ES2351449B1 - Procedimiento para la producción de una especie de parasitoide autóctono y utilización del mismo para el control de lepidópteros plaga de cultivos. - Google Patents

Procedimiento para la producción de una especie de parasitoide autóctono y utilización del mismo para el control de lepidópteros plaga de cultivos. Download PDF

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Abstract

En general, la presente invención se refiere a un procedimiento para la producción y a la utilización de una especie de parasitoide autóctono para el control biológico de lepidópteros plaga de cultivos. En particular, la presente invención se refiere a un procedimiento de producción y a la utilización de la especie autóctona Trichogramma achaeae Nagaraja & Nagarkatti (Hym.: Trichogrammatidae), parasitoide de huevos de lepidópteros, en programas de control biológico, en especial para el control del lepidóptero exótico Tuta absoluta (Meyrick) (Lep.: Gelechiidae) y otras especies del género Chrysodeixis y Helicoverpa (Lep.: Noctuidae).

Description

Procedimiento para la producción de una especie de parasitoide autóctono de la especie Trichogramma achaeae y su utilización para el control de lepidópteros plaga de cultivos.
En general,la presenteinvención se refierea un procedimiento parala producciónyala utilizaciónde una especie de parasitoide autóctonoparaelcontrol biológicode lepidópterosplagadecultivos.En particular,lapresenteinvención se refiereaun procedimientode producciónyala utilizacióndela especie autóctona Trichogramma achaeae Nagaraja &Nagarkatti (Hym.Trichogrammatidae), parasitoide de huevos de lepidópteros, en programas de control biológico, en especial para el control del lepidóptero exótico Tuta absoluta (Meyrick) (Lep.: Gelechiidae)y otras especies del género Chrysodeixis yHelicoverpa (Lep.: Noctuidae).
La introducción de programas biológicos que emplean especies de artrópodos como agentes de control viene despertando, desde la segunda mitad del siglo XX, un continuo interés por parte de los productores de una amplia gama de cultivos, en particular de regiones geográficas cálidas, como es la cuenca Mediterránea.Tanto es así, que esta práctica ha pasado de una gestión conducida de forma amateur por los agricultores individuales a articularse bajo grandesexplotaciones comerciales,donde las compañías internacionales producen los agentes beneficiosos en grandes cantidades durante todo el año, agentes que son suministrados a los países a escala mundial.
Así, la práctica del control biológico está creciendo constantemente, año tras año, de acuerdo con la creciente demanda de productos alimenticios libres de residuos químicos por parte de los legisladores gubernamentales sobre saludy seguridad, las empresas mayoristasy sus clientesal por menor.
Los beneficios obtenidosporlos productoresylos consumidores como consecuenciadela correspondiente disminución enel usode plaguicidas químicos sonevidentesybastante considerables.
Un aspecto importante de la lucha biológica donde se emplean entomófagos (parasitoidesy depredadores)viene determinado por las características biológicas de la población o de las poblaciones utilizadas. Así, en numerosas ocasiones se ha demostrado que la aplicación del concepto de especie taxonómica (basada sólo en caracteres morfológicos) es insuficiente para conseguir un agente de control biológico eficaz (SchlingeryDoutt, 1984;Waterhouse, 1998; Huberycol., 2001;WaterhouseySands, 2001; Driescheycol., 2007).Aeste respecto, la eficacia del control biológicoviene determinadaentreotros parámetros,porlaampliavariabilidadgenéticaparauna determinadaespecie, produciéndose una adaptacióna las condiciones geográficas locales que resulta en unas múltiplesy variadas característicasen cuantoala biología,la ecologíaola proporción huésped/presa.Así, debidoatalvariabilidad,la efectividad también es muy diferente cuando el agente se aplica como agente de lucha biológica.
A estohayque añadirquelaexistenciade especies hermanas (“sibling species”)y especies crípticas (“cryptic species”), ambas presentando caracteres morfológicos idénticos pero con comportamientos biológicos totalmente distintos,haprovocadoque,encasos concretosde utilizacióncomoagentesdeluchabiológica,seproduzcanimportantes fracasos, tanto cuando se aplican estos agentes como parasitoidesy como depredadores (Schlingery Doutt, 1984; Waterhouse, 1998; Huberycol., 2001;WaterhouseySands, 2001; Driescheycol., 2007). Estos efectos anterioreshan sido documentados en la utilización de al menos una especie del género Trichogramma (Soratiycol., 1996; Thomson ycol., 2004).
