentro a vacio para obtener el compuesto 31b.
5 Etapa 2: (R)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-fenilpropanoato de metilo (31c)
Se anadio disolucion acuosa saturada de NaHCO3 (125 ml) a una disolucion del compuesto 31b (50 g, 0,279 mol) y (Boc)20 (133 g, 0,418 mol) en DCM y se agit6 la mezcla resultante a ta durante 3 h. La reaccion estaba completa tat como indico la CCF. Se separ6 la fase organica y se extrajo la fase acuosa con DCM. Se secaron las fases organicas combinadas (Na2SO4), se concentraron y se puriflce) el residuo mediante CC (hexano/AE = 6:1) para dar el
10 compuesto 31c como un solid° blanco (74 g, rendimiento del 95%).
Etapa 3: (R)-(1-oxo-3-fenilpropan-2-il)carbamato de terc-butilo (31d)
A una disoluciOn con agitaci6n del compuesto 31c (25,0 g, 90 mmol) en tolueno-DCM (4:1, 1000 ml) se afiadio gota a gota una disoluciOn de DIBAL-H en tolueno (1,0 M, 179 ml, 179 mmol) a -78°C bajo argon y se agito la mezcla durante 1 h a esta temperatura. Se anadi6 metanol (200 ml) inmediatamente para extinguir la reaccion. Se vertio la 15 mezcla de reacciOn en una disolucion de 200 ml de tartrato de sodio y potasio at 20% (sal de Rochelle) y se agitO a ta hasta que se separaron las dos fases. Se concentro la fase organica a vacio y se purifico el residuo mediante CC (hexano/AE = 2:1) para dar el compuesto 31d como un sOlido blanco (19,9 g, rendimiento del 89%).
Etapa 4: (R,E)-(4-ciano-1-fenilbut-3-en-2-il)carbamato de terc-butilo (31e)
A una suspensiOn con agitacion de LiCI (1,0 g, 24 mmol) en ACN seco (200 ml) bajo nitrogen° a ta, se le anadie)
20 (Et0)2POCH2CN (4,2 g, 24 mmol), DBU (3,0 g, 20 mmol) y el compuesto 31d (5,0 g, 20 mmol). Se disolvio pronto casi toda la sal y se complete) la reaccion en 1,5 h. Se extinguio la reaccion con acid° citric° y se extrajo la mezcla
con AE tres veces. Se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera y se secaron sobre Na2SO4 anhidro. Tras filtracion, se evaporo el filtrado y se purific6 el residuo mediante CC (hexano/EAc = 5:1) para dar el compuesto 31e (4,2 g, rendimiento del 77%).
Etapa 5: (R,E)-4-amino-5-fenilpent-2-enonitrilo (31f)
Setrate el compuesto 31e (4,0 g, 14,7 mmol) con HCI 2 M/Me0H (300 m1). Tras acabarse la reacciOn, se eliminaron los disolventes a presi6n reducida para dar un sOlido blanco. Se use) el product° directamente en la siguiente etapa de reacci6n sin purificacion adicional.
Etapa 6: (R,E)-N-(4-ciano-1-fenilbut-3-en-2-11)-2-(trifluorometoxpbencenosulfonamida (31g)
A una disoluciOn del compuesto 31f (2,5 g, 14,5 mmol) en DCM (100 ml) se le afiadi6 cloruro de 2
(trifluorometoxi)benceno-1-sulfonilo (4,2 g, 16,0 mmol) y TEA (4,4 g, 3,5 mmol). Se agit6 la mezcla a ta durante 12 h, entonces se anadieron DCM (50 ml) y HCI 2 N (20 ml) a la mezcla. Se separo la fase organica y se lave con salmuera y se secO sobre Na2SO4 anhidro. Tras filtracion, se evapor6 el filtrado y se purific6 el residuo mediante CC (hexano/AE = 5:1) para dar el compuesto 31g (4,2 g, rendimiento del 74%).
Etapa 7: (R,E)-2-(N-(4-ciano-1-fenilbut-3-en-2-i1)-2-(trifluorometoxi)fenilsulfonamido)acetato de etilo (31h)
Auna disolucion del compuesto 31g (4,2 g, 10,6 mmol) en DMF (100 ml) se le anadio bromoacetato de etilo (2,1 g, 12,7 mmol) y K2CO3 (3,5 g, 25,4 mmol). Se agit6 la mezcla a ta durante 12 h, entonces se anadie agua (100 ml) a la mezcla. Se extrajo la mezcla con AE ties veces y se lave la fase organica combinada con salmuera y se seed) sobre Na2SO4 anhidro. Tras filtracion, se evapor6 el filtrado y se purified) el residuo mediante CC (hexano/AE = 5:1) para dar el compuesto 31h (3,7 g, rendimiento del 73%).
Etapa 8: (S)-2-(N-(5-amino-1-fenilpentan-2-11)-2-(trifluorometoxi)fenilsulfonamido)acetato de etilo (31i)
A una disoluciOn del compuesto 31h (3,7 g, 7,7 mmol) en Me0H (200 ml) se le anadieron Pt02 (0,1 g), Pt/C (0,3 g) y TFA (1,9 g). Se hidrogen6 la mezcla en un agitador Parr a 48 psi durante 12 h. Se filtr6 la mezcla y se concentro. Se us6 el product° directamente en la siguiente etapa de reacci6n sin purificacion adicional.
Etapa 9: (S)-2-(N-(5-((terc-butoxicarboninamino)-1-fenilpentan-2-i1)-2-(trifluorometoxi)fenilsulfonamido)acetato de etilo (31j)
A una disoluciOn enfriada con hielo del compuesto 31i (3,4 g, 7,0 mmol) en DCM (150 ml), se le anadieron TEA (2,1 g, 21,0 mmol) y DMAP (50 mg), seguido por la adicion gota a gota de una disoluciOn de dicarbonato de di-terc-butilo (1,7 g, 7,7 mmol) en DCM (50 m1). Se agit6 la mezcla de reacciOn durante 12 h a ta. Se evaporo el disolvente y se disolvio el producto brut° en AE. Se lave la fase organica con agua, acid° citrico al 10% y salmuera, se sec6 sobre
Na2SO4 anhidro y se concentrO a vacio. Se purified) el producto bruto resultante mediante CC (hexano/AE = 4:1) para dar el compuesto 31j (3,3 g, rendimiento del 80% a lo largo de dos etapas).
