ES2326819T3 - Inhibidores de la quinasa. - Google Patents
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- ES2326819T3 ES2326819T3 ES05704878T ES05704878T ES2326819T3 ES 2326819 T3 ES2326819 T3 ES 2326819T3 ES 05704878 T ES05704878 T ES 05704878T ES 05704878 T ES05704878 T ES 05704878T ES 2326819 T3 ES2326819 T3 ES 2326819T3
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Abstract
Un compuesto de fórmula I ** ver fórmula** en la que W es: ** ver fórmula** X es N, o C-R1 R es alquilo C 1-C 7, cicloalquilo C 3-C 7, (alquileno C 1-C 7)-(cicloalquilo C 3-C 7), -SO 2-(alquilo C 1-C 7), o -SO 2- NR 5 R 6 ; R 1 es hidrógeno, amino, metilo o -N=CH(NMe)2; R 2 es fenilo opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados de forma independiente de halo; R 3 es hidrógeno, alquilo C1-C7, cicloalquilo C3-C7 o fenilo opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados de forma independiente de halo y trifluorometilo. R 4 es hidrógeno o alquilo C1-C7. R 5 y R 6 se seleccionan de forma independiente del grupo constituido por alquilo C1-C7 o su sal farmacéuticamente aceptable.
Description
Inhibidores de la quinasa.
La p38 quinasa es una proteína quinasa activada
por mitógeno que pertenece a la superfamilia de las serín/treonina
quinasas. Esta quinasa es activada por tensiones extracelulares
tales como calor, luz UV y tensión osmótica, además de por
estímulos inflamatorios tales como lipopolisacárido. Cuando está
activada, la p38 quinasa fosforila los sustratos de las proteínas
intracelulares que regulan la biosíntesis de las citocinas
proinflamatorias, el factor de necrosis tumoral a
(TNF-\alpha) y la interleucina 1\beta
(IL-1\beta).
Estas citocinas participan en la patología de
una serie de trastornos inflamatorios crónicos (Lee, y col., Ann.
N.Y. Acad. Sci., 696, 149-170 (1993);
Muller-Ladner, Curr. Opin. Rheumatol., 8,
210-220 (1996)), trastornos cardiovasculares y del
sistema nervioso central (Salituro, y col., Current Medicinal
Chemistry, 6, 807-823 (1999)) y trastornos
autoinmunes (Pargellis, y col., Nature Structural Biology,
9(4), 268-272 (2002)).
Se ha identificado numerosos compuestos dentro
de las plataformas estructurales de piridinilimidazol (documentos
WO9621452, WO9725045, US5656644, US5686455, US5717100, WO9712876,
WO9821957, WO9847892, WO99903837, WO9901449, WO0061576, WO0172737)
y de pirimidinilimidazol (documentos WO9725048,
WO9901452, WO9725046, W09932121, W09901131, W09901130, WO9901136, WO9807452, WO9747618,
WO9856788, WO9857996) como inhibidores de la p38 quinasa o como inhibidores de citocinas. Se sabe que los inhibidores selectivos de la p38 quinasa suprimen la expresión del TNF-\alpha y de la IL-1\beta (McKenna, y col., J. Med. Chem., 45(11), 2173-2184 (2002)). Se ha comunicado actividad antiinflamatoria para compuestos dentro de la plataforma estructural de pirimidinilimidazol (Lantos, y col., J. Med. Chem., 27, 72-75 (1984)), y se está investigando una serie de inhibidores de la p38 quinasa para el tratamiento de diversos trastornos (Boehm y Adams, Exp. Opin. Ther. Patents, 10(1), 25-37 (2000)). Sigue existiendo la necesidad de tratamiento en este campo de compuestos que sean fármacos supresores de citocinas, es decir compuestos que sean capaces de inhibir la p38 quinasa.
WO9901452, WO9725046, W09932121, W09901131, W09901130, WO9901136, WO9807452, WO9747618,
WO9856788, WO9857996) como inhibidores de la p38 quinasa o como inhibidores de citocinas. Se sabe que los inhibidores selectivos de la p38 quinasa suprimen la expresión del TNF-\alpha y de la IL-1\beta (McKenna, y col., J. Med. Chem., 45(11), 2173-2184 (2002)). Se ha comunicado actividad antiinflamatoria para compuestos dentro de la plataforma estructural de pirimidinilimidazol (Lantos, y col., J. Med. Chem., 27, 72-75 (1984)), y se está investigando una serie de inhibidores de la p38 quinasa para el tratamiento de diversos trastornos (Boehm y Adams, Exp. Opin. Ther. Patents, 10(1), 25-37 (2000)). Sigue existiendo la necesidad de tratamiento en este campo de compuestos que sean fármacos supresores de citocinas, es decir compuestos que sean capaces de inhibir la p38 quinasa.
La presente invención proporciona nuevos
inhibidores de la p38 quinasa útiles para el tratamiento de
afecciones resultantes de una excesiva producción de citocinas.
La presente invención proporciona compuestos de
Fórmula I:
en la
que
W es:
X es N, o C-R^{1};
R es alquilo C_{1}-C_{7},
cicloalquilo C_{3}-C_{7}, (alquileno
C_{1}-C_{7})-(cicloalquilo
C_{3}-C_{7}), -SO_{2}-(alquilo
C_{1}-C_{7}), o
-SO_{2}-NR^{5}R^{6}; R^{1} es hidrógeno,
amino, metilo, o N=CH(NMe)_{2};
R^{2} es fenilo opcionalmente sustituido con
uno o dos sustituyentes seleccionados de forma independiente de
halo;
R^{3} es hidrógeno, alquilo
C_{1}-C_{7}, cicloalquilo
C_{3}-C_{7} o fenilo opcionalmente sustituido
con uno o dos sustituyentes seleccionados de forma independiente de
halo y trifluorometilo.
R^{4} es hidrógeno o alquilo
C_{1}-C_{7}.
R^{5} y R^{6} se seleccionan de forma
independiente del grupo compuesto por alquilo
C_{1}-C_{7} o su sal farmacéuticamente
aceptable.
\vskip1.000000\baselineskip
La presente invención proporciona un
procedimiento para inhibir la p38 quinasa en un mamífero, que
comprende administrar a un mamífero que necesite tal tratamiento
una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I o su sal
farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también proporciona un
procedimiento para suprimir la producción del factor de necrosis
tumoral \alpha (TNF-\alpha) en un mamífero, que
comprende administrar a un mamífero que necesite tal tratamiento
una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I o su sal
farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también proporciona un
procedimiento para suprimir la producción de
interleucina-1\beta (IL-1\beta)
en un mamífero, que comprende administrar a un mamífero que necesite
tal tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I o
su sal farmacéuticamente aceptable.
La presente invención además proporciona un
procedimiento para tratar afecciones resultantes de la producción
excesiva de citocina en un mamífero, que comprende administrar a un
mamífero que necesite tal tratamiento una cantidad eficaz de un
compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también proporciona un
procedimiento para tratar una neoplasia sensible en un mamífero,
que comprende administrar a un mamífero que necesite tal tratamiento
una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I o su sal
farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también proporciona un
procedimiento para inhibir metástasis en un mamífero, que comprende
administrar a un mamífero que necesite tal tratamiento una cantidad
eficaz de un compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente
aceptable.
La presente invención también proporciona un
procedimiento para tratar la artritis reumatoide en un mamífero,
que comprende administrar a un mamífero que necesite tal tratamiento
una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I o su sal
farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también proporciona una
formulación farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula I o
su sal farmacéuticamente aceptable, en combinación con un portador,
diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también proporciona el uso
de un compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable
para la fabricación de un medicamento para la inhibición de la p38
quinasa. Además, la presente invención proporciona un compuesto de
Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable para usar en la
inhibición de la p38 quinasa en mamíferos. Además, la presente
invención proporciona una composición farmacéutica adaptada para la
inhibición de la p38 quinasa, que comprende un compuesto de Fórmula
I o su sal farmacéuticamente aceptable en combinación con uno o más
excipientes, portadores o diluyentes de los mismos farmacéuticamente
aceptables. La invención también proporciona el uso de un compuesto
de Fórmula I para la fabricación de un medicamento para tratar una
enfermedad o afección capaz de mejorarse o prevenirse mediante la
inhibición de la p38 quinasa.
La presente invención también proporciona el uso
de un compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable
para la fabricación de un medicamento para la supresión de la
producción del factor de necrosis tumoral \alpha
(TNF-\alpha). Además, la presente invención
proporciona un compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente
aceptable para usar en la supresión de la producción del factor de
necrosis tumoral \alpha (TNF-\alpha) en
mamíferos. Además, La presente invención proporciona una composición
farmacéutica adaptada para la supresión de la producción del factor
de necrosis tumoral \alpha (TNF-\alpha), que
comprende un compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente
aceptable en combinación con uno o más excipientes, portadores o
diluyentes de los mismos farmacéuticamente aceptables. La invención
también proporciona el uso de un compuesto de Fórmula I para la
fabricación de un medicamento para tratar una enfermedad o afección
capaz de mejorarse o prevenirse mediante la supresión de la
producción del factor de necrosis tumoral \alpha
(TNF-\alpha).
La presente invención también proporciona el uso
de un compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable
para la fabricación de un medicamento para la supresión de la
producción de interleucina-1\beta
(IL-1\beta). Además, la presente invención
proporciona un compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente
aceptable para usar en la supresión de la producción de
interleucina-1\beta (IL-1\beta).
Además, la presente invención proporciona una composición
farmacéutica adaptada para la supresión de la producción de
interleucina-1\beta
(IL-1\beta), que comprende un compuesto de Fórmula
I o su sal farmacéuticamente aceptable en combinación con uno o más
excipientes, portadores o diluyentes de los mismos farmacéuticamente
aceptables. La invención también proporciona el uso de un compuesto
de Fórmula I para la fabricación de un medicamento para tratar una
enfermedad o afección capaz de mejorarse o prevenirse mediante la
supresión de la producción de interleucina-1\beta
(IL-1\beta).
La presente invención también proporciona el uso
de un compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable
para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de
afecciones resultantes de una producción excesiva de citocinas.
Además, la presente invención proporciona un compuesto de Fórmula I
o su sal farmacéuticamente aceptable para usar en el tratamiento de
afecciones resultantes de una producción excesiva de citocinas en
mamíferos. Además, la presente proporciona una composición
farmacéutica adaptada para en el tratamiento de afecciones
resultantes de una producción excesiva de citocinas, que comprende
un compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable en
combinación con uno o más excipientes, portadores o diluyentes de
los mismos farmacéuticamente aceptables. La invención también
proporciona el uso de un compuesto de Fórmula I para la fabricación
de un medicamento para tratar una enfermedad o afección capaz de
mejorarse o prevenirse mediante la supresión de la producción
excesiva de citocinas.
La presente también proporciona el uso de un
compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable para la
fabricación de un medicamento para el tratamiento de una neoplasia
sensible. Además, la presente proporciona un compuesto de Fórmula I
o su sal farmacéuticamente aceptable para usar en el tratamiento de
una neoplasia sensible en mamíferos. Además, la presente
proporciona una composición farmacéutica adaptada para el
tratamiento de una neoplasia sensible, que comprende un compuesto
de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable en combinación con
uno o más excipientes, portadores o diluyentes de los mismos
farmacéuticamente aceptables.
La presente invención también proporciona el uso
de un compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable
para la fabricación de un medicamento para la inhibición de la
metástasis. Además, la presente proporciona un compuesto de Fórmula
I o su sal farmacéuticamente aceptable para usar en la inhibición de
la metástasis en mamíferos. Además, la presente proporciona una
composición farmacéutica adaptada para la inhibición de la
metástasis, que comprende un compuesto de Fórmula I o su sal
farmacéuticamente aceptable en combinación con uno o más
excipientes, portadores o diluyentes de los mismos farmacéuticamente
aceptables.
La presente invención también proporciona el uso
de un compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable
para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la
artritis reumatoide. Además, la presente proporciona un compuesto
de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable para usar en el
tratamiento de la artritis reumatoide en mamíferos. Además, la
presente proporciona una composición farmacéutica adaptada para el
tratamiento de la artritis reumatoide, que comprende un compuesto
de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable en combinación con
uno o más excipientes, portadores o diluyentes de los mismos
farmacéuticamente
aceptables.
aceptables.
\vskip1.000000\baselineskip
Los términos químicos generales usados en las
fórmulas anteriores tienen sus significados habituales. Por
ejemplo, el término "alquilo C_{1}-C_{7}"
incluye fracciones metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo,
isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, hexilo y
heptilo. El término "alquileno C_{1}-C_{7}"
incluye las fracciones de metileno, etileno, propileno,
isopropileno, butileno, isobutileno, sec-butileno,
terc-butileno, pentileno, hexileno y heptileno. El término
"cicloalquilo C_{3}-C_{7}" incluye las
fracciones ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y
cicloheptilo. El término ``(alquileno
C_{1}-C_{7})-(cicloalquilo
C_{3}-C_{7}) se toma de modo que significa un
cicloalquilo C_{3}-C_{7} unido a través de un
ligante de alquileno C_{1}-C_{7}. El término
"halo" incluye flúor, cloro, bromo y yodo.
El término "p38 quinasa" se toma de modo
que signifique las isoformas p-38\alpha y/o
p-38\beta de la quinasa.
\newpage
El término "supresión de la producción de
TNF-\alpha (EL-1\beta,
citocina)" se toma de modo que signifique disminuir los niveles
excesivos in vivo de TNF-\alpha,
IL-1\beta, u otra citocina en un mamífero a
niveles normales o inferiores a lo normal. Esto puede conseguirse
mediante la inhibición de la liberación in vivo del
TNF-\alpha, la IL-1\beta u otra
citocina por parte de todas las células, incluidos macrófagos;
mediante regulación por disminución, a nivel genómico, de los
niveles excesivos in vivo de TNF-\alpha, la
IL-1\beta u otra citocina en un mamífero hasta
niveles normales o inferiores a lo normal: mediante inhibición de la
síntesis de TNF-\alpha,
IL-1\beta u otra citocina como acontecimiento
postraduccional; o mediante regulación por disminución de
TNF-\alpha, IL-1\beta u otra
citocina a nivel traduccional.
El término "Dosis mínima eficaz (DME)" se
toma de modo que signifique la menor dosis que produce un efecto que
es estadísticamente significativamente diferente del efecto
observado en un grupo control con vehículo.
El término "Dosis umbral eficaz (DUE)" se
toma de modo que signifique la dosis requerida para conseguir un
umbral de actividad especificado. Por ejemplo, la DUE es la dosis
requerida para alcanzar una respuesta del 50%.
El término "Dosis umbral mínima eficaz
(DUME)" se toma de modo que signifique la menor dosis que
garantiza un efecto estadísticamente significativo que también
alcanza un nivel de actividad umbral especificado. Por ejemplo, la
DUME50 es la menor dosis que alcanza una respuesta del 50% y que es
cierto que es estadísticamente significativamente diferente de un
grupo control con vehículo.
El término "cantidad eficaz" se toma de
modo que signifique una dosis de un compuesto de Fórmula I necesaria
para conseguir el efecto farmacológico deseado.
El experto en la técnica apreciará que ciertos
compuestos de Fórmula I contienen al menos un centro quiral. La
presente invención contempla todos los enantiómeros o
diaestereómeros individuales, así como mezclas de los enantiómeros
y diaestereómeros de dichos compuestos, incluidos los racematos. Se
prefiere que los compuestos de Fórmula I que contienen al menos un
centro quiral existan en forma de enantiómeros o diaestereómeros
sencillos, Los enantiómeros o diaestereómeros sencillos pueden
prepararse comenzando con reactivos quirales o mediante técnicas
sintéticas estereoselectivas o estereoespecíficas. Como alternativa,
los enantiómeros o diaestereómeros sencillos pueden aislarse a
partir de mezclas mediante técnicas de cristalización o de
cromatografía quiral estándar.
El experto en la técnica también apreciará que
cuando la variable "W" es imidazol (i) y R^{4} es hidrógeno,
al anillo imidazol existe en las dos siguientes formas
tautoméricas.
Aunque los tautómeros I y II son
estructuralmente distintos, el técnico experto apreciará que existen
en equilibrio y que son fácil y rápidamente interconvertibles en
condiciones normales. (Véase: March, Advanced Organic
Chemistry, Tercera Edición, Wiley Interscience, New York, New York
(1985), páginas 66-70; y Allinger, Organic
Chemistry, Segunda Edición, Worth Publishers, New York, New York,
(1976), página 173) Como tal, la representación de un compuesto de
Fórmula I, en la que la variable "W" es imidazol (i) y R^{4}
es hidrógeno, en una forma tautomérica contempla ambas formas
tautoméricas del anillo imidazol. Asimismo, la denominación de un
compuesto de Fórmula I en el que "W" es imidazol (i) y R^{4}
es hidrógeno como 1H-imidazol o
3H-imidazol contempla ambas formas tautoméricas del
anillo imidazol. Específicamente, el nombre
-[2-terc-butil-5-(4-fluor-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
contempla la molécula en su forma
1H-imidazol-4-ilo o
3H-imidazol-4-ilo.
De igual forma, cuando la variable "W" es triazol (iv), la
fracción triazol existe en tres formas tautoméricas y la
representación o denominación de una forma tautomérica contempla las
tres formas tautoméricas del anillo
triazol.
triazol.
El experto lector entenderá que los compuestos
de la presente invención pueden formar sales. En todos los casos,
las sales farmacéuticamente aceptables de todos los compuestos están
incluidas en los nombres de ellos. Los compuestos de la presente
invención son aminas y, en consecuencia, reaccionan con cualquiera
de un número de ácidos inorgánicos y orgánicos para formar sales de
adición de ácido farmacéuticamente aceptables. Sales
farmacéuticamente aceptables preferidas son las formadas con ácido
maleico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido clorhídrico y ácido
metanosulfónico. Especialmente preferidas son las sales de ácido
di-metanosulfónico de los compuestos de
Fórmula I.
Fórmula I.
\newpage
Ciertas clases de compuestos de Fórmula I son
inhibidores preferidos de la p38 quinasa. Los siguientes párrafos
describen tales clases preferidas:
a) W es:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
b) W
es:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
c) X es
C-R^{1};
d) X es C-NH_{2};
e) R^{2} es fenilo,
4-fluorofenilo, o
2,4-difluorofenilo;
f) R^{2} es fenilo;
g) R^{2} es
4-fluorofenilo;
h) R^{2} es
2,4-difluorofenilo;
i) R^{4} es hidrógeno;
\newpage
j) W es
X es C-R^{1}, R^{2} es
fenilo, 4-fluorofenilo, o
2,4-difluorofenilo, y R^{4} es hidrógeno;
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
k) W es
X es -_{CNH2}, R^{2} es fenilo,
4-fluorofenilo, o
2,4-difluorofenilo, y R^{4} es hidrógeno;
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
i) W es
X es C-R^{1}, R es alquilo
C_{1}-C_{7}, R^{2} es fenilo,
4-fluorofenilo o 2,4-difluorofenilo,
R^{3} es alquilo C_{1}-C_{7} o fenilo
opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados
de forma independiente de halo y trifluorometilo, y R^{4} es
hidrógeno;
\newpage
m) W es
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
X es C-NH_{2}, R es alquilo
C_{1}-C_{7}, R^{2} es fenilo,
4-fluorofenilo o 2,4-fluorofenilo,
R^{3} es alquilo C_{1}-C_{7} o fenilo
opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados
de forma independiente de halo, y R^{4} es hidrógeno.
n) El compuesto de Fórmula I es una base
libre.
o) El compuesto de Fórmula I es una sal.
p) El compuesto de Fórmula I es una sal de
metanosulfonato.
q) El compuesto de Fórmula I es una sal de
dimetanosulfonato.
