ES2279422T3 - Derivados de 3h-fenoxazina adecuados como agentes formadores de imagenes en la region del infrarrojo proximo, preparacion y uso de los mismos. - Google Patents
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Abstract
Compuestos de fórmula I en donde X e Y representan CH, CH2 o un heteroátomo divalente o trivalente, con la condición de que X e Y no sean al mismo tiempo CH o CH2; m y o representan independientemente entre sí 0 o 1, con las condiciones de que si m es 0 entonces la línea de trazos entre Y y el átomo de C vecino representa un enlace e Y es CH o un heteroátomo trivalente, si m es 1 entonces la línea de trazos entre Y y el átomo de C vecino está ausente e Y es CH2 o un heteroátomo divalente, si o es 0 entonces la línea de trazos entre X y el átomo de C vecino representa un enlace y X es CH o un heteroátomo trivalente, si o es 1 entonces la línea de trazos entre X y el átomo de C vecino está ausente y X es CH2 o un heteroátomo divalente; A representa (CR3R4)p y Q representa (CR9R10)n; n y p representan independientemente entre sí 0 o 1; R6, R7, R13 y R14 representan independientemente entre sí hidrógeno, halógeno, alquilo 1-4C, alquil(1-4C)SO2, SO3H, carboxi, alcoxi(1-4C)carbonilo, alcoxi 1-4C,OH o NR15R16; R1, R2, R3, R4, R9, R10, R11 y R12 representan independientemente entre sí hidrógeno, alquilo 1-4C, carboxi, alcoxi(1-4C)carbonilo o alcoxi o alcoxi 1-4C o, cuando X es CH o CH2 entonces R1 y R2 también pueden ser OH o NR15R16 o cuando Y es CH o CH2 entonces R11 y R12 pueden también ser OH o NR15R16; R5, R8, R15 y R16 representan independientemente entre sí hidrógeno, alquilo 1-4C, alcoxi 1-4C, R17OC(O)-alquilo 1-4C o (grupo reactivo)-alquilo 1-4C; y R17 representa hidrógeno o alquilo 1-4C; en forma de la base libre o de una sal de adición de ácido.
Description
Derivados de 3H-fenoxazina
adecuados como agentes formadores de imágenes en la región del
infrarrojo próximo, preparación y uso de los mismos.
La invención se refiere a nuevos agentes
formadores de imágenes en la región del infrarrojo próximo y al uso
de dichos agentes en un método para el marcaje de placas amiloideas
en el cerebro. En particular, los agentes de la invención son
útiles a la hora de identificar la formación y/o acumulación de
amiloide en enfermedades neurológicas y vasculares, tal como la
enfermedad de Alzheimer.
La enfermedad de Alzheimer afecta al 8% de la
población con más de 65 años y a por lo menos el 35% de aquellos
que tienen una edad por encima de los 80 años. Ningún método actual
permite un diagnóstico definitivo de la enfermedad de Alzheimer
antes de la autopsia y los médicos únicamente pueden efectuar un
diagnóstico de una probable enfermedad de Alzheimer mediante la
comparación de los resultados de varios ensayos y observaciones que
conducen a una precisión del diagnóstico del 80 al 90%
aproximadamente. La identificación de un agente formador de
imágenes con suficiente especificidad y sensibilidad para contrastar
la enfermedad de Alzheimer permitiría avances importantes en la
forma de diagnosticar la enfermedad de Alzheimer.
La enfermedad de Alzheimer es una enfermedad
neurodegenerativa del cerebro caracterizada por demencia, deterioro
cognitivo y pérdida de memoria. Los péptidos beta amiloideos
A\beta1-40 y A\beta1-42 son
importantes metabolitos de la proteína precursora de amiloide y se
encuentran en placas seniles y depósitos amiloideos
cerebrovasculares en los individuos afectados. Se considera que la
formación y acumulación de péptidos beta amiloideos agregados en el
cerebro son factores críticos en el desarrollo y progreso de la
enfermedad de Alzheimer. Otro contraste de la enfermedad es la
interfosforilación de la proteína tau asociada con los microtúbulos
con posterior formación de marañas neurofibrilares.
En la actualidad, la única confirmación
definitiva de la enfermedad de Alzheimer se consigue mediante examen
histopatológico postmortem de depósitos amiloideos y marañas
neurofibrilares en el cerebro. La valoración precoz de los síntomas
clínicos para el diagnóstico suele ser difícil y poco fiable. Por
tanto, existe la necesidad de disponer de agentes formadores de
imágenes in vivo que puedan demostrar específicamente la
localización y densidad de las placas amiloideas y marañas
neurofibrilares en el cerebro vivo. Dichos agentes serían
herramientas de diagnóstico útiles para la detección y regulación
precoces del progreso de la enfermedad, así como para evaluar la
eficacia de los tratamientos de la enfermedad de Alzheimer.
Las marañas neurofibrilares son elementos
citoesqueléticos constituidos por agregados de proteínas tau
hiper-fosforiladas ensamblados en forma de fibras
amiloideas de restricción periódica en filamentos helicoidales
apareados. El principal componente de las placas amiloideas es un
péptido beta-amiloideo con una longitud de
39-43 aminoácidos que es generado a partir de la
escisión de una proteína más grande precursora de amiloide. A
excepción de las placas difusas formadas casi exclusivamente de
péptidos beta-amiloideos, las placas amiloideas son
lesiones complejas que contienen numerosos productos celulares
asociados. Los depósitos de beta-amiloide se
presentan muy al principio del proceso de la enfermedad, bastante
antes de que se desarrollen los síntomas clínicos.
La formación de imágenes directas de depósitos
de amiloide in vivo es difícil ya que los depósitos tienen
muchas de las mismas propiedades físicas (por ejemplo, densidad y
contenido en agua) que los tejidos normales. Sin embargo, son
disponibles los procedimientos para la irradiación y formación de
imágenes de tejidos biológicos con luz del intervalo de longitud de
onda de 600 a 1.000 nm en la región del infrarrojo próximo
(NIR).
En la formación de imágenes por fluorescencia,
la energía procedente de una fuente de luz externa, por ejemplo un
láser, es absorbida y casi inmediatamente re-emitida
a una longitud de onda más larga de menor energía. Dado que el
tejido biológico tiene una permeabilidad relativamente alta a la luz
de longitud de onda larga de la región espectral de 600 a 1.000 nm,
tanto la detección de radiación no absorbida en forma de una
visualización de la transmisión como la detección de la radiación de
fluorescencia emitida, pueden proporcionar datos específicos al
tejido. La formación de imágenes de tejidos más profundos (es decir,
en el intervalo de centímetros) se efectúa empleando luz NIR en
combinación con fluorcromos NIR. La formación de imágenes por
fluorescencia en la región del infrarrojo próximo presenta la
ventaja de reducir al mínimo la autofluorescencia del tejido,
mejorando así las relaciones
diana/fondo.
diana/fondo.
