ES2377298A1 - Sistema de liberación controlada activado por oligonucleótidos. - Google Patents
Sistema de liberación controlada activado por oligonucleótidos. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2377298A1 ES2377298A1 ES201000900A ES201000900A ES2377298A1 ES 2377298 A1 ES2377298 A1 ES 2377298A1 ES 201000900 A ES201000900 A ES 201000900A ES 201000900 A ES201000900 A ES 201000900A ES 2377298 A1 ES2377298 A1 ES 2377298A1
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- oligonucleotide
- controlled release
- support
- release system
- pores
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 title claims abstract description 85
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 title claims abstract description 35
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 18
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims abstract description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 21
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical group O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 claims description 16
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 15
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 12
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims description 9
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 8
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 6
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 3
- 229910052980 cadmium sulfide Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 3
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical class NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N Zirconium Chemical compound [Zr] QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003139 biocide Substances 0.000 claims description 2
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 239000010954 inorganic particle Substances 0.000 claims description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 claims description 2
- 229920000620 organic polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 claims description 2
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000010703 silicon Substances 0.000 claims description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 2
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000010936 titanium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052726 zirconium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000001793 charged compounds Chemical class 0.000 claims 2
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 claims 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 claims 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims 1
- CJOBVZJTOIVNNF-UHFFFAOYSA-N cadmium sulfide Chemical compound [Cd]=S CJOBVZJTOIVNNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000002122 magnetic nanoparticle Substances 0.000 claims 1
- 230000004044 response Effects 0.000 abstract description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 abstract description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 16
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- WYTZZXDRDKSJID-UHFFFAOYSA-N (3-aminopropyl)triethoxysilane Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)CCCN WYTZZXDRDKSJID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 3
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- WUPHOULIZUERAE-UHFFFAOYSA-N 3-(oxolan-2-yl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC1CCCO1 WUPHOULIZUERAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WWBITQUCWSFVNB-UHFFFAOYSA-N 3-silylpropan-1-amine Chemical group NCCC[SiH3] WWBITQUCWSFVNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 229910052681 coesite Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910052906 cristobalite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000033116 oxidation-reduction process Effects 0.000 description 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000036619 pore blockages Effects 0.000 description 1
- 238000006479 redox reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 229910052814 silicon oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052682 stishovite Inorganic materials 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002411 thermogravimetry Methods 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 229910052905 tridymite Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/075—Ethers or acetals
- A61K31/08—Ethers or acetals acyclic, e.g. paraformaldehyde
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82B—NANOSTRUCTURES FORMED BY MANIPULATION OF INDIVIDUAL ATOMS, MOLECULES, OR LIMITED COLLECTIONS OF ATOMS OR MOLECULES AS DISCRETE UNITS; MANUFACTURE OR TREATMENT THEREOF
- B82B1/00—Nanostructures formed by manipulation of individual atoms or molecules, or limited collections of atoms or molecules as discrete units
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Sistema de liberación controlada activado por oligonucleótidos.La invención describe un nuevo sistema para la liberación controlada, preferiblemente de sustancias activas o de detección, en respuesta a la presencia de oligonucleótidos como estímulo específico. Además se ha desarrollado una preparación de sistemas conteniendo el sistema de liberación controlada descrito anteriormente, junto con un método para la determinación de secuencias de ácidos nucleicos específicas en disoluciones acuosas.
Description
Sistema de liberación controlada activado por
oligonucleótidos.
La invención describe un nuevo sistema para la
liberación controlada, preferiblemente de sustancias activas, en
respuesta a la presencia de oligonucleótidos como estimulo
específico.
Además se ha desarrollado una preparación de una
aplicación de éste sistema, su uso para la detección de
oligonucleótidos y especies biológicas, entre otros, y una
metodología para su utilización.
En las últimas décadas el desarrollo de la
química de coordinación y la química supramolecular ha dado lugar al
nacimiento de nuevos conceptos relacionados con el diseño de
dispositivos a escala nanométrica que permitan liberar sustancias
químicas de forma controlada. El control de la liberación de ciertas
sustancias es muy importante, ya que cuando se pretende liberar
sustancias anticancerígenas, como el Taxol o la Doxorrubicina, se
necesita que exista una liberación de esta sustancia únicamente en
zonas localizadas, en este caso con células tumorales. La respuesta
a eventos que ocurren en sistemas biológicos, de forma que estos
sean autorregulados, ha sido explorada en el desarrollo de
materiales de liberación controlada en respuesta a la relación
glucosa/insulina o modificaciones de pH, o anticuerpos. Sin embargo,
hasta el momento, el uso de la hibridación de ADN o ARN con sus
complementarios no ha sido explorado como estimulo para procesos de
liberación controlada.
