ES2291982T3 - Derivados de ciclopentilo. - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula I en la que X es metileno, oxígeno, azufre, o un grupo NR7; R1 es una cadena de alquilo C1-C8 o alquenileno C3-C8 o alquinileno C3-C8 lineal o ramificada, opcionalmente sustituida con CF3, fenilo, fenoxi o naftilo, los anillos aromáticos opcionalmente sustituidos por uno o más grupos alquilo C1-C4, halógenos, trifluorometilo, hidroxi o alcoxi C1-C4; R2, R3 son independientemente hidrógeno, una cadena de alquilo C1-C3, grupos halógeno, trifluorometilo, hidroxi o alcoxi C1-C4; R4, R5, R6, R7 son independientemente hidrógeno o alquilo C1-C6; y sus sales farmacéuticamente aceptables.

Description

Derivados de ciclopentilo.

\global\parskip0.900000\baselineskip

Esta invención se refiere a derivados de ciclopentilo novedosos de la siguiente fórmula general (I)

1

en la que

X

es metileno, oxígeno, azufre, o un grupo NR^{7};

R^{1}

es una cadena de alquilo C_{1}-C_{8} o alquenileno C_{3}-C_{8} o alquinileno C_{3}-C_{8} lineal o ramificada, opcionalmente sustituida con CF_{3}, fenilo, fenoxi o naftilo, los anillos aromáticos opcionalmente sustituidos por uno o más grupos alquilo C_{1}-C_{4}, halógenos, trifluorometilo, hidroxi o alcoxi C_{1}-C_{4};

R^{2}, R^{3} son independientemente hidrógeno, una cadena de alquilo C_{1}-C_{3}, grupos halógeno, trifluorometilo, hidroxi o alcoxi C_{1}-C_{4};

R^{4}, R^{5}, R^{6}, R^{7} son independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6};

y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, que son activas como moduladores de canales de sodio y/o de calcio y por lo tanto útiles en prevenir, aliviar y curar un amplio intervalo de patologías, incluyendo, pero no limitadas a, enfermedades neurológicas, psiquiátricas, cardiovasculares, inflamatorias, oftálmicas, urológicas, metabólicas y gastrointestinales, donde los mecanismos anteriores se han descrito como jugando un papel patológico.

Antecedentes de la invención Antecedente Químico

El documento DE 2624290 describe ácidos 2-aminocicloalcanocarboxílicos y sus derivados con la fórmula general

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en la que R^{1} es un grupo hidroxilo o un grupo NR^{4}R^{5}, R^{2} y R^{3} son hidrógeno, alquilo, aralquilo, arilo o acilo, R^{4} y R^{5} son hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{8}, aralquilo, arilo o heteroarilo, y su uso como analgésicos, antipiréticos, y anestésicos.

Antecedente Biológico

Es bien conocido que los canales de sodio juegan un papel importante en la red neuronal transmitiendo impulsos eléctricos rápidamente por todas las células y redes celulares, coordinando por lo tanto procesos superiores que varían de locomoción a cognición. Estos canales son proteínas transmembrana grandes, las cuales son capaces de cambiar entre diferentes estados para permitir permeabilidad selectiva para iones de sodio. Para este procedimiento se necesita una acción potencial para despolarizar la membrana, y así estos canales son de apertura regulada por voltaje. Se ha desarrollado en los últimos años una comprensión mucho mayor de los canales de sodio y los fármacos que interactúan con ellos.

Ha llegado a estar claro que un número de fármacos que tienen un mecanismo de acción desconocido actúan realmente modulando conductancia de los canales de sodio, incluyendo anestésicos locales, antiarrítmicos de clase I y anticonvulsivantes. Los bloqueantes de canales de sodio neuronales han encontrado aplicación con su uso en el tratamiento de epilepsia (fenitoína y carbamacepina), trastorno bipolar (lamotrigina), prevenir neurodegeneración, y en reducir dolor neuropático. Diversos fármacos antiepilépticos que estabilizan excitabilidad neuronal son efectivos en dolor neuropático (gabapentina).

Además, se ha observado también un incremento en expresión o actividad de canales de calcio en varios modelos de dolor inflamatorio, sugiriendo un papel de canales de sodio en dolor inflamatorio.

Los canales de calcio son proteínas multisubunidad, que atraviesan la membrana que permiten la entrada controlada de iones de calcio dentro de las células desde el fluido extracelular. Comúnmente, los canales de calcio son dependientes de voltaje y se refieren como canales de calcio sensibles a voltaje (VSCC). Los VSCC se encuentran por todo el sistema nervioso de los mamíferos, donde regulan actividades variadas tales como excitabilidad celular, liberación de transmisores, metabolismo intracelular, actividad neurosecretora y expresión génica. Todas las células "excitables" de los animales, tales como neuronas del sistema nervioso central (SNC), células nerviosas periféricas, y células musculares, incluyendo aquellas de músculos esqueléticos, músculos cardiacos y músculos lisos venosos y arteriales, tienen canales de calcio dependientes de voltaje. Los canales de calcio tienen un papel central en regular niveles de iones de calcio intracelulares que son importantes para la viabilidad celular y la función celular. Las concentraciones de los iones de calcio intracelulares están implicadas en un número de procesos vitales en animales, tales como liberación de neurotransmisores, contracción muscular, actividad de marcapasos, y secreción de hormonas. Se cree que los canales de calcio son relevantes en ciertos estados morbosos. Un número de compuestos útiles en tratar diversas enfermedades en mamíferos, incluyendo humanos, se piensa que ejercen sus efectos benéficos modulando funciones de canales de calcio dependientes de voltaje presentes en músculo cardiaco y/ músculo liso vascular. Los compuestos con actividad contra canales de calcio se han implicado también para el tratamiento de dolor. En particular los canales de calcio de tipo N (Cav2.2), responsables de la regulación de neurotransmisores, se piensa que juegan un papel en transmisión nociceptiva, debido tanto a su distribución tisular así como de los resultados de varios estudios farmacológicos.

Esta hipótesis se ha validado en la clínica por Zinocotide, un péptido derivado del veneno del caracol marino, Conus magus. Una limitación en el uso terapéutico de este péptido es que se tiene que administrar intratecalmente en humanos (Bowersox S. S. y Luther R. Toxicon, 1998, 36, 11, 1651-1658).

Todos juntos estos hallazgos indican que los compuestos con bloqueo de canal de sodio y/o de calcio tienen un alto potencial terapéutico en prevenir, aliviar y curar un amplio intervalo de patologías, incluyendo enfermedades neurológicas, psiquiátricas, cardiovasculares, urológicas, metabólicas y gastrointestinales, donde los mecanismos anteriores se han descrito como jugando un papel patológico.

