ES2400509T3

ES2400509T3 - Método de diseño de fármacos

Info

Publication number: ES2400509T3
Application number: ES06790302T
Authority: ES
Inventors: Gerald B. Tometzki; Wim Meutermans; Johannes Zuegg
Original assignee: Alchemia Pty Ltd
Current assignee: Alchemia Pty Ltd
Priority date: 2005-10-04
Filing date: 2006-10-03
Publication date: 2013-04-10
Anticipated expiration: 2026-10-03
Also published as: US20130172210A1; CN101278079A; JP5174672B2; EP1934388A1; DK1934388T3; US9709571B2; US8426345B2; JP2009510130A; CN101278079B; CN102796147A; EP1934388B1; EP1934388A4; WO2007038829A1; CA2619457C; CA2619457A1; WO2007038829A8; PL1934388T3; US20090163373A1

Abstract

Método de identificación de compuestos biológicamente activos que comprende: (a) diseñar una primera biblioteca de compuestos de fórmula 1 para explorar la diversidad molecular teniendo cada compuesto de la biblioteca al menos dos grupos farmacóforos R1 a R5 tal como se define a continuación y teniendo cada compuesto de la biblioteca el mismo número de grupos farmacóforos; (b) someter a ensayo la primera biblioteca de compuestos en uno o más ensayo(s) biológico(s); (c) identificar combinaciones de grupos farmacóforos asociadas con miembros activos de dicha primera biblioteca; y d) diseñar una segunda biblioteca conteniendo cada compuesto de la segunda biblioteca una combinación de grupos farmacóforos activos identificada en la etapa (c) y uno o más grupos farmacóforos adicionales con respecto a la primera biblioteca; de manera que el/cada componente de la primera y segunda biblioteca es un compuesto de fórmula 1: en la que el anillo puede ser de cualquier configuración; Z es azufre, oxígeno, CH2, C(O), C(O)NRA, NH, NRA o hidrógeno, en el caso en el que Z es hidrógeno entonces R1 no está presente, RA se selecciona del conjunto definido por R1 a R5, o en la que Z y R1 forman juntos un heterociclo, X es oxígeno o nitrógeno, siempre que al menos un X de la fórmula I sea nitrógeno, X también puede combinarse independientemente con uno de R1 a R5 para formar un azida, R1 a R5 se seleccionan independientemente de los siguientes grupos no farmacóforos H, metilo y acetilo, y se seleccionan independientemente grupos farmacóforos R1 a R5 del grupo que incluye pero no se limita a acilo o alquilo C2 a C20 excluyendo acetilo; heteroalquilo, alquinilo, alquenilo C2 a C20; heteroarilalquilo, arilalquilo, heteroarilo o arilo C5 a C20, que está sustituido opcionalmente, y puede ser ramificado o lineal, o en la que X y el correspondiente resto R, R2 a R5 respectivamente, se combinan para formar un heterociclo.

Description

Método de diseño de fármacos

Campo de la invención

La invención se refiere a un método de identificación de compuestos biológicamente activos, bibliotecas de compuestos.

Antecedentes

A menudo se describen moléculas pequeñas implicadas en interacciones moleculares con una diana terapéutica, ya sea una enzima o un receptor, en cuanto a elementos de unión o grupos farmacóforos que interaccionan directamente con la diana, y componentes no de unión que forman el entramado de la molécula bioactiva. En el caso de sustratos o ligandos peptídicos por ejemplo, habitualmente varias cadenas laterales de aminoácidos forman interacciones directas con su receptor o enzima, mientras que los pliegues específicos de la estructura principal peptídica (y otros residuos de aminoácido) proporcionan la estructura o armazón que controla el posicionamiento relativo de estas cadenas laterales. En otras palabras, la estructura tridimensional del péptido sirve para presentar cadenas laterales específicas en el modo requerido adecuado para la unión a una diana terapéutica. El problema es que tales modelos no permiten una rápida identificación de candidatos a fármacos debido a la necesidad de sintetizar una cantidad enorme de compuestos para identificar posibles compuestos activos.

Un grupo farmacóforo en el contexto de estas bibliotecas es un grupo anexo o sustituyente, o parte del mismo, que confiere actividad farmacológica a la molécula.

Podría considerarse que la diversidad molecular consiste en diversidad en combinaciones de grupos farmacóforos (diversidad en sustituyentes) y diversidad en el modo en el que estos grupos farmacóforos se presentan (diversidad en la forma). Se dice que las bibliotecas de compuestos en las que o bien la diversidad de sustituyentes, o bien la diversidad de forma, o ambos de estos parámetros varían sistemáticamente exploran la diversidad molecular.

Los armazones de hidrato de carbono proporcionan una oportunidad única para crear bibliotecas de moléculas estructuralmente diversas, variando los grupos farmacóforos, el armazón y las posiciones de unión de los grupos farmacóforos de una manera sistemática. Tales bibliotecas de diversidad permiten la rápida identificación de componentes mínimos o fragmentos que contienen al menos dos grupos farmacóforos requeridos para una interacción con una diana biológica. Estos fragmentos pueden optimizarse adicionalmente para proporcionar potentes moléculas para el diseño de fármacos. Por tanto, estos tipos de bibliotecas de hidrato de carbono proporcionan una excelente base para explorar la diversidad molecular.

En solicitudes anteriores (documentos WO2004014929, WO2003082846 y WO2004032940) se ha demostrado que podían sintetizarse matrices de compuestos novedosos de una manera combinatoria. Las bibliotecas de moléculas descritas en estas invenciones se sintetizaron de una manera tal que la posición, orientación y características químicas de grupos farmacóforos alrededor de una gama de armazones químicos podían modificarse y/o controlarse. Estas solicitudes demuestran la síntesis y actividad biológica de varias entidades químicas nuevas.

Muchas estrategias de descubrimiento de fármacos fallan debido a la falta de conocimiento de la conformación bioactiva de, o la incapacidad para imitar satisfactoriamente la conformación bioactiva del ligando natural para un receptor. Las bibliotecas de compuestos de la presente invención permiten la “exploración” sistemática del espacio conformacional para identificar la conformación bioactiva de la diana.

Le et al. (Drug Discovery Today, 8, 701-709, 2003) dan a conocer el uso de bibliotecas de compuestos como armazón para la identificación de sustancias biológicamente activas.

Normalmente en la técnica anterior se generan bibliotecas basadas en diversidad molecular de manera aleatoria en vez de sistemática. Este tipo de enfoque aleatorio requiere que se incluya un gran número de compuestos en la biblioteca para explorar la diversidad molecular. Además, este enfoque también puede dar como resultado huecos en el modelo debido a que no se accede eficazmente a todo el espacio molecular disponible.

Por tanto, uno de los problemas en la técnica anterior es la necesidad de sintetizar una enorme cantidad de compuestos para identificar posibles compuestos activos. Se han hecho intentos de desarrollar peptidomiméticos usando armazones de azúcar por Sofia et al. (Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters (2003) 13, 2185-2189). Sofia describe la síntesis de armazones de monosacáridos, que contienen específicamente un grupo ácido carboxílico, un grupo amino (N3) enmascarado y un grupo hidroxilo como puntos de sustitución en el armazón, estando convertidos los dos grupos hidroxilo restantes en sus metil éteres. Sofia enseña un subconjunto específico de armazones no abarcado por la presente invención y no contempla métodos para simplificar la optimización de grupos farmacóforos.

Por tanto, sigue habiendo una necesidad de proporcionar un método de exploración eficaz de bibliotecas diseñadas

a partir de compuestos con una gama más amplia de grupos farmacóforos diferentes.

La presente invención se refiere a un método de diseño de fármacos utilizando bibliotecas de exploración iterativas, que da como resultado una identificación sorprendentemente eficaz de candidatos a fármacos, partiendo de un 5 número seleccionado de farmacóforos (por ejemplo, dos) en la primera biblioteca y diseñando posteriormente bibliotecas con farmacóforos adicionales basándose en la información de SAR de la primera biblioteca.

La invención puede proporcionar un nuevo método para la rápida identificación de moléculas activas.