Ciertos sistemas de liberación actuales tienen
lugar mediante una simple dispersión, mientras que el mecanismo de
otros sistemas, tales como la biodegradación de soportes poliméricos
requieren disolventes orgánicos durante el proceso de cargado, lo
cual puede afectar a la estructura de la sustancia encapsulada.
Entre el uso de otro tipos de soportes, como
microcápsulas (M. Hamidi, et al., Adv. Drug Delivery
Rev. 2008, 17, 1638;), micelas (C. W. Pouton,
et al., Adv. Drug Delivery Rev. 2008,
17, 625;), vesículas (C. J. F. Rijcken, et al.,
Controlled Release 2007, 120, 131;), o
liposomas (T. L. Andresen, et al., Prog. Lipid Res.
2005, 44, 69), el empleo de soportes mesoporosos
inorgánicos ha sido en comparación poco empleado. Estos soportes
pueden ser sintetizados en una amplia variedad de morfologías con un
tamaño de poro definido, y presentan una elevada superficie
específica. Entre las diferentes óxidos que se pueden utilizar como
soporte, destacan por su uso las sílices porosas del tipo
MCM-41, HMS, MSU-n,
MSU-V, FSM-16,
KSW-2, SBA-n (n = 1, 2, 3, 8,
11-16) UVM-7, UVM-8,
M-UVM-7 o
M-UVM-8. Éstas se caracterizan por
tener un tamaño de partícula comprendido entre 1-100
\mum y una superficie específica de 200-1100
m^{2}/g.
La modificación química de este tipo de
materiales permite desarrollar sistemas de liberación controlada más
sofisticados, ya que se pueden diseñar válvulas moleculares que
contengan en su interior sustancias químicas que pueden ser
transportadas a un sitio específico del organismo y ser liberadas de
forma controlada mediante estímulos externos (Descalzo AB, et
al., Angew. Chem Int Ed 2006, 45,
5924-48; y Ariga K, et al., Chem Rev
2007, 251, 2562-91;) o provocados a
nivel celular. Recientemente se han descrito algunos materiales
funcionalizados con puertas moleculares mediante el empleo de
estructuras sólidas nanoscópicas organizadas (mesoporosos del tipo
MCM-41) en las que se han anclado moléculas
orgánicas funcionales en su superficie externa. De esta manera se
han descrito materiales funcionalizados con puertas moleculares
cuyos ciclos de apertura/cierre están controlados por la presencia
de ciertos aniones, cambios en el pH del medio, temperatura,
reacciones redox y la irradiación con luz (Casasús, R. Et
al., J. Am. Chem. Soc., 2008, 130,
1903-1917; Angelos, S. et al., Angew.
Chem. Int. Ed. 2008, 47,
2222-2226; Fu, Q. et al., Adv. Mater.
2003, 15, 1262; Trewyn, B. G. et al., Acc.
Chem. Res, 2007, 40, 846-853;
Radu, D. R. et al., J. Am. Chem. Soc. 2004,
126, 13216-13217; Slowing, I. I. et
al., Adv. Funct. Mater., 2007, 17,
1225-1236; Liu, N. et al., Nano
Lett., 2004, 4, 551-554;
Vivero-Escoto, J. L. et al., J. Am. Chem.
Soc., 2009, 131, 3462-3463 y
Aznar, E. et al., J. Am. Chem. Soc., 2009,
131, 6833-6843). Adicionalmente, hay muy
pocos materiales híbridos con puertas moleculares que muestren una
liberación selectiva en presencia de bio-moléculas,
pero en ningún caso ha sido descrito un sistema parecido en el que
el estimulo sea la presencia de un oligonucleótido (AND o ARN). Asi,
muy recientemente, se han descrito tres ejemplos de materiales
silíceos cuya carga es liberada en presencia de una enzima que es
capaz de hidrolizar determinados enlaces en las moléculas orgánicas
que actúan como puerta (Patel, K. et al., J. Am. Chem.
Soc., 2008, 130, 2382-2383;
Schlossbauer, A. et al., Angew. Chem. Int. Ed.,
2009, 48, 3092-3095 y Bernardos, A.
et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2009, 48,
5884-5887), y un ejemplo en el cual se emplean
anticuerpos que interaccionan con un hapteno anclado a la superficie
del material y que permiten la liberación de especies bioactivas en
presencia del antigeno correspondiente, debido a que la afinidad del
anticuerpo por el antigeno es mayor que por el hapteno anclado a la
superficie del material híbrido diseñado (Climent, E. et
al., J. Am. Chem. Soc., 2009, 131,
14075-14080).
