ES2388684T3 - Adyuvantes de vacunas - Google Patents
Adyuvantes de vacunas Download PDFInfo
- Publication number
- ES2388684T3 ES2388684T3 ES06744545T ES06744545T ES2388684T3 ES 2388684 T3 ES2388684 T3 ES 2388684T3 ES 06744545 T ES06744545 T ES 06744545T ES 06744545 T ES06744545 T ES 06744545T ES 2388684 T3 ES2388684 T3 ES 2388684T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- mycobacterium
- antigen
- vaccine
- inactive
- adjuvant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 title description 2
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 title description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 97
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 97
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 97
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims abstract description 76
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 68
- 241001494992 Mycobacterium indicus pranii Species 0.000 claims abstract description 41
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 12
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 7
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 claims abstract description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 15
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 14
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 12
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 7
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 6
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 6
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 5
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000013566 allergen Substances 0.000 claims description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 3
- 244000045947 parasite Species 0.000 claims description 3
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 claims description 2
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 claims description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims 1
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 claims 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 claims 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 50
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 42
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 39
- 229960003127 rabies vaccine Drugs 0.000 description 25
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 24
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 21
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 21
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 18
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 18
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 17
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 16
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 16
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 16
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 13
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 13
- 230000000240 adjuvant effect Effects 0.000 description 13
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 description 12
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 11
- SPSXSWRZQFPVTJ-ZQQKUFEYSA-N hepatitis b vaccine Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1N=CN=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C1=CC=CC=C1 SPSXSWRZQFPVTJ-ZQQKUFEYSA-N 0.000 description 11
- 229940124736 hepatitis-B vaccine Drugs 0.000 description 11
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 11
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 10
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 10
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 9
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 9
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 description 8
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 7
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 7
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 7
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 6
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 6
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 6
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 5
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 5
- 241000293871 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhi Species 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 5
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000006997 middlebrook medium Substances 0.000 description 5
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 5
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 5
- 241000371980 Influenza B virus (B/Shanghai/361/2002) Species 0.000 description 4
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 description 4
- 241000711798 Rabies lyssavirus Species 0.000 description 4
- 101000874347 Streptococcus agalactiae IgA FC receptor Proteins 0.000 description 4
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 4
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 4
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 4
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 208000037386 Typhoid Diseases 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 3
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 3
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 3
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 3
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 3
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 3
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 201000008297 typhoid fever Diseases 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- 241000304886 Bacilli Species 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N Lactic Acid Natural products CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000012645 endogenous antigen Substances 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 2
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 2
- 229940021993 prophylactic vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 210000002955 secretory cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 229940021747 therapeutic vaccine Drugs 0.000 description 2
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 108010023063 Bacto-peptone Proteins 0.000 description 1
- 241001436672 Bhatia Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N Cyanamide Chemical compound NC#N XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 108010041986 DNA Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 229940021995 DNA vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229940124884 Engerix-B Drugs 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 229940124914 Havrix Drugs 0.000 description 1
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 1
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108010028921 Lipopeptides Proteins 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000005647 Mumps Diseases 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 1
- 241001467552 Mycobacterium bovis BCG Species 0.000 description 1
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 description 1
- 108010059712 Pronase Proteins 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hy Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)CC(O)[C@]1(CCC(CC14)(C)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N 0.000 description 1
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 1
- 229960005327 acemannan Drugs 0.000 description 1
- -1 acemannan polysaccharide Chemical class 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229940021704 adenovirus vaccine Drugs 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 239000013011 aqueous formulation Substances 0.000 description 1
- 150000001491 aromatic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 241001506930 atypical mycobacterium Species 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960000190 bacillus calmette–guérin vaccine Drugs 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 208000027499 body ache Diseases 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 229940028617 conventional vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000005251 gamma ray Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 208000037824 growth disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 208000033353 latent tuberculosis infection Diseases 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000005541 medical transmission Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000013586 microbial product Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 1
- 208000010805 mumps infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 125000001446 muramyl group Chemical group N[C@@H](C=O)[C@@H](O[C@@H](C(=O)*)C)[C@H](O)[C@H](O)CO 0.000 description 1
- 208000013465 muscle pain Diseases 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000002956 necrotizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 231100000057 systemic toxicity Toxicity 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical group [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001005 tuberculin Drugs 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/04—Mycobacterium, e.g. Mycobacterium tuberculosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55588—Adjuvants of undefined constitution
- A61K2039/55594—Adjuvants of undefined constitution from bacteria
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Mycobacterium w inactivo para uso como adyuvante en el tratamiento profiláctico o terapéutico mediante vacunación, en donde dicho tratamiento comprende la administración a un mamífero de una vacuna que comprende Mycobacterium w mezclado, formulado, conjugado, cebado, fusionado y/o ligado con un antígeno, en donde dicho Mycobacterium w actúa como un adyuvante que potencia la inmunogenicidad de dicho antígeno.
Description
Adyuvantes de vacunas.
Campo de la invención
La presente invención concierne a nuevos adyuvantes y a composiciones que los contienen, al menos con un antígeno, y a métodos para elaborar y utilizar los mismos.
En caso de infección, una respuesta inmune específica tiene que ver con el reconocimiento y la eliminación final del antígeno/inmunógeno en una forma altamente discriminatoria. Las respuestas inmunes específicas están mediadas a través de dos tipos de mecanismos efectores. Una está mediada por anticuerpos producidos por linfocitos (respuesta humoral) y la otra está mediada por los mismos linfocitos sensibilizados especialmente (inmunidad mediada por células). Las respuestas humorales son las principales responsables de proporcionar profilaxis contra una enfermedad (vacuna profiláctica), mientras que la inmunidad mediada por células es la principal responsable de intervención en casos de enfermedad (vacuna terapéutica). Las vacunas profilácticas se administran anticipándose a una enfermedad. Las vacunas terapéuticas se administran en presencia de una enfermedad activa. La vacuna incluye antígeno(s) en un vehículo farmacéuticamente aceptable. Un antígeno es una sustancia que estimula una respuesta inmune.
En los libros de texto, monografías y artículos se describen una diversidad de antígenos. Estos incluyen alérgenos inmunógenos, una diversidad de materiales que incluyen o se obtienen a partir de agentes patógenos y no patógenos, tales como virus, bacterias, hongos, parásitos, material obtenido a partir de tumores o células. Las células, organismos tales como virus y bacterias, también se utilizan en forma intacta, p. ej., Polio, BCG, etc., una composición química de antígeno es muy variable e incluye péptidos de diversos tipos (tales como péptidos normales, polipéptidos, lipopéptidos, etc.), polisacáridos, conjugados de polisacáridos, lípidos, glicolípidos, hidratos de carbono, proteínas, ácidos nucleicos o el antígeno puede estar codificado por ácidos nucleicos.
Se clasifican en una variedad de formas. Algunas de las mismas se describen a continuación.
Inmunógeno - Cualquier sustancia que provoca la respuesta inmune cuando se introduce en el organismo. Un inmunógeno es siempre una macromolécula (proteína, polisacárido). Su capacidad para estimular la reacción inmune depende de su incidencia en el hospedador, el tamaño molecular, la composición química y la heterogeneidad (p. ej., similar a los aminoácidos en una proteína).
Alérgeno - Un alergeno es una sustancia que causa una reacción alérgica. Se puede ingerir, inhalar, inyectar o entrar en contacto con la piel.
Los antígenos se pueden clasificar según su origen.
Antígenos endógenos. Los antígenos exógenos son antígenos que han entrado en el organismo desde el exterior, por ejemplo, por inhalación, ingestión o inyección.
Los antígenos endógenos son antígenos que se han generado dentro de la célula, como resultado del metabolismo celular normal o debido a una infección vírica o bacteriana intracelular. Los fragmentos se presentan a continuación, en la superficie celular en moléculas del complejo de histocompatibilidad de clase I.