Etapa 10: acid° (S)-2-(N-(5-((terc-butoxicarboninamino)-1-fenilpentan-2-11)-2-(trifluorometoxi)fenilsulfonamido)acetico
(31 k)
A una disolucion del compuesto 31j (3,3 g, 5,6 mmol) en MeOHTTHF (1:1, 100 ml) se le anadio LiOH (2 N, 30 ml). Se
agitO la mezcla a ta durante 2 h. Tras acabarse la reacciOn, se anadiO HCI 2 N (30 ml). Se extrajo la mezcla con AE tres veces y se lave la fase organica combinada con salmuera y se sec6 sobre Na2SO4 anhidro. Tras filtraciOn, se evaporo el filtrado y se purified) el residuo mediante CC (hexano/AE = 1:1) para dar el compuesto 31k (2,8 g,
rendimiento del 90%).
Etapa 11: acid° (S)-2-(N-(5-amino-1-fenilpentan-2-0-2-(trifluorometoxilfenilsulfonamido )acetico (311)
Auna disolucion del compuesto 31k (2,8 g, 5 mmol) en DCM (100 ml) se le anadio TFA (20 ml). Tras acabarse la reaccien, se eliminaron los disolventes mediante presiOn reducida para dar un solid() blanco. Se us6 el producto en la siguiente etapa de reaccien sin purificaciOn adicional.
Etapa 12: (S)-5-bencil-44(24trifluorometoxi)fenil)sulfoni1)-1,4-diazocan-2-ona (31m)
A una disolucion del compuesto 311(2,3 g, 5,0 mmol) en DCM (50 ml) se le anadi6 DIPEA (2,6 g, 20 mmol) y BOP-C1
(1,5 g, 6,0 mmol). Se agit6 la mezcla de reaccien a ta durante 5 h bajo nitr6geno, entonces se anadieron 50 ml de DCM y acid° citrico al 10% a la mezcla. Se separ6 la fase organica, se lave) con salmuera y se seed. sobre Na2SO4 anhidro. Tras filtracion, se evapor6 el filtrado y se purific6 el residuo mediante CC (hexano/AE = 3:1) para dar el compuesto 31m (1,9 g, rendimiento del 88%).
Etapa 13: (S)-5-bencil-4((2-(trifluorometoxi)fenipsulfonil)-1 ,4-diazocan-2-tiona (31n)
Setrate una disolucion del compuesto 31m (500 mg, 1,13 mmol) en tolueno (30 ml) con 2,4-disulfuro de 2,4-bis(4metoxifeni1)-1,3,2,4-ditiadifosfetano (reactivo de Lawesson) (457 mg, 1,13 mmol), se calent6 a 80°C durante 30 min,
se enfrio hasta ta, se trate) con NaHCO3 (95 mg, 1,13 mmol) y se agito durante 10 min. Se extrajo la mezcla con AE tres veces y se lave) la fase organica combinada con salmuera y se secO sobre Na2SO4 anhidro. Tras filtracion, se evapor6 el filtrado y se purific6 el residuo mediante CC (hexano/AE = 4:1) para dar el compuesto 31n (491 mg, rendimiento del 95%).
5 Etapa 14: (S)-8-bencil-94(2-(trifluorometoxi)fenipsulfoni1)-3-(trifluorometil)-5,6,7,8,9,10-hexahidro-11 ,2,41triazolor4,3alf1 ,41diazocina (31)
Se enfri6 una disoluciOn del compuesto 31n (150 mg, 0,33 mmol) en THF (15 ml) hasta 0°C, se trate) con Hg(0Ac)2 (118 mg, 0,36 mmol) y CF3CONHNH2 (173 mg, 1,65 mmol), se agite) durante 2 h, se diluy6 con Et20 (20 ml), se filtro a traves de Celite y se evaporo. Se tato una disolucion del residuo en tolueno/H20 (30:1, 15 ml) con Ts0H-1-120 10 (250 mg, 1,32 mmol) y se agit6 a 75°C durante 12 h. Se diluy6 la mezcla con AE (30 ml) y se lav6 con K2CO3 saturado. Se extrajo la fase acuosa con AE (20 ml). Se secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4. Tras filtracion, se evaporo el filtrado y se purified' el residuo mediante HPLC preparativa para dar el compuesto 31 como un solido blanco (113 mg, rendimiento del 64%). 1H-RMN (500 MHz, CDCI3) 8 8,14 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,68 (t, J=8,5 Hz, 1H), 7,50 (t, J=7,5 Hz, 1H), 7,40 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,15-7,10 (m, 3H), 6,76-6,70 (m, 2H), 5,71 (d, J=18,0 Hz, 1H),
15 4,97 (m, 1H), 4,90 (d, J=8,0 Hz, 1H), 4,26 (dd, J=15,0, 8,0 Hz, 1H) 4,21 (m, 1H), 2,59 (dd, J=13,0, 10,5 Hz, 1H), 2,33 (dd, J=13,0, 5,0 Hz, 1H), 2,12-1,90 (m, 2H), 1,70-1,60 (m, 2H). EM (ESI+) m/z: 535 [M+Hr.
Ejernolos de oreearacien 31/1 a 31/2
Siguiendo procedimientos similares a los descritos en el ejemplo de preparacion 31, etapa 14, se prepararon los siguientes compuestos.
n.° Estructura PM m/z medido
OCF3
,9
,s=0
31/1 466,5 467,1
31/2 465,5 466,1
20 Expresi6n y purificacion de proteinas
Se realize) la expresiOn y purificaci6n de proteinas tal como se describe en el documento W02010/049144.