En el sureste Español, en particular en los últimos años, se ha producido un rápido aumento de la superficie de cultivos en los cuales se aplican programas de control integrado de plagas. En concreto en Almería, que es una de las mayores zonas productoras de hortalizas de Europa, la superficie donde se practica un control integrado ha aumentado de 1.400 hectáreas en la campaña 2006/07 hasta más de 18.000 hectáreas en 2008/09. Este incremento de los programas de control integrado de plagas plantea un reto sin precedentesy es especialmente necesario paraque el sector hortícola almeriense continúe siendo competitivo en vista de la evolución de los mercados. Sin embargo, la aplicacióndel controlintegradodeplagasnosehallevadoacaboporigualenlos diferentescultivos.Por ejemplo,en los cultivos de tomate de invernadero el control biológico se aplica todavía en un bajo porcentaje. Además, para este tipo de cultivo, recientemente ha aparecido una plaga exótica, el lepidóptero Tuta absoluta, que está causando graves problemasyparala que, hastala fecha, noexiste en España una solución satisfactoria.
Tuta absoluta sehaextendido desde América Central haciala mayor partede América del Sury es considerada unadelas principalesplagasdeltomateydeotras solanáceas(EPPO,2005).Su controlquímicoes difícilpordiversas razones. En primer lugar debido a la biología del lepidóptero Tuta absoluta, ya que las larvas se localizan dentro delashojasodelosfrutos(BrancoyFranca,1993;Urbanejaycol.,2007),loqueprovocala necesidaddeunuso intensivodel control químico.Ensegundolugar,debidoalaapariciónderesistenciasalas materiasactivashastaahora empleadas (EPPO,2005). Por ello,varios paísesde Suramérica han desarrolladoyaplicadoel control biológicode la especie plaga con especies de parasitoides oófagos, en especial con Trichogramma pretiosum (Riley)y T. nerudai PintureauyGerding (RiquelmeyBotto, 2003,ParrayZucchim, 2004, Bueno, 2005;Fariaycol. 2008).
Tuta absoluta seintrodujoen Castellón,España,en2006, dispersándosedesdela ComunidadValencianaaMurcia eIbiza (Urbanejaycol.,2007;EPPO,2008)yen2008seobservaronlos primerosataquesencultivoseninvernaderos de Almería. La plagaha desarrollado una gran severidad en las últimas campañas en cultivos de tomate en invernaderos deláreadeMurcia(Lucasycol.,2009).Seestáextendiendorápidamenteportodoelpaís, incluyendolasIslasCanarias,ytambiénporotrospaísesEuropeos,donde tambiénestáprovocandodaños,aunqueporahora menosgraves.En España se han evaluado diversos depredadores autóctonos para el control de Tuta absoluta, por ejemplo mediante la utilización de las chinches depredadoras Nesidiocoris tenuis (Reuter)y Macrolophus pygmaeus (Rambur) (Urbaneja ycol., 2008), pero ninguno de estos depredadores es capaz de proporcionar un control satisfactorio deTuta absoluta. Las especies de parasitoides disponibles comercialmente para el control de esta plaga proceden de Suraméricay son exóticas en Europa; por ello, su introducción en España constituiría un riesgo medioambiental.
Por tanto, existe una gran necesidad de encontrar una solución para esta plaga de cuarentena, que puede poner en riesgo lasexportacionesde tomates.Es especialmente necesariala posibilidadde disponerde una especie autóctonay, portantosinriesgosparaelmedio ambiente,quepuedallevaracaboun control adecuado.Además,estaespeciedebe ser relativamente fácilde criaragran escala,de formaquepueda estardisponibleenlas cantidades necesariasy aun precio asequible para los agricultores.
Según un primer aspecto de la invención, un objeto de la misma es la producción a escala comercial de la especie de parasitoide autóctona Trichogramma achaeae mediante la utilización de un nuevo procedimiento de cría.
Enunsegundo aspecto,lainvenciónse refiereala utilizacióndela especiede parasitoide autóctona Trichogramma achaeae para el control de lepidópteros plaga de cultivos. Por tanto, otro objeto de la invención es la utilización de la especie de parasitoide autóctona Trichogramma achaeae producida según el primer aspecto de la invención para el control de lepidópteros plaga de cultivos.
La introducción de la utilización comercial de esta especie en España incrementará la cartera de agentes biológicos disponibles para el control de lepidópteros, ofreciendo soluciones para determinadas plagas para las que, hasta la fecha, no se habían encontrado métodos satisfactoriosde control,ygenerandoal mismo tiempo, para otras plagasque sí disponían de enemigos naturales, competencia entre los productores, reduciendo de esta manera los costes para los agricultores.
Personas cualificadas de la firma solicitante han evaluado las diferentes especies de parasitoides autóctonas que podrían ser fácilmente criadas a gran escala (unas 50 especies). De entre ellas, se ha seleccionado la especie autóctona
T. achaeae. Esta especie presenta una amplia distribución mundial. T. achaeae ha sido descrita en Asia (China, IndiayRusia),Europa (Francia,Rusia),África(CaboVerde)yenelNuevoMundo(Argentina, Barbados,Chile,Trinidady Tobago, U.S.A.)yrecientemente en España.T. achaeae es una especie parasitoide de huevos de 26 especies de lepidópteros pertenecientesa10familias:Gelechiidae, Geometridae, Noctuidae, Notodontidae, Oecophoridae, Pieridae, Pyralidae, Sphingidae,TortricidaeyYponomeutidae (Polaszek, datos no publicados). T. achaeae sehaevaluado como agente de control biológico de diferentes lepidópteros plaga (Jalaliy col., 2001; JalaliySingh, 2002; Jalaliy col., 2002; Chandrashekharycol.,2003;YadavyAnand, 2003).
