ES2300672T3

ES2300672T3 - Derivados de cromenona.

Info

Publication number: ES2300672T3
Application number: ES04007549T
Authority: ES
Inventors: Teresa Dr. Mujica-Fernaud; Herwig Dr. Buchholz; Wilfried Dr. Rautenberg; Christian Dr. Sirrenberg
Original assignee: Merck Patent GmbH
Current assignee: Merck Patent GmbH
Priority date: 2003-04-30
Filing date: 2004-03-29
Publication date: 2008-06-16
Anticipated expiration: 2024-03-29
Also published as: DE502004006542D1; US20040220182A1; US8304416B2; ATE389650T1; US7378421B2; EP1473293A1; US20110136830A1; US20080146589A1; EP1473293B1

Abstract

Empleo de los compuestos de la fórmula I (Ver fórmula) en la que R1 significa H, -OH, -OA, fenoxi, Ar, -O-CO-A, SO3H, SO3A, -OSO3H, -OSO3A, -OSO2A, SO2A, Hal, COOH, COOA, CONH2, NHSO2A, COA, CHO o SO2NH2, R2 significa H, -OH, -OA, fenoxi, Ar, -O-CO-A, SO3H, SO3A, -OSO3H, -OSO3A, -OSO2A, SO2A, Hal, COOH, COOA, CONH2, NHSO2A, COA, CHO o SO2NH2, R3 significa H, -OH, -OA, fenoxi, Ar, -O-CO-A, SO3H, SO3A, -OSO3H, -OSO3A, -OSO2A, SO2A, Hal, COOH, COOA, CONH2, NHSO2A, COA, CHO o SO2NH2, R1 y R2 significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi, Het significa heterociclo con 1 hasta 4 átomos de N, de O y/o de S, con un núcleo o con dos núcleos, saturado, no saturado o aromático, que puede estar no substituido o substituido una, dos o tres veces por oxígeno de tipo carbonilo, por =S, por =NH, por Hal, por A, por -(CH2)o-Ar, por -(CH2)o-cicloalquilo, por -(CH2)o-OH, por -(CH2)o-NH2, por NO2, por CN, por -(CH2)o-COOH, por -(CH2)o-COOA, por -(CH2)o-CONH2, por -(CH2)o-NHCOA, por NHCONH2, por -(CH2)o-NHSO2A, por CHO, por COA'', por SO2NH2 y/o por S(O)oA, Ar significa fenilo, naftilo o bifenilo no substituido o substituido una, dos o tres veces por Hal, por A, por OH, por OA, por NH2, por NO2, por CN, por COOH, por COOA, por CONH2, por NHCOA, por NHCONH2, por NHSO2A, por CHO, por COA, por SO2NH2 o por S(O)oA, A significa alquilo con 1 hasta 10 átomos de carbono no ramificado o ramificado, pudiendo estar reemplazados de 1 hasta 7 átomos de H por F, A'' significa alquilo con 1 hasta 6 átomos de carbono o bencilo, Hal significa F, Cl, Br o I, o significa 0, 1 o 2, así como de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades, en los cuales juegue un papel la inhibición, la regulación y/o la modulación de la transducción de señal de cinasas.

Description

Derivados de cromenona.

Fundamento de la invención

La invención tenía como tarea encontrar nuevos compuestos con propiedades valiosas, especialmente aquellos que pudieran ser empleados para la fabricación de medicamentos.

La presente invención e refiere a compuestos, en los cuales juega un papel la inhibición, la regulación y/o la modulación de la transducción de señales cinasas, especialmente de tirosina cinasas y de Raf-cinasas, además se refiere a composiciones farmacéuticas, que contengan estos compuestos, así como al empleo de los compuestos para el tratamiento de enfermedades condicionadas por la cinasa.

En particular, la presente invención se refiere a compuestos, que inhiben, que regulan y/o que modulan la transducción de señal de las tirosina cinasas, a composiciones, que contienen estos compuestos, así como a procedimientos para su empleo destinado al tratamiento de enfermedades y de dolencias condicionadas por la tirosina cinasa tales como el cáncer, el crecimiento tumoral la arteriosclerosis, la degeneración de la mácula condicionada por la edad, la retinopatía diabética, las enfermedades inflamatorias y similares en los animales mamíferos. Las tirosina cinasas están constituidas por una clase de enzimas, que catalizan la transmisión del fosfato situado en el extremo de la cadena del adenosinatrifosfato hasta el resto tirosina en los substratos proteicos. Se supone que las tirosina cinasas tienen un papel esencial en diversas funciones celulares a través de la fosforilación del substrato en la transducción de la señal. Aún cuando todavía no están claros los mecanismos exactos de la transducción de la señal, se ha mostrado que las tirosina cinasas representan factores importantes en la proliferación celular, en la carcinogénesis y en la diferenciación celular.

Las tirosina cinasas pueden dividirse en receptores de tipo tirosina cinasa y en tirosina cinasas citosólicas. Los receptores de tipo tirosina cinasa presentan una parte extracelular, una parte transmembranal y una parte intracelular, mientras que las tirosina cinasas citosólicas están presentes, de manera exclusiva, en el interior de la célula.

Los receptores de tipo tirosina cinasa están constituidos por una pluralidad de receptores transmembranales con diversa actividad biológica. De este modo, se han identificado aproximadamente 20 subfamilias diferentes de los receptores de tipo tirosina cinasa. Una subfamilia de las tirosina cinasas, que porta la denominación de subfamilia HER, está constituida por la EGFR, por la HER2, por la HER3 y por la HER4. A los ligandos de esta receptor-subfamilia pertenecen el factor de crecimiento del epitelio, la TGF-\alpha, la anfirregulina, la HB-EGF, la betacelulina y la heregulina. La subfamilia de la insulina, a la que pertenecen la INS-R, la IGF-IR y la IR-R, representa otra subfamilia de estos receptores de tipo tirosina cinasa. La subfamilia PDGF contiene el receptor PDGF-\alpha y el receptor PDGF-\beta, la CSFIR, la c-kit y la FLK-II. Además, existe la familia FLK, que está constituida por el receptor del dominio de inserción de la cinasa (KDR), por la cinasa hepática-1 fetal (FLK-1), por la cinasa hepática-4 fetal (FLK-4) y por la fms-tirosina cinasa-1 (flt-1). De manera usual, las familias PDGF y FLK se tratan de manera conjunta debido a las similitudes que existen entre estos dos grupos. Véase el trabajo de de Plowman et al., DN & P 7(6):334-339, 1994, para un tratamiento más detallado de los receptores de tipo tirosina cinasa, que se incorpora por la presente como referencia.

Las tirosina cinasas citosólicas están constituidas, igualmente, por una pluralidad de subfamilias, entre las que se encuentran Src, Frk, Btk, Csk, Abl, Zap70, Fes/Fps, Fak, Jak, Ack, y LIMK. Cada una de estas subfamilias está subdividida, a su vez, en diversos receptores. De este modo la subfamilia Src representa, por ejemplo, una de las mayores subfamilias. Ésta contiene Src, Yes, Fyn, Lyn, Lck, Blk, Hck, Fgr y Yrk. La subfamilia enzimática Src se ha relacionado con la oncogénesis. Véase el trabajo de Bolen Oncogene, 8:2025-2031 (1993), para un tratamiento más detallado de las tirosina cinasas citosólicas, que se incorpora por la presente como referencia.

Tanto los receptores de tipo tirosina cinasa así como, también, las tirosina cinasas citosólicas participan en las vías de transmisión de las señales de la célula, que conducen a diversos estados de dolencia, entre los cuales se encuentran en el cáncer, la psoriasis y las hiperinmunorreacciones.

Se ha propuesto que juegan un papel en la angiogénesis diversas receptores de tipo tirosina cinasa así como los factores de crecimiento enlazados sobre las mismas, aún cuando algunas podrían favorecer indirectamente la angiogénesis (Mustonen y Alitalo, J. Cell Biol. 129:895-898, 1995). Una de estas receptores de tipo tirosina cinasa es la cinasa hepática 1 fetal, denominada también FLK-1. El análogo humano de la FLK-1 es el receptor que contiene el dominio de inserción de la cinasa KDR, que se conoce también bajo la denominación de receptor del factor de crecimiento de las células del endotelio de los vasos 2 o bien VEGFR-2, puesto que enlaza con elevada afinidad al VEGF. Finalmente se ha denominado también como NYK la versión correspondiente al ratón de este receptor (Oelrichs et al., Oncogene 8(1):11 - 15, 1993). El VEGF y el KDR representan un par constituido por ligando-receptor, que juega un papel esencial en el caso de la proliferación de las células del endotelio de los vasos y en la formación y en gemación de los vasos sanguíneos, que se denomina vasculogénesis o bien angiogénesis.

La angiogénesis se caracteriza por una actividad con una intensidad desmesurada del factor de crecimiento del endotelio de los vasos (VEGF). El VEGF está constituido en realidad por una familia de ligandos (Klagsburn y D'Amore, Cytokine & Growth Factor Reviews 7:259-270, 1996). El VEGF enlaza el tirosina cinasa receptor KDR transmembranal de elevada afinidad y la fms-tirosina cinasa-1 emparentada, conocida también por la denominación Flt-1 o receptor del factor de crecimiento de las células del endotelio de los vasos 1 (VEGFR-1). Se deduce por medio de ensayos de desactivación de cultivos celulares y genéticos que cada receptor contribuye a la angiogénesis según diversos aspectos. El KDR provoca la función mitógena del VEGF mientras que la Flt-1 parece que modula las funciones no mitógenas, como aquellas que están relacionadas con la adhesión celular. Una inhibición del KDR modula, por lo tanto, el nivel de la actividad mitógena del VEGF. En realidad se ha observado que el crecimiento de los tumores queda influenciado por el efecto antiangiogénico de los antagonistas del receptor del VEGF (Kim et al., Nature 362, páginas 841- 844, 1993).

Los tumores sólidos pueden tratarse, por lo tanto, con inhibidores de la tirosina, puesto que estos tumores dependen de la formación de la angiogénesis de los vasos sanguíneos necesarios para favorecer su crecimiento. A estos tumores sólidos pertenecen: la leucemia monocítica, el carcinoma cerebral, urogenital, del sistema linfático, del estómago, de la laringe y del pulmón, entre los cuales se encuentran el adenocarcinoma pulmonar y el carcinoma pulmonar microcelular. Otros ejemplos corresponden a los carcinomas en los que se observa una sobreexpresión o una activación de los oncogenes activadores de Raf (por ejemplo K-ras, erb-B). A estos carcinomas pertenecen el carcinoma de páncreas y el carcinoma de mama.

Así pues, los inhibidores de estas tirosina cinasas son adecuados para la profilaxis y el tratamiento de enfermedades proliferantes, que están condicionadas por este enzima.

La actividad angiogena del VEGF no está limitada a los tumores. El VEGF es responsable de la actividad angiogena que se produce en el caso de la retinopatía diabética en o bien en las proximidades de la retina. Este crecimiento vascular en la retina conduce a un debilitamiento de la agudeza visual y, finalmente, a la ceguera. Los niveles en el ojo en VEGF-ARNm y en VEGF-proteína se aumentan debido a las dolencias tales como la oclusión venosa de la retina en el caso de los primates así como por un nivel reducido en pO_{2} en el caso del ratón, que conducen a la neoplasia de los vasos. Los anticuerpos monoclonales anti-VEGF, o los inmunoconjugados de VEGF-receptor inhiben, cuando se inyectan intraocularmente, tanto en el modelo con primates así como también en el modelo con roedores, la neoplasia de los vasos en el ojo. Independientemente del motivo de la inducción del VEGF en el caso de la retinopatía diabética de los seres humanos, es adecuada la inhibición del VEGF ocular para el tratamiento de esta enfermedad.

La expresión del VEGF está también intensamente aumentada en regiones hipóxicas de tumores animales y de seres humanos junto a las zonas de necrosis. Además se regula el aumento del VEGF mediante la expresión de los oncogenes ras, raf, src y de los mutantes p53 (siendo significativos todos ellos para la lucha contra el cáncer). Los anticuerpos monoclonales anti-VEGF inhiben el crecimiento de los tumores humanos en el ratón desnudo. Aún cuando las mismas células tumorales siguen expresando en cultivo al VEGF, los anticuerpos no reducen su velocidad de la división celular. De este modo el VEGF, procedente de tumores, no actúa como factor mitógeno autocrino. Por lo tanto el VEGF contribuye in vivo al crecimiento tumoral debido a que favorece la angiogénesis mediante su actividad de quimiotaxis y de mitogénesis de las células del endotelio de los vasos. Estos anticuerpos monoclonales inhiben también el crecimiento de los carcinomas del colon humano que, de manera típica, están vascularizados de una manera menos pronunciada en los ratones exentos de timo y reducen el número de los tumores que se forman a partir de las células inoculadas.

La expresión de un constructo enlazador del VEGF de Flk-1, de Flt-1, del homólogo acortado del receptor KDR en el ratón para la eliminación de los dominios citoplasmáticos de la tirosina cinasa, pero manteniéndose un anclaje con la membrana, detiene prácticamente en los virus el crecimiento de un glioblastoma transplantable en el caso del ratón, probablemente debido al mecanismo negativo dominante de la formación de heterodímeros con receptores transmembranales de VEGF de las células del endotelio. Las células madre embrionarias, que se desarrollan en el ratón desnudo usualmente en forma de tumores sólidos, no forman tumores detectables en el caso de la desactivación de los dos alelos del VEGF. A partir de estos datos se deduce, en conjunto, el papel del VEGF en el crecimiento de los tumores sólidos. La inhibición del KDR o bien del Flt-1 participa en la angiogénesis patológica y estos receptores son adecuados para el tratamiento de enfermedades en las cuales la angiogénesis represente una parte del conjunto de la patología, por ejemplo inflamaciones, vascularización diabética de la retina así como diversas formas de cáncer, puesto que se sabe, que el crecimiento de los tumores depende de la angiogénesis (Weidner et al., N. Engl. J. Med., 324, páginas 1-8, 1991).

La presente invención se refiere, de igual modo, a los compuestos como inhibidores de las Raf-cinasas.

La fosforilación de las proteínas es un proceso fundamental para la regulación de las funciones celulares. El efecto de coordinación de las proteína cinasas así como, también, de las fosfatasas controla el grado de fosforilación y, como consecuencia, la actividad de proteínas diana específicas. Uno de los papales predominantes de la fosforilación de las proteínas consiste en la transducción de las señales, cuando se amplifiquen las señales extracelulares y se propaguen por medio de una cascada de episodios de fosforilación y de desfosforilación de la proteína, por ejemplo en la vía p21^{ras}/raf.

El gen p21^{ras} ha sido descubierto como un oncogen de los virus del sarcoma de Harvey y de Kirsten en ratas (H-Ras o bien K-Ras). En el caso de los seres humanos se han relacionado las mutaciones características en el gen Ras celular (c-Ras) con muchos tipos de cáncer diferentes. Se ha observado en estos alelos mutantes, que activan el Ras constituyente, que transforman en cultivo células como, por ejemplo, la línea celular murina NIH 3T3.

El oncogen p21^{ras} es un importante factor de contribución para el desarrollo y para la progresión de los carcinomas sólidos humanos y está mutado en el 30% de todos los carcinomas humanos (Bolton et al. (1994) Ann. Rep. Med. Chem., 29, 165-74; Bos. (1989) Cancer Res., 49, 4682-9). En su forma normal, no mutada, la Ras-proteína es un elemento clave de la cascada de la transducción de las señales, que se controla mediante los receptores del factor de crecimiento en casi todos los tejidos (Avruch et al. (1994) Trends Biochem. Sci., 19, 279-83).

Desde el punto de vista bioquímico, la Ras es una proteína enlazadora de guanina-nucleótido, y la ciclación entre una forma de GTP enlazada, activada y una forma de GDP enlazada, en reposo, es controlada estrictamente por la actividad GTPasa endógena de la Ras y por otras proteínas reguladoras. El producto génico de la Ras se enlaza sobre el trisfosfato de guanina (GTP) y sobre el difosfato de guanina (GDP) y produce la hidrólisis del GTP para dar GDP. La Ras es activa en estado enlazado del GTP. En los mutantes de la Ras en células tumorales está debilitada la actividad endógena de la GTPasa y, por lo tanto, la proteína proporciona señales de crecimiento constituyentes a los efectores situados en el sentido 3' ("downstream"), como por ejemplo hasta el enzima Raf-cinasa.