\vskip1.000000\baselineskip
Entre las formas de realización preferidas de la
presente invención se incluyen todas las combinaciones de los
párrafos a)-q).
Un subgénero especialmente preferido de
compuestos dentro del ámbito de la Fórmula I son los compuestos de
Fórmula I':
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la
que:
R' es 2,2-dimetilpropilo o
1,2,2-trimetilpropilo;
R^{2'} es fenilo,
4-fluorofenilo o
2,4-difluorofenilo;
R^{3'} es terc-butilo,
2-cloro-6-fluorofenilo,
2-fluoro-6-trifluometilfenilo,
2,6-diclorofenilo o
2,6-difluorofenilo;
o su sal farmacéuticamente aceptable.
\newpage
Compuestos más preferidos de fórmula I' son
aquéllos en los que.
1. R' es 2,2-dimetilpropilo,
R^{2'} es 4-fluorofenilo, y R^{3'} es
2-fluoro-6-trifluorometilfenilo;
2. R' es 2,2-dimetilpropilo,
R^{2'} es 4-fluorofenilo, y R^{3'} es
2,6-diclorofenilo;
3. R' es 2,2-dimetilpropilo,
R^{2'} es 4-fluorofenilo, y R^{3'} es
terc-butilo;
4. R' es 2,2-dimetilpropilo,
R^{2'} es fenilo, y R^{3'} es
2-cloro-6-fluorofenilo;
5. R' es 2,2-dimetilpropilo,
R^{2'} es 2,4-difluorofenilo, y R^{3'} es
terc-butilo;
6. R' es 1,2,2-trimetilpropilo,
R^{2'} es 4-fluorofenilo, y R^{3'} es
terc-butilo; y
7. R' es 1,2,2-trimetilpropilo,
R^{2'} es 4-fluorofenilo, y R^{3'} es
2,6-difluorofenilo.
\vskip1.000000\baselineskip
También se prefiere que cada uno de estos
compuestos existan en forma de la sal metanosulfonato, succinato,
fumarato, dimaleato, clorhidrato o dimetanosulfonato. Es
especialmente preferido que cada uno de estos compuestos exista en
forma de la sal de dimetanosulfonato.
Los compuestos de Fórmula I son inhibidores de
la p38 quinasa. Por tanto, la presente invención también proporciona
un procedimiento para inhibir la p38 quinasa en un mamífero, que
comprende administrar a un mamífero que necesite dicho tratamiento
una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula I. Se prefiere que el
mamífero tratado mediante la administración de los compuestos de
Fórmula I sea un ser humano
Como inhibidores de la p38 quinasa, los
compuestos de la presente invención son útiles para suprimir la
producción de las citocinas pro-inflamatorias,
factor de necrosis tumoral \alpha (TNF-\alpha) e
interleucina-1\beta (IL-1\beta)
y, por tanto, para el tratamiento de trastornos resultantes de una
producción excesiva de citocinas. Por tanto, se cree que los
compuestos de Fórmula I son útiles en el tratamiento de trastornos
inflamatorios, incluidos eccema, dermatitis atópica, artritis
reumatoide, osteoartritis, enfermedad intestinal inflamatoria y
síndrome del shock tóxico. También se cree que los compuestos de la
presente invención son útiles en el tratamiento de trastornos
cardiovasculares, tales como infarto agudo de miocardio,
insuficiencia cardíaca crónica, ateroesclerosis, miocarditis
vírica, rechazo de aloinjerto cardíaco y disfunción cardíaca
asociada con sepsis. Además, también se cree que los compuestos de
la presente invención son útiles para el tratamiento de trastornos
del sistema nervioso central, tales como meningitis meningocócica,
enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson y esclerosis
múltiple.
La mayoría de los tumores sólidos aumentan de
masa a través de la proliferación de células malignas y células
estromales, incluidas las células endoteliales. Para que un tumor
crezca a un tamaño mayor de 2-3 milímetros de
diámetro, se debe formar una vasculatura, un proceso conocido como
angiogénesis. Se ha comunicado que la supresión de la angiogénesis
inducida por tumor por la acción de angiostatina y endostatina tiene
como resultado actividad antitumoral (O'Reilly, y col., Cell, 88,
277-285 (1997)). Se ha mostrado que el inhibidor
selectivo de la p38 quinasa SB22025 inhibe la angiogénesis (J.R.
Jackson, y col., J. Pharmacol. Exp. Therapeutics, 284, 687 (1998))
Dado que la angiogénesis es un componente crucial de la expansión de
la masa de la mayoría de los tumores sólidos, el desarrollo de
nuevos inhibidores de la p38 quinasa para la inhibición de este
proceso representa un prometedor abordaje para el tratamiento
antitumoral. Este abordaje del tratamiento antitumoral puede
carecer de los efectos secundarios tóxicos o de las propiedades
inductoras de resistencia farmacológica de la quimioterapia
convencional (Judah Folkman, Endogenous Inhibitors of Angiogenesis,
The Harvey Lectures, Series 92, páginas 65-82,
Wiley-Liss Inc.,
(1998)).
(1998)).
Como inhibidores de la p38 quinasa, los
compuestos de la presente invención son, por tanto, útiles en la
inhibición del crecimiento de neoplasias sensibles. Schultz, R. M.
Potential of p38 MAP kinase inhibitors in the treatment of cancer.
En: E. Jucker (ed.), Progress in Drug Research, 60,
59-92, (2003). Una neoplasia sensible se define
como una neoplasia que depende de la p38 quinasa para su
supervivencia, crecimiento o metástasis. Entre las neoplasias
sensibles se incluyen tumores cerebrales, del tracto genitourinario,
sistema linfático, estómago, laringe y pulmones (patente de EE.UU.
nº 5.717.100). Preferentemente, el término "neoplasias
sensibles" tal como se usa en la presente solicitud incluye
cánceres humanos, incluido el carcinoma de pulmón de células no
pequeñas (A. Greenberg, y col., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., 26,
558 (2002)), carcinoma de mama (J. Chem, y col., J. Biol. Chem.,
276, 47901 (2001); B. Salh, y col., Int. J. Cancer, 98, 148 (2002);
y S. Xiong, y col., Cancer Res., 61, 1727 (2001)), carcinoma
gástrico (Y.D. Jung, y col., Proc. Am. Assoc. Cancer Res., 43, 9
(2002)), carcinomas colorrectales (S. Xiong, y col., Cancer Res.,
61, 1727 (2001)), carcinomas de próstata (J-I Park,
y col., Oncogene, 22, 4314-4332 (2003); L. Chen, y
col., Cancer Lett., 215, 239-247 (2004); y A.R.
Uzgara, y col., Prostate, 55, 128-139 (2003)),
melanoma maligno (C. Denkert, y col., Clin. Exp. Metastasis, 19, 79
(2002)) y mieloma múltiple (Hideshima, y col., Oncogene advance
online publication, 1-11, (11 de octubre de 2004); y
Hideshima, y col., Blood, 101(2),
703 (2003)).
703 (2003)).
La inhibición de la angiogénesis mediante la
supresión del TNF-\alpha también se ha indicado
que es útil en la inhibición o prevención de las metástasis
(patente de EE.UU. nº 6.414.150; patente de EE.UU. nº 6.335.336).
Además, la supresión del TNF-\alpha está indicada
para el tratamiento y la prevención de la caquexia, un síndrome de
emaciación experimentado por aproximadamente la mitad de todos los
pacientes de cáncer (T. Yoneda, y col., J. Clin. Invest., 87, 977
(1991)).
Además, la inhibición de la p38 quinasa puede
ser eficaz en el tratamiento de ciertas afecciones víricas tales
como la gripe (K. Kujime, y col., J. Immunology., 164,
3222-3228 (2000)), el rinovirus (S. Griego, y col..
J. Immunology, 165, 5211-5220 (2000)), y el VIH (L.
Shapiro, y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95,
7422-7426, (1998)).
Los compuestos de la presente invención pueden
prepararse a través de una variedad de procedimientos, algunos de
los cuales se ilustran en los siguientes esquemas. Un experto en la
técnica reconocerá que las etapas individuales en los esquemas
siguientes pueden variarse para proporcionar los compuestos de
Fórmula I. El orden concreto de las etapas requeridas para producir
los compuestos de Fórmula I depende del compuesto concreto que se
esté sintetizando, el compuesto de partida, y la labilidad relativa
de las fracciones sustituidas. En los siguientes esquemas se han
eliminado algunos sustituyentes por motivos de claridad y no se
pretende limitar de ningún modo las enseñanzas de los esquemas.
Los compuestos de Fórmula I en los que W es el
imidazol (i) se pueden preparar tal y como se ilustra en el esquema
siguiente en el que R^{1}, Raj, R^{2} y R^{3} son como se ha
definido anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema
I
La dicetona (a) se hace reaccionar con acetato
amónico y un aldehído adecuado en un disolvente adecuado,
preferentemente ácido acético, para proporcionar el correspondiente
nitrodipiridinil-imidazol (b). La fracción nitro se
reduce con hidrogenación o condiciones químicas estándar para
proporcionar la correspondiente diamina (c). A continuación, esta
diamina se hace reaccionar con bromuro de cianógeno para
proporcionar el
3-sustituido-5-(imidazol-4-il)-2-aminopiridinil-imidazol
(Ia) con un ortoformiato adecuado para proporcionar el
3-sustituido-5-(imidazol-4-il)piridinilimidazol
(Ib), o con un nitrito adecuado para proporcionar el
3-sustituido-5-(imidazol-4-il)piridiniltriazol
(Ic).
Las diacetonas requeridas (a) pueden prepararse
como se describe en el esquema siguiente, en el que R y R^{2} son
como se ha definido anteriormente.
\newpage
Esquema
II
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
En un disolvente adecuado se calientan juntos
2,6-dicloronitropiridina (d) y una amina o derivado
de amina adecuados, para proporcionar la correspondiente
2-amino-6-cloro-3-nitropiridina
(e), que después se acopla con un acetileno adecuadamente sustituido
para proporcionar el correspondiente
1,2-disustituido-acetileno (f). Este
acetileno se oxida para proporcionar la dicetona diana (a).
Los compuestos de Fórmula I en los que W es
pirazol (ii) o (iii) se preparan como se describe en el esquema
siguiente, en el que X, R, R^{1} y R^{2} son como se ha definido
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema
III
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
El acetileno (f) se trata con óxido de mercurio
en ácido sulfúrico acuoso para proporcionar la cetona (g). Esta
cetona se trata con dimetilformamida dimetilacetal o
tris(dimetilamino)metano en un disolvente adecuado,
normalmente dimetilformamida, para proporcionar la enaminocetona
(h). A continuación, la enaminocetona se trata con hidracina en un
disolvente adecuado, normalmente etanol o metanol, para proporcionar
el fenilpirazol (j). La fracción imidazo o triazolopiridina se
prepara como se ha descrito previamente para proporcionar los
compuestos de Fórmula Id.
Los compuestos de fórmula I en los que W es
[1,2,3]triazol (iv) pueden prepararse tal como se describe en
el esquema siguiente, en el que las variables Y, R y R^{2} son
como se ha definido previamente.
\newpage
Esquema
IV
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
El acetileno (f) se hace reaccionar con una
fuente de azida, normalmente azida sódica, en un disolvente adecuado
tal como dimetoxietano, para proporcionar el triazol (k). La
fracción imidazo o triazolopiridina se prepara como se ha descrito
previamente para proporcionar los compuestos de Fórmula Ie.
Los compuestos de Fórmula I, en los que W es
tiazol (v) u oxazol (vii) se pueden preparar como se ha descrito en
el esquema siguiente en el que las variables X, R, R^{2} y R^{3}
son como se ha definido anteriormente, e Y es O o S.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema
V
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La \alpha-bromocetona (1) se
hace reaccionar con una amida (m, Y= O) o tioamida adecuada (m, Y=
S) en un disolvente adecuado, para proporcionar el correspondiente
oxazol o tiazol (n). A continuación, el oxazol ((n, Y=O) se hace
reaccionar con bromo en un disolvente adecuado para proporcionar el
correspondiente heterociclo bromado (o, Y=O). El tiazol (n, Y=S) se
trata con n-butillitio y el anión resultante se hace
reaccionar con cloruro de tributilestaño para proporcionar el
correspondiente derivado de estaño (o, Y=S). El heterociclo
adecuadamente sustituido (o) se hace reaccionar con un ácido
borónico adecuado (p) en presencia de un catalizador adecuado como
se ha descrito anteriormente, para proporcionar los compuestos de
Fórmula If.
Las \alpha-bromocetonas
requeridas están comercialmente disponibles o pueden prepararse
mediante condiciones estándar a partir del compuesto de carbonilo
correspondiente, por ejemplo, tal como describen House (H.O. House,
Modern Synthetic Reactions, W.A. Benjamin, Inc., Menlo Park,
California (1972), páginas 459-478) y Larock (R.C.
Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Inc.,
New York, New York (1989), páginas 369-471, 755).
Las amidas y tioamidas requeridas están comercialmente disponibles o
pueden prepararse mediante procedimientos estándar bien conocidos
para el experto.
Se pueden preparar compuestos adicionales de
Fórmula I, en los que W es imidazol (i) o isoxazol (vi) en
condiciones estándar de acoplamiento con paladio tal y como se
describe en el esquema siguiente, en el que W' es imidazol (i) o
isoxazol (vi) y X y R son como se ha definido anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema
VI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Un haloheteroarilo adecuadamente sustituido (q)
se acopla con un ácido borónico adecuadamente sustituido (p) en
presencia de un catalizador de paladio, normalmente cloruro de
bis(trifenilfosfina)paladio (II), en un disolvente
adecuado, para proporcionar el compuesto deseado de Fórmula Ie. Los
materiales de partida requeridos están disponibles comercialmente o
pueden prepararse mediante procedimientos bien conocidos para un
experto en la técnica.
Muchos de los compuestos de la presente
invención no solo son útiles como inhibidores de la p38 sino que
también son productos intermedios útiles para la preparación de
compuestos adicionales de la presente invención. Por ejemplo, las
aminas primarias y secundarias se pueden acilar, alquilar o acoplar
con ácidos carboxílicos o aminoácidos en condiciones estándar de
acoplamiento peptídico. Además, las fracciones éster se pueden
reducir a los alcoholes correspondientes o convertir en amidas en
condiciones estándar. Los alcoholes se pueden activar o desplazar
en una serie de nucleófilos para proporcionar otros compuestos de la
invención. Dichos grupos salientes incluyen, entre otros, haluros,
iones de oxonio, percloratos de alquilo, ésteres de
amonioalcanosulfonato, fluorosulfonatos de alquilo, nonaflatos,
tresilatos, triflatos y ésteres sulfónicos, preferentemente el
mesilato o el tosilato. Las técnicas para la introducción de estos
grupos también son bien conocidas para el experto en la técnica;
véase, por ejemplo, marzo, Advanced Organic Chemistry, 5ª Ed., John
Wiley and Sons, New York, pág. 445-449 (2001).
Además, se puede diazotizar y desplazar la fracción
2-amino del núcleo de bencimidazol para proporcionar
compuestos adicionales de la invención en condiciones estándar.
El experto en la técnica también apreciará que
no todos los sustituyentes en os compuestos de Fórmula I tolerarán
ciertas condiciones de reacción empleadas para sintetizar los
compuestos. Estas fracciones se pueden introducir en un punto
conveniente en la síntesis o pueden protegerse y después
desprotegerse según sea necesario o deseado. El experto en la
técnica apreciará que los grupos protectores se pueden eliminar en
cualquier punto conveniente en la síntesis de los compuestos de la
presente invención. En la técnica se conocen procedimientos para
introducir y eliminar grupos protectores de nitrógeno y oxígeno;
véase, por ejemplo, Greene y Wuts, Protective Groups in Organic
Synthesis, 3ª Ed., John Wiley and Sons, New York, Capítulo 7 (1999).
Además, el experto en la técnica apreciará que, en muchas
circunstancias, el orden en el que se introducen las fracciones no
es crucial. El orden concreto de etapas requerido para producir los
compuestos de Fórmula I depende del compuesto concreto que se está
sintetizando, el compuesto de partida y la labilidad relativa de las
fracciones sustituidas.
Las abreviaturas, símbolos y términos usados en
los ejemplos y ensayos tienen los significados siguientes: AcOH =
ácido acético; DMF= N,N-dimetilformamida; DMSO=
dimetilsulfóxido; Et_{2}O = éter dietílico; EtOAc= acetato de
etilo; EtOH= etanol; h= hora(s); MeOH= metanol; min=
minuto(s); MTBE= éter de metil terc-butilo;
Pd(OAc)_{2}= acetato de paladio; TA= temperatura
ambiente; THF= tetrahidrofurano; VO(acac)_{2}=
acetilacetonato de vanadilo.
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación
1
Añadir neopentilamina (18 ml, 150 mmol) a una
suspensión de
2,6-dicloro-3-nitropiridina
(20 g, 103 mmol) y Na_{2}CO_{3} (18,5 g, 175 mmol) en EtOH (1,6
ml/mmol) a TA y agitar durante la noche. Concentrar y diluir la
suspensión resultante con agua (100 ml) y neutralizar lentamente con
HCl concentrado (aprox. 40 ml) hasta un pH= 7. Enfriar la
suspensión a 0ºC durante 1 hora y recoger el sólido mediante
filtración al vacío. Lavar el sólido con agua helada (4 x 50 ml) y
secar al aire durante la noche. Recristalizar el material en EtOAc
y hexanos, para dar el compuesto del título en forma de un sólido
amarillo (21,23 g, 84%). EM (ES): m/z = 244 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Disolver
6-cloro-3-nitropiridin-2-il)-(2,2-dimetilpropil)amina
(7,3 g, 30,0 mmol), fenilacetileno (5,0 ml, 45 mmol) y
trifenilfosfina (1,5 mmol, 0,39 g) en trietilamina (10 ml/g) en un
matraz de fondo redondo seco en horno se lava con nitrógeno y se
evacuan tres veces. Añadir Pd(OAc)_{2} (0,10 g, 0,45
mmol) y se repite el ciclo de evacuación/lavado con nitrógeno (3
veces). Calentar a 70-80ºC con agitación en
nitrógeno durante 1-3 horas, después enfriar a TA
durante 2 horas. concentrar y repartir entre agua (25 ml) y EtOAc
(150 ml). Separar la capa orgánica y lavar con agua (4 x 25 ml),
NaCl acuoso saturado (25 ml), secar con MgSO_{4}, filtrar y
concentrar. Purificar el sólido bruto mediante recristalización en
EtOAc/hexanos para dar el producto del título en forma de un sólido
naranja brillante (6,5 g, 21,2 mmol, 71%).
EM (ES): m/z = 310 [M+H]; pf
90-92ºC.
\vskip1.000000\baselineskip
Enfriar una mezcla de
(2,2-dimetilpropil)-(3-nitro-6-feniletinilpiridin-2-il)amina
(3,11 g, 10 mmol), NaHCO_{3} (0,420 g, 5,0 mmol). MgSO_{4}
(2,40 g, 20 mmol) en acetona (85 ml) y agua (25 ml) y enfriar hasta
0ºC. Añadir a la mezcla enfriada KMnO_{4} (3,16 g, 20,0 mmol) y
agitar enérgicamente la mezcla de reacción a 0ºC durante
aproximadamente 1-2 h. Inactivar la mezcla con
Na_{2}SO_{3} (5,67 g, 45 mmol). Retirar el baño de hielo y
agitar a TA durante 2 horas. Filtrar el sólido a través de una
lámina de agente de filtración. Lavar con agua (2 x 50 ml) y EtOAc
(50 ml). Separar las fases y extraer la fase acuosa con EtOAc (3 x
50 ml). Lavar las fases orgánicas combinadas con NaCl acuoso
saturado (25 ml), secar con MgSO_{4}, filtrar y concentrar.
