ES2298057A1 - Procedimiento quimo-enzimatico para la sistesis de iminociclitoles e iminociclitoles asi obtenidos. - Google Patents

Procedimiento quimo-enzimatico para la sistesis de iminociclitoles e iminociclitoles asi obtenidos. Download PDF

Info

Publication number
ES2298057A1
ES2298057A1 ES200602274A ES200602274A ES2298057A1 ES 2298057 A1 ES2298057 A1 ES 2298057A1 ES 200602274 A ES200602274 A ES 200602274A ES 200602274 A ES200602274 A ES 200602274A ES 2298057 A1 ES2298057 A1 ES 2298057A1
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
fsa
butyl
iminocyclitol
formula
vtcortauna
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
ES200602274A
Other languages
English (en)
Other versions
ES2298057B1 (es
Inventor
Pere Clapes Saborit
Jesus Joglar Tamargo
Jose Antonio Castillo Exposito
Carles Lozano Perez
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Consejo Superior de Investigaciones Cientificas CSIC
Original Assignee
Consejo Superior de Investigaciones Cientificas CSIC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority to ES200602274A priority Critical patent/ES2298057B1/es
Application filed by Consejo Superior de Investigaciones Cientificas CSIC filed Critical Consejo Superior de Investigaciones Cientificas CSIC
Priority to PCT/EP2007/059062 priority patent/WO2008025826A1/en
Priority to PL07803071T priority patent/PL2061892T3/pl
Priority to DK07803071.5T priority patent/DK2061892T3/da
Priority to DE602007004675T priority patent/DE602007004675D1/de
Priority to AU2007291195A priority patent/AU2007291195B2/en
Priority to ES07803071T priority patent/ES2340967T3/es
Priority to US12/439,485 priority patent/US8288132B2/en
Priority to CA2661772A priority patent/CA2661772C/en
Priority to EP07803071A priority patent/EP2061892B1/en
Priority to CNA200780036851XA priority patent/CN101522905A/zh
Priority to JP2009526109A priority patent/JP5145338B2/ja
Priority to AT07803071T priority patent/ATE457036T1/de
Publication of ES2298057A1 publication Critical patent/ES2298057A1/es
Application granted granted Critical
Publication of ES2298057B1 publication Critical patent/ES2298057B1/es
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
    • C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Luminescent Compositions (AREA)
  • Silicon Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Catalysts (AREA)

Abstract

Procedimiento quimo-enzimático para la síntesis de iminociclitoles e iminociclitoles así obtenidos. La presente invención describe un procedimiento quimo-enzimático útil para la síntesis de iminociclitoles basado en la utilización de la enzima D-fructosa-6-fosfato aldolasa (FSA), como por ejemplo: D-fagomina, 1-deoxinojirimicina y derivados N-sustituidos. Estos iminociclitoles, así obtenidos, pueden ser inhibidores de glicosiltransferasas y glicosidasas y pueden ser, por tanto, útiles para la elaboración de composiciones farmacéuticas para el tratamiento de enfermedades humanas.

