ES2329118T3 - Ltb4 como adyuvante de vacuna. - Google Patents
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Abstract
Preparación de vacuna que provoca una respuesta inmunitaria potenciada de un individuo, que comprende una cantidad eficaz inmunopotenciadora de un agente de LTB4 en asociación con una vacuna.
Description
LTB_{4} como adyuvante de vacuna.
La invención se refiere al uso de un agente de
leucotrieno B_{4} (LTB_{4}) como adyuvante para preparaciones
de vacuna.
Se han usado vacunas durante décadas para la
prevención de enfermedades en seres humanos. La eficacia de
cualquier preparación de vacuna depende en gran parte de su
inmunogenicidad, es decir, su capacidad para inducir una fuerte
inmunidad humoral y celular. Sin embargo, muchas vacunas actualmente
en uso tienen eficacia moderada debido a su débil inmunogenicidad.
Debido a esto, se han realizado varios intentos para complementar
preparaciones de vacuna con adyuvantes con el fin de aumentar la
capacidad de una vacuna dada para inducir una fuerte
inmunogenicidad. Desafortunadamente, la mayoría de las sustancias
usadas como adyuvantes tienen efectos secundarios no deseables, que
impiden su uso en seres humanos.
Se han usado de manera extensa adyuvantes para
mejorar la generación de una respuesta inmunitaria tras la
inmunización con un antígeno particular, especialmente en animales
de laboratorio. Sin embargo, los adyuvantes clásicos y eficaces,
tales como el adyuvante de Freund, provocan efectos secundarios no
deseables, que impiden su uso en seres humanos. Adyuvantes menos
tóxicos, tales como el hidróxido de aluminio (alumbre), aunque
relativamente bien tolerados, no ofrecen el mismo grado de
inmunopotenciación que el adyuvante de Freund.
Por tanto, debido a una falta de un adyuvante
eficaz, las vacunas para uso en seres humanos son a menudo poco
inmunogénicas y se requieren regímenes de inmunización múltiple para
lograr una protección apropiada contra un patógeno dado. Además, a
menudo se pierde la inmunidad de larga duración en ausencia de
inmunización repetida. Por tanto, se dedican intensos esfuerzos a
la identificación de nuevos adyuvantes eficaces para complementar
las vacunas usadas actualmente.
El leucotrieno B_{4} (LTB_{4}) es una
molécula natural conocida. El LTB_{4} es un metabolito del ácido
araquidónico derivado de la ruta de la
5-lipooxigenasa. El LTB_{4} tiene muchas
propiedades biológicas notificadas. En particular, el LTB_{4} se
considera un potente compuesto proinflamatorio; su actividad
biológica más importante son sus efectos quimiotáctico y
quimiocinético sobre los leucocitos. De hecho, se ha demostrado que
el LTB_{4} es un potente quimioatrayente para macrófagos,
monocitos y leucocitos polimorfonucleares humanos, tanto in
vitro como in vivo. El LTB_{4} también activa otras
funciones de leucocitos tales como la degranulación y la síntesis
de anión superóxido. Debido a estos efectos proinflamatorios, el
LTB_{4} se considera como un supuesto componente en mecanismos de
defensa. Además, el LTB_{4} se sintetiza por células
inflamatorias tales como macrófagos, monocitos y leucocitos
polimorfonucleares y también se sintetiza por linfocitos B.
Los efectos de LTB_{4} sobre la actividad de
células B se han estudiado anteriormente en condiciones
experimentales in vitro. Se evaluaron la proliferación de
linfocitos B, la expresión de marcadores de activación tales como
CD23 y la secreción de inmunoglobulinas. La mayoría de los estudios
alcanzaron conclusiones similares que establecían que el LTB_{4}
por sí mismo, en ausencia de estímulos o citocinas exógenos
(Proteína A o S. aureus), no tenía efectos sobre la
proliferación de células B o la síntesis de inmunoglobulinas (IgG o
IgM) (Yamaoka, K.A., et al., 1989, J. Immunol. 143:
1996-2000; Dugas, B., et al., 1990, J.
Immunol. 145:3406-3411; Odlander, B., et
al., 1989, Int. J. Tiss. Reac.