En una realización, y para demostrar la versatilidad de la invención, se eligió uno de los receptores acoplados a proteínas G (GPCR) como diana: el receptor de somatostatina (receptor de SST). El tetradecapéptido somatostatina se distribuye ampliamente en el sistema endocrino y exocrino, en el que tiene un papel esencial en la regulación de la secreción de hormonas [1-3]. Hasta la fecha, se han identificado cinco subtipos diferentes (SST1-5), que se expresan en razones variables por todos los diferentes tejidos en el cuerpo. También se expresan receptores de

15 somatostatina en tumores y análogos peptídicos de somatostatina que afectan principalmente a SST5, tales como ocreotida, lanreotida, vapreotida y seglitida [4-7] tienen efectos antiproliferativos. Se usan clínicamente para el tratamiento de tumores intestinales, pancreáticos e hipofisarios que producen hormonas. SST5 también está implicado en la angiogénesis, lo que abre la posibilidad de desarrollar fármacos antiangiogénicos que actúan sobre el receptor SST5, por ejemplo para el uso en oncología. La “secuencia núcleo” en la somatostatina responsable de su actividad biológica es Phe-Trp-Lys (FWK), que representa un motivo de dos grupos aromáticos y una carga positiva, que se encuentra en casi todos los compuestos activos de receptores de SST.

Se entenderá claramente que, si se hace referencia a una publicación de la técnica anterior en el presente documento, esta referencia no constituye una admisión de que la publicación forma parte del conocimiento general

25 común en la técnica en Australia o en cualquier otro país.

Sumario de la invención

En una forma, la invención proporciona un método de identificación de compuestos biológicamente activos que comprende:

(a) diseñar una primera biblioteca de compuestos de fórmula 1 para explorar la diversidad molecular teniendo cada compuesto de la biblioteca al menos dos grupos farmacóforos R1 a R5 tal como se define a continuación y teniendo cada compuesto de la biblioteca el mismo número de grupos farmacóforos;

(b): someter a ensayo la primera biblioteca de compuestos en uno o más ensayo(s) biológico(s);

(c): identificar combinaciones de grupos farmacóforos asociadas con miembros activos de dicha primera biblioteca y

(d): diseñar una segunda biblioteca conteniendo cada compuesto de la segunda biblioteca una combinación de grupos farmacóforos activos identificados en la etapa (c) y uno o más grupos farmacóforos adicionales con respecto a la primera biblioteca;

de manera que el/cada componente de la primera y segunda biblioteca es un compuesto de fórmula 1: 45

Fórmula I

en la que el anillo puede ser de cualquier configuración;

Z es azufre, oxígeno, CH2, C(O), C(O)NRA, NH, NRA o hidrógeno, en el caso en el que Z es hidrógeno entonces R1 no está presente, RA se selecciona del conjunto definido por R1 a R5, o en la que Z y R1 forman juntos un heterociclo,

X es oxígeno o nitrógeno, siempre que al menos un X de la fórmula I sea nitrógeno, X también puede combinarse 55 independientemente con uno de R1 a R5 para formar una azida,

R1 a R5 se seleccionan independientemente de los siguientes grupos no farmacóforos H, metilo y acetilo, y se seleccionan independientemente grupos farmacóforos R1 a R5 del grupo que incluye pero no se limita a acilo o alquilo C2 a C20 excluyendo acetilo; heteroalquilo, alquinilo, alquenilo C2 a C20; heteroarilalquilo, arilalquilo, heteroarilo o arilo C5 a C20, que está sustituido opcionalmente, y puede ser ramificado o lineal, o

en la que X y el correspondiente resto R, R2 a R5 respectivamente, se combinan para formar un heterociclo.

En otra forma, la invención comprende compuestos biológicamente activos cuando se identifican por el método descrito anteriormente.

5 En una realización preferida, la invención se refiere a dicho método en el que, en la primera biblioteca, tres de los sustituyentes R1-R5 son grupos no farmacóforos y se seleccionan de hidrógeno o metilo o acetilo.

En una realización preferida, la invención se refiere a dicho primer método en el que, en la primera biblioteca, dos de los sustituyentes R1-R5 son grupos no farmacóforos y se seleccionan de hidrógeno o metilo o acetilo.

En una realización preferida, la invención se refiere a dicho primer método en el que Z es azufre u oxígeno.

En una realización preferida, la invención se refiere a dicho primer método en el que al menos uno de los grupos 15 farmacóforos se selecciona de arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo o acilo.

En una realización preferida, la invención se refiere a una biblioteca de compuestos seleccionados de compuestos de fórmula 1 en los que, en la primera biblioteca, tres de los grupos no farmacóforos R1-R5 son hidrógeno o metilo o acetilo cuando se usan según dicho primer método.

En una realización preferida, la invención se refiere a una biblioteca de compuestos seleccionados de compuestos de fórmula 1 en los que, en la segunda biblioteca, dos de los grupos no farmacóforos R1-R5 son hidrógeno o metilo o acetilo cuando se usan según dicho primer método.

25 En una realización preferida, la invención se refiere a dicho primer método en el que el/cada componente de la biblioteca es un compuesto seleccionado de la fórmula 2 o la fórmula 3 o la fórmula 4

Fórmula 2 Fórmula 3 Fórmula 4

En una realización preferida, la invención se refiere a dicho primer método en el que el/cada componente de la biblioteca es un compuesto seleccionado de la fórmula 2 o la fórmula 3 o la fórmula 4 y en el que el/cada compuesto es de la configuración gluco o galacto o alo.

35 En una realización preferida, la invención se refiere a dicho primer método en el que el/cada componente de la biblioteca es un compuesto seleccionado de la fórmula 2 o la fórmula 3 o la fórmula 4 en el que el/cada compuesto es de la configuración galacto.

En una realización preferida, la invención se refiere a dicho primer método en el que el/cada componente de la biblioteca es un compuesto seleccionado de la fórmula 2 o la fórmula 3 o la fórmula 4 y en el que el/cada compuesto es de la configuración gluco.

En una realización preferida, la invención se refiere a dicho primer método en el que el/cada componente de la biblioteca es un compuesto seleccionado de la fórmula 2 o la fórmula 3 o la fórmula 4 y en el que el/cada compuesto

45 es de la configuración alo.

En una realización preferida, la invención se refiere a dicho primer método en el que el diseño de la biblioteca comprende modelado molecular para evaluar la diversidad molecular.

En una realización preferida, la invención se refiere a dicho primer método en el que los sustituyentes opcionales R1 a R5 incluyen OH, NO, NO2, NH2, N3, halógeno, CF3, CHF2, CH2F, nitrilo, alcoxilo, ariloxilo, amidina, guanidinios, ácido carboxílico, éster de ácido carboxílico, amida de ácido carboxílico, arilo, cicloalquilo, heteroalquilo, heteroarilo, aminoalquilo, aminodialquilo, aminotrialquilo, aminoacilo, carbonilo, imina sustituida o no sustituida, sulfato, sulfonamida, fosfato, fosforamida, hidrazida, hidroxamato, ácido hidroxámico, heteroariloxilo, aminoarilo,

55 aminoheteroarilo, tioalquilo, tioarilo o tioheteroarilo, que pueden estar opcionalmente sustituidos de manera adicional.

El término “halógeno” indica flúor, cloro, bromo o yodo, preferiblemente flúor, cloro o bromo.

El término “alquilo” usado o bien solo o bien en palabras compuestas tales como “alquilo opcionalmente sustituido”, “cicloalquilo opcionalmente sustituido”, “arilalquilo” o “heteroarilalquilo”, indica alquilo cíclico, ramificado o de cadena lineal, preferiblemente cicloalquilo o alquilo C1-20. Los ejemplos de alquilo ramificado o de cadena lineal incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, amilo, isoamilo, sec-amilo, 1,2-dimetilpropilo, 1,1-dimetilpropilo, hexilo, 4-metilpentilo, 1-metilpentilo, 2-metilpentilo, 3-metilpentilo, 1,1-dimetilbutilo, 2,2dimetilbutilo, 3,3-dimetilbutilo, 1,2-dimetilbutilo, 1,3-dimetilbutilo, 1,2,2-trimetilpropilo, 1,1,2-trimetilpropilo, heptilo, 5metilhexilo, 1-metilhexilo, 2,2-dimetilpentilo, 3,3-dimetilpentilo, 4,4-dimetilpentilo, 1,2-dimetilpentilo, 1,3-dimetilpentilo, 1,4-dimetilpentilo, 1,2,3-trimetilbutilo, 1,1,2-trimetilbutilo, 1,1,3-trimetilbutilo, octilo, 6-metilheptilo, 1-metilheptilo, 1,1,3,3-tetrametilbutilo, nonilo, 1,2,3,4,5,6 ó 7-metiloctilo, 1,2,3,4 ó 5-etilheptilo, 1,2 ó 3-propilhexilo, decilo, 1,2,3,4,5,6,7 u 8-metilnonilo, 1,2,3,4,5 ó 6-etiloctilo, 1,2,3 ó 4-propilheptilo, undecilo, 1,2,3,4,5,6,7,8 ó 9-metildecilo, 1,2,3,4,5,6 ó 7-etilnonilo, 1,2,3,4 ó 5-propiloctilo, 1,2 ó 3-butilheptilo, 1-pentilhexilo, dodecilo, 1,2,3,4,5,6,7,8,9 ó 10metilundecilo, 1,2,3,4,5,6,7 u 8-etildecilo, 1,2,3,4,5 ó 6-propilnonilo, 1,2,3 ó 4-butiloctilo, 1-2-pentilheptilo y similares. Los ejemplos de alquilo cíclico incluyen grupos alquilo mono o policíclico tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclononilo, ciclodecilo y similares.