Los agentes adecuados para la formación de
imágenes del cerebro in vivo deberán ser capaces de atravesar
la barrera sangre-cerebro para entrar en el cerebro
en cantidades suficientes que sean detectables mediante radiación
en la región del infrarrojo próximo, han de ser de bajo peso
molecular y lipófilos. Además, deberán tener una alta afinidad y
unión específica a placas de amiloide sin degradarse
rápidamente.
La presente invención proporciona nuevos agentes
formadores de imágenes que se pueden emplear en la formación de
imágenes en la región del infrarrojo próximo.
En un aspecto de la invención, se proporcionan
compuestos de fórmula I
en forma de la base libre o en
forma de una sal de adición de ácido, en
donde
X e Y representan CH, CH_{2} o un heteroátomo
divalente o trivalente, con la condición de que X e Y no sean al
mismo tiempo CH o CH_{2};
m y o representan independientemente entre sí 0
o 1, con las condiciones de que
si m es 0 entonces la línea de trazos entre Y y
el átomo de C vecino representa un enlace e Y es CH o un heteroátomo
trivalente,
si m es 1 entonces la línea de trazos entre Y y
el átomo de C vecino está ausente e Y es CH_{2} o un heteroátomo
divalente,
si o es 0 entonces la línea de trazos entre X y
el átomo de C vecino representa un enlace y X es CH o un heteroátomo
trivalente,
si o es 1 entonces la línea de trazos entre X y
el átomo de C vecino está ausente y X es CH_{2} o un heteroátomo
divalente;
A representa (CR_{3}R_{4})_{p} y Q
representa (CR_{9}R_{10})_{n};
n y p representan independientemente entre sí 0
o 1;
R_{6}, R_{7}, R_{13} y R_{14}
representan independientemente entre sí hidrógeno, halógeno, alquilo
1-4C,
alquil(1-4C)SO_{2}, SO_{3}H,
carboxi, alcoxi(1-4C)carbonilo, alcoxi
1-4C, OH o NR_{15}R_{16};
R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{4}, R_{9},
R_{10}, R_{11} y R_{12} representan independientemente entre
sí hidrógeno, alquilo 1-4C, carboxi,
alcoxi(1-4C)carbonilo o alcoxi o
alcoxi 1-4C o, cuando X es CH o CH_{2} entonces
R_{1} y R_{2} también pueden ser OH o NR_{15}R_{16} o cuando
Y es CH o CH_{2} entonces R_{11} y R_{12} pueden también ser
OH o NR_{15}R_{16};
R_{5}, R_{8}, R_{15} y R_{16}
representan independientemente entre sí hidrógeno, alquilo
1-4C, alcoxi 1-4C,
R_{17}OC(O)-alquilo 1-4C o
(grupo reactivo)-alquilo 1-4C; y
R_{17} representa hidrógeno o alquilo
1-4C.
En un aspecto preferido de la invención, se
proporcionan compuestos de fórmula I en forma de la base libre o de
una sal de adición de ácido en donde X es O, S o CH_{2} e Y es O,
S o CH_{2}, con la condición de que X e Y no sean ambos
CH_{2}.
Los compuestos de fórmula I portan una carga
catiónica en virtud de su estructura y, por tanto, están siempre
acompañados por un anión, por ejemplo, un anión resultante de la
desprotonación de un ácido orgánico o carboxílico, tal como cloruro,
bromuro, tetrafluorborato o trifluoracetato.
Con anterioridad y en cualquier lugar de la
presente descripción, los siguientes términos tienen los siguientes
significados:
Hal o halógeno representa I, Br, Cl o F.
Los radicales o compuestos orgánicos pueden
estar ramificados o sin ramificar.
Un "grupo alquilo" está ramificado o sin
ramificar y contiene preferentemente de 1 a 4 átomos de carbono.
Alquilo representa, por ejemplo, metilo, etilo, propilo, butilo.
Un "grupo alcoxi" está ramificado o sin
ramificar y contiene preferentemente de 1 a 4 átomos de carbono.
Alcoxi representa, por ejemplo, metoxi, etoxi, propoxi, butoxi.
"Alquilcarbonilo" se refiere a un radical
de fórmula -C(O)R_{a} en donde R_{a} es un radical
alquilo como se ha definido anteriormente.
Figura 1: el gráfico muestra la unión específica
del compuesto del ejemplo 3 a placas AD en ratones hembra
transgénicos de 16 meses de edad, APP23, que son inyectados i.v. con
3 mg/kg del agente de la invención. La unión específica se define
como la señal de fluorescencia (ratones transgénicos) menos la señal
de fluorescencia (ratones no transgénicos) dividido por la señal de
fluorescencia (ratones transgénicos).
En un aspecto de la invención, los compuestos de
fórmula I son capaces de ser detectados por radiación en la región
del infrarrojo próximo de una longitud de onda de
600-1.000 nm.
Según otro aspecto más de la invención, los
compuestos de la invención exhiben preferentemente las siguientes
propiedades:
- (i)
- especificidad por placas amiloideas
- (ii)
- penetración de la barrera sangre-cerebro
- (iii)
- solubilidad
- (iv)
- capaces de ser detectados por radiación en la región del infrarrojo próximo.
Se determina que se ha presentado la
especificidad de un compuesto de la invención por placas amiloideas
cuando existe una interacción química entre un compuesto de la
invención y dicha placa amiloidea. Esta asociación química incluye:
enlaces covalentes, enlaces iónicos, interacciones
hidrófila-hidrófila o interacciones
hidrófoba-hidrófoba.
Según un aspecto de la invención, se proporciona
una composición que comprende un compuesto de fórmula I y un
excipiente o diluyente farmacéuticamente aceptable.
Según otro aspecto más de la presente invención,
se proporciona una composición que comprende un compuesto de la
invención capaz de ser detectado por radiación en la región del
infrarrojo próximo de longitud de onda de 600-1.000
nm.
Las composiciones de acuerdo con la invención
comprenden un compuesto de la invención y están destinadas a
incluir todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersión,
revestimientos, agentes isotónicos y retardadores de la absorción y
similares, compatibles con la aplicación. En tanto que cualquier
medio o agente convencional sea compatible con el compuesto activo,
dicho medio se puede utilizar en las composiciones de la invención.
En las composiciones se pueden incorporar también compuestos activos
suplementarios.