14075-14080).
De entre los sistemas patentados existentes, en
las patentes descritas por J. Zink, F. Stoddart y colaboradores (WO
2009/094580 y WO 2009/097439) utilizan nanodispositivos para
producir una liberación controlada empleando reacciones de
oxidación-reducción o cambios de pH como estímulos
para el mecanismo de apertura/cierre, mientras que en otros
ejemplos, tales como los descritos por V. Lin y colaboradores en
US2006/154069 o US2009/0252811 utilizan nanopartículas de CdS o
diferentes polímeros para recubrir el material sintetizado. Así, no
existen demasiados estímulos específicos descritos para producir
nuevos sistemas de liberación controlada, siendo un campo que debido
a sus potenciales aplicaciones es de gran interés.
La invención se encuentra dentro del campo del
diseño de sistemas de liberación controlada en respuesta a estímulos
externos específicos. Debido a que el empleo de ácidos nucleicos no
ha sido descrito como un estimulo específico en la liberación
controlada de sustancias bio-activas, la presente
invención combina el uso de contenedores de sustancias activas con
ácidos nucleicos para desarrollar un nuevo sistema de liberación
controlada.
En esta invención, el sistema se basa en la
modificación superficial del material que contiene la sustancia
activa, el cual por interacción supramolecular bloquea la salida de
los poros del material mediante un oligonucleótido, inhibiendo su
liberación. La interfase entre el soporte y el oligonucleótido se
produce a través de un grupo coordinante unido al material
contenedor por enlace covalente y por interacción supramolecular al
oligonucleótido. El sistema es activado al ponerlo en contacto con
una disolución que contenga el ácido nucleico complementario,
preferiblemente en condiciones ensayadas, para que se produzca una
hibridación entre ambas cadenas de nucleótidos y de esa manera se
abrirá el poro y se producirá una salida de la sustancia activa del
interior del nanodispositivo sólido.
Según el contenido del soporte, se puede aplicar
la liberación del mismo para la detección de una hibridación del
oligonucleótido que tapa los poros del soporte ó se puede aplicar a
la liberación controlada de una sustancia activa biológica cuando
haya una hibridación del oligonucleótido.
Otro objeto de la presente invención es el
procedimiento para la preparación de sistemas conteniendo el sistema
de liberación controlada descrito en los párrafos anteriores.
Además, es objeto de la presente invención el
desarrollo de un método para la determinación de secuencias de
ácidos nucleicos específicas en disoluciones acuosas.
Se considera incluidos en esta descripción por
referencia los distintos modos particulares de llevar a cabo esta
invención definidos por las reivindicaciones dependientes 2 a 14, 16
a 18, 20 a 23 y 25 a 27.
Se complementa la presente memoria descriptiva
con un plano, ilustrativo de un ejemplo preferente y nunca
limitativo de la invención.
La Figura 1 muestra una realización preferente
de la invención, indicando un conjunto de un nanodispositivo, en
este caso del tipo MCM-41, cargado con fluoresceína
y modificado superficialmente por reacción con
aminopropiltrietoxisilano, que a su vez está unido a un
oligonucleótido por interacciones supramoleculares.
La Figura 2 representa la reacción del
oligonucleótido unido al nanodispositivo en presencia de su
oligonucleótido completamente complementario, llevando a una
hibridación más específica y dejando libre los poros del
nanodispositivo, liberando la fluoresceína contenido del mismo.
La Figura 3 compara la reacción del
oligonucleótido unido al nanodispositivo con varios
oligonucleótidos, medido en la variación de la fluorescencia de la
disolución medida a 516 nm (\lambda_{exc} 419 nm) según la
cantidad de fluoresceína liberada tras la hibridación.
El primer objeto de la presente invención es un
nuevo sistema de apertura activado por la presencia de
oligonucleótidos específicos y que pueda ser aplicado en nuevos
formatos de detección o en procesos de liberación controlada,
dependiendo del contenido del soporte.
Este sistema se basa en el bloqueo de los poros
del soporte mediante un oligonucleótido, conteniendo de esta forma
la sustancia activa dentro del soporte. Para la activación de la
liberación de la sustancia se produce en presencia del un segundo
oligonucleótido activante y complementario a este primer
oligonucleótido, fijado al soporte. Como la hibridación del segundo
oligonucleótido con el primer oligonucleótido es una interacción más
fuerte que la existente con el material contenedor de la sustancia
activa, la hibridación desbloquea la salida de los poros liberando
la sustancia dentro del soporte.