Purificar el producto bruto (cromatografía en gel de sílice,
eluyendo con una proporción 1:1 de hexanos:CH_{2}Cl_{2}) para
dar el compuesto del título (1,586 g, 46%).
EM (ES): m/z = 342 [M+H]; pf
88-90ºC.
\vskip1.000000\baselineskip
Calentar una mezcla de
1-[6-(2,2-dimetilpropilamino)-5-nitropiridin-2-il]-2-feniletano-1,2-diona
(1,0241 g, 3,0 mmol), trimetilacetaldehído (0,66 ml, 6,0 mmol),
acetato amónico (3,47 g, 45 mmol) en AcOH (5 ml/mmol) a 80ºC con
monitorización con cromatografía de
líquidos-espectroscopia de masas para la aparición
del producto. Enfriar la mezcla de reacción hasta 0ºC y neutralizar
hasta un pH de 7 con NaOH 5,0N. Extraer la fase acuosa neutralizada
con EtOAc (3 x 20 ml) y lavar las fases orgánicas combinadas con
porciones de 20 ml de NaHCO_{3} acuoso saturado hasta que no se
observe más neutralización. Secar la fase orgánica con MgSO_{4},
filtrar y concentrar. Triturar el sólido bruto naranja con EtOAc
para obtener el compuesto del título (0,7578 g, 63%).
EM (ES): m/z = 408 [M+H]; pf
224-226ºC.
\vskip1.000000\baselineskip
Los compuestos de las preparaciones
2-21 pueden prepararse esencialmente como se
describe en la preparación 1.
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación
22
Añadir ditionita sódica (2,58 g, 14,82 mmol)
seguido por 32% de NH4OH (9 ml) a una solución de
6-[2-(2,6-diclorofenil)-5-fenil-1H-imidazol-4-il)-3-nitropiridin-2-il}isobutilamina
(1,43 g, 2,96 mmol) en 50 ml de una mezcla 1:1 de THF:agua.
Agitar la mezcla a TA durante 2 horas. Diluir
con EtOAc. Lavar la capa orgánica con NaCl acuoso saturado y secar
la fase orgánica sobre Na_{2}SO_{4}. Concentrar para dar el
compuesto del título (1,32 g, 98%).
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación
23
Añadir a una solución de
2-isobutilamino-3-nitro-6-(4-fluorofenil)etinilpiridina
(3,99 g, 12,7 mmol) en 100 ml de MeOH una suspensión acuosa de HgO
(0,55 G, 2,54 mmol) en 100 ml de 4% de H_{2}SO_{4}. Agitar a
95ºC durante 17 horas y enfriar hasta TA. Filtrar la mezcla a
través de un agente de filtración y disolver el precipitado con
EtOAc (5 x 100 ml). Concentrar y lavar el residuo con una proporción
de 10:2:1 de hexano:éter dietílico:MeOH (130 ml) para proporcionar
el compuesto del título (2,60 g, 62%).
EM (ES): m/z = 332 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
A una solución agitada de
2-isobutilamino-3-nitro-6-(4-fluorofenil-etanona)-piridina
(5,63 g, 16,1 mmol) en 15 ml de DMF seco añadir dimetilformamida
dimetilacetal (4,50 ml, 33,8 mmol). Calentar la mezcla a 80ºC
durante 6 horas, enfriar hasta TA y concentrar. Disolver el residuo
en 100 ml de EtOH, añadir 8,30 ml de hidracina (80% en H_{2}O),
agitar durante 2 horas y concentrar. Purificar el residuo
(cromatografía en gel de sílice, eluyendo con una proporción 1:1 de
hexanos:EtOAc) para dar el compuesto del título (4,51 g, 75%).
EM (ES): m/z = 356 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Tratar una solución de
2-isobutilamino-3-nitro-6-[3-(4-fluorofenil)pirazol-4-il]piridina
(1,25 g, 3,52 mmol) en DMF seco (15 ml) con NaH 95% (0,36 g, 14,3
mmol) a 0ºC durante 15 minutos. Añadir clorhidrato de
morfolinoetilcloruro (0,983 g, 5,28 mmol) y calentar lentamente
hasta la TA. Añadir NaH adicional (0,36 g, 14,3 mmol) después de 1
hora y agitar la mezcla de reacción durante 24 horas. Inactivar con
MeOH (1 ml) y diluir con agua (30 ml). Extraer con EtOAc (100 ml),
secar con MgSO_{4} y concentrar. Purificar el residuo
(cromatografía en gel de sílice, eluyendo con una proporción 1:21
de hexanos:EtOAc) para dar el compuesto del título (1,35 g,
81%).
EM (ES): m/z = 469 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación
24
A una solución de
2,2-dimetilpropil-(2-nitro-5-feniletinilfenil)amina
(0,153 g) en DMSO (2,5 ml) añadir azida sódica (0,065 g). Calentar
a 80ºC durante 2 horas. Enfriar hasta TA. Añadir 10 ml de HCl 1N y
extraer con EtOAc (20 ml) y lavar con NaCl acuoso saturado (2 x 10
ml). Secar el resto de la fase orgánica sobre Na_{2}SO_{4} y
concentrar. Purificar el residuo (cromatografía en gel de sílice,
eluyendo con una proporción 1:2 de hexanos:EtOAc) para dar el
compuesto del título en forma de un sólido amarillo (0,176 g,
100%).
EM (ES): m/z = 353 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación
25
Agitar una mezcla de
2,6-dicloro-3-nitropiridina
(1 g, 2,60 mmol) y N,N-dimetilsulfamida (0,78 g,
3,12 mmol) en DMF seco (5 ml). Añadir hidruro de litio (0,11 g,
6,76 mmol) y agitar a TA durante la noche. Añadir 10 ml de agua y
HCl 3N hasta pH= 7. Filtrar el sólido amarillo para proporcionar el
compuesto del título (85%).
EM (ES): m/z = 279 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Introducir burbujas de nitrógeno a través de una
mezcla de ácido
N,N-dimetil-N'-(6-cloro-3-nitropiridin-2-il)sulfónico
(3,86 g, 13,7 mmol), fenilacetileno (2,3 ml, 20,67 mmol),
trifenilfosfina (0,09 g, 0,68 mmol) y yoduro de cobre (I) (0,06 g,
0,34 mmol) en trietilamina (30 ml) y THF (60 ml) durante 3 minutos.
Añadir a la mezcla cloruro de
bis(trifenilfosfina)paladio (II) (0,24 g, 0,34 mmol) y
calentar a 110ºC durante 4 horas. Filtrar a través de una lámina de
agente de filtración y concentrar. Purificar el residuo
(cromatografía en gel de sílice, eluyendo con una proporción 1:1 de
hexanos:EtOAc) para dar el compuesto del título (80%).
EM (ES): m/z = 346 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Agitar una mezcla de ácido
N,N-dimetil-N'-(3-nitro-6-feniletinilpiridin-2-il)sulfónico
(0,09 g, 0,26 mmol) y diclorhidrato de estaño (0,35 g, 1,56 mmol)
en EtOAc (5 ml) y EtOH (2,5 ml) a 70ºC durante 2 horas. Concentrar
y purificar el residuo (cromatografía en gel de sílice, eluyendo con
una proporción 1:1 de hexanos:EtOAc) para dar el compuesto del
título (65%).
EM (ES): m/z = 317 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Agitar una mezcla de ácido
N,N-dimetil-N'-(3-amino-6-feniletinilpiridin-2-il)sulfónico
(0,20 g, 0,63 mmol), bromuro de cianógeno (0,07 g, 0,69 mmol) y
metóxido de litio (0,04, 0,94 mmol) en
1,2-dicloroetano (20 ml) a 80ºC durante la noche.
Concentrar y purificar el residuo (cromatografía en gel de sílice,
eluyendo con una proporción 1:1 de hexanos:EtOAc) para dar el
compuesto del título (45%).
EM (ES): m/z = 342 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Añadir una solución de dimetilamida de ácido
2-amino-5-feniletinilimidazo[4,5-b]piridina-3-sulfónico
(0,10 g, 0,31 mmol) en acetona (4 ml) sobre una solución agitada
mecánicamente de NaHCO_{3} (0,01 g, 0,15 mmol) y MgSO_{4} (0,07
g, 0,62 mmol) en agua (4 ml) a 0ºC. Añadir KMnO_{4} (0,12 g, 0,748
mmol) y agitar a 0ºC durante la noche. Añadir Na_{2}SO_{3}
(0,13 g) y agitar durante 1 hora. Añadir EtOAc y lavar con una
solución acuosa saturada de NaCl y concentrar para dar el compuesto
de título en forma de un sólido naranja que se usa sin purificación
adicional (rendimiento 68%).
EM (ES): m/z = 372 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación
26
Añadir
(5-cloro-2-nitrofenil)amida
de ácido propano-2-sulfónico (10 g,
35,7 mmol), fenilacetileno (5,9 ml, 53,6 mmol) y trifenilfosfina
(0,46 g, 1,78 mmol) a una solución de trietilamina (25 ml, 178,5
mmol) en THF seco (25 ml) y lavar el sistema con nitrógeno. Añadir
a esta mezcla de agitación
diclorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (0,625 g,
0,89 mmol) y yoduro de cobre (I) (0,17 g, 0,89 mmol). Calentar la
reacción hasta reflujo durante 4 horas. Enfriar hasta TA y
concentrar hasta obtener una suspensión. Filtrar el material bruto a
través de un tapón de gel de sílice usando EtOAc como el disolvente
de elución. Concentrar el filtrado y cristalizar el compuesto del
título en EtOAc-hexanos (7,9 g, 64%).
EM (ES): m/z= 346 [M + H].
\vskip1.000000\baselineskip
Calentar una mezcla de
(3-nitro-6-feniletinilpiridin-2-il)amida
de ácido propano-2-sulfónico (1,8 g,
5,26 mmol) y cloruro de paladio (II) (0,93 g, 0,53 mmol) en DMSO
seco (20 ml) a 120ºC durante 12 horas en una atmósfera de
nitrógeno. Enfriar hasta TA, concentrar hasta obtener una
suspensión y purificar (cromatografía en gel de sílice, eluyendo
con un gradiente de 20:80 de EtOAc:hexanos a 30:70 de EtOAc:hexanos)
para dar el compuesto del título (1,07 g, 54%). EM (ES): m/z = 346
[M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Calentar una mezcla de
[3-nitro-6-(2-oxo-2-fenilacetil)piridin-2-il]amida
de ácido propano-2-sulfónico (0,25
g, 0,67 mmol), 2,6-difluorobenzaldehído (0,146 ml,
1,35 mmol) y acetato amónico (0,78 g, 10,05 mmol) en AcOH (5 ml) a
110ºC durante 2 horas. Enfriar hasta TA y concentrar. Diluir con
EtOAc (30 ml), extraer sucesivamente con NaHCO_{3} saturado y
NaCl acuoso saturado. Secar la capa orgánica sobre NaSO_{4},
concentrar y purificar (cromatografía en gel de sílice, eluyendo
con una proporción 30:70 de EtOAc:hexanos) para dar el compuesto del
título (0,32 g, 95%).
EM (ES): m/z = 500 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
A una solución en agitación de
{6-[2-(2,6-difluorofenil)-5-fenil-3H-imidazol-4-il]-3-nitropiridin-2-il}amida
de ácido propano-2-sulfónico (0,33
g, 0,66 mmol) en MeOH (10 ml) añadir 10% de Pd/C (0,033 g). Añadir
borohidruro de sodio (0,124 g, 3,3 mmol) en porciones y con
agotación en nitrógeno durante 15 minutos. Filtrar el catalizador y
concentrar. Diluir con EtOAc (20 ml), extraer sucesivamente con
NaHCO_{3} saturado y NaCl acuoso saturado. Secar la capa orgánica
sobre Na_{2}SO_{4} y concentrar para dar el compuesto del título
(0,3 g, 98%).
EM (ES): m/z = 470 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación
27
Calentar una mezcla de
{6-[2-(2,6-diclorofenil)-5-fenil-3H-imidazol-4-il]-3-nitropiridin-2-il}amida
de ácido propano-2-sulfónico (0,262
g, 0,49 mmol) y diclorhidrato de estaño (II) (0,55 g, 2,46 mmol) en
EtOH (10 ml) a 100ºC durante 1 hora. Enfriar hasta la TA y
concentrar hasta obtener una suspensión. Verter la mezcla de
reacción en NaHCO_{3} saturado (20 ml) y añadir un agente de
filtración. Filtrar y lavar con EtOAc. Separar las capas y extraer
sucesivamente con NaHCO_{3} saturado y NaCl acuoso saturado. Secar
la capa orgánica sobre Na_{2}SO_{4} y concentrar para dar el
compuesto del título (0,21g, 85%).
EM (ES): m/z = 504 [M+H].
\newpage
Preparación
28
A una solución de
1-bencil-2-metil-1H-imidazol
(8,0 g, 46 mmol) en cloroformo (200 ml) añadir
N-bromosuccinimida (7,85 g, 44 mmol) y agitar
durante 6 horas. Lavar con hidrógeno carbonato de sodio acuoso
saturado y NaCl acuoso saturado, secar sobre MgSO_{4} y filtrar a
través de una lámina de gel de sílice. Concentrar, filtrar y
suspender el residuo en éter dietílico (600 ml), calentar hasta
reflujo y filtrar en calienta. Concentrar el filtrado de éter para
dar el compuesto del título en forma de un sólido marrón (9,3
g).
EM (ES): m/z = 252 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Calentar una mezcla de
1-bencil-2-metil-5-bromo-1H-imidazol
(4,71 g, 18,7 mmol), ácido 2,4-difluorofenilborónico
(6,92 g, 43,8 mmol),
bis(acetato)bis(trifenilfosfina)-paladio
(II) (1,4 g, 1,875 mmol), Na_{2}CO_{3} 2N (19 ml, 38 mmol),
MeOH (19 ml) y 1,2-dimetoxietano (120 ml) hasta
reflujo durante 18 horas. Enfriar hasta TA. Añadir agua y EtOAc y
separar las capas. Secar la capa orgánica con MgSO_{4}, filtrar y
concentrar. Purificar el residuo (cromatografía en gel de sílice,
eluyendo con mezclas de EtOAc:CH_{2}Cl_{2}) para dar el
compuesto deseado (3,59 g).
EM (ES): m/z = 285 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Agitar una mezcla de
1-bencil-2-metil-5-(2,4-difluorofenil)-1H-imidazol
(3,58 g, 12,6 mmol) y N-bromosuccinimida (2,24 g,
12,6 mmol) en cloroformo (100 ml) a TA durante 18 horas. Añadir la
mezcla de reacción directamente sobre el gel de sílice y eluir con
mezclas de CH_{2}Cl_{2}:EtOAc para dar el compuesto del título
(3,41 g).
EM (ES): m/z = 364 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación
29
Someter a reflujo una solución comercialmente
disponible de
2-bromo-4'-fluoroacetofenona
(100,00 g, 460 mmol), 2,2-dimetilpropionamida (93,06
g, 20 mmol) en 1,4-dioxano (600 ml) durante 2 días.
Filtrar el precipitado, concentrar el filtrado y purificar
(cromatografía en gel de sílice, eluyendo con una proporción 60:1 de
hexanos:EtOAc) para dar el compuesto del título (55 g, 55%).
EM (ES): m/z = 220 [M+H].
Los compuestos de las preparaciones
30-31 pueden prepararse esencialmente como se
describe en la Preparación 29.
\newpage
Preparación
32
Disolver
2-terc-butil-4-(4-trifluorofenil)oxazol
(0,61 g, 2,77 mmol) en THF (15 ml) y añadir
terc-butil litio (3,3 ml, 1,7M) a -78ºC. Agitar la
mezcla durante 45 minutos. Añadir cloruro de trimetilestananilo
(0,58 g, 2,90 mmol) y dejar que la temperatura alcance la TA.
Agitar durante 2 horas y añadir una solución de cloruro amónico (200
\mul, pH= 8 con amoniaco) y concentrar.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,46 (m, 2H),
6,95 (m, 2H), 1,32 (s, 9H), 0,24 (s, 9H).
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación
33
Someter a reflujo una solución de
2-bromo-4'-fluoroacetofenona
(10 g, 46 mmol) y tioacetamida (6,9, 92 mmol) en
1,4-diozano (60 ml) durante 3 horas. Filtrar el
precipitado y lavar con EtOAc para dar el compuesto del título (6,5
g, 73%).
EM (ES): m/z = 194 [M+H].
Los compuestos de la preparación 34 pueden
prepararse esencialmente como se describe en la Preparación 33.
Preparación
35
Calentar a 50ºC una mezcla de
2,6-dicloro-3-nitropiridina
(9 g) y ácido bromhídrico (90 ml) en AcOH (30%) durante la noche.
Enfriar hasta TA y verter en agua (600 ml). Filtrar el sólido para
proporcionar el compuesto del título (87%).
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,93 (d, J=
8,14 Hz, 1H), 7,55 (d, J= 8,14 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
Agitar una mezcla de
2,6-dibromo-3-nitropiridina
(11,3 g, 39,25 mmol) y N,N-dimetilsulfamida (0,006
g, 47,10 mmol) en DMF (40 ml). Añadir hidruro de litio (0,81 g,
102,05 mmol) y agitar a TA durante la noche. Añadir 100 ml de agua
y HCl 3N hasta pH= 7. Filtrar el sólido amarillo para proporcionar
el compuesto del título (93%).
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6})
\delta 10,25 (a s, 1H), 8,41 (d, J= 8,59 Hz, 1H), 7,50 (d, J= 8,59
Hz, 1H), 2,95 (2, 6H).
\vskip1.000000\baselineskip
Calentar una mezcla de ácido
N,N-dimetil-N'-(6-bromo-3-nitropiridin-2-il)sulfónico
(11,6 g, 35,69 mmol) y cloruro de estaño (40 g, 178 mmol) en
EtOAc:EtOH a 500:250 ml durante 4 horas. Concentrar y purificar el
residuo (cromatografía en gel de sílice, eluyendo con 1:1 de
hexano:EtOAc). Triturar con agua para proporcionar el compuesto del
título (85%). EM (ES): m/z = 297 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Agitar una mezcla de ácido
N,N-dimetil-N'-(3-amino-6-bromopiridin-2-il)sulfónico
(0,40 g, 1,35 mmol), bromuro de cianógeno (0,08 g, 1,48 mmol) y
metóxido de litio (0,08, 2,02 mmol) en
1,2-dicloroetano (400 ml). Agitar a 80ºC durante 2
horas. Concentrar y purificar el residuo (cromatografía en gel de
sílice, eluyendo con una proporción 1:1 de hexanos:EtOAc) para dar
el compuesto del título (82%).
EM (ES): m/z = 322 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación
36
Combinar
5-bromo-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
(30,00 g, 105,94 mmol), Et_{3}N (60 ml) y
Pd(OAc)_{2}[P(Ph)_{3}]_{2}
(3,97 g, 5,30 mmol) en tolueno (150 ml) y calentar la mezcla
resultante hasta \sim65ºC en atmósfera de nitrógeno. A la mezcla
anterior añadir gota a gota
1-etinil-2,4-difluoro-benceno
(21,95 g, 158,92 mmol) en tolueno (30 ml) y después calentar la
mezcla de reacción resultante a 80ºC durante 3 horas. Enfriar la
reacción hasta 25ºC e inactivar con NH_{3}Cl acuoso saturado (300
ml). Agitar la mezcla de reacción resultante a temperatura ambiente
durante 20 minutos, después filtrar, lavar el sólido con H_{2}O y
secar en filtración al vacío durante 30 minutos. Suspender el sólido
en MTBE (200 ml), después filtrar y aclarar con MTBE (50 ml). Secar
el sólido recuperado en filtración al vacío para proporcionar 14,47
g del compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo
claro.