Antígenos tumorales. Los antígenos tumorales son aquellos antígenos que son presentados por las moléculas del MHC I en la superficie de células tumorales. Estos antígenos pueden estar presentados a veces únicamente por células tumorales y nunca por las células normales. En este caso, se denominan antígenos tumorales específicos y son típicamente el resultado de una mutación tumoral específica. Son más comunes los antígenos que son presentados por células tumorales y células normales, y se denominan antígenos asociados a tumores. Los linfocitos T citotóxicos que reconocen estos antígenos pueden ser capaces de destruir las células tumorales antes de que proliferen o sufran metástasis.
Los antígenos tumorales también pueden estar en la superficie del tumor en forma de, por ejemplo, un receptor mutado, en cuyo caso serán reconocidos por los linfocitos B.
Antígenos asociados a agentes patógenos:
Los antígenos se obtienen a partir de agentes patógenos tales como virus, bacterias, hongos, parásitos, por ejemplo, la rabia, la hepatitis B, las paperas, el sarampión, el tétanos, la difteria, etc. Los antígenos pueden ser producidos por tecnologías recombinantes, métodos de extracción, síntesis química, fermentación, etc. Pueden estar en forma de un compuesto o un organismo que es natural o que está modificado genéticamente, o como una fracción de un organismo, que tiene origen natural o está modificada genéticamente. Los ácidos nucleicos se han desarrollado cada vez más y se han identificado como antígenos en las vacunas de ADN. Los antígenos se pueden administrar en forma de antígenos aislados o en forma encapsulada, recubiertos, conjugados, mezclados, acoplados y/o formulados con adyuvante.
La mayor parte de las vacunas, cuando se aplican solas, no producen un estímulo inmune adecuado, que se dirige mediante el uso de un adyuvante, por ejemplo, alumbre en la vacuna de la Hepatitis B para proporcionar el efecto deseado:
- -
- incrementar directamente el número de células implicadas,
- -
- asegurar el procesamiento eficaz del antígeno, prolongando la permanencia del antígeno en un hospedador inmunizado,
- -
- o bien aumentando la síntesis de anticuerpos a través de las células que sintetizan anticuerpos.
Los adyuvantes son sustancias que potencian la respuesta inmune frente a los antígenos, pero no son necesariamente inmunógenos por sí mismos. Los adyuvantes pueden actuar reteniendo el antígeno localmente cerca del sitio de administración, para producir un efecto de depósito para facilitar una liberación lenta y sostenida del antígeno a las células del sistema inmune. Los adyuvantes también pueden atraer las células del sistema inmune a un depósito de antígenos y estimular tales células para provocar respuestas inmunes.
Una amplia gama de adyuvantes provoca potentes respuestas inmunes frente a antígenos. Estos incluyen saponinas que forman complejos con antígenos de proteínas de membrana (complejos inmunoestimulantes), polímeros plurónicos con aceite mineral, micobacterias inactivas en aceite mineral, adyuvante completo de Freund, productos bacterianos, tales como dipéptido de muramilo (MDP) y lipopolisacárido (LPS), así como lípido A y liposomas. Para inducir eficazmente la respuesta inmune humoral (RIH) y la inmunidad mediada por células (IMC), los antígenos se emulsionan preferiblemente en adyuvantes.
En la actualidad el único adyuvante, ampliamente utilizado en seres humanos ha sido el alumbre. Contiene sales de aluminio (alumbre) y ha sido útil para algunas vacunas, tales como la hepatitis B, difteria, tétanos, toxoide, etc., pero no es útil para otras, como la rabia, triple vírica, fiebre tifoidea, etc. No es capaz de inducir inmunidad mediada por células. El hidróxido de aluminio y el fosfato de aluminio se denominan colectivamente de forma generalizada alumbre. Los informes indican que el alumbre no logró mejorar la eficacia de las vacunas contra la tos ferina y la fiebre tifoidea y sólo proporcionaba un ligero efecto con vacunas de adenovirus. Los problemas con el alumbre incluyen la inducción de granulomas en el sitio de la inyección y una variación de lote a lote de las preparaciones de alumbre (documento de patente de EE.UU. 6.861.410).
Otros adyuvantes, tales como saponina, Quil A, y el adyuvante de agua-en-aceite, de Freund con bacilos de tuberculosis inactivos (Freund completo) o sin bacilos (Freund incompleto), han tenido un uso limitado en los seres humanos debido a sus efectos tóxicos y se han expresado preocupaciones en cuanto a efectos adversos en animales. Se ha descrito la mayoría de las formulaciones de adyuvantes, pero la mayoría no son aceptadas para las vacunas de rutina, debido principalmente a su toxicidad y sólo unas pocas han sido evaluadas en humanos.
El adyuvante completo de Freund (CFA) es un agente inmunoestimulante muy potente que se ha utilizado con éxito con muchos antígenos, con carácter experimental. El CFA incluye tres componentes: un aceite mineral, un agente emulsionante y Mycobacterium tuberculosis inactivada. Las soluciones acuosas de antígeno se mezclan con estos componentes para crear una emulsión de agua-en-aceite. Aunque es eficaz como adyuvante, el CFA causa efectos secundarios graves, por ejemplo, dolor, formación de abscesos, fiebre, etc., por lo tanto, el CFA no se utiliza en la preparación de vacunas comerciales.
El adyuvante incompleto de Freund (IFA) es similar al CFA, pero no incluye el componente bacteriano. Es una emulsión de aceite-en-agua. Sin embargo, las pruebas indican que tanto el aceite como el emulsionante usados en el IFA, pueden causar tumores en ratones.
Se ha encontrado que el dipéptido de muramilo (MDP) es la unidad mínima del complejo de la pared celular micobacteriana que genera la actividad adyuvante observada con CFA, por ejemplo, Ellouz y col., Biochem. Biophys. Res. Commun. (1974) 59:1317. Se han generado varios análogos sintéticos de MDP que muestran una amplia gama de potencia adyuvante y efectos secundarios (Chedid y col., Prog. Allergy (1978) 25:63). Análogos representativos del MDP incluyen derivados de treonilo de MDP (Byars y col., Vaccine (1987) 5:223), derivados de n-butilo de MDP (Chedid y col., Infect. Immun. 35:417), y un derivado lipófilo de un tripéptido de muramilo (Gisler y col., en Immunomodulations of Microbial Products and Related Synthetic Compounds (1981) Y. Yamamura Kotani S., compiladores,Excerpta Medica, Ámsterdam, pág.167). Un derivado lipófilo de MDP es N-acetilmuramil-L-alanil-D-isoglutaminil-Lalanina-2-(1',2'-dipalmitoil-sn-glicero-3-hidroxifosforiloxi)-etilamina (MTP-PE). El propio MTP-PE es capaz de actuar como un agente emulsionante para generar emulsiones estables de aceite-en-agua. El MTP-PE se ha utilizado en una emulsión de escualeno con Tween 80, denominada MTP-PE-LO (bajo nivel de aceite), para entregar el antígeno gD del virus del herpes simple, con resultados efectivos (Sánchez-Pescador y col., J. Immunol. (1988) 141:17201727), aunque con una estabilidad física deficiente.
Los polímeros sintéticos se evalúan como adyuvantes. Estos incluyen los homopolímeros y copolímeros de ácido láctico y glicólico, los cuales han sido utilizados para producir microesferas que encapsulan antígenos (véase Eldridge y col., Mol. Immunol. 28:287-294 (1993)).
Los copolímeros en bloque no iónicos son otros adyuvantes sintéticos que están siendo evaluados. Los efectos de los adyuvantes se investigan para copolímeros de bajo peso molecular en emulsiones a base de aceite y para copolímeros de peso molecular elevado en formulaciones acuosas (Todd y col., Vaccine 15:564-570 (1997)).
De hecho, el efecto adyuvante de la mayoría de los adyuvantes experimentales se ha asociado con los efectos adversos que provocan. Los adyuvantes que actúan como inmunoestimuladores, tales como dipéptido de muramilo, lipopolisacárido, lípido A, lípido A monofosforilo y citocinas tales como IL-2 e IL-12, también pueden causar efectos secundarios sistémicos (toxicidad general, pirogenicidad), limitando su uso.