La interacción del primer oligonucleótido que se
tiene que fijar al soporte, se produce con este mismo a través de
interacciones supramoleculares, preferentemente electrostáticas con
el material que contiene la sustancia a liberar.
Obtenemos mediante este sistema una innovadora
aproximación para el desarrollo de sistemas de liberación
controlada, que es además de gran selectividad dado que se basa en
la hibridación de hebras complementarias de ADN ó ARN.
En una realización particular, el sistema se
encuentra compuesto por:
- un soporte poroso con capacidad para contener
la sustancia activa o el indicador;
- una capa interfaz entre el soporte poroso y el
oligonucleótido que asegura su fijación en la superficie y
- el oligonucleótido complementario de aquel que
se desea reconocer, el cual se encuentra adsorbido a la superficie
por interacciones supramoleculares (tales como interacciones
electrostáticas) bloqueando la liberación de la sustancia
activa.
\vskip1.000000\baselineskip
El soporte puede estar formado por metales,
semiconductores, polímeros orgánicos, carbones u óxidos,
preferiblemente de diferentes especies inorgánicas, tales como el
titanio, zirconio, silicio, magnesio o boro. Entre las sílices de
elevada superficie específica que se pueden emplear como soporte,
existe el tipo MCM-41, HMS, MSU-n,
MSU-V, FSM-16,
KSW-2, SBA-n (n= 1, 2, 3, 8,
11-16) UVM-7, UVM-8,
M-UVM-7 o
M-UVM-8, entre otros.
Preferiblemente se ha usado el soporte MCM-41.
La capa interfaz se encuentra unida
covalentemente al soporte y es capaz de dar interacciones
supramoleculares, preferentemente electrostáticas, con el
oligonucleótido.
La elección del soporte ha de realizarse
teniendo en cuenta su compatibilidad con la sustancia activa a
liberar y la posibilidad de modificación superficial con la capa de
interfaz. La interacción entre esta capa y el oligonucleótido ha de
ser lo suficientemente fuerte para evitar la separación del
oligonucleótido bloqueante en ausencia del oligonucleótido activador
y complementario al 100%, pero lo suficientemente débil en
comparación con la hibridación entre los oligonucleótidos para que
en presencia del activador se produzca la liberación. Así pues, es
fundamental seleccionar la especie, topología y concentración
superficial en la composición de la capa interfaz.
En relación con el oligonucleótido bloqueante,
este puede ser una cadena de ADN o ARN formada por entre 10 y 50
nucleótidos. En una realización particular, dichos nucleótidos
pueden ir unidos de forma covalente a otras partículas inorgánicas,
tales como nanopartículas de sulfuro de cadmio o nanopartículas
magnéticas.
Los sistemas así desarrollados pueden formar
parte de polímeros o andamios para, entre otras aplicaciones,
regeneración tisular o diferenciación celular, dependiendo de la
sustancia activa biológica presente en el soporte y que es liberada
tras la hibridación de los oligonucleótidos. Si el soporte comprende
un indicador, colorante, sustancia fluorescente, o parecido, su
liberación puede ser utilizada para la detección del
oligonucleótido, tanto para su seguimiento como para su
cuantificación.
En una realización preferente el soporte es de
tipo óxido de silicio mesoporoso y la capa interfaz consiste en una
capa de compuestos con carga positiva al pH de ensayo del sistema,
tales como aminas o sales de guanidinio, y el oligonucleótido está
formado por cadenas de ADN o ARN de entre 15 y 30 nucleótidos.
El segundo aspecto de la invención hace
referencia al procedimiento para la preparación de los sistemas de
liberación controlada. Dicho procedimiento comprende las siguientes
etapas:
a) Suspender en una disolución acuosa
conteniendo el oligonucleótido un material poroso capaz de formar
interacciones supramoleculares con oligonucleótidos;
b) Agitar entre 10 minutos y 3 horas,
preferentemente 30 minutos, la suspensión manteniendo
simultáneamente la temperatura constante entre 15 y 50ºC,
preferentemente a 37ºC;
c) Eliminar la disolución, preferentemente
mediante centrifugación durante 5 minutos a 5.000 rpm y
d) Lavar con disolución acuosa.
\vskip1.000000\baselineskip
Aunque se pueden utilizar diferentes medios como
disolución acuosa, son preferidos los medios tamponados a pH
fisiológico, en especial a pH 7.5 con una mezcla MgCl_{2} 37.5 mM,
Tris-HCl 20 mM.