Por ejemplo, cuando se aplica una composición de
la invención a un sujeto, aquella se formula para que sea
compatible con la vía de aplicación proyectada. Ejemplos de vías de
aplicación incluyen la administración parenteral, por ejemplo
intravenosa, intradérmica, subcutánea, oral (por ejemplo,
inhalación), transdérmica (tópica), transmucosal y rectal. Las
soluciones o suspensiones empleadas para aplicación parenteral,
intradérmica o subcutánea pueden incluir los siguientes componentes:
un diluyente estéril, tal como agua para inyección, solución
salina, aceites fijos, polietilenglicoles, glicerina, propilenglicol
y otros disolventes sintéticos; agentes antibacterianos tal como
alcohol bencílico o metilparabenos; antioxidantes tal como ácido
ascórbico o bisulfito sódico; agentes quelantes tal como ácido
etilendiaminatetraacético o ciclodextrina; tampones tales como
acetatos, citratos o fosfatos y agentes para ajustar la tonicidad
tal como cloruro sódico o dextrosa. El pH se puede ajustar con
ácidos o bases, tal como ácido clorhídrico o hidróxido sódico.
Los compuestos o composiciones de la invención
se pueden unir a células o vectores y pueden ser suministrados a un
sujeto mediante, por ejemplo, inyección intravenosa, administración
local o por inyección estereotáctica.
La composición de la presente invención puede
incluir además uno o más de los siguientes componentes, en las
concentraciones indicadas, con la osmolalidad final ajustada con
cloruro sódico o cloruro potásico en un valor de alrededor de 250
miliosmoles (m Osm) a 330 miliosmoles; K/NaHCO_{3} a una
concentración de alrededor de 5-50 mM; MgCl_{2} a
una concentración de alrededor de 0-88 mM; KCl a una
concentración de alrededor de 4-104 mM;
Na_{3}PO_{4} a una concentración de alrededor de
0-1,5 mM; y CaCl_{2} a una concentración de
alrededor de 0-0,6 mM. Con preferencia, la solución
tampón se formula para mantener el pH de la composición reactiva
autorética en un valor comprendido entre 7 y 8 aproximadamente, con
suma preferencia alrededor de 7,4 y, en consecuencia, puede incluir
uno o más de los siguientes componentes, en los intervalos de
concentración indicados, con la osmolalidad final de alrededor de
280 m Osm a 300 m Osm: Tris/TEA a una concentración de alrededor de
0-150 mM; K_{2}Ox/EDTA a una concentración de
alrededor de 0-121 mM; y KCl/NaCl a una
concentración de alrededor de 0-155 mM.
Las composiciones de la presente invención
también pueden incluir ciertos aniones y cationes (por ejemplo,
alquilcloruros de metales) para facilitar la penetración a través de
las membranas celulares. Ejemplos no limitativos de aniones incluyen
bicarbonato, cloruro, borato, barbital, oxalato (Ox) o ácido
etilendiaminatetraacético (EDTA). Ha de indicarse que no todos los
aniones han resultado ser eficaces a la hora de promover la
penetración de un lado a otro de las membranas celulares. Ejemplos
no limitativos de cationes adecuados incluyen sodio (por ejemplo,
NaCl), potasio (por ejemplo, KCl), trishidroximetilaminometano
(Tris), (Tris[hidroximetil]-aminometano-ácido
clorhídrico (Tris-HCl)) o trietanolamina (TEA).
Según otro aspecto de la invención, se
proporcionan conjugados que comprenden un compuesto de la invención
enlazado covalentemente a una biomolécula a través de un grupo
reactivo. Las biomoléculas se pueden seleccionar del grupo
consistente en: nucleósido, nucleótido, oligonucleótido, ácido
nucleico, proteína, péptido, aminoácido, polisacárido,
oligosacárido, monosacárido, fármaco o una pequeña molécula, por
ejemplo, con un PM menor de 500.
El término "grupo reactivo" tal y como aquí
se emplea significa en particular un grupo como se define en la
tabla 1.
En otro aspecto de la invención, se proporciona
un procedimiento para la producción del compuesto de fórmula I y
sus sales, que comprende las etapas de reaccionar un derivado
fenólico de fórmula III
en donde los radicales y símbolos
A, X, R_{1}, R_{2}, R_{5}, R_{6}, R_{14} y o tienen los
significados definidos en la reivindicación 1 para un compuesto de
fórmula I, con un compuesto nitroso o diazo de fórmula
IV
en donde los radicales y símbolos
Q, Y, R_{7}, R_{8}, R_{11}, R_{12}, R_{13} y m tienen los
significados definidos en la reivindicación 1 para un compuesto de
fórmula I, R_{18} representa oxo o
p-nitrofenil-N= y R_{19}
representa hidroxi; y recuperar el compuesto resultante de fórmula I
en forma de la base libre o en forma de una sal de adición de
ácido.
Los compuestos de la invención se pueden
producir, por ejemplo, como se describe en los ejemplos
1-5. La elaboración de las mezclas de reacción y la
purificación de los compuestos así obtenidos se pueden llevar a
cabo de acuerdo con procedimientos conocidos. Las sales de adición
de ácido se pueden producir a partir de las bases libre de manera
conocida y viceversa. Los materiales de partida de fórmulas III y IV
son conocidos o se pueden preparar según métodos conocidos en la
técnica o análogos a los descritos en los ejemplos.
La invención proporciona un método para el
marcaje de estructuras diana en un cerebro por aplicación de un
compuesto o composición de la invención. El término "aplicar"
se emplea en su sentido más amplio e incluye cualquier método de
introducir los compuestos o composiciones de la invención en el
cuerpo de un sujeto o en parte de dicho cuerpo. Un sujeto se refiere
a cualquier mamífero incluyendo, por ejemplo, un ser humano, una
rata, un ratón, un perro, un gato o ganado porcino.
La aplicación de un compuesto o composición de
la invención a un sujeto se puede efectuar de forma sistémica o
local. Por ejemplo, se puede aplicar un compuesto de la invención al
sujeto de manera que se suministre por todo el cuerpo.
Alternativamente, se puede aplicar un compuesto de la invención
localmente a un órgano o tejido específico de interés. Esta
aplicación local puede ser in vivo en un sujeto vivo o in
vitro después de haber separado del cuerpo una muestra de
tejido. Ejemplos de aplicación de un compuesto o composición de la
invención se describen en la sección de ejemplos.
Una vez que se ha aplicado un compuesto o
composición de la invención, se efectúa la detección de los
compuestos empleando radiación en la región del infrarrojo próximo.