Para la selección del material biológico adecuado (3 poblaciones o “strains” del agente parasitoide) la solicitante ha encontradoque estas poblacionesse diferencian entresí,y con respectoa otras descritasenla literatura,por sus diferentes características biológicas,evaluadasporlos parámetrosde sus tablasde vida,yporel porcentajedeparasitismo sobre las especies de lepidópteros plaga. Además, dichas poblaciones, pertenecientes a una misma especie, pueden ser fácilyrápidamente diferenciadas empleando una combinacióndela técnica PCRyla digestión con endonucleasas de restricción de los fragmentos amplificados. Cada población del parasitoide posee una actividad parasítica característica para los huevos de Tuta absoluta que determina una diferente mortalidad inducida(expresadaporlaTasa Marginal de Ataque). La mezcla de dos o más de dichas poblaciones tiene una actividad parasítica significativamente mayor quelade los genotipos individuales. Esto se debeala mezclayapareamiento selectivosde los adultosde cada población, lo cual se lleva a cabo con una generación anterior a la de su utilización, en condiciones de campo, con el objetivo de aplicarlos como agentes de lucha biológica, obteniéndose así un vigor híbrido.
T. achaeae cumple todos los requisitos para el éxito del desarrollo comercial, ya que se trata de un sistema simple, fiableybarato que aporta grandes poblaciones sostenibles para su utilización como parasitoide de plagas agrícolas, siendo además una especiede cría rápidayeconómica.
A este respecto, T. achaeae se cría de forma sencilla, como otras especies del mismo género (Cabello, 1985), sobre el huéspedfacticio Ephestia kuheniella. Un huéspedfacticio es una especie que habita hábitats completamente diferentes que la especie de parasitoide, pero que aún así permite el desarrollo de algunos estadios del parasitoide (en este caso de la larva y pupa) en alguna de sus fases de desarrollo (en este caso el huevo). E. kuehniella son polillas plagade productosde naturalezafarinácea,y son muy comunes en productos alimenticiosdealmacén, nunca habiendo sido descritasen plantaso cultivos.El usodelos huéspedesfacticios permite multiplicarlas poblacionespor 35en10días,ylos requisitos físicosparael éxitodelacría sonmuy razonables, preferentemente una temperatura de aproximadamente 20-25ºC, preferentemente 22ºC,y una humedad relativa del 65-85%. Igualmente, T. achaeae se mantiene en un contenedor apropiado para el desarrollo adecuado del parasitoidegarantizando el intercambio de oxígenoypermitiendo la salida de los adultos de la especie de parasitoide emergidos de los huevos de su huésped alternativo.
En referencia al segundo aspecto de la invención, ésta se refiere a la utilización del parasitoide T. achaeae, producido en el sistema mencionado anteriormente según los procedimientos de cría descritos, para elcontrol biológico de plagasagrícolasde acuerdo conlos métodosyprocedimientossegúnlainvenciónen programasde control biológico en cultivos agrícolas. En una forma de realización especialmente preferente dela utilización según la invención, el parasitoide T. achaeae se utiliza para controlar la polilla exótica Tuta absoluta, con la cual el parasitoide no ha tenido anteriormente ningún contacto en la naturaleza.
Se han completado ensayos tanto de laboratorio como de campo sobre el porcentaje de reducción de daños por Tuta absoluta obtenidos después de, la suelta de diversas poblaciones de T. achaeae obtenidas según la presente invención en cultivos de tomate. Estos ensayos demuestran efectividades de hasta un 97% de reducción de daños (véase el Ejemplo 1).Tales resultados demuestran que las poblaciones de T. achaeae obtenidas según el método de cría descritoenestainvención presenta considerablesventajas frentea otras especies conocidasporserparasitoidesde Tuta absoluta. Por un lado, T. achaeae es una especie autóctonay, por tanto, sin riesgos ambientalesy, por otro lado, se han alcanzado efectividades mayores que las descritaspor otros autores en América del Sur con otras especiesdel mismo género tales como T. pretiosum.