Description

Procedimiento quimo-enzimático para la síntesis de iminociclitoles e iminociclitoles así obtenidos.
Sector de la técnica
La presente invención se encuadra en un primer sector químico y biotecnológico y en un segundo sector farmacéutico, ya que los productos sintetizados pueden ser aplicados como agentes terapéuticos.
Estado de la técnica
Los compuestos polihidroxilados, tales como oligosacáridos, carbohidratos complejos y sus conjugados con lípidos y proteínas, son moléculas de gran importancia en procesos bioquímicos de reconocimiento biológico tales como adhesión celular, infecciones virales, diferenciación celular en el desarrollo de órganos y metástasis (Koeller, K. M., Wong, C. H., Nat. Biotechnol. 18 (2000) 835). En consecuencia, las enzimas implicadas en su síntesis o degradación, glicosiltransferasas y glicosidasas, respectivamente, constituyen dianas de inhibición, o de activación (según Kolter, T., Wendeler, M., Chembiochem 4 (2003) 260) dada su implicación en alteraciones metabólicas y en enfermedades tales como diabetes tipo II, hepatitis B y C, enfermedad de Gaucher, enfermedad de Fabry, fibrosis cística, cáncer de colon o infecciones virales incluido el VIH (Asano, N., J. Enzyme Inhib. 15 (2000) 215; Asano, N., Glycobiology 13 (2003) 93R; Fiaux, H., Popowycz, F., Favre, S., Schutz, C., Vogel, P., Gerber-Lemaire, S., Juillerat-Jeanneret, L., J. Med. Chem. 48 (2005) 4237).
De entre los compuestos polihidroxilados inhibidores de glicosiltransferasas y glicosidasas destacan los iminociclitoles tipo pirrolidinas (1), piperidinas (2), indolizidinas (3), pirrolizidinas (4), nortropanos (5) e iminociclitoles de siete miembros (6) polihidroxilados (Figura 6), entre otros, algunos de los cuales son potentes inhibidores de glicosidasas y glicosiltransferasas (Asano, N., J. Enzyme Inhib. 15 (2000) 215; Asano, N., Glycobiology 13 (2003) 93R; Lillelund, V. H., Jensen, H. H., Liang, X., Bols, M., Chem. Rev. 102 (2002) 515; Compain, P., Martin, O. R., Curr. Top. Med. Chem. 3 (2003) 541; Mehta, G., Lakshminath, S., Tetrahedron Lett. 43 (2002) 331; Moris-Varas, F., Qian, X.-H., Wong, C.-H., J. Am. Chem. Soc. 118 (1996) 7647; Fuentes, J., Olano, D., Pradera, M. A., Tetrahedron Lett. 40 (1999) 4063; Li, H. Q., Bleriot, Y., Chantereau, C., Mallet, J. M., Sollogoub, M., Zhang, Y. M., Rodriguez-García, E., Vogel, P., Jimenez-Barbero, J., Sinay, P., Org. Biomol. Chem. 2 (2004) 1492; Lin, C. C., Pan, Y. S., Patkar, L. N., Lin, H. M., Tzou, D. L. M., Subramanian, T., Bioorg. Med. Chem. 12 (2004) 3259; Godin, G., Garnier, E., Compain, P., Martin, O. R., Ikeda, K., Asano, N., Tetrahedron Lett. 45 (2004) 579).
Algunos derivados como el miglitol y el miglustat son fármacos que se comercializan para el tratamiento de la diabetes tipo II (Platt, F. M., Butters, T. D., Drugs 63 (2003) 2435).
Las estrategias quimo-enzimáticas descritas hasta el momento para la síntesis de iminociclitoles se basan en la utilización de aldolasas, enzimas capaces de catalizar reacciones de condensación aldólica estereoselectivas entre aldehídos y cetonas (Von der Osten, C. H., Sinskey, A. J., Barbas, C. F., III, Pederson, R. L., Wang, Y. F., Wong, C. H., J. Am. Chem. Soc. 111 (1989) 3924,Romero, A., Wong, C. H., J. Org. Chem. 65 (2000) 8264,Look, G. C., Fotsch, C. H., Wong, C. H., Acc. Chem. Res. 26 (1993) 182,Machajewski, T. D., Wong, C. H., Angew. Chem. Int. Ed. 39 (2000) 1353; Patente (US005329052A)). De entre las aldolasas conocidas, las dependientes del fosfato de dihidroxiacetona (DHAP) han centrado la atención por cuatro razones:
1) su accesibilidad, algunas de ellas son comerciales o de producción relativamente simple a partir de E. coli modificado,
2) su elevada estereoselectividad,
3) su amplia tolerancia estructural por el aldehído aceptor, y
4) su capacidad estereogénica.
Las aldolasas dependientes de DHAP (DHAP aldolasas) catalizan la adición aldólica reversible de DHAP con un aldehído aceptor, generándose \alpha,\beta-dihidroxicetonas con dos nuevos centros estereogénicos. Particularmente interesante es que se conocen las cuatro DHAP aldolasas estereocomplementarias (Figura 1): D-fructosa-1,6-difosfato aldolasa (FruA), L-rhamnulosa-1-fosfato aldolasa (RhuA); L-fuculosa-1-fosfato aldolasa (FucA) y \delta-tagatosa-1,6-difosfato aldolasa (TagA). Una ventaja de estos biocatalizadores es que tienen alguna capacidad de controlar la estereoquímica de la adición aldólica y, por tanto, la configuración de los nuevos centros estereogénicos creados depende del enzima y no de los reactivos de la adición aldólica.
El esquema sintético quimo-enzimático general para la síntesis de iminociclitoles empleando DHAP-aldolasas se muestra en la Figura 2. El paso crucial en este esquema es la adición aldólica de la DHAP a amino aldehídos o sus equivalentes sintéticos catalizada por DHAP aldolasas. En esta etapa se generan dos centros esterogénicos cuya configuración depende del enzima, aunque existen números ejemplos en los que, en función del sustrato, el enzima pierde selectividad generándose productos diasteroméricos. Sigue una etapa de desfosforilación del aducto de condensación mediante una fosfatasa ácida y en último lugar la transformación al iminociclitol que normalmente se realiza en una etapa.
Una etapa crucial en esta síntesis es la preparación de la dihidroxiacetona fosfato (DHAP). La síntesis química de la dihidroxiacetona fosfato se realiza en cinco etapas con rendimientos globales alrededor del 60% (Figura 3) según lo descrito por Jung y col.(Jung, S.-H., Jeong, J.-H., Miller, P., Wong, C.-H., J. Org. Chem. 59 (1994) 7182).
Una aproximación alternativa son los sistemas multienzimáticos para la generación "in situ" de DHAP. Se trata de procedimientos sofisticados que exigen un control muy estricto de las condiciones de reacción y la presencia en la mezcla reaccionante de componentes que pueden dificultar el aislamiento y purificación del producto final (Fessner, W. D., Sinerius, G., Angew. Chem. Int. Ed. 33 (1994) 209; Charmantray, F., El Blidi, L., Gefflaut, T., Hecquet, L., Bolte, J., Lemaire, M., J. Org. Chem. 69 (2004) 9310,Sanchez-Moreno, I., Francisco García-García, J., Bastida, A., García-Junceda, E., Chem. Commun. (2004) 1634).
En la patente (US005329052A) y como esta descrito por Von der Osten y cols. (Von der Osten, C. H., Sinskey, A. J., Barbas, C. F., III, Pederson, R. L., Wang, Y. F., Wong, C. H., J. Am. Chem. Soc. 111 (1989) 3924), se utiliza dihidroxiacetona en presencia de sales de arsénico como sustituto de la DHAP para la adición aldólica enzimática. Si bien el procedimiento se simplifica, la utilización de sales de arsénico no es aplicable debido a su toxicidad y, por tanto, su peligrosidad para la salud y el medio ambiente.