La cantidad de compuesto necesaria a detectar puede ser determinada
fácilmente por los expertos en la materia. El incremento de la
cantidad de un compuesto de la invención y la comparación con un
control adecuado puede determinar la dosificación precisa necesaria
del compuesto.
La formación de imágenes de los depósitos
amiloideos se puede efectuar también cuantitativamente de manera
que pueda determinarse la cantidad de depósitos amiloideos. Para el
análisis cuantitativo, las imágenes de fluorescencia son analizadas
en una región de interés base.
En un aspecto de la invención, se proporciona un
método de marcaje de estructuras diana en el cerebro, que
comprende:
- (i)
- aplicar una composición que comprende un compuesto de fórmula I en forma de la base libre o de una sal de adición de ácido;
- (ii)
- permitir el tiempo suficiente para que dicho compuesto se asocie químicamente con la estructura diana en el cerebro;
- (iii)
- detectar dicho compuesto empleando radiación en la región del infrarrojo próximo.
En otro aspecto de la invención, se proporciona
un método para el marcaje de estructuras diana en el cerebro, que
comprende:
- (i)
- aplicar una composición que comprende un compuesto de fórmula I en donde X es O, S o C e Y es O, S o CH_{2} con la condición de que X e Y no sean ambos CH_{2};
- (ii)
- permitir el tiempo suficiente para que dicho compuesto se asocie químicamente con la estructura diana en el cerebro;
- (iii)
- detectar dicho compuesto empleando radiación en la región del infrarrojo próximo.
Según otro aspecto más de la invención, se
proporciona un método para el marcaje de estructuras diana en el
cerebro, que comprende:
(i) aplicar una composición que comprende un
compuesto de fórmula
en
donde
X e Y representan CH, CH_{2} o un heteroátomo
divalente o trivalente, con la condición de que X e Y no sean al
mismo tiempo CH o CH_{2};
m y o representan independientemente entre sí 0
o 1, con las condiciones de que
si m es 0 entonces la línea de trazos entre Y y
el átomo de C vecino representa un enlace e Y es CH o un heteroátomo
trivalente,
si m es 1 entonces la línea de trazos entre Y y
el átomo de C vecino está ausente e Y es CH_{2} o un heteroátomo
divalente,
si o es 0 entonces la línea de trazos entre X y
el átomo de C vecino representa un enlace y X es CH o un heteroátomo
trivalente,
si o es 1 entonces la línea de trazos entre X y
el átomo de C vecino está ausente y X es CH_{2} o un heteroátomo
divalente;
A representa (CR_{3}R_{4})_{p} y Q
representa (CR_{9}R_{10})_{n};
n y p representan independientemente entre sí 0
o 1;
R_{6}, R_{7}, R_{13} y R_{14}
representan independientemente entre sí hidrógeno, halógeno, alquilo
1-4C,
alquil(1-4C)SO_{2}, SO_{3}H,
carboxi, alcoxi(1-4C)carbonilo, alcoxi
1-4C, OH o NR_{15}R_{16};
R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{4}, R_{9},
R_{10}, R_{11} y R_{12} representan independientemente entre
sí hidrógeno, alquilo 1-4C, carboxi,
alcoxi(1-4C)carbonilo o alcoxi o
alcoxi 1-4C o, cuando X es CH o CH_{2} entonces
R_{1} y R_{2} también pueden ser OH o NR_{15}R_{16} o cuando
Y es CH o CH_{2} entonces R_{11} y R_{12} pueden también ser
OH o NR_{15}R_{16};
R_{5}, R_{8}, R_{15} y R_{16}
representan independientemente entre sí hidrógeno, alquilo
1-4C, alcoxi 1-4C,
R_{17}OC(O)-alquilo 1-4C o
(grupo reactivo)-alquilo 1-4C; y
R_{17} representa hidrógeno o alquilo
1-4C;
en forma de la base libre o de una sal de
adición de ácido, o de fórmula II
en
donde
R_{6}, R_{7}, R_{13} y R_{14}
representan independientemente entre sí hidrógeno, halógeno, alquilo
1-4C,
alquil(1-4C)SO_{2}, SO_{3}H,
carboxi, alcoxi(1-4C)carbonilo, alcoxi
1-4C, OH o NR_{15}R_{16}, y
R_{21} y R_{22} son hidrógeno, alquilo
1-4C, alcoxi 1-4C, fenilo,
fenilalquilo, carboxi o halógeno;
R_{14} y R_{22} junto con los átomos de
carbono a los cuales están unidos pueden también formar un anillo
saturado o insaturado;
R_{21} y R_{13} junto con los átomos de
carbono a los cuales están unidos pueden también formar un anillo
saturado o insaturado;
R_{5}, R_{8}, R_{20} y R_{23} son
hidrógeno, alquilo 1-4C, alcoxi
1-4C, polioxihidrocarbilo, fenilo, fenilalquilo;
R_{8} y R_{20} junto con el átomo de carbono
al cual están unidos pueden formar un anillo saturado o
insaturado;
R_{23} y R_{5} junto con el átomo de
nitrógeno al cual están unidos pueden formar un anillo saturado o
insaturado;
R_{22} y R_{23} junto con los átomos a los
cuales están unidos pueden formar un anillo saturado o
insaturado;
R_{5} junto con R_{6} y junto con los átomos
a los cuales están unidos pueden formar un anillo saturado o
insaturado;
R_{7} junto con R_{8} y junto con los átomos
a los cuales están unidos pueden formar un anillo saturado o
insaturado;
R_{20} junto con R_{21} y junto con los
átomos a los cuales están unidos pueden formar un anillo saturado o
insaturado;
(ii) permitir el tiempo suficiente para que
dicho compuesto se asocie químicamente con la estructura diana en el
cerebro;
(iii) detectar dicho compuesto empleando
radiación en la región del infrarrojo próximo.
Los compuestos y composiciones de la invención
son útiles como marcadores para el marcaje de estructuras
patológicas tales como placas amiloideas en el cerebro. Esto es de
utilidad a la hora de identificar, diagnosticar y prevenir
enfermedades que implican la formación y/o acumulación de placas
amiloideas y para controlar la eficacia de los tratamientos
terapéuticos de enfermedades que implican la formación y/o
acumulación de placas amiloideas. Estas enfermedades incluyen, por
ejemplo, enfermedad de Alzheimer, síndrome de Down, deterioro de la
memoria y cognitivo, demencia, neuropatías amiloideas, inflamación
del cerebro, trauma nervioso y cerebral, amiloidosis vascular o
hemorragia cerebral con amiloidosis.
En otro aspecto de la invención, los compuestos
y composiciones de la invención se emplean como agentes formadores
de imágenes en la región del infrarrojo próximo para identificar
placas amiloideas en el cerebro.