Esto conduce a crecimientos de tipo tumoral de las células, que portan estos mutantes (Magnuson et al. (1994) Semin. Cancer Biol., 5, 247-53). El Ras-proto-oncogen necesita un C-Raf-1-proto-oncogen funcionalmente intacto para transducir las señales de crecimiento y de diferenciación iniciadas en los eucariotas superiores mediante los receptores de tipo tirosina cinasa y los no-receptores de tipo tirosina cinasa.

La Ras activada es necesaria para la activación del C-Raf-1-proto-oncogen, sin embargo las etapas bioquímicas, mediante las cuales la Ras activa a la Raf-1-proteína-(Ser/Thr)-cinasa, se han caracterizado perfectamente entre tanto. Se ha observado que la inhibición del efecto de la Ras activa mediante la inhibición de la vía de señal de la Raf-cinasa mediante la administración de anticuerpos desactivantes contra la Ras-cinasa o mediante la coexpresión de la Ras-cinasa negativa, dominante o mediante MEK (MAPKK) negativo dominante, al substrato de la Raf-cinasa, conduce a la reversión de las células transformadas al fenotipo de crecimiento normal, véanse las publicaciones: Daum et al. (1994) Trends Biochem. Sci., 19, 474-80; Fridman et al. (1994) J Biol. Chem., 269, 30105-8. Kolch et al. (1991) Nature, 349, 426-28) y la conferencia de Weinstein-Oppenheimer et al. Pharm. & Therap. (2000), 88, 229-279.

De manera similar, ha sido relacionada la inhibición de la Raf-cinasa (mediante oligodesoxinucleótidos no codificantes) in vitro e in vivo con la inhibición del crecimiento de una serie de diversos tipos de tumores humanos (Monia et al., Nat. Med. 1996, 2,668-75).

Las proteína cinasas específicas de Raf-serina y de treonina son enzimas citosólicos, que estimulan el crecimiento celular en una serie de diversos sistemas celulares (Rapp, U.R., et al. (1988) en The Oncogene Handbook; T. Curran, E.P. Reddy y A. Skalka (Hrsg.) Elsevier Science Publishers; Países Bajos, páginas 213-253; Rapp, U.R., et al. (1988) Cold Spring Harbor Sym. Quant. Biol. 53:173-184; Rapp, U.R., et al. (1990) Inv Curr. Top. Microbiol. Immunol. Potter y Melchers (Hrsg.), Berlín, Springer-Verlag 166:129-139).

Se han caracterizado tres isozimas:

C-Raf (Raf-1) (Bonner, T.I., et al. (1986) Nucleic Acids Res. 14:1009-1015), A-Raf (Beck, T.W., et al. (1987) Nucleic Acids Res. 15:595-609), y B-Raf (Qkawa, S., et al. (1998) Mol. Cell. Biol. 8:2651-2654; Sithanandam, G. et al. (1990) Oncogene:1775). Estos enzimas se diferencian por su expresión en diversos tejidos. La Raf-1 se expresa en todos los órganos y en todas las líneas celulares, que han sido investigados, y la A-Raf y la B-Raf se expresan en el tejido urogenital o bien en el tejido cerebral (Storm, S.M. (1990) Oncogene 5:345-351).

Los Raf-genes son proto-oncogenes: éstos pueden iniciar la transformación maligna de las células cuando sean expresados en formas específicamente modificadas. Las modificaciones genéticas, que conducen a la activación oncogénica, generan una proteína cinasa constituyente activa mediante la eliminación o la interferencia con un dominio regulador negativo N-terminal de la proteína (Heidecker, G., et al. (1990) Mol. Cell. Biol. 10:2503-2512; Rapp, U.R., et al. (1987) en Oncogenes and Cancer; S. A. Aaronson, J. Bishop, T. Sugimura, M. Terada, K. Toyoshima y P. K. Vogt (Hrsg.) Japan Scientific Press, Tokio). La microinyección en células NIH 3T3 de versiones oncógenas activadas pero no de tipo silvestre de la Raf-proteína preparada con vectores de expresión de Escherichia coli, conduce a transformación morfológica y estimula la síntesis del ADN (Rapp, U.R., et al. (1987) en Oncogenes and Cancer; S. A. Aaronson, J. Bishop, T. Sugimura, M. Terada, K. Toyoshima, y P. K. Vogt (Hrsg.) Japan Scientific Press, Tokio; Smith, M. R., et al. (1990) Mol. Cell. Biol. 10:3828-3833).

Como consecuencia, la Raf-1 activada es un activador intracelular del crecimiento celular. La Raf-1-proteína-serina-cinasa es un candidato para el efector en el sentido 3' ("downstream") de la transducción mitógena de señales, puesto que los Raf-oncogenes tropiezan con la detención del crecimiento, que resulta de un bloqueo de la actividad celular de la Ras debido a una mutación celular (células Ras-inversoras) o de la microinyección de anticuerpos anti-Ras (Rapp, U.R., et al. (1988) in The Oncogene Handbook, T. Curran, E.P. Reddy y A. Skalka (Hrsg.), Elsevier Science Publishers; Países bajos, páginas 213-253; Smith, M.R., et al. (1986) Nature (Londres) 320:540-543).

La función C-Raf es necesaria para la transformación mediante una serie de diversos oncogenes enlazados con la membrana y para la estimulación del crecimiento por medio de los mitógenos contenidos en el suero (Smith, M.R., et al. (1986) Nature (Londres) 320:540-543). La actividad Raf-1-proteína-serina-cinasa se regula mediante mitógenos a través de la fosforilación (Morrison, D.K., et al. (1989) Cell 58:648-657), que provoca también la división subcelular (Olah, Z., et al. (1991) Exp. Brain Res. 84:403; Rapp, U.R., et al. (1988) Cold Spring Harbor Sym. Quant. Biol. 53:173-184. A los factores del crecimiento activados por la Raf-1 pertenecen el factor del crecimiento procedente de los trombocitos (PDGF) (Morrison, D.K., et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:8855-8859), el factor estimulante de las colonias (Baccarini, M., et al. (1990) EMBO J. 9:3649-3657), la insulina (Blackshear, P.J., et al. (1990) J. Biol. Chem. 265:12115-12118), el factor de crecimiento epidérmico (EGF) (Morrison, R.K., et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:8855-8859), la interleucina-2 (Turner, B.C., et al. (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:1227) y la interleucina-3 y el factor estimulante de las colonias de granulocitos-macrófagos (Carroll, M.P., et al. (1990) J. Biol. Chem. 265:19812-19817).

Tras el tratamiento mitógeno de las células, sufre una tanslocación la Raf-1-proteína-serina-cinasa, activada de manera pasajera, hasta la región perinuclear y hasta el núcleo (Olah, Z., et al. (1991) Exp. Brain Res. 84:403; Rapp, U.R., et al. (1988) Cold Spring Habor Sym. Quant. Biol. 53:173-184). Las células, que contienen Raf activada, están modificadas en su cuadro de expresión genética (Heidecker, G., et al. (1989) en Genes and signal transduction in multistage carcinogenesis, N. Colburn (Hrsg.), Marcel Dekker, Inc., New York, páginas 339-374) y Raf-oncogenes activate transcription from Ap-I/PEA3-dependent promotors in transient transfection assays (Jamal, S., et al. (1990) Science 344:463-466; Kaibuchi, K., et al. (1989) J. Biol. Chem. 264:20855-20858; Wasylyk, C., et al. (1989) Mol. Cell. Biol. 9:2247-2250).

Existen, al menos, dos vías independientes para la activación de la Raf-1 mediante mitógenos extracelulares: una de ellas, que contiene la proteína cinasa C (KC), y una segunda, que es iniciada por medio de las proteína tirosina cinasas (Blackshear, P.J., et al. (1990) J. Biol. Chem. 265:12131-12134; Kovacina, K.S., et al. (1990) J. Biol. Chem. 265:12115-12118; Morrison, D.K., et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:8855-8859; Siegel, J.N., et al. (1990) J. Biol. Chem. 265:18472-18480; Turner, B.C., et al. (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:1227). En cualquier caso contiene la activación de la Raf-1-proteína-fosforilación. La Raf-1-fosforilación puede ser una consecuencia de una cascada de cinasa, que sea amplificada mediante autofosforilación o puede estar provocada completamente por autofosforilación, que se inicia mediante el enlace de un probable ligando de activación sobre los dominios de regulación de la Raf-1, de manera análoga a lo que ocurre con la activación de la PKC mediante el diacilglicerol (Nishizuka, Y. (1986) Science 233:305-312).

Uno de los mecanismos principales, mediante el cual se provoca la regulación celular, consiste en la transducción de las señales extracelulares a través de la membrana, que modulan a su vez las vías bioquímicas en la célula. La fosforilación de la proteína representa un recorrido a través del cual se propagan las señales intracelulares desde una molécula a otra molécula, lo cual resulta finalmente en una respuesta celular. Estas cascadas de transducción de señales están altamente reguladas y frecuentemente están solapadas como se desprende por la presencia de un gran número de proteína cinasas así como también de fosfatasas. La fosforilación de las proteínas se produce, por regla general, en los restos de serina, de treonina o de tirosina, y las proteína cinasas se clasificaron, por lo tanto, según su especificidad del punto de fosforilación, es decir de las serina-/treonina cinasas y de las tirosina cinasas. Puesto que la fosforilación es un proceso de este tipo ampliamente extendido en las células y puesto que los fenotipos celulares están influenciados en gran medida por la actividad de esta vía, se supone actualmente que un número de estados patológicos y/o de enfermedades se deben bien a la activación desviadora o a mutaciones funcionales en los componentes moleculares de cascadas de cinasa. Por lo tanto se ha dado una atención considerable a la caracterización de estas proteínas y compuestos, que son capaces de modular su actividad (véase el artículo de recopilación: Weinstein-Oppenheimer et al. Pharma. &. Therap., 2000, 88, 229-279).

La proteína cinasa PKB (que se conoce también como AKT y como RAC-PK) es un miembro de la familia AKT/PKB de las serina-/treonina-cinasas, y se ha mostrado que participan en una serie diversa de vías de señal en la malignidad humana (Nicholson et al., Cell. Signal., 2002, 14, 381-395). La PKB, así como también otros miembros de la familia AKT/PKB, está localizada en el citosol de células no estimuladas y sufre una translocación, tras la estimulación, hasta la membrana celular. La translocación de la PKB puede activarse por medio de diversos ligandos, con inclusión del factor de crecimiento, que procede de los trombocitos, del factor del crecimiento epidérmico, del factor de básico del crecimiento de los fibroblastos, el estrés celular, tal como, por ejemplo, el choque térmico y la hiperosmolaridad y también la insulina (Bos, Trends Biochem. Sci., 1995, 20, 441-442), y otros estudios han mostrado que esta activación transcurre a través de la P13-cinasa, que es sensible a la wortmanina (Wortmannin) (Franke et al., Science, 1997, 275, 665-668). Tan pronto como se localizó la PKB sobre la plasmamembrana, se demostró que ésta induce varias funciones en la célula, con inclusión de la apoptosis, el efecto metabólico de la insulina, la inducción de la diferenciación y/o de la proliferación, la síntesis proteica y las respuestas al estrés (Alessi und Cohen, Curr. Opin. Genet. Dev., 1998, 8, 55-62; Downward, Curr. Opin. Cell Biol., 1998, 10, 262-267).

La PKB se clonó en 1991 independientemente por parte de tres grupos (Bellacosa et al., Science, 1991, 254, 274-277; Coffer und Woodgett, Eur. J. Biochem., 1991, 201, 475-481; Jones et al., Cell Regul., 1991, 2, 1001- 1009), habiéndose reconocido su relación con el carcinoma de estómago humano primario solamente en 1987 (Staal et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U S A, 1987, 84, 5034-5037). La secuenciación de la PKB\alpha permite reconocer en los dominios de cinasa la homología con respecto a los isozimas PKA (aproximadamente 68%) y PKC (aproximadamente 73%) (Jones et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1991, 88, 4171-5), un hecho que conduce a su cambio de denominación en PKB. Existen tres isoformas celulares de la PKB y dos ayusto-variantes (PKB\alpha, \beta, \gamma, \beta_{1}, \gamma_{1}; Brazil et al. Trends in Bio Sci, 2001, 26, 657-663). Se ha encontrado que la PKB\alpha es amplificada o sobreexpresada en los carcinomas de estómago y en una línea celular del cáncer de mama (Staal et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1987, 84, 5034-7; Jones et al., Cell Regul., 1991, 2, 1001-9). La PKB\beta es amplificada o sobreexpresada en el 3% del cáncer de mama (Bellacosa et al., Int. J. Cancer, 1995 64, 280-5), en el 12% del cáncer de páncreas (Cheng et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1996, 93, 3636-41) y en el 15% del cáncer de ovario (Bellacosa et al., Int. J. Cancer, 1995, 64, 280-5; Cheng et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1992, 89, 9267-71).

La PKB\gamma es sobreexpresada en el cáncer de mama estrógeno receptor-deficiente y en las líneas celulares de próstata andrógenoindependientes (Nakatani et al., J. Biol. Chem. 1999, 274, 21528-32).

Se ha propuesto que la PKB es un gen que participa en la reorganización cromosómica en la banda cromosómica 14q32. Es conocido que esta localización está sometida a una reorganización en el caso de las malignidades de las células T humanas, tales como, por ejemplo, en las leucemias prolinfocíticas y las leucemias de procedente mixta en la edad infantil (Staal et al., Genomics, 1988, 2, 96-98).

De igual modo, la PKB juega un papel para impedir la "muerte celular programada" o la apoptosis mediante la fosforilación inhibidora de la ASK-1, Bad, Caspase9 y FKHR (véase el resumen de los autores Nicholson et al., Cell Signaling 2001, 14, 281-395). Se ha demostrado que la PKB proporciona una señal de supervivencia para las células (véase el resumen de los autores Lawlor et al., J. of Cell Science 2001, 114, 2903-2910), para protegerlas contra un número de agentes, con inclusión de la irradiación UV (Dudek et al., Science, 1997, 275, 661-665), la eliminación de IGF1 de las células neuronales, desprendimiento de la matriz extracelular, estrés y choque térmico (Alessi und Cohen, Curr. Opin. Genet. Dev., 1998, 8, 55-62).

La fosfatasa PTEN dual-específica (Phosphatase and Tensin homologue deleted on Chromosome Ten [Phosphatase und Tensin homolog deletiert an Chromosom zehn]) aumenta el nivel Ptdlns(3, 4, 5)P_{3} en la célula mediante la desfosforilación de la Ptdlns(3, 4, 5)P_{3}. La Ptdlns(3, 4, 5)P_{3} se enlaza sobre el dominio PH (dominio de homología a la pleckstrina (Pleckstrin)) de la PKB. Este enlace representa una etapa esencial para la translocación en la membrana y para la activación de la PKB. El PTEN es un gen supresor de los tumores mutado en una gran parte de las líneas celulares del glioblastoma y del melanoma, de los carcinomas de próstata avanzados y de los carcinomas endometriales. Además, este gen ha sufrido una deleción en > 80% de los pacientes con padecimientos considerables tales como, por ejemplo, el síndrome de Cowden, el síndrome de Lhermitte-Duclos y el síndrome de Bannayan-Zonana. Los pacientes presentan varias características similares, con inclusión de tumores benignos múltiples (harmatomas) y una elevada propensión a las malignidades de mama y de la glándula tiroides (Di Cristofano et al. Cell, 2000, 100, 387-390).

Las líneas celulares derivadas de ratones PTEN+/- heterocigotes (los ratones PTEN-/- heterocigotes no son capaces de sobrevivir) presentan un nivel acrecentado en Ptdlns(3, 4, 5)P_{3}, que va acompañado por una actividad PKB acrecentada, simultáneamente con una sensibilidad disminuida frente a la apoptosis (Di Christofano et al. Nat. Genet. 1998, 19, 348-355; Stambolic et al., Cell, 1998, 95, 29-39, Myers et al., Proc. Natl. Acad. Si. U.S.A., 1998, 96 13513-13518).

La PKB también es capaz de verificar la promoción de la progresión del ciclo celular mediante la inhibición del inhibidor del ciclo celular p21 (Zhou et al.; Nat. Cell Biol., 2002,3, 245-252).

Estos descubrimientos podrían explicar la sobreexpresión de la PKB, que se observa en las células cancerosas, la supervivencia y la proliferación preferentes de los carcinomas por impedimento de la progresión normal hasta la apoptosis.

En el momento actual no se conocen productos terapéuticos que inhiban de manera eficaz la actividad de la PKB. Como consecuencia existe todavía una necesidad, apreciada desde hace mucho tiempo, de agentes complementarios, que sean capaces de inhibir de manera eficaz la función de la PKB para la activación de las proteínas proapoptóticas en todos los tipos de cáncer.