Ensayo de actividad mediante TR-FRET
Este metodo mide la capacidad de supuestos ligandos para modular la interacciOn entre el domino de uniOn a ligando (LBD) de RORy expresado en bacterias purificado y peptidos biotinilados en el extremo N-terminal sinteticos
25 que se derivan de proteinas coactivadoras del receptor nuclear tales como pero sin limitarse a SRC1 (NcoA1), SRC2 (NcoA2, TIF2), SRC3 (NcoA3), PGC1a, PGC113, CBP, GRIP1, TRAP220, RIP140. Los peptidos usados se enumeran en la tabla 1 a continuaciOn:
Tabla 1
Nombre
del pepti do Protei na de ADN de Secuenci a
(i nterval o de aa)
entrada de entrada de DB
DB
SRC1 (676700)
NP_003734 NM_003743, 4 NH2-CPSSHSSLTERHKI LHRLLQEGSPS-COOH
TRAP220(631-655) NP_004765 NM_004774.3 NH2-PVSSMAGNTKNHPMLMNLLKDNPAQ- COOH
TIF2(628-651) NP_006531 NM_006540,2 NH2-GQSRLHDSKGQTKLLQLLTTKSDQ-COOH
Se expres6 el dominio de uniOn a ligando (LBD) de RORy como una proteina de fusion con GST en celulas BL-21
30 (BL3) usando el vector pDEST15. Se lisaron las celulas mediante tratamiento con lisozima y sonicacion, y se purificaron las proteinas de fusiem sobre glutation-Sepharose (Pharmacia) segiin las instrucciones del fabricante. Para examinar los compuestos para determinar su influencia sobre la interacci6n RORy-peptido, se aplic6 la
tecnologia LANCE (Perkin Elmer). Este metodo se basa en la transferencia de energia dependiente de uni6n desde un fluoroforo donador hasta un fluorOforo aceptor unido al par de union de interes. Para facilidad de manipulaciOn y reduccion de ruido de la fluorescencia del compuesto, la tecnologia LANCE hace uso de marcadores fluoroforos genericos y se realizaron ensayos de deteccion con resolucion temporal en un volumen final de 25 pl en una place 5 de 384 pocillos, en un sistema de tampon a base de Tris (Tris-HCI 20 mM pH 6,8; KCI 60 mM, DTT 1 mM; MgC12 5 mM; BSA 35 ng/1.11), que contiene 20-60 ng/pocillo de RORy-LBD expresado de manera recombinante fusionado a GST, peptido biotinilado en el extremo N-terminal 200-600 nM, 200 ng/pocillo de conjugado de estreptavidina-xIAPC
(Prozyme) y 6-10 ng/pocillo de anticuerpo anti-GST marcado con Eu W1024 (Perkin Elmer). Se mantuvo el contenido en DMSO de las muestras al 1%.
10 Tras la generaciOn del sistema de tamp6n a base de Tris, se diluyeron los ligandos que modulan RORy potencialmente. Tras esta etapa, se mezclaron disoluciones de proteina, peptido y donador y aceptor fluorescente en el sistema de tampon a base de Tris y se habian ahadido a las diluciones de compuesto, tras esta adicion de quot;mezcla de detecciOnquot;, se equilibro el ensayo durante una hora en la oscuridad a ta en places FIA negras de 384
pocillos (Corning). Se detectO la sena! de LANCE mediante un contador EnVisionTM Multilabel de Perkin Elmer. Se 15 visualizaron los resultados representando la razon entre la luz emitida a 665 nm y 615 nm. Se observa un nivel basal de formaciOn de RORy-peptido en ausencia de ligando ahadido. Los ligandos que promueven la formaci6n de complejo inducen un aumento dependiente de la concentracion en la sehal fluorescente resuelta en el tiempo. Se esperaria que los compuestos que se unen igualmente bien tanto a RORy monomeric° como a complejo RORy
peptido no produjeran cambios en la señal, mientras que se esperaria que los ligandos, que se unen preferiblemente 20 al receptor monomeric° induzcan una disminuci6n dependiente de la concentraciOn en la serial observada.
Para evaluar el potencial antagonista de los compuestos, se determinaron los valores de CI50 usando un ensayo de detecci6n de ligando basado en la transferencia de energia fluorescente resuelta en el tiempo (TR-FRET) tal como se describio anteriormente. Los valores del ensayo TR-FRET normalizados, usando la siguiente ecuacion: 1000 * valor de medicion a 665 nm / valor de medici6n a 615 nm, se transfirieron al programa GraphPad Prism para
25 generar graficos y curves de dosis-respuesta usando la siguiente ecuacion:
Ecuaci6n: dosis-respuesta sigmoidea (pendiente variable)
Y = inferior+ (superior-inferior)/(1+10^((LogCE50-X)*Pico de la pendiente))
X es el logaritmo de la concentracion. Y es la respuesta.
Y comienza desde la parte inferior y liege hasta la parte superior con una forma sigmoidea.
30 Esta es identica a la quot;ecuaciOn logistica de cuatro parametrosquot;. Se calculan los valores de C150 usando esta ecuaci6n. Los ejemplos de preparacion enumerados a continuaci6n reducen la serial en el ensayo TR-FRET de manera dependiente de la dosis. Los ejemplos de preparacion de la presente invencion tienen habitualmente una actividad de inhibiciOn (FRET a CI50) que oscila entre por debajo de 100 nM y aproximadamente 10 1AM y normalmente, desde aproximadamente 100 nM hasta aproximadamente 1 OA. Los compuestos de la invenciOn que
35 modulan RORy tienen de manera deseable una inhibicion en el ensayo de actividad TR-FRET que oscila entre por debajo de 100 nM y aproximadamente 1 12M. La table 2 enumera ejemplos tipicos de compuestos de la invencion que tienen una actividad frente a RORy en el ensayo de actividad TR-FRET inferior a 500 nM (grupo A), desde aproximadamente 500 nM hasta 2 ill‘A (grupo B) y por encima de 21AM (grupo C).