Las síntesis quimo-enzimáticas de iminociclitoles descritas hasta el momento emplean alrededor de 8 etapas a partir del aldehído aceptor: dos de ellas enzimáticas, adición aldólica de DHAP a aldehído e hidrólisis del ester fosfato y 6 etapas químicas para la síntesis de DHAP y formación de los correspondientes iminociclitoles. Si la reacción se realiza con sistemas multienzimáticos esta requiere de dos enzimas más: una para la formación del intermedio clave, DHAP, y otra para regenerar el reactivo de fosforilacióan enzimática. Por tanto son estrategias de muchos pasos o muy sofisticadas y por tanto de limitada aplicación industrial.
Descripción de la invención Breve descripción
Un objeto de la invención lo constituye un procedimiento quimo-enzimático útil para la síntesis de iminociclitoles, en adelante procedimiento de la invención, basado en la utilización de la enzima D-fructosa-6-fosfato aldolasa (FSA) y que comprende las siguientes etapas:
i) adición aldólica, catalizada por la enzima FSA, entre la dihidroxiacetona (DHA) y un aldehído aceptor - con la amina convenientemente protegida con un grupo protector de aminas - de fórmula V, VI ó VII (Figura 4), donde:
-
\vtcortauna R^{1}, y R^{2} pueden ser independientemente uno de otro, iguales o diferentes, H, OH, hidroximetil, metil, etil, butil, pentil, hexil, octil, isopropil, isobutil, isopentil, 2-metilbutil, bencil, fenil opcionalmente sustituidos,
-
\vtcortauna las configuraciones de los carbonos que soportan los restos R^{1} y R^{2} (en la fórmula V) y donde el centro estereogénico de las fórmulas VI y VII pueden ser independientemente uno de otro, iguales o diferentes R o S, y
-
\vtcortauna n: 0 ó 1.
ii) aminación reductora, simple o doble, del aducto de adición obtenido en i) con H_{2} y en presencia de un catalizador metálico.
Una realización particular de la invención lo constituye el procedimiento de la invención donde el iminociclitol es un iminociclitol de fórmula I perteneciente, a título ilustrativo y sin que limite el alcance de la invención, al siguiente grupo: D-fagomina, 1-deoxinojirimicina y derivados N-sustituidos de los mismos, como por ejemplo el N-Butil-D-fagomina (Ejemplos 1, 2 y 3)).
Un objeto particular de la invención lo constituye el procedimiento de la invención donde la enzima FSA utilizada en la etapa i) se corresponde con la FSA de E. coli de SEQ ID NO2.
Otro objeto de la presente invención lo constituye el iminociclitol obtenido por el procedimiento de la invención, a título ilustrativo y sin que limite el alcance de la invención, perteneciente al siguiente grupo: D-fagomina, 1-deoxinojirimicina y derivados N-sustituidos de los mismos, como por ejemplo el N-Butil-D-fagomina (Ejemplos 1, 2 y 3)).
Descripción detallada
La presente invención se basa en que los inventores han observado que es posible la síntesis de iminociclitoles mediante un procedimiento basado en la utilización de la enzima D-fructosa-6-fosfato aldolasa de E. coli (SEQ ID NO2), en adelante FSA, como catalizador biológico para la reacción de adición aldólica entre la dihidroxiacetona y un aldehído. La capacidad sintética de la FSA es conocida por catalizar la adición aldólica entre la DHA y el gliceraldehído-3-fosfato para formar fructosa-6-fosfato (Schürmann, M.; Sprenger, G. A. J. Biol. Chem. (2001) 276 11055. También es conocida su capacidad sintética en adiciones aldólicas de DHA con otros aldehídos tipo glicoaldehído, D-gliceraldehído y D-eritrosa. Sin embargo, en ningún caso, los aductos de adición aldólica catalizados por FSA fueron caracterizados inequívocamente por técnicas espectroscópicas ni la estereoquímica de estos aductos resuelta. Por tanto no podía deducirse a priori que los aldehídos de formula V, VI y VII fueran sustratos o reactivos de la FSA ni que la estereoquímica final de la reacción fuera la adecuada para los productos de esta patente.
Las ventajas derivadas de la utilización de FSA son fundamentalmente cinco:
- la FSA utiliza dihidroxiacetona (DHA) en la reacción de adición aldólica en lugar del fosfato de la dihidroxiacetona (DHAP), eliminándose 5 etapas sintéticas en comparación con la metodología con aldolasas DHAP-dependientes, mencionadas en los antecedentes,
- se elimina el paso de hidrólisis enzimática del grupo fosfato mediante fosfatasa ácida y, por tanto, disminuyen los costos de producción y etapas sintéticas,
- la obtención y purificación de la FSA es simple y de bajo coste,
- como biocatalizador la FSA es estable a 4ºC como mínimo durante siete meses sin perdida de actividad, y
- no utiliza ni genera residuos tóxicos. Como se ha mencionado en los antecedentes, las DHAP-aldolases pueden emplear DHA en presencia de sales de arsénico, producto altamente tóxico y, por tanto, peligroso para la salud y el medio ambiente.
Finalmente, otra ventaja de estos biocatalizadores es que tienen alguna capacidad de controlar la estereoquímica de la adición aldólica y, por tanto, la configuración de los nuevos centros estereogénicos creados depende del enzima y no de los reactivos de la adición aldólica. En resumen, se trata de un procedimiento que ahorra 6 pasos de síntesis, evita la utilización de arsénico y la utilización de enzimas complementarios para la generación de DHAP o para la hidrólisis del ester fosfato del aducto de adición aldólica.
Por lo tanto, un objeto de la invención lo constituye un procedimiento quimo-enzimático útil para la síntesis de iminociclitoles, en adelante procedimiento de la invención, basado en la utilización de la enzima D-fructosa-6-fosfato aldolasa (FSA) y que comprende las siguientes etapas:
i) adición aldólica, catalizada por la enzima FSA, entre la dihidroxiacetona (DHA) y un aldehído aceptor - con la amina convenientemente protegida con un grupo protector de aminas - de fórmula V, VI ó VII (Figura 4), donde:
-
\vtcortauna R^{1}, y R^{2} pueden ser independientemente uno de otro, iguales o diferentes, H, OH, hidroximetil, metil, etil, butil, pentil, hexil, octil, isopropil, isobutil, isopentil, 2-metilbutil, bencil, fenil opcionalmente sustituidos,
-
\vtcortauna las configuraciones de los carbonos que soportan los restos R^{1} y R^{2} (en la fórmula V) y donde el centro estereogénico de las fórmulas VI y VII pueden ser independientemente uno de otro, iguales o diferentes R o S, y
-
\vtcortauna n: 0 ó 1.
ii) aminación reductora, simple o doble, del aducto de adición obtenido en i) con H_{2} y en presencia de un catalizador metálico.
En esta etapa ii) y, en un solo paso, se elimina el grupo que protege la amina (Cbz en los ejemplos realizados) y tiene lugar la aminación reductora intramolecular.
Tal como se utiliza en la presente invención el término iminociclitol se refiere a cualquiera compuesto perteneciente a las fórmulas I, II, III y IV:
1
donde:
-
\vtcortauna R^{1} y R^{2}, son independientemente uno de otro, iguales o diferentes, H, OH, hidroximetil, metil, etil, butil, pentil, hexil, octil, isopropil, isopentil, isobutil, 2-metilbutil, bencil, fenil opcionalmente sustituidos,