XI(6):277-289). Los únicos efectos
observables de LTB_{4} sobre linfocitos B se registraron cuando
se combinó con agentes estimulantes (Proteína A o S. aureus)
y citocinas. Un artículo contradictorio también notifica que el
LTB_{4} tenía efectos inhibidores sobre la síntesis de
inmunoglobulina a partir de linfocitos B
(Rola-Plecszczynski, M., et al., 1982,
Biochem. Biophys. Res. Commun. 108:1531-1537). El
documento WO 97/29751 da a conocer la actividad antiviral de
LTB_{4}. Por tanto, parece que el LTB_{4} por sí mismo no
estimula las funciones de células B y quizá puede incluso
influirlas de manera negativa en condiciones experimentales
definidas.
Sería sumamente deseable dotarse de un adyuvante
con mayor eficacia que el adyuvante a base de hidróxido de aluminio
usado actualmente y que no presente los efectos secundarios no
deseables del adyuvante de Freund más potente.
Según la presente invención, se proporciona el
uso de un agente de LTB_{4} como adyuvante, por ejemplo, con
vacunas contra la gripe (Influenza) y la tuberculosis (BCG), entre
otras.
Según la presente invención, se proporciona una
preparación de vacuna que provoca una respuesta inmunitaria
potenciada de un individuo, que comprende una cantidad eficaz
inmunopotenciadora de un agente de LTB_{4} en asociación con una
preparación de vacuna.
Según la presente invención, se proporciona el
uso de una cantidad eficaz inmunopotenciadora de un agente de
LTB_{4} para la preparación de una vacuna que provoca una
respuesta inmunitaria potenciada de un individuo, que comprende una
cantidad eficaz inmunopotenciadora de un agente de LTB_{4} en
asociación con una preparación de vacuna.
Más preferiblemente, la respuesta inmunitaria,
potenciada mediante la vacuna de la presente invención, es una
respuesta inmunitaria humoral.
Más preferiblemente, la vacuna de la presente
invención es inmunoprotectora contra un patógeno seleccionado del
grupo que consiste en Influenza y Tuberculosis.
\vskip1.000000\baselineskip
La figura 1 ilustra los efectos de la
administración concomitante de LTB_{4} a la vacuna Fluviral sobre
la generación de anticuerpos anti-Influenza en
ratones BALB/c.
La figura 2 ilustra los efectos de la
administración concomitante de LTB_{4} a la vacuna BCG sobre la
generación de anticuerpos anti-Mycobacterium tuberculosis en
ratones BALB/c.
La figura 3 ilustra los efectos de la
administración prolongada de LTB_{4} sobre la generación de
anticuerpos anti-citomegalovirus (CMV) durante la
infección aguda por CMV en ratones BALB/c.
\vskip1.000000\baselineskip
Todos los agentes de LTB_{4} pueden obtenerse
mediante síntesis química mediante métodos descritos en la
bibliografía y la mayoría están comercialmente disponibles.
Tal como se usa en el presente documento, la
expresión "agente de LTB_{4}" pretende significar uno o más
de los siguientes ácidos grasos poliinsaturados, que además del
propio LTB_{4}, son análogos de LTB_{4}, o precursores o
metabolitos de LTB_{4} o análogos de LTB_{4}: LTB_{4},
14,15-dihidro-LTB_{4},
17,18-deshidro-LTB_{4},
19-hidroxi-LTB_{4},
20-hidroxi-LTB_{4} y sus análogos
de 5(R)-hidroxi, 5-ceto,
5(S)hidroperoxi,
5(R)-hidroperoxi y 5-desoxi;
LTA_{4}; 14,15-dihidro-LTA_{4},
17,18-deshidro-LTA_{4}; ácido
5(S)hidroxi-6,8,11,14(E,Z,Z,Z)-eicosatetraenoico
("5-HETE"),
14,15-dihidro-5-HETE,
17,18-deshidro-5-HETE,
y sus análogos de 5(R)-hidroxi,
5-ceto, 5(S)-hidroperoxi,
5(R)-hidroperoxi; ácido
12(R)-hidroxi-5,8,10,14(Z,Z,E,Z)-eicosatetraenoico
("12-HETE"),
5,6-dihidro-12-HETE,
14,15-dihidro-12-HETE,
17,18-deshidro-12-HETE
y sus análogos de 12(S)-hidroxi,
12-ceto, 12(S)-hidroperoxi y
12(R)-hidroperoxi y ácido
12-oxo-5,8,10(Z,Z,E)-dodecatrienoico,
ácido
15(S)-hidroxi-5,8,11,13(Z,Z,Z,E)-eicosatetraenoico
("15-HETE"),
5,6-dihidro-15-HETE,
17,18-deshidro-15-HETE
y sus análogos de 15(R)-hidroxi,
5-ceto, 15(S)-hidroperoxi y
15(R)-hidroperoxi.