Hay muchos artículos y patentes los cuales describen moduladores o antagonistas de canales de sodio y/o de canales de calcio para el tratamiento o modulación de una plétora de trastornos, tales como su uso como anestésicos locales, antiarrítmicos, antieméticos, antimaniacodepresivos, agentes para el tratamiento de depresión unipolar, enfermedades cardiovasculares, incontinencia urinaria, diarrea, inflamación, epilepsia, afecciones neurodegenerativas, muerte de células nerviosas, anticonvulsivantes, dolor neuropático, migraña, hiperalgesia e inflamación agudas, enfermedad renal, alergia, asma, broncoespasmo, dismenorrea, espasmo esofágico, glaucoma, trastornos del tracto urinario, trastornos de motilidad intestinal, parto prematuro, obesidad. Se muestra más adelante una lista grandemente incompleta.

Una visión general de la técnica previa extensiva y concienzuda se comunica en el documento WO 03/057219 (y referencias en él); una selección adicional de la técnica previa se comunica en las siguientes referencias: Alzheimer, C. Adv. Exp. Med. Biol. 2002, 513, 161-181; Vanegas, H.; Schaible, H. Pain 2000, 85, 9-18; Patente de los Estados Unidos 5.051.403; Patente de los Estados Unidos 5.587.454; Patente de los Estados Unidos 5.863.952; Patente de los Estados Unidos 6.011.035; Patente de los Estados Unidos 6.117.841; Patente de los Estados Unidos 6.362.174; Patente de los Estados Unidos 6.380.198; Patente de los Estados Unidos 6.420.383; Patente de los Estados Unidos 6.458.781; Patente de los Estados Unidos 6.472.530, Patente de los Estados Unidos 6.518.288; Patente de los Estados Unidos 6.521.647; documento WO 97/10210; documento WO 03/018561.

Descripción de la invención

La presente invención se refiere a compuestos de fórmula I

3

en la que

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X

es metileno, oxígeno, azufre, o un grupo NR^{7};

R^{1}

es una cadena de alquilo C_{1}-C_{8} o alquenileno C_{3}-C_{8} o alquinileno C_{3}-C_{8} lineal o ramificada, opcionalmente sustituida con CF_{3}, fenilo, fenoxi o naftilo, los anillos aromáticos opcionalmente sustituidos por uno o más grupos alquilo C_{1}-C_{4}, halógenos, trifluorometilo, hidroxi o alcoxi C_{1}-C_{4};

R^{2}, R^{3} son independientemente hidrógeno, una cadena de alquilo C_{1}-C_{3}, grupos halógeno, trifluorometilo, hidroxi o alcoxi C_{1}-C_{4};

R^{4}, R^{5}, R^{6}, R^{7} son independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6};

y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Los compuestos de la invención son útiles como moduladores de canales de sodio y/o de calcio.

Los sustituyentes R^{1}-X, R^{2} y R^{3} en el anillo de fenilo pueden estar en cualquier posición. Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula I incluyen sales de adición de ácidos con ácidos inorgánicos, por ejemplo clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, y ácidos fosfóricos u orgánicos, por ejemplo ácido acético, propiónico, benzoico, cinnámico, mandélico, salicílico, glicólico, láctico, oxálico, málico, maleico, malónico, fumárico, tartárico, cítrico, y similares.

Los compuestos preferidos de la invención son los compuestos de fórmula I, en los que X es oxígeno, metileno, NH o NCH_{3}, R^{1} es cadena de alquilo C_{1}-C_{8}, opcionalmente sustituida con grupo CF_{3}, fenilo o fenoxi, donde el anillo aromático en R^{1} está opcionalmente sustituido por uno o dos grupos halógeno o metoxi o trifluorometilo, R^{2} y R^{3} son hidrógeno, metilo, metoxi, flúor, cloro, o bromo, R^{4}, R^{5} y R^{6} son hidrógeno o metilo.

Ejemplos de compuestos específicos de la invención son:

amida del ácido 2-(2-benciloxi-bencilamino)-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-(3-benciloxi-bencilamino)-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-(4-benciloxi-bencilamino)-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[2-(2-fluoro-benciloxi)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[3-(2-fluoro-benciloxi)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido cis-2-[3-(2-fluoro-benciloxi)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[4-(2-fluoro-benciltio)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[4-(2-fluoro-bencilamino)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[2-(2-fluoro-benciloxi)-3-fluoro-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3-fluoro-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[2-(2-fluoro-benciloxi)-3-cloro-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido (2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3-cloro-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido (2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3-bromo-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido (2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-2-metoxi-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido (2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3-metoxi-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3,5-dimetil-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido cis-2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3,5-dimetil-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

y todos los estereoisómeros y/o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Los compuestos de la invención y las sales de la misma se pueden obtener mediante un procedimiento que comprende:

a) hacer reaccionar compuestos de fórmula II

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4

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en la que R^{1}, R^{2}, R^{3} y X son como se definen anteriormente

con compuestos de fórmula III, en presencia de un agente reductor

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5

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en la que R^{4}, R^{5} y R^{6} como se definen previamente obteniéndose así un compuestos de fórmula I; o

b) hacer reaccionar compuestos de fórmula IV

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6

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en la que R^{1}, R^{2}, R^{3} y X son como se definen anteriormente e Y es un átomo de halógeno o un grupo O-EWG, donde el EWG quiere decir un grupo que retira electrones, como por ejemplo grupos mesilo, tosilo o trifluoroacetilo, capaces de transformar el oxígeno al cual están unidos, en un buen grupo saliente

con compuestos de fórmula III obteniendo así un compuesto de fórmula I; o

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c) hacer reaccionar un compuesto de fórmula Ia

7

en la que R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{5}, R^{6} y X son como se definen anteriormente, con compuestos de fórmula V o VI

R^{4}Y

\hskip4cm

R^{8}CHO

\hskip4.8cm

V

\hskip4.7cm

VI

en las que Y y R^{4} son como se definen anteriormente; y R^{8} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{5}, obteniéndose así un compuesto de la invención en el cual R^{4} es alquilo C_{1}-C_{6}; y, si se desea, convertir un compuesto de la invención en otro compuesto de la invención y/o, si se desea, convertir un compuesto de la invención en una sal farmacéuticamente aceptable y/o, si se desea, convertir una sal en un compuesto libre y/o, si se desea, separar una mezcla de isómeros de compuestos de la invención en un isómero único.

Los compuestos II, III, IV, V, y VI son compuestos comercialmente disponibles o se preparan a partir de compuestos comercialmente disponibles usando procedimientos bien conocidos.

Las reacciones de los compuestos de fórmula II con compuestos de fórmula III y de compuestos de fórmula Ia con compuestos de fórmula VI para dar los compuestos de fórmula I son una aminación reductora la cual se puede llevar a cabo de acuerdo con procedimientos bien conocidos. De acuerdo con una realización preferida de la invención, se puede llevar a cabo bajo atmósfera de nitrógeno, en un disolvente orgánico adecuado, tal como un alcohol, por ejemplo un alcanol inferior, en particular metanol, o en acetonitrilo, o en tetrahidrofurano, a una temperatura que varía de aproximadamente 0ºC a aproximadamente 80ºC, en presencia de un agente reductor, siendo el más apropiado borohidruro de sodio o cianoborohidruro de sodio. Ocasionalmente se pueden añadir isopropilato de titanio IV y filtros moleculares a la mezcla de reacción para facilitar la reacción.