En tercer lugar, la invención comprende el uso
de los sistemas de liberación controlada anteriormente expuestos
para la determinación de cadenas de oligonucleótidos -en el caso de
que los materiales se hallen cargados con indicadores, colorantes,
sustancias fluorescentes o parecidos- o para la liberación
controlada en respuesta a la presencia de oligonucleótidos en
disolución para la liberación de otras sustancias activas (fármacos,
biocidas, etc.) en medios celulares, o sistemas biológicos.
Finalmente, se encuentra comprendido en la
invención el procedimiento para la detección de oligonucleótidos que
comprende las siguientes etapas:
a) Suspender en disolución acuosa el material
con propiedades de liberación controlada;
b) Mezclar la disolución a ensayar que contiene
el oligonucleótido con la disolución preparada en la etapa a) y
c) Medir la señal macroscópica producida en la
etapa b) y opcionalmente cuantificar dicha señal por interpolación
en una curva de calibrado. La señal producida dependerá del
indicador presente en el soporte y liberado por la hibridación de
los oligonucleótidos. Por ejemplo, se podría medir la absorbancia,
la fluorescencia, etc.
\vskip1.000000\baselineskip
Aunque se pueden utilizar diferentes medios como
disolución acuosa, son preferidos los medios tamponados a pH
fisiológico, en especial a pH 7.5 con una mezcla MgCl_{2} 37.5 mM,
Tris-HCl 20 mM.
Los siguientes ejemplos ilustran la
invención.
Ejemplo
1
En una realización concreta de la invención se
pesaron 5 mg de un soporte tipo MCM-41 cargado con
fluoresceína y modificado superficialmente con
aminopropiltrietoxisilano (concentración de aminas determinada por
análisis termogravimétrico 1.98 mmoles/g SiO_{2}) y se
suspendieron en 5 mL de una disolución tamponada a pH 7.5
(MgCl_{2} 37.5 mM, Tris-HCl 20 mM) y conteniendo
el oligonucleótido O-1
(5'-AATGCTAGCTAAT CAATCGGG-3') en
una concentración de 20 nmol/g sólido y se dejó agitar a 37ºC
durante media hora. A continuación se centrifugó la suspensión
durante 5 minutos a 5000 rpm y se separó la disolución, lavando el
sólido con 5 mL de la disolución tamponada. Esta suspensión se
separó nuevamente por centrifugación, obteniendo así el conjunto
S1.
En la figura 1 se muestra un esquema de este
conjunto S1 obtenido, donde el 1.1 es el primer oligonucleótido
O-1, indicado en detalle en la parte inferior de la
figura; 1.2 es la cadena de aminopropilsilano generada por la
reacción del aminopropilatrietoxisilano con la superficie del
soporte, indicado en detalle en la parte inferior a la derecha; 1.3
es el soporte MCM-41; 1.4 es la fluoresceína
contenida en los poros del soporte, indicado en detalle en la parte
superior a la derecha; y 1.5 indica el conjunto S1.
Para la caracterización y cuantificación del
conjunto S1 se utilizo un oligonucleótido O-1'
(5'-AATGCTAGC
TAATCAATCGGG-Cy5-3', marcado con Cy5 en el extremo 3', unido al soporte mediante el mecanismo anteriormente descrito. La cuantificación se realizó mediante el cálculo de la fluorescencia de la disolución después de producirse el anclado al sólido, teniendo un contenido de 17 nanomoles/g sólido.
TAATCAATCGGG-Cy5-3', marcado con Cy5 en el extremo 3', unido al soporte mediante el mecanismo anteriormente descrito. La cuantificación se realizó mediante el cálculo de la fluorescencia de la disolución después de producirse el anclado al sólido, teniendo un contenido de 17 nanomoles/g sólido.
Ejemplo
2
En una realización concreta de la invención se
suspendieron 5 mg del conjunto S1 descrito anteriormente en 5 mL de
la disolución tamponada a pH 7.5 (MgCl_{2} 37.5 mM,
Tris-HCl 20 mM). De ésta suspensión se pipetearon
100 \muL y se le añadieron 300 \muL de la disolución tamponada
conteniendo el oligonucleótido O-2
(5'-CCCGATTGAT
TAGCTAGCATT-3') en concentración 15 nmol/g sólido, el cual es complementario al 100% con el oligonucleótido O-1 unido al soporte. En la Figura 2 se ilustra el funcionamiento de la hibridación del oligonucleótido O-1 unido al soporte en presencia del oligonucleótido O-2 100% complementario. Al hibridarse las dos hebras de los que comprenden los oligonucleótidos, se destapa el poro del soporte y se libera la sustancia que estaba contenido en el mismo. Se han utilizado las mismas indicaciones numéricas para los mismos componentes comprendidos en la Figura 1 y se ha añadido 2.1 que indica el oligonucleótido O-2, complementario al 100% con el oligonucleótido O-1; 2.2 es la hebra que forman los oligonucleótidos O-1 y O-2 después de su hibridación, destapando el poro del soporte 1.3, dejando el aminopropiltrietoxisilano 1.2 anclado al soporte y liberando la fluoresceína 1.4 contenida en los poros del soporte 1.3.