Los siguientes ejemplos son ilustrativos, pero
no limitativos, del método y composiciones de la presente
invención. Dentro del espíritu y alcance de la invención se incluyen
otras modificaciones y adaptaciones adecuadas de la variedad de
condiciones y parámetros normalmente encontradas y que resultan
evidentes para los expertos en la materia.
Una solución de
1-metil-1,2,3,4-tetrahidro-quinolin-7-ol
(20,0 mg, 123 \mumol) en agua (500 \mul) y 2 M HCl
(100 \mul) se enfría a 0ºC y se añade una solución acuosa de nitrito sódico (8,57 mg, 123 \mumol). La mezcla de reacción se agita a 0ºC durante 60 minutos, se neutraliza con una solución saturada de NaHCO_{3} y se extrae con acetato de etilo. La fase orgánica se seca con MgSO_{4} y el disolvente se separa bajo presión reducida. El intermedio nitroso obtenido y 4-metil-2-H-benz[1,4]oxazin-6-ol (24,5 mg, 148 \mumol) se disuelve en una mezcla de etanol (1,00 ml) y 2 M HCl (100 \mul) y se calienta bajo reflujo durante 1 hora. La solución se concentra bajo presión reducida y el residuo se purifica por cromatografía en columna (SiO_{2}, diclorometano/metanol = 10/3) proporcionando el compuesto del título como cristales de color azul, p.f.: 245-248ºC; ^{1}H NMR (500 MHz): \delta = 2,05 (tt, 2 H, ^{3}J= 6,1 Hz, ^{3}J = 5,5 Hz, 10-H), 2,92 (t, 2 H, ^{3}J = 6,1 Hz, 11-H), 3,31 (s, 3 H, 1'-H), 3,33 (s, 3 H, 2'-H), 3,70 (t, 2 H, ^{3}J = 5,5 Hz, 9-H), 3,78 (t, 2-H, ^{3}J = 4,9 Hz, 3-H), 4,35 (t, 2 H, ^{3}J = 4,9 Hz, 2-H), 6,82 (s, 1H, 7-H), 6,90 (s, 1 H, 5-H), 7,09 (s, 1 H, 11-H), 7,40 (s, 1 H, 12-H).
(100 \mul) se enfría a 0ºC y se añade una solución acuosa de nitrito sódico (8,57 mg, 123 \mumol). La mezcla de reacción se agita a 0ºC durante 60 minutos, se neutraliza con una solución saturada de NaHCO_{3} y se extrae con acetato de etilo. La fase orgánica se seca con MgSO_{4} y el disolvente se separa bajo presión reducida. El intermedio nitroso obtenido y 4-metil-2-H-benz[1,4]oxazin-6-ol (24,5 mg, 148 \mumol) se disuelve en una mezcla de etanol (1,00 ml) y 2 M HCl (100 \mul) y se calienta bajo reflujo durante 1 hora. La solución se concentra bajo presión reducida y el residuo se purifica por cromatografía en columna (SiO_{2}, diclorometano/metanol = 10/3) proporcionando el compuesto del título como cristales de color azul, p.f.: 245-248ºC; ^{1}H NMR (500 MHz): \delta = 2,05 (tt, 2 H, ^{3}J= 6,1 Hz, ^{3}J = 5,5 Hz, 10-H), 2,92 (t, 2 H, ^{3}J = 6,1 Hz, 11-H), 3,31 (s, 3 H, 1'-H), 3,33 (s, 3 H, 2'-H), 3,70 (t, 2 H, ^{3}J = 5,5 Hz, 9-H), 3,78 (t, 2-H, ^{3}J = 4,9 Hz, 3-H), 4,35 (t, 2 H, ^{3}J = 4,9 Hz, 2-H), 6,82 (s, 1H, 7-H), 6,90 (s, 1 H, 5-H), 7,09 (s, 1 H, 11-H), 7,40 (s, 1 H, 12-H).
Una solución de
1-etil-1,2,3,4-tetrahidro-quinolin-7-ol
(50,0 mg, 276 \mumol) en agua (1 ml) y 2 M HCl (250 \mul) se
enfría a 0ºC y se añade una solución de nitrito sódico (20,0 mg, 287
\mumol) y agua (400 \mul). La mezcla de reacción se agita a 0ºC
durante 60 minutos, se neutraliza con una solución saturada de
NaHCO_{3} y se extrae con acetato de etilo. La fase orgánica se
seca con MgSO_{4} y el disolvente se separa bajo presión
reducida. El intermedio nitroso (25,0 mg, 121 \mumol) y
4-metil-2-H-benz[1,4]oxazin-6-ol
(20,1 mg, 121 \mumol) se disuelve en una mezcla de etanol (750
\mul) y 2 M HCl (124 \mul) y se calienta bajo reflujo durante 1
hora. La solución se concentra bajo presión reducida y el residuo se
purifica por cromatografía en columna (SiO_{2},
diclorometano/metanol/agua/ácido acético = 10/10/1/1) proporcionando
el compuesto del título como cristales de color azul, p.f.:
245-247ºC; ^{1}H NMR (500 MHz): \delta = 1,24
(t, 3 H, ^{3}J= 6,5 Hz, 2'-H), 1,94 (m, 2 H,
10-H), 2,89 (m, 2 H, 11-H), 3,34 (s,
3 H, 3'-H), 3,67 (m, 2 H, 9-H), 3,73
(m, 2H,1'-H), 3,79 (m, 2 H, 3-H),
4,34 (m, 2 H, C-2), 6,99 (s, 1 H,
7-H), 7,01 (s, 1 H, 5-H), 7,22 (s, 1
H, 14-H), 7,55 (s, 1 H, 6-H).
Se disuelven tetrafluorborato de
4-nitro-bencenodiazonio (574 mg,
2,42 mmol) en H_{2}SO_{4} al 10% (400 \mul) y se añade a una
solución de
4-metil-2-H-benz[1,4]oxazin-6-ol
(400 mg, 2,42 mmol) en metanol (2 ml). La mezcla de reacción se
agita durante 30 minutos a temperatura ambiente, se neutraliza con
amoniaco acuoso al 25% y el precipitado rojo se hace descender por
centrifugado. El compuesto intermedio diazo en bruto se purifica por
recristalización
(n-butanol); p.f.: 162-165ºC.
(n-butanol); p.f.: 162-165ºC.