Se conocen los adyuvantes que emplean células enteras, tales como células de insectos (S. frugiperda), documento de Patente de EE.UU. 6.224.882. En los insectos o en las células de insectos infectadas con algunos de los virus de insectos o agentes infecciosos o cualquier otro tipo de infección, tampoco se pueden identificar todavía qué insectos/célula de insecto está infectado y cual no, por lo que el uso de los mismos puede dar como resultado una baja producción y una posible amenaza de transmisión de enfermedades a humanos (informe de la OMS de enero de 2005).
En un artículo publicado en Vaccine (1999) 17:2446-2452, se utiliza el Bacillus de Calmette-Guerin (BCG) como adyuvante de la vacuna contra la rabia en ratones. Los resultados experimentales no muestran ninguna mejora en los títulos de anticuerpos séricos neutralizantes en grupos de ratones inmunizados con BCG como adyuvante, en comparación con la vacuna simple.
El documento de patente de EE.UU. 6.355.414 describe el polisacárido acemanano como adyuvante. El documento de Patente de EE.UU. 6.306.404 describe composiciones de adyuvante y vacuna de lípido A monofosforilo, azúcar, y opcionalmente un agente tensioactivo a base de amina. El documento de Patente de EE.UU. 6.231.859 describe una combinación de saponina como adyuvante. Los adyuvantes de saponina tienen toxicidades sistémicas elevadas, como la hemólisis. El documento de patente de EE.UU. 6.060.068 describe la interleucina-2 como adyuvante para vacunas. El documento de patente de EE.UU. 6.355.256 describe QS-21 y IL-12 como adyuvantes.
Los documentos de patentes de EE.UU. 6.103.697, 6.228.373 y 6.228.374 describen péptidos como adyuvantes. Los documentos JP 11106351, JP 9268130 y AU 780.054 describen adyuvantes de aceite. Pero todos estos adyuvantes no se han demostrado con una amplia variedad de antígenos y mamíferos. La seguridad de estos adyuvantes aún no se ha confirmado.
Los efectos secundarios de los adyuvantes utilizados actualmente incluyen: (1) la sensibilización a la tuberculina o a cualquier otro antígeno utilizado en las pruebas de detección de infecciones; (2) la presencia en animales destinados al consumo de materiales que no se pueden ingerir sin riesgo por los seres humanos, (3) reacciones inflamatorias, granulomatosas, necrotizantes u otras reacciones inaceptables en los sitios de inyección, sobre todo tal y como ocurre con el adyuvante completo de Freund; (4) la pirogenicidad; (5) efectos sobre el sistema nervioso central y efectos adversos sobre la conducta; (6) trastornos del crecimiento; (7) la artritis; (8) el aumento de la permeabilidad vascular y reacciones inflamatorias en el ojo; (9) la inducción de respuestas autoinmunes no deseadas; (10) la inmunosupresión de epítopos adyuvantes.
Gormus Bobby J y col., (Expert review of vaccines, future drugs, London GB, vol. 2, nº 6, 2003, páginas 791-804) describen vacunas contra la lepra, Mw o el bacilo de Calmette-Guerin.
Stills Harold F Jr, Ilar Journal, vol. 46, nº 3, 2005, páginas 280-293, describen adyuvantes tales como el adyuvante completo de Freund y el adyuvante incompleto.
Sur Prabir Kumar y col., Journal of the Indian Medical Association 2003, vol. 101, nº 2, páginas 118, 120, describen el uso de Mw en combinación con quimioterapia o radioterapia.
Sharma P y col., Leprosy Review 2000, vol. 71, nº 2, páginas 179-192, describen Mw para el tratamiento de la lepra.
Existe desde hace tiempo una necesidad de que la industria proporcione adyuvantes que estén exentos de los efectos secundarios mencionados anteriormente. Sorprendentemente, se observa que Mycobacterium w y/o sus componentes cumplen con los requisitos de adyuvante. A diferencia del adyuvante de Freund, proporciona una inmunoestimulación en ausencia de emulsión. Tampoco se asocia a efectos sistémicos secundarios, tales como fiebre, dolor corporal, dolor muscular, etc.
Mycobacterium w es una micobacteria de crecimiento rápido. Mycobacterium w es una micobacteria atípica no patógena y cultivable, con propiedades bioquímicas y características de crecimiento rápido que se parecen a las que pertenecen a la clase IV del grupo Runyons de las micobacterias en sus propiedades metabólicas y de crecimiento, pero que no es idéntica a las cepas que se enumeran actualmente en este grupo. Por consiguiente, se cree que (Mw) es una cepa completamente nueva. La identidad de la especie de Mw ha sido definida mediante la determinación de la secuencia de ADN a través de la reacción en cadena de la polimerasa.
Se ha observado que Mycobacterium w es útil para el tratamiento de la lepra, la tuberculosis (documento de patente con nº de publicación: WO03075825 – 18/09/2003), y también para el tratamiento del cáncer (documento de patente con nº de publicación: WO03049667 – 19/06//2003).
Existe actualmente una necesidad de tener adyuvantes mejorados. Los adyuvantes mejorados se necesitan en para mejorar la eficacia de las vacunas actuales contra la rabia, en las que adyuvantes del tipo alumbre no se pueden utilizar. Son necesarios para mejorar la eficacia de las vacunas actuales que contienen adyuvante, p. ej., la vacuna contra la hepatitis B, que contiene alumbre. Los adyuvantes mejorados son también necesarios para mejorar la eficacia de diferentes vacunas candidatas para que sean eficaces y se puedan utilizar con eficacia, por ejemplo, las vacunas que contienen CEA. Los nuevos adyuvantes también son necesarios para proporcionar nuevas vacunas para diversas indicaciones nuevas, tales como la vacuna para la enfermedad hepática vírica.
- 1.
- Essential Immunology, octava edición. Ivan Roitt, Blackwell Scientific publication.
- 2.
- Vaccines, tercera edición. S. Plotkein W. Orenstein, W.B. Saunder's company
- 3.
- Vaccines - Prospects & perspectives. Harminder sigh, rajesh Bhatia, forward publishing company, Delhi.
- 4.
- Immunotherapy of cancer. Mary L. Disis, Humana press, Totowa, New Jersey, EE.UU.
- 5.
- DNA vaccine. Douglas B. Lowrie, Robert G. Whalen, Humana press, Totowa New Jersey, EE.UU.
- 6.
- Handbook of cancer vaccines. Micheal A. Morse, Timothy M.Clay, H.Kiva Lyerly. Humana press Totowa New Jersey, EE.UU.
- 7.
- Cellular Microbiology. Bian Henderson, Micheal Wilson, John Wiley & Sons.
La presente invención proporciona Mycobacterium w para uso como un adyuvante en el tratamiento profiláctico o terapéutico mediante vacunación, en donde dicho tratamiento comprende administrar una vacuna que comprende Mycobacterium w mezclada, formulada, conjugada, cebada, fusionada y/o ligada con un antígeno, a un mamífero, en donde dicha Mycobacterium w actúa como adyuvante que potencia la inmunogenicidad de dicho antígeno.
Otras realizaciones se describen en el conjunto de reivindicaciones.
Descripción detallada
Lista de figuras y sus descripciones:
Fig. 1. Efecto de la inmunización con la vacuna antirrábica que contiene Mw en caballos con títulos iniciales elevados.
Fig. 2. Efecto de la inmunización con la vacuna antirrábica que contiene Mw en caballos con títulos iniciales bajos.
Fig. 3. Efecto de la inmunización con la vacuna antirrábica que contiene Mw sobre los títulos de anticuerpos neu
tralizantes en caballos inmunizados previamente, antes y después del tratamiento.
Fig. 4. Efecto de múltiples inmunizaciones con la vacuna antirrábica en comparación con dosis únicas de vacuna
contra la rabia que contiene Mw sobre los títulos de anticuerpos anti-rabia en el caballo.
Fig. 5. Efecto de la vacuna contra la rabia recubierta con el antígeno Mw sobre la respuesta de los anticuerpos
contra el virus de la rabia en el caballo.
Fig. 6. Efecto de la vacuna recubierta con el antígeno Mw sobre la respuesta de los anticuerpos neutralizantes
contra el virus de la rabia en el caballo.