TAGCTAGCATT-3') en concentración 15 nmol/g sólido, el cual es complementario al 100% con el oligonucleótido O-1 unido al soporte. En la Figura 2 se ilustra el funcionamiento de la hibridación del oligonucleótido O-1 unido al soporte en presencia del oligonucleótido O-2 100% complementario. Al hibridarse las dos hebras de los que comprenden los oligonucleótidos, se destapa el poro del soporte y se libera la sustancia que estaba contenido en el mismo. Se han utilizado las mismas indicaciones numéricas para los mismos componentes comprendidos en la Figura 1 y se ha añadido 2.1 que indica el oligonucleótido O-2, complementario al 100% con el oligonucleótido O-1; 2.2 es la hebra que forman los oligonucleótidos O-1 y O-2 después de su hibridación, destapando el poro del soporte 1.3, dejando el aminopropiltrietoxisilano 1.2 anclado al soporte y liberando la fluoresceína 1.4 contenida en los poros del soporte 1.3.
Esta experiencia se repitió en presencia del
oligonucleótido O-3
(5'-CCCGATTGATTCTCTAGCATT-3', con
dos bases diferentes respecto al oligonucleótido O-2
en posición central, ó en presencia del oligonucleótido
O-4
(5'-CCCGATTGATTGGCTAGCATT-3', con
solo una base diferente respecto al oligonucleótido
O-2 en posición central) en la misma concentración,
ó en ausencia de cualquier nucleótido.
Se midió la intensidad de la fluorescencia
durante un total de 180 minutos. Los resultados se ilustran en la
Figura 3, donde a) representa la fluorescencia medida añadiendo el
oligonucleótido O-2; b) representa la fluorescencia
medida añadiendo el oligonucleótido O-3; c)
representa la fluorescencia medida añadiendo el oligonucleótido
O-4 y d) representa la fluorescencia medida en
ausencia de cualquier nucleótido, pero si añadiendo el resto de los
componentes de la mezcla. Se observa una ligera liberación del
contenido de los poros incluso cuando no hay ningún nucleótido
presente, por lo que puede haber un pequeño e insignificante
degradación de la unión del oligonucleótido O-1 con
el soporte. La liberación del contenido de los poros es luego mucho
menor al añadir el oligonucleótido O-4 con respecto
a la liberación con la presencia del oligonucleótido
O-3. La respuesta más eficaz se observa añadiendo el
oligonucleótido O-2, indicando la especificidad del
oligonucleótido O-1 para hibridar con su pareja
complementaria al completo y a un nivel significativamente menor con
oligonucleótidos que se difieren en uno u dos bases.
Todas estas realizaciones no son limitativas y
presentan ejemplos de las posibilidades de la invención.
Claims (20)
1. Un sistema de liberación controlada
caracterizado por que el sistema comprende un soporte poroso
con capacidad para contener una sustancia activa o un indicador, un
oligonucleótido bloqueante de los poros del soporte y una capa
interfaz entre el soporte poroso y el oligonucleótido que asegura la
fijación entre estos elementos, en el que la liberación de la
sustancia activa se produce por hibridación del oligonucleótido
bloqueante de los poros con su oligonucleótido complementario.
2. Un sistema de liberación controlada según la
reivindicación 1 caracterizado por que el oligonucleótido
unido a y tapando poros de un soporte se encuentra unido a la
superficie del soporte mediante interacciones supramoleculares.
3. Un sistema de liberación controlada según la
reivindicación 2 caracterizado por que la unión entre el
oligonucleótido y la superficie del soporte se debe a fuerzas
electrostáticas.
4. Un sistema de liberación controlada según
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 caracterizado por
que la unión entre el oligonucleótido y el soporte es tal que
permite por un lado unir un oligonucleótido a la superficie del
soporte, bloqueando los poros del soporte y por otro lado permite
hibridar el oligonucleótido unido al soporte con el oligonucleótido
complementario.