De acuerdo con este segundo aspecto de la invención, T. achaeae se introduce en cultivos de tomate de invernadero yal aire libre para controlar la polilla plagaTuta absoluta, utilizando tarjetas de cartón que se cuelgan de las plantas, parasu distribuciónporel cultivo.Se distribuyedel ordende50a400 recipientesde cartónpor hectárea con cantidades de hasta 12.000 pupas de T. achaeae cada uno por un invernadero semanalmente. Con introducciones semanales de entre 500.000y1.000.000 de individuos durante las épocas de vuelo de los adultos de Tuta absoluta se consigue un controlexitoso. Igualmente, T. achaeae se introduce en cultivosde tomatedeinvernaderoyal aire libre para controlar la polilla plaga Tuta absoluta adherida a un material inerte que actúa como portador, pudiéndose distribuir por el cultivo con espolvoreo directo.
En otra forma de realización de la invención,y de acuerdo con este segundo aspecto de la misma, T. achaeae se utiliza para controlar la polilla plaga T. absoluta en otros hortícolas diferentes del tomate donde esta plaga está causando daños, por ejemplo patata, berenjena, entre otros, utilizando la misma metodología descrita para el tomate.
De acuerdo con otra forma de realización de la invención, T. achaeae se utiliza para controlar otras especies de lepidópteros plaga de cultivos, como es el caso de la polilla Chrysodeixis chalcites (Esper, 1789) (Lepidoptera: Noctuidae) en cultivode platanera en las Islas Canariasy Helicoverpa armigera (= Heliothis armigera)(Lepidoptera: Noctuidae) en tomate (tanto en invernadero como en cultivos al aire libre)y en algodonero. En los últimos añosla “lagarta o bicho camello”, Chrysodeixis chalcites, se ha convertido en uno de los noctuidos plaga más importante en los cultivos de platanera de Canarias, presentando su control diversas dificultades debido al bajo nivel de la eficacia de los insecticidasde origen químicoo biológicoyal empleode estrategiasde lucha no adecuadas. Igualmente, se ha constatado un incremento de losdaños causados por esteyotros noctuidos plaga, como H. armigera, en distintos cultivos hortícolas debidos a la escasa efectividad del control químico a causa de la resistencia de las plagas a la mayoría de las materias activas disponibles.
Así, según tales realizacionesde la invención, las poblaciones de T. achaeae obtenidas según el procedimiento descrito anteriormente, serán utilizadas en múltiples programas de control biológico como arma de control biológico contra algunas de las plagas de lepidópteros más graves, a saber las especies de Tuta absoluta, Chrysodeixis chalcites yHelicoverpa armigera. Preferentemente, el cultivo comercial se selecciona de entre cultivos hortícolas protegidos de invernaderosde cristal,de plásticoo cultivosbajo mallaytambiénde cultivosal aire libre,por ejemplode tomatey berenjena,ytambién fresao frambuesa, cultivode algodónyplatanera.
Ejemplos
Ensayos técnicos para evaluar el potencial de control de Tuta absoluta con el parasitoide autóctono T. achaeae en un cultivo de tomate de invernadero
El objetivodelos ensayos eraevaluarla efectividaddelas poblacionesde T. achaeae para controlar poblaciones de
T. absoluta en cultivos de tomate de invernadero.Para ello se han realizado ensayos bajo condiciones de laboratorio, de semicampoyde campo,en ciclodeveranoyotoño (Ejemplo1)y en ciclodeinviernoyprimavera (Ejemplos2y 3).
Ejemplo1
Ensayos de laboratorio y de semicampo en cultivos de tomate con ciclo de verano-otoño
Materiales y métodos
Cría de los insectos
Los ejemplares de T. absoluta empleados en todos los ensayos fueron obtenidos de poblaciones criadas bajo condicionesde laboratorio sobre hojasde tomate.A suvez,la críade T. achaeae, también en laboratorio, se llevó a cabo utilizando como huéspedfacticio Ephestia kuehniella Zeller, según la metodología empleada descrita en la presente invención.
Ensayos de laboratorio
Paraevaluarla aceptaciónyparasitaciónde los huevosdeT. absoluta por las hembras del parasitoide se llevó a cabo un ensayo previo, bajo condiciones de laboratorio (25±1ºC,60-80% H.R.y16:8 horas L:D).Para ello se utilizó la metodología empleada por Brotodjojo&Walter (2006), conlaexcepciónde quea cada hembra sele ofertaron 10 huevos de T. absoluta de menos de 24 h. El número de repeticiones fue de 10. Los huevos en los que se había observado parasitación fueron evolucionados hasta la emergencia de los parasitoides adultos.
Ensayos de semicampo en invernaderos comerciales
El ensayodellevóacaboenuninvernadero comercialde Almería entreel27de agostoy el22de septiembrede 2008. Dentrodelinvernaderose dispusieron8jaulonesde8 m2 con plantasde tomate transplantadasen macetas(20 plantas/jaulón)delavariedadCherry.Cuandolasplantas tuvieronunaalturade1mfueron infestadasconadultosde T. absoluta (sueltasde4adultos/planta).En4jaulonesse realizaronun totalde7sueltasde T. achaeae (30 adultos/planta) cada3ó4días; otros4jaulones fueron dejados como control. Despuésde27 días desdela infestación, se contabilizó el número de larvas de T. absoluta, las hojas congaleríasylos frutos dañados.Se realizó un AnálisisdelaVarianzay se compararon las medias mediante mínima diferencia significativa, utilizando el software SPSS v. 15 (SPSS, 2006).