EM(ES+): m/z= 341 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Tratar una solución de
5-(2,4-difluoro-feniletinil)-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
(14,47 g, 42,51 mmol) en acetona (350 ml) con una solución de MgSO_{4} (10,23 g, 85,00 mmol) y NaHCO_{3} (1,79 g, 21,30 mmol) en agua (200 ml). Colocar la mezcla de reacción resultante en un baño de H_{2}O. Añadir celite (28,50 g), seguido por KMnO_{4} (14,11 g, 89,28 mmol) durante 10 minutos, dado que la reacción es exotérmica a \sim30ºC. Agitar a temperatura ambiente durante 3 horas, después inactivar con 10% en peso de Na_{2}SO_{4} acuoso (150 ml). Agitar durante 30 minutos, después filtrar sobre una lámina de celite, lavando con 10% de MeOH/EtOAc (2 x 700 ml cada uno). Separar las capas del filtrado y extraer la fase acuosa con EtOAc (2 x 500 ml cada uno). Lavar las fases orgánicas combinadas con H_{2}O (500 ml) y cloruro sódico acuoso saturado (500 ml), después secar sobre Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar a presión reducida para dar un sólido. Lavar la lámina de filtro de celite con 10% de MeOH/EtOAc y concentrar el filtrado a presión reducida para obtener sólido adicional. Combinar los sólidos y purificar mediante cromatografía en columna, eluyendo con 2% de NH_{4} 2N/MeOH en EtOAc, después 5% de NH_{4} 2N/MeOH en EtOAc, para dar 13,08 g (rendimiento 82%) del compuesto del título en forma de un sólido de color naranja-marrón.
(14,47 g, 42,51 mmol) en acetona (350 ml) con una solución de MgSO_{4} (10,23 g, 85,00 mmol) y NaHCO_{3} (1,79 g, 21,30 mmol) en agua (200 ml). Colocar la mezcla de reacción resultante en un baño de H_{2}O. Añadir celite (28,50 g), seguido por KMnO_{4} (14,11 g, 89,28 mmol) durante 10 minutos, dado que la reacción es exotérmica a \sim30ºC. Agitar a temperatura ambiente durante 3 horas, después inactivar con 10% en peso de Na_{2}SO_{4} acuoso (150 ml). Agitar durante 30 minutos, después filtrar sobre una lámina de celite, lavando con 10% de MeOH/EtOAc (2 x 700 ml cada uno). Separar las capas del filtrado y extraer la fase acuosa con EtOAc (2 x 500 ml cada uno). Lavar las fases orgánicas combinadas con H_{2}O (500 ml) y cloruro sódico acuoso saturado (500 ml), después secar sobre Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar a presión reducida para dar un sólido. Lavar la lámina de filtro de celite con 10% de MeOH/EtOAc y concentrar el filtrado a presión reducida para obtener sólido adicional. Combinar los sólidos y purificar mediante cromatografía en columna, eluyendo con 2% de NH_{4} 2N/MeOH en EtOAc, después 5% de NH_{4} 2N/MeOH en EtOAc, para dar 13,08 g (rendimiento 82%) del compuesto del título en forma de un sólido de color naranja-marrón.
EM (ES+): m/z = 373 (M+1).
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación
37
Disolver
[6-(4-fluoro-feniletinil)-3-nitro-piridin-2-il]-(1(R),2,2-trimetilpropil)-amina
(2,73 g, 8,00 mmol) en acetona (60 ml). Añadir agua (20 ml),
después NaHCO_{3} (336 mg, 4 mmol, 0,5 equiv.) y MgSO_{4} (1,9
g, 16 mmol, 2,0 equiv.) y enfriar la reacción hasta aproximadamente
3ºC. Añadir KMnO_{4} (2,5 g, 16 mmol, 2,0 equiv.) en porciones
con agitación enérgica manteniendo la temperatura por debajo de 3ºC.
Inactivar la reacción después de 1-2 h añadiendo
agua (20 ml) y Na_{2}SO_{3} (4,5 g, 36 mmol) y agitando la
mezcla a temperatura ambiente durante 1 hora. Filtrar la suspensión
sobre Celite® con la ayuda de 600 ml de acetato de etilo y
aproximadamente 300 ml de agua. Separar las capas y lavar la capa
orgánica cuatro veces con NaHCO_{3} acuoso saturado y dos veces
con NaCl acuoso saturado. Secar la capa orgánica con
Na_{2}SO_{4}, filtrar los sólidos y concentrar el sobrenadante
a presión reducida. Someter el residuo a cromatografía en gel de
sílice a presión media eluyendo con un gradiente del
50-70% de CH_{2}Cl_{2} en hexanos para dar el
compuesto deseado en forma de un aceite naranja (1,82 g, rendimiento
del 61%).
EM (ESI): m/z = 374,1 (M+H)+.
\vskip1.000000\baselineskip
Disolver
1-[6-(1(R),2,2-trimetilpropilamino)-5-nitropiridin-2-il]-2-((4-fluorofenil)etano-1,2-diona
(747 mg,
2,0 mmol) en ácido acético glacial (10 ml), añadir acetato amónico (2,3 g, 30 mmol, 15 equiv.) y, después, añadir trimetilacetaldehído (344 mg, 4,0 mmol, 2 equiv.). Calentar la mezcla de reacción hasta 100ºC durante 1 hora y concentrar a presión reducida. Repartir los sólidos resultantes entre acetato de etilo y agua. Lavar la capa orgánica 5 veces con NaHCO_{3} acuoso saturado y dos veces con NaCl acuoso saturado. Secar la capa orgánica con Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar a presión reducida. Someter el residuo a cromatografía en gel de sílice a presión media eluyendo con un sistema isocrático de 10% de acetato de etilo/hexanos, para dar el compuesto del título en forma de un sólido naranja. (589 mg, rendimiento del 67%).
2,0 mmol) en ácido acético glacial (10 ml), añadir acetato amónico (2,3 g, 30 mmol, 15 equiv.) y, después, añadir trimetilacetaldehído (344 mg, 4,0 mmol, 2 equiv.). Calentar la mezcla de reacción hasta 100ºC durante 1 hora y concentrar a presión reducida. Repartir los sólidos resultantes entre acetato de etilo y agua. Lavar la capa orgánica 5 veces con NaHCO_{3} acuoso saturado y dos veces con NaCl acuoso saturado. Secar la capa orgánica con Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar a presión reducida. Someter el residuo a cromatografía en gel de sílice a presión media eluyendo con un sistema isocrático de 10% de acetato de etilo/hexanos, para dar el compuesto del título en forma de un sólido naranja. (589 mg, rendimiento del 67%).
EM (ESI): m/z = 440,2 (M+H)+.
Los compuestos de las preparaciones
38-40 pueden prepararse esencialmente como se
describe en la preparación 37.
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación
41
Disolver
1-(4-fluoro-fenil)-2-[5-nitro-6-(2,2-dimetilpropilamino)-piridin-2-il]-etano-1,2-diona
(1,08 g, 3,0 mmol) en ácido acético glacial, añadir acetato amónico
(3,47 g, 45 mmol, 15 equiv.) y, después, añadir trimetilacetaldehído
(517 mg, 6,0 mmol, 2 equiv.). Calentar la mezcla de reacción hasta
100ºC durante 1 hora y concentrar a presión reducida. Repartir los
sólidos resultantes entre acetato de etilo y agua. Añadir
NaHCO_{3} hasta que cese la evolución de gas. Lavar la capa
orgánica 5 veces con NaHCO_{3} acuoso saturado y una vez con NaCl
acuoso saturado. Secar la capa orgánica con Na_{2}SO_{4},
filtrar y concentrar a presión reducida, para dar el compuesto del
título en forma de un sólido amarillo-naranja. (1,25
g, rendimiento del 97%)
EM exacta: calc.: m/z= 426.230 (M+H)+;
encontrado: m/z= 426,2313 (M+H)+.
\vskip1.000000\baselineskip
Agitar una suspensión de
6-(2-terc-butil-5-fenil-3H-imidazol-4-il)-3-nitropiridin-2-il]-(2,2-dimetilpropil)amina
(0,20 g, 0,5 mmol) y 10% de paladio sobre carbono (0,025 g) en EtOH (10 ml) bajo un globo de hidrógeno durante la noche. Filtrar la suspensión a través de un agente de filtración y lavar con EtOH (2 x 5 ml). Concentrar el filtrado hasta aproximadamente 5 ml y tratar a TA con bromuro de cianógeno (1,3 mmol). Inactivar con bicarbonato sódico acuoso saturado (2 ml) y agitar durante 15-60 minutos. Diluir la mezcla con agua (5 ml) y extraer con CH_{2}Cl_{2} (2 x 10 ml). Lavar las fases orgánicas combinadas con NaCl acuoso saturado (5 ml), secar con MgSO_{4}, filtrar, concentrar y purificar (cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente de etapas, comenzando con 100% de CH_{2}Cl_{2} a 5:95 de MeOH amoniacado:CH_{2}Cl_{2}), para dar el compuesto deseado. Se aísla la base libre u después se convierte en la sal metanosulfonato mediante tratamiento de una solución de MeOH-agua con ácido metanosulfónico, seguido por liofilización, para dar el compuesto del título. EM (ES): m/z = 402 [M+H].
(0,20 g, 0,5 mmol) y 10% de paladio sobre carbono (0,025 g) en EtOH (10 ml) bajo un globo de hidrógeno durante la noche. Filtrar la suspensión a través de un agente de filtración y lavar con EtOH (2 x 5 ml). Concentrar el filtrado hasta aproximadamente 5 ml y tratar a TA con bromuro de cianógeno (1,3 mmol). Inactivar con bicarbonato sódico acuoso saturado (2 ml) y agitar durante 15-60 minutos. Diluir la mezcla con agua (5 ml) y extraer con CH_{2}Cl_{2} (2 x 10 ml). Lavar las fases orgánicas combinadas con NaCl acuoso saturado (5 ml), secar con MgSO_{4}, filtrar, concentrar y purificar (cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente de etapas, comenzando con 100% de CH_{2}Cl_{2} a 5:95 de MeOH amoniacado:CH_{2}Cl_{2}), para dar el compuesto deseado. Se aísla la base libre u después se convierte en la sal metanosulfonato mediante tratamiento de una solución de MeOH-agua con ácido metanosulfónico, seguido por liofilización, para dar el compuesto del título. EM (ES): m/z = 402 [M+H].
\newpage
Los compuestos de los EjemploS
2-14 pueden prepararse esencialmente como se ha
descrito en el Ejemplo 1.
\vskip1.000000\baselineskip
Tratar una suspensión de
(ciclopropilmetil{6-[2-(2,6-diclorofenil)-5-(4-fluorofenil)-3H-imidazol-4-il]-3-nitropiridin-2-il}amina
(0,250 g, 0,5 mmol) en EtOH (10 ml) con dihidrato dicloruro de
estaño (0,5641 g, 2,5 mmol) y calentar a reflujo durante 2,5 horas
en nitrógeno. Enfriar hasta TA e inactivar lentamente con
NaHCO_{3} acuoso saturado (5 ml) y EtOAc (5 ml). Añadir agente de
filtración a la suspensión resultante y diluir la mezcla con 5 ml de
NaHCO_{3} y EtOAc. Filtrar la mezcla a través de una lámina del
agente de filtración. Lavar el sólido con 10 ml de cada uno de los
siguientes NaHCO_{3} y EtOAc. Separar las capas y extraer la fase
acuosa con EtOAc con10 ml. Lavar las fases orgánicas combinadas con
NaCl acuoso saturado (5 ml), secar con MgSO_{4}, filtrar y
concentrar. Disolver la fenilendiamina bruta en EtOH (5 ml) y tratar
con bromuro de cianógeno (1,0 mmol). Inactivar con NaHCO_{3}
acuoso saturado (2 ml) y agitar durante 15-60
minutos. Diluir la mezcla con agua (5 ml) y extraer con
CH_{2}Cl_{2} (2 x 10 ml). Lavar las fases orgánicas combinadas
con NaCl acuoso saturado (5 ml), secar con MgSO_{4}, filtrar,
concentrar y purificar (cromatografía en gel de sílice, eluyendo con
un gradiente de etapas, comenzando con 100% de CH_{2}Cl_{2} a
5:95 5% de amoniaco en MeOH:CH_{2}Cl_{2}) para dar el compuesto
deseado. Aislar la base libre y convertirla en la sal
metanosulfonato mediante tratamiento de una solución de
MeOH-agua con ácido metanosulfónico, seguido por
liofilización.
EM (ES): m/z = 495,1 [M+H].
\newpage
Los compuestos de los EjemploS
16-35 se pueden preparar esencialmente como se
describe en el Ejemplo 15.
Reducir y aislar la
{6-[2-terc-butil-5-(4-fluorofenil)-3H-imidazol-4-il]-3-nitropiridin-2-il}-(2,2-dimetilpropil)amina
(0,43 g; 1,0 mmol) como en el Ejemplo 1. Reaccionar la diamina
bruta con trietilortoacetato neto a 120ºC durante la noche.
Concentrar y diluir con 15 ml de HCl 1N. Neutralizar con NaHCO_{3}
saturado y extraer con CH_{2}Cl_{2}. Lavar la capa orgánica con
NaCl saturado, secar con Na_{2}SO_{4}, concentrar y purificar
(cromatografía en gel de sílice, eluyendo con
EtOAc:CH_{2}Cl_{2} a 50:50) para dar el compuesto del título en
forma de un sólido marrón (0,11 g, rendimiento de 53%). El producto
de base libre se convierte en la sal de metanosulfonato
esencialmente como se ha descrito en el Ejemplo 1.
EM (ES): m/z = 420 [M+H].
Los compuestos de los EjemploS
37-38 pueden prepararse esencialmente como se
describe en el Ejemplo 36.
Reducir la
{6-[2-(2,6-difluorofenil)-5-fenil-3H-imidazol-4-il]-3-nitropiridin-2-il}-(2,2-dimetilpropil)amina
esencialmente como se ha descrito en el Ejemplo 16 y después hacer
reaccionar la diamina en trimetilortoacetato como se describe en el
Ejemplo 36, para dar la base libre en forma de un sólido marrón
(0,11 g, rendimiento 49%). El metanosulfonato de la base libre se
forma esencialmente como se ha descrito en el Ejemplo 1.
EM (ES): m/z = 458 [M+H].
\newpage
Los compuestos de los Ejemplos
40-45 pueden prepararse esencialmente como se
describe en el Ejemplo 39.
Reducir la
{6-[2-(2-cloro-6-fluorofenil)-5-fenil-3H-imidazol-4-il]-3-nitropiridin-2-il}-(2,2-dimetilpropil)
amina como se ha descrito en el Ejemplo 15. Hacer reaccionar la
diamina con trietilortoformiato neto en reflujo durante 24 horas a
TA durante 24 horas adicionales. Purificar y aislar la base libre
esencialmente como se ha descrito en el Ejemplo 36 (0,11 g,
rendimiento 49%). Convertir en el metanosulfonato esencialmente
como se ha descrito en el Ejemplo 1.
EM (ES): m/z = 460 [M+H].
Los compuestos de los Ejemplos
47-48 pueden prepararse esencialmente como se
describe en el Ejemplo 46.
A una solución de
2-isobutilamino-3-nitro-6-[3-(4-fluorofenil)-1-isopropilpirazol-4-il]piridina
(0,50 g, 1,27 mmol) en 25 ml de THF:H_{2}O a 1:1 añadir
hidrosulfito de sodio (2,55 g, 14,6 mmol), en presencia de
NH_{4}OH (8,70 ml, 32% en H_{2}O). Diluir con agua (25 ml) tras
2 horas. Extraer con EtOAc (100 ml), secar con MgSO_{4} y
concentrar. Disolver el residuo en CH_{2}Cl_{2}:EtOH a 1:1 (25
ml), añadir bromuro de cianógeno (0,16 g, 1,51 mmol) y agitar
durante aproximadamente 48 horas. Concentrar y purificar el residuo
(cromatografía en gel de sílice, eluyendo con EtOAc:MeOH 16:1).
Recristalizar en éter dietílico: hexanos pata proporcionar la base
libre (0,,44 g, 88%). Convertir en el metanosulfonato esencialmente
como se ha descrito en el Ejemplo 1 (rendimiento 58%).
EM (ES): m/z = 393 [M+H].
Los compuestos de los Ejemplos
50-62 pueden prepararse esencialmente como se
describe en el Ejemplo 49.
Someter a reflujo la
N'-{5-[2,6-difluorofenil)-5-fenil-3H-imidazol-4-il]-3-isobutil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
preparada esencialmente como se ha descrito en el Ejemplo 1 (0,10
g, 0,225 mmol), N, N-dimetilformamida dimetil
acetal (0,05 ml, 0,4 mmol) en tolueno (1,5 ml) durante 2 horas.
Enfriar hasta TA y concentrar. Purificar (cromatografía en gel de
sílice, eluyendo con una proporción 1:1 de
CH_{2}Cl_{2}:acetonitrilo) para dar el compuesto del título
(0,11 g).
EM (ES): m/z = 500 [M+H].
El compuesto del Ejemplo 64 puede prepararse
esencialmente como se describe en el Ejemplo 63.
Agitar la
N'-{5-[2-(2,6-diclorofenil)-5-fenil-3H-imidazol-4-il]-3-isobutil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il}-N,N-dimetilformamidina
preparada esencialmente como se ha descrito en el Ejemplo 63 (0,10
g, 0,188 mmol), yodometano (0,040 g, 0,282 mmol) y Cs_{2}CO_{3}
(0,09 g, 0,28 mmol) en DMF (1,5 ml) a TA durante aproximadamente 24
horas. Extraer con EtOAc y lavar con agua (3 veces), NaCl acuoso
saturado, después secar sobre Na_{2}SO_{4}. Filtrar y
concentrar para dar una mezcla de isómeros de metilo. Purificar
(cromatografía en gel de sílice), eluyendo con una proporción
1:1:0,4 de CH_{2}Cl_{2}:acetonitrilo:hexanos para dar el
compuesto del título (0,02 g).
EM (ES): m/z = 548 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
Calentar la
N'-{5-[2-(2,6-difluorofenil)-3-metil-5-fenil-3H-imidazol-4-il]-3-isobutil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il}-N,N-dimetilformamidina
(0,02 g, 0,04 mol) en una proporción 1:1 de ácido acético
glacial:HCl concentrado (0,6 ml) a 100ºC durante 30 minutos.
Enfriar hasta la TA. Añadir CH_{2}Cl_{2} y agua, neutralizar con
NaOH 5N hasta aproximadamente pH= 7 con agitación rápida. Extraer
la fase acuosa 3 veces con CH_{2}Cl_{2}, combinar las capas
orgánicas, lavar con NaCl acuoso saturado y secar sobre
Na_{2}SO_{4}. Filtrar y concentrar para proporcionar el
compuesto del título (0,02 g).
EM (ES): m/z = 459 [M+H].
El compuesto del Ejemplo 67 puede prepararse
esencialmente como se describe en el Ejemplo 66.
\vskip1.000000\baselineskip
Suspender la
(2,2-dimetil-propil)-[3-nitro-6-(5-fenil-3H-[1,2,3]triazol-4-il)piridin-2-il]amina
(0,180 g, 0,51 mmol) y 10% de Pd/C (0,025 g) en EtOH (10 ml) y
agitar a TA bajo un globo que contiene hidrógeno durante 5 horas.