-
\vtcortauna R^{3} puede ser, independientemente de los otros, iguales o diferentes, H, hidroximetil, hidroxietil, etil, butil, pentil, hexil, octil, dodecil, isopropil, isobutil, isopentil, 2-metilbutil, bencil, feniletil, y
-
\vtcortauna n: 0 ó 1.
En la fórmula I, las configuraciones de los carbonos que soportan los restos R^{1} y R^{2} pueden ser, independientemente unos de otros, iguales o diferentes, R o S.
En las fórmulas II, III y IV, los centros estereogénicos (*) pueden ser, independientemente unos de otros, iguales o diferentes R o S.
Una realización particular de la invención lo constituye el procedimiento de la invención donde el iminociclitol es un iminociclitol de fórmula I perteneciente, a título ilustrativo y sin que limite el alcance de la invención, al siguiente grupo: D-fagomina, 1-deoxinojirimicina y derivados N-sustituidos de los mismos, como por ejemplo el N-Butil-D-fagomina (Ejemplos 1, 2 y 3)).
Un objeto particular de la invención lo constituye el procedimiento de la invención donde la enzima FSA utilizada en la etapa i) se corresponde con la FSA de E. coli de SEQ ID NO2. La enzima D-fructosa-6-fosfato aldolasa (FSA) utilizada en la presente invención ha sido clonada en la cepa E. coli MC4100, derivada de la cepa de E. coli K-12 (Schürmann, M.; Sprenger, G. A. J. Biol. Chem. (2001) 276 11055; Casadaban, M. J. (1976) J. Mol. Biol. 104, 541-555) y purificada posteriormente. La enzima FSA así utilizada consiste en la forma salvaje existente de forma natural en dicho microorganismo y cuya secuencia de aminoácidos se corresponde con la SEQ ID NO2. Cualquier otra enzima D-fructosa-6-fosfato aldolasa (FSA) salvaje puede ser aislada e identificada en otros microorganismos gracias a la información y procedimientos existentes en el estado de la técnica y a la descripción de la presente invención. Por lo tanto, otro objeto particular de la presente invención lo constituye el procedimiento de invención donde la enzima FSA es una enzima de secuencia análoga a la SEQ ID NO2, aislada de un microorganismo distinto de E. coli.
En el sentido utilizado en esta descripción, el término "análoga" pretende incluir cualquier secuencia de aminoácidos que pueda ser aislada de un microorganismo y que posea la capacidad de adición aldólica entre la dihidroxiacetona (DHA) y un aldehído aceptor de fórmula V, VI ó VII (Figura 4). En general, una secuencia de aminoácidos análoga es sustancialmente homóloga a la secuencia de aminoácidos comentada anteriormente. En el sentido utilizado en esta descripción, la expresión "sustancialmente homóloga" significa que las secuencias de aminoácidos en cuestión tienen un grado de identidad de, al menos, un 30%, preferentemente de, al menos, un 85%, o más preferentemente de, al menos, un 95%.
Otro objeto particular de la invención lo constituye el procedimiento de la invención donde el aldehído es un aldehído de estructura R^{3}COH, donde R^{3} puede ser un grupo hidroximetil, hidroxietil, etil, butil, pentil, hexil, octil, dodecil isopropil, isopentil, 2-metilbutil, bencil o feniletil, y donde se obtienen los correspondientes iminociclitoles de formula I con R^{3} distinto de H.
Otro objeto particular de la invención lo constituye el procedimiento de la invención donde la amina del aminoaldehído de i) está protegida o enmascarada con benciloxicarbonilo (Cbz) (Figura 4).
Otro objeto particular de la invención lo constituye el procedimiento de la invención donde el catalizador metálico utilizado en la etapa ii) pertenece, a título ilustrativo y sin que limite el alcance de la invención, al siguiente grupo: Pd, Pt, Rh y combinaciones de Pd y cianoborohidruro sódico (NaCNBH_{3}).
Otra realización particular de la invención lo constituye el procedimiento de la invención donde el aminoaldehído de i) es un aminoaldehído protegido tipo V perteneciente, a título ilustrativo y sin que limite el alcance de la invención, al siguiente grupo: N-Cbz-3-aminopropanal, y (S)-N-Cbz-3-amino-2-hidroxi-propanal.
La FSA acepta como sustratos tipo V para la adición aldólica a DHA. Con la experiencia desarrollada con aldolasas dependientes de DHAP, (Espelt, L.; Parella, T.; Bujons, J.; Solans, C.; Joglar, J.; Delgado, A.; Clapés, P. Chem.-Eur. J. (2003) 9 4887; Espelt, L.; Bujons, J.; Parella, T.; Calveras, J.; Joglar, J.; Delgado, A.; Clapés, P. Chem.-Eur. J. (2005) 11 1392) es obvio que los aldehídos tipo VI y VII serian también sustratos de la FSA y que directamente podrían ser objeto de adaptación por un experto en la materia.
Otro objeto de la presente invención lo constituye el iminociclitol obtenido por el procedimiento de la invención, a título ilustrativo y sin que limite el alcance de la invención, perteneciente al siguiente grupo: D-fagomina, 1-deoxinojirimicina y derivados N-sustituidos de los mismos, como por ejemplo el N-Butil-D-fagomina (Ejemplos 1, 2 y 3)).
Como se ha comentado anteriormente estos iminociclitoles así obtenidos pueden ser inhibidores de glicosiltransferasas y glicosidasas y pueden ser, por tanto, útiles para la elaboración de composiciones farmcéuticas para el tratamiento de enfermedades humanas.
Descripción de las figuras
Figura 1. - Estereoquímica de las DHAP aldolasas.
Figura 2.- Esquema general de la síntesis quimo-enzimática de iminociclitoles. Nequiv: equivalente sintético de amina. a) DHAP-aldolasa, b) fosfatasa ácida; c) aminación reductora intramolecular con H_{2} en presencia de un catalizador metálico o con un agente reductor.
Figura 3.- Esquema de síntesis del fosfato de la dihidroxiacetona (DHAP). a) HC(OEt)_{3}, H_{2}SO_{4} cat., EtOH, b) Cl(O)P(OPh)_{2}, piridina anhidra, DMAP cat., c) H_{2} 50 psi, PtO_{2} cristalino, EtOH, d) H_{2}O, 65ºC, e) NaOH acuoso hasta pH 7, f) Dowex H^{+}, 65ºC.
Figura 4.- Estructura de los aldehídos que pueden utilizarse en la reacción de adición aldólica catalizada por la FSA (fórmula V, VI y VII) y estructura del benciloxicarbonilo (Cbz).
Figura 5.- Esquema de las reacciones ejemplo de utilización del procedimiento de la invención para la síntesis de D-fagomina, N-butil-D-fagomina y 1-deoxinojirimicina: a) FSA, b) Pd/C H_{2} 50 psi de presión, y c) CH_{3}CH_{2}CH_{2}COH, Pd/C H_{2} 50 psi de presión.
Figura 6.- Estructura de los iminociclitoles, tipo pirrolidinas (1), piperidinas (2), indolizidinas (3), pirrolizidinas (4), nortropanos (5) e iminociclitoles de siete miembros (6) polihidroxilados.
Ejemplos de realización
A continuación se detallan tres ejemplos de utilización de esta metodología en la preparación de D-fagomina, N-butil-D-fagomina y 1-deoxinojirimicina. El esquema general de las reacciones que se detallan a continuación se muestra en la Figura 5.
Ejemplo 1
Síntesis de D-fagomina
Etapa 1ª
Obtención del aducto de adición aldólica