Table 2
Grupo Ejemplodepreparacionn° A 1 ,1/2,1/3,1/5,1/6,1/8,1/9,1/10,1/1 2,1/1 4,1/1 8,1/19,1/22,1/24,1/38,1/40,1/43,1/44,3/2,5/3, 6,6/2, 14, 17/4,20 B 1/11 ,1/1 3,1/1 7,1/20,1/23,1/25,1/28,1/36,1/37,1/39,1/41 ,2,4,6/3,6/5,7,16/1 ,16/3,16/4,18, 30,31/1 ,31/2 C 1/2,1/27,1/29,1/30,1/31,1/32,1/33,1/34,1/35,3,3/1 ,5/1 ,5/2,5/4,5/5,5/6,6/1 ,6/4,9,11,12,13, 16, 16/2,17, 17/2,22,26,27,29,31
40 Ensayo de gen indicador Ga14 de RORy
Se realizo la determinacion de una transactivacion dirigida por el promotor Ga14 mediado por ligando para cuantiflcar la union de ligando a RORy tal como sigue: se clono ADN que codifica para tres fragmentos de proteina de RORy diferentes en el vector pCMV-BD (Stratagene). La expresion estaba bajo el control de un promotor de CMV y como fusion al dominio de union a ADN de la proteina GAL4 de levadura. Los limites de aminoacidos de las tres proteinas
45 ylas respectivas entradas en la base de datos se enumeran en la table en 3. Otros vectores usados fueron pFR-Luc (Stratagene) como plasmido indicador regulado. pFR-Luc contiene un promotor sintetico con cinco repeticiones en tandem de los sitios de uni6n a GAL4 de levadura que controlan la expresiOn del gen de luciferasa de Photinus piralis (luciernaga americana). Con el fin de mejorar la exactitud experimental, se cotransfecto el plasmido pRL-CMV. pRL-CMV contiene el promotor de CMV constitutivo, que controla la expresiOn de la luciferasa de Renilla reniformis.
Tabla 3
Nombre
del constructo Li mites de aa (Sec. de ref. ) I D de secuenci a de ref.
hRORg-LBD
aa259-51 8 NP_005051 . 2
hRORgt
aa1 -497 NP_001 001 523 (RORg, i soforma t, 497aa)
mRORg-LBD aa264-516 NP_03541 1
Se realizaron todos los ensayos del gen indicador Ga14 en celulas 293T (DSMZ (Coleccion alemana de microorganismos y cultivos celulares), Braunschweig, Alemania, ACC635) que se habian hecho crecer en medio esencial minimo (MEM) con rojo fenol. Se complementO el medio con suero bovino fetal al 10%, aminoacidos no 5 esenciales 0,1 mM, piruvato de sodio 1 mM, Glutamax al 1% y 100 unidades de penicilina/estreptavidina por ml a 37°C en 5% de CO2.
Para el ensayo, se sembraron en placa 5x105 celulas por pocillo en placa de 96 pocillos en 100 j.l por pocillo, incubadas durante la noche a 37°C en 5% de CO2. Al dia siguiente, se desechO el medio y se transfectaron las celulas de manera transitoria usando 20 i.tl por pocillo de un reactivo de transfecciOn a base de OptiMEM-PEI 10 (Sigma-Aldrich, 408727) incluyendo los tres plasmidos descritos anteriormente. Aproximadamente 4 h tras la adici6n de la disolucion de transfecciOn, se afiadi6 medio esencial minimo red& preparado (MEM, misma composicion que la usada para sembrar en placa celulas, pero sin suero). Entonces se afiadieron disoluciones madre de compuesto,
diluidas previamente en MEM (misma composiciOn que la usada para sembrar en placa celulas) (sin que la concentraci6n final de vehiculo exceda el 0,1%).
15 Se incubaron las celulas durante 16 h adicionales antes de que se midieran las actividades de luciferasa de luciernaga (FF) y Renilla (REN) secuencialmente en el mismo extracto celular usando un sistema de ensayo de luciferasa Dual-Light (Dyer et al. , Anal. Biochem. 2000, 282:158). Todos los experimentos se realizaron por
triplicado.
Aplicando el ensayo de gen indicador Ga14 tal como se describio anteriormente, los ejemplos de preparaci6n de la
20 presente invenciOn tienen habitualmente una actividad de inhibicion (CI50 FF resp. C150 RENnorm) que oscila entre por debajo de 100 nM y aproximadamente 10 p.M, y normalmente, entre aproximadamente 100 nM y aproximadamente 1 uM. Los compuestos de la invencion que modulan ROR-y tienen de manera deseable una inhibicion en el ensayo de gen indicador Ga14 que oscila entre por debajo de 100 nM y aproximadamente 1 j.tM. Las
tablas 4 y 5 enumeran ejemplos tipicos de compuestos de la invencion que tienen una actividad frente a RORy en el 25 ensayo de gen indicador Ga14 inferior a 500 nM (grupo A), desde aproximadamente 500 nM hasta 2 piM (grupo B) y superior a 2 1AM (grupo C) para mediciones de luciferasa de luciernaga (FF, tabla 4) y Renilla normalizadas (RENnorm, tabla 5)
Tabla 4
Grupo Ejemplodepreparaci6nn.° A 1 ,1/2,1/3,1/4,1/5,1/6,1/9,1/1 0,1/1 2,1/14,1/15,1/1 8,1/22,1/37,1/38,1/44,3/2,5/2,5/3,6/2,14, 16/3, 16/4, B 1/7,1/1 3,1/16,1/1 7,1/1 9,1/20,1/24,1/26,1/28,1/29,1/31,1/34,1/36,1/39,1/40,1/43,2,3/1,6,6/3, 6/5,16/1 ,16/2,17/2,17/4,17/5,18,20,28,30,31/2 C 1/11 ,1/21 ,1/23,1/25,1/30,1/35,4,5/6,11 ,12,13,17/1,17/3,23,25,31/1
Tabla 5
Grupo Ejemplodepreparacionn.° A 1 ,1/2,1/3,1/4,1/5,1/6,1/9,1/1 0,1/1 2,1/1 4,1/1 8,1/22,1/38,1/39,1/44,3/2,5/3,6/2,14,16/1 ,16/3, 16/4, 18 B 1/7,1/1 5,1/16,1/1 7,1/1 9,1/20,1/21 ,1/24,1/25,1/26,1/28,1/29,1/31 ,1/34,1/36,1/37,1/40,1/43,2, 3/1 ,5/2,6,6/3,6/5,16/2,17/2,17/4,17/5,20,30,31/2 C 1/11 ,1/1 3,1/23,1/35,4,11 ,12,13,17/1 ,17/3,22,23,24,25,28,31/1
30 Ensayos de estimulacion de celulas mononucleares de sangre periferica (PBMC) y liberaciOn de citocina
Se adquirieron PBMC crioconservadas de Cellular Technology Ltd. Se descongelaron y se contaron tal como se explica resumidamente en el protocolo del proveedor usando complemento CTL-anti-Aggregate-Wash. Se lavaron las celulas y se sembraron en placa en medio libre de suero de CTL hasta -105 celulas/pocillo en placas de activacion de celulas T de 96 pocillos recubiertas con anticuerpo anti-CD3 humano (BD; n.° de catalogo: 354725)
35 junto con anticuerpo anti-CD28 humano (BD; n.° de catalogo: 555725) hasta una concentraci6n final de 2 12g/ml. Las muestras se trataron o bien con vehiculo (al 0,1%) o bien con moleculas quimicas pequenas de las concentraciones indicadas.