Fig. 7. Efecto de la inmunización con vacunas contra la rabia en comparación con una vacuna con adyuvante Mw
en ratones.
Fig. 8. Títulos de anticuerpos contra la rabia mediante la prueba de neutralización en ratón de ratones inmunizados
con la vacuna antirrábica y la vacuna contra la rabia formulada con Mw.
Fig. 9. Respuesta de anticuerpos en voluntarios humanos sanos, contra antígenos de HB, inmunizados por vía in
tradérmica, con la vacuna contra la hepatitis B y la vacuna con adyuvante Mw.
Fig. 10. Efecto de la 2ª dosis de inmunización sobre la respuesta de los anticuerpos, después una vacuna contra la
hepatitis B y una vacuna con adyuvante Mw.
Fig. 11. Efecto de refuerzo de la vacuna Mw-Ag de HB en voluntarios humanos.
Fig. 12. Respuestas de los anticuerpos en voluntarios humanos sanos, inmunizados por vía intramuscular con la vacuna contra la hepatitis B y adyuvante Mw.
Método para el crecimiento de Mycobacterium w
1. Cultivo de Mycobacterium w
a) Preparación del medio de cultivo
Mycobacterium w se cultiva sobre medio sólido, más particularmente sobre medio LJ o más particularmente en un medio líquido, tal como medio Middlebrook o medio líquido de Sautn. El medio Middlebrook se enriquece para obtener un rendimiento mejor. Se puede enriquecer preferiblemente mediante la adición de glucosa, bactopeptona y albúmina de suero bovino y aditivos de los mismos. Se utilizan en varias proporciones, preferiblemente se emplean en una proporción de 20:30:02. El medio de enriquecimiento se añade el medio Middlebrook en varias proporciones diferentes desde 15:1 hasta 25:1, más preferiblemente en la proporción de 20:1.
b) Preparación del biorreactor
a. Preparación del recipiente
Las partes internas de contacto del recipiente (juntas, sellados mecánicos, junta tórica/junta de estanqueidad, surcos, etc.) se limpian adecuadamente para evitar cualquier contaminación. El recipiente se llena con NaOH 0,1 N y se deja reposar durante 24 horas para eliminar los materiales pirógenos y otros contaminantes. El recipiente se limpia a continuación, primero con agua acidulada, luego tres veces con agua destilada antes de preparar el medio.
b. Esterilización del biorreactor
El biorreactor que contiene nueve litros de agua destilada se esteriliza con vapor a presión (indirecto/directo). De forma similar, el biorreactor se esteriliza una vez más con medio Middlebrook. Las otras botellas de adición, los filtros de entrada/salida de aire, etc., se esterilizan dos veces en un autoclave a 121,6ºC durante 15 minutos. Antes de utilizarlos se secan a 50ºC en un horno.
c. Parámetros ambientales
i. Temperatura: 37 ± 0,5ºC
ii. pH: 6,7 hasta 6,8 inicialmente
2. Recolección y concentración
Se realiza típicamente al final del 6º día, después de haber cultivado bajo condiciones asépticas, pero se puede recolectar en cualquier momento entre 6 horas y 15 días. La concentración de las células (sedimentación) se hace por centrifugación.
3. Lavado de las células
El sedimento así obtenido se lava un mínimo de tres veces con solución salina normal. Se puede lavar con o sin líquido que contiene detergente, que es preferiblemente isotónico.
4. Adición de vehículo farmacéuticamente aceptable.
Se añade una solución salina normal exenta de pirógenos al sedimento. Se puede utilizar cualquier otro líquido exento de pirógenos como vehículo farmacéutico. El vehículo se añade en una cantidad de forma que se obtenga la concentración deseada de material activo en la forma final.
5. Adición de conservante
Para conservar el producto exento de otras bacterias contaminantes, se añade un conservante para el tiempo de conservación. El conservante preferido es tiomersal en una concentración final de 0,005% p/v hasta 0,1% p/v más preferiblemente 0,01% p/v.
6. Esterilización terminal
La esterilización terminal se puede realizar mediante diversos métodos físicos, tal como la aplicación de calor o radiación ionizante o la filtración estéril. El calor puede ser en forma de calor seco o de calor húmedo. También puede ser en forma de ebullición o pasteurización. La radiación ionizante puede ser ultravioleta o de rayos gamma o microondas o cualquier otra forma de radiación ionizante. Es preferible someter a autoclave el producto final. Esto se puede realizar antes o después del envasado final.
7. Control de Calidad a) En el material se evalúa su pureza y su esterilidad. b) En los organismos se comprueba la ácido-resistencia y la tinción de Gram. c) Prueba de inactivación: Esta se realiza mediante el cultivo del producto en un medio LJ para
descubrir cualquier organismo vivo. d) Patogenicidad y/o contaminación con agentes patógenos. Con los organismos cultivados se infectan ratones Balb/c. Ninguno de los ratones debe morir y todos deben permanecer sanos y ganar peso. No debe haber ninguna lesión macroscópica o microscópica en el hígado, el pulmón, el bazo
o cualquier otro órgano, cuando los animales se sacrifican hasta ocho semanas después del tratamiento.
e) Prueba bioquímica.
f) El organismo se somete a las pruebas siguientes
i. Ureasa
ii. Hidrólisis con Tween 80
iii. Prueba con niacina
iv. Prueba de reducción de nitrato.
El organismo da resultados negativos en ureasa, hidrólisis con Tween 80 y la prueba de niacina. Es positivo para la prueba de reducción de nitrato.
1. Destrucción celular
La destrucción celular se puede realizar mediante ultrasonidos o el uso de un fraccionómetro de presión elevada o por aplicación de ingredientes para la presión osmótica. Las células rotas se lavaron con solución salina fisiológica y se volvieron a sedimentar mediante centrifugación.
1. Extracción del disolvente
Cualquier disolvente orgánico, tal como alcoholes, hidrocarburos halogenados, acetona, fenol, alcohol isopropílico, ácido acético, hexano y/o compuestos aromáticos de forma individual o en cualquier combinación de los mismos, puede realizar la extracción con disolventes.
2. Extracción enzimática.
La extracción enzimática se puede realizar con enzimas, que pueden digerir la pared/membranas celulares. Son típicamente proteolíticas y líticas esencialmente. Las enzimas lisozimas, liticasa y pronasa son las enzimas preferidas.
Los componentes/fracciones celulares de Mycobacterium w se utilizaron de forma aislada en lugar de organismos de Mycobacterium w y/o se añadieron al producto que contenía Mycobacterium w. La adición de los componentes celulares daba como resultado una eficacia mejorada del producto.
Las Mw en forma de células enteras o una fracción se formularon mezclando Mw en una solución isotónica, una fracción de Mw se formuló en un tampón apropiado y/o se conjugó con agentes de acoplamiento químico de antígenos o inmunógenos, tales como aldehídos, carbodiamidas, anhídridos y cualquiera de tales compuestos.
Los siguientes ejemplos demuestran la invención y no limitan el objeto de la invención.
Ejemplo 1
Las células de Mycobacterium w se dejaron crecer tal y como se ha mencionado anteriormente, en medio Middlebrook y se destruyeron en un autoclave a 121,6ºC, bajo presión de vapor de 1,03 bar. Las células se suspendieron en solución salina normal estéril, exenta de pirógeno. En las células se comprobó la esterilidad y la pureza. Las células se diluyeron hasta tener una concentración final de 109 células por ml. Las células se mezclaron con el antígeno, en uno de los ejemplos, el antígeno es un Ag de HB. Estas mezclas se utilizan como vacuna en donde Mw actúa como adyuvante.
Ejemplo 2
El calor inactivó las células de Mw y/o sus componentes y se activaron con hidrocloruro de 1-etil-3-(3dimetilaminopropil)carbodiimida (Sigma) y se recubrieron con antígeno, mezclando las células activadas con antígeno. La relación molar utilizada de antígeno frente a célula estaba en el intervalo de 1:2 a 1:100, preferiblemente en una relación de 1:50. Esta composición se utilizó para la inmunización en donde Mw y/o sus componentes actuaban como adyuvante.