El aldehído, N-Cbz-3-aminopropanal de partida se obtuvo a partir 3-aminopropanol por procedimientos convencionales descritos por Espelt y cols. (Espelt, L., Parella, T., Bujons, J., Solans, C., Joglar, J., Delgado, A., Clapés, P., Chem.-Eur. J. 9 (2003) 4887; Ocejo, M., Vicario, J. L., Badía, D., Carrillo, L., Reyes, E., Synlett (2005) 2110).
En un reactor de 250 mL de capacidad y provisto de agitación orbital se disuelve N-Cbz-3-aminopropanal (2,1 g, 22,9 mmol) en dimetilformamida (40 mL). A esta solución se añadió dihidroxiacetona (2,1 g, 22.9 mmol) y la enzima FSA en polvo crudo (2.09 g, 3445 U) disueltos en tampón bórico-borato 50 mM pH 7 (155 mL). La mezcla se dejó reaccionar bajo agitación orbital (120 rpm) a 4ºC durante 24 horas. En este punto la conversión de la reacción fue mayor del 98%. A continuación, se añadió MeOH (200 mL) al crudo de reacción, apareciendo un precipitado que fue separado por centrifugación. El sobrenadante se purificó por cromatografía líquida en fase reversa. Las fracciones puras se juntaron, se evaporó el disolvente obteniendo un sólido blanco 4.7 g (69% rendimiento, exceso diastereomérico 99%).
La obtención y purificación de la FSA se llevó a cabo a partir del extracto crudo de proteína de la fermentación y disrupción celular mediante un tratamiento térmico a 75ºC durante 40 minutos (Schurmann, M., Sprenger, G. A., J. Biol. Chem. 276 (2001) 11055; Thorell, S., Schurmann, M., Sprenger, G. A., Schneider, G., J. Mol. Biol. 319 (2002) 161; Schurmann, M., Sprenger, G. A., J. Mol. Catal. B-Enzym. 19 (2002) 247). El extracto de proteínas se obtuvo a partir de la cepa E. coli MC4100, derivada de la cepa de E. coli K-12 (Casadaban, M. J. J. Mol. Biol. (1976) 104, 541), que comprende la secuencia codificante de la proteína FSA de E. coli (SEQ ID NO1). La clonación, ligación en el plásmido y transformación en una cepa de E. Coli se describe detalladamente en Schurmann, M., Sprenger, G. A., J. Biol. Chem. 276 (2001) 11055; La proteína FSA así obtenida (SEQ ID NO2) conserva la actividad mientras que las impurezas proteicas precipitan separándose por simple filtración o centrifugación.
Etapa 2ª
Desprotección y aminación reductora intramolecular. El aducto obtenido en la etapa anterior (373 mg, 1.26 mmol) se disolvió en etanol/agua 1:9 (50 mL). La disolución se mantuvo en atmósfera de H_{2} a 50 psi de presión en presencia de paladio sobre carbón (100 mg). En estas condiciones, la eliminación del grupo Cbz y la aminación reductora intramolecular procedieron simultáneamente durante 12 horas. Alternativamente el aducto obtenido en la etapa anterior (373 mg, 1.26 mmol) se disolvió en etanol/agua 1:9 (50 mL) en presencia de cianoborohidruro sódico (NaCNBH_{3}) (50 mg). La disolución se mantuvo en atmósfera de H_{2} a presión atmosférica en presencia de paladio sobre carbón (100 mg). En estas condiciones, la eliminación del grupo Cbz, tuvo lugar por acción del paladio y la aminación reductora intramolecular por la presencia de NaCNBH_{3}. Ambas reacciones procedieron simultáneamente durante 6 horas. A continuación, el crudo de reacción se filtró sobre alúmina desactivada y el filtrado se evaporó obteniéndose un sólido de D-fagomina de 164 mg (89% rendimiento) [\alpha]_{D}^{22} + 20.4 (c 1.0 en H_{2}O); \delta_{H} (500 MHz; D_{2}O; 22ºC) 3.86 (1H, dd, J 11.8 y 3.0, 7-H), 3.66 (1H, dd, J 11.8 y 6.5, 7-H), 3.56 (1H, ddd, J 11.5, 9.0 y 5.0, 4-H), 3.21 (1H t, J 9.5 y 9.5, 3-H), 3.06 (1H, ddd, J 12.9, 4.4 y 2.3, 6-H), 2.68 (1H, dt, J 12.94, 12.92 y 2.70, 6-H), 2.61 (1H, ddd, J 9.68, 6.44 y 2.97, 2-H), 2.01 (1H, tdd, J 13.0, 4.9, 2.5 y 2.5, 5-H) y 1.48 ppm (1H, dq, J 13.0, 12,9, 11,5 y 4.5, 5-H); \delta_{C} (101 MHz; D_{2}O; 22ºC) 72.9, 72.7, 61.1, 60.9, 42.6 y 32.1.
Ejemplo 2
Síntesis de N-butil-D-fagomina
Etapa 1ª
Obtención del aducto de adición aldólica como en el apartado anterior
Etapa 2ª
Desprotección y doble aminación reductora. Butanal (54 mg, 0,74 mmol) y el aducto de la etapa anterior (150 mg, 0.51 mmol) se disolvieron en etanol/agua 7:3 (10 mL). A esta disolución se añadieron 50 mg de paladio sobre carbón y la mezcla se dejó reaccionar bajo H_{2} a 50 psi durante 12 horas. A continuación se procedió de manera similar al ejemplo anterior, y después de purificar el crudo por columna de sílica empleando mezclas de MeOH/CHCl_{3} como eluyentes, se obtuvo un sólido de N-butil-D-fagomina de 52 mg (52% de rendimiento). [\alpha]_{D}^{22} = -24.5 (c 1.2 en MeOH); \delta_{H} (500 MHz, D_{2}O, 22ºC) 3.90 (1H, dd, J 12.7, y 2.4, 7-H), 3.82 (1H, dd, J 12.7 y 2.9, 7-H), 3.45 (1H, ddd, J 11.5, 9.1 y 5.1, 4-H,), 3.30 (1H, t, J 9.4, 3-H), 2.90 (1H, td, J 12.2, 3.5 y 3.5, 6-H), 2.73 (1H, ddd, J 13.3, 11.2 y 5.4, 8-H), 2.50 (1H, ddd, J 13.3, 11.1 y 5.2, 8-H), 2.36 (1H, dt, J 12.6, 12.6 y 2.4, 6-H), 2.16 (1H, td, J 9.8, 2.6 y 2.6 Hz, 2-H), 1.92 (1H tdd, J 12.7, 5.0, 2.5 y 2.5, 5-H), 1.55-1.35 (3H, m, 5-H y 2 x 9-H), 1.30-1.21 (2H, m, 2 x 10-H) y 0.88 (3H, t, J 7.4 y 7.4, 11-Me); \delta_{C} (101 MHz, D_{2}O, 22ºC) 73.2, 72.0, 65.8, 58.1, 52.2, 49.1, 30.5, 25.6, 20.4 y 13.3.
Ejemplo 3
Síntesis de 1-deoxinojirimicina
Etapa 1ª
Obtención del aducto de adición aldólica
El aldehído, (S)-N-Cbz-3-amino-2-hidroxi-propanal de partida se obtuvo a partir (S)-3-amino-2-hidroxi-propanol por un procedimiento descrito por De Luca y cols. (De Luca, L., Giacomelli, G., Porcheddu, A., Org. Lett. 3 (2001) 3041).
El procedimiento fue equivalente al descrito en el Ejemplo 1 con la diferencia de que en este caso la reacción se llevó a cabo a 25ºC.
Etapa 2ª
Desprotección y aminación reductora intramolecular. Se procedió de manera similar al Ejemplo 1 obteniéndose un sólido blanco de 1-deoxinojirimicina de 164 mg (89% rendimiento) [\alpha]_{D}^{22} + 48.0 (c 1.0 en H_{2}O).
1H NMR (500 MHz, D_{2}O \delta ppm 3.74 (dd, J = 11.8, 3.00 Hz, 1H), 3.56 (dd, J = 11.9, 6.2 Hz, 1H), 3.4 (ddd, J = 10.96, 9.06, 5.25 Hz, 1H), 3.24 (t, J = 9.1, 9.1 Hz, 1H), 3.18 (t, J = 9.4, 9.4 Hz, 1H), 3.1 (dd, J = 12.3, 5.2 Hz, 1H), 2.54 (hept, J =9.4, 6.0, 3.0,1 H), 2.43 (dd, J = 12.3, 11.0 Hz, 1H).
<110> CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTÍFICAS
\hskip1cm
GreenLaneBD 
\vskip0.400000\baselineskip
<120> PROCEDIMIENTO QUIMO-ENZIMÁTICO PARA LA SÍNTESIS DE IMINOCICLITOLES E IMINOCICLITOLES ASÍ OBTENIDOS
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<130> Iminociclitol
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 2
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<170> PatentIn version 3.3
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 663
\vskip0.400000\baselineskip
<212> DNA
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)..(663)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 1
\vskip1.000000\baselineskip
100
101 
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 2
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 220
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 2
102

