ES2288629T3 - Soporte para una camara de muestras, en particular para la conservacion criogenica de muestras biologicas. - Google Patents

Abstract

Soporte (10) para al menos una cámara de muestras (11), en particular para la conservación criogénica de muestras biológicas, que comprende un bastidor de sujeción (20), que está equipado para el posicionamiento de la cámara de muestras (11), en el que el bastidor de sujeción (20) presenta una primera parte del bastidor (30) y una segunda parte del bastidor (40), que se pueden montar entre sí con elementos de unión (50) de modo que se pueden desprender, y que en el estado montado se tocan, respectivamente, en superficies laterales (31, 41), en el que por medio de un perfilado previsto en al menos una de las superficies laterales (31, 41) se conforman elementos de alojamiento (21 - 26), caracterizado porque los elementos de alojamiento (21 - 26), en el estado montado de las partes del bastidor, conforman orificios pasantes a través del bastidor de sujeción (20) y dejan un espacio libre para el alojamiento de la cámara de muestras, pudiéndose presionar la cámara de muestras (11) en estado montado de las partes del bastidor (30, 40) entre las superficies laterales (31, 41), y pudiéndose fijar de modo inmóvil en relación con el bastidor de sujeción.

Description

Soporte para una cámara de muestras, en particular para la conservación criogénica de muestras biológicas.

La invención se refiere a un soporte para al menos una cámara de muestras para el almacenamiento a bajas temperaturas (o: almacenamiento criogénico, conservación criogénica) de muestras en suspensión biológicas, a un dispositivo de almacenamiento criogénico para células biológicas suspendidas, grupos de células o partes constituyentes de células, y a un procedimiento para el almacenamiento criogénico.

La conservación criogénica de muestras biológicas posee un gran número de aplicaciones, que están orientadas a una conservación duradera de las muestras conservando su estado de vitalidad. Los dispositivos usados para ello están adaptados a las muestras correspondientes y a los requerimientos en el manejo de las muestras. A bajas temperaturas se pueden conservar, por ejemplo, en la medicina de transplantes, órganos, o en la medicina de transfusión, donaciones de sangre. En estas aplicaciones convencionales del almacenamiento criogénico se trata, por regla general, de disponer un volumen lo mayor posible de muestras en un espacio lo más estrecho posible. Por ejemplo, las donaciones de sangre se conservan en bolsas de sangre que se pueden empaquetar ocupando poco espacio en un banco de sangre. Las bolsas de sangre están provistas de una marca (por ejemplo, un código de barras), para hacer posible una extracción adecuada y sin errores del banco de sangre. Estas técnicas están limitadas al uso con muestras relativamente grandes (en el intervalo de ml a 1).

En la biología celular, y cada vez más en la biotecnología molecular, sin embargo, existe el objetivo de almacenar muestras biológicas muy pequeñas (células individuales, grupos de células o partes constituyentes de células) en estado congelado y, dado el caso, procesarlas. Por ejemplo, en el documento EP804073 se describe el procesado criogénico de células individuales. Las células se fijan, congeladas a baja temperatura, sobre un sustrato, se almacenan, y dado el caso se procesan. Esta técnica posee la desventaja de que el alojamiento de las células fijadas sobre los sustratos puede requerir relativamente mucho espacio, de manera que se dificulta la construcción de un banco de células criogénico. Adicionalmente, para evitar contaminaciones, las muestras han de estar provistas de una capa protectora, lo que dificulta el manejo de las muestras.

En el documento DE19921236 está descrito el hecho de depositar muestras en suspensión en forma de gotas para la conservación criogénica sobre sustratos estructurados, con los que se facilita la manejabilidad de las muestras congeladas. Los sustratos estructurados, sin embargo, pueden poseer desventajas por lo que se refiere a la carga de muestras y a la extracción de muestras. Para la carga de muestras, todos los alojamientos de muestras se han de llenar con un dispositivo de dispensación, cuyo funcionamiento puede ser muy complicado. Para la extracción de muestras, la gota almacenada en un alojamiento de muestras ha de ser totalmente sumergida, incluso cuando sólo se requiera una parte de la gota.

Alternativamente a la colocación de muestras sobre sustratos se conoce el uso de cámaras de muestras criogénicas (por ejemplo, en forma de capilares o de tubos de pared delgada). Las cámaras de muestras conforman un recipiente cerrado al menos parcialmente, y debido a ello ofrecen una protección mejorada para las muestras. Una desventaja general de las cámaras de muestras criogénicas, sin embargo, es que no se puede constatar una descongelación que se produzca en un tiempo intermedio, dado el caso, no intencionada, de la muestra en la cámara criogénica. Las cámaras de muestras miniaturizadas o las muestras que se encuentran en ellas no muestran, en la descongelación, ninguna modificación fundamental de la forma, tal y como sería el caso, por ejemplo, en una bolsa de sangre en un banco de sangre. La calidad de la conservación criogénica en cámaras de muestras, debido a ello, sólo se puede controlar, por regla general, con medios auxiliares técnicos costosos.