Para la determinacion del punto final de la produccion de citocina, se incubaron las celulas durante 72 h a 37°C y 5% de CO2. Se recogieron los sobrenadantes y se almacenaron congelados a -80°C hasta su procesamiento adicional. Se someti6 a ensayo las celulas para determinar la viabilidad mediante incubacion durante 15 min con diacetato de
fluoresceina (5 pig/m1 en PBS) y posterior medicion de fluoresceina (485 nm1535 nm).
5 Se determinaron las concentraciones de citocina en los sobrenadantes en ensayos ELISA multiplex basados en perlas usando kits de ensayo de citocina Procarta (Panomics) siguiendo las instrucciones de los fabricantes. Se leyeron las muestras en un dispositivo Luminex100 y se analizaron con el software IS Luminex 2.3 usando un modelo de ajuste de curva de regresion no lineal de 5 parametros.
La produccion de citocinas indicadoras de Th17 tales como IL-17A e IL-22 tal como se muestra (pero tambien de IL
10 21 e IL-17F) se inhibe con concentraciones inhibidoras eficaces medias (CE50) que oscilan normalmente entre 0,08 y 0,9 1..tM. La eficacia inhibidora de las moleculas para estas citocinas se encuentra en el intervalo del 50-95%. Los efectos sobre citocinas similares a IFNy se produjeron principalmente por celulas Th1; IL-4 (celulas Th2) o IL-10 (celulas T reguladoras) siguen siendo insignificantes. La figura 2 ilustra los efectos inhibidores selectivos sobre la producciOn de citocina por Th17 en PBMC humanas activadas de los ejemplos de preparaciOn 1, 16/4, 16/3 y 1/44.
15 Ensayoin vivo para determinar la supresion de IL-17 mediante agonistas inversos de RORy
Todos los modelos animales que imitan una enfermedad autoinmunitaria humana tienen el problema de que son de larga duracion, requieren cantidades sustanciales de farmacos exploratorios y la mayoria no permiten la monitorizacion de la produccion de IL-17 en una configuraciOn sencilla. Por tanto, se ha desarrollado un ensayo in vivo basado en un protocolo de inmunizacion originado a partir de un modelo de encefalomielitis autoinmunitaria 20 experimental (EAE) de rat6n. Tales modelos de EAE emplean la administraci6n de determinados peptidos autoinmunogenicos derivados de glicoproteina de mielina de oligodendrocitos (MOG) junto con administracion conjunta de un fuertes estimulantes inmunitarios tales como adyuvantes de Freund completos (CFA) y una imunizacion de recuerdo para la activacion de celulas T tal como toxina pertOsica (PTX) para inducir una respuesta autoinmunitaria. Las celulas Th17 que producen IL-17 estan elevadas bajo estas condiciones y aproximadamente
25 14-21 dias tras la inmunizaciOn, se hacen visibles signos macroscopicos de inflamaci6n del SNC tales como deterioro del movimiento.
Se uso el mismo protocolo de inmunizaciOn, no para inducir todos los sintomas de EAE, sino para provocar e inducir la producciOn de IL-17 por celulas Th17 y para demostrar la regulaciOn por disminuciOn de IL-17 en plasma mediante la administracion de un agonista inverso de RORy. La tabla 6 muestra la inmunizacion, administraci6n de compuesto
30 yesquema de toma de muestras de sangre:
Tabla 6
Dia 0
Dia 1 Di a 2 Di a 3 -1 7
1 7: 00
9: 00 1 0: 00 1 2: 00 1 7: 00 1 7: 30 9: 00 1 0: 00 1 7: 00 1 7: 30 9: 00 1 7: 00 1 7: 30
h
h
h
h
h
h
h
h
h
h
h
h
h
I nyecci On
1 0 mpk por X X X X X x
i . p. de
via i . p.
farmaco
(MOG)/CFA
(MOG)/C PTX PTX
o PTX
Toma de
X x x x
muestras
de sangre
Anal i si s de
I L-1 7, X X X X
I Lx
I FN7,
IL-2 Nivelesde X X [X] comp.
Dia0 Dia1 Dia2 Dia3—17
17:00 9:00 10:00 12:00 17:00 17:30 9:00 10:00 17:00 17:30 9:00 17:00 17:30
hhh h hhhhhhhh h Inyeccion 10mpk por X X X X X x
i.p.de via i.p.
tarmac() (MOG)/CFA (MOG)/C PTX PTX
o PTX TomadeX X x x
muestras de sangre
X
Anali sisde IL-X X X
I L-x
1 7,
I FNy,
I L-2
Ni vel es de
X X [X]
comp.
Este esquema de inmunizacion, aunque altera el desarrollo regular de los sintomas de EAE macroscop'cos en ratones, permite la monitorizaciOn de citocinas proinflamatorias en plasma, especificamente de IL-17, IL-2 e interferon gamma (IFNy).