El siguiente ejemplo describe el método para utilizar Mycobacterium w y sus componentes o fracciones como adyuvante. Los siguientes experimentos muestran el efecto adyuvante de la presente invención y no limitan el alcance de la invención.
El efecto adyuvante de acuerdo con la presente invención, se estudió en caballos inmunizados previamente que recibieron la vacuna contra la rabia, con el fin de evaluar el efecto de las composiciones que contenían Mycobacterium w y/o sus componentes y se formularon y se evaluaron para estudiar su efecto sobre el título de anticuerpos. Todas las inyecciones individuales de vacuna testigo (Rabipur), así como la vacuna del ensayo, contenían virus de la rabia inactivados en una cantidad superior o igual a 2,5 UI/ml. Se aplicaron con una dosificación diferente (nº de inyecciones) o en el intervalo mencionado. Los títulos de anticuerpos se midieron por el método ELISA y se evaluaron adicionalmente con la prueba de anticuerpos neutralizantes en ratones.
Ejemplo 1
Inmunización de caballos contra la rabia empleando adyuvante Mw:
Caballos inmunizados con la vacuna contra la rabia (Rabipur) fueron inmunizados de nuevo mediante la administración de la vacuna contra la rabia (Rabipur) reconstituida con agua o con solución salina que contenía Mycobacterium
w. Cada caballo recibió 1,0 ml de Rabipur reconstituida por vía intramuscular en dos dosis de 0,5 ml cada una, en cada hombro. Se recogió sangre al comienzo (día cero) y en intervalos de siete y catorce días después de la reinmunización. La sangre se analizó para determinar el título de anticuerpos contra la rabia mediante ELISA frente a un patrón de referencia. Las muestras de sangre también se analizaron para determinar los anticuerpos neutralizantes contra la rabia mediante la prueba de anticuerpos neutralizantes de ratón.
La Figura 1 muestra el efecto de ambas vacunas sobre los niveles de anticuerpos en el suero de los caballos, tres en cada grupo, que tenían un título de anticuerpos inicial muy bajo. La vacuna sola no produce el título protector de anticuerpos, mientras que la vacuna con Mw es capaz de elevar el título a un nivel significativamente superior el día
7. Este se incrementa aún más el día 14.
La Figura - 2 muestra el efecto de ambas vacunas sobre los niveles de anticuerpos en el suero de los caballos, dos en cada grupo, con títulos de anticuerpos iniciales elevados. La vacuna sola no produce el título protector de anticuerpos, mientras que la vacuna con Mw es capaz de elevar el título a un nivel significativamente superior el día 7. Este aumenta aún más el día 14.
Cuando los anticuerpos neutralizantes se evaluaron usando la prueba neutralizante de ratón, se observó que no había ningún efecto sobre los niveles de anticuerpos neutralizantes en el grupo testigo (que recibía la vacuna contra la rabia sola), pero hubo una mejora significativa en un grupo que recibía la vacuna con Mycobacterium w (grupo experimental). Hubo un incremento de más del doble en el título de anticuerpos neutralizantes el día 14, en comparación con el nivel de referencia en el grupo experimental (Fig. 3).
Ejemplo 2
Los grupos experimentales recibieron la vacuna contra la rabia reconstituida con Mw, mientras que el grupo testigo recibió sólo la vacuna contra la rabia. El grupo experimental fue inmunizado el día 0 con una sola inyección de la vacuna. El grupo testigo recibió cuatro inyecciones de la vacuna contra la rabia los días 0, 7 y 14 (en total 12).
En los resultados, tal y como se muestran en la Figura 4, el grupo experimental muestra una respuesta inmune mejor en comparación con el testigo. La respuesta de anticuerpos en el grupo experimental se consigue con menor cantidad de antígeno en comparación con el grupo testigo.
Ejemplo 3
La vacuna del ensayo, de acuerdo con la invención, fue evaluada en los mismos caballos que recibieron cuatro inyecciones de la vacuna contra la rabia convencional, en un intervalo de 4 semanas (16 inyecciones en total) antes de la misma. Todos recibieron una sola inyección de la vacuna del ensayo, que contenía la misma carga de antígeno que la que contenía una sola inyección de la vacuna contra la rabia. El título de anticuerpos generado en los caballos con la vacuna del ensayo, es mayor o igual que cualquiera que se produzca en el mismo caballo con cuatro inyecciones de vacuna testigo, inyectadas cada semana hasta un total de 16 inyecciones. El título de anticuerpos también se alcanza al cabo de 2 y 3 semanas en el grupo experimental, en comparación con cinco semanas en el grupo testigo.
Ejemplo 4
Un grupo de cinco caballos (grupo experimental) fueron inmunizados con vacuna antirrábica y el otro grupo (grupo testigo) fue inmunizado con el antígeno de la rabia recubierto con Mw. Cada caballo recibió 1 ml de vacuna por vía intramuscular. A los caballos se les extrajo sangre en un intervalo de 7 días durante el periodo de un mes. Los títulos de anticuerpos específicos se determinaron por ELISA y MNT. Los títulos de anticuerpos en el grupo experimental fueron significativamente más elevados que en el grupo testigo de caballos a partir del día 7 en adelante, tal y como se muestra en las Figuras 5 y 6.
Ejemplo 5
Inmunización de ratones contra la rabia
A los ratones se les administró 0,2 ml de vacuna contra la rabia (Rabipur) reconstituida en agua (testigo) o reconstituida con Mycobacterium w (Mw) que contenía solución salina normal. En cada grupo se inmunizaron treinta ratones. En cada grupo los días 5, 10, 15, 20, 25 y 30, se extrajo sangre de cinco ratones de cada grupo para obtener suero. Se administraron 0,2 ml de la vacuna por vía intradérmica, divididos en dos inyecciones de 0,1 ml cada una, a cada lado del lomo. El título de anticuerpos se evaluó después de la administración de la vacuna en un intervalo de 5 días. El título de anticuerpos se midió con ELISA (Figura 7). Los resultados sugieren que con la adición de Mycobacterium w se alcanza un mayor título de anticuerpos en comparación con el testigo. Dicho título tan elevado se alcanza muy pronto. El valor máximo se consigue el día 10 en el grupo de Mw, en comparación con el día 15 en el grupo testigo. El día 10, el valor alcanzado por el grupo de Mw es más del doble que el del grupo testigo. En un grupo testigo, después de alcanzar el valor máximo el día 15, este valor disminuye rápidamente y el valor alcanzado el día 20 es menos de la mitad del alcanzado el día 15 y no es detectable el día 25 y 30. En el grupo de Mw, el valor el día 20 es más del doble en comparación con el grupo testigo, que se mantiene el día 25 y el día 30. Las muestras se verificaron para estudiar la presencia de isotipos específicos de IgG. Estos anticuerpos estaban teniendo un componente importante de anticuerpos de isotipo IgG2a, tal y como se determinó mediante un esquipo de reactivos para determinar isotipos de IgG (SIGMA).
Ejemplo 6
Anticuerpos neutralizantes de ratón contra la rabia.
Suero obtenido el día 5, el día 10 y el día 25 a partir del ejemplo cinco anterior, se utilizó para detectar los anticuerpos neutralizantes de ratón, inoculando el cerebro de los ratones con virus de la rabia vivos (prueba de neutralización en ratón). El día 5, el título de anticuerpos neutralizantes no era detectable en ambos grupos. El día 10, el grupo Mw contenía 1,35 UI/ml, mientras que el grupo testigo contenía 0,2975 UI/ml de anticuerpos neutralizantes. Incluso después del día 25, los títulos de anticuerpos neutralizantes específicos eran significativamente más elevados en el grupo Mw como adyuvante que en el grupo testigo. El título del grupo de Mw era de 32 UI/mL, mientras que el grupo testigo solo logró el título protector de 1,09 UI/mL.
Esto muestra claramente la inducción más rápida y específica de la respuesta de anticuerpos neutralizantes hasta títulos protectores en 10 días en el grupo Mw, tal y como se indica en la tabla 2 y la Figura 8.