El término “alquileno” usado o bien solo o bien en palabras compuestas tales como “alquileno opcionalmente sustituido” indica los mismos grupos que “alquilo” definido anteriormente excepto que se ha eliminado un hidrógeno adicional para formar un radical divalente. Debe entenderse que el sustituyente opcional puede estar unido a o formar parte de la cadena de alquileno.

El término “alquenilo” usado o bien solo o bien en palabras compuestas tales como “alquenilo opcionalmente sustituido” indica grupos formados a partir de alquenos cíclicos, ramificados o de cadena lineal incluyendo grupos cicloalquilo o alquilo etilénicamente mono, di o poliinsaturados tal como se definió anteriormente, preferiblemente alquenilo C2-6. Los ejemplos de alquenilo incluyen vinilo, alilo, 1-metilvinilo, butenilo, iso-butenilo, 3-metil-2-butenilo, 1-pentenilo, ciclopentenilo, 1-metil-ciclopentenilo, 1-hexenilo, 3-hexenilo, ciclohexenilo, 1-heptenilo, 3-heptenilo, 1octenilo, ciclooctenilo, 1-nonenilo, 2-nonenilo, 3-nonenilo, 1-decenilo, 3-decenilo, 1,3-butadienilo, 1,4-pentadienilo, 1,3-ciclopentadienilo, 1,3-hexadienilo, 1,4-hexadienilo, 1,3-ciclohexadienilo, 1,4-ciclohexadienilo, 1,3cicloheptadienilo, 1,3,5-cicloheptatrienilo y 1,3,5,7-ciclooctatetraenilo.

El término “alquinilo” usado o bien solo o bien en palabras compuestas, tales como “alquinilo opcionalmente sustituido” indica grupos formados a partir de alquinos mono o policíclicos, ramificados o de cadena lineal, preferiblemente alquinilo C2-6.

Los ejemplos de alquinilo incluyen etinilo, 1-propinilo, 1 y 2-butinilo, 2-metil-2-propinilo, 2-pentinilo, 3-pentinilo, 4pentinilo, 2-hexinilo, 3-hexinilo, 4-hexinilo, 5-hexinilo, 10-undecinilo, 4-etil-1-octin-3-ilo, 7-dodecinilo, 9-dodecinilo, 10dodecinilo, 3-metil-1-dodecin-3-ilo, 2-tridecinilo, 11-tridecinilo, 3-tetradecinilo, 7-hexadecinilo, 3-octadecinilo y similares.

El término “alcoxilo” usado o bien solo o bien en palabras compuestas tales como “alcoxilo opcionalmente sustituido” indica alcoxilo ramificado o de cadena lineal, preferiblemente alcoxilo C1-7. Los ejemplos de alcoxilo incluyen metoxilo, etoxilo, n-propiloxilo, isopropiloxilo y los diferentes isómeros de butoxilo.

El término “ariloxilo” usado o bien solo o bien en palabras compuestas tales como “ariloxilo opcionalmente sustituido” indica heteroarilalcoxilo o arilalcoxilo heteroaromático, aromático, preferiblemente ariloxilo C6-13. Los ejemplos de ariloxilo incluyen fenoxilo, benciloxilo, 1-naftiloxilo y 2-naftiloxilo.

El término “acilo” usado o bien solo o bien en palabras compuestas tales como “acilo opcionalmente sustituido” o “heteroarilacilo” indica carbamoílo, grupo acilo alifático y grupo acilo que contiene un anillo aromático, que se denomina acilo aromático o un anillo heterocíclico que se denomina acilo heterocíclico. Los ejemplos de acilo incluyen carbamoílo; alcanoílo ramificado o de cadena lineal tal como formilo, acetilo, propanoílo, butanoílo, 2metilpropanoílo, pentanoílo, 2,2-dimetilpropanoílo, hexanoílo, heptanoílo, octanoílo, nonanoílo, decanoílo, undecanoílo, dodecanoílo, tridecanoílo, tetradecanoílo, pentadecanoílo, hexadecanoílo, heptadecanoílo, octadecanoílo, nonadecanoílo e icosanoílo; alcoxicarbonilo tal como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, tbutoxicarbonilo, t-pentiloxicarbonilo y heptiloxicarbonilo; cicloalquilcarbonilo tal como ciclopropilcarbonilo, ciclobutilcarbonilo, ciclopentilcarbonilo y ciclohexilcarbonilo; alquilsulfonilo tal como metilsulfonilo y etilsulfonilo; alcoxisulfonilo tal como metoxisulfonilo y etoxisulfonilo; aroílo tal como benzoílo, toluoílo y naftoílo; aralcanoílo tal como fenilalcanoílo (por ejemplo fenilacetilo, fenilpropanoílo, fenilbutanoílo, fenilisobutilo, fenilpentanoílo y fenilhexanoílo) y naftilalcanoílo (por ejemplo naftilacetilo, naftilpropanoílo y naftilbutanoílo); aralquenoílo tal como fenilalquenoílo (por ejemplo fenilpropenoílo, fenilbutenoílo, fenilmetacrililo, fenilpentenoílo y fenilhexenoílo) y naftilalquenoílo (por ejemplo naftilpropenoílo, naftilbutenoílo y naftilpentenoílo); aralcoxicarbonilo tal como fenilalcoxicarbonilo (por ejemplo benciloxicarbonilo); ariloxicarbonilo tal como fenoxicarbonilo y naftiloxicarbonilo; ariloxialcanoílo tal como fenoxiacetilo y fenoxipropionilo; arilcarbamoílo tal como fenilcarbamoílo; ariltiocarbamoílo tal como feniltiocarbamoílo; arilglioxiloílo tal como fenilglioxiloílo y naftilglioxiloílo; arilsulfonilo tal como fenilsulfonilo y naftilsulfonilo; carbonilo heterocíclico; alcanoílo heterocíclico tal como tienilacetilo, tienilpropanoílo, tienilbutanoílo, tienilpentanoílo, tienilhexanoílo, tiazolilacetilo, tiadiazolilacetilo y tetrazolilacetilo; alquenoílo heterocíclico tal como propenoílo heterocíclico, butenoílo heterocíclico, pentenoílo heterocíclico y hexenoílo heterocíclico; y glioxiloílo heterocíclico tal como tiazolilglioxiloílo y tieniglioxiloílo.

El término “arilo” usado o bien solo o bien en palabras compuestas tales como “arilo opcionalmente sustituido”, “arilalquilo” o “heteroarilo” indica residuos individuales, polinucleares, conjugados y condensados de hidrocarburos aromáticos o sistemas de anillos heterocíclicos aromáticos. Los ejemplos de arilo incluyen fenilo, bifenilo, terfenilo, cuaterfenilo, fenoxifenilo, naftilo, tetrahidronaftilo, antracenilo, dihidroantracenilo, benzantracenilo, dibenzantracenilo, fenantrenilo, fluorenilo, pirenilo, indenilo, azulenilo, crisenilo, piridilo, 4-fenilpiridilo, 3-fenilpiridilo, tienilo, furilo, pirrilo, pirrolilo, furanilo, imadazolilo, pirrolidinilo, piridinilo, piperidinilo, indolilo, piridazinilo, pirazolilo, pirazinilo, tiazolilo, pirimidinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, benzofuranilo, benzotienilo, purinilo, quinazolinilo, fenazinilo, acridinilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo y similares. Preferiblemente, el sistema de anillos heterocíclicos aromáticos contiene de 1 a 4 heteroátomos seleccionados independientemente de N, O y S y que contiene hasta 9 átomos de carbono en el anillo.