Del documento WO 02/46719 se conoce un dispositivo de almacenamiento criogénico con al menos una cámara de muestras en forma de tubo flexible o de almohadilla, que está fijada a un almacenamiento de datos. La fijación se puede realizar, en particular, con un bastidor de sujeción en un encapsulado del almacenamiento de datos. Una vista lateral esquemática aumentada de un bastidor de sujeción usado habitualmente (por ejemplo, según el documento WO 02/46719) se muestra en la Figura 14. El bastidor de sujeción 20' conforma un soporte 10' para cámaras de muestras 11' en forma de tubos flexibles con una sección transversal redonda, que se sujetan en elementos de alojamiento 21'. Los elementos de alojamiento 21' están conformados como orificios pasantes con una sección transversal igualmente en forma circular en el bastidor de sujeción 20'. Con esta construcción, las cámaras de muestras 11' se pueden enhebrar, ciertamente, de un modo sencillo en el bastidor de sujeción 20'. Sin embargo, representa una desventaja la reducida estabilidad de la sujeción. Las cámaras de muestras pueden resbalarse o combarse en el bastidor de sujeción. Para la fijación se han de tomar medidas especiales. Adicionalmente es necesario cerrar las cámaras de muestras en sus extremos libres. Las cámaras de muestras en forma capilar para el almacenamiento criogénico se describen también en el documento WO 99/20104. Las cámaras de muestras están depositadas sobre un disipador de calor, resultando las mismas desventajas que en el estado de la técnica según el documento WO 02/46719.

El objetivo de la invención es proporcionar un dispositivo de almacenamiento criogénico mejorado con el que se superen las desventajas de los dispositivos de almacenamiento criogénico convencionales, y que, en particular, haga posible una sujeción estable y fiable de cámaras de muestras (por ejemplo, para un gran número de células, en suspensión, grupos de células o partes constituyentes de células), y una extracción selectiva, parcial, de partes constituyentes de muestras. El objetivo de la invención también es proporcionar un procedimiento mejorado para el almacenamiento criogénico.

Estos objetivos se alcanzan mediante dispositivos y procedimientos según las características de las reivindicaciones 1, 13 ó 15. Las formas de realización ventajosas y las aplicaciones de la invención se desprenden de las reivindicaciones subordinadas.

Una idea básica de la invención es proporcionar un soporte para al menos una cámara de muestras en forma de un bastidor de sujeción, que presente al menos dos partes del bastidor que se toquen lateralmente en el estado montado, entre las que se pueda fijar una cámara de muestras de modo inmóvil en relación al bastidor de sujeción. Las partes del bastidor se pueden montar con elementos de unión a lo largo de sus superficies laterales de modo que se pueden desprender. De un modo ventajoso, con ello se hace posible una sujeción estable de cámaras de muestras preferentemente en forma de tubos flexibles, cañas, tubos o en forma capilar en bastidores de sujeción. Apretando las cámaras de muestras se pueden cerrar automáticamente sus extremos.

Por medio de un perfilado en al menos una de las superficies laterales se conforman elementos de alojamiento que en un estado montado de las partes del bastidor dejan un espacio libre mínimo para el alojamiento del material de la pared de la cámara de muestras, por ejemplo en forma de una ranura. Según una primera forma de realización de la invención, una de las superficies laterales de las partes del bastidor que se tocan es plana, mientras que la otra superficie lateral presenta el perfilado para la conformación de los elementos de alojamiento. Esta conformación puede poseer ventajas referidas a una construcción simplificada del bastidor de sujeción. Alternativamente, las dos superficies laterales presentan entalladuras orientadas entre sí, que en el estado montado de las partes del bastidor conforman los elementos de alojamiento. Esta conformación puede representar una ventaja para un montaje sin errores de las partes del bastidor.

Cuando el soporte está conformado de tal manera que los orificios pasantes poseen una sección transversal oval o en forma de ranura, la cámara de muestras insertada, que por regla general presenta una sección transversal circular, puede ser comprimida o apretada. Por medio de la deformación de la cámara de muestras en los elementos de alojamiento se conforman regiones estrechadas de la cámara, que representan puntos de rotura controlada para la extracción simplificada de secciones de muestras. De un modo ventajoso, se puede supervisar el cumplimiento de condiciones criogénicas para secciones de cámara retiradas selectivamente, de un modo sencillo, gracias al hecho de que los extremos comprimidos de las secciones de la cámara de muestra se deformen en una descongelación que se produzca entre medias, dado el caso, no intencionada.