Para este protocolo, se inmunizaron ratones C571bI6 de 10-14 semanas de edad (criador: Janvier) con peptido MOG
5 mas CFA en una jeringuilla precargada (MOG 35-55 en emulsion de CFA; n.° de catalog° EK-0114 con PTX 3,75x, Hooke Laboratories, kit de inducci6n de EAE) y CFA sin MOG (n.° de catalog° CK-5114, Hooke Laboratories) asi como se usaron ratones no tratados como controles. Se potenci6 la inmunizaci6n mediante la administraci6n de una dosis fija de toxina perttlsica (PTX) en mismo dia y un dia tras la imunizaciOn inicial segCin las instrucciones del fabricante. Empezando en el dia 0 (un dia antes de la inmunizacion) se obtuvieron muestras de sangre a diario del
10 mismo momento del dia y se sometieron a analisis de citocina plasmatica (ensayos Bio Plex x-plex para IL-17, IFNy, IL-2 murinos usados en un instrumento Luminex® 200 segOn las instrucciones del fabricante). Se realize) la inyeccion de farmaco a dosis de 2 x 10 mg/(kg x dia) por via intraperitoneal. Se disolvi6 el articulo de prueba en DMSO y entonces se diluy6 en solucion salina esteril (NaCI al 0,9%) + el 0,1% de Tween 80 hasta una concentraci6n final de
DMSO de cOmo maxim° el 5%.
15 Los resultados de este ensayo in vivo usando el compuesto del ejemplo de preparacion 1/8 como farmaco se muestran en la figura 1. Puede observarse en la figura 1 que los picos de IL-17 estan reducidos casi completamente tras la dosificaciOn del ejemplo de preparacion 1/8. La reducci6n de IL-17 y el aumento de IFNy tras la dosificacion del ejemplo de preparaciOn 1/8 muestra el cambio de una respuesta inmunitaria dirigida desde Th17 hasta Th1
demostrando asi el efecto de la regulacion por disminucion de la actividad de RORy in vivo.
20

Claims (15)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Compuesto representado por la formula (1)
    R1
    (I)
    y los enantiOmeros, diastereomeros, tautOmeros, solvatos y sales farmaceuticamente aceptables del mismo,
    5 enla que:
    R1 es hidrogeno; alquilo C1.42; alquenilo C1..12; alquinilo C1-12; cicloalquilo C3-10; COO-alquilo Ci_6; C0NR10R11; CN; NR1°R11; un heterociclo saturado de 3-10 miembros que contiene 1 0 2 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2, 3 6 4 heteroatomos seleccionados 10 independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
    en el que los grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo y heterociclico no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en
    10R11 y
    hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, halo-alquilo C1_6, 0-alquilo Ct.6, 0-(halo-alquilo C1.6), C0NR NR10R11;
    15
    y en el que los sistennas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, alquilo C1_6, halo-alquilo C1-12, cicloalquilo C3-6, 0
    CO2NR10R11, NR10.-.11,
    alquilo Ci_6, 0-(halo-alquilo C1_6), COOH,un sistema de anillos heteroaromatico
    20 monoo biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros, y un heterociclo saturado de 3-8 miembros que contiene 1 02 heteroatomos
    seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S
    en el que los sistemas de anillos, los grupos alquilo y cicloalquilo, independientemente entre si, no
    25 estansustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, alquilo Ci.6, halo-alquilo C1-6, 0-alquilo Ci_6, 0-(halo-alquilo Ci_6) y COOH;
    o en el que los sistennas de anillos heteroaromaticos y aromaticos estan condensados con un
    heterociclo saturado de 5-8 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados 30 independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S
    en el que el sistema de anillos condensado no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, alquilo halo-alquilo C1.6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6, 0-(halo-alquilo COOH,
    10R11 y NRiuR11;
    CO2NR
    35 R2es un sistenna de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 0 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
    en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y arornaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo 40 queconsiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, alquilo C1_6, halo-alquilo C1_12, cicloalquilo Cm, 0-alquilo C1.6, 0-(halo-alquilo C1.6), 0-alquilo C1.6 sustituido con un heterociclo saturado de 5 6 6 miembros que
    contiene 1 6 2 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, C0NR10R11, NR10R11,
    COOH, CO2(alquilo C1_6), S02(alquilo C1_6), un heterociclo saturado de 3-10 miembros que contiene 1 0 2 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste 45 enN, 0 y S, un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2
    6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, y un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
    en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados independientemente del 5 grupoque consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano alquilo C1-6, halo-alquilo C1_6, cicloalquilo C3-6,
    {110-11;
    0-alquilo C1-6, 0-(halo-alquilo C1_6), COOH, CO2NR10R y NR
    o en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos estan condensados con un heterociclo saturado de 5-8 miembros que contiene 1, 2 0 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S
    10 enel que el sistema de anillos condensado no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, alquilo Cl_sk halo-alquilo C1_6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6, 0-(halo-alquilo C14, COOH,
    CO2NR10R11 y Naive;
    L es -(CR62)x-, -NR7-(CR62).-, -(CR62),-NR7-, -(CR62)x-0-; o -(CR62)x-0-(CR62)x-;
    15 R6es independientemente H, alquilo C1-6, halo-alquilo C1-6 o halOgeno;
    R7 es H, alquilo C1.6, halo-alquilo C1.6 e hidroxi-alquilo Cl-s;
    Rlo y R11 n
    e cada aparici6n se seleccionan independientemente de hidrOgeno, alquilo C1-6, halo-alquilo Ci_6, R10 R11
    cicloalquilo C3.6; o y cuando se toman junto con el nitrOgeno al que estan unidos completan un anillo de 3 a 8 miembros que contiene atomos de carbon° y que contiene opcionalmente un heteroatomo 20 seleccionado de 0, S, SO, SO2 o NR7, en el que el anillo no esta sustituido o esta sustituido con uno o mas de halogen°, oxo o alquilo C1-6;
    R12 es H, alquilo C1-6 o halo-alquilo C1-6;
    x es independientemente 1, 2, 3 0 4;
    Ar es un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 0 3 25 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
    en el que el sistema de anillos heteroaromatico y aromatic° no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, halOgeno, ciano, halo-alquilo C1, alquilo Cts, cicloalquilo C3_6, 0-alquilo C1_6, 0-(halo-alquilo C14, COOH,
  2. 1011.-.11,
    30 CO2NR10R11, NR un heterociclo saturado de 3-10 miembros que contiene 1 6 2 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, OySy un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
    35 enel que el sistema de anillos heteroaromatico y aromatic° no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, halo-alquilo C1_12, alquilo C1_6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo Ci y COOH, y
    en el que en el circulo que representa el grupo Ar en la formula (1) los atomos que forman el puente que conectan Ar con el sistema de anillos de 8 miembros pueden ser independientemente entre si un atom°
    40 decarbono o un atom° de nitrogen° y ambos atomos que forman el puente son vecinos entre Si;
    X e Y se seleccionan independientemente entre si del grupo que consiste en 0, CH2, C(CH3)2, NH, N(alquilo C1_6), N(hidroxi-alquilo C1-6), S, SO2, C=0 y
    en los que alquilo C1-6 no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en oxo, halogen° y ciano;
    45 Zes CH2, C(CH3)2 o CO;
    por lo que se excluyen
    (1) combinaciones de X, Y y Z donde 0 esta conectado directamente a 0, NH, N(alquilo C1_6), N(hidroxi
    alquilo C1_6), S, CO o SO2,
    (2)
    combinaciones de X, Y y Z donde NH, N(alquilo C1-6), N(hidroxi-alquilo C1_6) esta conectado directamente a S, NH, N(alquilo C1_6), N(hidroxi-alquilo C1_6) y
    (3)
    combinaciones de X, Y y Z donde S esta conectado directamente a S, CO o SO2
    ycon la condiciOn de que se excluyen
    (1)
    el compuesto en el que Ar es fenilo no sustituido, X es 0, Y es CH2, Z es CH2, R2 es fenilo parasustituidocon CH3 y (L)a-R1 es CH2Ph y
    (2)
    los compuestos, donde el atom° de carbono en el anillo de Ar que es vecino directamente del atom° que forma el puente marcado con quot;*quot; esta sustituido con un grupo heterociclico o cicloalquilo C3.6 aromatic°.