5. Un sistema de liberación controlada según la
reivindicación 1 caracterizado por que el soporte poroso está
compuesto por metales, semiconductores, polímeros orgánicos,
carbones u óxidos de especies tales como el 5 silicio, aluminio,
titanio, zirconio, magnesio o boro.
6. Un sistema de liberación controlada según la
reivindicación 5 caracterizado por que el soporte poroso es
una sílice tipo MCM-41, HMS, MSU-n,
MSU-V, FSM-16,
KSW-2, SBA-n (n =
1,2,3,8,11-16) UVM-7,
UVM-8, M-UVM-7 o
MUVM-8.
7. Un sistema de liberación controlada según
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 caracterizado por
que el oligonucleótido bloqueante de los poros del soporte es una
cadena de ADN o ARN formada por entre 10 y 50 nucleótidos.
8. Un sistema de liberación controlada según
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 caracterizado por
que el oligonucleótido bloqueante de los poros del soporte es
complementario a un oligonucleótido a ser detectado.
9. Un sistema de liberación controlada según
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 caracterizado por
que el oligonucleótido bloqueante de los poros del soporte puede ir
unido de forma covalente a otras partículas inorgánicas, tales como
nanopartículas de sulfuro de cadmio o nanopartículas magnéticas.
10. Un sistema de liberación controlada según
la reivindicación 4 caracterizado por que la capa interfaz
está compuesta por compuestos con carga positiva covalentemente
unidos a la superficie del soporte poroso.
11. Un sistema de liberación controlada según la
reivindicación 10 caracterizado por que los compuestos con
carga positiva comprendidos en la capa interfaz son aminas, sales de
amonio o sales de guanidinio.
12. Un sistema de liberación controlada según
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 caracterizado por
que comprende además un polímero o andamio.
13. Procedimiento de preparación de un sistema
de liberación controlada según las reivindicaciones 1 a 12,
caracterizado porque comprende:
- a)
- Suspender en una disolución acuosa conteniendo el oligonucleótido un material poroso capaz de formar interacciones supramoleculares con oligonucleótidos;
- b)
- Agitar entre 10 minutos y 3 horas, la suspensión manteniendo simultáneamente la temperatura constante entre 15 y 50ºC;
- c)
- Eliminar la disolución y
- d)
- Lavar con disolución acuosa.
\vskip1.000000\baselineskip
14. Procedimiento según la reivindicación 13,
caracterizado por que la disolución se agita durante 30
minutos y se mantiene la suspensión a una temperatura constante de
37ºC en el paso b) y se elimina la disolución mediante
centrifugación durante 5 minutos a 5000 rpm en el paso c).
15. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 13 o 14, caracterizado por que la disolución
acuosa está tamponada.
16. Procedimiento según la reivindicación 15,
caracterizado por que la disolución acuosa tamponada tiene un
pH de 7.5 y comprende una mezcla de MgCl_{2} 37.5 mM y
Tris-HCl 20 mM.
17. Uso de un sistema de liberación controlada
descrito en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 para la
detección de oligonucleótidos, especies biológicas o restos de
especies biológicas.
18. Uso de un sistema de liberación controlada
descrito en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 para la
liberación de sustancias activas en disolución.
19. Uso de un sistema de liberación controlada
según la reivindicación 13, donde la disolución acuosa es un medio
celular o biológico.