Tabla 2: Efecto de la inmunización con Mw de Immuvac en ratones
- Vacuna testigo contra la rabia
- Vacuna contra la rabia con Mw
- Día 5
- no detectable no detectable
- Día 10
- 0,2975 1,35
- Día 25
- 1,09 32,00
Las composiciones de acuerdo con la presente invención, se prepararon de forma que tuvieran antígeno de la hepatitis B (vacuna del ensayo) y se compararon con la vacuna contra la hepatitis B (Engerix-B). Ambas (la vacuna del ensayo, así como la vacuna testigo) contenían 20 microgramos/ml de antígeno de la hepatitis B. Los títulos de anticuerpos se midieron utilizando el equipo de reactivos para ELISA, disponible comercialmente.
Ejemplo 1: Efecto de una dosis intradérmica única
Después de dar su consentimiento, dos grupos de 15 personas adultas de sexo masculino fueron seleccionadas al azar y se inmunizaron por vía intradérmica. Con una sola inyección de vacuna contra la hepatitis B (Engerix B), sola
o con la incorporación de Mw, el antígeno de la hepatitis B utilizado eran 2 mcG. Las muestras de suero se analizaron para determinar el título de anticuerpos en la semana 1, 2, 3 y 4 después de la inmunización. Los resultados indican que ningún voluntario en el grupo testigo produjo anticuerpos contra la hepatitis B. El nivel protector es 10 UI/ml. Por otro lado, el grupo que contenía la vacuna que incorporaba Mw, consiguió un título significativamente elevado (Figura 9), más de los niveles requeridos para un título protector de anticuerpos.
Ejemplo 2: Efecto de la segunda dosis intradérmica
El día 35 después de la primera inmunización, las personas con falta de respuesta recibieron una segunda dosis de inmunización con la vacuna del ensayo o testigo, por vía intradérmica. Las respuestas de los anticuerpos después de la segunda dosis se determinaron cada siete días. Los anticuerpos anti-HB en el grupo experimental se incrementaron significativamente en comparación con los títulos en el grupo testigo, tal y como se muestra en la Figura
10. En el grupo testigo sólo uno de los seis individuos que recibían la segunda dosis de la vacuna testigo, alcanzó el título de anticuerpos.
Ejemplo 3: Efecto de refuerzo de una dosis única de vacuna contra la Hepatitis B intradérmica
Dos individuos con títulos protectores el día 0, recibieron una vacuna del ensayo o una vacuna testigo. Después de la inmunización con las vacunas respectivas, sus títulos de anticuerpos mejoraron en los dos casos.
Ejemplo 4: Efecto de la administración intramuscular:
En otro ejemplo, 46 personas adultas de sexo masculino, fueron seleccionadas cada una al azar y se inmunizaron intramuscularmente, con una sola inyección de cualquier vacuna contra la hepatitis B (vacuna testigo (Engerix B)) sola o formulada con Mw (la vacuna del ensayo). Quince voluntarios recibieron la vacuna testigo, mientras que 31 voluntarios fueron inmunizados con la vacuna del ensayo. La cantidad de antígeno de la hepatitis B utilizado era 20 mcG. Las muestras de suero se analizaron para determinar el título de anticuerpos en la semana 1, 2, 3, 4, 6 y 7 después de la inmunización. Los resultados indican que ninguno de los voluntarios del grupo testigo produjo anticuerpos contra la hepatitis B. El nivel protector es de 10 UI/ml. Por otro lado, el grupo que contenía la vacuna que incorporaba Mw, logró un título significativamente alto (Fig. 12). Todos lograron niveles superiores a los requeridos para un título de anticuerpos protector con una sola inyección. Todos recibieron una segunda inyección de la vacuna testigo o una vacuna del ensayo el día 28. Hubo un aumento significativo del título de anticuerpos en el grupo experimental (Fig.12). El aumento también se observó en el grupo testigo, pero no fue tan notable.
Ejemplo 5: Efecto adyuvante de Mw para la respuesta inmune mediada por células contra el Ag de HB en ratones.
Un grupo de cinco ratones (grupo experimental) fueron inmunizados con la vacuna contra la hepatitis B (Engerix B) mezclada con Mw y otro grupo de cinco ratones (grupo testigo) recibió la vacuna contra la hepatitis B adecuadamente diluida. La inmunización se realizó por vía subcutánea. Cada ratón recibió 2 microgramos de antígeno de HB. El grupo experimental recibió la misma dosis de 2 microgramos de antígeno, formulada en células de Mw. Después de 15 días, se extrajo sangre de los ratones y se aislaron los PBMC. Las células aisladas se cultivaron en medio RPMI completo con FBS al 10% y 1 μg/mL de concavalina A como mutágeno, a 37ºC y 7% de CO2 durante 72 horas y se estimularon con antígeno de HB. Después de 72 horas, las células se recogieron y se sometieron a ELISPOT para IFN-γ, IL-2. Los resultados se obtuvieron con un lector de ELISPOT.
Los resultados mostraron que las células productoras de IFN-γ e IL-2 eran significativamente superiores en el grupo experimental en comparación con el grupo testigo.
Ejemplo 1: Efecto adyuvante de Mw sobre la respuesta inmune mediada por células contra el antígeno de cáncer CA - 19.9 en ratones.
Un grupo de cinco ratones se inmunizaron con CA – 19.9 (Sigma) solo (grupo testigo) o con una composición de acuerdo con la presente invención. Todos los ratones fueron inmunizados con inyecciones subcutáneas de 0,2 ml en la zona lumbar. Cada ratón recibió 10 UI de antígeno CA - 19.9. El grupo experimental recibió la misma dosis de 10 UI de antígeno formulada en células de Mw. Después de 15 días, se tomó sangre de los ratones y se aislaron las PBMC. Las células aisladas se cultivaron en medio RPMI completo con FBS al 10% y 1 μg/mL de concavalina A como mutágeno, a 37ºC y 7% de CO2 durante 72 horas y se estimularon con antígeno CA - 19,9. Después de 72 horas, las células se recogieron y se sometieron a ELISPOT para IFN-γ e IL-2.
Los resultados mostraron que el número de células secretoras de IFN-γ e IL-2 era significativamente superior en el grupo experimental en comparación con el grupo testigo.
Ejemplo 2: Efecto adyuvante de Mw para la respuesta inmune mediada por células contra el antígeno de neumococos en ratones.
Un grupo de cinco ratones fueron inmunizados con el antígeno de neumococos aislado (grupo testigo) o con una composición de acuerdo con la presente invención. Todos los ratones fueron inmunizados con inyecciones subcutáneas de 0,2 ml en la parte lumbar, que contenían 0,1 ml de antígeno de neumococo. Después de 15 días, se recogió sangre de los ratones y se aislaron las PBMC. Las células aisladas se cultivaron en medio RPMI completo con FBS al 10% y 1 μg/mL de concavalina A como mutágeno, a 37ºC y 7% de CO2 durante 72 horas y se estimularon con antígeno de neumococo. Después de 72 horas, las células se recogieron y se sometieron a ELISPOT para IFN-γ, IL2 e IL-12.
Los resultados mostraron que el número de células productoras de IFN-γ era menor en el grupo testigo que en el grupo experimental. La respuesta de IL-2 se observó sólo en el grupo experimental. Las células secretoras de IL-12 eran significativamente superiores en el grupo experimental.
Ejemplo 3: Efecto adyuvante de Mw para la respuesta inmune mediada por células contra el antígeno del virus de la gripe en ratones.
Un grupo de cinco ratones fueron inmunizados con la vacuna contra la gripe (Vaxigrip) mezclada con Mw y otro grupo de cinco ratones recibieron la vacuna de la gripe convenientemente diluida. Todos ratones fueron inmunizados con inyecciones subcutáneas de 0,2 ml en la zona lumbar. Cada ratón recibió 0,10 ml de vacuna contra la gripe. El grupo experimental recibió la misma dosis de antígeno formulada en células de Mw. Después de 15 días, se extrajo sangre de los ratones y se aislaron las PBMC. Las células aisladas se estimularon en medio RPMI completo con FBS al 10% y 1 μg/mL de concavalina A como mutágeno, a 37ºC y 7% de CO2 durante 72 horas y se estimularon con la vacuna contra la gripe. Después de 72 horas, se recogieron las células y se sometieron a ELISPOT para IFNγ, IL-2 e IL-12.