  3. 2. Compuesto segun la reivindicaciOn 1, en el que
    RI es alquilo C1_12; cicloalquilo C3-6; un heterociclo saturado de 3-8 miembros que contiene 1 6 2 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico
    de6-10 miembros
    en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, halo-alquilo C1_12, alquilo C1_6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6, COOH, un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1,2
    63 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, y un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
    en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, halo-alquilo C1-12, alquilo Ci_6, cicloalquilo C3-6,
    0-alquiloCi.€ y COOH;
    o en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos estan condensados con un
    heterociclo saturado de 5-8 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S
    en el que el sistema de anillos condensado no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3
    sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, halo-alquilo C1-12, alquilo Ci-s, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6 y COOH;
    R2 es un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
    enel que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre Si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, halo-alquilo C1-12, alquilo Ci.6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo Ci_6, COOH, un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1,2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, y un sistema
    deanillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
    en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halOgeno, ciano, halo-alquilo C1-12, alquilo C1.6, cicloalquilo C3.6,
    0-alquilo C1-6 y COOH;
    oen el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos estan condensados con un
    heterociclo saturado de 5-8 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S
    en el que el sistema de anillos condensado no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano,halo-alquilo C1-12, alquilo Ci_6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6 y COOH;
    L es -(CR62)r, -NR7-(CH2)x-, -(CH2)x-NR7-o -(CH2),-0-;
    R6 es independientemente H, alquilo C1-6 o halogeno;
    R7 es H o alquilo C1-4;
    R12 es H;
    x es 1, 2, 3 6 4;
    Ar es un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
    en el que el sistema de anillos heteroaromatico y aromatic° no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientennente del grupo que consiste en hidroxilo, halogen°,
    ciano,halo-alquilo C1-12, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1.6, COOH, un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, OySy un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
    en el que el sistema de anillos heteroaromatico y aromatic° no esta sustituido o esta sustituido con 1, 26 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, halo-alquilo C1-12, alquilo Ci_6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1-6 y COOH;
    X e Y se seleccionan independientemente entre si del grupo que consiste en 0, CH2, C(CH3)2, NH, N(alquilo C1.6), N(hidroxi-alquilo C1-6), S, SO2 y C=0; Z es CH2, C(CH3)2 o CO; porlo que se excluyen
    (1)
    combinaciones de X, Y y Z donde 0 esta conectado directamente a 0, NH, N(alquilo Cis), N(hidroxialquilo S, CO o SO2,
    (2)
    combinaciones de X, Y y Z donde NH, N(alquilo C1.6), N(hidroxi-alquilo esta conectado directamente a S, N(alquilo Ci.6), N(hidroxi-alquilo C1_6) y
    (3)combinaciones de X, Y y Z donde S esta conectado directamente a S, CO o SO2
    con la condicion de que se excluye el compuesto en el que Ar es fenilo no sustituido, X es 0, Y es CH2, Z es CH2, R2 es fenilo para-sustituido con CH3 y (I-)a-R1 es CH2Ph.
  4. 3. Compuesto segim la reivindicacion 1 6 2, en el que xes CH2;
    Z es CH2; L es -CH2-, -CH20-y -CH2OCH2-;
    Ar es fenilo, piridilo, pirazilo, piridazilo y pirimidilo, en el que Ar no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, halogen°, ciano, alquilo C1.6, halo-alquilo Ci, cicloalquilo C3.6, 0-alquilo C1-6 y halo-(alquilo C1_6).
  5. 4. Compuesto segiin cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que
    X es CH2; Z es CH2; L es -CH2-, -CH20-y -CH2OCH2-; R2 es un sistema de anillos heteroaromatico mono o biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3
    heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo
    que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, alquilo C, halo-alquilo Ci_6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo low NR 'ow ,
    Ci_6, 0-(halo-alquilo C1_6), COOH, CO2(alquilo C1-6), CONR S02(alquilo C1-6), un heterociclo saturado de 3-10 miembros que contiene 1 6 2 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, un sistema de anillos heteroaromatico mono o
    biciclico de 5-10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, y un sistema de anillos aromatic° mono o biciclico de 6-10 miembros
    en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre Si, no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano alquilo halo-alquilo Cis, cicloalquilo C3-6,
    ioR11
    0-alquiloCi_6, 0-(halo-alquilo C1_6), COOH, CO2NR y NR10R11;
    o en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos estan condensados con un heterociclo saturado de 5-8 miembros que contiene 1, 2 O 3 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S
    en el que el sistema de anillos condensado no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 ô 3
    sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, ciano, alquilo Ci halo-alquilo C1_6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1_6, 0-(halo-alquilo C1_6), COOH,
    101-('-‘11wR11.