Filtrar la mezcla de reacción usando un agente de filtración y
concentrar hasta aproximadamente la mitad del volumen de la
reacción. Usar la diamina inmediatamente sin posterior aislamiento
o purificación (EM (ES): m/z 323 [M + H], y tratar con bromuro de
cianógeno (0,09 g) en EtOH (5 ml). Agitar en nitrógeno durante 3,5
horas, inactivar con NaHCO_{3} acuoso saturado (2,0 ml), agitar,
diluir con CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y H_{2}O (5 ml) y separar las
fases. Extraer la fase acuosa con CH_{2}Cl_{2} (2 x 5 ml), lavar
las fases orgánicas combinadas con 5 ml cada una de H_{2}O y NaCl
acuoso saturado, y secar con MgSO_{4}. Filtrar y concentrar.
Purificar el residuo (cromatografía en gel de sílice, eluyendo con
amoniaco 2,0M en MeOH:CH_{2}Cl_{2} en una proporción de 4:96)
para dar la base libre. Convertir en la sal de metanosulfonato
mediante tratamiento de una solución de MeOH-agua
con ácido metanosulfónico, seguido por liofilización, para dar el
compuesto del título (0,07 g, 39%).
EM (ES): m/z = 348 [M+H].
Los compuestos de los Ejemplos
69-71 pueden prepararse esencialmente como se
describe en el Ejemplo 68.
\vskip1.000000\baselineskip
A una solución de nitrito sódico en agua (0,1
ml) (0,184 g, 2,66 mmol), añadir gota a gota una solución de
6-[2-(2-cloro-6-fluorofenil)-5-fenil-1H-imidazol-4-il]-N^{2}-isobutilpiridina-2,3-diamina
(1,1 g, 2,52 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (9 ml) y 50% de AcOH acuoso
(9 ml) Agitar la mezcla de reacción durante 15 minutos, añadir
CH_{2}Cl_{2} adicional y lavar la capa orgánica con una solución
de NaCl acuoso saturado, NaHCO_{3} acuoso (5%), secar con
MgSO_{4} y concentrar. Purificar el residuo (cromatografía en gel
de sílice, eluyendo con hexano:EtOAc a una proporción de 4:1 a 1:2)
para dar la base libre (70%). EM (ES): m/z = 447 [M+H]
Añadir 0,34 ml de una solución 1M de ácido metanosulfónico en
CH_{2}Cl_{2}:MeOH en una proporción de 9:1 a una solución de la
base libre (0,15 g, 0,336 mmol) en 10 ml de CH_{2}Cl_{2}:MeOH en
una proporción de 9:1. Agitar la solución 5 minutos, concentrar y
triturar el sólido blanco en éter dietílico. Filtrar el sólido para
proporcionar el compuesto del título (71%).
EM (ES): m/z = 447 [M+H].
Los compuestos de los Ejemplos
73-75 pueden prepararse esencialmente como se
describe en el Ejemplo 72.
\vskip1.000000\baselineskip
Calentar una mezcla de ácido
2-amino-5-(2-oxo-2-fenilacetil)imidazo[4,5-b]piridina-3-sulfónico
dimetilamida (0,07 g, 0,20 mmol), trimetilacetaldehído (65 \mul,
0,6 mmol) y acetato amónico (0,23 g, 3 mmol) en AcOH (5 ml) a 90ºC
durante 4 horas. Enfriar hasta la TA. Diluir con NaHCO_{3} acuoso
saturado y extraer con EtOAc. Concentrar la fase orgánica y
purificar (cromatografía en gel de sílice, eluyendo con
CH_{2}Cl_{2}:MeOH en una proporción de 15:1) para dar la base
libre (35%). EM (ES): m/z = 438 [M+H] Añadir 5,4 \mul de
una solución 1M de ácido metanosulfónico en CH_{2}Cl_{2}:MeOH en
una proporción de 95:5 a una solución de la base libre (0,02 g,
0,054 mmol) en 5 ml de CH_{2}Cl_{2}:MeOH en una proporción de
95:5. Agitar la solución 5 minutos, concentrar y triturar el sólido
blanco en éter dietílico. Filtrar el sólido para dar el compuesto
del título (71%).
EM (ES): m/z = 440 [M+H].
\newpage
Los compuestos de los Ejemplos
77-79 pueden prepararse esencialmente como se
describe en el Ejemplo 76.
\vskip1.000000\baselineskip
Agitar una mezcla de ácido
propano-2-sulfónico
{3-amino-6-[2-(2,6-difluorofenil)-5-fenil-3H-imidazol-4-il]-piridin-2-il)
amida (0,37 g, 0,79 mmol), bromuro de cianógeno (0,104 g, 0,99
mmol) y metóxido de litio (0,033 g, 0,87 mmol) en cloruro de
metileno (10 ml) durante 12 horas a TA. Añadir NaHCO_{3} saturado
(10 ml) y agitar durante 1 hora. Separar las capas y extraer con
NaCl acuoso saturado. Secar la capa orgánica sobre NaSO_{4},
concentrar y purificar (cromatografía en gel de sílice, eluyendo
con un gradiente de 40:60 de EtOAc:hexanos a 80:20 de
EtOAc:hexanos) para dar la base libre (0,21 g,54%). EM (ES):
m/z = 495 [M+H] Añadir ácido metanosulfónico a una solución
de la base libre en 1 ml de una mezcla 5:a de metanol:cloruro de
metileno. Concentrar la solución y añadir éter dietílico. Filtrar
el sólido y secar, para dar el compuesto del título.
EM (ES): m/z = 495 [M+H].
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Tabla pasa a página
siguiente)
\newpage
Los compuestos de los Ejemplos
81-91 pueden prepararse esencialmente como se
describe en el Ejemplo 80.
\vskip1.000000\baselineskip
Introducir burbujas de nitrógeno en una
suspensión de
2-terc-butil-4-(4-fluorofenil)oxazol
(0,145 g, 0,66 mmol),
5-bromo-3-isobutil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
(0,355 g, 1,32 mmol), carbonato de cesio (6,06 g, 18,6 mmol),
acetato de paladio (II) (0,201 g, 10%) y trifenilfosfina (0,14 g,
0,07 mmol) en DMF (1,5 ml). Calentar la reacción a 100ºC durante la
noche, enfriar hasta la TA y repartir entre EtOAc y NaCl acuoso
saturado. Lavar la capa orgánica con NaCl acuoso saturado. Secar
con Na_{2}SO_{4}, filtrar, concentrar y purificar
(cromatografía en gel de sílice, eluyendo con 2% de amoniaco 2M/MeOH
en CH_{2}Cl_{2}, para dar el compuesto del título (0,07 g, 34%).
EM (ES): m/z = 408 [M+H]
Los compuestos de los EjemploS
93-96 pueden prepararse esencialmente como se ha
descrito en el Ejemplo 92, con la base libre convertida en el
metanosulfonato esencialmente como se ha descrito en el Ejemplo
1.
Disolver ácido
2-amino-5-bromoimidazo[4,5-b]piridina-3-sulfónico
dimetilamida (0,05 g, 0,156 mmol) en tolueno (3 ml) en un tubo
sellado. Añadir
2-terc-butil-4-(4-fluorofenil)-5-trimetilestannaniloxazol
(0,07 g, 0,17 mmol) y tetrakis (trifenilfosfina)paladio (0)
(0,02 g, 0,015 mmol). Calentar la mezcla a 110ºC durante 4 horas.
Concentrar y purificar (cromatografía en gel de sílice, eluyendo con
CH_{2}Cl_{2}:MeOH en una proporción de 20:1), para dar el
compuesto del título. (14%).
EM (ES): m/z = 459 [M+H].
Los compuestos del Ejemplo 98 pueden prepararse
esencialmente como se ha descrito en el Ejemplo 97, con la base
libre convertida en el metanosulfonato esencialmente como se ha
descrito en el Ejemplo 1.
\vskip1.000000\baselineskip
Mezclar
l-[2-amino-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il]-2-(4-fluoro-fenil)-etano-1,2-diona
(19,58 g, 55,24 mmol), 2,6-dicloro-benzaldehído (15,47 g, 88,39 mmol) y NH_{4}OAc (42,58 g, 552,41 mmol) en ácido acético glacial (200 ml) y agitar a 85ºC en nitrógeno durante 5 horas. Concentrar la mezcla de reacción resultante a presión reducida. Disolver el residuo en acetato de etilo (2.000 ml) y lavar la solución resultante con bicarbonato sódico acuoso saturado (2 X 1.000 ml cada uno), agua (1.000 ml) y cloruro sódico acuoso saturado (1.000 ml). Secar las fases orgánicas sobre MgSO_{4}, filtrar y después concentrar a presión reducida. Purificar mediante cromatografía de columna, eluyendo con acetato de etilo-hexanos (1:1), después acetato de etilo y hexanos (2:1), después acetato de etilo neto, después 5% de NH_{3} 2N/MeOH en acetato de etilo, para dar 11,70 g (rendimiento de 41,5%) de 5-[2-(2,6-dicloro-fenil)-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetilpropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina en forma de un sólido blancuzco. EM(ES+): m/z = 509 (M+1).
(19,58 g, 55,24 mmol), 2,6-dicloro-benzaldehído (15,47 g, 88,39 mmol) y NH_{4}OAc (42,58 g, 552,41 mmol) en ácido acético glacial (200 ml) y agitar a 85ºC en nitrógeno durante 5 horas. Concentrar la mezcla de reacción resultante a presión reducida. Disolver el residuo en acetato de etilo (2.000 ml) y lavar la solución resultante con bicarbonato sódico acuoso saturado (2 X 1.000 ml cada uno), agua (1.000 ml) y cloruro sódico acuoso saturado (1.000 ml). Secar las fases orgánicas sobre MgSO_{4}, filtrar y después concentrar a presión reducida. Purificar mediante cromatografía de columna, eluyendo con acetato de etilo-hexanos (1:1), después acetato de etilo y hexanos (2:1), después acetato de etilo neto, después 5% de NH_{3} 2N/MeOH en acetato de etilo, para dar 11,70 g (rendimiento de 41,5%) de 5-[2-(2,6-dicloro-fenil)-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetilpropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina en forma de un sólido blancuzco. EM(ES+): m/z = 509 (M+1).
Mezclar
5-[2-(2,6-dicloro-fenil)-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
(11,20 g, 21,99 mmol) en metanol (150 ml) y después añadir, gota a
gota, una solución de ácido metanosulfónico (2,11 g, 21,96 mmol) en
metanol (10 ml). Agitar a temperatura ambiente durante 20 minutos y
después concentrar a presión reducida. Añadir acetato de etilo (150
ml), filtrar la suspensión resultarte y lavar la torta con éter
dietílico (200 ml). Secar el sólido resultante en un horno de secado
a 80ºC en vacío doméstico durante 2 horas, para dar 12,765 g
(rendimiento de 95%) del compuesto del título en forma de un sólido
morado
claro.
claro.
RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD): \delta
7,78-7,50 (m, 7H), 7,24-7,20 (m,
2H), 3,86 (s, 2H), 2,70 (s, 3H), 0,85 (s, 9H).
TOF-EM [ES+, M+H] Obs. m/z
509,1412, Calc. m/z 509,1423.
\vskip1.000000\baselineskip
Mezclar
l-[2-amino-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il]-2-(4-fluoro-fenil)-etano-1,2-diona
(18,32g, 51,69 mmol) y 2-fluoro-6-trifluorometil-benzaldehído (15,00 g, 78,08 mmol) y NH_{4}OAc (39,84 g, 516,90 mmol) en ácido acético glacial (200 ml) y agitar a 85ºC en nitrógeno durante 4 horas. Concentrar la mezcla de reacción resultante a presión reducida. Disolver el residuo en acetato de etilo (2.000 ml) y lavar la solución resultante con NaHCO_{3} acuoso saturado (2 X 1.000 ml cada uno), agua (1.000 ml) y cloruro sódico acuoso saturado (1.000 ml). Secar las fases orgánicas sobre MgSO_{4}, filtrar y después concentrar a presión reducida. Purificar mediante cromatografía en columna, eluyendo con acetato de etilo neto, después 2% de amoniaco 2N/MeOH en acetato de etilo, después 5% de amoniaco 2N/MeOH en acetato de etilo, para dar 7,38 g de 3-(2,2-dimetilpropil)-5-[5-(4-fluoro-fenil)-2-(2-fluoro-6-trifluorometil-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina en forma de un sólido blancuzco. Purificar las fracciones impuras mediante cromatografía en columna, eluyendo con acetato de etilo neto, después 1% de amoniaco 2N/MeOH en acetato de etilo, después 2% de amoniaco 2N/MeOH en acetato de etilo, Después 3% de amoniaco 2N/MeOH en acetato de etilo), para dar 4,68 g adicionales del compuesto deseado.
(18,32g, 51,69 mmol) y 2-fluoro-6-trifluorometil-benzaldehído (15,00 g, 78,08 mmol) y NH_{4}OAc (39,84 g, 516,90 mmol) en ácido acético glacial (200 ml) y agitar a 85ºC en nitrógeno durante 4 horas. Concentrar la mezcla de reacción resultante a presión reducida. Disolver el residuo en acetato de etilo (2.000 ml) y lavar la solución resultante con NaHCO_{3} acuoso saturado (2 X 1.000 ml cada uno), agua (1.000 ml) y cloruro sódico acuoso saturado (1.000 ml). Secar las fases orgánicas sobre MgSO_{4}, filtrar y después concentrar a presión reducida. Purificar mediante cromatografía en columna, eluyendo con acetato de etilo neto, después 2% de amoniaco 2N/MeOH en acetato de etilo, después 5% de amoniaco 2N/MeOH en acetato de etilo, para dar 7,38 g de 3-(2,2-dimetilpropil)-5-[5-(4-fluoro-fenil)-2-(2-fluoro-6-trifluorometil-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina en forma de un sólido blancuzco. Purificar las fracciones impuras mediante cromatografía en columna, eluyendo con acetato de etilo neto, después 1% de amoniaco 2N/MeOH en acetato de etilo, después 2% de amoniaco 2N/MeOH en acetato de etilo, Después 3% de amoniaco 2N/MeOH en acetato de etilo), para dar 4,68 g adicionales del compuesto deseado.
EM(ES+): m/z= 527 (M+1).
Mezclar
3-(2,2-dimetil-propil)-5-[5-(4-fluoro-fenil)-2-(2-fluoro-6-trifluorometilfenil)-1H-imidazol-4-il]-3H-imi-
dazo[4,5-b]piridin-2-ilamina (11,56 g, 21,95 mmol) en metanol (150 ml) y después añadir, gota a gota, una solución de ácido metanosulfónico (2,11 g, 21,96 mmol) en MeOH (10 ml). Dejar agitar la mezcla de reacción resultante a temperatura ambiente durante 20 minutos, después concentrar a presión reducida. Suspender el residuo en éter dietílico, filtrar y lavar con éter dietílico fresco. Secar el sólido resultante en un horno de secado a temperatura ambiente en vacío doméstico durante 48 horas, para dar 12,015 g (rendimiento de 87,9%) del compuesto del título en forma de un sólido morado claro.
dazo[4,5-b]piridin-2-ilamina (11,56 g, 21,95 mmol) en metanol (150 ml) y después añadir, gota a gota, una solución de ácido metanosulfónico (2,11 g, 21,96 mmol) en MeOH (10 ml). Dejar agitar la mezcla de reacción resultante a temperatura ambiente durante 20 minutos, después concentrar a presión reducida. Suspender el residuo en éter dietílico, filtrar y lavar con éter dietílico fresco. Secar el sólido resultante en un horno de secado a temperatura ambiente en vacío doméstico durante 48 horas, para dar 12,015 g (rendimiento de 87,9%) del compuesto del título en forma de un sólido morado claro.
RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD): \delta
7,84-7,60 (m, 7H), 7,24-7,20 (m,
2H), 3,86 (s, 2H), 2,70 (s, 3H), 0,85 (s, 9H).
TOF-EM [ES+, M+H] Obs. m/z
527,1979, Calc. m/z 527,1982.
\newpage
Mezclar
1-[2-amino-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il]-2-(2,4-difluoro-fenil)-etano-1,2-diona
(17,36 g, 46,62 mmol) y trimetilacetaldehído (6,42 g, 74,53 mmol) y
NH_{4}OAc (35,93 g, 466,20 mmol) en ácido acético glacial (200
ml) y agitar a 85ºC en nitrógeno durante 4,5 horas. Enfriar hasta la
temperatura ambiente durante la noche. Calentar la reacción a 85ºC
durante 5 horas, después 100ºC durante 3 horas, después enfriar
hasta la temperatura ambiente durante la noche. Concentrar la mezcla
de reacción resultante a presión reducida. Disolver el residuo en
EtOAc (2 l) y lavar la solución resultante con NaHCO_{3} saturado
(2 X 1 l), H_{2}O (1 l) y cloruro sódico acuoso saturado (1 l).
Secar las fases orgánicas sobre Na_{2}SO_{4}, filtrar y después
concentrar a presión reducida. Purificar mediante cromatografía en
columna, eluyendo con EtOAc neto, después 1% de amoniaco 2N/MeOH en
EtOAc, después 2% de amoniaco 2N/MeOH en EtOAc, después 3% de
amoniaco 2N/MeOH en EtOAc), para dar 10,28 g de
5-[2-terc-butil-5-(2,4-difluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en forma de un sólido blancuzco.
EM(ES+): m/z_ = 439 (M+1).
Mezclar
5-[2-terc-butil-5-(2,4-difluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
(11,55 g, 26,33 mmol) en MeOH (150 ml) y después añadir, gota a
gota, una solución de ácido metanosulfónico (2,53 g, 26,33 mmol) en
MeOH (10 ml). Agitar la mezcla de reacción resultante a temperatura
ambiente durante 20 minutos, después concentrar a presión reducida.
Suspender el residuo en Et_{2}O, después filtrar y lavar con
Et_{2}O fresco. Secar el sólido resultante en un horno de secado a
temperatura ambiente en vacío doméstico durante la noche, después a
80ºC durante 1,5 horas. Disolver la sal en MeOH y después tratar con
NaHCO_{3} hasta que pase a ser básica. Extraer la solución
resultante con EtOAc, secar las fases orgánicas combinadas sobre
Na_{2}SO_{4}, filtrar, después concentrar a presión reducida.
Purificar mediante cromatografía en columna, eluyendo con EtOAc
neto, después 1% de amoniaco 2N/MeOH en EtOAc, después 2% de
amoniaco 2N/MeOH en EtOAc, para dar 9,38 g de
5-[2-terc-butil-5-(2,4-difluorofenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina.
Mezclar
5-[2-terc-butil-5-(2,4-difluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
(9,38 g, 21,39 mmol) en MeOH anhidro (150 ml) y después añadir,
gota a gota, una solución de ácido metanosulfónico (2,06 g, 21,43
mmol) en MeOH (10 ml). Dejar agitar la mezcla de reacción resultante
a temperatura ambiente durante 30 minutos, después concentrar a
presión reducida. Suspender el residuo en Et_{2}O, después filtrar
y lavar con Et_{2}O fresco. Secar el sólido resultante en un
horno de secado a temperatura ambiente en vacío doméstico durante
48 horas, para dar 10,695 g (rendimiento de 76%) del compuesto del
título en forma de un sólido marrón.
RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD): \delta
7,74-7,66 (m, 2H), 7,60-7,54 (m,
1H), 7,15-7,08 (m, 2H), 3,70 (s, 2H), 2,70 (s, 3H),
1,51 (s, 9H), 0,81 (s, 9H).
TOF-EM [ES+, M+H]: Obs.:
m/z = 439,2398; Calc.: m/z = 439,2422.