La expresión agente de LTB_{4} también incluye
el ácido
12(S)-hidroxi-5,8,10(Z,E,E)-heptadecatrienoico;
todos los ácidos
5,12-dihidroxi-6,8,10,14-eicosatetraenoicos
isoméricos,
20,20,20-trifluorometil-LTB_{4},
3-tio-LTB_{4} y
3-hidroxi-LTB_{4}.
El término LTB_{4} también incluye variantes
que son ácidos grasos modificados de manera no covalente tales
como las sales de sodio o las de potasio de los agentes de
LTB_{4}.
La expresión agente de LTB_{4} también incluye
formulaciones de compuestos que podrían contener una mezcla de dos
o varios agentes de LTB_{4} o un agente de LTB_{4} y uno o
varios isómero(s) igualmente o menos activo(s) del
agente de LTB_{4} (isómeros posicionales, geométricos u
ópticos).
\vskip1.000000\baselineskip
Las vacunas para las que puede usarse LTB_{4}
como adyuvante incluyen todas las vacunas disponibles para seres
humanos y animales. La expresión "vacuna" pretende incluir
cualquier tipo de preparación (proteínas purificadas o
recombinantes, microorganismos completos inactivados,
microorganismos fragmentados, microorganismos vivos atenuados,
azúcares complejos, etc.). El término "microorganismos" incluye
virus de ADN o ARN, retrovirus, bacterias, parásitos y hongos.
Para someter a prueba el potencial adyuvante de
LTB_{4}, se inmunizaron grupos de 10 ratones BALB/c una vez
mediante inyección intramuscular con 5 \mul de la preparación de
vacuna comercial "Fluviral" en combinación con solución salina
o 1 ng de LTB_{4}. Catorce días tras la inmunización, se extrajo
sangre de los ratones y se analizaron los sueros para detectar
anticuerpos IgG anti-Influenza específicos mediante
ELISA. Los resultados obtenidos indican que los ratones que
recibieron LTB de manera concomitante con la vacuna desarrollaron
una mayor respuesta de anticuerpos anti-Influenza
(* p<0,05) en las tres diluciones sometidas a prueba. Se
encontró que una dosis de 1 ng de LTB_{4} era óptima. Estos
resultados muestran claramente que una simple adición de LTB_{4}
a la preparación de vacuna puede influir de manera positiva en la
producción de anticuerpos específicos.
Otra preparación de vacuna que se beneficiaría
en gran medida de un adyuvante es la vacuna BCG contra la
tuberculosis. Esta vacuna viva atenuada de
Pasteur-Merieux Connaught es débilmente
inmunogénica, requiriendo múltiples administraciones con el fin de
inducir anticuerpos anti-BCG. Se sometió a prueba si
el LTB_{4} podría influir en el desarrollo de anticuerpos
anti-BCG. Se inmunizaron ratones BALB/c
(n=4-5/grupo) por vía intradérmica cuatro veces con
la preparación de vacuna en combinación o no con dosis variables de
LTB_{4} (1-10 ng). Se inmunizaron los ratones en
el día 0, 24, 68 y 145. En el día 160, se extrajo sangre de los
ratones y se analizaron los sueros para detectar anticuerpos
anti-BCG mediante ELISA. Los resultados indican que
los sueros de ratones tratados con LTB_{4} tenían niveles
superiores de anticuerpos anti-BCG que el grupo de
BCG + solución salina, a lo largo de todas las diluciones de sueros
sometidas a prueba. Estos resultados muestran claramente que una
vacuna débil, tal como la vacuna BCG, puede beneficiarse en gran
medida de las propiedades de adyuvante de LTB_{4}, haciéndola más
eficaz en la inducción de una respuesta de anticuerpos
específicos.
La siguiente serie de experimentos se diseñó
para someter a prueba el potencial de LTB_{4} para modular la
respuesta de anticuerpos durante una infección aguda por CMV. Se
infectaron ratones BALB/c mediante inyección intraperitoneal (i.p.)
con 10.000 ufp de CMV murino. En el día 5 tras la infección, los
ratones (n=10) recibieron solución salina mediante inyección i.p. o
LTB_{4} (5 \mug/kg) (n=9) mediante inyección i.p. 3 veces a la
semana durante 12 semanas. En ese momento, se tomaron los sueros de
cada ratón y se sometieron a prueba para detectar anticuerpos
específicos anti-CMV. Los resultados obtenidos
indican que los ratones que recibieron LTB_{4} tenían más
anticuerpos anti-CMV que los ratones del grupo
tratado con placebo, lo que indica que el LTB_{4} puede influir
de manera positiva en la formación de anticuerpos
anti-CMV.