Resultados
Ensayos de laboratorio
Se encontró que los huevos huéspedes fueron bien aceptados por las hembras de T. achaeae, ya que el 100% de los huevos recibieron una puesta del parasitoide. El 83,3% de los huevos viraron a color negro (parasitismo aparente; cuando el parasitoide ha alcanzado el estadio de pupa), el resto no lo hizo, quedando finalmente colapsados. Ello puede ser debido al pequeño tamaño del huevo huésped (longitud = 372,46 ± 9,24 µ yanchura= 233,98 ± 6,39 µ;n=25).
Ensayos de invernadero
En laTabla1 se presentan los resultados del número de larvas de T. absoluta, así como el número degalerías en hojasyfrutos dañadosporplanta,en tomateeninvernadero,alos27díasde iniciadoel ensayo.Durantedichoperiodo, las temperaturas oscilaron entrelosextremosde 38,6ºC (máxima absoluta)y22,2ºC (mínima absoluta) con unavalor promedio de 29,0ºC. En los análisis de la varianza se ha encontrado efectos altamente significativos del tratamiento (P < 0,01) enel númerode larvasygalerías,ysignificativo(P < 0,05) en el número de frutos dañados. El número de larvas de la especie plaga era casi 12 veces inferior en las parcelas de sueltas de T. achaeae respecto al control, lo cual representa una eficacia del91,74%.
TABLA1
Número de larvas de Tuta absoluta y daños en cultivo de tomate en invernadero según tratamiento, en condiciones de verano
(las medias con letras diferentes son diferentes estadísticamente)
Las dosisde sueltas empleadasenel bioensayo sonequivalentesalas empleadasanivel comercialen Brasilpara
T. pretiosum.La eficacia encontrada (91,74%) es superiora losvalores máximos reportados para T. pretiosum (87,7%) en dicha zona(Parra&amp;Zucchim 2004).
Ejemplo2
Ensayos de campo en cultivo de tomate con ciclo de invierno-verano
Materiales y métodos
Cría de los insectos
Los individuos de T. absoluta ydeT. achaeae procedían de las mismas condiciones de crías descritas anteriormente en el Ejemplo 1.
Ensayo en invernadero
El ensayodellevóa caboenuninvernaderoexperimentalde400m2dela “Estación Experimentaldela Fundación Cajamar LasPalmerillas”, en Almería, en inviernoyprimavera del 2009. En el invernadero se plantó un cultivo de tomate con una densidadde2plantasporm2.Elinvernaderosedividióendos parcelas, colocando una mallaenel centro. Dos semanas después del trasplante, se introdujo el depredador N. tenuis a razón de 0,5 individuos por m2 (dosis habitual de sueltas de este enemigo natural en cultivo de tomate de primavera en Almería). Se soltó también en todoelcultivo4adultosde T. absoluta por planta3semanas después del transplante del cultivo. Una parcela se utilizó como control, sin sueltas de parasitoides,y en la otra parcela se realizaron las sueltas de T. achaeae, que se iniciaron al día siguiente de las sueltas de T. absoluta. En la parcela con sueltas de T. achaeae, se introdujeron 60 individuos de
T. achaeae por planta dos o tres veces por semana, todas las semanas en las que se observaron adultos activos de la plaga (capturas en trampas encoladas amarillas). Semanalmente se contabilizaron el número de huevos de T. absoluta, el númerodegalerías conysin larvasylos frutos dañadosenun totalde20 plantaspor parcela.Tambiénse recogieron semanalmente muestras de hojas con huevos de T. absoluta yseexaminóenel laboratorioel porcentajedehuevosque estaban parasitados.
Resultados
Los resultadossehan contabilizadodurantelas primeras7 semanasdecultivo, periodoenelqueyase observan resultados muy claros de efectividad del parasitoide T. achaeae. Dentro de un rango de temperaturas muy amplio, con 42ºCdemáximay6ºCde mínima,se obtuvo, mediante sueltasdel parasitoide T. achaeae,un porcentaje de parasitismo del 97,6%, con unas reducciones de daños por la plaga en hojas del 92,5% respecto al control, donde solo se introdujo el depredador N. tenuis. Las eficacias obtenidas son superioresalas descritas por otros autores utilizando otras especies de parasitoides en cultivosde tomate en Suramérica parael controlde T. absoluta.
Ejemplo3
Ensayos de semicampo en cultivo de tomate para evaluar la compatibilidad de uso de T. achaeae con el depredador
N. tenuis en cultivo de tomate, con ciclo de invierno-verano
Materiales y métodos
Cría de los insectos
Los individuos de T. absoluta ydeT. achaeae procedían de las mismas condiciones de crías descritas anteriormente en el Ejemplo 1.