Así pues, es deseable y constituye un objetivo de la presente invención, la identificación de pequeños compuestos, que inhiban, que regulen y/o que modulen de manera específica la transducción de señal de las tirosina cinasas y/o de las Raf-cinasas.

Se ha encontrado que los compuestos de la fórmula I y sus sales tienen propiedades farmacológicas muy valiosas con una buena compatibilidad.

De manera especial, éstos presentan propiedades inhibidoras de la tirosina cinasa. De igual modo se ha encontrado que los compuestos de la fórmula I, que se describen en general como derivados de la cromenona, son inhibidores del enzima Raf-cinasa. Puesto que el enzima es un efector en el sentido 3' ("downstream") de p21^{ras}, se han revelado como útiles los inhibidores en composiciones farmacéuticas para la aplicación en la medicina humana o en la medicina veterinaria, cuando esté indicada la inhibición de la vía Raf-cinasa, por ejemplo en el tratamiento de tumores y/o en el crecimiento celular tumoral inducido por la Raf-cinasa. Los compuestos son especialmente útiles para el tratamiento de los carcinomas sólidos en los seres humanos y en los animales, por ejemplo en el caso del cáncer murino, puesto que la progresión de estos cánceres depende de la cascada de transducción de señales Ras-proteína y por lo tanto responden al tratamiento mediante la interrupción de la cascada, es decir mediante la inhibición de la Raf-cinasa. Por lo tanto, se administrará el compuesto de la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el tratamiento de enfermedades que sean inducidas por medio de la vía Raf-cinasa, especialmente el cáncer, con inclusión de los carcinomas sólidos, tales como por ejemplo los carcinomas (por ejemplo del pulmón, del páncreas, de la glándula tiroides, de la vejiga o del colon), las enfermedades mieloides (por ejemplo la leucemia mieloide) o los adenomas (por ejemplo el adenoma de colon velloso), la angiogénesis patológica y la migración celular por metástasis. Los compuestos son útiles, de igual modo, para el tratamiento de las inflamaciones crónicas, que dependen de la activación complementaria (Niculescu et al. (2002) Immunol. Res., 24:191-199) y de la inmunodeficiencia inducida por el HIV-1 (Human Immunodeficiency Virus tipo 1) (Popik et al. (1998) J Virol, 72: 6406-6413).

De manera sorprendente, se ha encontrado, que los compuestos derivados, de conformidad con la invención, pueden interaccionar con vías de señal, de manera especial con las vías de señal aquí descritas y, de manera preferente, con la vía de señal Raf-cinasa. Los derivados de cromenona, de conformidad con la invención, presentan, de manera preferente, una actividad biológica ventajosa, que puede demostrarse fácilmente en ensayos basados en enzimas, por ejemplo ensayos tales como los que aquí han sido descritos. En tales ensayos, basados en enzimas, los derivados de cromenona, de conformidad con la invención, muestran y provocan de manera preferente un efecto inhibidor, que está documentado usualmente por medio de los valores IC_{50} en un intervalo adecuado, de manera preferente en el intervalo micromolar y, de una manera más preferente, en el intervalo nanomolar.

Tal como se ha tratado aquí, estas vías de señal son relevantes para diversas enfermedades. Por lo tanto, los derivados de cromenona son útiles en el caso de la profilaxis y/o del tratamiento de enfermedades, que dependan de las citadas vías de señal mediante la interacción con una o con varias de las vías de señal citadas.

Por consiguiente, el objeto de la presente invención está constituido por compuestos, de conformidad con la invención, como promotores o como inhibidores, de manera preferente como inhibidores de las vías de señal aquí descritas. Así pues, el objeto preferente de la invención está constituido por los compuestos, de conformidad con la invención, como promotores o como inhibidores, de manera preferente como inhibidores de la vía Raf-cinasa. Por consiguiente, un objeto más preferente de la invención está constituido por los compuestos, de conformidad con la invención, como promotores o como inhibidores, de manera preferente como inhibidores de la Raf-cinasa. Un objeto aún más preferente de la invención está constituido por los compuestos, de conformidad con la invención, como promotores o como inhibidores, de manera preferente como inhibidores de una o de varias Raf-cinasas, elegidas entre el grupo constituido por la A-Raf, por la B-Raf y por la C-Raf-1. Un objeto especialmente preferente de la invención está constituido por los compuestos, de conformidad con la invención, como promotores o como inhibidores, de manera preferente como inhibidores de la C-Raf-1.

Otro objeto de la presente invención está constituido por el empleo de uno o de varios compuestos, de conformidad con la invención, para el tratamiento y/o para la profilaxis de las enfermedades, de manera preferente de las enfermedades aquí descritas, que están provocadas, transmitidas y/o propagadas por las Raf-cinasas y, de manera especial, las enfermedades que son provocadas, transmitidas y/o propagadas por las Raf-cinasas elegidas entre el grupo constituido por la A-Raf, por la B-Raf y por la C-Raf-1. Usualmente se dividen en dos grupos las enfermedades aquí citadas, es decir en enfermedades hiperproliferantes y en enfermedades no hiperproliferantes. En este contexto, se consideran como enfermedades de tipo no canceroso la psoriasis, la artritis, las inflamaciones, la endometriosis, la cicatrización, la hiperplasia prostática benigna, las enfermedades inmunitarias, las enfermedades autoinmunitarias y las enfermedades de inmunodeficiencia, se consideran como enfermedades no hiperproliferantes, de manera usual, la artritis, las inflamaciones, las enfermedades inmunitarias, las enfermedades autoinmunitarias y las enfermedades de inmunodeficiencia. En este contexto deben considerarse como enfermedades de tipo canceroso el cáncer de cerebro, el cáncer pulmonar, el cáncer del epitelio plano, el cáncer de vejiga, el cáncer de estómago, el cáncer de páncreas, el cáncer hepático, el cáncer renal, el cáncer colorrectal, el cáncer de mama, el cáncer de cabeza, el cáncer de cuello, el cáncer de esófago, el cáncer ginecológico, el cáncer de la glándula tiroides, los linfomas, la leucemia crónica y la leucemia aguda, que son consideradas usualmente en conjunto como enfermedades hiperproliferantes. De manera especial, debe señalarse en este caso el crecimiento celular de tipo canceroso y, especialmente, el crecimiento celular de tipo canceroso inducido por la Raf-cinasa, que representa un objetivo de la presente invención. Por lo tanto, el objeto de la presente invención son los compuestos, de conformidad con la invención, como medicamentos y/o como productos activos para medicamentos para el tratamiento y/o para la profilaxis de las enfermedades citadas y el empleo de los compuestos, de conformidad con la invención, para la fabricación de un producto farmacéutico para el tratamiento y/o la profilaxis de las enfermedades citadas así como también un procedimiento para el tratamiento de las enfermedades citadas que comprende la administración de uno o de varios compuestos, de conformidad con la invención, a un paciente que necesite una administración de este tipo.

En una medida comparativa se ha encontrado, de igual modo, que los compuestos de la fórmula I son activos como inhibidores de la PKB. Esta actividad puede demostrarse, por ejemplo, por medio de un procedimiento, que ha sido descrito por los autores Alessi et al. EMBO L. 1996, 15, 6541-6551.

Puede observarse que los compuestos, de conformidad con la invención, presentan un efecto antiproliferante in vivo. Los compuestos, de conformidad con la invención, son administrados a un paciente con una enfermedad hiperproliferante, por ejemplo para la inhibición del crecimiento tumoral, para impedir la inflamación producida por una enfermedad linfoproliferante, para la inhibición del rechazo de los transplantes o el deterioro neurológico debido a la reparación tisular, etc. Los compuestos presentes son útiles para finalidades profilácticas o terapéuticas. Cuando se utilice aquí, el concepto de "tratamiento" se entenderá que se hace referencia tanto al hecho de impedir las enfermedades así como, también, al tratamiento de las dolencias preexistentes. Se consigue impedir la proliferación mediante la administración de los compuestos, de conformidad con la invención, como paso previo al desarrollo de la enfermedad evidente, por ejemplo para impedir el crecimiento tumoral, para impedir el crecimiento por metástasis, para la reducción de las restenosis generadas por la cirugía cardiovascular, etc. Como alternativa se emplearán los compuestos para el tratamiento de enfermedades persistentes mediante la estabilización o la mejora de los síntomas clínicos del paciente.

El huésped o paciente puede pertenecer a cualquier especie de mamíferos, por ejemplo a una especie de primates, especialmente los seres humanos, a los roedores, con inclusión de los ratones, las ratas y los hámsteres; los conejos; los caballos, las vacas, los perros, los gatos, etc. Son interesantes modelos con animales para las investigaciones experimentales, poniendo éstos a disposición un modelo para el tratamiento de una enfermedad de los seres
humanos.

Puede determinarse la susceptibilidad de una célula determinada frente al tratamiento con los compuestos, de conformidad con la invención, por medio de ensayos in vitro. De manera típica, se combinará un cultivo de la célula con un compuesto, de conformidad con la invención, a diversas concentraciones durante un tiempo suficiente para que se posibilite a los agentes activos inducir la muerte celular o para inhibir la migración, usualmente entre aproximadamente una hora y una semana. Para el ensayo in vitro pueden emplearse células cultivadas procedentes de una muestra tomada por biopsia. Las células supervivientes, que quedan remanentes después del tratamiento, son
computadas.

La dosis varía en función del compuesto específico empleado, de la enfermedad específica, del estado del paciente, etc. De manera típica es suficiente una dosis terapéutica para reducir considerablemente la población celular no deseada en el tejido diana, mientras que se mantiene la supervivencia del paciente. El tratamiento se proseguirá en general hasta que se presente una reducción considerable, por ejemplo al menos una reducción del 50% aproximadamente de la carga celular y puede proseguirse hasta que ya no se detecten en el cuerpo, de manera esencial, células no
deseadas.

Para la identificación de los inhibidores de las cinasas están disponibles diversos sistemas de ensayo. En el caso del ensayo de escintilación por proximidad (Sorg et al., J. of. Biomolecular Screening, 2002, 7, 11-19) y en el caso del ensayo FlashPlate se mide la fosforilación radioactiva de una proteína o péptido como substrato con \gammaATP. Cuando esté presente un compuesto inhibidor no se podrá detectar una señal radioactiva o se detectará una señal radioactiva debilitada. De igual modo, pueden utilizarse como procedimientos de ensayo las tecnologías de transferencia homogénea de energía de fluorescencia por resonancia con resolución en el tiempo (Homogeneous Time-resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer (HTR-FRET)) y tecnologías de polarización por fluorescencia (FP) (Sills et al., J. of Biomolecular Screening, 2002, 191-214).

Otros procedimientos de ensayo no radioactivos ELISA emplean fosfo-anticuerpos específicos (fosfo-AK). El fosfo-AK enlaza únicamente el substrato fosforilado. Este enlace puede detectarse con un segundo anticuerpo anti-cordero peroxidasaconjugado mediante quimioluminiscencia (Ross et al., 2002, Biochem. J., inmediatamente antes de la publicación, Manuscrito BJ20020786).

Existe un gran número de enfermedades asociadas con una desregulación de la proliferación celular y de la muerte celular (apoptosis). Las dolencias de interés abarcan las dolencias siguientes, pero sin embargo no están limitadas a las mismas. Los compuestos, de conformidad con la invención, son útiles para el tratamiento de una serie de diversas dolencias, en las que se presente la proliferación y/o la migración de células musculares lisas y/o de células de inflamación en la capa íntima de un vaso, dando por resultado un riego sanguíneo limitado de este vaso, por ejemplo en el caso de las lesiones oclusivas neointimales. A las enfermedades oclusivas de los vasos de transplantes interesantes pertenecen la aterosclerosis, la enfermedad de los vasos coronarios después de un transplante, la estenosis de transplante venoso, la estenosis de prótesis peri-anastomótica, la restenosis tras angioplastia o la aplicación de una endoprótesis vascular (stent) y similares.

Los compuestos, de conformidad con la invención, son adecuados, de igual modo, a título de aditivos para artículos comestibles, para el tratamiento de enfermedades y/o de malfunciones, que se caracterizan por condiciones de estrés oxidativo, así como a título de aditivos para artículos comestibles, además en formulaciones cosméticas a título de agentes protectores contra el sol.

Estado de la técnica

Se han descrito en la publicación WO 92/20642 compuestos de bis-mono-arilo y heteroarilo y compuestos de arilo y de heteroarilo bicíclicos, que pueden inhibir la tirosina cinasa. Los derivados de cromenona no han sido divulgados.

Se conocen derivados de cromenona como parte integrante de materiales fotográficos por la patente Nr. JP
07191431 (solicitud Nr. JP 0347126). Los compuestos presentes de la fórmula genérica I deben ser considerados como una invención de selección en lo que se refiere al estado de la técnica citado.

Se conocen heteroarilflavonoides que contienen flúor, con actividad fungicida por la publicación Indian Journal of Chemistry, Section B: Organic Chemistry Including Medicinal Chemistry (1987), 26B(5), 493-5.

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A continuación se han indicado derivados de cromenona, que han sido descritos en la literatura, pero sin embargo no lo han sido en relación con la inhibición de la tirosina cinasa:

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CAS RN 477545-79-2

la 1-[(4-oxo-4H-1-benzopiran-2-il)carbonil]-4-fenil-piperazina;

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CAS RN 476298-55-2

la 1-[(4-oxo-4H-1-benzopiran-2-il)carbonil]-3,5-dimetil-piperidina;

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CAS RN 380469-63-6

la 10-[(4-oxo-4H-1-benzopiran-2-il)carbonil]-fenotiazina;

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CAS RN 380328-67-6

el éster de etilo del ácido 1-[(4-oxo-4H-1-benzopiran-2-il)carbonil]-4-piperidincarboxílico;

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CAS RN 361166-59-8

el 1-[(4-oxo-4H-1-benzopiran-2-il)carbonil]-1H-indol;

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CAS RN 361166-57-6

la 1,2,3,4-tetrahidro-2-[(4-oxo-4H-1-benzopiran-2-il)carbonil]-isoquinolina;

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CAS RN 361166-50-9

la 1,2,3,4-tetrahidro-2-[(4-oxo-4H-1-benzopiran-2-il)carbonil]-quinolina;

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CAS RN 361166-57-6

la 4-[(6-bromo-4-oxo-4H-1-benzopiran-2-il)carbonil]-morfolina;

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CAS RN 352667-41-5

la 4-[(6-cloro-4-oxo-4H-1-benzopiran-2-il)carbonil]-morfolina;

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CAS RN 352667-39-1

la 1-[(6-bromo-4-oxo-4H-1-benzopiran-2-il)carbonil]-pirrolidina;

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CAS RN 352667-38-0

la 1-[(6-bromo-4-oxo-4H-1-benzopiran-2-il)carbonil]-piperidina;

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CAS RN 113734-98-8

el 2-[(8-bromo-6-flúor-4-oxo-4H-1-benzopiran-2-il)carbonil]-tiofeno.

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Resumen de la invención

La invención se refiere a compuestos de la fórmula I

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1

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en la que

R^{1}: significa -OH o -OA,

R^{2}: significa H, -OH, -OA, fenoxi, -O-CO-A, -OSO_{3}H, -OSO_{3}A, -OSO_{2}A o Hal,

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

Het: significa cromen-2-on-ilo, benzotiazolilo, tienilo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolilo, furilo, pirrolilo, isoxazolilo, imidazolilo, tiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, quinolilo o isoquinolilo no substituido o substituido una o dos veces por Hal y/o por A,

A: significa alquilo con 1 hasta 6 átomos de carbono, no ramificado o ramificado, pudiendo estar reemplazados de 1 hasta 5 átomos de H por F,

Hal: significa F, Cl, Br o I,

así como a sus solvatos y sus sales farmacéuticamente empleables; con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

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El objeto de la invención está constituido por los compuestos de la fórmula I y por sus sales así como por un procedimiento para la obtención de los compuestos de la fórmula I de conformidad con las reivindicaciones 27 a 29 así como de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente empleables, caracterizado porque

a): se hace reaccionar, en primer lugar, un compuesto de la fórmula II

2

\quad: en la que

\quad: R^{1}, R^{2}, R^{3} tienen el significado indicado en la reivindicación 27, con un compuesto de la fórmula III

3

\quad: en la que A significa alquilo con 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono,

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\quad: para dar un compuesto de la fórmula IV

4

\quad: en la que R^{1}, R^{2}, R^{3} tienen el significado indicado en la reivindicación 27, y A significa alquilo con 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono,

b): a continuación se hace reaccionar el éster IV con un compuesto de la fórmula V

5

\quad: en la que Het tiene el significado indicado en la reivindicación 27, y M significa sodio, potasio o litio,

\quad: para dar un compuesto de la fórmula I

\quad: y/o

c): se transforma una base o un ácido de la fórmula I en una de sus sales.