\vskip1.000000\baselineskip
Agitar una suspensión de
{6-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-3H-imidazol-4-il)-3-nitro-piridin-2-il}-(2,2-dimetilpropil)amina
(426 mg, 1,0 mmol) y 10% de paladio sobre carbono (85 mg) en 100%
etanol bajo un globo de hidrógeno durante la noche. Filtrar la
suspensión a través de un filtro de jeringa de 0,2 \mug y
concentrar a presión reducida. Disolver el residuo en 10% de etanol
acuoso y tratar a temperatura ambiente con bromuro de cianógeno (80
mg, 0,75 mmol, 1,5 equiv.). Cuando la reacción se ha completado,
inactivar la reacción con NaHCO_{3} acuoso saturado. Añadir
acetato de etilo y agua para disolver todos los sólidos. Lavar la
capa orgánica una vez con NaHCO_{3} acuoso saturado, una vez con
NaCl acuoso saturado, secar con Na_{2}SO_{4}, filtrar y
concentrar a presión reducida. Someter al residuo a cromatografía en
gel de sílice a presión reducida, eluyendo con 50% de acetato de
etilo/CH_{2}Cl_{2}, después con un gradiente de 1,5:3,5%
(amoniaco 2M en MeOH)/CH_{2}Cl_{2} para proporcionar
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en forma de una espuma marrón (156 mg, rendimiento 74%).
Tratar una solución de
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en metanol-agua con ácido metanosulfónico, seguido
por liofilización para proporcionar el compuesto del título.
EM exacta calc.: m/z = 421,2516 (M+H)+;
encontrado: m/z = 421,2523 (M+H)+.
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta7,85
(d, 1H, J=7,9 Hz), 7,85 (d, 1H, J=7,9 Hz), 7,72 (d, 1H, J=8,4 Hz),
7,62 (dd, 2H, J=8,8, 4,8 Hz), 7,27 (t, 2H, J=8,8 Hz), 3,90 (s, 2H),
2,70 (s, 3H), 1,62 (s, 9H), 0,89 (s, 9H).
\vskip1.000000\baselineskip
Disolver 126 mg (0,3 mmol) de
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3Himidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en 1,0 ml de acetona al 88%*. Añadir una solución de 70 mg de
ácido fumárico en acetona al 88% caliente* en incrementos con
agitación. Añadir cristales semilla y filtrar el precipitado
resultante. Secar al aire para proporcionar 145 mg (74%) de
cristales similares a pelos de color morado claro.
*(el agua restante en volumen)
\vskip1.000000\baselineskip
Disolver 126 mg (0,3 mmol) de
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3Himidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en 2,0 ml de acetona. Añadir 58 mg de ácido metanosulfónico en
incrementos. Añadir cristales semilla y filtrar el precipitado
resultante. Secar al aire para proporcionar 114 mg (62%) de
cristales irregulares de color blancuzco.
P.f. > 250ºC.
\vskip1.000000\baselineskip
Dimetanosulfonato de
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetilpropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
(300 mg) amorfo en 5 ml de agua desionizada. Filtrar la solución a
través de un filtro de 0,45 \mum en un matraz aforado de 500 ml
pre-enfriado. Enfriar rápidamente la solución en el
fondo y los laterales del matraz. Liofilizar durante 24 horas para
proporcionar dimetilsulfonato de
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetilpropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina.
\vskip1.000000\baselineskip
Disolver 126 mg (0,3 mmol) de
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3Himidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en 2,0 ml de acetona al 88%*. Añadir una solución de 71 mg de ácido
succínico en 1 ml de acetona caliente al 88%* en incrementos. Añadir
cristales semilla y filtrar el precipitado resultante. Secar al aire
para proporcionar 123 mg (63%) de cristales de color morado muy
claro.
*(el agua restante en volumen).
\vskip1.000000\baselineskip
Disolver 126 mg (0,3 mmol) de
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3Himidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en 1,0 ml de isopropanol. Añadir una solución de 69,6 mg de ácido
maleico en 1 ml de isopropanol caliente en incrementos. Añadir
cristales semilla y filtrar el precipitado resultante. Secar al aire
para proporcionar 120 mg (63%) de cristales de color morado muy
claro.
\newpage
Disolver 126 mg (0,3 mmol) de
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3Himidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en 2,0 ml de acetona. Añadir 120 \mul de ácido clorhídrico 5N en
incrementos. Filtrar el precipitado resultante. Secar al aire para
proporcionar 140 mg (93%) de cristales de color rosa muy claro.
\vskip1.000000\baselineskip
Disolver
{6-[2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-5-fenil-3H-imidazol-4-il]-3-nitro-piridin-2-il}-(2,2-dimetilpropil)-amina
(240 mg, 0,50 mmol) en 100% de etanol (10 ml) y añadir dihidrato dicloruro de estaño (II) (564 mg, 2,50 mmol, 5,0 equiv.). Calentar la mezcla de reacción hasta que se consuma el material de partida. Enfriar la solución de reacción hasta la temperatura ambiente, inactivar lentamente con NaHCO_{3} acuoso saturado. Añadir Celite® a la reacción inactivada y filtrar la suspensión sobre una lámina de Celite® con lavados de agua y acetato de etilo. Separar las capas y lavar la capa orgánica con NaCl acuoso saturado. Secar la capa orgánica con Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar a presión reducida. Añadir etanol acuoso al 10% y bromuro de cianógeno (106 mg, 1,00 mmol, 2,0 equiv. al sólido resultante y agitar durante la noche. Inactivar la reacción con NaHCO3 acuoso saturado (20 ml). Añadir acetato de etilo y agua para disolver todos los sólidos. Lavar la capa orgánica tres veces con NaCl acuoso saturado, secar con Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar a presión reducida. Someter el residuo a cromatografía en gel de sílice a presión media, eluyendo con un gradiente de 1,5-3% (amoniaco 2M en MeOH)/CH2Cl2, para proporcionar 5-[2-(2-cloro-6-fluorofenil)-5-fenil-3H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetilpropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina en forma de un sólido de color amarillo-verde (196 mg, rendimiento del 60%).
(240 mg, 0,50 mmol) en 100% de etanol (10 ml) y añadir dihidrato dicloruro de estaño (II) (564 mg, 2,50 mmol, 5,0 equiv.). Calentar la mezcla de reacción hasta que se consuma el material de partida. Enfriar la solución de reacción hasta la temperatura ambiente, inactivar lentamente con NaHCO_{3} acuoso saturado. Añadir Celite® a la reacción inactivada y filtrar la suspensión sobre una lámina de Celite® con lavados de agua y acetato de etilo. Separar las capas y lavar la capa orgánica con NaCl acuoso saturado. Secar la capa orgánica con Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar a presión reducida. Añadir etanol acuoso al 10% y bromuro de cianógeno (106 mg, 1,00 mmol, 2,0 equiv. al sólido resultante y agitar durante la noche. Inactivar la reacción con NaHCO3 acuoso saturado (20 ml). Añadir acetato de etilo y agua para disolver todos los sólidos. Lavar la capa orgánica tres veces con NaCl acuoso saturado, secar con Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar a presión reducida. Someter el residuo a cromatografía en gel de sílice a presión media, eluyendo con un gradiente de 1,5-3% (amoniaco 2M en MeOH)/CH2Cl2, para proporcionar 5-[2-(2-cloro-6-fluorofenil)-5-fenil-3H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetilpropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina en forma de un sólido de color amarillo-verde (196 mg, rendimiento del 60%).
Tratar una solución de
5-[2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-5-fenil-3H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetilpropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en metanol-agua con ácido metanosulfónico, seguido
por liofilización para proporcionar el compuesto del título. EM
(ESI): m/z= 475,2 (M+H)+.
\vskip1.000000\baselineskip
Disolver
{6-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-3H-imidazol-4-il]-3-nitro-piridin-2-il}-(1(R)-2,2-trimetilpropil)-amina
(558 mg, 1,27 mmol) en 100% de etanol (15 ml) y añadir dihidrato
dicloruro de estaño (II) (1,4 g, 6,3 mmol, 5 equiv.). Calentar la
mezcla de reacción hasta que se consuma el material de partida.
Enfriar la solución de reacción hasta la temperatura ambiente,
inactivar lentamente con NaHCO_{3} acuoso saturado. Añadir Celite®
y filtrar la suspensión sobre una lámina de Celite® y lavar con
agua y acetato de etilo. Separar las capas y lavar la capa orgánica
con NaCl acuoso saturado. Secar la capa orgánica con
Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar a presión reducida. Añadir
etanol acuoso al 10% (13 ml) y bromuro de cianógeno (202 mg, 1,99
mmol, 1,5 equiv. al residuo y agitar durante la noche. Añadir otros
1,5 equiv. de bromuro de cianógeno, agitar 3 horas e inactivar con
NaHCO_{3} acuoso saturado (20 ml). Añadir acetato de etilo y agua
para disolver todos los sólidos. Lavar la capa orgánica tres veces
con NaCl acuoso saturado, secar con Na_{2}SO_{4}, filtrar y
concentrar a presión reducida. Someter el residuo a cromatografía en
gel de sílice a presión media, eluyendo con un gradiente de
1,5-4% (amoniaco 2M en MeOH)/CH2Cl2, para
proporcionar
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-3H-imidazol-4-il]-3-(1(R)-2,2-trimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en forma de un cristal marrón (158 mg, rendimiento del 29%).
Tratar una solución de
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-3H-imidazol-4-il]-3-(1-(R)-2,2-trimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en metanol-agua con ácido metanosulfónico, seguido
por liofilización para proporcionar el compuesto del título. EM
(ESI): m/z= 435,2 (M+H)+.
\vskip1.000000\baselineskip
Disolver
{6-[2-(2,6-difluoro-fenil)-5-(4-fluoro-fenil)-3H-imidazol-4-il]-3-nitro-piridin-2-il}-(1(R),2,2-trimetil-
propil)-amina (673 mg, 1,4 mmol) en etanol al 100% (15 ml) y añadir dihidrato dicloruro de estaño (II) (1,5 g, 6,8 mmol, 5 equiv.).
propil)-amina (673 mg, 1,4 mmol) en etanol al 100% (15 ml) y añadir dihidrato dicloruro de estaño (II) (1,5 g, 6,8 mmol, 5 equiv.).
\newpage
Calentar la mezcla de reacción hasta que se
consuma el material de partida. Enfriar la solución de reacción
hasta la temperatura ambiente, inactivar lentamente con NaHCO_{3}
acuoso saturado. Añadir Celite® a la reacción inactivada y filtrar
la suspensión sobre una lámina de Celite® con lavados de agua y
acetato de etilo. Separar las capas y lavar la capa orgánica con
NaCl acuoso saturado. Secar la capa orgánica con Na_{2}SO_{4},
filtrar y concentrar a presión reducida. Añadir etanol acuoso al 10%
(14 ml) y bromuro de cianógeno (216 mg, 2,04 mmol, 1,5 equiv. al
residuo y agitar durante la noche. Inactivar con NaHCO_{3} acuoso
saturado (20 ml). Añadir acetato de etilo y agua para disolver
todos los sólidos. Lavar la capa orgánica con NaCl acuoso saturado,
secar con Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar a presión reducida.
Someter el residuo a cromatografía en gel de sílice a presión
media, eluyendo con un gradiente de 1,5-3% (amoniaco
2M en MeOH)/CH_{2}Cl_{2}, para proporcionar
5-[2-(2,6-difluoro-fenil)-5-(4-fluoro-fenil)-3H-imidazol-4-il]-3-(1(R)-2,2-trimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en forma de un cristal marrón (289 mg, rendimiento del 43%).
Tratar una solución de
5-[2-(2,6-difluoro-fenil)-5-(4-fluoro-fenil)-3H-imidazol-4-il]-3-(1(R)-2,2-trimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
en metanol-agua con ácido metanosulfónico, seguido
por liofilización para proporcionar el compuesto del título. EM
(ESI): m/z = 491,2 (M+H)+.
\vskip1.000000\baselineskip
Agitar una mezcla de ácido hipofosforoso 50% en
peso acuoso sol. (0,555 g) y 5% de Pt/C (2,5 g) en H_{2}O (20 ml,
0,4 vol.) durante 10 minutos. Añadir VO(acac)_{2}
(0,420 g, 1,20 mmol) y agitar la suspensión oscura durante 5
minutos adicionales. Cargar esta suspensión en una mezcla de
2-(2,2-dimetilpropilamino)-3-nitro-6-bromopiridina
(50,00 g, 173,61 mmol) en tolueno (500,00 ml) en un autoclave de 1
litro a temperatura ambiente. Calentar el autoclave hasta 75ºC en
presencia de H_{2} a 241,3 kPa (2,38 atmósferas) con agitación a
100 rpm. Tras 3 horas, filtrar la mezcla de reacción sobre una
lámina de Hyflo Super Cel® y concentrar el filtrado a presión
reducida hasta la mitad de la masa total (273,0 g) de la solución.
Agitar la solución y añadir bromuro de cianógeno (18,4 g, 173,70
mmol), seguido por MeOH (250 ml). Tras 18 horas, calentar hasta 40ºC
y concentrar a presión reducida hasta recoger 350 ml de disolvente
mediante destilación de trayecto corto. Diluir la pasta resultante
con MTBE (350 ml, 7,0 vol.), enfriar hasta 0ºC y agitar 1 hora.
Filtrar el sólido, lavar con MTBE (75 ml, 1,5 vol.) y secar a
presión reducida a 40ºC durante 24 horas para proporcionar 48,06 g
(76%) del compuesto deseado en forma de un sólido blanco.
RMN ^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}):
\delta 0,96 (9H, s), 3,91 (2H, s), 7,45 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,64
(1H, d, J = 8,1 Hz), 8,73 (2H, as).
EM (ES): m/z = 282,0;
(M-1)^{-}.
\vskip1.000000\baselineskip
Añadir trietilamina (27,10 g, 267,80 mmol) a una
mezcla de bromuro de
5-bromo-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2il-amonio
(25,00 g, 68,67 mmol) en etanol (25 ml) y tolueno (75 ml).
Calentar a 70-75ºC y después añadir
Pd(OAc)_{2} (0,15 g, 0,69 mmol), trifenilfosfina
(0,72 g, 2,75 mmol) y yoduro de cobre (I) (0,13 g, 0,69 mmol).
Añadir 2/3 de una solución de
4-fluorofenilacetileno (12,37 g, 103,00 mmol) en
tolueno (50 ml, 2,0 vol.) en 15 minutos. Añadir la solución de
4-fluoroacetileno restante tras 1 hora. Después de 3
horas, añadir 4-fluorofenilacetileno adicional (1,5
g, 12,86 mmol). Después de una hora adicional, eliminar el EtOH
mediante destilación. Enfriar la mezcla de reacción hasta < 40ºC
y añadir agua (25 ml). Enfriar hasta temperatura ambiente. Filtrar
la suspensión y lavar con agua (25 ml) y 2 x 25 ml de tolueno.
Secar a presión reducida a 45-50ºC para proporcionar
19,3 g (87%) del compuesto deseado.
\vskip1.000000\baselineskip
Añadir metanol (1.200 ml) a lotes combinados de
3-(2,2-dimetil-propil)-5-(4-fluoro-feniletinil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
(37,30 g) y calentar hasta reflujo. Añadir carbón activado (3,73
g, 10% en peso) y someter a reflujo durante 1 hora. Filtrar
mientras la suspensión está caliente, después añadir agua (375 ml)
al filtrado en agitación a temperatura ambiente. Filtrar los
sólidos, lavar 2 veces con 100 ml de agua y secar a presión reducida
a 45-50ºC, para proporcionar 30,0 g (80%) del
compuesto deseado.
RMN ^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}):
\delta 0,99 (9H, s), 3,91 (2H, s), 6,98 (2H, s),
7,25-7,32 (3H, m), 7,40 (1H, d, J = 7,8 Hz),
7,62-7,67 (2H, m).
\vskip1.000000\baselineskip
A una solución en agitación de
3-(2,2-dimetilpropil)-5-(4-fluoro-feniletinil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
(110,76 g, 343,57 mmol) en acetona (3665 ml) añadir MgSO_{4}
(82,7, 687,05 mmol) y NaHCO3 (14,4 g, 171,41 mmol) en agua
desionizada (1524 ml) durante 5 minutos. Añadir Hyflo Super Cel®
(171,1g), seguido por KMnO_{4} (108,6 g, 687,21 mmol). Calentar a
40-45ºC durante 3 horas y después enfriar hasta la
temperatura ambiente. Añadir Na_{2}SO_{3} acuoso saturado
(1.800 ml), seguido por EtOAc (3.500 ml) y agua (3.500 ml). Filtrar
a través de un lecho de Hyflo Super Cel® y lavar con una mezcla de
9% de MeOH/EtOAc (2.860 ml). Separar las capas de filtrado,
retroextraer la capa acuosa 2 x 2.750 ml de EtOAc. Combinar los
extractos orgánicos, lavar 2 veces con 2.380 ml de cloruro sódico
acuoso saturado (4760 ml) y secar sobre Na_{2}SO_{4}. Filtrar,
después concentrar a presión reducida para proporcionar un sólido de
color rojo-marrón (185 g). Añadir acetona (650 ml),
filtrar la suspensión, lavar el sólido recogido 3 veces con 167 ml
de MTBE (501 ml) y secar a presión reducida a 45ºC, para
proporcionar 106,79 g (88%) del compuesto deseado en forma de un
sólido de color amarillo claro.
RMN ^{1}H (500 MHz, DMSO-d_{6}):
\delta 0,72 (9H, s), 3,71 (2H, s), 7,47 (2H, dd, J1 = 7,5 Hz, J2 =
8,5 Hz), 7,56 (2H, as), 7,65 (1H, d, 8,0 Hz),
7,97-7,99 (2H, m), 8,02 (1H, d, J = 8,0 Hz).
EM(ES+): m/z = 355,4 (M+1)+.
\vskip1.000000\baselineskip
Calentar una mezcla de
1-[2-amino-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il]-2-(4-fluoro-fenil)etano-1,2-diona
(25,33 g, 71,48 mmol), NH_{4}OAc (82,3 g, 1,04 mol) y
trimetil-acetaldehído (13,0 ml, 116 mmol) en MeOH
(650 ml) hasta reflujo en nitrógeno durante 20 horas. Concentrar a
presión reducida. Disolver el residuo en EtOAc (2.000 ml), agua
desionizada (500 ml) y NaHCO_{3} acuoso saturado (1000 ml).
Separar las capas y lavar la capa orgánica con 1 l de NaHCO_{3}
acuoso saturado (1000 ml), agua desionizada (500 ml) y cloruro
sódico acuoso saturado (500 ml), después secar sobre
Na_{2}SO_{4}. Filtrar y concentrar a presión reducida, para
proporcionar 20,08 g de un sólido/espuma oscuro. Añadir MTBE (60 ml)
y calentar hasta reflujo. Añadir hexano (290 ml) durante 5 minutos,
después enfriar la suspensión hasta la temperatura ambiente. Agitar
1,25 horas, filtrar, lavar el sólido recogido con hexano (80 ml) y
secar a presión reducida a 45ºC durante la noche, para proporcionar
17,31 g (58%) del compuesto deseado en forma de un sólido marrón
claro.
\vskip1.000000\baselineskip
Calentar una mezcla de lotes combinados de
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
(55,9 g) Añadir hexano (800 ml) y enfriar la suspensión hasta la
temperatura ambiente. Filtrar el sólido, lavar con hexano (200 ml)
y secar a presión reducida a 45ºC, para proporcionar 54,35 g (97%)
del compuesto deseado en forma de un sólido marrón claro.