Claims (13)

1. Procedimiento quimo-enzimático útil para la síntesis de iminociclitoles caracterizado porque se basa en la utilización de la enzima D-fructosa-6-fosfato aldolasa (FSA) y porque comprende las siguientes etapas:
i) adición aldólica, catalizada por la enzima FSA, entre la dihidroxiacetona (DHA) y un aldehído aceptor - con la amina convenientemente protegida con un grupo protector de aminas - de fórmula V, VI ó VII, donde:
-
\vtcortauna R^{1}, y R^{2} pueden ser independientemente uno de otro, iguales o diferentes, H, OH, hidroximetil, metil, etil, butil, pentil, hexil, octil, isopropil, isobutil, isopentil, 2-metilbutil, bencil, fenil opcionalmente sustituidos,
-
\vtcortauna las configuraciones de los carbonos que soportan los restos R^{1} y R^{2} (en la fórmula V) y donde el centro estereogénico de las fórmulas VI y VII pueden ser independientemente uno de otro, iguales o diferentes R o S, y
-
\vtcortauna n: 0 ó 1; y
ii) aminación reductora, simple o doble, del aducto de adición obtenido en i) con H_{2} y en presencia de un catalizador metálico.
2. Procedimiento según la reivindicación 1 caracterizado porque el iminociclitol pertenece a las fórmulas I, II, III y IV:
\vskip1.000000\baselineskip
2
donde:
-
\vtcortauna R^{1} y R^{2}, son independientemente uno de otro, iguales o diferentes, H, OH, hidroximetil, metil, etil, butil, pentil, hexil, octil, isopropil, isopentil, isobutil, 2-metilbutil, bencil, fenil opcionalmente sustituidos,
-
\vtcortauna R^{3} puede ser, independientemente de los otros, iguales o diferentes, H, hidroximetil, hidroxietil, etil, butil, pentil, hexil, octil, dodecil, isopropil, isobutil, isopentil, 2-metilbutil, bencil, feniletil, y
-
\vtcortauna n: 0 ó 1.
3. Procedimiento según la reivindicación 2 caracterizado porque en el iminociclitol de fórmula I, las configuraciones de los carbonos que soportan los restos R^{1} y R^{2} pueden ser, independientemente unos de otros, iguales o diferentes, R o S.
4. Procedimiento según la reivindicación 2 caracterizado porque en el iminociclitol fórmula II, III o IV, los centros estereogénicos (*) pueden ser, independientemente unos de otros, iguales o diferentes R o S.
5. Procedimiento según la reivindicación 1 caracterizado porque el iminociclitol es un iminociclitol de fórmula I perteneciente al siguiente grupo: D-fagomina, 1-deoxinojirimicina y derivados N-sustituidos de los mismos, como por ejemplo el N-Butil-D-fagomina.
6. Procedimiento según la reivindicación 1 caracterizado porque la enzima FSA utilizada en la etapa i) se corresponde con la FSA de E. coli de SEQ ID NO2.
7. Procedimiento según la reivindicación 1 caracterizado porque la enzima FSA es una enzima de secuencia análoga a la SEQ ID NO2 y aislada de un microorganismo distinto de E. coli.
8. Procedimiento según la reivindicación 1 caracterizado porque la amina del aminoaldehído de i) está protegida o enmascarada con benciloxicarbonilo (Cbz).
9. Procedimiento según la reivindicación 1 caracterizado porque el aldehído es un aldehído de estructura R^{3}COH, donde R^{3} puede ser un grupo hidroximetil, hidroxietil, etil, butil, pentil, hexil, octil, dodecil isopropil, isopentil, 2-metilbutil, bencil o feniletil, y donde se obtienen los correspondientes iminociclitoles de formula I con R^{3} distinto de H.
10. Procedimiento según la reivindicación 1 caracterizado porque el aminoaldehído de i) es un aminoaldehído protegido tipo V perteneciente al siguiente grupo: N-Cbz-3-aminopropanal, y (S)-N-Cbz-3-amino-2-hidroxi-propanal.
11. Procedimiento según la reivindicación 1 caracterizado porque el catalizador metálico utilizado en la etapa ii) pertenece al siguiente grupo: Pd, Pt, Rh y combinaciones de Pd y cianoborohidruro sódico (NaCNBH_{3}).
12. Iminociclitol caracterizado porque se obtiene por el procedimiento según las reivindicaciones 1 a la 11.
13. Iminociclitol según la reivindicación 12 caracterizado porque pertenece al siguiente grupo: D-fagomina, 1-deoxinojirimicina y derivados N-sustituidos de los mismos, como por ejemplo el N-Butil-D-fagomina.
ES200602274A 2006-09-01 2006-09-01 Procedimiento quimo-enzimatico para la sintesis de iminociclitoles e iminociclitoles asi obtenidos. Expired - Fee Related ES2298057B1 (es)