En un compuesto de fórmula IV y V el halógeno es preferiblemente bromo o yodo. Las reacciones de alquilación de un compuesto de fórmula IV con un compuesto de fórmula III y de un compuesto de fórmula Ia con un compuesto de fórmula V se pueden llevar a cabo en un disolvente orgánico adecuado, tal como un alcohol, por ejemplo metanol, etanol o isopropanol, en particular en etanol, a una temperatura que varía de aproximadamente 0ºC a aproximadamente 50ºC.

Cuando en los compuestos de la presente invención y en los productos intermedios de los mismos, están presentes grupos, los cuales necesitan protegerse antes de someterse a las reacciones ilustradas anteriormente, pueden protegerse antes de hacerse reaccionar y después desprotegerse de acuerdo con procedimientos bien conocidos.

Farmacología

Los compuestos de la invención manifiestan afinidades por los sitios de unión a canales de calcio y/o de sodio como se demuestra usando radioligandos selectivos en estudios de unión in vitro.

Los compuestos de acuerdo con la invención son bloqueantes de los canales de sodio dependientes de voltaje y/o de los canales de calcio dependientes de voltaje. Estos compuestos desplazan por lo tanto 3H-batracotoxina (BTX) con una afinidad alta desde el sitio de unión en el canal de sodio, con la CI_{50} en el intervalo de \muM bajo o en el intervalo sub \muM. De forma similar los compuestos desplazan 3H-nitrendipina a partir del sitio de unión en el canal de calcio, con la CI_{50} en el intervalo de \muM bajo o más usualmente en el intervalo sub \muM igual que inhiben influjo de calcio inducido por canales de calcio por medio de despolarización celular.

Tales sustancias presentan "dependencia de uso" cuando los canales de sodio están bloqueados es decir el bloqueo máximo de los canales de sodio se logra sólo después de estimulación repetida del canal de sodio. Consecuentemente, las sustancias se unen preferiblemente a canales de sodio los cuales se activan de forma múltiple. Como un resultado las sustancias son capaces de actividad preferentemente en aquellas de las regiones del cuerpo las cuales están patológicamente sobreestimuladas, como se ilustra mediante experimentos de pinzamiento zonal de membrana (W. A. Catteral, Trends Pharmacol. Sci., 8, 57-65; 1987) los cuales muestran que los compuestos de acuerdo con la invención bloquean el canal de sodio estimulado eléctricamente en una manera "dependiente de usuario".

Como una consecuencia de estos mecanismos los compuestos de la invención están activos in vivo cuando se administran oralmente en el intervalo de 0,1 a 100 mg/kg en un intervalo amplio de modelos animales y en particular en la prueba de MES de convulsiones inducidas eléctricamente, en el modelo de formalina de dolor persistente y en el modelo de carragenina de inflamación.

El bloqueo dependiente de voltaje de los canales de calcio y/o de sodio de los compuestos de la invención se ha mostrado mediante ensayo de influjo de calcio de fluorescencia y mediante estudios electrofisiológicos.

La actividad moduladora de canales de calcio de tipo N de los derivados de ciclopentilo de fórmula general I se midió a través de un ensayo de afluencia de calcio basado en fluorescencia.

La actividad moduladora de canales de sodio de los derivados de ciclopentilo de fórmula general I se midió a través de ensayos electrofisiológicos usando la técnica de pinzamiento zonal de membrana de dos electrodos (TEVC) en oocitos de Xenopus aislados que expresaban el canal de Na Nav 1.3.

En vista de los mecanismos de acción descritos anteriormente, los compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento o prevención de dolor neuropático. Los síndromes de dolor neuropático incluyen, y no se limitan a: neuropatía diabética; ciática; dolor lumbar no específico; dolor de esclerosis múltiple; fibromialgia; neuropatía asociada con el VIH; neuralgia; tal como neuralgia post-herpética y neuralgia trigeminal; y dolor que resulta de trauma físico, amputación, cáncer, toxinas o afecciones inflamatorias crónicas.

Los compuestos de la invención son también útiles para el tratamiento de dolor crónico. El dolor crónico incluye, y no se limita a, dolor crónico causado por inflamación o una afección relacionada con la inflamación, osteoartritis, artritis reumatoide o como secuela a enfermedad, daño agudo o trauma e incluye dolor de la parte superior de la espalda o dolor lumbar (que resultan de enfermedad espinal sistemática, regional o primaria (tal como radiculopatía), dolor óseo (debido a osteoartritis, osteoporosis, metástasis ósea o razones desconocidas), dolor pélvico, dolor asociado a daño de la médula espinal, dolor de la caja cardiaca, dolor no de la caja cardiaca, dolor post-apoplejía central, dolor miofascial, dolor canceroso, dolor del SIDA, dolor de las células falciformes, dolor geriátrico o dolor causado por dolor de cabeza, síndrome articular temporomandibular, gota, fibrosis o síndromes de obstrucción de la salida torácica.

Los compuestos de la invención son también útiles en el tratamiento de dolor agudo (causado por daño agudo, enfermedad, daños de medicina deportiva, síndrome del túnel carpiano, quemaduras, esguinces y distensiones musculares, distensión musculotendinosa, síndromes de dolor cervicobraquial, dispepsias, úlcera gástrica, úlcera duodenal, dismenorrea, endometriosis o cirugía (tal como cirugía a corazón abierto o cirugía por derivación), dolor postoperatorio, dolor de piedras en el riñón, dolor de vesícula biliar, dolor de cálculos biliares, dolor obstétrico o dolor dental.

Los compuestos de la invención son también útiles en el tratamiento de migraña, tal como dolor de cabeza de tipo tensional, migraña transformada o dolor de cabeza evolutivo, dolor de cabeza en racimo, así como trastornos de dolor de cabeza secundarios, tales como los derivados de infecciones, trastornos metabólicos u otras enfermedades sistémicas y otros dolores de cabeza agudos, hemicránea paroxística y similares, que resultan de un empeoramiento de los dolores de cabeza primarios y secundarios anteriormente mencionados.

Los compuestos de la invención son también útiles para el tratamiento de afecciones neurológicas y trastornos cognitivos. Las afecciones neurológicas incluyen, y no se limitan a, afecciones tales como epilepsia (incluyendo ataques parciales simples, ataques parciales complejos, ataques generalizados secundarios, incluyendo adicionalmente ataques de ausencia, ataques mioclónicos, ataques clónicos, ataques tónicos, ataques clónicos tónicos y ataques atónicos), demencia degenerativa (incluyendo demencia senil, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Pick, enfermedad de Parkinson) y demencia vascular (incluyendo demencia multiinfarto, apoplejía e isquemia cerebral), así como demencia asociada con lesiones que ocupan espacio intracraneal, traumatismo, infecciones y afecciones relacionadas (incluyendo infección por VIH), metabolismo, toxinas, anoxia y deficiencia en vitaminas; y alteración cognitiva leve asociada con envejecimiento, particularmente trastorno de memoria asociado con la edad, trastornos de movimiento (parkinsonismo postencefalítico, parálisis supranuclear progresiva, degeneración corticobasal), narcolepsia, trastornos de déficit e hiperactividad (ADHD), esclerosis lateral amiotrófica, síndrome de Down.