Por último, se analizaron los sueros de cada
ratón infectado con CMV y tratado con solución salina o LTB_{4}
(véase anteriormente) para detectar anticuerpos neutralizantes. En
resumen, se incubó una dilución 1/100 de suero individual con 175
ufp de CMV murino durante 1 hora en hielo. Entonces se añadieron las
muestras (sueros-virus) a fibroblastos embrionarios
de ratón y se incubaron a 37ºC durante 2 horas. Se eliminaron los
virus no adsorbidos y se recubrieron las células con metilcelulosa
y se incubaron durante 4 días a 37ºC en una atmósfera humidificada
con CO_{2} al 5%. En ese momento, se fijaron las células, se
colorearon con cristal violeta y se contó el número de placas
(focos infectados por CMV). Una reducción en el número de placas
indica que un suero tiene actividad neutralizante. Los ratones no
infectados no tenían anticuerpos neutralizantes contra CMV, tal como
se esperaba. Se encontró que dos de 10 ratones (20%) tratados con
un placebo tenían sueros con actividad neutralizante frente a CMV.
Esto está en marcado contraste con el 78% de los sueros de ratones
tratados con LTB_{4}, que mostraban actividad neutralizante
frente a CMV. A continuación se comparó la actividad neutralizante
de sueros que se comprobó que eran positivos para la neutralización
de CMV. Los 2 sueros de ratones infectados que recibieron solución
salina pudieron reducir, en promedio, la infectividad de CMV en un
24%. En cambio, se encontró que los 7 sueros de ratones tratados
con LTB_{4} pudieron reducir la infectividad de CMV en un 45%,
casi dos veces la actividad de ratones control.
La presente invención se entenderá más
fácilmente en referencia a los siguientes ejemplos, que se facilitan
para ilustrar la invención en vez de limitar su alcance.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
I
Se inmunizaron ratones BALB/c hembra adultos
(6-8 semanas) mediante inyección intramuscular con 5
\mul de la vacuna contra Influenza comercial (Fluviral) en
combinación o no con 1 ng de LTB_{4}. Catorce días más tarde, se
extrajo sangre de los ratones mediante punción cardíaca y se
obtuvieron sueros. Se cuantificaron los anticuerpos
anti-Influenza mediante ensayo inmunoabsorbente
ligado a enzimas (ELISA). Se recubrieron los pocillos de una placa
de 96 pocillos con la preparación de vacuna Fluvial (dilución 1/100)
en tampón carbonato 0,1 M (pH 9,0) mediante incubación durante la
noche a 4ºC. Se lavaron los pocillos con solución salina tamponada
con Tris con Tween-20 (TBS-T) al
0,1% seguido por la adición de 100 \mul de diluciones crecientes
de los sueros que van a someterse a prueba. Tras una incubación de
2 horas a temperatura ambiente, se lavaron los pocillos seis veces
con TBS-T. Se añadieron a cada pocillo cien \mul
de anticuerpo de cabra anti-IgG de ratón marcado
con alcalina y se dejó que continuara la incubación durante una hora
a temperatura ambiente. Se lavaron los pocillos seis veces más con
TBS-T seguido por la adición de sustrato OPD y
disolución de revelador. Tras 30 minutos, se registró la
absorbancia (405 nm) de cada pocillo usando un lector de placas de
ELISA. Los valores, expresados como la densidad óptica (DO), se
representaron gráficamente frente a la inversa de la dilución del
suero. Los resultados muestran la DO media de sueros de 5 animales
por grupo + DE en un experimento representativo de los otros dos
(2). Tal como se muestra en la figura 1, los ratones que recibieron
una combinación de vacuna y 1 ng de LTB_{4} generaron una
respuesta de anticuerpos anti-Influenza
significativamente superior en comparación con los ratones que
recibieron la vacuna y la solución salina.