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De igual modo, el objeto de la invención está constituido por las formas ópticamente activas (estereoisómeros), por los enantiómeros, por los racematos, por los diastereómeros así como por los hidratos y los solvatos de estos compuestos. Se entenderá por solvatos de los compuestos los productos de adición de las moléculas inertes de disolventes sobre los compuestos, que se forman debido a su fuerza de atracción mutua. Los solvatos son, por ejemplo, los monohidratos o los dihidratos o los alcoholatos.

De igual modo, el objeto de la invención está constituido por mezclas de los compuestos de la fórmula I, de conformidad con la invención, por ejemplo las mezclas formadas por dos diastereómeros, por ejemplo en la proporción de 1:1, de 1:2, de 1:3, de 1:4, de 1:5, de 1:10, de 1:100 o de 1:1.000. De una manera especialmente preferente se trata en este caso de mezclas de compuestos estereoisómeros.

Se cumple para todos los restos, que se presenten varias veces, tal como por ejemplo A, que sus significados son independientes entre sí.

A significa alquilo, no está ramificado (es lineal) o está ramificado, y tiene 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono. De manera preferente A significa metilo, además etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec.-butilo o terc.-butilo, además también pentilo, 1-, 2- o 3-metilbutilo, 1,1-, 1,2- o 2,2-dimetilpropilo, 1-etilpropilo, hexilo, 1-, 2-, 3- o 4-metilpentilo, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- o 3,3-dimetilbutilo, 1- o 2-etilbutilo, 1-etil-1-metilpropilo, 1-etil-2-metilpropilo, 1,1,2- o 1,2,2-trimetilpropilo, de una manera más preferente por ejemplo triflúormetilo.

De manera muy especialmente preferente A significa alquilo con 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono, de manera preferente significa metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec.-butilo, terc.-butilo, pentilo, hexilo, triflúormetilo, pentaflúoretilo o 1,1,1-triflúoretilo.

De manera preferente A' significa alquilo con 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono, de manera preferente metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec.-butilo, terc.-butilo, pentilo, hexilo o bencilo.

OA significa alcoxi y es, de manera preferente, por ejemplo metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, triflúormetoxi o ciclopentoxi.

De manera preferente -COA (acilo) significa acetilo, propionilo, además también butirilo, pentanoilo, hexanoilo o, por ejemplo, benzoilo.

De manera preferente Hal significa F, Cl o Br, pero también I.

Ar significa, por ejemplo, fenilo, naftilo o bifenilo no substituido, de manera preferente, además, por ejemplo fenilo, naftilo o bifenilo monosubstituido, disubstituido o trisubstituido por A, por flúor, por cloro, por bromo, por yodo, por hidroxi, por metoxi, por etoxi, por propoxi, por butoxi, por pentiloxi, por hexiloxi, por nitro, por ciano, por formilo, por acetilo, por propionilo, por triflúormetilo, por amino, por metilamino, por etilamino, por dimetilamino, por dietilamino, por benciloxi, por sulfonamido, por metilsulfonamido, por etilsulfonamido, por propilsulfonamido, por butilsulfonamido, por dimetilsulfonamido, por fenilsulfonamido, por carboxi, por metoxicarbonilo, por etoxicarbonilo, por aminocarbonilo.

De manera muy especialmente preferente, Ar significa fenilo.

Het significa, independientemente de los posibles substituyentes, por ejemplo, 2- o 3-furilo, 2- o 3-tienilo, 1-, 2- o 3-pirrolilo, 1-, 2,4- o 5-imidazolilo, 1-, 3-, 4- o 5-pirazolilo, 2-, 4- o 5-oxazolilo, 3-, 4- o 5-isoxazolilo, 2-, 4- o 5-tiazolilo, 3-, 4- o 5-isotiazolilo, 2-, 3- o 4-piridilo, 2-, 4-, 5- o 6-pirimidinilo, son preferentes además 1,2,3-triazol-1-, -4- o -5-ilo, 1,2,4-triazol-1-, -3- o 5-ilo, 1- o 5-tetrazolilo, 1,2,3-oxadiazol-4- o -5-ilo, 1,2,4-oxadiazol-3- o - 5-ilo, 1,3,4-tiadiazol-2- o -5-ilo, 1,2,4-tiadiazol-3- o -5-ilo, 1,2,3-tiadiazol-4- o -5-ilo, 3- o 4-piridazinilo, pirazinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- o 7-indolilo, 4- o 5-isoindolilo, 1-, 2-, 4- o 5-bencimidazolilo, 1-, 3-, 4-, 5-, 6- o 7-benzopirazolilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-benzoxazolilo, 3-, 4-, 5-, 6- o 7- bencisoxazolilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-benzotiazolilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-bencisotiazolilo, 4-, 5-, 6- o 7-benz-2,1,3-oxadiazolilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-quinolilo, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-isoquinolilo, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-quinolinilo, 2-, 4-, 5-, 6-, 7- o 8-quinazolinilo, 5- o 6-quinoxalinilo, 2-, 3-, 5-, 6-, 7- u 8-2H-benzo[1,4]oxazinilo, otros preferentes son el 1,3-benzodioxol-5-ilo, el 1,4-benzodioxan-6-ilo, el 2,1,3-benzotiadiazol-4- o -5-ilo o el 2,1,3-benzoxadiazol-5-ilo o el cromenilo.

Los restos heterocíclicos pueden estar, también, parcial o completamente hidrogenados.

Así pues, Het puede significar también, por ejemplo, 2,3-dihidro-2-, -3-, -4- o -5-furilo, 2,5-dihidro-2-, -3-, -4- o 5-furilo, tetrahidro-2- o -3-furilo, 1,3-dioxolan-4-ilo, tetrahidro-2- o -3-tienilo, 2,3-dihidro-1-, -2-, -3-, -4- o -5-pirrolilo, 2,5-dihidro-1-, -2-, -3-, -4- o -5-pirrolilo, 1-, 2- o 3-pirrolidinilo, tetrahidro-1-, -2- o -4-imidazolilo, 2,3-dihidro-1-, -2-, -3-, -4- o -5-pirazolilo, tetrahidro-1-, -3- o -4-pirazolilo, 1,4-dihidro-1-, -2-, -3- o -4-piridilo, 1,2,3,4-tetrahidro-1-, -2-, -3-, -4-, -5- o -6-piridilo, 1-, 2-, 3- o 4-piperidinilo, 2-, 3- o 4-morfolinilo, tetrahidro-2-, -3- o - 4-piranilo, 1,4-dioxanilo, 1,3-dioxan-2-, -4- o -5-ilo, hexahidro-1-, -3- o -4-piridazinilo, hexahidro-1-, -2-, -4- o -5-pirimidinilo, 1-, 2- o 3-piperazinilo, 1,2,3,4-tetrahidro-1-, -2-, -3-, -4-, -5-, -6-, -7- u -8-quinolilo, 1,2,3,4-tetrahidro-1-, -2-, -3-, -4-, -5-, -6-, -7- u -8-isoquinolilo, 2-, 3-, 5-, 6-, 7- u 8- 3,4-dihidro-2H-benzo[1,4]oxazinilo, otros preferentes son el 2,3-metilendioxifenilo, el 3,4-metilendioxifenilo, el 2,3-etilendioxifenilo, el 3,4-etilendioxifenilo, el 3,4-(diflúormetilendioxi)fenilo, el 2,3-dihidrobenzofuran-5- o 6-ilo, el 2,3-(2-oxo-metilendioxi)-fenilo o también el 3,4-dihidro-2H-1,5-benzodioxepin-6- o -7-ilo, además son preferentes el 2,3-dihidrobenzofuranilo o el 2,3-dihidro-2-oxo-furanilo.

De manera especialmente preferente, Het significa cromen-2-on-ilo, benzotiazolilo, tienilo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolilo, furilo, pirrolilo, isoxazolilo, imidazolilo, tiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, quinolilo o isoquinolilo no substituido o substituido una o dos veces por Hal y/o por A.

De manera preferente, R^{1} significa -OH, -OA, fenoxi, -O-CO-A, -OSO_{3}H, -OSO_{3}A o -OSO_{2}A, de manera muy especialmente preferente significa -OH o -OA.

De manera preferente R^{2} significa H, -OH, -OA, fenoxi, -O-CO-A, -OSO_{3}H, -OSO_{3}A, -OSO_{2}A o Hal.

De manera preferente R^{3} significa H.

De manera preferente, R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también metilendioxi.

Los compuestos de la fórmula I pueden presentarse en diversas formas estereoisómeras. La fórmula I abarca todas estas formas.

Por lo tanto, constituyen el objeto de la invención especialmente aquellos compuestos de la fórmula I, en los cuales al menos uno de los restos citados tenga uno de los significados preferentes indicados más arriba. Un grupo preferente de compuestos puede expresarse por medio de la fórmula parcial Ia siguiente, que corresponde a la fórmula I y en la que los restos que no han sido designados con mayor detalle tienen el significado que ha sido indicado en el caso de la fórmula I, en las que, sin embargo

en Ia

R^{1}: significa -OH o -OA,

R^{2}: significa H, -OH, -OA o Hal,

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

Het: significa benzotiazolilo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolilo, furilo, pirrolilo, isoxazolilo, imidazolilo o tiazolilo no substituido o substituido una o dos veces por Hal y/o por A,

A: alquilo con 1 hasta 6 átomos de carbono, no ramificado o ramificado, pudiendo estar reemplazados de 1 a 5 átomos de H por F,

así como sus solvatos y sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

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El objeto de la invención está constituido, de manera especial, por los compuestos siguientes de la fórmula I

la 6-hidroxi-2-(1-methyl-1H-imidazol-2-carbonil)-cromen-4ona,

la 5,7-dihidroxi-2-(1-methyl-1H-imidazol-2-carbonil)-cromen-4ona,

la 7-hidroxi-2-(1-methyl-1H-imidazol-2-carbonil)-cromen-4ona,

la 6-(1-Methyl-1H-imidazol-2-carbonil)-[1,3]dioxolo[4,5g]cromen-8-ona,

la 5,7-dihidroxi-2-(piridin-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 6-hidroxi-2-(piridin-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 6-hidroxi-2-(3,5-dicloropirazin-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 6-hidroxi-2-(benzotiazolil-2-carbonil)-cromen-4-ona,

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Los compuestos de la fórmula I y también los productos de partida para su obtención se preparan por lo demás según métodos en sí conocidos, como los que han sido descritos en la literatura (por ejemplo en los manuales tales como en Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart) y, concretamente, bajo condiciones de la reacción que sean conocidas y adecuadas para las reacciones citadas. En este caso pueden emplearse también variantes en sí conocidas, que no han sido descritas aquí con mayor detalle.

Los productos de partida pueden formarse, en caso deseado, también in situ, de tal manera que no se aíslan de la mezcla de la reacción sino que se hacen reaccionar inmediatamente a continuación para dar los compuestos de la fórmula I.

Los compuestos de partida de las fórmulas II y III son conocidos por regla general. Sin embargo, cuando sean nuevos, podrán prepararse según métodos en sí conocidos.

Los compuestos de la fórmula I pueden obtenerse, de manera preferente, por reacción de los compuestos de la fórmula II con los compuestos de la fórmula III en primer lugar para dar los compuestos de la fórmula IV.

La reacción se lleva a cabo según métodos, que son conocidos por el técnico en la materia. En primer lugar, se lleva a cabo la reacción en un alcohol adecuado en presencia de un alcoholato alcalino o de un alcoholato alcalinotérreo, por ejemplo en etanol/etanolato de sodio o en metanol/metanolato de potasio.

Básicamente pueden emplearse también los disolventes inertes siguientes.

Como disolventes inertes son adecuados, por ejemplo, los hidrocarburos tales como el hexano, el éter de petróleo, el benceno, el tolueno o el xileno; los hidrocarburos clorados tales como el tricloroetileno, el 1,2-dicloroetano, el tetracloruro de carbono, el cloroformo o el diclorometano; los alcoholes tales como el metanol, el etanol, el isopropanol, el n-propanol, el n-butanol o el terc.-butanol; los éteres tales como el dietiléter, el diisopropiléter, el tetrahidrofurano (THF) o el dioxano; los glicoléteres tales como el etilenglicolmonometiléter o el etilenglicolmonoetiléter (metilglicol o etilglicol), el etilenglicoldimetiléter (diglimo); las cetonas, tales como la acetona o la butanona; las amidas tales como la acetamida, la dimetilacetamida o la dimetilformamida (DMF); los nitrilos tal como el acetonitrilo; los sulfóxidos, tal como el dimetilsulfóxido (DMSO); el sulfuro de carbono; los ácidos carboxílicos tales como el ácido fórmico o el ácido acético; los nitrocompuestos tales como el nitrometano o el nitrobenceno; los ésteres tal como el acetato de etilo o las mezclas de los disolventes citados.

El tiempo necesario para la reacción se encuentra, según las condiciones indicadas, entre algunos minutos y 14 días, la temperatura de la reacción se encuentra entre aproximadamente -30º y 140º, normalmente está comprendida entre -10º y 90º, de manera especial está comprendida entre aproximadamente 0º y aproximadamente 70º.

La ciclación para dar el compuesto de la fórmula IV se lleva a cabo mediante catálisis ácida, por medio del adición de ácidos minerales adecuados, tales como por ejemplo el ácido clorhídrico, el ácido fosfórico o el ácido sulfúrico.

El tiempo necesario para la reacción y la temperatura Son, de manera preferente, como se ha indicado precedentemente.

Los ésteres de la fórmula IV se hacen reaccionar con los compuestos de la fórmula V, según métodos normalizados, en un disolvente inerte para dar los compuestos de la fórmula I.

A título de compuesto de la fórmula V se empleará, de manera preferente, el Li-Het. El disolvente inerte, el tiempo necesario para la reacción y la temperatura son, de manera preferente, como se han indicado precedentemente, de manera especialmente preferente la conversión se lleva a cabo en THF a -80 hasta -75ºC.

Una base de la fórmula I puede transformarse con un ácido en la sal de adición con ácido correspondiente, por ejemplo mediante la reacción de cantidades equivalentes de la base y del ácido en un disolvente inerte tal como el etanol y, a continuación, concentración por evaporación. Para esta reacción entran en consideración, de manera especial, los ácidos, que proporcionan sales fisiológicamente aceptables. De este modo, pueden emplearse ácidos inorgánicos, por ejemplo el ácido sulfúrico, el ácido nítrico, los ácidos hidrácidos halogenados tales como el ácido clorhídrico o el ácido bromhídrico, los ácidos fosfóricos tal como el ácido ortofosfórico, el ácido sulfamínico, además los ácidos orgánicos, especialmente los ácidos carboxílicos, sulfónicos o sulfúricos alifáticos, alicíclicos, aralifáticos, aromáticos o heterocíclicos, monobásicos o polibásicos, por ejemplo el ácido fórmico, el ácido acético, el ácido propiónico, el ácido piválico, el ácido dietilacético, el ácido malónico, el ácido succínico, el ácido pimélico, el ácido fumárico, el ácido maleico, el ácido láctico, el ácido tartárico, el ácido málico, el ácido cítrico, el ácido glucónico, el ácido ascórbico, el ácido nicotínico, el ácido isonicotínico, el ácido metanosulfónico o el ácido etanosulfónico, el ácido etanodisulfónico, el ácido 2-hidroxietanosulfónico, el ácido bencenosulfónico, el ácido p-toluenosulfónico, los ácidos naftalin-monosulfónicos y los ácidos naftalin-disulfónicos, el ácido laurilsulfónico. Pueden emplearse sales con ácidos que no sean fisiológicamente aceptables, por ejemplo los picratos, para el aislamiento y/o para la purificación de los compuestos de la fórmula I.

Por otro lado, los compuestos de la fórmula I pueden transformarse con bases (por ejemplo con hidróxido o con carbonato de sodio o de potasio) en las correspondientes sales metálicas, de manera especial de metales alcalinos o de metales alcalinotérreos o en las correspondientes sales de amonio. De igual modo pueden emplearse las bases fisiológicamente aceptables, tal como por ejemplo la etanolamina.

Los compuestos de la fórmula I, de conformidad con la invención, pueden ser quirales como consecuencia de su estructura molecular y pueden presentarse, por lo tanto, en diversas formas enantiómeras. Éstos pueden presentarse, por lo tanto, en forma racémica o en forma ópticamente activa.