Los compuestos de la invención son también útiles para el tratamiento de trastornos psiquiátricos. Los trastornos psiquiátricos incluyen, y no se limitan a, maniacodepresión también conocida como trastorno bipolar (tal como trastorno bipolar tipo I, trastorno bipolar tipo II), trastorno ciclotímico, ciclación rápida, ciclación ultradian, depresión bipolar, manía aguda, manía, manía mixta, hipomanía o depresión unipolar, esquizofrenia, trastornos esquizofreniformes, trastornos esquizoafectivos, trastornos delirantes, trastornos psicóticos breves, trastornos psicóticos compartidos, trastorno psicótico debido a una afección médica general, trastornos psicóticos inducidos por sustancia o un trastorno psicótico no especificado de otra manera, trastornos de ansiedad y además en adicción al tabaco y a las drogas.

Los compuestos de la invención son también útiles en el tratamiento de enfermedades periféricas tales como tinnitus, espasmo muscular, esclerosis muscular, y otros trastornos, incluyendo, y no limitados a enfermedades cardiovasculares (tales como arritmia cardiaca, infarto cardiaco o angina de pecho, hipertensión, hipoxia, isquemia cardiaca), trastornos endocrinos (tales como acromegalia o diabetes insípida), enfermedades en las cuales la patofisiología del trastorno implica secreción celular excesiva o hipersecretora o inapropiada de otra manera de una sustancia endógena (tal como catecolamina, una hormona o un factor de crecimiento).

Los compuestos de la invención son también útiles en el tratamiento de enfermedad del hígado, tal como enfermedad del hígado inflamatoria, por ejemplo hepatitis B viral crónica, hepatitis C viral crónica, daño hepático alcohólico, cirrosis biliar primaria, hepatitis autoinmune, esteatohepatitis no alcohólica y rechazo a transplante de hígado.

Los compuestos de la invención inhiben procesos inflamatorios que afectan a todos los sistemas del cuerpo. Por lo tanto son útiles en el tratamiento de procesos inflamatorios del sistema musculoesquelético de los cuales la siguiente es una lista de ejemplos pero no es exhaustiva de todos los trastornos diana: afecciones artríticas tales como espondilitis anquilosante, artritis cervical, fibromialgia, intestino, artritis reumatoide juvenil, artritis lumbosacra, osteoartritis, osteoporosis, artritis psoriática, enfermedad reumática; trastornos que afectan piel y tejidos relacionados: eczema, psoriasis, dermatitis y afecciones inflamatorias tales como quemadura solar; trastornos del sistema respiratorio: asma, rinitis alérgica y síndrome de dificultad respiratoria, trastornos pulmonares en los cuales está implicada inflamación tales como asma y bronquitis; enfermedad pulmonar obstructiva crónica; trastornos de los sistemas inmune y endocrino: periarteritis nodosa, tiroiditis, anemia aplásica, esclerodoma, miastenia gravis, esclerosis múltiple, sarcoidosis, síndrome nefrítico, síndrome de Bechet, polimiositis, gingivitis.

Los compuestos de la invención son también útiles en el tratamiento de trastornos del tracto gastrointestinal (GI) tales como trastornos inflamatorios del intestino que incluyen pero no están limitados a colitis ulcerosa, enfermedad de Chron, ileitis, proctitis, enfermedad celíaca, enteropatías, colitis microscópica o colagenosa, gastroenteritis eosinófila, o pouchitis que resulta después de procolectomía y anastomosis postileonatal, y síndrome del intestino irritable que incluye cualesquiera trastornos asociados con dolor abdominal y/o disconfort abdominal tal como espasmo pilórico, indigestión nerviosa, colon espástico, colitis espástica, intestino espástico, neurosis intestinal, colitis funcional, colitis mucosa, colitis laxante y dispepsia funcional; pero también para tratamiento de gastritis atrófica, gastritis varioliforme, colitis ulcerativa, ulceración péctica, piresis, y otros daños al tracto gastrointestinal, por ejemplo, por Helicobacter pylori, enfermedad de reflujo gastroesofágico, gastroparesis, tal como gastroparesis diabética; y otros trastornos intestinales funcionales, tales como dispepsia no ulcerativa (NUD); émesis, diarrea, e inflamación visceral.

Los compuestos de la invención son también útiles en el tratamiento de trastornos del tracto genitourinario tales como vejiga sobreactiva, prostatitis (prostatitis bacteriana crónica y prostatitis no bacteriana crónica), prostadinia, cistitis intersticial, incontinencia urinaria e hiperplasia de próstata benigna, anexitis, inflamación pélvica, bartolinitis y vaginitis.

Los compuestos de la invención son también útiles en el tratamiento de enfermedades oftálmicas tales como retinitis, retinopatías, uveitis y daño agudo al tejido del ojo, degeneración macular o glaucoma, conjuntivitis.

Los compuestos de la invención son también útiles en el tratamiento de obesidad.

Los compuestos de la invención son también útiles en el tratamiento de todas las otras afecciones mediadas por la inhibición de canales de sodio de apertura regulada por voltaje y/o canales de calcio de apertura regulada por voltaje.

Se apreciará que los compuestos de la invención pueden usarse ventajosamente en conjunción con uno o más agentes terapéuticos diferentes. Ejemplos de agentes adecuados para terapia adjunta incluyen un agonista 5HT_{1B/1D}, tal como un triptano (por ejemplo sumatriptán o naratriptán); un agonista A1 de adenosina; un ligando de EP; un modulador de NMDA, tal como un antagonista de glicina; una antagonista de la sustancia P (por ejemplo un antagonista de NK1); un cannabinoide, acetaminafeno o fenacetina; un inhibidor de 5-lipooxigenasa; un antagonista de receptor de leucotrienos; un DMARD (por ejemplo metotrexato); gabapentina y compuestos relacionados; un antidepresivo tricíclico (por ejemplo amitriptilina); un fármaco antiepiléptico estabilizador de neuronas, un inhibidor de captación monoaminérgica (por ejemplo venlafaxina); un inhibidor de metaloproteasa de matriz, un inhibidor de la óxido nítrico sintasa (NOS), tal como un inhibidor de iNOS o un inhibidor de nNOS; un inhibidor de la liberación, o acción, de factor de necrosis tumoral alfa; una terapia de anticuerpos, tal como una terapia de anticuerpos monoclonales; un agente antiviral, tal como un inhibidor nucleosídico (por ejemplo lamivudina) o un sistema modulador inmune (por ejemplo, interferón); un analgésico, tal como un inhibidor de ciclooxigenasa-2; un anestésico local; un estimulante, incluyendo cafeína; un antagonista de H2 (por ejemplo ranitidina); un inhibidor de bomba de protones (por ejemplo omeprazol); un antiácido (por ejemplo hidróxido de aluminio o de magnesio); un antiflatulento (por ejemplo simeticona); un descongestionante (por ejemplo fenilefrina, fenilpropanolamina, pseudoefedrina, oximetazolina, epinefrina, nafazolina, xilometazolina, propilhexedrina, o levodesoxiefedrina); antitusivo (por ejemplo codeína, hidrocodona, carmifeno, carbetapentano, o dextrametorfano); un diurético; o una antihistamina sedante o no sedante. Se entenderá que la presente invención cubre el uso de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en combinación con uno o más agentes terapéuticos.