Ensayo en invernadero
El ensayodellevóacaboenuninvernadero comercialdeAlmería,enlaprimaveradel 2009. Dentrodelinvernaderose dispusieron8jaulonesde8m2 con plantasde tomate transplantadasen macetas(20 plantas/jaulón)delavariedad Cherry. Cuandolas plantas tuvieron una alturade1 m fueron infestadas con adultosde T. absoluta (sueltasde4adultos/planta).En2jaulonesse realizó una única sueltade20 individuosde Nesidiocoris tenuis (1 individuo/planta), en2 jaulonesse realizaronuntotalde7sueltasde60individuosde T. achaeae por planta, en tres semanas consecutivas (23sueltas por semana), en2jaulonesse introdujo ambos enemigos naturales,N. tenuis yT. achaeae,a las mismas dosis queenlosotros jaulones,ylosdos últimos jaulonesse dejaronsin enemigos naturales, como control.Se contabilizó semanalmente el número de larvas de T. absoluta, las hojas congaleríasy los frutos dañados en6 plantas de cada jaulón.
Resultados
En los jaulones con sueltas del parasitoide T. achaeae se alcanza un altonivelde parasitismo (95,3%)yuna fuerte reducción de daños respecto a los tratamientos con solo el depredador N. tenuis o sin enemigos naturales.
Los resultados sobre la efectividad de T. achaeae para controlar la plaga T. absoluta demuestran que los individuos del parasitoide seleccionados y producidos de acuerdo con el sistema descrito en la presente invención presentan múltiplesventajas frentea otras especiesde parasitoides utilizadas, anteriormente en otrospaíses. Por tanto, parael productor comercial de agentes de control biológico, T. achaeae es un enemigo naturaleficaz, preferentemente para el controlde T. absoluta yprobablemente para el control de otros noctuidos plaga de pequeño tamaño, comoH. armigera yC. chalcites.

Claims (7)

  1. REIVINDICACIONES
    1.
    Procedimiento de producción del parasitoide de la especie Trichogramma achaeae caracterizado porque la especie se cría durante una o dos generaciones sobre la polilla Ephestia kuehniella como huéspedfacticio.
  2. 2.
    Procedimiento de producción según la reivindicación 1, caracterizado porque los parasitoides de la especie Trichogramma achaeae se mantienena una temperaturade20-25ºC, preferentemente22ºC,y con una humedad relativa del 65-85%.
  3. 3.
    Utilización del parasitoide de la especie Trichogramma achaeae producido según cualquiera de las reivindicaciones anteriores para el control biológico de plagas en cultivos comerciales.
  4. 4.
    Utilización según la reivindicación 3, caracterizada porque las plagas de los cultivos se seleccionan de entre los lepidópteros gelechiidos, tales como la especie Tuta absoluta,ylos noctuidos tales como las especies Helicoverpa armigera yChrysodeixis chalcites.
  5. 5.
    Utilización según la reivindicación 4, caracterizada porque el cultivo comercial se selecciona de entre cultivos hortícolas protegidos,deinvernaderosde cristal,de plásticoo cultivos bajo mallaytambién cultivosal aire libre.
  6. 6.
    Utilización según las reivindicaciones3-5, caracterizada porque la especie Trichogramma achaeae producida según las reivindicaciones1-2 se distribuye en los cultivos adherida a un material inerte que actúa como portador, pudiéndose distribuir por el cultivo con espolvoreo directo.
    OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS
    N.º solicitud:200901183
    ESPAÑA
    Fecha de presentación de la solicitud: 08.05.2009
    Fecha de prioridad:
    INFORME SOBRE EL ESTADO DE LA TECNICA
    51 Int. Cl. : A01K67/033 (01.01.2006) A01N63/02 (01.01.2006)
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    Documentos citados Reivindicaciones afectadas
    X
    CONSOLI, F.L. Side effects of insecticides used in tomato fields on the egg parasitoid Trichogramma pretiosum Riley (Hym., Trichogrammatidae), a natural enemy of Tuta absoluta (Meyrick) (Lep., Gelechiidae). J. Appl. Ent., 1998, vol. 122, páginas 43-47. Ver material y métodos. 1,2
    X
    ES 2011068 A6 (SOCIETÉ COOPERATIVE AGRICOLE DE SEMENCES DE LIMAGNE &quot;LIMAGRAIN&quot;) 16.04.1988, columna 1, 1-11. 1,2
    X
    US 4370946 A (INSTITUT NATIONAL DE LA RECHERCHE AGRONOMIQUE) 01.02.1983, columna 2, líneas 9-17. 1,2
    X
    US 5178094 A (CROP GENETICS INTERNATIONAL CORPORATION) 12.01.1993, columna 12, líneas 51-60. 1,2
    X
    CHANDRASHEKHAR, K. Evaluation of parasitization efficiency of different species of Trichogramma on eggs of chilli fruit borer, Helicoverpa armigera (Hübner). Proceedings of the symposium of biological control of lepidopteran pests, 2002, julio 17-18. 3-6
    X
    JALALI, S.K. y SINGH, S.P. Selection and host age preference of natural enemies of Chilo partellus (Swinhoe) (Lepidoptera: Pyralidae). Pest Management and Economy Zoology, 202, vol. 10 (2), páginas 149-157. 3
    X
    JALALI, S.K. et al. Selection of promising species of trichogrammatid egg parasitoid for field evaluation against coconut leaf eating caterpillar, Opisina arenosella Walker. Journal of Plantation Crops, 2002, vol. 30 (2), páginas 30-32. 3
    A
    La polilla del tomate. Una nueva plaga. Tuta absoluta (Meyrick). [en línea] Recuperado de Internet [recuperado el 22.12.2010] <URL: http://www.terralia.com/index.php?revista=69&amp;articulo=441> 3-6
    Categoría de los documentos citados X: de particular relevancia Y: de particular relevancia combinado con otro/s de la misma categoría A: refleja el estado de la técnica O: referido a divulgación no escrita P: publicado entre la fecha de prioridad y la de presentación de la solicitud E: documento anterior, pero publicado después de la fecha de presentación de la solicitud
    El presente informe ha sido realizado • para todas las reivindicaciones □ para las reivindicaciones nº:
    Fecha de realización del informe 22.12.2010
    Examinador A. Polo Diez Página 1/5
    INFORME DEL ESTADO DE LA TÉCNICA
    Documentación mínima buscada (sistema de clasificación seguido de los símbolos de clasificación) A01K, A01N Bases de datos electrónicas consultadas durante la búsqueda (nombre de la base de datos y, si es posible, términos de
    búsqueda utilizados) INVENES, EPODOC, WPI, CLUSTER AGRICOLA (STN)
    OPINIÓN ESCRITA
    Fecha de Realización de la Opinión Escrita: 22.12.2010
    Declaración
    Novedad (Art. 6.1 LP 11/1986)
    Reivindicaciones Reivindicaciones 1,2 3,4,5,6 SI NO
    Actividad inventiva (Art. 8.1 LP11/1986)
    Reivindicaciones Reivindicaciones 1-6 SI NO
    Se considera que la solicitud cumple con el requisito de aplicación industrial. Este requisito fue evaluado durante la fase de examen formal y técnico de la solicitud (Artículo 31.2 Ley 11/1986).
    Base de la Opinión.-
    La presente opinión se ha realizado sobre la base de la solicitud de patente tal y como se publica.
    OPINIÓN ESCRITA
    1. Documentos considerados.-
    A continuación se relacionan los documentos pertenecientes al estado de la técnica tomados en consideración para la realización de esta opinión.
    Documento
    Número Publicación o Identificación Fecha Publicación
    D01
    CONSOLI, F.L. Side effects of insecticides used in tomato fields on the egg parasitoid Trichogramma pretiosum Riley (Hym., Trichogrammatidae), a natural enemy of Tuta absoluta (Meyrick) (Lep., Gelechiidae). J. Appl. Ent., 1998, vol. 122, páginas 43-47.
    D02
    ES 2011068 A6 (SOCIETÉ COOPERATIVE AGRICOLE DE SEMENCES DE LIMAGNE &quot;LIMAGRAIN&quot;) 16.04.1988
    D03
    US 4370946 A (INSTITUT NATIONAL DE LA RECHERCHE AGRONOMIQUE) 01.02.1983
    D04
    US 5178094 A (CROP GENETICS INTERNATIONAL CORPORATION) 12.01.1993
    D05
    CHANDRASHEKHAR, K. Evaluation of parasitization efficiency of different species of Trichogramma on eggs of chilli fruit borer, Helicoverpa armigera (Hübner). Proceedings of the symposium of biological control of lepidopteran pests, 2002, julio 17-18.
    D06
    JALALI, S.K. y SINGH, S.P. Selection and host age preference of natural enemies of Chilo partellus (Swinhoe) (Lepidoptera: Pyralidae). Pest Management and Economy Zoology, 202, vol. 10 (2), páginas 149-157.
    D07
    JALALI, S.K. et al. Selection of promising species of trichogrammatid egg parasitoid for field evaluation against coconut leaf eating caterpillar, Opisina arenosella Walker. Journal of Plantation Crops, 2002, vol. 30 (2), páginas 30-32.