El término “heterociclo” usado o bien solo o bien en palabras compuestas como “heterociclo opcionalmente sustituido” indica grupos heterociclilo monocíclicos o policíclicos que contienen al menos un átomo de heteroátomo seleccionado de nitrógeno, azufre y oxígeno. Los grupos heterociclilo adecuados incluyen grupos heterocíclicos que contienen N, tales como, grupos heteromonocíclicos de 3 a 6 miembros insaturados que contienen de 1 a 4 átomos de nitrógeno, por ejemplo, pirrolilo, pirrolinilo, imidazolilo, pirazolilo, piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, triazolilo o tetrazolilo; grupos heteromonocíclicos de 3 a 6 miembros saturados que contienen de 1 a 4 átomos de nitrógeno, tales como, pirrolidinilo, imidazolidinilo, piperidina o piperazinilo; grupos heterocíclicos condensados insaturados que contienen de 1 a 5 átomos de nitrógeno, tales como, indolilo, isoindolilo, indolizinilo, bencimidazoílo, quinolilo, isoquinolilo, indazolilo, benzotriazolilo o tetrazolopiridazinilo; grupo heteromonocíclico de 3 a 6 miembros insaturado que contiene un átomo de oxígeno, tal como, piranilo o furilo; grupo heteromonocíclico de 3 a 6 miembros insaturado que contiene de 1 a 2 átomos de azufre, tal como, tienilo; grupo heteromonocíclico de 3 a 6 miembros insaturado que contiene de 1 a 2 átomos de oxígeno y de 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como, oxazolilo, isoxazolilo u oxadiazolilo; grupo heteromonocíclico de 3 a 6 miembros saturado que contiene de 1 a 2 átomos de oxígeno y de 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como, morfolinilo; grupo heterocíclico condensado insaturado que contiene de 1 a 2 átomos de oxígeno y de 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como, benzoxazolilo o benzoxadiazolilo; grupo heteromonocíclico de 3 a 6 miembros insaturado que contiene de 1 a 2 átomos de azufre y de 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como, tiazolilo o tiadiazolilo; grupo heteromonocíclico de 3 a 6 miembros saturado que contiene de 1 a 2 átomos de azufre y de 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como tiazolidinilo; y grupo heterocíclico condensado insaturado que contiene de 1 a 2 átomos de azufre y de 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como, benzotiazolilo o benzotiadiazolilo.

En una realización preferida, la invención se refiere a dicho primer método en el que se sintetizan los compuestos.

En una realización preferida, la invención se refiere a dicho primer método en el que los ensayos biológicos se seleccionan de la clase de ligandos peptídicos de GPCR.

En otro aspecto, la invención proporciona un método según la fórmula 1 en el que al menos un X es nitrógeno, y dicho X se combina con el correspondiente R2-R5 para formar un heterociclo. La síntesis de los componentes heterocíclicos de la presente invención se da a conocer en el documento WO 2004/022572.

En una realización preferida, la invención proporciona un método según la fórmula 1 en el que X y R2 se combinan para formar un heterociclo.

En una realización preferida, la invención proporciona un método según la fórmula 1 en el que el heterociclo es heteroarilo, incluyendo triazoles, bencimidazoles, bencimidazolona, bencimidazoltiona, imidazol, hidantoína, tiohidantoína y purina.

Descripción detallada de la invención

Las realizaciones de la invención se describirán con referencia a los siguientes ejemplos. Cuando sea apropiado, se usan las siguientes abreviaturas.

Ac: Acetilo

DTPM: Barbiturato de 5-acil-1,3-dimetilo

Ph: Fenilo

TBDMS: t-Butildimetilsililo

TBDPS: t-Butildifenilsililo

Bn: Bencilo

Bz: Benzoílo

Me Metilo DCE 1,2-Dicloroetano

5 DCM Diclorometano, cloruro de metileno Tf Trifluorometanosulfonilo Ts 4-Metilfenilsulfonilo, p-toluenosulfonilo

10 DMF N,N-Dimetilformamida DMAP N,N-Dimetilaminopiridina -Dimetoxitolueno, benzaldehído dimetilacetal DMSO Dimetilsulfóxido DTT Ditiotreitol 20 DMTST Trifluoro-metanosulfonato de dimetil(metiltio)sulfonio TBAF Fluoruro de tetra-n-butilamonio

25 Parte A: Preparación de bloques de construcción: Con el fin de posibilitar completamente la invención, se describen a continuación métodos para la preparación de ciertos bloques de construcción usados en la preparación de los compuestos de la invención. Los bloques de construcción descritos son adecuados para síntesis tanto en fase de disolución como sólida de los compuestos de la

30 invención. Ejemplo A: Síntesis de un bloque de construcción de galactopiranósido que contiene 2,4-dinitrógeno

Condiciones: (i) -dimetoxitolueno ( -DMT), ácido p-toluenosulfónico (TsOH), acetonitrilo (MeCN), 76ºC, 85%;

(ii): cloruro de benzoílo (BzCl), trietilamina; DCM, 99%; (iii) metanol (MeOH)/MeCN/agua, TsOH, 75ºC, 98%; (iv) cloruro de t-butildifenilsililo (TBDPS-Cl), imidazol, piridina, 120ºC, 99%; (v) Tf2O, piridina, DCM, 0ºC, 100%;(b) NaN3, DMF, 16 h, TA, 99%.

Condiciones: (i) (a) anhídrido trifluorometanosulfónico (Tf2O), piridina, -20ºC, diclorometano (DCM), 1 hora, 100%,

(b): azida sódica (NaN3), N,N-dimetilformamida (DMF), 50ºC, 5 horas, cuantitativo; (ii) TsOH, MeCN/MeOH/agua (12:3:1), 90ºC, 6 horas, 88%(iii) TBDPSCl, DMAP, piridina, 120ºC, 12 horas, 93%

Ejemplo C: Síntesis de un bloque de construcción de glucopiranósido sustituido con 2,6-dinitrógeno

Condiciones: (i) (a) cloruro de tosilo, piridina, TA, 24 horas, 33%(b) NaN3, DMF, TA, 168 horas. Ejemplo D: Síntesis de un bloque de construcción de talopiranósido que contiene 2-nitrógeno

Condiciones: (i) TBDPSCI, imidazol, 1,2-DCE, reflujo; (ii) NaOMe/MeOH; (iii) (a) Tf2O, piridina, -20ºC, DCM, 1 hora,

(b) NaN3, DMF, 50ºC, 5 horas; (iv) TsOH, MeCN/MeOH/agua, (v) cloruro de benzoílo, DMAP, 1,2-DCE, -20ºC. Ejemplo E: Síntesis de dos bloques de construcción de altropiranósido que contienen 3-nitrógeno

Condiciones: (i) ciclohexanona dimetilacetal, TsOH, MeCN; (ii) p-metoxibenzaldehído dimetilacetal, TsOH, MeCN;

5 (iii) DIBAL, -78ºC, dietil éter; (iv) (a) Tf2O, piridina, -20ºC, DCM, 1 hora, (b) NaN3, DMF, 50ºC, 5 horas; (v) TsOH, MeCN/MeOH/agua, (vi) TBDPSCl, MAP, 1,2-DCE; (vii) (a) CAN, (b) BzCl, DMAP, 1,2-DCE, (c) TsOH, MeCN/MeOH/agua; (viii) TBDPSCI, DMAP, 1,2-DCE.

Ejemplo F: Síntesis de un bloque de construcción de glucopiranósido que contiene 2-nitrógeno 10

Condiciones: (i) -DMT, TsOH, MeCN; (ii) 1,2-DCE, BzCl, DMAP; (iii) TsOH, MeOH/MeCN; (iv) TBDPS-Cl, DMAP, 1,2-DCE.