El bastidor de sujeción usado según la invención está fabricado, preferentemente, de plástico, que a temperatura ambiente se puede deformar elásticamente, por ejemplo, elaborado de PE, TPX, polisulfona. La elasticidad del material del bastidor puede simplificar, así mismo, el montaje de las partes del bastidor con la al menos una cámara de muestras.

Según otra conformación ventajosa, las partes del bastidor están equipadas con elementos de unión, con los que se pueden unir las partes del bastidor entre ellas a lo largo de las superficies laterales perfiladas de tal modo que se pueden desprender. Los elementos de unión ofrecen la ventaja de que las partes del bastidor se pueden unir sin ayudas de ajuste adicionales, y en estado montado conforman una pieza constructiva autárquica. En caso de que los elementos de unión estén conformados por medio de combinaciones de nervios y ranuras, dado el caso perfiles de encaje, entonces la cámara de muestras se puede doblar adicionalmente, de modo ventajoso, en el elemento de alojamiento.

Cuando, según otra forma de realización de la invención al menos una de las partes del bastidor presenta clavijas de sujeción en superficies laterales opuestas entre sí, se pueden producir ventajas para la colocación de las cámaras de muestras en el bastidor de sujeción. Las clavijas de sujeción pueden estar conformadas, en particular, por medio de los elementos de unión entre las partes del bastidor.

Otras ventajas para el manejo del soporte se pueden producir cuando las dos partes del bastidor están unidas entre sí a un lado de modo que se pueden hacer bascular. La unión basculante comprende, por ejemplo, una charnela o una brida que se puede hacer girar.

Según una forma de realización especialmente preferida de la invención, el bastidor de sujeción está unido con un dispositivo de almacenamiento de datos con al menos un almacenamiento de datos. Esto hace posible el archivo de datos que caracterizan las muestras en las cámaras de muestras.

Otro objeto de la invención es un dispositivo de almacenamiento criogénico, que comprende al menos un soporte conforme a la invención y al menos una cámara de muestras fabricada de un material flexible, deformable elásticamente. Como cámaras de muestras se usan preferentemente cámaras de muestras extendidas longitudinalmente, a modo de caña o en forma de cilindro hueco (también conformadas como tubo flexible, tubo o capilar).

Por medio del uso de al menos una cámara de muestras extendidas longitudinalmente se consigue una serie de ventajas que tienen un efecto en la carga de muestras, en la supervisión del estado almacenado de modo criogénico y en la extracción de muestras. De este modo, según la invención, las cámaras de muestras usadas se pueden rellenar o vaciar rápidamente. El transporte de líquidos en la cámaras de muestras se puede realizar bajo el efecto de fuerzas capilares o de una sobrepresión o presión negativa inferior. Las cámaras de muestras se pueden miniaturizar y se pueden ajustar de modo flexible a las condiciones de empleo. Los extremos de entrada de un gran número de cámaras de muestras usadas simultáneamente se pueden ajustar sin problemas a disposiciones arbitrarias de depósitos colectores de muestras, de los que se pueden extraer muestras. Las cámaras de muestras hacen posible un cierre de las muestras respecto al entorno. Está descartada una contaminación desde la fase gaseosa o líquida del entorno (por ejemplo desde un medio de refrigeración). De una cámara de muestras prevista según la invención se pueden retirar muestras por medio de la descongelación de toda la cámara de muestras o de muestras parciales por medio de una separación mecánica, de preferencia directamente junto a los elementos de alojamiento del bastidor de sujeción, sin que se descongele toda la cámara de muestras. La separación mecánica se puede realizar incluso bajo el efecto de un calentamiento local, sin que se origine una pérdida de la muestra prevista en el resto de la cámara de muestras.

Un objeto de la invención es también un procedimiento para el almacenamiento criogénico de muestras en suspensión, en el que éstas, bajo el efecto de fuerzas capilares o fuerzas de presión exteriores son alojadas en al menos una cámara de muestras elaborada con un material flexible y deformable elásticamente, la cámara de muestras es inmovilizada en el soporte conforme a la invención, y con éste es lleva a un estado conservado de modo criogénico. El almacenamiento criogénico conforme a la invención se realiza por lo general a una temperatura por debajo de la temperatura ambiente, a la que es posible un alojamiento de las muestras duradero que conserve la vitalidad. La temperatura escogida y la dirección del alojamiento se escogen dependiendo de la aplicación. La invención se lleva a cabo de un modo especialmente ventajoso con alojamientos a baja temperatura a temperaturas por debajo de menos 100º Celsius, y en particular a la temperatura del nitrógeno líquido.