\newpage
Ejemplo
II
Se inmunizaron ratones BALB/c hembra adultos
(6-8 semanas) mediante inyecciones intradérmicas con
25 \mul de la vacuna BCG anti-tuberculosis en
combinación o no con dosis variables (1-10 ng) de
LTB_{4}. En todos los casos, se aumentaron los volúmenes
inyectados hasta 100 \mul con solución salina. Se inmunizaron los
ratones en los días 0, 24, 68 y 145. En el día 160, se extrajo
sangre de los ratones mediante punciones cardíacas y se sometieron
a prueba los sueros para detectar anticuerpos anti-Mycobacterium
tuberculosis. Se recubrieron placas de ELISA con una dilución
1/50 de la preparación de vacuna BCG en tampón carbonato 0,1 M (pH
9,0) mediante incubación durante la noche a 4ºC. Se lavaron los
pocillos con TBS-T y se bloquearon los sitios no
específicos mediante la adición de solución salina que contenía
suero bovino fetal al 10% durante una hora a temperatura ambiente.
Tras varios lavados, se añadieron a cada pocillo 100 \mul de
diluciones crecientes de los sueros que van a someterse a prueba.
Como control negativo (fondo), se usó el suero de un ratón BALB/C
sin tratar. Tras una incubación de 2 horas a temperatura ambiente,
se lavaron los pocillos seis veces con TBS-T. Se
añadieron a cada pocillo cien \mul de anticuerpo de cabra
anti-IgG de ratón marcado con alcalina y se dejó que
continuara la incubación durante una hora a temperatura ambiente.
Se lavaron los pocillos seis veces más con TBS-T
seguido por la adición de sustrato OPD y disolución de revelador.
Tras 30 minutos, se registró la absorbancia (405 nm) de cada
pocillo usando un lector de placas de ELISA. Los valores, expresados
como la densidad óptica (DO), se representaron gráficamente frente
a la inversa de la dilución del suero. Los resultados (figura 2)
muestran la DO media de cada grupo de suero. En promedio, los
sueros de ratones que recibieron una combinación de vacuna BCG y
LTB_{4} tenían una reactividad mayor contra antígenos de
Mycobacterium que el grupo que recibió BCG + solución
salina, lo que indica una respuesta de anticuerpos específicos
superior.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
III
Se infectaron ratones BALB/c hembra adultos
(6-8 semanas) mediante inyección intraperitoneal
(I.P.) con 1x10^{4} ufp de CMV murino. Comenzando el quinto día
tras la infección, se les inyectó a los ratones solución salina o
LTB_{4} (5 \mug/kg) mediante inyección I.P. a una frecuencia de
tres veces a la semana durante 12 semanas. Entonces se extrajo
sangre de los ratones y se sacrificaron. Se cuantificaron mediante
ELISA los anticuerpos anti-CMV totales de cada
ratón. Se recubrieron placas de ELISA con lisados de fibroblastos
infectados por CMV como fuente de antígenos de CMV. Se añadió un
\mug de lisados de proteína a cada pocillo y se incubó durante la
noche a 4ºC. Tras varios lavados con TBS-T, se
bloquearon los sitios no específicos mediante la adición de
solución salina que contenía suero bovino fetal al 10% durante una
hora a temperatura ambiente. Se enjuagaron los pocillos 3 veces con
TBS-T y se hicieron reaccionar con preparaciones de
sueros diluidos de cada ratón. Se dejó que los sueros reaccionaran
durante 2 horas a temperatura ambiente con el suero de un ratón
BALB/c sin tratar (no infectado) usado como control negativo. Tras
una incubación de 2 horas a temperatura ambiente, se lavaron los
pocillos seis veces con TBS-T. Se añadieron a cada
pocillo cien \mul de anticuerpo de cabra anti-IgG
de ratón marcado con alcalina y se dejó que continuara la incubación
durante una hora a temperatura ambiente. Se lavaron los pocillos
seis veces más con TBS-T seguido por la adición de
sustrato OPD y disolución de revelador. Tras 30 minutos, se
registró la absorbancia (405 nm) de cada pocillo usando un lector
de placas de ELISA. Los valores, expresados como la densidad óptica
(DO), se representaron gráficamente frente a la inversa de la
dilución del suero. Los resultados (figura 3) representan la media y
el error estándar derivado de 9 puntos de datos para cada grupo.
Los resultados obtenidos indican que los ratones que recibieron
LTB_{4} tenían más anticuerpos anti-CMV que los
ratones del grupo tratado con solución salina, lo que indica que el
LTB_{4} puede influir de manera positiva en la formación de
anticuerpos anti-CMV.
Se sometió a prueba el suero de cada ratón,
descrito anteriormente, para determinar su actividad neutralizante
frente a CMV. En resumen, se incubó una dilución 1/100 de suero
individual con 175 ufp de CMV murino durante 1 hora en hielo.