Condiciones: (i) TBDPSCI, DMAP, piridina, 120ºC, 0,5 horas, 81%; (ii) a. (Bu)2SnO, MeOH; b. Cloruro de benzoílo, TA, 24 horas;

Ejemplo G: Síntesis de un bloque de construcción de alopiranósido que contiene 2-nitrógeno

10 Condiciones: (i) DCM/piridina, MsCl, DMAP, 0ºC; (ii) benzoato de sodio, dimetilsulfóxido (DMSO), 140ºC; (iii) TsOH, MeOH/MeCN/agua, (iv) TBDPS-Cl, imidazol, DCM, 1 hora, reflujo. La síntesis de bibliotecas de fase sólida de azúcares se ilustra en el esquema 1. 15 Las condiciones de reacción son tal como sigue:

(A) Síntesis del compuesto 2P: R1=R2=OMe;

i) 2-naftalenometanol, DMTST, DCM; ii) resina TCA-Wang, BF3·Et2O, DCM; iii) NaOMe, metanol; iv) a. KOtBu, DMF; 20 b. Mel, DMF; v) HF ’esponja de protones ’, AcOH, DMF, 65ºC; vi) a. KOtBu, DMF; b. Mel, DMF; vii) 1,4-ditio-DL-treitol, KOtBu, DMF; viii) HBTU, Fmoc--Ala-OH, DIPEA, DMF; ix) piperidina/DMF (1/4); x) TFA, Et3SiH, DCM

(B) Síntesis del compuesto 3P: R1=metil-2-naftilo, R2=OMe; 25 i) 2-naftalenometanol, DMTST, DCM; ii) resina TCA-Wang, BF3·Et2O, DCM; iii) NaOMe, metanol; iv) a. KOtBu, DMF;

b. 2-bromometil-naftaleno, DMF; v) HF.’ esponja de protones ’, AcOH, DMF, 65ºC; vi) a. KOtBu, DMF; b. Mel, DMF; vii) 1,4-ditio-DL-treitol, KOtBu, DMF; viii) HBTU, Fmoc--Ala-OH, DIPEA, DMF; ix) piperidina/DMF (1/4); x) TFA, Et3SiH, DCM

30 (C) Síntesis del compuesto 4P: R1=metil-2-naftilo, R2=4-clorobencilo

i) 2-naftalenometanol, DMTST, DCM; ii) resina TCA-Wang, BF3·Et2O, DCM; iii) NaOMe, metanol; iv) a. KOtBu, DMF;

b. 2-bromometil-naftaleno, DMF; v) HF ’esponja de protones’, AcOH, DMF, 65 ºC; vi) a. KOtBu, DMF; bromuro de clorobencilo, DMF; vii) 1,4-ditio-DL-treitol, KOtBu, DMF; viii) HBTU, Fmoc--Ala-OH, DIPEA, DMF; ix) piperidina/DMF (1/4); x) TFA, Et3SiH, DCM

Esquema 1: Síntesis de bibliotecas de fase sólida de azúcares

Esquema 2: Síntesis de bloque de construcción de alosa 2,6; un ejemplo de síntesis de compuestos de tipo 2P, 3P y 4P.

5 La síntesis del bloque de construcción de alosa 2,6N se ilustra en el esquema 2. Las condiciones de reacción son tal como sigue:

i) p-metoxibenzaldehído dimetilacetal, ácido canforsulfónico, N,N-dimetilformamida (DMF); ii) Tf2O, piridina, diclorometano (DCM); iii) benzoato de tetrabutilamonio, DMF, 55ºC; iv) BH3·THF, Bu2BOTf, DCM; v) cloruro de

10 metanosulfonilo, piridina, DCM; vi) azida sódica, DMF, 85ºC; vii) metanolato de sodio (NaOMe), metanol; viii) nbutanol, etilendiamina, reflujo; ix) reactivo de DTPM, metanol; x) anhídrido benzoico, piridina; xi) ácido trifluoroacético, trietilsilano, DCM

Diseño de bibliotecas: 15 El diseño de las bibliotecas se basa en la presentación de una carga positiva y un número variable de sustituyentes

aromáticos en diferentes disposiciones espaciales en un armazón de monosacáridos. Partiendo de una carga positiva y un grupo aromático expuestos en el armazón núcleo, se elaboraron compuestos activos a partir de esta primera biblioteca mediante variación adicional y adición de más sustituyentes aromáticos para identificar rápidamente moléculas altamente activas.

La primera biblioteca de compuestos comprende dos grupos farmacóforos, conocida como biblioteca 2P, en particular, uno que contiene una carga positiva y un grupo aromático. Se diseñó la biblioteca de manera que cada molécula presenta dos grupos farmacóforos en presentación u orientación relativa diferente (por ejemplo, distancia, ángulo relativo, es decir, la posición relativa en el espacio es diferente).

Se identificaron compuestos activos a partir de esta biblioteca y se usó la información de SAR de esta biblioteca para diseñar la posterior biblioteca de compuestos en la que cada compuesto puede incluir tres grupos farmacóforos, conocida como biblioteca 3P. Las bibliotecas posteriores con cuatro grupos farmacóforos se denominan biblioteca 4P, etc.

Se identificaron miembros de actividad significativamente mejorada de la segunda biblioteca y se seleccionaron para el desarrollo de fármacos adicional.

El método de la invención incluye bibliotecas reales y virtuales.

Por tanto, las moléculas según la fórmula 1 son muy adecuadas para generar bibliotecas de exploración iterativas, partiendo de un número seleccionado de farmacóforos (por ejemplo, dos) en la primera biblioteca y diseñando bibliotecas posteriores con farmacóforos adicionales basándose en la información de SAR de la primera biblioteca, ayudando de ese modo en la delineación de farmacóforos.

Se sintetizaron las bibliotecas de compuestos 2P y 3P según los bloques de construcción descritos en los ejemplos A-G.

Se diseñó la biblioteca 2P (tabla 1) para explorar la diversidad molecular para moléculas 2P, que comprenden un grupo aromático y una carga positiva.

Se examinó la biblioteca 2P para determinar la actividad biológica y se proporcionan los resultados en la tabla 1.

De manera similar, se diseñó la biblioteca 3P para explorar la diversidad molecular para moléculas 3P. El diseño de la biblioteca 3P resultó de SAR obtenida de la biblioteca 2P en la tabla 1.

Se examinó la biblioteca 3P para determinar la actividad biológica y se proporcionan los resultados en la tabla 2.

Un análisis visual de los resultados según la tabla 1 (biblioteca 2P) y la tabla 2 (biblioteca 3P) indica que:

1.: La sustitución con 1,2-alosa según la fórmula 3 (y armazón C/D) presenta la disposición más activa de moléculas en la biblioteca en la que Z es oxígeno, R1 es naftilo y R2 es propilamina o etilamina. Estos compuestos representan las disposiciones más activas de los compuestos en el intervalo de nM bajo, y son candidatos adecuados para el desarrollo de fármacos adicional.

2.: R1 como naftilo es más activo que el correspondiente sustituyente de p-clorobencilo.

3.: 1,2-alosa según la fórmula 3 (armazón C/D) es más activa que la correspondiente conformación de 1,2-glucosa (armazón A/B).

4.: La sustitución 1,2 según la fórmula 3 (armazón C/D) es más activa que la correspondiente sustitución 2,6 según la fórmula 4 (armazón G)

5.: R2 como propilamina y etilamina son más activas que metilamina en la que Z, R1 y R2 son tal como se describieron anteriormente.

6.: La sustitución con 2,3-alosa según la fórmula 3 (armazón C/D) presenta las disposiciones más activas en las que R2 es etilamina, y R3 es p-clorobencilo en comparación con el correspondiente R2 como propilamina y etilamina en el que R3 es sustituyente de p-clorobencilo, y también en el que R2 es metilamina, etilamina o propilamina y R3 es naftilo.

7.: La sustitución con 2,3-glucosa según la fórmula 3 (armazón A/B) presenta las disposiciones más activas en las que R2 es propilamina y R3 es naftilo en comparación con el correspondiente R2 como metilamina o etilamina, y también en el que R2 es metilamina, etilamina o propilamina y R3 es p-clorobencilo.

8.: Las sustituciones con 2,4 y 3,4 según la fórmula 3 (armazón G) presentan las disposiciones menos activas.

Parte B: Ensayos biológicos

Ejemplo H. Examen in vitro de compuestos frente a los subtipos SSTR-1 a SSTR-5 de somatostatina

5 Método general

Se diluyeron preparaciones de membrana con receptor que contenían el receptor clonado deseado (por ejemplo receptor de somatostatina humano clonado del subtipo 5, SSTR5) y ligando radiomarcado a la concentración requerida para las pruebas y según los parámetros específicos asociados con la combinación de receptor-ligando seleccionada, incluyendo Bmáx. de receptor, Kd de ligando y cualquier otro parámetro necesario para optimizar las condiciones experimentales. Cuando se sometió a prueba para determinar la actividad de competición con respecto al ligando de referencia, se mezcló el “compuesto” con suspensión de membrana y el ligando de referencia radiomarcado (con o sin un exceso de ligando no marcado con respecto al receptor para la determinación de la unión no específica) y se incubó a la temperatura requerida mediante procedimientos de funcionamiento

15 convencionales internos. Tras la incubación, se detuvo la reacción de unión mediante la adición de tampón de lavado enfriado con hielo y se filtró en filtros apropiados, que entonces se cuentan. Se realizaron análisis de datos y ajuste de la curva con XLfit (IDBS).