Puesto que puede ser diferente la actividad farmacéutica de los racematos o bien de los estereoisómeros de los compuestos de conformidad con la invención, puede ser deseable emplear los enantiómeros. En estos casos pueden separarse el producto final o también ya los productos intermedios en compuestos enantiómeros, con ayuda de las medidas químicas o físicas conocidas por el técnico en la materia, o pueden emplearse ya como tales en la síntesis.

En el caso de las aminas racémicas se formarán a partir de la mezcla los diastereómeros mediante reacción con un agente de separación ópticamente activo. Como agentes de separación son adecuados, por ejemplo, los ácidos ópticamente activos, tales como las formas R y las formas S del ácido tartárico, del ácido diacetiltartárico, del ácido dibenzoiltartárico, del ácido mandélico, del ácido málico, del ácido láctico, de los aminoácidos adecuadamente N-protegidos (por ejemplo la N-benzoilprolina o la N-bencenosulfonilprolina) o los diversos ácidos canfosulfónicos ópticamente activos. De igual modo es ventajosa, también, una separación de los enantiómeros por cromatografía con ayuda de un agente de separación ópticamente activo (por ejemplo la dinitrobenzoilfenilglicina, el triacetato de celulosa u otros derivados de hidratos de carbono o polímeros de metacrilato derivatizados de forma quiral fijados sobre gel de sílice). Como eluyentes son adecuados, con esta finalidad, las mezclas acuosas o alcohólicas de disolventes tales como por ejemplo de hexano/isopropanol/acetonitrilo por ejemplo en la proporción de 82:15:3.

De igual modo, constituye el objeto de la invención el empleo de los compuestos de la fórmula I y/o de sus sales fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento (preparación farmacéutica), de manera especial por vía no química. En este caso pueden llevarse a una forma de dosificación adecuada junto con, al menos, un excipiente o producto auxiliar sólido, líquido y/o semilíquido y, en caso dado, en combinación con uno o varios productos activos de otro tipo.

De igual modo, constituyen el objeto de la invención los medicamentos, que contengan al menos un compuesto de la fórmula I y/o sus solvatos y sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, así como, en caso dado, excipientes y/o productos auxiliares.

Estas preparaciones pueden emplearse como medicamentos en la medicina humana o en la medicina veterinaria. Como excipientes entran en consideración substancias orgánicas o inorgánicas, que sean adecuadas para la aplicación enteral (por ejemplo oral), parenteral o tópica y que no reaccionen con los nuevos compuestos, por ejemplo el agua, los aceites vegetales, los alcoholes bencílicos, los alquilenglicoles, los polietilenglicoles, el triacetato de glicerina, las gelatinas, los hidratos de carbono tales como la lactosa o los almidones, el estearato de magnesio, el talco, la vaselina. Para la aplicación oral sirven, de manera especial, las tabletas, las píldoras, las grageas, las cápsulas, los polvos, los granulados, los jarabes, los jugos o las gotas, para la aplicación rectal sirven los supositorios, para la aplicación parenteral sirven las soluciones, de manera preferente las soluciones oleaginosas o acuosas, además las suspensiones, las emulsiones o los implantes, para el empleo tópico sirven los ungüentos, las cremas o los polvos o incluso en forma de aerosol nasal. De igual modo, los nuevos compuestos pueden liofilizarse y los liofilizados obtenidos pueden emplearse, por ejemplo, para la fabricación de preparados inyectables. Las preparaciones indicadas pueden ser esterilizadas y/o pueden contener productos auxiliares tales como agentes lubrificantes, agentes para la conservación, agentes estabilizantes y/o agentes humectantes, emulsionantes, sales para influenciar la presión osmótica, substancias tampón, colorantes, productos para mejorar el sabor y/o varios productos activos de otro tipo, por ejemplo una o varias vitaminas.

El objeto de la invención está constituido, de igual modo, por medicamentos que contengan, al menos, un compuesto de la fórmula I y/o sus solvatos y sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, y, al menos, otro producto activo para medicamentos.

El objeto de la invención está constituido también por un estuche (kit), constituido por envases separados de

(a): una cantidad activa de un compuesto de la fórmula I y/o de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, y

(b): una cantidad activa de otro producto activo para medicamentos.

El estuche contiene recipientes adecuados, tales como cajitas o cajas de cartón, botellas, bolsas o ampollas individuales. El estuche puede contener, por ejemplo, ampollas separadas en las cuales esté presente respectivamente una cantidad activa de un compuesto de la fórmula I y/o de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente aceptables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones,

y una cantidad activa de otro producto activo para medicamentos disuelto o en forma liofilizada.

Empleo Particularidades

I.

De igual modo, el objeto de la invención está constituido por el empleo de los compuestos de la fórmula I siguiente según la reivindicación 1

6

en la que

R^{1}: significa H, -OH, -OA, fenoxi, Ar, -O-CO-A, SO_{3}H, SO_{3}A, -OSO_{3}H, -OSO_{3}A, -OSO_{2}A, SO_{2}A, Hal, COOH, COOA, CONH_{2}, NHSO_{2}A, COA, CHO o SO_{2}NH_{2},

R^{2}: significa H, -OH, -OA, fenoxi, Ar, -O-CO-A, SO_{3}H, SO_{3}A, -OSO_{3}H, -OSO_{3}A, -OSO_{2}A, SO_{2}A, Hal, COOH, COOA, CONH_{2}, NHSO_{2}A, COA, CHO o SO_{2}NH_{2},

R^{3}: significa H, -OH, -OA, fenoxi, Ar, -O-CO-A, SO_{3}H, SO_{3}A, -OSO_{3}H, -OSO_{3}A, -OSO_{2}A, SO_{2}A, Hal, COOH, COOA, CONH_{2}, NHSO_{2}A, COA, CHO o SO_{2}NH_{2},

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

Het: significa heterociclo con 1 hasta 4 átomos de N, de O y/o de S, con un núcleo o con dos núcleos, saturado, no saturado o aromático, que puede estar no substituido o substituido una, dos o tres veces por oxígeno de tipo carbonilo, por =S, por =NH, por Hal, por A, por -(CH_{2})_{o}-Ar, por -(CH_{2})_{o}-cicloalquilo, por -(CH_{2})_{o}-OH, por -(CH_{2})_{o}-NH_{2}, por NO_{2}, por CN, por -(CH_{2})_{o}-COOH, por -(CH_{2})_{o}-COOA, por -(CH_{2})_{o}-CONH_{2}, por -(CH_{2})_{o}-NHCOA, por NHCONH_{2}, por -(CH_{2})_{o}-NHSO_{2}A, por CHO, por COA', por SO_{2}NH_{2} y/o por S(O)_{o}A,

Ar: significa fenilo, naftilo o bifenilo no substituido o substituido una, dos o tres veces por Hal, por A, por OH, por OA, por NH_{2}, por NO_{2}, por CN, por COOH, por COOA, por CONH_{2}, por NHCOA, por NHCONH_{2}, por NHSO_{2}A, por CHO, por COA, por SO_{2}NH_{2} o por S(O)_{o}A,

A: significa alquilo con 1 hasta 10 átomos de carbono no ramificado o ramificado, pudiendo estar reemplazados de 1 hasta 7 átomos de H por F,

A': significa alquilo con 1 hasta 6 átomos de carbono o bencilo,

Hal: significa F, Cl, Br o I,

o: significa 0, 1 o 2,

así como de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades, en las cuales juegue un papel la inhibición, la regulación y/o la modulación de la transducción de señal de cinasas.

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En este caso, las tirosina cinasas y/o las Raf-cinasas son preferentes.

El objeto de la invención está constituido, además, por el empleo de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1 o 2, así como de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades, que estén influenciadas por la inhibición de la tirosina cinasa por medio de los compuestos de la fórmula I.

El objeto de la invención está constituido, además, por el empleo de conformidad con la reivindicación 1 o 2 de los compuestos de la fórmula I, de conformidad con la reivindicación 1, así como de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades, que son provocadas, transmitidas y/o propagadas por medio de las Rac-cinasas, eligiéndose la Raf-cinasa entre el grupo constituido por la A-Raf, por la B-Raf y por la Raf-1.

Los significados y las realizaciones preferentes corresponden, en general, a las que se han indicado en el Resumen de la invención.

Por lo tanto, constituyen el objeto de la invención especialmente los empleos de conformidad con una o varias de las reivindicaciones 1 a 26 de aquellos compuestos de la fórmula I, en los cuales al menos uno de los restos citados tenga uno de los significados preferentes indicados más arriba. Algunos empleos preferentes de grupos de los compuestos pueden expresarse por medio de las fórmulas parciales Ia hasta Ig siguientes, que corresponden a la fórmula I y en las que los restos que no han sido designados con mayor detalle tienen el significado que ha sido indicado en el caso de la fórmula I, en las que, sin embargo

en Ia

R^{1}: significa H, -OH, -OA, fenoxi, -O-CO-A, -OSO_{3}H, -OSO_{3}A, -OSO_{2}A o Hal;

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en Ib

R^{1}: significa H, -OH, -OA, fenoxi, -O-CO-A, -OSO_{3}H, -OSO_{3}A, -OSO_{2}A o Hal,

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi;

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en Ic

R^{1}: significa -OH, -OA, fenoxi, -O-CO-A, -OSO_{3}H, -OSO_{3}A, -OSO_{2}A o Hal,

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

Het: significa un heterociclo con 1 hasta 4 átomos de N, de O y/o de S, con un núcleo o con dos núcleos, saturado, no saturado o aromático, que puede estar no substituido o substituido una, dos o tres veces por Hal y/o por A;

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en Id

R^{1}: significa -OH, -OA, fenoxi, -O-CO-A, -OSO_{3}H, -OSO_{3}A o -OSO_{2}A,

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

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en Ie

R^{2}: significa H, -OH, -OA, fenoxi, -O-CO-A,

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

Het: significa un heterociclo con 1 hasta 3 átomos de N, de O y/o de S, con un núcleo o con dos núcleos, aromático, que puede estar no substituido o substituido una, dos o tres veces por Hal y/o por A;

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en If

R^{1}: significa -OH o -OA,

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

Het: significa un heterociclo con 1 hasta 4 átomos de N, de O y/o de S, con un núcleo o con dos núcleos, aromático, que puede estar no substituido o substituido una, dos o tres veces por Hal y/o por A;

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en Ig

R^{1}: significa -OH o -OA,

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

así como de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones.

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Los compuestos presentes son adecuados como productos activos farmacéuticos para mamíferos, especialmente para los seres humanos, en el tratamiento de enfermedades condicionadas por la tirosina cinasa. A éstas enfermedades pertenecen la proliferación de las células tumorales, la neoplasia patológica de los vasos (o angiogénesis), que favorece el crecimiento de los tumores sólidos, la neoplasia de los vasos en el ojo (retinopatía diabética, degeneración de la mácula condicionada por la edad y similares) así como las inflamaciones (la psoriasis, la artritis reumatoide y similares).

La presente invención abarca el empleo de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1 y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento destinado al tratamiento o a la profilaxis del cáncer. Los carcinomas preferentes para el tratamiento proceden del grupo constituido por el carcinoma cerebral, el carcinoma del tracto urogenital, el carcinoma del sistema linfático, el carcinoma de estómago, el carcinoma de laringe y el carcinoma pulmonar. Otro grupo de formas de cáncer preferentes son la leucemia monocítica, el adenocarcinoma pulmonar, el carcinoma pulmonar microcelular, el cáncer de páncreas, el glioblastoma y el carcinoma de mama. De igual modo queda abarcado el empleo de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1 y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento destinado al tratamiento o a la profilaxis de una enfermedad, en la que participe la angiogénesis.

Una enfermedad de este tipo, en la que participa la angiogénesis, es una enfermedad ocular, tal como la vascularización de la retina, la retinopatía diabética, la degeneración de la mácula condicionada por la edad y similares.

De igual modo. queda abarcado por el ámbito de la presente invención el empleo de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1 y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento destinado al tratamiento o a la profilaxis de enfermedades inflamatorias. A tales enfermedades inflamatorias pertenecen, por ejemplo, la artritis reumatoide, la psoriasis, la dermatitis por contacto, el tipo tardío de la reacción de hipersensibilidad y similares.

De igual modo, queda abarcado el empleo de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1 y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento destinado al tratamiento y a la profilaxis de una enfermedad condicionada por la tirosina cinasa o bien de una dolencia condicionada por la tirosina cinasa en un animal mamífero, administrándose según este procedimiento a un animal mamífero enfermo, que requiera un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto de la fórmula I. La cantidad terapéutica depende de la enfermedad correspondiente y puede determinarse sin gran dificultad por el técnico en la materia.

De igual modo, la presente invención abarca el empleo de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1 y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento destinado al tratamiento o a la profilaxis de la vascularización de la retina.

De igual modo, constituyen una parte integrante de la invención los procedimientos para el tratamiento o para la profilaxis de las enfermedades oculares tal como la retinopatía diabética y la degeneración de la mácula condicionada por la edad. De igual modo, queda abarcado por el ámbito de la presente invención el empleo para el tratamiento o para la profilaxis de las enfermedades inflamatorias tales como la artritis reumatoide, la psoriasis, la dermatitis por contacto y los tipos tardíos de la reacción de hipersensibilidad, así como el tratamiento o la profilaxis de las patologías óseas del grupo constituido por el osteosarcoma, la osteoartritis y la raquitis.

El concepto de "enfermedad o dolencia condicionada por la tirosina cinasa" se refiere a los estados patológicos, que son dependientes de la actividad de una o de varias tirosina cinasas. Las tirosina cinasas participan bien directamente o bien indirectamente en las vías de transducción de las señales de diversas actividades celulares, entre las que se encuentra la proliferación, la adhesión y la migración así como la diferenciación. A las enfermedades, que están asociadas con la actividad de las tirosina cinasas, pertenecen la proliferación de las células tumorales, la neoplasia patológica de los vasos, que favorecen el crecimiento de los tumores sólidos, la neoplasia de los vasos en el ojo (la retinopatía diabética, la degeneración de la mácula condicionada por la edad y similares) así como las inflamaciones (la psoriasis, la artritis reumatoide y similares).

Los compuestos de la fórmula I, de conformidad con la invención, según la reivindicación 1, pueden administrarse a pacientes para el tratamiento del cáncer. Los compuestos presentes inhiben la angiogénesis tumoral e influencian así el crecimiento de los tumores (J. Rak et al. Cancer Research, 55:4575-4580, 1995). Las propiedades inhibidoras de la angiogénesis de los presentes compuestos de la fórmula I, según la reivindicación 1, son adecuadas también para el tratamiento de determinadas formas de ceguera, que están relacionadas con la neoplasia de los vasos de la retina.

Los compuestos de la fórmula I, según la reivindicación 1, son adecuados también para el tratamiento de determinadas patologías óseas tales como el osteosarcoma, la osteoartritis y la raquitis, que se conoce también bajo la denominación de osteomalacia oncógena (Hasegawa et al., Skeletal Radiol. 28, páginas 41-45, 1999; Gerber et al., Nature Medicine, tomo 5, Nr. 6, páginas 623-628, Junio 1999). Puesto que el VEGF favorece directamente la resorción ósea osteoclástica mediante el KDR/Flk-1 expresado en los osteoclastos maduros (FEBS Let. 473:161-164 (2000); Endocrinology, 141:1667 (2000)), los presentes compuestos son adecuados también para el tratamiento y para la profilaxis de dolencias que estén relacionadas con la resorción ósea, tales como la osteoporosis y el Morbus Paget.

Los compuestos pueden emplearse también, puesto que reducen los edemas cerebrales, las lesiones tisulares y las lesiones por reperfusión condicionadas por la isquemia, para reducir o para evitar las lesiones tisulares, que se presentan tras los episodios de isquemia cerebrales tales como la apoplejía (Drug News Perspect 11:265-270 (1998); J. Clin. Invest. 104:1613-1620 (1999)).

Los compuestos de la fórmula I, según la reivindicación 1, son adecuados para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades, que estén provocadas, transmitidas y/o propagadas por medio de las Raf-cinasas, elegidas entre el grupo constituido por la A-Raf, por la B-Raf y por la Raf-1.

Es preferente el empleo para el tratamiento de enfermedades, preferentemente del grupo de las enfermedades hiperproliferantes y no hiperproliferantes.

En este caso, se trata de enfermedades cancerosas o de enfermedades de tipo no canceroso.