Los compuestos de la presente invención son útiles en medicina humana y veterinaria. Se entenderá que la referencia a tratamiento incluye ambos tratamientos de síntomas establecidos como tratamiento preventivo, a menos que se establezca explícitamente otra cosa.

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Los derivados de ciclopentilo de fórmula I como se definen anteriormente se pueden administrar como el "ingrediente activo" de una composición farmacéuticamente aceptable la cual se puede preparar mediante procedimientos convencionales, por ejemplo mezclando el ingrediente activo con materiales orgánicos y/o inorgánicos terapéuticamente inertes, farmacéuticamente aceptables.

La composición que comprende los derivados de Ciclopentilo anteriormente definidos se puede administrar en una diversidad de formas, por ejemplo oralmente, en forma de comprimidos, trociscos, cápsulas, comprimidos recubiertos de película o azúcar, soluciones líquidas, emulsiones o suspensiones; rectalmente, en forma de supositorios; parenteralmente, por ejemplo mediante inyección o infusión intramuscular o intravenosa; y transdérmicamente.

Materiales vehículos orgánicos e inorgánicos terapéuticamente inertes, farmacéuticamente aceptables adecuados útiles en la preparación de tal composición incluye, por ejemplo, agua, gelatina, goma arábiga, lactosa, almidón, celulosa, estearato de magnesio, talco, aceites vegetales, polialquilenglicoles y similares. La composición que comprende los derivados de ciclopentilo de fórmula I como se definen anteriormente se puede esterilizar y puede contener adicionalmente componentes bien conocidos, tales como, por ejemplo, agentes conservantes, estabilizadores, humectantes o emulsionantes, por ejemplo aceite de parafina, monooleato de mannide, sales para ajustar presión osmótica, tampones y similares.

Por ejemplo, las formas orales sólidas pueden contener, conjuntamente con el ingrediente activo, diluyentes, por ejemplo lactosa, dextrosa, sacarosa, celulosa, almidón de maíz o almidón de patata; lubricantes, por ejemplo sílice, talco, ácido esteárico, estearato de magnesio o de calcio, y/o polietilenglicoles; agentes de unión, por ejemplo almidones, gomas arábigas, gelatina, metilcelulosa, carboximetilcelulosa o polivinilpirrolidona; agentes disgregantes, por ejemplo un almidón, ácido algínico, alginatos o glicolato de sodio almidón; mezclas efervescentes; tintes; edulcorantes; agentes humectantes tales como lecitina, polisorbatos, laurilsulfatos; y, en general, sustancias no tóxicas y farmacológicamente inactivas usadas en formulaciones farmacéuticas. Dichas preparaciones farmacéuticas pueden elaborarse en forma conocida, por ejemplo, por medio de procedimientos de mezclar, granular, comprimir, recubrir de azúcar, o recubrir de película.

Las formulaciones orales comprenden formulaciones de liberación sostenida que pueden prepararse de forma convencional, por ejemplo aplicando un recubrimiento entérico a comprimidos y gránulos.

La dispersión líquida para administración oral puede ser por ejemplo jarabes, emulsiones y suspensiones.

Los jarabes pueden contener como transportador, por ejemplo, sacarosa o sacarosa con glicerina y/o manitol y/o sorbitol.

Suspensiones y emulsiones pueden contener como un transportador, por ejemplo, un caucho natural, agar, alginato de sodio, pectina, metilcelulosa, carboximetilcelulosa, o alcohol polivinílico. Las suspensiones o soluciones para inyecciones intramusculares pueden contener, conjuntamente con el compuesto activo, un transportador farmacéuticamente aceptable, por ejemplo agua estéril, aceite de oliva, oleato de etilo, glicoles, por ejemplo propilenglicol, y, si se desea, una cantidad adecuada de clorhidrato de lidocaína. Las soluciones para inyecciones intravenosas o infusión pueden contener como transportador, por ejemplo agua estéril o preferiblemente pueden estar en forma de soluciones estériles, acuosas, salinas isotónicas.

Los supositorios pueden contener, conjuntamente con el ingrediente activo, un transportador farmacéuticamente aceptable, por ejemplo mantequilla de cacao, polietilenglicol, tensioactivos de ésteres de ácidos grasos de polioxietileno sorbitán o lecitina.

El tratamiento adecuado se da 1, 2 ó 3 veces diariamente, dependiendo de la velocidad de evacuación. De acuerdo con ello, la dosis deseada se puede presentar en una dosis única o en forma de dosis divididas administradas a intervalos apropiados, por ejemplo dos o cuatro o más sub-dosis por día.

Las composiciones farmacéuticas que comprenden los derivados de ciclopentilo de la fórmula I como se definen anteriormente contendrán, por unidad de dosificación, por ejemplo, cápsula, comprimido, inyección de polvo, cucharadita, supositorio y similares de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 500 mg del ingrediente activo lo más preferiblemente de 1 a 10 mg.

Las dosis terapéuticamente efectivas óptimas para administrarse pueden determinarse fácilmente por aquellos expertos en la técnica y variarán, básicamente, con la fuerza de la preparación, con el modo de administración y con el avance de la afección o trastorno tratado. Además, los factores asociados con el sujeto particular que se está tratando, incluyendo la edad del sujeto, peso, dieta y tiempo de administración, darán como resultado la necesidad de ajustar la dosis a un nivel efectivo terapéuticamente apropiado.

Los siguientes ejemplos ilustran adicionalmente la invención.

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Ejemplo 1

Amida del ácido cis-2-[3-(2-fluoro-benciloxi)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico

Se añadió una solución 2 M de amida del ácido 2-amino-ciclopentanocarboxílico (0,75 g, 6,5 mmol) en THF seco a una solución 1 M de THF seco de 3-(2-fluoro-benzoil)-benzaldehído (1,64 g, 7,15 mmol), preparado como se describe en el ejemplo 3. A esta mezcla, se añadió gota a gota una solución 2 M de Ti(O-iPr)_{4} (2,77 g, 9,75 mmol) en THF seco y la mezcla de reacción se agitó 12 horas a temperatura ambiente bajo nitrógeno.

Se añadió una solución 0,75 M de borohidruro de sodio (0,69 g, 18,2 mmol) en etanol absoluto y la mezcla resultante se calentó a 70ºC durante 6 horas. Después de enfriar, se añadieron 8 ml de agua para desactivar la reacción y el precipitado blanco resultante se eliminó mediante filtración. El compuesto en bruto se purificó usando cartucho de SCX (resina de intercambio catiónico fuerte). El producto puro se recuperó eluyendo con solución de amoniaco al 3% en metanol. Se obtuvo el compuesto del título (2,08 g) después de evaporar el disolvente a vacío con un rendimiento final del 94%.

EM (ESI Pos Pulverizador 3,5 kV; Descarga 20 V; Sonda 250ºC): 343 [MH+].

RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta: 7,55 (m, 1H), 7,45 (m, 2H), 7,25 (m, 3H), 7,0 (s, 1H), 6,88 (m, 2H), 6,78 (s, 1H), 5,1 (s, 2H), 3,7 (dd, 2H), 3,10 (m, 1H), 2,65 (m, 1H), 1,90-1,4 (m, 6H).

Ejemplo 2

Amida del ácido cis-2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3,5-dimetil-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico

Se añadió una solución 2 M de amida del ácido 2-amino-ciclopentanocarboxílico (0,75 g, 6,5 mmol) en THF seco a una solución 1 M de THF seco de 4-(2-fluoro-benciloxi)-3,5-dimetil-benzaldehído (1,84 g, 7,15 mmol), preparado como se describe en el ejemplo 4. A esta mezcla, se añadió gota a gota una disolución 2 M de Ti(O-iPr)_{4} (2,77 g, 9,75 mmol) en THF seco y la mezcla de reacción se agitó 12 horas a temperatura ambiente bajo nitrógeno.

Se añadió una disolución de borohidruro de sodio 0,75 M (0,69 g, 18,2 mmol) en etanol absoluto y la mezcla resultante se calentó a 70ºC durante 6 horas. Después de enfriar, se añadieron 8 ml de agua y el precipitado blanco se eliminó mediante filtración. El compuesto en bruto se purificó usando cartucho SCX (resina de intercambio catiónico fuerte). El producto puro se recuperó eluyendo con solución de amoniaco al 3% en metanol. Se obtuvo el compuesto del título (2,14 g) después de evaporar el disolvente a vacío con un rendimiento del 89%.

EM (ESI Pos Pulverizador 3,5 kV; Descarga 20 V; Sonda 250ºC): 371 [MH+].

RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta: 7,60 (m, 1H), 7,48 (m, 2H), 7,28 (m, 2H), 6,95 (s, 2H), 6,78 (s, 1H), 4,80 (s, 2H), 3,6 (dd, 2H), 3,15 (m, 1H), 2,68 (m, 1H), 2,2 (s, 6H), 1,85-1,51 (m, 6H).

Ejemplo 3

3-(2-fluoro-benciloxi)-benzaldehído

Se añadió gota a gota solución 0,5 M de 1-bromometil-2-fluoro-benceno (1,50 g, 8,0 mmol) en DMF a una suspensión de 3-hidroxi-benzaldehído (0.89 g, 7,3 mmol), K_{2}CO_{3} (1,51 g, 1 mmol) y KI (0,12 g, 0,73 mmol) en 100 ml de DMF. La mezcla de reacción se agitó a 90ºC durante toda una noche. Después de enfriar a temperatura ambiente, el residuo sólido se filtró y el disolvente se evaporó a vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo, la fase orgánica se lavó dos veces con NaOH 1 M, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se evaporó a sequedad. El residuo se purificó en gel de sílice, obteniéndose 167 mg del compuesto del título (rendimiento cuantitativo).

Ejemplo 4

4-(2-fluoro-benciloxi)-3,5-dimetil-benzaldehído

Se añadió gota a gota solución 0,5 M de 1-bromometil-2-fluoro-benceno (1,50 g, 8,0 mmol) en DMF a una suspensión que contenía 1,09 g de 4-hidroxi-3,5-dimetil-benzaldehído (7,3 mmol), 1,51 de K_{2}CO_{3} (11 mmol) y 120 mg de KI (0,73 mmol) en 100 ml de DMF. La reacción siguió el mismo procedimiento descrito en el ejemplo 3. El residuo se purificó en gel de sílice, obteniéndose una recuperación cuantitativa del compuesto del título (1,88 g).

Ejemplo 5

Unión in vitro de ^{3}H-batracotoxina en membranas de cerebro de rata

Preparaciones de membrana (fracción P2). Se sacrificaron ratas macho Wistar (Harlan, Italia - 175-200 g) bajo anestesia ligera y los cerebros se retiraron rápidamente y el córtex se retiró mediante disección, se homogeneizó en 10 volúmenes de tampón de sacarosa 0,25 M enfriada en hielo (Tris-HCl 50 mM, pH 7,4). El homogenado en bruto se centrifugó a 3250 rpm durante 10 minutos y el sobrenadante se recuperó. El sedimento se homogeneizó y centrifugó de nuevo y los dos sobrenadantes se almacenaron y centrifugaron a 14750 rpm durante 10 minutos, +4ºC. El sedimento resultante se almacenó a -20ºC hasta usar.

Ensayo de unión. El sedimento se resuspendió en tampón de Hepes 50 mM, pH 7,4 que contenía MgSO_{4} 0,8 mM, KCl 5,4 mM, glucosa 5,5 mM y colina 130 mM usando Polytron PT10. El ensayo de unión se llevó a cabo en volumen final de 0,25 ml que contenía 50 \mul de preparación de membrana (alrededor de 200 \mul de proteína), 50 \mul de ligando de ^{3}H-batracotoxina (10 nM), 50 \mul de TTX (1 \muM), 50 \mul de toxina de escorpión (37,5 \mug/ml) y 50 \mul de compuesto de prueba o tampón o 300 \muM de veratridina para determinar unión no específica. El ensayo de unión se llevó a cabo a 37ºC durante 30 minutos y se detuvo mediante filtración rápida a vacío a través de filtros de fibra de vidrio GF/B de Whatman. Los filtros (pre-remojados con 0,1% de polietilenoimina) se lavaron con 3 x 5 ml de tampón enfriado en hielo y se situaron en picoviales que contenían líquido de centelleo (Filter Count, Packard). La radiactividad unida se midió mediante espectrometría de líquido de centelleo a eficiencia del 45%.

Análisis de datos. La CI_{50} se calculó a partir de curvas de desplazamiento mediante el programa de ordenador LIGAND (McPherson, J. Pharmacol. Methods, 14, 213. 1985). Las curvas de desplazamiento se obtuvieron usando al menos 9 concentraciones, cada una por duplicado, cubriendo una intervalo de plegamiento de 100000 veces.

Ejemplo 6

Unión in vitro de ^{3}H-nitrendipina en membranas de cerebro de rata

Preparaciones de membrana. Se sacrificaron ratas macho Wistar (Harlan, Italia - 175-200 g) bajo anestesia ligera y los cerebros se retiraron rápidamente y el córtex se retiró mediante disección, se homogeneizó en 10 volúmenes de Tris\cdotHCl 50 mM enfriado en hielo, pH 7,7 usando Polytron PT10. El homogenado en bruto se centrifugó a 50000 x g durante 10 minutos. El sedimento se homogeneizó y se centrifugó dos veces en tampón recién preparado a 50000 x g durante 10 minutos, +4ºC. El sedimento resultante se almacenó a -20ºC hasta usar.