Preparación de los compuestos

milli-Q.

Concentración final en Concentración final en el ensayo de SST4 el ensayo de SST5

A. 240 l de 1,25 mM 0,25 mM 0,125 mM

B. 48 l de A + 192 l de mQ 0,05 mM 0,025 mM

C. 24 l de B + 192 l de mQ 0,01 mM 0,005 mM etc.

Se realizaron ensayos por triplicado a cada concentración dentro de la serie de dilución 1:5: 250 M, 50 M, 10 2 mM, 0,4 M, 0,08 M, 0,016 M, 0,0032 M, etc. (para el ensayo de SST4) y 125 M, 10

M, 1 M, 0,5 M, etc. (para el ensayo de SST5).

Ensayo de placa de filtro para el receptor de SST5

35 Se transfectó el receptor de somatostatina SST5 humano en células HEK-293 EBNA. Se suspendieron membranas en tampón de ensayo (Tris-HCl 50 mM, EGTA 1 mM, MgCl2 5 mM, sacarosa al 10%, pH 7,5). La concentración del receptor (Bmáx.) era 0,57 pmol/mg de proteína, Kd para la unión de [125l]SST-14 0,31 nM, volumen de 0,4 ml por vial (400 microensayos/vial) y concentración de proteína de 1,03 mg/ml.

Tras descongelar rápidamente la preparación de receptor congelada, se diluyeron los receptores con tampón de unión, se homogeneizaron y se mantuvieron en hielo.

1. Usar placas de filtro de fibra de vidrio Multiscreen (Millipore, n.º de cat. MAFCNOB10) recubiertas previamente

con PEI al 0,5% durante 2 h a 4ºC. Antes de usar añadir 200 l/pocillo de tampón de ensayo y filtrar usando el 45 sistema de separación Multiscreen.

: 2. Incubar 5,5 g de membranas (40 l de una dilución 1:40), tampón y [125I]SST-14 (4 nM, -80000 cpm, 2000 Ci/mmol) en un volumen total de 200 l durante 60 min. a 25ºC. Calcular CI50 para SST-14 (una versión truncada del ligando natural SST-28) (Auspep, n.º de cat. 2076) y SST-28 (Auspep, n.º de cat. 1638). Preparar diluciones en serie (1:5) de compuestos, tal como se describió anteriormente y en lugar de añadir SST-14 en el pocillo, añadir 20 l de compuestos (tabla 3).

3.: Filtrar usando el sistema de separación Multiscreen con 5 x 0,2 ml de tampón de ensayo enfriado con hielo.

55 4. Retirar el tubo de drenaje de plástico y secar la placa en horno durante 1 h a 40ºC.

5.: Sellar con cinta el fondo de la placa.

: 6. Añadir 50 l/pocillo de reactivo de centelleo (Supermix, Wallac, n.º de cat. 1200-439).

7.: Sellar y contar en el instrumento BJET, programa 2.

Tabla 3

Volumen (ul)

Membranas (5,5 g/pocillo)

Marcador radiomarcado ( 80000 cpm, 4 nM)

Ligando no marcado mQH2O

Compuestos

Tampón de ensayo

UT: unión total UNE: Unión no específica

UT: UNE Pruebas de compuestos

40 40
40 40
40 40

-20: 20 - --20

100 100 100

200 200 200

10 Parte C: Métodos experimentales generales

Ejemplo 1: Método de HPLC para compuestos en las tablas 1 y 2

Se realizó la separación por HPLC de los compuestos en las tablas 1 y 2 con el método A o método B tal como se

15 muestra a continuación.

Método A

Columna: Agilent SB Zorbax C18 4,6x50 mm (5

Fase móvil de CL:

5% de MeCN acuoso/1 min. 25 100% de MeCN/7 -12 min.

Método B

Columna: Agilent SB Zorbax C18 4,6x50 mm (5

Fase móvil de CL:

5% de MeCN ac./1 min. 35 30% de MeCN ac./3 min.

40% de MeCN ac./12 min.

100% de MeCN/13-15 min.

m, 80 Å)

Clave para los bloques de construcción para las tablas 1 y 2 Tabla 1: * % de unión de radioligando de SST5 desplazada a la conc. ( M) para la biblioteca 2P de compuestos

45 Tabla 2: * % de unión de radioligando de SST5 desplazada a la conc. ( M) para la biblioteca 3P de compuestos; R4 = X30; los compuestos 60-63, 119 y 156-159 son compuestos comparativos de la biblioteca 2P “++”:% de unión de radioligando de SST5 desplazada a la conc. ( M) >60%

50 “+’’: % de unión de radioligando de SST5 desplazada a la conc. ( M) 60>+>40% “-”: % de unión de radioligando de SST5 desplazada a la conc ( M) -<40% En blanco: no determinado