Priority Applications (13)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ES200602274A ES2298057B1 (es) 2006-09-01 2006-09-01 Procedimiento quimo-enzimatico para la sintesis de iminociclitoles e iminociclitoles asi obtenidos.
CNA200780036851XA CN101522905A (zh) 2006-09-01 2007-08-30 制备亚氨基环多醇的酶化学方法
DK07803071.5T DK2061892T3 (da) 2006-09-01 2007-08-30 Kemoenzymatisk fremgangsmåde til fremstilling af imincyclitoler
DE602007004675T DE602007004675D1 (de) 2006-09-01 2007-08-30 Minocyclitolen
AU2007291195A AU2007291195B2 (en) 2006-09-01 2007-08-30 Chemoenzymatic process for the preparation of iminocyclitols
ES07803071T ES2340967T3 (es) 2006-09-01 2007-08-30 Procedimiento quimioenzimatico para la preparacion de iminociclitoles.
PCT/EP2007/059062 WO2008025826A1 (en) 2006-09-01 2007-08-30 Chemoenzymatic process for the preparation of iminocyclitols
CA2661772A CA2661772C (en) 2006-09-01 2007-08-30 Chemoenzymatic process for the preparation of iminocyclitols
EP07803071A EP2061892B1 (en) 2006-09-01 2007-08-30 Chemoenzymatic process for the preparation of iminocyclitols
PL07803071T PL2061892T3 (pl) 2006-09-01 2007-08-30 Chemiczno-enzymatyczny sposób wytwarzania iminocyklitoli
JP2009526109A JP5145338B2 (ja) 2006-09-01 2007-08-30 イミノシクリトールの調製のための化学酵素的方法
AT07803071T ATE457036T1 (de) 2006-09-01 2007-08-30 Chemoenzymatisches verfahren zur herstellung von iminocyclitolen
US12/439,485 US8288132B2 (en) 2006-09-01 2007-08-30 Chemoenzymatic process for the preparation of iminocyclitols

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ES200602274A ES2298057B1 (es) 2006-09-01 2006-09-01 Procedimiento quimo-enzimatico para la sintesis de iminociclitoles e iminociclitoles asi obtenidos.

Publications (2)

Publication Number Publication Date
ES2298057A1 true ES2298057A1 (es) 2008-05-01
ES2298057B1 ES2298057B1 (es) 2009-08-07

Family

ID=38753525

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES200602274A Expired - Fee Related ES2298057B1 (es) 2006-09-01 2006-09-01 Procedimiento quimo-enzimatico para la sintesis de iminociclitoles e iminociclitoles asi obtenidos.
ES07803071T Active ES2340967T3 (es) 2006-09-01 2007-08-30 Procedimiento quimioenzimatico para la preparacion de iminociclitoles.

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES07803071T Active ES2340967T3 (es) 2006-09-01 2007-08-30 Procedimiento quimioenzimatico para la preparacion de iminociclitoles.

Country Status (12)

Country Link
US (1) US8288132B2 (es)
EP (1) EP2061892B1 (es)
JP (1) JP5145338B2 (es)
CN (1) CN101522905A (es)
AT (1) ATE457036T1 (es)
AU (1) AU2007291195B2 (es)
CA (1) CA2661772C (es)
DE (1) DE602007004675D1 (es)
DK (1) DK2061892T3 (es)
ES (2) ES2298057B1 (es)
PL (1) PL2061892T3 (es)
WO (1) WO2008025826A1 (es)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012007577A1 (en) 2010-07-16 2012-01-19 Bioglane, S.L.N.E. A buckwheat extract enriched in d-fagomine
CN102875450B (zh) * 2012-10-25 2015-04-08 上海丝绸集团股份有限公司 一种从桑叶中提取制备1-脱氧野尻霉素的工艺方法
EP3388518A1 (en) * 2017-04-10 2018-10-17 Consejo Superior de Investigaciones Cientificas (CSIC) Fructose-6-phosphate aldolase variants for aldol carboligations

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4266025A (en) * 1978-12-12 1981-05-05 Bayer Aktiengesellschaft Production of N-substituted derivatives of 1-desoxy-nojirimycin