Los resultados mostraron que el número de células productoras de IFN-γ, IL-2 e IL-12 en el grupo experimental era superior al número en el grupo testigo. El efecto fue máximo para IL-12 seguido por IL-2 y IFN-γ.
Ejemplo 4: Efecto adyuvante de Mw para la respuesta inmune mediada por células contra el antígeno de la Salmonella typhi vi en ratones.
Un grupo de cinco ratones (grupo experimental) fue inmunizado con antígeno de Salmonella typhi vi mezclado con Mw y el otro grupo de cinco ratones (grupo testigo) recibió el antígeno Salmonella typhi vi convenientemente diluido. Todos los ratones fueron inmunizados con inyecciones subcutáneas de 0,2 ml en la zona lumbar. Cada ratón recibió 0,1 ml de antígeno Salmonella typhi vi. El grupo experimental recibió la misma dosis de antígeno formulado en células Mw. Después de 15 días, se recogió sangre de los ratones y se aislaron las PBMC. Las células aisladas se culti
varon en medio RPMI completo con FBS al 10% y 1 μg/mL de concavalina A como mutágeno, a 37ºC y 7% de CO2
durante 72 horas y se estimularon con antígeno Salmonella typhi iv. Después de 72 horas, las células se recogieron y se sometieron a ELISPOT para estudiar IFN-γ, IL-2 e IL-12.
Los resultados mostraron que el grupo experimental tenía un mayor número de células productoras de IFN-γ, IL-2 e IL-12 que el grupo testigo. El efecto fue máximo con IL-12 seguido por IL-2 e IFN-γ.
Ejemplo 5: Efecto adyuvante de Mw para la respuesta inmune mediada por células contra el antígeno de la hepatitis A en ratones.
Un grupo de cinco ratones (grupo experimental) fue inmunizado con el antígeno de la hepatitis A (Havrix) mezclado con Mw y el otro grupo de cinco ratones (grupo testigo) recibió antígeno de la hepatitis A adecuadamente diluido. Todos los ratones fueron inmunizados con inyecciones subcutáneas de 0,2 ml en la zona lumbar. Cada ratón recibió 140 U de antígeno de la hepatitis A. El grupo experimental recibió la misma dosis de 140 U de antígeno formulada en células Mw. Después de 15 días, se recogió sangre de los ratones y se aislaron las PBMC. Las células aisladas se cultivaron en medio RPMI completo con FBS al 10% y 1 μg/mL de concavalina A como mutágeno, a 37ºC y 7% de CO2 durante 72 horas y se estimularon con antígeno de la hepatitis A. Después de 72 horas, las células se recogieron y se sometieron a ELISPOT para estudiar IFN-γ e IL-2.
Los resultados mostraron que en el grupo experimental el número de células productoras de IL-2 e IFN-γ era significativamente más elevado que en el grupo testigo.
Los ejemplos anteriores muestran el funcionamiento de la presente invención cuando se incorpora una variedad de diferentes tipos de antígenos. Para algunos de ellos, tales como el antígeno de la rabia, tifoideo, de neumococo, actualmente no hay adyuvantes incorporados en una preparación comercialmente disponible, debido al hecho de que los adyuvantes actuales no proporcionan el efecto deseado. También se muestra el efecto de la adición de adyuvante en combinación con un adyuvante conocido, tal como el alumbre. Por lo tanto, el adyuvante de la presente invención parece ser universal con una eficacia mejorada.
Estos ejemplos muestran claramente que Mw, cuando se utiliza como adyuvante, puede estimular la respuesta inmune específica mediada por células. Los resultados en caballos inmunizados previamente muestran que las inyecciones individuales de las vacunas del ensayo producen un aumento del título de anticuerpos, en comparación con caballos inmunizados con múltiples inyecciones de vacuna contra la rabia.
Los ejemplos con personas voluntarias y caballos también indican que los títulos protectores se pueden conseguir a través de una dosis de inmunización única con la vacuna del ensayo, en 7 a 10 días, mientras que títulos similares se pueden conseguir con la vacuna convencional después de un mes o más con múltiples inyecciones.
Los ejemplos anteriores muestran que el objeto de la estimulación inmunológica de acuerdo con la presente invención, puede ser cualquier mamífero, incluyendo pequeños ratones, mamíferos grandes, tales como caballos y seres humanos. La respuesta neta es idéntica en todos los animales. Las composiciones de prueba estimulan la inmunidad mediada por células de forma evidente a partir de los ejemplos anteriores.
Mw, cuando se utiliza junto con la vacuna antirrábica, logra un nivel máximo de anticuerpos más elevado y más pronto, reduciendo el tiempo hasta la primera aparición de anticuerpos, en comparación con el grupo testigo y se mantiene durante un período prolongado.
El ejemplo anterior también muestra la inducción más rápida y específica de la respuesta de los anticuerpos neutralizantes con títulos protectores en 10 días, en el grupo Mw, tal y como se indica en la tabla 2 y la Figura 7.
Ninguno de los animales ni de los voluntarios humanos ha mostrado ningún signo de toxicidad local o generalizada y la vacuna fue bien tolerada. También se obtienen resultados idénticos cuando se utilizan fracciones o componentes de Mycobacterium w o Mw completa.
Mw y/o sus componentes pueden estimular la respuesta inmune en humanos frente a un antígeno específico, sin ningún efecto adverso. También la ruta de inmunización es independiente de la respuesta inmune, cuando se administra con Mw como adyuvante.
Esto es indicativo del potencial de Mw para producir una respuesta inmune humoral más potente y sostenida para todos los antígenos. Como se ha mostrado en todos los ejemplos anteriores, dicho adyuvante Mw se utilizará completo o se emplearán sus componentes para potenciar la estimulación de la respuesta inmune contra prácticamente cualquier antígeno/inmunógeno.
Claims (11)
- REIVINDICACIONES
- 1.
- Mycobacterium w inactivo para uso como adyuvante en el tratamiento profiláctico o terapéutico mediante vacunación, en donde dicho tratamiento comprende la administración a un mamífero de una vacuna que comprende Mycobacterium w mezclado, formulado, conjugado, cebado, fusionado y/o ligado con un antígeno, en donde dicho Mycobacterium w actúa como un adyuvante que potencia la inmunogenicidad de dicho antígeno.
-
- 2.
- Mycobacterium w inactivo para uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde se disminuye la morbilidad y la mortalidad asociadas a una enfermedad.
-
- 3.
- Mycobacterium w inactivo para uso de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde dicho tratamiento mediante vacunación evita una enfermedad en un mamífero.
-
- 4.
- Mycobacterium w inactivo para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde se induce una respuesta inmune más rápida, más fuerte y/o más duradera.
-
- 5.
- Mycobacterium w inactivo para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde el Mycobacterium w se formula en una composición que también contiene otros adyuvantes.
-
- 6.
- Mycobacterium w inactivo para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde dicho Mycobacterium w se inactiva mediante calor o radiación, preferentemente utilizando un autoclave.
-
- 7.
- Mycobacterium w inactivo para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde el antígeno se selecciona a partir de péptidos, polipéptidos, células, extractos celulares, polisacáridos, conjugados de polisacáridos, lípidos, glicolípidos, carbohidratos, proteínas, virus, extractos víricos y antígeno codificado por ácidos nucleicos.
-
- 8.
- Mycobacterium w inactivo para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde el antígeno se obtiene a partir de un agente infeccioso seleccionado entre un virus, una bacteria, un hongo y un parásito.
-
- 9.
- Mycobacterium w inactivo para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en donde el antígeno es un antígeno asociado a un tumor.
-
- 10.
- Mycobacterium w inactivo para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde el antígeno es un antígeno específico de un tumor.
-
- 11.