Otras ventajas y particularidades de la invención se pueden observar a partir de la siguiente descripción de los dibujos anexos.

las figs. 1 a 8: muestran diferentes formas de realización de soportes conformes a la invención para cámaras de muestras,

la fig. 9 muestra una ilustración de la carga del soporte conforme a la invención con cámaras de muestras y la extracción de secciones de cámara;

las figs. 11 y 12 muestran vistas esquemáticas de otras formas de realización de soportes conformes a la invención para cámaras de muestras;

la fig. 13: muestra otra ilustración del manejo de un dispositivo de almacenamiento criogénico conforme a la invención, y

la fig. 14: muestra una vista lateral esquemática de un bastidor de sujeción convencional (estado de la técnica).

La Figura 1 muestra una forma de realización de un soporte 10 conforme a la invención con diferentes variantes de elementos de alojamiento para al menos una cámara de muestras en una vista lateral esquemática. El soporte 10 está formado por un bastidor de sujeción 20 con una primera parte del bastidor 30 (también: parte del suelo 30) y una segunda parte del bastidor 40 (también: parte del techo 40). Las partes del bastidor conforman en su conjunto una forma continua, por ejemplo rectangular, que está conformada por varios elementos del bastidor dispuestos formando un ángulo recto entre sí, y/o una forma de estrella con elementos del bastidor dispuestos de modo radial (para ejemplos, ver las figuras 7a, b, 8). En la Figura 1 se muestra con la finalidad de ilustración, de modo esquemático, una sección del bastidor de sujeción 20. Cada parte del bastidor 30, 40 posee una superficie lateral 31, 41, de las que al menos una superficie lateral 31 y/o 41, para la conformación de elementos de alojamiento 21 a 25, puede presentar un perfilado. El perfilado, sin embargo, no está previsto forzosamente (ver, por ejemplo, la Figura 6). Las partes del bastidor 30, 40 se pueden montar junto con elementos de unión 50, por ejemplo en forma de clavijas 51 o casquillos 52. En un lado del bastidor de sujeción pueden estar unidas las partes del bastidor 30, 40 entre ellas de modo que se puedan hacer bascular.

Para la conformación del elemento de alojamiento 21 con una sección transversal en forma oval, las dos superficies laterales 31, 41 llevan un perfilado con entalladuras en forma de semióvalo orientadas entre sí. Alternativamente, por ejemplo, la superficie lateral 31 de la parte del suelo 30 está conformada de modo plano, y únicamente la superficie lateral 41 de la parte del techo 40 está conformada con una entalladura de manera que el elemento de alojamiento 22 se conforma con una sección transversal en forma de semióvalo. De modo análogo se pueden conformar elementos de alojamiento 23, 24 con sección transversal triangular, rectangular o en forma de ranura por medio de un perfilado a uno o a ambos lados de las superficies laterales 31, 41. El elemento de alojamiento 25 representa una particularidad, en el que el perfilado comprende salientes y entalladuras complementarios entre sí en la superficie lateral 31, 41, que adicionalmente al apriete de las cámaras de muestras sujetas también hacen posible un doblez. El elemento de alojamiento 25 puede ser parte de un elemento de unión sobre la base de una combinación de nervio-ranura. Esta forma de realización de la invención mostrada en la Figura 3 con más particularidades posee la ventaja de que la cámara de muestras está cerrada en los elementos de alojamiento.

El bastidor de sujeción 10 está formado, preferentemente, por un material plástico deformable elásticamente a temperatura ambiente, por ejemplo elaborado de PE, TPX, polisulfona. Se fabrica preferentemente por medio de un procedimiento de moldeado por inyección. Las dimensiones de las partes del bastidor 30, 40 se escogen dependiendo de la aplicación, y se encuentran, por ejemplo, en el intervalo que va desde algunos cm a algunos dm. Los elementos de alojamiento conformados, por lo general, en forma rectangular u oval poseen normalmente dimensiones que son ligeramente menores que la dimensión exterior de las cámaras de muestras.

Las Figuras 2a, b muestran de modo ampliado una forma de realización concreta del soporte 10 conforme a la invención con otras particularidades. Las dos partes del bastidor 30, 40 poseen en las superficies laterales 31, 41 un perfilado en forma ondulada para la conformación de los elementos de alojamiento 21. Los elementos de unión 50 están previstos a distancias predeterminadas en las superficies laterales 31, 41, y están hechos de combinaciones de clavijas y casquillos 51, 52 con perfiles de enganche. En la parte izquierda de la Figura 2a está ilustrado un grupo de cámaras de muestras 11, respectivamente, de modo no deformado (antes del montaje de las partes del bastidor 30, 40), y apretado (después del montaje del bastidor de sujeción). En la Figura 2b se muestra el estado apretado de modo esquemático sin la parte superior del bastidor 41. El material presionado entre las partes del bastidor de las paredes de la cámara de muestras se aprieta a lo ancho preferentemente, de manera que adicionalmente a la sujeción de las cámaras de muestras también se produce un cierre local y una segmentación en cámaras parciales. La Figura 2b muestra además que en al menos una de las superficies laterales 31, 41 puede estar prevista una ranura 32 que se extiende en la dirección longitudinal de las superficies laterales. La ranura 32 conforma una zanja en la que se puede desviar el material de la pared de las cámaras de muestras, tal y como está ilustrado con otras particularidades en las Figuras 3a-c.