55 TR: tiempo de retención/minutos M+H: masa iónica +1 Tabla 1: Actividad biológica de la biblioteca 2P de ejemplo

ID de objeto: Armazón R1 R2 R3 R4 R5 Conc. 500 Conc. 250 Conc. 50* TR M+H

1: E - X15 X2 X30 X24 3,24 449,58

2: A X7 X20 X24 X30 X24 3,4 383,46

3: A X7 X15 X24 X30 X24 3,42 397,48

4: E - X20 X2 X30 X24 3,49 435,55

5: A X2 X20 X24 X30 X24 ++ + - 3,88 419,21

6: A X2 X15 X24 X30 X24 ++ + - 3,93 433,23

7: E - X19 X24 X30 X3 - - - 3,42 405,12

8: E - X19 X24 X30 X2 ++ + - 3,81 421,17

9: E - X19 X3 X30 X24 - - - 3,62 405,12

10: E - X19 X2 X30 X24 - - - 4,03 421,17

11: A X3 X19 X24 X30 X24 - - - 3,39 389,14

12: A X2 X19 X24 X30 X24 - - - 4,08 405,19

13: B X3 X19 X24 X30 X24 - - - 3,4 389,14

14: B X2 XX19 X24 X30 X24 - - - 3,68 405,19

15: E - X20 X24 X30 X3 - - - 3,25 419,13

16: E - X20 X24 X30 X2 + - - 3,59 435,19

17: E - X20 X3 X30 X24 - - - 3,68 419,13

18: E - X20 X2 X30 X24 - - - 4,06 435,19

19: A X3 X20 X24 X30 X24 ++ - - 3,56 403,16

20: B X3 X20 X24 X30 X24 + - - 3,37 403,16

21: B X2 X20 X24 X30 X24 ++ + - 3,7 419,21

22: E - X15 X24 X30 X3 - - - 3,22 433,15

23: E - X15 X24 X30 X2 + - - 3,59 449,2

24: E - X15 X3 X30 X24 - - - 3,7 433,15

25: E - X15 X2 X30 X24 + - - 4,06 449,2

26: E X3 X15 X24 X30 X24 ++ - - 3,57 417,17

27: B X3 X15 X24 X30 X24 - - - 3,4 417,17

28: B X2 X15 X24 X30 X24 ++ - - 3,68 433,23

29: F - X19 X24 X30 X3 - - - 3,55 405,12

30: F - X19 X24 X30 X2 + - - 3,84 421,17

31: F - X19 X3 X30 X24 + - - 3,75 405,12

32: F - X19 X2 X30 X24 - - - 4,05 421,17

33: C X3 X19 X24 X30 X24 - - - 3,38 389,14

34: C X2 X19 X24 X30 X24 - - - 3,72 405,19

35: D X3 X19 X24 X30 X24 - - - 3,41 389,14

36: D X2 X19 X24 X30 X24 + - - 3,77 405,19

37: F - X20 X3 X30 X24 - - - 3,76 419,13

38: C X3 x20 X24 X30 X24 ++ + - 3,33 403,16

39: D X3 X20 X24 X30 X24 ++ - - 3,44 403,16

40: D X2 X20 X24 X30 X24 ++ ++ - 3,8 419,21

41: F - X15 X24 X30 X3 - - - 3,51 433,15

42: F - X15 X24 X30 X2 + - - 3,81 449,2

43: F - X15 X3 X30 X24 - - - 3,66 433,15

44: D X3 X15 X24 X30 X24 ++ - - 3,51 417,17

45: D X2 X15 X24 X30 X24 ++ + - 3,86 433,23

46: G - X24 X3 X19 X30 - - - 3,31 386,14

47: G - X19 X2 X24 X30 - - - 3,27 402,2

48: G - X19 X24 X8 X30 - - - 2,48 352,18

49: G - X2 X24 X19 X30 - - - 3,64 388,18

50: G - X8 X24 X19 X30 - - - 2,61 352,18

51: G - X24 X3 X20 X30 - - - 3,08 400,16

52: G - X2 X24 X20 X30 - - - 3,46 402,2

53: G - X8 X24 X20 X30 - - - 2,73 366,2

54: G - X24 X3 X15 X30 - - - 3,27 414,11

55: G - X2 X24 X15 X30 - - - 3,79 416,21

56: G - X8 X24 X15 X30 - - - 2,78 380,21

57: F - X20 X2 X30 X24 - - - 4,01 435,19

58: F - X15 X2 X30 X24 - - - 4,08 449,2

59: C X2 X20 X24 X30 X24 ++ ++ + 3,74 419,21

Tabla 2: Actividad biológica de la biblioteca 3P de ejemplo

ID deobjeto: Armazón R1 R2 R3 R5 Conc.500 Conc.250 Conc.50 Conc.10 conc.1,0 Conc.0,5 Conc.0,25 Conc.0,10 Conc.0,001* TR M+H