Ensayo de unión. El sedimentose resuspendió en Tris\cdotHCl 50 mM, pH 7,7 usando Polytron PT10. El ensayo de unión se llevó a cabo en 1 ml de volumen final conteniendo 900 \mul de preparación de membranas (alrededor de 700 \mul de proteína), 50 \mul de ^{3}H-nifedipina (0,15 nM) y 50 \mul de compuesto de prueba o tampón o 1 \muM de nifedipina para determinar unión no específica. El ensayo de unión se llevó a cabo a 25ºC durante 45 minutos y se detuvo mediante filtración rápida a vacío a través de filtros de fibra de vidrio GF/B de Whatman. Los filtros se lavaron con 3 x 5 ml de tampón enfriado en hielo y se situaron en picoviales que contenían líquido de centelleo (Filter Count, Packard). La radiactividad unida se midió mediante espectrometría de líquido de centelleo a eficiencia del 45%.

Análisis de datos. La CI_{50} se calculó a partir de curvas de desplazamiento mediante el programa de ordenador LIGAND (McPherson, J. Pharmacol. Methods, 14, 213. 1985). Las curvas de desplazamiento se obtuvieron usando al menos 9 concentraciones, cada una por duplicado, cubriendo un intervalo de plegamiento de 100000 veces.

Ejemplo 7

Ensayo de afluencia de calcio

Las células de neuroblastoma humano IMR32 poseen constitutivamente tanto canales de tipo L como canales de tipo N. Bajo condiciones de diferenciación, las IMR32 se expresan preferiblemente en la superficie de membrana de canales de calcio de tipo N. Los restantes canales de calcio de tipo L se bloquearon usando el bloqueante de tipo L selectivo, nifedipina. En estas condiciones experimentales, sólo se pueden detectar los canales de tipo N.

Las células IMR32 se diferenciaron usando dibutiril-cAMP 1 mM y bromodeoxiuridina 2,5 \muM durante 8 días (4 veces) en matraz de 225 cm^{2}, después se desprendieron, se sembraron a 200.000 células/pocillo en 96 placas recubiertas de polilisina y se incubaron adicionalmente durante 18-24 horas en presencia de tampón de diferenciación antes de usar.

Se usó el Kit de Ensayo de Ca^{2+} (Molecular Devices), basado en una longitud de onda de 485-535 nm de indicador de calcio fluorescente.

Las células diferenciadas se incubaron con tinción cargada durante 30 minutos a 37ºC después, se añadió nifedipina (1 \muM) sola o en presencia de \omega-conotoxina o compuestos de prueba durante 15 minutos adicionales.

Se midió la fluorescencia (485-535 nm) antes y después (30-40 segundos) de la inyección automática de solución despolarizante de KCl 100 mM usando un lector de placa Victor (Perkin Elmer).

Las curvas de inhibición se calcularon a partir de 5 concentraciones, cada una por triplicado, y el CI_{50} se determinó usando un análisis de regresión lineal.

Los compuestos preferidos de fórmula general 1 inhiben canales de calcio de tipo N con un valor de CI_{50} menor de 10 \muM.

Ejemplo 8

Ensayo electrofisiológico

Se llevan a cabo experimentos para la determinación del bloqueo tónico en oocitos de Xenopus aislados que expresan el canal de Na Nav 1.3. Las corrientes se registran usando la técnica de pinzamiento zonal de membrana de dos electrodos (TEVC).

Preparación de oocitos

Se anestesia la rana (Xenopus laevis) en una disolución con éster etílico del ácido 3-aminobenzoico (1 g/l) y, después de 25 minutos, se sitúa en su parte posterior sobre un "lecho de hielo". La piel y los otros tejidos se cortan, los lóbulos del ovario se extraen y se guardan en ND96\diameterCa^{2+} (NaCl 96 mM, KCl 2 mM, MgCl_{2} 1 mM, Hepes 10 mM, pH 7,85 con NaOH).

Después de la retirada de los oocitos, el músculo y la piel se cosen separadamente.

Los lóbulos ováricos se reducen en racimos de 10/20 oocitos, se ponen en tubos con solución de colagenasa
(1 mg/ml) y se mantienen en movimiento durante aproximadamente 1 hora en un incubador.

Al final de esta etapa, cuando los oocitos están bien separados los unos de los otros, se aclaran tres veces con ND96\diameterCa^{2+} y tres veces con NDE (ND96\diameterCa^{2+} + CaCl 0,9 mM, MgCl_{2} 0,9 mM, piruvato 2,5 mM, gentamicina 50 mg/l).

Los oocitos obtenidos están en diferentes fases del desarrollo. Sólo las células en estados V y VI se seleccionan para experimentos subsiguientes de inyección de RNA.

El día después de la preparación, los oocitos se inyectan (Drummond Nanoject) con 20 ng de cRNA de Nav 1.3 y se mantienen en NDE.

Comenzando desde 48 horas después de la inyección de mRNA se registraron flujos de células completas usando una estación de trabajo automatizada de pinzamiento zonal de membrana de dos microelectrodos.

Los microelectrodos típicos tienen una resistencia de 0,5 a 1 Mohm y se rellenan con KCl 3 M.

La solución de baño control contiene (mM): NaCl 98, MgCl_{2} 1, CaCl_{2} 1,8, HEPES 5 (pH 7,6).

Los compuestos se preparan en soluciones de reserva (20 mM) y se disuelven a las concentraciones finales en la solución de baño externo.

Registro de corrientes

La relación corriente/voltaje (I/V) para las corrientes de Nav1.3 expresadas en oocitos se estudió primero para determinar el potencial de membrana que evoca la activación máxima. Nav1.3 mostró la activación máxima a 0 mV, que los inventores usaron como potencial de prueba (Vprueba) para estudios de bloqueo tónico.

Las propiedades de inactivación en el estado permanente de las corrientes de Nav1.3 se estudiaron después con el fin de determinar los potenciales de membrana para el estado de reposo (Vreposo) a los cuales la disponibilidad de los canales es máxima (Imáx), y para el potencial de membrana para la mitad de la inactivación máxima (V ½) que produce la mitad de la disponibilidad de corriente máxima (I ½) respectivamente. Estas dos condiciones de voltaje se usaron después para la evaluación de la dependencia de voltaje del bloqueo tónico.

Finalmente se usó un protocolo de dos etapas para determinar la dependencia de voltaje del bloqueo de Nav1.3: los oocitos se sometieron a pinzamiento a -80 mV, las corrientes se activaron mediante un pulso de etapa de 100 ms a 0 mV (Vprueba) a partir de un potencial precondicionante de 3000 ms a -80 mv (reposando, condición de Imáx)
y -40 mV (despolarizado, condición de I ½), respectivamente.

Las amplitudes de corriente en las dos condiciones se registraron en la ausencia y en la presencia de diferentes concentraciones de compuesto (se hizo enjuague entremedias) con el fin de determinar las curvas de concentración-inhibición y los valores de CI_{50} para el bloqueo tónico en las condiciones despolarizadas (mitad de la disponibilidad de corriente máxima).

Los compuestos preferidos de la fórmula general I inhiben canales de sodio Nav 1.3 con un valor de CI_{50} menor que el bloqueante de canal de sodio de referencia ralfinamida.