En las Figuras 3a a 3e se ilustran diferentes variantes de elementos de unión 50. Las Figuras 3a a 3c muestran una forma de realización de la invención en la que como elementos de unión 50 están previstos en la superficie lateral 41 superior de la parte del techo 40 un nervio 53 con un perfil de enganche, y en la parte del suelo 30 una ranura 54 con un perfil de enganche complementario. Adicionalmente, en las superficies superiores e inferiores 31, 41 están previstas a distancias determinadas entalladuras 26 para la conformación de los elementos de alojamiento (ver Figura 3b). La Figura 3c muestra los elementos de unión 50 en estado enganchado.

Una conformación modificada con elementos de unión 50 en forma de nervio y de ranura, que, sin embargo, no presentan ningún perfil de enganche, está ilustrada en la Figura 3d. Según otra alternativa, los elementos de unión 50 pueden comprender combinaciones de ganchos 55 y salientes 56 en los extremos libres de las partes del bastidor 30, 40 (Figura 3e).

La Figura 4 muestra en una vista en planta desde arriba en perspectiva la parte inferior del bastidor 30 de un soporte 10 conforme a la invención con una cámara de muestras 11 en forma de tubo flexible. La parte del bastidor 30 también comprende, además de los elementos del bastidor exteriores circulares, elementos del bastidor 33 interiores, que están conformados como nervios y que, del mismo modo, presentan superficies laterales superiores con un perfilado correspondiente a los principios explicados anteriormente. En los elementos del bastidor exteriores e interiores están previstos casquillos 52 como elementos de unión. Las cámaras de muestras 11 están diseñadas en forma de meandro por encima de la parte del bastidor 30. La disposición en forma de meandro posee la ventaja de que se puede alojar y conservar un volumen de muestras relativamente grande en una cámara de muestras continua en primer lugar. Por medio de la sujeción en el soporte 10, la cámara de muestras 11 se divide en cámaras parciales individuales o en secciones de cámara individuales, por medio de las cuales se facilita una extracción selectiva de muestras parciales (ver Figura 9). Las secciones de la cámara son regiones parciales de una cámara de muestras que en estado fijado discurren libremente entre los elementos del bastidor.

Las cámaras de muestras 11 están formadas, respectivamente, por un tubo flexible o un capilar con un diámetro interior que es fundamentalmente menor que la longitud de la cámara de muestras. El diámetro interior se encuentra, por ejemplo, en el intervalo que va de 5 \mum a 4 mm. La longitud de las cámaras de muestras se escoge, por ejemplo, en el intervalo que va de 0,5 cm a 10 dm. El cociente entre el diámetro de la sección transversal y la longitud de una cámara de muestras es preferentemente menor que 1/10. Las cámaras de muestras pueden estar elaboradas de cualquier material adecuado inerte y flexible, por ejemplo plástico, polímero o metal. De modo ventajoso, las cámaras de muestras miniaturizadas también pueden estar fabricadas con materiales de una mayor dureza, como por ejemplo cristal, materiales semiconductores, carbono o cerámica, que son deformables elásticamente con grosores de pared reducidos. El material de la pared de las cámaras de muestras puede estar conformado, dependiendo de los requerimientos deseados para la conservación criogénica, de modo hermético a los líquidos o de modo permeable. En particular, se puede usar un material que deje pasar los iones, tal y como se conoce de los tubitos de diálisis. En el material de la pared de las cámaras de muestras o en su superficie se pueden prever adicionalmente sensores (por ejemplo sensores de temperatura). Las cámaras de muestras pueden estar conformadas con un diámetro constante a lo largo de su longitud, que se corresponda con el diámetro de los extremos de entrada y salida (o aberturas de entrada y salida) de las cámaras de muestras. En el caso de formas de realización modificadas de la invención, a lo largo de la longitud de las cámaras de muestras está prevista una variación del diámetro interior.

Según la Figura 5, en la parte del bastidor 30 pueden estar previstas clavijas de sujeción 34. Las clavijas de sujeción 34 sobresalen desde la superficie lateral 31 superior de la parte del suelo 30 perpendicularmente hacia arriba, y están orientadas de modo correspondiente a la posición de los elementos de alojamiento. Las clavijas de sujeción 34 simplifican el dimensionado de la forma de meandro de la cámara de muestras. Alternativamente, según la invención, puede estar previsto un dispositivo de montaje especial en el que se pueda introducir la parte del bastidor 30 que se ha de cargar, y que lleve las clavijas de sujeción.