El compuesto intermedio diazo (560 mg, 1,78
mmol) y
4-metil-2-H-benz[1,4]oxazin-6-ol
(326 mg, 1,96 mmol) se disuelven en una mezcla de etanol (10 ml) y
agua (1 ml). Después de la adición de HCl al 32% (700 \mul), la
mezcla de reacción se agita a 70ºC bajo reflujo durante 1 hora y
luego se concentra la solución bajo presión reducida. El residuo se
disuelve en agua y se trata con una solución saturada de
tetrafluorborato sódico. El precipitado se hace descender por
centrifugado y se purifica por cromatografía en columna (SiO_{2},
diclorometano/metanol = 10/2) para proporcionar el compuesto del
título como cristales de color azul, p.f.:
235-238ºC.
^{1}H NMR (500 MHz): \delta = 3,37 (s, 6 H,
1'-H, 2'-H), 3,80 (t, 4 H, ^{3}J =
4,8 Hz, 3-H, 9-H), 4,37 (t, 4 H,
^{3}J = 4,8 Hz, 2-H, 10-H), 7,03
(s, 2 H, 5-H, 7-H), 7,21 (s, 2 H,
12-H, 14-H).
\vskip1.000000\baselineskip
Se disuelve tetrafluorborato de
4-nitro-bencenodiazonio (287 mg,
1,21 mmol) en H_{2}SO_{4} al 10% (200 \mul) y se añade a una
solución de
4-metil-3,4-dihidro-2H-benzo[1,4]tiazina
(200 mg, 1,21 mmol) en metanol (2 ml). La mezcla de reacción se
agita durante 30 minutos a temperatura ambiente, se neutraliza con
amoniaco acuoso al 25% y el precipitado rojo se hace descender por
centrifugado. El intermedio diazo en bruto se utiliza en la
siguiente etapa sin purificación adicional. El intermedio diazo (150
mg, 477 \mumol) y
4-metil-2-H-benz[1,4]oxazin-6-ol
(119 mg, 716 \mumol) se disuelven en una mezcla de etanol (4 ml) y
agua (400 \mul). Después de la adición de HCl al 32% (187 \mul),
la mezcla de reacción se calienta a 70ºC bajo reflujo durante 1
hora y luego se concentra la solución bajo presión reducida. El
producto en bruto se purifica por cromatografía en columna
(SiO_{2}, diclorometano/metanol = 10/3) para proporcionar el
compuesto del título como cristales de color azul; p.f.:
250-252ºC.
^{1}H NMR (500 MHz): \delta = 3,17 (t, 2 H,
^{3}J = 4,9 Hz, 10-H), 3,37 (s, 3 H,
1'-H), 3,41 (s, 3 H, 2'-H), 3,85 (m,
2 H, 9-H), 4,03 (m, 2 H, 3-H), 4,38
(d, 2 H, ^{3}J = 4,3 Hz, 2-H), 6,99 (s, 1 H,
7-H), 7,02 (s, 1 H, 5-H), 7,11 (s, 1
H, 14-H), 7,54 (s, 1 H, 12-H).
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución de
3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazin6-ol
(200 mg, 1,32 mmol), carbonato potásico (183 mg, 1,32 mmol) y éster
etílico de ácido 4-bromo-butílico
(217 \mul, 1,46 mmol) en dimetilformamida anhidra (1 ml) se agita
a 65ºC durante 16 horas bajo argón. La mezcla de reacción se vierte
en agua (20 ml), se neutraliza la fase acuosa con HCl 2 M y se
extrae con acetato de etilo (3 x 50 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secan con MgSO_{4} y se separa el disolvente bajo
presión reducida. El producto en bruto se purifica por
cromatografía en columna (SiO_{2}, hexano/acetato de etilo = 2/1)
para proporcionar un aceite incoloro; ^{1}H NMR (500 MHz):
\delta = 1,17 (t, 3 H, 3J = 7,4 Hz, 7'-H), 1,76
(dd, 2 H, ^{3}J = 7,4 Hz, 2'-H), 2,34 (t, 2 H,
^{3}J = 7,3 Hz, 3'-H), 3,17 (t, 2 H, ^{3}J = 7,4
Hz, 1'-H), 3,23 (d, 2 H, ^{3}J = 4,5 Hz,
3-H), 4,05 (m, 4 H, 2-H,
6'-H), 5,89 (dd, 1 H, ^{3}J = 7,9 Hz, ^{4}J =
2,4 Hz, 7-H), 6,11 (d, 1 H, ^{4}J = 2,4 Hz,
5-H), 6,42 (d, 1 H, 3J = 7,9 Hz,
8-H), 8,62 (s, 1 H, OH).
El compuesto intermedio diazo del ejemplo 3 (150
mg, 565 \mumol) y éster etílico de ácido
4-(6-hidroxi-2,3-dehidrobenzo[1,4]oxazin-4-il)-butírico
(213 mg, 678 \mumol) se disuelven en una mezcla de etanol (1 ml)
y agua (100 \mul). Después de la adición de HCl al 32% (222
\mul), la mezcla de reacción se calienta a 70ºC bajo reflujo
durante 1 hora y la solución se concentra bajo presión reducida. El
residuo se purifica por cromatografía en columna (SiO_{2},
diclorometano/metanol = 10/2) para proporcionar el compuesto del
título como cristales de color azul; p.f.:
242-245ºC.
\vskip1.000000\baselineskip
Se registran y analizan los espectros UV/VIS y
de fluorescencia. Para los espectros UV/VIS, se emplea un
espectrómetro Lambda 19 de Perkin Elmer equipado con celdillas de
1.000 cm de longitud de recorrido. La velocidad de exploración es de
120 nm/min. Los datos de fluorescencia se obtienen en un
espectrómetro Spex Fluorolog (I.S.A.) equipado con un detector R928
enfriado (Ranura 1 mm). Se determinan los rendimientos Quantum
empleando Cresylviolett (exc. 595 nm, rendimiento = 0,54) como
referencia.
Secciones de parafina de 4 micrómetros de
espesor de un ratón APP23 de 26 meses de edad son desparafinadas en
xileno y rehidratadas. Se disuelven 10 mg del agente de la invención
(compuesto del ejemplo 3) en 1 ml de dimetilsulfóxido y se diluye
con agua desionizada 1:10. Esta solución de tintura se aplica sobre
las secciones durante alrededor de 20 minutos. El fondo de la
sección se clarifica mediante lavado con etanol al 95%. Por último,
las secciones se deshidratan en etanol al 99%, se clarifican en
xileno y se montan con Vectashield™. Secciones criotómicas de 20
micrómetros de espesor de la corteza cerebral AD se secan al aire y
se fijan en PFA al 4% durante 5 minutos. Después de lavar con agua
del grifo, las secciones se tiñen bien con tioflavina S o bien con
el agente de la invención (compuesto del ejemplo 3) durante 5
minutos y se procesan adicionalmente como anteriormente se ha
descrito. El agente de la invención se disuelve en dimetilsulfóxido
y se diluye a una concentración final de 0,01% con etanol al 50%,
la tioflavina S se disuelve en etanol al 50% hasta una concentración
final de 0,01%.