60: A X2 X20 X24 X24 ++ + - 3,88 419,21

61: B X2 X20 X24 X24 ++ + - 3,7 419,21

62: D X2 X20 X24 X24 ++ ++ - 3,8 419,21

63: C X2 X20 X24 X24 ++ ++ + 3,72 419,21

64: CyD X2 X20 X8 X24 ++ ++ ++ + - 4,98

65: CyD X2 X20 X8 X24 ++ 4,98

66: CyD X2 X20 X3 X24 ++ ++ ++ - - 5,25

67: CyD X2 x20 X3 X24 ++ 5,25

68: CyD X2 X20 X1 X24 ++ ++ ++ - - - 5,49

69: CyD X2 X20 X2 X24 ++ ++ ++ ++ + 5,23

70: CyD X2 X20 X3 X2 + - 5,85

71: CyD X2 X20 X3 X8 ++ - 5,61

72: CyD X2 X20 X3 X3 ++ - 5,51

73: CyD X2 X20 X2 X2 + - 5,95

74: CyD X2 X20 X2 X8 ++ - 5,45

75: CyD X2 X20 X2 X3 ++ - 6,46

76: CyD X2 X20 X8 X2 ++ - 5,7

77: CyD X2 X20 X8 X8 ++ - 5,01

78: CyD X2 X20 X8 X3 ++ + 5,37

79: B X2 X20 X2 X2 ++ - 10,31

80: A X2 X20 X2 X2 ++ - 10,88

81: B X2 X20 X2 X8 ++ - 8,02

82: A X2 X20 X2 X8 ++ + 8,68

83: B X2 X20 X2 X3 ++ - 9,39

84: A X2 X20 X2 X3 ++ - 10,24

85: D X2 X20 X2 X24 ++ ++ 50,92

86: C X2 X20 X2 X24 ++ ++ 54,37

87: AoB X2 X20 X8 X24 - - 3,78 495,59

88: AoB X2 X20 X8 X24 - - 3,86 495,59

89: AoB X2 X20 X3 X24 - - 3,95 530,03

90: AoB X2 X20 X3 X24 ++ + 3,97 530,03

91: AoB X2 X20 X1 X24 - - 4,5 571,69

92: AoB X2 X2 X2 X24 + - 4,33 545,65

93: Ay B X2 X20 X24 X8 + - 4,13 495,59

94: AoB X2 X20 X24 X3 - - 4,33 530,03

95: AoB X2 X20 X24 X3 - - 4,33 530,03

96: AoB X2 X20 X24 X1 - - 4,77 571,69

97: Ay B X2 X20 X24 X2 + - 4,52 545,65

98: A X2 X20 X2 ’ X24 ++ + 5,45 545,65

99: A X2 X31 X2 X24 + - 5,07 559,67

100: A X2 X32 X2 X24 ++ + 5,05 559,67

101: A X2 X33 X2 X24 + - 4,79 557,66

102: A X2 X34 X2 X24 - - 6,24 613,77

103: A X2 X35 X2 X24 ++ + 5,85 585,71

104: A X2 X36 X2 X24 - - 6,33 599,74

105: A X2 X37 X2 X24 - - 6,72 599,74

106: A X2 X45 X2 X24 - - 4,96 573,7

107: A X2 X20 X46 X24 ++ ++ 4,22 530,03

108: A X2 X20 X47 X24 ++ ++ 4,87 564,48

109: A X2 X20 X48 X24 ++ - 4,98 530,03

110: A X2 X20 X49 X24 ++ ++ 4,43 546,64

111: A X2 X20 X50 X24 - - 5,44 552,66

112: A X2 X20 X51 X24 ++ + 3,78 546,64

113: A X2 X20 X52 X24 ++ ++ 5,71 564,48

115: A X2 X20 X9 X24 ++ + 5,89 545,65

115: A X2 X20 X53 X24 ++ + 5,8 564,48

116: A X2 X20 X54 X24 ++ + 4,43 546,64

117: A X2 X20 X55 X24 ++ ++ 5,71 564,48

118: A X2 X20 X56 X24 ++ ++ 6,9 587,68

119: A X2 X15 X24 X24 + + + -

120: Ay B X2 X15 X8 X24 ++ + 4,29/4,57

121: Ay B X2 X15 X24 X1 + + 5,4

122: Ay B X2 X15 X24 X2 ++ ++ 5,18

123: Ay B X2 X15 X24 X8 - - 4,78

124: Ay B X2 X15 X24 X3 + - 5,07

125: Ay B X2 X15 X24 X4 + - 4,28

126: CyD X2 X15 X8 X24 ++ + + - - 4,97

127: CyD X2 X15 X3 X24 ++ ++ ++ - - 5,17

128: CyD X2 X15 X1 X24 ++ + ++ - - - 5,45 585,71

129: CyD X2 X15 X2 X24 ++ ++ - + - 5,18 559,67

130: Ay B X2 X15 X4 X24 ++

131: Ay B X2 X15 X1 X24 ++

132: Ay B X2 X15 X2 X24 ++

133: Ay B X2 X15 X3 X24 ++

134: A X2 X15 X3 X24 ++ ++ ++ ++ + 4,78

135: A X2 X15 X3 X2 ++ - 9,87

136: A X2 X15 X3 X8 ++ - 7,82

137: A X2 X15 X3 X3 ++ - 9,32

138: A X2 X38 X2 X24 - - 3,67 574,69

139: A X2 X39 X2 X24 + - 5,07 573,7

140: A X2 X40 X2 X24 ++ ++ 4,96 573,7

141: A X2 X41 X2 X24 - - 5,16 587,73

142: A X2 X53 X2 X24 ++ + 5,69/7,43 599,74

143: A X2 X42 X2 X24 - - 5,98 613,77

144: A X2 X15 X46 X24 ++ + 4,34 544,06

145: A X2 X15 X47 X24 ++ + 5,07 578,5

146: A X2 X15 X48 X24 ++ - 5,05 544,06

147: A X2 X15 X49 X24 ++ + 4,5 560,66

148: A X2 X15 X50 X24 - - 5,34 566,69

149: A X2 X15 X51 X24 + - 3,95 560,66

150: A X2 X15 X52 X24 ++ ++ 5,78 578,5

151: A X2 X15 X9 X24 ++ + 5,78 559,67

152: A X2 X15 X53 X24 ++ + 5,97 578,5

153: A X2 X15 X54 X24 ++ ++ 4,32 560,66

154: A X2 X15 X55 X24 ++ ++ 5,88 578,5

155: A X2 X15 X56 X24 ++ ++ 7,25 601,71

156: A X3 X19 X24 X24 - - - 3,39 389,14

157: B X3 X19 X24 X24 - - -

158: C X3 X19 X24 X24 - - - 3,38 389,14

159: D X3 X19 X24 X24 - - -

160: CyD X3 X19 X8 X24 - - - - - 4,8

161: CyD X3 X19 X3 X24 ++ - - - - 5,14

162: CyD X3 X19 X1 X24 + - - - - - 5,45 542,04

163: CyD X3 X19 X2 X24 ++ - - - - 5,2

164: CyD X3 X43 X24 X2 + - 3,45

165: CyD X3 X44 X24 X2 ++ - 4

166: Ay B X3 X43 X24 X2 ++ - 3,59

167: Ay B X3 X44 X24 X2 ++ ++ 3,97

168: A o B X3 X19 X8 X24 - -

169: A o B X3 X19 X8 X24 - -

170: A o B X3 X19 X3 X24 - -

171: A o B X3 X19 X3 X24 - -

172: A o B X3 X19 X1 X24 - -

173: AoB X3 X19 X1 X24 - -

174: AoB X3 X19 X2 X24 - -

175: AoB X3 X19 X2 X24 - -

176: Ay B X3 X19 X24 X8 - - 4,88/5,61 465,95

177: Ay B X3 X19 X24 X3 - - 6,06/6,52 500,39

178: Ay B X3 X19 X24 X1 - - 9,09 542,04

179: Ay B X3 X19 X24 X2 - - 7,43 516,01

Figura 1: Ramas laterales para las tablas 1 y 2

Durante toda la memoria descriptiva y las reivindicaciones (si están presentes), a menos que el contexto requiera lo contrario, el término “comprenden”, o variaciones tales como “comprende” o “que comprende”, se entenderá que se 5 aplican a la inclusión del número entero o grupo de números enteros establecidos pero sin la exclusión de ningún otro número entero o grupo de números enteros.

Durante toda la memoria descriptiva y reivindicaciones (si están presentes), a menos que el contexto requiera lo contrario, el término “sustancialmente” o “aproximadamente” se entenderá que no se limita al valor para el intervalo 10 calificado por los términos.

Debe apreciarse que pueden realizarse diversos otros cambios y modificaciones a cualquier realización descrita.

Bibliografía

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[2] Csaba, Z. y Dournaud, P. (2001) Cellular biology of somatostatin receptors. Neuropeptides 35, 1-23

[3] T Reisine, T. (1995) Somatostatin receptors; Am. J. Pysiol. (Gastrointest. Liver Physiol. 32) 269, G813-G820 10

[4] Bauer, W. et al. (1982) SMS201-995: A very potent and selective octapeptide analogue of somatostatin with prolonged action. Life Sci. 31, 1133-1140

[5] Lamberts, S.W.J. et al. (1996) Drug therapy: Octreotide. N. Eng. J. Med. 334, 246-254 15

[6] Robinson, C. y Castaner, J. (1994) Lanreotide acetate. Drugs Future 19, 992-999

[7] Reisine, T. y Bell. G.I. (1995) Molecular biology of somatostatin receptors. Endocr. Rev. 16, 427-442 [8] Le et al. (Drug Discovery Today, 2003, 8, págs. 701-709

Claims

REIVINDICACIONES

1. Método de identificación de compuestos biológicamente activos que comprende:

(a) diseñar una primera biblioteca de compuestos de fórmula 1 para explorar la diversidad molecular teniendo cada

5 compuesto de la biblioteca al menos dos grupos farmacóforos R1 a R5 tal como se define a continuación y teniendo cada compuesto de la biblioteca el mismo número de grupos farmacóforos;

(b)

someter a ensayo la primera biblioteca de compuestos en uno o más ensayo(s) biológico(s);

(c)

identificar combinaciones de grupos farmacóforos asociadas con miembros activos de dicha primera biblioteca; y

(d)

diseñar una segunda biblioteca conteniendo cada compuesto de la segunda biblioteca una combinación de grupos farmacóforos activos identificada en la etapa (c) y uno o más grupos farmacóforos adicionales con respecto a la primera biblioteca;

15 de manera que el/cada componente de la primera y segunda biblioteca es un compuesto de fórmula 1:

Fórmula I

en la que el anillo puede ser de cualquier configuración;

Z es azufre, oxígeno, CH2, C(O), C(O)NRA, NH, NRA o hidrógeno, en el caso en el que Z es hidrógeno entonces R1 no está presente, RA se selecciona del conjunto definido por R1 a R5,

o en la que Z y R1 forman juntos un heterociclo,

X es oxígeno o nitrógeno, siempre que al menos un X de la fórmula I sea nitrógeno, X también puede combinarse independientemente con uno de R1 a R5 para formar un azida,

R1 a R5 se seleccionan independientemente de los siguientes grupos no farmacóforos H, metilo y acetilo, y se seleccionan independientemente grupos farmacóforos R1 a R5 del grupo que incluye pero no se limita a acilo o alquilo C2 a C20 excluyendo acetilo; heteroalquilo, alquinilo, alquenilo C2 a C20; heteroarilalquilo, arilalquilo, heteroarilo o arilo C5 a C20, que está sustituido opcionalmente, y puede ser ramificado o lineal, o en la que X y el

35 correspondiente resto R, R2 a R5 respectivamente, se combinan para formar un heterociclo.
2.

Método según la reivindicación 1, en el que en la primera biblioteca, tres de los sustituyentes R1-R5 son grupos no farmacóforos y se seleccionan de hidrógeno o metilo o acetilo.
3.

Método según la reivindicación 1, en el que en la primera biblioteca, dos de los sustituyentes R1-R5 son grupos no farmacóforos y se seleccionan de hidrógeno o metilo o acetilo.
4.

Método según la reivindicación 1, en el que Z es azufre u oxígeno.

45 5. Método según una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en el que al menos uno de los grupos farmacóforos se selecciona de arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo o acilo.
6.

Biblioteca de compuestos seleccionados de compuestos de fórmula 1 cuando se usan según la reivindicación 2.
7.

Biblioteca de compuestos seleccionados de compuestos de fórmula 1 cuando se usan según la reivindicación 3.
8. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que el/cada componente de la biblioteca es un 55 compuesto seleccionado de la fórmula 2 o la fórmula 3 o la fórmula 4.

Fórmula 2 Fórmula 3 Fórmula 4
9.

Método según la reivindicación 8, en el que el/cada compuesto es de la configuración gluco o galacto o alo.
10.

Método según la reivindicación 9, en el que el/cada compuesto es de la configuración gluco.
11.

Método según la reivindicación 9, en el que el/cada compuesto es de la configuración alo.
12.

Método según la reivindicación 9, en el que el/cada compuesto es de la configuración galacto.
13.

Método según la reivindicación 1, en el que el diseño de la biblioteca comprende modelado molecular para evaluar la diversidad molecular.
14.

Método según la reivindicación 1, en el que los sustituyentes opcionales R1 a R5 se seleccionan de OH, NO, NO2, NH2, N3, halógeno, CF3, CHF2, CH2F, nitrilo, alcoxilo, ariloxilo, amidina, guanidinios, ácido carboxílico, éster de ácido carboxílico, amida de ácido carboxílico, arilo, cicloalquilo, heteroalquilo, heteroarilo, aminoalquilo, aminodialquilo, aminotrialquilo, aminoacilo, carbonilo, imina sustituida o no sustituida, sulfato, sulfonamida, fosfato, fosforamida, hidrazida, hidroxamato, ácido hidroxámico, heteroariloxilo, aminoarilo, aminoheteroarilo, tioalquilo, tioarilo o tioheteroarilo, que pueden estar opcionalmente sustituidos de manera adicional.
15.

Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que se sintetizan los compuestos.
16.

Método según la reivindicación 1, en el que los ensayos biológicos implican una clase de ligandos peptídicos de GPCR.
17.

Método según la reivindicación 1, que comprende un compuesto según la fórmula 1 en la que al menos un X es nitrógeno, y dicho X se combina con el correspondiente R2-R5 para formar un heterociclo.
18.

Método según la reivindicación 17, en el que X y R2 se combinan para formar un heterociclo.
19.

Método según una cualquiera de las reivindicaciones 17 y 18, en el que el heterociclo es heteroarilo.
20.

Método según una cualquiera de las reivindicaciones 17-19, en el que el heteroarilo se selecciona de triazoles, bencimidazoles, bencimidazolona, bencimidazoltiona, imidazol, hidantoína, tiohidantoína y purina.