Entonces se añadieron las muestras (sueros-virus) a
fibroblastos embrionarios de ratón y se incubaron a 37ºC durante 2
horas. Se eliminaron los virus no adsorbidos y se recubrieron las
células con metilcelulosa y se incubaron durante 4 días a 37ºC en
una atmósfera humidificada con CO_{2} al 5%. En ese momento, se
fijaron las células, se colorearon con cristal violeta y se contó el
número de placas (focos infectados por CMV). Una reducción del
número de placas indica que un suero tiene actividad neutralizante.
Los ratones no infectados no tenían anticuerpos neutralizantes
contra CMV, tal como se esperaba (tabla 1). La tabla 1 ilustra los
efectos de la administración prolongada de LTB_{4} sobre la
generación de anticuerpos neutralizantes anti-CMV
durante la infección aguda por CMV en ratones BALB/c.
Se encontró que dos de 10 ratones (20%) tratados
con solución salina tenían sueros con actividad neutralizante
frente a CMV a una dilución 1/100. Esto está en marcado contraste
con el 78% (7/9) de los sueros de ratones tratados con LTB_{4},
que mostraban actividad neutralizante frente a CMV (tabla 1). A
continuación se comparó la actividad neutralizante de sueros que se
comprobó que eran positivos para la neutralización de CMV. Los 2
sueros de ratones tratados con solución salina pudieron reducir, en
promedio, la infectividad de CMV en un 24%. En cambio, se encontró
que los 7 sueros de ratones tratados con LTB_{4} pudieron reducir
la infectividad de CMV en un 45%, casi dos veces la actividad de
ratones control.
Aunque la invención se ha descrito con respecto
a realizaciones específicas de la misma, se entenderá que pueden
realizarse modificaciones adicionales.
Claims (6)
1. Preparación de vacuna que provoca una
respuesta inmunitaria potenciada de un individuo, que comprende una
cantidad eficaz inmunopotenciadora de un agente de LTB_{4} en
asociación con una vacuna.
2. Vacuna según la reivindicación 1, siendo
dicha vacuna inmunoprotectora contra un patógeno seleccionado del
grupo que consiste en Influenza y Tuberculosis.
3. Vacuna según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 ó 2, en la que dicho agente de LTB_{4} es uno o
más compuestos seleccionados del grupo que consiste en LTB_{4},
14,15-dihidro-LTB_{4},
17,18-deshidro-LTB_{4},
19-hidroxi-LTB_{4},
20-hidroxi-LTB_{4} y sus análogos
de 5(R)-hidroxi,
5(S)hidroperoxi,
5(R)-hidroperoxi y 5-desoxi;
LTA_{4}; 14,15-dihidro-LTA_{4},
17,18-deshidro-LTA_{4}; ácido
5(S)-hidroxi-6,8,11,14(E,Z,Z,Z)-eicosatetraenoico
("5-HETE"),
14,15-dihidro-5-HETE,
17,18-deshidro-5-HETE,
y sus análogos de 5(R)-hidroxi,
5(S)-hidroperoxi,
5(R)-hidroperoxi; o análogos modificados de
manera no covalente de los mismos, tales como las sales de sodio o
potasio.
4. Uso de una cantidad eficaz inmunopotenciadora
de un agente de LTB_{4} para la preparación de una vacuna que
provoca una respuesta inmunitaria potenciada de un individuo, que
comprende una cantidad eficaz inmunopotenciadora de un agente de
LTB_{4} en asociación con una vacuna.
5. Uso según la reivindicación 4, en el que
dicha vacuna es inmunoprotectora contra un patógeno seleccionado
del grupo que consiste en Influenza y
Tuberculosis.
6. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 4 ó 5, en el que dicho agente de LTB_{4} es uno o
más compuestos seleccionados del grupo que consiste en LTB_{4},
14,15-dihidro-LTB_{4},
17,18-deshidro-LTB_{4},
19-hidroxi-LTB_{4},
20-hidroxi-LTB_{4} y sus análogos
de 5(R)-hidroxi,
5(S)hidroperoxi,
5(R)-hidroperoxi y 5-desoxi;
LTA_{4}; 14,15-dihidro-LTA_{4},
17,18-deshidro-LTA_{4}; ácido
5(S)-hidroxi-6,8,11,14(E,Z,Z,Z)-eicosatetraenoico
("5-HETE"),
14,15-dihidro-5-HETE,
17,18-deshidro-5-HETE,
y sus análogos de 5(R)-hidroxi,
5(S)-hidroperoxi,
5(R)-hidroperoxi; o análogos modificados de
manera no covalente de los mismos, tales como las sales de sodio o
potasio.
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