RMN ^{1}H (300 MHz, CD_{3}OD): \delta 0,87
(9H, s), 1,45 (9H, s), 3,79 (2H, s), 7,05 (2H, dd, J_{1} = 8,7 Hz,
J_{2} = 9,0 Hz), 7,30 (1H, as), 7,40-7,50 (3H,
m).
EM(ES+): m/z = 421.4
(M+1)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Calentar una solución de
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
(10,0853 g, 23,98 mmol) en MeOH (24 ml) a 40ºC. Eliminar la fuente
de calor y añadir ácido metanosulfónico (3,14 ml, 47,91 mmol) en
EtOAc (10 ml) gota a gota durante 3,5 minutos. Agitar durante 1
horas enfriando al mismo tiempo hasta la temperatura ambiente.
Añadir EtOAc (20 ml) y agitar 5 minutos. Filtrar, lavar el sólido
con 2 x 50 ml de EtOAc, y secar a presión reducida a
45-50ºC durante 2,5 horas, para proporcionar 12,62 g
(86%) del compuesto del título en forma de un polvo sólido
blanco.
RMN ^{1}H (500 MHz, CD_{3}OD): \delta 0,94
(9H, s), 1,65 (9H, s), 2,73 (2H, s), 3,91 (2H, s),
7,31-7,35 (3H, m), 7,63-7,67 (2H,
m), 7,69 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,87 (1H, d, J= 8,5 Hz).
EM(ES+): m/z = 421,5
(M+1)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Calentar una mezcla de
3-(2,2-dimetil-propil)-5-(4-fluoro-feniletinil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
(184,7 g, 0,573 mol), ácido fórmico (932,0 ml), ácido
metanosulfónico (110,0 g, 1,14 mol), DMSO (224,0 g, 2,87 mol) y 48%
de HBr (9,7 g, 0,057 mol) a reflujo suave
(105-107ºC) con un dispositivo de destilación
durante la noche. Destilar los volátiles (550 ml) a presión
reducida. Enfriar hasta aproximadamente 65ºC y añadir agua (1,2 l)
que contiene Na_{2}S_{2}O_{3} (18,0 g, 0,114 mol) gota a gota
con agitación rigurosa, manteniendo la temperatura a
aproximadamente 65ºC. Enfriar la mezcla de reacción hasta la
temperatura ambiente (aproximadamente 3 horas), después en baño de
hielo (aproximadamente 30 minutos). Filtrar el sólido, aclarar con
agua (200 ml) y secar en horno de vacío a aproximadamente 50ºC, para
proporcionar 217,0 g (84%) del compuesto deseado.
RMN ^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}):
\delta 9,08 (s, 2H); 8,18 (d, J = 6,0 Hz, 2H);
7,92-7,98 (m, 3H); 7,40 (t, J = 8,0 Hz, 2H); 3,67
(s, 2H); 2,40 (s, 2H); 0,66 (s, 9H).
EM(ES+): m/z = 355,4
(M+1)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Calentar una mezcla de metasulfonato de
2-amino-3-(2,2-dimetil-propil)-5-[2-(4-fluorofenil)-2-oxo-acetil]-3H-imidazo[4,5-b]piridin-1-io
(0,62 mol), etanol (2,5 l), acetato amónico (500,0 g, 6,2 mol) y
trimetilacetaldehído (84,0 g, 0,93 mol) a aproximadamente 70ºC
durante la noche. Evaporar los volátiles. Añadir acetato de etilo
(4,0 l) y agua (3,0 l), seguido por NaOH 1,0N (1,2 l) y agitar
durante 20-30 minutos a temperatura ambiente.
Separar las fases y extraer la fase acuosa con acetato de etilo
(2,0 l). Combinar las fases de acetato de etilo, lavar dos veces
con 10 volúmenes de cloruro sódico acuoso saturado, tratar con Darco
(30,0 g, 10% en peso). Filtrar a través de una lámina de Celite y
concentrar el filtrado a aproximadamente 1,0 l). Añadir etanol (2,50
l) y calentar hasta aproximadamente 65ºC y añadir ácido
metanosulfónico (150,0 g, 1,55 mol) en acetato de etilo (500 ml) en
gotas rápidas, manteniendo la temperatura a aproximadamente 65ºC
durante 3 horas. Enfriar la mezcla de reacción hasta la temperatura
ambiente con agitación durante 2 horas más. Filtrar la suspensión,
aclarar el sólido con acetato de etilo (500 ml) y secar en horno de
vacío a aproximadamente 45ºC, para proporcionar 226,0 g del
compuesto del título.
RMN ^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}):
\delta 8,99 (s, 2H), 7,90 (d, 1H, J = 9,0 Hz); 7,86 (d, 1H, J =
9,0 Hz); 7,60 (dd, 2H, J = 9,0 Hz), 7,34 (dd, 2H, J = 9,0 Hz); 3,68
(s, 2H); 2,35 (s, 6H); 1,51 (s, 9H); 0,71 (s, 9H).
EM(ES+): m/z = 421,5
(M+1)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparar una placa padre con la adición a
todos los pocillos en un formato de 96 pocillos de 250 \mul de la
base libre del compuesto sujeto en metanol (0,1M). En cada pocillo
se dispensa una selección de ácidos en uno y dos equivalentes
morales. Los disolventes se evaporan de los 96 pocillos usando un
evaporador Genevac Series II dejando el residuo sólido en la placa
padre. En cada uno de estos pocillos se dispensa un selección de
disolventes a través de un cap mat y después se calientan
hasta 55ºC con agitación y se dejan equilibrar durante
60-90 minutos a aproximadamente 55ºC. A
continuación, cada muestra se filtra caliente y se transfiere a los
correspondientes pocillos en una placa de evaporación, una placa de
precipitación y una placa de enfriamiento. La placa de evaporación
se prepara transfiriendo 200 \mul del filtrado desde la placa
padre usando jeringuillas calentadas a 55ºC a la placa de
titulación de pocillos abiertos y, después, se deja evaporar hasta
sequedad durante la noche a temperatura ambiente y a la humedad
ambiente. La placa de precipitación se prepara añadiendo 100 \mul
del filtrado desde la placa padre usando jeringuillas calentadas a
55ºC a la placa de titulación de 96 pocillos tapada, en la que cada
pocillo contiene un anti-disolvente de 200 \mul de
heptano o 2-propanol. Después de equilibrar durante
un periodo de nueve horas a temperatura ambiente, el exceso de
solución se elimina usando papel de filtro
pre-cortado de Whatman. La placa de enfriamiento se
prepara transfiriendo 200 \mul del filtrado desde la placa padre
a pocillos individuales usando jeringuillas calentadas a 55ºC en una
placa de titulación tapada y enfriando exponencialmente desde 55 a
10ºC durante un periodo de 8 horas. Del material del fondo de cada
pocillo en las placas de 96 pocillos se recogen microfotografías
usando un microscopio de luz incidente invertida Zeiss Axiovert
200M con un objetivo de 2,5X. Si el material es cristalino, exhibe
birrefringencia que se muestra en blanco contra un fondo oscuro. Los
sólidos amorfos aparecen oscuros o en forma de gotas o anillos
opacos.
\vskip1.000000\baselineskip
La solución tampón de la quinasa se prepara
combinando 2,5 ml de Tris-HCl 1M (pH 7,5), 0,1 ml de
ditiotreitol 1M, 1,0 ml de cloruro de magnesio 1M y 300 \mul de
Triton-X-100 1%, y diluyendo hasta
100 ml con agua.
Se combinan 84 ml de esta solución tampón de
quinasa con 16 ml de DMSO para preparar la solución de DMSO al
16%.
La solución de ATP 200 \muM se prepara
añadiendo 102,6 \mul de ATP acuoso 10 mM, 25 \mul de
ATP-^{33}P y 163,5 \mul del péptido
661-681 del factor de crecimiento epidérmico acuoso
4 mM (Biomol, nº de catálogo P-121) en 5 ml de
solución tampón de quinasa.
La solución de la enzima p38 quinasa se prepara
disolviendo 9,5 \mul de solución de enzima concentrada (250 ng de
enzima p38/\mul de solución tampón de quinasa) en 1536 \mul de
solución tampón de quinasa.
\vskip1.000000\baselineskip
Se prepara una solución 80 \muM de cada
compuesto de prueba y compuesto control mediante la disolución de 2
\mul de una solución madre 10 mM de los respectivos compuestos en
dimetilsulfóxido en 248 \mul de la solución de DMSO al 16% en una
placa de microtitulación de 96 pocillos de Costar. La placa se
coloca sobre el dispensador de líquidos automático Tecan Genesis
para diluciones seriadas 1:3.
\vskip1.000000\baselineskip
En la placa de ensayo se introducen 10 \mul
del compuesto diluido en serie con un dispensador de líquidos
automático de 96 pocillos Beckman Multimek. Con un dispensador de
líquidos de 8 canales Titertek Multidrop se añaden 20 \mul de la
solución de ATP 200 \muM. Usando el Multimek se transfieren a la
placa de ensayo 10 \mul de solución de enzima p38 quinasa. La
mezcla se deja reaccionar durante 40 minutos a 30ºC y, después, se
detiene la reacción añadiendo con Multidrop 60 \mul de AcOH
glacial al 5% recién preparado. Se esta solución, 80 \mul se
transfieren a una placa "MAPH" usando la Multimek. Las placas
se dejan reposar durante 30 minutos a TA y después se lavan/aspiran
en el extractor Titertek MAP con AcOH glacial al 0,5% recién
preparado (1 x 300 \mul, 2 x 200 \mul). Los pocillos se tapan y
con la Multidrop se añaden 100 \mul de líquido de centelleo
MicroScint-20 (Packard Bioscience). Las placas se
dejan reposar durante 30 minutos y se cuentan en un contador de
centelleo PE/Wallac Microbeta Trilux para el
isótopo-^{33}P.
Todos los compuestos de ejemplo se analizaron
inicialmente a 10 concentraciones (20 \muM-1 nM
usando diluciones seriadas de 1:3). Los compuestos con valores de
CI_{50} inferiores a 25 nM se volvieron a analizar a una
concentración de partida de 2 \muM a 0,1 nM (diluciones seriadas
de 1:3). Los valores de CI_{50} para cada compuesto se calcularon
(software IDBS ActivityBase) usando regresión no lineal. Todos los
compuestos de ejemplo se analizaron esencialmente como se ha
descrito en lo que antecede y se encontró que inhibían la enzima
p38 quinasa con una CI_{50} \leq 5 \muM. Específicamente, los
siguientes compuestos se analizaron esencialmente como se ha
descrito en lo que antecede y se encontró que inhibían la enzima p38
quinasa como se indica en la tabla siguiente.
En la cavidad peritoneal de ratones hembra
Balb/C se inyectan 1 ml de caldo de tioglicolato (5,0 g de extracto
de levadura, 15,0 g de casitona o tripticasa, 5,0 g de dextrosa, 2,5
g de cloruro sódico, 0,75 g de L-cistina, 0,5 g de
tioglicolato sódico, 1,0 mg de resazurina y 0,75 g de agar en 1,0 l
de agua destilada. El día 4 o 5 después de la inyección se
sacrificaron a los ratones y después se les inyectó i.p. 4 ml de
medio RPMI-1640 (BioWhittaker) y los macrófagos
peritoneales se extrajeron mediante jeringuilla.
Los macrófagos peritoneales de ratón se cuentan
con un hemocitómetro y se ajustan a 5 x 10^{5} células/pocillo en
placas de 96 pocillos en medio RPMI-1640 con 10% de
suero bovino fetal. En placas de 96 pocillos se siembran 200
\mul/pocillo y las células se dejan reposar y adherir al fondo del
pocillo durante al menos 3 horas. El compuesto de prueba o el
inhibidor estándar de la p38 quinasa se tratan previamente usando
una serie de 8 concentraciones durante 1 horas a 37ºC (20
\mul/pocillo). Las células se tratan con una mezcla de 50 ng/ml de
lipopolisacárido (LPS) y 10 U/ml de interferón-y
durante 18 horas a 37ºC (20 \mul/pocillo). El medio acondicionado
se recoge y se analiza la producción de TNF-\alpha
usando el procedimiento Luminex.
El TNF-\alpha estándar
pre-mezclado y liofilizado (1 tubo estándar/dos
placas de 96 pocillos) se reconstituye con 50 \mul de agua
estéril (500.000 pg/ml). Las muestras se agitan con vórtex durante 5
segundos, se incuban en hielo durante 30 minutos y se agitan en
vórtex durante 5 segundos antes de usar. Un conjunto de doce tubos
de 1,5 ml se etiquetan con nº 1 a nº 12 y, después, a los tubos
adecuados se añaden las cantidades de medio celular que se muestran
más adelante (las concentraciones estándar son las siguientes;
50.000; 25.000; 12.500; 6.250; 3.125; 1.562,5; 781,3; 390,6; 195,3;
97,7; 48,8 y 24,4 pg/ml). . Las perlas conjugadas
anti-citocinas pre-mezcladas se
agitan en vórtex (25 veces) enérgicamente durante 30 segundos. Las
perlas conjugadas anti-citocina se diluyen hasta
una concentración 1X usando tampón de ensayo 1X
Bio-Plex. Para cada placa se añaden 240 \mul de
las perlas pre-mezcladas a 5760 \mul de tampón de
ensayo Bio-Plex. Una placa de filtración de 96
pocillos Millipore se bloquea con 100 \mul/pocillo de tampón de
bloqueo. El tampón de bloqueo se filtra usando un sistema de
filtración Millipore y, después, se seca con un paño. Se realizan 2
lavados sobre la placa de filtro con 100 \mul/pocillo de tampón
de ensayo Bio-Plex y se seca con un paño. Las perlas
conjugadas anti-citocina 1X se agitan en vórtex
durante 15 segundos y a cada pocillo se añaden 50 \mul. Esto se
filtra y se seca con un paño. Se realizan 2 lavados en placas con
100 \mul/pocillo de tampón de lavado Bio-Plex. De
nuevo, se filtra y se seca con un paño. A cada pocillo con muestra
se añaden 50 \mul de muestra o patrón. Esto se incuba durante 60
segundos a TA en un agitador protegido de la luz a 6 y después
durante 30, minutos en el parámetro 3, y, a continuación, se coloca
en el refrigerador durante la noche. e realizan 3 lavados en placas
con tampón de lavado Bio-Plex. Se filtra y se seca
con un paño. El anticuerpo de detección de citocina se prepara
(\sim10 min antes de usar) para cada placa y a 5940 \mul de
diluyente de anticuerpo de detección Bio-Plex se
añaden 60 \mul de la solución madre de anticuerpo de detección de
citocina pre-mezclado. Se añaden 50 \mul de
anticuerpo de detección de citocina y se incuban durante 60 segundos
a TA en un agitador protegido de la luz a 6, y después durante 30
minutos con un parámetro de 3. Se realizan 3 lavados con el tampón
de lavado Bio-Plex. Esto se filtra y se seca con un
paño. Se prepara Strept-PE (\sim10 minutos antes
de usar) para cada placa y a 5940 \mul de tampón de ensayo
Bio-Plex se añaden 60 \mul. A cada pocillo se
añaden 50 \mul estreptavidina-PE y se incuban
durante 60 segundos a TA en un agitador protegido de la luz a 6, y
después durante 10 minutos con un parámetro de 3. Se realizan 3
lavados con el tampón de lavado Bio-Plex. Esto se
filtra. Las perlas se resuspenden en 100 \mul/pocillo de tampón de
ensayo Bio-Plex. Los patrones y las muestras se
leen en un aparato Luminex. Estas lecturas de intensidad se
convierten después de unidades picogramo/mililitro en base a una
curva estándar de 12 puntos creada por duplicado usando un método de
regresión logística de cuatro parámetros (Bio-Plex
Manager, 2.0, Bio-Rad) y se calcula la
CI_{50}.
Miembros representativos de los compuestos de
ejemplo se analizaron esencialmente como se ha descrito en o que
antecede y el TNF-\alpha se suprimió in
vitro con una CI_{50} < 100 nM. Específicamente, los
siguientes compuestos se analizaron esencialmente como se ha
descrito en lo que antecede y se encontró que suprimían el
TNF-\alpha in vitro como se indica en la
tabla siguiente.
Los compuestos se administran por vía oral (100,
30, 10 y 3 mg/kg) a ratones hembra Balb/c (5 ratones/dosis). Tras 2
horas se administra lipopolisacárido (LPS, E. coli serotipo 0111:B4,
5 mg/kg) por vía intravenosa en la vena de la cola de cada ratón.
Una hora después de la administración de LPS, se asfixia a los
ratones mediante inhalación de CO_{2} y se extrajo sangre mediante
punción cardíaca.
\vskip1.000000\baselineskip
Reconstituir el TNF-\alpha
estándar pre-mezclado y liofilizado (1 tubo
estándar/dos placas de 96 pocillos) con 50 \mul de agua estéril
(500.000 pg/ml). Agitar suavemente con vórtex durante 5 segundos,
incubar en hielo durante 30 minutos y agitar en vórtex durante 5
segundos antes de usar. Etiquetar en conjunto de doce tubos de 1,5
ml se etiquetan con nº 1 a nº 12 y, después, añadir a los tubos
adecuados las cantidades de medio celular que se muestran más
adelante (las concentraciones estándar son las siguientes; 50.000;
25.000; 12.500; 6.250; 3.125; 1.562,5; 781,3; 390,6; 195,3; 97,7;
48,8 y 24,4 pg/ml). Agitar enérgicamente en vórtex (25 veces) las
perlas conjugadas anti-citocina
pre-mezcladas durante 30 segundos. Diluir las perlas
conjugadas anti-citocina hasta una concentración 1X
usando tampón de ensayo 1X Bio-Plex. Para cada
placa añadir 240 \mul de las perlas pre-mezcladas
a 5760 \mul de tampón de ensayo Bio-Plex. Bloquear
una placa de filtración de 96 pocillos Millipore con 100
\mul/pocillo de tampón de bloqueo. Filtrar con tampón de bloqueo
usando un sistema de filtración Millipore. Secar. Realizar 2
lavados sobre la placa de filtro con 100 \mul/pocillo de tampón
de ensayo Bio-Plex y secar con un paño. Agitar en
vórtex las perlas conjugadas anti-citocina 1X
durante 15 segundos y añadir a cada pocillo 50 \mul. Filtrar y
secar con un paño. Realizar 2 lavados en placas con 100
\mul/pocillo de tampón de lavado Bio-Plex. Filtrar
y secar con un paño. Añadir a cada pocillo de muestra 25 \mul de
la muestra de suero y 25 \mul de diluyente
(Bio-Rad) o 50 \mul de patrón. Incubar durante 60
segundos a TA en un agitador protegido de la luz a 6 y después
durante 30, minutos en el parámetro 3, y, a continuación, colocar
en el refrigerador durante la noche. Realizar 3 lavados en placas
con tampón de lavado Bio-Plex. Filtrar y secar con
un paño. Preparar el anticuerpo de detección de citocina se prepara
(\sim10 min antes de usar) para cada placa, añadir a 5940 \mul
de diluyente de anticuerpo de detección Bio-Plex 60
\mul de la solución madre de anticuerpo de detección de citocina
pre-mezclado. Añadir 50 \mul de anticuerpo de
detección de citocina e incubar durante 60 segundos a TA en un
agitador protegido de la luz a 6, y después durante 30 minutos con
un parámetro de 3. Realizar 3 lavados con el tampón de lavado
Bio-Plex. Filtrar y secar con un paño. Preparar
Strept-PE (\sim10 minutos antes de usar) para cada
placa y a 5940 \mul de tampón de ensayo Bio-Plex
se añaden 60 \mul. Añadir a cada pocillo 50 \mul de
estreptavidina-PE e incubar durante 60 segundos a
TA en un agitador protegido de la luz a 6, y después durante 10
minutos con un parámetro de 3. Realizar 3 lavados con el tampón de
lavado Bio-Plex. Filtrar. Resuspender las perlas en
100 \mul/pocillo de tampón de ensayo Bio-Plex.