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2077443T3 (es) 1991-12-05 1995-11-16 Givaudan Roure Int Pinanos.
JP2000219632A (ja) 1999-01-28 2000-08-08 Toyotama Koryo Kk カロリー軽減剤
AU2003277495A1 (en) 2002-10-08 2004-05-13 Meiji Dairies Corporation Food with lowered glycemic index
JP3839832B2 (ja) 2005-03-29 2006-11-01 弘道 山下 食欲抑制剤およびダイエット用空気調整装置

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4266025A (en) * 1978-12-12 1981-05-05 Bayer Aktiengesellschaft Production of N-substituted derivatives of 1-desoxy-nojirimycin

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
C. H. VON DER OSTEN et al., "Use of a recombinant bacterial fructose-1,6-diphosphate aldolase in aldol reactions: Preparative synthesis of 1-deoxynojirimycin, 1-deoxymannojirimycin, 1,4-dideoxy-1,4-imino-D-arabinitol, and fagomine", JACS, 1989, vol. 111, páginas 3924-3927. *
M. L. MITCHELL et al., "Synthesis and evaluation of six-membered GDP-iminocyclitol", Tetrahedron Lett., 2002, vol. 43, nº 32, páginas 5691-5693. *
R. L. PEDERSON et al., "{}A combined chemical and enzymatic procedure for the synthesis of 1-deoxynojirimycin and 1-deoxymannojirimycin", Tetrahedron Lett., 1988, vol. 29, nº 37, páginas 4645-4648. *
R. L. PEDERSON et al., "A combined chemical and enzymatic procedure for the synthesis of 1-deoxynojirimycin and 1-deoxymannojirimycin", Tetrahedron Lett., 1988, vol. 29, nº 37, páginas 4645-4648. *
R. L. PEDERSON et al., "Enzymatic aldol condensation as a route to heterocycles: Synthesis of 1,4-dideoxy-1,4-imino-D- arabinitol, fagomine, 1-deoxynojirimycin and 1-deoxymannojirimycin", Heterocycles, 1989, vol. 28, nº 1, páginas 477-480. *

Also Published As

Publication number Publication date
PL2061892T3 (pl) 2010-08-31
AU2007291195B2 (en) 2012-05-03
US20100009417A1 (en) 2010-01-14
AU2007291195A1 (en) 2008-03-06
JP2010501198A (ja) 2010-01-21
EP2061892A1 (en) 2009-05-27
CA2661772A1 (en) 2008-03-06
JP5145338B2 (ja) 2013-02-13
CA2661772C (en) 2016-03-22
US8288132B2 (en) 2012-10-16
DK2061892T3 (da) 2010-05-25
ES2340967T3 (es) 2010-06-11
EP2061892B1 (en) 2010-02-03
ES2298057B1 (es) 2009-08-07
WO2008025826A1 (en) 2008-03-06
ATE457036T1 (de) 2010-02-15
DE602007004675D1 (de) 2010-03-25
CN101522905A (zh) 2009-09-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Mlynarski et al. Organocatalytic synthesis of carbohydrates
Dragutan et al. Targeted drugs by olefin metathesis: piperidine-based iminosugars
Calveras et al. Chemoenzymatic synthesis and inhibitory activities of hyacinthacines A1 and A2 stereoisomers
Garcı́a-Junceda et al. Enzymes in the synthesis of bioactive compounds: the prodigious decades
Samland et al. The transaldolase family: new synthetic opportunities from an ancient enzyme scaffold
Forró et al. Recent lipase-catalyzed hydrolytic approaches to pharmacologically important β-and γ-amino acids
M Palomo et al. Enzymatic desymmetrization of prochiral molecules
EP3386955B1 (en) Intermediates for the preparation of sacubitril and their preparation
Roldán et al. Aldolase‐catalyzed asymmetric synthesis of N‐heterocycles by addition of simple aliphatic nucleophiles to aminoaldehydes
EP2247739B1 (en) ((2s,4r)-4,6-dihydroxytetrahydro-2h-pyran-2-yl)methyl carboxylate and process for its production employing a 2-deoxyribose-5-phosphate aldolase (dera)
ES2298057B1 (es) Procedimiento quimo-enzimatico para la sintesis de iminociclitoles e iminociclitoles asi obtenidos.
Liu et al. A biocatalytic approach to capuramycin analogues by exploiting a substrate permissive N-transacylase CapW
Wang et al. Enzymatic synthesis of phosphocarnitine, phosphogabob and fosfomycin
Laurent et al. Achiral hydroxypyruvaldehyde phosphate as a platform for multi-aldolases cascade synthesis of diuloses and for a quadruple acetaldehyde addition catalyzed by 2-deoxyribose-5-phosphate aldolases
Clapés Enzymatic CC bond formation
Petersen et al. Tandem asymmetric CC bond formations by enzyme catalysis
CN109180691B (zh) 一种c3-芳香型吡咯并吲哚类生物碱及其合成方法
KR100722155B1 (ko) 효소적 방법에 의한 광학활성 2-클로로만델릭산 에스테르와 2-클로로만델릭산의 제조 방법
EA014980B1 (ru) Энзиматический метод разделения рацемической 3-арил-4-аминомасляной кислоты
US20170267636A1 (en) A process for synthesis of piperidine alkaloids
Felluga et al. Chemo‐Enzymatic Synthesis and Determination of the Absolute Configuration of Both Enantiomers of Methyl trans‐5‐Oxo‐2‐pentylpyrrolidine‐3‐carboxylate Precursors of the Aza Analogues of (+)‐and (−)‐Methylenolactocin
Wohlgemuth Industrial asymmetric biocatalysis
Bertoli et al. Chemoenzymatic synthesis of optically active α-methylene-γ-carboxy-γ-lactams and γ-lactones
Hilvert Stereoselective reactions with catalytic antibodies
ES2408104B1 (es) Epóxidos y aziridinas de ciclohexano relacionados estructuralmente con la galactosa como inhibidores selectivos de galactosidasas.

Legal Events

Date Code Title Description
EC2A Search report published

Date of ref document: 20080501

Kind code of ref document: A1

FG2A Definitive protection

Ref document number: 2298057B1

Country of ref document: ES

FD2A Announcement of lapse in spain

Effective date: 20180912