20. Uso de un sistema de liberación controlada
según la reivindicación 18 donde la sustancia a liberar es un
fármaco, un biocída, o un aroma.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ES201000900A ES2377298B1 (es) | 2010-07-12 | 2010-07-12 | Sistema de liberación controlada activado por oligonucleótidos. |
| PCT/ES2011/070507 WO2012007623A2 (es) | 2010-07-12 | 2011-07-08 | Sistema de liberación controlada activado por oligonucleótidos |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ES201000900A ES2377298B1 (es) | 2010-07-12 | 2010-07-12 | Sistema de liberación controlada activado por oligonucleótidos. |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2377298A1 true ES2377298A1 (es) | 2012-03-26 |
| ES2377298B1 ES2377298B1 (es) | 2013-08-13 |
Family
ID=45469850
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES201000900A Active ES2377298B1 (es) | 2010-07-12 | 2010-07-12 | Sistema de liberación controlada activado por oligonucleótidos. |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| ES (1) | ES2377298B1 (es) |
| WO (1) | WO2012007623A2 (es) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2692165B2 (es) * | 2018-05-29 | 2019-04-08 | Univ Valencia Politecnica | Sistema de liberacion controlada y metodo de preparacion del mismo |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005009602A2 (en) * | 2003-07-22 | 2005-02-03 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Capped mesoporous silicates |
-
2010
- 2010-07-12 ES ES201000900A patent/ES2377298B1/es active Active
-
2011
- 2011-07-08 WO PCT/ES2011/070507 patent/WO2012007623A2/es active Application Filing
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005009602A2 (en) * | 2003-07-22 | 2005-02-03 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Capped mesoporous silicates |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| CLIMENT, E., BERNARDOS, A., MARTÍNEZ-MAÑEZ,R. et al. Controlled Delivery Systems UsingAntibody-Capped Mesoporous Nanocontainers.Journal of the American Chemical Society. 9de Septiembre de 2009. Vol 131,Nº 39, páginas14075-14080. * |
| SADASIVAN, S., DUJARDIN, E., LI,M. ET AL. DNA-Driven Assembly of Mesoporoussilica/Gold Satellite Nanostructures. Small.Enero de 2005. Vol 1, Nº 1. Páginas 103-106.ISSN 1613-6810 * |
| SOLBERG, S.M., LANDRY, C. C.,Adsorption of DNA into Mesoporous Silica. Journalof Physical Chemistry B. 10 de Agosto de 2006.Vol 110, Nº 31 Páginas 15261 ¿ 15268. ISSN1520-6106 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2012007623A3 (es) | 2012-03-08 |
| ES2377298B1 (es) | 2013-08-13 |
| WO2012007623A2 (es) | 2012-01-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Liao et al. | Programmed pH-responsive microcapsules for the controlled release of CdSe/ZnS quantum dots | |
| Yánez-Sedeño et al. | Janus particles for (bio) sensing | |
| Slowing et al. | Mesoporous silica nanoparticles: structural design and applications | |
| Cauda et al. | Multiple core− shell functionalized colloidal mesoporous silica nanoparticles | |
| Douroumis et al. | Mesoporous silica nanoparticles in nanotechnology | |
| Kecht et al. | Selective functionalization of the outer and inner surfaces in mesoporous silica nanoparticles | |
| Slowing et al. | Mesoporous silica nanoparticles for drug delivery and biosensing applications | |
| Klichko et al. | Mesostructured silica for optical functionality, nanomachines, and drug delivery | |
| Angelos et al. | Photo-driven expulsion of molecules from mesostructured silica nanoparticles | |
| AU2002330668B2 (en) | Synthesis and use of organosilica particles | |
| JP2005062178A (ja) | 酸素感知粒子のマイクロカプセル化 | |
| JP7501884B2 (ja) | 有機ポリマーコア、磁性材料を組み込む第１無機酸化物シェル、及びメソポーラス第２無機シェルから成る粒子 | |
| Oh et al. | New approach to the immobilization of glucose oxidase on non-porous silica microspheres functionalized by (3-aminopropyl) trimethoxysilane (APTMS) | |
| Liu et al. | An NIR-light-responsive surface molecularly imprinted polymer for photoregulated drug release in aqueous solution through porcine tissue | |
| Sedighi et al. | Rapid immobilization of oligonucleotides at high density on semiconductor quantum dots and gold nanoparticles | |
| Ramon-Marquez et al. | A multifunctional material based on co-electrospinning for developing biosensors with optical oxygen transduction | |
| Tobias et al. | Polystyrene microparticles with convergently grown mesoporous silica shells as a promising tool for multiplexed bioanalytical assays | |
| Zhang et al. | Highly sensitive glass nanopipette sensor using composite probes of DNA-functionalized metal–organic frameworks | |
| ES2702999B2 (es) | Material poroso para la detección de Candida albicans, método de diagnóstico que lo utiliza y método de preparación del mismo | |
| JP2018535651A (ja) | 診断方法および装置 | |
| Kim et al. | Biocompatible amphiphilic Janus nanoparticles with enhanced interfacial properties for colloidal surfactants | |
| ES2377298A1 (es) | Sistema de liberación controlada activado por oligonucleótidos. | |
| Zhang et al. | Facile preparation of polydiacetylene-based uniform porous fluorescent microspheres for potential immunoassay applications | |
| Li et al. | orthogonal adsorption of carbon dots and DNA on nanoceria | |
| WO2009040843A2 (en) | Preparation of micro or nano systems detectable in biological environments based on inorganic oxides with controlled porosity for carrying biologically active or activable substances |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FG2A | Definitive protection |
Ref document number: 2377298 Country of ref document: ES Kind code of ref document: B1 Effective date: 20130813 |