Las Figuras 6a y 6b muestran un soporte 10 conforme a la invención con cámaras de muestras 11 insertadas, de modo seccionado, antes y después del montaje de las partes del bastidor 30, 40. En esta forma de realización de la invención, las superficies laterales 31, 41 están conformadas planas y sin perfilados. Después del posicionamiento de las cámaras de muestras 11 (por ejemplo, con clavijas de sujeción según la Figura 5), se coloca la parte del bastidor 40 superior sobre las cámaras de muestras 11. Por medio de la presión de las partes del bastidor que anteriormente estaban sueltas se enganchan entre sí los elementos de unión 50. El estado montado se fija por medio de los perfiles de enganche de los elementos de unión 50, de manera que las cámaras de muestras 11 están dispuestas con secciones presionadas de modo inmóvil en relación al soporte 10 (Figura 6b).

Una forma de realización alternativa del soporte 10 conforme a la invención con elementos del bastidor 35 que se separan radialmente está ilustrada en las Figuras 7a, 7b y 8. La cámara de muestras 11 está diseñada en forma espiral sobre los elementos del bastidor 35 de la parte del bastidor 30 inferior (no se muestra la parte superior del bastidor). Entre los elementos del bastidor 35 se conforman a medida que aumenta la distancia respecto al centro, secciones de la cámara 12 más largas. La cámara de muestras 11 posee en un extremo en el centro del soporte una ampliación 13 en forma de embudo, que sobresale hacia arriba desde el plano del bastidor, y que sirve para la carga de las muestras.

La Figura 7a muestra la cámara de muestras 11 colocada antes del montaje del soporte. Después del montaje del soporte y del proceso de congelación, resulta la imagen según la Figura 7b. Entre las secciones de la cámara 12 está apretada la cámara de muestras 11 en los elementos del bastidor 35. Alternativamente a la disposición en forma espiral, según la Figura 8, la cámara de muestras 11 puede estar diseñada en forma rectangular, de manera que se producen secciones de la cámara 12 en línea recta.

En la Figura 9 se ilustra una secuencia ventajosa en el manejo de dispositivos de almacenamiento criogénico conformes a la invención, de un modo esquemático. En primer lugar se realiza una carga de la(s) cámara(s) de muestras. Las muestras en suspensión se alojan por medio del ejercicio de una presión negativa o bajo el efecto de fuerzas capilares desde depósitos de almacenamiento, por ejemplo la ondulación de una placa de título, en las cámaras de muestras. Según los pasos 1 y 2, análogamente a la Figura 6, las cámaras de muestras 11 llenas son colocadas entre las partes del bastidor, y son presionadas. En esta conformación, los elementos de unión 50 están formados por ganchos laterales de la parte del bastidor 40 superior. Según el paso 3, se puede realizar un sellado adicional del compuesto de soporte-cámaras de muestras, por ejemplo con una envoltura de una lámina 14. En este estado se realiza el proceso de congelación y el alojamiento en estado congelado (conservado de modo criogénico). El dispositivo de almacenamiento criogénico se lleva a un entorno con una temperatura más reducida. Este entorno se da, por ejemplo, en un recipiente criogénico con nitrógeno líquido o con nitrógeno gaseoso con T = - 120ºC.

Para la extracción de muestras por medio de la separación de secciones de la cámara 12 después o durante la conservación criogénica, según el paso 4 se separan las secciones deseadas de la cámara de modo mecánico con una herramienta de corte 90. La herramienta de corte puede estar conformada con uno o dos filos (ver inserción). Las secciones de la cámara 12 son cortadas directamente junto a los elementos de alojamiento en el bastidor de sujeción 20. Gracias a ello, los extremos de las secciones separadas de la cámara 12 presentan una deformación que difiere de la forma circular de la sección transversal, tal y como se muestra esquemáticamente en el paso 5. Las secciones de la cámara congeladas se pueden seguir conservando, por ejemplo, en estado conservado de modo criogénico. De modo ventajoso, permanecen las deformaciones en los extremos de las secciones de la cámara en tanto que se de el estado criogénico.

La extracción de muestras puede llevarse a cabo, de modo alternativo, de manera que todo el dispositivo de almacenamiento criogénico se descongele y se retire el contenido de la al menos una cámara de muestras. Esto se lleva a cabo, por ejemplo, poniendo una presión negativa en uno de los extremos de la al menos una cámara de muestras.

En el paso 4 de la Figura 9 se ilustra otro punto de vista importante de la invención. De modo ventajoso, el soporte 10 puede estar unido con un dispositivo de almacenamiento de datos 60. El dispositivo de almacenamiento de datos 60 contiene al menos un almacenamiento de datos 61 que está dispuesto preferentemente en una carcasa 62 (ver Figura 11). El almacenamiento de datos 61 posee un punto de corte para el alojamiento, al menos temporal, de una conexión de enchufe 63 con líneas de unión eléctricas, a través de las cuales se puede conectar el almacenamiento de datos 61 con un dispositivo de control (no representado).