La unión del agente de la invención (compuesto
del ejemplo 3) a péptido A\beta agregado
A\beta11-40 en solución, se investiga por
espectroscopía de fluorescencia diferencial y desplazamiento por
tioflavina. El espectro de fluorescencia del agente de la invención
(compuesto del ejemplo 3) muestra una intensidad de fluorescencia
ligeramente reducida en el intervalo de 680-720 nm
tras la unión a \beta-amiloide. Se registran
espectros diferentes a concentraciones diferentes del agente de la
invención (compuesto del ejemplo 3) dependiendo la magnitud del
cambio de fluorescencia de la concentración de A\beta agregado. Se
observa la saturación a elevadas concentraciones del agente de la
invención (compuesto del ejemplo 3) y el valor Kd para el agente de
la invención (compuesto del ejemplo 3) se estima en 0,2 \muM. En
otro experimento, se incuba A\beta agregado con tioflavina T, en
donde la intensidad de fluorescencia a 460-560 nm
(excitación 445 nm) representa la tioflavina unida a A\beta
agregado. La adición del agente de la invención (compuesto del
ejemplo 3) causa una reducción de la fluorescencia, dependiente de
la concentración, indicando ello un desplazamiento de tioflavina
respecto del A\beta agregado y se puede calcular entonces la
constante de unión aparente para el agente de la invención
(compuesto del ejemplo 3). El experimento se efectúa a
concentraciones de tioflavina de
0,37 \muM-3 \muM, siendo las constantes de unión aparente para el agente de la invención (compuesto del ejemplo 3) de 0,1 \muM-0,2 \muM en todas las concentraciones de tioflavina y no aumentan a concentraciones de tioflavina más elevadas.
0,37 \muM-3 \muM, siendo las constantes de unión aparente para el agente de la invención (compuesto del ejemplo 3) de 0,1 \muM-0,2 \muM en todas las concentraciones de tioflavina y no aumentan a concentraciones de tioflavina más elevadas.
Se prepara una solución para inyección
disolviendo 10 mg del agente de la invención en 0,2 ml de
dimetilsulfóxido diluido con 9,8 ml de agua estéril. Se preparan
concentraciones más bajas por dilución adicional con agua. Cuatro
ratones hembra APP23 de 21 meses de edad reciben una sola inyección
del compuesto (volumen de inyección:
1 ml/100 g de peso corporal). Después de 1 hora, los animales tratados son sacrificados por decapitación. Los cerebros son extraídos y congelados en hielo seco. Se cortan secciones de 14 \mum de espesor en un criotomo, se montan en estado descongelado y se secan al aire. El teñido se efectúa como anteriormente se ha descrito. Las secciones son analizadas empleando microscopía de fluorescencia y microscopía confocal convencionales.
1 ml/100 g de peso corporal). Después de 1 hora, los animales tratados son sacrificados por decapitación. Los cerebros son extraídos y congelados en hielo seco. Se cortan secciones de 14 \mum de espesor en un criotomo, se montan en estado descongelado y se secan al aire. El teñido se efectúa como anteriormente se ha descrito. Las secciones son analizadas empleando microscopía de fluorescencia y microscopía confocal convencionales.
(i) Teñido de secciones de cerebro de
ratones APP23 (que contienen depósitos amiloideos pero no marañas
neurofibrilares): Los agentes de la invención tiñen fuertemente las
placas amiloideas y los depósitos amiloideos vasculares en secciones
de cerebro de ratones APP23.
(ii) Teñido de secciones de cerebro AD
humano (que contienen tanto depósitos amiloideos como marañas
neurofibrilares): Secciones de cerebro tomadas de la corteza frontal
de pacientes AD son teñidas con los agentes de la invención y los
resultados se comparan con un teñido con tioflavina S. Los agentes
de la invención tiñen de manera intensiva y selectiva los depósitos
amiloideos.
(iii) Teñido ex vivo en ratones APP23:
La administración intravenosa de los agentes de la invención en
ratones APP23 conduce a un teñido selectivo e intenso de los
depósitos amiloideos, analizados ex vivo.
Para la formación de imágenes in vivo en
la región del infrarrojo próximo, ratones APP23 transgénicos de
10-24 meses de edad (3 \leq n \leq 5) y, como
control, ratones APP23 no transgénicos de la misma edad (3 \leq n
\leq 4), son inyectados intravenosamente (i.v.) en la vena del
rabo con 0,1, 1 y 3 mg/kg de agente de la invención (0,1, 1 y 3
mg/10 ml en salina al 0,9%). Se registran imágenes 30, 60, 120 y 240
minutos después de la administración sistémica. El gráfico de la
figura 1 muestra la unión específica del compuesto del ejemplo 3 a
placas AD en ratones APP23 transgénicos hembras de 16 meses de edad
que son inyectados i.v. con 3 mg/kg de agente de la invención.
Aquí, la unión específica se define como la señal de fluorescencia
(ratones transgénicos) menos las señal de fluorescencia (ratones no
transgénicos) divido por la señal de fluorescencia (ratones
transgénicos). Se observan diferencias importantes en la intensidad
de la señal de fluorescencia, es decir unión específica, 60, 120 y
240 minutos después de la administración del agente de la invención
en los ratones APP23 transgénicos y en los ratones de control no
transgénicos, demostrando ello la capacidad del agente de la
invención para el marcaje de placas amiloideas en el cerebro con el
fin de identificar la enfermedad de Alzheimer.