    D08
    La polilla del tomate. Una nueva plaga. Tuta absoluta (Meyrick). [en línea] Recuperado de Internet [recuperado el 22.12.2010] <URL: ttp://www.terralia.com/index.php?revista=69&amp;articulo=441>
  7. 2. Declaración motivada según los artículos 29.6 y 29.7 del Reglamento de ejecución de la Ley 11/1986, de 20 de marzo, de Patentes sobre la novedad y la actividad inventiva; citas y explicaciones en apoyo de esta declaración
    La invención se refiere a un procedimiento de producción del himenóptero Trichogramma achaeae que consiste en la cría del mismo durante una o dos generaciones sobre el lepidóptero Ephestia kuehniella en determinadas condiciones (reivindicaciones 1-2).
    La invención también se refiere a la utilización del himenóptero Trichogramma achaeae producido con el procedimiento anterior para el control biológico de cultivos comerciales en general (reivindicación 3) y de los cultivos afectados por Tuta absoluta, Helicoverpa armigera o Chrysodeixis chalcites (reivindicaciones 4-6)
    Novedad y actividad inventiva (art. 6 y 8 de la L.P)
    Varios documentos del estado de la técnica divulgan métodos y aparatos para cultivar especies del género Trichogramma sobre la polilla de la harina E. kuehniella. Estas especies del género Trichogramma se vienen utilizando hace tiempo como agentes de biocontrol contra diferentes plagas:
    En el documento D1 se describe el cultivo de Trichogramma pretiosum sobre E. kuehniella para combatir T. absoluta.
    El documento D2 se refiere a un procedimiento y aparato para cultivar insectos entomófagos para su posterior utilización contra parásitos de las cosechas. Concretamente se nombra al entomófago Trichogramma maidis cultivado sobre huevos de
    E. kuehniella (columna 1, líneas 1-11)
    En el documento D3 se divulga la conservación de huevos de insectos oofagos, como Trichogramma, después de cultivarlos sobre de huevos de la polilla de la harina, en particular E. kuhniella, (columna 1, línea 1-columna 2, línea 24)
    D4 describe un aparato para cultivar insectos parásitos que se usan comúnmente para el control de plagas. Entre ellos se mencionan a los del género Trichogramma que se pueden cultivar sobre E. kuhniella (columna 12, líneas 56-60).
    OPINIÓN ESCRITA
    Dado que todas las especies de Trichogramma utilizadas hasta ahora han sido cultivadas con éxito sobre la polilla de la harina E. kuhniella, y se ha descrito ampliamente la tecnología para llevar a cabo este tipo de cultivo, se considera que la elección de este sustrato para el cultivo de otra especie de Trichogramma, sería evidente para un experto en la materia.
    Por ello, se considera que si bien, las reivindicaciones 1 y 2, son nuevas, ya que ningún documento cita explícitamente el cultivo de la especie Trichogramma achaeae sobre la polilla de la harina, dichas reivindicaciones carecen de actividad inventiva teniendo en cuenta cualquiera de los documentos D1 a D4 por separado.
    Por otra parte, como se ha mencionado anteriormente, muchas de las especies del género Trichogramma y, en particular T. achaeae, han sido utilizadas para el control biológico de plagas de diferentes insectos.
    En el documento D5 se prueban varias especies de Trichogramma (entre ellas T. achaeae) como agentes de control sobre Helicoverpa armigera (tabla 1)
    En los documentos D6 y D7 se seleccionan, entre varias especies de Trichogramma que incluyen a T. achaeae, la más adecuada como enemigo de Chilo partellus (tabla 1) y de Opinsina arenosella (tabla 3).
    Dado que el proceso de cultivo que se emplea para obtener la T. achaeae no otorga, en principio, ninguna característica que la haga diferente de otras T. achaeae cultivadas de otro modo y empleadas en la lucha biológica, se considera que la reivindicación 3 carece de novedad a la vista de cualquiera de los documentos D5, D6 y D7. El documento D5 afecta asimismo a la novedad de las reivindicaciones 4 a 6.
    En estos documentos se muestra que no todas las especies de un mismo género son igualmente adecuadas para el control de una plaga concreta. Existe una alta especificidad entre el parásito y el entomopatógeno, lo que hace que la búsqueda de una especie adecuada para la lucha biológica sea un proceso de selección entre los enemigos naturales más adecuados para la misma.
    De hecho, en el documento D5 aunque se utiliza Trichogramma achaeae contra la Helicoverpa armigera, no es esta especie la que da mejores resultados.
    Por ello, se recomienda que se elabore una nueva reivindicación, conteniendo parte de la reivindicación 4 y ajustada a lo que realmente se ha ensayado y descrito en su solicitud, es decir, a la utilización de T. achaeae para combatir las plaga de T. absoluta. Esta nueva reivindicación podría tener novedad y actividad inventiva, ya que ningún documento de los encontrados en el estrado de la técnica divulga ni sugiere que el biocontrol de la Tuta absoluta se realice con esa especie concreta de Trichogramma (ver documento D8 que muestra los enemigos naturales y especies utilizadas hasta el momento en el biocontrol de esta plaga del tomate).
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