Como almacenamiento de datos 61 puede estar previsto un chip de almacenamiento conocido de por sí, en el que estén almacenados, dependiendo de la aplicación, cualquier tipo de datos, de modo eléctrico o magnético. Se usa, por ejemplo, una denominada memoria "flash". En el dispositivo de almacenamiento de datos 60 también puede estar previsto un almacenamiento óptico. En el almacenamiento de datos se escriben datos para la caracterización de las muestras en suspensión alojadas. Estos datos comprenden, por ejemplo, en el caso de aplicaciones médicas, datos de identificación para la determinación del donante y del tipo de las células suspendidas, otras características del donante, como por ejemplo el grupo sanguíneo, dado el caso, datos de literatura relevantes relativos a los tipos de células suspendidas, y dado el caso, datos de medición ya existentes y/o datos de imágenes. Los datos de imágenes comprenden, por ejemplo, imágenes de microscopio óptico o de microscopio de electrones de células suspendidas, que sirven para la caracterización específica del donante de las células, y para comparaciones posteriores. Los datos almacenados son accedidos y/o complementados durante el almacenamiento criogénico.

Se muestran conformaciones alternativas del soporte 10 según la invención con el bastidor de sujeción 20 y el dispositivo de almacenamiento de datos 60 en las Figuras 10 a 12. La carcasa 62 del dispositivo de almacenamiento de datos 60 está conformada preferentemente en una pieza con el material del bastidor de sujeción 10. El bastidor de sujeción 20 está conformado cerrado por medio de elementos de bastidor circulares según la Figura 10. Alternativamente, según las Figuras 11 y 12, están previstos elementos de bastidor 36 en forma de varillas, que se extienden desde la carcasa 62 del almacenamiento de datos. Cada elemento de bastidor 36 contiene una serie de elementos de alojamiento en los que está fijada la al menos una cámara de muestras 11. Puede estar prevista, por ejemplo, una única cámara de muestras, que se pase en forma de meandro a través de todos los elementos de bastidor 36, y que se fije en el estado colocado o sujeto. Alternativamente pueden estar previstas también varias cámaras de muestras separadas, tal y como se ilustra en la Figura 12. El bastidor de sujeción 20 puede presentar para la separación de partes de la(s) cámara(s) de muestras, por ejemplo en forma de puntos de rotura controlada 37.

La Figura 13 ilustra una forma de realización de la invención, en la que están previstas dos cámaras de muestras 11 que se cargan con diferentes muestras de suspensión. En la práctica, el número de las cámaras de muestras pertenecientes a un dispositivo de almacenamiento criogénico puede ser considerablemente mayor, y en particular, se puede escoger dependiendo de la conformación del depósito colector de muestras 70. El depósito colector de muestras 70 se conforma, por ejemplo, por medio de una placa de título micro o nano con un gran número de compartimentos 71. Las aberturas de entrada de las cámaras de muestras 11 penetran, respectivamente, en uno de los compartimentos.

Para la carga de las cámaras de muestras, las partes del bastidor mostradas esquemáticamente todavía no están montadas. Las muestras en suspensión son absorbidas en las cámaras de muestras. Para la carga en paralelo, el dispositivo de absorción 80 comprende varias pipetas de líquido 81, 82, ... de modo correspondiente al número de las cámaras de muestras que se han de cargar. Alternativamente, la carga de las cámaras de muestras, sin embargo, también se puede realizar de modo secuencial con una única pipeta de líquido 81.

Después de la carga se montan las partes del bastidor, para fijar la(s) cámara(s) de muestras. Los extremos que llevan, por un lado, al depósito colector de muestras 70, y por otro lado, al dispositivo de absorción 80 de las cámaras de muestras son cortadas. Este estado está ilustrado esquemáticamente en la Figura 13 (abajo). Los extremos cerrados son accesibles libremente, dado el caso, para un acceso posterior al contenido de las cámaras de muestras.

Las características de la invención dadas a conocer en el preámbulo, las reivindicaciones y los dibujos pueden ser importantes tanto de modo individual como en combinación para la realización de la invención en sus diferentes configuraciones.