Las enfermedades de tipo no canceroso se eligen entre el grupo constituido por la psoriasis, la artritis, las inflamaciones, la endometriosis, la cicatrización, la hiperplasia prostática benigna, las enfermedades inmunitarias, las enfermedades autoinmunitarias y las enfermedades de inmunodeficiencia.

Las enfermedades de tipo canceroso se eligen entre el grupo constituido por el cáncer cerebral, el cáncer pulmonar, el cáncer del epitelio plano, el cáncer de vejiga, el cáncer de estómago, el cáncer de páncreas, el cáncer hepático, el cáncer renal, el cáncer colorrectal, el cáncer de mama, el cáncer de cabeza, el cáncer de cuello, el cáncer de esófago, el cáncer ginecológico, el cáncer de la glándula tiroides, el linfoma, la leucemia crónica y la leucemia aguda.

Los compuestos, de conformidad con la invención, pueden administrarse a los animales mamíferos, de manera preferente a los seres humanos, bien solos o, de manera preferente, en combinación con excipientes o con extendedores farmacéuticamente aceptables, en caso dado con productos auxiliares conocidos tales como alumbre, en una composición farmacéutica tal como es usual en la práctica farmacéutica. Los compuestos pueden administrarse de manera oral o parenteral, entre ellas por la vía de administración intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutánea, rectal y tópica.

En el caso de la administración oral de un compuesto quimioterapéutico, de conformidad con la invenció, podrá administrarse el compuesto elegido, por ejemplo, en forma de tabletas o de cápsulas o como solución o suspensión acuosa. En el caso de las tabletas orales pertenecen a los excipientes a ser empleados de manera usual, la lactosa y el almidón de maíz, y de manera usual se añadirán agentes lubrificantes tal como el estearato de magnesio. En el caso de la administración oral en forma de cápsulas pertenecen a los extendedores adecuados la lactosa y el almidón de maíz desecado. Cuando se requieran suspensiones acuosas para la administración oral, se combinará el producto activo con emulsionantes y con agentes de suspensión. En caso deseado podrán añadirse determinados edulcorantes y/o aromatizantes. Para el empleo intramuscular, intraperitoneal, subcutáneo e intravenoso se prepararán, de manera usual, soluciones estériles del producto activo, y el valor del pH de las soluciones debería ser ajustado y tamponado de manera usual. En el caso de la aplicación intravenosa debería ajustarse la concentración total de las substancias disueltas de tal manera que el preparado sea isotónico. La dosis exacta para el paciente correspondiente depende, sin embargo, de una serie de factores, por ejemplo de la actividad de los compuestos empleados en cada caso, de la edad, del peso corporal, del estado general de salud, del sexo, de la alimentación, del momento y de la vía de administración, de la velocidad de liberación, del tipo de administración, de la forma medicamentosa a ser administrada, de la combinación de medicamentos y de la gravedad de la enfermedad, contra la cual debe aplicarse la terapia. La dosis terapéuticamente activa correspondiente para el paciente respectivo puede determinarse fácilmente por medio de ensayos de rutina, por ejemplo por parte del médico, que aconseja o bien que acompaña este tratamiento terapéutico.

Las substancias, de conformidad con la invención, se administrarán, por regla general, de manera preferente en dosis comprendidas entre aproximadamente 1 y 500 mg, de manera especial comprendidas entre 5 y 100 mg por unidad de dosificación. La dosis diaria se encuentra comprendida, de manera preferente, entre aproximadamente 0,02 y 10 mg/kg de peso corporal.

Los compuestos, de conformidad con la invención, pueden administrarse también junto con otros terapéuticos perfectamente conocidos, que se elegirán en base a su correspondiente adecuación para las dolencias tratadas. De este modo serían convenientes, por ejemplo, en el caso de las dolencias óseas, las combinaciones que contengan biofosfonatos de acción antirresorción tales como el alendronato y el risedronato, los bloqueadores de la integrina (tales como los que se definen más adelante), tales como los antagonistas \alphav\beta3, los estrógenos conjugados empleados en la terapia hormonal tales como Prempro®, Premarin® y Endometrion®; los moduladores selectivos del receptor de los estrógenos (SERMs) tales como el raloxifeno, el droloxifeno, el CP-336, 156 (Pfizer) y el lasofoxifeno, los inhibidores de la catepsina-K y los inhibidores del bombeo de protones ATP.

Los compuestos presentes son adecuados, de igual modo, para la combinación con agentes anticancerosos conocidos. A estos agentes anticancerosos conocidos pertenecen los siguientes: los moduladores del receptor de los estrógenos, los moduladores del receptor de los andrógenos, los moduladores del receptor de los retinoides, los citotóxicos, los agentes antiproliferantes, los inhibidores de la prenil proteína transferasa, los inhibidores de la HMG-CoA-reductasa, los inhibidores de la HIV-proteasa, los inhibidores de la transcriptasa inversa así como otros inhibidores de la angiogénesis. Los compuestos presentes son adecuados de manera especial para el empleo conjunto con radioterapia. Los efectos sinérgicos de la inhibición del VEGF en combinación con radioterapia han sido descritos en el ámbito profesional (véase la publicación WO 00/61186).

El concepto de "moduladores del receptor de los estrógenos" se refiere a aquellos compuestos que perturben o inhiban el enlace de los estrógenos sobre el receptor y, concretamente, independientemente del modo en que esto se produzca. A los moduladores del receptor de los estrógenos pertenecen, por ejemplo, el tamoxifeno, el raloxifeno, el idoxifeno, el LY353381, el LY 117081, el toremifeno, el fulvestranto, el propanoato de 4-[7-(2,2-dimetil-1-oxopropoxi-4-metil-2-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]-2H-1-benzopiran-3-il]fenil-2,2-dimetilo, la 4,4'-dihidroxibenzofenon-2,4-dinitrofenilhidrazona y el SH646, lo cual no representa ningún tipo de limitación.

El concepto de "moduladores del receptor de los andrógenos" se refiere a aquellos compuestos que perturben o que inhiban el enlace de los andrógenos sobre el receptor y, concretamente, independientemente del modo en que esto se produzca. A los moduladores del receptor de los andrógenos pertenecen, por ejemplo, el finasterido y otros inhibidores de la 5\alpha-reductasa, la nilutamida, la flutamida, la bicalutamida, el liarozol y el acetato de abiraterona.

El concepto de "moduladores del receptor de los retinoides" se refiere a aquellos compuestos que perturben o inhiban el enlace de los retinoides sobre el receptor y, concretamente, independientemente del modo en que esto suceda. A tales moduladores del receptor de los retinoides pertenecen, por ejemplo, el bexaroteno, la tretinoina, el ácido 13-cis-retínico, el ácido 9-cis-retínico, la \alpha-diflúormetilornitina, el ILX23-7553, la trans-N-(4'-hidroxofenil)retinamida y la N-4-carboxifenilretinamida.

El concepto de "citotóxicos" se refiere a aquellos compuestos que conducen, en primer lugar, mediante acción directa sobre la función celular a la muerte celular o que inhiben o que perturban la miosis celular, entre los cuales se encuentran los agentes de alquilación, los factores de la necrosis tumoral, los agentes intercalantes, los inhibidores de la microtubulina y los inhibidores de la topoisomerasa. A los citotóxicos pertenecen, por ejemplo, la tirapazimina, el sertenef, la cachectina, la ifosfamida, la tasonermina, la lonidamina, el carboplatino, la altretamina, la prednimustina, la dibromdulcita, la ranimustina, la fotemustina, el nedaplatino, el oxaliplatino, la temozolomida, el heptaplatino, la estramustina, el tosilato de improsulfano, la trofosfamida, la nimustina, el cloruro de dibrospidium, el pumitepa, el lobaplatino, el satraplatino, la profiromicina, el cisplatino, el irofulveno, la dexifosfamida, el cis-aminodicloro(2-metilpiridin)platino, la bencilguanina, la glufosfamida, el GPX100, el tetracloruro de (trans,trans,trans)-bis-mu-(hexan-1,6-diamina)-mu-[diamina-platino(II)]bis-[diamina(cloro)platino(II)], la diarizidinilspermina, el trióxido de arsenio, la 1-(11-dodecilamino-10-hidroxiundecil)-3,7-dimetilxantina, la zorubicina, la idarubicina, la daunorubicina, el bisantreno, la mitoxantrona, la pirarubicina, el pinafido, la valrubicina, la amrubicina, el antineoplaston, la 3'-desamino-3'-morfolino-13-desoxo-10-hidroxicarminomicina, la annamicina, la galarubicina, el elinafido, el MEN10755 y la 4-desmetoxi-3-desamino-3-aziridinil-4-metilsulfonildaunorubicina (véase la publicación WO 00/50032), lo cual no representan ningún tipo de limitación.

A los inhibidores de la microtubulina pertenecen, por ejemplo, el paclitaxel, el sulfato de vindesina, la 3',4'-dideshidro-4'-desoxi-8'-norvincaleucoblastina, el docetaxol, la rizoxina, la dolastatina, el isetionato de mivobulina, la auristatina, la cemadotina, el RPR109881, el BMS184476, la vinflunina, la criptoficina, la 2,3,4,5,6-pentaflúor-N-(3-flúor-4-metoxifenil)bencenosulfonamida, la anhidrovinblastina, la N,N-dimetil-L-valil-L-valil-N-metil-L-valil-L-prolil-L-prolin-t-butilamida, el TDX258 y el BMS188797.

Los inhibidores de la topoisomerasa son, por ejemplo, el topotecano, la hicaptamina, el irinotecano, el rubitecano, la 6-etoxipropionil-3',4'-O-exo-bencilidencartreusina, la 9-metoxi-N,N-dimetil-5-nitropirazol[3,4,5-kl]acridin-2-(6H)propanamina, la 1-amino-9-etil-5-flúor-2,3-dihidro-9-hidroxi-4-metil-1H,12H-benzo[de]pirano[3',4':b,7]indolizino[1,2b]quinolin-10,13(9H,15H)-diona, el lurtotecano, la 7-[2-(N-isopropilamino)etil]-(20S)camptotecina, el BNP1350, el BNPI1100, el BN80915, el BN80942, el fosfato de etoposido, el teniposido, el sobuzoxano, el 2'-dimetilamino-2'-desoxi-etoposido, el GL331, la N-[2-(dimetilamino)etil]-9-hidroxi-5,6-dimetil-6H-pirido[4,3-b]carbazol-1-carboxamida, la asulacrina, la (5a,5aB,8aa,9b)-9-[2-[N-[2-(dimetilamino)etil]-N-metilamino]etil]-5-[4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil]5,5a,6,8,8a,9-hexohidrofuro(3',4':6,7)nafto(2,3-d)-1,3-dioxol-6-ona, el 2,3-(metilendioxi)-5-metil-7-hidroxi-8-metoxibenzo[c]fenantridinio, la 6,9-bis[(2-aminoetil)amino]benzo[g]isoquinolin-5,10-diona, 5-(3-aminopropilamino)-7,10-dihidroxi-2-(2-hidroxietilaminometil)-6H-pirazol[4,5,1-de]-acridin-6-ona, la N-[1-[2-(dietilamino)etilamino]-7-metoxi-9-oxo-9H-tioxanten-4-ilmetil]formamida, la N-(2-(dimetil-amino)-etil)acridin-4-carboxamida, la 6-[[2-(dimetilamino)-etil]amino]-3-hidroxi-7H-indeno[2,1-c]quinolin-7-ona y la dimesna.

A los "agentes antiproliferantes" pertenecen los oligonucleótidos ARN no codificantes y ADN no codificantes tales como el G3139, el ODN698, el RVASKRAS, el GEM231 y el INX3001, así como los antimetabolitos tales como la enocitabina, el carmofur, el tegafur, la pentostatina, la doxifluridina, el trimetrexato, la fludarabina, la capecitabina, la galocitabina, el ocfosfato de citarabina, el hidrato de sodio de la fosteabina, el raltitrexed, el paltitrexid, el emitefur, la tiazofurina, la decitabina, el nolatrexed, el pemetrexed, la nelzarabina, la 2'-desoxi-2'-metilidencitidina, la 2'-flúormetilen-2'-desoxicitidina, la N-[5-(2,3-dihidrobenzofuril)sulfonil]-N'-(3,4-diclorofenil)urea, la N6-[4-desoxi-4-[N2-[2(E),4(E)-tetradecadienoil]glicilamino]-L-glicero-B-L-manoheptopiranosil]adenina, la aplidina, la ecteinascidina, la troxacitabina, el ácido 4-[2-amino-4-oxo-4,6,7,8-tetrahidro-3H-pirimidino[5,4-b][1,4]tiazin-6-il-(S)-etil]-2,5-tienoil-L-glutámico, la aminopterina, el 5-flúrouracilo, la alanosina, el acetato de 11-acetil-8-(carbamoiloximetil)-4-formil-6-metoxi-14-oxa-1,11-diazatetraciclo(7.4.1.0.0)-tetradeca-2,4,6-trien-9-ilo, la swainsonina, el lometrexol, el dexrazoxano, la metioninasa, la 2'-ciano-2'-desoxi-N4-palmitoil-1-B-D-arabinofuranosilcitosina y la 3-aminopiridin-2-carboxaldehídotiosemicarbazona. Los "agentes antiproliferamtes" contienen también otros anticuerpos monoclonales contra los factores del crecimiento como los que se han indicado ya bajo el concepto de "inhibidores de la angiogénesis", tal como el trastuzumab, así como los genes supresores de los tumores, como el p53, que pueden segregarse mediante transferencia genética recombinante inducida por virus (véase por ejemplo la publicación de la patente norteamericana Nr. 6,069,134).

Ensayos

Los compuestos de conformidad con la invención, descritos en los ejemplos, se investigaron en los ensayos descritos más adelante, y se ha encontrado que presentan un efecto inhibidor de la cinasa. Se conocen otros ensayos por la literatura y podrían ser fácilmente realizados por el técnico en la material (véanse, por ejemplo, las publicaciones Dhanabal et al., Cancer Res. 59:189-197; Xin et al., J. Biol. Chem. 274:9116-9121; Sheu et al., Anticancer Res. 18:4435-4441; Ausprunk et al., Dev. Biol. 38:237-248; Gimbrone et al., J. Natl. Cancer Inst. 52:413-427; Nicosia et al., in vitro 18:538- 549).

Ensayo de la VEGF-receptor cinasa

La actividad VEGF-receptor cinasa se determina mediante la incorporación de fosfato marcado de manera radioactiva en ácido poliglutámico/substrato de tirosina 4:1 (pEY). El producto pEY fosforilado se fija sobre una membrana filtrante y se determina cuantitativamente la incorporación del fosfato marcado de manera radioactiva mediante cómputo por escintilación.

Materiales VEGF-receptor cinasa

Los dominios de las tirosina cinasas intracelulares de la KDR humana (Terman, B. 1. et al. Oncogene (1991) tomo 6, páginas 1677-1683) y Flt-1 (Shibuya, M. et al. Oncogene (1990) tomo 5, páginas 519-524) se clonaron como proteína de fusión génica de glutationa-S-transferasa (GST). Esto se llevó a cabo mediante clonación de los dominios del citoplasma de la KDR-cinasa como fusión adecuada como pauta de lectura sobre el extremo carboxi del gen GST. Las proteínas de fusión solubles, recombinantes de GST-dominio de cinasa se expresaron en células de insectos de Spodoptera frugiperda (Sf21) (Invitrogen) mediante el empleo de un vector de expresión de Baculovirus (pAcG2T, Pharmingen).

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Tampón para la lisis

50 mM Tris pH 7,4, 0,5 M NaCl, 5 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,5% de Triton X-100, 10% de glicerina, respectivamente 10 mg/ml de leupeptina, de pepstatina y de aprotinina así como 1 mM de fluoruro de fenilmetilsulfonilo (todos ellos de la firma Sigma).

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Tampón para el lavado

50 mM Tris pH 7,4, 0,5 M NaCl, 5 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,05% de Triton X-100, 10% de glicerina, respectivamente 10 mg/ml de leupeptina, de pepstatina y de aprotinina así como 1 mM de fluoruro de fenilmetilsulfonilo.

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Tampón para la diálisis

50 mM Tris pH 7,4, 0,5 M NaCl, 5 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,05% de Triton X-100, 50% de glicerina, respectivamente 10 mg/ml de leupeptina, de pepstatina y de aprotinina así como 1 mM de fluoruro de fenilmetilsulfonilo.

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10 \times Tampón de reacción

200 mM Tris, pH 7,4, 1,0 M NaCl, 50 mM MnCl_{2}, 10 mM DTT y 5 mg/ml de albúmina de suero de ternera [bovine serum albumin = BSA] (Sigma).