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Ejemplo 9

Prueba de electrochoque máximo en ratas y ratones

Las ratas Wistar recibieron un electrochoque (160 mA durante 0,2 s con un tren de pulsos de 60 Hz que tuvieron una duración de pulso de 0,4 ms; modelo de unidad ECT 7801, Ugo Basile, Comerio, Italia) a través de electrodos de clip intra-auriculares suficientes para producir una respuesta de extensor tónico de miembro trasero en al menos el 97% de los animales control.

Los ratones recibieron un choque de 28 mA de 0,7 segundos con un tren de pulsos de 80 Hz que tuvo una duración de pulso de 0,4 ms. Se administraron varias dosis del compuesto de prueba y AED estándar a grupos de 10 a 20 ratones o ratas por dosis en un volumen de 5 ml/kg 60 minutos oralmente o 30 minutos intraperitonealmente antes de inducción de MES para calcular valores de ED_{50}. La supresión completa del componente extensor tónico de miembro posterior de convulsiones se tomó como evidencia de la actividad anticonvulsivante.

Ejemplo 10

Prueba de formalina en ratones

De acuerdo con un protocolo modificado de Rosland y col., (1990) los ratones se inyectaron subcutáneamente (s.c.) con 20 \mul de solución al 2,7% de formalina dentro de la superficie plantar de la zarpa trasera y se situaron inmediatamente dentro de cámaras de observación de PVC transparentes (23 x 12 x 13 cm). El comportamiento de dolor se cuantificó contando el tiempo de lamida acumulado (s) de la zarpa inyectada. Se tomaron medidas durante la fase temprana (0-5 minutos) y la fase tardía (30-40 minutos) después de inyección de formalina (Tjolsen y col. 1992).

El compuesto de prueba se administró oralmente 15 minutos antes de la inyección de formalina en un volumen de peso corporal de 10 ml/kg a grupos de 10 ratones por dosis. Los grupos control se trataron con vehículo.

Ejemplo 11

Modelo de inflamación de carragenina

Se usaron ratas Wistar macho de 175-200 gramos.

La zarpa trasera izquierda se inyectó con 100 \mul de carragenina (2% p/v en solución salina). Los compuestos de la invención (30 mg/kg), indometacina (5 mg/kg) o vehículo control (tal como agua destilada) se administraron oralmente 1 hora antes de la inyección de carragenina. El volumen de la zarpa se midió con un pletismómetro (Ugo Basile) inmediatamente antes (basal) y 1, 2, 3, 4 y 5 horas después de la inyección de carragenina.

Claims (6)

1. Un compuesto de fórmula I

8

en la que

X

es metileno, oxígeno, azufre, o un grupo NR^{7};

R^{1}

es una cadena de alquilo C_{1}-C_{8} o alquenileno C_{3}-C_{8} o alquinileno C_{3}-C_{8} lineal o ramificada, opcionalmente sustituida con CF_{3}, fenilo, fenoxi o naftilo, los anillos aromáticos opcionalmente sustituidos por uno o más grupos alquilo C_{1}-C_{4}, halógenos, trifluorometilo, hidroxi o alcoxi C_{1}-C_{4};

R^{2}, R^{3} son independientemente hidrógeno, una cadena de alquilo C_{1}-C_{3}, grupos halógeno, trifluorometilo, hidroxi o alcoxi C_{1}-C_{4};

R^{4}, R^{5}, R^{6}, R^{7} son independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6};

y sus sales farmacéuticamente aceptables.

2. Compuestos de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1, en los que X es oxígeno, metileno, NH o NCH_{3}, R^{1} es cadena de alquilo C_{1}-C_{8}, opcionalmente sustituida con grupo CF_{3}, fenilo o fenoxi, donde el anillo aromático en R^{1} está opcionalmente sustituido por uno o dos grupos halógenos o metoxi o trifluorometilo, R^{2} y R^{3} son hidrógeno, metilo, metoxi, flúor, cloro o bromo, R^{4}, R^{5} y R^{5} son hidrógeno o metilo.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado del grupo constituido por:

amida del ácido 2-(2-benciloxi-bencilamino)-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-(3-benciloxi-bencilamino)-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-(4-benciloxi-bencilamino)-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[2-(2-fluoro-benciloxi)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[3-(2-fluoro-benciloxi)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido cis-2-[3-(2-fluoro-benciloxi)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[4-(2-fluoro-benciltio)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[4-(2-fluoro-bencilamino)-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[2-(2-fluoro-benciloxi)-3-fluoro-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3-fluoro-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[2-(2-fluoro-benciloxi)-3-cloro-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido (2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3-cloro-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

\global\parskip0.900000\baselineskip

amida del ácido (2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3-bromo-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido (2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-2-metoxi-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido (2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3-metoxi-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido 2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3,5-dimetil-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

amida del ácido cis-2-[4-(2-fluoro-benciloxi)-3,5-dimetil-bencilamino]-ciclopentanocarboxílico;

y todos sus esteroisómeros y/o sales farmacéuticamente aceptables.

4. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula I, como se define en la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, comprendiendo el procedimiento:

a) hacer reaccionar un compuesto de fórmula II

9

en la que R^{1}, R^{2}, R^{3} y X son como se definen anteriormente

con compuestos de fórmula III, en presencia de un agente reductor

10

en la que R^{4}, R^{5} y R^{6} son como se definen previamente, obteniéndose así un compuesto de fórmula I; o

b) hacer reaccionar de compuestos de fórmula IV

11

en la que R^{1}, R^{2}, R^{3} y X son como se definen anteriormente e Y es un átomo de halógeno o un grupo O-EWG, donde el EWG quiere decir un grupo que retira electrones, como por ejemplo grupos mesilo, tosilo o trifluoroacetilo, capaces de transformar el oxígeno al cual están unidos, en un buen grupo saliente

con compuestos de fórmula III, obteniendo así un compuesto de fórmula I; o

\global\parskip1.000000\baselineskip

c) hacer reaccionar un compuesto de fórmula Ia

12

en la que R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{5}, R^{6} y X son como se definen anteriormente, con compuestos de fórmula V o VI

R^{4}Y

\hskip4cm

R^{8}CHO

\hskip4.8cm

V

\hskip4.7cm

VI

en las que Y y R^{4} son como se definen anteriormente; y R^{8} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{5}, obteniéndose así un compuesto de la invención en el cual R^{4} es alquilo C_{1}-C_{6}; y, si se desea, convertir un compuesto de la invención en otro compuesto de la invención y/o, si se desea, convertir un compuesto de la invención en una sal farmacéuticamente aceptable y/o, si se desea, convertir una sal en un compuesto libre y/o, si se desea, separar una mezcla de isómeros de compuestos de la invención en un isómero único.

5. Una composición farmacéutica que contiene un compuesto de fórmula I, como se define en la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en mezcla con un vehículo y/o diluyente adecuado y opcionalmente a otros agentes terapéuticos.

6. El uso de un compuesto de fórmula I, como se define en la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de un medicamento que tiene actividad moduladora de canales de sodio y/o calcio para prevenir, aliviar y curar enfermedades neurológicas, psiquiátricas, cardiovasculares, inflamatorias, oftálmicas, urológicas, metabólicas y gastrointestinales, donde los canales de sodio y/o calcio están implicados en el proceso patológico.