Claims (18)

1. Soporte (10) para al menos una cámara de muestras (11), en particular para la conservación criogénica de muestras biológicas, que comprende un bastidor de sujeción (20), que está equipado para el posicionamiento de la cámara de muestras (11), en el que el bastidor de sujeción (20) presenta una primera parte del bastidor (30) y una segunda parte del bastidor (40), que se pueden montar entre sí con elementos de unión (50) de modo que se pueden desprender, y que en el estado montado se tocan, respectivamente, en superficies laterales (31, 41), en el que por medio de un perfilado previsto en al menos una de las superficies laterales (31, 41) se conforman elementos de alojamiento (21-26), caracterizado porque los elementos de alojamiento (21-26), en el estado montado de las partes del bastidor, conforman orificios pasantes a través del bastidor de sujeción (20) y dejan un espacio libre para el alojamiento de la cámara de muestras, pudiéndose presionar la cámara de muestras (11) en estado montado de las partes del bastidor (30, 40) entre las superficies laterales (31, 41), y pudiéndose fijar de modo inmóvil en relación con el bastidor de
sujeción.

2. Soporte según la reivindicación 1, en el que una de las superficies laterales (31) es plana, y la otra superficie lateral (42) presenta, respectivamente, el perfilado, de manera que entre las superficies laterales (31, 41) se conforman los elementos de alojamiento (21-26).

3. Soporte según la reivindicación 1, en el que las dos superficies laterales (31-41) presentan el perfilado, de manera que entre las superficies laterales (31, 41) se conforman los elementos de alojamiento (21-26).

4. Soporte según una de las reivindicaciones precedentes, en el que los elementos de alojamiento (21-26) presentan una sección transversal oval, triangular, rectangular o en forma de ranura.

5. Soporte según una de las reivindicaciones precedentes, en el que los elementos de unión (50) comprenden nervios y ranuras ajustados y/o clavijas y casquillos en las superficies laterales.

6. Soporte según la reivindicación 5, en el que los nervios, ranuras, clavijas y/o casquillos presentan perfiles de enganche.

7. Soporte según una de las reivindicaciones precedentes, en el que una de las partes del bastidor (30) presenta en su parte exterior nervios de sujeción (34) que están orientados, respectivamente, en relación a los elementos de alojamiento, de tal manera que se hace posible una sujeción de las cámaras de muestras (11) sobre la parte del bastidor (30).

8. Soporte según una de las reivindicaciones precedentes, en el que las partes del bastidor (30, 40) están unidas entre sí en un lado de modo que se pueden hacer bascular.

9. Soporte según una de las reivindicaciones precedentes, en el que las partes del bastidor presentan, respectivamente, elementos del bastidor exteriores que conforman una forma rectangular del bastidor de sujeción (20).

10. Soporte según la reivindicación 9, en el que las partes del bastidor están equipadas con elementos interiores del bastidor que conforman en el estado montado, igualmente, elementos de alojamiento, en los que se puede fijar la cámara de muestras (11) empleada.

11. Soporte según una de las reivindicaciones precedentes 1 a 8, en el que las partes del bastidor están formadas, respectivamente, de elementos del bastidor (35) que conforman una forma de estrella que se separa radialmente.

12. Soporte según una de las reivindicaciones precedentes, que está unido con un dispositivo de almacenamiento de datos (60) con al menos un almacenamiento de datos (61).

13. Dispositivo de almacenamiento criogénico, que comprende un soporte (10) según una de las reivindicaciones precedentes, y al menos una cámara de muestras (11) fabricada de un material deformable flexible y elástico.

14. Dispositivo de almacenamiento criogénico según la reivindicación 13, en el que la al menos una cámara de muestras (11) posee la forma de un cilindro hueco, de un cono hueco, de un tubo, de un tubo flexible, de un canal o de una aguja hueca.

15. Procedimiento para el almacenamiento de al menos una muestra en suspensión en un estado de baja temperatura, con las etapas siguientes:

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Alojamiento de la al menos una muestra en suspensión en al menos una cámara de muestras (11) elaborada de un material deformable flexible y elástico,

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Sujeción de la cámara de muestras (11) en un soporte (10) según una de las reivindicaciones 1 a 13 precedentes, en el que la cámara de muestras (11) se fija entre las partes del bastidor (30, 40), y

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Paso de las muestras en suspensión a un estado de baja temperatura por medio del posicionamiento del soporte (10) con la cámara de muestras (11) en un medio criogénico.

16. Procedimiento según la reivindicación 15, en el que el alojamiento de la al menos una muestra en suspensión en la al menos una cámara de muestras se realiza por medio de la inmersión de la al menos una cámara de muestras (11) con un extremo de entrada en un depósito colector de muestras (70) y del paso de la muestra en suspensión, bajo el efecto de una presión negativa ejercida en el extremo de salida correspondiente, o de fuerzas capilares.

17. Procedimiento según una de las reivindicaciones 15 ó 16, en el que se la al menos una cámara de muestras (11), en estado de baja temperatura, se desprende al menos una muestra parcial por medio de una separación mecánica.

18. Procedimiento según la reivindicación 17, en el que la separación mecánica comprende un corte junto a los elementos del bastidor del soporte (10) de secciones de la cámara (12) de la cámara de muestras (11).