- Mycobacterium w inactivo para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en donde el antígeno es un alérgeno.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IN505MU2005 | 2005-04-25 | ||
| INMU05052005 | 2005-04-25 | ||
| PCT/IB2006/000978 WO2006114680A2 (en) | 2005-04-25 | 2006-04-21 | Vaccine adjuvants |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2388684T3 true ES2388684T3 (es) | 2012-10-17 |
Family
ID=37215117
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES06744545T Active ES2388684T3 (es) | 2005-04-25 | 2006-04-21 | Adyuvantes de vacunas |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8048434B2 (es) |
| EP (1) | EP1948782B8 (es) |
| AP (1) | AP2695A (es) |
| AU (1) | AU2006238906B2 (es) |
| CA (1) | CA2632353C (es) |
| EA (1) | EA200800917A1 (es) |
| ES (1) | ES2388684T3 (es) |
| GB (1) | GB2442408B (es) |
| PL (1) | PL1948782T3 (es) |
| WO (1) | WO2006114680A2 (es) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2463434B (en) * | 2007-06-28 | 2013-01-30 | Cadila Pharmaceuticals Ltd | Mitogen activated protein kinase modulator |
| WO2011083493A1 (en) * | 2010-01-08 | 2011-07-14 | National Institute Of Immunology | Human chorionic gonadotropin (hcg) based vaccine for prevention and treatment of cancer |
| US20180042850A1 (en) * | 2010-02-19 | 2018-02-15 | Cadila Pharmaceuticals Ltd. | Pharmaceutical Composition of Killed Cells with Substantially Retained Immunogenicity |
| EP2537030B1 (en) * | 2010-02-19 | 2017-08-30 | Cadila Pharmaceuticals Ltd. | A pharmaceutical composition of killed cells with substantially retained immunogenicity |
| WO2012117323A1 (en) * | 2011-02-28 | 2012-09-07 | Cadila Pharmaceuticals Limited | Therapeutic cancer vaccine |
| EP2729166B1 (en) * | 2011-07-05 | 2017-09-06 | Cadila Pharmaceuticals Limited | Cancer antigen |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5643565A (en) | 1985-09-20 | 1997-07-01 | Chiron Corporation | Human IL-2 as a vaccine adjuvant |
| US6355256B1 (en) | 1994-09-30 | 2002-03-12 | Ludwig Institute For Cancer Research | Compositions containing a p53 derived protein or peptide, an adjuvant, and interleukin-12 and uses thereof |
| SE9403526D0 (sv) | 1994-10-14 | 1994-10-14 | Astra Ab | New Peptides |
| SE9501067D0 (sv) | 1995-03-24 | 1995-03-24 | Astra Ab | New peptides |
| JP4104186B2 (ja) | 1995-11-30 | 2008-06-18 | 財団法人化学及血清療法研究所 | オイルアジュバントワクチンおよびその調製方法 |
| US6231859B1 (en) | 1996-12-02 | 2001-05-15 | Aquila Biopharmaceuticals, Inc. | Saponin adjuvant compositions |
| CU22629A1 (es) | 1997-03-06 | 2000-12-22 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Formulaciones inmunopotenciadoras para uso vacunal |
| JPH11106351A (ja) | 1997-10-02 | 1999-04-20 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | オイルアジュバントワクチンおよびその製造方法 |
| US6306404B1 (en) | 1998-07-14 | 2001-10-23 | American Cyanamid Company | Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid A |
| JP2001131087A (ja) | 1999-11-05 | 2001-05-15 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | オイルアジュバントワクチン |
| GB2382529B (en) * | 2001-01-17 | 2004-01-28 | Bakulesh Mafatlal Khamar | Use of an immunomodulator for the management of HIV disease/infection |
| UA79952C2 (en) * | 2001-12-10 | 2007-08-10 | Kabulesh Mafatlal Khamar | MYCOBACTERIUM w APPLICATIONS FOR CANCER TREATMENT |
| GB2392839A (en) | 2002-03-08 | 2004-03-17 | Bakulesh Mafatlal Khamar | Use of Mycobacterium w in the treatment of tuberculosis |
-
2006
- 2006-04-21 GB GB0801474A patent/GB2442408B/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-04-21 ES ES06744545T patent/ES2388684T3/es active Active
- 2006-04-21 CA CA2632353A patent/CA2632353C/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-04-21 WO PCT/IB2006/000978 patent/WO2006114680A2/en active Application Filing
- 2006-04-21 EP EP06744545A patent/EP1948782B8/en not_active Not-in-force
- 2006-04-21 US US10/583,731 patent/US8048434B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-04-21 EA EA200800917A patent/EA200800917A1/ru unknown
- 2006-04-21 PL PL06744545T patent/PL1948782T3/pl unknown
- 2006-04-21 AU AU2006238906A patent/AU2006238906B2/en not_active Ceased
- 2006-04-21 AP AP2008004362A patent/AP2695A/xx active
-
2011
- 2011-09-23 US US13/242,909 patent/US8277778B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1948782A2 (en) | 2008-07-30 |
| US8277778B2 (en) | 2012-10-02 |
| EP1948782B1 (en) | 2012-08-01 |
| US20120014985A1 (en) | 2012-01-19 |
| EA200800917A1 (ru) | 2008-12-30 |
| GB2442408A (en) | 2008-04-02 |
| EP1948782B8 (en) | 2012-09-12 |
| CA2632353C (en) | 2018-02-20 |
| AU2006238906B2 (en) | 2013-04-11 |
| WO2006114680A8 (en) | 2008-08-14 |
| WO2006114680A3 (en) | 2007-08-23 |
| GB2442408B (en) | 2010-06-30 |
| AU2006238906A1 (en) | 2006-11-02 |
| EP1948782A4 (en) | 2009-06-17 |
| GB0801474D0 (en) | 2008-03-05 |
| AP2695A (en) | 2013-07-16 |
| WO2006114680A2 (en) | 2006-11-02 |
| CA2632353A1 (en) | 2006-11-02 |
| US8048434B2 (en) | 2011-11-01 |
| US20080131458A1 (en) | 2008-06-05 |
| PL1948782T3 (pl) | 2013-01-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Wilson-Welder et al. | Vaccine adjuvants: current challenges and future approaches | |
| Edelman | Survey of human-use adjuvants | |
| Hasson et al. | The past, current and future trends in DNA vaccine immunisations | |
| US9308252B2 (en) | Extracellular matrix materials as vaccine adjuvants for diseases associated with infectious pathogens or toxins | |
| O'HAGAN | Conference science medal lecture: recent advances in vaccine adjuvants for systemic and mucosal administration | |
| JP3485184B2 (ja) | インターロイキン含有安定ワクチン組成物 | |
| ES2388684T3 (es) | Adyuvantes de vacunas | |
| Azad et al. | Vaccine delivery-current trends and future | |
| JP2019515005A (ja) | 水酸化アルミニウムゲル−塩化ナトリウム複合免疫学的アジュバント、並びにその調製方法及びその使用 | |
| US6890540B1 (en) | Vaccine formulation | |
| KR20200142028A (ko) | 애주번트로서의 버크홀데리아 슈도말레이 복합체 외막 소포체 | |
| EP1154792B1 (en) | Tuberculosis vaccine formulation comprising monoglycerides or fatty acids as adjuvant | |
| US20140161836A1 (en) | Carious tooth vaccine and preparation method | |
| CA2627364A1 (en) | Extracellular matrix materials as vaccine adjuvants for diseases associated with infectious pathogens or toxins | |
| KR20040081469A (ko) | 점막 면역 자극제로서 간염 비 바이러스 표면 항원 및결과물로서의 제제 | |
| JP2012504118A (ja) | ワクチンアジュバント | |
| Lowell et al. | Proteosome™ technology for vaccines and adjuvants | |
| RU2190424C1 (ru) | Антигенный состав чумной химической вакцины | |
| Virella | 12 Humoral Immune Response and Its Induction by Active Immunization | |
| WO2023250522A2 (en) | Vaccine adjuvants and methods | |
| Ronco et al. | Adjuvants for mucosal vaccines | |
| Wilson-welder | In vitro and in vivo evaluation of novel biodegradable polymer adjuvants for vaccine delivery | |
| Welder | In vitro and in vivo evaluation of novel biodegradable polymer adjuvants for vaccine delivery | |
| JP2004262847A (ja) | ワクチン製剤 |