    CO2NR y NR
  6. 5. Compuesto segiin cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que
    X es CH2;
    Z
    es CH2;
    L es -CH2-, -CH20-y -CH2OCH2-;
    R1 es alquilo C1_12; cicloalquilo C3_10 o un sistema de anillos aromatic° de 6 miembros
    en el que los grupos alquilo y cicloalquilo no estan sustituido o estan sustituidos con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halogen°, ciano, haloalquiloC1_6, 0-alquilo C1-6 y 0-(halo-alquilo C1.6);
    y en el que el sistema de anillos aromatic° de 6 miembros no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halOgeno, ciano, alquilo C,halo-alquilo Ci_6, 0-alquilo C1.6 y 0-(halo-alquilo C1-6).
  7. 6.
    Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que
    Yse selecciona del grupo que consiste en 0, NH y N(alquilo C1_6), en el que alquilo C1.6 no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen° y ciano.
  8. 7.
    Compuesto segiin cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que
    X
    es CH2;
    Yes 0;
    Z es CH2;
    L es -CH2-, -CH20-y -CH2OCH2-;
    Ar es fenilo, piridilo y pirimidilo, en el que Ar no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 6 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, halogen°, alquilo Ci_4, halo-alquilo cl_4,0-alquilo C1-4 y halo-(alquilo C14;
    R1 es alquilo C1-12; cicloalquilo C3-10; un sistema de anillos heteroaromatico monociclico de 5 a 6 miembros
    que contiene 1, 2, 3 O 4 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y
    S; o un sistema de anillos monoaromatico de 6 miembros,
    en el que alquilo C1-12, cicloalquilo C3-10, un sistema de anillos heteroaromatico monociclico de 5 a 6
    miembrosque contiene 1, 2, 3 6 4 heteroatomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S, y un sistema de anillos monoaromatico de 6 miembros esta opcionalmente sustituido con 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, oxo, halogen°, halo-alquilo C1_6, 0-alquilo C1-6 y 0-(halo-alquilo C14;
    R2 es un sistema de anillos heteroaromatico biciclico de 10 miembros que contiene 1, 2 6 3 heteroatomos
    seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, 0 y S; o un sistema de anillos
    monoaromatico de 6 miembros
    en el que los sistemas de anillos heteroaromaticos y aromaticos, independientemente entre Si,
    no estan
    5
    sustituido o estan sustituidos con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halogen°, alquilo Ci.6, halo-alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, 0-alquilo C1_6 y 0-(halo-alquilo
    C1-6).
  9. 8.
    Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que
    X es CH2;
    Yes 0;
    10
    Zes CH2;
    Ar es fenilo, piridilo y pirimidilo, en el que Ar no esta sustituido o esta sustituido con 1, 2 O 3 sustituyentes
    seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidroxilo, halogen°, alquilo Ci_4, halo-alquilo
    0-alquilo C1_4 y halo-(alquilo C14;
    L-Ri se selecciona de
    Br,
    N
    CN,
    --k\
    , NHN-N 0--/c , HN
    VNIO
    Naoti
    M KCc7
    r-OH
    OH
    s
    0
    0 Y
    15
    R2 se selecciona de
    58
    CI
    CI
    CI 0 e CN Me0 CF3 OMe 0 e F CF3 OH
    Cl
    CN
  10. 9.
    CI Compuesto segtin cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, seleccionado de
    y los enantiOrneros, diastereorneros, tautomeros, solvatos y sales farmaceuticamente aceptables del mismo.
  11. 10. Compuesto segOn cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para su uso como medicamento.
  12. 11. Compuesto segOn cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para su uso en el tratamiento o la profilaxis de 5 unaenfermedad o un trastorno asociado con la inhibicion o activaciOn del receptor RORy.
  13. 12.
    Compuesto para su uso segOn la reivindicacion 11, en el que las enfermedades o los trastornos son inflamacion tisular mediada por Th17, o de etiologia autoinmunitaria o que son una enfermedad cutanea con sintomas asociados tales como dolor, picor o excoriaciones.
  14. 13.
    Compuesto para su uso segOn la reivindicaciOn 11 6 12, en el que la enfermedad o el trastorno se
    10 selecciona del grupo de artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, lupus eritematoso, psoriasis, eccema at6pico, enfermedades inflamatorias del intestino tales como enfermedad de Crohn o colitis ulcerosa, asma, esclerosis mOltiple, diabetes tipo 1 y esclerosis lateral amiotr6fica.
  15. 14. ComposiciOn farmaceutica que comprende un compuesto segOn cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 y un portador farmaceuticamente aceptable.
    15
    Figura 'I
    Figura la
    iLi7
    dia de estudio
    Figura lb
    IFNg
    10thiculo 01.p. CP
    1 60,0
    *X• WhiCtif00 Lp MCP
    A
    =,. 140,0
    120,0-—0quot;ftb E.) prep 1M 4200 mpk) MCP
    100,0-0 42 80 0'
    a 60,0 tt 'E. 40,0
    20,
    ()Arc 5 10 die de estudio
    1L-6
    Ej. prep. 1i0 (2 x 10 mpk) MCP
    5 10 15 20 dia de estudlo
    Figura 2
    Figure 2a
    1L-17A
    ......... ....... . . .. .. .•
    4 1L-4
    1L-10 1L-22 viabilidad
    c.21:- • -• • • quot;-' ' .... Iv L-10 L-22 viabilidad
    0,0001 0 0,01 0,1 (n.16141 uM
    IL-17A I.L.4 1L-I0 IL-22 CE5O 0,2060 co 432,7 0,4216
    Figura 21)
    •
    z V
    ......... ..... .v...
    • • 4 • • •IF 4
    1L-4 1L-10 1L-22
    viabilidad
    0,0001 0,001 0,01 0,1 1 10 rn,016/3 u -17A -4 1 -10 0,08642 I 9990 7e 0,202
    1L-17A IL-4 IL-10 IFNg viabilidad
    0,01 0,1 In.°1/441 uNI IL-11A IL-10 CE50 0,1442 11,40 J 2,9841+015
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