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Tampón para la dilución del enzima

50 mM Tris, pH 7,4, 0,1 M NaCl, 1 mM DTT, 10% de glicerina, 100 mg/ml de BSA.

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10\times Substrato

750 \mug/ml de ácido poli(glutámico/tirosina; 4:1) (Sigma).

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Solución para la interrupción

30% de ácido tricloracético, 0,2 M de pirofosfato de sodio (ambos de la firma Fisher).

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Solución de lavado

15% de ácido tricloroacético, 0,2 M de pirofosfato de sodio.

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Placas filtrantes

Millipore #MAFC NOB, GF/C 96 pocillos-placa de fibra de vidrio.

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Procedimiento A

Purificación de las proteínas

1.: Se infectaron células de Sf21 con el virus recombinante con un m.o.i. (multiplicidad de la infección) de 5 partículas víricas/célula y se cultivaron durante 48 horas a 27ºC.

2.: Todas las etapas se llevaron a cabo a 4ºC. Las células infectadas se recolectaron mediante centrifugación a 1.000xg y se lisaron durante 30 minutos a 4ºC con 1/10 en volumen de tampón para la lisis y a continuación se centrifugaron durante 1 hora a 100.000xg. El sobrenadante se dispuso a continuación sobre una columna de glutationa-sefarosa (Pharmacia) equilibrado con tampón para la lisis y se lavaron con 5 volúmenes del mismo tampón y a continuación con 5 volúmenes del tampón de lavado. La proteína recombinante GST-KDR se eluyó con el tampón de lavado/10 mM de glutationa reducida (Sigma) y se dializó frente al tampón para la diálisis.

Procedimiento B

Ensayo de la VEGF-receptor cinasa

1.: Se combinan el ensayo con 5 \mul de inhibidor o de controles en 50% de DMSO.

2.: Se combina con 35 \mul de mezcla de la reacción, que contiene 5 \mul de 10x tampón para la reacción, 5 \mul de 25 mM ATP/10 \muCi[^{33} P]ATP (Amersham) y 5 \mul de 10x substrato.

3.: La reacción se inicia mediante la adición de 10 \mul de KDR (25 nM) en el tampón para la dilución del enzima.

4.: Se mezcla y se incuba durante 15 minutos a temperatura ambiente.

5.: La reacción se detiene mediante la adición de 50 \mul de solución para la interrupción.

6.: Se incuba durante 15 minutos a 4ºC.

7.: Se transfieren alícuotas de 90 \mul sobre placas filtrantes.

8.: Filtración por succión y lavado 3 veces con solución para el lavado.

9.: Se añaden 30 \mul de cóctel de escintilación, se cierran las placas y se cuentan en un contador de escintilaciones del tipo Wallac Microbeta.

Ensayo de mitogénesis en células del endotelio de las venas del cordón umbilical humano

La expresión de los VEGF-receptores, que estimulan las reacciones mitógenas sobre el factor de crecimiento, está limitada en su mayor parte a las células del endotelio de los vasos. Las células del endotelio de las venas del cordón umbilical humano cultivadas (HUVECs) proliferan como reacción al tratamiento con VEGF y pueden emplearse como sistema de ensayo para la determinación cuantitativa de los efectos de los inhibidores de KDR-cinasa sobre la estimulación del VEGF. En el ensayo descrito se tratan capas monocelulares de HUVECs en estado de reposo durante 2 horas como paso previo a la adición de VEGF o "basic fibroblast growth factor" (bFGF) con el constituyente o con el compuesto de ensayo. La reacción mitógena sobre VEGF o sobre bFGF se determina con ayuda de la medida de la incorporación de la [^{3}H]timidina en el ADN celular.

Materiales HUVECs

Se utilizaron HUVECs congelados como aislados de cultivo primarios de la firma Clonetics Corp. Las células se obtienen en el medio de crecimiento endotélico (Endothelial Growth Medium = EGM; Clonetics) y se utilizan para los ensayos de mitogenidad en los pasajes comprendidos entre el tercero y el séptimo.

Placas de cultivo Placas de cultivo de tejidos de poliestireno con 96 pocillos NUNCLON (NUNC #167008). Medio de ensayo

Medio de Eagle modificado según Dulbecco con 1 g/ml de glucosa (DMEM con un bajo contenido en glucosa; Mediatech) plus 10% (v/v) de suero de ternera fetal (Clonetics).

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Compuestos de ensayo

Se lleva a cabo una dilución en serie con las soluciones madre de trabajo de los compuestos de ensayo con 100% de dimetilsulfóxido (DMSO) hasta que sus concentraciones sean aproximadamente 400 veces mayor que la concentración final deseada. Las últimas diluciones (concentración 1 x) se preparan inmediatamente antes de proceder a la adición a las células con medio de ensayo.

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10x Factores de crecimiento

Se preparan con medio de ensayo soluciones del VEGF 165 humano (500 ng/ml; R&D Systems) y bFGF (10 ng/ml; R&D Systems).

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10x [^{3}H]-Timidina

Se diluye la [metil-^{3}H]-timidina (20 Ci/mmol; Dupont-NEN) con medio de DMEM con un bajo contenido en glucosa hasta 80 \muCi/ml.

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Medio para el crecimiento celular

Solución de sal en equilibrio de Hank (Mediatech) con 1 mg/ml de albúmina de suero de ternera (Boehringer-Mannheim).

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Solución para la lisis celular

NaOH 1 N, 2% (p/v) Na_{2}CO_{3}.

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Procedimiento 1

Se recolectan mediante tratamiento con tripsina capas monocelulares de HUVEC mantenidas en EGM y se sobreinoculan con una densidad de 4.000 células por cada 100 \mul de medio de ensayo, por cubito, en placas con 96 pocillos. El crecimiento de las células se detiene al cabo de 24 horas a 37ºC en una atmósfera húmeda que contiene un 5% de CO_{2}.

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Procedimiento 2

Se substituye el medio para la detención del crecimiento por 100 \mul de medio de ensayo, que contiene bien el constituyente (0,25% [v/v] DMSO) o la concentración final deseada del compuesto de ensayo. Todas las determinaciones se llevan a cabo por medio de tres repeticiones. Las células se incuban a continuación durante 2 horas a 37ºC/5% de CO_{2}, de tal manera que los compuestos de ensayo puedan penetrar en las células.

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Procedimiento 3

Las células se estimulan, después de un tratamiento previo durante 2 horas, mediante la adición de 10 \mul de medio de ensayo, 10x solución de VEGF o 10x solución de bFGF por cubito. Las células se incuban a continuación a 37ºC/5% de CO_{2}.

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Procedimiento 4

Al cabo de 24 horas se combina, en presencia de los factores del crecimiento, con 10x [^{3}H]-timidina (10 \mul/pocillo).

\newpage

Procedimiento 5

El medio se filtra por succión al cabo de tres días desde la combinación con la [^{3}H]-timidina y las células se lavan dos veces con medio para el lavado de las células (400 \mul/pocillo, a continuación 200 \mul/pocillo). Las células lavadas, adheridas se solubilizan a continuación mediante la adición de solución para la lisis celular (100 \mul/pocillo) y calentamiento durante 30 minutos a 37ºC. Los lisados celulares se transfieren a tubitos de vidrio para la escintilación de 7 ml, que contienen 150 \mul de agua. Se combinan con el cóctel de escintilación (5 ml/tubito), y se determina la radioactividad asociada con las células mediante espectroscopia por escintilación líquida. Según estos ensayos, los compuestos de la fórmula I representan inhibidores del VEGF y por lo tanto son adecuados para la inhibición de la angiogénesis, como en el tratamiento de las enfermedades oculares, por ejemplo de la retinopatía diabética y para el tratamiento de carcinomas, por ejemplo de tumores sólidos. Los compuestos presentes inhiben la mitogénesis estimulada por el VEGF de células humanas cultivadas del endotelio de los vasos con valores HK50 comprendidos entre 0,01 y 5,0 \muM. Estos compuestos son también selectivos en comparación con las tirosina cinasas emparentadas (por ejemplo FGFR1 así como la familia Src; véase la relación entre las Src-cinasas y las VEGFR-cinasas en la publicación de Eliceiri et al., Molecular Cell, tomo 4, páginas 915-924, diciembre 1999).

II.

De igual modo, el objeto de la invención consiste en el empleo de los compuestos de la fórmula I y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento destinado al tratamiento de enfermedades y/o de malfunciones, que estén caracterizadas por condiciones de estrés oxidativo, en un animal mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, administrándose por vía oral al animal mamífero, que requiera un tratamiento de este tipo, una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1.

Las enfermedades y/o las malfunciones están constituidas, de manera especial, por pérdidas de la memoria y por enfermedades neurodegenerativas.

Los compuestos, de conformidad con la invención, encuentran aplicación, por lo tanto, para la neuroprotección.

Se ha descrito en la publicación WO 00/54754 el empleo de la isoquercetina y del ácido ascórbico para finalidades correspondientes.

El objeto de la invención consiste, de igual modo, en el empleo de los compuestos de conformidad con la invención y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables como aditivos para artículos comestibles.

De igual modo, el objeto de la invención consiste en una composición, que contenga ácido ascórbico, ascorbato o un derivado del ácido ascórbico y, al menos, un compuesto, de conformidad con la invención, y/o su sal y solvato fisiológicamente aceptable.

III.

Como derivados flavonoides, los compuestos de conformidad con la invención presentan propiedades antioxidantes.

Se ha descrito, por ejemplo, en la publicación WO 01/72263 el empleo en formaciones tópicas de los derivados de ectoína con agentes antioxidantes para la protección de las proteínas del estrés de la piel.

Por lo tanto, el objeto de la invención consiste en el empleo de los compuestos de conformidad con la invención y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables en formulaciones cosméticas, de manera preferente en forma de una formulación tópica.

De igual modo, el objeto de la invención consiste en el empleo los compuestos de conformidad con la invención y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables para la protección de la proteína del estrés de la piel, de manera preferente en forma de una formulación tópica.

La obtención de la composición tópica se efectúa llevándose hasta una forma de formulación adecuada, al menos, uno de los compuestos, empleados de conformidad con la invención, en caso dado con productos auxiliares y/o con excipientes. Los productos auxiliares y los excipientes proceden del grupo de los excipientes, de los agentes para la conservación y de otros productos auxiliares usuales.

Las composiciones tópicas a base de, al menos, uno de los compuestos, empleados de conformidad con la invención, se emplearán externamente sobre la piel o sobre los anexos de la piel.

Como formas de aplicación pueden citarse, por ejemplo, las soluciones, las suspensiones, las emulsiones, las pastas, los ungüentos, los geles, las cremas, las lociones, los polvos, los jabones, los preparados de limpieza que contengan tensioactivos, los aceites y los aerosoles. Como complemento de uno o varios compuestos, empleados de conformidad con la invención, se aportarán a la composición excipientes, productos auxiliares usuales de cualquier tipo y, en caso dado, otros productos activos.

Los productos auxiliares preferentes proceden del grupo formado por los agentes para la conservación, los antioxidantes, los estabilizantes, los solubilizantes, las vitaminas, los colorantes y los mejoradores del sabor. Los ungüentos, las pastas, las cremas y los geles pueden contener, además de uno o varios compuestos, empleados de conformidad con la invención, los excipientes usuales, por ejemplo grasas animales y vegetales, ceras, parafinas, almidones, tragacanto, derivados de la celulosa, polietilenglicoles, siliconas, bentonitas, ácido silícico, talco y óxido de cinc o mezclas de estos productos.

Los polvos y los aerosoles pueden contener, además de uno o varios compuestos, empleados de conformidad con la invención, los excipientes usuales, por ejemplo la lactosa, el talco, el ácido silícico, el hidróxido de aluminio, el silicato de calcio y el polvo de poliamida o mezclas de estos productos. Los aerosoles pueden contener, de manera adicional, los agentes propulsores usuales, por ejemplo los hidrocarburos clorofluorados, el propano/butano o el dimetiléter.

Las soluciones y las emulsiones pueden contener, además de uno o varios compuestos, empleados de conformidad con la invención, los excipientes usuales, tales como los disolventes, los solubilizantes y los emulsionantes, por ejemplo el agua, el etanol, el isopropanol, el carbonato de etilo, el acetato de etilo, el alcohol bencílico, el benzoato de bencilo, el propilenglicol, el 1,3-butilglicol, los aceites, especialmente los aceites de semillas de algodón, el aceite de cacahuete, el aceite de semillas de maíz, el aceite de oliva, el aceite de ricino y el aceite de sésamo, los ésteres de glicerina de los ácidos grasos, los polietilenglicoles y los ésteres de los ácidos grasos del sorbitán o mezclas de estos productos.

Las suspensiones pueden contener, además de uno o varios compuestos, empleados de conformidad con la invención, los excipientes usuales, tales como diluyentes líquidos, por ejemplo el agua, el etanol o el propilenglicol, los agentes de suspensión, por ejemplo los alcoholes isoestearílicos etoxilados, los ésteres de sorbita de polioxietileno y los ésteres de sorbitán del polioxietileno, las celulosas microcristalinas, el metahidróxido de aluminio, la bentonita, el agar-agar y el tragacanto o mezclas de estos productos.

Los jabones pueden contener, además de uno o varios compuestos, empleados de conformidad con la invención, los excipientes usuales, tales como las sales alcalinas de los ácidos grasos, las sales de los semiésteres de los ácidos grasos, los hidrolizados de proteína de ácidos grasos, los isotionatos, la lanolina, los alcoholes grasos, los aceites vegetales, los extractos vegetales, la glicerina, los azúcares o mezclas de estos productos.

Los productos de limpieza, que contienen tensioactivos, pueden contener, además de uno o varios compuestos, empleados de conformidad con la invención, los excipientes usuales, tales como sales de los sulfatos de los alcoholes grasos, los sulfatos de los éteres de los alcoholes grasos, los semiésteres del ácido sulfosuccínico, los hidrolizados de proteína de ácidos grasos, los isotionatos, los derivados de imidazolio, los tauratos de metilo, los sarcosinatos, los étersulfatos de las amidas de los ácidos grasos, las alquilamidobetaínas, los alcoholes grasos, los glicéridos de los ácidos grasos, las dietanolamidas de los ácidos grasos, los aceites vegetales y sintéticos, los derivados de la lanolina, los ésteres de glicerina de ácidos grasos etoxilados o mezclas de estos productos.

Los aceites para el rostro y para el cuerpo pueden contener, además de uno o varios compuestos, empleados de conformidad con la invención, los excipientes usuales, tales como los aceites sintéticos, tales como los ésteres de los ácidos grasos, los alcoholes grasos, los aceites de silicona, los aceites naturales, tales como los aceites vegetales y los extractos vegetales oleaginosos, los aceites de parafina, los aceites de lanolina o mezclas de estos productos.

Otras formas de aplicación cosmética, típicas, son también las barras de labios, las barras para el cuidado de los labios, el rimel, el delineador de ojos, las sombras de párpados, el colorete, el maquillaje en polvo, en emulsión y de cera así como los preparados para la protección contra el sol, los preparados para antes del baño solar y para después del baño solar.

En la composición tópica está presente al menos un compuesto, empleado de conformidad con la invención, en una cantidad comprendida de manera preferente entre un 0,0001 y un 50% en peso, de manera especialmente preferente comprendida entre un 0,001 y un 10% en peso, de manera especialmente preferente comprendida entre un 0, 1 y un 1% en peso, referido a la composición.

Ensayo para investigar las propiedades captadoras de radicales o bien del efecto antioxidante

El ensayo sirve para cribar la propiedad antioxidante o la propiedad captadora de radicales de una substancia o de un extracto. Para determinar esta propiedad se deja reaccionar en solución etanólica la substancia con un radical estable DPPH* (el hidrato de 2,2-difenil-1-picrilhidracilo). La reducción del DPPH* se sigue por medio de la disminución de la extinción a la longitud de onda característica del radical. En su forma radical el DPPH* absorbe en 515 nm, cuando se produce la reducción por medio de un antioxidante (AOX) disminuye la extinción. Para cada antioxidante se investigan concentraciones diferentes (expresadas como la relación entre los moles de antioxidante/moles de DPPH*). La disminución de la extinción a 515 nm se determina al cabo de 1 segundo, de 2 minutos, de 10 minutos y a continuación cada 10 minutos hasta que la extinción permanezca constante. La concentración inicial exacta del DPPH* se determina con ayuda del coeficiente de extinción. Para cada concentración de antioxidante se determina la concentración remanente de DPPH* como porcentaje de la concentración inicial y se representa frente a la relación molar entre el antioxidante y el DPPH*. Se define la actividad contra radicales como la proporción del antioxidante, que reduce la concentración de DPPH al 50 por ciento de la cantidad inicial (concentración eficiente -Efficient Concentration- = EC_{50}). Cuanto menor sea este valor, tanto mayor será la actividad contra los radicales. El comportamiento de la reacción de los antioxidantes individuales es muy variable. Puede hacerse una distinción entre las substancias que reaccionan rápidamente, que tienen una reacción media y que reaccionan lentamente, pudiéndose alcanzar el estado estable (steady-state) al cabo de un tiempo comprendido entre 30 segundos y 12 horas.