Claims (11)
1. Compuestos de fórmula I
en
donde
X e Y representan CH, CH_{2} o un heteroátomo
divalente o trivalente, con la condición de que X e Y no sean al
mismo tiempo CH o CH_{2};
m y o representan independientemente entre sí 0
o 1, con las condiciones de que
si m es 0 entonces la línea de trazos entre Y y
el átomo de C vecino representa un enlace e Y es CH o un heteroátomo
trivalente,
si m es 1 entonces la línea de trazos entre Y y
el átomo de C vecino está ausente e Y es CH_{2} o un heteroátomo
divalente,
si o es 0 entonces la línea de trazos entre X y
el átomo de C vecino representa un enlace y X es CH o un heteroátomo
trivalente,
si o es 1 entonces la línea de trazos entre X y
el átomo de C vecino está ausente y X es CH_{2} o un heteroátomo
divalente;
A representa (CR_{3}R_{4})_{p} y Q
representa (CR_{9}R_{10})_{n};
n y p representan independientemente entre sí 0
o 1;
R_{6}, R_{7}, R_{13} y R_{14}
representan independientemente entre sí hidrógeno, halógeno, alquilo
1-4C,
alquil(1-4C)SO_{2}, SO_{3}H,
carboxi, alcoxi(1-4C)carbonilo, alcoxi
1-4C, OH o NR_{15}R_{16};
R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{4}, R_{9},
R_{10}, R_{11} y R_{12} representan independientemente entre
sí hidrógeno, alquilo 1-4C, carboxi,
alcoxi(1-4C)carbonilo o alcoxi o
alcoxi 1-4C o, cuando X es CH o CH_{2} entonces
R_{1} y R_{2} también pueden ser OH o NR_{15}R_{16} o cuando
Y es CH o CH_{2} entonces R_{11} y R_{12} pueden también ser
OH o NR_{15}R_{16};
R_{5}, R_{8}, R_{15} y R_{16}
representan independientemente entre sí hidrógeno, alquilo
1-4C, alcoxi 1-4C,
R_{17}OC(O)-alquilo 1-4C o
(grupo reactivo)-alquilo 1-4C; y
R_{17} representa hidrógeno o alquilo
1-4C;
en forma de la base libre o de una sal de
adición de ácido.
2. Un compuesto de fórmula I según
la reivindicación 1 en forma de la base libre o de una sal de
adición de ácido, en donde X es O, S o CH_{2} e Y es O, S o
CH_{2} con la condición de que X e Y no sean ambos CH_{2} al
mismo tiempo.
3. Un compuesto de fórmula I según
la reivindicación 1, en donde dicho compuesto se elige entre cloruro
de
4,8-dimetil-2,3,4,9,10,11-hexahidro-1,6-dioxa-4,13-diaza-8-azonia-pentaceno;
cloruro de
8-etil-4-metil-2,3,4,9,10,11-hexahidro-1,6-dioxa-4,13-diaza-8-azonia-pentaceno;
tetrafluorborato de
4,8-dimetil-3,8,9,10-tetrahidro-2H-1,6,11-trioxa-8,13-diaza-4-azonia-pentaceno;
cloruro de
4,8-dimetil-2,3,9,10-tetrahidro-4H-1,6-dioxa-11-tia-4,13-diaza-8-azonia-pentaceno;
y cloruro de
8-(3-etoxicarbonil-propil)-4-metil-3,8,9,10-tetrahidro-2H-1,6,11-trioxa-8,13-diaza-4-azonia-pentaceno.
4. Una composición que comprende un
compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 y un
excipiente o diluyente farmacéuticamente aceptable.
5. Un procedimiento para la
producción de un compuesto de fórmula I o una sal del mismo, que
comprende las etapas de reaccionar un derivado fenólico de fórmula
III
en donde los radicales y símbolos
A, X, R_{1}, R_{2}, R_{5}, R_{6}, R_{14} y o tienen los
significados definidos en la reivindicación 1 para un compuesto de
fórmula I, con un compuesto nitroso o diazo de fórmula
IV
en donde los radicales y símbolos
Q, Y, R_{7}, R_{8}, R_{11}, R_{12}, R_{13} y m tienen los
significados definidos en la reivindicación 1 para un compuesto de
fórmula I, R_{18} representa oxo o
p-nitrofenil-N= y R_{19}
representa hidroxi; y recuperar el compuesto resultante de fórmula I
en forma de la base libre o en forma de una sal de adición de
ácido.
6. Uso de un compuesto de fórmula I
según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en forma de la base
libre o de una sal de adición de ácido como un agente formador de
imágenes en la región del infrarrojo próximo.
7. Uso de un compuesto de fórmula
II
en
donde
R_{6}, R_{7}, R_{13} y R_{14}
representan independientemente entre sí hidrógeno, halógeno, alquilo
1-4C,
alquil(1-4C)SO_{2}, SO_{3}H,
carboxi, alcoxi(1-4C)carbonilo, alcoxi
1-4C, OH o NR_{15}R_{16}, y
R_{21} y R_{22} son hidrógeno, alquilo
1-4C, alcoxi 1-4C, fenilo,
fenilalquilo, carboxi o halógeno;
R_{14} y R_{22} junto con los átomos de
carbono a los cuales están unidos pueden también formar un anillo
saturado o insaturado;
R_{21} y R_{13} junto con los átomos de
carbono a los cuales están unidos pueden también formar un anillo
saturado o insaturado;
R_{5}, R_{8}, R_{20} y R_{23} son
hidrógeno, alquilo 1-4C, alcoxi
1-4C, polioxihidrocarbilo, fenilo, fenilalquilo;
R_{8} y R_{20} junto con el átomo de carbono
al cual están unidos pueden formar un anillo saturado o
insaturado;
R_{23} y R_{5} junto con el átomo de
nitrógeno al cual están unidos pueden formar un anillo saturado o
insaturado;
R_{22} y R_{23} junto con los átomos a los
cuales están unidos pueden formar un anillo saturado o
insaturado;
R_{5} junto con R_{6} y junto con los átomos
a los cuales están unidos pueden formar un anillo saturado o
insaturado;
R_{7} junto con R_{8} y junto con los átomos
a los cuales están unidos pueden formar un anillo saturado o
insaturado;
R_{20} junto con R_{21} y junto con los
átomos a los cuales están unidos pueden formar un anillo saturado o
insaturado,
como se ha definido en la reivindicación 6 como
un agente formador de imágenes en la región del infrarrojo
próximo.
8. Uso según las reivindicaciones 6
o 7 como un agente formador de imágenes en la región del infrarrojo
próximo para formar imágenes de placas amiloideas.
9. Un conjugado que comprende un
compuesto de fórmula I según cualquiera de las reivindicaciones 1 a
3 enlazado covalentemente a una biomolécula a través de un grupo
reactivo.
10. Un conjugado según la
reivindicación 9, en donde la biomolécula se elige del grupo
consistente en nucleósido, nucleótido, oligonucleótido, ácido
nucleico, proteína, péptido, aminoácido, polisacárido,
oligosacárido, monosacárido, un fármaco o una pequeña molécula que
tiene un peso molecular menor de 500.
11. Un conjugado según la
reivindicación 9 o 10 capaz de ser detectado mediante el uso de
radiación en la región del infrarrojo próximo.
Applications Claiming Priority (2)
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---|---|---|---|
US49592103P | 2003-08-18 | 2003-08-18 | |
US495921P | 2003-08-18 |
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