Leer los patrones y las muestras en un aparato Luminex. Estas
lecturas de intensidad se convierten después de unidades
picogramo/mililitro en base a una curva estándar de 12 puntos creada
por duplicado usando un método de regresión logística de cuatro
parámetros (Bio-Plex Manager, 2.0,
Bio-Rad) y se calcula la CI_{50}.
Miembros representativos de los compuestos de
ejemplo se analizaron esencialmente como se ha descrito en o que
antecede y el TNF-\alpha se suprimió in
vitro con una CI_{50} < 100 nM. El compuesto del Ejemplo
104 se analizó esencialmente como se ha descrito en lo que antecede
y exhibió una CI_{50} < 1 mg/kg.
\vskip1.000000\baselineskip
La inyección intraarticular de LPS en los
tobillos de las ratas induce la síntesis de
TNF-\alpha, que se puede medir en líquido de
lavado sinovial. Se detectan niveles elevados de
TNF-\alpha en un plazo de 2 horas. Dado que la
articulación es el lugar en el que se desarrolla la artritis, este
modelo puede determinar con rapidez si un compuesto administrado
por vía oral tiene un efecto sobre una respuesta inflamatoria en el
sinovio.
En cada grupo de tratamiento se introducen seis
ratas hembra Lewis (150-200 g). A los animales se
administra vehículo (1% de carboximetilcelulosa
sódica-0,25% de Tween 80) o compuesto problema (1
mg/kg, 3 mg/kg, 10 mg/kg y 30 mg/kg) por vía oral. Una hora
después, se administran 10 \mul de LPS (10 \mug) por vía
intraarticular en el tobillo derecho de cada rata, mientras que el
tobillo izquierdo recibe 10 \mul de solución salina. Tras dos
horas, se lava cada tobillo con 100 \mul de solución salina. El
lavado se recoge y almacena a -80ºC.
- Grupo 1:
- Vehículo (1% de NaCMC-0,25% de Tween 80, 1 ml, vía oral)
- Grupo 2:
- Compuesto problema (1 mg/kg, 1 ml, vía oral)
- Grupo 3:
- Compuesto problema (3 mg/kg, 1 ml, vía oral)
- Grupo 4:
- Compuesto problema (10 mg/kg, 1 ml, vía oral)
- Grupo 5:
- Compuesto problema (30 mg/kg, 1 ml, vía oral)
\newpage
El TNF-\alpha se mide con un
kit de ELISA disponible comercialmente (R&D, RTA00). El
tratamiento con el compuesto del Ejemplo 104 produjo una inhibición
dependiente de la dosis de la síntesis de
TNF-\alpha con una DTME_{50} de 0,54 mg/kg.
\vskip1.000000\baselineskip
La línea celular de melanoma B16F10 se obtiene
de la Colección de Cultivos Tipo Americana, Rockville, MD. Las
células se cultivan en medio RPMI-1640 suplementado
con 10% de suero bovino fetal. Las células cultivadas in
vitro se recogen durante su fase de crecimiento exponencial
mediante tripsinización suave, se lavan dos veces en medio y se
resuspenden en medio RPMI-1640 sin suero. El número
de células viables se determina usando un hemocitómetro y se
ajustan a 1x10^{7}/ml. Las células tumorales se inyectan por vía
subcutánea en ratones C57B16 normales. El volumen del inóculo por
ratón es 0,2 ml (2.000.000 células). Cuando los tumores alcanzan
300-500 mg, los ratones se usan para estudios de
inhibición diana a un tiempo fijo (2,5 horas) después del
tratamiento por vía oral con el compuesto o para estudios
farmacodinámicos en los que los tumores se recogen a múltiples
puntos de tiempo (p. ej., 3, 6, 9, 12, 15 y 18 h) después del
tratamiento por vía oral con el compuesto.
\vskip1.000000\baselineskip
Los tumores obtenidos como se ha descrito en lo
que antecede se congela en nitrógeno líquido y se almacenan a
-80ºC. Los tejidos tumorales se homogeneizan en hielo usando un
homogeneizador Daunce en un tampón de extracción (Tris 25 mM a pH
7,5, que contiene los siguientes inhibidores de la proteasa: 10
\mug/ml de leupeptina, 10 \mug/ml de inhibidor de la trip de
soja-quimotripsina, 10 \mug/ml de
N-tosil-L-fenilalanina
clorometilcetona, 10 de \mug/ml de aprotinina, éster metílico de
N\alpha-p-tosil-L-arginina,
benzamidina 7 mM, fluoruro de fenilmetilsulfonilo 0,3 mM y dos
comprimidos del cóctel de Roche de inhibidor completo de la
proteasa; los siguientes inhibidores de la fosfatasa:
beta-glicerofosfato 60 mM, vanadato sódico 1 mM,
fluoruro sódico 10 mM. p-nitrofenil fosfato 20 mM,
ácido ocadaico 1 \muM, microcistina 1 \muM, pirofosfoato sódico
2,5 mM y ditiotreitol 1 mM, EDTA 15 mM, EGTA 5 mM, 1% de Triton
X100 y NaCl 150 mM). Los lisados tisulares se limpian mediante
centrifugación en una microcentrífuga refrigerada a 14.000 rpm y a
1ºC durante 20 min. Los sobrenadantes se transfieren a tubos de
microcentrífuga frescos pre-enfriados en hielo y se
congelan de nuevo en nitrógeno líquido o hielo seco. Tras una
rápida descongelación hasta aproximadamente un 80% en agua tibia,
las muestras se colocan en hielo para su descongelación completa.
Las muestras se centrifugan de nuevo a 14.000 rpm y a 1ºC durante
15 minutos. El sobrenadante se transfiere a tubos de microcentrífuga
frescos pre-enfriados y las concentraciones de
proteínas se miden usando reactivos de ensayo de proteínas de
Bio-Rad usando seroalbúmina bovina como patrón
proteico.
Los extractos de proteínas se equiparan con el
tampón de extracción. A los extractos proteicos se añade un volumen
igual de tampón de muestra 2X SDS y se llevan a ebullición en un
baño de agua durante 5 minutos. Para la electroforesis en gradiente
4-20% de SDS-PAGE se usan 100 \mug
de extracto de proteína por muestra y se transfieren a membranas de
nitrocelulosa (NC). Las membranas de NC se bloquean en BSA 5% en
TBST (Tris 20 mM, pH= 7,5, NaCl 500 mM, 0,05% de Tween 20 y 0,02%
de azida sódica) durante al menos 1 hora. A continuación se incuban
las membranas en anticuerpo principal en una proporción de 1:1.000
con BSA 5% en TBST durante la noche en agitador con 80 rpm a 4ºC.
Las membranas se lavan 4 veces, 10 minutos cada vez, con TBST.
Después, las membranas se incuban durante 40 minutos con conjugado
HRP ((peroxidasa de rábano) anticuerpo secundario en una dilución
de 1:10.000 en leche desgrasada 3% en TBST y se lavan de nuevo 4
veces con TBST, 10 minutos cada vez. A continuación, mediante
quimioluminiscencia potenciada (ECL, Amersham) se visualizan las
inmunotransferencias siguiendo las instrucciones del fabricante,
Todos los anticuerpos primarios se adquieren en Cell Signaling y
los conjugados HRP-anticuerpos secundarios se
obtienen de Amersham. Los geles, membranas y aparatos usados para
la electroforesis y la transferencia de tipo western se adquieren en
Invitrogen. Las bandas proteicas de interés se cuantifican a partir
de las películas usando Kodak Image Station 1000.
El compuesto del Ejemplo 104 se analizó
esencialmente como se ha descrito en lo que antecede y exhibió una
DMNT_{50}= 3,59 mg/kg.
\vskip1.000000\baselineskip
Se usaron ratas hembra Lewis (\cong 190 g,
Charles River Labs) inmunizadas con colágeno bovino de tipo II (2
mg/ml) emulsionado con un volumen igual de adyuvante (hidróxido de
aluminio). Las ratas se inmunizan con aproximadamente 0,3 mg de la
emulsión por vía intradérmica en la parte posterior cerca de la base
de la cola. Todos los animales fueron
re-inmunizados 7 días después de acuerdo con el
mismo protocolo. Las ratas comienzan a desarrollar artritis (que se
caracteriza por inflamación y enrojecimiento de uno o ambos
tobillos) de 12 a 14 días después de la primera inmunización. A los
primeros signos de artritis se distribuye a las ratas por igual a
cinco grupos de tratamiento y se inicia el tratamiento de cada rata
con dosis dos veces al día durante 14 días.
\vskip1.000000\baselineskip
- Grupo 1
- Vehículo (1% de carboximetilcelulosa sódica + 0,25% de Tween 80) 1 ml, vía oral, dos veces al día x 14 días
- Grupo 2
- Compuesto problema, 5 mg/kg, 1 ml, vía oral, dos veces al día x 14 días
- Grupo 3
- Compuesto problema, 15 mg/kg, 1 ml, vía oral, dos veces al día x 14 días
- Grupo 4
- Compuesto problema, 30 mg/kg, ml, vía oral, dos veces al día x 14 días
- Grupo 5
- Prednisolona, 10 mg/kg, 1 ml, vía oral, una vez al día x 14 días
\vskip1.000000\baselineskip
El diámetro del tobillo se mide con compás 5
días a la semana, y se registra. Los datos se expresan en forma del
área bajo la curva (AUC) generada a partir de las puntuaciones
compuestas de inflamación y el análisis estadístico realizado. El
compuesto del Ejemplo 104 se analizó esencialmente como se ha
descrito en lo que antecede y exhibió una DMNT_{50}= 1,5 mg/kg
(dos veces al día).
Se prefiere la administración oral de los
compuestos de la presente invención. No obstante, la administración
oral no es la única vía, ni siquiera la única vía preferida. Por
ejemplo, la administración transdérmica puede ser muy deseable para
pacientes que son olvidadizos o enfadados por la ingesta del
medicamento oral, y la vía intravenosa puede preferirse por
cuestión de comodidad o para evitar posibles complicaciones
relacionadas con la administración oral. Los compuestos de Fórmula
I también se pueden administrar por vía percutánea, intramuscular,
intranasal o intrarrectal en circunstancias concretas. La vía de
administración se puede variar de cualquier manera, limitada por
las propiedades físicas de los fármacos, la comodidad del paciente y
del cuidador, y otras circunstancias relevantes ((Remington's
Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Mack Publishing Co.
(1990)).
Las composiciones farmacéuticas se preparan de
un modo bien conocido en la técnica farmacéutica. El portador o el
excipiente pueden ser un material sólido, semisólido o líquido que
puede servir como vehículo o medio del ingrediente activo. En la
técnica se conocen bien portadores o excipientes adecuados. La
composición farmacéutica se puede adaptar para uso oral, mediante
inhalación, parenteral o tópico, y puede administrarse al paciente
en forma de comprimidos, cápsulas, aerosoloes, inhaladores,
supositorios, soluciones, suspensiones o similares.
Los compuestos de la presente invención pueden
administrarse por vía oral por ejemplo con un diluyente inerte o
cápsulas o en comprimidos. Para el fin de la administración
terapéutica oral, los compuestos pueden incorporarse con
excipientes y usarse en forma de comprimidos, trociscos, cápsulas,
elixires, suspensiones, jarabes, obleas, gomas masticables y
similares. Estas preparaciones deberían contener al menos un 4% del
compuesto de la presente invención, el ingrediente activo, pero
pueden variarse en función de la forma concreta y pueden ser, de un
modo conveniente, entre 4% a aproximadamente 70% del peso de la
unidad. La cantidad del compuesto presente en las composiciones es
tal que se obtenga una dosis adecuada. Las composiciones y
preparaciones preferidas de la presente invención pueden
determinarse por procedimientos bien conocidos para el experto en la
técnica.
Los comprimidos, cápsulas, trocitos y similares
pueden también contener uno o más de los adyuvantes siguientes:
Ligantes, tales como povidona, hidroxipropilcelulosa, celulosa
microcristalina o gelatina; excipientes o diluyentes tales como:
almidón, lactosa, celulosa microcristalina o fosfato dicálcico,
agentes disgregantes tales como: croscarmelosa, crospovidona,
almidón glicolato sódico, almidón de maíz, y similares; lubricantes
tales como: estearato de magnesio, ácido esteárico, talco o aceite
vegetal hidrogenado; deslizantes tales como dióxido de silicio
coloidal, agentes humectantes tales como: laurilsulfato de sodio y
polisorbato 80; y agentes edulcorantes tales como: sacarosa,
aspartamo o sacarina o un agente aromatizante tal como: Menta
piperita, salicilato de metilo o aroma de naranja. Cuando la forma
unitaria de dosificación es una cápsula, puede contener, además de
materiales del tipo anterior, un portador líquido tal como
polietilenglicol o un aceite graso. Otras formas unitarias de
dosificación pueden contener otros diversos materiales que modifican
la forma física de la unidad de dosificación, por ejemplo, en forma
de recubrimientos. Por tanto, los comprimidos o las píldoras pueden
recubrirse con azúcar, hidroxipropilmetilcelulosa, polimetacrilatos
u otros agentes de recubrimiento. Los jarabes pueden contener,
además de los presentes compuestos, sacarosa como un agente
edulcorante y ciertos conservantes, pigmentos y colorantes y
sabores. Los materiales usados en la preparación de estas diversas
composiciones deberán ser farmacéuticamente puros y no tóxicos a las
cantidades usadas.
Generalmente, los compuestos de Fórmula I son
eficaces en un amplio intervalo de dosificación. Por ejemplo, las
dosificaciones al día normalmente entrarán dentro del intervalo de
aproximadamente 0,0001 a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal.
En algunos casos, niveles de dosis inferiores al límite inferior del
intervalo mencionado en lo que antecede pueden se más que
adecuados, mientras que en otros casos pueden emplearse dosis
incluso mayores sin causar ningún efecto secundario dañino y, por
tanto, el intervalo de dosificación anterior no está destinado a
limitar el ámbito de la invención de ningún modo. Debe entenderse
que la cantidad de compuesto administrado en realidad será
determinada por un médico, a la luz de circunstancias relevantes,
incluyendo la afección a tratar, la vía de administración elegida,
el compuesto o compuestos reales administrados, la edad, el peso y
la respuesta de cada paciente individual y la gravedad de los
síntomas del paciente.
Claims (10)
1. Un compuesto de Fórmula I:
\vskip1.000000\baselineskip
en la
que:
W es:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
X es N, o C-R^{1};
R es alquilo C_{1}-C_{7},
cicloalquilo C_{3}-C_{7}, (alquileno
C_{1}-C_{7})-(cicloalquilo
C_{3}-C_{7}), -SO_{2}-(alquilo
C_{1}-C_{7}), o
-SO_{2}-NR^{5}R^{6};
R^{1} es hidrógeno, amino, metilo o
-N=CH(NMe)_{2};
R^{2} es fenilo opcionalmente sustituido con
uno o dos sustituyentes seleccionados de forma independiente de
halo;
R^{3} es hidrógeno, alquilo
C_{1}-C_{7}, cicloalquilo
C_{3}-C_{7} o fenilo opcionalmente sustituido
con uno o dos sustituyentes seleccionados de forma independiente de
halo y trifluorometilo.
R^{4} es hidrógeno o alquilo
C_{1}-C_{7}.
R^{5} y R^{6} se seleccionan de forma
independiente del grupo constituido por alquilo
C_{1}-C_{7} o su sal farmacéuticamente
aceptable.
\newpage
2. Un compuesto de Fórmula I:
en la
que:
R' es 2,2-dimetilpropilo o
1,2,2-trimetilpropilo;
R^{2'} es fenilo,
4-fluorofenilo, o
2,4-difluorofenilo;
R^{3'} es terc-butilo,
2-cloro-6-fluorofenilo,
2-fluoro-6-trifluorometilfenilo,
2,6-diclorofenilo o
2,6-difluorofenilo; o su sal farmacéuticamente
aceptable.
\vskip1.000000\baselineskip
3. Un compuesto de Fórmula I:
en la
que:
a) R' es 2,2-dimetilpropilo,
R^{2'} es 4-fluorofenilo y R^{3'} es
2-fluoro-6-trifluorometilfenilo;
b) R' es 2,2-dimetilpropilo,
R^{2'} es 4-fluorofenilo y R^{3'} es
2,6-diclorofenilo;
c) R' es 2,2-dimetilpropilo,
R^{2'} es 4-fluorofenilo y R^{3'} es
terc-butilo;
d) R' es 2,2-dimetilpropilo,
R^{2'} es fenilo, y R^{3'} es
2-cloro-6-fluorofenilo;
e) R' es 2,2-dimetilpropilo,
R^{2'} es 2,4-difluorofenilo y R^{3'} es
terc-butilo;
f) R' es 1,2,2-trimetilpropilo,
R^{2'} es 4-fluorofenilo y R^{3'} es
terc-butilo; o
g) R' es 1,2,2-trimetilpropilo,
R^{2'} es 4-fluorofenilo y R^{3'} es
2,6-difluorofenilo o su sal farmacéuticamente
aceptable.
\vskip1.000000\baselineskip
4. El compuesto
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
o su sal farmacéuticamente aceptable.
5. El compuesto
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina
su sal fumarato, dimetanosulfonato, succinato, dimaleato o,
clorhidrato.
\newpage
6. El compuesto dimetanosulfonato de
5-[2-terc-butil-5-(4-fluoro-fenil)-1H-imidazol-4-il]-3-(2,2-dimetil-propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilamina.
7. Una formulación farmacéutica que comprende un
compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-6
en combinación con un portador, diluyente o excipiente
farmacéuticamente aceptable.
8. El uso de un compuesto de cualquiera de las
reivindicaciones 1-6 para la fabricación de un
medicamento para tratar una enfermedad o afección susceptible de ser
mejorada o prevenida mediante la inhibición de la
p-38 quinasa.
9. El uso de un compuesto de cualquiera de las
reivindicaciones 1-6 para la fabricación de un
medicamento para el tratamiento de neoplasmas sensibles.
10. El uso de la reivindicación 9, en el que la
neoplasma sensible es mieloma múltiple.
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| US6426360B1 (en) * | 1994-07-28 | 2002-07-30 | G D Searle & Co. | 4,5-substituted imidazolyl compounds for the treatment of inflammation |
| US5717100A (en) * | 1995-10-06 | 1998-02-10 | Merck & Co., Inc. | Substituted imidazoles having anti-cancer and cytokine inhibitory activity |
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| US6087496A (en) * | 1998-05-22 | 2000-07-11 | G. D. Searle & Co. | Substituted pyrazoles suitable as p38 kinase inhibitors |
| US6180632B1 (en) * | 1997-05-28 | 2001-01-30 | Aventis Pharmaceuticals Products Inc. | Quinoline and quinoxaline compounds which inhibit platelet-derived growth factor and/or p56lck tyrosine kinases |
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| AR017219A1 (es) * | 1997-12-19 | 2001-08-22 | Smithkline Beecham Corp | Derivados de imidazol 1,4,5 sustituidos, composiciones que los comprenden, procedimiento para la preparacion de dichos derivados, uso de los derivados parala manufactura de un medicamento |
| US6207687B1 (en) | 1998-07-31 | 2001-03-27 | Merck & Co., Inc. | Substituted imidazoles having cytokine inhibitory activity |
| US6291457B1 (en) | 1999-07-01 | 2001-09-18 | Merck & Co., Inc. | Compounds having cytokine inhibitory activity |
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