En lo que antecede y a continuación todas las temperaturas se han indicado en ºC. En los ejemplos siguientes la expresión "elaboración usual" significa: se añade agua, en caso necesario, se ajusta, en caso necesario, a valores del pH comprendidos entre 2 y 10, según la constitución del producto final, se extrae con acetato de etilo o con diclorometano, se separa, se seca la fase orgánica sobre sulfato de sodio, se concentra por evaporación y se purifica mediante cromatografía sobre gel de sílice y/o mediante cristalización. Valores Rf sobre gel de sílice; eluyente: acetato de etilo/metanol 9:1.

Espectrometría de masas (MS):

EI (ionización por choque electrónico) M^{+}

FAB (bombardeo atómico rápido) (M+H)^{+}

ESI (ionización por electropulverización) (M+H)^{+}

(cuando no se indique otra cosa)

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Ejemplo 1 Obtención de la 6-hidroxi-2-(1-metil-1H-imidazol-2-carbonil)-cromen-4-ona

1.1 Se disuelven 3,8 g de sodio, en porciones, bajo agitación, en 300 ml de etanol. A continuación se añade, gota a gota, una solución de 5,0 g de 2,5-dihidroxiacetofenona y 17,8 ml de éster de dietilo del ácido oxálico en 25 ml de etanol. A continuación se calienta la mezcla de la reacción durante 3 horas a 80º. Se enfría hasta la temperatura ambiente y se añaden, gota a gota, 10 ml de HCl al 32%. Se calienta durante 30 minutos a 90º, se enfría y se elimina el disolvente. Tras elaboración usual se obtienen 5,6 g de la 6-hidroxi-2-etoxicarbonil-cromen-4-ona ("AA").

1.2 Se añaden 2,4 ml de una solución 1,6 M de n-BuLi a una solución, enfriada a -78º, de 0,3 ml de 1-metil-1H-imidazol en 5 ml de THF, bajo atmósfera de N_{2} y se agita durante 30 minutos. A continuación se añade una solución de 300 mg de "AA" en 5 ml de THF y es continúa agitando durante 2 hora. Se elabora de manera usual y se obtienen 303 mg de la 6-hidroxi-2-(1-metil-1H-imidazol-2-carbonil)-cromen-4-ona.

^{1}H NMR (DMSO-d6) \delta 4,02 (s, 3H), 7,32 (m, 3H), 7,59 (s, 1H), 7,62 (dd, J= 9,6, 2,0 Hz, 1H), 7,74 (s, 1H), 10,21(s,1H).

^{13}C NMR (DMSO-d6) \delta 36,1, 107,2, 115,3, 120,3, 124,2, 124,6, 129,7, 129,9, 141,1, 149,2, 155,2, 156,0, 174,8, 177,4.

EI MS (m/z) 267 (M^{+}), 239, 211

UV-Vis (^{i}PrOH): \lambda_{max}. (1g. \varepsilon):

De manera análoga se obtienen los compuestos siguientes

la 6-hidroxi-2-(1-metil-1H-imidazol-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 5,7-dihidroxi-2-(1-metil-1H-imidazol-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 7-hidroxi-2-(1-metil-1H-imidazol-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 6-(1-metil-1H-imidazol-2-carbonil)-[1,3]dioxolo[4,5g]cromen-8-ona,

la 5,7-dihidroxi-2-(piridin-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 6-hidroxi-2-(piridin-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 6-hidroxi-2-(3,5-dicloropirazin-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 6-hidroxi-2-(benzotiazolil-2-carbonil)-cromen-4-ona.

Resultados de los ensayos farmacológicos

7

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Los ejemplos siguientes se refieren a preparaciones farmacéuticas:

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Ejemplo A Viales para inyección

Se ajusta una solución de 100 g de un producto activo de la fórmula I y 5 g de hidrógenofosfato disódico en 3 litros de agua bidestilada a pH 6,5 con ácido clorhídrico 2 n, se filtra de manera estéril, se envasa en viales para inyección, se liofilizan bajo condiciones estériles y se cierran de manera estéril. Cada vial para inyección contiene 5 mg de producto activo.

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Ejemplo B Supositorios

Se funde una mezcla de 20 g de un producto activo de la fórmula I con 100 g de lecitina de soja y 1.400 g de manteca de cacao, se cuela en moldes y se deja enfriar. Cada supositorio contiene 20 mg de producto activo.

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Ejemplo C Solución

Se prepara una solución a partir de 1 g de un producto activo de la fórmula I, de 9,38 g de NaH_{2}PO_{4}. 2 H_{2}O, de 28,48 g de Na_{2}HPO_{4} . 12 H_{2}O y de 0,1 g de cloruro de benzalconio en 940 ml de agua bidestilada. Se ajusta a pH 6,8, se enrasa a 1 litro, y se esteriliza mediante irradiación. Esta solución se puede emplear en forma de colirio.

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Ejemplo D Ungüentos

Se mezcla 500 mg de un producto activo de la fórmula I con 99,5 g de vaselina bajo condiciones asépticas.

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Ejemplo E Tabletas

Se prensa una mezcla de 1 kg de producto activo de la fórmula I, 4 kg de lactosa, 1,2 kg de almidón de patata, 0,2 kg de talco y 0,1 kg de estearato de magnesio de modo habitual para dar tabletas, de tal manera, que cada tableta contenga 10 mg de producto activo.

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Ejemplo F Grageas

Se prensan tabletas de manera análoga a la del ejemplo E, que a continuación se revisten, de modo habitual, con un revestimiento de sacarosa, almidón de patata, talco, tragacanto y colorante.

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Ejemplo G Cápsulas

Se cargan 2 kg de producto activo de la fórmula I, de manera habitual, en cápsulas de gelatina dura, de tal manera que cada cápsula contenga 20 mg de producto activo.

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Ejemplo H Ampollas

Se filtra de manera estéril, una solución de 1 kg de producto activo de la fórmula I en 60 litros de agua bidestilada, se envasa en ampollas, se liofiliza bajo condiciones estériles y se cierran de manera estéril. Cada ampolla contiene 10 mg de producto activo.

Claims

1. Empleo de los compuestos de la fórmula I

8

en la que

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

A': significa alquilo con 1 hasta 6 átomos de carbono o bencilo,

Hal: significa F, Cl, Br o I,

o: significa 0, 1 o 2,

así como de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades, en los cuales juegue un papel la inhibición, la regulación y/o la modulación de la transducción de señal de cinasas.

2. Empleo según la reivindicación 1, en la que las cinasas se eligen del grupo formado por las tirosina cinasas y/o las Raf-cinasas.

3. Empleo, según la reivindicación 1 o 2, de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1 así como de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades, que estén influenciadas por la inhibición de la tirosina cinasa por medio de los compuestos de la fórmula I.

4. Empleo según la reivindicación 3, en la que la enfermedad a ser tratada es un tumor sólido.

5. Empleo según la reivindicación 4, en el que el tumor sólido se elige entre el grupo formado por el tumor cerebral, el tumor del tracto urogenital, el tumor del sistema linfático, el tumor de estómago, el tumor de laringe y el tumor pulmonar.

6. Empleo según la reivindicación 5, en el que el tumor sólido se elige entre el grupo formado por la leucemia monocítica, el adenocarcinoma pulmonar, el carcinoma pulmonar microcelular, el cáncer de páncreas, el glioblastoma y el carcinoma de mama.

7. Empleo según la reivindicación 3 para el tratamiento de una enfermedad, en la que participe la angiogénesis.

8. Empleo según la reivindicación 7, en el que la enfermedad es una enfermedad ocular.

9. Empleo según la reivindicación 3 para el tratamiento de la vascularización de la retina, de la retinopatía diabética, de la degeneración de la mácula condicionada por la edad y/o de las enfermedades inflamatorias.

10. Empleo según la reivindicación 9, en el que la enfermedad inflamatoria procede del grupo formado por la artritis reumatoide, la psoriasis, la dermatitis por contacto y el tipo tardío de la reacción de hipersensibilidad.

11. Empleo según la reivindicación 3 para el tratamiento de patologías óseas, procediendo la patología ósea del grupo formado por el osteosarcoma, la osteoartritis y la raquitis.

12. Empleo según la reivindicación 3 de los compuestos de la fórmula I y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento destinado al tratamiento de los tumores sólidos, administrándose una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1, en combinación con un compuesto elegido entre el grupo formado por 1) un modulador del receptor de los estrógenos, 2) un modulador del receptor de los andrógenos, 3) un modulador del receptor de los retinoides, 4) un citotóxico, 5) un agente antiproliferante, 6) un inhibidor de la prenil-proteína transferasa, 7) un inhibidor de la HMG-CoA-reductasa, 8) un inhibidor de la HIV-proteasa, 9) un inhibidor de la transcriptasa inversa así como 10) otros inhibidores de la angiogénesis.

13. Empleo según la reivindicación 3 de los compuestos de la fórmula de los compuestos de la fórmula I y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento destinado al tratamiento de los tumores sólidos, administrándose una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto según la reivindicación 1 en combinación con radioterapia y con un compuesto elegido del grupo formado por 1) un modulador del receptor de los estrógenos, 2) un modulador del receptor de los andrógenos, 3) un modulador del receptor de los retinoides, 4) un citotóxico, 5) un agente antiproliferante, 6) un inhibidor de la prenil-proteína transferasa, 7) un inhibidor de la HMG-CoA-reductasa, 8) un inhibidor de la HIV-proteasa, 9) un inhibidor de la transcriptasa inversa así como 10) otros inhibidores de la angiogénesis.

14. Empleo según la reivindicación 1 o 2 de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1, así como de sus sales y de sus solvatos farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades, que estén provocadas, transmitidas y/o propagadas por medio de las Raf-cinasas.

15. Empleo según la reivindicación 14, en el que la Raf-cinasa se elige del grupo constituido por la A-Raf, la B-Raf y la Raf-1.

16. Empleo según la reivindicación 14, en el que las enfermedades se eligen entre el grupo formado por las enfermedades hiperproliferantes y las enfermedades no hiperproliferantes.

17. Empleo según la reivindicación 14 o 16, en el que la enfermedad es el cáncer.

18. Empleo según la reivindicación 14 o 16, en el que la enfermedad no es de tipo canceroso.

19. Empleo según la reivindicación 14, 16 o 18, en el que las enfermedades de tipo no canceroso se eligen entre el grupo constituido por la psoriasis, la artritis, las inflamaciones, la endometriosis, la cicatrización, la hiperplasia prostática benigna, las enfermedades inmunitarias, las enfermedades autoinmunitarias y las enfermedades de inmunodeficiencia.

20. Empleo según una de las reivindicaciones 14, 16 o 17, en el que la enfermedad se elige del grupo constituido por el cáncer cerebral, el cáncer pulmonar, el cáncer del epitelio plano, el cáncer de vejiga, el cáncer de estómago, el cáncer de páncreas, el cáncer hepático, el cáncer renal, el cáncer colorrectal, el cáncer de mama, el cáncer de cabeza, el cáncer de cuello, el cáncer de esófago, el cáncer ginecológico, el cáncer de la glándula tiroides, el linfoma, la leucemia crónica y la leucemia aguda.

21. Empleo, según una o varias de las reivindicaciones 1 a 20, de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1

en la que

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22. Empleo, según una o varias de las reivindicaciones 1 a 21, de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1

en la que

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

23. Empleo, según una o varias de las reivindicaciones 1 a 22, de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1

en la que

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

Het: significa un heterociclo con 1 hasta 4 átomos de N, de O y/o de S, con un núcleo o con dos núcleos, saturado, no saturado o aromático, que puede estar no substituido o substituido una, dos o tres veces por Hal y/o por A,

así como de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones

24. Empleo, según una o varias de las reivindicaciones 1 a 23, de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1

en la que

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

Het: significa un heterociclo con 1 hasta 3 átomos de N, de O y/o de S, con un núcleo o con dos núcleos, aromático, que puede estar no substituido o substituido una, dos o tres veces por Hal y/o por A

25. Empleo, según una o varias de las reivindicaciones 1 a 24, de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1

en la que

R^{1}: significa -OH o -OA,

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

Het: significa un heterociclo con 1 hasta 4 átomos de N, de O y/o de S, con un núcleo o con dos núcleos, aromático, que puede estar no substituido o substituido una, dos o tres veces por Hal y/o por A,

26. Empleo, según una o varias de las reivindicaciones 1 a 25, de los compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1

en la que

R^{1}: significa -OH o -OA,

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

A: significa alquilo con 1 hasta 6 átomos de carbono, no ramificado o ramificado, pudiendo estar reemplazados de 1 a 5 átomos de H por F,

27. Compuestos de la fórmula I

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9

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en la que

R^{1}: significa -OH o -OA,

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

Hal: significa F, Cl, Br o I

\newpage

28. Compuestos de la fórmula I, según la reivindicación 27,

en la que

R^{1}: significa -OH o -OA,

R^{2}: significa H, -OH, -OA o Hal,

R^{3}: significa H,

R^{1} y R^{2} significan, en conjunto, también, metilendioxi o etilendioxi,

29. Compuestos según la reivindicación 27 elegidos del grupo formado por

la 6-hidroxi-2-(1-metil-1H-imidazol-2-carbonil)-cromen-4ona,

la 5,7-dihidroxi-2-(1-metil-1H-imidazol-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 7-hidroxi-2-(1-metil-1H-imidazol-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 6-(1-metil-1H-imidazol-2-carbonil)-[1,3]dioxolo[4,5g]cromen-8-ona,

la 5,7-dihidroxi-2-(piridin-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 6-hidroxi-2-(piridin-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 6-hidroxi-2-(3,5-dicloropirazin-2-carbonil)-cromen-4-ona,

la 6-hidroxi-2-(benzotiazolil-2-carbonil)-cromen-4-ona,

30. Medicamento que contiene, al menos, un compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 27 a 29 y/o sus solvatos y sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, así como, en caso dado, excipientes y/o productos auxiliares.

31. Medicamento que contiene, al menos, un compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 27 a 29 y/o sus solvatos y sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones y, al menos, otro producto activo para medicamentos.

32. Estuche (kit), constituido por envases separados de

(a): una cantidad activa de un compuesto de la fórmula I según una o varias de las reivindicaciones 27 a 29 y/o de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente empleables, con inclusión de sus mezclas en todas las proporciones, y

(b): una cantidad activa de otro producto activo para medicamentos.

\newpage

33. Procedimiento para la obtención de los compuestos de la fórmula I según las reivindicaciones 27 a 29 así como de sus solvatos y de sus sales farmacéuticamente empleables, caracterizado porque

a): se hace reaccionar, en primer lugar, un compuesto de la fórmula II

10

\quad: en la que

11

\quad: para dar un compuesto de la fórmula IV

12

13

\quad: en la que Het tiene el significado indicado en la reivindicación 27,

\quad: y M significa sodio, potasio o litio,

\quad: para dar un compuesto de la fórmula I

\quad: y/o

34. Empleo de los compuestos de la fórmula I, según una o varias de las reivindicaciones 27 a 29 y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables para la fabricación de un medicamento destinado al tratamiento de enfermedades y/o de malfunciones, que se caractericen por condiciones de estrés oxidativo.

35. Empleo según la reivindicación 34, en el que las enfermedades y/o las malfunciones están constituidas por la pérdida de memoria y por las enfermedades neurodegenerativas.

36. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 27 a 29 y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables como aditivos para los artículos comestibles.

37. Empleo de los compuestos según una o varias de las reivindicaciones 27 a 29 y/o de sus sales y de sus solvatos fisiológicamente aceptables en formulaciones cosméticas.

38. Empleo según la reivindicación 37 para la protección de las proteínas del estrés de la piel.

39. Empleo según la reivindicación 37 o 38 en forma de una composición tópica.

40. Empleo según la reivindicación 37, 38 o 39, caracterizado porque está presente, al menos, un compuesto empleado en una composición tópica en una cantidad comprendida entre un 0,0001 y un 50% en peso, referido a la composición.